JP3577756B2 - Ｎ−保護グルタミン酸γ−誘導体の選択的製造法 - Google Patents

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、Ｎ−保護グルタミン酸γ−誘導体の製造法、より詳しくは、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドの存在下にＮ−保護グルタミン酸無水物とアミノ酸またはその誘導体とを反応させることを特徴とするＮ−保護グルタミン酸γ−誘導体の選択的製造法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
従来、Ｎ−グルタミン酸γ−ペプチドのようなＮ−保護グルタミン酸γ−誘導体を製造するには、一般に、Ｎ−保護グルタミン酸のα−カルボキシル基を保護し、ジシクロヘキシルカルボジイミド（ＤＤＣ）、アジド化等により脱水縮合した後、α−保護基を除去する方法が用いられている。このような方法によれば、高純度のγ−誘導体が得られるものの工程が長く操作が煩雑であり、収率も低い場合が多い。一方、Ｎ−保護グルタミン酸無水物を用いたＮ−保護グルタミン酸誘導体の製造法が知られている（Ｊ． Ｃｈｅｍ． Ｓｏｃ．， １９５０， １９５４−１９５９および Ａｕｓｔ． Ｊ． Ｃｈｅｍ．， ２４， ４３５−４３７）。この方法は、簡単な方法ではあるが、Ｎ−保護基の種類によっては、α−誘導体とγ−誘導体の混合物が生成し、その選択性は高くない。
【０００３】
【発明が解決しようとする課題】
本発明は、より少ない工程数でしかも高収率かつ高純度でグルタミン酸γ−誘導体を製造し、提供することのできる方法を開発することを目的とする。
【０００４】
【課題を解決するための手段】
本発明者は、上記の目的を達成すべく鋭意研究の結果、Ｎ−保護グルタミン酸の無水物をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドの存在下にアミノ酸またはその誘導体とを反応させるとＮ−保護グルタミン酸のγ−誘導体が高い選択性でしかも良好な収率で生成することを見出し、このような知見に基いて本発明を完成した。
【０００５】
すなわち、本発明はＮ−保護グルタミン酸無水物をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドの存在下にアミノ酸またはその誘導体と反応させることを特徴とするＮ−保護グルタミン酸γ−誘導体の選択的製造法に関する。
【０００６】
以下、本発明を逐次詳細に説明する。
【０００７】
本発明に用いられるＮ−保護グルタミン酸無水物における保護基には特別の制限はなく、通常ペプチド化学で用いられる保護基、例えばベンジルオキシカルボニル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、ホルミル基、フタリル基等が挙げられる。また、この無水物の製造法にも特別な制限はなく、Ｎ−保護グルタミン酸をＤＤＣ、無水酢酸等の脱水剤で処理するなどの常法を用いることができる。
【０００８】
また、本発明に用いられるアミノ酸としては、グリシン、アラニン、β−アラニン、グルタミン、アスパラギン、バリン、ロイシン、イソロイシン、プロリン、メチオニン、セリン、スレオニン、フェニルアラニン、チロシン、トリプトファン、ヒスチジン、グルタミン酸、アスパラギン酸、リジン、アルギニン等があげられる。
【０００９】
アミノ酸誘導体としては、これらアミノ酸が数個、好ましくは２〜５個つながったペプチド類；α−及び／またはω−カルボキシル基がメチルエステル、エチルエステル、ベンジルエルテルなどで保護されたアミノ酸またはペプチドエステル類；ω−アミノ基がホルミル基、アセチル基、トリフルオロアセチル基、ベンゾイル基、ｔ−ブチルオキシカルボニル基、ベンジルオキシカルボニル基などのアシル基で保護されたω−アシルアミノ酸またはペプチド類；側鎖水酸基がベンジル基で保護されたアミノ酸類またはペプチド類；等を挙げることができる。
【００１０】
Ｎ−保護グルタミン酸無水物とアミノ酸またはその誘導体との反応は、例えば、Ｎ−保護グルタミン酸無水物に対して、０．５〜２倍モル、好ましくは０．８〜１．２倍モルのアミノ酸またはその誘導体を、０．２〜２倍モル、好ましくは０．５〜１．２倍モルのＮ−ヒドロキシコハク酸イミドの存在下に、溶媒中、−２０〜８０℃、好ましくは０〜５０℃で３０分〜２４時間行えばよい。
【００１１】
反応に用いられる溶媒としては、酢酸エチル、ジオキサン、クロロホルム、Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド等の有機溶媒があげられる。これら溶媒は混合して用いてもよく、また水との混合溶媒も使用することが可能である。
【００１２】
本発明の製造法により製造されたＮ−保護グルタミン酸γ−誘導体は、その保護基を常用の方法で除去すればグルタミン酸γ−誘導体とすることができることは言うまでもない。
【００１３】
副生するα−体は、保護基の除去前でも除去後でも、結晶化、クロマトグラフィーなどの常用の方法によりγ−体から分離することができる。
【００１４】
【実施例】
以下、実施例により本発明を更に説明する。
【００１５】
合成例１：Ｚ−Ｇｌｕ無水物の合成
ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−グルタミン酸（Ｚ−Ｇｌｕ）１４ｇを酢酸エチル７０ｍｌに懸濁し、５℃に冷却した。これにジシクロヘキシルカルボジイミド１０．３ｇ を酢酸エチル３０ｍｌに溶解した溶液を１０℃以下で加えた。５℃以下で１時間、ついで室温で２時間攪拌した。析出したジシクロヘキシル尿素を濾過により分離して、Ｚ−Ｇｌｕ無水物の酢酸エチル溶液を得た。
【００１６】
実施例１〜３および比較例１〜３
炭酸水素ナトリウム１０．５ｇ （対Ｚ−Ｌｙｓ、２．５倍モル）、α−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−リジン（Ｚ−Ｌｙｓ）１４ｇ およびＮ−ヒドロキシコハク酸イミド２．９ｇを水１５０ｍｌ に懸濁し、４０℃に加温した。Ｚ−Ｇｌｕ無水物を９．７ｇ含有する酢酸エチル溶液を加え、同温度で１５分間攪拌した。その後、塩酸を加えてｐＨ２に調整し、分層した。酢酸エチル層を５％塩化ナトリウム水溶液７０ｍｌで洗浄した後、酢酸エチル層に水１５０ｍｌ 、５％パラジウム炭素２ｇを加えてｐＨ２に調整し、水素ガスを２時間通して脱保護を行なった。この間、ｐＨを２に調整した。反応終了後、パラジウム炭素を濾過により除き、分層した。水層を約１２０ｍｌ まで減圧濃縮後、メンブレン濾過し、ＨＰＬＣにより反応収率およびγ−体とα−体との生成比を求めた。 同様にして、Ｚ−Ｌｙｓにかえて、Ｌ−ＡｌａまたはＬ−Ｇｌｕを用いて行った。
【００１７】
また、比較例として、Ｎ−ヒドロキシコハク酸イミドを添加しないで各反応を行った。
【００１８】
下記第１表に結果を示す。
【００１９】
【表１】

【００２０】
同表からＮ−ヒドロキシコハク酸イミドには、反応率そのものを顕著に高めるのみならず、γ−誘導体の選択性をも顕著に高める作用のあることが理解される。
【００２１】
【発明の効果】
本発明によれば、Ｎ−保護グルタミン酸γ−誘導体を高収率、高選択率で容易に製造することができる。

Claims (1)

1. Ｎ−保護グルタミン酸無水物をＮ−ヒドロキシコハク酸イミドの存在下にアミノ酸またはその誘導体と反応させることを特徴とするＮ−保護グルタミン酸γ−誘導体の選択的製造法。