JP6506250B2 - 化学架橋剤 - Google Patents
化学架橋剤 Download PDFInfo
- Publication number
- JP6506250B2 JP6506250B2 JP2016502634A JP2016502634A JP6506250B2 JP 6506250 B2 JP6506250 B2 JP 6506250B2 JP 2016502634 A JP2016502634 A JP 2016502634A JP 2016502634 A JP2016502634 A JP 2016502634A JP 6506250 B2 JP6506250 B2 JP 6506250B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hydrazide
- vigf2
- modified
- peptide
- rhgaa
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 title claims description 81
- 239000000126 substance Substances 0.000 title description 19
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 claims description 98
- 101001018026 Homo sapiens Lysosomal alpha-glucosidase Proteins 0.000 claims description 86
- 102000045921 human GAA Human genes 0.000 claims description 86
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 65
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 62
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 62
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 46
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 43
- 101001076292 Homo sapiens Insulin-like growth factor II Proteins 0.000 claims description 41
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 claims description 34
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 33
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 27
- -1 dimethyl butoxy benzyloxycarbonyl Chemical group 0.000 claims description 19
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 claims description 12
- 229940068935 insulin-like growth factor 2 Drugs 0.000 claims description 12
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 12
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 claims description 10
- 239000000863 peptide conjugate Substances 0.000 claims description 10
- 108010030291 alpha-Galactosidase Proteins 0.000 claims description 9
- 102000005840 alpha-Galactosidase Human genes 0.000 claims description 9
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 claims description 8
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 claims description 8
- 102100029199 Iduronate 2-sulfatase Human genes 0.000 claims description 8
- 101710096421 Iduronate 2-sulfatase Proteins 0.000 claims description 8
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 8
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 8
- 102000004547 Glucosylceramidase Human genes 0.000 claims description 7
- 108010017544 Glucosylceramidase Proteins 0.000 claims description 7
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 7
- 102000016871 Hexosaminidase A Human genes 0.000 claims description 5
- 108010053317 Hexosaminidase A Proteins 0.000 claims description 5
- 101710124978 Beta-hexosaminidase B Proteins 0.000 claims description 4
- 101000962729 Dictyostelium discoideum Lysosomal alpha-mannosidase Proteins 0.000 claims description 4
- 102000016870 Hexosaminidase B Human genes 0.000 claims description 4
- 108010053345 Hexosaminidase B Proteins 0.000 claims description 4
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 4
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 claims description 4
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 4
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 4
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 4
- RMTLMTYIGIOBQR-UHFFFAOYSA-N n-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)-4-formylbenzamide Chemical compound C1=CC(C=O)=CC=C1C(=O)NN1C(=O)CCC1=O RMTLMTYIGIOBQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 4
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 claims description 3
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 3
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 claims description 2
- 125000001493 tyrosinyl group Chemical group [H]OC1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 claims 2
- 102100024295 Maltase-glucoamylase Human genes 0.000 claims 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 159
- HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N benzaldehyde Chemical compound O=CC1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 38
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 37
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 37
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 29
- 102100037182 Cation-independent mannose-6-phosphate receptor Human genes 0.000 description 27
