JP6942726B2 - クロメン化合物および第２活性薬剤の併用薬 - Google Patents

Description

関連出願との相互参照
本出願は、米国特許法§１１９（ｅ）の下で、２０１６年１月８日に出願された米国出願第６２／２７６，７１３号、および２０１６年１月１１日に出願された米国出願第６２／２７７，２２５号の利益を主張する。第６２／２７６，７１３号および第６２／２７７，２２５号の内容をその全体で参照により援用する。

分野
本開示は、概して、医薬用途のためのクロメン化合物および第２化合物の併用薬、当該併用薬を含んでなる医薬組成物、ならびに当該併用薬を投与することによる対象の治療に有用な方法に関する。より詳細には、本開示は、重水素化および非重水素化クロメン化合物群および第２活性化合物を含んでなる併用薬、ならびに様々な癌を予防および治療するための方法に関する。

このセクションは、必ずしも先行技術ではない本開示に関する背景情報を提供する。

非ステロイド性抗炎症薬（ＮＳＡＩＤ）は、様々な癌を治療および予防することが実証されている。非選択的ＮＳＡＩＤは、ＣＯＸ−１およびＣＯＸ−２の両方を阻害する。ＣＯＸ−２は、プロスタグランジンの産生を増加させ、アポトーシスを阻害し、血管新生を促進し、炎症および免疫機能を調節することによって発癌に寄与する。ＣＯＸ−２インヒビターは、様々な癌のための有効な治療薬であり得る。

いくつかの選択的ＣＯＸ−２インヒビターは、クロメンの構造的特徴を含む。クロメン系ＣＯＸ−２インヒビターは、ジアリール複素環式コキシブ化合物と同様の選択性および抗侵害受容能を有する。しかしながら、クロメン系ＣＯＸ−２インヒビターは、ジアリール複素環式コキシブ系薬剤とは異なり、腎臓を損傷することがなく、そのため高血圧の可能性が減少する。

尿中ＰＧＥ−Ｍは、ＰＧＥ２の主要な尿代謝産物であり、全身ＰＧＥ２産生の指標として使用することができる。ＰＧＥ−Ｍレベルは、非選択的ＮＳＡＩＤおよびＣＯＸ−２選択的インヒビターの両方によって抑制される。ＮＳＡＩＤ（ＣＯＸ−２インヒビターなど）の抗腫瘍効果がＣＯＸ−２の標的化によるＰＧＥ２産生の低下に依存することを考えると、尿中ＰＧＥ−Ｍは、癌予防および治療におけるＮＳＡＩＤの薬理活性の貴重な中間マーカーとして役立つ。ＰＧＥ−Ｍは、ＣＯＸ−２過剰発現に依存する癌を有する患者におけるＣＯＸ−２インヒビターの有効性を予測するための有用なバイオマーカーである（Ｗａｎｇ， ｅｔ ａｌ．， Ｃａｎｃｅｒ Ｐｒｅｖ． Ｒｅｓ．， ２０１３）。

国際公開第０３／０１５６０８号は、ＣＯＸ−２インヒビターと併用され得るプロテインキナーゼインヒビターを用いて癌を治療または予防する方法を記載している。

米国第２００４／０１２７４７０号は、ＣＯＸ−２インヒビターおよびＥＧＦＲアンタゴニストの併用薬を用いる異常増殖障害の治療方法を記載している。

国際公開第２０１３／１８９１２１号は、抗炎症効果および抗腫瘍効果を有する新規の重水素化ベンゾピラン化合物を報告している。

Ｚｈａｎｇら（ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１５）は、エルロチニブを様々なＮＳＡＩＤに共有結合させてインビトロで肺癌を治療する方法を記載している。

このセクションは、本開示の概要を提供し、その全範囲またはその全ての特徴の網羅的な開示ではない。

式（Ｉ）の化合物またはその薬剤的に許容できる塩もしくは溶媒和物、および第２化合物の併用薬が与えられ、式（Ｉ）が、

であり、

Ｍが、Ｈおよびアルキルからなる群から選択され、

Ｚが、ＣＦ_３、ＣＦ_２Ｈ、およびＣ_２Ｆ_５からなる群から選択され、

Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４の各々が、Ｈ、アルキル、アラルキル、デューテロアルキル、デューテロアラルキル、デューテロアルコキシ、デューテロシクロアルキル、デューテロン、デューテリウムアリールオキシ、デューテロアリールオキシ、デューテロヘテロアリールオキシ、デューテロアリールアルコキシ、デューテロヘテロアリールアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、デューテロアミノ、デューテロスルファミジル（ｄｅｕｔｅｒｏｓｕｌｆａｍｉｄｙｌ）、スルファミジル（ｓｕｌｆａｍｉｄｙｌ）、シクロアルキル、シクロアルケニル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、ペンタフルオロスルファニル、ヒドロキシアルキル、トリアルキルシリル、アルキニル、およびアルケニルからなる群から独立に選択され、

前記第２化合物が、ＰＤ−１インヒビター、ＰＤ−Ｌ１インヒビター、ＣＴＬＡ−４インヒビター、ＯＸ−４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＬＡＧ−３インヒビター、ＩＤＯインヒビター、二重特異性タンパク質、ＥＧＦＲインヒビター、ＨＥＲ２インヒビター、および免疫刺激療法薬からなる群から選択される。

別の実施形態では、治療有効量の式（ＩＩ）の化合物および第２化合物の併用薬を含んでなる医薬組成物が与えられる。

別の実施形態では、治療有効量の式（Ｉ）の化合物および第２化合物の併用薬をそれを必要とする対象に投与することを含んでなる癌治療方法が与えられる。

結腸直腸癌細胞を接種したマウスにおける腫瘍容積（ｍｍ^３）に対する化合物Ａ０１、エルロチニブ、またはそれらの併用薬の効果を示す。 結腸癌細胞を接種したマウスにおける腫瘍拒絶に対する化合物Ａ０１、抗ＰＤ１抗体、またはそれらの併用薬の効果を示す。 ＣＤ８^＋Ｔ細胞の増加を腫瘍容積の減少と相関させる線形回帰を示す。 マウスに接種した結腸癌細胞におけるＣＤ８^＋Ｔ細胞レベルに対する化合物Ａ０１、抗ＰＤ１抗体、またはそれらの併用薬の効果を示す。

Ａ．定義
本明細書で使用される用語「デューテリウム」は、重水素ラジカルが炭素に結合して重水素化化合物を形成している、単一の重水素原子を意味するものとする。

本明細書で使用される場合、用語「アルキル」および「アルキレン」は、指定数の炭素原子を有する分枝鎖および直鎖飽和脂肪族炭化水素基を指す。例えば、「Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル」などの「Ｃ_１〜Ｃ_５」を、直線状または分枝状で１、２、３、４、または５個の炭素原子を有する基を含むと定義する。例えば、「Ｃ_１〜Ｃ_５アルキル」は、具体的には、メチル、エチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、イソブチル、ペンチルなどを含む。

用語「シクロアルキル」は、指定数の炭素原子を有する単環式飽和脂肪族炭化水素基を意味する。例えば、「シクロアルキル」には、シクロプロピル、メチル−シクロプロピル、２，２−ジメチル−シクロブチル、２−エチル−シクロペンチル、およびシクロヘキシルが含まれる。

本明細書で使用される場合、用語「アルケニル」および「アルケニレン」は、指定数の炭素および１つ以上の炭素間二重結合を有する分枝鎖および直鎖の不飽和または部分的不飽和の炭化水素基を指す。用語「シクロアルケニル」は、指定数の炭素原子および１つ以上の炭素間二重結合を有する単環式の不飽和または部分的不飽和の脂肪族炭化水素基を意味する。

本明細書で使用される場合、用語「アルキニル」および「アルキニレン」は、指定数の炭素および１つ以上の炭素間三重結合を有する分枝鎖および直鎖の不飽和または部分的不飽和の炭化水素基を指す。

本明細書で使用される用語「アルコキシ」は、酸素架橋を介して結合した指定数の炭素原子の環状または非環状のアルキル基を表す。したがって、「アルコキシ」は、上記のアルキルおよびシクロアルキルの定義を包含する。

本明細書で使用される用語「アリール」は、各環７個以下の原子からなる安定な単環式または二環式の炭素環であって、１つ以上の環が芳香族である前記炭素環を意味するものとする。このようなアリールエレメントの例には、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、およびビフェニルが含まれる。

本明細書で使用される用語「ヘテロアリール」は、各環７個以下の原子からなる安定な単環式または二環式の環であって、１つ以上の環が芳香族であり、Ｏ、Ｎ、およびＳからなる群から選択される１〜４個のヘテロ原子を含む前記環を表す。この定義の範囲内のヘテロアリール基には、限定はされないが、アクリジニル、カルバゾリル、シンノリニル、キノキサリニル、ピラゾリル、インドリル、ベンゾトリアゾリル、フリル、チエニル、ベンゾチオフェニル、ベンゾフリル、キノリル、イソキノリル、オキサゾリル、イソキサゾイル、インドリル、ピラジニル、ピリダジニル、ピリジル、ピリミジニル、ピロリル、およびテトラヒドロキノリンが含まれる。

本明細書で使用される用語「ハロ」または「ハロゲン」は、塩素、フッ素、臭素、およびヨウ素を含む。

本開示には、式（Ｉ）の化合物の遊離形態、ならびにその薬剤的に許容できる塩および立体異性体が含まれる。本明細書に例示されている具体的な化合物の一部は、アミン化合物のプロトン化塩である。用語「遊離形態」は、非塩形態のクロメン化合物を指す。包含される薬剤的に許容できる塩には、本明細書に記載の具体的な化合物について例示した塩だけでなく、式（Ｉ）の化合物の遊離形態の全ての典型的な薬剤的に許容できる塩も含まれる。記載されている具体的な塩化合物の遊離形態は、当該分野で公知の技術を用いて単離され得る。

本開示の薬剤的に許容できる塩は、従来の化学的方法によって塩基性または酸性部分を含む本開示の化合物から合成され得る。

本開示の化合物が酸性である場合、好適な「薬剤的に許容できる塩」は、無機塩基および有機塩基を含む薬剤的に許容できる非毒性塩基から調製される塩を指す。

生理的条件下で、化合物中の脱プロトン化された酸性部分、例えばカルボキシル基がアニオン性であり得、この電子電荷は、プロトン化またはアルキル化された塩基性部分、例えば四級窒素原子のカチオン電荷に対して内部的にバランスが取られ得るため、本開示の化合物は潜在的に内部塩または双性イオンであることに留意されたい。

