JP6793927B2

JP6793927B2 - シプロフロキサシン誘導体系抗菌薬

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Publication number: JP6793927B2
Application number: JP2019545235A
Authority: JP
Inventors: グリゴレヴィッチシュチルリン，ユーリイ; ヴァレリーヴィッチシュチルリン，ニキータ; ヴラジーミロヴィッチプガチェフ，ミハイール; セルゲーエヴィチパべレフ，ローマン; ガブドゥラッハトヴナイクサノヴァ，アルフィヤ; ヴラジーミロヴナニキーティナ，エレーナ; スタニスラヴォヴィチツルケビチュ，ミハイル
Original assignee: アクトシオナーノエオブシェストヴォ“タツフィムファルムプレパラティ”
Priority date: 2016-11-02
Filing date: 2017-10-31
Publication date: 2020-12-02
Anticipated expiration: 2037-10-31
Also published as: US20190248802A1; US10759810B2; EA034063B1; EP3517527B1; RU2636751C1; EP3517527A4; CN110088090A; EP3517527A1; EA201900244A1; WO2018084747A1; JP2020508999A

Description

本発明は、有機複素環式化合物の化学構造に関し、すなわち、抗菌特性を示す、一般式（化１）のシプロフロキサシンの新規誘導体に関する。化合物は、医薬および獣医学で使用できる。

極めて効果的で安全な抗菌薬の研究および指向性合成は、近年の薬理学および医化学の主要な仕事の１つである。近年、新規の高度に病原性の微生物株の出現およびそれらの既存の抗生物質に対する耐性の増加が原因となり、感染症の数と流行の顕著な増加が認められている。

例えば、大腸菌の変異株（Ｏ１０４：Ｈ４）に起因して挿話的に発生する急性細菌感染症の存在にもかかわらず、先進国における主要な死亡の原因の１つは、よく知られた細菌−黄色ブドウ球菌、大腸菌および緑膿菌のままである。

特に、ＷＨＯによると、黄色ブドウ球菌は、医療機関において最も高頻度に感染症を引き起こす細菌リストの最上位にある。敗血症および重症型の皮膚および軟部組織感染症（せつ腫症、蜂巣炎、熱傷様皮膚症候群）を引き起こす黄色ブドウ球菌のメチシリン耐性株は、ヒトにとって特に危険であり、３１％の患者の死亡の原因となる。

黄色ブドウ球菌のメチシリン耐性株の抑制のために最近の治療で使用される最も効果的な抗菌薬の１つは、フルオロキノロン系薬、特に、シプロフロキサシンである。化学構造としては、シプロフロキサシンはフルオロキノロン系誘導体である。

シプロフロキサシンの作用機序は、細菌ＤＮＡジャイレース（核ＲＮＡのまわりの染色体のＤＮＡの超らせん形成に関与する、トポイソメラーゼＩＩおよびＩＶ）を抑制する、細菌のＤＮＡ合成、増殖および***を損なうことであり、これは、顕著な形態学的変化（細胞壁および細胞膜を含む）および細菌細胞の急速な死滅をもたらす。

シプロフロキサシンは、多くの好気性グラム陰性およびグラム陽性細菌、すなわち、緑膿菌、インフルエンザ菌、大腸菌、赤痢属菌種、サルモネラ属菌種、髄膜炎菌、淋菌、ブドウ球菌属種（ペニシリナーゼ産生および非産生）、腸球菌属菌種のいくつかの株、ならびにカンピロバクター菌属菌種、レジオネラ属菌種、マイコプラズマ属菌種、クラミジア属菌種、マイコバクテリウム属菌種に対して最大活性を有する抗菌効果を有する（非特許文献１）。

シプロフロキサシンは、シプロフロキサシンの影響を受けやすい微生物に起因する感染性および炎症性疾患に使用され、これらには、気道、腹腔の疾患および骨盤、骨、関節、皮膚の器官の疾患、敗血症、ＥＮＴ器官の重度感染症の疾患が含まれる（非特許文献２）。

シプロフロキサシンの大きな欠点は、年齢による摂取量の制限であり、小児と若者では成長障害を引き起こすので、この薬物の処方は禁忌である（非特許文献３）。

また、シプロフロキサシンの欠点には、極めて一般的なこの薬物の副作用−腹痛、悪心、腸内菌共生バランス失調、不眠、眩暈、アレルギー反応（血管浮腫、じんま疹、痒み）である。近年、フルオロキノロン系全種類に対する微生物の耐性の顕著な増加が認められている（非特許文献４）。

請求された技術的解決策の出願日の時点で、ほとんどのメチシリン耐性ブドウ球菌は、シプロフロキサシンに耐性があることが知られている（非特許文献５）。

一連のシプロフロキサシン誘導体における構造−生物活性の関係の調査により、Ｃ−７原子の位置の置換基の性質がそれらの生物学的作用に対して最も大きな影響を与えることが明らかとなった（非特許文献６）。

ほとんどの場合、このような置換基は、５および６員窒素含有複素環式化合物、例えば、ピペラジン、ピリミジン、１，２，３−トリアゾール、ピロリジン、およびそれらの置換誘導体である。

文献（非特許文献７）は、ピペラジン環のＣ−７原子の位置で種々のペプチドフラグメントおよび置換ジアリール尿素により組み換えしたシプロフロキサシン誘導体について記載している。これらの化合物は、シプロフロキサシンに比べてわずかに低い抗菌活性を示した。

１，２，３−トリアゾールフラグメントを含む架橋を介した、アミノグリコシド抗生物質ネオマイシンを用いたピペラジン環のＣ−７原子によるシプロフロキサシンの組み換えは、グラム陰性およびグラム陽性細菌株に対して高抗菌活性を示すハイブリッド構造を生じた（非特許文献８）。

国際出願（特許文献１）は、グラム陽性およびグラム陰性菌株に対するその抗菌活性を遙かに凌ぐ、ピペラジン環のＣ−７原子によるシプロフロキサシン誘導体について記載している。

全ての上記化合物の大きな欠点は、それらを抗菌薬の候補として見なすことを許容しない、それらの高い毒性であるという点に留意すべきである。

国際公開第２０１１／０３４９７１号［Ｍｏｄｉｆｉｅｄｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓａｎｄｍｅｔｈｏｄｓｏｆｕｓｉｎｇｔｈｅｓａｍｅｅ／Ｄｅｓｉｇｎｍｅｄｉｘ，Ｉｎｃ．−Ｐｕｂｌ．ｏｎＭａｒｃｈ２４，２０１１］ロシア国特許出願公開第０２４６６７２８号明細書［Ｆｏｓｆｏｎｉｅｖｙｅｓｏｌｉｎａｏｓｎｏｖｅｐｒｏｉｚｖｏｄｎｙｈｐｉｒｉｄｏｋｓｉｎａ［Ｐｈｏｓｐｈｏｎｉｕｍｓａｌｔｓｂａｓｅｄｏｎｐｙｒｉｄｏｘｉｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ］／ＳｈｔｙｒｌｉｎＹ．Ｇ．，ＳｈｔｙｒｌｉｎＮ．Ｖ．，ＰｕｇａｃｈｅｖＭ．Ｖ．−Ｐｕｂｌ．−１１／２０／２０１２］

ＹａｋｏｖｌｅｖＶ．Ｐ．Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｎｙｅｐｒｅｐａｒａｔｙｇｒｕｐｐｙｆｔｏｒｃｈｉｎｏｌｏｖ［Ａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌｄｒｕｇｓｏｆｔｈｅｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｇｒｏｕｐ］／／Ｒｕｓ．ｍｅｄ．ｊｏｕｒｎａｌ−１９９７，Ｖｏｌ．５−ｐ．１４０５−１４１３．ＳａｒｋｏｚｙＧ．Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ：ａｃｌａｓｓｏｆａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌａｇｅｎｔｓ／／Ｖｅｔ．Ｍｅｄ．−２００１−Ｖ．４６−Ｐ．２５７−２７４．ＢｅｌｏｂｏｒｏｄｏｖａＮ．Ｖ．，ＰａｄｅｙｓｋａｙａＥ．Ｎ．，ＢｉｒｙｕｋｏｖＡ．Ｖ．Ｆｔｏｒｑｕｉｎｏｌｏｎｙｖｐｅｄｉａｔｒｉｉ−ｚａｉｐｒｏｔｉｖ［Ｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓｉｎｐｅｄｉａｔｒｉｃｓ−ｐｒｏｓａｎｄｃｏｎｓ］／／ＰｅｄｉａｔｒｉｃｓＰｕｂｌ．−１９９６．Ｖｏｌ．２．−Ｐ．７６−８４．ＮｏｒｒｂｙＳ．Ｒ．Ｓｉｄｅ−ｅｆｆｅｃｔｓｏｆｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ：ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｓｂｅｔｗｅｅｎｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓａｎｄｏｔｈｅｒａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ／／Ｅｕｒ．Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｉｎｆｅｃｔ．Ｄｉｓ．−１９９１−Ｖ．１０−Ｐ．３７８−３８３．ＬｏｗｙＦ．Ｄ．Ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ：ｔｈｅｅｘａｍｐｌｅｏｆＳｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ／／Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔ．−２００３−Ｖ．１１１．−Ｐ．１２６５−１２７３．ＥｍａｍｉａＳ．，ＳｈａｆｉｅｅＡ．，ＦｏｒｏｕｍａｄｉＡ．Ｑｕｉｎｏｌｏｎｅｓ：ＲｅｃｅｎｔＳｔｒｕｃｔｕｒａｌａｎｄＣｌｉｎｉｃａｌＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｓ／／Ｉｒａｎ．Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｒｅｓ．−２００５．−Ｖ．−Ｐ．１２３−１３６．Ｎ．Ｇｅｒｍａｎ，Ｐ．Ｗｅｉ，Ｇ．Ｗ．ＫａａｔｚａｎｄＲ．Ｊ．Ｋｅｒｎｓ．Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄｅｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆｆｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓａｓｓｕｂｓｔｒａｔｅ−ｂａｓｅｄｉｎｈｉｂｉｔｏｒｓｏｆｂａｃｔｅｒｉａｌｅｆｆｌｕｘｐｕｍｐｓ／／Ｅｕｒ．Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−２００８−Ｖ．４３．−Ｐ．２４５３−２４６３．Ｖ．Ｐｏｋｒｏｖｓｋａｙａ，Ｖ．Ｂｅｌａｋｈｏｖ，Ｍ．Ｈａｉｎｒｉｃｈｓｏｎ，Ｓ．ＹａｒｏｎａｎｄＴ．ＢａａｓｏｖＤｅｓｉｇｎ，Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ，ａｎｄＥｖａｌｕａｔｉｏｎｏｆＮｏｖｅｌＦｌｕｏｒｏｑｕｉｎｏｌｏｎｅ−ＡｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅＨｙｂｒｉｄＡｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ／／Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−２００９−Ｖ．５．−Ｐ，２２４３−２２５４．ＴｏｍｉｔａＩ．，ＢｒｏｏｋｓＨ．Ｇ．，ＭｅｔｚｌｅｒＤ．Ｅ．ＳｙｎｔｈｅｓｉｓｏｆｖｉｔａｍｉｎＢ６ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ．ＩＩ．３−Ｈｙｄｒｏｘｙ−４−ｈｙｄｒｏｘｙｍｅｔｈｙｌ−２−ｍｅｔｈｙｌ−５−ｐｙｒｉｄｉｎｅａｃｅｔｉｃａｃｉｄａｎｄｒｅｌａｔｅｄｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ／／Ｊ．Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌ．Ｃｈｅｍ．−１９６６−Ｖ．３．，Ｎ．２．−Ｐ．１７８−１８３Ｒ．Ｓｅｒｗａ，Ｔ．Ｇ．Ｎａｍ，Ｌ．Ｖａｌｇｉｍｉｇｌｉ，Ｓ．Ｃｕｌｂｅｒｔｓｏｎ，Ｃ．Ｌ．Ｒｅｃｔｏｒ，Ｂ．Ｓ．Ｊｅｏｎｇ，Ｄ．Ａ．Ｐｒａｔｔ，Ｎ．Ａ．Ｐｏｒｔｅｒ．ＰｒｅｐａｒａｔｉｏｎａｎｄＩｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｏｆＶｉｔａｍｉｎＢ６−ＤｅｒｉｖｅｄＡｍｉｎｏｐｙｒｉｄｉｎｏｌＡｎｔｉｏｘｉｄａｎｔｓ／／Ｃｈｅｍ．Ｅｕｒ．Ｊ．−２０１０−Ｖ．１６．，Ｎ．４６．−Ｐ．１４１０６−１４１１４Ｍ．Ｖ．Ｐｕｇａｃｈｅｖ，Ｎ．Ｖ．Ｓｈｔｙｒｌｉｎ，Ｅ．Ｖ．Ｎｉｋｉｔｉｎａ，Ｌ．Ｐ．Ｓｙｓｏｅｖａ，Ｔ．Ｉ．Ａｂｄｕｌｌｉｎ，Ａ．Ｇ．Ｉｋｓａｎｏｖａ，Ａ．Ａ．Ｉｌａｅｖａ，Ｅ．Ａ．Ｂｅｒｄｎｉｋｏｖ，Ｒ．Ｚ．Ｍｕｓｉｎ，Ｙｕ．Ｇ．ＳｈｔｙｒｌｉｎＳｙｎｔｈｅｓｉｓａｎｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｎｏｖｅｌｐｈｏｓｐｈｏｎｉｕｍｓａｌｔｓｏｎｔｈｅｂａｓｉｓｏｆｐｙｒｉｄｏｘｉｎｅ／／Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−２０１３．−Ｖ．２１，Ｉｓｓ．１４．−Ｐ．４３８８−４３９５Ｍ．Ｖ．Ｐｕｇａｃｈｅｖ，Ｎ．Ｖ．Ｓｈｔｙｒｌｉｎ，Ｓ．Ｖ．Ｓａｐｏｇｎｉｋｏｖ，Ｌ．Ｐ．Ｓｙｓｏｅｖａ，Ａ．Ｇ．Ｉｋｓａｎｏｖａ，Ｅ．Ｖ．Ｎｉｋｉｔｉｎａ，Ｒ．Ｚ．Ｍｕｓｉｎ，Ｏ．Ａ．Ｌｏｄｏｃｈｎｉｋｏｖａ，Ｅ．Ａ．Ｂｅｒｄｎｉｋｏｖ，Ｙｕ．Ｇ．ＳｈｔｙｒｌｉｎＢｉｓ−ｐｈｏｓｐｈｏｎｉｕｍｓａｌｔｓｏｆｐｙｒｉｄｏｘｉｎｅ：ｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｓｔｒｕｃｔｕｒｅａｎｄａｎｔｉｂａｃｔｅｒｉａｌａｃｔｉｖｉｔｙ／／Ｂｉｏｏｒｇ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．−２０１３．−Ｖ．２１，Ｉｓｓ．２３．−Ｐ．７３３０−７３４２

請求された技術的解決策の目的は、シプロフロキサシンをベースにしたフルオロキノロン系の新しい非毒性の（安全な）、高い抗菌活性を有する抗菌薬を生成することであり、また、示した目的の既知の手段を広げることを目的とする。

請求された技術的解決策の結果は、天然の化合物（ビタミンＢ_６群のメンバーであるピリドキシン）のフラグメントおよび抗菌薬シプロフロキサシンのフラグメントの両方を含む一般式（Ｉ）の新規化合物を得ることである。

請求された化合物が番号Ｉ−１〜Ｉ−１２により示される下記スキーム１〜７に従って、請求された式（Ｉ）のシプロフロキサシンの新規誘導体を得ることにより、問題が解決され、指定した技術的結果が達成される。

スキーム１．（ａ）Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（以下、ＤＭＦＡ）、シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、２０℃、４時間。

スキーム２．（ａ）Ｈ_２Ｏ、５５℃、３時間；（ｂ）Ｈ_２Ｏ、ＤＭＦＡ、シプロフロキサシン塩酸塩、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、５５℃、６時間；（ｃ）Ｈ_２Ｏ、ＨＣｌ。

^＊［］は、単離されない中間体生成物を示す。

スキーム３．（ａ）ＣＨ_３ＯＨ、ＳＨＣＨ_２ＣＨ_２ＯＨ、ＣＨ_３ＯＮａ、５０℃、５時間；（ｂ）ＣＨＣｌ_３、ＮＢＳ、ＰＰｈ_３、２０℃、１時間（ｃ）ＤＭＦＡ、シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、２０℃、４時間；（ｄ）Ｈ_２Ｏ、ＨＣｌ、２５℃、２４時間。

スキーム４．（ａ）ＣＨ_３Ｃ（Ｏ）Ｈ、ＨＣｌ、３〜５℃、３時間またはＣ_６Ｈ_６、Ｒ_１Ｃ（Ｏ）Ｈ、ｐ−ＴｓＯＨ、煮沸、８時間；（ｂ）ＣＨＣｌ_３、ＮＢＳ、ＰＰｈ_３、２０℃、１時間；（ｃ）ＤＭＦＡ、シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、２０℃、４時間。

スキーム５．（ａ）ＤＭＦＡ、シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、２０℃、４時間；（ｂ）Ｈ_２Ｏ、ＨＣｌ。

^＊［］は、単離されない中間体生成物を示す。

スキーム６．（ａ）シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、２０℃、４時間；（ｂ）Ｈ_２Ｏ、ＨＣｌ、２５℃、２４時間。

スキーム７．（ａ）Ｃ_６Ｈ_６、パラホルム、ｐ−ＴｓＯＨ、煮沸、６時間；（ｂ）ＣＨＣｌ_３、ＳＯＣｌ_２、２０℃、３時間（ｃ）ＤＭＦＡ、シプロフロキサシン、ＫＩ、ＮａＨＣＯ_３、８０℃、４時間；（ｄ）Ｈ_２Ｏ、ＨＣｌ。

^＊［］は、単離されない中間体生成物を示す。

スキーム１〜７に従って得られた新規化合物の特性は、下記の具体的な性能の実施例で与えられている。

得られた化合物の構造は、質量分析法、^１Ｈおよび^１３ＣＮＭＲ分光法により確認した。

ＮＭＲスペクトルは、ＢｒｕｋｅｒＡＶＡＮＣＥ−４００装置で記録する。化学シフトは、重水素化溶媒（^１Ｈおよび^１３Ｃ）の残留プロトンのシグナルに対して決定する。

融解温度は、ＳｔａｎｆｏｒｄＲｅｓｅａｒｃｈＳｙｓｔｅｍｓＭＰＡ−１００ＯｐｔｉＭｅｌｔを用いて測定する。反応の過程の制御および化合物の純度は、ＳｏｒｂｆｉｌＰｌａｔｅによるＴＬＣ法により実施される。

ＭＡＬＤＩ質量スペクトルは、固体レーザーおよび飛行時間質量分析計を備えたＢｒｕｋｅｒのＵｌｔｒａｆｌｅｘＩＩＩ装置で記録する。加速電圧は２５ｋＶである。試料をＡｎｃｈｏｒＣｈｉｐターゲットに適用した。スペクトル記録を正イオンモードで実施する。得られたスペクトルは、試料の種々のポイントで得られた３００スペクトルの合計である。マトリックスには、２，５−ジヒドロキシ安息香酸（ＤＨＢ）（Ａｃｒｏｓ、９９％）およびｐ−ニトロアニリン（ＰＮＡ）が用いられる。マトリックスの調製のためにクロロホルムが使用される。ターゲット上への試料の適用は、「ｄｒｉｅｄｄｒｏｐｓ」法により実施する。

請求された技術的解決策の具体的実施形態の実施例

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・塩酸塩（Ｉ−１）の調製

２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の１．４４ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の化合物（１）（非特許文献９）の溶液に、２０℃で、１．５０ｇ（４．５ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．８４ｇ（１０．０ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．２３ｇ（１．４ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は１．１２ｇ（４７％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２４３℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．１４−１．１８ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３２−１．３７ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．５３ｓ（６Ｈ，２ＣＨ_３），２．３６ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６１ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．２９ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．４４ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｎ），３．５０−３．５６ м（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），４．９８ｃ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），７．２８ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．７８ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．８７ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），８．６０ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１４．９５ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．１８ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１８．４３ｓ（ＣＨ_３），２４．７４ｓ（２ＣＨ_３），３５．３６ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．７９ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．７Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．５５ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．４６ｓ（ＣＨ_２），５８．７７ｓ（ＣＨ_２），９９．６２ｓ（Ｃ（ＣＨ_３）_２），１０４．８６ｓ（Ｃ_ａｒ），１０７．７８ｓ（Ｃ_ａｒ）），１１２．００ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．４２ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．８Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２６．３２（Ｃ_ｐｙｒ），１２６．４８ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．０２ｓ（Ｃ），１４０．４２ｓ（Ｃ），１４５．７７ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．２Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４６．１３ｓ（Ｃ），１４７．２６ｓ（Ｃ），１４７．５２ｓ（Ｃ），１５３．５７ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６６．８６ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．８３ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２．２Ｈｚ，Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５２３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（５−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−６−メチルピリジン−３−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・塩酸塩（Ｉ−２）の調製

２．５０ｇ（１０．３ｍｍｏｌ）の３−ヒドロキシ−４，５−クロロメチル−２−メチルピリジニウム塩酸塩（２）（非特許文献１０）の２５ｍｌの蒸留水中溶液を、５５℃で３時間混合する。得られた溶液に、７５ｍｌのジメチルホルムアミド、３．６０ｇ（９．８ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン塩酸塩および３．３８ｇ（４０．２ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムを加える。活発なガス放出（約２分間）の終わりに、０．２５ｇ（１．５０ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを加える。得られた溶液を、５５℃で６時間撹拌する。混合の終わりに、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物に１００ｍｌの蒸留水を加え、３０分間煮沸する。不溶性残留物を真空中で濾別する。

残留物を１００ｍｌの丸底フラスコに移し、５０ｍｌの蒸留水を加え、濃塩酸を用いてｐＨ＝２．５６に酸性化する。真空中で溶媒を除去する。

乾燥残留物を１００ｍｌの丸底フラスコに移し、６０ｍｌの水で満たし、撹拌しながらＮａＨＣＯ_３を加えて、ｐＨ＝６．００に中和する。沈殿物を濾別し、１００ｍｌの丸底フラスコに移し、５０ｍｌの蒸留水を加え、濃塩酸を用いてｐＨ＝２．５６に酸性化する。溶液を真空中で乾燥する。収量は２．７５ｇ（５４％）で、融解温度は１９０℃以上（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ：１．１９−１．２０ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３０−１．３２ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．６４ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），３．５２ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．６９−３．７１ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．８６ｓ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），４．７０ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），４．９６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），７．６０ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．３Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．９５ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．０Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６７ｓ（１Ｈ，ＣＨ），８．７２ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６），ｐｐｍ：７．６６ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１５．６３ｓ（ＣＨ_３），３６．０３ｓ（シクロプロピルＣＨ），４６．３２ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５０．７１ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．７６ｓ（ＣＨ_２），５５．５２ｓ（ＣＨ_２），１０６．８６ｓ（Ｃ_ａｒ），１０７．００ｓ（Ｃ_ａｒ），１１１．２５ｄ（^２Ｊ_Ｃ− _Ｆ＝２３．２Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．３９ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝８．１Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２６．４２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３５．３７ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．１１ｓ（Ｃ），１４３．７０ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ− Ｎ），１４４．０１ｓ（Ｃ），１４４．１８ｓ（Ｃ），１４８．３０ｓ（Ｃ），１５２．２０ｓ（Ｃ），１５２．８８ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２４８．９Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６５．９０ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．４２ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｃｌ］^＋４８３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（５−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−６−メチルピリジン−３−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・４塩酸塩（Ｉ−３）の調製

残留物を１００ｍｌの丸底フラスコに移し、５０ｍｌの蒸留水を加え、５ｍｌの濃塩酸を加える。真空中で溶媒を除去する。収量は４．２３ｇ（６５％）で、融解温度は２２０℃以上（分解）である。

４塩酸塩の構造の証明を銀滴定法を用いて実施する。この調査は、自動滴定装置ＭｅｔｒｏｈｍＢａｓｉｃＴｉｔｒｉｎｏ７９４で実施する（１μｌの精度で添加）。試薬：蒸留水、硝酸銀ＡｇＮＯ_３、約１％のクロム酸カリウムＫ_２ＣｒＯ_４溶液

滴定溶液の調製：Ｖ_ｋ．＝１００ｍｌ、ｍ（ＡｇＮＯ_３）＝１．７０７５０ｇ、Ｍ_ｒ（ＡｇＮＯ_３）＝１６９．８７ｇ／ｍｏｌ、ｃ（ＡｇＮＯ_３）＝０．１００５Ｍ。調製後、滴定装置の投与装置が満たされる。

試料溶液の調製：Ｖ_ｋ．＝１００ｍｌ、ｍ（試料）＝０．４９１４０ｇ、Ｍ_ｒ（Ｉ−３）＝４８２．５１ｇ／ｍｏｌ、Ｍ_ｒ（ＨＣｌ）＝３６．４６ｇ／ｍｏｌ、ω（Ｈ_２Ｏ）＝８．１６％、ｍ（水不含試料）＝０．４５１３０ｇ。

滴定法手順：滴定は、Ｍｏｈｒ法（クロム酸カリウムの存在下での直接銀滴定）を用いて行われる。一定分量の試験溶液（Ｖ_ａｌ．＝２０ｍｌ）を撹拌棒が置かれたガラス容器に移す。初期溶液のｐＨは約２．２であり、これは、濃ＫＯＨ溶液で９．５の値に調節する（約４のｐＨで沈殿が形成され、これは約９のｐＨで溶解する）。その後、４〜５滴のクロム酸カリウムを加え（溶液が黄色になる）、分注器注入口を浸漬させ、スロー滴定を行う。最初に、溶液中に塩化銀の沈殿物が現れ、溶液は淡黄色になる。その後、滴定剤が添加されると、クロム酸銀の赤色沈殿物が現れ、これは、撹拌すると、オレンジ色に着色し、時間と共に色が消える（最初は素早く、しかし、当量点に近づくとよりゆっくりと）。滴定の終わりは、２〜３分以内に退色しないオレンジ色で決定される。

滴定結果：４回の測定の結果による滴定剤（Ｖ_{ｔｉｔｒａｎｔ}）の体積は：５．８９８ｍｌ、５．８２８ｍｌ、５．７５２ｍｌおよび５．８０７ｍｌである。
Ｖ_{ａｖｅｒａｇｅ}＝５．８２１±０．０６０ｍｌ
ｃ（ＨＣｌ）＝ｃ（ＡｇＮＯ_３）＊Ｖ_{ａｖｅｒａｇｅ}／Ｖ_ａｌ．＝０．０２９２５±０．０００３０Ｍ
ｖ（ＨＣｌ）＝ｃ（ＨＣｌ）＊Ｖ_ｋ．＝０．００２９２５±０．００００３０ｍｏｌ
ｍ（ＨＣｌ）＝ｖ（ＨＣｌ）＊Ｍ_ｒ（ＨＣｌ）＝０．１０６６±０．００１１ｇ
ｍ（Ｉ−３）＝ｍ（水不含試料）−ｍ（ＨＣｌ）＝０．３４４７±０．００１１ｇ
ｖ（Ｉ−３）＝ｍ（Ｉ−３）／Ｍ_ｒ（Ｉ−３）＝０．０００７１４４±０．０００００２３ｍｏｌ
ｎ（ＨＣｌ）＝ｖ（ＨＣｌ）／ｖ（Ｉ−３）＝４．０９４±０．０４２
このように、化合物Ｉ−３は、４モルの塩酸を含む。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ：０．９９−１．０３ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．２３−１．２８ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．５６ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），３．５２ｂｒｍ（９Ｈ，ピペラジノ４ＣＨ_２＋シクロプロピルＣＨ），４．６１ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），４．９８ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），７．２６ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１２．９Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．３０ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．２Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．３０ｓ（１Ｈ，ＣＨ），８．４１ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６＋Ｄ_２Ｏ）δ，ｐｐｍ：９．１２ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１６．８３ｓ（ＣＨ_３），３７．７５ｓ（シクロプロピルＣＨ），４８．０５ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．８Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ２），５３．２５ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５６．４２ｓ（ＣＨ_２），５８．２０ｓ（ＣＨ_２），１０７．２３ｓ（Ｃ_ａｒ），１０８．２６ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．３０ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２２．９Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２０．３４ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝８．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２７．４９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３６．１１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４０．４６ｓ（Ｃ），１４５．５６ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．２Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４６．６１ｓ（Ｃ），１４７．４０ｓ（Ｃ），１４９．７９ｓ（Ｃ），１５４．１７ｓ（Ｃ），１５４．８２ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１７０．２５ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７７．４０ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ−４Ｃｌ］^＋４８３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（２−（（（２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）スルファニル）エチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−４）の調製

ステップ１．５−（（（２−ヒドロキシエチル）スルファニル）メチル）−２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（３）の調製
２．６９ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）の化合物（１）（非特許文献９）を、０．５２ｇ（２２．４ｍｍｏｌ）のナトリウムに１０ｍｌの無水メタノール中溶液に加えた後、１．１４ｇ（１４．６ｍｍｏｌ）のメルカプトエタノールを冷却しながら添加する。反応混合物を５０℃で５時間攪拌する。沈殿物を濾別し、溶媒を真空中で除去する。乾燥残留物を最小量のクロロホルム中に溶解し、カラムクロマトグラフィーで精製する（溶離液はクロロホルム、その後、酢酸エチル）。収量は１．７４ｇ（６４％）で、白色結晶であり、融解温度は１０３〜１０４℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．５３ｓ（６Ｈ，２ＣＨ_３），２．３７ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６１ｔ（２Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝６．１Ｈｚ，ＳＣＨ _２ＣＨ_２ＯＨ），３．００ｓ（１Ｈ，ＯＨ），３．５８ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｓ），３．７１ｔ（２Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝６．１Ｈｚ，ＳＣＨ_２ＣＨ _２ＯＨ），４．９４ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），７．８３ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１８．４２ｓ（ＣＨ_３），２４．８２ｓ（２ＣＨ_３），３０．０７ｓ（ＳＣＨ _２ＣＨ_２ＯＨ），３４．４４ｓ（ＣＨ_２Ｓ），５８．５２ｓ（ＣＨ_２Ｏ），６０．０９ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９９．９１ｓ（Ｃ（ＣＨ_３）_２），１２５．６３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２６．６３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．９３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４６．４６ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．４６ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ２．５−（（（２−ブロモエチル）スルファニル）メチル）−２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（４）の調製
１．７０ｇ（６．５ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンおよび１．１６ｇ（６．５ｍｍｏｌ）のブロモスクシンイミドを、１．７４ｇ（６．５ｍｍｏｌ）の化合物（３）の２０ｍｌの無水クロロホルム中溶液に２０℃で加える。１時間後、溶液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：ジエチルエーテル：石油エーテル＝２：１）で精製する。収量は１．４２ｇ（６６％）で、淡褐色油である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．５４ｓ（６Ｈ，２ＣＨ_３），２．３９ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．８６ｔ（２Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．６Ｈｚ，ＳＣＨ _２ＣＨ_２Ｂｒ），３．４０ｔ（２Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．６Ｈｚ，ＳＣＨ_２ＣＨ _２Ｂｒ），３．６０ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｓ），４．９３ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），７．８５ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１８．６０ｓ（ＣＨ_３），２４．８５ｓ（２ＣＨ_３），３０．１８ｓ（ＳＣＨ _２ＣＨ_２Ｂｒ），３０．５７ｓ（ＳＣＨ_２ＣＨ _２Ｂｒ），３３．６９ｓ（ＣＨ_２Ｓ），５８．５２ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９９．９６ｓ（Ｃ（ＣＨ_３）_２），１２５．４１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２６．１５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．８９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４６．４８ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．９２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ３．１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（２−（（（２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）スルファニル）エチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−４）の調製
０．４６ｇ（１．４ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．１２ｇ（１．４ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．０５ｇ（０．４ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、０．４９ｇ（１．５ｍｍｏｌ）の化合物（４）の２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は０．４１ｇ（５１％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２０６〜２０８℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．１６−１．２０ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３５−１．４０ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．５４ｓ（６Ｈ，２ＣＨ_３），２．３８ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６０−２．６２ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），２．６４−２．６７ｍ（４Ｈ，ＳＣＨ _２ＣＨ _２Ｎ），３．３１−３．３３ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．５１−３．５６ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），３．５９ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｎ），４．９６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），７．３２ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．８５ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），７．９３ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．７０ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１４．９７ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．３３ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１８．６０ｓ（ＣＨ_３），２４．８５ｓ（２ＣＨ_３），２８．７５ｓ（ＣＨ_２），３０．５７ｓ（ＣＨ_２），３５．４０ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．８２ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．８Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．７４ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．８１ｓ（ＣＨ_２），５８．５３ｓ（ＣＨ_２），９９．８７ｓ（Ｃ（ＣＨ_３）_２），１０４．９１ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝３．０Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１０８．１６ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．４１ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．８４ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２５．４２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２６．６２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９，１７ｓ（Ｃ），１４０．０４ｓ（Ｃ），１４５．９５ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４６．４２ｓ（Ｃ），１４７．４６ｓ（Ｃ），１４７．５４ｓ（Ｃ），１５３．７７ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６７．０８ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７７．１６ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５８３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（２−（（（５−ヒドロキシ−４−ヒドロキシメチル−６−メチルピリジン−３−イル）メチル）スルファニル）エチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−５）の調製

２０ｍｌの水中の０．２４ｇ（０．４ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン誘導体（Ｉ−４）および１ｍｌの濃ＨＣｌを２５℃で２４時間撹拌する。次に、溶液を重炭酸ナトリウムでｐＨ＝６に中和する。沈殿物を濾別し、アセトン、クロロホルムおよび水で連続的に洗浄する。収量は０．１２ｇ（５２％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は１３５〜１４０℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ：１．１８ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３２ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．３２ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．５８−２．６４ｍ（８Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２，ＳＣＨ_２ＣＨ_２Ｎ），３．３２−３．３６ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．６１−３．６７ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），３．８０ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｎ），４．８２ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．８８ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），７．５６ｂｒｓ（１ＨＣＨ_ａｒ），７．８２ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），７．８８ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．２Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６５ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），９．３２ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：７．５７ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１９．３１ｓ（ＣＨ_３），２８．０１ｓ（ＣＨ_２），２９．８０ｓ（ＣＨ_２），３５．８８ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．３２ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．０６ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５６．４８ｓ（ＣＨ_２），５７．２６ｓ（ＣＨ_２），１０６．３８ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１０８．１８ｓ（Ｃ_ａｒ），１１０．９１ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．１Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１８．５６ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．８Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２９．９５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３１．４２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．１６ｓ（Ｃ），１４０．３３ｓ（Ｃ），１４５．１３ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．１Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４６．０１ｓ（Ｃ），１４７．９６ｓ（Ｃ），１５０．０７ｓ（Ｃ），１５３．０１ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２４９．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６５．９４ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．３４ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５４３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（２，８−ジメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−６）の調製

ステップ１．５−ヒドロキシメチル−２，８−ジメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（６）の調製
３〜５℃に冷却および撹拌しながら、１２．００ｇ（５９．０ｍｍｏｌ）のピリドキシン塩酸塩（５）の１５０ｍｌのアセトアルデヒド中の懸濁液を通して、３９．００ｇ（１０７０．０ｍｍｏｌ）の塩酸を通過させる。得られた反応混合物を２０時間撹拌する。沈殿物を濾別し、エーテルで洗浄し、カリウムの水溶液で中和する。生成物を濾過し、エチルアルコールから再結晶化する。収量は５．６５ｇ（５０％）で、無色結晶であり、融解温度は１２５℃である（特許文献２）。

ステップ２．５−ブロモメチル−２，８−ジメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（９）の調製
１．３４ｇ（５．１ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンおよび０．９１ｇ（５．１ｍｍｏｌ）のブロモスクシンイミドを、０．９９ｇ（５．１ｍｍｏｌ）の化合物（６）の２０ｍｌの無水クロロホルム中溶液に２０℃で加える。１時間後、溶液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：ジエチルエーテル：石油エーテル＝２：１）で精製する。収量は０．４５ｇ（３４％）で、淡褐色油状物質である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．５７ｄ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝５．１Ｈｚ，ＣＨＣＨ _３），２．４０ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．２７，４．３２（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_ＨＨ＝−１０．８Ｈｚ，ＣＨ_２Ｏ），４．９４，４．９７（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_ＨＨ＝−１５．８Ｈｚ，ＣＨ_２Ｂｒ），５．１５ｋ（１Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝５．１Ｈｚ，ＣＨＣＨ_３），８．００ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１８．５９ｓ（ＣＨ_３），２０．６２ｓ（ＣＨ_３），２６．７４ｓ（ＣＨ_２Ｂｒ），６３．４７ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９７．３２ｓ（ＣＨＣＨ_３），１２６．７９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２６．９４ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４０．９１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．９３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．６３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ３．１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（２，８−ジメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−６）の調製。０．４１ｇ（１．２ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．１０ｇ（１．２ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．０６ｇ（０．４ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、０．３８ｇ（１．５ｍｍｏｌ）の化合物（９）の３０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は０．３１ｇ（４９％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２３３℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．１７−１．２０ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３３−１．３８ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．５８ｄ（３Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｈ＝５．１Ｈｚ，ＣＨ_３），２．４１ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６１−２．６３ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．２８−３．３１ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．４３，３．４６（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１３．４Ｈｚ，ＣＨ_２Ｎ），３．４９−３．５３ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），５．０２，５．０８（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１６．２Ｈｚ，ＣＨ_２Ｏ），５．１８ｋ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｈ＝５．１Ｈｚ，ＣＨ），７．３０ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．０ＨｚＣＨ_ａｒ），７．８９ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．９２ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），８．６７ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１４．９５ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．３０ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１８．４３ｓ（ＣＨ_３），２０．７６ｓ（２ＣＨ_３），３５．３９ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．９１ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．７Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．６２ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．５９ｓ（ＣＨ_２），６４．４９ｓ（ＣＨ_２），９７．２１ｓ（ＣＨＣＨ_３），１０４．９２ｓ（Ｃ_ａｒ），１０８．０９ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．３４ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．７８ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．８Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２６．８２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２８．０８ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．１３ｓ（Ｃ），１４１．０２ｓ（Ｃ），１４５．８８ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４７．２６ｓ（Ｃ），１４７．４３ｓ（Ｃ），１４８．０２ｓ（Ｃ），１５３．７３ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６７．００ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７７．０８ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５０９．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−２−プロピル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−７）の調製

ステップ１．５−ヒドロキシメチル−８−メチル−２−プロピル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］−ピリジン（７）の調製
ディーンスタークノズルを備えた丸底フラスコ中で、７．００ｇ（３４．４ｍｍｏｌ）のピリドキシン塩酸塩（５）、１３．７０ｇ（７２．１ｍｏｌ）のｐ−トルエンスルホン酸一水和物および６．５０ｍｌ（７２．２ｍｍｏｌ）のオイル状アルデヒドの、１２０ｍｌのベンゼン中懸濁液を調製する。反応生成物を８時間煮沸後、溶媒を真空中で留去する。重炭酸ナトリウムの水溶液を用いて、残留物をｐＨ＝７に中和する。沈殿物を濾過し、ベンゼンで洗浄する。収量は５．５８ｇ（７３％）で、白色結晶であり、融解温度は１０１℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：０．９９ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．４Ｈｚ，ＣＨ _３ＣＨ_２ＣＨ_２），１．５２−１．５８ｍ（２Ｈ，ＣＨ_３ＣＨ _２ＣＨ_２），１．８０−１．８７ｍ（２Ｈ，ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ _２），２．３４ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．２５ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），４．４８ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．９６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．９７ｔ（１Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝４．８Ｈｚ，ＣＨ），７．８３ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１４．０１ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１７．０８ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１８．１７ｓ（ＣＨ_３），３６．４１ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），６０．０４ｓ（ＣＨ_２Ｏ），６４．２７ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９９．９７ｓ（ＣＨＣ_３Ｈ_７），１２７．７６ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３０．１１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．１７ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．３１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．９９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ２．５−ブロモメチル−８−メチル−２−プロピル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］−ピリジン（１０）の調製
３．４９ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンおよび２．３７ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）のブロモスクシンイミドを、２．９７ｇ（１３．３ｍｍｏｌ）の化合物（７）の２０ｍｌの無水クロロホルム中溶液に２０℃で加える。１時間後、溶液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：ジエチルエーテル：石油エーテル＝２：１）で精製する。収量は１．５６ｇ（４１％）で、白色油状物質である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．００ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．４Ｈｚ，ＣＨ _３ＣＨ_２ＣＨ_２），１．５２−１．６２ｍ（２Ｈ，ＣＨ_３ＣＨ _２ＣＨ_２），１．８２−１．９１（２Ｈ，ＣＨ_３ＣＨ_２ＣＨ _２），２．４３ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．３０，４．３４（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_ＨＨ＝−１０．８Ｈｚ，ＣＨ_２Ｏ），４．９９ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｂｒ），５．０３ｔ（１Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝５．２Ｈｚ，ＣＨＣ_３Ｈ_７），８．０３ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１４．０２ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１７．０７ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１８．４９ｓ（ＣＨ_３），２６．７３ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），３６．３５ｓ（ＣＨ_２Ｂｒ），６３．６３ｓ（ＣＨ_２Ｏ），１００．１３ｓ（ＣＨＣ_３Ｈ_７），１２７．００ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２７．５０ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４０．３６ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．１５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．６１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ３．１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−２−プロピル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−７）の調製
１．４４ｇ（４．４ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．３７ｇ（４．４ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．１５ｇ（１．３ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、１．５１ｇ（５．３ｍｍｏｌ）の化合物（１０）の３０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は０．６ｇ（２６％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２３７〜２３９℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：０．９９ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．４Ｈｚ，Ｃ_３Ｈ_７），１．１３−１．１９ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３４−１．３７ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．４９−１．６０ｍ（２Ｈ，Ｃ_３Ｈ_７），１．７７−１．８９（２Ｈ，Ｃ_３Ｈ_７），２．３９ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６０−２．６２ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ２），３．２７−３．２９ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．４１，３．４５（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１３．２Ｈｚ，ＣＨ_２Ｎ），３．５２ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），５．００，５．０８（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１６．２Ｈｚ，ＣＨ_２Ｏ），５．０２ｋ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｈ＝５．２Ｈｚ，ＣＨ），７．２９ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．８４ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．９０ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），８．６３ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１４．９４ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．２６ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１３．９９ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１７．０７ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），１８．２９ｓ（ＣＨ_３），３５．３９ｓ（Ｃ_３Ｈ_７），３６．４３ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．８５ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．７Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．５９ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．５６ｓ（ＣＨ_２），６４．５４ｓ（ＣＨ_２），９９．９２ｓ（ＣＨＣ_３Ｈ_７），１０４．９０ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２．９Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１０７．９６ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．２０ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．６３ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．８Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２６．８９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２８．３７ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．０９ｓ（Ｃ），１４０．８０ｓ（Ｃ），１４５．８４ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．３Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１４７．１９ｓ（Ｃ），１４７．３７ｓ（Ｃ），１４８．０７ｓ（Ｃ），１５３．６８ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．７Ｈｚ，Ｃ−Ｆ），１６６．９５ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．９９ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］^＋５３５．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−２−オクチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−８）の調製

ステップ１．５−ヒドロキシメチル−２−オクチル−８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（８）の調製
ディーンスタークノズルを備えた丸底フラスコ中で、７．００ｇ（３４．４ｍｍｏｌ）のピリドキシン塩酸塩（５）、１３．７０ｇ（７２．１ｍｏｌ）のｐ−トルエンスルホン酸一水和物および５．９０ｍｌ（３４．４ｍｍｏｌ）のノニルアルデヒドの、１２０ｍｌのベンゼン中懸濁液を調製する。反応生成物を８時間煮沸後、溶媒を真空中で留去する。重炭酸ナトリウムの水溶液を用いて、残留物をｐＨ＝７に中和する。沈殿物を濾過し、石油エーテルで洗浄する。収量は８．２６ｇ（８２％）で、白色結晶であり、融解温度は１７５℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：０．８８ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝６．６Ｈｚ，ＣＨ_３），１．２８−１．３８（１０Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．４９−１．５７ｍ（２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．８０−１．９４ｍ（２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），２．３９ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），３．３０ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），４．５３ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．９９ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．００ｋ（１Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝５．２Ｈｚ，ＣＨ），７．８３ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１４．２５ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），１８．３３ｓ（ＣＨ_３），２２．８０ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２３．７１ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．３５ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．５１ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．６０ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３１．９９ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３４．４２ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），６０．３８ｓ（ＣＨ_２Ｏ），６４．３２ｓ（ＣＨ_２Ｏ），１００．２１ｓ（ＣＨＣ_８Ｈ_１７），１２７．７９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２９．８１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．３１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．５９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．０５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ２．５−ブロモメチル−２−オクチル−８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（１１）の調製
２．６７ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）のトリフェニルホスフィンおよび１．８２ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）のブロモスクシンイミドを、２．９９ｇ（１０．２ｍｍｏｌ）の化合物（８）の２０ｍｌの無水クロロホルム中溶液に２０℃で加える。１時間後、溶液を真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（溶離液：ジエチルエーテル：石油エーテル＝２：１）で精製する。収量は１．８９ｇ（５２％）で、白色結晶であり、融解温度は１７５℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：０．８７ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝７．２Ｈｚ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．２６−１．３４（１０Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．４８−１．５５ｍ（２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．７９−１．９３ｍ（２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），２．４１ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．２８，４．３３（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_ＨＨ＝−１０．８ＨｚＣＨ_２Ｏ），４．９６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｂｒ），４．９９ｔ（１Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝５．２Ｈｚ，ＣＨＣ_８Ｈ_１７），８．００ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：１４．１８ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），１８．５５ｓ（ＣＨ_３），２２．７４ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２３．６２ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２６．７４ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．２８ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．４３ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．５４ｓ（ＣＨ_２Ｂｒ），３１．９３ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３４．３０ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７）６３．５８ｓ（ＣＨ_２Ｏ），１００．２６ｓ（ＣＨＣ_８Ｈ_１７），１２６．８４ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２７．２１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４０．７９ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．０５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．６７ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ３．１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−２−オクチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ−［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−８）の調製
０．９３ｇ（２．８ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．２４ｇ（２．８ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．１０ｇ（０．８ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、１．２０ｇ（３．４ｍｍｏｌ）の化合物（１１）の２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は０．９１ｇ（５４％）で、黄色結晶であり、融解温度は８９〜９３℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：０．８６ｔ（３Ｈ，^３Ｊ_ＨＨ＝６．８Ｈｚ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．１５−１．１８ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．２３−１．３８ｍ（１２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），１．４８−１．５４ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．８２−１．９０ｍ（２Ｈ，Ｃ_８Ｈ_１７），２．４１ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６１−２．６３ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．２９−３．３３ｍ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．４１，３．４５（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１３．２Ｈｚ，ＣＨ_２Ｎ），３．５２ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），５．０１，５．０９（ＡＢシステム，２Ｈ，^２Ｊ_Ｈ−Ｈ＝−１６．２Ｈｚ，ＣＨ_２Ｏ），５．１２ｋ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｈ＝５．２Ｈｚ，ＣＨ），７．３０ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．０Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．８８ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．１Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．９１ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），８．６６ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１４．９５ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．２９ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１４．１８ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），１８．３９ｓ（ＣＨ_３），２２．７３ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２３．７０ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．２８ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．４６ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），２９．５５ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３１．９３ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３４．４４ｓ（Ｃ_８Ｈ_１７），３５．３９ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．９０ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．６Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．６２ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．６０ｓ（ＣＨ_２），６４．５８ｓ（ＣＨ_２），１００．１３ｓ（ＣＨＣ_８Ｈ_１７），１０４．８９ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２．９Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１０８．０６ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．３２ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．７５ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２６．８２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１２８．２８ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．１２ｓ（Ｃ），１４０．９３ｓ（Ｃ），１４５．８８ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．３Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４７．３０ｓ（Ｃ），１４７．４２ｓ（Ｃ），１４８．０８ｓ（Ｃ），１５３．７２ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６７．００ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７７．０４ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ−Ｈ］^＋６０５．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（５−ヒドロキシ−２，４−ビス（ヒドロキシメチル）−６−メチルピリジン−３−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−９）の調製

０．７１ｇ（２．８ｍｍｏｌ）の化合物（１２）（非特許文献１１）の２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、０．７９ｇ（２．４ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．４４ｇ（５．２ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．１２ｇ（０．７ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。再結晶化後、１５ｍｌの０．１ＨのＨＣｌ溶液を加え、真空中で溶媒を留去する。収量は０．８４ｇ（６５％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は１９０〜１９５℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ：１．１５−１．１９ｂｒｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．２８−１．３４ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．３７ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．６６ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．２７ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．３０ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），３．７３ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），３．７９ｍ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），４．５６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），４．７８ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），６．００ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），７．５４ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．４Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．８７ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．３Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６４ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），９．１５ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：７．４８ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１９．２８ｓ（ＣＨ_３），３５．８０ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．４４ｄ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝４．６Ｈｚ，ピペラジノ２ＣＨ_２），５１．６０ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５３．４１ｓ（ＣＨ_２），５６．１７ｓ（ＣＨ_２），６３．２６ｓ（ＣＨ_２），１０６．４９ｓ（^４Ｊ_Ｃ−Ｆ＝３．１Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１０６．７２ｓ（Ｃ_ａｒ），１１０．８５ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．０Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１８．６８ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２７．７２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３５．０３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．０８ｓ（Ｃ），１４４．３９ｓ（Ｃ），１４４．９５ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．２Ｈｚ，Ｃ_ａｒ）−Ｎ），１４７．９１ｓ（Ｃ），１４８．７９ｓ（Ｃ），１４９．４４ｓ（Ｃ），１５２．９７ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２４９．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６５．８２ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．３１ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋２Ｈ−Ｃｌ］^＋５１４．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（５−ヒドロキシメチル−２，２，８−トリメチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン−６−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸（Ｉ−１０）の調製

１．３０ｇ（４．３ｍｍｏｌ）の化合物（１３）（非特許文献１２）の２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、１．２９ｇ（３．９ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．３３ｇ（３．９ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．１４ｇ（１．２ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、２０℃で連続的に加える。４時間後、真空中で溶媒を除去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトン：水＝２：１の溶媒混合物から再結晶化する。収量は０．９４ｇ（４４％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２２５℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１．１６ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３３ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．５４ｓ（６Ｈ，２ＣＨ_３），２．３８ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），２．７９ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．２９ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．４９ｂｒｓ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），３．８４ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｎ），４．４４ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．９４ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），７．２９ｂｒｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），７．８９ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１２．３Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６７ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），１４．９３ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ．：８．３０ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１８．３９ｓ（ＣＨ_３），２４．７９ｓ（２ＣＨ_３），３５．４３ｓ（シクロプロピルＣＨ），４９．６３ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５２．２７ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５７．７１ｓ（ＣＨ_２），５８．９９ｓ（ＣＨ_２），６３．０７ｓ（ＣＨ_２），９９．６５ｓ（Ｃ（ＣＨ_３）_２），１０５．２０ｓ（Ｃ_ａｒ），１０８．０９ｓ（Ｃ_ａｒ），１１２．３９ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２０．０８ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１２５．６５ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３０．１１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．０５ｓ（Ｃ），１４５．６１ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．２Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４５．９２ｓ（Ｃ），１４６．０８ｓ（Ｃ），１４６．２０ｓ（Ｃ），１４７．５４ｓ（Ｃ），１５３．７３ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２５１．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６７．０２ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７７．０７ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５５３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（５−ヒドロキシ−３，４−ビス（ヒドロキシメチル）−６−メチルピリジン−２−イル）メチル）ピペラジニル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・塩酸塩（Ｉ−１１）の調製
２０ｍｌの水中の０．９１ｇ（１．７ｍｍｏｌ）の化合物（Ｉ−１０）および１ｍｌの濃ＨＣｌを２５℃で２４時間撹拌する。次に、溶液を重炭酸ナトリウムでｐＨ＝６に中和する。沈殿物を濾別し、アセトン、クロロホルムおよび水で連続的に洗浄する。沈殿物を洗浄後、１７ｍｌの０．１ＨのＨＣｌ溶液を加え、真空中で溶媒を留去する。収量は０．６９ｇ（７６％）で、淡黄色結晶であり、融解温度は２１２〜２１５℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δｐｐｍ：１．１８ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３３ｂｒｓ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．４４ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），３．４４ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．６６ｂｒｓ（４Ｈ，ピペラジノ２ＣＨ_２），３．８４ｂｒｓ（１Ｈ，シクロプロピルＣＨ），４．４８ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），４．６２ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．８０ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．９０ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），７．６０ｂｒｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），７．９１ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１２．９Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６５ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），９．６９ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），１５．１０ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：７．６２ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１９．２６ｓ（ＣＨ_３），３５．９７ｓ（シクロプロピルＣＨ），４６．６０ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５１．１５ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５５．９２ｓ（ＣＨ_２），５６．０３ｓ（ＣＨ_２），５７．２７ｓ（ＣＨ_２），１０６．８０ｓ（Ｃ_ａｒ），１１１．１３ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．６Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．１８ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝７．７Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１３３．５０ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３４．００ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．０５ｓ（Ｃ），１４３．８５ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝１０．１Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｎ），１４５．６７ｓ（Ｃ），１４８．０８ｓ（Ｃ），１５０．０７ｓ（Ｃ），１５２．８１ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２４９．５Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６５．８１ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．３２ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋５１３．

１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・塩酸塩（Ｉ−１２）の調製

ステップ１．５−ヒドロキシメチル−８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン（１４）の調製
ディーンスタークノズルを備えた丸底フラスコ中で、２０．００ｇ（９７．０ｍｍｏｌ）のピリドキシン塩酸塩（５）、９２．５０ｇ（４８６．８ｍｏｌ）のｐ−トルエンスルホン酸一水和物および５．８４ｇ（１９４．６ｍｍｏｌ）のパラホルムの、１５０ｍｌのベンゼン中懸濁液を調製する。反応生成物を６時間煮沸後、溶媒を真空中で留去する。２４．５０ｇ（６１２．５ｍｍｏｌ）の水酸化ナトリウムの１５０ｍｌの水中の溶液を混合物に加え、希塩酸でｐＨ＝７に中和する。生成物を酢酸エチルで抽出し、これを次に留去して、乾燥残留物を最初に水で、その後ジエチルエーテルで洗浄する。収量は、１．１０ｇ（６％）で、灰色の結晶質物質である。融解温度は１１２〜１１３℃である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：２．３６ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．０９ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ），４．４９ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），４．９６ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．２６ｓ（２Ｈ，ＯＣＨ_２Ｏ），７．７７ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）δ，ｐｐｍ：１８．２１ｓ（ＣＨ_３），５９．９７ｓ（ＣＨ_２Ｏ），６４．０４ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９１．２０ｓ（ＯＣＨ_２Ｏ），１２８．１７ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３０．３１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３９．４３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．４３ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４７．５８ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ２．５−クロロメチル−８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン・塩酸塩（１５）の調製
２．５０ｍｌ（３４．４ｍｍｏｌ）の塩化チオニルを、１．００ｇ（５．５ｍｍｏｌ）の化合物（１４）の２０ｍｌのクロロホルム中溶液に加える。得られた反応混合物を２０℃で３時間攪拌する。真空中で溶媒を除去する。定量的収率の白色結晶質物質で、融解温度は１９０〜１９２℃（分解）である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：２．５４ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），４．８９ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．２１ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｏ），５．４９ｓ（２Ｈ，ＯＣＨ_２Ｏ），８．４３ｓ（１Ｈ，ＣＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：１４．７６ｓ（ＣＨ_３），３９．０３ｓ（ＣＨ_２Ｃｌ），６３．１１ｓ（ＣＨ_２Ｏ），９１．７２ｓ（ＯＣＨ_２Ｏ），１３０．４６ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３３．６４ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１３５．５２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４４．２１ｓ（Ｃ_ｐｙｒ），１４８．９２ｓ（Ｃ_ｐｙｒ）．

ステップ３．１−シクロプロピル−６−フルオロ−７−（４−（（８−メチル−４Ｈ−［１，３］ジオキシノ［４，５−ｃ］ピリジン−５−イル）メチル）ピペラジン−１−イル）−４−オキソ−１，４−ジヒドロキノリン−３−カルボン酸・塩酸塩（Ｉ−１２）の調製
０．６３ｇ（１．９ｍｍｏｌ）のシプロフロキサシン、０．３４ｇ（４．１ｍｍｏｌ）の重炭酸ナトリウムおよび０．１６ｇ（１．０ｍｍｏｌ）のヨウ化カリウムを、０．５０ｇ（２．１ｍｍｏｌ）の化合物（１５）の２０ｍｌの無水ＤＭＦＡ中の溶液に、２０℃で連続的に加える。反応混合物を８０℃で４時間攪拌する。真空中で溶媒を留去する。乾燥残留物を酢酸エチルで抽出し、不溶性の部分を濾別し、濾液を乾固し、アセトンで洗浄する。得られた残留物に、６．４ｍｌの０．１ＨのＨＣｌ溶液を加え、真空中で溶媒を留去する。収量は０．３４ｇ（３４％）で、淡褐色結晶質物質である。

ＮＭＲスペクトル ^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：１．１８−１．２２ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），１．３６−１．４１ｍ（２Ｈ，シクロプロピルＣＨ_２），２．４４ｓ（３Ｈ，ＣＨ_３），３．４５−３．８８ｍ（９Ｈ，ピペラジノ４ＣＨ_２＋シクロプロピルＣＨ），４．４１ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２Ｎ），５．４１ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），５．４５ｓ（２Ｈ，ＣＨ_２），７．６０ｄ（１Ｈ，^４Ｊ_Ｈ−Ｆ＝７．４Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），７．９６ｄ（１Ｈ，^３Ｊ_Ｈ−Ｆ＝１３．０Ｈｚ，ＣＨ_ａｒ），８．６６ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ａｒ），８．６８ｓ（１Ｈ，ＣＨ_ｐｙｒ），１２．０ｂｒｓ（１Ｈ，ＯＨ）．

ＮＭＲスペクトル ^１３Ｃ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ，ｐｐｍ：７．６１ｓ（シクロプロピル２ＣＨ_２），１５．５０ｓ（ＣＨ_３），３５．９７ｓ（シクロプロピルＣＨ），４６．１２ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５０．５３ｓ（ピペラジノ２ＣＨ_２），５１．５８ｓ（ＣＨ_２），６４．２８ｓ（ＣＨ_２），９１．３３ｓ（ＣＨ_２），１０６．８６ｓ（Ｃ_ａｒ），１０６．９１ｓ（Ｃ_ａｒ）１１１．２２ｄ（^２Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２３．０Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１１９．３５ｄ（^３Ｊ_Ｃ−Ｆ＝６．９Ｈｚ，Ｃ_ａｒ），１３９．０９ｓ（Ｃ），１４８．２５ｓ（Ｃ），１４８．５７ｓ（Ｃ），１５３．８３ｄ（^１Ｊ_Ｃ−Ｆ＝２４９．４Ｈｚ，Ｃ_ａｒ−Ｆ），１６５．８３ｓ（Ｃ（Ｏ）ＯＨ），１７６．３９ｓ（Ｃ＝Ｏ）．
ＭＡＬＤＩ−ＭＳ：［Ｍ＋Ｈ］^＋４９６．

請求されたシプロフロキサシン系誘導体の抗菌活性の調査

抗菌活性の測定は、黄色ブドウ球菌ＡＴＣＣ２９２１３（博物館株）、表皮ブドウ球菌（臨床分離株）、ルテウス菌（臨床分離株）、枯草菌１６８（博物館株）、大腸菌ＡＴＣＣ２５９２２（博物館株）、ネズミチフス菌ＴＡ１００（博物館株）、緑膿菌ＡＴＣＣ２７８５３（博物館株）の株に対し実施した。９６ウエル無菌プレートを用い、ミュラーヒントン培地中の系列希釈を使用して、最小阻止濃度（ＭＩＣ）を決定するための微量法により、グラム陽性微生物の参考株および臨床分離株に対する抗菌作用範囲の比較に基づく評価を実施した。

細菌増殖が目視で測定されない、最も低い濃度の抗生物質（一連の連続希釈由来）が最小阻止濃度（ＭＩＣ）であると見なされる。

抗菌活性の調査を目的とする接種材料（人為的混入に使用する感染性物質）の調製のために、高密度栄養培地（寒天ＬＢ培地）上で増殖させた細菌の純粋な日々の培養物を使用した。塩化ナトリウムの無菌等張性溶液中で、微生物の懸濁液を調製し、マックファーランド基準（１．５ｘ１０^８ＣＦＵ／ｍｌ）に従い、接種材料密度を０．５に調節した。その後、得られた接種材料をＬＢ培地で１０^７ＣＦＵ／ｍｌの濃度に希釈した。調製後、接種材料を１５分間用いた；各実験の前に、菌株の純度をモニターした。

１００μｌのミュラーヒントン培地を各プレートのウエルに加え、１００μｌの体積中の１２８μｇ／ｍｌの濃度で試験塩基を第１のウエルに導入し、連続２倍希釈によりその濃度を０．２５μｇ／ｍｌに調節した。その後、調製した接種材料を各ウエルに加え、それにより、調査化合物の濃度を半分に希釈した（６４．０μｇ／ｍｌまで希釈）。実験では、各調製物を３回滴定した。対照として、試験薬物を含まないウエルを含めた（培養物の増殖の対照）。さらに、栄養培地および溶媒の純度をモニターした。プレートを３６℃のサーモスタット中で２４時間インキュベーションした。

培養物の増殖を目視で評価し、試験化合物の存在下の微生物の増殖を、試験化合物のない場合の培養物の増殖と比較した。

請求された抗菌物質に対し、化学構造が最も近いのはシプロフロキサシンであり、これを、プロトタイプおよび比較薬物として選択した。また、対照薬として、出願者は、「抗生物質の最終兵器」バンコマイシンおよびフルオロキノロン系の最も効果的な薬物の１つであるモキシフロキサシンを使用した。

表１に示すデータからわかるように、ほとんど全ての請求された化合物が調査している微生物株に対し、顕著な抗菌活性を有する。同時に、化合物Ｉ−２、Ｉ−３、Ｉ−９およびＩ−１２は、最も活性であることが証明された；グラム陽性微生物に対するそれらの抗菌作用は、比較薬物と同等であることがわかった。

最も活性な化合物の１つのＩ−２について、表２に示す微生物の臨床株（黄色ブドウ球菌ＭＲＳＡ）に対して、抗菌活性の徹底的な調査を実施した。バンコマイシン、シプロフロキサシンおよびセフトリアキソンを対照薬として使用した。

表１および２に示されたデータからわかるように、化合物は、グラム陽性細菌に対して、ＭＩＣ値の観点でシプロフロキサシンと同等の、およびいくつかの株の場合には、それより優れた結果を示した。黄色ブドウ球菌ＭＲＳＡの新鮮な臨床単離株の場合には、Ｉ−２は、ほとんど全ての場合で、ＭＩＣの観点から、セフトリアキソンより優れている。グラム陰性菌株との関連では、化合物Ｉ−２は、低抗菌活性を示す。

化合物Ｉ−２の胃内投与後のマウスでの一般急性毒性調査

両方の性のＩＣＲマウス（ＣＤ−１）（６〜８週齡、２０〜２５ｇ）群あたり６匹の動物に対し、固定用量法を用いて、化合物Ｉ−２の急性毒性を調査した。試験化合物Ｉ−２の出発用量は、５０００ｍｇ／ｋｇであった。胃プローブを用いて、動物への化合物Ｉ−２の胃内（経口）投与（＜２．５ｍｌ／１００ｇ）を行った。

化合物Ｉ−２の５０００ｍｇ／ｋｇの投与量時に、両方の性のマウスは、動物に対する機械的な影響により生じた活動のわずかな抑制を示した。２０〜３０分後、動物の行動は正常に戻った。１．５〜２時間後、動物は食物と水の摂取を始めた。全実験の間、動物の死亡は観察されなかった。

実験全体を通して、実験動物の生命活動の全ての主要な指標は、標準活動に相当し、対照の活動とは異ならなかった。マウスは、良好な食欲、光沢のある外被を有し、可視粘膜は淡いピンク色であり、行動は、この種の動物に相当し、観察期間中に異常性は観察されなかった。

実験の終わりに、対照および実験動物の安楽死および病理形態学的切開を実施した。マウスの剖検中、変化は観察されなかった。対照および実験動物は、相互で違いはなかった。化合物Ｉ−２で胃内の処理をした死亡マウスの剖検では、次の像が観察された。動物の死体は、適切な構造で、平均的肥満度である。自然開口部：口は閉じられ、舌は口中にあり、唇および歯茎の粘膜は、淡いピンク色で、なめらかで、光沢がある。鼻開口部−粘膜は淡いピンク色で、乾燥し、流出物は無く、透過性は良好である。耳介は変化がなく、外耳道はきれいである。肛門は閉じ、粘膜は淡いピンク色である。毛髪はうまく保持され、毛被は光沢がある。皮膚は弾性があり、皮下線維は良好に発現し、黄色がかった色で弾性がある。筋肉は赤みがかっており、よく発達し、腱および靱帯は白色で弾性および耐久性がある。骨および関節の配置は、破壊されていない。胸部および腹部空洞の器官の位置：解剖学的に正しい。胸部および腹部空洞に体液はない。咽頭および食道の開通性は、破壊されていない。心臓の体積は変化していない。心臓の空洞は、少量の非凝集血を含み、心内膜はなめらかで光沢がある。肺は、淡いピンク色から赤色で、不均一な色で、分葉はよく発現している。脾臓は拡大しておらず、シャープエッジを有し、楕円形状であり、弾性的堅さがあり、赤褐色である。肝臓は拡大しておらず、シャープエッジを有し、形状は変化しておらず、密度が高く、サクランボ色である。胃は、均一な堅さの灰色のフィード塊を含む。胃の粘膜は淡い灰色である。腸の薄いまたは厚い部分の腸粘膜は、淡いピンク色または淡い灰色である。腎臓は、豆形状で、暗褐色であり、腎傍体では、わずかな量の脂肪があり、嚢は容易に分離し、皮質と脳ゾーンとの間の境界は発現している。膀胱は、空であるか、または淡黄色の尿で満たされ、粘膜は淡いピンク色である。生殖器は異常が無い。雄の精巣は、弾性的堅さがあって、陰嚢の空洞中にあり、楕円形状をしている。雌は、正常な卵巣および子宮を有する。脳は水腫性ではなく、脳の白質は弾性があり、出血はない。

５０００ｍｇ／ｋｇの用量の化合物Ｉ−２の投与では、死亡率は観察されなかったので、化合物Ｉ−２の平均致死用量は、マウスでは検出されなかった。したがって、調査により、化合物Ｉ−２は、危険物クラス４の、低危険性物質に属する。

したがって、高い抗菌活性を有し、低毒性のシプロフロキサシン系の新規フルオロキノロン系が得られた。

調査したレベルの技術では、示した結果を確実に達成する一連の定められた明確な特徴を有する技術的解決策を見つけられなかったので、請求された技術的解決策は、本発明に該当する「新規性」の基準に適合する。

請求された技術的解決策は、この科学および技術の分野の当業者には明らかではないので、本発明に該当する「進歩性」の基準に適合する。

請求された技術的解決策は、標準的な装置、よく知られた国内の材料および技術を用いて任意の特殊化された事業で実施することができるので、「産業上の利用可能性」の基準に適合する。

Claims

一般式（Ｉ）である、シプロフロキサシンの誘導体。
抗菌活性を有する、請求項１に記載のシプロフロキサシンの誘導体。