- 101710145225 Cation-independent mannose-6-phosphate receptor Proteins 0.000 description 27
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 26
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 25
- 238000007385 chemical modification Methods 0.000 description 23
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 23
- QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N para-ethylbenzaldehyde Natural products CCC1=CC=C(C=O)C=C1 QNGNSVIICDLXHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 19
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 17
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 16
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 16
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 16
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 15
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 15
- 239000000244 polyoxyethylene sorbitan monooleate Substances 0.000 description 15
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 15
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 15
- 229940068968 polysorbate 80 Drugs 0.000 description 15
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 15
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 15
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 15
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 15
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 14
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 14
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 13
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 12
- 108010045758 lysosomal proteins Proteins 0.000 description 12
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 11
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 11
- 125000002344 aminooxy group Chemical group [H]N([H])O[*] 0.000 description 10
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 10
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 10
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 9
- HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N benzaldehyde Chemical group O=[11CH]C1=CC=CC=C1 HUMNYLRZRPPJDN-KWCOIAHCSA-N 0.000 description 9
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 9
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 9
- 210000003712 lysosome Anatomy 0.000 description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 description 9
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 8
- 238000002641 enzyme replacement therapy Methods 0.000 description 8
- 230000001868 lysosomic effect Effects 0.000 description 8
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 8
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 8
- 239000000562 conjugate Substances 0.000 description 7
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 7
- 150000007857 hydrazones Chemical class 0.000 description 7
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 7
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 7
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 7
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000015439 Lysosomal storage disease Diseases 0.000 description 6
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 5
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 4
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 4
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 4
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 4
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 4
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 4
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 4
- 101710124976 Beta-hexosaminidase A Proteins 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 102000016679 alpha-Glucosidases Human genes 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 102000057877 human IGF2 Human genes 0.000 description 3
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 3
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 3
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 125000005544 phthalimido group Chemical group 0.000 description 3
- 230000036515 potency Effects 0.000 description 3
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 3
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 3
- 238000013341 scale-up Methods 0.000 description 3
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 3
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 3
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- 208000032007 Glycogen storage disease due to acid maltase deficiency Diseases 0.000 description 2
