JP3231898B2 - 美白化粧料 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、皮膚美白効果を有する
美白化粧料に関し、さらに詳しくは、メラニン生成抑制
作用に基づく美白効果を有する花血藤（生薬）抽出物を
有効成分として配合した美白化粧料に関する。

【０００２】

【従来の技術】一般に、日焼けによる色黒、シミ、ソバ
カス等は、黒褐色無定形の色素であるメラニンの生成に
より生じるものと考えられており、このメラニンは、皮
膚が紫外線などの外的刺激を受けると、皮膚のメラニン
細胞中に存在するチロシナーゼ（チロシン酸化酵素）が
活性化し、たんぱく質構成アミノ酸の一種であるチロシ
ンが酸化されて生成する。このことから、メラニン生成
に関与するチロシナーゼの活性を抑制することにより肌
を白くする効果が期待されるため、チロシナーゼ活性抑
制成分の化粧料への配合が提唱されていた。

【０００３】従来、美白効果を有する美白化粧料とし
て、特公昭５５−４３４４３号「美白化粧料」や特公昭
５４−９７４号「生薬抽出物配合組成物」に開示される
ように、アスコルビン酸またはその誘導体を配合したも
のが知られている。他にも、アルブチンを配合した皮膚
外用剤（特開昭６０−１６９０６号等）やコウジ酸を配
合した漂白化粧料（特公昭３２−８１００号）、植物成
分（特開昭６３−２９１３号他）または動物成分（特開
昭６３−８３１２号他）から抽出した化粧料が美白効果
を有するものとして公知である。

【０００４】しかしながら、上記従来の化粧料は、充分
な美白効果が認められないものが多く、また、保存安定
性が充分でなかったり、刺激性を有するなど皮膚に対す
る安全性に問題があるものが多かった。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明は、上述従来の
技術の問題点を解決し、優れた皮膚美白効果を有し、か
つ充分な保存安定性および高い安全性を有する美白化粧
料を提供することを目的とする。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者等は上記課題を
解決するために鋭意研究した結果、生薬の一種である花
血藤の抽出物がチロシナーゼ酵素活性阻害作用、および
メラノーマ細胞におけるメラニン生成抑制作用を有する
ことを見い出し、本発明を提供することができた。

【０００７】すなわち、本発明は、生薬である花血藤の
抽出物を配合したことを特徴とする美白化粧料を提供す
るものである。

【０００８】

【作用】本発明の化粧料は、次に示すような方法で製造
することができる。まず、花血藤（別名として、大血
藤、紅藤、大活血、大血通、血木通または活血藤などと
も呼ばれる）の粉砕物を抽出溶媒を用いて抽出する。な
お、該抽出溶媒としては、アルコール（メタノール、エ
タノール、プロパノールまたはイソプロピルアルコール
等）や水などを用いることができ、また、これらの混合
溶液を用いることもできる。例えば、アルコール濃度が
20〜70％の含水アルコールを用い、50℃で１時間の抽出
を行うと抽出効率が良い。

【０００９】抽出後、抽出液を濾別して抽出エキスを得
る。得られた抽出エキスは、さらに60℃以下の温度で加
熱しながら減圧濃縮して乾固させ、乾固した抽出物を回
収して化粧料に配合する。なお、上記抽出エキスをその
まま化粧料に配合し、美白効果を有する活性成分を分画
して化粧料に配合しても良い。

【００１０】このようにして得た花血藤の抽出物は、従
来より用いられてきたアスコルビン酸と比較して、低濃
度で優れたメラニン生成抑制作用を発揮することが本発
明者等によって確認されている。花血藤抽出物の化粧料
への配合量は特に限定されるものではないが、好ましく
は0.01〜5.0 ％配合することにより、美白効果を有する
美白化粧料を得ることができる。

【００１１】以下、実施例により本発明をさらに詳細に
説明する。しかし本発明の範囲は以下の実施例により制
限されるものではない。

【００１２】

【実施例１】本実施例では、花血藤の抽出方法の一例を
示す。まず、生薬である花血藤の乾燥物約 100ｇをミキ
サーで粉砕し、その粉砕物および 500mlの50％エチルア
ルコールをフラスコに入れ、撹拌しながら50℃で１時間
環流抽出を行った。抽出後、この溶液を吸引濾過し、得
られた濾液をエバポレーターを用いて50℃にて減圧濃縮
した。次いで、得られた濃縮液を減圧乾燥し、11.9ｇの
褐色結晶体（抽出物）を得た。

【００１３】

【実施例２】本実施例では、実施例１で得た花血藤の抽
出物のチロシナーゼ活性阻害作用の測定を行った。な
お、チロシナーゼ活性阻害作用の測定は、ドーパからチ
ロシナーゼにより生産されるドーパクロムを、 475nmの
吸光度測定によって定量する方法を用いた。また、チロ
シナーゼ活性阻害作用の測定にあたっては、次のような
反応試薬を用いた。 （イ）コハク酸ナトリウムバッファー（ 100mM、pH 5.
5） （ロ）マッシュルームチロシナーゼ（SIGMA 社製）溶液
（270 units/mlになるように（イ）のバッファーで調
製） （ハ）L-DOPA（和光純薬工業（株）社製）溶液（6mM に
（イ）のバッファーで調製） まず、試験管に（イ）のバッファー1.8ml および（ロ）
のチロシナーゼ溶液0.1ml を入れ、この試験管に、実施
例１で得た抽出物を表１に示す終濃度となるように調整
した水溶液0.1ml を加え、30℃の恒温水槽で10分間イン
キュベートした。次いで、この試験管に（ハ）のL-DOPA
溶液を1ml 加え、撹拌した後、30℃の恒温室中で往復振
とう機に該試験管を約45度傾けてセットし、40分間振と
う（往復回数150/分）した。振とう後、分光光度計を用
いて 475nmの吸光度を測定し、その測定値をＡとした。

【００１４】

【表１】

【００１５】一方、コントロールとして試料溶液の代わ
りに（イ）のバッファーを加えたこと以外は上記と同様
にして 475nmの吸光度を測定し、その測定値をＢとし
た。また、ブランクとしてL-DOPA溶液の代わりに（イ）
のバッファーを加えたこと以外は上記と同様にして 475
nmの吸光度を測定し、その測定値をＣとした。

【００１６】上記 475nmの吸光度の測定値から試料溶液
のチロシナーゼ活性阻害率を算出した。なお、チロシナ
ーゼ活性阻害率の算出は、以下の計算式を用いて行い、
その結果を表１に示した。

【００１７】計算式‥‥チロシナーゼ活性阻害率（％）
＝｛１−（Ａ−Ｃ）／Ｂ｝×100 表１のデータを基に、チロシナーゼ活性を50％阻害する
花血藤抽出物の濃度を求めたところ19.8μｇ／ｍｌであ
り、花血藤の抽出物は低濃度のものであっても、チロシ
ナーゼの活性を強く阻害しており、優れたチロシナーゼ
活性阻害作用を有することが確認された。

【００１８】

【実施例３】本実施例では、実施例１で得た花血藤抽出
物のメラニン生成抑制作用の測定を行った。

【００１９】まず、メラニンを生成するマウス由来の悪
性黒色腫細胞であるＢ16メラノーマ細胞（B16-F0、ATCC
No. CRL-6322 ）を、ウシ胎児血清を終濃度10％となる
ように添加したイーグルＭＥＭ培地で培養し、６ウェル
プレート（FALCON社製）の各ウェルに、該細胞を 3×10
³ cell/ml の濃度で含む上記培地を 6ml入れ、ＣＯ₂イ
ンキュベーター(5％ＣＯ₂ 、37℃）内で５日間培養し
た。

【００２０】次いで、この培地を0.03％のテオフィリン
(SIGMA社製）を含む新しいイーグルＭＥＭ培地（6 ml）
に交換し、各ウェルに適当な量の試料溶液（実施例１で
得た抽出物の水溶液）を添加した後さらに３日間培養し
た。培養終了後、該培地を捨てて各ウェルに１mlの生理
食塩水を加え、スクレーパーを用いてウェルの底面に付
着している細胞をかきとるように懸濁させた。次に、ピ
ペットを用いて該細胞懸濁液をマイクロ遠心チューブ
(1.5ml容量、エッペンドルフ社製）に移し、遠心分離
（1,000 ×ｇ、15分間）した。

【００２１】一方、対照として試料溶液の代わりに滅菌
水を添加して上記同様の試験を行った。また、細胞の白
色化を比較するための実験区として、試料溶液の代わり
に 2％Ｌ−アスコルビン酸水溶液を (a)60μｌ、(b)150
μｌ、(c)300μｌ添加し、上記同様の試験を行った。

【００２２】次に、ペレットとなった細胞の白色化の度
合を目視で比較し、メラニン生成抑制効果の判定を行っ
た。その際、対照実験区（滅菌水添加区）の細胞の白色
の度合を「−」、Ｌ−アスコルビン酸を添加した比較実
験区の細胞の白色の度合をそれぞれ (a)：「＋」、(b)
：「＋＋」、 (c)：「＋＋＋」として、試料溶液を添
加した場合の細胞の白色の度合が−、＋、＋＋、＋＋＋
のどれに対応するかを目視で判断し、試料溶液のメラニ
ン生成抑制効果の強さとして４段階の判定を行った。な
お、その結果は表２に示した。

【００２３】

【表２】

【００２４】表２からもわかるように、花血藤の抽出物
は50μg/mlの濃度でＬ−アスコルビン酸 200μg/mlと同
等のメラニン生成抑制作用を示し、Ｌ−アスコルビン酸
よりも低濃度でメラニン生成を抑制することが確認され
た。また、各抽出物は 800μg/mlの高濃度であっても細
胞に対する毒性はなかった。

【００２５】

【実施例４】本実施例では、実施例１で得た花血藤の抽
出物の美白化粧料への配合例を示す。

【００２６】 （重量％） 花血藤抽出物 1.0 グリセリン 5.0 ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート 1.5 エタノール 10.0 香料 適量 防腐剤、酸化防止剤 適量 色素 適量 精製水 残部

【００２７】

【発明の効果】生薬である花血藤の抽出物は、優れたチ
ロシナーゼ活性阻害作用、およびメラノーマ細胞におけ
るメラニン生成抑制作用を有しており、この花血藤の抽
出物を配合した本発明の美白化粧料は、優れた皮膚美白
効果を発揮する。また、本発明の美白化粧量に配合され
る花血藤の抽出物は、少量で優れた皮膚美白効果を発揮
し、細胞への毒性も低いため、安全性の高いものであ
る。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (56)参考文献 特開 平６−199885（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 生薬である花血藤の抽出物を配合したこ
   とを特徴とする美白化粧料。