JP6635720B2 - 血液分析装置及び血液分析方法 - Google Patents

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Description

本発明は、血液から調製された測定試料を用いて、マラリア原虫に感染した血液試料を分析するための血液分析装置及び血液分析方法に関する。
特許文献１には、マラリア原虫に感染した赤血球（以下、「マラリア感染赤血球」という）の検出方法が開示されている。この検出方法では、ＲＮＡよりＤＮＡを強く染色する染色色素を含み且つマラリア原虫を内部に保持した状態で染色色素が透過できるように赤血球の細胞膜を部分的に溶解することができる試薬と、血液試料とを混合して測定試料を調製し、測定試料をフローサイトメータのフローセルに導入し、フローセルを流れる測定試料に光を照射して、測定試料から発せられる散乱光と蛍光とを検出し、散乱光強度と蛍光強度とを２軸としてスキャッタグラムを作成する。
マラリア原虫の形態の１つであるリングフォームに感染した赤血球には、１つのマラリア原虫が入っている赤血球（以下、「シングルリングフォーム」という）と、２つ以上のマラリア原虫が入っている赤血球（以下、「マルチリングフォーム」という）とがあり、シングルリングフォームとマルチリングフォームとでは含まれるＤＮＡ量が異なる。また、熱帯熱マラリアでは、マルチリングフォームの割合が多い傾向にある。このことに着目し、特許文献１に記載された検出方法では、スキャッタグラムにおいて、蛍光強度が異なる領域に出現するシングルリングフォームとマルチリングフォームとを別々に検出し、マルチリングフォームの領域に存在するドット数（細胞数）に基づいて、熱帯熱マラリアか否かを判定する。
特開２００６−３０４７７４号公報
熱帯熱マラリアでもマルチリングフォームが出現しない場合がある。特許文献１に開示された検出方法では、マルチリングフォームの数を用いることから、このような血液試料に対しては正しく判定できない可能性がある。そこで、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染しているか否かの判定精度を向上させることが望まれている。
本発明の第１の態様による血液分析装置は、試料調製部と、検出部と、出力部と、解析部とを備える。試料調製部は、赤血球を収縮させる希釈液、核酸を染色する染色色素及び血液試料から測定試料を調製する。検出部は、試料調製部によって調製された測定試料に対して光を照射して得られる蛍光強度及び散乱光強度を検出する。解析部は、検出部によって検出された蛍光強度及び散乱光強度に基づいて、白血球を含む集団である第１粒子群と、マラリア原虫に感染していない赤血球を含む集団である第２粒子群と、前記散乱光強度が前記第１粒子群より小さく、前記蛍光強度が前記第１粒子群より小さく且つ前記第２粒子群より大きい、リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である第３粒子群と、を特定し、特定されたリングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である前記第３粒子群に属する粒子の散乱光強度の代表値が所定値未満の場合に、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報を出力部に出力させる。前記散乱光強度の代表値は、前記散乱光強度の最頻値、平均値、中央値または重心値である。
本発明の第２の態様による血液分析方法は、赤血球を収縮させる希釈液、核酸を染色する染色色素及び血液試料から調製された測定試料に対して光を照射し、測定試料に対して光を照射することによって得られる蛍光強度及び散乱光強度を検出する。この血液分析方法は、検出された蛍光強度及び散乱光強度に基づいて、白血球を含む集団である第１粒子群と、マラリア原虫に感染していない赤血球を含む集団である第２粒子群と、前記散乱光強度が前記第１粒子群より小さく、前記蛍光強度が前記第１粒子群より小さく且つ前記第２粒子群より大きい、リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である第３粒子群と、を特定する。また、この血液分析方法は、リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である前記第３粒子群に属する粒子の散乱光強度の代表値が所定値未満の場合に、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があると判定する。前記散乱光強度の代表値は、前記散乱光強度の最頻値、平均値、中央値または重心値である。
本発明によれば、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染しているか否かを精度よく判定することができる。
実施の形態に係る血液分析装置の構成を示す模式図。 解析部の構成を示すブロック図。 実施の形態に係る血液分析装置の動作の流れを示すフローチャート。 測定試料調製処理の手順を示すフローチャート。 測定データ解析処理の手順を示すフローチャート。 縦軸を前方散乱光強度、横軸を蛍光強度としたスキャッタグラムにおける白血球、血小板凝集、正常赤血球、及びマラリア感染赤血球の各粒子群の出現領域を説明するための図。 マラリア種判定処理の手順を示すフローチャート。 熱帯熱マラリア原虫に感染した血液試料のスキャッタグラムの一例を示す図。 縦軸を前方散乱光強度、横軸を蛍光強度としたスキャッタグラムにおける白血球、血小板凝集、正常赤血球、シングルリングフォーム、マルチリングフォーム、トロフォゾイト・シゾント、及びガメトサイトの各粒子群の出現領域を説明するための図。 三日熱マラリア原虫に感染した血液試料のスキャッタグラムの一例を示す図。 熱帯熱マラリア原虫のシングルリングフォームの前方散乱光強度と、三日熱マラリア原虫のシングルリングフォームの前方散乱光強度とを比較した図。 熱帯熱マラリア原虫に感染した血液試料のスキャッタグラムの他の例を示す図。 三日熱マラリア原虫に感染した血液試料のスキャッタグラムの他の例を示す図。 熱帯熱マラリア原虫に感染した血液試料のスキャッタグラムのさらに他の例を示す図。 分析結果の出力例を示す図。
本実施の形態では、血液試料及び試薬から調整された測定試料に光を照射したときに発生する蛍光強度と前方散乱光強度に基づいて、マラリア感染赤血球を含む集団を特定し、赤血球に感染したマラリア原虫が熱帯熱マラリア原虫か否かを判定する血液分析装置について説明する。
＜血液分析装置の構成＞
図１を参照し、血液分析装置の構成について説明する。血液分析装置１は、測定部２と、解析部３とを備える。測定部２は、血液試料を取り込み、血液試料から測定試料を調製し、測定試料を光学測定する。解析部３は、測定部２の測定により得られた測定データを処理し、血液試料の分析結果を出力する。
測定部２は、吸引部４と、試料調製部５と、光学検出部６と、第２検出部７と、信号処理回路８１と、マイクロコンピュータ８２と、通信インターフェース８３とを備える。
吸引部４は、図示しない吸引管を有し、試験管に収容された血液試料を吸引管によって吸引する。
試料調製部５は、反応槽５４を有し、試薬容器５１，５２，５３に接続されている。試薬容器５２は、赤血球を収縮させる第１希釈液を収容する。試薬容器５３は、核酸を染色する染色色素を含有する染色用試薬を収容する。試薬容器５１は、第２希釈液を収容する。吸引部４は、吸引管を反応槽５４の上方へ移動させ、吸引された血液試料を反応槽５４に吐出する。血液試料と、第１希釈液と、染色用試薬とが反応槽５４で混合され、測定試料が調製される。測定試料は、白血球及びマラリア感染赤血球の測定に用いられる。吸引部４によって吸引された血液試料と、第２希釈液とが反応槽５４で混合され、第２測定試料が調製される。第２測定試料は、赤血球の測定に用いられる。
試薬容器５２に収容される第１希釈液について説明する。第１希釈液は、溶血力が異なる２種類の界面活性剤を含んでいる。具体的には、第１希釈液は、カチオン系界面活性剤である２．９５ｍＭのラウリルトリメチルアンモニウムクロライドと、カチオン系界面活性剤である１．１１ｍＭのステアリルトリメチルアンモニウムクロライドとを含む。ステアリルトリメチルアンモニウムクロライドの方がラウリルトリメチルアンモニウムクロライドよりも溶血力が強い。溶血力が異なる２種類の界面活性剤であれば、上記の組み合わせに限られない。また、第１希釈液は、ノニオン系界面活性剤である２．９０ｍＭのＰＢＣ−４４と、２０ｍＭのＡＤＡと、適量のＮａＣｌと、１Ｌの精製水とをさらに含んでいる。ＡＤＡのｐＨは６．１である。また、第１希釈液のｐＨは５．０以上７．０以下である。血球を収縮させるために、第１希釈液の浸透圧が２００ｍＯｓｍ／ｋｇ・Ｈ２Ｏ以上であることが好ましい。具体的には、第１希釈液の浸透圧は２００ｍＯｓｍ／ｋｇ・Ｈ２Ｏ以上、３００ｍＯｓｍ／ｋｇ・Ｈ２Ｏ以下である。
第２希釈液は、赤血球を収縮させるための第１希釈液とは異なり、シースフローＤＣ検出法による赤血球の測定用の希釈液である。また、第２希釈液は、フローサイトメトリー方式による血球の測定においてシース液としても利用される。第１希釈液は、シース液として利用されない。
試薬容器５３に収容される染色用試薬について説明する。染色用試薬は、染色色素（ヘキスト３４５８０）を含む。染色用試薬における染色色素の濃度は０．３μＭ以上０．６μＭ以下であることが好ましく、具体的には、０．４５μＭである。また、測定試料における染色色素の濃度が０．１５μＭ以上１．０μＭ以下であることが好ましい。ヘキスト３４５８０の化学式を以下に示す。
Figure 0006635720
なお、第１希釈液と染色用試薬とを分けずに、赤血球を収縮させる第１希釈液と染色色素とを含有する１つの試薬を、血液試料と混合して測定試料を調製してもよい。
光学検出部６は、フローサイトメトリー法による白血球及びマラリア感染赤血球の測定に用いられる。光学検出部６は、フローセル６１と、光源部６２と、検出部６３及び６４とを備える。フローセル６１は、試薬容器５１に収容された第２希釈液及び試料調製部５により調製された測定試料が供給される。フローセル６１は、測定試料を第２希釈液であるシース液で包んだ流れを形成する。
光源部６２は、半導体レーザ光源であり、波長４０５ｎｍの青紫色レーザ光をフローセル６１へ照射する。
検出部６３及び６４は、フローセル６１中の測定試料の流れに光が照射されたときに、測定試料から発せられる光を検出する。検出部６３及び６４には、アバランシェフォトダイオードを採用できる。以下の説明では、光源部６２とフローセル６１とを結ぶ方向を「Ｘ方向」といい、Ｘ方向に対して直交する方向をＹ方向という。検出部６３は、フローセル６１からＹ方向側に配置されたミラーを介して、測定試料から発せられる蛍光を検出できる。また、検出部６４は、フローセル６１からＸ方向側に配置される。さらに具体的には、検出部６４は、フローセル６１を挟んで光源部６２の反対側に配置される。検出部６３は、検出部６４は、測定試料から発せられる前方散乱光を検出できる。
なお、前方散乱光に代えて、側方散乱光、後方散乱光など、他の散乱光を検出するようにしてもよい。
検出部６３及び６４のそれぞれは、受光強度を示すアナログ信号を出力する。以下、検出部６３から出力されるアナログ信号を「蛍光信号」といい、検出部６４から出力されるアナログ信号を「前方散乱光信号」という。
第２検出部７は、シースフローＤＣ検出法による赤血球の測定に用いられる。第２検出部７には、試料調製部５から第２測定試料が供給される。第２検出部７は、図示しないシースフローセルを備え、シースフローセルを流れる第２測定試料に電圧を印加する。血球がシースフローセルを通過すると、血球の電気抵抗によって電圧が変化する。第２検出部７は、電圧の変化を捉えて電気抵抗を検出し、これによって血球を検出する。第２検出部７は、電圧を示すアナログ信号を出力する。
信号処理回路８１は、検出部６３及び６４、並びに第２検出部７が出力するアナログ信号に対して信号処理を行う。信号処理回路８１は、蛍光信号及び前方散乱光信号に含まれるパルスのピーク値を特徴パラメータとして抽出する。以下、蛍光信号のピーク値を「蛍光強度」といい、前方散乱光信号のピーク値を「前方散乱光強度」という。信号処理回路８１は、第２検出部７の出力信号のピーク値を、赤血球の検出データとして抽出する。
マイクロコンピュータ８２は、吸引部４、試料調製部５、光学検出部６、第２検出部７、信号処理回路８１、および通信インターフェース８３を制御する。
通信インターフェース８３は、通信ケーブルによって解析部３に接続される。測定部２は、通信インターフェース８３によって、解析部３とデータ通信を行う。通信インターフェース８３は、血液試料の測定が行われると、各特徴パラメータを含む測定データを解析部３へ送信する。
図２を参照し、解析部３の構成について説明する。解析部３は、本体３００と、入力部３０９と、出力部３１０とを備えている。本体３００は、ＣＰＵ（Central Processing Unit）３０１と、ＲＯＭ（Read Only Memory）３０２と、ＲＡＭ（Random Access Memory）３０３と、ハードディスク３０４と、読出装置３０５と、入出力インターフェース３０６と、画像出力インターフェース３０７と、通信インターフェース３０８とを有する。本実施の形態においては、出力部３１０として画像を表示するディスプレイを用いている。しかしながら、出力部３１０としては、印刷により紙等に出力するプリンタを用いてもよい。
ＣＰＵ３０１は、ＲＯＭ３０２に記憶されているコンピュータプログラムおよびＲＡＭ３０３にロードされたコンピュータプログラムを実行する。ＲＡＭ３０３は、ＲＯＭ３０２およびハードディスク３０４に記録されているコンピュータプログラムの読み出しに用いられる。ＲＡＭ３０３は、コンピュータプログラムを実行するときに、ＣＰＵ３０１の作業領域としても利用される。
ハードディスク３０４には、測定部２から与えられた測定データを解析し、分析結果を出力するためのコンピュータプログラム３２０がインストールされている。
読出装置３０５は、フレキシブルディスクドライブ、ＣＤ−ＲＯＭドライブ、またはＤＶＤ−ＲＯＭドライブ等であり、可搬型記録媒体３２１に記録されたコンピュータプログラムまたはデータを読み出すことができる。また、可搬型記録媒体３２１には、コンピュータを解析部３として機能させるためのコンピュータプログラム３２０が格納されている。可搬型記録媒体３２１から読み出されたコンピュータプログラム３２０は、ハードディスク３０４にインストールされる。
入力部３０９は、入出力インターフェース３０６に接続される。出力部３１０は、画像出力インターフェース３０７に接続される。通信インターフェース３０８は、測定部２の通信インターフェース８３に接続される。
＜血液分析装置の動作＞
図３を参照し、血液分析装置１の動作について説明する。
まず、解析部３のＣＰＵ３０１が、ユーザからの測定実行の指示を、入力部３０９を介して受け付ける（ステップＳ１０１）。測定実行の指示を受け付けると、ＣＰＵ３０１は、測定部２に測定開始を指示する指示データを送信し（ステップＳ１０２）、測定部２が指示データを受信する（ステップＳ１０３）。マイクロコンピュータ８２は、測定試料調製処理を実行し（ステップＳ１０４）、第１測定処理を実行し（ステップＳ１０５）、第２測定処理を実行する（ステップＳ１０６）。
図４を参照して、測定試料調製処理について説明する。マイクロコンピュータ８２が吸引部４を制御して、反応槽５４に所定量、例えば１７μＬの血液試料を供給する（ステップＳ２０１）。次に、マイクロコンピュータ８２が試料調製部５を制御して、試薬容器５２から反応槽５４に所定量、例えば１ｍＬの第１希釈液を供給し、試薬容器５３から反応槽５４に所定量、例えば２０μＬの染色用試薬を供給する（ステップＳ２０２）。
反応槽５４は、ヒータによって所定温度になるように加温されている。加温された状態で、反応槽５４内の混合物の撹拌が行われる（ステップＳ２０３）。ステップＳ２０１〜Ｓ２０３の動作により、反応槽５４において測定試料が調製される。マイクロコンピュータ８２が試料調製部５を制御して、測定試料を反応槽５４から光学検出部６へ導出する（ステップＳ２０４）。
マイクロコンピュータ８２が吸引部４を制御して、試験管から血液試料を所定量吸引させ、反応槽５４に所定量、例えば４μＬの血液試料を供給する（ステップＳ２０５）。次に、マイクロコンピュータ８２が試料調製部５を制御して、試薬容器５１から反応槽５４に所定量、例えば２０００μＬの第２希釈液を供給する（ステップＳ２０６）。
次に、試料調製部５が反応槽５４内の混合物を撹拌する（ステップＳ２０７）。ステップＳ２０５〜Ｓ２０７の動作により、反応槽５４において第２測定試料が調製される。マイクロコンピュータ８２が試料調製部５を制御して、第２測定試料を反応槽５４から第２検出部７へ導出する（ステップＳ２０８）。
ステップＳ２０８の処理が終了すると、マイクロコンピュータ８２は、メインルーチンへ処理をリターンする。
再び図３を参照する。第１測定処理では、光学検出部６による測定試料の測定が行われる。試料調製部５がシース液と共に測定試料をフローセル６１に供給する。光源部６２がフローセル６１中の測定試料の流れに光を照射する。
測定試料がフローセル６１を流れると、白血球、血小板凝集、及び赤血球がフローセル６１を順次通過する。ここで、「血小板凝集」とは、２つ以上の血小板が凝集したものである。赤血球にマラリア感染赤血球が含まれている場合、マラリア感染赤血球の内部には、マラリア原虫が入っている。第１希釈液の作用により、測定試料中の赤血球は縮小している。マラリア感染赤血球は、内部にマラリア原虫を保持したまま、第１希釈液によって縮小される。また、マラリア原虫には核が存在するため、染色用試薬によって染色される。白血球も核を有するため、染色試薬によって染色される。マラリア原虫に感染していない赤血球（以下、「正常赤血球」という）及び血小板凝集には核が存在しないため、染色用試薬によってはほとんど染色されない。
血球に光が照射される都度、血球（白血球、血小板凝集、赤血球）からは蛍光及び前方散乱光が発せられる。血球から発せられた蛍光は検出部６３によって検出される。血球から発せられた前方散乱光は検出部６４によって検出される。
検出部６３及び６４のそれぞれは、受光レベルに応じた電気信号を、蛍光信号及び前方散乱光信号として出力する。信号処理回路８１は、蛍光信号から蛍光強度を抽出し、前方散乱光信号から前方散乱光強度を抽出する。
第２測定処理では、第２検出部７による第２測定試料の測定が行われる。第２検出部７は、シースフローセルを流れる第２測定試料に電圧を印加し、電圧を示すアナログ信号を信号処理回路８１へ出力する。赤血球がシースフローセルを通過する都度、その電気抵抗に応じて電圧が変化する。信号処理回路８１は、信号処理により電気抵抗の変化を捉え、赤血球を検出する。これにより、信号処理回路８１は、第２検出部７の出力信号を赤血球の検出データに変換する。
第２測定処理の後、マイクロコンピュータ８２は、各特徴パラメータを含む測定データを解析部３へ送信し（ステップＳ１０７）、処理を終了する。
解析部３は、測定データを受信する（ステップＳ１０８）。その後、ＣＰＵ３０１は、測定データ解析処理を実行し、血液試料の分析結果を生成して、分析結果をハードディスク３０４に格納する（ステップＳ１０９）。
図５を参照し、測定データ解析処理について説明する。測定データ解析処理を開始すると、まずＣＰＵ３０１は、測定データに含まれる赤血球の検出データを用いて、赤血球を計数する（ステップＳ３０１）。
シースフローＤＣ検出法に代えて、測定データに含まれる前方散乱光強度を用いて赤血球を計数することもできる。赤血球は、第１希釈液によって縮小される。前方散乱光強度は、血球の大きさを反映した特徴パラメータであり、縮小された赤血球の前方散乱光強度は特定の範囲の値を取る。したがって、赤血球が出現する特定範囲内の前方散乱光強度を有する粒子を赤血球とし、赤血球を計数してもよい。前方散乱光強度に代えて、前方散乱光のパルス幅、パルス面積を用いて、赤血球を検出することもできる。前方散乱光に代えて、側方散乱光を検出し、側方散乱光のパルスのピーク値、パルス幅、またはパルス面積を用いて、赤血球を検出することもできる。
次に、ＣＰＵ３０１は、測定データに含まれる蛍光強度及び前方散乱光強度に基づいて、白血球、血小板凝集、正常赤血球、及びマラリア感染赤血球を分類し、それぞれを計数する（ステップＳ３０２）。なお、この処理では、解析対象の粒子から正常赤血球を除外するため、蛍光強度が所定の閾値以下の粒子を除外している。正常赤血球の多くは染色色素によって十分に染色されず、蛍光を発しないか、微弱な蛍光を発する。したがって、蛍光強度が所定の閾値以下の粒子を解析対象から除外することで、ほとんどの正常赤血球を除外することができる。ただし、網状赤血球などの若干の蛍光を発する正常赤血球は除外されない。ステップＳ３０２では、このように除外されなかった正常赤血球が、他の血球と区別して検出される。
図６を参照して、白血球、血小板凝集、正常赤血球、及びマラリア感染赤血球の分類について説明する。図６のスキャッタグラムにおいて、縦軸は前方散乱光強度を示し、横軸は蛍光強度を示す。
白血球を含む集団は、前方散乱光強度及び蛍光強度が大きい領域４０１に概ね出現する。血小板凝集を含む集団は、前方散乱光強度が白血球を含む集団の領域４０１と同程度であり、且つ、蛍光強度が領域４０１よりも小さい領域４０２に概ね出現する。正常赤血球は第１希釈液によって強く縮小される。また、上述したように、蛍光強度が所定の閾値以下の正常赤血球は解析対象から除外されているが、除外されなかった正常赤血球も染色用試薬によって十分に染色されておらず、弱い蛍光しか発しない。このため、第１希釈液によって縮小された正常赤血球を含む集団は、前方散乱光強度が白血球を含む集団の領域４０１よりも小さく、且つ、蛍光強度が領域４０１よりも小さい領域４０３に正常赤血球として概ね出現する。
マラリア感染赤血球は第１希釈液によって強く縮小され、また、核を有するマラリア原虫を内部に保持しているため染色用試薬によって染色される。このため、マラリア感染赤血球を含む集団は、前方散乱光強度が白血球を含む集団の領域４０１より小さく、且つ、蛍光強度が正常赤血球を含む集団の領域４０３より大きい領域４０４に概ね出現する。
ステップＳ３０２の処理において、ＣＰＵ３０１は、測定データにおける前方散乱光強度の粒度分布と、蛍光強度の粒度分布とを組み合わせて、白血球を含む集団、血小板凝集を含む集団、正常赤血球を含む集団、及びマラリア感染赤血球を含む集団を特定する。より具体的には、ＣＰＵ３０１は、前方散乱光強度が白血球を含む集団である第１粒子群より小さく、蛍光強度が正常赤血球を含む集団である第２粒子群より大きい第７粒子群を特定する。この第７粒子群はマラリア感染赤血球を含む集団である。なお、ここで前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群より小さい粒子群とは、前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群より少なくとも一部において少ない粒子群をいう。また、前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群より大きい粒子群とは、前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群より少なくとも一部において大きい粒子群をいう。また、前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群と同程度の粒子群とは、前方散乱光強度又は蛍光強度が特定の粒子群と少なくとも一部において同程度の粒子群をいう。
再び図５を参照する。ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定処理を実行する（ステップＳ３０３）。
図７を参照し、マラリア種判定処理について説明する。マラリア種判定処理は、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあるか、熱帯熱マラリア以外の種（以下、「その他の種」という）のマラリア原虫に感染している疑いがあるかを判定するための処理である。
ＣＰＵ３０１は、マラリア感染赤血球の数が所定値であるＴ１以上であるか否かを判定する（ステップＳ４０１）。ここでＴ１は、マラリア感染赤血球の数がＴ１未満であればノイズを考慮してマラリア感染赤血球が出現していないと判断できる数値である。マラリア感染赤血球の数がＴ１未満の場合（ステップＳ４０１においてＮＯ）、血液試料がマラリア原虫に感染していないと判断できる。この場合、ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定処理を終了し、測定データ解析処理に戻す。
マラリア感染赤血球の数がＴ１以上の場合（ステップＳ４０１においてＹＥＳ）、血液試料がマラリア原虫に感染している可能性があると判断できる。この場合、ＣＰＵ３０１は、ステップＳ４０２に処理を移す。
マラリア原虫の形態の１つであるメロゾイトが赤血球に侵入することで、マラリア原虫の赤内型の生活環が始まる。赤内型の生活環では、マラリア原虫の形態がリングフォーム、トロフォゾイト、シゾントに順に変化する。シゾントは複数のメロゾイトに***し、その際に赤血球を破壊する。これにより、多数のメロゾイトが血中に放出される。メロゾイトは次の赤血球に侵入し、再び赤内型の生活環が始まる。このようなサイクルを繰り返し、マラリア原虫は増殖する。
血中に放出されたメロゾイトの一部は、雌雄異体のガメトサイトに分化する。感染者が蚊に吸血されると、ガメトサイトが蚊の体内に侵入し、蚊がマラリア原虫を保有することになる。
ステップＳ４０２において、ＣＰＵ３０１は、血液試料に感染している可能性があるマラリア原虫の種に関するマラリア種判定フラグ、血液試料に感染している可能性があるマラリア原虫のステージに関するステージフラグのそれぞれに初期値の０をセットする。マラリア種判定フラグ、及びステージフラグは、ＲＡＭ３０３の特定の領域に設けられている。
マラリア種判定フラグに０がセットされている場合には、血液試料がマラリア原虫に感染している可能性が低いことを示す。マラリア種判定フラグに１がセットされている場合には、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあることを示す。マラリア種フラグに２がセットされている場合には、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す。なお、熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあるとは、熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性はあるが、高いとまではいえないことをいう。
マラリア種判定フラグに３がセットされている場合には、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している疑いがあることを示す。マラリア種判定フラグに４がセットされている場合には、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す。
ステージフラグに０がセットされている場合には、トロフォゾイト及びシゾント、並びにガメトサイトが出現している可能性が低いことを示す。ステージフラグに１がセットされている場合には、血液試料にトロフォゾイト又はシゾントが出現している可能性が高いことを示す。 ステージフラグに２がセットされている場合には、ガメトサイトが出現している可能性が高いことを示す。
次に、ＣＰＵ３０１は、シングルリングフォームを含む集団である第３粒子群、マルチリングフォームを含む集団である第４粒子群、トロフォゾイト又はシゾントを内部に含む赤血球（以下、「トロフォゾイト・シゾント」という）を含む集団である第５粒子群、ガメトサイトを含む集団である第６粒子群を特定し、各粒子群に属する粒子を計数する（ステップＳ４０３）。
ステップＳ４０３の処理を具体的に説明する。図８に、シングルリングフォームを含む集団とマルチリングフォームを含む集団とが出現したスキャッタグラムの例を示す。図８に示すように、シングルリングフォームを含む集団は、前方散乱光強度が白血球を含む集団より小さく、蛍光強度が白血球を含む集団より小さい。また、シングルリングフォームを含む集団は、蛍光強度が正常赤血球を含む集団より大きい。つまり、シングルリングフォームを含む集団は、図９における領域４１１に概ね出現する。ＣＰＵ３０１は、このようなシングルリングフォームを含む集団を、第３粒子群として特定する。
図８では、正常赤血球を含む集団が、シングルリングフォームを含む集団及びマルチリングフォームを含む集団の前方散乱光強度よりも大きい領域に出現している。これは、蛍光強度が所定の閾値以下の粒子を解析対象から除外したためである。蛍光強度が所定の閾値以下の粒子を解析対象から除外しない場合には、蛍光強度及び前方散乱光強度が低い領域にこれらの粒子（正常赤血球）が出現する。つまり、シングルリングフォームを含む集団及びマルチリングフォームを含む集団と前方散乱光強度が同程度であり、シングルリングフォームを含む集団よりも蛍光強度が小さい領域に正常赤血球が出現する。
また、図８に示すように、マルチリングフォームを含む集団は、前方散乱光強度がシングルリングフォームを含む集団と同程度であり、且つ、蛍光強度がシングルリングフォームを含む集団より大きい。つまり、マルチリングフォームを含む集団は、図９における領域４１２に概ね出現する。ＣＰＵ３０１は、このような粒子群を検出した場合、これを第４粒子群として特定する。
図８に示すスキャッタグラムでは、トロフォゾイト・シゾントが出現していない。トロフォゾイト・シゾントが出現する場合、図中において破線で示す領域に出現する。つまり、トロフォゾイト・シゾントを含む集団は、前方散乱光強度がシングルリングフォームを含む集団より大きく、且つ、蛍光強度がシングルリングフォームを含む集団より大きい。つまり、トロフォゾイト・シゾントを含む集団は、図９における領域４１３に概ね出現する。ＣＰＵ３０１は、このような粒子群を検出した場合、これを第５粒子群として特定する。
図１０に、ガメトサイトを含む集団が出現したスキャッタグラムの例を示す。図１０に示すように、ガメトサイトを含む集団は、前方散乱光強度がシングルリングフォームを含む集団より大きく、且つ、蛍光強度がシングルリングフォームを含む集団と同程度である。つまり、ガメトサイトを含む集団は、図９における領域４１４に概ね出現する。ＣＰＵ３０１は、このような粒子群を検出した場合、これを第６粒子群として特定する。
再び図７を参照する。ＣＰＵ３０１は、第６粒子群に属する粒子数、つまりガメトサイトの数が所定値であるＴ２以上であるか否かを判定する（ステップＳ４０４）。ここでＴ２は、第６粒子群に属する粒子数がＴ２未満であればノイズを考慮してガメトサイトが出現していないと判断できる数値である。第６粒子群に属する粒子数がＴ２以上である場合（ステップＳ４０４においてＹＥＳ）、ガメトサイトが血液試料中に出現したと判断できる。この場合、ＣＰＵ３０１は、ステージフラグに２をセットし（ステップＳ４０５）、ステップＳ４０６へ処理を移す。
第６粒子群に属する粒子数がＴ２未満である場合（ステップＳ４０４においてＮＯ）、ガメトサイトが血液試料中に出現していないと判断できる。この場合、ＣＰＵ３０１は、ステップＳ４０６へ処理を移す。
なお、ステップＳ４０４のガメトサイトの出現の判定処理を省略してもよい。
ＣＰＵ３０１は、第３粒子群に属する粒子数、つまりシングルリングフォームの数が所定値であるＴ３以上であるか否かを判定する（ステップＳ４０６）。ここでＴ３は、第３粒子群に属する粒子数がＴ３未満であればノイズを考慮してシングルリングフォームが出現していないと判断できる数値である。第３粒子群に属する粒子数がＴ３未満である場合（ステップＳ４０６においてＮＯ）、ＣＰＵ３０１はステップＳ４１１に処理を移す。
第３粒子群に属する粒子数がＴ３以上である場合（ステップＳ４０６においてＹＥＳ）、ＣＰＵ３０１は、第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値が、所定値であるＴ４以上であるか否かを判定する（ステップＳ４０７）。
なお、ステップＳ４０６のシングルリングフォームの出現の判定処理を行わず、ステップＳ４０７を実行してもよい。
熱帯熱マラリア原虫のシングルリングフォームの大きさは、その他の種のマラリア原虫のシングルリングフォームの大きさと比べて小さい。また、前方散乱光強度は細胞の大きさを反映している。したがって、図１１に示すように、熱帯熱マラリア原虫のシングルリングフォームを含む集団は、その他の種のマラリア原虫のシングルリングフォームを含む集団よりも前方散乱光強度が全体的に小さい。また、代表値はデータ群の特徴を表す。このため、熱帯熱マラリア原虫のシングルリングフォームを含む集団の前方散乱光強度の代表値Ｍ１は、その他の種のマラリア原虫のシングルリングフォームを含む集団の前方散乱光強度の代表値Ｍ２よりも小さい。ここでＴ４は、熱帯熱マラリア原虫とその他の種のマラリア原虫とを識別するための数値である。以上より、第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４未満であるか以上であるかを判定することで、血液試料への感染が疑われるマラリア原虫が熱帯熱マラリア原虫であるかその他の種のマラリア原虫であるかを判定できる。このように、血液分析装置１では、シングルリングフォーム及びマルチリングフォームの数等に影響されることなく、熱帯熱マラリア原虫に感染しているか否かを精度よく判定できる。
代表値としては、最頻値、平均値、中央値、重心値等を採用できる。特に、最頻値は、第３粒子群に属する粒子において、最も多い前方散乱光強度の値であり、第３粒子群に属する粒子の大きさに関する全体の傾向を反映している。したがって、代表値には最頻値を採用することが好ましい。
なお、前方散乱光強度の代表値に代えて、側方散乱光強度（側方散乱光のピーク値）又は後方散乱光強度（後方散乱光のピーク値）など、他の散乱光強度の代表値を採用することもできる。
また、ステップＳ４０７において、シングルリングフォームを含む集団である第３粒子群に代えて、マルチリングフォームを含む集団である第４粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値に基づいて、感染が疑われるマラリア原虫が熱帯熱マラリア原虫であるか否かを判定することもできる。また、シングルリングフォームとマルチリングフォームとを合わせたリングフォーム全体の粒子群を特定し、この粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値に基づいて、感染が疑われるマラリア原虫が熱帯熱マラリア原虫であるか否かを判定することもできる。
再び図７を参照する。第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４未満である場合（ステップＳ４０７においてＮＯ）、熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性がある。この場合、ＣＰＵ３０１は、第４粒子群に属する粒子数が所定値であるＴ５以上であるか否かを判定する（ステップＳ４０８）。ここでＴ５は、第４粒子群に属する粒子数がＴ５未満であればノイズを考慮してマルチリングフォームが出現していないと判断できる数値である。
熱帯熱マラリア原虫の感染者の末梢血中にはマルチリングフォームが出現することが多く、その他の種のマラリア原虫の感染者の末梢血中にはマルチリングフォームがほとんど出現しない。第４粒子群に属する粒子数がＴ５未満である場合（ステップＳ４０８においてＮＯ）、マルチリングフォームが血液試料中に出現していないと判断できる。この場合、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いとはいえない。その一方で、ステップＳ４０７において、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があると判断されている。そこで、ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定フラグに１をセットし（ステップＳ４０９）、マラリア種判定処理を終了し、測定データ解析処理に戻す。
熱帯熱マラリア原虫に感染した血液試料でも、マルチリングフォームが出現しない場合がある（図１２参照）。このような血液試料についても、上記のようなマラリア種判定処理を行うことで、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあると判定することができる。
再び図７を参照する。第４粒子群に属する粒子数がＴ５以上である場合（ステップＳ４０８においてＮＯ）、マルチリングフォームが血液試料中に出現している可能性があると判断できる。この場合、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いと判定できる。そこで、ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定フラグに２をセットし（ステップＳ４１０）、マラリア種判定処理を終了し、測定データ解析処理に戻す。
なお、ステップＳ４０８のマルチリングフォームの出現の判定処理を省略することもできる。この場合、ステップＳ４０７において第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４未満であれば、マラリア種判定フラグに１をセットすればよい。
第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４以上である場合（ステップＳ４０７においてＹＥＳ）、その他の種のマラリア原虫に感染している可能性がある。この場合、ＣＰＵ３０１は、第５粒子群に属する粒子数が所定値であるＴ６以上であるか否かを判定する（ステップＳ４１１）。ここでＴ６は、ノイズを考慮してトロフォゾイト・シゾントが出現していないと判断するための基準値である。
熱帯熱マラリア原虫の感染者の末梢血中にはトロフォゾイト・シゾントがほとんど出現せず、その他の種のマラリア原虫の感染者の末梢血中にはトロフォゾイト・シゾントが出現することが多い。第５粒子群に属する粒子数がＴ６未満である場合（ステップＳ４１１においてＮＯ）、トロフォゾイト・シゾントが血液試料中に出現していないと判断できる。この場合、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性が高いとはいえない。その一方で、ステップＳ４０７において、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している疑いがあると判断されている。そこで、ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定フラグに３をセットし（ステップＳ４１２）、マラリア種判定処理を終了し、測定データ解析処理に戻す。
その他の種のマラリア原虫に感染した血液試料でも、トロフォゾイト・シゾントが出現しない場合がある（図１３参照）。このような血液試料についても、上記のようなマラリア種判定処理を行うことで、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している疑いがあると判定することができる。
再び図７を参照する。第５粒子群に属する粒子数がＴ６以上である場合（ステップＳ４１１においてＹＥＳ）、トロフォゾイト・シゾントが血液試料中に出現していると判断できる。また、この場合、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性が高いと判定できる。そこで、ＣＰＵ３０１は、マラリア種判定フラグに４を、ステージフラグに１をそれぞれセットし（ステップＳ４１３）、マラリア種判定処理を終了し、測定データ解析処理に戻す。
熱帯熱マラリア原虫に感染した血液試料でも、トロフォゾイト・シゾントが出現する場合がある（図１４参照）。上記のマラリア種判定処理では、トロフォゾイト・シゾントが出現したか否かの判定処理であるステップＳ４０９に先立ち、感染が疑われるマラリア原虫が熱帯熱マラリア原虫であるかその他の種のマラリア原虫であるかを判定する処理であるステップＳ４０６を実行する。このため、上記のような血液試料についても、熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあると判定することができる。なお、ステップＳ４０９を実行した後、ステップＳ４０６を実行してもよい。
また、ステップＳ４１１のトロフォゾイト・シゾントの出現の判定処理を省略することもできる。この場合、ステップＳ４０６において第３粒子群に属する粒子数がＴ３未満であるか、ステップＳ４０７において第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４以上であれば、マラリア種判定フラグに３をセットすればよい。
再び図５を参照する。上記のようなマラリア種判定処理を終了すると、ＣＰＵ３０１は、赤血球数とマラリア感染赤血球数との比率（以下、「マラリア感染赤血球比率」という）を算出する（ステップＳ３０４）。以上で、ＣＰＵ３０１は、測定データ解析処理を終了し、メインルーチンへ処理をリターンする。
再び図３を参照する。上記のような測定データ解析処理を終了すると、ＣＰＵ３０１は、分析結果を出力部３１０に出力して（ステップＳ１１０）、処理を終了する。分析結果には、赤血球数、白血球数、マラリア感染赤血球数、及びマラリア感染赤血球比率の各測定結果と、診断の参考となる参考情報とが含まれる。マラリア種判定処理において、第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４以上であるか未満であるかによって、熱帯熱マラリアの感染に関する情報が参考情報として出力される。つまり、マラリア種判定処理において、第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４未満である場合は、参考情報として、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報（以下、「熱帯熱マラリア感染情報」という）が出力される。マラリア種判定処理において、第３粒子群に属する粒子の前方散乱光強度の代表値がＴ４以上である場合は、参考情報として、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報（以下、「他種感染情報」という）が出力される。
具体的には、熱帯熱マラリア感染情報は、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報（以下、「第１熱帯熱マラリア感染情報」という）と、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報（以下、「第２熱帯熱マラリア感染情報」という）とを含む。マラリア種判定フラグに２がセットされている場合、第１熱帯熱マラリア感染情報が参考情報として出力され、マラリア種判定フラグに１がセットされている場合、第２熱帯熱マラリア感染情報が参考情報として出力される。
また、他種感染情報は、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報（以下、「第１他種感染情報」という）と、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報（以下、「第２他種感染情報」という）とを含む。マラリア種判定フラグに４がセットされている場合、第１他種感染情報が参考情報として出力され、マラリア種判定フラグに３がセットされている場合、第２他種感染情報が参考情報として出力される。
ステージフラグに１がセットされている場合、参考情報として、トロフォゾイト又はシゾントが出現している可能性が高いことを示す情報（以下、「トロフォゾイト・シゾント出現情報」という）が出力される。
ステージフラグに２がセットされている場合、参考情報として、ガメトサイトが出現している可能性が高いことを示す情報（以下、「ガメトサイト出現情報」という）が出力される。
図１５を参照し、表示される分析結果についてさらに説明する。出力部３１０には、分析結果画面５００が表示される。分析結果画面５００は、試料情報表示領域５１０と、患者情報表示領域５２０と、測定結果表示領域５３０と、参考情報表示領域５４０とを有する。測定結果表示領域５３０は、ＣＢＣ項目表示領域５３１と、マラリア項目表示領域５３２とを有する。
試料情報表示領域５１０には、分析結果画面５００に表示されている分析結果の元となった血液試料の情報が表示される。患者情報表示領域５２０には、血液試料を採取された被験者の情報が表示される。
測定結果表示領域５３０には、測定データ解析処理によって得られた各項目の測定値が表示される。ＣＢＣ項目表示領域５３１には、血球分析における基本的な測定項目の測定値が表示される。ＣＢＣ項目表示領域５３１に表示される測定値は、赤血球（ＲＢＣ）、及び白血球（ＷＢＣ）の測定値を含む。マラリア項目表示領域５３２には、マラリア感染赤血球に関する測定項目の測定値が表示される。マラリア項目表示領域５３２に表示される測定値は、マラリア感染赤血球数（Ｍ−ＲＢＣ）及びマラリア感染赤血球比率（ＭＲ）の測定値を含む。
参考情報表示領域５４０には、測定データ解析処理によって、マラリア原虫の感染が疑われる等のユーザに報告すべき結果が得られた場合に、ユーザへの参考情報が表示される。測定データ解析処理において、マラリア種判定フラグに２がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、第１熱帯熱マラリア感染情報である「Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｌｍ」が表示され、マラリア種判定フラグに１がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、第２熱帯熱マラリア感染情報である「Ｐ．ｆａｌｃｉｐａｌｍ？」が表示される。なお、第１熱帯熱マラリア感染情報は上記に限られず、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報であればよい。第２熱帯熱マラリア感染情報も上記に限られず、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報であればよい。また、マラリア種判定フラグに１又は２がセットされている場合に、血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があることを示す同一の情報を出力するようにしてもよい。
測定データ解析処理において、マラリア種判定フラグに４がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、第１他種感染情報である「Ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ」が表示され、マラリア種判定フラグに３がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、第２他種感染情報である「Ｏｔｈｅｒ ｓｐｅｃｉｅｓ？」が表示される。なお、第１他種感染情報は上記に限られず、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報であればよい。第２他種感染情報も上記に限られず、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報であればよい。また、マラリア種判定フラグに３又は４がセットされている場合に、血液試料がその他の種のマラリア原虫に感染している可能性があることを示す同一の情報を出力するようにしてもよい。
測定データ解析処理において、ステージフラグに１がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、トロフォゾイト・シゾント出現情報である「Ｔｒｏｐｈｏｚｏｉｔｅ／Ｓｃｉｚｏｎｔ ｐｒｅｓｅｎｔ」が表示される。トロフォゾイト又はシゾントは、マラリア原虫の生活環においてリングフォームから進んだステージで出現する。したがって、トロフォゾイト又はシゾントが検出された場合に、トロフォゾイト・シゾント出現情報を出力することで、ユーザに感染者がトロフォゾイト又はシゾントが出現するステージであることを通知することができる。
測定データ解析処理において、ステージフラグに２がセットされた場合、参考情報表示領域５４０に、ガメトサイト出現情報である「Ｇａｍｅｔｏｃｙｔｅ ｐｒｅｓｅｎｔ？」が表示される。ガメトサイトは、トロフォゾイト及びシゾントが出現するステージからさらに進んだステージにおいて出現する。マラリア感染症においては、その症状が軽減されたとしても、ガメトサイトが血液中に存在する場合がある。このため、マラリア感染症の治療では、ガメトサイトを消滅させることが重要である。したがって、ガメトサイトが検出された場合に、ガメトサイト出現情報を出力することで、ユーザにガメトサイトが出現するステージであることを通知することができる。
１ 血液分析装置
２ 測定部
３ 解析部
５ 試料調製部
６ 光学検出部
７ 第２検出部
６１ フローセル
６２ 光源部
６３ 検出部
６４ 検出部
３０１ ＣＰＵ
３１０ 表示部
３２０ コンピュータプログラム
３２１ 可搬型記録媒体

Claims (17)

  1. 赤血球を収縮させる希釈液、核酸を染色する染色色素及び血液試料から測定試料を調製する試料調製部と、
    前記試料調製部によって調製された前記測定試料に対して光を照射して得られる蛍光強度及び散乱光強度を検出する検出部と、
    出力部と、
    前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、白血球を含む集団である第１粒子群と、マラリア原虫に感染していない赤血球を含む集団である第２粒子群と、前記散乱光強度が前記第１粒子群より小さく、前記蛍光強度が前記第１粒子群より小さく且つ前記第２粒子群より大きい、リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である第３粒子群と、を特定し、特定された前記リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である前記第３粒子群に属する粒子の散乱光強度の代表値が所定値未満の場合に、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報を前記出力部に出力させる解析部と、を備え、
    前記散乱光強度の代表値は、前記散乱光強度の最頻値、平均値、中央値または重心値である、血液分析装置。
  2. 前記解析部は、前記第３粒子群に属する粒子の散乱光強度の最頻値が所定値未満の場合に、前記血液試料が前記熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１に記載の血液分析装置。
  3. 前記解析部は、前記代表値が前記所定値以上の場合に、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫以外のマラリア原虫に感染している可能性があることを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１又は２に記載の血液分析装置。
  4. 前記解析部は、前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、前記散乱光強度が前記第３粒子群と同程度であり、且つ、前記蛍光強度が前記第３粒子群より大きい第４粒子群を特定するように構成されており、前記第４粒子群に属する粒子数が第２所定値以上のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１乃至３の何れか１項に記載の血液分析装置。
  5. 前記解析部は、前記第４粒子群に属する粒子数が前記第２所定値未満のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項４に記載の血液分析装置。
  6. 前記解析部は、前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、前記散乱光強度が前記第３粒子群より大きく、且つ、前記蛍光強度が前記第３粒子群より大きい第５粒子群を特定するように構成されており、前記第５粒子群に属する粒子数が第３所定値以上のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫以外のマラリア原虫に感染している可能性が高いことを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項３、請求項３に従属する請求項４又は請求項３に従属する請求項５に記載の血液分析装置。
  7. 前記解析部は、前記第５粒子群に属する粒子数が前記第３所定値未満のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫以外のマラリア原虫に感染している疑いがあることを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項６に記載の血液分析装置。
  8. 前記解析部は、前記第５粒子群に属する粒子数が前記第３所定値以上のときに、トロフォゾイト又はシゾントが前記血液試料中に出現している可能性があることを示す情報を前記出力部にさらに出力させるように構成されている、
    請求項６又は７に記載の血液分析装置。
  9. 前記解析部は、前記散乱光強度が前記第３粒子群より大きく、且つ、前記蛍光強度が前記第３粒子群と同程度である第６粒子群を特定し、前記第６粒子群に属する粒子数に基づいて、ガメトサイトが前記血液試料中に出現している可能性があることを示す情報を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１乃至８の何れか１項に記載の血液分析装置。
  10. 前記解析部は、前記散乱光強度が前記第１粒子群より小さく、且つ、前記蛍光強度が前記第２粒子群より大きい第７粒子群を特定し、前記第７粒子群に属する粒子数を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１乃至９の何れか１項に記載の血液分析装置。
  11. 前記試料調製部は、前記希釈液とは異なる第２希釈液と、前記血液試料とを混合して第２測定試料を調製するように構成されており、
    前記試料調製部によって調製された前記第２測定試料に含まれる各粒子の電気抵抗を検出する第２検出部をさらに備え、
    前記解析部は、前記第２検出部によって検出された電気抵抗に基づいて、前記第２測定試料に含まれる赤血球を検出し、検出された赤血球数と、前記第７粒子群に含まれる粒子数との比率を前記出力部に出力させるように構成されている、請求項１０に記載の血液分析装置。
  12. 前記試料調製部によって調製された前記測定試料を流すためのフローセルと、
    前記フローセルを流れる前記測定試料に青紫色レーザ光を照射するための光源部と、
    をさらに備え、
    前記検出部は、前記フローセルを流れる前記測定試料に対して前記光源部から青紫色レーザ光が照射されたときに得られる前記蛍光強度及び前記散乱光強度を検出するように構成されている、請求項１乃至１１の何れか１項に記載の血液分析装置。
  13. 赤血球を収縮させる希釈液、核酸を染色する染色色素及び血液試料から調製された測定試料に対して光を照射し、
    前記測定試料に対して前記光を照射することによって得られる蛍光強度及び散乱光強度を検出し、
    検出された前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、白血球を含む集団である第１粒子群と、マラリア原虫に感染していない赤血球を含む集団である第２粒子群と、前記散乱光強度が前記第１粒子群より小さく、前記蛍光強度が前記第１粒子群より小さく且つ前記第２粒子群より大きい、リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である第３粒子群と、を特定し、
    前記リングフォームのマラリア原虫が１つ入った赤血球を含む集団である前記第３粒子群に属する粒子の散乱光強度の代表値が所定値未満の場合に、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性があると判定し、
    前記散乱光強度の代表値は、前記散乱光強度の最頻値、平均値、中央値または重心値である、血液分析方法。
  14. 前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、前記散乱光強度が前記第３粒子群と同程度であり、且つ、前記蛍光強度が前記第３粒子群より大きい第４粒子群を特定し、前記第４粒子群に属する粒子数が第２所定値以上のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している可能性が高いと判定する、請求項１３に記載の血液分析方法。
  15. 前記第４粒子群に属する粒子数が前記第２所定値未満のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫に感染している疑いがあと判定する、請求項１４に記載の血液分析方法。
  16. 前記蛍光強度及び前記散乱光強度に基づいて、前記散乱光強度が前記第３粒子群より大きく、且つ、前記蛍光強度が前記第３粒子群より大きい第５粒子群を特定し、前記第５粒子群に属する粒子数が第３所定値以上のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫以外のマラリア原虫に感染している可能性が高いと判定する、請求項１３乃至１５の何れか１項に記載の血液分析方法。
  17. 前記第５粒子群に属する粒子数が前記第３所定値未満のときに、前記血液試料が熱帯熱マラリア原虫以外のマラリア原虫に感染している疑いがあると判定する、請求項１６に記載の血液分析方法。
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