JP3930616B2 - ２−アミノ−６置換プリンの精製方法 - Google Patents
２−アミノ−６置換プリンの精製方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3930616B2 JP3930616B2 JP22820797A JP22820797A JP3930616B2 JP 3930616 B2 JP3930616 B2 JP 3930616B2 JP 22820797 A JP22820797 A JP 22820797A JP 22820797 A JP22820797 A JP 22820797A JP 3930616 B2 JP3930616 B2 JP 3930616B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- amino
- crystals
- substituted purine
- aqueous solution
- mol
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、２−アミノ−６置換プリンの精製方法に関する。さらに詳しくは、核酸系抗ウイルス薬の中間体として有用な２−アミノ−６置換プリンの精製方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス等に対する抗ウイルス薬として、グアニル置換基を有する核酸系抗ウイルス薬が知られており、該核酸系抗ウイルス薬を合成する際に有用な中間体として２−アミノ−６置換プリンが使用されている（特開平６−２０６８７９号公報）。
【０００３】
前記２−アミノ−６置換プリンは、例えば、２−アミノ−６置換プリンを水酸化ナトリウム水溶液または水酸化カリウム水溶液に溶解し、得られた水溶液に塩酸、酢酸等の酸類を添加して該水溶液のｐＨを７．５付近に調整し、晶析する方法によって精製されている（国際公開第９４／０７８９２号パンフレット）。
【０００４】
しかしながら、前記方法によって精製された２−アミノ−６置換プリンの結晶粒子は、非常に細かいため、該結晶を濾取する際には、濾過性が悪く、濾取に長時間を要するという欠点がある。
【０００５】
また、前記方法には、濾取した結晶を乾燥させる際には、２−アミノ−６置換プリンの結晶が二次凝集し、このようにして生成した二次凝集物は、非常に固い塊状物であり、各種溶媒に対する溶解速度が遅いため、使用の際には、あらかじめ該二次凝集物には粉砕等の煩雑な操作を施さなければならないという欠点がある。
【０００６】
さらに、前記方法には、着色成分、２−アミノ−６置換プリンの類縁物質等を含有しない高純度の２−アミノ−６置換プリンを得ることができないという欠点がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、二次凝集を生じさせずに、操作性よく各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンを高純度で精製することができる方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明の要旨は、
〔１〕 一般式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
【００１０】
（式中、Ｘは水酸基、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示す）
で表わされる２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させ、得られた２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合することを特徴とする２−アミノ−６置換プリンの精製方法、ならびに
〔２〕 ２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際のアンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液の温度が４０〜７０℃である前記〔１〕記載の２−アミノ−６置換プリン溶液の精製方法
に関する。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明の精製方法によれば、前記したように、
一般式（Ｉ）：
【００１２】
【化３】
【００１３】
（式中、Ｘは水酸基、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示す）
で表わされる２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させ、得られた２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合することにより、２−アミノ−６置換プリンを精製することができる。
【００１４】
本発明においては、このようにアンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液が用いられている点に１つの大きな特徴がある。かかる水溶液を用いた場合には、驚くべきことに、精製された２−アミノ−６置換プリンを結晶として二次凝集させずに、操作性よく高純度で得ることができる。
【００１５】
前記２−アミノ−６置換プリンは、公知の方法、例えば、国際公開第９４／０７８９２号パンフレット、J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2051-61等に記載の方法（以下、従来法という）等によって得ることができる。
【００１６】
前記２−アミノ−６置換プリンは、まず、アルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させる。
【００１７】
前記２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させる際の温度は、特に限定がなく、通常、３〜３０℃程度であればよい。
【００１８】
前記アルカリ金属水酸化物としては、例えば、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムが好適例としてあげられる。
【００１９】
前記アルカリ金属水酸化物の使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、０．５モル以上、なかんづく１モル以上であることが好ましく、１０モル以下、なかんづく４モル以下であることが好ましい。
【００２０】
前記アルカリ金属水酸化物は、アルカリ金属水酸化物の水溶液として用いられる。
【００２１】
前記アルカリ金属水酸化物の水溶液の濃度は、容積効率を考えた経済性の観点から、０．５重量％以上、なかんづく１重量％以上であることが好ましく、４０重量％以下、なかんづく２０重量％以下であることが好ましい。
【００２２】
２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する。
【００２３】
前記アンモニアは、通常、水溶液またはガスとして用いることができる。
【００２４】
前記アンモニアの濃度は、特に限定がなく、容積効率を考えた経済性の観点から、５重量％以上、なかんづく１０重量％以上であることが好ましく、また入手の容易性の観点から、１００重量％以下、なかんづく３０重量％以下であることが好ましい。
【００２５】
前記アンモニアの使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、１モル以上、なかんづく３モル以上であることが好ましく、１５モル以下、なかんづく１０モル以下となるように調整することが好ましい。
【００２６】
前記塩化アンモニウムには、特に限定がなく、一般に市販されているものを用いることができる。
【００２７】
前記塩化アンモニウムの使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、１モル以上、なかんづく１．５モル以上であることが好ましく、１０モル以下、なかんづく５モル以下であることが好ましい。なお、前記塩化アンモニウムの使用量は、２−アミノ−６置換プリンを溶解させるために用いたアルカリ金属水酸化物の使用量よりも少ない場合には、２−アミノ−６置換プリンの精製収率が低下することがあるので、アルカリ金属水酸化物の使用量よりも過剰量であることが好ましい。
【００２８】
本発明においては、２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液とアンモニアとを混合したのち、塩化アンモニウム水溶液と混合したり、２−アミノ−６置換プリン溶液と塩化アンモニウム水溶液とを混合したのち、アンモニアと混合するのではなく、前記２−アミノ−６置換プリン溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合するという方法が採られているので、２−アミノ−６置換プリンの結晶を成長させながら晶析させることができ、従来法で得られる結晶よりも濾過性に優れた結晶が得られ、かくして得られた結晶は、乾燥の際には二次凝集を生じがたく、しかも２−アミノ−６置換プリンの類縁物質および着色成分が、濾液に除去され、精製効率が高いという優れた性質が発現される。
【００２９】
前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液には、２−アミノ−６置換プリンに適度な溶解性を付与し、結晶を成長させながら晶析することができる観点から、アンモニア１〜５０重量％および塩化アンモニウム１〜５０重量％が含まれ、アンモニアと塩化アンモニウムとの合計含有量が８０重量％以下であることが好ましい。
【００３０】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合し、アルカリ金属水酸化物の水溶液から２−アミノ−６置換プリンの結晶を析出させることにより、該２−アミノ−６置換プリンを精製することができる。
【００３１】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際には、例えば、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液に、前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液を滴下することが濾過性に優れた結晶が得られる点から好ましい。
【００３２】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際には、前記２−アミノ−６置換プリン溶液の温度は、通常、３〜３０℃程度であればよく、また前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液の温度は、晶析する２−アミノ−６置換プリンの結晶の粒子径を大きくする点から、４０℃以上、なかんづく５０℃以上であることが好ましく、アンモニアが気化し、散逸させないようにする点から、７０℃以下、なかんづく６５℃以下であることが好ましい。
【００３３】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合したあとには、通常、０．５〜３時間程度、均一な組成となるように前記混合液を攪拌することが好ましい。
【００３４】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合したのち、高い精製収率で２−アミノ−６置換プリンを得るために、かかる溶液を７０℃以下、例えば、室温程度にまで冷却することが好ましい。
【００３５】
冷却後には、得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶を、濾紙等のフィルターを用いて濾過することにより、回収することができる。
【００３６】
濾取した２−アミノ−６置換プリンの結晶は、水、メタノール等の溶媒で適宜洗浄したのちに、減圧下で乾燥することにより、２−アミノ−６置換プリンの白色結晶として回収することができる。
【００３７】
かくして得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶の平均粒子径は、レーザー光回折散布法に従って測定した場合、１０〜７０μｍであり、従来法で得られる２−アミノ−６置換プリンの結晶の平均粒子径３〜５μｍと比べて、非常に大きい。従って、本発明の製造方法によって得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶は、従来法で得られた２−アミノ−６置換プリンよりも濾過性に優れたものである。
【００３８】
さらに前記２−アミノ−６置換プリンの結晶は、前記したように、平均粒子径が大きいので、かかる２−アミノ−６置換プリンを乾燥させる段階で２−アミノ−６置換プリンの結晶の二次凝集物が生じがたいので、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド等の各種溶媒に対して溶解速度が非常に速いものである。
【００３９】
また、従来法によって得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶には、着色成分、類縁物質等の不純物が含有されているが、このような不純物が含有された２−アミノ−６置換プリンを本発明の精製方法で精製した場合には、これらの不純物が除去され、高純度を有する２−アミノ−６置換プリンを得ることができる。
【００４０】
以上説明したように、本発明の２−アミノ−６置換プリンの精製方法によれば、比較的大きな粒子径を有する２−アミノ−６置換プリンが得られるので、濾過する際の濾過性に優れ、乾燥時に二次凝集物を生じがたく、しかも各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンの結晶を高純度で得ることができる。
【００４１】
かくして得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶は、例えば、核酸系抗ウイルス薬の中間体として好適に使用しうる化合物である。
【００４２】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はかかる実施例のみに限定されるものではない。
【００４３】
製造例１〔２−アミノ−６−ヨードプリンの製造〕
J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2056-61に記載の方法にしたがって、粗製２−アミノ−６−ヨードプリンを調製した。
得られた粗製２−アミノ−６−ヨードプリンの純度は、９５．０％であった。
【００４４】
なお、前記結晶の純度は、液体クロマトグラフィー分析（ＬＣ分析）で得られた各ピークの面積比（百分率）から測定した。
【００４５】
製造例２〔２−アミノ−６−クロロプリンの製造〕
J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2056-61に記載の方法にしたがって、粗製２−アミノ−６−クロロプリンを調製した。
得られた粗製２−アミノ−６−クロロプリンの純度は、９２．０％であった。
【００４６】
製造例３〔グアニンの製造〕
特開昭５９−１６８９１号公報に記載の方法にしたがって粗製グアニン（一般式（Ｉ）においてＸが水酸基である化合物）を調製した。
得られた粗製グアニンの純度は、９９．０％であった。
【００４７】
実施例１
製造例１で得られた２−アミノ−６−ヨードプリン７８．３ｇ（０．３０モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液９００．０ｇ（０．４５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を調製した。
【００４８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９０モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−ヨードプリンを晶析させた。
【００４９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取した。２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、６３秒間を要した。
【００５０】
次に、濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回、メタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−ヨードプリンの白色の結晶７０．５ｇ（０．２７モル）を得た。２−アミノ−６−ヨードプリンの収率は、９０％であり純度は、９９．５％であった。
【００５１】
かくして得られた２−アミノ−６ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は粒度分布測定装置〔（株）島津製作所製、商品名：ＳＡＬＤ−１１００〕を用いて測定したところ、１３μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集が認められなかった。
【００５２】
なお、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、得られた白色結晶は、J. Pharm. Sci. 1968, 57(12), 2056-61に記載の方法によって得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶であることが確認された。
【００５３】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０９ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、４０秒間を要した。
【００５４】
比較例１
従来法にしたがって、２−アミノ−６−ヨードプリン７８．３ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液９００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸４５．６ｇを加え、晶析させた２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー５００ｍＬを、実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には２５２秒間を要した。
【００５５】
乾燥後、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の純度は９７．０％であった。
【００５６】
得られた２−アミノ−６ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が生じていた。
【００５７】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、３０分間攪拌したが、二次凝集で生じた固い粒が溶け残った。
【００５８】
実施例１および比較例１（従来法）の結果から、実施例１の方法によれば、従来法と比べて、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の濾過に要する時間が大幅に短縮されたことから、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶は、濾過性に優れたものであることがわかる。
【００５９】
また、実施例１および比較例１の結果から、実施例１の方法によれば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに対する溶解速度が非常に速い２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を得ることができることがわかる。
【００６０】
実施例２
比較例１で得られた２−アミノ−６−ヨードプリン２６．１ｇ（０．１モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液３００．０ｇ（０．１５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を調製した。
【００６１】
次に、水１００ｍＬ、塩化アンモニウム１６．１ｇ（０．３モル）および２８％アンモニア水３０．４ｇ（０．５モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−ヨードプリンを晶析させた。
【００６２】
滴下終了後、前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液と前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合した混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取した。
【００６３】
濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−ヨードプリンの白色の結晶２３．５ｇ（０．０９モル）を得た。２−アミノ−６−ヨードプリンの精製収率は、９０．０％であり、純度は９９．５％であった。
【００６４】
得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例と同様にして調べたところ、１３μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００６５】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、４０秒間を要した。
【００６６】
実施例２および比較例１（従来法）の結果から、実施例２の方法によれば、従来法で得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の純度を大幅に向上させることができることがわかる。
【００６７】
実施例３
製造例２で得られた２−アミノ−６−クロロプリン５０．９ｇ（０．３モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液９００．０ｇ（０．４５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−クロロプリン溶液を調製した。
【００６８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９０モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−クロロプリンを４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−クロロプリンを晶析させた。
【００６９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、２８秒間を要した。
【００７０】
次に濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−クロロプリンの白色結晶４４．８ｇ（０．２６４モル）を得た。２−アミノ−６−クロロプリンの精製収率は８８％であり、純度は９９．０％であった。
【００７１】
かくして得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５５μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００７２】
なお、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、該白色結晶のＩＲスペクトルが、J. Pharm. Sci., 1968, 57(12),2056-61に記載の方法によって得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、得られた白色結晶は、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶であることが確認された。
【００７３】
次に、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶０．８ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、７分間を要した。
【００７４】
比較例２
従来法にしたがって、２−アミノ−６−クロロプリン５０．９ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液９００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸４５．６ｇを添加し、晶析させた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー５００ｍＬを、実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には、２０８秒間を要した。
【００７５】
乾燥後、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の純度は、９７．０％であった。
【００７６】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、５μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が生じていた。
【００７７】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、３０分間攪拌したが、二次凝集で生じた固い固体が溶け残った。
【００７８】
実施例３および比較例２（従来法）の結果から、実施例３の方法によれば、従来法と比べて、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の濾過に要する時間が大幅に短縮されたことから、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶は、濾過性に優れたものであることがわかる。
【００７９】
また、実施例３および比較例２の結果から、実施例３の方法によれば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに対する溶解速度が非常に速い２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を得ることができることがわかる。
【００８０】
実施例４
比較例２で得られた２−アミノ−６−クロロプリン１７．０ｇ（０．１モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液３００．０ｇ（０．１５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−クロロプリン溶液を調製した。
【００８１】
次に、水１００ｍＬ、塩化アンモニウム１６．１ｇ（０．３モル）および２８％アンモニア水３０．４ｇ（０．５モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−クロロプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−クロロプリンを晶析させた。
【００８２】
滴下終了後、前記２−アミノ−６−クロロプリン溶液と前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合した混合物を４０〜７０℃で、０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。
【００８３】
濾取した結晶を、水を１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−クロロプリンの白色の結晶１５．１ｇ（０．０８９モル）を得た。２−アミノ−６−クロロプリンの精製収率は、８９％であり、純度は９９．７％であった。
【００８４】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５５μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００８５】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、７分間を要した。
【００８６】
実施例４および比較例２（従来法）の結果から、実施例３の方法によれば、従来法で得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の純度を大幅に向上させることができることがわかる。
【００８７】
実施例５
製造例３で得られたグアニン４５．３ｇ（０．３モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液１２００．０ｇ（０．６モル）に室温下で溶解させ、グアニン溶液を調製した。
【００８８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記グアニン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、グアニンを晶析させた。
【００８９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物に晶析しているグアニンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。グアニンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、３０２秒間を要した。
【００９０】
次に濾取した結晶を水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、グアニンの白色の結晶４４．８ｇ（０．２９６モル）を得た。グアニンの精製収率は９８．８％であり、純度は９９．５％であった。
【００９１】
得られたグアニンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、１１μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００９２】
なお、得られたグアニンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、得られた白色結晶のＩＲスペクトルは、特開昭５９−１６８９１号公報に記載の方法によって得られたグアニンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、得られた白色結晶はグアニンの結晶であることが確認された。
【００９３】
比較例３
従来法にしたがって、グアニン１５．１ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液４００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸２０．３ｇを添加し、晶析させたグアニンの晶析スラリー５００ｍＬを実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には３７８秒間を要した。乾燥後、得られたグアニンの結晶の純度は、９９．０％であった。
【００９４】
得られたグラニンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、１μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集が生じていた。
【００９５】
実施例５および比較例３（従来法）の結果から、実施例５の方法によれば、従来法で得られたグアニンの結晶の純度を高め、結晶の濾過速度を向上させることができることがわかる。
【００９６】
【発明の効果】
本発明の２−アミノ−６置換プリンの精製方法によれば、比較的大きな粒子径を有する２−アミノ−６置換プリンが得られるので、２−アミノ−６置換プリンの結晶の二次凝集物を生じがたく、濾過する際の濾過性に優れ、しかも各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンの結晶を高純度で得ることができるという効果が奏される。
【発明の属する技術分野】
本発明は、２−アミノ−６置換プリンの精製方法に関する。さらに詳しくは、核酸系抗ウイルス薬の中間体として有用な２−アミノ−６置換プリンの精製方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、マウス白血病ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス等に対する抗ウイルス薬として、グアニル置換基を有する核酸系抗ウイルス薬が知られており、該核酸系抗ウイルス薬を合成する際に有用な中間体として２−アミノ−６置換プリンが使用されている（特開平６−２０６８７９号公報）。
【０００３】
前記２−アミノ−６置換プリンは、例えば、２−アミノ−６置換プリンを水酸化ナトリウム水溶液または水酸化カリウム水溶液に溶解し、得られた水溶液に塩酸、酢酸等の酸類を添加して該水溶液のｐＨを７．５付近に調整し、晶析する方法によって精製されている（国際公開第９４／０７８９２号パンフレット）。
【０００４】
しかしながら、前記方法によって精製された２−アミノ−６置換プリンの結晶粒子は、非常に細かいため、該結晶を濾取する際には、濾過性が悪く、濾取に長時間を要するという欠点がある。
【０００５】
また、前記方法には、濾取した結晶を乾燥させる際には、２−アミノ−６置換プリンの結晶が二次凝集し、このようにして生成した二次凝集物は、非常に固い塊状物であり、各種溶媒に対する溶解速度が遅いため、使用の際には、あらかじめ該二次凝集物には粉砕等の煩雑な操作を施さなければならないという欠点がある。
【０００６】
さらに、前記方法には、着色成分、２−アミノ−６置換プリンの類縁物質等を含有しない高純度の２−アミノ−６置換プリンを得ることができないという欠点がある。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、前記従来技術に鑑みてなされたものであり、二次凝集を生じさせずに、操作性よく各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンを高純度で精製することができる方法を提供することを目的とする。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明の要旨は、
〔１〕 一般式（Ｉ）：
【０００９】
【化２】
（式中、Ｘは水酸基、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示す）
で表わされる２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させ、得られた２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合することを特徴とする２−アミノ−６置換プリンの精製方法、ならびに
〔２〕 ２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際のアンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液の温度が４０〜７０℃である前記〔１〕記載の２−アミノ−６置換プリン溶液の精製方法
に関する。
【００１１】
【発明の実施の形態】
本発明の精製方法によれば、前記したように、
一般式（Ｉ）：
【００１２】
【化３】
（式中、Ｘは水酸基、塩素原子、臭素原子またはヨウ素原子を示す）
で表わされる２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させ、得られた２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合することにより、２−アミノ−６置換プリンを精製することができる。
【００１４】
本発明においては、このようにアンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液が用いられている点に１つの大きな特徴がある。かかる水溶液を用いた場合には、驚くべきことに、精製された２−アミノ−６置換プリンを結晶として二次凝集させずに、操作性よく高純度で得ることができる。
【００１５】
前記２−アミノ−６置換プリンは、公知の方法、例えば、国際公開第９４／０７８９２号パンフレット、J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2051-61等に記載の方法（以下、従来法という）等によって得ることができる。
【００１６】
前記２−アミノ−６置換プリンは、まず、アルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させる。
【００１７】
前記２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させる際の温度は、特に限定がなく、通常、３〜３０℃程度であればよい。
【００１８】
前記アルカリ金属水酸化物としては、例えば、水酸化ナトリウムおよび水酸化カリウムが好適例としてあげられる。
【００１９】
前記アルカリ金属水酸化物の使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、０．５モル以上、なかんづく１モル以上であることが好ましく、１０モル以下、なかんづく４モル以下であることが好ましい。
【００２０】
前記アルカリ金属水酸化物は、アルカリ金属水酸化物の水溶液として用いられる。
【００２１】
前記アルカリ金属水酸化物の水溶液の濃度は、容積効率を考えた経済性の観点から、０．５重量％以上、なかんづく１重量％以上であることが好ましく、４０重量％以下、なかんづく２０重量％以下であることが好ましい。
【００２２】
２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する。
【００２３】
前記アンモニアは、通常、水溶液またはガスとして用いることができる。
【００２４】
前記アンモニアの濃度は、特に限定がなく、容積効率を考えた経済性の観点から、５重量％以上、なかんづく１０重量％以上であることが好ましく、また入手の容易性の観点から、１００重量％以下、なかんづく３０重量％以下であることが好ましい。
【００２５】
前記アンモニアの使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、１モル以上、なかんづく３モル以上であることが好ましく、１５モル以下、なかんづく１０モル以下となるように調整することが好ましい。
【００２６】
前記塩化アンモニウムには、特に限定がなく、一般に市販されているものを用いることができる。
【００２７】
前記塩化アンモニウムの使用量は、経済性の観点から、前記２−アミノ−６置換プリン１モルに対して、１モル以上、なかんづく１．５モル以上であることが好ましく、１０モル以下、なかんづく５モル以下であることが好ましい。なお、前記塩化アンモニウムの使用量は、２−アミノ−６置換プリンを溶解させるために用いたアルカリ金属水酸化物の使用量よりも少ない場合には、２−アミノ−６置換プリンの精製収率が低下することがあるので、アルカリ金属水酸化物の使用量よりも過剰量であることが好ましい。
【００２８】
本発明においては、２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液とアンモニアとを混合したのち、塩化アンモニウム水溶液と混合したり、２−アミノ−６置換プリン溶液と塩化アンモニウム水溶液とを混合したのち、アンモニアと混合するのではなく、前記２−アミノ−６置換プリン溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合するという方法が採られているので、２−アミノ−６置換プリンの結晶を成長させながら晶析させることができ、従来法で得られる結晶よりも濾過性に優れた結晶が得られ、かくして得られた結晶は、乾燥の際には二次凝集を生じがたく、しかも２−アミノ−６置換プリンの類縁物質および着色成分が、濾液に除去され、精製効率が高いという優れた性質が発現される。
【００２９】
前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液には、２−アミノ−６置換プリンに適度な溶解性を付与し、結晶を成長させながら晶析することができる観点から、アンモニア１〜５０重量％および塩化アンモニウム１〜５０重量％が含まれ、アンモニアと塩化アンモニウムとの合計含有量が８０重量％以下であることが好ましい。
【００３０】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合し、アルカリ金属水酸化物の水溶液から２−アミノ−６置換プリンの結晶を析出させることにより、該２−アミノ−６置換プリンを精製することができる。
【００３１】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際には、例えば、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液に、前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液を滴下することが濾過性に優れた結晶が得られる点から好ましい。
【００３２】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際には、前記２−アミノ−６置換プリン溶液の温度は、通常、３〜３０℃程度であればよく、また前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液の温度は、晶析する２−アミノ−６置換プリンの結晶の粒子径を大きくする点から、４０℃以上、なかんづく５０℃以上であることが好ましく、アンモニアが気化し、散逸させないようにする点から、７０℃以下、なかんづく６５℃以下であることが好ましい。
【００３３】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合したあとには、通常、０．５〜３時間程度、均一な組成となるように前記混合液を攪拌することが好ましい。
【００３４】
前記２−アミノ−６置換プリンを溶解させたアルカリ金属水酸化物の水溶液と、前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合したのち、高い精製収率で２−アミノ−６置換プリンを得るために、かかる溶液を７０℃以下、例えば、室温程度にまで冷却することが好ましい。
【００３５】
冷却後には、得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶を、濾紙等のフィルターを用いて濾過することにより、回収することができる。
【００３６】
濾取した２−アミノ−６置換プリンの結晶は、水、メタノール等の溶媒で適宜洗浄したのちに、減圧下で乾燥することにより、２−アミノ−６置換プリンの白色結晶として回収することができる。
【００３７】
かくして得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶の平均粒子径は、レーザー光回折散布法に従って測定した場合、１０〜７０μｍであり、従来法で得られる２−アミノ−６置換プリンの結晶の平均粒子径３〜５μｍと比べて、非常に大きい。従って、本発明の製造方法によって得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶は、従来法で得られた２−アミノ−６置換プリンよりも濾過性に優れたものである。
【００３８】
さらに前記２−アミノ−６置換プリンの結晶は、前記したように、平均粒子径が大きいので、かかる２−アミノ−６置換プリンを乾燥させる段階で２−アミノ−６置換プリンの結晶の二次凝集物が生じがたいので、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、Ｎ−メチルピロリドン、ジメチルスルホキシド等の各種溶媒に対して溶解速度が非常に速いものである。
【００３９】
また、従来法によって得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶には、着色成分、類縁物質等の不純物が含有されているが、このような不純物が含有された２−アミノ−６置換プリンを本発明の精製方法で精製した場合には、これらの不純物が除去され、高純度を有する２−アミノ−６置換プリンを得ることができる。
【００４０】
以上説明したように、本発明の２−アミノ−６置換プリンの精製方法によれば、比較的大きな粒子径を有する２−アミノ−６置換プリンが得られるので、濾過する際の濾過性に優れ、乾燥時に二次凝集物を生じがたく、しかも各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンの結晶を高純度で得ることができる。
【００４１】
かくして得られた２−アミノ−６置換プリンの結晶は、例えば、核酸系抗ウイルス薬の中間体として好適に使用しうる化合物である。
【００４２】
【実施例】
以下、実施例により本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はかかる実施例のみに限定されるものではない。
【００４３】
製造例１〔２−アミノ−６−ヨードプリンの製造〕
J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2056-61に記載の方法にしたがって、粗製２−アミノ−６−ヨードプリンを調製した。
得られた粗製２−アミノ−６−ヨードプリンの純度は、９５．０％であった。
【００４４】
なお、前記結晶の純度は、液体クロマトグラフィー分析（ＬＣ分析）で得られた各ピークの面積比（百分率）から測定した。
【００４５】
製造例２〔２−アミノ−６−クロロプリンの製造〕
J. Pharm. Sci., 1968, 57(2), p.2056-61に記載の方法にしたがって、粗製２−アミノ−６−クロロプリンを調製した。
得られた粗製２−アミノ−６−クロロプリンの純度は、９２．０％であった。
【００４６】
製造例３〔グアニンの製造〕
特開昭５９−１６８９１号公報に記載の方法にしたがって粗製グアニン（一般式（Ｉ）においてＸが水酸基である化合物）を調製した。
得られた粗製グアニンの純度は、９９．０％であった。
【００４７】
実施例１
製造例１で得られた２−アミノ−６−ヨードプリン７８．３ｇ（０．３０モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液９００．０ｇ（０．４５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を調製した。
【００４８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９０モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−ヨードプリンを晶析させた。
【００４９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取した。２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、６３秒間を要した。
【００５０】
次に、濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回、メタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−ヨードプリンの白色の結晶７０．５ｇ（０．２７モル）を得た。２−アミノ−６−ヨードプリンの収率は、９０％であり純度は、９９．５％であった。
【００５１】
かくして得られた２−アミノ−６ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は粒度分布測定装置〔（株）島津製作所製、商品名：ＳＡＬＤ−１１００〕を用いて測定したところ、１３μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集が認められなかった。
【００５２】
なお、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、得られた白色結晶は、J. Pharm. Sci. 1968, 57(12), 2056-61に記載の方法によって得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶であることが確認された。
【００５３】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０９ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、４０秒間を要した。
【００５４】
比較例１
従来法にしたがって、２−アミノ−６−ヨードプリン７８．３ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液９００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸４５．６ｇを加え、晶析させた２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー５００ｍＬを、実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には２５２秒間を要した。
【００５５】
乾燥後、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の純度は９７．０％であった。
【００５６】
得られた２−アミノ−６ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が生じていた。
【００５７】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、３０分間攪拌したが、二次凝集で生じた固い粒が溶け残った。
【００５８】
実施例１および比較例１（従来法）の結果から、実施例１の方法によれば、従来法と比べて、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の濾過に要する時間が大幅に短縮されたことから、２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶は、濾過性に優れたものであることがわかる。
【００５９】
また、実施例１および比較例１の結果から、実施例１の方法によれば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに対する溶解速度が非常に速い２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を得ることができることがわかる。
【００６０】
実施例２
比較例１で得られた２−アミノ−６−ヨードプリン２６．１ｇ（０．１モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液３００．０ｇ（０．１５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を調製した。
【００６１】
次に、水１００ｍＬ、塩化アンモニウム１６．１ｇ（０．３モル）および２８％アンモニア水３０．４ｇ（０．５モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−ヨードプリンを晶析させた。
【００６２】
滴下終了後、前記２−アミノ−６−ヨードプリン溶液と前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合した混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッツェ漏斗を使用して濾取した。
【００６３】
濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−ヨードプリンの白色の結晶２３．５ｇ（０．０９モル）を得た。２−アミノ−６−ヨードプリンの精製収率は、９０．０％であり、純度は９９．５％であった。
【００６４】
得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例と同様にして調べたところ、１３μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００６５】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド４０ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、４０秒間を要した。
【００６６】
実施例２および比較例１（従来法）の結果から、実施例２の方法によれば、従来法で得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶の純度を大幅に向上させることができることがわかる。
【００６７】
実施例３
製造例２で得られた２−アミノ−６−クロロプリン５０．９ｇ（０．３モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液９００．０ｇ（０．４５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−クロロプリン溶液を調製した。
【００６８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９０モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−クロロプリンを４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−クロロプリンを晶析させた。
【００６９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、２８秒間を要した。
【００７０】
次に濾取した結晶を、水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−クロロプリンの白色結晶４４．８ｇ（０．２６４モル）を得た。２−アミノ−６−クロロプリンの精製収率は８８％であり、純度は９９．０％であった。
【００７１】
かくして得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５５μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００７２】
なお、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、該白色結晶のＩＲスペクトルが、J. Pharm. Sci., 1968, 57(12),2056-61に記載の方法によって得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、得られた白色結晶は、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶であることが確認された。
【００７３】
次に、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶０．８ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、７分間を要した。
【００７４】
比較例２
従来法にしたがって、２−アミノ−６−クロロプリン５０．９ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液９００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸４５．６ｇを添加し、晶析させた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー５００ｍＬを、実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には、２０８秒間を要した。
【００７５】
乾燥後、得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の純度は、９７．０％であった。
【００７６】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、５μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が生じていた。
【００７７】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、３０分間攪拌したが、二次凝集で生じた固い固体が溶け残った。
【００７８】
実施例３および比較例２（従来法）の結果から、実施例３の方法によれば、従来法と比べて、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の濾過に要する時間が大幅に短縮されたことから、２−アミノ−６−クロロプリンの結晶は、濾過性に優れたものであることがわかる。
【００７９】
また、実施例３および比較例２の結果から、実施例３の方法によれば、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミドに対する溶解速度が非常に速い２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を得ることができることがわかる。
【００８０】
実施例４
比較例２で得られた２−アミノ−６−クロロプリン１７．０ｇ（０．１モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液３００．０ｇ（０．１５モル）に室温下で溶解させ、２−アミノ−６−クロロプリン溶液を調製した。
【００８１】
次に、水１００ｍＬ、塩化アンモニウム１６．１ｇ（０．３モル）および２８％アンモニア水３０．４ｇ（０．５モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記２−アミノ−６−クロロプリン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、２−アミノ−６−クロロプリンを晶析させた。
【００８２】
滴下終了後、前記２−アミノ−６−クロロプリン溶液と前記アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合した混合物を４０〜７０℃で、０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物中に晶析している２−アミノ−６−クロロプリンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。
【００８３】
濾取した結晶を、水を１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、２−アミノ−６−クロロプリンの白色の結晶１５．１ｇ（０．０８９モル）を得た。２−アミノ−６−クロロプリンの精製収率は、８９％であり、純度は９９．７％であった。
【００８４】
得られた２−アミノ−６−クロロプリンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、５５μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００８５】
次に、得られた２−アミノ−６−ヨードプリンの結晶１．０ｇを２３℃のＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド１００ｇに添加し、攪拌して該結晶が完全に溶解するまでの時間を調べたところ、７分間を要した。
【００８６】
実施例４および比較例２（従来法）の結果から、実施例３の方法によれば、従来法で得られた２−アミノ−６−クロロプリンの結晶の純度を大幅に向上させることができることがわかる。
【００８７】
実施例５
製造例３で得られたグアニン４５．３ｇ（０．３モル）を２％水酸化ナトリウム水溶液１２００．０ｇ（０．６モル）に室温下で溶解させ、グアニン溶液を調製した。
【００８８】
次に、水３００ｍＬ、塩化アンモニウム４８．４ｇ（０．９モル）および２８％アンモニア水９１．２ｇ（１．５０モル）を混合し、４０〜７０℃に加温し、混合液を調製し、該混合液に前記グアニン溶液を４０〜７０℃で、１〜２時間かけて滴下し、グアニンを晶析させた。
【００８９】
滴下終了後、晶析させた混合物を４０〜７０℃で０．５時間攪拌し、室温まで冷却し、前記混合物に晶析しているグアニンの結晶を直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取した。グアニンの晶析スラリー５００ｍＬを濾取する際には、３０２秒間を要した。
【００９０】
次に濾取した結晶を水１５０ｍＬで２回およびメタノール１００ｍＬで２回洗浄し、洗浄した結晶を減圧下で乾燥し、グアニンの白色の結晶４４．８ｇ（０．２９６モル）を得た。グアニンの精製収率は９８．８％であり、純度は９９．５％であった。
【００９１】
得られたグアニンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、１１μｍであった。また、乾燥時には、二次凝集物が認められなかった。
【００９２】
なお、得られたグアニンの白色結晶のＩＲスペクトルを調べたところ、得られた白色結晶のＩＲスペクトルは、特開昭５９−１６８９１号公報に記載の方法によって得られたグアニンの結晶のＩＲスペクトルと一致したことから、得られた白色結晶はグアニンの結晶であることが確認された。
【００９３】
比較例３
従来法にしたがって、グアニン１５．１ｇを２％水酸化ナトリウム水溶液４００ｇに溶解させた溶液に３６％塩酸２０．３ｇを添加し、晶析させたグアニンの晶析スラリー５００ｍＬを実施例１と同様にして、直径９ｃｍのヌッチェ漏斗を使用して濾取したところ、その濾取には３７８秒間を要した。乾燥後、得られたグアニンの結晶の純度は、９９．０％であった。
【００９４】
得られたグラニンの晶析スラリー中の結晶の平均粒子径は、実施例１と同様にして調べたところ、１μｍであった。なお、乾燥時には、二次凝集が生じていた。
【００９５】
実施例５および比較例３（従来法）の結果から、実施例５の方法によれば、従来法で得られたグアニンの結晶の純度を高め、結晶の濾過速度を向上させることができることがわかる。
【００９６】
【発明の効果】
本発明の２−アミノ−６置換プリンの精製方法によれば、比較的大きな粒子径を有する２−アミノ−６置換プリンが得られるので、２−アミノ−６置換プリンの結晶の二次凝集物を生じがたく、濾過する際の濾過性に優れ、しかも各種溶媒に対して速い溶解速度を呈する２−アミノ−６置換プリンの結晶を高純度で得ることができるという効果が奏される。
Claims (2)
- 一般式（Ｉ）：
で表わされる２−アミノ−６置換プリンをアルカリ金属水酸化物の水溶液に溶解させ、得られた２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合することを特徴とする２−アミノ−６置換プリンの精製方法。 - ２−アミノ−６置換プリン溶液と、アンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液とを混合する際のアンモニアおよび塩化アンモニウムを含有する水溶液の温度が４０〜７０℃である請求項１記載の２−アミノ−６置換プリンの精製方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22820797A JP3930616B2 (ja) | 1997-08-25 | 1997-08-25 | ２−アミノ−６置換プリンの精製方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP22820797A JP3930616B2 (ja) | 1997-08-25 | 1997-08-25 | ２−アミノ−６置換プリンの精製方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH1160575A JPH1160575A (ja) | 1999-03-02 |
| JP3930616B2 true JP3930616B2 (ja) | 2007-06-13 |
Family
ID=16872879
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP22820797A Expired - Fee Related JP3930616B2 (ja) | 1997-08-25 | 1997-08-25 | ２−アミノ−６置換プリンの精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3930616B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018157133A1 (en) | 2017-02-27 | 2018-08-30 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2005132767A (ja) * | 2003-10-30 | 2005-05-26 | Sumitomo Chemical Co Ltd | プリン化合物の製造方法 |
| JP7045013B2 (ja) * | 2019-05-24 | 2022-03-31 | 国立大学法人山口大学 | グアニン結晶の製造方法 |
-
1997
- 1997-08-25 JP JP22820797A patent/JP3930616B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2018157133A1 (en) | 2017-02-27 | 2018-08-30 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
| EP3971291A1 (en) | 2017-02-27 | 2022-03-23 | Translate Bio, Inc. | Methods for purification of messenger rna |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH1160575A (ja) | 1999-03-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5305248B2 (ja) | 新規ナテグリニド結晶 | |
| JPS63152382A (ja) | ピラノインドリジン誘導体及びその製造法 | |
| JPH05208943A (ja) | Ｎ−（トランス−４−イソプロピルシクロヘキシルカルボニル）−ｄ−フェニルアラニンの結晶及びその製造法 | |
| JP2007505165A (ja) | シス−ジヨード−（トランス−ｌ−１，２−シクロヘキサンジアミン）白金（ｉｉ）錯体及び高純度オキサリプラチンの調製方法 | |
| JP3930616B2 (ja) | ２−アミノ−６置換プリンの精製方法 | |
| JPH08333364A (ja) | ｄ４ Ｔ多形フォームＩ方法 | |
| JPH02149516A (ja) | グリベンクラミドの微粉化法 | |
| JP2001526678A (ja) | ５−アミノ−２，４，６−トリヨード−ｎ，ｎ´−ビス（２，３−ジヒドロキシプロピル）−イソフタルアミドの黄色多形 | |
| JPS63295561A (ja) | ２−キノロン誘導体 | |
| JP3400105B2 (ja) | 光学活性スルホン酸誘導体およびその製法 | |
| ES2386079T3 (es) | Procedimiento para la preparación de tricianometanuros de metal alcalino o alcalintérreo | |
| JP2003515536A (ja) | 高温融解結晶変態のエピナスチン塩酸塩の生成方法 | |
| WO1995022531A1 (fr) | Procede de production de 2(1h)-quinoxalinone a substition en position 6 | |
| JP2008285446A (ja) | （±）２−（ジメチルアミノ）−１−｛〔Ｏ−（ｍ−メトキシフェネチル）フェノキシ〕メチル｝エチル水素サクシナート塩酸塩のＩ形結晶とＩＩ形結晶の混晶の製造法 | |
| JP2000501705A (ja) | ３―アミノ―１，２，４―ベンゾトリアジンジオキシドの製造方法 | |
| JP2981323B2 (ja) | ２−ビスアリールアミノ−９，９−ジアルキルフルオレンの単離方法 | |
| JP3859093B2 (ja) | 抗腫瘍性白金錯体カルボプラチンの製造方法 | |
| JPH01190661A (ja) | ４，４′−ジヒドロキシジフエニルスルホンの精製法 | |
| JP2786602B2 (ja) | ジブロモベンザンスロンの精製法 | |
| WO2006080484A1 (ja) | セフカペン ピボキシルのメタンスルホン酸塩 | |
| JPS61180773A (ja) | ベンズイミダゾ−ルチオ−ルの製法 | |
| JP3487067B2 (ja) | ３−アミノ−２−ヒドロキシアセトフェノン塩の製造法 | |
| JPH06279448A (ja) | ２種類のフタロジニトリル誘導体から対称性の低い新規なフタロシアニン錯体を製造する方法 | |
| JP3259196B2 (ja) | ２−ヒドラジノ−４，６−ジメトキシピリミジンの製造法 | |
| JPH03128363A (ja) | ジスルフィド型サイアミン誘導体の製造方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A711 | Notification of change in applicant |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A712 Effective date: 20041025 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20070222 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070222 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070309 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |