JP4855237B2 - 顕微鏡画像処理装置および顕微鏡画像処理プログラム - Google Patents
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Description
図1において、蛍光顕微鏡1は、対物レンズ6、蛍光キューブ5、落射光源4、鏡筒28、撮像装置3を備え、ステージ(試料台)13上の標本2の観察像を目視観察可能にするとともに、観察光路a1に沿って外部に導出可能にしている。観察光路a1上には、蛍光顕微鏡1からの観察像が投影される位置に、撮像装置3が配置されている。
図2は、蛍光キューブ5の一例を示す図である。
しかしながら、上述のような技術では、蛍光顕微鏡1の換作者が視覚によって認識できるのみであり、PC8等に搭載される撮像システムへの情報入力は、別途行わなければならないという問題点があった。
すなわち、本発明の一態様によれば、本発明の顕微鏡画像処理装置は、蛍光顕微鏡によって観察するための観察像を処理する顕微鏡画像処理装置であって、試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子の中から、任意の光学素子を前記蛍光の光路上に切り替え可能に配置する光学素子切替手段と、前記光学素子切替手段によって配置された光学素子を介して前記観察像を撮像するための撮像手段と、前記撮像手段によって撮像された観察像に基づいて、前記光学素子切替手段によって配置された光学素子の種類を判断する光学素子判断手段と、前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類に基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定する擬似カラー設定手段と、試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子に関する情報を格納する光学素子情報格納手段と、前記光学素子情報格納手段を参照することにより前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類を特定する光学素子特定手段と、複数の蛍光色素に関する情報を格納する蛍光色素情報格納手段と、蛍光色素を識別するための蛍光色素識別情報を入力する蛍光色素識別情報入力手段と、前記蛍光色素情報格納手段を参照することにより前記蛍光色素識別情報入力手段によって入力された蛍光色素識別情報の蛍光色素を特定する蛍光色素特定手段と、を備え、前記擬似カラー設定手段は、前記蛍光色素特定手段によって特定された蛍光色素に対応する蛍光色素特性と光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類とに基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定することを特徴とする。
また、本発明によれば、特定された光学素子の特性に基づいて、特定した光学素子に対応した擬似カラーを自動的に設定することができる。
(第1の実施の形態)
図3は、本発明を適用した第1の実施の形態の蛍光顕微鏡撮像システムを示す図である。
図4は、バンドパスフィルタ9B、ダイクロイックミラー10B、および吸収フィルタ11Bの青色成分の分光特性を示す図であり、図5は、バンドパスフィルタ9G、ダイクロイックミラー10G、および吸収フィルタ11Gの緑色成分の分光特性を示す図であり、図6は、バンドパスフィルタ9R、ダイクロイックミラー10R、および吸収フィルタ11Rの赤色成分の分光特性を示す図である。
以上のような初期化を行ったうえで、蛍光顕微鏡1の操作者は、モニタ12上のターレット操作部および撮像装置操作部を介して、蛍光顕微鏡1による観察および顕微鏡撮像システムによる画像の取得を行う。
(第1の実施の形態の変形例1)
蛍光顕微鏡撮像システムでは、蛍光キューブ5ごとに撮影した画像を、重ねあわせて表示することがある。このため前述の蛍光キューブ5の判別結果に応じて、各蛍光キューブ5に対応した擬似カラーを設定する。各蛍光キューブ5ごとに撮影した画像を、設定した擬似カラーで表示し、重ね合わせを行う。
(第1の実施の形態の変形例2)
前述の第1の実施の形態では、ターレット7をPC100からの操作としたが、手動で切り替える構成とすることも可能である。
(第2の実施の形態)
図7は、本発明を適用した第2の実施の形態の蛍光顕微鏡撮像システムを示す図である。
(第2の実施の形態の変形例1)
図8は、本発明を適用した第2の実施の形態の変形例1の蛍光顕微鏡撮像システムを示す図である。
例えば、ステージ13上などに取り外し可能に補助光源15aを配置したり、対物レンズレボルバの対物レンズ6と対物レンズ6の間に補助光源15bを配置し、初期化時は対物レンズレボルバを補助光源15bの位置に移動したりするなどしてもよい。
このようにしても上述の第2の実施の形態と同様の効果を得ることができる。
(第2の実施の形態の変形例2)
顕微鏡撮像システムを実装したパーソナルコンピュータ等のPC300上のメモリに、透過照明光源14または補助光源15の分光特性、撮像装置3の分光感度、複数の蛍光キューブ5の分光特性を記憶させ、蛍光キューブ5ごとに撮像装置3で撮像される画像の推測値を保持しておく。そして、初期化時に各蛍光キューブ5ごとに撮影された画像データと、推測値を比較し、蛍光キューブ5を推定する。
(第2の実施の形態の変形例3)
上述の変形例2に加えて、観察している蛍光色素の分光特性をPC300へ入力できるようにしておく。入力された蛍光色素の分光特性と吸収フィルタ11の分光特性から、蛍光自体の色を計算で求め、その色を蛍光キューブ5に対応した擬似カラーに設定する。
(第3の実施の形態)
図9は、本発明を適用した第3の実施の形態の蛍光顕微鏡撮像システムを示す図である。
そして、操作者はパーソナルコンピュータ等のPC400を操作し、モニタ27を有するPC400に実装される顕微鏡撮像システムからの指示に従ったコントローラ25によって、ステージ18、透過照明光源19、落射照明光源20、複数の対物レンズ21を搭載した対物レンズレボルバ、撮像装置23、およびターレット24が制御される。
ターレット24には、上述の各実施の形態のターレット7と同様、落射光源20からの照明光を反射する複数の蛍光キューブ5が備えられている。
図10は、透過照明光源19の分光特性の例を示す図である。
本第3の実施の形態においても、上述したターレット7上の蛍光キューブ5と同様に、ターレット24上の蛍光キューブ5は適宜付け替えることが可能である。
1A 蛍光顕微鏡
1B 倒立型顕微鏡
2 標本
3 撮像装置
4 落射光源
5 蛍光キューブ
6 対物レンズ
7 ターレット
8 PC
9 バンドパスフィルタ
9B バンドパスフィルタ
9G バンドパスフィルタ
9R バンドパスフィルタ
10 ダイクロイックミラー
10B ダイクロイックミラー
10G ダイクロイックミラー
10R ダイクロイックミラー
11 吸収フィルタ
11B 吸収フィルタ
11G 吸収フィルタ
11R 吸収フィルタ
12 モニタ
13 ステージ(試料台)
14 透過照明光源
15、15a、15b、15c 補助光源
16 ミラー
17 標本
18 ステージ(試料台)
19、19a、19b、19c、19d、19e、19f、19g、19h、19i、19j、19k、 透過照明光源
20 落射光源
21 対物レンズ
22 結像レンズ
23 撮像装置
24 ターレット
25 コントローラ
27 モニタ
28 鏡筒
29 暗箱
100 PC
200 PC
300 PC
400 PC
a1 観察光路
Claims (2)
- 蛍光顕微鏡によって観察するための観察像を処理する顕微鏡画像処理装置において、
試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子の中から、任意の光学素子を前記蛍光の光路上に切り替え可能に配置する光学素子切替手段と、
前記光学素子切替手段によって配置された光学素子を介して前記観察像を撮像するための撮像手段と、
前記撮像手段によって撮像された観察像に基づいて、前記光学素子切替手段によって配置された光学素子の種類を判断する光学素子判断手段と、
前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類に基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定する擬似カラー設定手段と、
試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子に関する情報を格納する光学素子情報格納手段と、
前記光学素子情報格納手段を参照することにより前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類を特定する光学素子特定手段と、
複数の蛍光色素に関する情報を格納する蛍光色素情報格納手段と、
蛍光色素を識別するための蛍光色素識別情報を入力する蛍光色素識別情報入力手段と、
前記蛍光色素情報格納手段を参照することにより前記蛍光色素識別情報入力手段によって入力された蛍光色素識別情報の蛍光色素を特定する蛍光色素特定手段と、
を備え、
前記擬似カラー設定手段は、前記蛍光色素特定手段によって特定された蛍光色素に対応する蛍光色素特性と光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類とに基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定することを特徴とする顕微鏡画像処理装置。 - 蛍光顕微鏡によって観察するための観察像を処理する顕微鏡画像処理装置のコンピュータを、
試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子の中から、任意の光学素子を前記蛍光の光路上に切り替え可能に配置する光学素子切替手段と、
前記光学素子切替手段によって配置された光学素子を介して前記観察像を撮像するための撮像手段と、
前記撮像手段によって撮像された観察像に基づいて、前記光学素子切替手段によって配置された光学素子の種類を判断する光学素子判断手段と、
前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類に基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定する擬似カラー設定手段と、
試料を励起する励起光を透過し、前記試料から発せられた蛍光を透過する複数種類の光学素子に関する情報を格納する光学素子情報格納手段を参照することにより、前記光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類を特定する光学素子特定手段と、
蛍光色素を識別するための蛍光色素識別情報を入力する蛍光色素識別情報入力手段と、
複数の蛍光色素に関する情報を格納する蛍光色素情報格納手段を参照することにより、前記蛍光色素識別情報入力手段によって入力された蛍光色素識別情報の蛍光色素を特定する蛍光色素特定手段、
として機能させるための顕微鏡画像処理プログラムであって、
前記擬似カラー設定手段は、前記蛍光色素特定手段によって特定された蛍光色素に対応する蛍光色素特性と光学素子判断手段によって判断された光学素子の種類とに基づいて、前記撮像手段によって撮像された観察像に擬似カラーを設定することを特徴とする顕微鏡画像処理プログラム。
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