JP6901274B2

JP6901274B2 - ω３系脂肪酸吸収促進用組成物

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Publication number: JP6901274B2
Application number: JP2017024866A
Authority: JP
Inventors: 理恵今井; 裕実春武藤
Original assignee: Fancl Corp
Current assignee: Fancl Corp
Priority date: 2017-02-14
Filing date: 2017-02-14
Publication date: 2021-07-14
Anticipated expiration: 2037-02-14
Also published as: JP2018131395A

Description

本発明は、ω３系脂肪酸吸収促進用組成物に関する。

ω（オメガ）３系脂肪酸（ω-3 fatty acid）は、不飽和脂肪酸の分類の一つで、一般にω３位に炭素−炭素二重結合を持つものを指す。植物及び微生物中では、ω６位に二重結合を作るΔ１２−脂肪酸デサチュラーゼによりオレイン酸の二重結合を一個増やしてリノール酸を生成することができる。さらに植物及び微生物中では、ω３位に二重結合を作るΔ１５−脂肪酸デサチュラーゼによりリノール酸の二重結合を一個増やしてα−リノレン酸を生成することができる。しかしヒトを含む動物は、ステアリン酸からオレイン酸を生成するΔ９−脂肪酸デサチュラーゼを有してはいるものの、Δ１２−脂肪酸デサチュラーゼもΔ１５−脂肪酸デサチュラーゼもどちらも有していないので、リノール酸もα−リノレン酸もどちらも自ら合成することができない。このためω３系脂肪酸は、ω６系脂肪酸とともに必須脂肪酸となっている。近年ω３系脂肪酸の生理機能が注目されている。例えばω３系脂肪酸の欠乏により学習能、視力の低下をきたすことが明らかとなってきた。このため、ω３系脂肪酸を多く含む魚油や、魚油から精製されたω３系脂肪酸を多く含む組成物が健康食品として注目を集めている。

天然に存在するω３系脂肪酸としては、
「α-リノレン酸 (ALA)：18:3 (n-3)：all-cis-9,12,15-オクタデカトリエン酸」、
「ステアリドン酸 (STD)：18:4 (n-3)：all-cis-6,9,12,15-オクタデカテトラエン酸」、
「エイコサトリエン酸 (ETE)：20:3 (n-3)：all-cis-11,14,17-エイコサトリエン酸」、
「エイコサテトラエン酸 (ETA)：20:4 (n-3)：all-cis-8,11,14,17-エイコサテトラエン酸」、
「エイコサペンタエン酸 (EPA)：20:5 (n-3)：all-cis-5,8,11,14,17-エイコサペンタエン酸」、
「ドコサペンタエン酸 (DPA)：22:5 (n-3)：all-cis-7,10,13,16,19-ドコサペンタエン酸」、
「ドコサヘキサエン酸 (DHA)：22:6 (n-3)：all-cis-4,7,10,13,16,19-ドコサヘキサエン酸」、
「テトラコサペンタエン酸：24:5 (n-3)：all-cis-9,12,15,18,21-テトラコサペンタエン酸」、
「テトラコサヘキサエン酸：24:6 (n-3)：all-cis-6,9,12,15,18,21-テトラコサヘキサエン酸」
が知られている。なお表記は「慣用名：数値表現：化学名」である。
上記したように魚油食品、なかでも肝油、ニシン、サバ、サケ、イワシ、タラ、ナンキョクオキアミ等の魚介類は、エイコサペンタエン酸（EPA）やドコサヘキサエン酸（DHA）のようなω３系脂肪酸に富んでいる。魚やその他の生物に含まれるDHAの多くは、ラビリンチュラ類の1属であるSchizochytrium属などのような海産の微生物によって生産されたものが、食物連鎖の過程で濃縮されたものであることが知られている。

ω３系脂肪酸を含む油脂を摂取すると小腸絨膜に存在するリパーゼによって脂肪酸とグリセリンに分解されて吸収されるが、その吸収率に影響を及ぼす物質ついては、あまり明らかになっていない。

一方、オリーブは、モクセイ科オリーブ属に属する植物で、地中海地域をはじめとして広く栽培されている。その果実はオリーブ油の製造や、食用として全世界で幅広く利用されており、食経験は非常に豊富である。オリーブの果実や葉には、オレウロペインやヒドロキシチロソール等のポリフェノール成分が含まれていることが知られている（特許文献１）。さらに、オリーブ抽出物や果実に含まれるポリフェノール成分は、骨形成促進作用（特許文献１）、抗炎症作用（特許文献２）、不妊治療効果（特許文献３）、脂肪肝の予防改善作用（特許文献４）、美白効果（特許文献５）、抗酸化効果（特許文献６）等の様々な作用を有することも知られている。これらの作用の中心は、オレウロペイン及びその構成成分であるヒドロキシチロソールなどのポリフェノール化合物が担っていることが明らかになっている。
しかし、オリーブやオリーブ葉、オリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物、及びそれらに含まれるポリフェノール成分が、ω３系脂肪酸の吸収に関わっていることはこれまで全く知られていない。

特開２００９−２２７６１６号公報特開２００９−４６４３９号公報特開２００９−１９１０１２号公報特開２００９−２６３２５７号公報特許第４５８７２００号公報特開２０１６−７９１２７号公報

本発明者らは、ω３系脂肪酸を含む油脂とオリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物の相互作用について研究を行い、オリーブやオリーブ葉に含まれているポリフェノール成分、なかでもヒドロキシチロソールがω３系脂肪酸の吸収を促進することを発見し、本発明をなした。

すなわち、本発明の課題は、オリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物を含有するω３系脂肪酸の吸収促進用組成物、及びオリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物と油脂に含有されるω３系脂肪酸の吸収促進用組成物、オリーブポリフェノール類、ヒドロキシチロソールのいずれか１以上の物質と油脂に含有されるω３系脂肪酸の吸収促進用組成物を提供することにある。

本発明の主な構成は以下の通りである。
（１）オリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物を含有するω３系脂肪酸吸収促進用組成物。
（２）オリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物がオリーブポリフェノール類を含有するものである（１）に記載の組成物。
（３）ポリフェノール類が、ヒドロキシチロソールである（２）に記載の組成物。
（４）ヒドロキシチロソールを含むω３系脂肪酸吸収促進用組成物。
（５）ω３系脂肪酸を含む油脂とヒドロキシチロソールを含有するω３系脂肪酸吸収促進用組成物。
（６）ω３系脂肪酸を含む油脂が魚油である（５）に記載の組成物。
（７）ω３系脂肪酸がエイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸である（１）〜（６）のいずれかに記載の組成物。

本発明により、ω３系脂肪酸の吸収促進用組成物が提供される。本発明の組成物は、ドコサヘキサエン酸（以下「ＤＨＡ」）やエイコサペンタエン酸（以下「ＥＰＡ」）などのω３系脂肪酸の吸収効率が高まるため、従来必要とされていた投与量より少ない量で、これらのω３系脂肪酸の効果を発揮させることができる。

ドコサヘキサエン酸（ＤＨＡ）の吸収促進試験の結果を示すグラフである。エイコサペンタエン酸（ＥＰＡ）の吸収促進試験の結果を示すグラフである。

本発明は、オリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物を含有するω３系脂肪酸の吸収促進用組成物に係る発明である。また本発明は、ω３系脂肪酸を含む油脂とヒドロキシチロソールを含有するω３系脂肪酸の吸収促進用組成物に係る発明である。
オリーブには、ヒドロキシチロソール、オレウロペイン及びこれらの配糖体等のオリーブポリフェノール化合物が含まれる。ヒドロキシチロソールは、オレウロペインの加水分解物である。本発明においては、ω３系脂肪酸の吸収を促進する物質として、オリーブポリフェノールであるヒドロキシチロソール又はオレウロペインが有効であるが、なかでもヒドロキシチロソールが好ましい。オリーブポリフェノールはオリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物に含有されている。
本発明に使用するオリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物とは、果実又は葉の抽出物をいう。
天然のオリーブ（Ｏｌｅａｅｕｒｏｐａｅａ）から分離される抽出物であり、分離箇所としては果実（果肉、果汁、種子）、葉等が挙げられる。オリーブ果実の搾油後の残渣から水抽出して得られる抽出物が市販されている。
例えば、市販されているＯｌｉｖｅｘＨＴ６（サンブライト株式会社製：果汁抽出物、抽出方法：エタノール抽出）は、オリーブ果実を圧搾して得られたオリーブ果汁を酸処理後、エタノールにて濾過・精製し粉末化したものであって、総ポリフェノールとして３０質量％以上含有し、ヒドロキシチロソールを６質量％以上含有し、さらにチロソールを１質量％以上含有する組成物である。
市販のＯｌｅａｓｅｌｅｃｔ（インデナ株式会社製：果肉抽出物、抽出方法：水とエタノールの混合溶媒抽出）は、オリーブ果実より水とエタノールの混合溶媒にて抽出し粉末化したものであって、総ポリフェノールとして３０質量％以上含有し、ベルバスコシドを５質量％以上、ヒドロキシチロソールを１．５質量％以上含有する組成物である。
市販のＯＰＥＸＴＡＮ（インデナ株式会社製：果肉抽出物、抽出方法：水とエタノールの混合溶媒抽出）はオリーブ果実より水とエタノールの混合溶媒にて抽出し粉末化したものであって、総ポリフェノールとして１０質量％以上含有し、ベルバスコシドを２．０〜３．５質量％含有し、ヒドロキシチロソール及びその誘導体を４．５質量％以上含有する組成物である。これらの市販の組成物を利用することができる。

本発明に使用するオリーブ葉抽出物は、オリーブ（ＯｌｅａｅｕｒｏｐａｅａＬ．）の葉から分離されるエキスである。葉の全部または一部から、抽出溶媒を用いて分離してもよいし、圧搾により分離してもよい。

抽出溶媒としては例えば、水、有機溶媒（例えば、アルコール、アセトンなどから選ばれる１種の溶媒、または２種以上の混合溶媒）、水および有機溶媒の混合液を使用できる。中でも水、水とアルコールとの混合液、およびアルコールが好ましい。アルコールとしては、エタノール、メタノールが好ましい。抽出時間および温度は、オリーブ葉抽出物を得るための抽出部位、溶媒の種類などによって適宜定めることができる。オリーブ葉抽出物は、オリーブ葉から抽出された粗抽出物であってもよいし、粗抽出物に濃縮、乾燥、粉砕などの加工を施したものであってもよい。さらに、分配法による処理、精製処理（例えば、イオン交換樹脂、カラムなどを利用して吸着処理後、溶媒による溶出、その後必要によりさらに濃縮処理）により不純物を除去したものも使用することができる。

オリーブ葉抽出物は、一般にはオリーブ葉エキスとして市販されており、市販品を用いることができる。このような市販品としては、例えば、オレウロペインを35％以上含有する「オピエース」（エーザイフード・ケミカル株式会社）、ヒドロキシチロソールを20％以上含有する「オラリス」（エーザイフード・ケミカル株式会社）、などが挙げられる。

本発明に用いるオリーブ抽出物又はオリーブ葉抽出物は、ヒドロキシチロソールを０．０２質量％以上含有するものであることが好ましく、０．１質量％以上含有するものであることがさらに好ましい。本発明においては、ω３系脂肪酸の吸収促進用組成物として、オリーブあるいはオリーブ葉から抽出精製された精製ヒドロキシチロソール又は化学的に合成されたヒドロキシチロソールを用いることもできる。
本発明において、有効成分であるヒドロキシチロソールは、ω３系脂肪酸を含有する油脂を摂取するのに際して、ω３系脂肪酸を吸収促進するために同時に摂取する。あるいは、魚油等のω３系脂肪酸を含む油脂とヒドロキシチロソールを含む組成物とすることができる。魚油等とヒドロキシチロソールを含むω３系脂肪酸吸収促進用組成物とする場合は、ω３系脂肪酸高含有の魚油又は精製魚油１質量部に対して、ヒドロキシチロソールを０．００１〜１００質量部、好ましくは０．０１〜１０質量部になるように配合することができる。

本発明のω３系脂肪酸の吸収促進用組成物は、そのままあるいは各種賦形剤を添加して製剤化する。製剤としては顆粒剤、錠剤、カプセル剤を例示することができる。
また組成物をそのまま、あるいは製剤化したものを飲食品に添加して用いることもできる。
なお製剤化に当たっては、本発明の組成物の目的を阻害しない範囲で、ω３系脂肪酸の吸収促進用組成物に各種の賦形剤や添加剤を使用することができる。具体的には、シクロデキストリン、へミセルロース、リグニン、グアーガム、コンニャクマンナン、イサゴール、アルギン酸、寒天、カラギーナン、キチン、カルボキシメチルセルロース、ポリデキストロースなどの食物繊維や増粘剤、食用油、カルシウム、鉄、ナトリウム、亜鉛、銅、カリウム、リン、マグネシウム、ヨウ素、マンガン、セレンなどのミネラル；ビタミンＡ、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、ナイアシン、葉酸、パントテン酸などの脂溶性又は水溶性のビタミン群、グリセリン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪酸エステル、ソルビタン脂肪酸エステル、プロピレングリコール脂肪酸エステル、リン脂質、アラビアガム、キサンタンガム、トラガカントガム、ローカストビーンガム、ミツロウなどの乳化剤や分散剤、増量剤、賦形剤、保存料・酸化防止剤、風味調整剤や香料、塩化ナトリウム、グルタミン酸ナトリウム、グリシン、コハク酸、乳酸ナトリウムなどの呈味料、クエン酸、クエン酸ナトリウム、酢酸、アジピン酸、フマル酸、リンゴ酸などの酸味料、マルチトール、アスパルテームなどの低カロリー甘味料、着色剤などである。
本発明の組成物には、必要に応じて酸味料、香料などを添加することもできる。

以下に本発明の組成物を用いた実施例、比較例及びそれを用いた試験例を示し、本発明を説明する。
１．試験試料の調製
下記表１に、本発明の組成物（実施例）及び比較例の組成物の組成を示す。

各成分を、秤量後ホモミキサーを用いて常法により混合し、実施例及び比較例の組成物とした。

２．動物試験による吸収性試験
１）試験動物及び投与方法
７週齢のＳＤラット動物搬入後、７日間訓化飼育を行い１群６匹とし、７日目に体重を測定し、体重層別法により群分けした。被検物質の投与前日から１６時間絶食した後、翌朝より試験試料を、ゾンデを用いて経口胃内投与した。
投与後、イソフルラン吸入麻酔で非覚醒状態にし、外側尾静脈から採血した。採血は、投与前、投与後１、２、３、４、６、８、１０、２４時間後の９ポイントで実施した。
動物への投与量は、実施例、比較例の試料を予めガスクロマトグラフィー分析により脂肪酸組成を分析し、その測定結果に基づき、動物１匹の投与量が下記の表２の量になるようにした。

２）血中ＤＨＡ、ＥＰＡ量の測定
採血した血液は、血漿を分離し以下の操作手順でＨＰＬＣ・ＭＳ測定用試料とした。
１血漿５０μＬにエタノール１００μＬ添加する。
２エタノール：１０Ｎ水酸化ナトリウム＝９：１の溶液を２００μＬ添加し、９０℃ で６０分インキュベーションしてケン化する。
３ヘキサン４００μＬを添加し、５分間浸透した後静置し、分離したヘキサン層を除去する。
４水層に６Ｎ塩酸水溶液２００μＬを添加混合し、次いでヘキサン６００μＬを添加し５分間浸透した後静置し、ヘキサン層を回収し、乾固する。
５アセトニトリル５０μＬを添加混合し、これをＨＰＬＣ・ＭＳ測定用試料とする。
またＨＰＬＣ及びマススペクトルの測定、検出条件は次のとおりとした。

ＨＰＬＣ条件
ＢＥＨＣ１８，２．１ｍｍ×５０ｍｍｗｉｔｈ１．７μｍ４０℃
Ａ：０．１％ギ酸水溶液
Ｂ：アセトニトリル
Ａ：Ｂ＝２０：８０
流速：０．３５ｍＬ／分

ＭＳ条件

３）測定結果
血中ＤＨＡ濃度、ＥＰＡ濃度の変化から、血中動態指標であるＴｍａｘ、Ｃｍａｘ、ＡＵＣを求め、下記の表４及び図１（ＤＨＡ）、表５及び図２（ＥＰＡ）に示した。なお血中動態指標はテューキー・クレーマー法で有意差検定を行った。有意水準はｐ＜０．０５である。

表４、５及び図１、２に示すとおりＤＨＡ及びＥＰＡともヒドロキシチロソールを含む本発明の組成物が顕著にＡＵＣを上昇させた。したがって本発明の組成物がω３系脂肪酸の吸収を促進させることが明らかとなった。

３．処方例
上記の試験結果に基づく、ヒドロキシチロソールとω３系脂肪酸を含む組成物のソフトカプセル充填用の処方例を下記表６に示す。

Claims

ヒドロキシチロソールが２０質量％以上含まれるオリーブ葉抽出物を含有するω３系脂肪酸吸収促進用組成物（ステアリドン酸を含むものを除く）。