本明細書で使用される用語「併用薬」は、本明細書に記載の式（Ｉ）または（ＩＩ）のクロメン化合物および第２化合物の両方の使用を表す。この併用薬には、キットまたはワンパッケージ化された製品などの両方の化合物の同時提供と、入手または処方された両方の化合物を別々に患者が使用することとが含まれる。併用薬の式（Ｉ）または（ＩＩ）のクロメン化合物は、第２化合物の前、同時、後に、または交互に患者に投与され得る。

免疫チェックポイントタンパク質は免疫系の不可欠な成分であり、通常免疫シグナル（例えば、Ｔ細胞活性化のシグナル）を刺激または阻害するように作用することができる。刺激性免疫チェックポイントタンパク質の非限定的な例には、ＣＤ２７、ＣＤ４０、ＯＸ４０、ＧＩＴＲ、ＣＤ１３７、ＣＤ２８、ＨＶＥＭ、およびＩＣＯＳが含まれる。阻害性免疫チェックポイントタンパク質の非限定的な例には、アデノシンＡ_２Ａ受容体、Ｂ７−Ｈ３、Ｂ７−Ｈ４、ＢＴＬＡ、ＣＴＬＡ−４、ＩＤＯ、ＫＩＲ、ＬＡＧ−３、ＰＤ−１、ＰＤ−Ｌ１、ＴＩＭ−３、およびＶＩＳＴＡ（Ｃ１０ｏｒｆ５４）が含まれる。

免疫チェックポイント調節化合物は、免疫チェックポイントタンパク質の作用を調節する、抗体、小分子、生物製剤、または多糖類などの化合物である。免疫チェックポイントタンパク質の調節は、アゴニスト、アンタゴニスト、アロステリックエフェクター、または免疫チェックポイントタンパク質もしくは免疫チェックポイントタンパク質の通常の生物学的機能を修飾するタンパク質リガンドへの結合から生じる効果としての化合物の作用を含み得る。多くの癌は、高レベルの阻害性免疫チェックポイントタンパク質を発現して、Ｔ細胞および他の免疫系成分による検出を回避する。ＰＤ−１などの阻害性免疫チェックポイントタンパク質をアンタゴニスト抗体で遮断すると、癌細胞の検出および破壊において免疫応答が増加する。逆に、ＯＸ−４０などの刺激性免疫チェックポイントタンパク質をアゴニスト抗体で活性化すると、癌細胞の認識および破壊において免疫応答が増加する。

Ｂ．クロメン化合物
本開示は、式（Ｉ）または式（ＩＩ）に示される構造を有するクロメン化合物に関する。本出願によって開示される化合物およびその薬剤的に許容できる塩は、抗炎症薬および鎮痛薬および腫瘍を治療または予防するための薬剤の調製に適用することができる。

一実施形態において、本開示は、式（Ｉ）のクロメン化合物またはその薬剤的に許容できる塩もしくは溶媒和物および第２化合物を含んでなる併用薬を与え、

Ｍが、Ｈおよびアルキルからなる群から選択され、Ｚが、−ＣＦ_３、−ＣＦ_２Ｈ、および−Ｃ_２Ｆ_５からなる群から選択され、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４の各々が、Ｈ、アルキル、アラルキル、デューテロアルキル、デューテロアラルキル、デューテロアルコキシ、デューテロシクロアルキル、デューテロン、デューテリウムアリールオキシ、デューテロアリールオキシ、デューテロヘテロアリールオキシ、デューテロアリールアルコキシ、デューテロヘテロアリールアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、デューテロアミノ、デューテロスルファミジル（ｄｅｕｔｅｒｏｓｕｌｆａｍｉｄｙｌ）、スルファミジル（ｓｕｌｆａｍｉｄｙｌ）、シクロアルキル、シクロアルケニル、ハロ、ハロアルキル、アルコキシ、ハロアルコキシ、アルキルチオ、ハロアルキルチオ、ペンタフルオロスルファニル、ヒドロキシアルキル、トリアルキルシリル、アルキニル、およびアルケニルからなる群から独立に選択される。

いずれかの構成要素においていずれかの変数（例えば、Ｒ^１、Ｚなど）が２回以上現れる場合、各出現におけるその定義は、他の全ての出現と独立している。また、置換基と変数との組み合わせは、そのような組み合わせが安定な化合物をもたらす場合にのみ許容される。置換基から環系に引かれた線は、示された結合が置換可能な環原子のいずれかに付いてもよいことを示す。環系が多環式である場合、結合は近位環上の適切な炭素原子のいずれかにだけ付いていることが意図されている。本発明の化合物の置換基および置換パターンは、化学的に安定であり、当該分野で公知の技術と、以下に示す方法とによって、容易に入手可能な出発材料から、容易に合成され得る化合物を製造することができるように、当業者が選択することができると解される。

式（Ｉ）のクロメン化合物は、論文に発表された方法、または実験手順の妥当性が十分に実証されている方法の他に以下の反応を用いて製造し得る。したがって、以下の合成溶液は単なる例示であり、化合物または特定の置換基を限定するものではない。溶液中の置換基の数は、特許請求の範囲に指定された数に従う必要はない。さらに、明確にするために、単一の置換を示す式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物は、複数の置換基を有する化合物を許容し得る。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメンは、サリチルアルデヒド（対応するフェノールから製造される；国際公開第２０１３／１８９１２１号、中国第１０２７５７４１７号；中国第１０３０４４４７７号；および中国第１０３０１２３５０号参照、それぞれ参照により援用される）を、Ｚ＝−ＣＦ_３の場合には文献（すなわち、米国特許第６，０３４，２５６号）に記載の手順に従ってエチル４，４，４−トリフルオロクロトネートと、ま
たはＺ＝−ＣＦ_２ＣＦ_３の場合にはエチル４，４，５，５，５−ペンタフルオロブテ−２−エノエート（ＣＡＳ番号［３７７５９−７８−７］）と反応させることにより製造し得る。あるいは、Ｚ＝−ＣＦ_３であるキラルクロメン酸は、ＡＣＳ Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．Ｌｅｔｔ．２０１４， ５， １１６２−１１６６に記載の手順に従って、サリチルアルデヒドと４，４，４−トリフルオロクロトンアルデヒドおよびキラル触媒との反応、次いで酸化により製造する。Ｚ＝−ＣＦ_２ＣＦ_３であるキラルクロメン酸は、４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンテ−２−エン−１−オールから製造される４，４，５，５，５−ペンタフルオロペンテ−２−エナールを用い、以下に概説する４，４，４−トリフルオロクロトンアルデヒド（ＩＮＴ−０３）の製造と同じ手順を用いる類似の方法によって製造する。

様々な実施形態において、式（Ｉ）の化合物は、１つ以上の重水素置換基、例えばデューテロアルキル、デューテロシクロアルキル、およびデューテロンを有する。一実施形態において、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^４の１つ以上が、デューテロアルキル、デューテロシクロアルキル、またはデューテロンである。いくつかの実施形態では、併用薬のクロメン化合物は、式（ＩＩ）で示される構造、またはその薬剤的に許容できる塩もしくは立体異性体、またはそのプロドラッグ分子を有し、

Ｘは、Ｏ、ＳおよびＮＲ^ａから選択され、

Ｒ^ａは、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、１または２個のハロゲンで置換されたＣ_１〜Ｃ_３アルキル、およびアリールから選択され、

Ｒは、カルボキシル、アシルアミノ、アルキルスルホニル、Ｃ_１〜Ｃ_３シクロカルボニル、アリール置換Ｃ_１〜Ｃ_３シクロカルボニル、およびＣ_１〜Ｃ_３アルコキシカルボニル、およびアルコキシカルボニルから選択され、

Ｒ^１は、ハロアルキル、アルキル、アラルキル、フェニル、およびシクロアルキルから選択され、

Ｒ^２は、以下の群：水素、デューテリウム、ハロ、アルキル、デューテロアルキル、アラルキル、デューテロアラルキル、アルコキシ、デューテロアルコキシ、アリールオキシ、デューテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、デューテロヘテロアリールオキシ、アリールアルコキシ、デューテロアリールアルコキシ、ヘテロアリールアルコキシ、デューテロヘテロアリールアルコキシ、ハロアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、ハロアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、アミノ、デューテロアミノ、スルファミジル、ペンタフルオロスルファニル、およびデューテロスルファミジルの１つ以上から選択され、

ｎは、１、２、および３からなる群から選択される整数であり、

Ｒ^３は、デューテロアルキルである。

式（Ｉ）のクロメン化合物の具体的な実施形態には、以下が含まれる。

別の実施形態において、式（ＩＩ）のクロメン化合物：

ＸはＯであり、Ｒ^ａは、Ｈ、Ｃ_１〜Ｃ_３アルキル、Ｃ_３〜Ｃ_６シクロアルキル、１または２個のハロで置換されたＣ_１〜Ｃ_３アルキル、およびアリールからなる群から選択され、ｎは、１、２、および３からなる群から選択される整数であり、Ｒはカルボキシルおよびアルコキシカルボニルからなる群から選択され、Ｒ^１は、ハロアルキル、アルキル、アラルキル、およびシクロアルキルからなる群から選択され、各Ｒ^２は、デューテリウム、ハロゲン、アルキル、デューテロアルキル、アラルキル、デューテロアラルキル、ハロアルキル、デューテロハロアルキル、アルコキシ、デューテロアルコキシ、アリールオキシ、デューテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシ、デューテロヘテロアリールオキシ、アリールアルコキシ、デューテロアリールアルコキシ、ヘテロアリールアルコキシ、デューテロヘテロアリールアルコキシ、ハロアルコキシ、デューテロハロアルコキシ、アミ
ノ、デューテロアミノ、スルファミジル、およびデューテロスルファミジルからなる群から独立に選択され、Ｒ^３は、デューテロアルキルである。別の実施形態において、位置７は非置換であり、ＲはカルボキシルまたはＣ_１〜Ｃ_３アルコキシカルボニルであり、Ｒ^１はハロアルキルであり、およびそれらの組み合わせである。別の実施形態において、ｎは１または２であり、ＲはカルボキシルまたはＣ_１〜Ｃ_３アルコキシカルボニルであり、Ｒ^１はハロアルキル、シクロアルキル、またはフェニルであり；Ｒ^２は、デューテリウム、ハロゲン、アルキル、デューテロアルキル、ハロアルキル、デューテロハロアルキル、アルコキシ、デューテロアルコキシ、アルキルアミノ、デューテロアルキルアミノ、アルキル化スルファミジル、およびアルキル化デューテロスルファミジルであり、またはそれらの組み合わせであり、Ｒ^２置換の１つ以上は６位にある。

Ｃ．第２化合物
式（Ｉ）のクロメン化合物を第２化合物と併用する。第２化合物は、小分子、薬剤、ペプチド、抗体、または医薬品である。一実施形態では、第２化合物は、ＰＤ−１インヒビター、ＰＤ−Ｌ１インヒビター、ＣＴＬＡ−４インヒビター、ＯＸ−４０アゴニスト、ＣＤ１３７アゴニスト、ＬＡＧ−３インヒビター、ＩＤＯインヒビター、二重特異性タンパク質、ＥＧＦＲインヒビター、ＨＥＲ２インヒビター、または免疫刺激療法薬であり得る。

一実施形態では、第２化合物はＰＤ−１インヒビターである。ＰＤ−１インヒビターは、分化群別２７９（ＣＤ２７９）としても知られる、免疫チェックポイントタンパク質、プログラム細胞死タンパク質１に作用する免疫チェックポイントモジュレーターである。ＰＤ−１は免疫細胞上に存在し、通常、Ｔ細胞が活性化するのを妨げる「オフスイッチ」として働く。この阻害機能は、ＰＤ−１が多くの腫瘍に存在するＰＤ−Ｌ１に結合すると活性化される。いくつかの実施形態では、ＰＤ−１インヒビターは、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−２２４（ＣＡＳ番号１４２２１８４−００−６）、ＡＭＰ−５１４（ＭＥＤＩ０６８０、ＣＡＳ番号１６４２３７４−６９−３）、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４３、およびＡＵＮＰ−１２（ＡＵＲ−０１２、Ａｕｒｉｇｅｎｅ−０１２、Ａｕｒｉｇｅｎｅ ＮＰ−１２）からなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＰＤ−Ｌ１インヒビターである。ＰＤ−Ｌ１インヒビターは、分化群別２７４（ＣＤ２７４）またはＢ７ホモログ１（Ｂ７−Ｈ１）としても知られる、免疫チェックポイントタンパク質、プログラム死リガンド１に作用する免疫チェックポイントモジュレーターである。腫瘍におけるＰＤ−Ｌ１のアップレギュレーションは、腫瘍が免疫系を回避することを可能にし得るため、ＰＤ−Ｌ１の高発現は、腫瘍の攻撃性の増加および生存率の低下と相関することが示されている。これはＰＤ−Ｌ１のＰＤ−１への結合を介して起こり、ＰＤ−Ｌ１インヒビターは、ＰＤ−Ｌ１への結合によってこれを妨げる。いくつかの実施形態において、ＰＤ−Ｌ１インヒビターは、ＲＧ ７４４６、ＢＭＳ−９３６５５９（ＭＤＸ １１０５，ＣＡＳ番号１４２２１８５−２２−５）、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＳＴＩ−Ａ１０１０、アベルマブ、アテゾリズマブ、およびデュルバルマブからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＣＴＬＡ−４インヒビターである。ＣＴＬＡ−４インヒビターは、分化群別１５２（ＣＤ１５２）としても知られる、免疫チェックポイントタンパク質、細胞傷害性Ｔリンパ球関連タンパク質４に作用する免疫チェックポイントモジュレーターである。ＣＴＬＡ−４チェックポイントタンパク質は、活性化Ｔ細胞およびＴｒｅｇで発現され、ＣＴＬＡ−４のＣＤ８０またはＣＤ８６への結合は免疫機能を阻害する。ＣＴＬＡ−４は、ＣＤ２８を打ち負かすことによって、または免疫刺激効果を引き起こすＣＤ８０もしくはＣＤ８６にＣＤ２８が結合するのを妨げることによって、作用し得る。ＣＴＬＡ−４は、抗原提示細胞からＣＤ８０およびＣＤ８６を捕捉および除去すること
によって作用し得る。いくつかの実施形態において、ＣＴＬＡ−４インヒビターは、イピリムマブおよびトレメリムマブからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＯＸ−４０アゴニストである。ＯＸ−４０アゴニストは、分化群別１３４（ＣＤ１３４）およびＯＸ−４０としても知られる、免疫チェックポイントタンパク質、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー４（ＴＮＦＲＳＦ４）に作用する免疫チェックポイントモジュレーターである。ＯＸ−４０は、免疫活性化の２４〜７２時間後に発現される二次共刺激性免疫チェックポイントタンパク質である。ＯＸ−４０ＬがＴ細胞上のＯＸ−４０受容体に結合し、Ｔ細胞死を防ぎ、サイトカイン産生を増加させるため、ＯＸ−４０は、最初の数日を超えて免疫応答を維持することと、それ以降の記憶応答において重要な役割を果たす。いくつかの実施形態において、ＯＸ−４０アゴニストは、抗ＯＸ４０、ＴＩＭ３抗体、およびＩｍｍｕｔｕｎｅ ＩＭＰ７０１からなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＣＤ１３７アゴニストである。ＣＤ１３７アゴニストは免疫チェックポイントモジュレーターであり、ＣＤ１３７タンパク質に結合する抗体および小分子を含むがこれらに限定されない化合物を含む。ＣＤ１３７は、腫瘍壊死因子受容体スーパーファミリーメンバー９（ＴＮＦＲＳＦ９）、４−１ＢＢとしても知られており、免疫系の刺激を引き起こすリンパ球活性化（ＩＬＡ）によって誘発される。ＣＤ１３７は、活性化されたＴ細胞によって発現され得るが、ＣＤ４Ｔ細胞よりもＣＤ８Ｔ細胞でより強く発現され得る。さらに、ＣＤ１３７の発現は、樹状細胞、Ｂ細胞、濾胞性樹状細胞、ナチュラルキラー細胞、顆粒球、および炎症部位の血管壁細胞に見られる。いくつかの実施形態において、ＣＤ１３７アゴニストは、ウレルマブおよびウトミルマブからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＬＡＧ−３インヒビターである。ＬＡＧ−３インヒビターは免疫チェックポイントモジュレーターであり、ＬＡＧ−３タンパク質に結合し、免疫系に対するその阻害効果を防止する抗体および小分子を含むがこれらに限定されない化合物を含む。ＬＡＧ−３の主要なリガンドはＭＨＣクラスＩＩであり、ＣＤ４よりも高い親和性で結合する。当該タンパク質は、ＣＴＬＡ−４およびＰＤ−１と同様の様式で、Ｔ細胞の細胞増殖、活性化、およびホメオスタシスを負に調節し、Ｔｒｅｇ抑制機能において役割を果たすことが報告されている。ＬＡＧ−３は寛容原性状態でＣＤ８^＋Ｔ細胞を維持するのにも役立ち、ＰＤ−１と共同して、慢性ウイルス感染中のＣＤ８枯渇を維持するのに役立つ。いくつかの実施形態において、ＬＡＧ−３インヒビターは、ＢＭＳ−９８６０１６（ＣＡＳ番号１６８３５７２−２９−３）である。

一実施形態では、第２化合物はＩＤＯインヒビターである。ＩＤＯインヒビターは免疫チェックポイントモジュレーターであり、インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼに結合し、免疫系に阻害シグナルを送ることを妨げる抗体および小分子を含むがこれらに限定されない化合物を含む。ＩＤＯは、細胞の微環境におけるＬ−Ｔｒｐの枯渇によって腫瘍細胞が免疫系を逃れることを可能にし得る。前立腺癌、結腸直腸癌、膵臓癌、子宮頸癌、胃癌、卵巣癌、頭部癌、肺癌などの広範なヒト癌は、ヒトＩＤＯ（ｈＩＤＯ）を過剰発現する。いくつかの実施形態において、ＩＤＯインヒビターは、ＧＤＣ−０９１９（ＣＡＳ番号１４０２８３６−５８−１）、インドキシモド、１−メチル−Ｄ−トリプトファン（ＮＳＣ−７２１７８２）、ＮＬＧ９１９（ＣＡＳ番号１４０２８３６−５８−１）、エパカドスタット、およびノルハルマンからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物は、接近度を減少させるか、もしくは生物学的反応を誘発するため、またはその両方を行うために、２つ以上の標的に結合する２つ以上のドメインを含む二重特異性タンパク質である。別の実施形態では、二重特異性タンパク質の作用は
、応答を刺激すること、もしくは阻害効果を防止すること、またはその両方によって、免疫応答の増大を引き起こす。二重特異性タンパク質は、Ｔ細胞またはナチュラルキラー（ＮＫ）細胞を含むがこれらに限定されない免疫細胞上、および腫瘍細胞上のエピトープに結合し得る。二重特異性タンパク質の作用は、免疫細胞の腫瘍細胞への接近による免疫応答の増大を引き起こし得る。二重特異性タンパク質の作用はまた、阻害性チェックポイントタンパク質または他の免疫阻害性シグナルの阻害による免疫応答を引き起こし得る。二重特異性タンパク質の作用はまた、免疫細胞の活性の増加を引き起こすシグナルの活性化による免疫応答を引き起こし得る。いくつかの実施形態では、二重特異性タンパク質は、ＡＬＴ−８０１（ＣＡＳ番号１１８８４５０−５３−４）、およびＭＥＤＩ−５６５（ＡＭＧ２１１、ＢＩＩＢ−０２４、ＣＡＳ番号１４１９５７４−８３−６）からなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＥＧＦＲインヒビターである。ＥＧＦＲインヒビターは、複数の経路によって達成され得る、ＥＧＦＲの活性化、アップレギュレーション、または過剰発現を防止する化合物である。他のタンパク質に影響を与え、ＥＧＦＲの活性化、アップレギュレーション、または過剰発現の防止もする化合物は、ＥＧＦＲインヒビターと見なされる。ＥＧＦＲアップレギュレーションまたは過剰発現は、制御されない細胞***を生じる遺伝子変異によって引き起こされる。ＥＧＦＲアップレギュレーションまたは過剰発現は、肺の扁平上皮癌、肛門癌、神経膠芽細胞腫、および頭頸部の上皮腫瘍を含むが、これらに限定されない多数の癌に関連している。いくつかの実施形態において、ＥＧＦＲインヒビターは、ブリガチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ダコミチニブ、セツキシマブ、エルロチニブ、フラボピリドール、ザルツムマブ、ネシツムマブ、リドカイン、マツズマブ、オシメルチニブ、パニツムマブ、ＰＤ１６８３９３（ＣＡＳ番号１９４４２３−１５−９）、ラパチニブ、バンデタニブ、リンドペピムト（ｒｉｎｄｏｐｅｐｉｍｕｔ）、カネルチニブ、ＨｕＭＡＸ−ＥＧＦＲ、およびＣｉｍａＶａｘ−ＥＧＦからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物はＨＥＲ２インヒビターである。ＨＥＲ２は、ＣＤ３４０、ＥＲＢＢ２、またはＨＥＲ２／ｎｅｕとしても知られている。ＨＥＲ２は、ＭＡＰＫ、ＰＩ３Ｋ／Ａｋｔ、ホスホリパーゼＣ、ＰＫＣ、およびＳＴＡＴ経路を含む複数の細胞経路を活性化できる癌遺伝子である。ＨＥＲ２タンパク質を介したシグナル伝達は、細胞増殖を促進し、アポトーシスを阻害する。ＨＥＲ２の阻害は、増殖を減少させ、アポトーシスを増加させる。ＨＥＲ２インヒビターには、小分子、ＨＥＲ２アンタゴニスト、阻害性ペプチド、および抗ＨＥＲ２抗体が含まれる。いくつかの実施形態において、ＨＥＲ２インヒビターは、アド−トラスツズマブエムタンシン、トラスツズマブ、およびペルツズマブからなる群から選択される。

一実施形態では、第２化合物は免疫刺激療法薬である。免疫刺激療法薬は、刺激経路の刺激因子または阻害経路の阻害因子として作用する免疫系の作用を調節する抗体、小分子、生物製剤、または多糖類などの化合物であり、これまでに記載されている分子および分子のクラスとは異なる場合がある。これらの療法薬の作用機序は、アゴニスト、アンタゴニスト、アロステリックエフェクター、酵素、または癌に対する免疫系の有効性を高める作用としての作用を含み得る。免疫刺激療法薬は、Ｂ７−Ｈ３を阻害すること、ＮＫＧ２Ａを阻害すること、ホスファチジルセリンに結合すること、ＣＤ２７に結合して免疫応答を刺激すること、アデノシンＡ２受容体に拮抗すること、または未知の機序によって作用することがあり得る。いくつかの実施形態において、免疫刺激療法薬は、ビダペナント（ｖｉｄａｐｅｎａｎｔ）、バルリルマブ、モナリズマブ（ｍｏｎａｌｉｚｕｍａｂ）、ＫＡＨＲ−１０２、ＢＧＢ３２４（Ｒ−４２８、ＣＡＳ番号１０３７６２４−７５−１）、エノブリツズマブ（ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）、リリルマブ、バビツキシマブ、ピジリズマブ、ＢＬ−８０４０（ＣＡＳ番号６６４３３４−３６−５）、ＧＤＣ−０９１９（
ＮＬＧ−９１９、ＲＧ６０７、ＣＡＳ番号１４０２８３６−５８−１）、ＩＧＮ−３１１（ＣＡＳ番号１３５４８４６−０６−２）、エロツズマブ、ブリナツモマブ、サマリズマブ（ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、プレリキサフォール、ガニツマブ、ペキソダルチニブ（ｐｅｘｏｄａｒｔｉｎｉｂ）、トラベデルセン、およびガルニセルチブからなる群から選択される。

Ｄ．併用薬
本明細書に記載の式（Ｉ）のクロメン化合物は、癌などの類似の疾患の治療または改善に有用であることが知られている第２化合物との併用で使用される。併用投与において、第２化合物は、一般的に使用される投与経路と用量で、式（Ｉ）の化合物と同時に、または連続して投与され得る。クロメン化合物は、第２化合物の前または後に投与され得る。式（Ｉ）のクロメン化合物が第２化合物と同時に使用される場合、式（Ｉ）のクロメン化合物、第２化合物、および任意の１種以上の追加の薬剤を含んでなる医薬組成物が使用され得る。併用療法には、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物を重複したスケジュールで投与する療法も含まれる。式（Ｉ）のクロメン化合物は、式（Ｉ）の化合物を単独で使用する場合よりも、第２化合物との併用の場合に、より低用量で使用され得る。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＰＤ−１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＰＤ−１のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＰＤ−１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＰＤ−１インヒビターは、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４３、ＡＭＰ−５１４、またはＡＵＮＰ−１２である。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＰＤ−１のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＰＤ−１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＰＤ−１インヒビターは、ニボルマブ、ピジリズマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４３、ＡＭＰ−５１４、またはＡＵＮＰ−１２である。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＰＤ−Ｌ１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＰＤ−Ｌ１のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＰＤ−Ｌ１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＰＤ−Ｌ１インヒビターは、ＲＧ ７４４６、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＳＴＩ−Ａ１０１０、アベルマブ、アテゾリズマブ、またはデュルバルマブである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＰＤ−Ｌ１のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＰＤ−Ｌ１インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＰＤ−Ｌ１インヒビターは、ＲＧ ７４４６、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＳＴＩ−Ａ１０１０、アベルマブ、アテゾリズマブ、またはデュルバルマブである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＣＴＬＡ−４インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＣＴＬＡ−４のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種
以上をＣＴＬＡ−４インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＣＴＬＡ−４インヒビターは、イピリムマブまたはトレメリムマブである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＣＴＬＡ−４のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＣＴＬＡ−４インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＣＴＬＡ−４インヒビターは、イピリムマブまたはトレメリムマブである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＯＸ−４０アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＯＸ−４０アゴニストと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＯＸ−４０アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＯＸ−４０アゴニストは、抗ＯＸ４０、ＴＩＭ３抗体、またはＩｍｍｕｔｕｎｅ ＩＭＰ７０１である。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＯＸ−４０アゴニストと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＯＸ−４０アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＯＸ−４０アゴニストは、抗ＯＸ４０、ＴＩＭ３抗体、またはＩｍｍｕｔｕｎｅ ＩＭＰ７０１である。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＣＤ１３７アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＣＤ１３７アゴニストと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＣＤ１３７アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＣＤ１３７アゴニストは、ウレルマブおよびウトミルマブである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＣＤ１３７アゴニストと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＣＤ１３７アゴニストと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＣＤ１３７アゴニストは、ウレルマブおよびウトミルマブである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＬＡＧ−３インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＬＡＧ−３のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＬＡＧ−３インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＬＡＧ−３インヒビターは、ＢＭＳ−９８６０１６である。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＬＡＧ−３のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＬＡＧ−３インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＬＡＧ−３インヒビターは、ＢＭＳ−９８６０１６である。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＩＤＯインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＩＤＯのインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＩＤＯインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＩＤＯインヒビターは、ＧＤＣ−０９１９、インドキシモド、１−メチル−Ｄ−
トリプトファン、ＮＬＧ９１９、エパカドスタット、またはノルハルマンである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＩＤＯのインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＩＤＯインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＩＤＯインヒビターは、ＧＤＣ−０９１９、インドキシモド、１−メチル−Ｄ−トリプトファン、ＮＬＧ９１９、エパカドスタット、またはノルハルマンである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を二重特異性タンパク質と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、二重特異性タンパク質と併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上を二重特異性タンパク質と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用する二重特異性タンパク質は、ＡＬＴ−８０１またはＭＥＤＩ−５６５である。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、二重特異性タンパク質と併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上を二重特異性タンパク質と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用する二重特異性タンパク質は、ＡＬＴ−８０１またはＭＥＤＩ−５６５である。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＥＧＦＲインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＥＧＦＲのインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＥＧＦＲインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＥＧＦＲインヒビターは、ブリガチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ダコミチニブ、セツキシマブ、エルロチニブ、フラボピリドール、ザルツムマブ、ネシツムマブ、リドカイン、マツズマブ、オシメルチニブ、パニツムマブ、ＰＤ１６８３９３、ラパチニブ、バンデタニブ、リンドペピムト（ｒｉｎｄｏｐｅｐｉｍｕｔ）、カネルチニブ、ＨｕＭＡＸ−ＥＧＦＲ、またはＣｉｍａＶａｘ−ＥＧＦである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＥＧＦＲのインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上をＥＧＦＲインヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＥＧＦＲインヒビターは、ブリガチニブ、ゲフィチニブ、イコチニブ、ネラチニブ、アファチニブ、ダコミチニブ、セツキシマブ、エルロチニブ、フラボピリドール、ザルツムマブ、ネシツムマブ、リドカイン、マツズマブ、オシメルチニブ、パニツムマブ、ＰＤ１６８３９３、ラパチニブ、バンデタニブ、リンドペピムト（ｒｉｎｄｏｐｅｐｉｍｕｔ）、カネルチニブ、ＨｕＭＡＸ−ＥＧＦＲ、またはＣｉｍａＶａｘ−ＥＧＦである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物をＨＥＲ２インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、ＨＥＲ２のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上をＨＥＲ２インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＨＥＲ２インヒビターは、アド−トラスツズマブエムタンシン、トラスツズマブ、またはペルツズマブである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、ＨＥＲ２のインヒビターと併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上
をＨＥＲ２インヒビターと併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用するＨＥＲ２インヒビターは、アド−トラスツズマブエムタンシン、トラスツズマブ、またはペルツズマブである。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を免疫刺激療法薬と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を重水素化し、免疫刺激療法薬と併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ａ０１〜Ａ１０のうち１種以上を免疫刺激療法薬と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用する免疫刺激療法薬は、ビダペナント（ｖｉｄａｐｅｎａｎｔ）、バルリルマブ、モナリズマブ（ｍｏｎａｌｉｚｕｍａｂ）、ＫＡＨＲ−１０２、ＢＧＢ３２４、エノブリツズマブ（ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）、リリルマブ、バビツキシマブ、ピジリズマブ、ＢＬ−８０４０、ＧＤＣ−０９１９、ＩＧＮ−３１１、エロツズマブ、ブリナツモマブ、サマリズマブ（ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、プレリキサフォール、ガニツマブ、ペキソダルチニブ（ｐｅｘｏｄａｒｔｉｎｉｂ）、トラベデルセン、およびガルニセルチブである。

別の実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物を非重水素化し、免疫刺激療法薬と併用する。さらに別の実施形態において、化合物Ｂ０１〜Ｂ１１のうち１種以上を免疫刺激療法薬と併用する。別の実施形態において、式（Ｉ）の重水素化クロメン化合物と併用する免疫刺激療法薬は、ビダペナント（ｖｉｄａｐｅｎａｎｔ）、バルリルマブ、モナリズマブ（ｍｏｎａｌｉｚｕｍａｂ）、ＫＡＨＲ−１０２、ＢＧＢ３２４、エノブリツズマブ（ｅｎｏｂｌｉｔｕｚｕｍａｂ）、リリルマブ、バビツキシマブ、ピジリズマブ、ＢＬ−８０４０、ＧＤＣ−０９１９、ＩＧＮ−３１１、エロツズマブ、ブリナツモマブ、サマリズマブ（ｓａｍａｌｉｚｕｍａｂ）、プレリキサフォール、ガニツマブ、ペキソダルチニブ（ｐｅｘｏｄａｒｔｉｎｉｂ）、トラベデルセン、およびガルニセルチブである。

特定の実施形態において、化合物Ａ０１を、エルロチニブ、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、イピリムマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、トラスツズマブ、セツキシマブ、ペルツズマブ、またはパニツムマブのうちの１つと併用する。特定の実施形態において、化合物Ａ０１をエルロチニブと併用する。

本出願における併用薬は、抗炎症効果および鎮痛効果を高めるために、利用可能もしくは開発中の両方の他の従来の抗炎症薬、例えば、ステロイド抗炎症薬、非ステロイド抗炎症薬、ｉＮＯＳインヒビター、ＬＴＢ４受容体刺激薬、およびＬＴＡ４ヒドロラーゼインヒビターなどの薬剤と共に使用され得るか、または、腫瘍への治療効果または阻害効果を増強するために、抗生物質、アルキル化薬剤、代謝拮抗剤、ホルモン剤、免疫剤、インターフェロン剤、および薬剤のいくつかの他の組み合わせと共に使用され得る。

Ｅ．投与および用量範囲
標準的な製薬技術に基づいて、本開示の式（Ｉ）の化合物、第２化合物、およびそれらの併用薬は、単独で、または薬剤的に許容できる賦形剤との医薬配合物で、ヒトなどの哺乳類に、例えば経口、皮下、腹腔内、静脈内、直腸内、局所、眼内、経肺、経鼻、および非経口投与により、投与され得る。

一実施形態において、本開示の併用薬における式（Ｉ）のクロメン化合物は、治療有効量で存在する。一実施形態において、治療上有効な用量は、健常対照またはベースライン基準と比較した場合に、尿中ＰＧＥ−Ｍの７０％以上の減少を引き起こすのに十分な量である。尿中ＰＧＥ−Ｍは、酵素結合免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）または質量分析などの従来の手段によって測定することができる。健常対照は、癌に罹患していない対象であり得る。ベースライン基準は、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬による治療の開始前に、患者の尿中ＰＧＥ−Ｍを測定することによって得られ得る。米国第２
０１２／００１６００２号は、対象における尿中ＰＧＥ−Ｍを測定するための方法を記載しており、参照によりその全体が援用される。

一実施形態において、式（Ｉ）のクロメン化合物の用量は、約０．１〜約１００ｍｇ／ｋｇ／日である。用量は、１日に１回の用量で、または１日に２回、３回、４回、もしくはそれ以上の回数、または徐放性形態で投与され得る。

一実施形態では、第２化合物の量は、治療有効量で存在する。別の実施形態では、第２化合物の治療有効量は、約０．０１〜約２５０ｍｇ／ｋｇ／日である。別の実施形態において、第２化合物の治療有効量は、単独で投与される場合よりも、式（Ｉ）の化合物との併用で投与される場合に、より少ない。第２化合物の具体的な治療有効量が表３に開示されている。

Ｆ．癌療法：
本開示の併用薬は、癌治療に有用である。一実施形態では、癌治療方法は、本明細書に記載の治療有効量の式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬をそれを必要とする対象に投与することを含んでなる。特定の実施形態において、癌は、メラノーマ、非小細胞肺癌、結腸直腸癌、頭頸部癌、腎細胞癌、リンパ腫、尿路上皮癌、メルケル細胞癌、膵臓癌、乳癌、胃癌、腸癌、子宮内膜癌、肝胆道癌、尿路癌、脳癌、皮膚癌、神経膠芽細胞腫、前立腺癌、および卵巣癌からなる群から選択される。特定の実施形態において、癌は、結腸直腸癌、胃癌、非小細胞肺癌、乳癌、膵臓癌、前立腺癌、または頭頸部扁平上皮癌である。

別の実施形態では、方法は、前記対象の癌における主要組織適合複合体（ＭＨＣ）クラスＩの発現を測定することと、癌がＭＨＣクラスＩの陽性の発現を示す場合に式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬を投与することとをさらに含んでなる。ＭＨＣクラスＩの発現を、高、低、または負に分類し得、高および低発現は「陽性」ＭＨＣクラスＩ発現とみなす。ＭＨＣクラスＩ発現を、免疫組織化学（ＩＨＣ）分析または他の臨床分析によって定量し得る。「高」および「低」発現は、当業者が決定し得る。カスタムマルチプレックスビーズアレイ（ｃｕｓｔｏｍ ｍｕｌｔｉｐｌｅｘ ｂｅａｄ ａｒｒａｙ）（Ｒ＆Ｄ Ｓｙｓｔｅｍｓ）を用いて、可溶性ＭＨＣクラスＩポリペプチド関連配列Ａ（ｓＭＩＣＡ）、ｓＭＩＣＢ、可溶性ＵＬ１６結合タンパク質（ｓＵＬＢＰ）−１、ｓＵＬＢＰ−２、ｓＵＬＢＰ−３、およびｓＵＬＢＰ−４を測定する。ビーズベースのアッセイは、ＬｕｍｉｎｅｘベースのＢｉｏ−Ｐｌｅｘシステム（ＢＩＯ−ＲＡＤ）を用いて分析する。可溶性ＭＨＣクラスＩポリペプチド関連鎖Ａ（ｓＭＩＣＡ）のレベルを測定する方法に関するさらなる情報については、Ｋｏｇｕｃｈｉ ｅｔ．ａｌ． Ｃａｎｃｅｒ
Ｒｅｓ．２０１５を参照されたい。当業者、例えば臨床病理医によって標準的な方法によって測定されるＭＨＣクラスＩタンパク質の発現の存在は、請求項に係る併用療法薬に対する陽性反応の予測指標である。Ｓｉｍｐｓｏｎ ｅｔ．ａｌ． Ｇｕｔ ２０１０を参照されたい。

別の実施形態では、方法は、前記対象の癌におけるＰＤ−Ｌ１の発現を測定することと、癌がＰＤ−Ｌ１の陽性発現を示す場合に、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬を前記対象に投与することとをさらに含んでなる。ＰＤ−Ｌ１は、ＩＨＣ分析などの当該分野で慣用の手段によって測定し得る。一実施形態では、腫瘍細胞の５０％以上がＰＤ−Ｌ１について染色される場合、腫瘍はＰＤ−Ｌ１発現について陽性とみなされ得る。

別の実施形態では、方法は、前記対象の癌における腫瘍内Ｔ細胞のレベルを測定することと、癌が腫瘍内Ｔ細胞のレベルの上昇を示す場合に、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬を前記対象に投与することとをさらに含んでなる。Ｓｉｍｐｓｏｎ ｅｔ． ａｌ．， Ｇｕｔ ２０１０によると、結腸直腸癌において、ＩＨＣ染色の標準的な方法によって評価されるように、１５Ｔ細胞／ｍｍ^２を超えることは、高レベルまたは上昇したレベルの腫瘍内Ｔ細胞であると見なされる。Ｄｉｅｃｉ Ａｎｎａｌｓ ｏｆ
Ｏｎｃｏｌｏｇｙ ２０１５によると、乳癌において、症例は、Ｓａｌｇａｄｏ ｅｔ．ａｌ． Ａｎｎ Ｏｎｃｏｌ （２０１５）に開示されている方法に従って、腫瘍内Ｔ細胞（Ｉｔ−ＴＩＬ）または間質Ｔ細胞（Ｓｔｒ−ＴＩＬ）の５０％以上である場合、腫瘍浸潤リンパ球（ＴＩＬ）としても知られている腫瘍内Ｔ細胞の上昇、または高含有として定義される。

別の実施形態では、方法は、対象における尿中ＰＧＥ−Ｍのレベルを測定することと、尿中ＰＧＥ−Ｍレベルが上昇する場合に、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の
併用薬を前記対象に投与することとをさらに含んでなる。尿中ＰＧＥ−Ｍレベルは、正常の上限（ＵＬＮ）の１．５倍以上である場合に、「上昇」と見なされる。男性の場合には、上昇した尿中ＰＧＥ−Ｍレベルは＞１５ｎｇ／ｍｇクレアチニン（ＵＬＮは１０ｎｇ／ｍｇクレアチニン）となる。女性の場合には、上昇した尿中ＰＧＥ−Ｍレベルは＞９ｎｇ／ｍｇクレアチニン（ＵＬＮは６ｎｇ／ｍｇクレアチニン）となる。他の実施形態において、尿中ＰＧＥ−Ｍレベルを、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、または頭頸部扁平上皮癌から選択される癌を有する対象において測定する。さらに別の実施形態において、結腸直腸癌、非小細胞肺癌、乳癌、胃癌、膵臓癌、前立腺癌、または頭頸部扁平上皮癌は、ステージＩＩＩまたはステージＩＶにある。

別の実施形態では、方法は、対象におけるマイクロサテライト不安定性（ＭＳＩ）のレベルを測定することと、ＭＳＩが高、低、または安定である場合に式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬を投与することとをさらに含んでなる。ＭＳＩは、特定のＤＮＡ反復についてのＰＣＲベースの分析またはミスマッチ修復（ＭＭＲ）タンパク質のＩＨＣ分析などを介して、当該分野で慣用の手段によって測定し得る（例えば、Ｖｉｌａｒ ｅｔ ａｌ．， Ｎａｔ． Ｒｅｖ． Ｃｌｉｎ．Ｏｎｃｏｌ， ２０１０； Ｂｕｐａｔｈｉ， ｅｔ ａｌ．Ｊ． Ｇａｓｔｒｏｉｎｔｅｓｔ．Ｏｎｃｏｌ， ２０１６； Ｄｕｄｌｅｙ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．２０１６； Ｓｉｎｉｃｒｏｐｅ， ｅｔ ａｌ．， Ｃｌｉｎ．Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌ． Ｈｅｐａｔｏｌ．， ２０１６； ａｎｄ Ｋａｕｔｔｏ， ｅｔ ａｌ．， Ｏｎｃｏｔａｒｇｅｔ， ２０１６を参照されたい）。一実施形態では、高レベルのＭＳＩは、２つ以上の遺伝子座、またはマーカーのより大きなパネルでは＞３０％の遺伝子座における不安定性として定義され得、低レベルのＭＳＩは、１つの遺伝子座、またはより大きなパネルでは１０〜３０％の遺伝子座における不安定性として定義され得、マイクロサテライトの安定性は、どの遺伝子座でも、またはより大きなパネルでは＜１０％の遺伝子座で不安定ではないこととして定義され得る。他の実施形態では、方法は、癌が結腸直腸癌、胃癌、子宮内膜癌、卵巣癌、肝胆道癌、尿路癌、脳癌、または皮膚癌である場合に、マイクロサテライト不安定性を測定することをさらに含んでなる。

別の実施形態では、方法は、標準的なフローサイトメトリー法に従ってＣＤ８^＋／ＦＯＸＰ３発現細胞の比を測定することと、ＣＤ８^＋／ＦＯＸＰ３比が＞１である場合に、式（Ｉ）のクロメン化合物および第２化合物の併用薬を投与することとをさらに含んでなるが、卵巣癌および尿路上皮癌における優れた臨床転帰を予測することが報告されているためである。Ｐｒｅｓｔｏｎ ｅｔ．ａｌ． ＰＬｏＳ Ｏｎｅ．２０１３ ａｎｄ Ｂａｒａｓ ｅｔ． ａｌ．， Ｏｎｃｏｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ ２０１６．

特定の実施形態において、肺癌を治療するための方法は、化合物Ａ０１およびエルロチニブの併用薬の投与を含んでなる。

特定の実施形態において、結腸直腸癌を治療するための方法は、化合物Ａ０１およびペンブロリズマブの併用薬の投与を含んでなる。

特定の実施形態において、メラノーマを治療するための方法は、化合物Ａ０１およびペンブロリズマブの併用薬の投与を含んでなる。

特定の実施形態において、結腸直腸癌を治療するための方法は、化合物Ａ０１およびアテゾリズマブの併用薬の投与を含んでなる。

特定の実施形態において、肺癌を治療するための方法は、化合物Ａ０１およびアテゾリズマブの併用薬の投与を含んでなる。

Ｇ．医薬組成物：
式（Ｉ）のクロメン化合物、第２化合物、またはそれらの併用薬を含有する医薬組成物は、経口投与に適した形態、例えば、錠剤、ロゼンジ、水性もしくは油性懸濁液、分散性粉末もしくは顆粒、エマルジョン、硬質もしくは軟質カプセル、またはシロップもしくはエリキシル剤であり得る。経口投与用の組成物は、医薬組成物の製造の分野で公知の任意の方法に従って調製され得、このような組成物は、製薬上優れ、口当たりの良い製剤を与えるために、１種以上の賦形剤、または甘味剤、矯味剤、着色剤、および保存剤からなる群から選択される薬剤を含み得る。錠剤は、錠剤の製造に適した非毒性の薬剤的に許容できる賦形剤との混合物中に活性成分を含有する。これらの賦形剤は、例えば、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、乳糖、リン酸カルシウム、またはリン酸ナトリウムなどの不活性希釈剤;造粒剤および崩壊剤、例えば微結晶性セルロース、クロスカルメロースナトリウ
ム、コーンスターチ、またはアルギン酸;結合剤、例えばデンプン、ゼラチン、ポリビニ
ルピロリドン、またはアカシア、および潤滑剤、例えばステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、またはタルクであり得る。錠剤はコーティングされていなくてもよく、または薬剤の不快な味を隠すように、もしくは胃腸管における崩壊および吸収を遅延させ、それにより長期間持続作用を与えるように、公知の技術によってコーティングされていてもよい。例えば、ヒドロキシプロピルメチルセルロースもしくはヒドロキシプロピルセルロースなどの水溶性味マスキング材料、またはエチルセルロースもしくは酢酸酪酸セルロースなどの時間遅延材料を使用し得る。

錠剤の用量は、０．１ｍｇ／錠剤、０．２ｍｇ／錠剤、０．２５ｍｇ／錠剤、０．５ｍｇ／錠剤、１ｍｇ／錠剤、２ｍｇ／錠剤、５ｍｇ／錠剤、１０ｍｇ／錠剤、２５ｍｇ／錠剤、５０ｍｇ／錠剤、１００ｍｇ／錠剤、および２５０ｍｇ／錠剤であり得る。カプセル剤などの他の形態の用量も同様の基準用量であり得る。

経口使用のための製剤はまた、活性成分が不活性固体希釈剤、例えば炭酸カルシウム、リン酸カルシウム、もしくはカオリンと混合されている硬質ゼラチンカプセルとして、または活性成分が水溶性担体、例えばポリエチレングリコール、もしくは油媒体、例えばピーナッツ油、流動パラフィン、もしくはオリーブ油と混合されている軟質ゼラチンカプセルとして与えられ得る。

水性懸濁液は、水性懸濁液の製造に適した賦形剤との混合物中に活性物質を含有する。このような賦形剤には、懸濁剤、例えば、カルボキシメチルセルロースナトリウム、メチルセルロース、ヒドロキシプロピルメチル−セルロース、アルギン酸ナトリウム、ポリビニル−ピロリドン、トラガカントガム、およびアカシアゴムが含まれ、分散剤または湿潤剤は、天然リン脂質、例えばレシチン、またはアルキレンオキシドと脂肪酸との縮合生成物、例えばポリオキシエチレンステアレート、またはエチレンオキシドと長鎖脂肪族アルコールとの縮合生成物、例えばヘプタデカエチレンオキシセタノール、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール由来の部分エステルとの縮合生成物、例えばポリオキシエチレンソルビトールモノオレエート、またはエチレンオキシドと脂肪酸およびヘキシトール無水物由来の部分エステルとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。水性懸濁液はまた、１種以上の保存剤、例えば、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エチルまたはｎ−プロピル、１種以上の着色剤、１種以上の矯味剤、およびスクロース、サッカリン、またはアスパルテームなどの１種以上の甘味剤を含有し得る。

油性懸濁液は、活性成分を植物油、例えばラッカセイ油、オリーブ油、ゴマ油、もしくはヤシ油、または流動パラフィンなどの鉱油中に懸濁させることによって製剤化され得る。油性懸濁液は、増粘剤、例えば蜜蝋、硬質パラフィン、またはセチルアルコールを含有し得る。口当たりの良い経口製剤を与えるために、上記の甘味剤などの甘味剤および矯味
剤を添加し得る。これらの組成物は、ブチル化ヒドロキシアニソールまたはアルファ−トコフェロールなどの抗酸化剤の添加によって保存され得る。

水を添加することによって水性懸濁液を調製するのに適した分散性粉末および顆粒は、分散剤または湿潤剤、懸濁化剤、および１種以上の保存剤との混合物中に活性成分を与える。好適な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤は、すでに上で述べたものによって例示されている。さらなる賦形剤、例えば甘味剤、矯味剤、および着色剤も存在し得る。これらの組成物は、アスコルビン酸などの抗酸化剤の添加によって保存し得る。

本開示の医薬組成物はまた、水中油型エマルジョンの形態であり得る。油性相は、植物油、例えばオリーブ油もしくはラッカセイ油、または鉱油、例えば流動パラフィン、またはこれらの混合物であり得る。好適な乳化剤は、天然リン脂質、例えば大豆レシチン、ならびに脂肪酸およびヘキシトール無水物由来のエステルまたは部分エステル、例えばモノオレイン酸ソルビタン、ならびに前記部分エステルとエチレンオキシドとの縮合生成物、例えばポリエチレンソルビタンモノオレエートであり得る。エマルジョンはまた、甘味剤、矯味剤、保存剤、および抗酸化剤を含有し得る。

シロップおよびエリキシル剤は、甘味剤、例えばグリセロール、プロピレングリコール、ソルビトール、またはスクロースを用いて製剤化され得る。このような製剤はまた、粘滑剤、保存剤、矯味剤、着色剤、および抗酸化剤を含有し得る。

医薬組成物は、滅菌注射用水溶液の形態であり得る。使用され得る許容される担体および溶媒には、水、リンガー溶液、および等張性塩化ナトリウム溶液がある。

滅菌注射用製剤はまた、活性成分が油性相に溶解している滅菌注射用の水中油型マイクロエマルジョンであり得る。例えば、活性成分を、まず、大豆油とレシチンとの混合物に溶解し得る。次いで、油溶液を水およびグリセロール混合物に導入し、処理してマイクロエマルジョンを形成する。

注射可能な溶液またはマイクロエマルジョンは、局所ボーラス注入によって患者の血流に導入され得る。あるいは、本発明の化合物の一定の循環濃度を維持するように溶液またはマイクロエマルジョンを投与することが有利であり得る。このような一定の濃度を維持するために、連続静脈内送達装置を利用し得る。このような装置の実施形態は、Ｄｅｌｔｅｃ ＣＡＤＤ−ＰＬＵＳ^ＴＭモデル５４００静脈内ポンプである。

医薬組成物は、筋肉内および皮下投与用の滅菌注射用水性または油性懸濁液の形態であり得る。この懸濁液は、上記の好適な分散剤または湿潤剤および懸濁化剤を用いて、公知の技術に従って製剤化され得る。滅菌注射用製剤は、例えば１，３−ブタンジオール中の溶液などの非毒性の非経口的に許容される希釈剤または溶媒中の滅菌注射用溶液または懸濁液であり得る。さらに、不揮発性油は、溶媒または懸濁媒体として従来から使用されている。この目的のために、合成モノグリセリドまたはジグリセリドを含む任意の無刺激不揮発性油を使用し得る。さらに、オレイン酸などの脂肪酸は注射剤の調製に使用される。

式（Ｉ）のクロメン化合物、第２化合物、またはそれらの併用薬は、薬剤の直腸内投与用の坐剤の形態でも投与され得る。これらの組成物は、常温では固体であるが直腸内温度では液体であるため、直腸内で溶解して薬剤を放出する好適な非刺激性賦形剤と薬剤を混合することによって調製され得る。このような物質には、カカオバター、グリセリンゼラチン、硬化植物油、種々の分子量のポリエチレングリコールの混合物、およびポリエチレングリコールの脂肪酸エステルが含まれる。

局所使用のために、式（Ｉ）のクロメン化合物、第２化合物、またはそれらの併用薬を含有するクリーム、軟膏、ゼリー、溶液、または懸濁液などが使用される。（本出願において、局所適用は口腔洗浄および含嗽を含むものとする。）

本開示の式（Ｉ）のクロメン化合物、第２化合物、およびそれらの併用薬は、好適な経鼻担体および送達装置の局所的使用を介して経鼻形態で、または当業者に周知の経皮皮膚パッチの形態を用いて経皮経路を介して投与され得る。経皮送達システムの形態で投与するために、用量投与は、もちろん、投与計画を通して断続的ではなく連続的である。本開示の化合物および併用薬はまた、カカオバター、グリセリンゼラチン、硬化植物油、様々な分子量のポリエチレングリコールの混合物、およびポリエチレングリコールの脂肪酸エステルなどの基剤を使用する坐剤として送達され得る。

本開示の化合物がヒト対象に投与される場合、日用量は通常、処方する医師によって決められ、用量は、通常、個々の患者の年齢、体重、性別、および応答、ならびに患者の症状の重症度によって変わる。

Ｈ．代謝産物およびプロドラッグ：
本開示の併用薬には、式（I）のクロメン化合物の代謝産物および／またはプロドラッ
グ、ならびに第２化合物の併用薬も含まれる。一実施形態では、併用薬は、クロメン化合物の代謝産物またはプロドラッグおよび第２化合物を含んでなる。別の実施形態において、併用薬は、クロメン化合物および第２化合物の代謝産物またはプロドラッグを含んでなる。さらなる別の実施形態において、併用薬は、クロメン化合物の代謝産物またはプロドラッグおよび第２化合物の代謝産物またはプロドラッグを含んでなる。

実施例１：結腸細胞癌における併用薬の抗腫瘍効果

本研究は、選択的シクロオキシゲナーゼ２（ＣＯＸ−２）インヒビターである（Ｓ）−６−ブロモ−８−トリデューテロメチル−２−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−クロメン−３−カルボン酸（化合物Ａ０１）のエルロチニブとの併用でのＨＴ−２９異種移植マウス結腸癌モデルにおける腫瘍増殖に対する効果を評価した。

ＨＴ−２９細胞を培地中で１週間培養した。消化後、細胞を８００〜１５００ｒｐｍで３〜５分間遠心分離した。細胞をＰＢＳで洗浄し、再び同じ条件で遠心分離した。次いで、細胞をＰＢＳ中で１２．５×１０^７細胞／ｍＬの最終濃度まで懸濁させた。ＨＴ−２９細胞懸濁液２００μＬをマウス前肢腋窩（マウスあたり２．５×１０^６個のＨＴ−２９細胞）に皮下注射した。

４８匹のＣＢ１７ＳＣＩＤ雄マウスに２．５×１０^６個のＨＴ２９細胞を移植した。腫瘍の増殖を、各動物について、キャリパーおよび式：Ｖ＝π×ａｂ^２／６を用いて計算した。腫瘍が約７５ｍｍ^３の大きさに達したら、マウスを６つの治療群：ビヒクル、１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１＋５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブ、１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１＋５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブ、５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブのうちの１つにランダムに割り当てた。化合物Ａ０１を２％ＤＭＳＯ、４％エタノール、４％ヒマシ油、および９０％ｄｄＨ_２Ｏに溶解した。

化合物Ａ０１およびエルロチニブを、ランダム化の直後に開始して２２日間継続して、強制経口投与により毎日投与した。ランダム化後０、３、６、９、１２、１５、１８、２１、および２２日目にマウス重量および腫瘍容積の測定を行った。２４日目に、化合物Ａ０１、エルロチニブ、およびＰＧＥ２レベルを測定するために、各動物から腫瘍組織を収
集した。

全ての動物が腫瘍を発症した。試験期間にわたって、治療群間に体重の差はなかった（表６）。

１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１＋５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブの併用薬は、ビヒクルで治療したマウスと比較した場合、腫瘍増殖を６６％遅らせた。１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１＋５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブの併用薬は、ビヒクルで治療したマウスと比較した場合、腫瘍増殖を６０％遅らせた。１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１はビヒクルと比較して単独で腫瘍増殖の５１％抑制を生じたが、エルロチニブ単独ではビヒクルと比較して腫瘍増殖の３８％抑制を生じた（表７、図１）。

エルロチニブの経口投与は、投与後２時間および６時間で化合物Ａ０１の血漿中濃度に影響を与えた（表８）

エルロチニブだけがない場合の腫瘍内化合物Ａ０１の量と比較して、エルロチニブの添加は、化合物Ａ０１の腫瘍内レベルを１．５倍増加させた（表９）

単独またはエルロチニブとの併用での化合物Ａ０１は、腫瘍中のＰＧＥ２レベルを６６〜１００％抑制した（表１０）。

化合物Ａ０１単独は、腫瘍増殖の減速において５０ｍｇ／ｋｇエルロチニブよりも優れていた。しかし、化合物Ａ０１＋エルロチニブの併用薬は、各治療薬単独よりもビヒクルと比較した場合に最大の腫瘍増殖抑制を示した。エルロチニブと併用した場合、１ｍｇ／ｋｇまたは１０ｍｇ／ｋｇで与えられた化合物Ａ０１の間にはほとんど差がなかった。

実施例２：結腸細胞癌における併用薬の抗腫瘍効果

この実験は、ＣＴ２６異種移植マウス結腸癌モデルにおける腫瘍増殖に対してエルロチニブとの併用での化合物Ａ０１を評価した。

ＣＴ２６．ＷＴ細胞を標準条件下で培養した。それらをトリプシンで採取し、ＰＢＳで洗浄した。１０^５個の細胞を、６週齢の雌ＢＡＬＢ／ｃマウスの右脇腹に全量１００μＬで注射した。腫瘍の大きさは、最も長い直径およびその垂線の平均として定量化した。マウスは、０日目から毎日、セレコキシブ、化合物Ａ０１、またはビヒクル（１０％ＤＭＳＯ／５０％ＰＥＧ４００／４０％水）を経口で（経口的に）受けた。抗ＰＤ−１モノクローナル抗体（クローンＲＭＰ１−１４、ＢｉｏＸＣｅｌｌ）を、腫瘍細胞接種後５〜９日目に（平均腫瘍直径が約５ｍｍのときに）、次いで３〜４日ごとに、２００μｇ／マウスで腹腔内投与し、最大６回注射した。

ＣＯＸ−２インヒビター（化合物Ａ０１またはセレコキシブ）および抗ＰＤ１抗体の併用療法を受けたマウスは、接種後５０日まで完全に腫瘍を拒絶した。対照的に、単剤療法（セレコキシブ、化合物Ａ０１、または抗ＰＤ１抗体単独）は腫瘍増殖を妨げなかった（図２）。いずれの治療レジメンも体重減少を引き起こさなかった。併用療法は、ビヒクルで治療したマウスと比較して、ＩＬ−６、ＩＦＮ−γ、ＩＬ−１β、ＴＮＦ−α、およびＰＧＥ_２の腫瘍内レベルを低下させた。

実施例３：結腸細胞癌への免疫応答に対する併用薬の効果

雌のＢＡＬＢ／ｃマウスに、実施例２のように１０^５個のＣＴ２６結腸直腸癌細胞を接種した。ＣＯＸ−２インヒビター（セレコキシブもしくは化合物Ａ０１）またはビヒクルを、毎日経口投与した。接種後９日目および１４日目に抗ＰＤ１抗体を腹腔内投与（２００μｇ／マウス）した。１６日目（最初の抗ＰＤ１投与後７日目）に腫瘍を分析した。

１６日目に、群間で腫瘍の大きさまたは重量に差はなかった。化合物Ａ０１単剤療法または併用療法で、ビヒクルで治療したマウスと比較して、腫瘍へのＣＤ４５^＋細胞（白血球）、ＣＤ３^＋、ＣＤ８^＋、ＣＤ８^＋ＩＦＮγ^＋、ＣＤ４^＋ＩＦＮγ^＋、ＣＤ８^＋ＴＮＦα^＋、およびＣＤ４^＋ＴＮＦα^＋細胞浸潤の増加があった。単独またはＣＯＸ−２インヒ
ビターとの併用での抗ＰＤ１抗体の投与は、腫瘍内ＣＤ４^＋Ｆｏｘｐ３^＋細胞の数を増加させた。化合物Ａ０１単独の治療は、Ｆｏｘｐ３^＋Ｔ細胞に対するＣＤ８^＋Ｔ細胞の比率を増加させた。セレコキシブ単独の治療は、Ｆｏｘｐ３^＋Ｔ細胞に対するＣＤ８^＋Ｔ細胞の比率を増加させなかった。ＧＲ−１^＋骨髄由来サプレッサー細胞（ＭＤＳＣ）に明らかな効果はなかった。併用療法は、脾臓ＣＤ４^＋ＩＦＮγ^＋細胞の数を増加させた。

実施例４：腫瘍増殖および免疫応答に対するクロメンおよび抗ＰＤ−Ｌ１抗体の併用薬の効果

この実験は、結腸癌のマウスモデルにおいて、単独および抗ＰＤ−Ｌ１抗体との併用での化合物Ａ０１による治療に対する免疫応答への効果を評価した。

ＣＴ２６マウス結腸癌細胞を実施例２のように準備した。雌のＥｎｖｉｇｏ ＢＡＬＢ／ｃ（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＨｓｄ）に、腋窩高く（前肢のすぐ下）に、ＰＢＳ（２００μＬ）中に懸濁した５×１０^５個のＣＴ２６細胞を皮下接種した。マウスを７つの群：ビヒクル（群１）、抗体対照（ラットＩｇＧ２ｂアイソタイプ）（群２）、抗ｍＰＤ−Ｌ１（クローン１０Ｆ９Ｇ２）（群３）、化合物Ａ０１（群４）、化合物Ａ０１＋抗体対照（群５）、化合物Ａ０１＋抗ｍＰＤ１−Ｌ１（群６）、および１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１＋抗ｍＰＤ−Ｌ１（群７）に分けた。接種後３、６、９、１２、および１６日目に抗体を腹腔内注射により投与した。化合物Ａ０１を毎日経口で与えた。１６日目の最終投与の２時間後にマウスを安楽死させ、試験のためにサンプルを調製した。

化合物Ａ０１または抗ｍＰＤ−Ｌ１での治療は、ビヒクルおよびアイソタイプ対照と比較して、腫瘍増殖を減速させた（全ての用量は、示されている場合を除いて１０ｍｇ／ｋｇである）。

＊：１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１

安楽死させた後、腫瘍を除去し、生細胞を回収するために処理した。赤血球を除去した。細胞を表面マーカーについて染色し、適用可能であれば、細胞内染色のために透過処理した。細胞を洗浄し、フローサイトメトリー染色バッファーに懸濁し、フローサイトメトリーにより分析した。

表１２は、免疫応答に対する化合物Ａ０１（別段の定めがない限り１０ｍｇ／ｋｇ）および抗ｍＰＤ−Ｌ１（１０ｍｇ／ｋｇ）の効果を示す。単独および抗ｍＰＤ−Ｌ１との併用での化合物Ａ０１は、（全ＣＤ４５^＋細胞の）腫瘍内ＣＤ４^＋ＣＤ８⁻Ｔ細胞のパーセンテージを増加させた。化合物Ａ０１および抗ｍＰＤ−Ｌ１の両方は、（全ＣＤ４５^＋細胞の）腫瘍内ＣＤ８^＋ＣＤ４⁻Ｔ細胞のパーセンテージを増加させた。化合物Ａ０１は、（全ＣＤ８^＋ＣＤ４⁻Ｔ細胞の）Ｋｉ６７^＋ＣＤ８^＋およびＰＤ−１^＋ＣＤ８^＋Ｔ細胞のレベルを低下させた。治療は、（全ＣＤ４５^＋細胞のパーセンテージとしての）Ｔｒｅｇ（ＣＤ２５^＋Ｆｏｘｐ３^＋）およびＭＤＳＣ（ＣＤ１１ｂ^＋Ｌｙ６Ｇ^＋）の相対的な数には最小の効果しか及ぼさなかった。併用療法は、Ｔｒｅｇに対するＣＤ８^＋Ｔ細胞の比率を増加させた。図３は、ＣＤ８^＋細胞パーセンテージと腫瘍退縮とを相関させる。図４は、ＣＤ８^＋群間の統計的差異を示す。

＊：１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１

実施例５：ＨＴ−２９腫瘍増殖および腫瘍内ＰＧＥ２に対する化合物Ａ０１の効果

この研究は、ＨＴ−２９異種移植マウス結腸癌モデルにおける腫瘍ＰＧＥ−２効果に対する化合物Ａ０１およびセレコキシブの効果を比較した。

ＨＴ−２９細胞を準備し、実施例１と同じ手順を用いて標準的な方法により移植した。

４２匹のＣＢ１７ＳＣＩＤマウスに２．５×１０^６個のＨＴ−２９細胞を移植した。腫瘍が７５ｍｍ^３の大きさに達したら、マウスを６つの治療群：ビヒクル、１０ｍｇ／ｋｇセレコキシブ、０．１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、０．３ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、３ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１、１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１のうちの１つにランダムに割り当てた。化合物Ａ０１を２％ＤＭＳＯ、４％エタノール、４％ヒマシ油、および９０％ｄｄＨ_２Ｏに溶解した。

化合物Ａ０１およびセレコキシブを、ランダム化の直後に開始して２２日間継続して、強制経口投与により毎日投与した。ランダム化後０、３、６、９、１２、１５、１８、２１、および２２日目にマウス重量および腫瘍容積の測定を行った。２２日の投与後、各動物からの血液を、投与の２時間後および６時間後に収集した。血漿中の化合物Ａ０１の濃
度を検出した。２４日目に、化合物Ａ０１、セレコキシブ、およびＰＧＥ２レベルを測定するために、各動物から腫瘍組織を収集した。

表１３は、１０ｍｇ／ｋｇセレコキシブまたは様々な用量の化合物Ａ０１の腫瘍容積に対する効果を示す。表１４は、化合物Ａ０１またはセレコキシブによる治療後の平均腫瘍内ＰＧＥ−２血漿中濃度を示す。

実施例６：ＣＴ２６腫瘍増殖および腫瘍内ＰＧＥ２に対する化合物Ａ０１の効果

この実験は、ＣＴ２６．ＷＴマウス結腸癌を有するＢａｌｃ／ｃ雌マウスにおいて、セレコキシブと比較した化合物Ａ０１の効能、ならびにプロスタグランジンＥ２（ＰＧＥ２）レベルおよびＴ細胞阻害へのそれらの効果を評価した。さらに、血液および腫瘍における化合物Ａ０１濃度の分析を行った。

ＣＴ２６マウス結腸癌細胞を実施例２のように準備した。雌のＨａｒｌａｎ Ｂａｌｂ／ｃマウス（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＨｓｄ）に、腋窩高く（前肢のすぐ下）に、ＰＢＳ（２００μＬ）中に懸濁した５×１０^５個のＣＴ２６細胞を皮下接種した。全ての動物について平均腫瘍量が約７９ｍｍ^３（群平均の範囲、７５〜８３ｍｍ^３）であった８日目に、腫瘍量のキャリパー測定推定に基づいて全てのマウスを試験群に分類した。マウスを１０の群：ビヒクル対照（群１）、３０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１（群２）、１０ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１（群３）、３ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１（群４）、１ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１（群５）、０．３ｍｇ／ｋｇ化合物Ａ０１（群６）、３０ｍｇ／ｋｇセレコキシブ（群７）、および１０ｍｇ／ｋｇセレコキシブ（群８）に分けた。

表１５は、１０ｍｇ／ｋｇセレコキシブまたは様々な用量の化合物Ａ０１の腫瘍容積に対する効果を示す。表１６は、化合物Ａ０１またはセレコキシブによる治療後の平均腫瘍内ＰＧＥ−２血漿中濃度を示す。

実施例７：ＣＴ２６腫瘍増殖および腫瘍内ＰＧＥ２に対する化合物Ａ０１および抗ＰＤ−Ｌ１の効果

この実験は、結腸癌のマウスモデルにおいて、単独または抗ＰＤ−Ｌ１抗体との併用での化合物Ａ０１による治療のＰＧＥ−２血漿中濃度への効果を評価する。

ＣＴ２６マウス結腸癌細胞を実施例４のように準備する。雌のＥｎｖｉｇｏ ＢＡＬＢ／ｃ（ＢＡＬＢ／ｃＡｎＮＨｓｄ）マウスに、実施例４に記載のように５×１０^５個のＣＴ２６細胞を接種する。次いで、マウスを対照群および治療群に分け、ここで、治療は、単独または抗ＰＤ−Ｌ１抗体との併用での化合物Ａ０１による。腫瘍の大きさおよび腫瘍ＰＧＥ−２血漿中濃度を測定する。

上述の実施形態は、本開示の態様の単なる例示である。これらの実施形態は、本特許を限定するものとみなされるべきではない。当業者は、本発明の概念を逸脱しないで種々の変形および改良をなし得、それらの変形および改良は本発明の保護範囲に含まれるものであることに留意されたい。したがって、本発明の保護範囲は特許請求の範囲に従う。

言及された全ての文献は、本明細書に記載されているかのように、参照により援用される。本開示の要素またはその例示的な実施形態を導入する場合、冠詞「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」、および「前記（ｓａｉｄ）」は、１つ以上の要素が存在することを意味することが意図されている。「含んでなる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」、「含む（ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ）」、および「有する（ｈａｖｉｎｇ）」という用語は包括的であり、列挙された要素以外の追加の要素が存在し得ることを意味するものとする。本発明を具体的な実施形態に関して説明したが、これらの実施形態の詳細は限定するものとして解釈されるべきではない。

Claims (6)

1. 式（Ｉ）の化合物またはその薬剤的に許容できる塩もしくは溶媒和物、および第２化合物を含んでなる併用薬であって、
   

   

   前記式（Ｉ）の化合物が、
   （Ｓ）−６−ブロモ−８−トリデューテロメチル−２−（トリフルオロメチル）−２Ｈ−クロメン−３−カルボン酸であり、
   前記第２化合物が、ＰＤ−１インヒビター、およびＰＤ−Ｌ１インヒビターからなる群から選択され、
   結腸癌を対象とする、併用薬。
2. 前記第２化合物が、
   ニボルマブ、ピジリズマブ、ペンブロリズマブ、ＡＭＰ−２２４、ＡＭＰ−５１４、ＳＴＩ−Ａ１１１０、ＴＳＲ−０４３、ＡＭＰ−５１４、およびＡＵＮＰ−１２からなる群より選択されるＰＤ−１インヒビター、および
   ＲＧ ７４４６、ＢＭＳ−９３６５５９、ＭＳＢ００１０７１８Ｃ、ＳＴＩ−Ａ１０１０、アベルマブ、アテゾリズマブ、およびデュルバルマブからなる群から選択されるＰＤ−Ｌ１インヒビター、
   である、請求項１に記載の併用薬。
3. 前記第２化合物が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、お
   よびデュルバルマブからなる群から選択される、請求項１又は２に記載の併用薬。
4. 前記第２化合物が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、またはアベルマブである、請求項１〜３のいずれか１項に記載の併用薬。
5. 前記第２化合物が、ペンブロリズマブ、ニボルマブ、またはアテゾリズマブである、請求項１〜４のいずれか１項に記載の併用薬。
6. 治療有効量の請求項１〜５のいずれか１項に記載の併用薬、および１種以上の薬剤的に許容できる賦形剤を含んでなる医薬組成物であって、
   結腸癌を治療するための医薬組成物。

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