JP4894015B2 - 爆砕発酵処理バガスの製造方法 - Google Patents
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Description
アスペルギルス・ソーヤ(Aspergillus sojae)NFRI1147株をポテトデキストロース寒天培地(日水)にて十分に生育させ、胞子形成をさせた後、その胞子を0.1%Tween80を含む0.9%食塩水にけん濁し、この胞子液を、ポテトデキストロース寒天培地(日水)に塗沫した。25℃にて2〜3日間静置培養して独立したコロニーを形成させ、約500個のコロニーから生育速度が速かった株12株を分離した。分離株をバガス-小麦フスマ培地(爆砕バガス5g、小麦フスマ5g、蛎殻カルシウム5mg、脱イオン水50mL)に接種して、25℃にて3〜10日間培養した後、0.05M酢酸緩衝液(pH5)を加えて培養物をよく抽出し、No5濾紙(ADVANTEC社製)によって濾過して、抽出液を得た。抽出液のキシナラーゼ活性を測定し、キシラナーゼ活性値が高い自然変異株1147−9株を選択した。さらに1147−9株をもとにして、同様に2回目の単胞子分離操作を繰り返し、同様に成育の早い株12株を得た。これらを同様にバガス-小麦フスマ培地にて培養し、キシラナーゼ活性を測定した。最も活性の高い株は、単胞子分離する前の0.254U/mg蛋白から0.453U/mg蛋白に上昇した。得られた最も活性値の高い株を1147−9−6株とした。なお、NFRI1147株は独立行政法人食品総合研究所において保管されており、一定の条件下で第三者に分譲される。
乾燥バガス粉砕機を用いて平均粒径3.5mmの長さに粗粉砕し、反応釜(オートクレーブ)内に収容した後、反応釜に加熱水蒸気を送り込み、2.5Mpa(220℃),70秒間の蒸煮処理を行った後、反応釜から急激に水蒸気を排出し、圧力を瞬時に大気圧にまで戻すことにより爆砕処理を行った。この蒸煮爆砕処理を行ったバガス35kgに小麦フスマ15kgを混合し、水50Lを加水して水分が約50重量%となるように調整した後、単胞子分離により選択した麹菌を接種し、30℃、6日間培養して麹を製造した。
この製麹した麹を水70Lに分散し、麹の製造で用いた爆砕処理したバガス300kgに混合した。そして、水分が全体の50重量%となるように加水し調整した後、30℃、60時間の発酵処理した後、80〜100℃の蒸気に30分間暴露して発酵停止処理を行った。この発酵処理物をディスク型乾燥機(月島機械社製)を用い、乾燥温度80〜100℃(品温)で乾燥した後、微粉砕処理をして、平均粒径250μmの爆砕発酵処理バガスとした。この爆砕発酵処理バガスの栄養組成を表1に示す。
爆砕発酵処理バガスの抗酸化活性を調べるために、DPPHラジカル消去法を実施した。この試験には、爆砕発酵処理バガスの熱水抽出液と80%エタノール抽出液を供試サンプルとした。熱水抽出は、爆砕発酵処理バガス2gを25mlの80℃の熱水で20分間静置抽出し、No.5濾紙(ADVANTEC社製)を用いて濾過した。この操作を2回繰り返し、50mlに調整(fill up)し、供試サンプルとした。また、80%エタノール抽出は、爆砕発酵処理バガス1gを10倍量の80%エタノールで12時間間静置抽出し、No.5濾紙を用いて濾過した。この操作を2回繰り返した後、遠心エバポレーターを用いて蒸発乾固し、これを80%エタノールにて1mg/mlに調整し、供試サンプルとした。
得られた爆砕発酵処理バガスを70%アセトン水で抽出後、分液フラスコにて、n−ヘキサンと水で抽出した。この水層をさらに、酢酸エチルと水で抽出した。この得られた酢酸エチル抽出物に抗酸化性が認められた。分画の手順を図3に示す。また、主な画分の抗酸化活性を図4に示した。なお、抗酸化性の測定には、前述のDPPHラジカル消去法を用いた。
爆砕発酵処理バガス及び対照としての特許文献2記載の爆砕酵素処理バガスにおけるパラヒドロキシ安息香酸(pHBA)とフェルラ酸の含量を調べた。粉砕したサンプルを1g精秤し、80%メタノールを25ml添加し、磨砕抽出した。その後、8000rpm、15分間遠心分離後、上澄みを得た。この工程を2回繰り返し50mlにFill upし、0.45μmのフィルターにてろ過した。その後、HPLC(ODSカラム(野村科学社製)検出波長280nm)にて分析した。図5に示すように、パラヒドロキシ安息香酸(pHBA)含量には差が見られなかったが、フェルラ酸含量は、本発明の爆砕発酵処理バガスの方が、対照の爆砕酵素処理バガスに比べて約3倍多く、100gあたり1.25mgを含んでいた。
Claims (11)
- バガスを蒸煮爆砕処理し、この蒸煮爆砕処理バガスに発酵基質を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、麹菌により製麹し、得られた麹に加水し、麹が水に分散した麹分散液に前記蒸煮爆砕処理バガスを、製麹に用いた前記蒸煮爆砕処理バガスの5〜10倍量を混合し、この混合物の水分含量を調整した後、発酵することを特徴とする爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 蒸煮爆砕処理が、2.0〜3.0Mpaの条件下で行われることを特徴とする請求項1記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- バガスをあらかじめ粉砕処理した後、蒸煮爆砕処理を行うことを特徴とする請求項1又は2記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 発酵基質として、小麦フスマを用いることを特徴とする請求項1〜3のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 蒸煮爆砕処理バガスと発酵基質の混合物に、等量の加水を行い、水分含量を調整することを特徴とする請求項1〜4のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 麹菌として、アスペルギルス・ソーヤ(NFRI1147)から単胞子分離を実施して得られるキシラナーゼ活性の高い麹菌を用いることを特徴とする請求項1〜5のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 麹分散液に蒸煮爆砕処理バガスを混合し、この混合物の水分含量を約50%に調整することを特徴とする請求項1〜6のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- さらに、カルシウム含有化合物を添加し、pHを4.0〜6.9に調整することを特徴とする請求項7記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 48〜72時間発酵した後、発酵停止処理を実施することを特徴とする請求項1〜8のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 爆砕発酵処理食物繊維が、乾燥微粉末の形態であることを特徴とする請求項1〜9のいずれか記載の爆砕発酵処理食物繊維の製造方法。
- 食物繊維を50重量%以上含有し、キシロビオースとキシロトリオースを0.5%以上含有し、100g中にフェルラ酸を1mg以上含有するバガスの爆砕発酵処理食物繊維。
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