JP2023512228A - トール様受容体７（ＴＬＲ７）アゴニストとしての１Ｈ－ピラゾロ［４，３－ｄ］ピリミジン化合物 - Google Patents

Abstract

下記の式（Ｉ）：【化１】TIFF2023512228000089.tif5166で表される化合物は、トール様受容体７（ＴＬＲ７）のアゴニストとして有用である。そのような化合物は、特に抗がん免疫療法剤と併用してがん治療に、またはワクチンアジュバントとして使用され得る。【選択図】なし

Description

本出願は、米国特許法第１１９条（ｅ）の下で、２０２０年７月２９日に提出された米国仮出願シリアル番号第６３／０５８，１３０号、および２０２０年１月２７日に提出された米国仮出願シリアル番号第６２／９６６，１２４号の利益を主張し；それらの開示は、参照により本明細書に組み込まれる。

本開示は、トール様受容体７（「ＴＬＲ７」）アゴニストおよびその複合体、ならびに調製方法、並びにそのようなアゴニストおよびその複合体の使用に関する。

トール様受容体（「ＴＬＲｓ」）は、特定の種類の病原体に保存される小分子モチーフである病原体関連分子パターン（「ＰＡＭＰｓ」）を認識する受容体である。ＴＬＲは、細胞の表面上または細胞内のいずれかに存在し得る。同種のＰＡＭＰの結合によるＴＬＲの活性化は、宿主内の関連病原体の存在－すなわち感染を伝え、宿主の免疫系を刺激して感染と闘わせる。ヒトには１０のＴＬＲｓがあり、ＴＬＲ１、ＴＬＲ２、ＴＬＲ３などと名付けられている。

アゴニストによるＴＬＲの活性化－ＴＬＲ７のものが最も研究されている－は、実際の病原体感染以外の様々な病態の治療において、免疫応答を全体的に刺激することにより、ワクチンおよび免疫療法剤の作用に対して良い効果を及ぼし得る。それゆえ、ワクチンアジュバントとしての、またはがん免疫療法におけるエンハンサーとしてのＴＬＲ７アゴニストの使用に大きな関心がある。例えば、Ｖａｓｉｌａｋｏｓ ａｎｄ Ｔｏｍａｉ ２０１３，Ｓａｔｏ－Ｋａｎｅｋｏ ｅｔ ａｌ．２０１７，Ｓｍｉｔｓ ｅｔ ａｌ．２００８，およびＯｔａ ｅｔ ａｌ．２０１９を参照されたい。

ＴＬＲ７は、エンドソームの膜上に位置する細胞内受容体であり、一本鎖ＲＮＡウイルスと関連するＰＡＭＰsを認識する。その活性化は、ＩＦＮαおよびＩＦＮβなどのＩ型インターフェロンの分泌を誘導する（Ｌｕｎｄ ｅｔ ａｌ．２００４）。ＴＬＲ７には２つの結合部位があり、一つは一本鎖ＲＮＡリガンド（Ｂｅｒｇｈｏｅｆｅｒ ｅｔ ａｌ．２００７）との、一つはグアノシンなどの小分子（Ｚｈａｎｇ ｅｔ ａｌ． ２０１６）との結合部位である。

ＴＬＲ７は、グアノシン様合成アゴニスト、例えば１Ｈ－イミダゾ［４，５－ｃ］キノリン骨格を基にしているイミキモド、レシキモド、およびガーディキモド（gardiquimod）などに結合し、活性化されることがある。小分子ＴＬＲ７アゴニストのレビューについてはＣｏｒｔｅｚ ａｎｄ Ｖａ ２０１８を参照されたい。

ベサトリモドが挙げられるように、プテリジノン分子骨格を基にする合成ＴＬＲ７アゴニストもまた既知である（Ｄｅｓａｉ ｅｔ ａｌ．２０１５）。

プリン様骨格を基にする他の合成ＴＬＲ７アゴニストは開示されており、しばしば下記の一般式（Ａ）：

［式中、Ｒ、Ｒ’、およびＲ”は、構造的な可変要素であり、Ｒ”は一般に非置換または置換された芳香またはヘテロ芳香環を含む］で示される。

プリン様骨格を有する生物活性分子および線維症、炎症性疾患、がん、または病原性感染などの病態の治療におけるその使用の開示には：Ａｋｉｎｂｏｂｕｙｉ ｅｔ ａｌ．２０１５および２０１６；Ｂａｒｂｅｒｉｓ ｅｔ ａｌ．２０１２；Ｃａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１４；Ｄｉｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１６、２０１７ａ、および２０１７ｂ；Ｇｒａｕｐｅ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｈａｓｈｉｍｏｔｏ ｅｔ ａｌ．２００９；Ｈｅ ｅｔ ａｌ．２０１９ａおよび２０１９ｂ；Ｈｏｌｌｄａｃｋ ｅｔ ａｌ．２０１２；Ｉｓｏｂｅ ｅｔ ａｌ．２００９ａおよび２０１２；Ｐｏｕｄｅｌ ｅｔ ａｌ．２０１９ａおよび２０１９ｂ；Ｐｒｙｄｅ ２０１０；ならびにＹｏｕｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１９が挙げられる。

基Ｒ”は、ピリジルであり得る：Ｂｏｎｆａｎｔｉ ｅｔ ａｌ．２０１５ａおよび２０１５ｂ；Ｈａｌｃｏｍｂ ｅｔ ａｌ．２０１５；Ｈｉｒｏｔａ ｅｔ ａｌ．２０００；Ｉｓｏｂｅ ｅｔ ａｌ．２００２、２００４、２００６、２００９ａ、２００９ｂ、２０１１、および２０１２；Ｋａｓｉｂｈａｔｌａ ｅｔ ａｌ．２００７；Ｋｏｇａ－Ｙａｍａｋａｗａ ｅｔ ａｌ．２０１３；Ｍｕｓｍｕｃａ ｅｔ ａｌ．２００９；Ｎａｋａｍｕｒａ ２０１２；Ｏｇｉｔａ ｅｔ ａｌ．２００７；ならびにＹｕ ｅｔ ａｌ．２０１３。

式（Ａ）の６，５縮合環系－ピリミジン６員環とイミダゾール５員環が縮合した－が改変された関連分子の開示がある。（ａ）Ｄｅｌｌａｒｉａ ｅｔ ａｌ．２００７、Ｊｏｎｅｓ ｅｔ ａｌ．２０１０および２０１２、ならびにＰｉｌａｔｔｅ ｅｔ ａｌ．２０１７は、ピリミジン環がピリジン環に置換された化合物を開示する。（ｂ）Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１１、Ｃｏｅ ｅｔ ａｌ．２０１７、Ｐｏｕｄｅｌ ｅｔ ａｌ．２０２０ａおよび２０２０ｂ、ならびにＺｈａｎｇ ｅｔ ａｌ．２０１８は、イミダゾール環がピラゾール環に置換された化合物を開示する。（ｃ）Ｃｏｒｔｅｚ ｅｔ ａｌ．２０１７および２０１８；Ｌｉ ｅｔ ａｌ．２０１８；ならびにＭｃＧｏｗａｎ ｅｔ ａｌ．２０１６ａ、２０１６ｂ、および２０１７は、イミダゾール環がピロール環に置換された化合物を開示する。

Ｂｏｎｆａｎｔｉ ｅｔ ａｌ．２０１５ｂおよび２０１６ならびにＰｕｒａｎｄａｒｅ ｅｔ ａｌ．２０１９は、プリン部分の２つの環が大環状分子により架橋されたＴＬＲ７モジュレーターを開示する。

ＴＬＲ７アゴニストは、パートナー分子に結合されることがあり、それは、例えば、リン脂質、ポリ（エチレングリコール）（「ＰＥＧ」）、抗体、または別のＴＬＲ（一般にＴＬＲ２）であり得る。代表的な開示には：Ｃａｒｓｏｎ ｅｔ ａｌ．２０１３、２０１５、および２０１６、Ｃｈａｎ ｅｔ ａｌ．２００９および２０１１、Ｃｏｒｔｅｚ ｅｔ ａｌ．２０１７，Ｇａｄｄ ｅｔ ａｌ．２０１５、Ｌｉｏｕｘ ｅｔ ａｌ．２０１６，Ｍａｊ ｅｔ ａｌ．２０１５、Ｖｅｒｎｅｊｏｕｌ ｅｔ ａｌ．２０１４、ならびにＺｕｒａｗｓｋｉ ｅｔ ａｌ．２０１２が挙げられる。主な結合部位は、式（Ａ）のＲ”基である。

Ｊｅｎｓｅｎ ｅｔ ａｌ．２０１５は、ＴＬＲ７アゴニストの送達のためのカチオン性脂質ビークルの使用を開示する。

レシキモドなどのいくつかのＴＬＲ７アゴニストは、ＴＬＲ７/ＴＬＲ８デュアルアゴニストである。例えば、Ｂｅｅｓｕ ｅｔ ａｌ．２０１７、Ｅｍｂｒｅｃｈｔｓ ｅｔ ａｌ．２０１８、Ｌｉｏｕｘ ｅｔ ａｌ．２０１６、およびＶｅｒｎｅｊｏｕｌ ｅｔ ａｌ．２０１４を参照されたい。

筆頭著者または発明者および発行年により本明細書に引用される文書についての完全な引用が、本明細書の末尾に記載される。

本明細書は、１Ｈ－ピラゾロ［４，３ｄ］ピリミジン芳香族系を有する、ＴＬＲ７アゴニストとしての活性がある化合物に関する。

一つの態様において、下記の式（Ｉ）：

［式中、
Ｗは、Ｈ、ハロ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、ＣＮ、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、

であり；
各Ｘは、独立してＮまたはＣＲ^２であり；
Ｒ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_８アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３シクロアルキル）、
（Ｃ_１－Ｃ_８アルカンジイル）_０－１（Ｃ_５－Ｃ_６シクロアルキル）、
（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（５－６員ヘテロアリール）、
（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１フェニル、または
（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＣＦ_３であり；
各Ｒ^２は、独立してＨ、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｓ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
ＳＯ_２（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｏ（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、
Ｓ（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、ＳＯ_２（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、
Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル、Ｃｌ、Ｆ、ＣＮ；または［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１ＮＲ^ｘＲ^ｙであり；
Ｒ^３は、Ｈ、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、
ＮＨ_２、
ＮＨ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）_２、
ＮＨ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
Ｎ（Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル）_２、
Ｎ［Ｃ_１－Ｃ_３アルキル］Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、
ＮＨ（ＳＯ_２)（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
ＮＨ（ＳＯ_２)（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
６員の芳香族もしくはヘテロ芳香族部分、
５員のヘテロ芳香族部分、または
下記の構造：

を有する部分であり；
Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_５アルキル、Ｃ_２－Ｃ_５アルケニル、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル、
ハロ、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、
（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、フェニル、
ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、５もしくは６員ヘテロアリール、

であり；
Ｒ^６は、ＮＨ_２、
（ＮＨ）_０－１（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）_２、
（ＮＨ）_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
Ｎ（Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル）_２、
または
下記の構造：

を有する部分であり；
Ｒ^ＸおよびＲ^ｙは、独立してＨまたはＣ_１－Ｃ_３アルキルであるか、あるいはＲ^ＸおよびＲ^ｙは、それらに結合している窒素と結合して３から７員の環を形成し；
ｎは、１、２、または３であり；
ｐは、０、１、２、または３であり；
ここでＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^５において、
アルキル部分、アルカンジイル部分、シクロアルキル部分、または下記の式：

で示される部分は、
ＯＨ、ハロ、ＣＮ、（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、ＳＯ_２（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、ＮＲ^ｘＲ^ｙ、
（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）
から選択される一つ以上の置換基で適宜置換されてもよく；
アルキル、アルカンジイル、シクロアルキル、または下記の式：

で示される部分は、
Ｏ、ＳＯ_２、ＣＦ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＨ、
Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＣＦ_３、
Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、
または
Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_５シクロアルキル）
に置換されるＣＨ_２基を有してもよい］
で示される構造を有する化合物が提供される。

本明細書に開示される化合物は、ＴＬＲ７アゴニストとしての活性を有し、いくつかは、目的とする作用の標的組織または臓器への標的化送達のための抗体に結合されることがある。それらはＰＥＧ化され、その医薬特性が調節されることもある。

本明細書に開示される化合物、またはその複合体あるいはそのＰＥＧ化誘導体は、免疫系の活性化による治療に適している病態を患う患者に対して、治療的有効量の、そのような化合物またはその複合体あるいはそのＰＥＧ化誘導体を、特にワクチンまたはがん免疫療法剤と併用して投与することによって、そのような患者を治療するのに使用され得る。

化合物
一つの態様において、本開示の化合物は、下記の式（Ｉａ）で示され、式中、Ｒ^１およびＲ^３は、式（Ｉ）について定義される通りである：

一つの態様において、本開示は、式（Ｉａ）
［式中、
Ｒ^１は、

であり；
Ｒ^３は、ＯＨ、

である］
で示される構造を有する化合物を提供する。

基Ｒ^１の例には：

が挙げられる。

Ｒ^２は、好ましくはＯＭｅ、Ｏ（シクロプロピル）、またはＯＣＨＦ_２、より好ましくはＯＭｅである。

基Ｒ^３の例には、ＯＨ、

が挙げられる。

一つの態様において、Ｒ^５は、Ｈである。

本明細書に開示される化合物の具体例を以下の表Ａに示す。表は、以下に提供される手順を通じて割り出された、生物学的活性：ヒトＴＬＲ７レポーターアッセイおよび／またはヒト全血におけるＣＤ６９遺伝子の誘導に関するデータも提供する。最も右の列に解析データ（マススペクトル、ＨＰＬＣ保持時間、およびＮＭＲ）を記載する。一つの実施形態において、本開示の化合物は、（ａ）１，０００ｎＭ未満のヒトＴＬＲ７（ｈＴＬＲ７）アゴニスト（レポーター）アッセイＥＣ_５０値および（ｂ）１，０００ｎＭ未満のヒト全血（ｈＷＢ）ＣＤ６９誘導ＥＣ_５０値を有する。（アッセイが複数回行われた場合、報告される値は平均値である。）

医薬組成物および投与
もう一つの態様において、薬学的に許容される担体または添加剤とともに製剤化される、本明細書に開示されるような化合物、またはその複合体を含む医薬組成物が提供される。医薬組成物は、一つ以上の追加の薬学的活性成分、例えば生物学的製剤または小分子薬剤などを適宜含んでもよい。医薬組成物は、別の治療剤、特に抗がん剤との併用療法で投与され得る。

医薬組成物は、一つ以上の添加剤を含むことがある。使用されることがある添加剤には、担体、界面活性剤、増粘または乳化剤、固体結合剤、分散または懸濁助剤、可溶化剤、着色剤、風味剤、コーティング、崩壊剤、滑沢剤、甘味剤、防腐剤、等張化剤、およびそれらの組み合わせが挙げられる。適当な添加剤の選択および使用は、Gennaro編，Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第２０版（Lippincott Williams ＆ Wilkins 2003）に記載されている。

好ましくは、医薬組成物は、静脈内、筋肉内、皮下、非経口、脊髄または上皮投与（例えば、注射または注入による）に適する。投与経路に応じて、活性化合物は、物質でコーティングされ、化合物を不活化することがある酸および他の自然条件の作用から保護されることがある。「非経口投与」という語句は、通常、注射による、経腸および局所投与以外の投与方法を意味し、例として、静脈内、筋肉内、動脈内、髄腔内、嚢内、眼窩内、心臓内、皮内、腹腔内、経気管、皮下、表皮下、関節内、嚢下、くも膜下、脊髄内、硬膜外および胸骨内注射ならびに注入が挙げられるが、これらに限定されない。あるいは、医薬組成物は、局所、上皮または粘膜投与経路などの非非経口経路（non-parenteral route）で、例えば、鼻腔内、経口的、経膣的、経直腸的、舌下または局所的に投与され得る。

医薬組成物は、滅菌水溶液または滅菌水分散液の形であり得る。それらは、マイクロエマルジョン、リポソーム、または高い薬物濃度を達成するのに適当な他の秩序構造中で製剤化されることもある。組成物は、投与前に水で再調製する凍結乾燥物の形でも提供され得る。

担体物質と結合して単一剤形を生成し得る活性成分の量は、治療を受ける患者および特定の投与方法によって異なり、一般的には治療効果をもたらす組成物の量であろう。一般的に、１００パーセントのうち、この量は、活性成分の約０．０１パーセントから約９９パーセント、好ましくは約０．１パーセントから約７０パーセント、最も好ましくは、薬学的に許容される担体との併用で活性成分の約１パーセントから約３０パーセントに及ぶであろう。

投与計画は、治療反応を提供するように調整される。例えば、単回のボーラス投与を行ってもよく、用量をいくつかに分けて時間をかけて投与してもよく、状況の緊急性に応じて比例的に用量を増減させてもよい。投与の簡便性および用量の均一性にとって、用量単位形態で非経口組成物を製剤化することは特に有利である。「用量単位形態」は、治療を受ける患者に対する単一の用量として適当な、物理的に別々の単位を指し；各単位には、望ましい治療反応をもたらすように計算された、予め決められた量の活性化合物が、必要な医薬担体とともに含まれる。

用量は、宿主の体重に対して、約０.０００１から１００ｍｇ/ｋｇ、より一般的には０．０１から５ｍｇ/ｋｇに及ぶ。例えば、用量は、０．３ｍｇ/ｋｇ体重、１ｍｇ/ｋｇ体重、３ｍｇ/ｋｇ体重、５ｍｇ/ｋｇ体重または１０ｍｇ/ｋｇ体重であってもよく、１－１０ｍｇ/ｋｇ、あるいは０．１から５ｍｇ/ｋｇの範囲内であってもよい。代表的な治療レジメンは、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、１か月に１回、３か月に１回、または３から６か月に１回の投与である。好ましい投与計画には、以下の投薬スケジュール：（ｉ）４週間ごとに６用量を投与し、次に３か月ごとに投与；（ｉｉ）３週間ごとに投与；（ｉｉｉ）３ｍｇ/ｋｇ体重で１回投与し、続いて１ｍｇ/ｋｇ体重で３週間ごとに投与のうちの一つを用いて、１ｍｇ/ｋｇ体重または３ｍｇ/ｋｇ体重で静脈内投与する方法が挙げられる。いくつかの方法において、用量は、約１－１０００μｇ/ｍＬの、いくつかの方法においては約２５－３００μｇ/ｍＬの血漿中抗体濃度を達成するように調整される。

本発明の化合物の「治療有効量」は、好ましくは、疾患の症状の重症度の減少、疾患の無症状期間の回数および持続期間の上昇、または疾患の苦痛に起因する機能障害もしくは身体障害の予防をもたらす。例えば、がんを有する患者の治療については、「治療有効量」は、治療を受けていない患者と比較して、好ましくは少なくとも約20%、より好ましくは少なくとも約40%、さらに好ましくは少なくとも約60%、さらに好ましくは少なくとも約80%、腫瘍増殖を阻害する。治療有効量の治療化合物は、腫瘍の大きさを減少させるか、そうでなければ、患者における症状を寛解させることがあり、患者は、一般にはヒトであるが、別の哺乳動物であってもよい。２つ以上の治療剤が併用療法で投与される場合、「治療有効量」は、個々の薬剤としてではなく、全体としての組み合わせの有効性をいう。

医薬組成物は、インプラント、経皮パッチ、およびマイクロカプセル化送達システムなどの放出制御または徐放性製剤であり得る。生分解性の生体適合性ポリマー、例えば、エチレン酢酸ビニル、ポリ酸無水物、ポリグリコール酸、コラーゲン、ポリオルトエステル、およびポリ乳酸などが使用され得る。例えば、Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems，J.R. Robinson編，Marcel Dekker社，ニューヨーク，1978を参照されたい。

治療組成物は、（１）無針皮下注射器具；（２）マイクロ注入ポンプ；（３）経皮デバイス；（４）注入デバイス；および（５）浸透圧装置などの医療機器を用いて投与され得る。

ある実施形態において、医薬組成物は、インビボにおいて適切な分布を確保するように製剤化されることがある。例えば、本発明の治療化合物が血液脳関門を通過することを確実にするために、それらはリポソーム中で製剤化されることがあり、リポソームは、標的化部分をさらに含み、特定の細胞または臓器への選択的輸送を増強することがある。

産業上の利用可能性および用途
本明細書に開示されるＴＬＲ７アゴニスト化合物は、ＴＬＲ７の活性化により寛解し得る疾患または病態の治療のために使用され得る。

一つの実施形態において、ＴＬＲ７アゴニストは、抗がん免疫療法剤－別名を免疫抗がん剤という－と組み合わせて使用される。抗がん免疫療法剤は、がん細胞を攻撃し、破壊する体の免疫系を刺激することにより、特にＴ細胞の活性化を介して効果を発揮する。免疫系には、それによる正当な標的細胞への攻撃、およびそれによる健康で正常な細胞への攻撃の抑止のバランスの維持を助ける、多数のチェックポイント（調節）分子がある。いくつかは刺激因子（上方調節因子）であり、それらの関与はＴ細胞活性化を促進し、免疫応答を増強するということを意味する。他は阻害因子（下方制御因子またはブレーキ）であり、それらの関与はＴ細胞活性化を阻害し、免疫応答を弱めるということを意味する。アゴニスト免疫療法剤の、刺激性チェックポイント分子への結合は、後者の活性化およびがん細胞に対する免疫応答の増強をもたらし得る。交換的に、アンタゴニスト免疫療法剤の、抑制性チェックポイント分子への結合は、後者による免疫系の下方制御を防ぎ、がん細胞に対する活発な応答の維持を助け得る。刺激性チェックポイント分子の例は、B7－1、B7－2、CD28、4－1BB （CD137）、4－1BBL、ICOS、CD40、ICOS－L、OX40、OX40L、GITR、GITRL、CD70、CD27、CD40、ＤＲ３およびCD28Hである。抑制性チェックポイント分子の例は、ＣＴＬＡ－４、ＰＤ－１、ＰＤ－Ｌ１、PD－L2、LAG－3、TIM－3、ガレクチン９、CEACAM－1、BTLA、CD69、ガレクチン－1、CD113、ＧＰＲ５６、VISTA、2B4、CD48、GARP、PD1H、ＬＡＩＲ１、TIM－1、CD96およびTIM－4である。

どちらの抗がん免疫療法剤の作用機序においても、その有効性は、ＴＬＲ７の活性化などの全身的な免疫系の上方制御により上昇し得る。それゆえ、一つの実施形態において、本明細書は、がんを患う患者に、抗がん免疫療法剤および本明細書に開示されるようなＴＬＲ７アゴニストの治療的に有効な組み合わせを投与することを特徴とする、がんの治療方法を提供する。投与のタイミングは、同時でも、連続的でも、交互であってもよい。投与方法は、全身的であっても、局所的であってもよい。ＴＬＲ７アゴニストは、対象を絞った方法で、複合体を用いて送達されることがある。

上記のような併用療法により治療され得るがんには、急性骨髄白血病、副腎皮質癌、カポジ肉腫、リンパ腫、肛門癌、虫垂癌、奇形／ラブドイド腫瘍、基底細胞癌、胆管癌、膀胱癌、骨癌、脳癌、乳癌、気管支腫瘍、カルチノイド腫瘍、心臓腫瘍、子宮頸癌、脊索腫、慢性リンパ性白血病、慢性骨髄増殖性腫瘍、結腸癌、結腸直腸癌、頭蓋咽頭腫、胆管癌、子宮内膜癌、上衣腫、食道癌、感覚神経芽腫、ユーイング肉腫、眼癌、卵管癌、胆嚢癌、消化管カルチノイド腫瘍、消化管間質腫瘍、胚細胞腫瘍、へアリー細胞白血病、頭頸部癌、心臓癌、肝臓癌、下咽頭癌、膵臓癌、腎臓癌、喉頭癌、慢性骨髄性白血病、***および口腔癌（lip and oral cavity cancer）、肺癌、黒色腫、メルケル細胞癌、中皮腫、口腔癌（mouth cancer）、口腔癌（oral cancer）、骨肉腫、卵巣癌、陰茎癌、咽頭癌、前立腺癌、直腸癌、唾液腺癌、皮膚癌、小腸癌、軟部組織肉腫、精巣癌、咽喉癌、甲状腺癌、尿道癌、子宮癌、膣癌、および外陰癌が挙げられる。

本明細書に開示されるような併用療法に使用され得る抗がん免疫療法剤には、AMG 557、AMP－224、アテゾリズマブ、アベルマブ、BMS 936559、セミプリマブ、CP－870893、ダセツズマブ、デュルバルマブ、エノブリツズマブ、ガリキシマブ、IMP321、イピリムマブ、ルカツムマブ、MEDI－570、MEDI－6383、MEDI－6469、ムロモナブ－CD3、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピディリズマブ、スパルタリズマブ、トレメリムマブ、ウレルマブ、ウトミルマブ、バルリルマブ、ボンレロリズマブが挙げられる。それらの代替名（商標名、旧名、研究コード、または同義語）およびそれぞれの標的チェックポイント分子を以下の表Ｂに示す。

ＴＬＲ７アゴニストとの併用療法の一つの実施形態において、抗がん免疫療法剤は、アンタゴニスト抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ－１、または抗ＰＤ－Ｌ１抗体である。がんは、肺癌（非小細胞肺癌を含む）、膵臓癌、腎臓癌、頭頸部癌、リンパ腫（ホジキンリンパ腫を含む）、皮膚癌（黒色腫およびメルケル皮膚癌を含む）、尿路上皮癌（膀胱癌を含む）、胃癌、肝細胞癌、または結腸直腸癌であり得る。

ＴＬＲ７アゴニストとの併用療法のもう一つの実施形態において、抗がん免疫療法剤は、アンタゴニスト抗ＣＴＬＡ－４抗体、好ましくはイピリムマブである。

ＴＬＲ７アゴニストとの併用療法のもう一つの実施形態において、抗がん免疫療法剤は、アンタゴニスト抗ＰＤ－１抗体、好ましくはニボルマブまたはペムブロリズマブである。

本明細書に開示されるＴＬＲ７アゴニストは、ワクチンアジュバントとしても有用である。

本発明の実施は、限定ではなく実例として提供される以下の実施例を参照することによりさらに理解され得る。

解析手順
ＮＭＲ
プロトン核磁気共鳴（ＮＭＲ）スペクトルを得るために以下の条件を用いた：溶媒および内部標準としてＤＭＳＯ－ｄ６またはＣＤＣｌ_３のいずれかを用いて、４００Ｍｚまたは５００ＭｈｚのＢｒｕｋｅｒ装置のいずれかでＮＭＲスペクトルを得た。ＡＤＣ ＬａｂｓのＡＣＤ Ｓｐｅｃｔｒｕｓバージョン２０１５－０１またはＭｅｓｔＲｅＮｏｖａソフトウェアのいずれかを用いることにより、生のＮＭＲデータを解析した。

化学シフトは、内部のテトラメチルシラン（ＴＭＳ）から、または重水素化ＮＭＲ溶媒により推測されるＴＭＳの位置を基準に、低磁場側が百万分率（ｐｐｍ）で報告される。明らかな多重度は：一重線－ｓ、二重線－ｄ、三重線－ｔ、四重線－ｑ、または多重線－ｍとして報告する。広幅化を示すピークをｂｒとしてさらに表す。積分値は近似値である。積分強度、ピーク形状、化学シフトおよび結合定数は、溶媒、濃度、温度、ｐＨ、および他の因子に依存し得るということに注意すべきである。さらに、ＮＭＲスペクトルにおいて水または溶媒ピークと重複するか、または交換が起こるピークは、信頼できる積分強度を提供しないことがある。場合によっては、ＮＭＲスペクトルは、水ピーク抑制を用いて得られることがあるが、重複するピークが目に見えなくなるか、またはその形状および／もしくは積分値が変化することがある。

液体クロマトグラフィー
以下のプレパラティブおよび分析（ＬＣ／ＭＳ）液体クロマトグラフィー法を用いた：

ＬＣ／ＭＳ方法Ａ：カラム：BEH C18 2.1 x 50mm；移動相Ａ：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：０．０５％ ＴＦＡ含有アセトニトリル；温度：５０℃；グラジエント：１．７分かけて２－９８％Ｂ；流速：０．８ｍＬ/分

ＬＣ／ＭＳ方法Ｂ：カラム：BEH C18 2.1 x 50mm；移動相Ａ：95：5 Ｈ_２Ｏ：０．０１Ｍ ＮＨ_４ＯＡｃ含有アセトニトリル；移動相Ｂ：5：95 Ｈ_２Ｏ：０．０１Ｍ ＮＨ_４ＯＡｃ含有アセトニトリル；温度：５０℃；グラジエント：１分かけて５－９５％Ｂ；流速：０．８ｍＬ/分

ＬＣ／ＭＳ方法Ｃ：カラム：Waters XBridge C18、2.1 mm x 50 mm、1.7 μｍ粒子；移動相Ａ：5：95 アセトニトリル：０．１％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95：5 アセトニトリル：０．１％ ＴＦＡ含有水；温度：５０℃；グラジエント：３分かけて０％Ｂから１００％Ｂ、次いで１００％Ｂで０．５０分保持；流速：１ｍＬ/分；検出：ＭＳおよびＵＶ（２２０ｎｍ）

ＬＣ／ＭＳ方法Ｄ．カラム：BEH C18 2.1 x 50mm；移動相Ａ：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：０．０５％ ＴＦＡ含有アセトニトリル；温度：５０℃；グラジエント：１．０分かけて２－９８％Ｂ、次いで９８％Ｂで０．５０分保持；流速：０．８ｍＬ/分．検出：ＭＳおよびＵＶ（２２０ｎｍ）

ＬＣＭＳ方法Ｅ．カラム：Xbridge BEH C18 XP (50 x 2.1 mm)、2.5 μｍ；移動相Ａ：5：95 ＣＨ３ＣＮ：１０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ含有Ｈ_２Ｏ；移動相Ｂ：95：5 ＣＨ３ＣＮ：１０ ｍＭ ＮＨ４ＯＡｃ含有Ｈ_２Ｏ；温度：５０℃；グラジエント：３分かけて０－１００％Ｂ；流速：１．１ｍＬ/分）

合成－一般的な手順
一般的に、本明細書に開示される手順は、ピラゾロピリミジン環系の１Ｈまたは２Ｈ位置でアルキル化された位置異性体の混合物をもたらす（それぞれＮ１およびＮ２位置異性体とも呼ばれ、アルキル化された窒素に言及している）。簡略化のために、Ｎ２位置異性体は便宜上示されないが、初期に生成される混合物中に存在し、例えばプレパラティブＨＰＬＣにより、後で分離されるということが理解されるべきである。

位置異性体の混合物を合成の初期段階に分離し、１Ｈ位置異性体を用いて残りの合成段階を実行してもよく、あるいは、必要に応じて、位置異性体の混合物を用いて合成を進め、後期に分離を実行してもよい。

本発明の化合物は、有機合成の当業者に周知の多数の方法で調製され得る。本発明の化合物は、有機合成化学の技術分野で既知の合成法、または当業者により認識されるようなそのバリエーションとともに、以下に記載される方法を用いて合成され得る。好ましい方法には、以下に記載される方法が挙げられるが、これらに限らない。本明細書で引用される全ての参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明の化合物は、本セクションに記載される反応および技術を用いて調製されることがある。反応は、使用される試薬および物質に適切な溶媒中で行われ、影響をもたらされる変換に適する。同様に、以下に記載される合成法の説明において、溶媒の選択、反応雰囲気、反応温度、実験時間およびワークアップの手順などの、全ての提案される反応条件は、その反応にとって標準的な条件であるように選択されることが理解されるべきであり、このことは当業者により容易に認識されるべきである。分子の様々な部分に存在する官能性は、提案される試薬および反応に適合しなければならないということが、有機合成の当業者により理解される。反応条件に適合する置換基に対するそのような制限は、当業者にとって容易に明らかであろうし、別法が次に使用されなければならない。このことは、望ましい本発明の化合物を得るために、合成段階の順番を変更する判断、またはある特定のプロセススキームを別のものに代えて選択する判断を時には必要とするだろう。本分野において任意の合成経路を計画するにあたって、主に考慮すべきもう一つの点は、本発明に記載される化合物中に存在する反応性官能基の保護のために使用される保護基を賢明に選択することであるということが認識されるであろう。熟練の専門家に対して多数の選択肢を記載する、信頼できる記述は、Greene and Wuts (Protective Groups In Organic Synthesis, 第３版, Wiley and Sons, 1999)である。

式（Ｉ）の化合物は、以下のスキームに説明される方法を参照することにより調製されることがある。その中に示されるように、最終生成物は、式（Ｉ）と同じ構造式を有する化合物である。任意の式（Ｉ）の化合物は、適切な置換基を有する試薬の適当な選択によるスキームにより製造されることがあることが理解されるであろう。溶媒、温度、圧力、および他の反応条件は、当業者により容易に選択されることがある。出発物質は、市販されているか、または当業者により容易に調製される。化合物の構成要素は、本明細書のここまたは他の箇所に定義されるとおりである。
スキーム１

本発明に記載される化合物への一般的な経路は、スキームに図示され、Ｒ^１、Ｒ^５、Ｌ^１、Ｌ^２、Ｌ^３、Ｑ^１、Ｑ^２、ＸおよびＷ置換基は、予め本文中で定義されるか、または目的の最終置換基に変換され得る官能基である。Ｌは、ハライドなどの脱離基、トリフラート、チオエーテルまたはヘテロ環などの脱離基に容易に変換され得るＯＨである。スキーム１に示されるように、本発明の化合物を調製する一般的な手順は、置換ベンジル誘導体１から開始することを伴う。適当な試薬を用いて、１を適切に保護されたヒドラジンで置換することにより、官能性ベンジル誘導体２が得られる。例えば、２は、ＤＭＦなどの適当な溶媒中で、ＤＩＰＥＡまたはＫ_２ＣＯ_３などの多数の入手可能な塩基試薬のうちの一つを用いる、メチル 4－（ブロモメチル）－3－メトキシベンゾエートなどのベンジルハライドとtert-ブチルヒドラジンカルボキシレートなどの適切に保護されたヒドラジンの置換反応、続いて文献中で既知の標準的な条件を用いる保護基の除去により生じることがある。次に、環化をもたらす既知の条件を用いて、２を適当に置換されたアルケノエイト３と反応させることにより、適当に置換されたニトロピラゾール４が得られる。例えば、適当な塩基を用いて、ベンジルヒドラジン２をメチル（Ｚ）－4－（ジメチルアミノ）－3－ニトロ－2－オキソブト－3－エノエートと環化反応させることで、ニトロピラゾール４が得られる。ニトロピラゾール４の、アミノピラゾール５への還元は、Ｈ_２（ｇ）とＰｄ－ＣまたはＺｎ（ｓ）とＮＨ_４ＯＡｃなどの、文献中で既知の標準的な条件を用いて達成され得る。適当に置換された５を適切に官能化されたイミデート６と反応させ、ＮａＯＭｅ－ＭｅＯＨなどの塩基性条件下で、得られたグアニジノ中間体を環化することでヒドロキシピリミジン７が得られる。文献中で既知の標準的な条件を用いて、７を適切に置換されたアミン８とカップリングさせ、続いて必要に応じて脱保護することにより、化合物９が得られる。
スキーム２

スキーム２に図示されるように、Ｒ５における基は、ピラゾロピリミジン環を形成する前に、置換基を導入するように処理されることがある。適当な脱離基Ｌ４は、その後の化学反応に備えてアミノピラゾール１０中に導入され得る。例えば、ハロゲン基の導入は、ＮＢＳまたはＮＩＳなどの適当なハロゲン化試薬を用いて達成され得る。文献中に記載される条件下で、鈴木反応などの既知の炭素－炭素結合形成反応またはブッフバルト反応などの既知の炭素－ヘテロ原子反応を用いる、その後の１１の反応は、Ｒ^５におけるアルキル、シクロアルキル、アリールまたはヘテロアリール置換基の導入に使用され得る。
スキーム３

ピラゾロピリミジン９の代替の合成法がスキーム３および４に示される。スキーム１および２に記載される合成経路を用いて、Ｑ^４にプレースホルダー官能基を有する化合物１２が調製され得る。標準的な文献条件を用いてアミン８とカップリングした後、Ｑ^４は、当業者にとって利用可能な様々な手段を用いてＷに変換され得る。例えば、Ｑ^４がエステルの場合、ＬｉＡｌＨ_４またはＬｉＢＨ_４などの標準的な条件を用いて第一級アルコールに還元され、様々な求核試薬によって置換され得る、－Ｃｌ、－Ｂｒまたは－ＯＴｓなどの適当な脱離基に変換され得る。次に、必要に応じて脱保護することにより、ピラゾロピリジミジン９（pyrazolopyridimidine 9）が得られる。別のバリエーションにおいて、スキーム４の化合物１２に示されるようなプレースホルダー官能基Ｑ^４は、アミン８とカップリングする前に、化合物１４にあるように、Ｗに変換され得る。
スキーム４

合成－具体例
上記の内容をさらに説明するために、以下の限定されない代表的な合成スキームが含まれる。請求項の範囲内にあるこれらの実施例のバリエーションは、当業者の範囲内であり、本開示の範囲内にあると見なされる。読者は、本開示を提供された、関連技術に熟練した当業者であれば、網羅的な実施例がなくとも、本明細書に開示される化合物を調製し、使用することができるであろうということを認識するであろう。

１００以上の番号がつけられた化合物についての解析データは、表Ａで見つかる。
実施例１－中間体Ａ

中間体Ａは、本開示の化合物の合成に有用である。

ステップ１：tert-ブチルヒドラジンカルボキシレート（12.75 g、96 mmol）およびＤＩＰＥＡのＤＭＦ（24 mL）溶液を、ＲＴで、滴下漏斗により、１時間かけて、２４ｍＬのＤＭＦ中、メチル 4－（ブロモメチル）－3－メトキシベンゾエート（5 g、19.30 mmol）を滴下して処理した。反応混合物をＲＴで終夜撹拌した。ＥｔＯＡｃ（135 mL）およびＨ_２Ｏ（75 mL）を添加し、二相混合物を３０分間撹拌した。反応混合物を分液漏斗に注ぎ、水層を除去した。有機層を追加量のＨ_２Ｏ（75 mL）で２回、１０％ ＬｉＣｌ溶液（75 mL）で２回洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。カラムクロマトグラフィー（Isco、220 g ＳｉＯ_２、０％ ＣＨ_２Ｃｌ_２(５分)、次いで１５％ ＥｔＯＡｃ－ＣＨ_２Ｃｌ_２）により、tert－ブチル 2－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）ヒドラジン－1－カルボキシレートを透明な油（3.85 g）として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ 7.64（dd，J=7.7，1.5 Hz，1H），7.56（d，J=1.5 Hz，1H），7.37（d，J=7.7 Hz，1H），6.08－5.87（m，1H），4.07（s，2H），3.94（d，J=4.6 Hz，6H），1.50－1.40（m，9H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３１１．２；ＬＣ ＲＴ＝０．８０分（方法Ａ）

ステップ２：tert－ブチル 2－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）ヒドラジン－1－カルボキシレート（25.4 g、82 mmol）を、ＲＴでＭｅＯＨ（164 mL）中に溶解した。４Ｎ ＨＣｌ－ジオキサン（123 ml、59.5 mmol）を添加し、反応物をＲＴで終夜撹拌した。白色沈殿物を濾過により回収し、乾燥させてメチル 4－（ヒドラジニルメチル）－3－メトキシベンゾエート，２・ＨＣｌ（20 g）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 9.12（br s），7.62－7.55（m，1H），7.53－7.47（m，2H），4.10（s，2H），3.88（s，3H），3.87（s，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ２１１．１；ＬＣ ＲＴ＝０．５１分（方法Ａ）

ステップ３：（E）－N,N－ジメチル－2－ニトロエテン－1－アミン（46.4 g、400 mmol）およびピリジン（420 ml、5195 mmol）のＣＨ_２Ｃｌ_２（799 ml）溶液を－１０℃に冷却し、エチル 2－クロロ－2－オキソアセテート（51.4 ml、460 mmol）でゆっくりと処理した。２５℃に温まるまで、反応混合物を２時間にわたってそのままにし、終夜撹拌した。ＣＨ_２Ｃｌ_２を回転蒸発により除去し、メチル 4－（ヒドラジニルメチル）－3－メトキシベンゾエート ジヒドロクロライド（31.7 g、112 mmol）を反応混合物に添加した。溶液を２時間、ＲＴで撹拌し、溶媒を真空下で除去した。残留物を水、１Ｎ ＨＣｌ水溶液で洗浄し、ＥｔＯＡｃ（3x）で抽出した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２中に溶解し、ショートシリカゲルカラムに通し、エタノールから再結晶して、エチル 1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－4－ニトロ－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（29.4 g）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ 8.06（s，1H），7.64（dd，J=7.9，1.5 Hz，1H），7.56（d，J=1.5 Hz，1H），7.13（d，J=7.8 Hz，1H），5.53（s，2H），4.45（q，J=7.2 Hz，2H），3.94（s，3H），3.88（s，3H），1.37（t，J=7.2 Hz，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｎａ］^＋ ３８６．０；ＬＣ ＲＴ＝０．９８分（方法Ａ）

ステップ４：エチル 4－アミノ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（3.04 g、9.12 mmol、収率８６％）およびＰｄ－Ｃ（1.131 g、0.531 mmol）を、ＥｔＯＡｃ/ＭｅＯＨ（1:1）（152 mL）中に懸濁した。反応フラスコを真空下で排気し、Ｈ_２（3X）でパージし、Ｈ_２（g）のバルーン圧の下で攪拌した。５時間後、反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（商標）に通して濾過し、未使用のＰｄ－Ｃ（1.131 g、0.531 mmol）を添加した。反応フラスコを真空下で排気し、Ｈ_２（3X）でパージし、１６時間、Ｈ_２（g）のバルーン圧の下で攪拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（商標）に通して濾過し、濃縮し、真空乾燥させ、エチル 4－アミノ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（3.04 g）をクリーム色の粉末として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 7.52－7.49（m，1H），7.47（dd，J=7.9，1.5 Hz，1H），7.19（s，1H），6.40（d，J=7.8 Hz，1H），5.54（s，2H），5.10（s，1H），4.15（q，J=7.1 Hz，2H），3.91（s，3H），3.84（s，3H），1.14（t，J=7.1 Hz，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３３４．１；ＬＣ/ＲＴ＝０．８５分（方法Ｂ）

ステップ５：エチル 4－アミノ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（1.65 g、4.95 mmol）をＣＨＣｌ_３（49.5 ml）中に溶解し、０℃に冷却した。ＮＢＳ（0.925 g、5.20 mmol）を添加した。１５分後、反応物をＣＨＣｌ_３で希釈し、１０％ チオ硫酸ナトリウム水溶液とともに１０分間勢いよく攪拌した。有機相を分離し、Ｈ_２Ｏで洗浄し、ＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（80g ＳｉＯ_２、０から５０％ ＥｔＯＡｃ－ヘキサン グラジエント溶出）により精製し、エチル 4－アミノ－3－ブロモ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（1.32 g）を白色固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 7.61－7.41（m，2H），6.55（d，J=8.3 Hz，1H），5.56（s，2H），5.02（s，2H），4.20（q，J=7.1 Hz，2H），3.90（s，3H），3.85（s，3H），1.15（t，J=7.1 Hz，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４１２．２；ＬＣ ＲＴ＝１．０２分（方法Ａ）

ステップ６：エチル 4－アミノ－3－ブロモ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（741.2 mg、収率６７．１％）、Ｋ_２ＣＯ_３（1.098 g、7.94 mmol）およびＴＭＢ（ＴＨＦ中、３．５Ｍ）（1.816 ml、6.36 mmol）をジオキサン（26.5 ml）：水（5.30 ml）（5:1）中に懸濁した。Ｎ_２気流で反応混合物を５分間通気した後、ＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）－ＣＨ_２Ｃｌ_２付加物（0.052 g、0.064 mmol）を添加した。さらに４分間攪拌し続けた後、反応フラスコを密閉し、９０℃に加熱した。３時間後、追加量のＴＭＢ（ＴＨＦ中、３．５Ｍ；0.908 mL、3.18 mmoL）およびＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）－ＣＨ_２Ｃｌ_２付加物（0.052 g、0.064 mmol）を添加した。反応混合物を１００℃で１６時間撹拌した。冷却した反応混合物を１００ｍＬのＥｔＯＡｃで希釈し、ＣＥＬＩＴＥ（商標）に通して濾過し、追加量のＥｔＯＡｃで洗浄した。粗生成物を4 g ＣＥＬＩＴＥ（商標）上で濃縮した。カラムクロマトグラフィー（80g ＳｉＯ_２、０から３０％ ＥｔＯＡｃ－ＣＨ_２Ｃｌ_２ グラジエント溶出）により、エチル 4－アミノ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（741 mg）をクリーム色の固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 7.49（d，J=1.5 Hz，1H），7.46（dd，J=7.9，1.5 Hz，1H），6.40（d，J=7.8 Hz，1H），5.48（s，2H），4.94－4.86（m，2H），4.14（q，J=7.0 Hz，2H），3.90（s，3H），3.84（s，3H），2.10（s，3H），1.15－1.08（m，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ３４８．２；ＬＣ/ＲＴ＝０．８９分（方法Ａ）

ステップ７：エチル 4－アミノ－1－（2－メトキシ－4－（メトキシカルボニル）ベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾール－5－カルボキシレート（742 mg、2.136 mmol）をＭｅＯＨ（10.800 mL）中に懸濁し、勢いよく攪拌しながら穏やかに加熱し、物質を可溶化した。1,3－ビス－（メトキシカルボニル）－2－メチル－2－チオシュードウレア（661 mg、3.20 mmol）、続いてＡｃＯＨ（0.611 mL、10.68 mmol）を添加した。反応混合物をＲＴで１６時間撹拌した。追加量のＡｃＯＨを添加（0.049 mL、0.854 mmol）し、反応物をＲＴでさらに７２時間攪拌した後、ＮａＯＭｅ（ＭｅＯＨ中、２５％ ｗｔ）（5.69 mL、25.6 mmol）を添加した。３時間撹拌した後、反応混合物をＡｃＯＨで再び酸性化した。生成物を濾過により回収し、１０分間風乾し、実験用乾燥機内で完全に乾燥させ、メチル 4－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（中間体Ａ）（722.0 mg）をクリーム色の固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 11.58－11.17（m，2H），7.51（d，J=1.4 Hz，1H），7.49－7.42（m，1H），6.67（d，J=7.9 Hz，1H），5.67（s，2H），3.90（s，3H），3.84（s，3H），3.71（s，3H），2.31（s，3H）
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４０２．３；ＬＣ ＲＴ＝０．８６分（方法Ａ）
実施例２－化合物１１２

ステップ１：メチル 4－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（中間体Ａ、200 mg、0.498 mmol）およびＢＯＰ（331 mg、0.747 mmol）のＤＭＦ（2491 μl）懸濁液を、ＲＴで、（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メタンアミン（72.6 mg、0.648 mmol）およびＤＢＵ（３当量）（225 μl、1.495 mmol）で処理した。反応混合物を４０℃に加熱した。１５分後、追加量のＤＢＵ（２当量；150 μL、0.997 mmol）を添加した。反応混合物を４０℃で１６時間撹拌した。ＲＴに冷ました後、反応混合物をＥｔＯＡｃおよび半飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液の間で分配した。有機相を分離し、水相をＥｔＯＡｃ（2x）で抽出した。合わせた有機層を１０％ ＬｉＣｌ水溶液およびブラインで連続的に洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。カラムクロマトグラフィー（12g ＳｉＯ_２、０から１０％ ＣＨ_３ＯＨ－ＣＨ_２Ｃｌ_２ グラジエント溶出）により、メチル 3－メトキシ－4－（（5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）ベンゾエート（201.1 mg）を得た。
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４９６．２；ＬＣ ＲＴ＝０．７９分（方法Ａ）

ステップ２：メチル 3－メトキシ－4－（（5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）ベンゾエート（200 mg、0.404 mmol）をＴＨＦ中にＲＴで懸濁し、超音波処理して溶解を補助した。ＬｉＡｌＨ_４（ＴＨＦ中、１Ｍ；807 μL、0.807 mmol）を１０分かけて滴下した。２０分後、反応物をＭｅＯＨでクエンチし、ＥｔＯＡｃおよびロッシェル塩の間で分配した。二相混合物をＲＴで２時間撹拌した。水層を分離し、ＥｔＯＡｃ（1X）で再抽出した。合わせた有機層をブラインで洗浄し、濃縮した。カラムクロマトグラフィー（12g ＳｉＯ_２、０から１０％ ＣＨ_３ＯＨ－ＣＨ_２Ｃｌ_２ グラジエント溶出）により、メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（73 mg）を得た。
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４６８．４；ＬＣ ＲＴ＝０．６２分（方法Ａ）

ステップ３：メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（73 mg、0.156 mmol）をＣＨ_２Ｃｌ_２（1562 μL）中に、ＲＴで溶解した。ＳＯＣｌ_２（57.0 μl、0.781 mmol）を添加し、反応物を２０分間撹拌した。濃縮により、メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（80 mg）を十分な純度で得て、それ以上は精製せずに使用した。
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４８６．１；ＬＣ ＲＴ＝０．８３分（方法Ａ）

ステップ４：メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（20 mg、0.041 mmol）のアセトニトリル（412 μL）ストック溶液を、テトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミン（12.49 mg、0.123 mmol）で処理した。反応物を４０℃で終夜撹拌した。ＲＴに冷ました後、反応混合物を濃縮し、ジオキサン（400 μL）中に再溶解し、１０Ｍ ＮａＯＨ（82 μL、0.823 mmol）で処理した。反応混合物を５時間、８０℃に加熱した。ＲＴに冷ました後、反応物をＡｃＯＨ（42 μL）で中和し、濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：３％Ｂで０分保持、２０分かけて３－４３％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳおよびＵＶシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１１２（5.1 mg）を得た。

化合物１１３を類似的に調製した：粗生成物をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：２％Ｂで０分保持、２４分かけて２－４２％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１１３（8.6 mg）を得た。
実施例３－化合物１０１

ステップ１：メチル 4－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（US 2020/0038403 A1；300 mg、0.774 mmol）のＤＭＳＯ（3.9 mL）溶液を、（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メタンアミン（174 mg、1.55 mmol）、ＢＯＰ（411 mg、0.929 mmol）およびＤＢＵ（233 μl、1.549 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏ（3x）で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、メチル 3－メトキシ－4－（（5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）ベンゾエート（353 mg、収率95％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 9.80（s，1H），7.99－7.93（m，1H），7.77（t，J=5.9 Hz，1H），7.49（d，J=1.5 Hz，1H），7.45（dd，J=7.8、1.5 Hz，1H），6.62（d，J=7.9 Hz，1H），6.10（d，J=0.9 Hz，1H），5.80（s，2H），4.73（d，J=5.9 Hz，2H），3.84（s，3H），3.82（s，3H），3.64（s，3H），2.31（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：0.67 min。ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ 482.3 （方法Ａ）

ステップ２：メチル 3－メトキシ－4－（（5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）ベンゾエート（190 mg、0.395 mmol）のＴＨＦ（10 mL）溶液を０℃に冷却し、ＬｉＡｌＨ_４（ＴＨＦ中、１Ｍ、691 μL、0.691 mmol）で処理した。反応混合物を１５分間０℃で撹拌し、ＭｅＯＨおよびロッシェル塩（飽和水溶液）でクエンチし、ＲＴで１時間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（3x）で抽出した。合わせた有機層をＨ_２Ｏで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（160 mg、収率89％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ６）δ 9.77－9.75（m，1H），7.90－7.88（m，1H），7.72（br t，J=5.7 Hz，1H），6.94（s，1H），6.76（d，J=7.5 Hz，1H），6.61－6.57（m，1H），6.15（d，J=0.8 Hz，1H），5.68（s，2H），5.16（t，J=5.7 Hz，1H），4.73（br d，J=5.8 Hz，2H），4.44（d，J=5.6 Hz，2H），3.70（s，3H），3.62（s，3H），2.33（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．５８分 ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４５４．３（方法Ａ）

ステップ３：メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（22 mg、0.048 mmol）のジオキサン（500 μL）溶液をＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、200 μL、2.0 mmol）で処理し、７５℃に加熱した。５時間後、反応混合物をＲＴに冷まし、ＨＯＡｃ（114 μL、2.0 mmol）で中和し、窒素気流下で濃縮した。残留物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過した。粗製物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル:１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：９％Ｂで０分保持、２０分かけて９－４９％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０１（3.5 mg、収率８％）を得た。
実施例４－化合物１０２

ＳＯＣｌ_２（24 μL、0.33 mmol）を、（4－（（5－アミノ－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシフェニル）メタノール（26.3 mg、0.067 mmol）の、ＲＴのＴＨＦ（0.7 mL）溶液に添加した。３０分間撹拌した後、反応混合物を減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に再溶解し、減圧濃縮した。残留物をＤＭＦ（0.7 mL）中に溶解し、シクロブタンアミン（25.3 mg、0.355 mmol）で処理し、ＲＴで３時間撹拌した。温度を７０℃に上昇させた。反応混合物をさらに２時間攪拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過した。粗製物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル: １０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：２％Ｂで０分保持、２０分かけて２－４２％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、残留物を得て、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２２分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０２をビスＴＦＡ塩（4.0 mg、１１％）として得た。
実施例５－化合物１０３

ステップ１：メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（159 mg、0.35 mmol）のＤＣＭ（3.5 mL）溶液を、ＳＯＣｌ_２（128 μL、1.76 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に再溶解し、減圧濃縮して、メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（182 mg、１００％）を得た。
ＬＣ ＲＴ：０．８０分 ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４７２．３（方法Ａ）

ステップ２：メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチルイソキサゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（25 mg、0.053 mmol）のＤＭＦ（1.1 mL）溶液を、テトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミン（26.8 mg、0.265 mmol）で処理した。反応混合物を７０℃で２時間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をジオキサン（0.5 mL）中に、ＲＴで再溶解し、ＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、27 μl、0.27 mmol）で処理し、４．５時間、８０℃に加熱した。反応混合物をＲＴで、ＨＯＡｃ（15 μl、0.27 mmol）で中和し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２０分かけて０－３０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０３をビスＴＦＡ塩（20.2 mg、５４％）として得た。

以下の化合物を類似的に調製した：化合物１０４、化合物１０５、化合物１０６、化合物１１０、および化合物１１１。
実施例６－化合物１０７

メチル （1－（4－（（シクロブチルアミノ）メチル）－2－メトキシベンジル）－7－ヒドロキシ－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（US 2020/0038403 A1；30 mg、0.073 mmol）のＤＭＦ（0.7 mL）溶液を、ＢＯＰ（57.9 mg、0.131 mmol）、（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン・ＨＣｌ（54.4 mg、0.364 mmol）およびＤＢＵ（164 μL、1.091 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液およびＨ_２Ｏで洗浄した。有機層を減圧濃縮した。残留物をジオキサン（0.7 mL）中に溶解し、ＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、0.20 mL、2.0 mmol）で処理し、７５℃に加熱した。４時間後、反応混合物をＲＴに冷まし、ＨＯＡｃ（0.12 mL、2.0 mmol）で中和し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦおよびＨ_２Ｏ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２０分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０７（8.6 mg、収率２６％）を得た。
実施例７－化合物１１４

ステップ１：メチル （7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（US 2020/0038403 A1、図７、化合物６４；700 mg、1.95 mmol）のＤＭＳＯ（9.7 mL）溶液を、（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン・ＨＣｌ（379 mg、2.53 mmol）、ＢＯＰ（129 mg、2.92 mmol）およびＤＢＵ（1.0 mL、6.8 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、Ｈ_２Ｏで洗浄した。有機層をＨ_２Ｏ（6x）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ/ＭｅＯＨ中に溶解し、ＣＥＬＩＴＥ（商標）上に吸収させ、カラムクロマトグラフィー（100g C18 gold column；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル:０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル:０．０５％ ＴＦＡ含有水；流速：６０ｍＬ/分、１０－５０％ グラジエント）により精製した。精製した生成物をＤＣＭ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（372 mg、収率４２％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 9.69－9.66（m，1H），7.89（s，1H），7.76（t，J=5.8 Hz，1H），6.95（s，1H），6.81－6.77（m，1H），6.76－6.70（m，1H），5.69（s，2H），5.17（t，J=5.7 Hz，1H），4.89（d，J=5.7 Hz，2H），4.45（d，J=5.8 Hz，2H），3.77（s，3H），3.60（s，3H），2.56（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．５６分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋ ４５５．３（方法Ａ）

ステップ２：メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（372 mg、0.818 mmol）のＤＣＭ（8.2 mL）溶液をＳＯＣｌ_２（179 μL、2.46 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に再溶解し、減圧濃縮して、メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（387 mg、１００％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 11.82－11.60（m，1H），9.40－9.21（m，1H），8.12－8.08（m，1H），7.10（s，1H），7.04－6.95（m，2H），5.81（s，2H），5.02（br d，J=5.3 Hz，2H），4.74（s，2H），3.80（s，3H），3.75（s，3H），2.60（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．７０分 ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４７３．３（方法Ａ）

ステップ３：メチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（34.7 mg、0.073 mmol）のＤＭＦ（1.5 mL）溶液を、テトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミン（37.1 mg、0.367 mmol）で処理した。反応物を７５℃で１時間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をジオキサン（1.0 mL）およびＭｅＯＨ（0.2 mL）中に溶解し、ＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、0.2 mL、2.0 mmol）で処理し、７５℃で２時間加熱した。ＲＴに冷ました後、反応混合物をＨＯＡｃ（0.12 mL、2.0 mmol）で中和し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦおよびＨ_２Ｏ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、３０分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１１４（7.5 mg、１８％）を得た。

以下の化合物を類似的に調製した：化合物１１５、化合物１１７、化合物１２０、化合物１２１、化合物１２２、および化合物１２３。
実施例８－化合物１１６

メチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（19 mg、0.043 mmol）のジオキサン（0.4 mL）およびＭｅＯＨ（0.2 mL）溶液を、ＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、50 μL、0.5 mmol）で処理し、５０℃に加熱した。３０分後、反応混合物をＲＴに冷まし、ＨＯＡｃ（30 μL、0.5 mmol）で中和し、減圧濃縮した。残留物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過した。粗製物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：２％Ｂで０分保持、２５分かけて２－４２％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１１６（3.9 mg、収率２２％）を得た。
実施例９－化合物１０９ａ

メチル （7－ヒドロキシ－1－（2－メトキシ－4－（（（テトラヒドロ－2H－ピラン－4－イル）アミノ）メチル）ベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（75 mg、0.170 mmol、US 2020/0038403 A1）のＤＭＳＯ（1.5 mL）溶液に、（S）－3－アミノ－1－シクロプロピルプロパン－1－オール（39.0 mg、0.339 mmol）、ＤＢＵ（0.077 mL、0.509 mmol）、およびＢＯＰ（150 mg、0.339 mmol）を添加した；反応混合物を７０℃で２時間加熱し、５Ｍ ＮａＯＨ（0.136 mL、0.678 mmol）で処理し、７０℃で２時間加熱した。反応混合物を２５℃に冷まし、粗製物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：３％Ｂで０分保持、３０分かけて３－４３％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させた。物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２５分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させた。物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：１％Ｂで０分保持、２５分かけて１－４１％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０９ａ（2.3 mg、4.69 μmol、収率2.77％）を得た。

化合物１０９ｂを類似的に調製した。
実施例１０－化合物１０８

ステップ１．メチル （7－ヒドロキシ－1－（2－メトキシ－4－（（（テトラヒドロ－2H－ピラン－4－イル）アミノ）メチル）ベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（90 mg、0.203 mmol、US 2020/0038403 A1）、（S）－2－アミノ－3－シクロプロピルプロパン－1－オール ヒドロクロライド（93 mg、0.610 mmol）およびＢＯＰ（135 mg、0.305 mmol）のＤＭＦ（2034 μl）溶液に、ＤＢＵ（153 μl、1.017 mmol）を添加した。反応混合物をＲＴで終夜、水（2 mL、０．２％ ＴＦＡ）で希釈し、Accq Prep 20x150 mm Xbridge column（６回注入）：２０％ アセトニトリル/水（０．１％ ＴＦＡ）で精製し、１２分で回収したフラクションを凍結乾燥して、メチル （S）－（7－（（1－シクロプロピル－3－ヒドロキシプロパン－2－イル）アミノ）－1－（2－メトキシ－4－（（（テトラヒドロ－2H－ピラン－4－イル）アミノ）メチル）ベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（65 mg、収率59.2％）を白色固体として得た。
ＬＣＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５３９．３

ステップ２．メチル （S）－（7－（（1－シクロプロピル－3－ヒドロキシプロパン－2－イル）アミノ）－1－（2－メトキシ－4－（（（テトラヒドロ－2H－ピラン－4－イル）アミノ）メチル）ベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（167 mg、0.309 mmol）をジオキサン（5158 μl）中に溶解し、ＮａＯＨ（619 μl、3.09 mmol）で処理し、８０℃で終夜加熱した。反応混合物をＨＣｌで中和し、濃縮した。残留物をＤＭＦ（4 mL）中に溶解し、濾過した。粗製物質をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２０分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１０８（60 mg、収率４０％）を得た。

化合物１２５を類似的に調製した。
実施例１１－化合物１２６

ステップ１．ＤＭＦ（1 mL）中、メチル 4－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（50 mg、0.129 mmol）に、ＮＢＳ（76 mg、0.427 mmol）を添加した。反応混合物を４０℃で終夜撹拌し、２５℃に冷まし、ＭｅＯＨで希釈し、濾過して、メチル 4－（（3－ブロモ－7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（40 mg、0.082 mmol、収率63.1％）を得た。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ４６８．２ ［Ｍ＋２Ｈ］＋
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 11.86－11.17（m，2H），7.51（s，2H），7.02－6.74（m，1H），5.74（s，2H），3.86（d，J=9.7 Hz，6H），3.76（s，3H）

ステップ２．ＬｉＡｌＨ_４（ＴＨＦ中、１Ｍ；6 mL、6.00 mmol）を、メチル 4－（（3－ブロモ－7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（1 g、2.145 mmol）のＴＨＦ（20 mL）溶液に、０℃（氷浴）でゆっくりと添加した。反応混合物をＲＴで３０分間撹拌した。０℃（氷浴）で飽和Ｎａ_２ＳＯ_４（5.0 ml）をゆっくりと添加することにより、反応物をクエンチした。混合物をＲＴで３０分間撹拌した。有機溶媒をロータリーエバポレーターで除去し、水相を凍結乾燥させた。凍結乾燥物質をＭｅＯＨ（100ml）で希釈し、濾過（3x 10 mL ＭｅＯＨで洗浄）した。溶媒を除去し、物質をシリカゲル（ＤＣＭ－ＭｅＯＨ ０－３０％）で精製して、メチル （3－ブロモ－7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（330 mg、0.753 mmol、収率３０％）を得た。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ４４０．２［Ｍ＋２Ｈ］＋
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 7.05－6.95（m，1H），6.87－6.76（m，2H），5.66（s，2H），5.23－5.14（m，1H），4.52－4.43（m，2H），3.82－3.72（m，6H）

ステップ３．マイクロウェーブバイアルに、メチル （3－ブロモ－7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（200 mg、0.456 mmol）（純度約８０％でＮ２位置異性体が混入している）、ＴＭＢ（0.255 ml、1.825 mmol）、[1,1'－ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン]ジクロロパラジウム（ＩＩ）（100 mg、0.137 mmol）、Ｋ_２ＣＯ_３（442 mg、3.19 mmol）、ジオキサン（8 mL）および水（2 mL）を入れた。反応混合物を電子レンジで、１２０℃で１時間加熱し、ＥｔＯＡｃで希釈し、水で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させた。溶媒を除去し、物質をシリカゲル（ドライロード）ＤＣＭ－ＭｅＯＨ ０－５０％で精製して、5－アミノ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（49 mg、0.093 mmol、収率20.43％）を得た。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ３１６．３［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ４．２０ｍＬ バイアルに、5－アミノ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（50 mg、0.159 mmol）およびＤＣＭ（2 mL）を添加し、続いてＲＴでＳＯＣｌ_２（.1 mL、1.370 mmol）を添加した。反応混合物を２５℃で攪拌し、減圧濃縮し、5－アミノ－1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（52.9 mg、0.158 mmol、収率100％）を得て、精製せずに使用した。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ３３５．７［Ｍ＋２Ｈ］^＋

ステップ５．ＤＭＦ（2 mL）中、5－アミノ－1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（52 mg、0.156 mmol）に、2－（ピペラジン－1－イル）エタン－1－オール（.1 mL、0.815 mmol）を添加した。反応混合物を２５℃で終夜攪拌し、溶媒を除去した。物質をシリカゲル（ドライロード）ＤＣＭ－ＭｅＯＨ ０－３０％で精製し、5－アミノ－1－（4－（（4－（2－ヒドロキシエチル）ピペラジン－1－イル）メチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（53 mg、0.095 mmol、収率61.3％）を得た。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ４２８．３［Ｍ＋Ｈ］＋

ステップ６．5－アミノ－1－（4－（（4－（2－ヒドロキシエチル）ピペラジン－1－イル）メチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（53 mg、0.124 mmol）および（S）－3－アミノ－1－シクロプロピルプロパン－1－オール（30 mg、0.260 mmol）のＤＭＳＯ（1.5 mL）溶液に、ＤＢＵ（0.075 mL、0.496 mmol）およびＢＯＰ（110 mg、0.248 mmol）を添加した。反応混合物を７０℃で１時間加熱した。生成物をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．１％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．１％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２０分かけて０－４０％Ｂ、次いで３０ １００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳおよびＵＶシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１２６を得た。
実施例１２－化合物１１８

ステップ１．メチル 4－（（5－（（tert－ブトキシカルボニル）アミノ）－7－ヒドロキシ－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（685 mg、1.59 mmol；US 2020/0038403；図８、化合物７１）のＴＨＦ（16 mL）溶液を０℃に冷却し、ＬｉＡｌＨ_４（ＴＨＦ中、１Ｍ、2.8 mL、2.8 mmol）で処理した。反応混合物を１５分間、０℃で撹拌し、Ｈ_２Ｏおよびロッシェル塩（飽和水溶液）でクエンチし、ＲＴで３時間撹拌した。有機層をＣＥＬＩＴＥ（商標）上に吸収させ、カラムクロマトグラフィー（24g ＳｉＯ_２；０から２０％ ＭｅＯＨ－ＤＣＭ グラジエント溶出）により精製し、tert－ブチル （7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（460 mg、収率７２％）を得た。
^１Ｈ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 11.69－11.43（m，1H），10.95－10.62（m，1H），7.87－7.79（m，1H），6.97（s，1H），6.77（d，J=7.7 Hz，1H），6.59（d，J=7.8 Hz，1H），5.66（s，2H），5.16（t，J=5.8 Hz，1H），4.45（d，J=5.8 Hz，2H），3.79（s，3H），1.49（s，9H）
ＬＣ ＲＴ：０．７７分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４０２．２（方法Ｄ）

ステップ２．tert－ブチル （7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（460 mg、1.15 mmol）のＤＭＳＯ（5.7 mL）溶液を、（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン・ＨＣｌ（223 mg、1.49 mmol）、ＢＯＰ（760 mg、1.72 mmol）およびＤＢＵ（0.69 mL、4.6 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏ（2x）で洗浄した。有機層をＣＥＬＩＴＥ（商標）上に吸収させ、カラムクロマトグラフィー（100g C18 gold column；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル:０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル:０．０５％ ＴＦＡ含有水；流速：６０ｍＬ/分、３０－５０％ グラジエント）により精製した。精製した生成物をＤＣＭ中に溶解し、飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、tert－ブチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（190 mg、収率３３％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 9.24－9.15（m，1H），7.87（s，1H），7.72（t，J=5.8 Hz，1H），6.95（s，1H），6.82－6.75（m，1H），6.73－6.68（m，1H），5.68（s，2H），5.17（t，J=5.7 Hz，1H），4.87（d，J=5.7 Hz，2H），4.44（d，J=5.7 Hz，2H），3.76（s，3H），2.55（s，3H），1.43（s，9H）
ＬＣ ＲＴ：０．７５分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４９７．２（方法Ｄ）

ステップ３．tert－ブチル （1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（161 mg、0.320 mmol）のＤＣＭ（0.65 mL）溶液をＳＯＣｌ_２（71 μL、0.97 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に溶解し、減圧濃縮して、tert－ブチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（166 mg、１００％）を得た。
ＬＣ ＲＴ：０．８９分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５１５．２（方法Ｄ）

ステップ４．tert－ブチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（33 mg、0.064 mmol）のＤＭＦ（1.3 mL）溶液を、ＤＩＥＡ（113 μL、0.645 mmol）および3－メトキシアゼチジン・ＨＣｌ（23.9 mg、0.193 mmol）で処理した。反応混合物を７０℃で１時間撹拌し、Ｎ_２気流下で乾燥させ、続いて減圧下でさらに乾燥させた。残留物をジオキサン（0.6 mL）中に溶解し、ＨＣｌ（ジオキサン中、４Ｍ、0.82 mL、3.3 mmol）で処理し、４０℃で３０分間撹拌し、濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル:１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：２％Ｂで０分保持、３０分かけて２－４２％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させた。単離した生成物をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２５分かけて０－３０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１１８（9.4 mg、２１％）を得た。

化合物１１９を類似的に調製した。
実施例１３－化合物１２７

ステップ１．tert－ブチル （7－ヒドロキシ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（200 mg、0.498 mmol）のＤＭＳＯ（2.5 mL）溶液を、（5－シクロプロピル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン・ＨＣｌ（175 mg、0.996 mmol）、ＢＯＰ（331 mg、0.747 mmol）およびＤＢＵ（0.30 mL、2.0 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏ（2x）で洗浄した。有機層を減圧濃縮した。粗生成物をＭｅＯＨ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＨＰＬＣにより、以下の条件で精製した：カラム：Axia C18 100 mm x 30 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：10:90 メタノール：０．１％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：90:10 ＭｅＯＨ：０．１％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：４０％Ｂで０分保持、１０分かけて４０－５５％Ｂ、次いで５５％Ｂで５分保持；流速：４０ｍＬ/分；２２０ｎｍでＵＶ検出；カラム温度：２５℃。精製した生成物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で中和し、ＤＣＭで洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、tert－ブチル （7－（（（5－シクロプロピル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（93.2 mg、収率３６％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 9.25－9.17（m，1H），7.88（s，1H），7.71（t，J=5.7 Hz，1H），6.96（s，1H），6.84－6.76（m，1H），6.75－6.67（m，1H），5.70－5.67（m，2H），5.17（t，J=5.7 Hz，1H），4.84（d，J=4.6 Hz，2H），4.45（d，J=5.8 Hz，2H），3.77（s，3H），2.35－2.27（m，1H），1.44（s，9H），1.25－1.20（m，2H），1.08－1.03（m，2H）
ＬＣ ＲＴ：０．７７分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５２３．４（方法Ｄ）

ステップ２．tert－ブチル （7－（（（5－シクロプロピル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（93.2 mg、0.178 mmol）のＤＣＭ（3.6 mL）溶液をＳＯＣｌ_２（39 μL、0.54 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１０分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に溶解し、減圧濃縮して、tert－ブチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－シクロプロピル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（95.4 mg、収率９９％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 11.70－11.19（m，1H），9.46－9.20（m，1H），8.10－8.06（m，1H），7.10（s，1H），6.97（s，2H），5.79（s，2H），4.97（br d，J=5.2 Hz，2H），4.73（s，2H），3.74（s，3H），2.40－2.30（m，1H），1.53（s，9H），1.30－1.22（m，2H），1.10－1.04（m，2H）
ＬＣ ＲＴ：０．８９分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝５４１．３（方法Ｄ）

ステップ３．tert－ブチル （1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－7－（（（5－シクロプロピル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（30 mg、0.055 mmol）のＤＭＦ（1.1 mL）溶液を、ＤＩＥＡ（77 μL、0.44 mmol）およびテトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミン（22.4 mg、0.222 mmol）で処理した。反応混合物を６０℃で１時間撹拌し、次に温度を６５℃に上昇させ、１時間攪拌し続けた。反応混合物をＮ_２気流下で乾燥させ、続いて減圧下でさらに乾燥させた。残留物をジオキサン（1.1 mL）中に溶解し、ＨＣｌ（ジオキサン中、４Ｍ、0.75 mL、3 mmol）で処理し、４０℃で９０分間撹拌し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：２％Ｂで０分保持、３０分かけて２－４２％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させた。単離した生成物をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：５％Ｂで０分保持、２０分かけて５－７０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１２７（13.6 mg、４７％）を得た。解析データについては表Ａを参照されたい。

化合物１２８および化合物１２９を類似的に調製した。
実施例１４－化合物１３０

ステップ１．エチル 5－メトキシ－6－メチルニコチネート（1.32 g、6.77 mmol）のＣＣｌ_４（19 mL）溶液をＮＢＳ（1.44 g、8.12 mmol）およびＡＩＢＮ（0.22 g、1.4 mmol）で処理した。反応混合物を６０℃で４０時間攪拌し、飽和Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３水溶液で洗浄した。有機層を減圧濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（40g ＳｉＯ_２；０から２５％ ＥｔＯＡｃ－ヘキサン グラジエント溶出）により精製して、エチル 6－（ブロモメチル）－5－メトキシニコチネート（1.20 g、4.38 mmol、収率６５％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，クロロホルム－ｄ）δ 8.83－8.75（m，1H），7.78（d，J=1.6 Hz，1H），4.65（s，2H），4.43（q，J=7.1 Hz，2H），3.99（s，3H），1.43（t，J=7.2 Hz，3H） ＬＣ ＲＴ：０．８９分
ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２７４．１（方法Ｄ）

ステップ２．メチル （7－ヒドロキシ－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（2.51 g、12.0 mmol）のＤＭＦ（50 mL）溶液をＮＢＳ（2.14 g、12.0 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１５分間撹拌し、濾過した。回収した固体をＨ_２Ｏおよびジエチルエーテルで洗浄し、メチル （3－ブロモ－7－ヒドロキシ－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（3.28 g、収率９５％）を得た。
ＬＣ ＲＴ：０．５７分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝２８８．１（方法Ｄ）

ステップ３．メチル （3－ブロモ－7－ヒドロキシ－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（648 mg、2.25 mmol）のＤＭＦ（22.5 mL）溶液を、エチル 6－（ブロモメチル）－5－メトキシニコチネート（617 mg、2.25 mmol）およびＣｓ_２ＣＯ_３（2199 mg、6.75 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌し、ＥｔＯＡｃで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３溶液およびＨ_２Ｏで洗浄した。有機層を減圧濃縮した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（40g ＳｉＯ_２；０から１００％ ＥｔＯＡｃ－ヘキサン グラジエント溶出）により精製し、エチル 6－（（3－ブロモ－7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－5－メトキシニコチネート（653.1 mg、収率６０％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 11.61－11.41（m，1H），8.49－8.47（m，1H），7.81（d，J=1.6 Hz，1H），5.85（s，2H），4.34（q，J=7.1 Hz，2H），3.96（s，3H），3.74（s，3H），1.31（t，J=7.1 Hz，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．８６分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４８１．２（方法Ｄ）

ステップ４．エチル 6－（（3－ブロモ－7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－5－メトキシニコチネート（542 mg、1.13 mmol）のＭｅＯＨ（54 mL）懸濁液を、Ｐｄ/Ｃ（24 mg、0.23 mmol）で処理した。反応フラスコを真空下で排気し、Ｈ_２（3x）でパージした。反応混合物をＨ_２雰囲気（バルーン）下で１６時間撹拌した。反応フラスコを真空下で排気し、Ｎ_２（3x）でパージした。反応混合物をＤＣＭで希釈し、ＣＥＬＩＴＥ（商標）に通して濾過し、減圧濃縮して、エチル 6－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－5－メトキシニコチネート（450 mg、収率９９％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 8.49－8.44（m，1H），7.85（s，1H），7.79（d，J=1.6 Hz，1H），5.86（s，2H），4.33（q，J=7.1 Hz，2H），3.95（s，3H），3.75（s，3H），1.31（t，J=7.1 Hz，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．７８分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４０３．０（方法Ｄ）

ステップ５．エチル 6－（（7－ヒドロキシ－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－5－メトキシニコチネート（543 mg、1.35 mmol）のＴＨＦ（28 mL）溶液を０℃に冷却し、ＬｉＡｌＨ_４（ＴＨＦ中、１Ｍ、2.4 mL、2.4 mmol）で処理した。反応混合物を１５分間０℃で撹拌し、Ｈ_２Ｏおよびロッシェル塩（飽和水溶液）でクエンチし、ＲＴで２時間撹拌した。有機層をＣＥＬＩＴＥ（商標）上に吸収させ、カラムクロマトグラフィー（40g ＳｉＯ_２；０から１０％ ＭｅＯＨ－ＤＣＭ グラジエント溶出）により精製し、メチル （7－ヒドロキシ－1－（（5－（ヒドロキシメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（191 mg、収率３９％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 7.89－7.84（m，1H），7.80（s，1H），7.37（d，J=1.5 Hz，1H），5.80－5.72（m，2H），5.28（t，J=5.7 Hz，1H），4.48（d，J=5.4 Hz，2H），3.87－3.81（m，3H），3.74（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．５６分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝３６１．０（方法Ｄ）

ステップ６．メチル （7－ヒドロキシ－1－（（5－（ヒドロキシメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（190 mg、0.527 mmol）のＤＭＳＯ（2.6 mL）溶液を、（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン・ＨＣｌ（103 mg、0.685 mmol）、ＢＯＰ（303 mg、0.685 mmol）およびＤＢＵ（0.28 mL、1.8 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで１時間撹拌し、ＤＣＭで希釈し、Ｈ_２Ｏ（6x）で洗浄した。有機層を減圧濃縮した。粗生成物をＭｅＯＨ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＨＰＬＣにより、以下の条件で精製した：カラム：Axia C18 100 mm x 30 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：10:90 メタノール：０．１％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：90:10 メタノール：０．１％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：５％Ｂで０分保持、１０分かけて５－３０％Ｂ、次いで３０％Ｂで２分保持；流速：４０ｍＬ/分；２２０ｎｍでＵＶ検出；カラム温度：２５℃。精製した生成物を飽和ＮａＨＣＯ_３水溶液で中和し、ＤＣＭで洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、メチル （1－（（5－（ヒドロキシメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（102.4 mg、収率４３％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ 9.68（s，1H），8.99（br s，1H），7.98－7.92（m，1H），7.84（s，1H），7.45（d，J=1.1 Hz，1H），5.77（s，2H），5.35（br s，1H），4.92（br s，2H），4.51（br s，2H），3.88（s，3H），3.61（s，3H），2.57（s，3H）
ＬＣ ＲＴ：０．６１分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４５６．１（方法Ｄ）

ステップ７．メチル （1－（（5－（ヒドロキシメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（102 mg、0.225 mmol）のＤＣＭ（4.5 mL）溶液をＳＯＣｌ_２（49 μL、0.68 mmol）で処理した。反応混合物をＲＴで３０分間撹拌し、減圧濃縮した。残留物をＤＣＭ中に溶解し、減圧濃縮して、メチル （1－（（5－（クロロメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（107 mg、収率１００％）を得た。
ＬＣ ＲＴ：０．６７分 ＬＣ／ＭＳ［Ｍ＋Ｈ］^＋＝４７４．３（方法Ｄ）

ステップ８．メチル （1－（（5－（クロロメチル）－3－メトキシピリジン－2－イル）メチル）－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（35 mg、0.074 mmol）のＤＭＦ（0.7 mL）溶液を、ＤＩＥＡ（103 μL、0.591 mmol）およびテトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミン（29.9 mg、0.295 mmol）で処理した。反応混合物を７０℃で２時間撹拌し、Ｎ_２気流下で乾燥させ、続いて減圧下でさらに乾燥させた。残留物をジオキサン（0.8 mL）中に溶解し、ＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、37 μL、0.37 mmol）で処理した。反応混合物を６０℃に加熱した。追加量のＮａＯＨ（１０Ｍ 水溶液、120 μL、1.2 mmol）を、８時間かけて反応混合物に添加した。反応混合物をＲＴで、ＨＯＡｃで中和し、減圧濃縮した。粗生成物をＤＭＦ中に溶解し、ＰＴＦＥフリットに通して濾過し、プレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件で精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：１０ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ含有水；グラジエント：１％Ｂで０分保持、２０分かけて１－４１％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させた。単離した生成物をプレパラティブＬＣ／ＭＳにより、以下の条件でさらに精製した：カラム：XBridge C18、200 mm x 19 mm、５μｍ粒子；移動相Ａ：5:95 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；移動相Ｂ：95:5 アセトニトリル：０．０５％ ＴＦＡ含有水；グラジエント：０％Ｂで０分保持、２５分かけて０－４０％Ｂ、次いで１００％Ｂで０分保持；流速：２０ｍＬ/分；カラム温度：２５℃。フラクション収集はＭＳシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、遠心蒸発で乾燥させ、化合物１３０をビスＴＦＡ塩（11 mg、２０％）として得た。

化合物１３１を類似的に調製した。
実施例１５－化合物１３４

ステップ１．メチル （7－ヒドロキシ－3－ヨード－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5－イル）カルバメート（5.0 g、14.92 mmol）のＤＭＦ（50.0 mL）撹拌溶液に、０℃で、Ｃｓ_２ＣＯ_３（9.72 g、29.8 mmol）およびメチル 4－（ブロモメチル）－3－メトキシベンゾエート（3.87 g、14.92 mmol）を添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、水を添加した。沈殿した固体を濾過し、過剰量の水、続いて石油エーテルで洗浄した。固体を真空乾燥させた。粗製化合物をＩＳＣＯコンビフラッシュクロマトグラフィーにより、クロロホルム中、０－１００％ 酢酸エチルで溶出させて精製し、メチル 4－（（7－ヒドロキシ－3－ヨード－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（3.88 g、6.20 mmol、収率４１．５％）をオフホワイト固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ ppm：11.69（br s，1H），11.38（s，1H），7.56－7.45（m，2H），6.87－6.78（m，1H），5.75（s，2H），3.88（s，3H），3.85（s，3H），3.75（s，3H）
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ５１４．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ２．メチル 4－（（7－ヒドロキシ－3－ヨード－5－（（メトキシカルボニル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（3.5 g、6.82 mmol）の1,4－ジオキサン（35.0 mL）撹拌溶液に、Ｋ_２ＣＯ_３（1.885 g、13.64 mmol）、ＴＭＢ（1.907 mL、13.64 mmol）およびＰｄＣｌ_２（ｄｐｐｆ）.ＣＨ_２Ｃｌ_２付加物（0.557 g、0.682 mmol）を、Ｎ_２パージ下で添加した。反応混合物を１００℃で６時間撹拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（商標）ベッドに通して濾過し、過剰量の酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、残留物を得た。粗製化合物をＩＳＣＯコンビフラッシュクロマトグラフィー（クロロホルム中、０－２０％ メタノール）により精製し、メチル 4－（（5－アミノ－7－ヒドロキシ－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（2.1 g、4.10 mmol、収率60.1％）を褐色固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ＝10.90（s，1H），7.51（s，1H），7.46（d，J＝8.0 Hz，1H），6.63－6.50（m，1H），6.18－6.01（m，2H），5.71－5.54（m，2H），3.91（s，3H），3.87－3.78（s，3H），2.23（s，3H）
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ３４４．０［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ３．メチル 4－（（5－アミノ－7－ヒドロキシ－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシベンゾエート（0.5 g、1.456 mmol）のＴＨＦ（5.0 mL）撹拌溶液に、０℃で、ＬｉＡｌＨ_４（1.214 mL、2.91 mmol）を添加した。反応混合物をＲＴに温め、１時間撹拌し、氷冷水でクエンチし、ＣＥＬＩＴＥ（商標）ベッドに通して濾過し、過剰量の酢酸エチルで洗浄した。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、5－アミノ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（0.31 g、0.551 mmol、収率37.8％）を褐色半固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ＝6.99－6.95（m，1H），6.73（br d，J＝7.5 Hz，1H），6.44－6.38（m，1H），5.75－5.49（m，2H），5.26－4.99（m，1H），4.44（s，2H），3.87－3.80（m，3H），2.23（s，3H）
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ３１６．３［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ４．5－アミノ－1－（4－（ヒドロキシメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－7－オール（1.1 g、3.49 mmol）のＤＭＳＯ（10.0 mL）撹拌溶液に、ＤＢＵ（1.577 mL、10.47 mmol）、ＢＯＰ（2.314 g、5.23 mmol）および（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミンヒドロクロライド（0.522 g、3.49 mmol）を添加した。反応混合物をＲＴで２時間撹拌した。（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メタンアミン，ＨＣｌ（0.3 g、2.0 mmol）を添加した。反応混合物をＲＴで１６時間撹拌し、ＥｔＯＡｃおよび水の間で分配した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、減圧濃縮して、残留物を得た。粗製化合物をＩＳＣＯコンビフラッシュクロマトグラフィーにより、クロロホルム中、０－２０％ メタノールで溶出させて精製し、（4－（（5－アミノ－3－メチル－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシフェニル）メタノール（0.81 g、1.243 mmol、収率35.6％）を褐色固体として得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６）δ＝7.60－7.55（m，1H），7.26（br t，J＝5.8 Hz，1H），6.98－6.93（m，1H），6.77（br d，J＝7.5 Hz，1H），6.68－6.60（m，1H），5.68（s，2H），5.55－5.48（m，1H），5.20－5.13（m，1H），4.78（br d，J＝5.5 Hz，2H），4.49－4.42（m，2H），3.82－3.77（m，3H），2.56（d，J＝2.0 Hz，4H），2.55－2.50（m，6H）
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ４１１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ５．（4－（（5－アミノ－3－メチル－7－（（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）アミノ）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－1－イル）メチル）－3－メトキシフェニル）メタノール（0.45 g、1.096 mmol）のＴＨＦ（10.0 mL）撹拌溶液に、０℃で、ＳＯＣｌ_２（1.0 ml、13.70 mmol）を添加した。反応混合物を０℃で１時間撹拌し、ＲＴに温め、減圧濃縮し、粗製 1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－N7－（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5,7－ジアミン（0.51 g、推定収率１００％）を褐色固体として得て、そのまま次のステップで使用した。
ＬＣ－ＭＳ ｍ/ｚ ４２９．４［Ｍ＋Ｈ］^＋

ステップ６．1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－N7－（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5,7－ジアミン（0.15 g、0.350 mmol）のＤＭＦ（3.0 mL）撹拌溶液に、1－メチルピペラジン（0.053 g、0.525 mmol）およびＫ_２ＣＯ_３（0.145 g、1.049 mmol）を添加した。反応混合物を５０℃で９０分間撹拌し、ＣＥＬＩＴＥ（商標）ベッドに通して濾過し、過剰の酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、残留物を得た。粗製化合物を逆相プレパラティブＬＣ／ＭＳ（カラム：TRIART－YMC－EXRS（250 mm x 19 mm）；移動相Ａ：水中、１０ ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ ｐＨ－４．５、移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；流速：２０ｍＬ/分；グラジエント：０/０、１０/１５、２０/１５、２２/１００、２４/０）により精製した。フラクション収集はＭＳおよびＵＶシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、Ｇｅｎｅｖａｃ装置を用いて遠心蒸発で乾燥させ、化合物１３４（12.6 mg、0.025 mmol、収率7.15％）を得た。
実施例１６－化合物１３２

1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－N7－（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5,7－ジアミン（0.15 g、0.350 mmol）のＤＭＦ（3.0 mL）撹拌溶液に、2－（ピペラジン－1－イル）エタン－1－オール（0.068 g、0.525 mmol）、2－（ピペラジン－1－イル）エタン－1－オール（0.068 g、0.525 mmol）およびＫ_２ＣＯ_３（0.097 g、0.699 mmol）を添加した。反応混合物を５０℃で９０分間撹拌し、ＣＥＬＩＴＥ（商標）ベッドに通して濾過し、過剰の酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、残留物を得て、これを逆相プレパラティブＬＣ／ＭＳ（カラム：Gemini NX（250 x 21.2 mm）５μｍ、移動相Ａ：水中、１０ ｍＭ 炭酸水素アンモニウム ９．５ｐＨ、移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ、流速：２０ｍＬ/分、グラジエント Ｔ/％Ｂ：０/１０、７/３５、１２/３５、１２．０１/１００）により精製した。フラクション収集はＭＳおよびＵＶシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、Ｇｅｎｅｖａｃ装置を用いて遠心蒸発で乾燥させ、化合物１３２（51.2 mg、0.095 mmol、収率27.2％）を得た。
実施例１７－化合物１３３

1－（4－（クロロメチル）－2－メトキシベンジル）－3－メチル－N7－（（5－メチル－1,2,4－オキサジアゾール－3－イル）メチル）－1H－ピラゾロ[4,3－d]ピリミジン－5,7－ジアミン（0.15 g、0.350 mmol）のアセトニトリル（3.0 mL）撹拌溶液に、テトラヒドロ－2H－ピラン－4－アミンヒドロクロライド（0.072 g、0.525 mmol）、Ｎａ_２ＣＯ_３（0.111 g、1.049 mmol）およびＫＩ（0.058 g、0.350 mmol）を添加した。反応混合物を５０℃で３時間撹拌した。反応混合物をＣＥＬＩＴＥ（商標）ベッドに通して濾過し、過剰量の酢酸エチルで洗浄した。濾液を減圧濃縮し、残留物を得た。粗製化合物を逆相プレパラティブＬＣ／ＭＳ（カラム：Gemini NX（250 x 21 mm） x ５ミクロン；移動相Ａ：水中、１０ ｍＭ ＮＨ_４ＯＡｃ、移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ：ＭｅＯＨ（1:1）、流速：１９ｍＬ/分、グラジエント：０/３５、１２/４５）により精製した。フラクション収集はＭＳおよびＵＶシグナルによりトリガーされた。目的物を含むフラクションを混ぜ合わせ、Ｇｅｎｅｖａｃを用いて遠心蒸発で乾燥させ、化合物１３３（17.4 mg、0.035 mmol、収率10.08％）を得た。
実施例１８－出発物質および中間体

下記のチャートは、本明細書に開示されるＴＬＲ７アゴニストの調製用の出発物質または中間体として有用なことがある化合物を作成するためのスキームを示す。スキームは、出発物質または中間体として使用されることがある他の類似化合物の作成に適用され得る。使用される試薬は当技術分野において周知であり、多くの場合、その使用は前述の実施例に示されている。
チャート１

チャート２

チャート３

生物学的活性
ＴＬＲ７アゴニストとして本明細書に開示される化合物の生物学的活性は、以下の手順により定量されることがある。

ヒトＴＬＲ７アゴニスト活性アッセイ
この手順は、本明細書に開示される化合物のヒトＴＬＲ７（ｈＴＬＲ７）アゴニスト活性を定量する方法を説明する。

ヒトＴＬＲ７分泌型胚性アルカリホスファターゼ（ＳＥＡＰ）レポータートランスジーンを有する改変ヒト胚性腎臓ブルー細胞（ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ（商標）ＴＬＲ細胞；Ｉｎｖｉｖｏｇｅｎ）を、非選択培地（１０％ウシ胎児血清（Sigma）を添加したＤＭＥＭ高グルコース（Invitrogen））中に懸濁した。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ（商標）ＴＬＲ７細胞を３８４ウェル組織培養プレートの各ウェルに添加し（１ウェルあたり１５，０００細胞）、１６－１８時間、３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。ＨＥＫ－Ｂｌｕｅ（商標）ＴＬＲ細胞が入ったウェルに化合物（100 nl）を添加し、処置した細胞を３７℃、５％ＣＯ_２でインキュベートした。処理から１８時間後、１０マイクロリットルの新たに調製したＱｕａｎｔｉ－Ｂｌｕｅ（商標）試薬（Invivogen）を各ウェルに添加し、３０分間インキュベートし（３７℃、５％ＣＯ_２）、Ｅｎｖｉｓｉｏｎプレートリーダー（ＯＤ＝６２０ｎｍ）を用いてＳＥＡＰレベルを測定した。半数効果濃度値（ＥＣ_５０；アッセイ基準値および最大値の中間の応答を引き起こす化合物濃度）を算出した。

ヒト血液におけるＩ型インターフェロン遺伝子（ＭＸ－１）およびＣＤ６９の誘導
Ｉ型インターフェロン（ＩＦＮ）ＭＸ－１遺伝子およびＢ細胞活性化マーカーＣＤ６９の誘導は、ＴＬＲ７経路の活性化で起こる下流のイベントである。以下は、ＴＬＲ７アゴニストに対する応答におけるそれらの誘導を測定するヒト全血アッセイである。

ヘパリン処置したヒト全血をヒト患者から回収し、１ｍＭで、ＴＬＲ７アゴニスト試験化合物で処置した。血液をＲＰＭＩ １６４０培地で希釈し、Ｅｃｈｏを使用して１ウェルあたり１０ｎＬプレドット（predot）し、最終濃度を１μＭとした（１０μＬの血液中に１０ｎＬ）。３０秒間振盪機で混合した後、プレートを覆い、３７℃のチャンバー内に終夜＝１７時間置いた。固定／溶解バッファーを調製し（Ｈ_２０中５ｘ→１ｘ、３７℃で温める；Ｃａｔ＃ ＢＤ ５５８０４９）、後で使用するためにパームバッファーを（氷上で）維持した。

表面マーカー染色（ＣＤ６９）のために表面抗体を調製した：０．０４５μｌ ｈＣＤ１４－ＦＩＴＣ（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｃａｔ ＃ ＭＨＣＤ１４０１）＋０．６μｌ ｈＣＤ１９－ｅｆ４５０（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ Ｃａｔ ＃ ４８－０１９８－４２）＋１．５μｌ ｈＣＤ６９－ＰＥ（ｃａｔ＃ ＢＤ５５５５３１）＋０．８５５μｌ ＦＡＣＳバッファー。３μｌ/ウェルで添加し、１０００ｒｐｍで１分間遠心し、振盪機で３０秒間混合し、氷上に３０分間置いた。３０分後、７０μＬの予め温めた１ｘ固定／溶解バッファーで刺激を停止させ、Feliex mateを用いて再懸濁し（１５回、プレートごとにチップを変えた）、３７℃で１０分間インキュベートした。

２０００ｒｐｍで５分間遠心し、ＨＣＳプレートウォッシャーで吸引し、振盪機で３０秒間混合し、次いで７０μＬのｄＰＢＳで洗浄し、ペレット状にすること２回（２０００ｒｐｍ、５分間）、５０μＬのＦＡＣＳバッファーで洗浄し、ペレット状にすること１回（２０００ｒｐｍ、５分間）を行った。振盪機で３０秒間混合した。細胞内マーカー染色（ＭＸ－１）については：５０μｌのＢＤ ＰｅｒｍバッファーＩＩＩを添加し、振盪機で３０秒間混合した。氷上で３０分間インキュベートした（遮光）。５０μＬのＦＡＣＳバッファーで２回洗浄し（透過処理後２３００ｒｐｍで５分間遠心）、続いて振盪機で３０秒間混合した。ＭＸ１抗体（(4812)－Ａｌｅｘａ ６４７：Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ ＃ＮＢＰ２－４３７０４ＡＦ６４７）を含む２０μＬのＦＡＣＳバッファーで再懸濁した（２０μｌ ＦＡＣＳバッファー＋０．８ｕｌ ｈＩｇＧ＋０．０４μｌ ＭＸ－１）。１０００ｒｐｍで１分間遠心し、振盪機で３０秒間混合し、サンプルをＲＴで、暗所で４５分間インキュベートし、続いて２ｘＦＡＣＳバッファーで洗浄した（透過処理後２３００ｒｐｍで５分間遠心）。２０μｌのＦＡＣＳバッファーで再懸濁し（１ウェルあたり合計３５μＬ）、ホイルで覆い、４℃に置き、翌日に読み取った。プレートをｉＱｕｅＰｌｕｓで読み取った。結果をツールセットにロードし、カーブマスターでＩＣ５０曲線を作成した。ｙ軸の１００％は１μＭのレシキモドに設定されている。

マウス血液におけるＴＮＦ－アルファおよびＩ型ＩＦＮ応答遺伝子の誘導
ＴＮＦ－アルファおよびＩ型ＩＦＮ応答遺伝子の誘導は、ＴＬＲ７経路の活性化で起こる下流のイベントである。以下は、ＴＬＲ７アゴニストに対する応答における、マウス全血中のそれらの誘導を測定するアッセイである。

ヘパリン処置したマウス全血を、Ｐｅｎ－Ｓｔｒｅｐを含むＲＰＭＩ １６４０培地で、５：４の比率で希釈した（５０μＬの全血および４０μＬの培地）。体積９０μＬの希釈血液をＦａｌｃｏｎ平底９６ウェル組織培養プレートのウェルに移し、プレートを４℃で１時間インキュべートした。１００％ ＤＭＳＯストック中の試験化合物を、濃度応答アッセイのために同じ培地で２０倍希釈し、次いで１０μＬの希釈した試験化合物をウェルに添加し、最終ＤＭＳＯ濃度が０．５％となるようにした。コントールウェルに、５％ ＤＭＳＯを含む１０μＬの培地を添加した。次にプレートを３７℃で、５％ＣＯ_２インキュベーター内で１７時間インキュベートした。インキュベート後、１００μＬの培地を各ウェルに添加した。プレートを遠心し、１３０μＬの上清を除去し、ＥＬＩＳＡによるＴＮＦα産生のアッセイに使用した（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、カタログ番号 ８８－７３２４ Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃより）。Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｍＲＮＡ Ｃａｔｃｈｅｒ Ｐｌｕｓキット（Ｃａｔ＃ Ｋ１５７０－０２）に由来する、ＤＴＴを含む体積７０μＬのｍＲＮＡキャッチャー溶解バッファー（１ｘ）を、ウェル中の残りの７０μＬサンプルに添加し、ピペッティングにより５回混合した。次にプレートをＲＴで５－１０分間振盪し、続いて２μＬのプロテイナーゼＫ（20 mg/mL）を各ウェルに添加した。次にプレートを１５－２０分間、ＲＴで振盪した。次に、さらに処理するまでの間、プレートを－８０℃で保存した。

冷凍サンプルを解凍し、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ｍＲＮＡ Ｃａｔｃｈｅｒ Ｐｌｕｓキット（Ｃａｔ＃ Ｋ１５７０－０２）を用いて、製造業者の説明書に従ってｍＲＮＡを抽出した。ＲＮＡ抽出から得られたｍＲＮＡの半量を用いて、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ ＳｕｐｅｒＳｃｒｉｐｔ ＩＶ ＶＩＬＯ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘ（Ｃａｔ＃ １１７５６５００）を使用して、２０μＬの逆転写酵素反応でｃＤＮＡを合成した。ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）のＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ Ｒｅａｌ－Ｔｉｍｅ ＰＣＲシステムを用いて、ＴａｑＭａｎ（登録商標）リアルタイムＰＣＲを行った。全てのリアルタイムＰＣＲ反応を、市販のマウスＩＦＩＴ１、ＩＦＩＴ３、ＭＸ１およびＰＰＩＡ遺伝子発現用プレデザインＴａｑＭａｎアッセイ並びにＴａｑＭａｎ Ｍａｓｔｅｒ Ｍｉｘを用いて、２回繰り返して行った。ＰＰＩＡは、ハウスキーピング遺伝子として利用した。製造業者からの勧告に従った。全ての生データ（Ｃｔ）を平均ハウスキーピング遺伝子（Ｃｔ）で正規化し、次に比較Ｃｔ（ΔΔＣｔ）法を利用して、実験解析のために、相対的な遺伝子発現量（ＲＱ）を定量化した。

定義
「脂肪族」は、特定の数の炭素原子を有する直鎖または分岐鎖の飽和または不飽和非芳香族炭化水素部分を意味し（例えば、「Ｃ_３脂肪族」、「Ｃ_１－５脂肪族」、「Ｃ_１－Ｃ_５脂肪族」、または「Ｃ_１からＣ_５脂肪族」のように。後者３つの表現は１から５個の炭素原子を有する脂肪族部分と同義である）、炭素原子の数が明確に特定されない場合は、１から４個の炭素原子（不飽和脂肪族部分の場合は２から４個の炭素）である。同様の理解が、他の種類における炭素の数、つまりＣ_２－４アルケン、Ｃ_４－Ｃ_７シクロ脂肪族などに適用される。同様に、「（ＣＨ_２）_１－３」などの用語は、下付き文字が１、２、または３であることの省略表現として理解されるべきであり、そのため、かかる用語は、ＣＨ_２、ＣＨ_２ＣＨ_２、およびＣＨ_２ＣＨ_２ＣＨ_２を表すことになる。

「アルキル」は、適用可能な炭素原子の数を指定するための同じ慣習に従う飽和脂肪族部分を意味する。実例として、Ｃ_１－Ｃ_４アルキル部分には、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、イソブチル、t－ブチル、1－ブチル、2－ブチル、および同類のものが挙げられるが、これらに限らない。「アルカンジイル」（時として「アルキレン」とも呼ばれる）は、アルキル基の２価の対応物を意味し、例えば、

などがある。

「アルケニル」は、適用可能な炭素原子の数を指定するための同じ慣習に従う、少なくとも一つの炭素－炭素二重結合を有する脂肪族部分を意味する。実例として、Ｃ_２－Ｃ_４アルケニル部分には、エテニル（ビニル）、2－プロペニル（アリルまたはプロプ－2－エニル）、シス－1－プロペニル、トランス－1－プロペニル、Ｅ－（またはＺ－）2－ブテニル、3－ブテニル、1,3－ブタジエニル（ブト－1,3－ジエニル）、および同類のものが挙げられるが、これらに限らない。

「アルキニル」は、適用可能な炭素原子の数を指定するための同じ慣習に従う、少なくとも一つの炭素－炭素三重結合を有する脂肪族部分を意味する。実例として、Ｃ_２－Ｃ_４アルキニル基には、エチニル（アセチレニル）、プロパルギル（プロプ－2－イニル）、1－プロピニル、ブト－2－イニル、および同類のものが挙げられる。

「シクロ脂肪族」は、１から３個の環を有し、各環が、３から８個（好ましくは３から６個）の炭素原子を有する、飽和または不飽和非芳香族炭化水素部分を意味する。「シクロアルキル」は、各環が飽和であるシクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルケニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素－炭素二重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。「シクロアルキニル」は、少なくとも一つの環が少なくとも一つの炭素－炭素三重結合を有する、シクロ脂肪族部分を意味する。実例として、シクロ脂肪族部分には、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニル、シクロヘプチル、シクロオクチル、およびアダマンチルが挙げられるが、これらに限らない。好ましいシクロ脂肪族部分は、シクロアルキル部分、特にシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、およびシクロヘキシルである。「シクロアルカンジイル」（時として「シクロアルキレン」とも呼ばれる）は、シクロアルキル基の２価の対応物を意味する。同様に、「ビシクロアルカンジイル」（または「ビシクロアルキレン」）および「スピロアルカンジイル」（または「スピロアルキレン」）は、ビシクロアルキルおよびスピロアルキル（または「スピロシクロアルキル」）基の２価の対応物を指す。

「ヘテロシクロ脂肪族」は、少なくとも一つのその環において、最大３個（好ましくは１から２個）の炭素が、Ｎ、ＯまたはＳから独立して選択されるヘテロ原子で置換されており、ここでＮおよびＳは、適宜酸化されてもよく、Ｎは、適宜四級化されてもよい、シクロ脂肪族部分を意味する。好ましいシクロ脂肪族部分は、５から６員の大きさの１つの環からなる。同様に、「ヘテロシクロアルキル」、「ヘテロシクロアルケニル」、および「ヘテロシクロアルキニル」は、少なくとも一つのその環が、そのように修飾されている、シクロアルキル、シクロアルケニル、またはシクロアルキニル部分をそれぞれ意味する。代表的なヘテロシクロ脂肪族部分には、アジリジニル、アゼチジニル、1,3－ジオキサニル、オキセタニル、テトラヒドロフリル、ピロリジニル、ピペリジニル、ピペラジニル、テトラヒドロピラニル、テトラヒドロチオピラニル、テトラヒドロチオピラニルスルホン、モルホリニル、チオモルホリニル、チオモルホリニルスルホキシド、チオモルホリニルスルホン、1,3－ジオキソラニル、テトラヒドロ－1,1－ジオキソチエニル、1,4－ジオキサニル、チエタニル、および同類のものが挙げられる。「ヘテロシクロアルキレン」は、ヘテロシクロアルキル基の２価の対応物を意味する。

「アルコキシ」、「アリールオキシ」、「アルキルチオ」、および「アリールチオ」は、それぞれ、－Ｏ（アルキル）、－Ｏ（アリール）、－Ｓ（アルキル）、および－Ｓ（アリール）を意味する。例は、それぞれ、メトキシ、フェノキシ、メチルチオ、およびフェニルチオである。

「ハロゲン」または「ハロ」は、より狭い意味が指示されない限り、フッ素、塩素、臭素またはヨウ素を意味する。

「アリール」は、各環が３から７個の炭素原子を有し、少なくとも一つの環が芳香族である、単、二、または三環式環系（好ましくは単環式）を有する、炭化水素部分を意味する。環系中の環は、（ナフチルのように）互いに縮合していてもよく、（ビフェニルのように）互いに結合していてもよく、（インダニルまたはシクロヘキシルフェニルのように）非芳香環と縮合または結合していてもよい。さらなる実例として、アリール部分には、フェニル、ナフチル、テトラヒドロナフチル、インダニル、ビフェニル、フェナントリル、アントラセニル、およびアセナフチルが挙げられるが、これらに限らない。「アリーレン」は、アリール基の２価の対応物、例えば1,2－フェニレン、1,3－フェニレン、または1,4－フェニレンを意味する。

「ヘテロアリール」は、各環が３から７個の炭素原子を有し、少なくとも一つの環が、Ｎ、Ｏ、またはＳから独立して選択される１から４個のヘテロ原子を含む芳香環であり、ここでＮおよびＳは、適宜酸化されてもよく、Ｎは、適宜四級化されてもよい、単、二、または三環式環系（好ましくは５から７員の単環式）を有する部分を意味する。そのような少なくとも一つのヘテロ原子を含む芳香環は、（ベンゾフラニルまたはテトラヒドロイソキノリルのように）他の種類の環と縮合してもよく、（フェニルピリジルまたは2－シクロペンチルピリジルのように）他の種類の環と直接結合してもよい。さらなる実例として、ヘテロアリール部分には、ピロリル、フラニル、チオフェニル（チエニル）、イミダゾリル、ピラゾリル、オキサゾリル、イソオキサゾリル、チアゾリル、イソチアゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、ピリジル、N－オキソピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、イソキノリニル、キナゾリニル、シンノリニル、キノザリニル、ナフチリジニル、ベンゾフラニル、インドリル、ベンゾチオフェニル、オキサジアゾリル、チアジアゾリル、フェノチアゾリル、ベンゾイミダゾリル、ベンゾトリアゾリル、ジベンゾフラニル、カルバゾリル、ジベンゾチオフェニル、アクリジニル、および同類のものが挙げられる。「ヘテロアリーレン」は、ヘテロアリール基の２価の対応物を意味する。

例えば「非置換の、または置換された」あるいは「適宜置換されてもよい」を用いる、つまり「非置換の、または置換されたＣ_１－Ｃ_５アルキル」あるいは「適宜置換されてもよいヘテロアリール」と表現するなどして、部分が置換されてもよいということが示される場合、かかる部分は、一つ以上の独立して選択される置換基、好ましくは数にして１から５個、より好ましくは数にして１から２個の置換基を有してもよい。置換基および置換パターンは、置換基が結合する部分を考慮して当業者により選択されることがあり、化学的に安定で、当技術分野で既知の技術、ならびに本明細書に記載される方法により合成され得る化合物を提供する。部分が、「非置換の、または置換された」あるいは「適宜置換されてもよい」ものとして特定される場合、好ましい実施形態において、かかる部分は非置換である。

「アリールアルキル」、「（ヘテロシクロ脂肪族）アルキル」、「アリールアルケニル」、「アリールアルキニル」、「ビアリールアルキル」、および同類のものは、場合によっては、アリール、ヘテロシクロ脂肪族、ビアリールなどで置換されたアルキル、アルケニル、またはアルキニル部分を、場合によっては、例えば、ベンジル、フェネチル、N－イミダゾイルエチル、N－モルホリノエチル、および同類のもののように、アルキル、アルケニル、またはアルキニル部分で開いた（不満足な）原子価を有する部分を意味する。反対に、「アルキルアリール」、「アルケニルシクロアルキル」、および同類のものは、場合によっては、アルキル、アルケニルなどで置換されたアリール、シクロアルキル、その他の部分、場合によっては、例えば、メチルフェニル（トリル）またはアリルシクロヘキシルのような部分を意味する。「ヒドロキシアルキル」、「ハロアルキル」、「アルキルアリール」、「シアノアリール」、および同類のものは、場合によっては、一つ以上の特定の置換基（場合によっては、ヒドロキシル、ハロなど）で置換されたアルキル、アリール、その他の部分を意味する。

例えば、許容される置換基には、アルキル（特にメチルまたはエチル）、アルケニル（特にアリル）、アルキニル、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ（特にフルオロ）、ハロアルキル（特にトリフルオロメチル）、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル（特にヒドロキシエチル）、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｏ（ハロアルキル）（特に－ＯＣＦ_３）、－Ｏ（シクロアルキル）、－Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、－Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、－ＣＯ_２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、アジド、－ＮＨ_２、－ＮＨ（アルキル）、－Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ（アリール）、－ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、－ＯＳＯ_２（アルキル）、－ＳＨ、－Ｓ（アルキル）、－Ｓ（アリール）、－Ｓ（シクロアルキル）、－Ｓ（＝Ｏ）アルキル、－ＳＯ_２（アルキル）、－ＳＯ_２ＮＨ_２、－ＳＯ_２ＮＨ（アルキル）、－ＳＯ_２Ｎ（アルキル）_２、および同類のものが挙げられるが、これらに限らない。

置換される部分が脂肪族部分の場合、好ましい置換基は、アリール、ヘテロアリール、シクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｏ（ハロアルキル）、－Ｏ（シクロアルキル）、－Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、－Ｏ（アリール）、アルキルチオ、アリールチオ、＝Ｏ、＝ＮＨ、＝Ｎ（アルキル）、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、－ＣＯ_２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、アジド、－ＮＨ_２、－ＮＨ（アルキル）、－Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ（アリール）、－ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、－ＯＳＯ_２（アルキル）、－ＳＨ、－Ｓ（アルキル）、－Ｓ（アリール）、－Ｓ（＝Ｏ）アルキル、－Ｓ（シクロアルキル）、－ＳＯ_２（アルキル）、－ＳＯ_２ＮＨ_２、－ＳＯ_２ＮＨ（アルキル）、および－ＳＯ_２Ｎ（アルキル）_２である。より好ましい置換基は、ハロ、ヒドロキシル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ（アリール）、＝Ｏ、＝ＮＯＨ、＝ＮＯ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、アジド、－ＮＨ_２、－ＮＨ（アルキル）、－Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ（アリール）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、および－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である。特に好ましい置換基は、フェニル、シアノ、ハロ、ヒドロキシル、ニトロ、Ｃ_１－Ｃ_４アルコキシ、Ｏ（Ｃ_２－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、およびＯ（Ｃ_２－Ｃ_４アルカンジイル）ハロである。

置換される部分がシクロ脂肪族、ヘテロシクロ脂肪族、アリール、またはヘテロアリール部分の場合、好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、アルキニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｏ（ハロアルキル）、－Ｏ（アリール）、－Ｏ（シクロアルキル）、－Ｏ（ヘテロシクロアルキル）、アルキルチオ、アリールチオ、－Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、－ＣＯ_２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、アジド、－ＮＨ_２、－ＮＨ（アルキル）、－Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ（アリール）、－ＮＨ（ヒドロキシアルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２、－ＯＳＯ_２（アルキル）、－ＳＨ、－Ｓ（アルキル）、－Ｓ（アリール）、－Ｓ（シクロアルキル）、－Ｓ（＝Ｏ）アルキル、－ＳＯ_２（アルキル）、－ＳＯ_２ＮＨ_２、－ＳＯ_２ＮＨ（アルキル）、および－ＳＯ_２Ｎ（アルキル）_２である。より好ましい置換基は、アルキル、アルケニル、ハロ、ハロアルキル、ヒドロキシル、ヒドロキシアルキル、シアノ、ニトロ、アルコキシ、－Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｈ、－ＣＯ_２Ｈ、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨＯＨ、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－Ｃ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－Ｃ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＯＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｏ（ヒドロキシアルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＯＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＯＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ_２、－ＮＨ（アルキル）、－Ｎ（アルキル）_２、－ＮＨ（アリール）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｈ、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ_２、－ＮＨＣ（＝Ｏ）ＮＨ（アルキル）、－ＮＨＣ（＝Ｏ）Ｎ（アルキル）_２、および－ＮＨＣ（＝ＮＨ）ＮＨ_２である。特に好ましい置換基は、Ｃ_１－Ｃ_４アルキル、シアノ、ニトロ、ハロ、およびＣ_１－Ｃ_４アルコキシである。

「Ｃ_１－Ｃ_５アルキル」または「５から１０％」のように範囲が述べられる場合、かかる範囲は、範囲の終点、つまり第一の例においてはＣ_１およびＣ_５、並びに第二の例においては５％および１０％を含む。

（例えば、構造式中の関連する立体中心における価標を太線にするか、または破線にすることにより、構造式中で、二重結合をＥまたはＺ配置を有するものとして描くことにより、あるいは立体化学を指定する命名法または記号を用いることにより）特定の立体異性体が明確に指示されない限り、全ての立体異性体が、純粋化合物ならびにその混合物として本発明の範囲内に含まれる。特に断らない限り、ラセミ体、個々のエナンチオマー（光学的に純粋であろうと部分的に分割されていようと）、ジアステレオマー、幾何異性体、およびそれらの組み合わせ、並びにそれらの混合物は、本発明により全て包含される。

当業者は、化合物が、本明細書で使用される構造式に描かれるものと同等の互変異性体（例えば、ケトおよびエノール形）、共鳴構造、および双性イオン型を有することがあり、構造式は、そのような互変異性体、共鳴構造、双性イオン型を包含するということを認識するであろう。

「薬学的に許容されるエステル」は、インビボで（例えば人体内で）加水分解し、親化合物またはその塩を生成するか、あるいはそれ自体が親化合物の活性と類似のそれを有するエステルを意味する。適当なエステルには、Ｃ_１－Ｃ_５アルキル、Ｃ_２－Ｃ_５アルケニルまたはＣ_２－Ｃ_５アルキニルエステル、特にメチル、エチルまたはｎ－プロピルエステルが挙げられる。

「薬学的に許容される塩」は、医薬製剤に適する化合物の塩を意味する。化合物が一つ以上の塩基性基を有する場合、塩は、酸付加塩、例えば、硫酸塩、臭化水素酸塩、酒石酸塩、メシル酸塩、マレイン酸塩、クエン酸塩、リン酸塩、酢酸塩、パモ酸塩（エンボン酸塩）、ヨウ化水素酸塩、硝酸塩、塩酸塩、乳酸塩、メチル硫酸塩、フマル酸塩、安息香酸塩、コハク酸塩、メシル酸塩、ラクトビオン酸塩、スベリン酸塩、トシル酸塩、および同類のものなどであり得る。化合物が一つ以上の酸性基を有する場合、塩は、カルシウム塩、カリウム塩、マグネシウム塩、メグルミン塩、アンモニウム塩、亜鉛塩、ピペラジン塩、トロメタミン塩、リチウム塩、コリン塩、ジエチルアミン塩、4－フェニルシクロヘキシルアミン塩、ベンザチン塩、ナトリウム塩、テトラメチルアンモニウム塩、および同類のものなどの塩であり得る。多形結晶性形態および溶媒和物も本発明の範囲内に包含される。

「患者（subject）」は動物を指し、霊長類（例えば、ヒト）、サル、ウシ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ウマ、イヌ、ネコ、ウサギ、ラット、またはマウスを含むが、これらに限らない。「患者（subject）」および「患者（patient）」という用語は、例えば、ヒトなどの哺乳動物の患者に関して、本明細書で互換的に使用される。

「治療する（treat）」、「治療する（treating）」、および「治療（treatment）」という用語は、疾患または障害の治療の文脈において、障害、疾患、または病態、あるいは障害、疾患、もしくは病態に関連する症状のうちの一つ以上を軽減するか、または抑制すること；あるいは疾患、障害、または病態の、あるいは一つ以上のそれらの症状の進行、拡大または悪化を遅らせることを含むように意図される。「がんの治療」は、以下の効果のうちの一つ以上を指す：（１）（ｉ）遅延および（ｉｉ）完全な増殖停止を含む、ある程度の腫瘍増殖の阻害；（２）腫瘍細胞数の減少；（３）腫瘍の大きさの維持；（４）腫瘍の大きさの減少；（５）末梢臓器への腫瘍細胞浸潤の（ｉ）減少、（ｉｉ）遅延または（ｉｉｉ）完全な予防を含む阻害；（６）転移の（ｉ）減少、（ｉｉ）遅延または（ｉｉｉ）完全な予防を含む阻害；（７）（ｉ）腫瘍の大きさの維持、（ｉｉ）腫瘍の大きさの減少、（ｉｉｉ）腫瘍の増殖の遅延、（ｉｖ）浸潤の減少、遅延または予防をもたらすことがある、抗腫瘍免疫応答の増強および／または（８）ある程度の、障害に関連する一つ以上の症状の重症度または数の軽減。

本明細書の式において、価標に対して横方向の波線（

）または価標の末端にあるアスタリスク（＊）は、共有結合部位を意味する。例えば、式

において、Ｒは

である、またはＲは

であるという記述は、

を意味する。

本明細書の式において、その２つの炭素の間で芳香環を横切る価標は、その価標に結合する基が、黙示的にそこにある（または、完全に書かれている場合、明示的にそこにある）水素の除去によって空きができる芳香環の位置のうちのどこにあってもよいということを意味する。実例として：

は、

を表し；

は、

を表し；

は、

を表す。

本開示は、本明細書に記載される化合物で生じる原子の全ての同位体を含む。同位体は、原子番号は同じだが異なる質量数を有する原子を含む。一般的な例であり、限定ではないが、水素の同位体には重水素およびトリチウムが挙げられる。炭素の同位体には、^１３Ｃおよび^１４Ｃが挙げられる。同位体標識した本発明の化合物は、一般的に、他の場合に使用される非標識試薬の代わりに、同位体標識した適切な試薬を用いて、当業者に既知の従来の技術により、または本明細書に記載されるものと類似の工程により調製され得る。例として、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル基は、重水素化されていなくても、部分的に重水素化されていても、完全に重水素化されていてもよく、「ＣＨ_３」には、ＣＨ_３、^１３ＣＨ_３、^１４ＣＨ_３、ＣＨ_２Ｔ、ＣＨ_２Ｄ、ＣＨＤ_２、ＣＤ_３などが含まれる。一つの実施形態において、化合物中の様々な元素は、それらの天然の同位体存在度で存在する。

当業者は、特定の構造はどちらの互変異性体－例えば、ケトかエノールか－で描かれてもよく、その２つの形態は等価であるということを認識するであろう。

アクロニムおよび略語
表Ｃは、本明細書で使用されるアクロニムおよび略語の一覧をその意味とともに提供する。

参考文献
本明細書の初めの方で、筆頭著者（または発明者）および日付により省略された形で引用される以下の参考文献に対する完全な引用を以下に提供する。これらの参考文献のそれぞれは、あらゆる目的のために、参照により本明細書に組み込まれる。

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前述の本発明の詳細な説明は、本発明の特定の部分または態様に、主にまたは排他的に関係する節を含む。これは、明確化のため、および便宜のためであり、特定の特徴は、それが開示される節だけでなくその他の節においても関連していることがあり、本明細書における開示は、異なる節に記載される情報の、全ての適切な組み合わせを含むことが理解されるべきである。同様に、本明細書における様々な図および説明は、本発明の特定の実施形態に関するが、具体的な特徴が、特定の図または実施形態の文脈で開示される場合、かかる特徴は、適切な範囲で、別の図または実施形態の文脈で、別の特徴と組み合わせて、または本発明一般においても使用され得るということが理解されるべきである。

さらに、本発明は、特定の好ましい実施形態について特に記載されているが、本発明は、かかる好ましい実施形態に限定されない。それどころか、本発明の範囲は、添付の請求項により定義される。

Claims (13)

1. 下記の式（Ｉ）：
   

   

   ［式中、
   Ｗは、Ｈ、ハロ、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、ＣＮ、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、
   

   

   であり；
   各Ｘは、独立してＮまたはＣＲ^２であり；
   Ｒ^１は、（Ｃ_１－Ｃ_８アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３シクロアルキル）、
   （Ｃ_１－Ｃ_８アルカンジイル）_０－１（Ｃ_５－Ｃ_６シクロアルキル）、
   （Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（５－６員ヘテロアリール）、
   （Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１フェニル、または
   （Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＣＦ_３であり；
   各Ｒ^２は、独立してＨ、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｓ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
   ＳＯ_２（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｃ_１－Ｃ_３アルキル、Ｏ（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、
   Ｓ（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、ＳＯ_２（Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル）、
   Ｃ_３－Ｃ_４シクロアルキル、Ｃｌ、Ｆ、ＣＮ；または［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１ＮＲ^ｘＲ^ｙであり；
   Ｒ^３は、Ｈ、ハロ、ＯＨ、ＣＮ、
   ＮＨ_２、
   ＮＨ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
   Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）_２、
   ＮＨ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
   Ｎ（Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル）_２、
   Ｎ［Ｃ_１－Ｃ_３アルキル］Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_１－Ｃ_６アルキル）、
   ＮＨ（ＳＯ_２）（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
   ＮＨ（ＳＯ_２）（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
   ６員の芳香族もしくはヘテロ芳香族部分、
   ５員のヘテロ芳香族部分、または
   下記の構造：
   

   

   を有する部分であり；
   Ｒ^５は、Ｈ、Ｃ_１－Ｃ_５アルキル、Ｃ_２－Ｃ_５アルケニル、Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル、
   ハロ、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、
   （Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、フェニル、
   ＮＨ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、５もしくは６員ヘテロアリール、
   

   

   であり；
   Ｒ^６は、ＮＨ_２、
   （ＮＨ）_０－１（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）、
   Ｎ（Ｃ_１－Ｃ_５アルキル）_２、
   （ＮＨ）_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_８シクロアルキル）、
   Ｎ（Ｃ_３－Ｃ_６シクロアルキル）_２、
   または
   下記の構造：
   

   

   を有する部分であり；
   Ｒ^ＸおよびＲ^ｙは、独立してＨまたはＣ_１－Ｃ_３アルキルであるか、あるいはＲ^ＸおよびＲ^ｙは、それらに結合している窒素と結合して３から７員の環を形成し；
   ｎは、１、２、または３であり；
   ｐは、０、１、２、または３であり；
   ここでＲ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、およびＲ^５において、
   アルキル部分、アルカンジイル部分、シクロアルキル部分、または下記の式：
   

   

   で示される部分は、
   ＯＨ、ハロ、ＣＮ、（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
   Ｃ（＝Ｏ）（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、ＳＯ_２（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、ＮＲ^ｘＲ^ｙ、
   （Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）Ｏ（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）
   から選択される一つ以上の置換基で適宜置換されてもよく；
   アルキル、アルカンジイル、シクロアルキル、または下記の式：
   

   

   で示される部分は、
   Ｏ、ＳＯ_２、ＣＦ_２、Ｃ（＝Ｏ）、ＮＨ、
   Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_３アルキル）、
   Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＣＦ_３、
   Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）ＯＨ、
   または
   Ｎ［Ｃ（＝Ｏ）］_０－１（Ｃ_１－Ｃ_４アルカンジイル）_０－１（Ｃ_３－Ｃ_５シクロアルキル）
   に置換されるＣＨ_２基を有してもよい］
   で示される構造を有する化合物。
2. Ｒ^１が、
   

   

   からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
3. Ｒ^２が、ＯＭｅである、請求項１に記載の化合物。
4. Ｒ^３が、
   

   

   からなる群から選択される、請求項１に記載の化合物。
5. Ｒ^５が、Ｈである、請求項１に記載の化合物。
6. 下記の式（Ｉａ）：
   

   

   で示される構造を有する、請求項１に記載の化合物。
7. Ｒ^１が、
   

   

   からなる群から選択される、請求項６に記載の化合物。
8. Ｒ^３が、
   

   

   からなる群から選択される、請求項６に記載の化合物。
9. 下記の式（Ｉａ）：
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１は、
   

   

   であり；
   Ｒ^３は、ＯＨ、
   

   

   である］
   で示される構造を有する化合物。
10. がんを患う患者に、抗がん免疫療法剤および請求項１または９に記載の化合物の治療的に有効な組み合わせを投与することを特徴とする、がんの治療方法。
11. 前記抗がん免疫療法剤が、アンタゴニスト抗ＣＴＬＡ－４、抗ＰＤ－１、または抗ＰＤ－Ｌ１抗体である、請求項１０に記載の方法。
12. 前記がんが、肺癌（非小細胞肺癌を含む）、膵臓癌、腎臓癌、頭頸部癌、リンパ腫（ホジキンリンパ腫を含む）、皮膚癌（黒色腫およびメルケル皮膚癌を含む）、尿路上皮癌（膀胱癌を含む）、胃癌、肝細胞癌、または結腸直腸癌である、請求項１１に記載の方法。
13. 前記抗がん免疫療法剤が、イピリムマブ、ニボルマブ、またはペムブロリズマブである、請求項１２に記載の方法。