JP4683923B2 - プレニルキノン生合成能の高い形質転換植物 - Google Patents

プレニルキノン生合成能の高い形質転換植物 Download PDF

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Description

本発明は、形質転換植物、特に、プラストキノン類、トコトリエノール類およびトコフェロール類を、形質転換されていない同じ植物よりも多量に産生する形質転換植物に関する。本発明は、これらの植物を産生するための方法およびこれらの植物を培養するための方法にも関する。本発明の植物は、ｐ−ヒドロキシフェニルピルベートジオキシゲナーゼ酵素（以下、ＨＰＰＤと呼ぶ）の阻害剤である除草剤に耐性となる特性も有する。
プレニルキノン類は、特にプラストキノン類、トコフェロール類およびトコトリエノール類を含む、脂質親和性を有する化合物の大きな群である。植物中で、プレニルキノン類は、ホモゲンチサート経路を介して合成される。
最も良く知られているプレニルキノンはビタミンＥ、すなわちα−トコフェロールであり、ヒトまたは動物の食事の必須成分であり、特に、ビタミンＥを天然には生成しないが栄養的に必要としている哺乳動物に必須である。ビタミンＥの最も理解されている効果は、細胞膜脂質へのその抗酸化作用である（Ｅｐｓｔｅｉｎら著、１９６６年、Ｒａｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ第２８巻：３２２〜３３５頁；Ｋａｍｅｌ−ＥｌｄｉｎおよびＡｐｐｅｌｑｖｉｓｔ著、１９９６年、Ｌｉｐｉｄｓ第３１巻：６７１〜７０１頁）。
ビタミンＥ以外に、ヒトおよび動物の食事において必須ではないがトコトリエノール類が、ビタミンＥよりも著しい特に有利な抗酸化特性を有する（Ｋａｍａｔら著、１９９７年、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．第１７０巻、１３１〜１３７頁）。これらの化合物は、特に、細胞をフリーラジカルから保護すること、および心臓血管疾患または癌の発生を防ぐことも知られている（Ｐａｃｋｅｒら著、２００１年、Ｊ．Ｎｕｔｒ．第１３１（２）巻：３６９８〜３７３８頁）。さらに、トコトリエノール類は、エストロゲン受容体の増殖の阻害による抗癌活性、すなわち、トコフェロール類が持っていない活性を示す（Ｇｕｔｈｒｉｅら著、１９９７頁、Ｊ．Ｎｕｔｒ．第１２７巻：５４４〜５４８頁）。これらは、トコフェロール類よりもかなり優れた低コレステロール血症活性も示し（Ｐｅａｒｃｅら著、１９９２年、Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．第３５巻、３５９５〜３６０６頁；Ｑｕｒｅｓｈｉら著、２００１年、Ｊ．Ｎｕｔｒ．第１３１巻：２６０６〜２６１８頁）、これにより、動脈硬化を抑えることがより可能になっている。
プラストキノン類は、ヒトまたは動物の健康における役割が知られていないが、植物においては必須の役割を果たす。これらの分子は、葉緑素膜中に存在し、それらの機能は、光合成反応中の電子移動である（Ｇｒｕｍｂａｃｈ著、１９８４年、Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ｏｆ ｐｌａｎｔ ｌｉｐｉｄｓ、ＳｉｅｇｅｎｔｈａｌｅｒおよびＥｉｃｈｅｎｂｅｒｇｅｒ編）。
さらに、プレニルキノン類の量の増加が、植物に、酸化的ストレス、特に、冷気、乾燥または強度の光に対する、より優れた抵抗性を付与する。
植物および光合成性生物において、通常、ホモゲンチサートがプレニルキノン類の芳香族前駆体を構成する。ホモゲンチサートは、ｐ−ヒドロキシフェニルピルベートジオキシゲナーゼ酵素（以下、ＨＰＰＤと称する）の産物である。大部分の生物において、ＨＰＰＤは、芳香族アミノ酸チロシンの異化分解経路に関連する酵素である（Ｇｏｏｄｗｉｎ著、１９７２年、Ｔｙｒｏｓｉｎｅ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ：Ｔｈｅ ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ、ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ａｎｄ ｃｌｉｎｉｃａｌ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ ｏｆ ｐ−ｈｙｄｒｏｘｙｐｈｅｎｙｌｐｙｒｕｖａｔｅ ｏｘｙｇｅｎａｓｅ、Ｇｏｏｄｗｉｎ Ｂ．Ｌ．編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ｐｒｅｓｓ、１〜９４）。ＨＰＰＤは、チロシン分解産物であるｐ−ヒドロキシフェニルピルベート（ＨＰＰ）のホモゲンチサートへの転化反応を触媒する。
大部分の植物は、アロゲナートを介してチロシンを合成する（ＡｂｏｕＺｅｉｄら著、１９９５年、Ａｐｐｌｉｅｄ Ｅｎｖ Ｍｉｃｒｏｂ第４１巻：１２９８〜１３０２頁；Ｂｏｎｎｅｒら著、１９９５年、Ｐｌａｎｔ Ｃｅｌｌｓ Ｐｈｙｓｉｏｌ．第３６巻、１０１３〜１０２２頁；Ｂｙｎｇら著、１９８１年、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ第６巻：１２８９〜１２９２頁；ＣｏｎｎｅｌｙおよびＣｏｎｎ著、１９８６年、Ｚ．Ｎａｔｕｒｆｏｒｓｃｈ第４１ｃ：６９〜７８頁；Ｇａｉｎｅｓら著、１９８２年、Ｐｌａｎｔｓ第１５６巻：２３３〜２４０頁）。これらの植物において、ＨＰＰは、チロシンの分解からのみ誘導される。一方、酵母Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅまたは細菌Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ（大腸菌）のような生物において、ＨＰＰはチロシン前駆体であり、プレフェナートをＨＰＰに転化するプレフェナート脱水素酵素（以下、ＰＤＨと呼ぶ）の作用により合成される（Ｌｉｎｇｅｎｓら著、１９６７年、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ第１巻：３６３〜３７４頁；ＳａｍｐａｔｈｋｕｍａｒおよびＭｏｒｒｉｓｓｏｎ著、１９８２年、Ｂｉｏｃｈ Ｂｉｏｐｈｙｓ Ａｃｔａ第７０１巻：２０４〜２１１頁）。従って、これらの生物において、ＨＰＰの産生は芳香族アミノ酸生合成経路（シキマート経路）に直接結びつき、チロシン分解経路には結びつかない（図１参照）。
植物によるプレニルキノン類の生合成を増加させるために、本特許出願の発明者は、前記前駆体の生合成をＰＤＨ酵素の過発現による「シキマート」経路に結びつけることにより、これらの植物の細胞内へのＨＰＰ前駆体の流入を増加させようとした。予想される効果は、ＨＰＰ前駆体のより大きな流れであり、全体としてプレニルキノン生合成を増加させるはずである。
ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子による植物の形質転換が、前記植物によるプレニルキノン類の産生の増加を可能にすることが実際上注目された。この増加は、ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子で形質転換された植物が、ＨＰＰＤ酵素も過発現する植物である場合、非常に著しい。
ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子による植物の形質転換が、ＨＰＰＤ阻害剤への前記植物の耐性の増加を可能にすることも注目された。この耐性の増加は、ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子で形質転換された植物が、ＨＰＰＤ酵素も過発現する植物である場合、非常に著しい。
この数年間において、この酵素が新規科の「脱色性」除草剤の標的であることが示された後、ＨＰＰＤへの興味が著しく増加した。その標的がＨＰＰＤであるそのような除草剤は、特にイソオキサゾール（欧州特許第４１８ １７５号、欧州特許第４７０ ８５６号、欧州特許４８７ ３５２号、欧州特許第５２７ ０３６号、欧州特許５６０ ４８２号、欧州特許６８２ ６５９号、米国特許第５，４２４，２７６号）、特に、イソキサフルトール、トウモロコシ用の選択的除草剤、ジケトニトリル（欧州特許第４９６ ６３０号、欧州特許第４９６ ６３１号）、特に、２−シアノ−３−シクロプロピル−１−（２−ＳＯ２ＣＨ３−４−ＣＦ３フェニル）プロパン−１，３−ジオンおよび２−シアノ−３−シクロプロピル−１−（２−ＳＯ２ＣＨ３−４−２，３−ジクロロフェニル）プロパン−１，３−ジオン、トリケトン（欧州特許第６２５ ５０５号、欧州特許第６２５ ５０８号、米国特許第５，５０６，１９５号）、特にスルコトリオンまたはメソトリオン、あるいはピラゾリネートである。
その標的が植物の生命を維持する代謝経路に含まれる酵素である除草剤の利点の一つは、離れた系統発生的由来の植物に対する広い活性範囲である。しかしながら、そのような除草剤は、不必要な植物すなわち「雑草」を除去するために作物に適用されたときに、栽培植物にも作用するという大きな欠点も有する。この欠点は、前記除草剤に耐性のある栽培植物を用いることにより克服することができる。そのような植物は、通常、それらの組織中で酵素を過発現するように前記除草剤への抵抗性のための酵素をコードする遺伝子をそのゲノム中に導入することによる遺伝子工学により得られる。
今までに、除草剤に耐性の植物を作るために、遺伝子工学を用いる３つの主要な手法が用いられてきた。第１の手法は、解毒性酵素をコードする遺伝子で植物を形質転換することにより除草剤を解毒することにある。この酵素は、除草剤またはその活性代謝産物を、非毒性分解産物、例えば、ブロモキシニルまたはベースト（ｂａｓｔｅ）への耐性用の酵素に転化する（欧州特許第２４２ ２３６号、欧州特許第３３７ ８９９号）。第２の手法は、除草剤またはその活性代謝産物への感受性が低くなるように突然変異された標的酵素、例えば、グリホサート耐性酵素をコードする遺伝子で植物を形質転換することにある（欧州特許第２９３ ３５６号；Ｐａｄｇｅｔｔｅら著、１９９１年、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．第２６６巻：３３頁）。第３の手法は、植物中で、大量の、可能なら植物に入る除草剤の量よりもかなり多い量の標的酵素を産生するように、感受性標的酵素を過発現することにある。この手法は、その阻害剤の存在にも拘わらず、機能性酵素の充分な水準を維持することを可能にする。
この第３の手法を実行し、ＨＰＰＤ阻害剤に耐性の植物を得ることを可能にした（ＷＯ９６／３８５６７）。さらに、感受性（非突然変異）標的酵素を過発現させるこの単純な手法を初めてうまく用いて、除草剤への作物学的水準での耐性を植物に付与した。
大部分のＨＰＰＤ阻害除草剤が、ゆっくりかつ実質的に不可逆的に結合する基質に関して競合的阻害剤であることも知られている（Ｅｌｌｉｓら著、１９９６年、Ｃｈｅｍ．Ｒｅｓ．Ｔｏｘｉｃｏｌ．第９巻：２４〜２７頁；Ｖｉｖｉａｎｉら著、１９９８年、Ｐｅｓｔｉｃ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｐｈｙｓｉｏｌ．第６２巻：１２５〜１３４頁）。従って、それらの作用形式は、その結合部位に選択的に結合することによりＨＰＰと競合することにある。この結合の結果は、ホモゲンチサート合成を細胞が停止することである。
ＰＤＨ酵素の過発現によるＨＰＰＤ基質ＨＰＰの流入の増加を利用する本発明は、除草剤耐性植物、特に、ＨＰＰＤ阻害除草剤に耐性である植物を得るための第４の可能な手法を構成するようである。
従って、本発明は、
（１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
（２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
を含むことを特徴とする形質転換植物に関する。
特定の実施態様によれば、本発明は、
（１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
（２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
を含み、植物中で機能的でありフィチル／プレニルトランスフェラーゼ酵素を過発現させる遺伝子は除くことを特徴とする形質転換植物に関する。
もう一つの特定の実施態様によれば、本発明は、
（１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、および
（２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
で形質転換された植物からなることを特徴とする形質転換植物に関する。
本発明の特定の実施態様によれば、本発明の形質転換植物は形質転換植物細胞により代表され得る。
「形質転換植物」または「形質転換植物細胞」という用語は、本発明によれば、形質転換植物または任意の他の生物に由来し得る少なくとも一つの導入遺伝子をそのゲノム中に安定して取り込んだ植物または植物細胞を意味することを関心のある。好ましくは、本発明による導入遺伝子は、形質転換植物以外の少なくとも一つの生物に由来する要素を含むキメラ遺伝子により代表される。特に、本発明による導入遺伝子は、他の要素のうち、異なる生物に由来する少なくとも一つのプロモーター、コード配列、およびターミネーターを含んでよく、前記生物も形質転換植物と異なる。
「植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子」という表現において、「ＰＤＨ」という用語は、プレフェナートをＨＰＰに転化するＰＤＨ活性を示す任意の天然または突然変異したＰＤＨ酵素を意味するものと解釈されるべきである。特に、前記ＰＤＨ酵素は、任意の型の生物に由来し得る。ＰＤＨ活性を有する酵素は、プレフェナート基質の量の減少の測定または、酵素的反応から誘導される産物、すなわちＨＰＰまたは補因子ＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの一方の蓄積の測定を可能にする任意の方法により確認することができる。特に、ＰＤＨ活性は、実施例２に記載の方法により測定することができる。
ＰＤＨ酵素をコードしている多くの遺伝子が文献に記載されており、その配列は、ウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｎｃｂｉ．ｎｌｍ．ｎｉｈ．ｇｏｖ／ｅｎｔｒｅｚ／上で確認することができる。Ｍａｎｎｈａｕｐｔらが記載（１９８９年、Ｇｅｎｅ第８５巻、３０３〜３１１頁）のような酵母Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｉａｅ（受入番号Ｓ４６０３７）、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属の細菌、特に、Ｈｅｎｎｅｒらが記載（１９８６年、Ｇｅｎｅ第４９（１）巻、１４７〜１５２頁）のような種Ｂ．ｓｕｂｔｉｌｉｓ（受入番号Ｐ２０６９２）、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属の細菌、特に、Ｈｕｄｓｏｎらが記載（１９８４年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．第１８０（４）巻、１０２３〜１０５１頁）のような種Ｅ．ｃｏｌｉ（受入番号ＫＭＥＣＴＤ）、またはＥｒｗｉｎｉａ属の細菌、特に、Ｘｉａらが記載（１９９２年、Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．第１３８（７）巻、１３０９〜１３１６頁）のような種Ｅ．ｈｅｒｂｉｃｏｌａ（受入番号Ｓ２９９３４）のＰＤＨ酵素をコードする遺伝子が特に知られている。
「植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子」という表現において、「ＨＰＰＤ」という用語は、ＨＰＰをホモゲンチサートに転化するＨＰＰＤ活性を示す任意の天然、突然変異またはキメラＨＰＰＤ酵素を意味するものと解釈されるべきである。ＨＰＰＤの酵素活性は、ＨＰＰ基質の量の減少の測定または、酵素反応から誘導される産物、すなわちホモゲンチサートの蓄積の測定を可能にする任意の方法により測定することができる。特に、実施例１およびＧａｒｃｉａｌらの文献（１９９７年、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．第３２５巻、７６１〜７６９頁）またはＧａｒｃｉａｌらの文献（１９９９年、Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．第１１９巻、１５０７〜１５１６頁）に記載の方法によりＨＰＰＤ活性を測定することができる。
特に、前記ＨＰＰＤ酵素は、任意の型の生物に由来し得る。ＨＰＰＤ酵素をコードする多くの遺伝子、特に、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ（Ｒｕｅｔｓｃｈｉら著、１９９２年、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．第２０５巻、４５９〜４６６頁、ＷＯ９６／３８５６７）のような細菌の、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ（ＷＯ９６／３８５６７、遺伝子バンク ＡＦ０４７８３４）またはニンジン（ＷＯ９６／３８５６７、遺伝子バンク ８７２５７）のような植物の、Ｃｏｃｃｉｃｏｉｄｅｓ（遺伝子バンク ＣＯＩＴＲＰ）の、またはマウスもしくはブタのような哺乳動物の遺伝子が文献に記載されている。
本発明によれば、「突然変異したＨＰＰＤ」という用語は、天然ＨＰＰＤに関して少なくとも一つの突然変異を有すると共に、対応する天然ＨＰＰＤよりもＨＰＰＤ阻害性除草剤への耐性がより大きな特性を有するＨＰＰＤを意味することを意図している。この突然変異したＨＰＰＤは、特許出願ＷＯ９９／２４５８５に記載のように、そのＣ末端部分において突然変異したＨＰＰＤであることが有利である。好ましくは、突然変異したＨＰＰＤは、特許出願ＷＯ９９／２４５８５に記載のように、突然変異Ｗ３３６を含む。
「キメラＨＰＰＤ」という用語は、種々のＨＰＰＤに由来する要素を含むＨＰＰＤを意味することを意図している。そのようなキメラＨＰＰＤは、特に、特許出願ＷＯ９９／２４５８６に記載されている。
このＨＰＰＤは、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｅｓｃｅｎｓ（ＷＯ９６／３８５６７）またはＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ（ＷＯ９６／３８５６７）からのＨＰＰＤであるのが有利である。
「植物中で機能的でありフィチル／プレニルトランスフェラーゼ酵素を過発現させる遺伝子」という表現において、「フィチル／プレニルトランスフェラーゼ」という用語は、特許出願ＷＯ０２／０８９５６１に記載のようなフィチル／プレニルトランスフェラーゼ酵素を意味すると解されるべきである。特に、前記「植物中で機能的でありフィチル／プレニルトランスフェラーゼ酵素を過発現させる遺伝子」は、Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ ｓｌｒ１７３６遺伝子（ウェブサイトｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｋａｚｕｓａ．ｏｒ．ｊｐ／ｃｙａｎｏｂａｓｅ上のＣｙａｎｏｂａｓｅに記載の配列）およびＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ＡＴＰＴ２遺伝子（Ｓｍｉｔｈら著、１９９７年、Ｐｌａｎｔ Ｊ．第１１巻、８３〜９２頁）から選択される遺伝子からなる。
本発明による形質転換された植物または植物細胞は、非形質転換植物よりも多くの量のプレニルキノン類を産生する。好ましくは、本発明による形質転換された植物または植物細胞は、植物中で機能的でありＰＤＨまたはＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子の一つのみで形質転換された植物よりも多くの量のプレニルキノン類を産生する。好ましくは、本発明による形質転換された植物または植物細胞により産生されるプレニルキノン類は、トコフェロール類および／またはトコトリエノール類および／またはプラストキノン類である。トコフェロール類、トコトリエノール類およびプラストキノン類の量を測定するための多くの方法が知られており、当業者が利用できる。例えば、トコフェロール類、トコトリエノール類およびプラストキノン類は、Ｆｒａｚｅｒらの方法（２０００年、Ｐｌａｎｔ Ｊ．第２４巻：５５１〜５５８頁）により測定することができる。本発明によれば、「より多くの量」という用語は、好ましくは少なくとも２倍多い、好ましくは少なくとも５倍多い、好ましくは少なくとも１０倍多い、好ましくは少なくとも５０倍多い、好ましくは少なくとも１００倍多い、好ましくは少なくとも５００倍多い、および好ましくは少なくとも１０００倍多い量を意味すると解される。
本発明による形質転換された植物は、ＨＰＰＤ阻害剤に耐性である効果も有する。
「ＨＰＰＤ阻害剤に耐性の形質転換された植物」という用語は、形質転換されていない同じ植物に通常毒性であるＨＰＰＤ阻害剤の投与量（ｄｏｓｅ）に関して耐性である特徴を少なくとも示す前述のような形質転換植物を意味すると意図される。形質転換されていない植物に通常毒性であるＨＰＰＤ阻害剤の投与量は、使用するＨＰＰＤ阻害剤に、および前記阻害剤を適用する植物に、および前記植物に適用する段階にも依存する。しかしながら、当業者は、ＨＰＰＤ阻害剤について通常そうであるように、植物への「脱色」効果により先行される可能性のある、前記阻害剤の適用からある日数後に死ぬことになる前記阻害剤の致死効果に、または、植物の成長低下という効果に、前記阻害剤の毒性が対応し得るという知識においてそのような投与量を決めることができる。好ましくは、本発明によるＨＰＰＤ阻害剤に耐性の形質転換された植物は、植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子のみで形質転換された同じ植物に通常毒性であるＨＰＰＤ阻害剤の投与量に関して耐性である。
「ＨＰＰＤ阻害剤」という用語は、ＨＰＰをホモゲンチサートに転化させるその天然の酵素的活性を一時的にまたは永続的に阻害するように植物ＨＰＰＤ酵素に結合することができる天然または人工由来の任意の化合物を意味すると意図される。この特性故に、本発明のＨＰＰＤ阻害剤は、それが適用される植物の死または成長阻害を誘発し、前記死は、通常、前記植物の「脱色」の後に生じる。
ＨＰＰＤ阻害剤の例として、イソオキサゾール（欧州特許第４１８ １７５号、欧州特許第４７０ ８５６号、欧州特許第４８７ ３５２号、欧州特許第５２７ ０３６号、欧州特許第５６０ ４８２号、欧州特許第６８２ ６５９号、米国特許第５，４２４，２７６号）、特に、イソキサフルトール、トウモロコシ用の選択的除草剤、ジケトニトリル類（以下、ＤＫＮｓと呼び、欧州特許第４９６ ６３０号、欧州特許第４９６ ６３１号に記載）、特に、２−シアノ−３−シクロプロピル−１−（２−ＳＯ２ＣＨ３−４−ＣＦ３フェニル）プロパン−１，３−ジオンおよび２−シアノ−３−シクロプロピル−１−（２−ＳＯ２ＣＨ３−４−２，３−ジクロロフェニル）プロパン−１，３−ジオン、トリケトン類（欧州特許第６２５ ５０５号、欧州特許第６２５ ５０８号、米国特許第５，５０６，１９５号）、特にスルコトリオンまたはメソトリオン、あるいはピラゾリネートを挙げることができる。
本発明によれば、「植物中で機能的である遺伝子」という表現は、植物中で機能することができる遺伝子を意味すると意図される。植物中で機能することができる遺伝子は、前記植物の少なくとも一つの組織中でその遺伝子がコードする蛋白を発現することができる遺伝子である。特に、本発明による植物中で機能的である遺伝子は、ＰＤＨおよびＨＰＰＤ酵素を過発現させ得る。蛋白の過発現は、形質転換されていない同じ植物中におけるよりも高い水準での形質転換植物の組織中でのこの蛋白の過発現を意味し、この水準は、前記植物の同一の発育段階において測定される。好ましくは、本発明による植物中で機能的な遺伝子は、それが導入される植物以外の生物に由来する要素を含み得るキメラ遺伝子である。
本発明による植物中で機能的である遺伝子は、好ましくは、少なくとも、互いに機能的に結合している、植物中で機能的であるプロモーター、ＰＤＨ酵素および／またはＨＰＰＤ酵素をコードする配列、およびこの同じ植物中で機能的であるターミネーター要素を含むキメラ遺伝子である。キメラ遺伝子が含み得る種々の要素は、第１に、蛋白の転写、翻訳および成熟用の制御要素、例えば、プロモーター、シグナルペプチドまたはトランジットペプチドをコードする配列、またはポリアデニル化シグナルを構成するターミネーター要素であり、第２に、蛋白をコードする配列である。「互いに機能的に結合」という発現は、その機能が調整されてコード配列を発現させるように、キメラ遺伝子の前記要素が互いに結合していることを意味する。例えば、プロモーターは、コード配列の発現を提供することができる場合、コード配列に機能的に結合される。本発明によるキメラ遺伝子およびその種々の要素のアセンブリの構築は、当業者によく知られている技術、特に、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの文献（１９８９年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ， Ｎｏｌａｎ Ｃ．編、ニューヨーク：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）に記載の技術を用いて行うことができる。キメラ遺伝子を構成する制御要素の選択は、それらがその中で機能すべき植物に本質的に依存し、当業者は、所定の植物中で機能的である制御要素を選択することができる。
本発明によるキメラ遺伝子が含み得るプロモーターは、構成的に、誘発的に、空間的にまたは時間的に制御することができる。
本発明のキメラ遺伝子において用いることができる構成的プロモーターのうち、例えば、オクトピンシンターゼ遺伝子またはノパリンシンターゼ遺伝子のプロモーター（Ｓａｎｄｅｒｓら著、１９８７年、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．第１５巻、１５４３〜１５４８頁）のような細菌プロモーター、カリフラワーモザイクウイルスの１９Ｓまたは３５Ｓ ＲＮＡの転写を制御する遺伝子のプロモーター（ＣａＭＶ；Ｌａｗｔｏｎら著、１９８７年、Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．第９巻、３１５〜３２４頁；Ｏｄｅｌｌら著、１９８５年、Ｎａｔｕｒｅ第３１３頁、８１０〜８１２頁）のようなウイルスプロモーター、カッサバ葉脈モザイクウイルスのプロモーター（ＣｓＶＭＶ；特許出願ＷＯ９７／４８８１９に記載）を挙げることができる。植物由来のプロモーターのうち、リブロース−ビスカルボキシラーゼ／オキシゲナーゼ（ＲｕＢｉｓＣｏ）小サブユニット遺伝子のプロモーター、欧州特許第０ ５０７ ６９８号に記載のようなヒストン遺伝子のプロモーター、またはイネアクチン遺伝子のプロモーター（Ｗａｎｇら著、１９９２年、Ｍｏｌ．Ｃｅｌｌ．Ｂｉｏｌ．第１２（８）巻：３３９９〜３４０６頁；米国特許第５，６４１，８７６号）が挙げられる。
本発明のキメラ遺伝子において用いることができる誘発性プロモーターのうち、例えば、オーキシン結合蛋白をコードする遺伝子のプロモーター（Ｓｃｈｗｏｂら著、１９９３年、Ｐｌａｎｔ Ｊ．第４（３）巻：４２３〜４３２頁）、ＵＤＰ−グルコースフラボノイドグリコシルトランスフェラーゼをコードする遺伝子のプロモーター（Ｒａｌｓｔｏｎら著、１９８８年、Ｇｅｎｅｔ．第１１９（１）巻：１８５〜１９７頁）、ＭＩＰ蛋白分解酵素阻害剤をコードする遺伝子のプロモーター（Ｃｏｒｄｅｒｏら著、１９９４年、Ｐｌａｎｔ Ｊ．第６（２）巻、１４１〜１５０頁）、またはグリセルアルデヒド−３−ホスフェート脱水素酵素をコードする遺伝子のプロモーター（Ｍａｒｔｉｎｅｚら著、１９８９年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．第２０８（４）巻、５５１〜５６５頁；Ｑｕｉｇｌｅｙら著、１９８９年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｅｖｏｌ．第２９（５）巻、４１２〜４２１頁；Ｋｏｈｌｅｒら著、１９９５年、Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．第２９（６）巻、１２９３〜１２９８年）を挙げることができる。
本発明のキメラ遺伝子において用いることができる組織特異的プロモーターのうち、例えば特許出願ＷＯ００／２９５９４に記載のような根特異的プロモーター、特許出願ＷＯ９８／２２５９３、ＷＯ９９／１５６７９またはＷＯ９９／４３８１８に記載のような花特異的プロモーター、果実特異的プロモーター、特に、特許出願ＷＯ９１／１３９９３、ＷＯ９２／１７５８０、ＷＯ９８／４５４６０、ＷＯ９８／４５４６１またはＷＯ９９／１６８９０に記載のような種子特異的プロモーターを挙げることができる。
本発明のキメラ遺伝子で用いることができるターミネーター要素のうち、例えば、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ由来のノパリンシンターゼをコードする遺伝子のｎｏｓターミネーター要素（Ｂｅｖａｎら著、１９８３年、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．第１１（２）巻、３６９〜３８５頁）または欧州特許出願第０ ６３３ ３１７号に記載のようなヒストン遺伝子のターミネーター要素を挙げることができる。
キメラ遺伝子は、シグナルペプチドまたはトランジットペプチドをコードする細胞下（ｓｕｂｃｅｌｌｕｌａｒ）標的配列も含むことができる。そのような、ＨＰＰＤ酵素またはＰＤＨ酵素をコードする配列の上流または下流に位置する配列は、前記ＨＰＰＤまたはＰＤＨ酵素を、特異的に、宿主生物の細胞区画内に導くことを可能にする。例えば、キメラ遺伝子は、ミトコンドリア、プラスト、小胞体または小胞のような細胞質の特定の区画にＨＰＰＤおよび／またはＰＤＨ酵素を導くために、シグナルペプチドまたはトランジットペプチドをコードする配列を含むことができる。
そのような配列の役割が、特に、大部分が植物細胞の種々の区画中での蛋白の輸送に関連するレビューＰｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（１９９８年）の３８版に記載されている（植物細胞中の小胞への蛋白の選別；１２７〜１４４頁、核孔複合体；１４５〜１６２頁、葉緑体外皮膜中へのおよびそれを通過する蛋白移動；９１〜２０７頁；葉緑体中のチラコイド蛋白の標的用の複数経路；２０９〜２２１頁；植物内へのミトコンドリア蛋白輸送；３１１〜３３８頁）。
一つの実施態様によれば、トランジットペプチドは、葉緑体標的またはミトコンドリア標的シグナルであり得、続いて、葉緑体またはミトコンドリア内で開裂する。好ましくは、本発明のキメラ遺伝子は、ＨＰＰＤおよび／またはＰＤＨ酵素を葉緑体中に導くトランジットペプチドをコードする細胞下標的配列を含む。
トランジットペプチドは、一重または二重であってよい。二重トランジットペプチドは、中間配列により任意に分離される。例えば、本発明による好ましいトランジットペプチドは、転写の方向において、色素体中に位置する酵素をコードする植物遺伝子のトランジットペプチドをコードする配列、色素体中に位置する酵素をコードする植物遺伝子の成熟Ｎ−末端部の配列の一部、および、続いて、色素体中に位置する酵素をコードする植物遺伝子の第２のトランジットペプチドをコードする配列を含む。そのような二重トランジットペプチドが、例えば、欧州特許出願第０ ５０８ ９０９号に記載されている。
本発明によれば、キメラ遺伝子は、転写活性化因子（エンハンサー）、例えば、特許出願ＷＯ８７／０７６４４に記載のタバコモザイクウイルス（ＴＭＶ）の、ＣａｒｒｉｎｇｔｏｎおよびＦｒｅｅｄ（１９９０年、Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．第６４（４）巻：１５９０〜７頁）に記載されているタバコエッチウイルス（ＴＥＶ）の、またはゴマノハグサモザイクウイルス（Ｆｉｇｗｏｒｔ Ｍｏｓａｉｃ Ｖｉｒｕｓ、米国特許第５，９９４，５２１号）の転写活性化因子のような、プロモーターとコード配列との間に位置する、他の制御配列も含むことができる。本発明によるキメラ遺伝子は、イントロン、特に、単子葉植物中での遺伝子の発現を促進するイントロン、例えば、特許出願ＷＯ９９／３４００５に記載のイネアクチン遺伝子のイントロン１またはトウモロコシイントロンａｄｈ１も含むことができる。
本発明による植物および植物細胞は、形質転換された植物および植物細胞である。本発明による形質転換された植物および植物細胞を得るために、当業者は、植物を形質転換する多くの既知の方法の一つを用いることができる。
好ましくは、本発明による植物および植物細胞は、本発明による植物中で機能的でありＨＰＰＤまたはＰＤＨを過発現させる遺伝子を含むクローニング、発現および／または形質転換ベクターで形質転換される。
本発明の実施に有用であり得るベクターは、例えば、プラスミド、コスミド、バクテリオファージまたはウイルスである。好ましくは、本発明による植物細胞または植物を形質転換するためのベクターはプラスミドである。通常、ベクターの主な性質は、それ自体を維持する性能および、特に複製開始点の存在故に植物細胞中で自己複製する性能であるはずである。宿主生物の安定な形質転換を得ることを目的として、ベクターをゲノム中に取り込むこともできる。そのようなベクターの選択および、本発明による遺伝子を前記ベクター中に挿入するための技術が、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの文献（１９８９年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｎｏｌａｎ Ｃ．編、ニューヨーク：Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ）に広く記載されており、当業者の通常の知識の一部である。本発明で用いられるベクターは、本発明による遺伝子に加えて、選択マーカーをコードする別の遺伝子も含むのが有利である。選択マーカーは、効果的に形質転換された宿主生物、すなわち、ベクターを取り込んだ生物の選択を可能にする。用いることができる選択マーカーのうち、抗生物質に抵抗性を得るための遺伝子を含むマーカー、例えば、ハイグロマイシンホスホトランスフェラーゼ遺伝子（Ｇｒｉｔｚら著、１９８３年、Ｇｅｎｅ第２５巻：１７９〜１８８頁）のマーカーを挙げることができるが、除草剤耐性遺伝子、例えば、ビアラホス（ｂｉａｌａｐｈｏｓ）への抵抗性を得るためのｂａｒ遺伝子（Ｗｈｉｔｅら著、１９９０年、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒｅｓ．第１８（４）巻：１０６２頁）、グリホサートへの抵抗性を得るためのＥＰＳＰＳ遺伝子（米国特許第５，１８８，６４２号）、あるいはイソオキサゾールへの抵抗性を得るためのＨＰＰＤ遺伝子（ＷＯ９６／３８５６７）を含むマーカーも挙げられる。ＧＵＳ酵素のような容易に確認できる酵素をコードする遺伝子、または形質転換細胞中での顔料の産生を制御する酵素または顔料をコードする遺伝子も挙げられる。そのような選択マーカー遺伝子が、特に、特許出願ＷＯ９１／０２０７１、ＷＯ９５／０６１２８、ＷＯ９６／３８５６７およびＷＯ９７／０４１０３に記載されている。
本発明による形質転換植物を得るために用いることができる形質転換方法のうち一つは、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）および前述のベクターの存在下に形質転換させるべき植物の細胞または組織を配置することである（ＣｈａｎｇおよびＣｏｈｅｎら著、１９７９年、Ｍｏｌ．Ｇｅｎ．Ｇｅｎｅｔ．第１６８（１）巻、１１１〜１１５頁；ＭｅｒｃｅｎｉｅｒおよびＣｈａｓｓｙ著、１９８８年、Ｂｉｏｃｈｉｍｉｅ第７０（４）巻、５０３〜５１７頁）。電気穿孔は、形質転換させるべき細胞または組織とベクターを電場に付することからなるもう一つの方法である（ＡｎｄｒｅａｓｏｎおよびＥｖａｎｓ、１９８８年、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓ第６（７）巻、６５０〜６６０頁；ＳｈｉｇｅｋａｗａおよびＤｏｗｅｒ著、１９８９年、Ａｕｓｔ．Ｊ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．第３（１）巻、５６〜６２頁）。もう一つの方法は、ベクターを、マイクロインジェクションにより細胞または組織に直接注入することからなる（ＧｏｒｄｏｎおよびＲｕｄｄｌｅ著、１９８５年、Ｇｅｎｅ第３３（２）巻、１２１〜１３６頁）。「バイオリスティック」法を有利に用いることができる。これは、ベクターがその上に吸着された粒子を、細胞または組織に衝突させることからなる（Ｂｒｕｃｅら著、１９８９年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、第８６（２４）巻、９６９２〜９６９６頁；Ｋｌｅｉｎら著、１９９２年、Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ、第１０（３）巻、２８６〜２９１頁；米国特許第４，９４５，０５０号）。好ましくは、植物細胞または組織の形質転換は、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属の細菌を用いて、好ましくは、前記植物の細胞または組織にＡ．ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｋｎｏｐｆ、１９７９年、Ｓｕｂｃｅｌｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．第６巻、１４３〜１７３頁；Ｓｈａｗら著、１９８３年、Ｇｅｎｅ、第２３（３）巻：３１５〜３３０頁）またはＡ．ｒｈｉｚｏｇｅｎｅｓ（ＢｅｖａｎおよびＣｈｉｌｔｏｎ著、１９８２年、Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｇｅｎｅｔ．、第１６巻：３５７〜３８４頁；ＴｅｐｆｅｒおよびＣａｓｓｅ−Ｄｅｌｂａｒｔ著、１９８７年、Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．Ｓｃｉ．、第４（１）巻、２４〜２８頁）を注入することにより行うことができる。好ましくは、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓでの植物細胞または組織の形質転換は、Ｉｓｈｉｄａらが記載のプロトコール（１９９６年、Ｎａｔ．Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．、第１４（６）巻、７４５〜７５０頁）に従って行われる。当業者は、形質転換すべき植物の性質に従った適切な方法を選択する。
本発明の主題は、本発明による植物を産生する方法でもある。この方法は、前述のように形質転換された植物細胞から形質転換植物を再生することにある。再生は、植物の性質に依存する任意の適切な方法により得られる。
本発明は、これらの形質転換された植物の一部および、これらの植物の子孫も含む。「これらの植物の一部」という用語は、地面の上であっても下であっても、これらの植物の任意の器官を意味すると意図される。地面の上の器官は、茎、葉、および雄および雌の生殖器官を含む花である。地面の下の器官は、主に根であるが、塊茎でもあり得る。「子孫」という用語は、主に、これらの植物の互いの生殖により生じる胚芽を含む種子である。拡大解釈では、「子孫」という用語は、親の少なくとも一つが本発明による形質転換植物である交雑から誘導される各新しい世代において形成される全ての種子に適用される。子孫は、前記形質転換植物の植物性増殖により得ることもできる。本発明による種子は、殺真菌性、除草性、殺虫性、殺線虫性、殺菌性または殺ウイルス性から選択される活性を有する少なくとも一つの活性産物を含む農薬組成物で被覆することができる。
本発明による形質転換植物は、関心のある蛋白をコードする少なくとも一つの他の遺伝子を含むことができ、この他の遺伝子も、植物中で機能的でありＰＤＨおよび／またはＨＰＰＤを過発現させる遺伝子と同時、その前または後に植物のゲノム中に人工的に導入される。関心のある蛋白をコードする遺伝子のうち、除草剤への耐性を得るためのもう一つの酵素をコードする遺伝子、例えば、ビアラホスへの耐性を得るためのｂａｒ遺伝子（Ｗｈｉｔｅら著、ＮＡＲ、第１８巻：１０６２頁、１９９０年）をコードする遺伝子、またはグリホサートへの耐性を得るためのＥＰＳＰＳ酵素（米国特許第５，１８８，６４２号、ＷＯ９７／０４１０３）をコードする遺伝子を挙げることができる。殺虫性毒素をコードする遺伝子、例えば、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ細菌のδ−内毒素をコードする遺伝子も挙げることができる（例えば、国際特許出願ＷＯ９８／４０４９０）。疾患への抵抗性を得るための他の遺伝子、例えば、欧州特許出願第０ ５３１ ４９８号または米国特許第５，８６６，７７８号に記載のようなオキサラートオキシダーゼ酵素をコードする遺伝子もこれらの植物中に含まれてよく、特許出願ＷＯ９７／３００８２、ＷＯ９９／２４５９４、ＷＯ９９／０２７１７、ＷＯ９９／５３０５３およびＷＯ９９／９１０８９に記載のような別の抗菌および／または抗真菌性ペプチドをコードする遺伝子も挙げられる。植物の栽培学的特徴をコードする遺伝子、特に、米国特許第５，５５２，３０６号、５，６１４，３１３および特許出願ＷＯ９８／４６７６３およびＷＯ９８／４６７６４に記載のようなδ−６不飽和化酵素をコードする遺伝子または、特許出願ＷＯ００／０１８３３およびＷＯ００／３６１２７に記載のようなセリンアセチルトランスフェラーゼ（ＳＡＴ）酵素をコードする遺伝子も挙げることができる。
関心のある蛋白をコードするさらなる遺伝子を、ベクターにより取り込むことができる。この場合、ベクターは、ＰＤＨ酵素および／またはＨＰＰＤ酵素をコードする本発明の遺伝子、およびもう一つのペプチドまたは関心のある蛋白をコードする少なくとも一つの遺伝子を含む。
これらは、前述の通常の技術に従って、前記さらなる遺伝子を含む少なくとも一つの他のベクターにより取り込むこともできる。
本発明による植物は、一方が、本発明によるＰＤＨ酵素および／またはＨＰＰＤ酵素をコードする遺伝子を有し、他方が、少なくとも一つの他の関心のあるペプチドまたは蛋白をコードするもう一つの遺伝子を有する、植物の交雑により得ることもできる。
本発明により形質転換された植物は、単子葉植物または双子葉植物であってよい。好ましくは、これらの植物は、栽培学的に重要な植物である。単子葉植物は小麦、トウモロコシまたはイネであるのが良い。双子葉植物はナタネ、ダイズ、タバコまたは綿花であるのが良い。
本発明は、本発明の形質転換植物を栽培する方法であって、前記植物の栽培に適した耕地（ｆｉｅｌｄ）の領域に前記形質転換植物の種子を播くこと、前記種子または前記形質転換植物に実質的に影響を与えることなく前記耕地の領域にＨＰＰＤ阻害剤を含む少なくとも一種の除草剤組成物を適用すること、次に、所望の成熟度に達したときに栽培植物を採取すること、および任意に、採取した植物から種子を分離することから構成されることを特徴とする方法にも関する。
本発明は、ＨＰＰＤ阻害剤への耐性を植物に与えるための方法であって、前記植物を、同時又は順次に、
（１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
（２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
で形質転換することを特徴とする方法にも関する。
本発明は、プレニルキノン類、特にトコフェロール類、トコトリエノール類および／またはプラストキノン類の産生のための、本発明による植物または植物細胞の使用にも関する。
本発明は、植物中のプレニルキノン類の量を増加させる方法であって、前記植物を、同時又は順次に、
（１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
（２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
で形質転換することを特徴とする方法にも関する。
本発明は、プレニルキノン類を産生する方法であって、本発明による形質転換植物細胞または植物を、前記植物細胞または前記植物の成長および増殖に適した培養培地中で培養する工程を含むことを特徴とする方法にも関する。
前記方法の特定の実施態様によれば、産生されたプレニルキノン類が好ましくは、ビタミンＥに代表されるトコフェロール類である。
前記方法の特定の実施態様によれば、産生されたプレニルキノン類は好ましくはトコトリエノール類である。
本発明の特定の実施態様によれば、プレニルキノン類を産生するための前記方法は、前記形質転換植物細胞によりまたは第１の工程で培養された前記形質転換植物により産生された前記プレニルキノン類を抽出するその後の工程を含む。
プレニルキノン類を産生するための前記方法を、本発明による形質転換植物細胞を用いて行う場合、前記植物細胞は、その生存および成長を促進する培養培地中で培養される。当業者は、前記植物細胞を最適に成長させるように前記培養培地の組成を決めることができる。例えば、植物細胞を培養するための方法および培地が、ＭｕｒａｓｈｉｇｅおよびＳｋｏｏｇの文献（１９６２年、Ｐｈｙｓｉｏｌ．Ｐｌａｎｔ．第１５巻：４７３〜４９７頁）およびＧａｍｂｏｒｇらの文献（１９６８年、Ｅｘｐｔｌ．Ｃｅｌｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ、第５０巻：１５１〜１５９頁）に記載されている。
さらに、本発明による形質転換植物細胞を用いて前記方法を行う場合、産生された前記プレニルキノン類は、培養培地中に分泌されてよいしまたは分泌されなくてもよい。前記プレニルキノン類が培養培地中に分泌される場合、前記方法の抽出工程の前に、前記植物細胞の除去により培養培地を回収する工程を行うことができる。前記植物細胞の除去により培養培地を回収するそのような工程は、液体画分に含まれている固形分を分離する任意の手段により行うことができる。特に、濾過および遠心分離は、この工程を行うための適切な手段である。
プレニルキノン類が培養培地中に分泌されない場合、抽出工程は、培養された植物細胞の濃縮、単離された植物細胞の破壊、破壊された細胞抽出物の遠心分離および、その後の、前記プレニルキノン類を含む上澄みの回収からなる一連の工程により行うことができる。細胞破壊工程は、機械的粉砕（圧力差、超音波の作用、摩砕による）、酵素的溶解または浸透圧衝撃のような当業者に知られた技術を用いて行うことができ、前記技術は個々にまたは組み合わせて用いることができる。
プレニルキノン類を産生するための前記方法を本発明による形質転換植物を用いて行う場合、前記植物は、その生存およびその成長に適した基質上で培養され、前記基質は天然または人工的であり得る。天然基質は、例えば、土または土の混合物であってよく、前記植物は、例えば培養チャンバー中のような制御条件下、例えば温室中のような半制御条件下、または例えば露出地面のような天然条件下で培養することができる。人工基質は、例えば、液体基質または寒天基質であってよく、その組成物は、本発明による植物の生存および成長を促進する。当業者は、前記植物を最適に成長させるように前記人工基質の組成を決めることができる。植物を培養するための基質の例として、栄養要素Ｎ（窒素）、Ｐ（リン）およびＫ（カリウム）を含む栄養溶液、またはこれらの媒体上に植物を成長させる任意の他の市販または調節栄養溶液を注いだ岩綿または蛭石のような培地を挙げることができる。本発明による植物を人工基質上で培養する場合、これらは、通常、培養チャンバー中で制御条件下に培養される。
さらに、本発明による形質転換植物を用いて前記方法を行う場合、産生された前記プレニルキノン類は、通常、前記形質転換植物中に固定される。
本発明による形質転換植物または前記植物の一部は、ヒトまたは動物の食事を意図した食物組成物中に直接用いて取り込む、または、それらが含むプレニルキノン類の抽出を行うことができる。前述のように、「植物の一部」という用語は、地面の上であっても地面の下であっても、これらの植物の任意の器官を意味すると意図される。地面の上の器官は、茎、葉、および雄および雌の生殖器官を含む花、ならびに種子でもある。地面の下の器官は、主に根であるが、塊茎でもあり得る。本発明の好ましい実施態様によれば、種子は、食用を意図した形質転換植物の一部である。
本発明は、本発明による形質転換植物の種子も含み、この種子は、非形質転換植物の種子と比較してプレニルキノン類に富んでいる。さらに、本発明は、種子または本発明による形質転換植物の他の部分を含む食物組成物も含む。植物のこれらの部分、特に種子から産生された油も、本発明の主題である。
形質転換植物中で産生されたプレニルキノン類を回収するために、培養された植物の粉砕、粉砕植物材料の濾過および／または遠心分離、および、その後の、前記プレニルキノン類を含む上澄みの回収からなる一連の工程により抽出工程を行うことができ、前記回収は、脂質化合物の抽出からなることができる。好ましくは、粉砕工程は、機械的粉砕（圧力差、超音波の作用、摩砕による）からなり、その後、酵素的溶解または浸透圧衝撃を行うことができる。
本方法は、得られた植物細胞または植物の抽出物中に含まれるプレニルキノン類を精製する最終的工程を行うこともできる。前記プレニルキノン類の精製は、化合物を濃縮または分離する技術、特に、当業者に良く知られている微小濾過、限外濾過、電気泳動またはクロマトグラフィーの技術により行うことができる。精製されたプレニルキノン類を得るために、当業者は、前記プレニルキノン類を含む精製画分を確認するために前記プレニルキノン類を測定する方法を用いることができる。この方法によれば、産生された前記プレニルキノン類は、好ましくは５０％、６０％、７０％、８０％、９０％、９５％、９９％または有利には１００％の純度を有する。
本発明の特定の実施態様によれば、本発明による形質転換植物は、植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子および植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子に加えて、植物中で機能的でありゲラニル−ゲラニルリダクターゼ（以下、ＧＧＲと呼ぶ）酵素を過発現させる遺伝子を含む。産生されたプレニルキノン類のうち、そのような植物は、トコトリエノール類およびプラストキノン類に比して、優先的に、トコフェロール類、特にビタミンＥを産生する。
ＧＧＲ酵素は、ゲラニル−ゲラニルピロホスフェートからフィチルピロホスフェートへの転化を触媒する酵素である。特定の実施態様によれば、植物中で機能的でありＧＧＲを過発現させる遺伝子は、植物ＧＧＲをコードする遺伝子のコード配列を含む。例えば、Ｋｅｌｌｅｒらの文献（１９９８年、Ｅｕｒ．Ｊ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．第２５１（１−２）巻：４１３〜４１７頁）に公開されているＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓのＧＧＲをコードする配列、または、受入番号ＡＪ００７７８９（タバコ）、ＡＦ０６９３１８（Ｍｅｓｅｍｂｒｙａｎｔｈｅｎｕｍ ｃｒｙｓｔａｌｌｉｎｕｍ）、Ｙ１４００４（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ）およびＱ５５０８７（Ｓｙｎｅｃｈｏｃｙｓｔｉｓ種ＰＣＣ６８０３）により記載された配列を用いることができる。
Figure 0004683923
Figure 0004683923
以下の実施例により、本発明を説明することができるが、その範囲を制限するものではない。
これらの実施例で以下に記載の方法または工程の全てが、例示的なものであり、同じ結果を達成するために利用できる種々の方法のうちから選択される。この選択は、結果の質に影響を与えず、その結果、同じ結果を得るために当業者が適切な方法を用いることができる。特に、および実施例で別段の断りがない限り、用いられる全ての組換えＤＮＡ技術は、Ｓａｍｂｒｏｏｋらの文献（１９８９年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版、Ｎｏｌａｎ Ｃ．編、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，ニューヨーク州）、ＳａｍｂｒｏｏｋおよびＲｕｓｓｅｌの文献（２００１、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第３版、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ，ニューヨーク州）、Ａｕｓｕｂｅｌらの文献（１９９４年、Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ、Ｃｕｒｒｅｎｔ ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ、米国、第１巻および２巻）、およびＢｒｏｗｎの文献（１９９８年、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ＬａｂＦａｘ、第２版、Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ、英国）に記載の標準的プロトコールに従って行われる。植物分子生物学用の標準的材料および方法が、Ｒ．Ｄ．Ｄ．Ｃｒｏｙ（１９９３年、Ｐｌａｎｔ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ ＬａｂＦａｘ、ＢＩＯＳ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ Ｌｔｄ（英国）およびＢｌａｃｋｗｅｌｌ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎｓ（英国））に記載されている。ＰＣＲ（ポリメラーゼ連鎖反応）用の標準的材料および方法も、ＤｉｅｆｆｅｎｂａｃｈおよびＤｖｅｋｓｌｅｒの文献（１９９５年、ＰＣＲ Ｐｒｉｍｅｒ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、ニューヨーク州）およびＭｃＰｈｅｒｓｏｎらの文献（２０００、ＰＣＲ−Ｂａｓｉｃｓ：Ｆｒｏｍ ｂａｃｋｇｒｏｕｎｄ ｔｏ ｂｅｎｃｈ，第１版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ Ｖｅｒｌａｇ、独国）に記載されている。
ＨＰＰＤ活性の測定
Ｇａｒｃｉａらの文献（１９９７年、Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｊ．第３２５巻、７６１〜７６９頁）またはＧａｒｃｉａらの文献（１９９９年、Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．第１１９巻、１５０７〜１５１６頁）に記載の方法によりＨＰＰＤ活性を測定することができる。
プレフェナート脱水素酵素活性の測定
プレフェナート脱水素酵素活性は、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ、ｐＨ８．６、３００μＭのプレフェナートおよび１ｍＭのＮＡＤまたはＮＡＤＰを含み合計体積が２００μｌである溶液中でＮＡＤＨまたはＮＡＤＰＨの形成を２５℃で、３４０ｎｍでの分光光度モニターにより測定する。
ＨＰＰＤ過発現キメラ遺伝子の構築
ＨＰＰＤ阻害性除草剤への抵抗性を植物に付与するためにＨＰＰＤを過発現させるキメラ遺伝子を構築した。
これは、転写の方向において、欧州特許出願第０ ５０７ ６９８号に記載のような「二重ヒストン」プロモーター（ＰｄＨ４）、ＣａｒｒｉｎｇｔｏｎおよびＦｒｅｅｄの文献（１９９０年；Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．第６４巻：１５９０〜１５９７頁）に記載のタバコエッチウイルス翻訳エンハンサー（ＴＥＶ）配列、欧州特許出願第０ ５０８ ９０９号に記載のような最適化トランジットペプチド（ＯＴＰ）をコードする配列、特許出願ＷＯ９６／３８５６７に記載のＡｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ＨＰＰＤ遺伝子のコード部分、次いで、Ｂｅｖａｎらの文献（１９８３年、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．第１１（２）巻、３６９〜３８５頁）に記載のノパリンシンターゼ遺伝子のｎｏｓターミネーターを組み立てることから構成される。次に、アセンブリを、バイナリーベクターにクローニングし、以下の構造を有する。
Figure 0004683923
ＰＤＨ過発現キメラ遺伝子の構築
キメラ遺伝子過発現ＰＤＨの構築は、翻訳の方向において、欧州特許出願第０ ５０７ ６９８号に記載のような「二重ヒストン」プロモーター（ＰｄＨ４）、ＣａｒｒｉｎｇｔｏｎおよびＦｒｅｅｄの文献（１９９０年；Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．第６４巻：１５９０〜１５９７頁）に記載のタバコエッチウイルス翻訳エンハンサー（ＴＥＶ）配列、欧州特許出願第０ ５０８ ９０９号に記載のような最適化トランジットペプチド（ＯＴＰ）をコードする配列、Ｍａｎｎｈａｕｐｔらの文献（１９８９年、Ｇｅｎｅ第８５巻、３０３〜３１１頁）に記載の酵母ＰＤＨ遺伝子のコード部分、およびＢｅｖａｎらの文献（１９８３年、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．第１１（２）巻、３６９〜３８５頁）に記載のノパリンシンターゼ遺伝子のｎｏｓターミネーターを組み立てることからなる。次に、アセンブリを、カナマイシン抵抗性遺伝子（ＮＰＴＩＩ）を含むバイナリーベクターｐＲＤ２２４にクローニングしてベクターｐＲＤ２２４−ＰＤＨを得る。このベクターは以下の構造を有する。
Figure 0004683923
次に、このバイナリーベクターを用いて、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ菌株ＥＨＡ１０５を形質転換し、Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ菌株ＥＨＡ１０５−ｐＲＤ ２２４−ＰＤＨを得た。このＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ菌株を用いて、タバコＰＢＤ６およびタバコＰＢＤ６−ＡＲＡ９を形質転換した（タバコは、Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ ＨＰＰＤを過発現させるキメラ遺伝子で形質転換）。
形質転換された植物を、カナマイシン上で選択する。
ＰＤＨを過発現している発現カセットでのタバコＰＢＤ６−ＡＲＡ９の形質転換
ＰＢＤ６−ＡＲＡ９タバコ植物は、実施例３に記載のようなキメラ遺伝子で形質転換したタバコ植物であり、特許出願ＷＯ９６／３８５６７に記載のＡ．ｔｈａｌｉａｎａ ＨＰＰＤを過発現している。ＰＢＤ６−ＡＲＡ９タバコ植物を得るための方法が、Ｇａｒｃｉａらの文献（１９９９年、Ｐｌａｎｔ Ｐｈｙｓｉｏｌ．第１１９巻、１５０７〜１５１６頁）に記載されている。実施例４に記載のようなＰＤＨを過発現しているキメラ遺伝子で形質転換されたＰＢＤ６−ＡＲＡ９系を、ＡＲＡ９−ＰＤＨ系と呼ぶ。
５．１：形質転換
ｆｏｌｉａｒ ｄｉｓｋ技術（Ｈｏｒｓｃｈら著、１９８５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ第２２７巻：１２２９〜１２３１頁）に従って、非発癌遺伝子であるＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ菌株ＥＨＡ１０５−ｐＲＤ２２４−ＰＤＨを用いて形質転換を行う。
５．２：再生
３０ｇ／ｌのスクロースおよび３５０ｍｇ／ｌのセフォタキシムおよび２００ｍｇ／ｍｌのカナマイシンを含むＭｕｒａｓｈｉｇｅおよびＳｋｏｏｇ（ＭＳ）基礎培地上で、外植葉からＡＲＡ９−ＰＤＨタバコ植物を再生する。外植葉は、温室中の植物から得、ｆｏｌｉａｒ ｄｉｓｋ技術（Ｈｏｒｓｃｈら著、１９８５年、Ｓｃｉｅｎｃｅ第２２７巻：１２２９〜１２３１頁）に従って３つの連続工程で再生する：
・第１の工程は、３０ｇ／ｌのスクロースと０．０５ｍｇ／ｌのナフチル酢酸（ＡＮＡ）および２ｍｇ／ｌのベンジルアミノプリン（ＢＡＰ）も含むＭＳ基礎培地上で１５日間、そして２００ｍｇ／ｍｌのカナマイシンで若枝を誘導することを含む。
・この工程中に形成された緑若枝を、次に、３０ｇ／ｌのスクロースおよび２００ｍｇ／ｍｌのカナマイシンが加えられているが、ホルモンを含まないＭＳ培地上で１０日間培養することにより成長させる。
・続いて成長した若枝を除去し、次に、塩、ビタミンおよび糖の半分の量、２００ｍｇ／ｍｌのカナマイシンを含み、ホルモンを含まないＭＳ発根媒体上で培養する。約１５日後、発根した若枝を温室内に移す。
形質転換された植物の耐性を、ジケトニトリル（ＤＫＮ）で処理した土の上に播種することにより調べる。
ＰＢＤ６−ＡＲＡ９およびＡＲＡ９−ＰＤＨタバコ植物のＨＰＰＤ阻害剤への耐性
６．１．ジケトニトリル（ＤＫＮ）への耐性
１３個のＡＲＡ９−ＰＤＨ系および、形質転換用の出発材料として用いたＰＢＤ６−ＡＲＡ９系を、ＤＫＮの濃度が５、１０および３２ｐｐｍと増加するように蒔いた。
ＤＫＮが５ｐｐｍの場合、全てのＰＢＤ６−ＡＲＡ９およびＡＲＡ９−ＰＤＨ系は、特にそれら全てがＡ．ｔｈａｌｉａｎａ ＨＰＰＤを過発現するので、抵抗性である。ＤＫＮが１０ｐｐｍの場合、親系ＰＢＤ６−ＡＲＡ９が完全に阻害される。一方、全てのＡＲＡ９−ＰＤＨ系は、阻害される一つ（ＡＲＡ９−ＰＤＨ４）のみを除いて、優れた抵抗性である。ＤＫＮが３２ｐｐｍの場合、１０ｐｐｍのＤＫＮに抵抗性であったＡＲＡ９−ＰＤＨ系の全てが、抵抗性であり正常に成長する植物を与えるが、組換えＨＰＰＤのみを発現する親系ＰＢＤ６−ＡＲＡ９は完全に阻害される。最良の耐性を示す系は、ＡＲＡ９−ＰＤＨ１４、ＡＲＡ９−ＰＤＨ１８およびＡＲＡ９−ＰＤＨ２４系である。
６．２．スルコトリオンおよびメソトリオンへの耐性
ＨＰＰＤ阻害剤スルコトリオンおよびメソトリオンを用いて同じ実験を行った。ＡＲＡ９−ＰＤＨ１８系は、３μＭのメソトリオンおよび６μＭのスルコトリオンに耐性であるが、Ｐｅｔｉｔ Ｈａｖａｎａ型の野生型タバコ系は、０．３７５μＭのこれら二つの化合物に感受性であることが分かった。
ＰＢＤ６−ＡＲＡ９およびＡＲＡ９−ＰＤＨタバコ植物中でのトコフェロールおよびトコトリエノール水準の測定
分析した植物の各々の中間葉および幼若葉のサンプルから、Ｆｏｌｃｈの方法（Ｆｏｌｃｈら著、１９５７頁、Ｊ．Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．、２２６〜４９７頁）により脂質抽出物を得る。次に、それらのトコフェロールおよびトコトリエノール含量の分析を、Ｆｒａｚｅｒらの方法（２０００年、Ｐｌａｎｔ Ｊ．第２４巻：５５１〜５５８頁）に従ったＨＰＬＣにより行う。次に、これらの含量を、対照産物に関して定量し、次に、固形分１ｇ当たりのμｇで表す。結果を表１に示す。
Figure 0004683923
これらの結果は、ＰＤＨおよびＨＰＰＤ酵素を過発現させるキメラ遺伝子で組み合わせて形質転換したＡＲＡ９−ＰＤＨタバコ植物は、ＨＰＰＤ酵素をコードする遺伝子で単独形質転換したＰＢＤ６−ＡＲＡ９タバコ植物と比べて、プレニルキノン類、特に、トコフェロール類およびトコトリエノール類を多量に与えることを明らかに示している。トコトリエノール類について最高の効果が得られる。この効果は、***組織に富む幼若葉においていっそう顕著である。この組織特異性の原因は、ＡＲＡ９−ＰＤＨタバコ植物を作るために用いられるプロモーターであって、植物の迅速成長組織、特に***組織（ＰｄＨ４）において優先的に発現されるプロモーターに関係する。他の型のプロモーターの使用により、植物の他の組織において同様の効果を得ることが可能となるはずである。
さらに、種々のＡＲＡ９−ＰＤＨ系の間で観察される相違は、異なる形質転換事象が含まれるという事実に由来する。ホモ接合性系の成長を意図した最適系の間での交雑は、プレニルキノン類の産生、およびＨＰＰＤ阻害剤への耐性に関して同等である系を得ることを可能にするはずである。

Claims (7)

  1. 形質転換植物を栽培する方法であって、前記植物の栽培に適した耕地の領域に前記形質転換植物の種子を播くことと、前記形質転換種子または前記形質転換植物に実質的に影響を与えることなく前記耕地の前記領域にＨＰＰＤ阻害剤を含む少なくとも一種の除草剤組成物を適用することと、次に、所望の成熟度に達したときに栽培した植物を採取することと、任意に、採取した植物から種子を分離することとを具備することを特徴とする方法であって、
    前記形質転換植物は、
    （１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
    （２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
    を含むことを特徴とする形質転換植物であって、但し、ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子は、Ｅｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃｏｌａのＴｙｒＡ遺伝子ではない、前記方法。
  2. 植物中で機能的でありＰＤＨを過発現させる遺伝子が、酵母ＰＤＨをコードする遺伝子のコード配列を含むことを特徴とする、請求項１に記載の方法。
  3. 酵母ＰＤＨをコードする遺伝子のコード配列が、サッカロミセル・セレビシエ（Ｓａｃｃｈａｒｏｍｙｃｅｓ ｃｅｒｅｖｉｓｅａｅ）遺伝子のコード配列であることを特徴とする、請求項２に記載の方法。
  4. 植物中で機能的でありＨＰＰＤを過発現させる遺伝子が、植物ＨＰＰＤをコードする遺伝子のコード配列を含むことを特徴とする、請求項１から３のいずれか一項に記載の方法。
  5. 植物ＨＰＰＤをコードする遺伝子のコード配列が、アラビドプシス・タリアナ（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ ｔｈａｌｉａｎａ）遺伝子のコード配列であることを特徴とする、請求項４に記載の方法。
  6. 植物を、同時又は順次に、
    （１）植物中で機能的でありＰＤＨ酵素を過発現させる遺伝子、
    （２）植物中で機能的でありＨＰＰＤ酵素を過発現させる遺伝子
    で形質転換することを特徴とする、植物のＨＰＰＤ阻害剤への耐性を増加させるための方法であって、但し、ＰＤＨ酵素をコードする遺伝子は、Ｅｒｗｉｎｉａ ｈｅｒｂｉｃｏｌａのＴｙｒＡ遺伝子ではない前記方法。
  7. 前記形質転換された植物を、同時または順次に、さらに、植物中で機能的でありＧＧＲ酵素を過発現させる遺伝子で形質転換することを特徴とする、請求項６に記載の方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2844142B1 (fr) * 2002-09-11 2007-08-17 Bayer Cropscience Sa Plantes transformees a biosynthese de prenylquinones amelioree
FR2848571A1 (fr) * 2002-12-12 2004-06-18 Bayer Cropscience Sa Cassette d'expression codant pour une hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et plantes contenant un tel gene tolerantes aux herbicides
CL2007003744A1 (es) * 2006-12-22 2008-07-11 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un derivado 2-piridilmetilbenzamida y un compuesto insecticida; y metodo para controlar de forma curativa o preventiva hongos fitopatogenos de cultivos e insectos.
CL2007003743A1 (es) * 2006-12-22 2008-07-11 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende fenamidona y un compuesto insecticida; y metodo para controlar de forma curativa o preventiva hongos fitopatogenos de cultivos e insectos.
EP1969931A1 (de) * 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Fluoalkylphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
EP1969930A1 (de) 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
EP1969929A1 (de) 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG Substituierte Phenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
US9199922B2 (en) 2007-03-12 2015-12-01 Bayer Intellectual Property Gmbh Dihalophenoxyphenylamidines and use thereof as fungicides
EP2120558B1 (de) * 2007-03-12 2016-02-10 Bayer Intellectual Property GmbH 3,4-Disubstituierte Phenoxyphenylamidin-Derivate und deren Verwendung als Fungizide
EP1969934A1 (de) 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG 4-Cycloalkyl-oder 4-arylsubstituierte Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
CN101663285A (zh) 2007-04-19 2010-03-03 拜尔农作物科学股份公司 噻二唑基羟苯基脒及其用作杀菌剂的用途
DE102007045956A1 (de) 2007-09-26 2009-04-09 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombination mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045957A1 (de) 2007-09-26 2009-04-09 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akarziden Eigenschaften
DE102007045922A1 (de) 2007-09-26 2009-04-02 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045955A1 (de) 2007-09-26 2009-04-09 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045919B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045920B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Synergistische Wirkstoffkombinationen
DE102007045953B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
EP2090168A1 (de) 2008-02-12 2009-08-19 Bayer CropScience AG Methode zur Verbesserung des Pflanzenwachstums
EP2194785A2 (de) * 2007-10-02 2010-06-16 Bayer CropScience AG Methoden zur verbesserung des pflanzenwachstums
EP2072506A1 (de) 2007-12-21 2009-06-24 Bayer CropScience AG Thiazolyloxyphenylamidine oder Thiadiazolyloxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
CA2950653C (en) * 2008-04-14 2021-01-05 Bayer Cropscience Nv New mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, dna sequence and isolation of plants which are tolerant to hppd inhibitor herbicides
EP2168434A1 (de) 2008-08-02 2010-03-31 Bayer CropScience AG Verwendung von Azolen zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress
AU2009278225B2 (en) 2008-08-08 2014-06-19 Bayer Cropscience Nv Methods for plant fiber characterization and identification
BRPI0918430A2 (pt) 2008-08-14 2015-11-24 Bayer Cropscience Ag 4-fenil-1h-pirazóis inseticidas.
DE102008041695A1 (de) * 2008-08-29 2010-03-04 Bayer Cropscience Ag Methoden zur Verbesserung des Pflanzenwachstums
EP2201838A1 (de) 2008-12-05 2010-06-30 Bayer CropScience AG Wirkstoff-Nützlings-Kombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
EP2198709A1 (de) 2008-12-19 2010-06-23 Bayer CropScience AG Verfahren zur Bekämpfung resistenter tierischer Schädlinge
WO2010075966A1 (de) 2008-12-29 2010-07-08 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten nutzung des produktionspotentials genetisch modifizierter pflanzen
EP2223602A1 (de) 2009-02-23 2010-09-01 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials genetisch modifizierter Pflanzen
EP2204094A1 (en) 2008-12-29 2010-07-07 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants Introduction
EP2039772A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants introduction
EP2039770A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
EP2039771A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
US8487118B2 (en) 2009-01-19 2013-07-16 Bayer Cropscience Ag Cyclic diones and their use as insecticides, acaricides and/or fungicides
EP2227951A1 (de) 2009-01-23 2010-09-15 Bayer CropScience AG Verwendung von Enaminocarbonylverbindungen zur Bekämpfung von durch Insekten übertragenen Viren
BRPI1004930B1 (pt) 2009-01-28 2017-10-17 Bayer Intellectual Property Gmbh Compounds, fungicidal composition and method for controlling phytopathogenic fungi of crops.
AR075126A1 (es) 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
EP2398770B1 (en) 2009-02-17 2016-12-28 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicidal n-(phenylcycloalkyl)carboxamide, n-(benzylcycloalkyl)carboxamide and thiocarboxamide derivatives
EP2218717A1 (en) 2009-02-17 2010-08-18 Bayer CropScience AG Fungicidal N-((HET)Arylethyl)thiocarboxamide derivatives
TW201031331A (en) 2009-02-19 2010-09-01 Bayer Cropscience Ag Pesticide composition comprising a tetrazolyloxime derivative and a fungicide or an insecticide active substance
DE102009001469A1 (de) 2009-03-11 2009-09-24 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001681A1 (de) 2009-03-20 2010-09-23 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001732A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001728A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001730A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
WO2010108507A2 (de) 2009-03-25 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Synergistische wirkstoffkombinationen
AP3073A (en) 2009-03-25 2014-12-31 Bayer Cropscience Ag Active ingredient combinations with insecticidal and acaricidal properties
WO2010108506A1 (de) 2009-03-25 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden eigenschaften
CN102448304B (zh) 2009-03-25 2015-03-11 拜尔农作物科学股份公司 具有杀昆虫和杀螨特性的活性成分结合物
WO2010108504A1 (de) 2009-03-25 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden eigenschaften
EP2232995A1 (de) 2009-03-25 2010-09-29 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
EP2239331A1 (en) 2009-04-07 2010-10-13 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
US8835657B2 (en) 2009-05-06 2014-09-16 Bayer Cropscience Ag Cyclopentanedione compounds and their use as insecticides, acaricides and/or fungicides
AR076839A1 (es) 2009-05-15 2011-07-13 Bayer Cropscience Ag Derivados fungicidas de pirazol carboxamidas
EP2251331A1 (en) 2009-05-15 2010-11-17 Bayer CropScience AG Fungicide pyrazole carboxamides derivatives
EP2255626A1 (de) 2009-05-27 2010-12-01 Bayer CropScience AG Verwendung von Succinat Dehydrogenase Inhibitoren zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress
CA2763835C (en) * 2009-06-02 2017-01-31 Bayer Cropscience Ag Use of succinate dehydrogenase inhibitors for controlling sclerotinia spp.
JP5642786B2 (ja) 2009-07-16 2014-12-17 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ フェニルトリアゾール類を含む相乗的活性化合物組み合わせ
WO2011015524A2 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Bayer Cropscience Ag Fungicide heterocycles derivatives
EP2292094A1 (en) 2009-09-02 2011-03-09 Bayer CropScience AG Active compound combinations
EP2343280A1 (en) 2009-12-10 2011-07-13 Bayer CropScience AG Fungicide quinoline derivatives
AU2010334818B2 (en) * 2009-12-23 2015-07-09 Bayer Intellectual Property Gmbh Plants tolerant to HPPD inhibitor herbicides
UY33142A (es) * 2009-12-23 2011-07-29 Bayer Cropscience Ag Plantas tolerantes a herbicidas inhibidores de las hppd
WO2011076882A1 (en) 2009-12-23 2011-06-30 Bayer Cropscience Ag Plants tolerant to hppd inhibitor herbicides
UY33143A (es) * 2009-12-23 2011-07-29 Bayer Cropscience Ag Plantas tolerantes a herbicidas inhibidores de las hppd
CN102906252A (zh) * 2009-12-23 2013-01-30 拜尔知识产权有限公司 对hppd抑制剂型除草剂耐受的植物
BR112012012107B1 (pt) 2009-12-28 2019-08-20 Bayer Cropscience Ag Composto, composição fungicida e método para controlar fungos fitopatogênico de culturas
TWI528898B (zh) 2009-12-28 2016-04-11 拜耳知識產權公司 殺真菌劑肟醯基（ｈｙｄｒｏｘｉｍｏｙｌ）-雜環衍生物
JP5782657B2 (ja) 2009-12-28 2015-09-24 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 殺菌剤ヒドロキシモイル−テトラゾール誘導体
CA2785845A1 (en) * 2010-01-05 2011-07-14 Syngenta Participations Ag Constitutive synthetic plant promoters and methods of use
EP2525658B1 (de) 2010-01-22 2017-03-01 Bayer Intellectual Property GmbH Akarizide und/oder insektizide wirkstoffkombinationen
AR080105A1 (es) 2010-02-02 2012-03-14 Bayer Cropscience Ag Transformacion de soja usando inhibidores de hidrofenil piruvato dioxigenasa (hppd) como agentes de seleccion
ES2523503T3 (es) 2010-03-04 2014-11-26 Bayer Intellectual Property Gmbh 2-Amidobencimidazoles sustituidos con fluoroalquilo y su uso para el aumento de la tolerancia al estrés en plantas
JP2013522274A (ja) 2010-03-18 2013-06-13 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 非生物的な植物ストレスに対する活性剤としてのアリールスルホンアミド類及びヘタリールスルホンアミド類
AR080827A1 (es) 2010-04-06 2012-05-09 Bayer Cropscience Ag Utilizacion del acido 4- fenil- butirico y/o de sus sales para el aumento de la tolerancia al estres en plantas
JP6046604B2 (ja) 2010-04-09 2016-12-21 バイエル・インテレクチュアル・プロパティ・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツングＢａｙｅｒ Ｉｎｔｅｌｌｅｃｔｕａｌ Ｐｒｏｐｅｒｔｙ ＧｍｂＨ 非生物的ストレスに対する植物の耐性を増強させるための（１−シアノシクロプロピル）フェニルホスフィン酸の誘導体、それらのエステル及び／又はそれらの塩の使用
EP2563784A1 (en) 2010-04-28 2013-03-06 Bayer CropScience AG Fungicide hydroximoyl-heterocycles derivatives
BR112012027558A2 (pt) 2010-04-28 2015-09-15 Bayer Cropscience Ag ''composto da fórmula (i), composição fungicida e método para o controle de fungos fitogênicos de colheitas''
WO2011134911A2 (en) 2010-04-28 2011-11-03 Bayer Cropscience Ag Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
ES2532971T3 (es) 2010-06-03 2015-04-06 Bayer Intellectual Property Gmbh N-[(het)arilalquil)]pirazol (tio)carboxamidas y sus análogos heterosustituidos
UA110703C2 (uk) 2010-06-03 2016-02-10 Байєр Кропсайнс Аг Фунгіцидні похідні n-[(тризаміщений силіл)метил]-карбоксаміду
CN103080091A (zh) 2010-06-03 2013-05-01 拜耳知识产权有限责任公司 O-环丙基环己基-羧酰替苯胺类和它们用作杀真菌剂的用途
WO2011151369A1 (en) 2010-06-03 2011-12-08 Bayer Cropscience Ag N-[(het)arylethyl)] pyrazole(thio)carboxamides and their heterosubstituted analogues
US9593317B2 (en) 2010-06-09 2017-03-14 Bayer Cropscience Nv Methods and means to modify a plant genome at a nucleotide sequence commonly used in plant genome engineering
CN109504700A (zh) 2010-06-09 2019-03-22 拜尔作物科学公司 植物基因组改造中常用的在核苷酸序列上修饰植物基因组的方法和工具
KR20130041225A (ko) 2010-07-20 2013-04-24 바이엘 크롭사이언스 아게 항진균제로서의 벤조시클로알켄
WO2012028587A1 (de) 2010-09-03 2012-03-08 Bayer Cropscience Ag Dithiin-tetra (thio) carboximide zur bekämpfung phytopathogener pilze
EP2611300B1 (de) 2010-09-03 2016-04-06 Bayer Intellectual Property GmbH Substituierte anellierte dihydropyrimidinonderivate
JP2012082186A (ja) 2010-09-15 2012-04-26 Bayer Cropscience Ag 殺虫性アリールピロリジン類
JP2012062267A (ja) 2010-09-15 2012-03-29 Bayer Cropscience Ag 殺虫性ピロリンｎ−オキサイド誘導体
EP2460406A1 (en) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Use of fluopyram for controlling nematodes in nematode resistant crops
US20140056866A1 (en) 2010-09-22 2014-02-27 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of biological or chemical control agents for controlling insects and nematodes in resistant crops
KR101871525B1 (ko) 2010-10-07 2018-06-26 바이엘 크롭사이언스 악티엔게젤샤프트 테트라졸릴옥심 유도체 및 티아졸릴피페리딘 유도체를 포함하는 살진균제 조성물
CN103313977B (zh) 2010-10-21 2015-06-03 拜耳知识产权有限责任公司 1-(杂环羰基)哌啶
EP2630125B1 (en) 2010-10-21 2016-08-24 Bayer Intellectual Property GmbH N-benzyl heterocyclic carboxamides
CN103298802B (zh) 2010-11-02 2016-06-08 拜耳知识产权有限责任公司 N-杂芳基甲基吡唑基羧酰胺
EP2669372B1 (en) 2010-11-10 2016-07-06 Bayer CropScience AG Hppd variants and methods of use
WO2012062749A1 (de) 2010-11-12 2012-05-18 Bayer Cropscience Ag Benzimidazolidinone verwendbar als fungizide
EP2640701B1 (en) 2010-11-15 2017-07-05 Bayer Intellectual Property GmbH Cyanoenamines and their use as fungicides
MX2013005258A (es) 2010-11-15 2013-07-05 Bayer Ip Gmbh N-aril pirazol(tio)carboxamidas.
WO2012065905A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Bayer Cropscience Ag Cyanoenamines and their use as fungicides
US20130231303A1 (en) 2010-11-15 2013-09-05 Bayer Intellectual Property Gmbh 5-halogenopyrazole(thio)carboxamides
WO2012065947A1 (en) 2010-11-15 2012-05-24 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopyrazolecarboxamides
EP2454939A1 (en) 2010-11-18 2012-05-23 Bayer CropScience AG Post-harvest treatment
AU2011335158B2 (en) 2010-11-30 2016-09-15 Bayer Intellectual Property Gmbh Pyrimidine derivatives and use thereof as pesticides
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
CN103281900A (zh) 2010-12-01 2013-09-04 拜耳知识产权有限责任公司 氟吡菌酰胺用于防治作物中的线虫以及提高产量的用途
EP2658853A1 (en) 2010-12-29 2013-11-06 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2474542A1 (en) 2010-12-29 2012-07-11 Bayer CropScience AG Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2471363A1 (de) 2010-12-30 2012-07-04 Bayer CropScience AG Verwendung von Aryl-, Heteroaryl- und Benzylsulfonamidocarbonsäuren, -carbonsäureestern, -carbonsäureamiden und -carbonitrilen oder deren Salze zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen
WO2012088645A1 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Bayer Cropscience Ag Method for improving plant quality
BR112013020866A2 (pt) 2011-02-15 2016-08-02 Bayer Ip Gmbh combinações de compostos ativos
EP2494867A1 (de) 2011-03-01 2012-09-05 Bayer CropScience AG Halogen-substituierte Verbindungen in Kombination mit Fungiziden
CA2823999C (en) 2011-03-10 2020-03-24 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
WO2012123434A1 (en) 2011-03-14 2012-09-20 Bayer Cropscience Ag Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2502495A1 (en) 2011-03-16 2012-09-26 Bayer CropScience AG Use of a dithiino-tetracarboxamide for the protection of harvested products against phytopathogenic fungi
MX2013010821A (es) 2011-03-25 2013-10-17 Bayer Ip Gmbh Uso de n-(1,2,5-oxadiazol-3-il)benzamidas para combatir plantas no deseadas en areas en plantas de cultivo transgenicas tolerantes a los herbicidas inhibidores de la hppd.
MX2013010908A (es) 2011-03-25 2013-10-07 Bayer Ip Gmbh Uso de n-(tetrazol-4-il)- o n-(triazol-3-il)arilcarboxamidas o de sus sales para combatir plantas no deseadas en areas de plantas de cultivo trangenicas tolerantes a los herbicidas inhibidores de la hppd.
CA2831704C (en) 2011-03-31 2019-10-01 Bayer Intellectual Property Gmbh Herbicidally and fungicidally active 3-phenylisoxazoline-5-carboxamides and 3-phenylisoxazoline-5-thioamides
EP2694494A1 (en) 2011-04-08 2014-02-12 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
AR090010A1 (es) 2011-04-15 2014-10-15 Bayer Cropscience Ag 5-(ciclohex-2-en-1-il)-penta-2,4-dienos y 5-(ciclohex-2-en-1-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas, usos y metodos de tratamiento
EP2511255A1 (de) 2011-04-15 2012-10-17 Bayer CropScience AG Substituierte Prop-2-in-1-ol- und Prop-2-en-1-ol-Derivate
AR085568A1 (es) 2011-04-15 2013-10-09 Bayer Cropscience Ag 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-penta-2,4-dienos y 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas
AR085585A1 (es) 2011-04-15 2013-10-09 Bayer Cropscience Ag Vinil- y alquinilciclohexanoles sustituidos como principios activos contra estres abiotico de plantas
EA023712B1 (ru) 2011-04-22 2016-07-29 Байер Интеллекчуал Проперти Гмбх Комбинации активных соединений, содержащие производное соединение (тио)карбоксамида и фунгицидное соединение
MX348785B (es) 2011-06-06 2017-06-28 Bayer Cropscience Nv Metodos y medios para modificar un genoma vegetal en un sitio preseleccionado.
EP2729007A1 (de) 2011-07-04 2014-05-14 Bayer Intellectual Property GmbH Verwendung substituierter isochinolinone, isochinolindione, isochinolintrione und dihydroisochinolinone oder jeweils deren salze als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
UA115128C2 (uk) 2011-07-27 2017-09-25 Байєр Інтеллектуал Проперті Гмбх Протравлювання насіння для боротьби з фітопатогенними грибами
BR112014002855A2 (pt) 2011-08-10 2017-02-21 Bayer Ip Gmbh combinações do composto ativo que incluem derivados específicos do ácido tetrâmico
EP2742059A1 (en) 2011-08-12 2014-06-18 Bayer CropScience NV Guard cell-specific expression of transgenes in cotton
MX346439B (es) 2011-08-22 2017-03-17 Bayer Cropscience Nv Métodos y medios para modificar un genoma vegetal.
CN103748092A (zh) 2011-08-22 2014-04-23 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂肟基-四唑衍生物
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
RU2014113760A (ru) 2011-09-09 2015-10-20 Байер Интеллекчуал Проперти Гмбх Ацил-гомосериновые лактоновые производные для повышения урожая растений
EP2755949B1 (en) 2011-09-12 2015-10-21 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicidal 4-substituted-3-{phenyl[(heterocyclylmethoxy)imino]methyl}-1,2,4-oxadizol-5(4h)-one derivatives
MX355824B (es) 2011-09-15 2018-05-02 Bayer Ip Gmbh Piperidinpirazoles como fungicidas.
BR112014006208B1 (pt) 2011-09-16 2018-10-23 Bayer Intellectual Property Gmbh método de indução de respostas reguladoras do crescimento nas plantas aumentando o rendimento de plantas úteis ou plantas de cultura e composição de aumento do rendimento da planta compreendendo isoxadifen-etilo ou isoxadifeno e combinação de fungicidas
UA114093C2 (xx) 2011-09-16 2017-04-25 Спосіб збільшення врожаю корисних рослин
WO2013037955A1 (en) 2011-09-16 2013-03-21 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of acylsulfonamides for improving plant yield
EP2757886A1 (de) 2011-09-23 2014-07-30 Bayer Intellectual Property GmbH Verwendung 4-substituierter 1-phenyl-pyrazol-3-carbonsäurederivate als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
IN2014DN03473A (ja) 2011-10-04 2015-06-05 Bayer Ip Gmbh
WO2013050324A1 (de) 2011-10-06 2013-04-11 Bayer Intellectual Property Gmbh Abiotischen pflanzenstress-reduzierende kombination enthaltend 4- phenylbuttersäure (4-pba) oder eines ihrer salze (komponente (a)) und eine oder mehrere ausgewählte weitere agronomisch wirksame verbindungen (komponente(n) (b)
CN103958531B (zh) 2011-11-21 2016-12-28 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂n‑[(三取代的甲硅烷基)甲基]‑羧酰胺衍生物
CA2856591A1 (en) 2011-11-25 2013-05-30 Hendrik Helmke 2-iodoimidazole derivatives
BR112014012588A2 (pt) 2011-11-25 2017-06-13 Bayer Ip Gmbh novos derivados heterocíclicos de alcanol
AR089656A1 (es) 2011-11-30 2014-09-10 Bayer Ip Gmbh Derivados de n-bicicloalquil- y n-tricicloalquil-(tio)-carboxamida fungicidas
EP2601839A1 (en) 2011-12-08 2013-06-12 Bayer CropScience AG Synergisitic fungicidal combinations containing phosphorous acid derivative and zoxamide
US9414595B2 (en) 2011-12-19 2016-08-16 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
EP2606732A1 (en) 2011-12-19 2013-06-26 Bayer CropScience AG Use of an anthranilic diamide derivatives with heteroaromatic and heterocyclic substituents in combination with a biological control agent
US9556158B2 (en) 2011-12-29 2017-01-31 Bayer Intellectual Property Gmbh Fungicidal 3-[(pyridin-2-ylmethoxyimino)(phenyl)methyl]-2-substituted-1,2,4-oxadiazol-5(2H)-one derivatives
IN2014DN06122A (ja) 2011-12-29 2015-08-14 Bayer Ip Gmbh
US9408386B2 (en) 2012-02-22 2016-08-09 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of succinate dehydrogenase inhibitors (SDHIs) for controlling wood diseases in grape
MX360174B (es) 2012-02-27 2018-10-12 Bayer Ip Gmbh Combinaciones de compuestos activos que contienen una tiazolilisoxazolina y un fungicida.
US9206122B2 (en) 2012-03-14 2015-12-08 Bayer Intellectual Property Gmbh Pesticidal arylpyrrolidines
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
US9357778B2 (en) 2012-04-12 2016-06-07 Bayer Cropscience Ag N-acyl-2-(cyclo)alkypyrrolidines and piperidines useful as fungicides
CN104428294B (zh) 2012-04-20 2017-07-14 拜尔农科股份公司 N‑环烷基‑n‑[(杂环基苯基)亚甲基]‑(硫代)羧酰胺衍生物
US20150080337A1 (en) 2012-04-20 2015-03-19 Bayer Cropscience N-cycloalkyl-n-[(trisubstitutedsilylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
CN104245940A (zh) 2012-04-23 2014-12-24 拜尔作物科学公司 植物中的靶向基因组工程
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
BR112014027643B1 (pt) 2012-05-09 2019-04-24 Bayer Cropscience Ag Pirazole-indanil-carboxamidas.
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
JP6326043B2 (ja) 2012-05-09 2018-05-16 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト ５−ハロゲノピラゾールインダニルカルボキサミド類
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
EP2871958A1 (en) 2012-07-11 2015-05-20 Bayer CropScience AG Use of fungicidal combinations for increasing the tolerance of a plant towards abiotic stress
BR112015004858A2 (pt) 2012-09-05 2017-07-04 Bayer Cropscience Ag uso de 2-amidobenzimidazóis, 2-amidobenzoxazóis e 2-amidobenzotiazóis substituídos ou sais dos mesmos como substâncias ativas contra estresse abiótico em plantas
JP6557142B2 (ja) 2012-09-14 2019-08-07 バイエル クロップサイエンス エルピーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ｌｐ Ｈｐｐｄ変異体および使用方法
AU2013322855B2 (en) 2012-09-25 2017-06-22 Bayer Cropscience Ag Herbicidal and fungicidal 5-oxy-substituted 3-phenylisoxazoline-5-carboxamides and 5-oxy-substituted 3-phenylisoxazoline-5-thioamides
PT2908641T (pt) 2012-10-19 2018-04-16 Bayer Cropscience Ag Método para o tratamento de plantas contra fungos resistentes a fungicidas utilizando derivados de carboxamida ou tiocarboxamida
CN105357968A (zh) 2012-10-19 2016-02-24 拜尔农科股份公司 包含羧酰胺衍生物的活性化合物复配物
JP6262747B2 (ja) 2012-10-19 2018-01-17 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト カルボキサミド誘導体を用いる植物成長促進方法
CA2888565C (en) 2012-10-19 2021-03-02 Bayer Cropscience Ag Active compound combinations comprising carboxamide derivatives and a biological control agent
WO2014060519A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Bayer Cropscience Ag Method for enhancing tolerance to abiotic stress in plants using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
WO2014079957A1 (de) 2012-11-23 2014-05-30 Bayer Cropscience Ag Selektive inhibition der ethylensignaltransduktion
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
EA201500580A1 (ru) 2012-11-30 2016-01-29 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Двойные фунгицидные смеси
EA030020B1 (ru) 2012-11-30 2018-06-29 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Двойные фунгицидные смеси
EA030236B1 (ru) 2012-11-30 2018-07-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Тройные фунгицидные и пестицидные смеси
WO2014082950A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Ternary fungicidal mixtures
EA031510B1 (ru) 2012-11-30 2019-01-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Двойная фунгицидная смесь
WO2014086751A1 (de) 2012-12-05 2014-06-12 Bayer Cropscience Ag Verwendung substituierter 1-(arylethinyl)-, 1-(heteroarylethinyl)-, 1-(heterocyclylethinyl)- und 1-(cyloalkenylethinyl)-cyclohexanole als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
EP2740356A1 (de) 2012-12-05 2014-06-11 Bayer CropScience AG Substituierte (2Z)-5(1-Hydroxycyclohexyl)pent-2-en-4-insäure-Derivate
EP2740720A1 (de) 2012-12-05 2014-06-11 Bayer CropScience AG Substituierte bicyclische- und tricyclische Pent-2-en-4-insäure -Derivate und ihre Verwendung zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen
AR093909A1 (es) 2012-12-12 2015-06-24 Bayer Cropscience Ag Uso de ingredientes activos para controlar nematodos en cultivos resistentes a nematodos
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
BR112015014307A2 (pt) 2012-12-19 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag difluorometil-nicotínico- tetrahidronaftil carboxamidas
JP2016515100A (ja) 2013-03-07 2016-05-26 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト 殺菌性３−｛フェニル［（ヘテロシクリルメトキシ）イミノ］メチル｝−ヘテロ環誘導体
WO2014161821A1 (en) 2013-04-02 2014-10-09 Bayer Cropscience Nv Targeted genome engineering in eukaryotes
BR112015025637A2 (pt) 2013-04-12 2017-07-18 Bayer Cropscience Ag novos derivados de triazol
CN105283449A (zh) 2013-04-12 2016-01-27 拜耳作物科学股份公司 新的***硫酮衍生物
KR20150144779A (ko) 2013-04-19 2015-12-28 바이엘 크롭사이언스 악티엔게젤샤프트 살충성 또는 농약성 2성분 혼합물
BR112015026235A2 (pt) 2013-04-19 2017-10-10 Bayer Cropscience Ag método para melhorar a utilização do potencial de produção de plantas transgênicas envolvendo a aplicação de um derivado de ftaldiamida
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
EP3013802B1 (en) 2013-06-26 2019-08-14 Bayer Cropscience AG N-cycloalkyl-n-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
AU2014289341A1 (en) 2013-07-09 2016-01-28 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Use of selected pyridone carboxamides or salts thereof as active substances against abiotic plant stress
EP3077377B1 (en) 2013-12-05 2020-01-22 Bayer CropScience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
CA2932484A1 (en) 2013-12-05 2015-06-11 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
WO2015138394A2 (en) 2014-03-11 2015-09-17 Bayer Cropscience Lp Hppd variants and methods of use
AR101214A1 (es) 2014-07-22 2016-11-30 Bayer Cropscience Ag Ciano-cicloalquilpenta-2,4-dienos, ciano-cicloalquilpent-2-en-4-inas, ciano-heterociclilpenta-2,4-dienos y ciano-heterociclilpent-2-en-4-inas sustituidos como principios activos contra el estrés abiótico de plantas
AR103024A1 (es) 2014-12-18 2017-04-12 Bayer Cropscience Ag Piridoncarboxamidas seleccionadas o sus sales como sustancias activas contra estrés abiótico de las plantas
CN107531676A (zh) 2015-04-13 2018-01-02 拜耳作物科学股份公司 N‑环烷基‑n‑(双杂环基亚乙基)‑(硫代)羧酰胺衍生物
JP6873979B2 (ja) 2015-09-11 2021-05-19 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト Ｈｐｐｄ変異体および使用方法
WO2017184727A1 (en) 2016-04-21 2017-10-26 Bayer Cropscience Lp Tal-effector mediated herbicide tolerance
US20190159451A1 (en) 2016-07-29 2019-05-30 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Active compound combinations and methods to protect the propagation material of plants
BR112019005660A2 (pt) 2016-09-22 2019-06-04 Bayer Cropscience Ag novos derivados de triazol e seu uso como fungicidas
EP3515907A1 (en) 2016-09-22 2019-07-31 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Novel triazole derivatives
US20190225974A1 (en) 2016-09-23 2019-07-25 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Targeted genome optimization in plants
WO2018077711A2 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Use of pyraziflumid for controlling sclerotinia spp in seed treatment applications
JP2020500905A (ja) 2016-12-08 2020-01-16 バイエル・クロップサイエンス・アクチェンゲゼルシャフト ハリガネムシを防除するための殺虫剤の使用
WO2018108627A1 (de) 2016-12-12 2018-06-21 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung substituierter indolinylmethylsulfonamide oder deren salze zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
EP3332645A1 (de) 2016-12-12 2018-06-13 Bayer Cropscience AG Verwendung substituierter pyrimidindione oder jeweils deren salze als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
CA3055389A1 (en) 2017-03-07 2018-09-13 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Hppd variants and methods of use
CA3055317A1 (en) 2017-03-07 2018-09-13 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Hppd variants and methods of use
BR112019018059A2 (pt) 2017-03-07 2020-08-04 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC molécula de ácido nucleico recombinante, célula hospedeira, plantas, sementes transgênicas, polipeptídeo recombinante, método para produzir um polipeptídeo, método de controle de ervas daninhas, uso do ácido nucleico e produto de utilidade
PL3638666T3 (pl) 2017-06-13 2022-01-03 Bayer Aktiengesellschaft Chwastobójczo skuteczne 3-fenyloizoksazolino-5-karboksyamidy amidów kwasu tetrahydro- i dihydrofuranokarboksylowego
BR112019026261B1 (pt) 2017-06-13 2023-12-19 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft 3- fenilisoxazolina-5-carboxamidas e seus usos para controlar plantas indesejadas
WO2019025153A1 (de) 2017-07-31 2019-02-07 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung von substituierten n-sulfonyl-n'-aryldiaminoalkanen und n-sulfonyl-n'-heteroaryldiaminoalkanen oder deren salzen zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
WO2019034602A1 (de) 2017-08-17 2019-02-21 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame 3-phenyl-5-trifluormethylisoxazolin-5-carboxamide von cyclopentylcarbonsäuren und -estern
WO2019083810A1 (en) 2017-10-24 2019-05-02 Basf Se IMPROVING HERBICIDE TOLERANCE FOR 4-HYDROXYPHENYLPYRUVATE DIOXYGENASE (HPPD) INHIBITORS BY NEGATIVE REGULATION OF HPPD EXPRESSION IN SOYBEANS
US20210032651A1 (en) 2017-10-24 2021-02-04 Basf Se Improvement of herbicide tolerance to hppd inhibitors by down-regulation of putative 4-hydroxyphenylpyruvate reductases in soybean
EP3360417A1 (de) 2017-11-02 2018-08-15 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Verwendung von sulfonylindol als herbizid
EA202091774A1 (ru) 2018-01-25 2020-12-07 Байер Акциенгезельшафт Гербицидно-активные 3-фенилизоксазолин-5-карбоксамиды производных циклопентенилкарбоновой кислоты
AU2019269028A1 (en) 2018-05-15 2020-12-03 Bayer Aktiengesellschaft 2-Bromo-6-alkoxyphenyl-substituted Pyrrolin-2-ones and their use as herbicides
AR115087A1 (es) 2018-05-15 2020-11-25 Bayer Ag 3-(4-alquinil-6-alcoxi-2-clorofenil)-3-pirrolin-2-onas, un método para su preparación y su uso como herbicidas
AR115088A1 (es) 2018-05-15 2020-11-25 Bayer Ag Espirociclohexilpirrolin-2-onas y su uso como herbicidas
WO2019219588A1 (de) 2018-05-15 2019-11-21 Bayer Aktiengesellschaft Speziell substituierte 2-alkyl-6-alkoxyphenyl-3-pyrroliin-2-one und deren verwendung als herbizide
WO2019228788A1 (de) 2018-05-29 2019-12-05 Bayer Aktiengesellschaft 2-brom-6-alkoxyphenyl-substituierte pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
WO2019228787A1 (de) 2018-05-29 2019-12-05 Bayer Aktiengesellschaft Speziell substituierte 2-alkyl-6-alkoxyphenyl-3-pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
JP2021525774A (ja) 2018-06-04 2021-09-27 バイエル アクチェンゲゼルシャフトＢａｙｅｒ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ 除草活性二環式ベンゾイルピラゾール
US20210254091A1 (en) * 2018-06-29 2021-08-19 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Herbicide tolerant plants expressing a cyanobacterial plastoquinone biosynthetic pathway
AU2019309023A1 (en) 2018-07-26 2021-02-18 Bayer Aktiengesellschaft Use of the succinate dehydrogenase inhibitor fluopyram for controlling root rot complex and/or seedling disease complex caused by rhizoctonia solani, fusarium species and pythium species in brassicaceae species
BR112021004865A2 (pt) 2018-09-17 2021-06-01 Bayer Aktiengesellschaft uso do fungicida isoflucypram para controlar claviceps purpurea e reduzir esclerócios em cereais
BR112021004933A2 (pt) 2018-09-17 2021-06-01 Bayer Aktiengesellschaft uso do inibidor de succinato desidrogenase fluopiram para controlar claviceps purpurea e reduzir esclerócio em cereais
CN113544124B (zh) 2019-01-14 2024-05-28 拜耳公司 除草的取代的n-四唑基芳基甲酰胺
EP3927695A1 (de) 2019-02-20 2021-12-29 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame 4-(4-trifluormethyl-6-cycloropylpyrazolyl)pyrimidine
EP3937637B1 (de) 2019-03-12 2023-04-19 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame 3-phenylisoxazolin-5-carboxamide von s-haltigen cyclopentenylcarbonsäureestern
WO2020187626A1 (de) 2019-03-15 2020-09-24 Bayer Aktiengesellschaft Speziell substituierte 3-phenyl-5-spirocyclopentyl-3-pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
CN113544119A (zh) 2019-03-15 2021-10-22 拜耳公司 3-(2-溴-4-炔基-6-烷氧基苯基)-取代的5-螺环己基-3-吡咯啉-2-酮及其作为除草剂的用途
EA202192470A1 (ru) 2019-03-15 2022-02-11 Байер Акциенгезельшафт Новые 3-(2-бром-4-алкинил-6-алкоксифенил)-3-пирролин-2-оны и их применение в качестве гербицидов
CA3133170A1 (en) 2019-03-15 2020-09-24 Bayer Aktiengesellschaft Specifically substituted 3-(2-halogen-6-alkyl-4-propinylphenyl)-3-pyrrolin-2-ones and to the use thereof as herbicides
EA202192468A1 (ru) 2019-03-15 2022-02-16 Байер Акциенгезельшафт Специфически замещенные 3-(2-алкокси-6-алкил-4-пропинилфенил)-3-пирролин-2-оны и их применение в качестве гербицидов
CA3142286A1 (en) 2019-06-03 2020-12-10 Bayer Aktiengesellschaft 1-phenyl-5-azinyl pyrazolyl-3-oxyalkyl acids and their use for controlling undesired plant growth
MX2022007686A (es) 2019-12-19 2022-07-19 Bayer Ag Acidos 1,5-difenilpirazolil-3-oxialquilicos y acidos 1-fenil-5-tienilpirazolil-3-oxialquilicos y su uso para el combate del crecimiento de plantas no deseado.
WO2021204669A1 (de) 2020-04-07 2021-10-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte isophtalsäurediamide
WO2021204666A1 (de) 2020-04-07 2021-10-14 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte isophtalsäurediamide und ihre verwendung als herbizide
BR112022019768A2 (pt) 2020-04-07 2022-12-06 Bayer Ag Diamidas de ácido isoftálico substituídas
EP4132917B1 (de) 2020-04-07 2024-01-24 Bayer Aktiengesellschaft Substituierte isophtalsäurediamide
WO2021204884A1 (de) 2020-04-09 2021-10-14 Bayer Aktiengesellschaft 3-(4-alkenyl-phenyl)-3-pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
WO2021209486A1 (de) 2020-04-15 2021-10-21 Bayer Aktiengesellschaft Speziell substituierte pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
CN115943143A (zh) 2020-04-29 2023-04-07 拜耳公司 1-吡嗪基吡唑基-3-氧基烷基酸和其衍生物及其用于控制不需要的植物生长的用途
US20230180758A1 (en) 2020-05-27 2023-06-15 Bayer Aktiengesellschaft Substituted pyrroline-2-ones and their use as herbicides
CA3199303A1 (en) 2020-10-23 2022-04-28 Bayer Aktiengesellschaft 1-(pyridyl)-5-azinylpyrazole derivatives, and their use for control of undesired plant growth
EP4026833A1 (de) 2021-01-12 2022-07-13 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame 2-(het)arylmethylpyrimidine
WO2022253700A1 (de) 2021-06-01 2022-12-08 Bayer Aktiengesellschaft Speziell substituierte pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
EP4358718A1 (de) 2021-06-25 2024-05-01 Bayer Aktiengesellschaft (1,4,5-trisubstituierte-1h-pyrazol-3-yl)oxy-2-alkoxy-alkylsäuren und -alkylsäure-derivate, deren salze und ihre verwendung als herbizide wirkstoffe
WO2023274869A1 (de) 2021-06-29 2023-01-05 Bayer Aktiengesellschaft 3-(4-alkenyl-phenyl)-3-pyrrolin-2-one und deren verwendung als herbizide
AR126252A1 (es) 2021-07-08 2023-10-04 Bayer Ag Amidas de ácido benzoico sustituidas
WO2023099381A1 (de) 2021-12-01 2023-06-08 Bayer Aktiengesellschaft (1,4,5-trisubstituierte-1h-pyrazol-3-yl)oxy-2-alkylthio-alkylsäuren und -alkylsäure-derivate, deren salze und ihre verwendung als herbizide wirkstoffe
CN114574373B (zh) * 2022-03-29 2022-11-01 陕西海斯夫生物工程有限公司 一株产生育酚的重组裂殖壶菌、其构建方法及应用
WO2024078871A1 (de) 2022-10-14 2024-04-18 Bayer Aktiengesellschaft 1-pyridyl-5-phenylpyrazolyl-3-oxy- und -3-thioalkylsäuren und derivate und deren verwendung zur bekämpfung unerwünschten pflanzenwachstums

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001521745A (ja) * 1997-10-29 2001-11-13 インスティテュート フュール プフランツェンゲネティク ウント クルトゥルプフランツェンフォルシュング 遺伝子導入植物のトコフェロール含有量操作
WO2002000901A1 (de) * 2000-06-29 2002-01-03 Sungene Gmbh & Co. Kgaa Veränderung des gehalts an feinchemikalien in organismen durch genetische veränderung des shikimatweges
WO2002089561A1 (en) * 2001-05-09 2002-11-14 Monsanto Technology Llc. Tyra genes and uses thereof

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ATE85360T1 (de) * 1985-08-07 1993-02-15 Monsanto Co Glyphosat resistente pflanzen.
GB8920519D0 (en) 1989-09-11 1989-10-25 Rhone Poulenc Ltd New compositions of matter
GB9017539D0 (en) 1990-08-10 1990-09-26 Rhone Poulenc Agriculture New compositions of matter
US5641876A (en) * 1990-01-05 1997-06-24 Cornell Research Foundation, Inc. Rice actin gene and promoter
AU7583691A (en) 1990-03-05 1991-10-10 Upjohn Company, The Protein expression via seed specific regulatory sequences
GB9310203D0 (en) 1993-05-18 1993-06-30 Rhone Poulenc Agriculture Compositions of new matter
GB9101659D0 (en) 1991-01-25 1991-03-06 Rhone Poulenc Agriculture Compositions of matter
GB9101660D0 (en) 1991-01-25 1991-03-06 Rhone Poulenc Agriculture New compositions of matter
DE69231588T2 (de) * 1991-02-25 2001-03-29 Zeneca Ltd Verwendung eines gens, das für oxalat oxidase kodiert zur transformation von pflanzen
FR2673644A1 (fr) 1991-03-05 1992-09-11 Rhone Poulenc Agrochimie Sequence adn codant pour une oxalate oxydase et plantes transformees contenant cette sequence et resistantes au sclerotinia.
IL101508A0 (en) 1991-04-08 1992-12-30 Rhone Poulenc Agrochimie Chimeric plant genes based on upstream regulatory elements of helianthinin
GB9115377D0 (en) * 1991-07-17 1991-09-04 Rhone Poulenc Agriculture New compositions of matter
GB9116834D0 (en) 1991-08-05 1991-09-18 Rhone Poulenc Agriculture Compositions of new matter
US5334753A (en) 1992-03-12 1994-08-02 Rhone-Poulenc Agriculture Ltd Processes for preparing ortho-substituted benzoic acids
ES2123682T3 (es) 1993-05-18 1999-01-16 Rhone Poulenc Agriculture Derivados de 2-ciano-1,3-diona y su empleo como herbicidas.
US5614313A (en) * 1994-07-07 1997-03-25 Imperial Chemical Industries Plc Polymeric film having a layer comprising calcined silicone particles and china clay particles
US5506195A (en) * 1994-11-01 1996-04-09 Zeneca Limited Selective 1,3-cyclohexanedione corn herbicide
FR2734842B1 (fr) * 1995-06-02 1998-02-27 Rhone Poulenc Agrochimie Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase, tolerantes a certains herbicides
FR2736926B1 (fr) 1995-07-19 1997-08-22 Rhone Poulenc Agrochimie 5-enol pyruvylshikimate-3-phosphate synthase mutee, gene codant pour cette proteine et plantes transformees contenant ce gene
FR2745004B1 (fr) 1996-02-16 1998-03-27 Rhone Poulenc Agrochimie Peptide antibacterien et antifongique
CA2256501A1 (en) * 1996-06-27 1997-12-31 E.I. Du Pont De Nemours And Company Plant gene for p-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase
US5994521A (en) * 1996-07-03 1999-11-30 University Of Kentucky Research Foundation Full length transcript (FLt) promoter from figwort mosaic caulimovirus (FMV) and use to express chimeric genes in plant cells
US5955361A (en) 1996-11-20 1999-09-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. P gene promoter constructs for floral-tissue preferred gene expression
JP2001522233A (ja) 1997-03-13 2001-11-13 マイコーゲン コーポレーション バチルス・チューリンギエンシス毒素
US5959175A (en) 1997-04-09 1999-09-28 Thomas; Terry L. Sunflower albumin 5' regulatory region for the modification of plant seed lipid composition
US5977436A (en) 1997-04-09 1999-11-02 Rhone Poulenc Agrochimie Oleosin 5' regulatory region for the modification of plant seed lipid composition
US5968809A (en) 1997-04-11 1999-10-19 Abbot Laboratories Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids
EP0996732B1 (en) 1997-04-11 2005-06-15 Calgene LLC Methods and compositions for synthesis of long chain polyunsaturated fatty acids in plants
FR2766207B1 (fr) 1997-07-11 2000-12-08 Rhone Poulenc Agrochimie Gene chimere codant pour la drosomycine, vecteur le contenant pour la transformation des cellules vegetales et plantes transformees obtenues resistantes aux maladies
DE19730066A1 (de) * 1997-07-14 1999-01-21 Basf Ag DNA-Sequenz codierend für eine Hydroxyphenylpyruvatdioxygenase und deren Überproduktion in Pflanzen
FR2768746B1 (fr) 1997-09-23 2001-06-08 Agronomique Inst Nat Rech Promoteur specifique des petales et procede d'obtention de plantes a fleurs sans petale
US6642437B1 (en) 1997-09-30 2003-11-04 The Regents Of The University Of California Production of proteins in plant seeds
FR2770854B1 (fr) 1997-11-07 2001-11-30 Rhone Poulenc Agrochimie Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un tel gene, tolerantes aux herbicides
FR2770853B1 (fr) 1997-11-07 1999-12-31 Rhone Poulenc Agrochimie Gene codant pour la thanatine, vecteur le contenant et plantes transformees obtenues resistantes aux maladies
FR2772787B1 (fr) 1997-12-24 2001-12-07 Rhone Poulenc Agrochimie Promoteur h3c4 de mais associe au premier intron de l'actine de riz, gene chimere le comprenant et plante transformee
CA2288219A1 (en) 1998-02-25 1999-09-02 Japan Tobacco Inc. Novel dna fragment directing gene expression predominant in flower organ
FR2777568B1 (fr) 1998-04-15 2002-10-31 Rhone Poulenc Agrochimie Gene codant pour l'heliomicine, proteine obtenue, vecteur le contenant, organismes transformes obtenus et procede de preparation
ES2260926T3 (es) 1998-07-07 2006-11-01 Max-Planck-Gesellschaft Zur Forderung Der Wissenschaften E.V. Medios y metodo para potenciar el contenido de compuestos de azufre en plantas.
AU757440B2 (en) * 1998-08-05 2003-02-20 Sungene Gmbh And Co. Kgaa DNA sequence coding for a 1-deoxy-d-xylulose-5-phosphate synthase and the overproduction thereof in plants
FR2787466B1 (fr) 1998-12-17 2001-02-16 Rhone Poulenc Agrochimie Procede pour augmenter la teneur en cysteine, methionine et glutathion chez les plantes et plantes obtenues
DE60043189D1 (de) * 1999-04-12 2009-12-03 Monsanto Technology Llc Öl, das Brassicastanol enthält
DE10046462A1 (de) * 2000-09-19 2002-05-29 Sungene Gmbh & Co Kgaa Verbesserte Verfahren zur Vitamin E Biosynthese
FR2817557B1 (fr) * 2000-12-05 2005-05-06 Aventis Cropscience Sa Nouvelles cibles pour herbicides et plantes transgeniques resistantes a ces herbicides
CA2478957C (en) * 2002-03-19 2013-07-02 Monsanto Technology, Llc Homogentisate prenyl transferase ("hpt") nucleic acids and polypeptides, and uses thereof
FR2844142B1 (fr) * 2002-09-11 2007-08-17 Bayer Cropscience Sa Plantes transformees a biosynthese de prenylquinones amelioree

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2001521745A (ja) * 1997-10-29 2001-11-13 インスティテュート フュール プフランツェンゲネティク ウント クルトゥルプフランツェンフォルシュング 遺伝子導入植物のトコフェロール含有量操作
WO2002000901A1 (de) * 2000-06-29 2002-01-03 Sungene Gmbh & Co. Kgaa Veränderung des gehalts an feinchemikalien in organismen durch genetische veränderung des shikimatweges
WO2002089561A1 (en) * 2001-05-09 2002-11-14 Monsanto Technology Llc. Tyra genes and uses thereof

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