- 206010053185 Glycogen storage disease type II Diseases 0.000 description 2
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 2
- 102000038455 IGF Type 1 Receptor Human genes 0.000 description 2
- 108010031794 IGF Type 1 Receptor Proteins 0.000 description 2
- 108010001127 Insulin Receptor Proteins 0.000 description 2
- 108010040066 N-acetylglucosamine-1-phosphodiester alpha-N-acetylglucosaminidase Proteins 0.000 description 2
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 108010033276 Peptide Fragments Proteins 0.000 description 2
- 102000007079 Peptide Fragments Human genes 0.000 description 2
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N beta-N-Acetyl-D-neuraminic acid Natural products CC(=O)NC1C(O)CC(O)(C(O)=O)OC1C(O)C(O)CO SQVRNKJHWKZAKO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012148 binding buffer Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 2
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 201000004502 glycogen storage disease II Diseases 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 2
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 2
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 2
- 108091005601 modified peptides Proteins 0.000 description 2
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000003098 myoblast Anatomy 0.000 description 2
- 229940103023 myozyme Drugs 0.000 description 2
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 2
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 2
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229950008882 polysorbate Drugs 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 2
- 210000004683 skeletal myoblast Anatomy 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- WACNXHCZHTVBJM-UHFFFAOYSA-N 1,2,3,4,5-pentafluorobenzene Chemical group FC1=CC(F)=C(F)C(F)=C1F WACNXHCZHTVBJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSMWPOJJYXSZOE-UHFFFAOYSA-N 2-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)-4-formylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=C(C=O)C=C1N1C(=O)CCC1=O MSMWPOJJYXSZOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JYHIQJZRAUFBQS-UHFFFAOYSA-N 2-(2,5-dioxopyrrolidin-1-yl)-6-hydrazinylpyridine-3-carboxylic acid;propan-2-one Chemical compound CC(C)=O.NNC1=CC=C(C(O)=O)C(N2C(CCC2=O)=O)=N1 JYHIQJZRAUFBQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 3-[3-[3,5-dihydroxy-6-methyl-4-(3,4,5-trihydroxy-6-methyloxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]oxydecanoyloxy]decanoic acid;hydrate Chemical compound O.OC1C(OC(CC(=O)OC(CCCCCCC)CC(O)=O)CCCCCCC)OC(C)C(O)C1OC1C(O)C(O)C(O)C(C)O1 HVCOBJNICQPDBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 102100034561 Alpha-N-acetylglucosaminidase Human genes 0.000 description 1
- 208000031277 Amaurotic familial idiocy Diseases 0.000 description 1
- 102000015081 Blood Coagulation Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010039209 Blood Coagulation Factors Proteins 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 1
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000024720 Fabry Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000015872 Gaucher disease Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 208000032008 Glycogen storage disease due to glycogen debranching enzyme deficiency Diseases 0.000 description 1
- 206010053250 Glycogen storage disease type III Diseases 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 102000003746 Insulin Receptor Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100033448 Lysosomal alpha-glucosidase Human genes 0.000 description 1
- 208000002720 Malnutrition Diseases 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- 208000002678 Mucopolysaccharidoses Diseases 0.000 description 1
- 208000010577 Niemann-Pick disease type C Diseases 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 description 1
- 208000007930 Type C Niemann-Pick Disease Diseases 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000003044 adaptive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 108010056760 agalsidase beta Proteins 0.000 description 1
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 1
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 108010009380 alpha-N-acetyl-D-glucosaminidase Proteins 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005875 antibody response Effects 0.000 description 1
- 150000003934 aromatic aldehydes Chemical group 0.000 description 1
- 125000000613 asparagine group Chemical group N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004900 autophagic degradation Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008033 biological extinction Effects 0.000 description 1
- 239000003114 blood coagulation factor Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000002805 bone matrix Anatomy 0.000 description 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 description 1
- 235000021256 carbohydrate metabolism Nutrition 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 239000013592 cell lysate Substances 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 230000033077 cellular process Effects 0.000 description 1
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 1
- 238000010382 chemical cross-linking Methods 0.000 description 1
- 125000003636 chemical group Chemical group 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- 230000009881 electrostatic interaction Effects 0.000 description 1
- 238000013073 enabling process Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 229940014516 fabrazyme Drugs 0.000 description 1
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 1
- 235000019256 formaldehyde Nutrition 0.000 description 1
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L glutamate group Chemical group N[C@@H](CCC(=O)[O-])C(=O)[O-] WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-L 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 201000004543 glycogen storage disease III Diseases 0.000 description 1
- 210000002288 golgi apparatus Anatomy 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 230000013632 homeostatic process Effects 0.000 description 1
- 229940068924 human insulin-like growth factor 2 Drugs 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 125000000311 mannosyl group Chemical group C1([C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 238000006011 modification reaction Methods 0.000 description 1
- 206010028093 mucopolysaccharidosis Diseases 0.000 description 1
- 208000022018 mucopolysaccharidosis type 2 Diseases 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 235000018343 nutrient deficiency Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 125000001820 oxy group Chemical group [*:1]O[*:2] 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 108010091748 peptide A Proteins 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 125000001500 prolyl group Chemical group [H]N1C([H])(C(=O)[*])C([H])([H])C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 description 1
- 230000018883 protein targeting Effects 0.000 description 1
- 230000004844 protein turnover Effects 0.000 description 1
- 238000004366 reverse phase liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N sialic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)C[C@@](O)(C(O)=O)OC1[C@H](O)[C@H](O)CO SQVRNKJHWKZAKO-OQPLDHBCSA-N 0.000 description 1
- 125000005629 sialic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002363 skeletal muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N tfa trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F.OC(=O)C(F)(F)F WROMPOXWARCANT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/22—Hormones
- A61K38/30—Insulin-like growth factors, i.e. somatomedins, e.g. IGF-1, IGF-2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
- A61K38/46—Hydrolases (3)
- A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/59—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes
- A61K47/60—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyureas or polyurethanes the organic macromolecular compound being a polyoxyalkylene oligomer, polymer or dendrimer, e.g. PEG, PPG, PEO or polyglycerol
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/65—Insulin-like growth factors, i.e. somatomedins, e.g. IGF-1, IGF-2
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2408—Glucanases acting on alpha -1,4-glucosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2405—Glucanases
- C12N9/2434—Glucanases acting on beta-1,4-glucosidic bonds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2465—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on alpha-galactose-glycoside bonds, e.g. alpha-galactosidase (3.2.1.22)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
- C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
- C12N9/2477—Hemicellulases not provided in a preceding group
- C12N9/2488—Mannanases
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/96—Stabilising an enzyme by forming an adduct or a composition; Forming enzyme conjugates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
- C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
- C12Y302/0102—Alpha-glucosidase (3.2.1.20)
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Description
配列番号1
IGF2/CI−MPR受容体への結合を増大させるために、vIGF2ペプチドのリソソーム酵素への化学的カップリングのために新しい化学的結合アプローチを利用した。このアプローチは既に記載されているものとは異なり、リソソーム酵素は、アルデヒド基を導入するために第1の架橋剤により修飾され、一方、vIGF2ペプチドは、N末端残基にヒドラジド基を導入するために第2の架橋剤により修飾される。特に、組換え野生型ヒト酸性α−グルコシダーゼ(rhGAA)を、50kDa分子量カットオフ膜を備えた濃縮器によって7.5mg/mlまで濃縮してから、4℃で一晩、透析によって緩衝液を50mMのリン酸ナトリウム(pH6.5)/100mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80に交換した。次に、20倍モル過剰のN−スクシンイミジル−4−ホルミルベンズアミド(S−4FB、Solulink)クロスリンカーを用いて、周囲温度で2時間rhGAAを化学修飾して、新規のベンズアルデヒド基を導入した。次に、ベンズアルデヒド修飾rhGAAは50mMのNaOAc(pH4.8)/50mMのNaCl緩衝液中で精製されて、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物が除去され、vIGF2ペプチドへの化学的カップリングまで4℃で貯蔵される。
NHS−PEG4−tBoc−ヒドラジドクロスリンカーは、ペプチドに対する良好な溶解度を保持しながら、vIGF2ペプチドを効率的に修飾して新規のヒドラジド基を導入することが示された。しかしながら、tBoc保護基は弱酸条件を用いて除去するのが困難であり、脱保護のために高濃度のTFA(15%)および4時間のインキュベーションを使用した。これらの厳しい条件下でも、脱保護ヒドラジド修飾vIGF2ペプチドの約50%しか回収できなかった。効率的な除去および修飾ペプチドのより良好な回収のためにより不安定な保護基を用いてクロスリンカーを設計することができれば、アプローチはさらに改善されるであろう。
遠心濃縮器(例えば、50kDa公称分子量カットオフ(MWCO)膜を有するAmicon Ultra、Millipore)を用いて、小さいスケール(すなわち、100mg未満)で、組換えヒト酸性α−グルコシダーゼ(rhGAA)を8〜10mg/mlまで濃縮してから、4℃で一晩、透析によって修飾緩衝液[50mMのリン酸ナトリウム(pH6.5)/100mMのNaCl/100mMのグルコース/2%のマンニトール/0.05%のポリソルベート−80]に緩衝液交換した。より大きいスケールの調製(例えば、200mgよりも多いrhGAA)の場合、タンパク質濃度および緩衝液交換は、50kDaのMWCO膜を有するタンジェンシャルフローろ過(TFF)システムを用いて、ダイアフィルトレーション/濃縮によって達成することができる。rhGAAタンパク質の濃度は、166,117M−1cm−1のモル吸光係数(ε)を用いて280nmでのUV吸光分光法によって決定される。次に、修飾緩衝液で希釈することによって、rhGAAタンパク質濃度を7.5mg/mlに調整し、25倍モル過剰の二官能性クロスリンカースクシンイミジル4−ホルミル安息香酸(SFB)と共に約20℃で4時間インキュベートして、rhGAA上に新規のベンズアルデヒド(芳香族アルデヒド)基を導入した。ベンズアルデヒド修飾rhGAAを、4℃で50mMのNaOAc(pH4.8)/100mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80に対して、緩衝液を複数変化させて透析して、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物を除去した。化学修飾rhGAAはこの緩衝液中で安定であり、vIGF2ペプチドへの化学的結合まで無期限に貯蔵することができる。重要なことに、rhGAA上に導入されたベンズアルデヒド基は、ヒドラジド修飾またはアミノオキシ修飾vIGF2ペプチドに対する結合のために化学反応性を保持する。また、ベンズアルデヒド修飾rhGAAが、GAAの安定性またはカップリング効率に悪影響を与えることなく、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80中で貯蔵可能であることも決定した。
ベンズアルデヒド修飾rhGAAは、以下のようにヒドラゾン連結を形成するためにヒドラジドなどの特定の化学基を介して、vIGF2ペプチドへの化学的結合のために利用することができる。凍結乾燥した精製vIGF2ペプチドを、50mMのリン酸ナトリウム(pH7.5)/50mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80中0.6mg/mlで再構成し、20倍モル過剰の二官能性クロスリンカーN−tert−ブトキシカルボニル(tBoc)保護ヒドラジドクロスリンカー(NHS−PEG4−tBoc−ヒドラジド、Quanta Biodesign)と共に周囲温度でインキュベートして、N末端に新規のtBoc保護ヒドラジド基を導入した。vIGF2の修飾の進行および程度を評価するために、C4逆相高速液体クロマトグラフィ(C4RP−HPLC)によって反応をモニターした。C4RP−HPLC法は、1100シリーズのクォータナリポンプ、自動サンプラー、サーモスタット付カラムコンパートメント、およびAgilent ChemStationソフトウェア(Rev.B.04.03)を有するダイオードアレイ検出器(DAD)からなるAgilent Technologies(Palo Alto,CA)HPLCシステムにおいて4.6×250mm、5μm、300ÅのC4 Jupiterカラム(Phenomenex,Torrence,CA)を用いた。移動相は、緩衝液A:水中0.1%のトリフルオロ酢酸(TFA)および緩衝液B:アセトニトリル(MeCN)中0.1%のTFAで構成した。26%のアセトニトリル(MeCN/0.1%TFA)で予め平衡化したC4カラムにペプチドサンプルを装填した。2分後に、MeCN/0.1%TFAの26〜33%の直線的なグラジエントを用いて、13分間にわたってカラムを展開させた。図4Aに示されるように、PEG4−tBoc−ヒドラジドを結合するためのvIGF2ペプチドの化学修飾において保持時間の著しいシフト(増大)が観察される(中央パネル)。vIGF2ペプチドの化学修飾が完了(通常2時間まで)したら、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物を除去するために調製用C4RP−HPLCによりtBoc−ヒドラジド修飾vIGF2ペプチドを精製し、揮発性溶媒を除去するために凍結乾燥した。次に、乾燥したペプチドを2%のTFA(dH2O中)中で再構成し、周囲温度で最長72時間までインキュベートして、tBoc保護基を除去し、その後のリソソーム酵素への結合のためにヒドラジド基を露出させた。tBoc脱保護の進行もC4RP−HPLCによってモニターし、通常、tBocが除去されるとペプチドの保持時間を出発の非修飾vIGF2ペプチドの付近まで減少させることが示された(図4A、下部パネル)。tBoc基の完全な脱保護は、通常、これらの実験条件下で約60時間を必要とした。次に、調製用C4RP−HPLCによってtBoc脱保護ヒドラジド修飾vIGF2を精製し、凍結乾燥し、ベンズアルデヒド修飾rhGAAへの化学的結合まで乾燥貯蔵した。また、より高いTFA濃度(例えば、4%のTFA)および他の酸および有機溶媒を用いてtBoc保護基の除去を試験したが、これらの条件は遥かにより低いヒドラジド修飾vIGF2ペプチドの回収率をもたらした。以下のように、結果として生じるヒドラゾン連結を介して脱保護ヒドラジドvIGF2ペプチドをベンズアルデヒド修飾rhGAAに化学的に結合した(rhGAAに対して4倍モル過剰のvIGF2ペプチドを用いる)。ベンズアルデヒド修飾rhGAAのタンパク質濃度を、通常、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80緩衝液により4〜5mg/mlに調整し、凍結乾燥した脱保護ヒドラジド修飾vIGF2ペプチドに酵素を(1モルのrhGAA:4モルのvIGF2ペプチドのモル比で)直接添加し、約20℃で約16時間インキュベートした。カップリングの速度を増大するためにアニリン(5〜10mM)も添加することができるが、これらの実験条件下でカップリングのために絶対に必要とされるわけではないことが見出された。次に、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/2%のマンニトール/0.05%のポリソルベート−80緩衝液中におけるサイズ排除クロマトグラフィによってvIGF2ペプチド結合rhGAAを精製し、過剰のvIGF2ペプチドを除去した。vIGF2−rhGAAのピーク画分をプールし、30kDa公称分子量カットオフ酢酸セルロース膜によるAmicon Ultraを用いて濃縮した。ヒドラゾン連結vIGF2ペプチドが、対象とするIGF2/CI−MPR受容体に対するrhGAAの結合を増大させるかどうかを決定するために、受容体プレート結合アッセイによってvIGF2−rhGAAを特徴付けた。図4Bに示されるように、vIGF2−rhGAAは、非結合rhGAAよりも著しく良くIGF2/CI−MPR受容体に結合し、骨格筋細胞モデルにおける実質的により良好な外因性リソソーム酵素の細胞取込みと相関した(図5A)。これらの結果は、標的筋肉細胞における外因性治療薬の細胞取込みの増強のための改善された受容体結合の機能的重要性を示す。筋肉細胞ライセートのウエスタンブロット分析は、内部移行したvIGF2−rhGAAがリソソームに送達され、そこでvIGF2ペプチドが除去され、非結合rhGAA酵素について観察されるようにrhGAAが正常に処理されたことを示す(図5B)。IGF2ペプチドは、常在リソソームプロテアーゼによって自然に分解されることが既に報告されていたことから、これらの結果は予想された。重要なことに、ウエスタンブロットデータは、化学結合されたvIGF2ペプチドが除去され、リソソームにおけるGAAプロセシングを妨害しなかったことを示す(GAAプロセシングは、天然グリコーゲン基質を加水分解するために、高親和性結合および最適なGAA酵素の動態学のために必要とされる)。
vIGF2ペプチドの修飾のためのtBoc保護ヒドラジドクロスリンカーの利用に加えて、異なる保護基を有する他のクロスリンカーも利用することができる。本発明者らは、vIGF2ペプチドのN末端に新規のヒドラジド基を導入するためにメチルベンジルオキシカルボニル(BOM)保護ヒドラジド(NHS−PEG4−BOM−ヒドラジド)を含有する二官能性クロスリンカーを化学的に合成した。BOM保護基を除去した後、以下のように、ベンズアルデヒド修飾リソソーム酵素に対するその後の結合(結果として生じるヒドラゾン連結を介する)のために化学反応性ヒドラジド基が露出される。凍結乾燥した精製vIGF2ペプチドを50mMのリン酸ナトリウム(pH7.5)/50mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80中0.6mg/mlで再構成し、20倍モル過剰のNHS−PEG4−BOM−ヒドラジドと共に周囲温度でインキュベートして、N末端に新規のBOM保護ヒドラジド基を導入した。vIGF2の修飾の進行および程度を評価するために、C4RP−HPLCによって反応をモニターした。PEG4−BOM−ヒドラジドを結合するためのvIGF2ペプチドの化学修飾において保持時間の著しいシフト(増大)が観察される(図6、中央パネル)。vIGF2ペプチドの化学修飾が完了(通常2時間まで)したら、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物を除去するために調製用C4RP−HPLCによりBOM−ヒドラジド修飾vIGF2ペプチドを精製し、揮発性溶媒を除去するために凍結乾燥した。次に、乾燥したペプチドを2%のTFA(dH2O中)中で再構成し、周囲温度で最長72時間までインキュベートして、BOM保護基を除去し、その後のリソソーム酵素への結合のためにヒドラジド基を露出させた。BOM脱保護の進行もC4RP−HPLCによってモニターし、通常、BOMが除去されるとペプチドの保持時間を出発の非修飾vIGF2ペプチドの付近まで減少させることが示された(図6、下部パネル)。BOM基の完全な脱保護は、通常、これらの実験条件下で約60時間を必要とした。次に、調製用C4RP−HPLCによってBOM脱保護ヒドラジド修飾vIGF2を精製し、凍結乾燥し、ベンズアルデヒド修飾rhGAAへの化学的結合まで乾燥貯蔵した。
またベンズアルデヒド修飾rhGAAは、以下のように、非常に安定したオキシム連結を介したアミノオキシ修飾vIGF2ペプチドへの化学的結合のために利用することができる。凍結乾燥した精製vIGF2ペプチドを50mMのリン酸ナトリウム(pH7.5)/50mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80中0.6mg/mlで再構成し、20倍モル過剰のフタルイミドオキシ−PEG12−NHSエステル(Quanta Biodesign)と共に周囲温度でインキュベートして、N末端に新規のフタルイミドオキシ基を導入した。vIGF2ペプチドの化学修飾が完了(通常2時間まで)したら、次にフタルイミドオキシ修飾vIGF2ペプチドを0.5Mのヒドラジンと共に周囲温度で30〜60分間インキュベートして、中間体フタルイミドオキシ基を所望のアミノオキシ基に変換した。C4RP−HPLCを利用して、化学修飾反応、およびフタルイミドオキシ基のアミノオキシ基への変換をモニターした。図7Aに示されるように、アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドは、非修飾vIGF2ペプチドと比較して、C4RP−HPLCにおいてわずかに長い保持時間を有した。アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドはTFAにより酸性化されてから、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物を除去するために調製用C4RP−HPLCによって精製され、揮発性溶媒を除去するために凍結乾燥される。結果として生じるオキシム連結を介したベンズアルデヒド修飾rhGAAへの化学的結合のために、乾燥したアミノオキシ修飾ヒドラジドvIGF2ペプチドを直接使用した。簡単に言うと、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80緩衝液によってベンズアルデヒド修飾rhGAAのタンパク質濃度を通常4〜5mg/mlに調整し、乾燥アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドに酵素を(1モルのrhGAA:4モルのvIGF2ペプチドのモル比で)直接添加し、約20℃で約16時間インキュベートした。次に、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/2%のマンニトール/0.05%のポリソルベート−80緩衝液中におけるサイズ排除クロマトグラフィによってvIGF2ペプチド結合rhGAAを精製し、上記のように、過剰のvIGF2ペプチドを除去した。
またvIGF2ペプチドは、tBoc保護アミノオキシ二官能性クロスリンカーを用いてオキシム連結を介してリソソーム酵素へ化学的に結合させることもできる。このアプローチは、潜在的に危険なヒドラジンを用いる化学変換を必要とすることなく、ベンズアルデヒド修飾リソソーム酵素への化学的結合のためにアミノオキシ修飾vIGF2ペプチドをもたらす。簡単に言うと、凍結乾燥した精製vIGF2ペプチドを50mMのリン酸ナトリウム(pH7.5)/50mMのNaCl/0.05%のポリソルベート−80中0.6mg/mlで再構成し、20倍モル過剰の二官能性クロスリンカーtBoc保護アミノオキシクロスリンカー(NHS基またはペンタフルオロベンゼン基のいずれかを有する)と共に周囲温度でインキュベートして、N末端に新規のtBoc保護アミノオキシ基を導入し、C4RP−HPLCによりモニターした。図8(中央パネル)に示されるように、PEG化tBoc−アミノオキシクロスリンカーを結合するためのvIGF2ペプチドの化学修飾において保持時間の著しいシフト(増大)が観察される(中央パネル)。vIGF2ペプチドの化学修飾が完了(通常2時間まで)したら、過剰のクロスリンカーおよび反応副産物を除去するために調製用C4RP−HPLCによりtBoc−アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドを精製し、揮発性溶媒を除去するために凍結乾燥した。次に、乾燥したペプチドを2%のTFA(dH2O中)中で再構成し、周囲温度で最長72時間までインキュベートして、tBoc保護基を除去し、その後のリソソーム酵素への結合のためにアミノオキシ基を露出させた。tBoc脱保護の進行もC4RP−HPLCによってモニターし、通常、tBocが除去されるとペプチドの保持時間を出発の非修飾vIGF2ペプチドの付近まで減少させることが示された(図8、下部パネル)。tBoc基の完全な脱保護は、通常、これらの実験条件下で約50時間を必要とした。次に、調製用C4RP−HPLCによってtBoc脱保護アミノオキシ修飾vIGF2を精製し、凍結乾燥し、ベンズアルデヒド修飾リソソーム酵素への化学的結合まで乾燥貯蔵した。
単一のクロスリンカーを用いてオキシム連結vIGF2−rhGAAを生成するための代替の方法は、以下のように化学的に酸化されたrhGAAにアミノオキシ修飾vIGF2ペプチドをカップリングさせることによって達成することができる。透析またはサイズ排除クロマトグラフィ(SEC)によってrhGAAを0.1MのNaOAc(pH5.2)中に緩衝液交換し、同じ緩衝液によりタンパク質濃度を5mg/mlに調整した。次に、rhGAAを2mMのメタ過ヨウ素酸ナトリウムと共に4℃で30分間インキュベートして、rhGAAのN−グリカンにおいて炭水化物(大部分は末端シアル酸およびガラクトース)を酸化し、アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドへの化学的結合のために化学反応性アルデヒド基を生じさせた。次に、過剰のメタ過ヨウ素酸ナトリウムを除去するために、化学的に酸化されたrhGAAを0.1MのNaOAc(pH5.2)に対して透析するか、あるいはSECにさらした。酸化rhGAA(約4mg/mlで貯蔵)を乾燥アミノオキシ修飾vIGF2ペプチドに、1モルのrhGAA:4モルのvIGF2ペプチドのモル比で直接添加し、約20℃で約16時間インキュベートし、結果として生じるオキシム連結を形成する。次に、上記のように過剰のvIGF2ペプチドを除去するために、50mMのリン酸ナトリウム(pH6.0)/100mMのNaCl/2%のマンニトール/0.05%のポリソルベート−80緩衝液中におけるSECによってvIGF2ペプチド結合rhGAAを精製した。
Claims (13)
- a.変異インスリン様成長因子2(vIGF2)を第1の架橋剤と接触させて、N末端残基に保護ヒドラジド基を導入するステップ、
b.ヒドラジド修飾vIGF2を溶液中で脱保護して、脱保護ヒドラジド修飾vIGF2を形成するステップ、
c.リソソーム酵素を第2の架橋剤と接触させて、アルデヒド基を導入するステップ、及び
d.ステップbの脱保護ヒドラジド修飾vIGF2の少なくとも1つを、ステップcのアルデヒド修飾リソソーム酵素に結合するステップ
を含む、リソソーム酵素―リソソーム標的化ペプチド結合体を製造する方法。 - 第2の架橋剤がN−スクシンイミジル−4−ホルミルベンズアミド(S−4FB)を含む、請求項1に記載の方法。
- 第1の架橋剤が、N−tert−ブトキシカルボニル(tBoc)保護ヒドラジドクロスリンカーを含む、請求項1又は2に記載の方法。
- N−tert−ブトキシカルボニル(tBoc)保護ヒドラジドクロスリンカーが、NHS−PEG4−tBoc−ヒドラジドである、請求項3に記載の方法。
- 第1の架橋剤が、アセトン保護ヒドラジド基、ジメトキシベンジルオキシカルボニル保護ヒドラジド基、トリメトキシベンジルオキシカルボニル保護ヒドラジド基、又はこれらの任意の組み合わせを有する、請求項1〜4のいずれか一項に記載の方法。
- 第1の架橋剤が、アセトン保護NHS−PEG4−ヒドラジド、ジメトキシベンジルカルボニル保護NHS−PEG4−ヒドラジド、又はトリメトキシベンジルオキシカルボニル保護NHS−PEG4−ヒドラジドを含む、請求項1〜5のいずれか一項に記載の方法。
- 前記リソソーム酵素が、酸性α−グルコシダーゼ(rhGAA)、酸性α−ガラクトシダーゼA(GLA)、酸性β−グルクロニダーゼ(GUS)、酸性α−イズロニダーゼA(IduA)、酸性イズロン酸2−スルファターゼ(I2S)、β−ヘキソサミニダーゼA(HexA)、β−ヘキソサミニダーゼB(HexB)、酸性α−マンノシダーゼA、β−グルコセレブロシダーゼ(GlcCerase)、酸性リパーゼ(LPA)、又はこれらの任意の組み合わせを含む、請求項1〜6のいずれか一項に記載の方法。
- 前記リソソーム酵素がヒト型である、請求項1〜7のいずれか一項に記載の方法。
- ステップdにおいて、脱保護ヒドラジド修飾vIGF2が約4倍モル過剰で添加される、請求項1〜8のいずれか一項に記載の方法。
- ステップdにおいて、アニリンが添加される、請求項1〜9のいずれか一項に記載の方法。
- vIGF2が、野生型ヒトvIGF2の配列と比較して、次の変化:
野生型ヒトvIGF2のN末端アミノ酸残基1〜4の欠損;
野生型ヒトvIGF2の6位のグルタミン酸残基のアルギニン残基による置換;
野生型ヒトvIGF2の27位のチロシン残基のロイシン残基による置換;及び
野生型ヒトvIGF2の65位のリジン残基のアルギニン残基による置換;
の一つ以上を含む請求項1〜10のいずれか一項に記載の方法。 - vIGF2が、配列番号1、2、3、及び4の1つ以上を含む、請求項1〜11のいずれか一項に記載の方法。
- ステップbの後で、脱保護ヒドラジド基修飾vIGF2を凍結乾燥するステップをさらに含む、請求項1〜12のいずれか一項に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201361794784P | 2013-03-15 | 2013-03-15 | |
US61/794,784 | 2013-03-15 | ||
PCT/US2014/027818 WO2014143734A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-03-14 | Chemical crosslinkers |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019063679A Division JP2019142889A (ja) | 2013-03-15 | 2019-03-28 | 化学架橋剤 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2016515510A JP2016515510A (ja) | 2016-05-30 |
JP6506250B2 true JP6506250B2 (ja) | 2019-04-24 |
Family
ID=51537517
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016502634A Active JP6506250B2 (ja) | 2013-03-15 | 2014-03-14 | 化学架橋剤 |
JP2019063679A Pending JP2019142889A (ja) | 2013-03-15 | 2019-03-28 | 化学架橋剤 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2019063679A Pending JP2019142889A (ja) | 2013-03-15 | 2019-03-28 | 化学架橋剤 |
Country Status (15)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US9889203B2 (ja) |
EP (2) | EP2976092B1 (ja) |
JP (2) | JP6506250B2 (ja) |
KR (1) | KR20150132126A (ja) |
CN (1) | CN105189742A (ja) |
AU (2) | AU2014228231B2 (ja) |
BR (1) | BR112015022780A2 (ja) |
CA (1) | CA2902210C (ja) |
ES (1) | ES2804594T3 (ja) |
HK (1) | HK1215049A1 (ja) |
IL (1) | IL240209A0 (ja) |
MX (1) | MX2015012873A (ja) |
SG (1) | SG11201505936QA (ja) |
WO (2) | WO2014143734A2 (ja) |
ZA (1) | ZA201506363B (ja) |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ES2804594T3 (es) * | 2013-03-15 | 2021-02-08 | Amicus Therapeutics Inc | Reticuladores químicos |
GB201508025D0 (en) | 2015-05-11 | 2015-06-24 | Ucl Business Plc | Fabry disease gene therapy |
KR101847536B1 (ko) * | 2015-06-02 | 2018-04-11 | 한국생명공학연구원 | 효모 세포벽 만노단백질 유래의 당사슬을 이용한 만노스-6-인산 당사슬이 부가된 당단백질의 제조방법 |
SG11202010533WA (en) * | 2018-04-30 | 2020-11-27 | Amicus Therapeutics Inc | Gene therapy constructs and methods of use |
CN113631182A (zh) | 2018-10-10 | 2021-11-09 | 阿米库斯治疗学公司 | 二硫键稳定的多肽组合物和使用方法 |
CA3154189A1 (en) * | 2019-10-10 | 2021-04-15 | Hung Do | Variant igf2 constructs |
AR124216A1 (es) | 2020-12-01 | 2023-03-01 | Univ Pennsylvania | Composiciones nuevas con motivos selectivos específicos del tejido y composiciones que las contienen |
EP4334334A1 (en) | 2021-04-23 | 2024-03-13 | The Trustees of The University of Pennsylvania | Novel compositions with brain-specific targeting motifs and compositions containing same |
WO2024130070A2 (en) | 2022-12-17 | 2024-06-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Recombinant aav capsids with cardiac- and skeletal muscle- specific targeting motifs and uses thereof |
WO2024130067A2 (en) | 2022-12-17 | 2024-06-20 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | Recombinant aav mutant vectors with cardiac and skeletal muscle-specific targeting motifs and compositions containing same |
Family Cites Families (9)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5401650A (en) * | 1990-10-24 | 1995-03-28 | The Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York | Cloning and expression of biologically active α-galactosidase A |
CA2723664A1 (en) * | 2000-03-22 | 2001-09-27 | Solulink, Incorporated | Hydrazine-based and carbonyl-based bifunctional crosslinking reagents |
JP5137814B2 (ja) * | 2005-04-06 | 2013-02-06 | ジェンザイム・コーポレーション | 治療ターゲティングのための酸不安定リンカーを介するpegおよびポリシアルリソソーム酵素のコンジュゲート |
EP1877101B1 (en) * | 2005-04-28 | 2016-11-16 | Ventana Medical Systems, Inc. | Enzymes conjugated to antibodies via a peg heterobifuctional linker |
EP2046375B1 (en) * | 2006-07-20 | 2017-04-05 | The General Hospital Corporation | Methods and compositions for the selective activation of protoxins through combinatorial targeting |
WO2011041897A1 (en) * | 2009-10-06 | 2011-04-14 | Angiochem Inc. | Compositions and methods for the transport of therapeutic agents |
DK2714752T3 (en) * | 2011-05-27 | 2018-02-26 | Amicus Therapeutics Inc | PROCEDURES FOR THE CONNECTION OF TARGETING PEPTIDES TO RECOMBINANT LYSOSOMAL ENZYMES FOR IMPROVED TREATMENT OF LYSOSOMAL DISPOSAL DISEASES |
RU2014126484A (ru) * | 2011-12-01 | 2016-02-10 | Ангиочем Инк. | Нацеленные соединения лизосомальных ферментов |
ES2804594T3 (es) * | 2013-03-15 | 2021-02-08 | Amicus Therapeutics Inc | Reticuladores químicos |
-
2014
- 2014-03-14 ES ES14764160T patent/ES2804594T3/es active Active
- 2014-03-14 BR BR112015022780A patent/BR112015022780A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-03-14 WO PCT/US2014/027818 patent/WO2014143734A2/en active Application Filing
- 2014-03-14 EP EP14764160.9A patent/EP2976092B1/en active Active
- 2014-03-14 JP JP2016502634A patent/JP6506250B2/ja active Active
- 2014-03-14 US US14/762,647 patent/US9889203B2/en active Active
- 2014-03-14 CA CA2902210A patent/CA2902210C/en active Active
- 2014-03-14 AU AU2014228231A patent/AU2014228231B2/en active Active
- 2014-03-14 WO PCT/US2014/027771 patent/WO2014143701A1/en active Application Filing
- 2014-03-14 MX MX2015012873A patent/MX2015012873A/es unknown
- 2014-03-14 CN CN201480008669.3A patent/CN105189742A/zh active Pending
- 2014-03-14 SG SG11201505936QA patent/SG11201505936QA/en unknown
- 2014-03-14 EP EP20170446.7A patent/EP3714893A1/en not_active Withdrawn
- 2014-03-14 KR KR1020157023763A patent/KR20150132126A/ko not_active Application Discontinuation
-
2015
- 2015-07-29 IL IL240209A patent/IL240209A0/en unknown
- 2015-08-31 ZA ZA2015/06363A patent/ZA201506363B/en unknown
-
2016
- 2016-03-15 HK HK16102953.3A patent/HK1215049A1/zh unknown
-
2018
- 2018-02-08 US US15/891,397 patent/US10814008B2/en active Active
-
2019
- 2019-03-28 JP JP2019063679A patent/JP2019142889A/ja active Pending
- 2019-05-16 AU AU2019203437A patent/AU2019203437A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
US20180185503A1 (en) | 2018-07-05 |
US9889203B2 (en) | 2018-02-13 |
IL240209A0 (en) | 2015-09-24 |
US10814008B2 (en) | 2020-10-27 |
EP2976092A2 (en) | 2016-01-27 |
CA2902210C (en) | 2021-07-20 |
WO2014143701A1 (en) | 2014-09-18 |
MX2015012873A (es) | 2016-02-03 |
AU2014228231A1 (en) | 2015-08-13 |
HK1215049A1 (zh) | 2016-08-12 |
SG11201505936QA (en) | 2015-09-29 |
JP2019142889A (ja) | 2019-08-29 |
EP2976092B1 (en) | 2020-04-22 |
BR112015022780A2 (pt) | 2018-02-06 |
EP2976092A4 (en) | 2016-11-23 |
AU2014228231B2 (en) | 2019-02-21 |
CA2902210A1 (en) | 2014-09-18 |
WO2014143734A3 (en) | 2014-12-04 |
AU2019203437A1 (en) | 2019-06-13 |
CN105189742A (zh) | 2015-12-23 |
US20160129126A1 (en) | 2016-05-12 |
WO2014143734A2 (en) | 2014-09-18 |
ES2804594T3 (es) | 2021-02-08 |
ZA201506363B (en) | 2017-11-29 |
EP3714893A1 (en) | 2020-09-30 |
KR20150132126A (ko) | 2015-11-25 |
JP2016515510A (ja) | 2016-05-30 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6506250B2 (ja) | 化学架橋剤 | |
US10660972B2 (en) | Methods for coupling targeting peptides onto recombinant lysosomal enzymes for improved treatments of lysosomal storage diseases | |
US11377649B2 (en) | Plant lectins as carriers of associated drug substances into animal and human cells | |
JP5871999B2 (ja) | 安定化α−ガラクトシダーゼおよびその使用 | |
WO2014082080A2 (en) | Methods for coupling targeting peptides onto recombinant lysosomal enzymes for improved treatments of lysosomal storage diseases |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20170310 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20180619 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20180919 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190226 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190328 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6506250 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |