JP3120987B2 - ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および安定化のための方法および組成物 - Google Patents
ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および安定化のための方法および組成物Info
- Publication number
- JP3120987B2 JP3120987B2 JP01510443A JP51044389A JP3120987B2 JP 3120987 B2 JP3120987 B2 JP 3120987B2 JP 01510443 A JP01510443 A JP 01510443A JP 51044389 A JP51044389 A JP 51044389A JP 3120987 B2 JP3120987 B2 JP 3120987B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cyclodextrin
- pharmaceutical composition
- composition according
- protein
- polypeptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B82—NANOTECHNOLOGY
- B82Y—SPECIFIC USES OR APPLICATIONS OF NANOSTRUCTURES; MEASUREMENT OR ANALYSIS OF NANOSTRUCTURES; MANUFACTURE OR TREATMENT OF NANOSTRUCTURES
- B82Y5/00—Nanobiotechnology or nanomedicine, e.g. protein engineering or drug delivery
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6949—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes
- A61K47/6951—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit inclusion complexes, e.g. clathrates, cavitates or fullerenes using cyclodextrin
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nanotechnology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
【発明の詳細な説明】 本発明は、選ばれたシクロデキストリン誘導体によ
る、ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および／ま
たは安定化方法に関する。ポリペプチド、特にタンパク
質と、選ばれたシクロデキストリン誘導体とを含んで成
る可溶化および／または安定化された組成物も記載され
る。
る、ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および／ま
たは安定化方法に関する。ポリペプチド、特にタンパク
質と、選ばれたシクロデキストリン誘導体とを含んで成
る可溶化および／または安定化された組成物も記載され
る。
シクロデキストリンは環状オリゴ糖である。最も普通
のシクロデキストリンは、６個のグルコース残基の環か
ら成るα−シクロデキストリン;7個のグルコース残基の
環から成るβ−シクロデキストリン；および８グルコー
ス単位の環から成るγ−シクロデキストリンである。シ
クロデキストリンの内側の空洞は親油性であり、一方シ
クロデキストリンの外側は親水性である。この性質の組
合せは、特に医薬との関連において、天然のシクロデキ
ストリンの広範な研究を導き、そして多数の包接複合体
が報告されている。β−シクロデキストリンは、その空
洞サイズのために特に着目されているが、比較的低い水
溶性（25℃において約1.8％w/v）および付随の腎毒性が
製剤分野におけるそれの用途を制限している。
のシクロデキストリンは、６個のグルコース残基の環か
ら成るα−シクロデキストリン;7個のグルコース残基の
環から成るβ−シクロデキストリン；および８グルコー
ス単位の環から成るγ−シクロデキストリンである。シ
クロデキストリンの内側の空洞は親油性であり、一方シ
クロデキストリンの外側は親水性である。この性質の組
合せは、特に医薬との関連において、天然のシクロデキ
ストリンの広範な研究を導き、そして多数の包接複合体
が報告されている。β−シクロデキストリンは、その空
洞サイズのために特に着目されているが、比較的低い水
溶性（25℃において約1.8％w/v）および付随の腎毒性が
製剤分野におけるそれの用途を制限している。
天然シクロデキストリンの性質を変更する試みは、ヘ
プタキス（2,6−ジ−Ｏ−メチル）−β−シクロデキス
トリン、ヘプタキス（2,3,6−トリ−Ｏ−メチル）−β
−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シク
ロデキストリン、β−シクロデキストリン−エピクロロ
ヒドリンポリマー等の開発をもたらした。シクロデキス
トリンの分かりやすい概説および製剤研究におけるそれ
らの用途については、Pithaら、Controlled Drug Deliv
ery,S.D.Bruck編、第Ｉ巻、CRC Press,Boca Raton,Flor
ida,第125−148頁（1983）を参照のこと。更に最近の概
説については、Uekamaら、CRC Critical Reviews in Th
erapeutic Drug Carrier System,3（１）巻、１−40（1
987）;Uekama,Topics in Pharmaceutical Sciences 198
7、D.D.BreimerおよびP.Speiser編、Elsevier Science
Publishers B.V.（Biomedical Division）、181−194
（1987）；およびPagington,Chemistry in Britain,455
−458頁（1987年５月）を参照のこと。
プタキス（2,6−ジ−Ｏ−メチル）−β−シクロデキス
トリン、ヘプタキス（2,3,6−トリ−Ｏ−メチル）−β
−シクロデキストリン、ヒドロキシプロピル−β−シク
ロデキストリン、β−シクロデキストリン−エピクロロ
ヒドリンポリマー等の開発をもたらした。シクロデキス
トリンの分かりやすい概説および製剤研究におけるそれ
らの用途については、Pithaら、Controlled Drug Deliv
ery,S.D.Bruck編、第Ｉ巻、CRC Press,Boca Raton,Flor
ida,第125−148頁（1983）を参照のこと。更に最近の概
説については、Uekamaら、CRC Critical Reviews in Th
erapeutic Drug Carrier System,3（１）巻、１−40（1
987）;Uekama,Topics in Pharmaceutical Sciences 198
7、D.D.BreimerおよびP.Speiser編、Elsevier Science
Publishers B.V.（Biomedical Division）、181−194
（1987）；およびPagington,Chemistry in Britain,455
−458頁（1987年５月）を参照のこと。
様々な薬剤とα−，β−もしくはγ−シクロデキスト
リンまたはそれらの混合物との包接複合体は多数の関係
者により記載されており、そして様々な利点がそれらの
複合体にありとされている。それらの記載として、次の
ものを挙げることができる。
リンまたはそれらの混合物との包接複合体は多数の関係
者により記載されており、そして様々な利点がそれらの
複合体にありとされている。それらの記載として、次の
ものを挙げることができる。
上記に列挙した特許のうち、Hiraiらの米国特許第4,6
59,696号のみがタンパク質またはポリペプチドに関する
と思われる。しかしながら、Hiraiらの特許の請求項か
ら、包接複合体が形成されないこと、そして発明者が提
供するものが親水性の生理学的に活性なポリペプチドと
シクロデキストリンとの物理的混合物から本質的に成る
医薬組成物であり、前記組成物は剤形の均質混合物であ
ることが明らかであろう。シクロデキストリンは、α
−，β−もしくはγ−シクロデキストリン、またはトリ
−Ｏ−メチルシクロデキストリンおよびトリアミノシク
ロデキストリンにより例示されるシクロデキストリン誘
導体であることができ、α−シクロデキストリンが特に
好ましい。生理学的に活性なポリペプチドは、甲状腺刺
激ホルモン放出ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモ
ン、インスリン、ソマトスタチン、成長ホルモン、プロ
ラクチン、副腎皮質刺激ホルモン、メラニン細胞刺激ホ
ルモンまたは多数の他のものであることができる。この
組成物は、鼻、膣または直腸用製剤のためにデザインさ
れ、即ち非経口または非注射の投与経路が使われる。
59,696号のみがタンパク質またはポリペプチドに関する
と思われる。しかしながら、Hiraiらの特許の請求項か
ら、包接複合体が形成されないこと、そして発明者が提
供するものが親水性の生理学的に活性なポリペプチドと
シクロデキストリンとの物理的混合物から本質的に成る
医薬組成物であり、前記組成物は剤形の均質混合物であ
ることが明らかであろう。シクロデキストリンは、α
−，β−もしくはγ−シクロデキストリン、またはトリ
−Ｏ−メチルシクロデキストリンおよびトリアミノシク
ロデキストリンにより例示されるシクロデキストリン誘
導体であることができ、α−シクロデキストリンが特に
好ましい。生理学的に活性なポリペプチドは、甲状腺刺
激ホルモン放出ホルモン、黄体形成ホルモン放出ホルモ
ン、インスリン、ソマトスタチン、成長ホルモン、プロ
ラクチン、副腎皮質刺激ホルモン、メラニン細胞刺激ホ
ルモンまたは多数の他のものであることができる。この
組成物は、鼻、膣または直腸用製剤のためにデザインさ
れ、即ち非経口または非注射の投与経路が使われる。
Matsuyamaら、Drug Development and Industrial Pha
rmacy,13（15）、2687−2691（1987）は、α−，β−お
よびγ−シクロデキストリンへの芳香族アミノ酸の結合
の熱力学に関して報告している。芳香族アミノ酸を含む
ヒト血清アルブミンもタンパク質モデルとしてテストし
た。前記著者らは、シクロデキストリンが酵素加水分解
からペプチドを保護し得ることを示唆している。また、
1984年６月16日に公表された積水化学（Sekisui Chemic
al Co.,Lid.）の日本国特許公開公報JP59/104556（84/1
04556）によれば、β−シクロデキストリンのような環
状オリゴ糖が、血液中のタンパク質および酵素の変性を
防ぐタンパク質安定化剤において最近使用されている。
オクチルフェノキシポリ（エトキシエタノール）および
β−シクロデキストリンと混合されたヒト血液は、ほと
んど変化なく24時間維持された。
rmacy,13（15）、2687−2691（1987）は、α−，β−お
よびγ−シクロデキストリンへの芳香族アミノ酸の結合
の熱力学に関して報告している。芳香族アミノ酸を含む
ヒト血清アルブミンもタンパク質モデルとしてテストし
た。前記著者らは、シクロデキストリンが酵素加水分解
からペプチドを保護し得ることを示唆している。また、
1984年６月16日に公表された積水化学（Sekisui Chemic
al Co.,Lid.）の日本国特許公開公報JP59/104556（84/1
04556）によれば、β−シクロデキストリンのような環
状オリゴ糖が、血液中のタンパク質および酵素の変性を
防ぐタンパク質安定化剤において最近使用されている。
オクチルフェノキシポリ（エトキシエタノール）および
β−シクロデキストリンと混合されたヒト血液は、ほと
んど変化なく24時間維持された。
鎮痛、制吐および麻酔強化活性を有するジベンゾ〔b
d〕ピラン誘導体および塩と2,6−ジ−Ｏ−メチル−β−
シクロデキストリンとの包接複合体は、Nogradiらの米
国特許第4,599,327号に記載されており、それらの複合
体についての増加された水溶解性および改善された生物
活性が主張されている。そのようなメチル化シクロデキ
ストリンの製薬用途は、Uekama,Pharm.Int.,1985年５
月、61−65により発表されている。Pitha,Journal of I
nclusion Phenomena 2、477−485（1984）も参照のこ
と。
d〕ピラン誘導体および塩と2,6−ジ−Ｏ−メチル−β−
シクロデキストリンとの包接複合体は、Nogradiらの米
国特許第4,599,327号に記載されており、それらの複合
体についての増加された水溶解性および改善された生物
活性が主張されている。そのようなメチル化シクロデキ
ストリンの製薬用途は、Uekama,Pharm.Int.,1985年５
月、61−65により発表されている。Pitha,Journal of I
nclusion Phenomena 2、477−485（1984）も参照のこ
と。
フロセミドの溶解を改善するためにFenyvesiら、Che
m.Pharm.Bull.,32（２）、665−669（1984）によりシク
ロデキストリンポリマーが報告されている。水溶性β−
シクロデキストリンエピクロロヒドリンポリマーを使っ
たフェニトインの溶解および吸収の改良はUekamaら、In
ternatinal Journal of Pharmaceutics,23、35−42（19
85）により記載されている。
m.Pharm.Bull.,32（２）、665−669（1984）によりシク
ロデキストリンポリマーが報告されている。水溶性β−
シクロデキストリンエピクロロヒドリンポリマーを使っ
たフェニトインの溶解および吸収の改良はUekamaら、In
ternatinal Journal of Pharmaceutics,23、35−42（19
85）により記載されている。
ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（HPBC
DまたはHPCD）およびβ−シクロデキストリンへのプロ
ピレンオキシドの付加によるそれの調製方法は、20年近
く前のGrameraらの米国特許第3,459,731号に記載されて
いる。Grameraらは、エチレンオキシドとβ−シクロデ
キストリンとの反応によるヒドロキシエチル−β−シク
ロデキストリンの類似の調製方法も記載している。ずっ
と最近になって、Pithaと共同研究者らは、このシクロ
デキストリン誘導体の改良調製方法および種々の薬剤分
子の溶解におけるそれの効果を記載している。1986年６
月24日発行のPithaの米国特許第4,596,795号は、性ホル
モン、特にテストステロン、プロゲステロンおよびエス
トラジオールと、特定のシクロデキストリン、好ましく
はヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよび
ポリ−β−シクロデキストリンとの包接複合体を記載し
ている。この複合体は、性ホルモンを舌下または頬経路
で全身循環系に好都合に供給することができる。この供
給システムの有効性は、「シクロデキストリンの親水性
誘導体の高溶解力、ステロイドとそれらとの複合体の非
凝集性構造、並びに口組織への低い毒性および刺激性」
のためであると思われる。ポリ−γ−シクロデキストリ
ンおよびヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン
を含む他のシクロデキストリンでの成功もまた、Pitha
の特許に記載されている。同一および関連の研究に関す
るPithaら、J.Pharm.Sci.,74（９）、987−990（1985年
９月）も参照のこと。Pithaらは、J.Pharm.Sci.の論文
において、テストステロン−ヒドロキシプロピル−β−
シクロデキストリン複合体を含有する錠剤の貯蔵安定性
およびシクロデキストリン自体に毒性がないこと、並び
に溶解性を改善する上でのシクロデキストリン誘導体お
よびそれらと薬剤との複合体の非晶性質の重要性を記載
している。
DまたはHPCD）およびβ−シクロデキストリンへのプロ
ピレンオキシドの付加によるそれの調製方法は、20年近
く前のGrameraらの米国特許第3,459,731号に記載されて
いる。Grameraらは、エチレンオキシドとβ−シクロデ
キストリンとの反応によるヒドロキシエチル−β−シク
ロデキストリンの類似の調製方法も記載している。ずっ
と最近になって、Pithaと共同研究者らは、このシクロ
デキストリン誘導体の改良調製方法および種々の薬剤分
子の溶解におけるそれの効果を記載している。1986年６
月24日発行のPithaの米国特許第4,596,795号は、性ホル
モン、特にテストステロン、プロゲステロンおよびエス
トラジオールと、特定のシクロデキストリン、好ましく
はヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリンおよび
ポリ−β−シクロデキストリンとの包接複合体を記載し
ている。この複合体は、性ホルモンを舌下または頬経路
で全身循環系に好都合に供給することができる。この供
給システムの有効性は、「シクロデキストリンの親水性
誘導体の高溶解力、ステロイドとそれらとの複合体の非
凝集性構造、並びに口組織への低い毒性および刺激性」
のためであると思われる。ポリ−γ−シクロデキストリ
ンおよびヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリン
を含む他のシクロデキストリンでの成功もまた、Pitha
の特許に記載されている。同一および関連の研究に関す
るPithaら、J.Pharm.Sci.,74（９）、987−990（1985年
９月）も参照のこと。Pithaらは、J.Pharm.Sci.の論文
において、テストステロン−ヒドロキシプロピル−β−
シクロデキストリン複合体を含有する錠剤の貯蔵安定性
およびシクロデキストリン自体に毒性がないこと、並び
に溶解性を改善する上でのシクロデキストリン誘導体お
よびそれらと薬剤との複合体の非晶性質の重要性を記載
している。
改良された最適化されたヒドロキシプロピル−β−シ
クロデキストリンの調製および精製は、Pithaら、Inter
national Journal of Pharmaceutics,29、73−82（198
6）により最近記載されている。同じ刊行物において、
前記著者らは、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキス
トリンの濃（40〜50％）水溶液中での32種の薬剤につい
ての増加された水溶解性；アセトアミノフェン、アポモ
ルフィン、ブチル化ヒドロキシトルエン、クロルタリド
ン、コレカルシフェロール、デキサメタゾン、ジクマロ
ール、ジゴキシン、ジフェニルヒダントイン、エストラ
ジオール、エストリオール、エチニルエストラジオール
−３−メチルエーテル、エチステロン、フロセミド、ヒ
ドロフルメチアザイド、インドメタシン、リン酸イプロ
ニアジド、17−メチルテストステロン、ニトログリセリ
ン、ノルエチンドロン、ウアバイン、オクスプレノロー
ル、プロゲステロン、レチナール、レチン酸（全てのト
ランスおよび塩形）、レチノール、スピロノラクトン、
スルピリド、テストステロン、およびテオフィリンの改
善された可溶化が記載されている。前者著者らは、これ
を、ヒトへの性ホルモンの経口投与に効果的であると以
前に発見したヒドロキシプロピル−β−シクロデキスト
リンに関する彼らの初期研究の拡張であると指摘した。
Pithaら、International Journal of Pharmaceutics,2
9、73−82（1986）において報告された彼らの後期研究
は、ごく最近、1988年２月23日に発行されたPithaの米
国特許第4,727,064号にも記載された。その特許は、シ
クロデキストリンと薬剤との非晶質複合体を含有する組
成物；薬剤とシクロデキストリン混合物との安定性非晶
質複合体の製造方法であって、（１）水溶性であり且つ
薬剤と包接複合体を形成することができるシクロデキス
トリン誘導体の本質的に非晶質の混合物を水に溶解し、
そして（２）水性媒質中に親油性薬剤を可溶化して溶液
を形成せしめそして可溶化された薬剤／シクロデキスト
リン複合体を形成せしめることを含んで成る方法をクレ
ームしている。この特許明細書において多数の薬剤を使
った研究が報告されているが、タンパク質または他のペ
プチドを全く包含しない。前記特許明細書は、ヒドロキ
シプロピル−β−シクロデキストリンおよびヒドロキシ
プロピル−γ−シクロデキストリン（後者はプロピレン
オキシドとγ−シクロデキストリンとの同様な縮合によ
る）を含む、種々の置換された非晶質シクロデキストリ
ンの調製を記載している。
クロデキストリンの調製および精製は、Pithaら、Inter
national Journal of Pharmaceutics,29、73−82（198
6）により最近記載されている。同じ刊行物において、
前記著者らは、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキス
トリンの濃（40〜50％）水溶液中での32種の薬剤につい
ての増加された水溶解性；アセトアミノフェン、アポモ
ルフィン、ブチル化ヒドロキシトルエン、クロルタリド
ン、コレカルシフェロール、デキサメタゾン、ジクマロ
ール、ジゴキシン、ジフェニルヒダントイン、エストラ
ジオール、エストリオール、エチニルエストラジオール
−３−メチルエーテル、エチステロン、フロセミド、ヒ
ドロフルメチアザイド、インドメタシン、リン酸イプロ
ニアジド、17−メチルテストステロン、ニトログリセリ
ン、ノルエチンドロン、ウアバイン、オクスプレノロー
ル、プロゲステロン、レチナール、レチン酸（全てのト
ランスおよび塩形）、レチノール、スピロノラクトン、
スルピリド、テストステロン、およびテオフィリンの改
善された可溶化が記載されている。前者著者らは、これ
を、ヒトへの性ホルモンの経口投与に効果的であると以
前に発見したヒドロキシプロピル−β−シクロデキスト
リンに関する彼らの初期研究の拡張であると指摘した。
Pithaら、International Journal of Pharmaceutics,2
9、73−82（1986）において報告された彼らの後期研究
は、ごく最近、1988年２月23日に発行されたPithaの米
国特許第4,727,064号にも記載された。その特許は、シ
クロデキストリンと薬剤との非晶質複合体を含有する組
成物；薬剤とシクロデキストリン混合物との安定性非晶
質複合体の製造方法であって、（１）水溶性であり且つ
薬剤と包接複合体を形成することができるシクロデキス
トリン誘導体の本質的に非晶質の混合物を水に溶解し、
そして（２）水性媒質中に親油性薬剤を可溶化して溶液
を形成せしめそして可溶化された薬剤／シクロデキスト
リン複合体を形成せしめることを含んで成る方法をクレ
ームしている。この特許明細書において多数の薬剤を使
った研究が報告されているが、タンパク質または他のペ
プチドを全く包含しない。前記特許明細書は、ヒドロキ
シプロピル−β−シクロデキストリンおよびヒドロキシ
プロピル−γ−シクロデキストリン（後者はプロピレン
オキシドとγ−シクロデキストリンとの同様な縮合によ
る）を含む、種々の置換された非晶質シクロデキストリ
ンの調製を記載している。
Uekamaら、CRC Critical Reviews in Therapeutic Dr
ug Carrier Systems,３（１）、１−40（1987）は、ヒ
ドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含む種々
のシクロデキストリンの特徴を記載している。前記著者
らは、薬剤カルモフル、ジアゼパム、ジギトキシン、フ
ルビプロフェン、インドメタシン、イソソルビドジニト
レート、フェニトイン、プレドニソロン、プロゲステロ
ンおよびテストステロンについて、15mg/mlのHPBCDの存
在下での改善された水溶解性を示すデータを与えてい
る。シクロデキストリンの代謝および毒性の考察におい
て、Uekamaらは、低−中濃度のシクロデキストリン（普
通は３−８％w/vおよびそれ以上）が溶血を引き起こす
こと、そしてメチル化シクロデキストリンが天然のシク
ロデキストリンよりも高い溶血活性を有することを指摘
している。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリ
ンは4.5mMで溶血を開始させると述べられている。前記
著者らは、多量のシクロデキストリンの非経口投与を避
けるべきであるが、「γ−シクロデキストリンとヒドロ
キシプロピル−β−シクロデキストリンは、粘膜用に使
われる液体製剤と注射剤のための薬剤可溶化に有用であ
ると思われる」と更に指摘している。タンパク質のよう
なポリペプチドとの使用については言及されていない。
ug Carrier Systems,３（１）、１−40（1987）は、ヒ
ドロキシプロピル−β−シクロデキストリンを含む種々
のシクロデキストリンの特徴を記載している。前記著者
らは、薬剤カルモフル、ジアゼパム、ジギトキシン、フ
ルビプロフェン、インドメタシン、イソソルビドジニト
レート、フェニトイン、プレドニソロン、プロゲステロ
ンおよびテストステロンについて、15mg/mlのHPBCDの存
在下での改善された水溶解性を示すデータを与えてい
る。シクロデキストリンの代謝および毒性の考察におい
て、Uekamaらは、低−中濃度のシクロデキストリン（普
通は３−８％w/vおよびそれ以上）が溶血を引き起こす
こと、そしてメチル化シクロデキストリンが天然のシク
ロデキストリンよりも高い溶血活性を有することを指摘
している。ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリ
ンは4.5mMで溶血を開始させると述べられている。前記
著者らは、多量のシクロデキストリンの非経口投与を避
けるべきであるが、「γ−シクロデキストリンとヒドロ
キシプロピル−β−シクロデキストリンは、粘膜用に使
われる液体製剤と注射剤のための薬剤可溶化に有用であ
ると思われる」と更に指摘している。タンパク質のよう
なポリペプチドとの使用については言及されていない。
1985年７月４日に国際公開番号WO 85/02767のもとに
公表されたJASSEN PHARMACEUTICA N.V.の国際特許出願P
CT/EP 84/00417は、水中で不安定であるかまたは控えめ
にのみ可溶である薬剤とヒドロキシアルキル基および所
望により追加のアルキル基を有する部分的にエーテル化
されたβ−シクロデキストリン誘導体との包接化合物を
含んで成る医薬組成物を記載している。中でも期待され
るシクロデキストリン誘導体はヒドロキシプロピル−β
−シクロデキストリンおよびヒドロキシエチル−β−シ
クロデキストリンであり、一方薬剤としては非ステロイ
ド系抗リウマチ剤、ステロイド、強心配糖体並びにベン
ゾジアゼピン、ベンズイミダゾール、ピペリジン、ピペ
ラジン、イミダゾールおよびトリアゾールの誘導体が挙
げられる。好ましい薬剤としては、エトミデート、ケト
コナゾール、ツブラゾール、イトラコナゾール、レボカ
バスチンおよびフルナリジンが挙げられる。該発明の医
薬組成物は、種々の薬剤を可溶化するためにシクロデキ
ストリン誘導体の４〜10％溶液を使った、経口、非経口
および局所製剤を包含する。10％HPECDを使ったインド
メタシン、ジギトキシン、プロゲステロン、デキサメタ
ゾン、ヒドロコルチゾンおよびジアゼパムの改善された
溶解性が示されており、そして７％HPBCD中のジアゼパ
ムの注射用製剤が特別に記載されている。使用される比
較的低いシクロデキストリン濃度が、高いシクロデキス
トリン濃度で観察される溶血作用を回避するかまたは最
小にしたいという願望を反映している。
公表されたJASSEN PHARMACEUTICA N.V.の国際特許出願P
CT/EP 84/00417は、水中で不安定であるかまたは控えめ
にのみ可溶である薬剤とヒドロキシアルキル基および所
望により追加のアルキル基を有する部分的にエーテル化
されたβ−シクロデキストリン誘導体との包接化合物を
含んで成る医薬組成物を記載している。中でも期待され
るシクロデキストリン誘導体はヒドロキシプロピル−β
−シクロデキストリンおよびヒドロキシエチル−β−シ
クロデキストリンであり、一方薬剤としては非ステロイ
ド系抗リウマチ剤、ステロイド、強心配糖体並びにベン
ゾジアゼピン、ベンズイミダゾール、ピペリジン、ピペ
ラジン、イミダゾールおよびトリアゾールの誘導体が挙
げられる。好ましい薬剤としては、エトミデート、ケト
コナゾール、ツブラゾール、イトラコナゾール、レボカ
バスチンおよびフルナリジンが挙げられる。該発明の医
薬組成物は、種々の薬剤を可溶化するためにシクロデキ
ストリン誘導体の４〜10％溶液を使った、経口、非経口
および局所製剤を包含する。10％HPECDを使ったインド
メタシン、ジギトキシン、プロゲステロン、デキサメタ
ゾン、ヒドロコルチゾンおよびジアゼパムの改善された
溶解性が示されており、そして７％HPBCD中のジアゼパ
ムの注射用製剤が特別に記載されている。使用される比
較的低いシクロデキストリン濃度が、高いシクロデキス
トリン濃度で観察される溶血作用を回避するかまたは最
小にしたいという願望を反映している。
Carpenterら、The Journal of Pediatrics,111、507
−512（1987年10月）は、重いビタミンＡ過剰症を処置
するための、水中５％溶液として調製された、２−ヒド
ロキシプロピル−β−シクロデキストリンの点滴静注液
を記載している。点滴注入中、循環しているレチニルエ
ステルが一時的に増加し、一方尿中に排出される全ビタ
ミンＡが点滴注入後増加することが認められた。５％HP
BCDの点滴静注液は、おそらくビタミンと複合体形成し
そして過剰量の幾らかを体内から除去することにより、
ビタミンの生体内レベルを減少させることがわかった。
−512（1987年10月）は、重いビタミンＡ過剰症を処置
するための、水中５％溶液として調製された、２−ヒド
ロキシプロピル−β−シクロデキストリンの点滴静注液
を記載している。点滴注入中、循環しているレチニルエ
ステルが一時的に増加し、一方尿中に排出される全ビタ
ミンＡが点滴注入後増加することが認められた。５％HP
BCDの点滴静注液は、おそらくビタミンと複合体形成し
そして過剰量の幾らかを体内から除去することにより、
ビタミンの生体内レベルを減少させることがわかった。
「水溶性β−ヒドロキシシクロデキストリン」中のエ
ストラジオールの脳特異的供給のための特定のジヒドロ
リジン←→ピリジニウム塩酸化還元系製剤が、Bodorお
よび共同研究者らにより、Estesらの“Use of a Chemic
al Redox System for Brain Enhanced Delivery of Est
radiol Decreases Prostate Weight"の箇所にBiologica
l Approaches to the Controlled Delivery of Drugs,
R.L.Juliano編、Annals of the New York Academy of S
ciences,第507巻、1987、334−336中に報告されてい
る。
ストラジオールの脳特異的供給のための特定のジヒドロ
リジン←→ピリジニウム塩酸化還元系製剤が、Bodorお
よび共同研究者らにより、Estesらの“Use of a Chemic
al Redox System for Brain Enhanced Delivery of Est
radiol Decreases Prostate Weight"の箇所にBiologica
l Approaches to the Controlled Delivery of Drugs,
R.L.Juliano編、Annals of the New York Academy of S
ciences,第507巻、1987、334−336中に報告されてい
る。
1986年10月15日にEPO公開第0197571号のもとに公表さ
れたJANSSEN PHARMACEUTICA N.V.のヨーロッパ特許出願
第86200334.0号は、C1−C6アルキル、ヒドロキシC1−C6
アルキル、カルボキシC1−C6アルキルもしくはC1−C6ア
ルキルオキシカルボニルC1−C6アルキルで置換されたγ
−シクロデキストリンまたはそれらの混合エーテルであ
るγ−シクロデキストリンを記載している。中でも名を
挙げられた特定の誘導体は、ヒドロキシプロピル−γ−
シクロデキストリンとヒドロキシエチル−γ−シクロデ
キストリンである。そのようなシクロデキストリン誘導
体と薬剤を含んで成る組成物も記載されている。対応す
る1988年８月16日のＭllerの米国特許第4,764,604号
も参照のこと。
れたJANSSEN PHARMACEUTICA N.V.のヨーロッパ特許出願
第86200334.0号は、C1−C6アルキル、ヒドロキシC1−C6
アルキル、カルボキシC1−C6アルキルもしくはC1−C6ア
ルキルオキシカルボニルC1−C6アルキルで置換されたγ
−シクロデキストリンまたはそれらの混合エーテルであ
るγ−シクロデキストリンを記載している。中でも名を
挙げられた特定の誘導体は、ヒドロキシプロピル−γ−
シクロデキストリンとヒドロキシエチル−γ−シクロデ
キストリンである。そのようなシクロデキストリン誘導
体と薬剤を含んで成る組成物も記載されている。対応す
る1988年８月16日のＭllerの米国特許第4,764,604号
も参照のこと。
更に他の誘導化されたシクロデキストリンの包接特徴
も文献中に記載されている。α−，β−およびγ−シク
ロデキストリンのグルコシルおよびマルトシル誘導体で
ある枝分れシクロデキストリン並びにそれらと薬剤との
包接複合体の研究が最近報告されている。Uekama,Topic
s in Pharmaceutical Sciences 1987、D.D.Breimerおよ
びP.Speiser編、Elsevier Science Publishers B.V.（B
iomedical Division）、181−194（1987）は、増強され
た薬剤吸収を含む、マルトシルおよびグルコシルシクロ
デキストリン誘導体の生物薬剤学的性質における効果を
記載している。その刊行物において、Uekamaは天然のシ
クロデキストリンがγ＜α＜βの順で溶血を引き起こす
と指摘している。化学的に修飾されたシクロデキストリ
ンの場合、この順序はヒドロキシエチル−β＜マルトシ
ル−β＜ヒドロキシプロピル−β＜β＜メチル−βに変
わる。
も文献中に記載されている。α−，β−およびγ−シク
ロデキストリンのグルコシルおよびマルトシル誘導体で
ある枝分れシクロデキストリン並びにそれらと薬剤との
包接複合体の研究が最近報告されている。Uekama,Topic
s in Pharmaceutical Sciences 1987、D.D.Breimerおよ
びP.Speiser編、Elsevier Science Publishers B.V.（B
iomedical Division）、181−194（1987）は、増強され
た薬剤吸収を含む、マルトシルおよびグルコシルシクロ
デキストリン誘導体の生物薬剤学的性質における効果を
記載している。その刊行物において、Uekamaは天然のシ
クロデキストリンがγ＜α＜βの順で溶血を引き起こす
と指摘している。化学的に修飾されたシクロデキストリ
ンの場合、この順序はヒドロキシエチル−β＜マルトシ
ル−β＜ヒドロキシプロピル−β＜β＜メチル−βに変
わる。
Koizumiら、Chem.Pharm.Bull.,35（８）、3413−3418
（1987）は、グルコシルシクロデキストリン、即ち６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−α−CD（G1−α−CD）、６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−β−CD（G1−β−CD）および
6A,6D−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−β−CD（2G1−β
−CD）と水難溶性薬剤との包接複合体に関して報告して
いる。
（1987）は、グルコシルシクロデキストリン、即ち６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−α−CD（G1−α−CD）、６−
Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−β−CD（G1−β−CD）および
6A,6D−ジ−Ｏ−α−Ｄ−グルコシル−β−CD（2G1−β
−CD）と水難溶性薬剤との包接複合体に関して報告して
いる。
Okadaら、Chem.Pharm.Bull.,36（６）、2176−2185
（1988）は、マルトシルシクロデキストリン、即ち６−
Ｏ−α−マルトシル−α−CD（G2−α−CD）、６−Ｏ−
α−マルトシル−β−CD（G2−β−CD）、６−Ｏ−α−
マルトシル−γ−CD（G2−γ−CD）、６−Ｏ−α−マル
トトリオシル−α−CD（G3−α−CD）、６−Ｏ−α−マ
ルトトリオシル−β−CD（G3−β−CD）および６−Ｏ−
α−マルトトリオシル−γ−CD（G3−γ−CD）と水難溶
性薬剤との包接複合体に関して報告している。
（1988）は、マルトシルシクロデキストリン、即ち６−
Ｏ−α−マルトシル−α−CD（G2−α−CD）、６−Ｏ−
α−マルトシル−β−CD（G2−β−CD）、６−Ｏ−α−
マルトシル−γ−CD（G2−γ−CD）、６−Ｏ−α−マル
トトリオシル−α−CD（G3−α−CD）、６−Ｏ−α−マ
ルトトリオシル−β−CD（G3−β−CD）および６−Ｏ−
α−マルトトリオシル−γ−CD（G3−γ−CD）と水難溶
性薬剤との包接複合体に関して報告している。
Yamamotoら、Iternational Journal of Pharmaceutic
s,49、163−171（1989）は、枝分れβ−シクロデキスト
リン、例えばグルコシル−β−シクロデキストリ、マル
トシル−β−シクロデキストリンおよびジ−マルトシル
−β−シクロデキストリンの物理化学的性質、並びにそ
れらの包接性質を記載している。前記著者らは、枝分れ
β−シクロデキストリンが水難溶性薬剤のためのより優
れた可溶化剤であり、そしてβ−シクロデキストリン自
体よりも低い溶血活性を有することを報告しており、彼
らはグルコシル−β−シクロデキストリンとマルトシル
−β−シクロデキストリンが非経口製剤において特に有
用であり得ると提案している。
s,49、163−171（1989）は、枝分れβ−シクロデキスト
リン、例えばグルコシル−β−シクロデキストリ、マル
トシル−β−シクロデキストリンおよびジ−マルトシル
−β−シクロデキストリンの物理化学的性質、並びにそ
れらの包接性質を記載している。前記著者らは、枝分れ
β−シクロデキストリンが水難溶性薬剤のためのより優
れた可溶化剤であり、そしてβ−シクロデキストリン自
体よりも低い溶血活性を有することを報告しており、彼
らはグルコシル−β−シクロデキストリンとマルトシル
−β−シクロデキストリンが非経口製剤において特に有
用であり得ると提案している。
特許文献は、下記に記載するような日本の研究者によ
り実施された枝分れシクロデキストリンに関する多数の
最近の研究を反映している。
り実施された枝分れシクロデキストリンに関する多数の
最近の研究を反映している。
1988年６月７日に公表された日本国特開昭63−135402
（TOKUYAMA SODA KK）は、マルトシル−β−シクロデキ
ストリンと、ジギトキシン、ニフェジピン、フルルビプ
ロフェン、イソソルビドニトレート、フェニトイン、プ
ロゲステロンまたはテストステロンの少なくとも１つと
から成る組成物を記載している。該組成物は、改善され
た水溶解性および減少された赤血球破壊を有し、ヒトに
安全であり、そして注射剤、点眼剤、シロップとして、
並びに局所および粘膜適用に用いることができる。
（TOKUYAMA SODA KK）は、マルトシル−β−シクロデキ
ストリンと、ジギトキシン、ニフェジピン、フルルビプ
ロフェン、イソソルビドニトレート、フェニトイン、プ
ロゲステロンまたはテストステロンの少なくとも１つと
から成る組成物を記載している。該組成物は、改善され
た水溶解性および減少された赤血球破壊を有し、ヒトに
安全であり、そして注射剤、点眼剤、シロップとして、
並びに局所および粘膜適用に用いることができる。
1987年12月７日に公表された日本国特開昭62−281855
（DAIKIN KOGYO KK）は、マルトシル−β−シクロデキ
ストリンと様々なビタミンおよびホルモン、例えばステ
ロイドホルモン、例えばプレドニソロン、ヒドロコルチ
ゾンおよびエストリオール、との安定な水溶性包接化合
物を記載している。こうしてそれらの親油性ビタミンお
よびホルモンを水溶液として使用することができる。
（DAIKIN KOGYO KK）は、マルトシル−β−シクロデキ
ストリンと様々なビタミンおよびホルモン、例えばステ
ロイドホルモン、例えばプレドニソロン、ヒドロコルチ
ゾンおよびエストリオール、との安定な水溶性包接化合
物を記載している。こうしてそれらの親油性ビタミンお
よびホルモンを水溶液として使用することができる。
1988年２月17日に公表された日本国特開昭63−036793
（NIKKEN CHEM KK）は、ジマルトシル−γ−シクロデキ
ストリンの調製および医薬におけるそれの一般用途を記
載している。
（NIKKEN CHEM KK）は、ジマルトシル−γ−シクロデキ
ストリンの調製および医薬におけるそれの一般用途を記
載している。
1987年５月18日に公表された日本国特開昭62−106901
（NIKKEN CHEM KK）は、ジグルコシル−β−シクロデキ
ストリンの調製および製薬のためのそれの一般用途を記
載している。
（NIKKEN CHEM KK）は、ジグルコシル−β−シクロデキ
ストリンの調製および製薬のためのそれの一般用途を記
載している。
1986年10月22日に公表された日本国特開昭61−236802
（NIKKE CHEM KK）は、マルトシル−γ−シクロデキス
トリンの調製および製剤と一緒のそれの一般用途を記載
している。
（NIKKE CHEM KK）は、マルトシル−γ−シクロデキス
トリンの調製および製剤と一緒のそれの一般用途を記載
している。
1986年９月１日に公表された日本国特開昭61−197602
（NIKKEN CHEM KK）は、マルトシル−β−シクロデキス
トリンの調製および医学において期待されるそれの用途
を記載している。
（NIKKEN CHEM KK）は、マルトシル−β−シクロデキス
トリンの調製および医学において期待されるそれの用途
を記載している。
1986年４月11日に公表された日本国特開昭61−070996
（NIKKEN CHEM KK）は、マルトシル−α−シクロデキス
トリンおよび製薬におけるそれの一般用途を記載してい
る。
（NIKKEN CHEM KK）は、マルトシル−α−シクロデキス
トリンおよび製薬におけるそれの一般用途を記載してい
る。
1988年２月５日に公表された日本国特開昭63−027440
（SANRAKU OCEAN）は、グルコシル化された枝分れシク
ロデキストリンと共に水不溶性または微溶性薬剤を含有
する組成物を記載している。製剤の中で言及されるのは
ステロイドホルモンである。
（SANRAKU OCEAN）は、グルコシル化された枝分れシク
ロデキストリンと共に水不溶性または微溶性薬剤を含有
する組成物を記載している。製剤の中で言及されるのは
ステロイドホルモンである。
1987年７月21日に公表された日本国特開昭62−164701
（SHOKUHIN SANGYO BIO）は、ジグルコシル−α−シク
ロデキストリンの調製および医学におけるそれの一般用
途を記載している。
（SHOKUHIN SANGYO BIO）は、ジグルコシル−α−シク
ロデキストリンの調製および医学におけるそれの一般用
途を記載している。
1987年１月９日に公表された日本国特開昭62−003795
（TOKUYAMA SODA KK）は、α−，β−およびγ−シクロ
デキストリンのグルコースおよび麦芽オリゴ糖（２−４
グルコース単位）誘導体の製造並びに製薬のための安定
剤としてのそれの用途を記載している。
（TOKUYAMA SODA KK）は、α−，β−およびγ−シクロ
デキストリンのグルコースおよび麦芽オリゴ糖（２−４
グルコース単位）誘導体の製造並びに製薬のための安定
剤としてのそれの用途を記載している。
近年、治療または診断または分析用の、ポリペプチ
ド、特にタンパク質を含む製品および潜在製品の数がも
のすごく増加している。典型的には、タンパク質または
他のペプチドは、診断もしくは分析用途における使用ま
たは注射のために水溶液において製剤化される。不運に
も、ペプチドはしばしば溶解性および／または安定性の
問題を有している。例えば、あるタンパク質は水溶性で
ない。水溶性であっても、タンパク質の分解／変性、二
量化および／または重合等により引き起こされる安定性
の問題を有するものもあり、それらのいずれもが不活性
化をもたらし得る。これは貯蔵寿命をひどく制限し、そ
してしばしば低温貯蔵要件および機械的移動における制
限を課する。
ド、特にタンパク質を含む製品および潜在製品の数がも
のすごく増加している。典型的には、タンパク質または
他のペプチドは、診断もしくは分析用途における使用ま
たは注射のために水溶液において製剤化される。不運に
も、ペプチドはしばしば溶解性および／または安定性の
問題を有している。例えば、あるタンパク質は水溶性で
ない。水溶性であっても、タンパク質の分解／変性、二
量化および／または重合等により引き起こされる安定性
の問題を有するものもあり、それらのいずれもが不活性
化をもたらし得る。これは貯蔵寿命をひどく制限し、そ
してしばしば低温貯蔵要件および機械的移動における制
限を課する。
共有結合反応を含むタンパク質／ペプチド不安定性ま
たは分解、例えば加水分解、および変性過程の原因は多
数ある。変性の場合、タンパク質のコンホメーションま
たは三次元構造が破壊され、そしてタンパク質は通常の
球状構造からほぐれる。それの天然のコンホメーション
に再生するよりもむしろ、疎水性相互作用は分子の凝集
塊化または凝集を引き起こし得、または異常なコンホメ
ーションへの再生を引き起こし得る。それらの最終結果
のいずれかが生物活性の減少または損失を課する。タン
パク質の不安定の原因の要約については、Wangら、Jour
nal of Parenteral Science and Technology,Technical
Report No.10,“Parenteral Formulations of Protein
s and Peptides:Stability and Stabilizers"、増補42
巻、第25号、1988年、pp.S3−S56を参照のこと。
たは分解、例えば加水分解、および変性過程の原因は多
数ある。変性の場合、タンパク質のコンホメーションま
たは三次元構造が破壊され、そしてタンパク質は通常の
球状構造からほぐれる。それの天然のコンホメーション
に再生するよりもむしろ、疎水性相互作用は分子の凝集
塊化または凝集を引き起こし得、または異常なコンホメ
ーションへの再生を引き起こし得る。それらの最終結果
のいずれかが生物活性の減少または損失を課する。タン
パク質の不安定の原因の要約については、Wangら、Jour
nal of Parenteral Science and Technology,Technical
Report No.10,“Parenteral Formulations of Protein
s and Peptides:Stability and Stabilizers"、増補42
巻、第25号、1988年、pp.S3−S56を参照のこと。
上記で言及したWangらの刊行物は、タンパク質および
他のペプチドの非経口製剤を安定化するための種々の賦
形剤の技術用途も要約しており、例えば、血清アルブミ
ン、アミノ酸、脂肪酸およびリン脂質、界面活性剤、金
属、ポリオール、還元剤、金属キレート化剤、ポリビニ
ルピロリドン、加水分解されたゼラチンおよび硫酸アン
モニウムの使用を包含し、凍結条件および凍結乾燥下で
の変性を防止するかまたは少なくする凍結保護剤として
使われる物質、例えば炭水化物、アルコール、ポリビニ
ルピロリドンおよびグルタミン酸の使用を包含する。特
定のタンパク質を安定化するために当業者により提案さ
れた賦形剤の例は、1984年７月３日に発行されたHayash
iらの米国特許第4,457,916号、KYOWA HAKKO KOGYO CO,L
TDのヨーロッパ特許公告第0123291号およびE.I.DUPONT
DE NEMOURS AND COMPANY'Sのヨーロッパ特許公告第0231
132号に記載されている。
他のペプチドの非経口製剤を安定化するための種々の賦
形剤の技術用途も要約しており、例えば、血清アルブミ
ン、アミノ酸、脂肪酸およびリン脂質、界面活性剤、金
属、ポリオール、還元剤、金属キレート化剤、ポリビニ
ルピロリドン、加水分解されたゼラチンおよび硫酸アン
モニウムの使用を包含し、凍結条件および凍結乾燥下で
の変性を防止するかまたは少なくする凍結保護剤として
使われる物質、例えば炭水化物、アルコール、ポリビニ
ルピロリドンおよびグルタミン酸の使用を包含する。特
定のタンパク質を安定化するために当業者により提案さ
れた賦形剤の例は、1984年７月３日に発行されたHayash
iらの米国特許第4,457,916号、KYOWA HAKKO KOGYO CO,L
TDのヨーロッパ特許公告第0123291号およびE.I.DUPONT
DE NEMOURS AND COMPANY'Sのヨーロッパ特許公告第0231
132号に記載されている。
Hayashiらの特許明細書は、非イオン性界面活性剤、
Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−キシロース、
Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸の塩、トレハロー
ス、デキストランおよびヒドロキシエチルスターチから
選択された少なくとも１種の物質並びにそれらの混合物
から選択された安定化剤を添加することにより、腫瘍壊
死因子（TNF）を安定化する方法を記載している。TNFを
含有する得られた水溶液または粉末は、活性の低下なし
に長期間貯蔵することができ、そして凍結、解凍、凍結
乾燥、熱処理等に対して安定であると述べられている。
Ｄ−グルコース、Ｄ−ガラクトース、Ｄ−キシロース、
Ｄ−グルクロン酸、Ｄ−グルクロン酸の塩、トレハロー
ス、デキストランおよびヒドロキシエチルスターチから
選択された少なくとも１種の物質並びにそれらの混合物
から選択された安定化剤を添加することにより、腫瘍壊
死因子（TNF）を安定化する方法を記載している。TNFを
含有する得られた水溶液または粉末は、活性の低下なし
に長期間貯蔵することができ、そして凍結、解凍、凍結
乾燥、熱処理等に対して安定であると述べられている。
1984年10月31日に発表されたヨーロッパ特許公報第01
23291号は、所望により血清アルブミンの添加および更
に安定性を増大せしめるための凍結乾燥を含む、インタ
ーフェロンへのアルカリ金属塩または塩化マグネシウム
の添加を伴うインターフェロンの安定化方法を記載して
いる。この特許公報は、デキストラン、コンドロイチン
硫酸、デンプン、グリコーゲン、インスリン、デキスト
リンおよびアルギン酸塩から成る群から選択された糖と
インターフェロンとを接触させることによりインターフ
ェロンを安定化する方法も記載している。
23291号は、所望により血清アルブミンの添加および更
に安定性を増大せしめるための凍結乾燥を含む、インタ
ーフェロンへのアルカリ金属塩または塩化マグネシウム
の添加を伴うインターフェロンの安定化方法を記載して
いる。この特許公報は、デキストラン、コンドロイチン
硫酸、デンプン、グリコーゲン、インスリン、デキスト
リンおよびアルギン酸塩から成る群から選択された糖と
インターフェロンとを接触させることによりインターフ
ェロンを安定化する方法も記載している。
1987年８月５日に公表されたヨーロッパ特許公告第02
31132号は、組換えインターロイキン−２（IL−２）組
成物およびそれの製造方法に関する。従来技術を論ずる
際に、このヨーロッパ公告は、それより前のヨーロッパ
特許公告第0133767号を、ヒト白血球から得ることので
きるγ−インターフェロンがアルブミンおよび／または
糖の添加により安定化され得ることを開示していると言
及している。糖としては、単糖、二糖、糖アルコールお
よびそれらの混合物、例えばグルコース、マンノース、
ガラクトース、フルクトース、スクロース、マルトー
ス、ラクトース、マンニトールおよびキシリトールを挙
げることができる。また、ヨーロッパ特許公告第023113
2号は、グリセロールを使ったタンパク質（キモトリプ
シノーゲンおよびリボヌクレアーゼ）の安定化がGekko
ら、Biochemistry 20、4677−4686（1981）により報告
されていることを認めている。ヨーロッパ特許公告第02
31132号自体は、水、組換えインターロイキン−２およ
び好ましくはポリオールを含んで成る組換えヒトIL−２
組成物に関する。適当なポリオールは、水混和性または
水溶性であると述べられており、例えば、ポリヒドロキ
シアルコール、単糖および二糖、例えばマンニトール、
グリセロール、エチレングリコール、プロピレングリコ
ール、トリメチルグリコール、グルコース、フルクトー
ス、アラビノース、マンノース、マルトースおよびスク
ロースである。ポリオールはIL−２の活性を増加させる
と述べられている。
31132号は、組換えインターロイキン−２（IL−２）組
成物およびそれの製造方法に関する。従来技術を論ずる
際に、このヨーロッパ公告は、それより前のヨーロッパ
特許公告第0133767号を、ヒト白血球から得ることので
きるγ−インターフェロンがアルブミンおよび／または
糖の添加により安定化され得ることを開示していると言
及している。糖としては、単糖、二糖、糖アルコールお
よびそれらの混合物、例えばグルコース、マンノース、
ガラクトース、フルクトース、スクロース、マルトー
ス、ラクトース、マンニトールおよびキシリトールを挙
げることができる。また、ヨーロッパ特許公告第023113
2号は、グリセロールを使ったタンパク質（キモトリプ
シノーゲンおよびリボヌクレアーゼ）の安定化がGekko
ら、Biochemistry 20、4677−4686（1981）により報告
されていることを認めている。ヨーロッパ特許公告第02
31132号自体は、水、組換えインターロイキン−２およ
び好ましくはポリオールを含んで成る組換えヒトIL−２
組成物に関する。適当なポリオールは、水混和性または
水溶性であると述べられており、例えば、ポリヒドロキ
シアルコール、単糖および二糖、例えばマンニトール、
グリセロール、エチレングリコール、プロピレングリコ
ール、トリメチルグリコール、グルコース、フルクトー
ス、アラビノース、マンノース、マルトースおよびスク
ロースである。ポリオールはIL−２の活性を増加させる
と述べられている。
上述のものにもかかわらず、当業界においてタンパク
質などのポリペプチドの可溶化および安定化のためのよ
り有効で且つ一般的に適用可能な方法および組成物に対
する明白で且つ緊急の要望が残っている。
質などのポリペプチドの可溶化および安定化のためのよ
り有効で且つ一般的に適用可能な方法および組成物に対
する明白で且つ緊急の要望が残っている。
本発明は、β−およびγ−シクロデキストリンのヒド
ロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マル
トシルおよびマルトトリオシル誘導体を用いた、ポリペ
プチド、特にタンパク質の安定化および／または可溶化
のための方法および組成物を提供する。或る観点におい
ては、本発明はポリペプチドの可溶化および／または安
定化方法であって、前記ポリペプチドを、β−およびγ
−シクロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒドロキ
シエチル、グルコシル、マルトシルおよびマルトトリオ
シル誘導体から成る群から選択されたシクロデキストリ
ンの可溶化および／または安定化有効量と組み合わせる
ことを含んで成る方法を提供する。好ましくは、前記デ
キストリンを含んで成る水溶液が使用される。別の観点
において、本発明は、ポリペプチドと、可溶化および／
または安定化有効量のβ−およびγ−シクロデキストリ
ンのヒドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシ
ル、マルトシルおよびマルトトリオシル誘導体から成る
群から選択されたシクロデキストリンとを含んで成る組
成物、特に水性組成物を提供する。更に別の観点におい
て、本発明は、ポリペプチドと安定化有効量のβ−およ
びγ−シクロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒド
ロキシエチル、グルコシル、マルトシルおよびマルトト
リオシル誘導体から成る群から選択されたシクロデキス
トリンとを含んで成る凍結乾燥組成物を提供する。好ま
しくは、上述の方法および組成物は、生物学的に有用な
タンパク質製剤の改良に向けられる。
ロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マル
トシルおよびマルトトリオシル誘導体を用いた、ポリペ
プチド、特にタンパク質の安定化および／または可溶化
のための方法および組成物を提供する。或る観点におい
ては、本発明はポリペプチドの可溶化および／または安
定化方法であって、前記ポリペプチドを、β−およびγ
−シクロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒドロキ
シエチル、グルコシル、マルトシルおよびマルトトリオ
シル誘導体から成る群から選択されたシクロデキストリ
ンの可溶化および／または安定化有効量と組み合わせる
ことを含んで成る方法を提供する。好ましくは、前記デ
キストリンを含んで成る水溶液が使用される。別の観点
において、本発明は、ポリペプチドと、可溶化および／
または安定化有効量のβ−およびγ−シクロデキストリ
ンのヒドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシ
ル、マルトシルおよびマルトトリオシル誘導体から成る
群から選択されたシクロデキストリンとを含んで成る組
成物、特に水性組成物を提供する。更に別の観点におい
て、本発明は、ポリペプチドと安定化有効量のβ−およ
びγ−シクロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒド
ロキシエチル、グルコシル、マルトシルおよびマルトト
リオシル誘導体から成る群から選択されたシクロデキス
トリンとを含んで成る凍結乾燥組成物を提供する。好ま
しくは、上述の方法および組成物は、生物学的に有用な
タンパク質製剤の改良に向けられる。
本発明の目的および利点は、下記の詳細な記載および
添付図面から明らかであろう。
添付図面から明らかであろう。
図１は、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリ
ン（HPBCD）の濃度（％w/v）を増加させていった時のイ
ンターロイキン−２（IL−２）試料についての初期光散
乱の指標としての蛍光単位のプロットである。
ン（HPBCD）の濃度（％w/v）を増加させていった時のイ
ンターロイキン−２（IL−２）試料についての初期光散
乱の指標としての蛍光単位のプロットである。
図２は、ショ糖増量剤を含むIL−２（1mg/ml）のHPBC
D製剤試料についての初期光散乱の指標としての蛍光計
単位のプロットである。
D製剤試料についての初期光散乱の指標としての蛍光計
単位のプロットである。
図３は、未製剤化IL−２に比較した時のHPBCDと共に
製剤化されたIL−２試料の超遠心の結果を表わす棒グラ
フである。
製剤化されたIL−２試料の超遠心の結果を表わす棒グラ
フである。
図４は、増加していく濃度のHPBCDを含むIL−２試料
の生物活性を表わす片対数プロットである。
の生物活性を表わす片対数プロットである。
本発明に従って使用されるポリペプチドは、生物学上
または産業上有用である任意のポリペプチドである。本
発明の生物学上有用なポリペプチドは、ヒトもしくは動
物における病気の診断、治療、緩和、処置もしくは予防
において、またはヒトもしくは動物における望ましい肉
体もしくは精神の発達および状態の増強において使用す
ることができる任意のポリペプチドである。ヒトおよび
／または脊椎動物医学または診断（生体内または生体
外）において使用されるポリペプチド、特にタンパク質
が特に着目される。産業上有用なポリペプチドは、分析
的に使用されるもの、生産に使用されるもの、または化
学工業において有用であるものである。
または産業上有用である任意のポリペプチドである。本
発明の生物学上有用なポリペプチドは、ヒトもしくは動
物における病気の診断、治療、緩和、処置もしくは予防
において、またはヒトもしくは動物における望ましい肉
体もしくは精神の発達および状態の増強において使用す
ることができる任意のポリペプチドである。ヒトおよび
／または脊椎動物医学または診断（生体内または生体
外）において使用されるポリペプチド、特にタンパク質
が特に着目される。産業上有用なポリペプチドは、分析
的に使用されるもの、生産に使用されるもの、または化
学工業において有用であるものである。
アミノ酸は、少なくとも１個のアミノ（−NH2）基と
少なくとも１個のカルボキシル（−COOH）基を有する有
機化合物である。オリゴペプチドは、アミノ基と別のア
ミノ酸のカルボキシル基とを反応させて水１分子を遊離
させ、そしてペプチド結合を形成せしめることにより形
成されるアミノ酸オリゴマーである。ポリペプチドは、
同じやり方で形成されるアミノ酸ポリマーである。一般
に、オリゴペプチドは２〜20個のペプチド結合を有し、
ポリペプチドはそれより多数のペプチド結合を有する。
タンパク質は非常に大きなポリペプチドである。本発明
のポリペプチドを構成するアミノ酸は、天然でも合成で
もよく、いずれかの非カルボニル炭素原子（例えば、ア
ミノ酸のα−COOH基から数えてα，β，γ，δまたはε
炭素）にアミノ基が結合していてもよく、エナンチオマ
ー（例えばＤ−またはＬ−）またはジアステレオマーと
して存在してもよく、保護されたカルボキシまたはアミ
ノ基を有してもよく、そして疎水性、親水性、酸性、塩
基性または中性である側鎖を有してもよい。合成ポリペ
プチドは逆向きのペプチド結合を含むことができるが、
その場合それらは少なくとも１価のジアミンと１個のジ
カルボン酸モノマーを含有しなければならない。
少なくとも１個のカルボキシル（−COOH）基を有する有
機化合物である。オリゴペプチドは、アミノ基と別のア
ミノ酸のカルボキシル基とを反応させて水１分子を遊離
させ、そしてペプチド結合を形成せしめることにより形
成されるアミノ酸オリゴマーである。ポリペプチドは、
同じやり方で形成されるアミノ酸ポリマーである。一般
に、オリゴペプチドは２〜20個のペプチド結合を有し、
ポリペプチドはそれより多数のペプチド結合を有する。
タンパク質は非常に大きなポリペプチドである。本発明
のポリペプチドを構成するアミノ酸は、天然でも合成で
もよく、いずれかの非カルボニル炭素原子（例えば、ア
ミノ酸のα−COOH基から数えてα，β，γ，δまたはε
炭素）にアミノ基が結合していてもよく、エナンチオマ
ー（例えばＤ−またはＬ−）またはジアステレオマーと
して存在してもよく、保護されたカルボキシまたはアミ
ノ基を有してもよく、そして疎水性、親水性、酸性、塩
基性または中性である側鎖を有してもよい。合成ポリペ
プチドは逆向きのペプチド結合を含むことができるが、
その場合それらは少なくとも１価のジアミンと１個のジ
カルボン酸モノマーを含有しなければならない。
本発明の方法および組成物に使用されるポリペプチド
には、非ペプチド補欠分子群、例えば炭水化物、ヘムお
よび脂肪酸が結合している分子が含まれる。該ポリペプ
チドは、生存している生物または細胞により作られる分
子、合成有機化学により作られる分子、および合成的に
改変された生物学的生成物である分子を包含する。それ
らは天然物質のものと同一のアミノ酸配列を有するか、
または部位特異的突然変異誘発のような技術により変更
された配列を有することができる。
には、非ペプチド補欠分子群、例えば炭水化物、ヘムお
よび脂肪酸が結合している分子が含まれる。該ポリペプ
チドは、生存している生物または細胞により作られる分
子、合成有機化学により作られる分子、および合成的に
改変された生物学的生成物である分子を包含する。それ
らは天然物質のものと同一のアミノ酸配列を有するか、
または部位特異的突然変異誘発のような技術により変更
された配列を有することができる。
共有結合（一次）構造に加えて、ポリペプチドは、そ
れらの生物学的機能、水溶解性、およびシクロデキスト
リンと相互作用する能力に影響を及ぼす固有のコンホメ
ーション（二次、三次および四次構造の組合せ）を有す
ることができる。ポリペプチドは多数の生物学的機能を
有することができ、それらは酵素；酵素阻害剤；抗体；
抗原；電子、酸素、金属イオンまたは小さい有機分子の
輸送体；イオノホア；抗生物質；***促進因子；ホルモ
ン；成長調節因子；神経伝達物質；細胞表面認識タンパ
ク質；細胞走化性因子；および細胞毒として働くことが
できる。それらはまた、次のもののレセプター、アゴニ
スト、アンタゴニストであってもよい：イオノホア、抗
生物質、***促進因子、ホルモン、神経伝達物質、成長
調節因子、細胞表面認識タンパク質、細胞走化性因子お
よび細胞毒。
れらの生物学的機能、水溶解性、およびシクロデキスト
リンと相互作用する能力に影響を及ぼす固有のコンホメ
ーション（二次、三次および四次構造の組合せ）を有す
ることができる。ポリペプチドは多数の生物学的機能を
有することができ、それらは酵素；酵素阻害剤；抗体；
抗原；電子、酸素、金属イオンまたは小さい有機分子の
輸送体；イオノホア；抗生物質；***促進因子；ホルモ
ン；成長調節因子；神経伝達物質；細胞表面認識タンパ
ク質；細胞走化性因子；および細胞毒として働くことが
できる。それらはまた、次のもののレセプター、アゴニ
スト、アンタゴニストであってもよい：イオノホア、抗
生物質、***促進因子、ホルモン、神経伝達物質、成長
調節因子、細胞表面認識タンパク質、細胞走化性因子お
よび細胞毒。
本発明の幾つかの好ましいポリペプチドの用途として
は、次のものが挙げられる：免疫処置（ワクチンアジュ
バントとして）、生体外診断薬（抗原もしくは抗体の非
特異的結合を少なくするためまたは溶解性／安定性を高
めるため）並びに生体内診断薬および治療薬（治療薬お
よび診断薬ポリペプチドの溶解性／安定性を高めるた
め）。それらのポリペプチドの好ましい治療標的は、
癌、例えば黒色腫、腎細胞癌、骨髄腫、白血病、乳癌、
結腸癌、リンパ腫、神経芽腫、星状細胞腫および神経膠
腫；自己免疫疾患、例えば真性糖尿病、慢性関節リウマ
チおよび多発性硬化症；免疫不全症；並びに感染症であ
る。
は、次のものが挙げられる：免疫処置（ワクチンアジュ
バントとして）、生体外診断薬（抗原もしくは抗体の非
特異的結合を少なくするためまたは溶解性／安定性を高
めるため）並びに生体内診断薬および治療薬（治療薬お
よび診断薬ポリペプチドの溶解性／安定性を高めるた
め）。それらのポリペプチドの好ましい治療標的は、
癌、例えば黒色腫、腎細胞癌、骨髄腫、白血病、乳癌、
結腸癌、リンパ腫、神経芽腫、星状細胞腫および神経膠
腫；自己免疫疾患、例えば真性糖尿病、慢性関節リウマ
チおよび多発性硬化症；免疫不全症；並びに感染症であ
る。
ポリペプチドの中で本発明により期待されるのは、療
法上有用なポリペプチド、例えば抗血清、抗毒素および
抗体である。抗血清としては、例えば、抗狂犬病、抗ベ
ニン（ブラックウイドウグモ毒液）、Ｂ型肝炎免疫グロ
ブリン、破傷風免疫グロブリン、静内免疫グロブリン、
百日咳免疫グロブリンおよび狂犬免疫グロブリンが挙げ
られる。抗毒素としては、例えば、ジフテリアおよび破
傷風のためのもの;Rh0（Ｄ）免疫グロブリン；血清成
分、例えば５％正常ヒト血清アルブミン、５％血漿タン
パク質画分、20％正常ヒト血清アルブミン、25％正常ヒ
ト血清アルブミン、25％正常ヒト血清アルブミン、第II
因子、第VII因子、第VIII因子、第IX因子、第ＸおよびX
a因子、抗トロンビンIII、トランスフェリン、ハプトグ
ロビン、フィブロネクチン、γグロブリン、プロテイン
Ｃ、プロテインＳおよびトロンビン；トキソイド、例え
ばジフテリアおよび破傷風トキソイド；弱毒化ワクチン
〔例えばコレラ、インフルエンザ、髄膜炎、ペスト菌
（Yersinia pestis）または悪疫、肺炎、ポリオ、狂犬
病、チフスおよびブドウ球菌に対するもの〕および生ワ
クチン（例えばポリオ、麻疹、風疹およびおたふくかぜ
に対するもの）；成長因子、ホルモンおよび類似の生物
活性ポリペプチド、例えばα−１−抗トリプシン、心房
性ナトリウム利尿因子（利尿薬）、カルシトニン、カル
モジュリン、コリオゴナドトロピン（αおよびβ）、コ
ロニー刺激因子、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン、
β−エンドルフィン、内皮細胞増殖補足因子、表皮増殖
因子、エリトロポイエチン、繊維芽細胞増殖因子、フィ
ブロネクチン、濾胞刺激ホルモン、顆粒球コロニー刺激
因子、成長ホルモン（ソマトトロピン）、成長ホルモン
放出因子（ソマトリベリン）、インスリン、インスリン
様成長因子（ソマトメジン）インターフェロン（典型的
にはα，β，γ）、インターロイキン（典型的には1,2,
3,4）、ルトロピン、リンホトキシン、マクロファージ
由来成長因子、マクロファージ阻止因子、マクロファー
ジ刺激因子、巨核球刺激因子、神経成長因子、膵臓エン
ドルフィン、副甲状腺ホルモン、血小板由来増殖因子、
レラキシン、セクレチン、骨成長因子、スーパーオキシ
ドジスムターゼ、胸腺ホルモン、胸腺因子、チモポイエ
チン、チロトロピン、組織プラスミノーゲン活性化因
子、形質転換増殖因子（αおよびβ）、腫瘍壊死因子、
腫瘍血管形成誘導因子、血管作動性腸ポリペプチドおよ
び傷害血管形成誘導因子；免疫抑制剤、例えばRh
0（Ｄ）ISGおよびIVGG;血栓崩壊剤、例えばウロキナー
ゼ、ストレプトキナーゼおよび組織プラスミノーゲン活
性化因子；並びに抗原、例えばツタウルシ（Rhus al
l）、毒ウルシ（Phus tox）およびブドウ球菌溶解物が
挙げられる。
法上有用なポリペプチド、例えば抗血清、抗毒素および
抗体である。抗血清としては、例えば、抗狂犬病、抗ベ
ニン（ブラックウイドウグモ毒液）、Ｂ型肝炎免疫グロ
ブリン、破傷風免疫グロブリン、静内免疫グロブリン、
百日咳免疫グロブリンおよび狂犬免疫グロブリンが挙げ
られる。抗毒素としては、例えば、ジフテリアおよび破
傷風のためのもの;Rh0（Ｄ）免疫グロブリン；血清成
分、例えば５％正常ヒト血清アルブミン、５％血漿タン
パク質画分、20％正常ヒト血清アルブミン、25％正常ヒ
ト血清アルブミン、25％正常ヒト血清アルブミン、第II
因子、第VII因子、第VIII因子、第IX因子、第ＸおよびX
a因子、抗トロンビンIII、トランスフェリン、ハプトグ
ロビン、フィブロネクチン、γグロブリン、プロテイン
Ｃ、プロテインＳおよびトロンビン；トキソイド、例え
ばジフテリアおよび破傷風トキソイド；弱毒化ワクチン
〔例えばコレラ、インフルエンザ、髄膜炎、ペスト菌
（Yersinia pestis）または悪疫、肺炎、ポリオ、狂犬
病、チフスおよびブドウ球菌に対するもの〕および生ワ
クチン（例えばポリオ、麻疹、風疹およびおたふくかぜ
に対するもの）；成長因子、ホルモンおよび類似の生物
活性ポリペプチド、例えばα−１−抗トリプシン、心房
性ナトリウム利尿因子（利尿薬）、カルシトニン、カル
モジュリン、コリオゴナドトロピン（αおよびβ）、コ
ロニー刺激因子、副腎皮質刺激ホルモン放出ホルモン、
β−エンドルフィン、内皮細胞増殖補足因子、表皮増殖
因子、エリトロポイエチン、繊維芽細胞増殖因子、フィ
ブロネクチン、濾胞刺激ホルモン、顆粒球コロニー刺激
因子、成長ホルモン（ソマトトロピン）、成長ホルモン
放出因子（ソマトリベリン）、インスリン、インスリン
様成長因子（ソマトメジン）インターフェロン（典型的
にはα，β，γ）、インターロイキン（典型的には1,2,
3,4）、ルトロピン、リンホトキシン、マクロファージ
由来成長因子、マクロファージ阻止因子、マクロファー
ジ刺激因子、巨核球刺激因子、神経成長因子、膵臓エン
ドルフィン、副甲状腺ホルモン、血小板由来増殖因子、
レラキシン、セクレチン、骨成長因子、スーパーオキシ
ドジスムターゼ、胸腺ホルモン、胸腺因子、チモポイエ
チン、チロトロピン、組織プラスミノーゲン活性化因
子、形質転換増殖因子（αおよびβ）、腫瘍壊死因子、
腫瘍血管形成誘導因子、血管作動性腸ポリペプチドおよ
び傷害血管形成誘導因子；免疫抑制剤、例えばRh
0（Ｄ）ISGおよびIVGG;血栓崩壊剤、例えばウロキナー
ゼ、ストレプトキナーゼおよび組織プラスミノーゲン活
性化因子；並びに抗原、例えばツタウルシ（Rhus al
l）、毒ウルシ（Phus tox）およびブドウ球菌溶解物が
挙げられる。
本発明により期待される別のポリペプチドは、特に獣
医学用のポリペプチドであり、ワクチン、動物成長因子
並びにウシインターフェロンおよびインターロイキン−
２を含む。代表的なワクチンとしては、ウシワクチン、
例えば炭疸菌、クロストリジウム菌（多種）、パスツレ
ラ菌、レプトスピラ・ポモナ菌（Leptospira pomon
a）、ウシの下痢、ブルセラ症、パラインフルエンザ、
３−RSウイルス、破傷風、水疱性口内炎およびブドウ球
菌に対するもの；イヌワクチン、例えばボルデテラ菌、
コロナウイルス、ジステンパー、パルボウイルス、パラ
インフルエンザおよび狂犬病に対するもの；ウマワクチ
ン、例えば炭疸、脳脊髄炎、インフルエンザ、破傷風、
狂犬病および連鎖球菌腺疫に対するワクチン；ネコワク
チン、例えば白血病、肺炎−クラミジアおよび狂犬病に
対するもの；ヒツジワクチン、例えば炭疸、気腫疸、ブ
ルータング、陽性毒血症、破傷風およびビブリオ症に対
するもの；並びにブタワクチン、例えば炭疸、陽性毒血
症、赤痢、丹毒、レプトスピラ症、パルボウイルス、偽
性狂犬病、破傷風およびロタウイルスに対するものが挙
げられる。
医学用のポリペプチドであり、ワクチン、動物成長因子
並びにウシインターフェロンおよびインターロイキン−
２を含む。代表的なワクチンとしては、ウシワクチン、
例えば炭疸菌、クロストリジウム菌（多種）、パスツレ
ラ菌、レプトスピラ・ポモナ菌（Leptospira pomon
a）、ウシの下痢、ブルセラ症、パラインフルエンザ、
３−RSウイルス、破傷風、水疱性口内炎およびブドウ球
菌に対するもの；イヌワクチン、例えばボルデテラ菌、
コロナウイルス、ジステンパー、パルボウイルス、パラ
インフルエンザおよび狂犬病に対するもの；ウマワクチ
ン、例えば炭疸、脳脊髄炎、インフルエンザ、破傷風、
狂犬病および連鎖球菌腺疫に対するワクチン；ネコワク
チン、例えば白血病、肺炎−クラミジアおよび狂犬病に
対するもの；ヒツジワクチン、例えば炭疸、気腫疸、ブ
ルータング、陽性毒血症、破傷風およびビブリオ症に対
するもの；並びにブタワクチン、例えば炭疸、陽性毒血
症、赤痢、丹毒、レプトスピラ症、パルボウイルス、偽
性狂犬病、破傷風およびロタウイルスに対するものが挙
げられる。
本発明により期待される更に別のポリペプチドは免疫
学における用途を有する。そのようなものとしては、モ
ノクローナル抗体（非接合）、二次抗体（アルカリホス
ファターゼ接合）、免疫グロブリンスクリーニングおよ
びイソタイピングキット、プロテインＡ製品およびイム
ノアッセイ試薬が挙げられる。モノクローナル抗体のう
ち、診断キット用に承認されるものは、例えばIgE、ペ
ルオキシダーゼ−抗ペルオキシダーゼ接合体、ヒト絨毛
性性腺刺激ホルモン、Ｔ細胞、フェリチン接合体、癌胎
児性抗原（CEA）、OKT−II、抗−狂犬病、ヒト成長ホル
モン、Total T4、プロラクチン、125I−IgE、UCG、甲状
腺刺激ホルモン、クラミジア、ゲンタマイシンおよび風
疹に対するものである。他の有用なモノクローナル抗体
としては、例えばヒト細胞表面抗原に対するモノクロー
ナル抗体、マウス細胞表面抗原に対するモノクローナル
抗体、補体および血液タンパク質に対するモノクローナ
ル抗体、免疫グロブリン（ヒト）に対するモノクローナ
ル抗体、神経学的抗原に対するモノクローナル抗体、腫
瘍マーカーに対するモノクローナル抗体、細胞成分に対
するモノクローナル抗体、エプスタイン−バーウイルス
抗原に対するモノクローナル抗体、ヒトリンパ球抗原
（HLA）タイプに対するモノクローナル抗体、血液学的
抗体、白血球抗体、細菌抗原に対する抗体、寄生虫抗原
に対する抗体、Ｔ−細胞リンパ栄養ウイルス（HIV−II
I）抗体および細胞骨格抗体が挙げられる。有用なポリ
クローナル抗体（非接合）としては、免疫グロブリンに
対するアフィニティー精製抗体、植物ウイルスに対する
抗体、ヒトイソ酵素に対する抗体、およびクロマトグラ
フィー精製抗体が挙げられる。有用なアルカリホスファ
ターゼ接合二次抗体は、免疫グロブリンに対するアフィ
ニティー精製抗体、植物ウイルスに対する抗体、ビオチ
ン接合抗体、フルオレセインイソチオシアネート（FIT
C）接合抗体、金接合抗体、ペルオキシダーゼ接合抗
体、ローダミン接合抗体およびヨウ素接合抗体を包含す
る。ポリペプチドイムノアッセイ試薬は、EIA級の酵
素、酵素−抗体複合体、免疫学用試薬、標準または対照
として用いられるエンザイムリンクドイムノソルベント
アッセイ（ELISA）用試薬、免疫電気泳動（IEP）アッセ
イ用試薬、標準または対照として使用されるラジオイム
ノアッセイ（RIA）用試薬、標準または対照として使用
される比濁分析用試薬、キットチューブおよびプレート
ウエル用の核抗原およびコーティング試薬を包含する。
学における用途を有する。そのようなものとしては、モ
ノクローナル抗体（非接合）、二次抗体（アルカリホス
ファターゼ接合）、免疫グロブリンスクリーニングおよ
びイソタイピングキット、プロテインＡ製品およびイム
ノアッセイ試薬が挙げられる。モノクローナル抗体のう
ち、診断キット用に承認されるものは、例えばIgE、ペ
ルオキシダーゼ−抗ペルオキシダーゼ接合体、ヒト絨毛
性性腺刺激ホルモン、Ｔ細胞、フェリチン接合体、癌胎
児性抗原（CEA）、OKT−II、抗−狂犬病、ヒト成長ホル
モン、Total T4、プロラクチン、125I−IgE、UCG、甲状
腺刺激ホルモン、クラミジア、ゲンタマイシンおよび風
疹に対するものである。他の有用なモノクローナル抗体
としては、例えばヒト細胞表面抗原に対するモノクロー
ナル抗体、マウス細胞表面抗原に対するモノクローナル
抗体、補体および血液タンパク質に対するモノクローナ
ル抗体、免疫グロブリン（ヒト）に対するモノクローナ
ル抗体、神経学的抗原に対するモノクローナル抗体、腫
瘍マーカーに対するモノクローナル抗体、細胞成分に対
するモノクローナル抗体、エプスタイン−バーウイルス
抗原に対するモノクローナル抗体、ヒトリンパ球抗原
（HLA）タイプに対するモノクローナル抗体、血液学的
抗体、白血球抗体、細菌抗原に対する抗体、寄生虫抗原
に対する抗体、Ｔ−細胞リンパ栄養ウイルス（HIV−II
I）抗体および細胞骨格抗体が挙げられる。有用なポリ
クローナル抗体（非接合）としては、免疫グロブリンに
対するアフィニティー精製抗体、植物ウイルスに対する
抗体、ヒトイソ酵素に対する抗体、およびクロマトグラ
フィー精製抗体が挙げられる。有用なアルカリホスファ
ターゼ接合二次抗体は、免疫グロブリンに対するアフィ
ニティー精製抗体、植物ウイルスに対する抗体、ビオチ
ン接合抗体、フルオレセインイソチオシアネート（FIT
C）接合抗体、金接合抗体、ペルオキシダーゼ接合抗
体、ローダミン接合抗体およびヨウ素接合抗体を包含す
る。ポリペプチドイムノアッセイ試薬は、EIA級の酵
素、酵素−抗体複合体、免疫学用試薬、標準または対照
として用いられるエンザイムリンクドイムノソルベント
アッセイ（ELISA）用試薬、免疫電気泳動（IEP）アッセ
イ用試薬、標準または対照として使用されるラジオイム
ノアッセイ（RIA）用試薬、標準または対照として使用
される比濁分析用試薬、キットチューブおよびプレート
ウエル用の核抗原およびコーティング試薬を包含する。
本発明により期待される別のポリペプチドは、細胞生
物学／生化学において、例えば無血清培養において（細
胞培養用試薬および補足物として）、糖タンパク質およ
び炭水化物研究において（エンドグルコシダーゼ、エキ
ソグリコシダーゼ、炭水化物研究用酵素、糖タンパク質
のオリゴ糖の分析用酵素）、分子量マーカーとして（例
えばゲル浸透クロマトグラフィー用の検量線作成タンパ
ク質、サブユニットタンパク質）、プロテアーゼ（血液
研究、タンパク質の配列決定、組織消化および細胞の収
得、タンパク質の完全消化並びに固定化プロテアーゼに
おいて使われる）、細胞表面認識タンパク質（アデノシ
ンおよび類似体、環状ヌクレオチド、ホスホイノシチ
ド）、ホスホリパーゼおよび生物発光アッセイ試薬とし
て、有用であるポリペプチドが挙げられる。
物学／生化学において、例えば無血清培養において（細
胞培養用試薬および補足物として）、糖タンパク質およ
び炭水化物研究において（エンドグルコシダーゼ、エキ
ソグリコシダーゼ、炭水化物研究用酵素、糖タンパク質
のオリゴ糖の分析用酵素）、分子量マーカーとして（例
えばゲル浸透クロマトグラフィー用の検量線作成タンパ
ク質、サブユニットタンパク質）、プロテアーゼ（血液
研究、タンパク質の配列決定、組織消化および細胞の収
得、タンパク質の完全消化並びに固定化プロテアーゼに
おいて使われる）、細胞表面認識タンパク質（アデノシ
ンおよび類似体、環状ヌクレオチド、ホスホイノシチ
ド）、ホスホリパーゼおよび生物発光アッセイ試薬とし
て、有用であるポリペプチドが挙げられる。
本発明における使用が期待される更に別のポリペプチ
ドは、分子生物学の分野において特に重要なポリペプチ
ドであり、様々な酵素や試薬を包含する。酵素として
は、標識用酵素、修飾用酵素、ヌクレアーゼ、ポリメラ
ーゼ、配列決定用酵素および制限酵素を挙げることがで
きる。試薬としては、阻害剤、抗生物質および様々な他
の試薬を挙げることができる。
ドは、分子生物学の分野において特に重要なポリペプチ
ドであり、様々な酵素や試薬を包含する。酵素として
は、標識用酵素、修飾用酵素、ヌクレアーゼ、ポリメラ
ーゼ、配列決定用酵素および制限酵素を挙げることがで
きる。試薬としては、阻害剤、抗生物質および様々な他
の試薬を挙げることができる。
本発明に従って使用される好ましいポリペプチドは成
長調節物質を包含する。中でも好ましい成長調節物質
は、リンパ組織および骨髄中の血球の成熟および増殖に
影響を及ぼす造血因子；一般に真核生物の細胞増殖に影
響を及ぼすサイトカイン；およびリンパ球の増殖に影響
を及ぼすリンホカインである。成長調節物質またはリン
ホカインである特定のポリペプチドは、インターロイキ
ン1,2,3および4;α，βおよびγインターフェロン；顆
粒球コロニー刺激因子（Ｇ−CSF）；顆粒球−マクロフ
ァージCSF（GM−CSF）；マクロファージCSF（ｍ−CS
F）；巨核球CSF;マルチCSFまたはIL−３（BPA,HCGF,MCG
FおよびPSFとしても知られている）；エリトロポイエチ
ン；リンホトキシン；腫瘍壊死因子（TNF、またカケク
チンとしても知られている）；αおよびβ形質転換増殖
因子（TGF）；血小板由来増殖因子（PDGF）；表皮増殖
因子（EGF）；神経成長因子（NGF）；インスリン様因子
ＩおよびII（IGF IはソマトメジンＣとも呼ばれる）；
成長ホルモン（GH、ソマトトロピンとも呼ばれる）；並
びに成長ホルモン放出因子（GHRF、ソマトリベリンとも
呼ばれる）である。Clarkら、“The Human Hematopoiet
ic Colony Stimulating Factors",Science,1229−1237
（1987年６月５日）;Taniguchi,“Regulation of Cytok
ine Expression",Ann.Rev.Imm.,６、439−464（198
8）；およびWatsonら、Molecular Biology of the Gen
e,第II巻、第４版、Benjamin/Cummings Publishing（19
87）を参照のこと。
長調節物質を包含する。中でも好ましい成長調節物質
は、リンパ組織および骨髄中の血球の成熟および増殖に
影響を及ぼす造血因子；一般に真核生物の細胞増殖に影
響を及ぼすサイトカイン；およびリンパ球の増殖に影響
を及ぼすリンホカインである。成長調節物質またはリン
ホカインである特定のポリペプチドは、インターロイキ
ン1,2,3および4;α，βおよびγインターフェロン；顆
粒球コロニー刺激因子（Ｇ−CSF）；顆粒球−マクロフ
ァージCSF（GM−CSF）；マクロファージCSF（ｍ−CS
F）；巨核球CSF;マルチCSFまたはIL−３（BPA,HCGF,MCG
FおよびPSFとしても知られている）；エリトロポイエチ
ン；リンホトキシン；腫瘍壊死因子（TNF、またカケク
チンとしても知られている）；αおよびβ形質転換増殖
因子（TGF）；血小板由来増殖因子（PDGF）；表皮増殖
因子（EGF）；神経成長因子（NGF）；インスリン様因子
ＩおよびII（IGF IはソマトメジンＣとも呼ばれる）；
成長ホルモン（GH、ソマトトロピンとも呼ばれる）；並
びに成長ホルモン放出因子（GHRF、ソマトリベリンとも
呼ばれる）である。Clarkら、“The Human Hematopoiet
ic Colony Stimulating Factors",Science,1229−1237
（1987年６月５日）;Taniguchi,“Regulation of Cytok
ine Expression",Ann.Rev.Imm.,６、439−464（198
8）；およびWatsonら、Molecular Biology of the Gen
e,第II巻、第４版、Benjamin/Cummings Publishing（19
87）を参照のこと。
本発明に使用される他の好ましいポリペプチドは融合
タンパク質である。融合タンパク質は、共有結合したタ
ンパク質またはタンパク質の部分である。別の目的を有
するタンパク質またはそれの活性断片を結合させ、両方
の性質を有する融合分子を提供することができる。一般
的に言えば、一方のタンパク質／タンパク質断片が「捜
索者（seeker）」であり、そしてもう一方が「行為者
（actor）」または「破壊者（destroyer）」である。そ
のような融合タンパク質の例は、IL−２に結合したシュ
ードモナス外毒素、IL−２に結合したジフテリア毒素、
他のタンパク質に結合した前記のいずれかの毒素、また
は前の段落に記載した好ましいタンパク質間の結合体、
またはそれらの部分である。米国特許第4,545,985;4,46
8,382;および4,675,382号を参照のこと。この文献は全
て、そのまま本明細書中に引用により組み込まれそして
参照される。
タンパク質である。融合タンパク質は、共有結合したタ
ンパク質またはタンパク質の部分である。別の目的を有
するタンパク質またはそれの活性断片を結合させ、両方
の性質を有する融合分子を提供することができる。一般
的に言えば、一方のタンパク質／タンパク質断片が「捜
索者（seeker）」であり、そしてもう一方が「行為者
（actor）」または「破壊者（destroyer）」である。そ
のような融合タンパク質の例は、IL−２に結合したシュ
ードモナス外毒素、IL−２に結合したジフテリア毒素、
他のタンパク質に結合した前記のいずれかの毒素、また
は前の段落に記載した好ましいタンパク質間の結合体、
またはそれらの部分である。米国特許第4,545,985;4,46
8,382;および4,675,382号を参照のこと。この文献は全
て、そのまま本明細書中に引用により組み込まれそして
参照される。
上述のような毒素と結合したIL−２の融合タンパク質
はIL−２レセプターを使って細胞を殺すためにデザイン
され、そして移植片拒絶を防止することにおいて用途を
見出す。他の融合タンパク質は、組み合わされるタンパ
ク質またはそれの部分に依存して、様々な利用性を有す
る。例えば、サブスタンスＰと毒素は、慢性の痛みを緩
和するのに用いることができる融合タンパク質を形成
し、一方α−メラニン細胞刺激ホルモン（MSH）とジフ
テリア毒素は、黒色腫細胞を殺すためにデザインされた
融合タンパク質を形成する。
はIL−２レセプターを使って細胞を殺すためにデザイン
され、そして移植片拒絶を防止することにおいて用途を
見出す。他の融合タンパク質は、組み合わされるタンパ
ク質またはそれの部分に依存して、様々な利用性を有す
る。例えば、サブスタンスＰと毒素は、慢性の痛みを緩
和するのに用いることができる融合タンパク質を形成
し、一方α−メラニン細胞刺激ホルモン（MSH）とジフ
テリア毒素は、黒色腫細胞を殺すためにデザインされた
融合タンパク質を形成する。
本発明に使用される更に別の好ましいポリペプチド
は、突然変異により変更されたタンパク質であるミュー
テイン（mutein）である。好ましいミューテインは、前
の段落に記載した好ましい成長調節物質および融合タン
パク質のミューテインであり、そして典型的には、対応
する未変更タンパク質と同じ目的を有する。特に好まし
いミューテインとしては、米国特許第4,752,585号およ
び第4,518,584号（これは引用によりそのまま本明細書
に組み込まれそして参照される）に記載されているIL−
２ミューテイン；並びに例えば米国特許第4,737,462号
および第4,588,585号（これは引用によりそのまま本明
細書中に組み込まれそして参照される）に記載されてい
るβ−インターフェロンのミューテインが挙げられる。
は、突然変異により変更されたタンパク質であるミュー
テイン（mutein）である。好ましいミューテインは、前
の段落に記載した好ましい成長調節物質および融合タン
パク質のミューテインであり、そして典型的には、対応
する未変更タンパク質と同じ目的を有する。特に好まし
いミューテインとしては、米国特許第4,752,585号およ
び第4,518,584号（これは引用によりそのまま本明細書
に組み込まれそして参照される）に記載されているIL−
２ミューテイン；並びに例えば米国特許第4,737,462号
および第4,588,585号（これは引用によりそのまま本明
細書中に組み込まれそして参照される）に記載されてい
るβ−インターフェロンのミューテインが挙げられる。
本発明に用いられるシクロデキストリンは、β−シク
ロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒドロキシエチ
ル、グルコシル、マルトシルおよびマルトトリオシル誘
導体並びにγ−シクロデキストリンの対応する誘導体で
ある。ヒドロキシアルキル群は、１または複数のヒドロ
キシル基、例えばヒドロキシプロピル（２−ヒドロキシ
プロピル、３−ヒドロキシプロピル）、ジヒドロキシプ
ロピル等を含むことができる。グルコシル、マルトシル
およびマルトトリオシル誘導体は、１または複数の糖残
基、例えばグルコシルまたはジグルコシル、マルトシル
またはジマルトシルを含むことができる。様々なシクロ
デキストリン誘導体の混合物、例えばマルトシル誘導体
とジマルトシル誘導体の混合物も同様に用いることがで
きる。本発明において使用される特定のシクロデキスト
リンとしては、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキス
トリン（HPCDまたはHPBCD）、ヒドロキシエチル−β−
シクロデキストリン（HEBCD）、ヒドロキシプロピル−
γ−シクロデキストリン（HPGCD）、ヒドロキシエチル
−γ−シクロデキストリン（HEGCD）、ジヒドロキシプ
ロピル−β−シクロデキストリン（2HPBCD）、グルコシ
ル−β−シクロデキストリン（G1−β−CDまたはG1BC
D）、ジグルコシル−β−シクロデキストリン（2G1−β
−CDまたは2G1BCD）、マルトシル−β−シクロデキスト
リン（G2−β−CDまたはG2BCD）、マルトシル−γ−シ
クロデキストリン（G2−γ−CDまたはG2GCD）、マルト
トリオシル−β−シクロデキストリン（G3−β−CDまた
はG3BCD）、マルトトリオシル−γ−シクロデキストリ
ン（G3−γ−CDまたはG3GCD）およびジマルトシル−β
−シクロデキストリン（2G2−β−CDまたは2G2BCD）、
並びにそれらの混合物、例えばマルトシル−β−シクロ
デキストリン／ジマルトシル−β−シクロデキストリン
が挙げられる。
ロデキストリンのヒドロキシプロピル、ヒドロキシエチ
ル、グルコシル、マルトシルおよびマルトトリオシル誘
導体並びにγ−シクロデキストリンの対応する誘導体で
ある。ヒドロキシアルキル群は、１または複数のヒドロ
キシル基、例えばヒドロキシプロピル（２−ヒドロキシ
プロピル、３−ヒドロキシプロピル）、ジヒドロキシプ
ロピル等を含むことができる。グルコシル、マルトシル
およびマルトトリオシル誘導体は、１または複数の糖残
基、例えばグルコシルまたはジグルコシル、マルトシル
またはジマルトシルを含むことができる。様々なシクロ
デキストリン誘導体の混合物、例えばマルトシル誘導体
とジマルトシル誘導体の混合物も同様に用いることがで
きる。本発明において使用される特定のシクロデキスト
リンとしては、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキス
トリン（HPCDまたはHPBCD）、ヒドロキシエチル−β−
シクロデキストリン（HEBCD）、ヒドロキシプロピル−
γ−シクロデキストリン（HPGCD）、ヒドロキシエチル
−γ−シクロデキストリン（HEGCD）、ジヒドロキシプ
ロピル−β−シクロデキストリン（2HPBCD）、グルコシ
ル−β−シクロデキストリン（G1−β−CDまたはG1BC
D）、ジグルコシル−β−シクロデキストリン（2G1−β
−CDまたは2G1BCD）、マルトシル−β−シクロデキスト
リン（G2−β−CDまたはG2BCD）、マルトシル−γ−シ
クロデキストリン（G2−γ−CDまたはG2GCD）、マルト
トリオシル−β−シクロデキストリン（G3−β−CDまた
はG3BCD）、マルトトリオシル−γ−シクロデキストリ
ン（G3−γ−CDまたはG3GCD）およびジマルトシル−β
−シクロデキストリン（2G2−β−CDまたは2G2BCD）、
並びにそれらの混合物、例えばマルトシル−β−シクロ
デキストリン／ジマルトシル−β−シクロデキストリン
が挙げられる。
本発明の方法において使用されるヒドロキシプロピル
−β−シクロデキストリンは市販されている。あるい
は、既知の方法により、特にPithaら、International J
ournal of Pharmaceutics,29、73−82（1986）の最適方
法を用いることにより、調製することができる。次のも
のはPithaらの方法を使った典型的手順である。
−β−シクロデキストリンは市販されている。あるい
は、既知の方法により、特にPithaら、International J
ournal of Pharmaceutics,29、73−82（1986）の最適方
法を用いることにより、調製することができる。次のも
のはPithaらの方法を使った典型的手順である。
31gの水酸化ナトリウムを250mlの水に溶かした。次い
で100gのβ−シクロデキストリンを添加し、そして溶媒
を温めて溶液にした。フラスコを冷却し、50mlのプロピ
レンオキシドを添加した。添加中をフラスコにドライア
イス／アセトン冷却器を取り付けた。溶液を室温に戻
し、そして72時間撹拌した。次いで濃塩酸で溶液を中和
し、水で希釈した。溶媒を減圧留去してシロップを残
し、このシロップをエタノール中に取り出した。室温で
30分間撹拌した後、生成した塩化ナトリウムを濾過によ
り除去した。濾過ケークをエタノールで洗浄し、そして
合わせたエタノール層を減圧留去した。残渣を水に溶か
し、そして酢酸セルロース（＃7,38mm,4.6ml/cm,分子量
カットオフ＝1000、Fisher Scientific）中で透析し
た。０℃で５時間後、透析チューブから溶液を取り出
し、凍結乾燥した。得られた固体をアセトン中に懸濁
し、一晩撹拌した。濾過した固体をアセトン中に再懸濁
し、24時間撹拌した。濾過により固体を収集し、200ml
の水に溶かし、そして凍結乾燥した。75gの精製ヒドロ
キシプロピル−β−シクロデキストリンが得られた。NM
Rおよび真正試料との比較により、置換度を算出した。
で100gのβ−シクロデキストリンを添加し、そして溶媒
を温めて溶液にした。フラスコを冷却し、50mlのプロピ
レンオキシドを添加した。添加中をフラスコにドライア
イス／アセトン冷却器を取り付けた。溶液を室温に戻
し、そして72時間撹拌した。次いで濃塩酸で溶液を中和
し、水で希釈した。溶媒を減圧留去してシロップを残
し、このシロップをエタノール中に取り出した。室温で
30分間撹拌した後、生成した塩化ナトリウムを濾過によ
り除去した。濾過ケークをエタノールで洗浄し、そして
合わせたエタノール層を減圧留去した。残渣を水に溶か
し、そして酢酸セルロース（＃7,38mm,4.6ml/cm,分子量
カットオフ＝1000、Fisher Scientific）中で透析し
た。０℃で５時間後、透析チューブから溶液を取り出
し、凍結乾燥した。得られた固体をアセトン中に懸濁
し、一晩撹拌した。濾過した固体をアセトン中に再懸濁
し、24時間撹拌した。濾過により固体を収集し、200ml
の水に溶かし、そして凍結乾燥した。75gの精製ヒドロ
キシプロピル−β−シクロデキストリンが得られた。NM
Rおよび真正試料との比較により、置換度を算出した。
アルカリ性水溶液中でのプロピレンオキシドとβ−シ
クロデキストリンとの縮合によるPithaらのHPBCDの調製
方法は、不運にも、特に生成物の精製において、欠点を
有する。縮合の完了後、反応混合物を塩酸で中和し、減
圧下で水を蒸発させ、そしてシロップ状残渣をエタノー
ル中に溶解し、反応の主な副生成物である塩化ナトリウ
ムを沈澱させる。濾過後、エタノールを減圧蒸発せし
め、残渣を水に溶解し、そして透析して残余の塩化ナト
リウムとプロピレンオキシドの重合生成物を除去する。
透析中、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン
の一部が膜を通過して失われる。次いで透析物を凍結乾
燥し、アセトン中で２回撹拌し、そして洗浄して残余の
重合生成物を除去する。最後に、再びヒドロキシプロピ
ル−β−シクロデキストリンを凍結乾燥する。二回目の
凍結乾燥は、アセトンで洗浄後の生成物が均質でないた
めに必要である。
クロデキストリンとの縮合によるPithaらのHPBCDの調製
方法は、不運にも、特に生成物の精製において、欠点を
有する。縮合の完了後、反応混合物を塩酸で中和し、減
圧下で水を蒸発させ、そしてシロップ状残渣をエタノー
ル中に溶解し、反応の主な副生成物である塩化ナトリウ
ムを沈澱させる。濾過後、エタノールを減圧蒸発せし
め、残渣を水に溶解し、そして透析して残余の塩化ナト
リウムとプロピレンオキシドの重合生成物を除去する。
透析中、ヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン
の一部が膜を通過して失われる。次いで透析物を凍結乾
燥し、アセトン中で２回撹拌し、そして洗浄して残余の
重合生成物を除去する。最後に、再びヒドロキシプロピ
ル−β−シクロデキストリンを凍結乾燥する。二回目の
凍結乾燥は、アセトンで洗浄後の生成物が均質でないた
めに必要である。
Pithaらの方法に伴うそれらの難点を克服するため
に、HPBCDの合成のための新規方法がフロリダ州ゲイン
スビリーのフロリダ大学のMaciej Smulkowskiにより開
発された。この新規方法は、イオン交換樹脂（H+）によ
る反応混合物からの水酸化ナトリウムの除去を伴う。結
果として、Pithaらの精製の時間のかかる幾つかの段階
を回避することができる。更に、Pithaらにより使用さ
れた水酸化ナトリウムの量（β−シクロデキストリン１
当量に対して７当量）を、シクロデキストリン１分子あ
たり２当量の水酸化ナトリウムに減らすことができ、そ
して適当なNMRおよび旋光度を有する生成物を生成する
ことができる。
に、HPBCDの合成のための新規方法がフロリダ州ゲイン
スビリーのフロリダ大学のMaciej Smulkowskiにより開
発された。この新規方法は、イオン交換樹脂（H+）によ
る反応混合物からの水酸化ナトリウムの除去を伴う。結
果として、Pithaらの精製の時間のかかる幾つかの段階
を回避することができる。更に、Pithaらにより使用さ
れた水酸化ナトリウムの量（β−シクロデキストリン１
当量に対して７当量）を、シクロデキストリン１分子あ
たり２当量の水酸化ナトリウムに減らすことができ、そ
して適当なNMRおよび旋光度を有する生成物を生成する
ことができる。
この新規方法によれば、アルカリ溶液中でまずβ−シ
クロデキストリンをプロピレンオキシドと縮合せしめ、
イオン交換カラム（Dowex 50W−X8,H+型）上で水酸化ナ
トリウムを除去し、溶出液をもとの体積の1/2まで減圧
蒸発させ、残った溶液を凍結乾燥し、生じた白色固体を
アセトンで洗浄し、再び凍結乾燥し、次いで粉砕および
篩分けにかける。この方法の可能な変更は次のものを含
む：（１）樹脂の濾過および濾過用漏斗上での洗浄を伴
う、反応フラスコ中での中和のためのイオン交換樹脂の
使用；（２）シクロデキストリンを溶解するための水酸
化カルシウム、マグネシウム、リチウムまたはカリウム
の使用；（３）イオン交換樹脂の代わりに、二酸化炭素
での反応混合物の飽和または硫酸での中和による、反応
後の水酸化物の除去；（４）更に少量の水酸化ナトリウ
ム（１〜２当量）の使用；および（５）二回目の凍結乾
燥の削除。
クロデキストリンをプロピレンオキシドと縮合せしめ、
イオン交換カラム（Dowex 50W−X8,H+型）上で水酸化ナ
トリウムを除去し、溶出液をもとの体積の1/2まで減圧
蒸発させ、残った溶液を凍結乾燥し、生じた白色固体を
アセトンで洗浄し、再び凍結乾燥し、次いで粉砕および
篩分けにかける。この方法の可能な変更は次のものを含
む：（１）樹脂の濾過および濾過用漏斗上での洗浄を伴
う、反応フラスコ中での中和のためのイオン交換樹脂の
使用；（２）シクロデキストリンを溶解するための水酸
化カルシウム、マグネシウム、リチウムまたはカリウム
の使用；（３）イオン交換樹脂の代わりに、二酸化炭素
での反応混合物の飽和または硫酸での中和による、反応
後の水酸化物の除去；（４）更に少量の水酸化ナトリウ
ム（１〜２当量）の使用；および（５）二回目の凍結乾
燥の削除。
次のものは、新規改良方法を使った典型的な手順であ
る。
る。
50gのβ−シクロデキストリンを、75mlの水中の3.53g
の水酸化ナトリウムの溶液に溶かし、そして０℃におい
て29mlのプロピレンオキシドで処理した。反応混合物を
その温度でで５時間維持し、次いで室温で42時間維持し
た。その時間の終了後、反応混合物をDowex 50W−X8カ
ラム（H+型）に通し、カラムを水で洗浄し、そして溶出
液を100mlの容量まで減圧蒸発せしめ、次いで凍結乾燥
した。生じた白色固体をアセトンで洗浄すると、Pitha
らの方法により調製されたHPCDと同じ置換度（4.7）お
よびNMRを有する51gのHPCDが得られた。旋光度もPitha
らの生成物のものと同一であった。
の水酸化ナトリウムの溶液に溶かし、そして０℃におい
て29mlのプロピレンオキシドで処理した。反応混合物を
その温度でで５時間維持し、次いで室温で42時間維持し
た。その時間の終了後、反応混合物をDowex 50W−X8カ
ラム（H+型）に通し、カラムを水で洗浄し、そして溶出
液を100mlの容量まで減圧蒸発せしめ、次いで凍結乾燥
した。生じた白色固体をアセトンで洗浄すると、Pitha
らの方法により調製されたHPCDと同じ置換度（4.7）お
よびNMRを有する51gのHPCDが得られた。旋光度もPitha
らの生成物のものと同一であった。
7.71gの水酸化ナトリウムを使った25gのβ−シクロデ
キストリンの縮合も同様な結果を与えた。
キストリンの縮合も同様な結果を与えた。
新規改良HPBCD合成における更なる改良は、最後の凍
結乾燥前の溶液の精製のために活性炭を使用することで
ある。Dowex 50イオン交換カラムからの水溶液を活性炭
で処理すると、HPBCDの損失なしに重合生成物のほとん
どが除去され、そして酢酸エチルでの１回のみの洗浄後
の濾液はすぐに最後の凍結乾燥にかける用意ができてい
た。こうして、１回のみの凍結乾燥が必要であった。凍
結乾燥の代わりに最終生成物の結晶化も、少なくとも小
スケールでは、可能である。
結乾燥前の溶液の精製のために活性炭を使用することで
ある。Dowex 50イオン交換カラムからの水溶液を活性炭
で処理すると、HPBCDの損失なしに重合生成物のほとん
どが除去され、そして酢酸エチルでの１回のみの洗浄後
の濾液はすぐに最後の凍結乾燥にかける用意ができてい
た。こうして、１回のみの凍結乾燥が必要であった。凍
結乾燥の代わりに最終生成物の結晶化も、少なくとも小
スケールでは、可能である。
この改良新規方法（活性炭を使用）からの生成物は、
もとの新規方法およびPithaらの方法の生成物よりも優
れているように見える。第一に、生成物は真白でありそ
して無色の水溶液を与えるが、初期の生成物の溶液は黄
色であった。第二に、生成物は油状でなく、これはより
高度に置換された難溶性の油状シクロデキストリンの除
去によるかもしれない。
もとの新規方法およびPithaらの方法の生成物よりも優
れているように見える。第一に、生成物は真白でありそ
して無色の水溶液を与えるが、初期の生成物の溶液は黄
色であった。第二に、生成物は油状でなく、これはより
高度に置換された難溶性の油状シクロデキストリンの除
去によるかもしれない。
HPBCDは、他の置換度、例えば５または７の置換度に
おいて調製することができる。典型的には、上記の手順
のHPBCD（ASD7）を製造するために使われる。HPBCDの異
性体混合物の質量スペクトルは、置換度７に集中する。
このスペクトルは、高速原子衝撃を使って試料を「穏や
かに」イオン化することにより得られる。生成したスペ
クトルは、異性体分布の対称性および形成された異性体
の数の広がりの両方において、以前に報告されたもの
（Californium−252プラズマ脱着により得られたもの）
と同様である。
おいて調製することができる。典型的には、上記の手順
のHPBCD（ASD7）を製造するために使われる。HPBCDの異
性体混合物の質量スペクトルは、置換度７に集中する。
このスペクトルは、高速原子衝撃を使って試料を「穏や
かに」イオン化することにより得られる。生成したスペ
クトルは、異性体分布の対称性および形成された異性体
の数の広がりの両方において、以前に報告されたもの
（Californium−252プラズマ脱着により得られたもの）
と同様である。
ヒドロキシエチル−β−シクロデキストリン（HEBC
D）は、HPBCDと同様にして、上記に詳述した改良方法を
使って、ただし上記で使ったプロピレンオキシドの代わ
りに同等量のエチレンオキシドを用いることにより、調
製することができる。
D）は、HPBCDと同様にして、上記に詳述した改良方法を
使って、ただし上記で使ったプロピレンオキシドの代わ
りに同等量のエチレンオキシドを用いることにより、調
製することができる。
２−ヒドロキシプロピル−γ−シクロデキストリ（HP
GCD）の合成も同様に、β−シクロデキストリン出発物
質の代わりにγ−シクロデキストリンを用いて、HPBCD
と同じ基本的手順を使用する。しかしながら、γ−シク
ロデキストリンはβ−シクロデキストリンの７個のグル
コース残基に比較して８個のグルコース残基を含むた
め、置換度を下げるためにプロピレンオキシドの使用量
を減らすことができる。0.077モルのγ−シクロデキス
トリンあたり0.75モルのプロピレンオキシドの使用（８
個のOH基を考慮して〜20％過剰量）が８の置換度を有す
るHPGCDを与え、一方0.56モルのプロピレンオキシド
（当量よりも〜10％少量）の使用は約７の置換度を与え
る。
GCD）の合成も同様に、β−シクロデキストリン出発物
質の代わりにγ−シクロデキストリンを用いて、HPBCD
と同じ基本的手順を使用する。しかしながら、γ−シク
ロデキストリンはβ−シクロデキストリンの７個のグル
コース残基に比較して８個のグルコース残基を含むた
め、置換度を下げるためにプロピレンオキシドの使用量
を減らすことができる。0.077モルのγ−シクロデキス
トリンあたり0.75モルのプロピレンオキシドの使用（８
個のOH基を考慮して〜20％過剰量）が８の置換度を有す
るHPGCDを与え、一方0.56モルのプロピレンオキシド
（当量よりも〜10％少量）の使用は約７の置換度を与え
る。
ヒドロキシエチル−γ−シクロデキストリン（HEGC
D）は、前の段落に記載のHPGCDと同様にして、単にプロ
ピレンオキシドの代わりに当量のエチレンオキシドを使
って、調製することができる。
D）は、前の段落に記載のHPGCDと同様にして、単にプロ
ピレンオキシドの代わりに当量のエチレンオキシドを使
って、調製することができる。
本発明に使用されるヒドロキシアルキルシクロデキス
トリンは、Pithaらにより記載された方法またはそれの
変法により調製することができる。それらの方法によっ
て得られるシクロデキストリンは、本質的に非晶質混合
物である。シクロデキストリンの非晶質性質の重要性
は、Pithaら、J.Pharm.Sci.,74（９）、987−990（1985
年９月）およびPithaの米国特許第4,727,064号において
記載されている。それらの物質の非晶質性質の利点は、
高濃度のシクロデキストリンになるほどますます著しく
なる。
トリンは、Pithaらにより記載された方法またはそれの
変法により調製することができる。それらの方法によっ
て得られるシクロデキストリンは、本質的に非晶質混合
物である。シクロデキストリンの非晶質性質の重要性
は、Pithaら、J.Pharm.Sci.,74（９）、987−990（1985
年９月）およびPithaの米国特許第4,727,064号において
記載されている。それらの物質の非晶質性質の利点は、
高濃度のシクロデキストリンになるほどますます著しく
なる。
ポリペプチドと一緒の使用のためには、不純物、即ち
酸化剤、過酸化物、プロピレンオキシドまたはシクロデ
キストリンの調製に使用した他の化学物質、を比較的含
まないシクロデキストリンを用いることが非常に望まし
い。というのは、酸化によってポリペプチドが効果的で
なくなり得るからである。好ましくは、不純物のレベル
は、100μＭ過酸化物またはそれの等価物よりも低いで
あろう。
酸化剤、過酸化物、プロピレンオキシドまたはシクロデ
キストリンの調製に使用した他の化学物質、を比較的含
まないシクロデキストリンを用いることが非常に望まし
い。というのは、酸化によってポリペプチドが効果的で
なくなり得るからである。好ましくは、不純物のレベル
は、100μＭ過酸化物またはそれの等価物よりも低いで
あろう。
本発明において使用される他のシクロデキストリン、
即ちβ−およびγ−シクロデキストリンのグルコシル、
マルトシルおよびマルトトリオシル誘導体は、親のシク
ロデキストリンに比べて非常に水溶性である枝分れシク
ロデキストリンである。それらの枝分れシクロデキスト
リンは、親のシクロデキストリンから微生物学的方法に
より製造することができる。グルコシル−β−シクロデ
キストリンは、バシラス・オーベンシス（Bacillus ohb
ensis）のシクロマルトデキストリン−グルカノトラン
スフェラーゼを用いた大スケールでのβ−シクロデキス
トリン合成の母液から得ることができる;Koizumiら、Ch
em.Pharm.Bull.,35（８）,3413−3418（1987）およびそ
の中に引用された文献を参照のこと。マルトシルおよび
マルトトリオシル−β−およびγ−シクロデキストリン
は、親のシクロデキストリンとマルトースまたはマルト
トリオースとから、シュードモナス菌（Pseudomonas）
のイソアミラーゼまたはクレブシエラ・アエロゲネス
（Klebsiella aerogenes）のプルラナーゼの逆反応によ
って調製することができ、一方グルコシル−γ−シクロ
デキストリンは、マルトシル−γ−シクロデキストリン
の酵素的加水分解によって調製することができる;Okada
ら、Chem.Pharm.Bull.,36（６）,2176−2185（1988）お
よびその中に引用された文献を参照のこと。プルラナー
ゼの存在下でマルトースとβ−シクロデキストリンとを
反応させることによるマルトシル−β−シクロデキスト
リンの調製は、1986年12月18日に公開された日本国特開
昭61−287902および1986年９月１日に公開された日本国
特開昭61−197602にも記載されている。マルトシル−β
−シクロデキストリンと様々なジマルトシル−β−シク
ロデキストリンの混合物を便利に使用することができ
る。1987年５月26日に発行されたKainumaらの米国特許
第4,668,629号も参照のこと。
即ちβ−およびγ−シクロデキストリンのグルコシル、
マルトシルおよびマルトトリオシル誘導体は、親のシク
ロデキストリンに比べて非常に水溶性である枝分れシク
ロデキストリンである。それらの枝分れシクロデキスト
リンは、親のシクロデキストリンから微生物学的方法に
より製造することができる。グルコシル−β−シクロデ
キストリンは、バシラス・オーベンシス（Bacillus ohb
ensis）のシクロマルトデキストリン−グルカノトラン
スフェラーゼを用いた大スケールでのβ−シクロデキス
トリン合成の母液から得ることができる;Koizumiら、Ch
em.Pharm.Bull.,35（８）,3413−3418（1987）およびそ
の中に引用された文献を参照のこと。マルトシルおよび
マルトトリオシル−β−およびγ−シクロデキストリン
は、親のシクロデキストリンとマルトースまたはマルト
トリオースとから、シュードモナス菌（Pseudomonas）
のイソアミラーゼまたはクレブシエラ・アエロゲネス
（Klebsiella aerogenes）のプルラナーゼの逆反応によ
って調製することができ、一方グルコシル−γ−シクロ
デキストリンは、マルトシル−γ−シクロデキストリン
の酵素的加水分解によって調製することができる;Okada
ら、Chem.Pharm.Bull.,36（６）,2176−2185（1988）お
よびその中に引用された文献を参照のこと。プルラナー
ゼの存在下でマルトースとβ−シクロデキストリンとを
反応させることによるマルトシル−β−シクロデキスト
リンの調製は、1986年12月18日に公開された日本国特開
昭61−287902および1986年９月１日に公開された日本国
特開昭61−197602にも記載されている。マルトシル−β
−シクロデキストリンと様々なジマルトシル−β−シク
ロデキストリンの混合物を便利に使用することができ
る。1987年５月26日に発行されたKainumaらの米国特許
第4,668,629号も参照のこと。
タンパク質などのポリペプチドは、他の薬剤分子に比
べて固有の溶解性および安定性問題を提出する。それら
はポリペプチドの独特の構造の反映である。タンパク質
は、例えば、単一分子中に多数の疎水性領域と親水性領
域を有する高分子量の非常に大きな分子である。更に、
タンパク質の三次元構造またはコンホメーションは、そ
れらの活性にとって非常に重要であり、そしてタンパク
質の環境により容易に有害な影響を受け、好ましくない
環境は凝集をもたらし得る。従って、それらの複雑な分
子の可溶化および安定化を達成することは困難であり、
そして可溶化／安定化を達成することができ且つ活性の
顕著な低下を伴わずにそのようなことを行うことができ
る未試行の物質の能力を容易に推定することはできな
い。しかしながら、本発明者らは、シクロデキストリン
の選択群、即ちβ−およびγ−シクロデキストリンのヒ
ドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マ
ルトシルおよびマルトトリオシル誘導体（ヒドロキシプ
ロピルおよびヒドロキシエチル誘導体は好ましくは上述
のようにして非晶形において調製される）が、上記に定
義したポリペプチド、特にタンパク質を可溶化／安定化
させることにおいて使用するのに非常に適する。次の実
施例は、本発明に従って達成することができる可溶化／
安定化結果を例示する。それらの実施例は、いかなる形
態にせよ本発明を限定するつもりはない。
べて固有の溶解性および安定性問題を提出する。それら
はポリペプチドの独特の構造の反映である。タンパク質
は、例えば、単一分子中に多数の疎水性領域と親水性領
域を有する高分子量の非常に大きな分子である。更に、
タンパク質の三次元構造またはコンホメーションは、そ
れらの活性にとって非常に重要であり、そしてタンパク
質の環境により容易に有害な影響を受け、好ましくない
環境は凝集をもたらし得る。従って、それらの複雑な分
子の可溶化および安定化を達成することは困難であり、
そして可溶化／安定化を達成することができ且つ活性の
顕著な低下を伴わずにそのようなことを行うことができ
る未試行の物質の能力を容易に推定することはできな
い。しかしながら、本発明者らは、シクロデキストリン
の選択群、即ちβ−およびγ−シクロデキストリンのヒ
ドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マ
ルトシルおよびマルトトリオシル誘導体（ヒドロキシプ
ロピルおよびヒドロキシエチル誘導体は好ましくは上述
のようにして非晶形において調製される）が、上記に定
義したポリペプチド、特にタンパク質を可溶化／安定化
させることにおいて使用するのに非常に適する。次の実
施例は、本発明に従って達成することができる可溶化／
安定化結果を例示する。それらの実施例は、いかなる形
態にせよ本発明を限定するつもりはない。
実施例１ 予備試験 本発明に包含される代表的なシクロデキストリン、即
ちヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（HPBC
D）の、インターロイキン−２（IL−２）の安定化剤と
しての使用に関する予備試験は、IL−２のHPBCD配合溶
液を凍結乾燥し、再構成時に透明溶液を生じることがで
きるかどうかを評価することにより行った。これは、ご
く少数の物質が凍結乾燥と再構成後に透明なIL−２溶液
を与えるので、IL−２製剤スクリーニングのための優れ
た最初の試験であることが判明した。
ちヒドロキシプロピル−β−シクロデキストリン（HPBC
D）の、インターロイキン−２（IL−２）の安定化剤と
しての使用に関する予備試験は、IL−２のHPBCD配合溶
液を凍結乾燥し、再構成時に透明溶液を生じることがで
きるかどうかを評価することにより行った。これは、ご
く少数の物質が凍結乾燥と再構成後に透明なIL−２溶液
を与えるので、IL−２製剤スクリーニングのための優れ
た最初の試験であることが判明した。
まず、25％および12.5％の最終濃度のHPBCDが1mg/ml
のIL−２溶液1ml中に存在するように、IL−２をHPBCDと
配合した。それらを次のようなサイクルを使ってLSL Ly
olab凍結乾燥機中で凍結乾燥した：−30℃で18時間の一
次乾燥（温度は12゜／分の速度で15℃まで上昇する）、
次いで15℃で20時間の二次乾燥。全段階50ミクロンの真
空下で実施した。凍結乾燥調製物を1mlの注射用蒸留水
（WFI）で再構成した。目視検査で、溶液は透明である
と認められた。更に、溶液の透明度を評価するための光
散乱アッセイにより分析すると、それらは61および66の
光散乱値を与えた。このアッセイは、蛍光計を使って90
度の試料から散乱する光（510nm）の量を測定すること
により光散乱値を決定する。通常、500以下の値は良好
で且つ透明な溶液を表わし、500−1000の範囲の値は限
界溶液を表わし、そして＞1000の散乱値は濁った容認で
きない溶液を表わす。
のIL−２溶液1ml中に存在するように、IL−２をHPBCDと
配合した。それらを次のようなサイクルを使ってLSL Ly
olab凍結乾燥機中で凍結乾燥した：−30℃で18時間の一
次乾燥（温度は12゜／分の速度で15℃まで上昇する）、
次いで15℃で20時間の二次乾燥。全段階50ミクロンの真
空下で実施した。凍結乾燥調製物を1mlの注射用蒸留水
（WFI）で再構成した。目視検査で、溶液は透明である
と認められた。更に、溶液の透明度を評価するための光
散乱アッセイにより分析すると、それらは61および66の
光散乱値を与えた。このアッセイは、蛍光計を使って90
度の試料から散乱する光（510nm）の量を測定すること
により光散乱値を決定する。通常、500以下の値は良好
で且つ透明な溶液を表わし、500−1000の範囲の値は限
界溶液を表わし、そして＞1000の散乱値は濁った容認で
きない溶液を表わす。
次に、再構成時に透明溶液を与えるのに必要とされる
最小HPBCDレベルを決定するために、ある範囲の濃度のH
PBCD（0.5−25％w/v）を、バイアルあたり1mlの合計容
量においてIL−２（1mg）、１または２％ショ糖および1
0mMクエン酸緩衝液（賦形剤）と配合した。それらを上
記と同様にして凍結乾燥し、そして1mlのWFIで再構成し
た。光散乱アッセイを用いて、得られた溶液の透明度を
測定した。図１における非常に低い蛍光計数値（30−6
0）により示されるように、試験した範囲に渡り全ての
試料からIL−２の透明溶液が得られた。更に、光散乱分
析に使用した試料のウエスタンブロット分析は、IL−２
をHPBCDと共に凍結乾燥しても感知できる程の二量体の
増加を全く示さなかった。
最小HPBCDレベルを決定するために、ある範囲の濃度のH
PBCD（0.5−25％w/v）を、バイアルあたり1mlの合計容
量においてIL−２（1mg）、１または２％ショ糖および1
0mMクエン酸緩衝液（賦形剤）と配合した。それらを上
記と同様にして凍結乾燥し、そして1mlのWFIで再構成し
た。光散乱アッセイを用いて、得られた溶液の透明度を
測定した。図１における非常に低い蛍光計数値（30−6
0）により示されるように、試験した範囲に渡り全ての
試料からIL−２の透明溶液が得られた。更に、光散乱分
析に使用した試料のウエスタンブロット分析は、IL−２
をHPBCDと共に凍結乾燥しても感知できる程の二量体の
増加を全く示さなかった。
実施例２ 更なる光散乱試験 全てのIL−２製剤を上記のような普通の方法で凍結乾
燥した。凍結乾燥プラッグを水で再構成し、そして次の
ようにして特徴づけた。
燥した。凍結乾燥プラッグを水で再構成し、そして次の
ようにして特徴づけた。
実施例１に詳述した実験の後、1mg/mlのIL−２製剤を
安定化するのに必要とされる賦形剤の最小レベルを決定
する試みにおいて、より低濃度のHPBCDを試験した。ま
た、より均質なプラッグを得るために試料をショ糖で増
量した。実施例１と同様にして光散乱値を得た。その結
果を図２に与える。図中の曲線１と３は、賦形剤散乱に
ついて補正していない製剤試料についての光散乱値を表
わし、一方曲線２と４は、賦形剤散乱の補正後のそれら
の値（IL−２を含まない対照製剤についての値を差し引
くことにより得られる）を示す。溶液の透明度の減少を
示す光散乱値の増加は、製剤中のHPBCDの濃度が0.2％よ
り低くなった時に認められる。分子レベルでは、これは
IL−２の１分子あたり20分子のHPBCDの最小値に換算さ
れる。下の表１を参照のこと。
安定化するのに必要とされる賦形剤の最小レベルを決定
する試みにおいて、より低濃度のHPBCDを試験した。ま
た、より均質なプラッグを得るために試料をショ糖で増
量した。実施例１と同様にして光散乱値を得た。その結
果を図２に与える。図中の曲線１と３は、賦形剤散乱に
ついて補正していない製剤試料についての光散乱値を表
わし、一方曲線２と４は、賦形剤散乱の補正後のそれら
の値（IL−２を含まない対照製剤についての値を差し引
くことにより得られる）を示す。溶液の透明度の減少を
示す光散乱値の増加は、製剤中のHPBCDの濃度が0.2％よ
り低くなった時に認められる。分子レベルでは、これは
IL−２の１分子あたり20分子のHPBCDの最小値に換算さ
れる。下の表１を参照のこと。
表 １ 特定製剤中のHPBCDとIL−２のモル比 （1,2） 製剤中のHPBCD％ HPBCDモル/IL−２モル 0.05 4.87 0.10 9.74 0.20 19.47 0.50 48.68 2.00 194.72 1.それらの値は、β−シクロデキストリンの平均置換度
が〜７であると仮定して、1540のHPBCD分子量から算出
したものである。
が〜７であると仮定して、1540のHPBCD分子量から算出
したものである。
2.IL−２濃度は製剤中1mg/mlである。
実施例３ 超遠心アッセイ 超遠心は、高分子量凝集体およびオリゴマーの存在を
検出する単純な方法である。超遠心は、70.1Ti型ロータ
ーを使ってBeckman L8−70において実施した。5mlの試
料製剤を105,000×ｇで１時間回転させた。上清の280nm
の吸光度を測定した。次いで前記吸光度を遠心前のもの
と比較した。HPBCDが配合されたIL−２の再構成試料を
このアッセイにより試験した。実施例２と同様にして試
料を調製し、その結果を図３に与える。この図からわか
るように、凍結乾燥前の未配合IL−２は、このアッセイ
による上清中にタンパク質の〜93％を含み、IL−２が溶
液中ではほとんど完全に凝集しないことを示す。0.5ま
たは2.0％のHPBCDおよび１％または２％ショ糖が配合さ
れたIL−２は、未配合のIL−２と同様にふるまった。そ
れらのデータは、HPBCD製剤を再構成するとタンパク質
が非凝集形で存在することを示している。
検出する単純な方法である。超遠心は、70.1Ti型ロータ
ーを使ってBeckman L8−70において実施した。5mlの試
料製剤を105,000×ｇで１時間回転させた。上清の280nm
の吸光度を測定した。次いで前記吸光度を遠心前のもの
と比較した。HPBCDが配合されたIL−２の再構成試料を
このアッセイにより試験した。実施例２と同様にして試
料を調製し、その結果を図３に与える。この図からわか
るように、凍結乾燥前の未配合IL−２は、このアッセイ
による上清中にタンパク質の〜93％を含み、IL−２が溶
液中ではほとんど完全に凝集しないことを示す。0.5ま
たは2.0％のHPBCDおよび１％または２％ショ糖が配合さ
れたIL−２は、未配合のIL−２と同様にふるまった。そ
れらのデータは、HPBCD製剤を再構成するとタンパク質
が非凝集形で存在することを示している。
実施例４ 生物活性アッセイ 0.05〜25.00％のHPBCDを含むIL−２製剤を実施例２に
記載のようにして凍結乾燥し、次いで再構成した。MTT
株を使ったHT−２細胞増殖アッセイにより、IL−２試料
の生物活性を測定した。このアッセイは、Gillisら（19
78）によりJournal of Immunology 120巻、2027−2032
頁において記載されたIL−２アッセイから応用したもの
である。図４からわかるように、IL−２はHPBCDと配合
した時でも完全な生物活性を保持した。
記載のようにして凍結乾燥し、次いで再構成した。MTT
株を使ったHT−２細胞増殖アッセイにより、IL−２試料
の生物活性を測定した。このアッセイは、Gillisら（19
78）によりJournal of Immunology 120巻、2027−2032
頁において記載されたIL−２アッセイから応用したもの
である。図４からわかるように、IL−２はHPBCDと配合
した時でも完全な生物活性を保持した。
ウエスタンブロットアッセイ タンパク質の純度を評価するために、上述のようにし
て種々の濃度のHPBCDと組み合わせ、凍結乾燥し、そし
て水で再構成した多数のIL−２製剤において、ウエスタ
ンブロットを行った。試験した試料は、次のようにIL−
２のHPBCD製剤を包含した:1％ショ糖を含む0.05％HPBC
D、１％ショ糖を含む0.1％HPBCD、１％ショ糖を含む0.2
％HPBCD、１％ショ糖を含む0.5％HPBCD、１％ショ糖を
含む2.0％HPBCD、１％ショ糖を含む１％β−シクロデキ
ストリン、２％ショ糖を含む0.5％HPBCD、および２％シ
ョ糖を含む2.0％HPBCD。未配合IL−２も試験した。37℃
において一週間後、HPBCDおよびβ−シクロデキストリ
ン製剤を試験した。未配合IL−２において観察されるも
のと同じ位、凍結乾燥および次なる再水和後のHPBCD製
剤においてわずかな量の二量体が存在していた。しか
し、上記に示したHPBCD製剤についての結果は、全て優
秀であるとみなされた。未修飾のβ−シクロデキストリ
ンが配合されたIL−２は、凍結乾燥プラッグの再構成後
に幾分透明な溶液（散乱数〜3000）を与え、ウエスタン
ブロットにおいてHPBCD製剤よりも暗い二量体バンドを
示した。
て種々の濃度のHPBCDと組み合わせ、凍結乾燥し、そし
て水で再構成した多数のIL−２製剤において、ウエスタ
ンブロットを行った。試験した試料は、次のようにIL−
２のHPBCD製剤を包含した:1％ショ糖を含む0.05％HPBC
D、１％ショ糖を含む0.1％HPBCD、１％ショ糖を含む0.2
％HPBCD、１％ショ糖を含む0.5％HPBCD、１％ショ糖を
含む2.0％HPBCD、１％ショ糖を含む１％β−シクロデキ
ストリン、２％ショ糖を含む0.5％HPBCD、および２％シ
ョ糖を含む2.0％HPBCD。未配合IL−２も試験した。37℃
において一週間後、HPBCDおよびβ−シクロデキストリ
ン製剤を試験した。未配合IL−２において観察されるも
のと同じ位、凍結乾燥および次なる再水和後のHPBCD製
剤においてわずかな量の二量体が存在していた。しか
し、上記に示したHPBCD製剤についての結果は、全て優
秀であるとみなされた。未修飾のβ−シクロデキストリ
ンが配合されたIL−２は、凍結乾燥プラッグの再構成後
に幾分透明な溶液（散乱数〜3000）を与え、ウエスタン
ブロットにおいてHPBCD製剤よりも暗い二量体バンドを
示した。
実施例５ 上述したような選ばれたポリペプチド〔IL−２、腫瘍
壊死因子（TNF）、マクロファージコロニー刺激因子
（ｍ−CSF）、インスリンおよびヒト成長ホルモン〕とH
PBCDとを配合し、そしてその製剤を様々な時間および温
度条件下で貯蔵した。各製剤について光散乱値（上述し
たようにして測定）および外観を記録した。その結果を
下表に示す。
壊死因子（TNF）、マクロファージコロニー刺激因子
（ｍ−CSF）、インスリンおよびヒト成長ホルモン〕とH
PBCDとを配合し、そしてその製剤を様々な時間および温
度条件下で貯蔵した。各製剤について光散乱値（上述し
たようにして測定）および外観を記録した。その結果を
下表に示す。
選択した試料の生物活性を既知の方法により測定し
た。IL−２生物活性は上記のようにして測定した。TNF
活性は、TNF感受性マウスＬ−929繊維芽細胞標的細胞系
を用いた試験管内細胞毒性アッセイを使って測定した。
このアッセイは、J.M.OstroveおよびG.E.Gifford,Proc,
Soc.Exp.Biol.Med.160:354−358（1979）並びにM.R.Ruf
fおよびG.E.Gifford,Inf.Immun.31:380−385（1981）に
おいて記載された方法から採用した。ｍ−CSFバイオア
ッセイは、NSF−60マウスレトロウイルス誘発性骨髄白
血病細胞系を使って行った。CSFアッセイについての関
連文献は、J.Ihleら、Advances in Oncology,第４巻、9
5−137頁、G.Klein編（Raven Press,NY）およびJ.C.Lee
ら、J.Immunol.128:2393−2398（1982）である。
た。IL−２生物活性は上記のようにして測定した。TNF
活性は、TNF感受性マウスＬ−929繊維芽細胞標的細胞系
を用いた試験管内細胞毒性アッセイを使って測定した。
このアッセイは、J.M.OstroveおよびG.E.Gifford,Proc,
Soc.Exp.Biol.Med.160:354−358（1979）並びにM.R.Ruf
fおよびG.E.Gifford,Inf.Immun.31:380−385（1981）に
おいて記載された方法から採用した。ｍ−CSFバイオア
ッセイは、NSF−60マウスレトロウイルス誘発性骨髄白
血病細胞系を使って行った。CSFアッセイについての関
連文献は、J.Ihleら、Advances in Oncology,第４巻、9
5−137頁、G.Klein編（Raven Press,NY）およびJ.C.Lee
ら、J.Immunol.128:2393−2398（1982）である。
HPBCD/タンパク質製剤についてのデータは、未配合の
IL−２、TNFおよびｍ−CSFの値と同等であり、このこと
はHPBCDとの配合後それらのタンパク質が十分な生物活
性を保持していることを示す。
IL−２、TNFおよびｍ−CSFの値と同等であり、このこと
はHPBCDとの配合後それらのタンパク質が十分な生物活
性を保持していることを示す。
表２に明記したように配合した選択した試料を、タン
パク質変性の指標として二量体形成についてもアッセイ
した。ごく少量での二量体の検出の細部を強化するため
にSDS−PAGEゲルを銀染色した。通常のクーマシーまた
はファーストグリーン染色は、そのような低レベルにお
ける二量体形成を通常示さない。IL−２では４℃にて12
週間後、TNFでは４℃にて10週間後、そしてヒト成長ホ
ルモンでは４℃にて７週間後、実質的な二量体形成は存
在しなかった。ｍ−CSFは、実験の開始時に示したもの
と本質的に同じ組成を４℃にて７週間後にも示した。ｍ
−CSFは、溶液中では二量体として存在し、ゆえに二量
体として泳動される。従って、それらの結果は、HPBCD
との配合後にタンパク質の性質に何ら変化がないことを
表わす。インスリンはわずかな二量体形成を示したが、
その量は非常に少量であった。
パク質変性の指標として二量体形成についてもアッセイ
した。ごく少量での二量体の検出の細部を強化するため
にSDS−PAGEゲルを銀染色した。通常のクーマシーまた
はファーストグリーン染色は、そのような低レベルにお
ける二量体形成を通常示さない。IL−２では４℃にて12
週間後、TNFでは４℃にて10週間後、そしてヒト成長ホ
ルモンでは４℃にて７週間後、実質的な二量体形成は存
在しなかった。ｍ−CSFは、実験の開始時に示したもの
と本質的に同じ組成を４℃にて７週間後にも示した。ｍ
−CSFは、溶液中では二量体として存在し、ゆえに二量
体として泳動される。従って、それらの結果は、HPBCD
との配合後にタンパク質の性質に何ら変化がないことを
表わす。インスリンはわずかな二量体形成を示したが、
その量は非常に少量であった。
実施例６ 四次微分紫外分光法（4D−UV）は、芳香族アミノ酸の
環境変化を評価することができ、こうして起こり得るコ
ンホメーション変化を表示する技術である。1mg/mlの未
配合IL−２と比較して、HPBCDと配合したIL−２につい
てタンパク質の四次微分スペクトルに全く差が認められ
なかった。HPBCD製剤は下記のものを含んだ。IL−２ HPBCD ショ糖 緩 衝 剤 1mg/ml 0.2％ 0.5％ 10mMクエン酸塩pH6.5 1mg/ml 0.5％ 0.5％ 10mMクエン酸塩pH6.5 1mg/ml 2.0％ 2.0％ 10mMクエン酸塩pH6.5 本発明に従ったタンパク質とシクロデキストリンの配
合は、出発物質として精製タンパク質を使用する別々の
作業として実施することができ、またはシクロデキスト
リンとの配合をタンパク質の精製の中に含めることもで
きる。例として、選択したペプチドIL−２と選択したシ
クロデキストリンHPBCDとの配合を下記に記載する。こ
の配合は、精製工程中に実施する。
環境変化を評価することができ、こうして起こり得るコ
ンホメーション変化を表示する技術である。1mg/mlの未
配合IL−２と比較して、HPBCDと配合したIL−２につい
てタンパク質の四次微分スペクトルに全く差が認められ
なかった。HPBCD製剤は下記のものを含んだ。IL−２ HPBCD ショ糖 緩 衝 剤 1mg/ml 0.2％ 0.5％ 10mMクエン酸塩pH6.5 1mg/ml 0.5％ 0.5％ 10mMクエン酸塩pH6.5 1mg/ml 2.0％ 2.0％ 10mMクエン酸塩pH6.5 本発明に従ったタンパク質とシクロデキストリンの配
合は、出発物質として精製タンパク質を使用する別々の
作業として実施することができ、またはシクロデキスト
リンとの配合をタンパク質の精製の中に含めることもで
きる。例として、選択したペプチドIL−２と選択したシ
クロデキストリンHPBCDとの配合を下記に記載する。こ
の配合は、精製工程中に実施する。
まず、タンパク質出発物質は、しばしばタンパク質精
製の最終段階であるゲル濾過プールの生成物中に存在す
る組換えIL−２である。この時点で、IL−２と複合体を
形成しそして溶液中でそれを安定化するのに適当な量に
おいて、濃HPBCD溶液を添加する。所望であれば、HPBCD
とIL−２の濃度を調整し、そして典型的には増量剤を添
加する。増量剤は、約0.5〜10重量％、好ましくは１〜
５重量％のレベルで溶液中に存在する。好ましい増量剤
は、水溶性であり、安定であり、そしてIL−２と反応し
ないもの、例えばショ糖、ラクトース、トレハロース、
マルトース、マンニトール、ソルビトール、デンプン、
デンプン水解物、微結晶セルロース、およびアルブミ
ン、例えばヒト血清アルブミンである。増量剤は、凍結
乾燥中タンパク質を保護し、より均質な凍結乾燥生成物
を与え、そして一回量容器中に入れた時、凍結乾燥生成
物を肉眼で容易に見えるようにする。
製の最終段階であるゲル濾過プールの生成物中に存在す
る組換えIL−２である。この時点で、IL−２と複合体を
形成しそして溶液中でそれを安定化するのに適当な量に
おいて、濃HPBCD溶液を添加する。所望であれば、HPBCD
とIL−２の濃度を調整し、そして典型的には増量剤を添
加する。増量剤は、約0.5〜10重量％、好ましくは１〜
５重量％のレベルで溶液中に存在する。好ましい増量剤
は、水溶性であり、安定であり、そしてIL−２と反応し
ないもの、例えばショ糖、ラクトース、トレハロース、
マルトース、マンニトール、ソルビトール、デンプン、
デンプン水解物、微結晶セルロース、およびアルブミ
ン、例えばヒト血清アルブミンである。増量剤は、凍結
乾燥中タンパク質を保護し、より均質な凍結乾燥生成物
を与え、そして一回量容器中に入れた時、凍結乾燥生成
物を肉眼で容易に見えるようにする。
増量剤を添加した後、一回量（即ち投薬あたり約0.01
〜2mg、好ましくは0.2〜1.0mgのIL−２を提供するであ
ろう容量）の溶液を容器中に小分けし、スロット栓で容
器に蓋をし、そして常用の凍結乾燥条件および装置を使
って、内容物を凍結乾燥する。
〜2mg、好ましくは0.2〜1.0mgのIL−２を提供するであ
ろう容量）の溶液を容器中に小分けし、スロット栓で容
器に蓋をし、そして常用の凍結乾燥条件および装置を使
って、内容物を凍結乾燥する。
凍結乾燥した無菌生成物は、（１）組換えIL−２、
（２）増量剤（例えばショ糖）、（３）HPBCDおよび
（４）混合物を再構成した時にほぼ生理的pHを提供する
であろう少量の緩衝剤、の混合物から成ることができ
る。組換えIL−２は、典型的には混合物の約0.015重量
％〜3.85重量％、より好ましくは混合物の約0.4％〜2.0
％を構成するだろう。HPBCDは、典型的には混合物の約
0.2重量％〜10重量％を構成するだろう。
（２）増量剤（例えばショ糖）、（３）HPBCDおよび
（４）混合物を再構成した時にほぼ生理的pHを提供する
であろう少量の緩衝剤、の混合物から成ることができ
る。組換えIL−２は、典型的には混合物の約0.015重量
％〜3.85重量％、より好ましくは混合物の約0.4％〜2.0
％を構成するだろう。HPBCDは、典型的には混合物の約
0.2重量％〜10重量％を構成するだろう。
凍結乾燥混合物は、常用の非経口用水性注射液、例え
ば注射用蒸留水、リンガー液、ブドウ糖注射液、ブドウ
糖および塩注射液等、または水性HPBCD溶液をバイアル
に注入することにより再構成することができる。バイア
ルに添加する注入液の量は、筋肉または皮下注射用には
典型的には１〜10ml、好ましくは１〜2mlの範囲である
が、静注用にはより多量を用いることができる。
ば注射用蒸留水、リンガー液、ブドウ糖注射液、ブドウ
糖および塩注射液等、または水性HPBCD溶液をバイアル
に注入することにより再構成することができる。バイア
ルに添加する注入液の量は、筋肉または皮下注射用には
典型的には１〜10ml、好ましくは１〜2mlの範囲である
が、静注用にはより多量を用いることができる。
再構成した製剤は、ヒトまたは他の哺乳動物へのIL−
２療法を提供するためのそれらへの非経口投与に適当で
ある。そのような療法は、様々な免疫調節性の指示、例
えばＴ細胞突然変異誘発、IFN−γの誘導、細胞性免疫
の回復または増強（例えば免疫不全状態の処置）および
細胞性抗腫瘍活性の増大に適当である。
２療法を提供するためのそれらへの非経口投与に適当で
ある。そのような療法は、様々な免疫調節性の指示、例
えばＴ細胞突然変異誘発、IFN−γの誘導、細胞性免疫
の回復または増強（例えば免疫不全状態の処置）および
細胞性抗腫瘍活性の増大に適当である。
一般的に言えば、シクロデキストリンとの配合がポリ
ペプチド精製工程の一部として起こる時、シクロデキス
トリンは、少なくとも0.01％（w/v）のシクロデキスト
リン（例えばHPBCD）、より好ましくは約0.1％（w/v）
〜約60％（w/v）のシクロデキストリン（例えばHPBCD）
を含んで成る水溶液として導入されるだろう。最も好ま
しくは、そしてポリペプチドがIL−２である時は特に、
その範囲は約0.2％（w/v）〜約60％（w/v）シクロデキ
ストリンであろう。
ペプチド精製工程の一部として起こる時、シクロデキス
トリンは、少なくとも0.01％（w/v）のシクロデキスト
リン（例えばHPBCD）、より好ましくは約0.1％（w/v）
〜約60％（w/v）のシクロデキストリン（例えばHPBCD）
を含んで成る水溶液として導入されるだろう。最も好ま
しくは、そしてポリペプチドがIL−２である時は特に、
その範囲は約0.2％（w/v）〜約60％（w/v）シクロデキ
ストリンであろう。
既に精製されたポリペプチドを本発明に従って配合し
ようとする時、ポリペプチド（典型的には凍結乾燥した
もの）は、選択した濃度の水性シクロデキストリン（例
えばHPBCD）溶液と混合することにより、簡単に溶解す
ることができる。水性シクロデキストリン溶液は、通常
少なくとも0.01％（w/v）のシクロデキストリン、例え
ばHPBCD、より好ましくは約0.1％（w/v）〜約60％（w/
v）のシクロデキストリン、例えばHPBCD、を含んで成
る。最も好ましくは、ポリペプチドがIL−２である時特
に、範囲は0.2％（w/v）〜約60％（w/v）のシクロデキ
ストリンである。使用するシクロデキストリン（例えば
HPBCD）の量は、選択される特定のポリペプチドにより
異なるであろうが、いずれの場合にせよ安定化および／
または可溶化有効量であろう。この方法で調製された製
剤は、この形態で投与することができ、または凍結乾燥
し次いで再構成することができる。凍結乾燥組成物にお
いて、シクロデキストリン対ポリペプチドの重量比は通
常約1:1〜200:1、好ましくは約2:1〜50:1であろう。
ようとする時、ポリペプチド（典型的には凍結乾燥した
もの）は、選択した濃度の水性シクロデキストリン（例
えばHPBCD）溶液と混合することにより、簡単に溶解す
ることができる。水性シクロデキストリン溶液は、通常
少なくとも0.01％（w/v）のシクロデキストリン、例え
ばHPBCD、より好ましくは約0.1％（w/v）〜約60％（w/
v）のシクロデキストリン、例えばHPBCD、を含んで成
る。最も好ましくは、ポリペプチドがIL−２である時特
に、範囲は0.2％（w/v）〜約60％（w/v）のシクロデキ
ストリンである。使用するシクロデキストリン（例えば
HPBCD）の量は、選択される特定のポリペプチドにより
異なるであろうが、いずれの場合にせよ安定化および／
または可溶化有効量であろう。この方法で調製された製
剤は、この形態で投与することができ、または凍結乾燥
し次いで再構成することができる。凍結乾燥組成物にお
いて、シクロデキストリン対ポリペプチドの重量比は通
常約1:1〜200:1、好ましくは約2:1〜50:1であろう。
上記の別法として、既に精製されたポリペプチドが液
体形（適当量の水性媒質に既に溶解した形）であっても
よく、そして選択したシクロデキストリンを十分な安定
化量において乾燥形で添加してもよい。
体形（適当量の水性媒質に既に溶解した形）であっても
よく、そして選択したシクロデキストリンを十分な安定
化量において乾燥形で添加してもよい。
本発明に従って調製した薬剤製剤は、投与のために選
択されたポリペプチドの薬理学的性質に依存して、様々
な状態を処置するのに用いることができる。
択されたポリペプチドの薬理学的性質に依存して、様々
な状態を処置するのに用いることができる。
好ましくは、本発明に従って調製した非経口用薬剤製
剤は、水性媒質中に選択したポリペプチドと可溶化およ
び／または安定化有効量の選択したシクロデキストリン
とを含んで成る。好ましくは、該製剤は、有機溶媒を実
質上含まず、無菌であり且つ発熱物質不含であり、そし
て許容される製剤方法に従って、例えばRemington's Ph
armaceutical Science、第17版、Alfonso R.Gennaro
編、Mack Publishing Company,Easton,PA（1985）、151
8−1552に記載のようにして調製される。水性無菌注射
液は、酸化防止剤、緩衝剤、抗菌剤、等浸透圧調整剤、
および非経口用製剤に許容されるような添加剤を更に含
有することができる。様々な一回量および数回量容器、
例えば密封したアンプルおよびバイアルは、当業界で周
知であるようにして用いることができる。無菌非経口製
剤の必須成分、即ち選択したポリペプチド、水および選
択したシクロデキストリンは、患者に最終的に投与され
る溶液が適当量の必須成分を含む限り、様々な形式で提
供することができる。例えば、ポリペプチド／シクロデ
キストリン／水製剤は、すぐ注射できる一回量または数
回量容器中に提供することができる。別の例として、内
容物を一緒にすると注射適当量の製剤を与えることがで
きるように考案された希釈液（水またはシクロデキスト
リン／水）とは別の容器に、ポリペプチド／シクロデキ
ストリン／水の濃縮溶液を提供することができる。別の
変形として、ポリペプチド、または好ましくはポリペプ
チド／シクロデキストリンの組合せを凍結乾燥状態で一
方の容器中に提供し、そして別の容器は、各内容物を一
緒にすると適当量の必須成分を含む製剤を与えることが
できるように考案された希釈液（もう一方の容器中のシ
クロデキストリンの量に依存して、水またはシクロデキ
ストリン／水）を含むことができる。いずれの場合にせ
よ、各容器の内容物は無菌であろう。
剤は、水性媒質中に選択したポリペプチドと可溶化およ
び／または安定化有効量の選択したシクロデキストリン
とを含んで成る。好ましくは、該製剤は、有機溶媒を実
質上含まず、無菌であり且つ発熱物質不含であり、そし
て許容される製剤方法に従って、例えばRemington's Ph
armaceutical Science、第17版、Alfonso R.Gennaro
編、Mack Publishing Company,Easton,PA（1985）、151
8−1552に記載のようにして調製される。水性無菌注射
液は、酸化防止剤、緩衝剤、抗菌剤、等浸透圧調整剤、
および非経口用製剤に許容されるような添加剤を更に含
有することができる。様々な一回量および数回量容器、
例えば密封したアンプルおよびバイアルは、当業界で周
知であるようにして用いることができる。無菌非経口製
剤の必須成分、即ち選択したポリペプチド、水および選
択したシクロデキストリンは、患者に最終的に投与され
る溶液が適当量の必須成分を含む限り、様々な形式で提
供することができる。例えば、ポリペプチド／シクロデ
キストリン／水製剤は、すぐ注射できる一回量または数
回量容器中に提供することができる。別の例として、内
容物を一緒にすると注射適当量の製剤を与えることがで
きるように考案された希釈液（水またはシクロデキスト
リン／水）とは別の容器に、ポリペプチド／シクロデキ
ストリン／水の濃縮溶液を提供することができる。別の
変形として、ポリペプチド、または好ましくはポリペプ
チド／シクロデキストリンの組合せを凍結乾燥状態で一
方の容器中に提供し、そして別の容器は、各内容物を一
緒にすると適当量の必須成分を含む製剤を与えることが
できるように考案された希釈液（もう一方の容器中のシ
クロデキストリンの量に依存して、水またはシクロデキ
ストリン／水）を含むことができる。いずれの場合にせ
よ、各容器の内容物は無菌であろう。
一般的に言えば、本明細書中に記載の非経口製剤にお
けるポリペプチドの投与についての療法的用量範囲は、
ポリペプチドの非経口投与に特有に使われるものと同じ
であろう。当然、そのような療法的用量範囲は患者の大
きさおよび種、製剤を投与する条件、使用する非経口投
与のタイプ等により異なるであろう。所望の量の活性成
分を供給するのに必要とされる一定の剤形の分量は、も
ちろん非経口製剤中のペプチドの濃度に依存するだろ
う。
けるポリペプチドの投与についての療法的用量範囲は、
ポリペプチドの非経口投与に特有に使われるものと同じ
であろう。当然、そのような療法的用量範囲は患者の大
きさおよび種、製剤を投与する条件、使用する非経口投
与のタイプ等により異なるであろう。所望の量の活性成
分を供給するのに必要とされる一定の剤形の分量は、も
ちろん非経口製剤中のペプチドの濃度に依存するだろ
う。
多くのポリペプチドは注射により投与されるが、或る
ものは経口投与され得る。それらを本発明に従って選択
したシクロデキストリンを用いて安定化し、次いで周知
の担体材料を用いて常法により錠剤、カプセル等に製剤
化することができる。上記に言及したRemington's Phar
maceutical Sciencesを参照のこと。
ものは経口投与され得る。それらを本発明に従って選択
したシクロデキストリンを用いて安定化し、次いで周知
の担体材料を用いて常法により錠剤、カプセル等に製剤
化することができる。上記に言及したRemington's Phar
maceutical Sciencesを参照のこと。
本発明に従って製剤化される生体内使用のための診断
薬は、上記に記載の治療薬と同じ方法で調製されるだろ
う。ただし、一回量剤形が、選択したポリペプチドの治
療有効量ではなく診断有効量を含有するだろう。他方、
生体外診断は必ずしも医薬上許容される必要はない。従
って、生体外診断成分を、例えば、生体内適用には禁じ
られる抗菌剤または抗真菌剤の添加により、外因性汚染
から保護することができる。生体内診断薬中の他の成
分、例えば色素原は、医薬製剤中に存在する物質の必要
条件を満たす必要はない。
薬は、上記に記載の治療薬と同じ方法で調製されるだろ
う。ただし、一回量剤形が、選択したポリペプチドの治
療有効量ではなく診断有効量を含有するだろう。他方、
生体外診断は必ずしも医薬上許容される必要はない。従
って、生体外診断成分を、例えば、生体内適用には禁じ
られる抗菌剤または抗真菌剤の添加により、外因性汚染
から保護することができる。生体内診断薬中の他の成
分、例えば色素原は、医薬製剤中に存在する物質の必要
条件を満たす必要はない。
本発明を様々な好ましい態様によって記載してきた
が、本発明の精神から逸脱することなく様々な改良、置
換、削除および変更を行い得ることは当業者にとって明
白であろう。従って、本発明の範囲は、次の請求の範囲
によってのみ限定される。
が、本発明の精神から逸脱することなく様々な改良、置
換、削除および変更を行い得ることは当業者にとって明
白であろう。従って、本発明の範囲は、次の請求の範囲
によってのみ限定される。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｋ 38/44 Ａ６１Ｋ 37/26 38/46 37/66 47/40 37/24 (72)発明者 スターン，ウォーレン アメリカ合衆国，フロリダ 32601，ゲ インスビル，ノースウエスト ナインス プレイス 4921 (72)発明者 ウォン，グレゴリー ジェイ. アメリカ合衆国，イリノイ 60045，レ イク フォーレスト，イースト ウッド ランド 281 (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A61K 38/00 A61K 9/08 A61K 38/21 A61K 38/22 A61K 38/28 A61K 38/44 A61K 38/46 A61K 47/40 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ)
Claims (37)
- 【請求項１】ポリペプチドの可溶化および／または安定
化方法であって、β−およびγ−シクロデキストリンの
ヒドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、
マルトシルおよびマルトトリオシル誘導体から成る群か
ら選択されたシクロデキストリンの可溶化および／また
は安定化有効量と前記ポリペプチドとを組合わせること
を含む方法。 - 【請求項２】前記シクロデキストリンが水溶液中に存在
する、請求項１に記載の方法。 - 【請求項３】前記水溶液が少なくとも0.1％（w/v）のシ
クロデキストリンを含む、請求項２に記載の方法。 - 【請求項４】前記水溶液が0.2％（w/v）〜60％（w/v）
のシクロデキストリンを含む、請求項３に記載の方法。 - 【請求項５】前記シクロデキストリンがヒドロキシプロ
ピル−β−シクロデキストリンである、請求項１〜４の
いずれか１項に記載の方法。 - 【請求項６】前記ポリペプチドがタンパク質である、請
求項２に記載の方法。 - 【請求項７】前記タンパク質がスーパーオキシドジスム
ターゼ、インスリン、組織ラスミノーゲン活性化因子、
エリトロポイエチン及びインターフェロンから成る群か
ら選ばれる、請求項６に記載の方法。 - 【請求項８】前記インターフェロンがβ−インターフェ
ロンである、請求項７に記載の方法。 - 【請求項９】前記タンパク質が成長ホルモン、表皮増殖
因子、及びインターロイキンから成る群から選ばれる、
請求項６に記載の方法。 - 【請求項１０】前記インターロイキンがIL−２である、
請求項９に記載の方法。 - 【請求項１１】前記タンパク質が腫瘍壊死因子、心房性
ナトリウム利尿因子、及びコロニー刺激因子から成る群
から選ばれる、請求項６に記載の方法。 - 【請求項１２】前記ポリペプチド及びシクロデキストリ
ンを含有する水溶液を凍結乾燥することを含む、請求項
２に記載の方法。 - 【請求項１３】β−およびγ−シクロデキストリンのヒ
ドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マ
ルトシルおよびマルトトリオシル誘導体から成る群から
選択されたシクロデキストリンの可溶化および／または
安定化有効量並びにポリペプチドを含んで成る医薬組成
物。 - 【請求項１４】請求項13に記載の水性の医薬組成物。
- 【請求項１５】少なくとも0.1％（w/v）のシクロデキス
トリンを含む、請求項14に記載の医薬組成物。 - 【請求項１６】0.2％（w/v）〜60％（w/v）のシクロデ
キストリンを含む、請求項15に記載の医薬組成物。 - 【請求項１７】前記シクロデキストリンがヒドロキシプ
ロピル−β−シクロデキストリンである、請求項14〜16
のいずれか１項に記載の医薬組成物。 - 【請求項１８】前記ポリペプチドがタンパク質である、
請求項14に記載の医薬組成物。 - 【請求項１９】前記タンパク質がスーパーオキシドジス
ムターゼ、インスリン、組織プラスミノーゲン活性化因
子、エリトロポイエチン及びインターフェロンから成る
群から選ばれる、請求項18に記載の医薬組成物。 - 【請求項２０】前記インターフェロンがβ−インターフ
ェロンである、請求項19に記載の医薬組成物。 - 【請求項２１】前記タンパク質が成長ホルモン、表皮増
殖因子、及びインターロイキンから成る群から選ばれ
る、請求項18に記載の医薬組成物。 - 【請求項２２】前記インターロイキンがIL−２である、
請求項21に記載の医薬組成物。 - 【請求項２３】前記タンパク質が腫瘍壊死因子、心房性
ナトリウム利尿因子、及びコロニー刺激因子から成る群
から選ばれる、請求項18に記載の医薬組成物。 - 【請求項２４】ヒトまたは脊椎動物投与のためのもので
ある、請求項18に記載の医薬組成物。 - 【請求項２５】試験管内用途のためのものである、請求
項18に記載の医薬組成物。 - 【請求項２６】β−およびγ−シクロデキストリンのヒ
ドロキシプロピル、ヒドロキシエチル、グルコシル、マ
ルトシルおよびマルトトリオシル誘導体から成る群から
選択されたシクロデキストリンの安定化有効量並びにポ
リペプチドを含んで成る凍結乾燥された医薬組成物。 - 【請求項２７】1:1〜200:1のシクロデキストリン対ポリ
ペプチド重量比をもつ、請求項26に記載の医薬組成物。 - 【請求項２８】2:1〜50:1のシクロデキストリン対ポリ
ペプチド重量比をもつ、請求項27に記載の医薬組成物。 - 【請求項２９】前記シクロデキストリンがヒドロキシ−
β−シクロデキストリンである、請求項26〜28のいずれ
か１項に記載の医薬組成物。 - 【請求項３０】前記ポリペプチドがタンパク質である、
請求項26に記載の医薬組成物。 - 【請求項３１】前記タンパク質がスーパーオキシドジス
ムターゼ、インスリン、組織プラスミノーゲン活性化因
子、エリトロポイエチン、及びインターフェロンから成
る群から選ばれる、請求項30に記載の医薬組成物。 - 【請求項３２】前記インターフェロンがβ−インターフ
ェロンである、請求項31に記載の医薬組成物。 - 【請求項３３】前記タンパク質が成長ホルモン、表皮増
殖因子、及びインターロイキンから成る群から選ばれ
る、請求項30に記載の医薬組成物。 - 【請求項３４】前記インターロイキンがIL−２である、
請求項33に記載の医薬組成物。 - 【請求項３５】前記タンパク質が腫瘍壊死因子、心房性
ナトリウム利尿因子、及びコロニー刺激因子から成る群
から選ばれる、請求項30に記載の医薬組成物。 - 【請求項３６】ヒトまたは脊椎動物投与のためのもので
ある、請求項26に記載の医薬組成物。 - 【請求項３７】試験管内用途のためのものである、請求
項26に記載の医薬組成物。
Applications Claiming Priority (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US25372088A | 1988-10-05 | 1988-10-05 | |
| US253,720 | 1988-10-05 | ||
| US07/373,928 US5997856A (en) | 1988-10-05 | 1989-06-29 | Method and compositions for solubilization and stabilization of polypeptides, especially proteins |
| US373,928 | 1989-06-29 | ||
| PCT/US1989/004099 WO1990003784A1 (en) | 1988-10-05 | 1989-09-19 | Cyclodextrin-peptide complexes |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11500404A JPH11500404A (ja) | 1999-01-12 |
| JP3120987B2 true JP3120987B2 (ja) | 2000-12-25 |
Family
ID=26943506
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP01510443A Expired - Lifetime JP3120987B2 (ja) | 1988-10-05 | 1989-09-19 | ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および安定化のための方法および組成物 |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US5997856A (ja) |
| EP (1) | EP0437478B1 (ja) |
| JP (1) | JP3120987B2 (ja) |
| AU (1) | AU620926B2 (ja) |
| CA (1) | CA1328634C (ja) |
| DK (1) | DK175923B1 (ja) |
| ES (1) | ES2020357A6 (ja) |
| IE (1) | IE63649B1 (ja) |
| WO (1) | WO1990003784A1 (ja) |
Families Citing this family (118)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5474980A (en) * | 1984-10-04 | 1995-12-12 | Monsanto Company | Prolonged release of biologically active somatotropins |
| US5411951A (en) * | 1984-10-04 | 1995-05-02 | Monsanto Company | Prolonged release of biologically active somatotropin |
| GB9001987D0 (en) * | 1990-01-29 | 1990-03-28 | Janssen Pharmaceutica Nv | Improved cyclodextrin based erythropietin formulation |
| US5120720A (en) * | 1990-09-20 | 1992-06-09 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services | Preparation of lipophile:hydroxypropylcyclodextrin complexes by a method using co-solubilizers |
| US5472954A (en) * | 1992-07-14 | 1995-12-05 | Cyclops H.F. | Cyclodextrin complexation |
| DE4239877C1 (de) * | 1992-11-27 | 1994-03-17 | Boehringer Ingelheim Int | Stabilisierte Superoxid-Dismutase (SOD)-Zusammensetzung |
| CA2114163C (en) * | 1993-01-29 | 2002-04-30 | Nobuo Nishiki | Method for stabilizing antigenicity of myeloperoxidase |
| US5298410A (en) * | 1993-02-25 | 1994-03-29 | Sterling Winthrop Inc. | Lyophilized formulation of polyethylene oxide modified proteins with increased shelf-life |
| TW402506B (en) * | 1993-06-24 | 2000-08-21 | Astra Ab | Therapeutic preparation for inhalation |
| US6794357B1 (en) | 1993-06-24 | 2004-09-21 | Astrazeneca Ab | Compositions for inhalation |
| US6632456B1 (en) | 1993-06-24 | 2003-10-14 | Astrazeneca Ab | Compositions for inhalation |
| US20010003739A1 (en) * | 1993-06-24 | 2001-06-14 | Astrazeneca Ab | Systemic administration of a therapeutic preparation |
| US5830853A (en) | 1994-06-23 | 1998-11-03 | Astra Aktiebolag | Systemic administration of a therapeutic preparation |
| US6165976A (en) * | 1994-06-23 | 2000-12-26 | Astra Aktiebolag | Therapeutic preparation for inhalation |
| US6524557B1 (en) | 1994-12-22 | 2003-02-25 | Astrazeneca Ab | Aerosol formulations of peptides and proteins |
| EE9700138A (et) | 1994-12-22 | 1997-12-15 | Astra Aktiebolag | Aerosoolravimvormid |
| ATE238043T1 (de) * | 1994-12-22 | 2003-05-15 | Astrazeneca Ab | Parathyroidhormon pth enthaltende therapeutische zubereitung zur inhalation |
| JPH11503764A (ja) * | 1996-01-22 | 1999-03-30 | ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア | レプトスピラ外膜タンパク質 |
| DE69733664T3 (de) | 1996-04-19 | 2011-04-14 | Grifols Inc. (n.d. Ges.d.Staates Delaware), Los Angeles | Verfahren zur INaktivierung von Viren und Lyophilisierung von Blutproteinen |
| US5916883A (en) * | 1996-11-01 | 1999-06-29 | Poly-Med, Inc. | Acylated cyclodextrin derivatives |
| US6132712A (en) * | 1996-12-11 | 2000-10-17 | A. Glenn Braswell | Superoxide dismutase stabilized with fragments of casein and pharmaceutical compositions incorporating same |
| IL122732A0 (en) * | 1997-01-15 | 1998-08-16 | Akzo Nobel Nv | Liquid gonadotropin-containing formulation its preparation and a device containing same |
| FR2762615B1 (fr) * | 1997-04-28 | 1999-07-16 | Inst Nat Sante Rech Med | Nouveau site interne d'entree des ribosomes et vecteur le contenant |
| US6537537B2 (en) * | 1997-06-12 | 2003-03-25 | The Procter & Gamble Company | Water-in-silicone emulsion cosmetic compositions |
| JP4087938B2 (ja) * | 1998-02-04 | 2008-05-21 | 高砂香料工業株式会社 | ヒノキチオ−ル類の分岐サイクロデキストリン包接化合物からなる抗菌剤およびそれを含有する組成物 |
| US6048736A (en) * | 1998-04-29 | 2000-04-11 | Kosak; Kenneth M. | Cyclodextrin polymers for carrying and releasing drugs |
| WO2000009150A2 (en) * | 1998-08-17 | 2000-02-24 | Prendergast Patrick T | Cytokine and cytokine receptor, agonist, antagonist and/or antibody combination for therapeutic use |
| BR9905867A (pt) * | 1998-11-06 | 2001-01-23 | Bio Sidus S A | Linhagem celular produtora de eritropoietina humana recombinante e a eritropoietina humana recombinante produzida por esta célula |
| DE19856443A1 (de) * | 1998-12-08 | 2000-06-21 | Centeon Pharma Gmbh | Stabilisiertes Antithrombin III-Präparat |
| EP1141313A2 (en) | 1998-12-31 | 2001-10-10 | Chiron Corporation | Improved expression of hiv polypeptides and production of virus-like particles |
| CA2368655A1 (en) | 1999-04-08 | 2000-10-19 | Gregory M. Glenn | Dry formulation for transcutaneous immunization |
| US6514729B1 (en) | 1999-05-12 | 2003-02-04 | Xencor, Inc. | Recombinant interferon-beta muteins |
| US6733985B1 (en) * | 1999-05-19 | 2004-05-11 | International Technidyne Corporation | Preparation of stable liquid and dried synthetic prothrombin time reagents |
| CN1175901C (zh) * | 1999-12-06 | 2004-11-17 | 天津华立达生物工程有限公司 | 一种稳定的干扰素水溶液 |
| GB9930882D0 (en) * | 1999-12-30 | 2000-02-23 | Nps Allelix Corp | GLP-2 formulations |
| US8632785B2 (en) * | 2000-02-08 | 2014-01-21 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin pharmaceutical composition containing a gelatin fragment |
| US20030118598A1 (en) * | 2000-02-08 | 2003-06-26 | Allergan, Inc. | Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| JP2003522154A (ja) * | 2000-02-08 | 2003-07-22 | アラーガン、インコーポレイテッド | ボツリヌス毒素医薬組成物 |
| US20060269575A1 (en) * | 2000-02-08 | 2006-11-30 | Allergan, Inc. | Botulinum toxin pharmaceutical compositions formulated with recombinant albumin |
| US7780967B2 (en) * | 2000-02-08 | 2010-08-24 | Allergan, Inc. | Reduced toxicity Clostridial toxin pharmaceutical compositions |
| US6740639B1 (en) * | 2000-03-29 | 2004-05-25 | Council Of Scientific & Industrial Research | Inclusion complees of a high potent opioid peptide, pharmaceutical compositions and method of treatment |
| US6740495B1 (en) * | 2000-04-03 | 2004-05-25 | Rigel Pharmaceuticals, Inc. | Ubiquitin ligase assay |
| US6979551B2 (en) * | 2000-04-03 | 2005-12-27 | Rigel Pharmaceuticals, Inc. | Assays for identifying ubiquitin agents and for identifying agents that modify the activity of ubiquitin agents |
| US20040029831A1 (en) * | 2000-05-31 | 2004-02-12 | Kava Pharmaceuticals, Inc. | Extracts of kava-kava |
| US6303157B1 (en) | 2000-05-31 | 2001-10-16 | Kava Pharmaceuticals, Inc. | Extracts of kava-kava |
| US6468989B1 (en) | 2000-07-13 | 2002-10-22 | Dow Pharmaceutical Sciences | Gel compositions containing metronidazole |
| US6749845B2 (en) * | 2001-02-15 | 2004-06-15 | Aeropharm Technology, Inc. | Modulated release particles for lung delivery |
| IL141647A0 (en) * | 2001-02-26 | 2002-03-10 | Yeda Res & Dev | Synthetic human peptides and pharmaceutical compositions comprising them for the treatment of systemic lupus erythematosus |
| MXPA03011793A (es) * | 2001-06-29 | 2004-04-02 | Maxygen Holdings Ltd | Formulaciones de interferon. |
| DE10149030A1 (de) * | 2001-10-05 | 2003-04-10 | Viscum Ag | Stabile galenische gefriergetrocknete Arzneimittelzubereitung von rViscumin |
| BRPI0105509B8 (pt) * | 2001-11-05 | 2021-05-25 | Univ Minas Gerais | formulações do peptídeo angiotensina-(1-7) usando as ciclodextrinas, lipossomas e o polímero plga |
| US6881726B2 (en) | 2001-12-24 | 2005-04-19 | Dow Pharmaceutical Sciences | Aqueous compositions containing metronidazole |
| US20040057969A1 (en) * | 2002-09-20 | 2004-03-25 | Smith Mark L | Compositions containing stabilized hepatitis antigen and methods of their use |
| US20040175359A1 (en) * | 2002-11-12 | 2004-09-09 | Desjarlais John Rudolph | Novel proteins with antiviral, antineoplastic, and/or immunomodulatory activity |
| US20030124139A1 (en) * | 2002-11-20 | 2003-07-03 | Irina Esikova | Compositions and methods for stabilizing biological molecules upon lyophilization |
| AU2004206844A1 (en) * | 2003-01-14 | 2004-08-05 | Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. | Parenteral formulations of a peptide for the treatment of systemic lupus erythematosus |
| ES2606464T3 (es) * | 2003-01-14 | 2017-03-24 | Yeda Research And Development Co. | Formulaciones parenterales de péptidos para el tratamiento del lupus eritematoso sistémico |
| RS52218B (en) * | 2003-12-11 | 2012-10-31 | Ares Trading S.A. | STABILIZED FLUID INTERFERON FORMULATIONS |
| AR047658A1 (es) | 2004-02-03 | 2006-02-01 | Cargill Inc | Concentrado de proteinas y corriente acuosa con carbohidratos hidrosolubles |
| US7772182B2 (en) * | 2004-08-05 | 2010-08-10 | Alza Corporation | Stable suspension formulations of erythropoietin receptor agonists |
| WO2006040839A1 (ja) * | 2004-10-15 | 2006-04-20 | Advanced Medicine Research Institute | 眼疾患処置用点眼剤及びキット |
| NL1027737C2 (nl) * | 2004-12-14 | 2006-06-16 | Teststrip B V | Chromatografische analyse-inrichting en test kit. |
| EP1676602A1 (en) * | 2005-01-04 | 2006-07-05 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Continuous administration of epitopes derived from protein present in atherosclerotic plaque for the treatment of atherosclerosis |
| WO2006125076A2 (en) | 2005-05-18 | 2006-11-23 | Trinity Biosystems, Inc. | Methods and compositions for immunizing against chlamydia infection |
| EP1739092A1 (en) | 2005-06-28 | 2007-01-03 | I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale | Peptidic antagonists of class III semaphorins/neuropilins complexes |
| CA2617908C (en) * | 2005-08-03 | 2012-10-09 | Cargill, Incorporated | Corn protein concentrates |
| EP2258441A3 (en) | 2005-09-02 | 2011-09-21 | Intercell USA, Inc. | Devices for transcutaneous delivery of vaccines and transdermal delivery of drugs |
| ES2380803T3 (es) * | 2005-11-14 | 2012-05-18 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Dominio no histona MACROH2A como inhibidor de la actividad PARP-1 y uso del mismo |
| JP2007177149A (ja) * | 2005-12-28 | 2007-07-12 | Shield Lab:Kk | チオクト酸又はジヒドロリポ酸と分岐鎖シクロデキストリンとの包接化合物 |
| SI2049142T2 (sl) * | 2006-07-26 | 2016-04-29 | Sandoz Ag | Formulacije kaspofungina |
| KR100785913B1 (ko) * | 2006-11-29 | 2007-12-17 | 한국과학기술연구원 | 경화된 β-사이클로덱스트린 중합체 분말과 그의 제조방법 |
| CN101605530A (zh) * | 2006-12-12 | 2009-12-16 | 安米林药品公司 | 药物制剂及其制备方法 |
| CA2685596A1 (en) | 2007-05-02 | 2008-11-13 | Ambrx, Inc. | Modified interferon beta polypeptides and their uses |
| CN105147611A (zh) * | 2007-07-26 | 2015-12-16 | 圣诺菲·帕斯图尔有限公司 | 抗原佐剂组合物及其方法 |
| AU2008340058A1 (en) * | 2007-12-20 | 2009-07-02 | Merck Serono S.A. | PEG-interferon-beta formulations |
| AR061947A1 (es) * | 2008-01-08 | 2008-08-10 | Oscar Belluscio Daniel | Metodo para la obtencion del complejo gonadotrofina corionica humana (gch) / ciclodextrina administrable por via oral, producto obtenido con dicho metodo y uso clinico-terapeutico del complejo gonadotrofina corionica humana (gch) / ciclodextrina |
| CA2727937A1 (en) | 2008-06-20 | 2009-12-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Immunoglobulins with reduced aggregation |
| CN102281903B (zh) * | 2008-11-17 | 2013-11-13 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 降低大分子在生理条件下聚集的方法和配方 |
| US20110256592A1 (en) * | 2008-12-12 | 2011-10-20 | Eurogentec S.A | Use of cyclodextrins to improve the specificity, sensitivity and yield of nucleic acid amplification reactions |
| AU2010210033A1 (en) * | 2009-02-05 | 2011-08-04 | Digna Biotech, S.L. | Pharmaceutical compositions comprising TGF- beta1 inhibitor peptides |
| EP2248823A1 (en) | 2009-04-28 | 2010-11-10 | Institut National de la Recherche Agronomique | New competence stimulating peptide |
| JP5739880B2 (ja) | 2009-06-04 | 2015-06-24 | ノバルティス アーゲー | ＩｇＧ結合のための部位を同定するための方法 |
| KR101907434B1 (ko) | 2010-09-03 | 2018-10-12 | 발네바 오스트리아 게엠베하 | C. 디피실의 a 독소 및 b 독소 단백질의 분리된 폴리펩타이드 및 이의 용도 |
| US11246915B2 (en) | 2010-09-15 | 2022-02-15 | Applied Molecular Transport Inc. | Cholix toxin-derived fusion molecules for oral delivery of biologically active cargo |
| AU2011302645B2 (en) | 2010-09-15 | 2015-02-26 | Applied Molecular Transport, Llc | Systems and methods of delivery of bioactive agents using bacterial toxin-derived transport sequences |
| WO2012065996A1 (en) * | 2010-11-15 | 2012-05-24 | Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh | PHARMACEUTICAL FORMULATION COMPRISING INSULIN GLARGINE AND MALTOSYL-ß-CYCLODEXTRIN |
| US9149045B2 (en) | 2010-12-07 | 2015-10-06 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wipe coated with a botanical emulsion having antimicrobial properties |
| US8524264B2 (en) | 2010-12-07 | 2013-09-03 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Protein stabilized antimicrobial composition formed by melt processing |
| US9832993B2 (en) | 2010-12-07 | 2017-12-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Melt processed antimicrobial composition |
| US10821085B2 (en) | 2010-12-07 | 2020-11-03 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Wipe coated with a botanical composition having antimicrobial properties |
| US8445032B2 (en) | 2010-12-07 | 2013-05-21 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Melt-blended protein composition |
| US9648874B2 (en) | 2010-12-07 | 2017-05-16 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Natural, multiple use and re-use, user saturated wipes |
| EP2537933A1 (en) | 2011-06-24 | 2012-12-26 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) | An IL-15 and IL-15Ralpha sushi domain based immunocytokines |
| US8574628B2 (en) | 2011-12-19 | 2013-11-05 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Natural, multiple release and re-use compositions |
| US20150355179A1 (en) | 2012-10-10 | 2015-12-10 | Centre National De La Recherche Scientifique (Cnrs) | Cdkact biosensors-fluorescent polypeptide to probe the activity of cdk/cyclin kinases in vitro, in cellulo and in vivo |
| PT2919801T (pt) * | 2012-10-26 | 2020-07-30 | Lupin Atlantis Holdings Sa | Composição farmacêutica estável da proteína de fusão tnfr:fc etanercept |
| JP2015535238A (ja) | 2012-10-26 | 2015-12-10 | ルピン・リミテッドＬｕｐｉｎ Ｌｉｍｉｔｅｄ | ペグインターフェロンα−２ｂの安定な医薬組成物 |
| ITBO20120710A1 (it) * | 2012-12-28 | 2014-06-29 | Univ Degli Studi Torino | Sistema di veicolazione per l'insulina |
| US8871713B2 (en) | 2013-03-01 | 2014-10-28 | Theratechnologies Inc. | Formulations of growth hormone releasing factor (GRF) molecules with improved stability |
| JP6463725B2 (ja) | 2013-03-13 | 2019-02-06 | シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド | シクロデキストリンおよび抗体−薬物結合体製剤 |
| CA2902547A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-25 | Allergan, Inc. | Composition of a sustained-release delivery and method of stabilizing proteins during fabrication process |
| WO2014170032A1 (en) | 2013-04-19 | 2014-10-23 | Cytune Pharma | Cytokine derived treatment with reduced vascular leak syndrome |
| US10745489B2 (en) | 2013-04-29 | 2020-08-18 | Ogd2 Pharma | Targeting o-acetylated gd2 ganglioside as a new therapeutic and diagnostic strategy for Cancer Stem Cells cancer |
| AU2014261788B2 (en) | 2013-04-29 | 2019-07-11 | Nantes Université | Targeting O-acetylated GD2 ganglioside as a new therapeutic and diagnostic strategy for Cancer Stem Cells Cancer |
| DK3030262T3 (da) | 2013-08-08 | 2019-12-02 | Cytune Pharma | Kombineret farmaceutisk sammensætning |
| CA2919725C (en) | 2013-08-08 | 2023-04-18 | Cytune Pharma | An il-15 and il-15r.aplha. sushi domain based modulokines |
| EP2915569A1 (en) | 2014-03-03 | 2015-09-09 | Cytune Pharma | IL-15/IL-15Ralpha based conjugates purification method |
| SI3139965T1 (sl) | 2014-05-07 | 2022-01-31 | Applied Molecular Transport Inc. | Fuzijske molekule, izpeljane iz toksina cholix, za peroralno dostavljanje biološko aktivnega tovora |
| EP3058956A1 (en) | 2015-02-23 | 2016-08-24 | Institut Curie | Combined vaccination/radioterapy for cancer treatment |
| AU2016380988B2 (en) | 2015-12-30 | 2022-07-21 | Genentech, Inc. | Formulations with reduced degradation of polysorbate |
| EP3269739A1 (en) | 2016-07-15 | 2018-01-17 | OGD2 Pharma | Humanized antibody against o-acetylated gd2 ganglioside (oacgd2) |
| US11666655B2 (en) | 2016-11-28 | 2023-06-06 | Indian Institute Of Technology, Delhi | Formulation for stabilizing bio-therapeutics |
| EP3329937A1 (en) | 2016-12-05 | 2018-06-06 | OGD2 Pharma | Use of antibody against o-acetylated gd2 ganglioside to improve the therapeutic potential of drugs |
| US20180271792A1 (en) * | 2017-03-23 | 2018-09-27 | Rezolute, Inc. | Oral delivery of physiologically active substances |
| CA3093386A1 (en) | 2018-03-08 | 2019-09-12 | Applied Molecular Transport Inc. | Toxin-derived delivery constructs for oral delivery |
| SG11202009925PA (en) | 2018-03-08 | 2020-11-27 | Applied Molecular Transport Inc | Toxin-derived delivery constructs for oral delivery |
| GB201906835D0 (en) | 2019-05-15 | 2019-06-26 | Ucb Biopharma Sprl | Dry microparticles |
| TW202120521A (zh) | 2019-08-16 | 2021-06-01 | 美商應用分子運輸公司 | 組合物、配方及介白素生產及純化 |
Family Cites Families (64)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3459731A (en) * | 1966-12-16 | 1969-08-05 | Corn Products Co | Cyclodextrin polyethers and their production |
| US4024223A (en) * | 1972-11-11 | 1977-05-17 | Teijin Limited | Stripe composition and method of reducing smell associated therewith |
| JPS53136513A (en) * | 1977-05-06 | 1978-11-29 | Ono Pharmaceut Co Ltd | Stabilization of prostaglandin-x-related compounds |
| HU176215B (en) * | 1978-01-27 | 1981-01-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Process for preparing a cyclodextrin-indomethacin inclusion complex with a ratio of at about 2:1 |
| JPS54115368A (en) * | 1978-03-01 | 1979-09-07 | Ono Pharmaceut Co Ltd | Prostaglandin i2 analog, its preparation, and drug composition containing it as active constituent |
| IT1113341B (it) * | 1978-03-31 | 1986-01-20 | Ono Pharmaceutical Co | Analoghi della 6,9-metano-pgi2 |
| US4352793A (en) * | 1979-04-26 | 1982-10-05 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Pharmaceutical composition comprising bencyclane fumarate and cyclodextrin |
| JPS6033430B2 (ja) * | 1980-05-12 | 1985-08-02 | 小野薬品工業株式会社 | プロスタグランジン類似化合物 |
| EP0056995B1 (en) * | 1981-01-23 | 1986-03-26 | The Wellcome Foundation Limited | Chemical complex |
| HU183430B (en) * | 1981-05-12 | 1984-05-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszet | Process for producing cyclodextrine inclusion complexes of n-bracket-1-phenylethyl-bracket closed-3,3-diphenylpropylamine or n-bracket-1-phenylethyl-bracket closed-3,3-diphenylpropylamine-hydrochloride |
| US4407795A (en) * | 1981-07-16 | 1983-10-04 | American Cyanamid Company | Inclusion compound of p-hexadecylamino benzoic acid in cyclodextrin and method of use |
| JPS5813541A (ja) * | 1981-07-16 | 1983-01-26 | Kureha Chem Ind Co Ltd | エイコサペンタエン酸又はドコサヘキサエン酸のシクロデキストリン包接化合物 |
| JPS5838250A (ja) * | 1981-09-01 | 1983-03-05 | Teikoku Chem Ind Corp Ltd | 複合体 |
| JPS58126810A (ja) * | 1981-12-24 | 1983-07-28 | Kaken Pharmaceut Co Ltd | 抗炎症眼科用液剤およびその製法 |
| US4383992A (en) * | 1982-02-08 | 1983-05-17 | Lipari John M | Water-soluble steroid compounds |
| JPS58177949A (ja) * | 1982-04-12 | 1983-10-18 | Takeda Chem Ind Ltd | ランカシジン群抗生物質包接化合物 |
| US4659696A (en) * | 1982-04-30 | 1987-04-21 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Pharmaceutical composition and its nasal or vaginal use |
| DE3315356A1 (de) * | 1982-04-30 | 1983-11-17 | Ono Pharmaceutical Co. Ltd., Osaka | Verwendung von prostaglandinanalogen |
| DE3372705D1 (en) * | 1982-04-30 | 1987-09-03 | Takeda Chemical Industries Ltd | Pharmaceutical composition and its use |
| US4425336A (en) * | 1982-05-24 | 1984-01-10 | Key Pharmaceuticals, Inc. | 3,4-Dihydroxy-N-[3-(4-dihydroxyphenyl)-1-methyl-n-propyl]-beta-phenethylamine cyclodextrin complexes |
| US4424209A (en) * | 1982-06-21 | 1984-01-03 | Key Pharmaceuticals, Inc. | 3,4-Di-isobutyryloxy-N- 3-(4-isobutyryloxyphenyl)-1-methyl-n-propyl!-beta-phenethylamine cyclodextrin complexes |
| JPS5920230A (ja) * | 1982-07-19 | 1984-02-01 | チバ−ガイギ−・アクチエンゲゼルシヤフト | ピルプロフエン含有薬剤 |
| JPS5951220A (ja) * | 1982-08-02 | 1984-03-24 | Asahi Chem Ind Co Ltd | 新規なプラスミノ−ゲン・アクチベ−タ−およびその製法ならびにこれを含有する薬剤 |
| US4457916A (en) * | 1982-08-31 | 1984-07-03 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | Method for stabilizing Tumor Necrosis Factor and a stable aqueous solution or powder containing the same |
| HU190818B (en) * | 1982-11-09 | 1986-11-28 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara Rt,Hu | Process for producing complexes of piperonyl-butoxide-cyclodextrin |
| JPS59104556A (ja) * | 1982-12-07 | 1984-06-16 | Sekisui Chem Co Ltd | 蛋白質安定化剤 |
| EP0123291A2 (en) * | 1983-04-20 | 1984-10-31 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Method for stabilizing interferon |
| JPS59196824A (ja) * | 1983-04-21 | 1984-11-08 | Kowa Co | 吸着防止剤 |
| JPS6025967A (ja) * | 1983-07-21 | 1985-02-08 | Eisai Co Ltd | トリパミド包接化合物 |
| US4751095A (en) * | 1983-07-28 | 1988-06-14 | Karl Curtis L | Aspartame stabilization with cyclodextrin |
| DE3484374D1 (de) * | 1983-08-04 | 1991-05-08 | Green Cross Corp | Gamma-interferonzusammensetzung. |
| JPS6081166A (ja) * | 1983-10-11 | 1985-05-09 | Fujisawa Pharmaceut Co Ltd | ２−ニトロオキシメチル−６−クロロピリジンのβ−シクロデキストリン包接化合物およびその製造法 |
| DE3346123A1 (de) * | 1983-12-21 | 1985-06-27 | Janssen Pharmaceutica, N.V., Beerse | Pharmazeutische praeparate von in wasser schwerloeslichen oder instabilen arzneistoffen und verfahren zu ihrer herstellung |
| IT1196033B (it) * | 1984-02-22 | 1988-11-10 | Chiesi Farma Spa | Composto ad attivita' antiinfiammatoria ottenuto per complessazione con beta-ciclodestrina e relative formulazioni farmaceutiche |
| EP0156169B1 (en) * | 1984-02-29 | 1991-12-18 | Asahi Kasei Kogyo Kabushiki Kaisha | An aqueous solution of a tissue plasminogen activator dissolved therein at an increased concentration and a method |
| US4675395A (en) * | 1984-03-14 | 1987-06-23 | Seiwa Technological Laboratories Limited | Cyclodextrin inclusion compound and process for its preparation |
| US4727064A (en) * | 1984-04-25 | 1988-02-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Pharmaceutical preparations containing cyclodextrin derivatives |
| US4596795A (en) * | 1984-04-25 | 1986-06-24 | The United States Of America As Represented By The Secretary, Dept. Of Health & Human Services | Administration of sex hormones in the form of hydrophilic cyclodextrin derivatives |
| JPS6170996A (ja) * | 1984-09-13 | 1986-04-11 | Nikken Kagaku Kk | マルトシル−α−サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPS61197602A (ja) * | 1985-02-28 | 1986-09-01 | Nikken Kagaku Kk | 新規分岐サイクロデキストリンおよびその製造方法 |
| JPS61207380A (ja) * | 1985-03-11 | 1986-09-13 | Taiyo Yakuhin Kogyo Kk | モベンゾキサミンの経口製剤 |
| GB8506792D0 (en) * | 1985-03-15 | 1985-04-17 | Janssen Pharmaceutica Nv | Derivatives of y-cyclodextrin |
| JPS61236802A (ja) * | 1985-04-13 | 1986-10-22 | Nikken Kagaku Kk | 新規な分岐γ―サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPS61286318A (ja) * | 1985-06-13 | 1986-12-16 | Ichiro Shibauchi | 浴剤の製造方法 |
| JPS61287901A (ja) * | 1985-06-17 | 1986-12-18 | Nikken Kagaku Kk | 新規分岐α―サイクロデキストリンの製造方法 |
| JPS61287902A (ja) * | 1985-06-17 | 1986-12-18 | Nikken Kagaku Kk | 新規分岐β―サイクロデキストリンの製造方法 |
| US4663316A (en) * | 1985-06-28 | 1987-05-05 | Warner-Lambert Company | Antibiotic clathrates and pharmaceutical compositions thereof |
| US4728509A (en) * | 1985-08-19 | 1988-03-01 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Aqueous liquid preparation |
| US4623641A (en) * | 1985-09-09 | 1986-11-18 | Chinoin Gyogyszer Es Vegyeszeti Termekek Gyara R.T. | Method of treating ulcers and erosions in the gastrointestinal system using PGI2 -methyl ester-beta cyclodextrin inclusion complexes |
| JPS62106901A (ja) * | 1985-11-05 | 1987-05-18 | Nikken Kagaku Kk | ジグルコシル−β−サイクロデキストリンおよびその製造方法 |
| JPH0635481B2 (ja) * | 1986-01-14 | 1994-05-11 | 日研化学株式会社 | ジグルコシル−α−サイクロデキストリンおよびその製造方法 |
| US4933433A (en) * | 1986-01-31 | 1990-06-12 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Recombinant interleukin-2 composition and process for making it |
| JPS62223129A (ja) * | 1986-03-25 | 1987-10-01 | Shionogi & Co Ltd | インタ−ロイキン−２組成物 |
| JPS62281855A (ja) * | 1986-05-29 | 1987-12-07 | Daikin Ind Ltd | ビタミン，ビタミン誘導体，またはホルモンを含有する包接化合物 |
| JPS6327440A (ja) * | 1986-07-18 | 1988-02-05 | Sanraku Inc | グルコシル化分岐シクロデキストリン含有組成物 |
| JPS6336793A (ja) * | 1986-07-31 | 1988-02-17 | Nikken Kagaku Kk | ジマルトシル―γ―サイクロデキストリンの製造方法 |
| US4925678A (en) * | 1987-04-01 | 1990-05-15 | Ranney David F | Endothelial envelopment drug carriers |
| US4897472A (en) * | 1986-11-19 | 1990-01-30 | Oy Alko Ab | Process for isolation and purification of cyclodextrins |
| JPH0764884B2 (ja) * | 1986-11-27 | 1995-07-12 | 株式会社トクヤマ | シクロデキストリン組成物 |
| JP2577049B2 (ja) * | 1987-06-04 | 1997-01-29 | 三共株式会社 | シクロスポリン製剤 |
| US5002935A (en) * | 1987-12-30 | 1991-03-26 | University Of Florida | Improvements in redox systems for brain-targeted drug delivery |
| DE68906942T3 (de) * | 1988-03-29 | 1999-05-12 | University Of Florida, Gainesville, Fla. | Pharmazeutische Zusammensetzungen für die parenterale Anwendung. |
| US5120720A (en) * | 1990-09-20 | 1992-06-09 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health & Human Services | Preparation of lipophile:hydroxypropylcyclodextrin complexes by a method using co-solubilizers |
| US5580856A (en) * | 1994-07-15 | 1996-12-03 | Prestrelski; Steven J. | Formulation of a reconstituted protein, and method and kit for the production thereof |
-
1989
- 1989-06-29 US US07/373,928 patent/US5997856A/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-09-19 AU AU43382/89A patent/AU620926B2/en not_active Expired
- 1989-09-19 WO PCT/US1989/004099 patent/WO1990003784A1/en active IP Right Grant
- 1989-09-19 JP JP01510443A patent/JP3120987B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1989-09-19 EP EP89911212A patent/EP0437478B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-09-22 CA CA000612516A patent/CA1328634C/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-10-04 IE IE320189A patent/IE63649B1/en not_active IP Right Cessation
- 1989-10-04 ES ES8903338A patent/ES2020357A6/es not_active Expired - Fee Related
-
1991
- 1991-04-05 DK DK199100606A patent/DK175923B1/da not_active IP Right Cessation
-
1995
- 1995-06-07 US US08/474,178 patent/US5730969A/en not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP0437478B1 (en) | 1993-04-14 |
| US5730969A (en) | 1998-03-24 |
| AU620926B2 (en) | 1992-02-27 |
| US5997856A (en) | 1999-12-07 |
| JPH11500404A (ja) | 1999-01-12 |
| WO1990003784A1 (en) | 1990-04-19 |
| CA1328634C (en) | 1994-04-19 |
| IE63649B1 (en) | 1995-05-31 |
| IE893201L (en) | 1990-04-05 |
| EP0437478A1 (en) | 1991-07-24 |
| AU4338289A (en) | 1990-05-01 |
| DK175923B1 (da) | 2005-07-04 |
| ES2020357A6 (es) | 1991-08-01 |
| DK60691A (da) | 1991-06-04 |
| DK60691D0 (da) | 1991-04-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3120987B2 (ja) | ポリペプチド、特にタンパク質の可溶化および安定化のための方法および組成物 | |
| Brewster et al. | Use of 2-hydroxypropyl-β-cyclodextrin as a solubilizing and stabilizing excipient for protein drugs | |
| AU648061B2 (en) | Improved cyclodextrin based erythropoietin formulation | |
| JP6047495B2 (ja) | 持続型インターフェロンアルファ結合体の液状製剤 | |
| JP5909755B2 (ja) | 非血液凝固タンパク質の糖ポリシアル酸化 | |
| Russell-Jones et al. | Vitamin B12 mediated oral delivery systems for granulocyte-colony stimulating factor and erythropoietin | |
| JP2975632B2 (ja) | グリコサミノグリカン修飾プロテイン | |
| JP2022058911A (ja) | 非血液凝固タンパク質の糖ポリシアル酸化 | |
| CA2150617C (en) | Nanoerythrosome as bioactive agent carrier | |
| EP1608344B1 (en) | Oral formulations of cladribine | |
| EP1587525A2 (en) | Parenteral formulations of a peptide for the treatment of systemic lupus erythematosus | |
| EP0399716B1 (en) | Hypoallergenic steroidal anesthetic/hypnotic compositions | |
| JPH0585942A (ja) | インターフエロン−ヒアルロン酸及び／又はその塩の結合体 | |
| US5691304A (en) | Improved process for preparing polymyxin B/dextran conjugates | |
| DE68906027T2 (de) | Cyclodextrimpeptid-einschlusskomplexe. | |
| JPH09124512A (ja) | 肝臓ターゲティングのための水溶性の薬物−プルラン結合体製剤 | |
| EP2272503B1 (en) | Oral formulations of cladribine | |
| JPWO2002066496A1 (ja) | 修飾剤 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20071020 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081020 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091020 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091020 Year of fee payment: 9 |
|
| S533 | Written request for registration of change of name |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R313533 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091020 Year of fee payment: 9 |
|
| R350 | Written notification of registration of transfer |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R350 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |