JP5006504B2 - フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 - Google Patents
フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 Download PDFInfo
- Publication number
- JP5006504B2 JP5006504B2 JP2003507139A JP2003507139A JP5006504B2 JP 5006504 B2 JP5006504 B2 JP 5006504B2 JP 2003507139 A JP2003507139 A JP 2003507139A JP 2003507139 A JP2003507139 A JP 2003507139A JP 5006504 B2 JP5006504 B2 JP 5006504B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- antibody
- seq
- clot
- deimmunized
- fragment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
- Magnetic Resonance Imaging Apparatus (AREA)
Description
バドツィンスキーら,Blood 54(4): 794-804, 1979。 グレーフとハーファー,「血液中の架橋結合フィブリン誘導体の検出と関連性」、Seminars in Thrombosis and Hemostatis 8(1),1982。
本明細書を通じて、論旨が別意を要求しない限り、語「含む(comprise)」、又はその変化形である「含む(comprises)」若しくは「含む(comprising)」などは、述べられた要素若しくは整数又は要素若しくは整数の群を含むことを意味するが他の如何なる要素若しくは整数又は要素若しくは整数の群を排除することを意味するものではないと解する。
(i) ヒト由来のものと同じものを含む架橋結合フィブリンの誘導体又は抽出物を得る工程、
(ii) 非ヒト動物で該架橋結合フィブリン誘導体に特異的であるが断片Dと交差反応しない抗体を作成する工程、及び
(iii) 該非ヒト由来の抗体を脱免疫化処理する工程
を含む方法を意図する。
(i) MHCクラスII分子と結合できるペプチド配列を予測する工程、及び
(ii) 戦略的な残基を変化させてペプチドのMHCクラスII分子と結合する能力を消失させる工程、
に基づく。
(a) 架橋結合フィブリンの誘導体から又は同じもの若しくはフィブリノゲン分解産物を含む抽出物から選択される抗原で表面をコーティングする工程、
(b) 工程(a)の抗原を、上に記載したように調製したフィブリン架橋結合誘導体から誘導したモノクローナル抗体と接触させる工程、及び
(c) 工程(b)で形成した複合体をシグナル増幅工程にかける工程、
を含む多数の手段により同定しうる。
(1) 架橋結合フィブリン誘導体に特異的であるが断片Dには特異的でないモノクローナル抗体を架橋結合フィブリン誘導体から誘導された抗原を含むか架橋結合フィブリン誘導体自体を含むと思われる生体試料と接触させる工程、及び
(2) 工程(1)で形成した複合体をシグナル増幅工程にかける工程、
を含む連結フィブリン誘導体を検出するための検定法をも含む。
脾臓はD二量体の注射の三日後に頸部転位により殺した2匹の免疫化したマウスから無菌の状態で摘出した。マウスは事前に前述のグレーフとハーファーの引用文献で報告されたようにタンパク質分解酵素トロンビンとプラスミンで消化したフィブリン溶解物を三回注射して免疫化した。この二つの脾臓を5mlの完全培地(85%のRPMI1640、15%w/vのウシ胎児血清、100I.U./mlのペニシリン、100μg/mlのストレプトマイシン及び2×10-3Mのグルタミン。ギブコ、グランドアイランド、ニューヨーク)を含む60mmペトリ皿(ファルコン、3001、オックスナード、カリフォルニア)に入れた。細胞懸濁液は、60℃の角度で最後の1センチを曲げた3mlの使い捨て注射器に接続した2×18ゲージの注射針で膵臓の皮膜を剥離して調製した。この細胞懸濁液を次に22ゲージの注射針に取り付けた10mlの注射器に吸い取り、中程度の圧力で射出した。この操作を2回行なった後、細かいメッシュのステンレススチールのスクリーンを通してファルコン2001管中に細胞を濾過して大き目の細胞の塊及び細胞破砕物を除去した。
選択された各クローン型の2°ウェルの一つを再懸濁し、ウェルごとの生細胞の数をトリパンブルー排除によって測定した。各クローン型を播種する直前に、HT培地又は完全培地(細胞が融合後28日より多く経過している場合)で妥当な一連の希釈を行い、0.5細胞/0.05mlの頻度とした。次にこの容量を、0.1mlのHT培地又は完全培地に1×105正常なマウス脾臓フィーダー細胞を含む96穴平底組織培養プレート(フローラボラトリーズ、ミシサーガ、オンタリオ、カナダ)(LDプレート)の各ウェルにトリダク・ステッパーで添加した。このLDプレートは次いで37℃の加湿した5%CO2、95%空気の雰囲気中に置き、7〜10日後にクローンの増殖をスクリーニングした。陽性の増殖を示した各ウェルから、スクリーニング用に0.1mlの上清を採取し、これらのウェルに初めて0.1〜0.15mlのHT又は完全培地で養分を与えた。このLDスクリーニング検定に基づき、最小限の二つの「より良い」特異的抗体生産性クローンを最終的に大量培養に拡大するために選択した。
96穴U底マイクロテストプレート(ディスポーザブルプロダクツ社、アデレード、サウスオーストラリア)のウェルに50μlのD二量体(5μg/ml)又はフィブリノゲン分解産物(5μg/ml PBS、室温(25℃)中で1時間)を加えて被覆した。過剰な抗原は、プレートを逆さまにしプレートを叩いて除去した。このプレートを次に0.05%w/vのトゥイーン20(シグマケミカル社、セントルイス、ミズーリ)を含むPBSで3回洗浄した。D二量体又はフィブリノゲン分解産物に対するMAbを分泌するクローンは、次いで各ウェルに50μlの組織培養上清を添加し、1時間室温で培養することにより検出した。非結合のMAbはプレートを逆さまにして叩いて除去し、プレートはPBS/トゥイーンで3回洗浄した。PBS/トゥイーンで1000倍希釈したウサギ抗マウス免疫グロブリン(ダコパッツ、コペンハーゲン、デンマーク)に結合したペルオキシダーゼの100μlを添加し、室温で更に1時間インキュベートした。このプレートを再度逆さまにし、PBS/トゥイーンで3回洗浄し、100μlの活性化された基質(使用直前に、50mMのクエン酸、2.5mMの0−トリジン二塩酸塩(0−トリジン、シグマケミカルコーポレーション、希釈HCIから再結晶化)、0.025mMEDTA,pH4.5を含む10mlの基質溶液に3%過酸化水素溶液の10μlを添加)を各ウェルに添加した。青色から黄色への色変化を起こした呈色反応を3MのHCIを50μl添加して10分後に停止させ、吸収はティテルテック・ムルティスカン上で450nmで記録した。
ネズミハイブリドーマ3B6を、15%w/vのウシ胎児血清を補充したRPMI1640培地で増殖させた。総RNAは107ハイブリドーマ細胞から調製した。VH及びVKcDNAは逆転写酵素とマウスκ定常領域プライマー及びマウスIgG定常領域プライマーを用いて調製した。第一鎖のcDNAは、様々なマウスシグナル配列プライマー(VHに対し6セット、VKに対し7セット)を用いて増幅した。この増幅したDNAをゲル精製し、ベクターpGem(登録商標)ティーイージー(プロメガ)中にクローニングした。得られたVHとVKクローンを、予測された大きさの挿入断片についてPCRでスクリーニングし、選択されたクローンのDNA配列をジデオキシチェインターミネーター法で決定した。
3B6VH及びVKの配列は、既に記載された手順(カーら、国際特許公開番号 WO98/52976)を用いて潜在的T細胞エピトープの存在について分析した。潜在的T細胞エピトープとして同定されたペプチド(MHCクラスII結合ペプチド)を、コンピュータ内で改変し、改変された配列が潜在的MHCクラスII結合の喪失していることを確実にするためそして更なるMHCクラスII結合モチーフが周囲の配列で形成されなかったことを検証するために再分析した。またこの配列を、MHCクラスII結合モチーフをヒト生殖細胞系列で見られるモチーフに変換するよう改変した。単一の概して保存性のアミノ酸置換基を試し、全体的な抗体構造に注意を払って置換した。多数の様々な配列が、それぞれが異なった数の置換基を含むVH及びVK用にコンパイルされる。
実施例5のスキームに従って設計された重及び軽(v)領域は、(ドーアティら,Nucleic Acids Research 19: 2471-2476, 1991)に記載の重複PCR組換え法によりインビトロで構築した。クローニングしたネズミVH及びVK遺伝子を、フレームワーク領域を所望のヒト化配列へ突然変異誘発させるためのテンプレートとして用いた。変異原性プライマーの対の組みを、改変対象の領域を覆うように合成した。隣接するプライマーは15bpの同族配列を含んでいた。これらのプライマーを用いた1回目のPCRは、所望の(v)領域遺伝子を包含する5〜8個の重複するDNA断片を形成した。鋳型としてベクターVH−PCR1及びVK−PCR1(オーランディら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 3833-3837, 1989)を用いて、リーダーシグナルペプチド、リーダーイントロン及びネズミ免疫グロブリンプロモーターを含む5’フランキング配列、及び、スプライス部位及びイントロン配列を含む3’フランキング配列、並びに更に二つの重複する断片を導入した。生産されたこれらのDNA断片を、外側に隣接するプライマーを用いた2回目のPCRで結合させて所望の全長PCR産物を得た。DNA配列決定のためこれらのPCR産物をベクターpUC19にクローニングした。予測した配列改変を含むクローンを選択し、DNA配列全体がそれぞれ正確に所望のVH及びVKであることを確認した。重鎖及び軽鎖遺伝子を、(Tempestら,Biotechnology 9: 266-271, 1991)に記載のようにヒトIgG1又はκ定常領域を有する発現ベクターpSVgpt及びpSVhygに転位させた。ベクターVH−PCR1及びVK−PCR1(オーランディら,1989, 上記)をテンプレートとして用いて、リーダーシグナルペプチド、リーダーイントロン及びネズミ免疫グロブリンプロモーターを含む5’フランキング配列、並びにスプライス部位及びイントロン部位を含む3’フランキング配列を導入した。
3B6変異体の重鎖並びに軽鎖発現ベクターを、NS0、即ち非免疫グロブリンを生産するマウス骨髄腫(ヨーロピアンコレクションオブアニマルセルカルチャー、ポートン、英国(ECACCNo85110505)から得られる)中に電気穿孔法により異なる組み合わせで共トランスフェクトさせた。gpt遺伝子を発現するコロニーを、0.8μg/mlのミコフェノール酸及び250μg/mlのキサンチンを補充したダルベッコの改変イーグル培地(DMEM)中で選択した。トランスフェクトした細胞クローンによるヒト抗体の生産はヒトIgG(48)についてELISAで測定した。抗体を分泌する細胞株を選択して増殖させた。3B6抗体変異体はProsep(登録商標)−A(バイオプロセシング社、コンセット、英国)を用いて精製した。
抗体変異体は、実施例3に大まかに記載したELISA系検定を用いてD二量体結合をテストした。結合特異性はヒトフィブリノゲン結合検定を用いて確認した。しかしながら、好ましい実施態様では、D二量体は液相で用いた。この検定では、溶液中のD二量体を捕捉するために3B6抗体をELISAプレート上に0.5μg/ウェルで被覆した。D二量体は10μg/ml(500ng/ウェル)で及び2倍の希釈で適用した。表れた抗体はHRPO結合マウスモノクローナル抗D(ダイマーテストEIAタグ、エイジェン社)であった、その結果物はOPD基質で発色させ、492nmで読み取った。脱免疫化3B6抗体をネズミ及びキメラ3B6抗体、及び前述の脱免疫化抗体3B6DIVH1/DIVK1と比較する。その結果は図4A、4B及び4Cに示す。液相D二量体の使用はクローンの選択という点で固相D二量体よりも良好であることが分かった。液相D二量体の使用は本発明の好ましい側面である。
マウス由来の3B6モノクローナル抗体及びヒト用の脱免疫化形は図1Aに示すが、これは血塊の主要部分であるフィブリンに対し特異性を示す(図1B)。血塊造影の概念は3B6モノクローナル抗体を核標識、この場合は99mTcで標識することににり展開される(図2)。ヒトにおける標識化した3B6脱免疫化モノクローナル抗体の投与(図3A)。前大腿における血塊などの循環系における塊の可視化(図3B)は、フィブリンにモノクローナル抗体が結合しその結果血塊部位で照射の集中が生ずることにより発生する。
大腿の血管内に入れたバルーンカテーテルを通してトロンビンとヒトフィブリノゲンを注入することにより予め形成させた血栓を塞栓形成術により、麻酔したイヌの中に肺塞栓(0.1〜0.5g)を形成させた。フィブリンに特異的なモノクローナル抗体のキメラ(ヒト/マウス)誘導体の精製したFab’断片(0.35mg)を、15mCiの 99mTcで標識化した。塞栓形成の1時間後に、放射標識した抗体標品を抹消静脈カテーテルを通して注入した。抗体の注入の8時間後に、画像形成走査を行い、塞栓を可視化した。
1. アダムスら、Cancer Res. 53: 4026-4034, 1993
2. アルチュールら、Nucl. Acids Res. 25: 3389-3402, 1997
3. アウスベルら、"Current Protocols in Molecular Biology"15章,John Wiley & Sons Inc, 1994-1998
4. ブジンスキーら、Blood 54(4), 1979
5. カーら、(国際特許公開番号 WO98/52976)
6. コーシアら、J. Mol. Biol. 196: 901, 1987
7. コーシアら、J. Mol. Biol. 227: 799, 1992
8. シューら、(米国特許第6,056,957)
9. コリガンら、Current Protocols in Immunology, John Wiley & Sons, Inc., 1991-1997
10. カンバーら、J. Immunol. 149: 120-126, 1992
11. ドーアティら、Nucleic Acids Research 19: 2471-2476, 1991
12. デイヴィーズとリーヒマン、FEBS Lett. 339: 285-290, 1994
13. ヨーロッパ特許公開第0239400
14. ゲフターら、Somatic Cell Genet. 3: 231-236, 1977
15. グロックシューバーら、Biochem. 29: 1363-1367, 1990
16. グレーフとハーファー、「血液中の架橋結合フィブリン誘導体の検出と関連性」、Seminars in Thrombosis and Hemostatis 8(1), 1982
17. ハマーズ−キャスターマンら、Nature 363: 446-448, 1993
18. ジョーンズら、Nature 321: 522-525
19. カバットら、"Sequences of Proteins of Immunological Interest",U.S.ディパートメントオブヘルスアンドヒューマンサービス, 1983
20. ケネットら(編)Monoclonal Antibodies and Hybridomas: A New Dimension in Biological Analyses, 376-384,プレナムプレス、ニューヨーク、1980
21. ケーラーとミルシュタイン、Eur. J. Immunol. 6(7): 511-519, 1976
22. ケーラーとミルシュタイン、Nature 256: 495-499, 1975
23. コステルニーら、J. Immunol. 148: 1547-1553: 1992
24. コズボーら、Methods in Enzymology 121: 140, 1986
25. クレベルら、J. Immunol. Methods 201(1): 35-55, 1997
26. クーとシュッツ、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 92: 6552-6556, 1995
27. リューら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 84: 3439-3443, 1987
28. モーガンら(米国特許第6,180,377)
29. オーランディら、Proc. Natl. Acad. Sci. USA 86: 3833-3837, 1989
30. プリュックサンら、Antibody engineering: A practical approach内 203-252, 1996
31. プリュックサン、Biochem. 31: 1579-1584, 1992
32. クィーンら(米国特許第6,180,370)
33. ライターら、Biochem 33: 5451-5459, 1994
34. ライターら、Cancer Res. 54: 2714-2718, 1994
35. ライターら、J. Biol. Chem. 269: 18327-18331, 1994
36. ライヒマンら、Nature 332: 323-327, 1998
37. シャルマンら、Nature 276: 269-270, 1978
38. テンペストら、Biotechnology 9: 266-271, 1991
39. トーヤマら、"Monoclonal Antibody, Experiment Manual", コーダンシャサイエンティフィックより出版, 1987
40. トローブリッジ、J. Exp. Med. 148(1): 313-323, 1978
41. バーホイェンら、Science 239: 1534-1536, 1988
42. フォルクら、J. Virol. 42(1): 220-227, 1982
43. ウォードら、Nature 341: 544-546, 1989
44. ウェバーら、Mol. Immunol. 32: 249-258, 1995
45. ウィルナーら、Biochemistry 21: 2687-2692, 1982
46. ウィンターとミルシュタイン、Nature 349: 293, 1991
Claims (19)
- 架橋結合したフィブリンを認識するがフィブリノゲンを認識しないヒトD二量体上のエピトープに特異的な脱免疫化抗体または脱免疫化抗体断片あって、
該抗体または抗体断片の可変(v)領域のぺプチド断片とMHCクラスII分子との結合を消失し又は減少させるように、該v領域のアミノ酸残基の一つ以上が突然変異されており、かつ
前記抗体または抗体断片は、配列番号:1/配列番号:4、配列番号:2/配列番号:4、配列番号:3/配列番号:4、配列番号:1/配列番号:6、配列番号:2/配列番号:6、配列番号:2/配列番号:5、配列番号:3/配列番号:5、配列番号:3/配列番号:6、および配列番号:1/配列番号:5からなる群から選択されるアミノ酸配列の組合せを含む重(H)鎖v領域及び軽(L)鎖v領域の組み合せを含む、脱免疫化抗体または脱免疫化抗体断片。 - 前記抗体または抗体断片が、抗フィブリンネズミモノクローナル抗体3B6により認識されるエピトープに特異的である、請求項1記載の抗体または抗体断片。
- ヒト患者における血塊を検出するための造影剤の製造のためのレポーター分子で標識された、請求項1または2記載の抗体または抗体断片の使用。
- 前記レポーター分子が核標識である、請求項3記載の使用。
- 前記核標識が 99mTc、18F、64Cu、67Ga、68Ga、77Br、97Ru、 111In、 123I、 124I、 131I、または188Reである、請求項4記載の使用。
- 前記核標識が99mTcである、請求項5記載の使用。
- ヒトにおいて血塊の溶解、成長防止、または除去を促進するための薬剤の製造のための請求項1または2記載の抗体または抗体断片の使用であって、該抗体が、該抗体に融合若しくは結合した血塊溶解物質または血塊成長阻止物質をさらに含む、使用。
- 請求項1または2記載の抗体または抗体断片、ならびに画像形成標識および/または治療用物質の一方又は両方を含む、抱合体(conjugate)。
- 前記画像形成標識が、MRI型標識、超音波型標識、CT型標識、又は (ガンマカメラシンチグラフィおよびPETを含む)核医学型標識である、請求項8記載の抱合体。
- 前記画像形成標識が、99mTc、18F、64Cu、67Ga、68Ga、77Br、97Ru、 111In、 123I、 124I、 131I、および188Reからなる群から選択される、請求項9記載の抱合体。
- 前記画像形成標識が 99mTcである、請求項10記載の抱合体。
- 前記治療用物質が抗凝血性物質またはサイトカインである、請求項8記載の抱合体。
- 請求項1または2記載の抗体または抗体断片であって、該抗体は、ヒト患者における血塊を検出するためのイン・ビボでの使用のためのレポーター分子で標識され、標識された抗体の前記患者への導入に基づき、該標識された抗体が循環系全体に拡散され、該患者は前記血塊を可視化するための造影手段にかけられる、抗体または抗体断片。
- 前記造影手段が、MRI、CTスキャン、超音波、またはガンマカメラシンチグラフィもしくはPETを含むコンピュータ支援断層撮影核医学スキャンである、請求項13記載の抗体または抗体断片。
- 前記レポーター分子が核標識である、請求項13記載の抗体または抗体断片。
- 前記核標識が 99mTc、18F、64Cu、67Ga、68Ga、77Br、97Ru、 111In、 123I、 124I、 131I、または188Reである、請求項15記載の抗体または抗体断片。
- 前記核標識が99mTcである、請求項16記載の抗体または抗体断片。
- ヒトにおいて血塊の溶解、成長防止、または除去を促進するためのイン・ビボでの使用のための請求項1または2記載の抗体または抗体断片であって、該抗体が、該抗体に融合若しくは結合した血塊溶解物質または血塊成長阻止物質をさらに含む、抗体または抗体断片。
- 前記造影手段が、平面またはコンピュータ支援断層撮影核医学スキャンである、請求項13および15〜17のいずれか一項記載の抗体または抗体断片。
Applications Claiming Priority (5)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US30115401P | 2001-06-26 | 2001-06-26 | |
US60/301,154 | 2001-06-26 | ||
US30094701P | 2001-06-27 | 2001-06-27 | |
US60/300,947 | 2001-06-27 | ||
PCT/AU2002/000827 WO2003000736A1 (en) | 2001-06-26 | 2002-06-26 | Humanized antibodies derived from dd-3b6/22, specific for the d-dimer fragment of fibrin |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009067335A Division JP2009149686A (ja) | 2001-06-26 | 2009-03-19 | フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2005502610A JP2005502610A (ja) | 2005-01-27 |
JP5006504B2 true JP5006504B2 (ja) | 2012-08-22 |
Family
ID=26972062
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2003507139A Expired - Fee Related JP5006504B2 (ja) | 2001-06-26 | 2002-06-26 | フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 |
JP2009067335A Pending JP2009149686A (ja) | 2001-06-26 | 2009-03-19 | フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009067335A Pending JP2009149686A (ja) | 2001-06-26 | 2009-03-19 | フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 |
Country Status (12)
Country | Link |
---|---|
US (4) | US7087724B2 (ja) |
EP (1) | EP1412388B1 (ja) |
JP (2) | JP5006504B2 (ja) |
CN (2) | CN1531554A (ja) |
AT (1) | ATE502050T1 (ja) |
AU (1) | AU2002318960B2 (ja) |
BR (1) | BR0210648A (ja) |
CA (1) | CA2450828C (ja) |
DE (1) | DE60239467D1 (ja) |
MX (1) | MXPA03012030A (ja) |
NZ (1) | NZ530122A (ja) |
WO (1) | WO2003000736A1 (ja) |
Families Citing this family (18)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US7087724B2 (en) * | 2001-06-26 | 2006-08-08 | Agen Biomedical Ltd | Carrier molecules |
KR100842121B1 (ko) * | 2004-02-09 | 2008-07-01 | (주)바이오버드 | D-다이머에 대한 단일클론 항체와 이를 이용한 d-다이머및 교차결합성 피브린 또는 이를 포함하는 피브린 분해물검사용 진단시약 |
JP4471867B2 (ja) * | 2005-02-25 | 2010-06-02 | シスメックス株式会社 | Dダイマー測定用標準物質 |
EP1917532A4 (en) * | 2005-07-29 | 2009-10-21 | Biobud Co Ltd | ANTI-D-DIMER MONOCLONAL ANTIBODY AS A DIAGNOSTIC AGENT FOR DETECTING D-DIMER, RETICULATED FIBRIN AND ITS DERIVATIVES CONTAINING D-DIMERS |
US20080280310A1 (en) * | 2007-05-09 | 2008-11-13 | Louis Panagopoulos | Testing for Blood Group Immunological Reaction Without the Use of Anti-Human Globulin |
WO2009014835A2 (en) * | 2007-06-21 | 2009-01-29 | Angelica Therapeutics, Inc. | Modified toxins |
AU2008287427B2 (en) * | 2007-08-13 | 2014-10-09 | Vasgene Therapeutics, Inc. | Cancer treatment using humanized antibodies that bind to EphB4 |
US8470314B2 (en) * | 2008-02-29 | 2013-06-25 | Angelica Therapeutics, Inc. | Modified toxins |
US20100143890A1 (en) * | 2008-12-08 | 2010-06-10 | Electronics And Telecommunications Research Institute | Peptide compounds for capturing or inhibiting avian influenza virus and application thereof |
JP2012000072A (ja) * | 2010-06-18 | 2012-01-05 | Japan Health Science Foundation | 新規な抗フィブリン抗体 |
EP3339327A3 (en) | 2013-02-28 | 2018-09-19 | National Cancer Center | Antibody against insoluble fibrin |
EP2968450A4 (en) | 2013-03-15 | 2016-10-26 | Angelica Therapeutics Inc | MODIFIED TOXINS |
CN103468644B (zh) * | 2013-09-26 | 2016-01-20 | 重庆探生科技有限公司 | 产生抗人d-二聚体的单克隆抗体的杂交瘤细胞株及制备方法和应用 |
CN104062436B (zh) * | 2014-06-06 | 2016-02-10 | 上海良润生物医药科技有限公司 | Fxyd在制备诊断和预示肺癌标志物中的应用及fxyd双抗夹心elisa检测试剂盒 |
US11311626B2 (en) | 2017-05-02 | 2022-04-26 | National Cancer Center Japan | Plasmin-cleavable anti-insoluble fibrin antibody-drug conjugate |
CN109053893B (zh) * | 2018-08-15 | 2021-03-30 | 智享生物(苏州)有限公司 | 一种抗d-二聚体单克隆抗体及其制备方法 |
CN112851818B (zh) * | 2019-11-28 | 2022-12-27 | 东莞市朋志生物科技有限公司 | 针对d-二聚体的结合蛋白及其应用和检测d-二聚体的方法 |
WO2022159776A1 (en) * | 2021-01-21 | 2022-07-28 | Therini Bio, Inc. | Antibodies which bind human fibrin and methods of use |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
AU572125B2 (en) | 1983-03-17 | 1988-05-05 | Mabco Limited | Monoclonal antibodies with specificity for crosslinked fibrin and their diagnotic uses |
GB8607679D0 (en) | 1986-03-27 | 1986-04-30 | Winter G P | Recombinant dna product |
US4946778A (en) * | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5091513A (en) * | 1987-05-21 | 1992-02-25 | Creative Biomolecules, Inc. | Biosynthetic antibody binding sites |
IE67430B1 (en) * | 1988-06-24 | 1996-04-03 | Res Corp Technologies Inc | Assay for soluble crosslinked fibrin polymers |
US5530101A (en) * | 1988-12-28 | 1996-06-25 | Protein Design Labs, Inc. | Humanized immunoglobulins |
EP0489061A4 (en) | 1989-08-24 | 1992-10-14 | Australian Nuclear Science And Technology Organisation | Radio-labelled antibodies for imaging |
US5859205A (en) * | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
EP0668875A4 (en) * | 1992-10-12 | 1999-05-26 | Agen Ltd | ANTI-COAGULAR AGENT ON BLOOD CLOTH, METHOD FOR PRODUCING THE SAME AND ITS USE. |
EP0627932B1 (en) * | 1992-11-04 | 2002-05-08 | City Of Hope | Antibody construct |
US6180377B1 (en) * | 1993-06-16 | 2001-01-30 | Celltech Therapeutics Limited | Humanized antibodies |
US6056957A (en) * | 1994-08-04 | 2000-05-02 | Schering Corporation | Humanized monoclonal antibodies against human interleukin-5 |
JP3889084B2 (ja) * | 1996-05-15 | 2007-03-07 | 株式会社三菱化学ヤトロン | 新規なモノクローナル抗体並びにe−Dダイマー及びe−DD/E複合体の免疫学的測定法 |
JP2002512624A (ja) * | 1997-05-21 | 2002-04-23 | バイオベーション リミテッド | 非免疫原性タンパク質の製造方法 |
AU776910B2 (en) | 1998-12-08 | 2004-09-23 | Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung | Modifying protein immunogenicity |
US7087724B2 (en) * | 2001-06-26 | 2006-08-08 | Agen Biomedical Ltd | Carrier molecules |
-
2002
- 2002-06-26 US US10/184,300 patent/US7087724B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-06-26 WO PCT/AU2002/000827 patent/WO2003000736A1/en active Application Filing
- 2002-06-26 JP JP2003507139A patent/JP5006504B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2002-06-26 CN CNA028128753A patent/CN1531554A/zh active Pending
- 2002-06-26 MX MXPA03012030A patent/MXPA03012030A/es not_active Application Discontinuation
- 2002-06-26 NZ NZ530122A patent/NZ530122A/en not_active IP Right Cessation
- 2002-06-26 CA CA2450828A patent/CA2450828C/en not_active Expired - Fee Related
- 2002-06-26 AT AT02748417T patent/ATE502050T1/de not_active IP Right Cessation
- 2002-06-26 CN CN2011100552408A patent/CN102206276B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2002-06-26 BR BR0210648-5A patent/BR0210648A/pt not_active IP Right Cessation
- 2002-06-26 DE DE60239467T patent/DE60239467D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-26 EP EP02748417A patent/EP1412388B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2002-06-26 AU AU2002318960A patent/AU2002318960B2/en not_active Ceased
-
2006
- 2006-05-10 US US11/432,223 patent/US7459143B2/en not_active Expired - Fee Related
-
2008
- 2008-09-02 US US12/231,381 patent/US20090092546A1/en not_active Abandoned
-
2009
- 2009-03-19 JP JP2009067335A patent/JP2009149686A/ja active Pending
-
2010
- 2010-01-15 US US12/657,255 patent/US20100286375A1/en not_active Abandoned
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CA2450828A1 (en) | 2003-01-03 |
US20090092546A1 (en) | 2009-04-09 |
MXPA03012030A (es) | 2005-07-01 |
NZ530122A (en) | 2008-03-28 |
CA2450828C (en) | 2013-11-26 |
US7459143B2 (en) | 2008-12-02 |
EP1412388A1 (en) | 2004-04-28 |
CN102206276B (zh) | 2013-07-17 |
CN102206276A (zh) | 2011-10-05 |
DE60239467D1 (de) | 2011-04-28 |
AU2002318960B2 (en) | 2008-05-15 |
US20100286375A1 (en) | 2010-11-11 |
BR0210648A (pt) | 2004-10-05 |
US20060239912A1 (en) | 2006-10-26 |
US20030124056A1 (en) | 2003-07-03 |
EP1412388B1 (en) | 2011-03-16 |
US7087724B2 (en) | 2006-08-08 |
EP1412388A4 (en) | 2006-08-09 |
ATE502050T1 (de) | 2011-04-15 |
CN1531554A (zh) | 2004-09-22 |
JP2005502610A (ja) | 2005-01-27 |
WO2003000736A1 (en) | 2003-01-03 |
JP2009149686A (ja) | 2009-07-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2009149686A (ja) | フィブリンのd二量体断片に特異的なdd−3b6/22から誘導されるヒト化抗体 | |
RU2112037C1 (ru) | Гибридное моноклональное антитело, взаимодействующее с cd4-антигеном т-хелперных клеток человека, и способ его получения | |
JP3492373B2 (ja) | モノクローナル抗体 | |
CA2210751C (en) | Anti-cd6 monoclonal antibodies and their uses | |
JP3925663B2 (ja) | 抗Fasリガンド抗体および該抗体を用いた測定法 | |
RU2588668C2 (ru) | ПЕПТИД ИЛИ ПЕПТИДНЫЙ КОМПЛЕКС, СВЯЗЫВАЮЩИЙСЯ С альфа2-ИНТЕГРИНОМ, СПОСОБЫ ЕГО ПОЛУЧЕНИЯ И ПРИМЕНЕНИЯ УКАЗАННОГО ВЕЩЕСТВА | |
JP2009183303A (ja) | Icam−1に対するヒト化抗体、それらの生成および使用 | |
MX2010011955A (es) | Inmunoglobulinas de dominio variable doble y usos de las mismas. | |
JP2935520B2 (ja) | ガン治療に用いられる新規高親和性改変抗体系統群 | |
JP2009268470A (ja) | 抗体分子を用いての腫瘍脈管系の選択的標的化 | |
BRPI0822556B1 (pt) | Anticorpo monoclonal anti-vegf e composição farmacêutica | |
JP7076082B2 (ja) | 新規な抗ヒトgpvi抗体およびその使用 | |
KR19990028638A (ko) | 항-Fas 리간드 항체 및 이 항체를 이용한 측정법 | |
AU2002318960A1 (en) | Humanized antibodies derived from DD-3B6/22, specific for the D-dimer fragment of fibrin | |
JP2019510474A (ja) | トロンビン抗体、その抗原結合フラグメント及び医薬用途 | |
JPS6312297A (ja) | ヒトインタ−ロイキン−2−リセプタ−を認識するモノクロ−ナル抗体 | |
JPWO2004029242A1 (ja) | フォンビルブランド因子特異的切断酵素に対する抗体及びそれを用いたアッセイ系 | |
JP2022513481A (ja) | 抗アルファ-シヌクレイン抗体およびその使用 | |
AU766149B2 (en) | Variants of humanized anti-carcinoma monoclonal antibody CC49 | |
JP2024514855A (ja) | Dll3に対する結合分子及びその使用 | |
JP4059404B2 (ja) | 甲状腺機能を刺激する活性を持つ抗体 | |
TW202039582A (zh) | 抗EpCAM抗體及其應用 | |
JP2792651B2 (ja) | ヒト膵臓癌に対するモノクローナル抗体 | |
JP7337922B2 (ja) | アミロイド沈着物を撮像するための方法および組成物 | |
JP7299209B2 (ja) | 癌治療において壊死を標的とするヒト化抗核抗体 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20050615 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20060227 |
|
RD02 | Notification of acceptance of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7422 Effective date: 20060227 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20060302 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060405 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080229 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20080530 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080625 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20080924 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20081001 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20081024 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20081119 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090515 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20090515 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120227 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20120409 |
|
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20120525 |
|
FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20150601 Year of fee payment: 3 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |