JP2021529516A - サイトカイン融合タンパク質及びその使用 - Google Patents
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Abstract
Description
本出願は、2018年6月18日出願の米国仮出願第62/686,481及び2019年2月22日出願の米国仮出願第62/809,496の優先権の利益を主張するものである。これらの出願の全内容は、全ての目的のために引用により本明細書中に組み込まれている。
本出願は、融合タンパク質、その製造方法、及び融合タンパク質を投与することによって疾患又は障害を治療する方法に関する。
サイトカイン療法は、疾患(癌又は感染症など)に対する免疫応答を誘導するために免疫系を刺激するのに効果的な戦略である。しかし、患者に投与されるサイトカインは、一般的に半減期が短い。例えば、インターロイキン-21は、様々な免疫細胞(T、B及びNK細胞など)を刺激し、抗腫瘍活性を増強する。組換えIL-21は、静脈内投与後約1〜3時間の半減期を有すると報告された。Schmidt H, Clin Cancer Res. 2010 Nov 1;16 (21):5312-9を参照されたい。
本出願は、a)サイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含む融合タンパク質を提供する。いくつかの実施態様では、サイトカインは、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、抗原結合部分をさらに含む。
本出願は、サイトカイン及び半減期延長ドメインを含む融合タンパク質に関する。いくつかの実施態様では、サイトカインは、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、a)アルブミン結合部分と融合したサイトカイン(「サイトカイン-ALBBM」)、及びb)抗原結合部分を含み、サイトカイン-ALBBMと抗原結合部分との結合は、任意に切断可能である。
用語「抗体」は、その最も広い意味で使用され、それらが所望の抗原結合活性を示す限り、モノクローナル抗体、ポリクローナル抗体、多特異性抗体(例えば、二重特異性抗体)、全長抗体及びその抗原結合断片を含むが、これらに限定されない様々な抗体構造を包含する。用語「抗体部分」は、全長抗体又はその抗原結合断片を指す。
表1:CDRの定義
2残基の番号付けは、前出のChothiaらの命名法に従う。
3残基の番号付けは、前出のMacCallumらの命名法に従う。
4残基の番号付けは、前出のLefrancらの命名法に従う。
5残基の番号付けは、前出のHonegger及びPluckthunの命名法に従う。
本明細書に提供されるのは、a)サイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含む融合タンパク質である。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択されるサイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含む。いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分はアルブミン結合ドメイン(ABD)を含む。いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分は、単一ドメイン抗体(sdAb)を含む。いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分は、サイトカインのC末端と融合する。いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分は、サイトカインのN末端と融合する。いくつかの実施態様では、サイトカイン及びアルブミン結合部分は、第1のリンカー(約1〜30個のアミノ酸など)を介して連結される。いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分は、単一ドメイン抗体(VHH抗体など)である。比較的小さい分子量を有するsdAbは、融合タンパク質の癌の浸透を増加させ、それにより、ある種の癌、例えば、固形腫瘍を治療するのにより良好に適するものにするのに役立ち得る。
また本明細書に提供されるのは、a)アルブミン結合部分と融合したサイトカイン(「サイトカイン-ALBBM」)、及びb)抗原結合部分を含む融合タンパク質であって、サイトカイン-ALBBMと抗原結合部分との間の結合が任意に切断可能である、融合タンパク質である。いくつかの実施態様では、該抗原結合部分は腫瘍抗原に結合する。このような融合タンパク質は、様々な利点を提供する。例えば、いくつかの実施態様では、腫瘍抗原に結合する抗原結合部分は、サイトカインの癌近接部への局所送達を可能にし、より低いオフターゲット毒性及び効力の増加をもたらす。
1 血清半減期
いくつかの実施態様では、該融合タンパク質の血清半減期は、個体に投与した場合には少なくとも約15日、約14日、約13日、約12日、約11日、約10日、約9日、約8日、約7日、約6日、約5日、約4日、約3日、約2日、約24時間、約24時間、約20時間、約18時間、約16時間、約14時間、約12時間、約10時間、約8時間、約6時間、約4時間、約3時間、約2時間、又は約1時間である。該融合タンパク質は、様々な経路を介して、例えば、静脈内、経口、皮下又は腹腔内投与することができる。
いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、基準タンパク質よりも高い安定性を有する。いくつかの実施態様では、基準タンパク質は、同じサイトカイン及び/又は同じ抗原結合部分を含むが、アルブミン結合部分を有していない。いくつかの実施態様では、同一のサイトカイン及び同一の抗原結合部分は、融合タンパク質と同じ順序で、及び/又は同じリンカーを介して融合する。
いくつかの実施態様では、本明細書に記載の融合タンパク質は、基準タンパク質と比較して改善された臨床的性質を有する。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、基準タンパク質の細胞毒性活性と比較して、改善された細胞毒性活性を示す。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、基準タンパク質の抗腫瘍効果と比較して、より高い抗腫瘍効果(腫瘍負荷を低減し、生存を改善するなど)を示す。いくつかの実施態様では、該基準タンパク質は、同じサイトカイン及び/又は同じ抗原結合部分を含むが、アルブミン結合部分を有していない。いくつかの実施態様では、同一のサイトカイン及び同一の抗原結合部分は、融合タンパク質と同じ順序で、かつ/又は同じリンカーを介して融合する。
本明細書に記載の融合タンパク質の細胞に対する細胞毒性(ADCC活性など)は、多くのアッセイを用いて試験することができる。例えば、該融合タンパク質が認識することができる抗原を発現する癌細胞株、及びエフェクター細胞(例えば、PBMC細胞)を、96ウェルプレート内で混合する。様々な濃度の融合タンパク質を各ウェルに添加する。インキュベーション後、EC50(ADCC活性を表す)を計算することができる。
いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、個体における癌(例えば、腫瘍成長を阻害することによって)を治療する。いくつかの実施態様では、融合は、基準タンパク質の抗腫瘍効果と比較して、癌に対して増強された抗腫瘍効果を示した。例えば、いくつかの実施態様では、該融合タンパク質の投与は、基準タンパク質の腫瘍負荷と比較して、腫瘍負荷の減少(少なくとも約10%、20%、30%、40%又は50%未満などの腫瘍体積)をもたらした。いくつかの実施態様では、癌は、中皮腫、肺癌、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、リンパ腫、白血病、頭頚部癌、肝臓癌、食道癌、胃癌、及び結腸直腸癌を含む群から選択される。いくつかの実施態様では、該基準タンパク質は、同じサイトカイン及び/又は同じ抗原結合部分を含むが、アルブミン結合部分を有していない。いくつかの実施態様では、同一のサイトカイン及び同一の抗原結合部分は、融合タンパク質と同じ順序で、及び/又は同じリンカーを介して融合する。
いくつかの実施態様では、本明細書に記載の融合タンパク質は、サイトカインとアルブミン結合部分との間に第1のリンカーを含む。いくつかの実施態様では、本明細書に記載の融合タンパク質は、アルブミン結合部分と融合したサイトカイン(「サイトカイン-ALBBM」)と抗原結合部分との間に第2のリンカーを含む。
上記の成分のカップリングは、両成分がそれぞれの活性、すなわち、サイトカイン受容体、アルブミン、又は標的抗原へのそれぞれの結合を保持する限り、2つの分子を結合する任意の化学反応によって達成され得る。この結合は、多くの化学的メカニズム、例えば、共有結合、親和性結合、インターカレーション、配位結合及び錯化を含むことができる。いくつかの実施態様では、結合は共有結合である。共有結合は、既存の側鎖の直接縮合又は外部架橋分子の取り込みのいずれかによって達成することができる。多くの二価又は多価の連結剤は、この文脈においてタンパク質分子をカップリングするのに有用であり得る。例えば、代表的なカップリング剤は、チオエステル類、カルボジイミド、スクシンイミドエステル類、ジイソシアネート、グルタルアルデヒド、ジアゾベンゼン類及びヘキサメチレンジアミン類などの有機化合物を含むことができる。このリストは、当技術分野で知られている様々なクラスのカップリング剤を網羅することを意図するものではなく、むしろ、より一般的なカップリング剤の例である(Killen及びLindstromらの文献, Jour. Immun. 133:1335-2549 (1984); Jansenらの文献, Immunological Reviews 62:185-216 (1982);並びにVitettaらの文献, Science 238:1098 (1987)を参照されたい)。
ペプチドリンカーは、天然に存在する配列、又は非天然の配列を有してよい。例えば、重鎖のヒンジ領域由来の配列をリンカーとして使用してよい。例えば、WO1996/34103を参照されたい。
本明細書に記載の融合タンパク質はサイトカインを含む。いくつかの実施態様では、サイトカインは、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される。
IL-21は、広範囲の免疫及び非免疫細胞型に対して多面発現作用を有するT細胞及びナチュラルキラーT細胞によって産生されるI型サイトカインである。このサイトカインは、CD4+及びCD8+ T細胞、B細胞、マクロファージ、単球、及び樹状細胞(DC)を含むが、これらに限定されない広範囲の細胞型に対して多様な影響を及ぼす。IL-21の機能的受容体は、IL-21受容体(IL-21R)、並びにIL-2、IL-4、IL-7、IL-9、及びIL-15の受容体のサブユニットでもある共通のサイトカイン受容体γ鎖(γc)で構成される。
IL-7は、IL-2スーパーファミリーのメンバーの1つである。IL-2スーパーファミリーは、IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15及びIL-21を含む。IL-2スーパーファミリーは、共通のγ鎖サブユニットを有する受容体に結合する。共通のγ鎖サブユニットに加えて、IL-7の受容体(IL-7R)は、結合を起こすためにIL-7Rα鎖を必要とする。Linらの文献, Anticancer Res. 2017 Mar;37(3):963-967を参照されたい。
IL-15のヘテロ三量体受容体は、IL-2R/IL-15Rβ(CD122)及び共通のガンマ(γc)鎖(CD132)をIL-2受容体と共有する。IL-15及びIL-2は、T細胞増殖の刺激、細胞傷害性Tリンパ球の生成、B細胞による免疫グロブリン合成の刺激、並びにNK細胞の生成及び持続性を含むある種の機能を共有する。しかし、多くの適応性免疫応答において、IL-2及びIL-15はまた、明確でしばしば競合する役割を有する。IL-2とは異なり、IL-15は、抗腫瘍性免疫応答を減衰させることができる調節性T細胞(Treg)の維持に必要とされない。IL-15とは対照的に、IL-2は、CD8+エフェクターT細胞の活性化誘導細胞死(AICD)を介するT細胞応答を阻害する。しかし、IL-15は、NK、エフェクターCD8+及び表現型CD8+ T記憶細胞の分化に必要である。加えて、臨床前の研究に基づくと、それらの毒性は異なると思われ、IL-2とは対照的に、血管毛細管漏れがIL-15ではほとんど観察されない。要約すると、IL-15は、主に、CD8 T細胞及びNK細胞の増殖並びに細胞毒性機能を刺激し、増強された抗腫瘍応答をもたらす。しかし、最初は癌治療薬としての見込みを示したが、IL-15の有効性は、その短いインビボ半減期によって制限された。Steelらの文献, Trends Pharmacol Sci. 2012 Jan; 33(1): 35-41。Robinson らの文献 Immunol Lett. 2017 Oct; 190: 159-168を参照されたい。
インターロイキン-33(IL-33)は、IL-1ファミリーのメンバーである。これは、最初に、Tヘルパー2(TH2)細胞及び肥満細胞を活性化する2型免疫応答のインデューサとして説明された。現在は、IL-33もグループ2の自然リンパ球系細胞(ILC2)、調節性T(Treg)細胞、TH1細胞、CD8+ T細胞及びナチュラルキラー(NK)細胞を強力に刺激するという証拠が蓄積している。この多面発現性は、組織及び代謝恒常性、感染、炎症、癌及び中枢神経系の疾患におけるIL-33の役割に反映される。
インターロイキン-22(IL-22)は、Tヘルパー(Th)-17細胞、γδ T細胞、NKT細胞及び新たに説明された自然リンパ球系細胞(ILC)によって産生される、最近説明されたIL-10ファミリーサイトカインである。ヒトIL22遺伝子は、IFN-γ及びIL-26をコードする遺伝子の近傍の染色体12q15に位置する。サイトカインの活性のある分泌型は、146個のアミノ酸のタンパク質である。
いくつかの実施態様では、サイトカインバリアントは、本明細書に提供される融合タンパク質中に存在することができる。変異は、ヒト野生型サイトカインタンパク質と比較して、アミノ酸配列の変化をもたらすサイトカインポリペプチドをコードする1以上のコドンの置換、欠失、又は挿入であってよい。アミノ酸置換は、ロイシンとセリンとの置換などの、1つのアミノ酸を、類似の構造的及び/又は化学的性質を有する別のアミノ酸に置換した結果、例えば、保存的アミノ酸置換であり得る。例えば、アミノ酸置換をもたらす部位特異的変異誘発及びPCR媒介変異誘発を含む当業者に知られている標準的な技術を用いて、本明細書に提供される分子をコードするヌクレオチド配列中に変異を導入することができる。挿入又は欠失は、任意に、約1〜10個のアミノ酸の範囲内に存在し得る。ある実施態様では、置換、欠失、又は挿入は、元の分子と比較して25個未満のアミノ酸置換、20個未満のアミノ酸置換、15個未満のアミノ酸置換、10個未満のアミノ酸置換、5個未満のアミノ酸置換、4個未満のアミノ酸置換、3個未満のアミノ酸置換、又は2個未満のアミノ酸置換を含む。いくつかの実施態様では、置換は、1以上の予測された非必須アミノ酸残基に行われる保存的アミノ酸置換である。許容される変異は、配列中のアミノ酸の挿入、欠失、又は置換を系統的に行い、完全長又は成熟天然配列が示す活性について、得られたバリアントを試験することによって決定してよい。
本明細書に記載の融合タンパク質はアルブミン結合分子を含む。関心のあるタンパク質に連結されるアルブミン結合分子及び方法は、例えば、WO 1991/01743、WO 2001/45746、WO 2002/076489、WO 2004/041865、又は米国特許公開第20070269422A1号に記載されており、それらの内容は、引用により本明細書中に組み込まれている。
いくつかの実施態様では、アルブミン結合部分はアルブミン結合ドメイン(ABD)を含む。いくつかの実施態様では、アルブミン結合分子は、SPG株G148のABDを含む。いくつかの実施態様では、アルブミン結合分子は、SPG株G148のC末端アルブミン結合ドメイン3(ABD3)を含む。例えば、Nilvebrant及びHober (2013)の文献, Comput. Struct. Biotechol. J., 6: e201303009を参照されたい。
本発明によれば、アルブミン結合部分はまた、抗アルブミン抗体又はその抗原結合断片であり得る。いくつかの実施態様では、抗アルブミン抗体又はその抗原結合断片は、抗HSA抗体又はその抗原結合断片である。
表2
いくつかの実施態様では、抗体断片は、単一ドメイン抗体(sdAb)である。
いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は抗原結合部分をさらに含み、該抗原結合部分は、アルブミン結合部分と融合したサイトカイン(「サイトカイン-ALBBM」)のN末端又はC末端と融合する。
いくつかの実施態様では、該抗原結合部分は、抗メソテリン単一ドメイン抗体(「抗-MSLN dsAb」)である。
いくつかの実施態様では、本明細書に提供される融合タンパク質のアミノ酸配列バリアントが企図される。例えば、融合タンパク質の全体又は任意の成分(複数可)において融合タンパク質の結合親和性及び/又は他の生物学的性質を向上させることが望ましい場合がある。融合タンパク質のアミノ酸配列バリアントは、融合タンパク質をコードする核酸配列に適切な改変を導入することによって、又はペプチド合成によって調製され得る。このような改変は、例えば、融合タンパク質のアミノ酸配列中の残基からの欠失、及び/又は残基への挿入及び/又は残基の置換を含む。最終構築物が所望の特性を有するように、欠失、挿入、及び置換を任意に組合せることで、最終構築物に到達することができる。
いくつかの実施態様では、1以上のアミノ酸置換を有する融合タンパク質バリアントが提供される。置換変異誘発のための関心部位は、アルブミン結合分子及び/又は抗原結合部分のHVR並びにFRを含む。保存的置換は表3に示されている。より多くの実質的な変化は、アミノ酸側鎖クラスを参照して以下にさらに記載するように、「例示的な置換」の見出しの下に提供される。アミノ酸置換は、融合タンパク質の成分中に導入され、生成物は、所望の活性、例えば、抗原結合の保持/改善、免疫原性の低下、又はADCC若しくはCDCの改善についてスクリーニングされ得る。節「V.調製方法」の下の小区分「1. アミノ酸配列バリアント」も参照されたい。
表3. アミノ酸置換
(1)疎水性:ノルロイシン、Met、Ala、Val、Leu、Ile;
(2)中性親水性:Cys, Ser, Thr, Asn, Gln;
(3)酸性:Asp, Glu;
(4)塩基:His, Lys, Arg;
(5)鎖の方向に影響を与える残基:Gly, Pro;
(6)芳香族:Trp, Tyr, Phe。
いくつかの実施態様では、本明細書に提供される融合タンパク質は、当技術分野で公知であり、容易に入手可能なさらなる非タンパク質性部分を含有するようにさらに修飾されてよい。融合タンパク質の誘導体化に適する部分には、水溶性ポリマーが含まれるが、これらに限定されない。水溶性ポリマーの非限定的な例には、ポリエチレングリコール(PEG)、エチレングリコール/プロピレングリコールの共重合体、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、ポリ-1,3-ジオキソラン、ポリ-1,3,6-トリオキサン、エチレン/無水マレイン酸共重合体、ポリアミノ酸(ホモポリマー又はランダム共重合体のいずれか)、及びデキストラン又はポリ(n-ビニルピロリドン)ポリエチレングリコール、プロプロピレングリコールホモポリマー類、プロリプロピレンオキシド/エチレンオキシド共重合体、ポリオキシエチル化ポリオール類(例えば、グリセロール)、ポリビニルアルコール、及びそれらの混合物が含まれるが、これらに限定されない。ポリエチレングリコールプロピオンアルデヒドは、水中での安定性による製造上の利点を有し得る。ポリマーは、任意の分子量であってよく、分岐状又は非分岐状であってよい。融合タンパク質に結合したポリマーの数は変化してもよく、2以上のポリマーが結合している場合、それらは同一分子又は異なる分子であり得る。一般に、誘導体化に使用されるポリマーの数及び/又は種類は、改善されるべき融合タンパク質の特定の性質又は機能、融合タンパク質誘導体が規定条件下での治療に使用されるか否かなどを含むが、これら限定されない留意事項に基づいて決定することができる。
本出願はまた、切断型ヒトIL-21を含むヒトIL-21バリアントを含む融合タンパク質を提供する。理論に拘束されることなく、C末端に1〜11個のアミノ酸を欠くIL-21の切断型を含む融合タンパク質は、野生型対応物及びC末端に12個以上のアミノ酸を欠く切断された対応物よりも安定性が改善されていることが明らかになっている。本明細書に記載の切断型IL-21を含む融合タンパク質が、抗アルブミン結合部分を含む融合タンパク質に限定されないことが企図される。
本出願によってさらに提供されるのは、本明細書に記載の融合タンパク質のいずれか1つを含む医薬組成物、及び任意に、医薬として許容し得る担体である。医薬組成物は、凍結乾燥製剤又は水溶液の形態で、所望の純度を有する本明細書に記載の融合タンパク質を、任意選択の医薬として許容し得る担体、賦形剤又は安定剤と混合することによって調製することができる(レミントンの薬学(Remington's Pharmaceutical Sciences) 第16版, Osol, A.(編) (1980))。
本出願の一態様は、本明細書に記載の融合タンパク質又は医薬組成物を用いて、個体における疾患又は病態を治療する方法を提供する。例えば、本明細書に記載の融合タンパク質は、a)サイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含む。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択されるサイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含む。いくつかの実施態様では、該アルブミン結合部分は、アルブミン結合ドメイン又は本明細書に記載のアルブミンに結合する単一ドメイン抗体(sdAb)を含む。いくつかの実施態様では、本方法は、第2の薬剤を投与することをさらに含む。
いくつかの実施態様では、疾患又は病態を治療するための融合タンパク質は、本明細書に記載(節IIの中など)の融合タンパク質のいずれかを含む。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質は、i)サイトカイン及びii)サイトカインと融合した半減期延長ドメインを含む。いくつかの実施態様では、半減期延長ドメインは、サイトカインのC末端と融合する。いくつかの実施態様では、半減期延長ドメインは、サイトカインのN末端と融合する。いくつかの実施態様では、サイトカイン及び半減期延長ドメインは、リンカーを介して連結される。いくつかの実施態様では、リンカーは、本明細書に記載(節II-Bの中など)の任意のリンカーであり得る。いくつかの実施態様では、サイトカインは、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される。いくつかの実施態様では、サイトカインは、IL-21である。
いくつかの実施態様では、本明細書に記載の疾患又は病態を治療するための融合タンパク質は、半減期延長ドメインを含む。
FcRn媒介リサイクルが可能な抗体又はその断片にサイトカインを結合させることにより、対象からのサイトカインのクリアランスを低減又は別の方法で遅延させることができ、それにより、投与されたサイトカインの半減期を長くすることができる。
アルブミンは、そのサイズ及びFcRn媒介リサイクルに対する感受性により、約3週間の延長された血清半減期を有し、細胞内分解を防止する天然の担体タンパク質である。そのため、サイトカインをアルブミンに結合させることにより、サイトカインの半減期を大幅に延長することができる。この手法は、治療上有益なタンパク質の血漿半減期を延長するために行われてきた。例えば、WO 2001/079271A1及びWO 2003/59934A2を参照されたく、これらの内容は、引用により本明細書中に組み込まれている。HSAのいくつかのアイソフォームを表2に列挙した。
血清中のサイトカイン又はそのバリアントの半減期を延長するためのさらなる計画は、上記のアルブミン結合タンパク質又はIgG結合タンパク質などのある結合タンパク質にサイトカインを結合させることを含む。結合タンパク質は、アルブミン又はIgGなどの半減期が延長した血清タンパク質に結合する任意のタンパク質であり得る。アルブミン及びIgGは、血清中で長い半減期を有することが知られているポリペプチドである。
あるいは、本明細書に記載のサイトカインは、scFv、scFc、二重可変ドメイン(DVD)、及びCrossMab手法に基づく抗体誘導体を含むが、これらに限定されない様々な抗体誘導体に連結されてよい。例えば、Kleinらの文献 (2012), MAbs, 4(6): 653-663;米国特許公開第20070071675A1号を参照されたい。抗体誘導体は、二重特異性抗体又はその断片として操作された抗体誘導体を含む。このように、いくつかの実施態様では、半減期延長ドメインは、scFv、scFc、二重可変ドメイン(DVD)、CrossMab手法に基づく抗体誘導体、及び二重特異性抗体又はその断片を含むが、これらに限定されない任意の抗体誘導体、バリアント、又はその融合生成物を含むことができる。
血清中の融合タンパク質の半減期を延長するためのさらなる計画は、該融合タンパク質をポリアミノ酸配列に連結させることによるものである。このように、いくつかの実施態様では、半減期延長ドメインは、ポリアミノ酸配列を含む。ポリアミノ酸配列は、融合タンパク質に連結されたときに、血清中の融合タンパク質の半減期を延長することができる任意のポリアミノ酸配列であり得る。ポリアミノ酸配列の例には、PASポリペプチド及びXTENポリペプチドが含まれる。
本明細書に提供されるサイトカインの半減期を延長するためのさらなる計画には、PEG化及びさらなるグリコシル化部位の操作が含まれる。これらの計画の各々を、以下でさらに詳細に説明する。
本明細書に記載の半減期延長ドメインは、2つの異なる半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進する1以上の改変を含んでよい。第1の半減期延長ドメイン及び第2の半減期延長ドメインを含むいくつかの実施態様では、その正しいヘテロ二量体形態での融合タンパク質の生成が効率的に生成されるように、第1及び第2の半減期延長ドメインのヘテロ二量体化を促進することが望ましい。このように、第1の半減期延長ドメインに1以上のアミノ酸改変を行うことができ、Kleinらの文献 (2012), MAbs, 4(6): 653-663に記載されているような任意の計画を含む、当技術分野で利用可能な任意の計画を用いて、第2の半減期延長ドメインに1以上のアミノ酸改変を行うことができる。
本明細書に記載の方法は、疾患又は障害を治療するために使用することができる。いくつかの実施態様では、疾患又は病態は、癌、炎症状態、及び感染症からなる群から選択される。
融合タンパク質及び/又は第2の薬剤は、任意の適切な投薬量及び投与経路を使用して個体に投与されてよい。いくつかの実施態様では、該融合タンパク質及び/又は第2の薬剤は、個体に非経口投与される。投与経路は、適切な方法、例えば、皮下、静脈内、腹腔内、筋肉内、動脈内、病巣内、関節内、腫瘍内、又は経口経路による注射又は注入で、ある期間にわたる単回若しくは複数回のボーラス又は注入などによって既知の、許容される方法に従う。
本明細書に記載の融合タンパク質及び本明細書に記載の融合タンパク質の成分(アルブミン結合部分、サイトカイン又はそのバリアント、抗原結合部分など)は、当技術分野で知られているタンパク質の発現及び精製の方法のいずれかによって調製され得る。
本発明のいくつかの実施態様では、個体に融合タンパク質を投与するための、個体における疾患又は病態(癌又は炎症性疾患など)の治療に有用な材料を含有する製品が提供される。製品は、容器と、容器上の若しくは容器に付随するラベル又は添付文書を含むことができる。適切な容器には、例えば、ボトル、バイアル、注射器などが含まれる。容器は、ガラス又はプラスチックなどの様々な材料から形成されてよい。一般的に、容器は、本明細書に記載の疾患又は障害を治療するのに有効な組成物を保持し、滅菌アクセスポートを有してよい(例えば、容器は、静脈用溶液バッグ又は皮下注射針によって穿刺可能なストッパを有するバイアルであってよい)。組成物中の少なくとも1つの活性剤は、本明細書に記載の融合タンパク質である。ラベル又は添付文書は、組成物が特定の状態を治療するために使用されることを示す。ラベル又は添付文書は、融合タンパク質を患者に投与するための説明書をさらに含む。本明細書に記載の併用療法を含む製品及びキットも企図される。
1. a)サイトカイン、及びb)アルブミン結合部分(アルブミンに結合するsdAbなど)を含み、該サイトカインが、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される、融合タンパク質。
以下の実施例は、本出願の純粋な例示であることが意図されており、したがって、決して適用を制限するものと見なされるべきではない。以下の実施例及び詳細な説明は、例示のためのものであり、限定するものではない。
この実施例は、本明細書で提供されるある例示的なIL-21融合タンパク質を示す。この実施例に記載の例示的なIL-21融合タンパク質は、本発明の全範囲を表すことを意図するものではないことを理解すべきである。
ラマに免疫接種するために、2つの異なる抗原ペプチドを用いて、抗MSLN単一ドメイン抗体(VHH抗体)を生成した。第1の抗原ペプチド(MSLN抗原1)は、細胞膜に固定されたMSLNを表す。第2の抗原ペプチド(MSLN抗原2)は、細胞膜に固定されたMSLNのC末端を表す。これら2つのペプチドの配列は以下の通りである:
MSLN抗原1(MSLN切断型)
オリゴヌクレオチド合成
例示的なオリゴヌクレオチド合成手順を以下に記載する。ヒトIL-21全長をコードするcDNA配列(配列番号1)、ヒトIL-21切断型(配列番号2)、G148-ABD-wt(配列番号3)、低免疫原性G148-ABDバリアント(配列番号4〜11)、HSAを標的とするヒト化sdAb、及びMSLNを標的とするヒト化sdAb(例えば、表4に列挙したもの)を、NgoMIV制限酵素部位、及び5'に付加されたKozak配列及び3'に付加されたSalI制限酵素部位と共に、GeneArt遺伝子合成(ThermoFisher Scientific)又はgBlocks遺伝子断片(Integrated DNA Technologies)を用いる遺伝子合成によって取得した。これらの遺伝子のコドン使用を、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞における発現のために最適化した。合成オリゴヌクレオチドを、NgoMIV/SalI消化-ライゲーション法によりUCOE発現ベクターCET1019-AS-Puro (CS221284, Millipore Sigma)に挿入した。
IL-21融合タンパク質発現ベクターの構築を本明細書に例示する。IL-21のC末端を、ペプチドリンカー(L1)を介してアルブミン結合ドメイン又はアルブミン結合sdAb(αHSA)のN末端と融合し、アルブミン結合ドメイン又はアルブミン結合sdAbのC末端を、第2のペプチドリンカー(L2)を介してメソテリン結合sdAb(抗MSLN)と融合した。これらのポリペプチドをコードするDNA配列を、Gibsonアセンブリ(Synthetic Genomics)又は同様のインビトロ組換え法によって、シームレスに一緒にアセンブリすることができる。Gibsonアセンブリ反応のためにその隣接する断片に重複する配列を有するDNA断片を生成するために、L1若しくはL2リンカーペプチドをコードする20〜40塩基対(bp)の重複配列又はCET1019-AS-Puroベクター配列を、プライマーの5'末端に導入した(図2、工程1参照)。増幅後、PCR産物を精製し、PureLinkゲル抽出キット(ThermoFisher Scientific)を用いたゲル抽出により回収した。所望の遺伝子-リンカー-ベクター組合せの精製したDNA断片を、Gibsonアセンブリマスターミックス(New England BioLabs)又はNEBuilder HiFi DNAアセンブリマスターミックス(New England BioLabs)によって、製造業者のプロトコルに従って混合し、アセンブリした(図2、工程2参照)。
IL-21融合タンパク質をコードするDNA配列を、ExpiCHO細胞において一過的に発現させる。簡単に説明すると、1日目に、CHO細胞を、流れが調節されていない125mlのフラスコ中の25mlの一過性トランスフェクション培地(BalanCD(登録商標)Transfectory(商標)CHO, Irvine Scientific, # 91147)、及び4mMのグルタミン中に3〜4×l0e6細胞/mlで播種する。0日目に、22.5μgのプラスミドDNAを1.5mlの一過性トランスフェクション培地中で112.5μgのPEIと混合し、室温で7分間インキュベートする。次いで、混合物を細胞にゆっくりと添加する。1日目に1回、50g/LのTC Yeastolyteと共に、1)0.5mMのバルプロ酸(50μl〜25ml)、2)10% post-TF supplement (Irvine Scientific #91148)、3)1.5mlのグルコース原料(200g/L)、及び4)5% IS Feedを細胞に供給する。CHO細胞を、アフィニティーカラムでの精製のために8日目に回収する。
ヒトNK細胞を、陰性選択キット-キットII(全てのビーズは、Miltenyi Biotech, Bergisch Gladbach, Germanyからのものである)を使用して単離する。精製を手動で行うか、又はAutoMACS (Miltenyi)を用いて行う。細胞の純度は、蛍光活性化細胞選別(FACS)によって常に制御され、90%超である。単離したNK細胞を、上の実施例1に記載のものを含む本明細書に提供する融合タンパク質で処理する。NK細胞の増殖を、FACS分析を用いてCD69シグナルで監視する。
ヒト肺癌細胞A549を、新たに単離したヒトPBMCと混合し、0、5、10、及び50ng/mLの精製IL-21融合タンパク質とインキュベートする。MMP切断可能なリンカーを使用する場合には、IL-21を活性化するために添加したMMP9を用いて、平行な実験セットを設定する。混合培養物を72時間までインキュベートし、MTS法を使用して、この研究における凍結標的細胞の割合を決定する。
Neuマウスに、0日目にA549癌細胞を移植する。腫瘍が約50〜100mm3まで増殖した後に、マウスをランダム化し、1日おきに本明細書に提供するIL-融合タンパク質及び対照(例えば、PBS中のアイソタイプ対照抗体)で処理する。本明細書に提供するIL-21融合タンパク質は、IL-21併用研究(IL-21と第2の薬剤の併用治療の研究)と比較した場合、同じ用量でより良好な有効性を示すか、又はかなり低い用量で同様の有効性を達成することが予想される。
ラマに免疫接種して、イネから発現させたヒト血清アルブミン(HSA)(Sigma、#A9731)を用いて、抗HSA単一ドメイン抗体(VHH抗体)を生成した。免疫後、末梢単核細胞(PBMC)をRNA抽出のために単離した。VHH抗体ファージディスプレイライブラリーを、抗体遺伝子をコードするmRNA/cDNAを用いて構築した。構築したファージディスプレイライブラリーを、抗原との親和性結合の複数ラウンドを経てスクリーニングした。陽性クローンを、Octet親和性測定(ForteBio, Octet RED96)によって同定した。陽性クローンの抗体遺伝子の配列を決定し、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞発現のためにUCOEベクター(EMD Millipore, #CS221284)にクローニングした。
本明細書では、IL-21-抗HSA融合タンパク質発現ベクターの構築を例示する。GeneArt Gene Synthesis (ThermoFisher Scientific)を用いた遺伝子合成により、ヒトIL-21全長をコードするcDNA配列(配列番号1)を得た。これらの遺伝子のコドン使用を、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞における発現のために最適化した。ヒトIL-21のC末端を、ペプチドリンカーを介して抗HSA VHH抗体のN末端と融合した。ヒトIL-21、ポリペプチドリンカー及び抗HSA VHH抗体をコードするDNA配列は、アセンブリクローニング(New England BioLabs, #E5520S)又は同様のインビトロ組換え法によってシームレスにアセンブルすることができる。IL-21-抗HSA融合のオリゴヌクレオシドを、CHO細胞発現のためにUCOE発現ベクターCET1019-AS-Puro (EMD Millipore, #CS221284)に挿入した。
IL-21融合タンパク質をコードするDNA配列を、ExpiCHO細胞において一過的に発現させる。簡単に説明すると、1日目に、ExpiCHO-S細胞(Gibco(商標)、#A29127)を、ベント式エルレンマイヤー振蕩フラスコ中のExpiCHO発現培地(Gibco(商標)、#A2910001)と共に3〜4×l0e6細胞/mLで播種し、8% CO2を有する37℃のインキュベーター中の125rpmのオービタルシェーカー上に置いた。0日目に、プラスミドDNAをExpifectamine CHO試薬(Gibco(商標)、#A29129)と混合した。次いで、混合物を細胞にゆっくりと添加する。16時間後、細胞を5% CO2を有する32℃のインキュベーターに移す。細胞に、ExpiCHO(商標)供給(Gibco(商標)、#A29129)を1日目及び5日目に2回供給する。CHO細胞を、アフィニティーカラムでの精製のために8日目〜12日目に収集する。
10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中でPfeiffer細胞を維持した。100,000個のPfeiffer細胞を、10mMのHEPESを含有するハンクス平衡塩溶液中で、5% CO2、37℃で30分間、組換えヒトIL-21(rhIL-21)、P390(マウスIL-21-抗HSA、配列番号120の配列を有する)、又はP394(ヒトIL-21-抗HSA、配列番号121の配列を有する)の示した濃度で処理した。リン酸化STAT3は、製造業者の説明書に従って、リン酸化STAT3(Tyr705)均一時間分解蛍光(HTRF)アッセイ(Cisbio)を用いて測定した。665nm/620nmのシグナル比を1000倍し、用量応答曲線(Graphpad Prism)を用いてプロット及びフィッティングをして、EC50を計算した。
NCI-N87及びNCI-H226癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェル及び5,000個のNCI-H226細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P303は抗MSLN抗体であり、P394はヒトIL-21-抗HSA融合タンパク質であり、P390はマウスIL-21-抗HSA融合タンパク質であり、P461/P462はヒトIL-15/IL-15Rα-抗HSA融合タンパク質である)。
NCI-N87及びNCI-H226癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェル及び5,000個のNCI-H226細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。抗MSLN抗体P303を、3ng/ml(NCI-N87細胞)又は20ng/ml(NCI-H226細胞)のいずれかで各ウェルに添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P303は抗MSLN抗体であり、P394はヒトIL-21-抗HSA融合タンパク質であり、P390はマウスIL-21-抗HSA融合タンパク質であり、P461/P462(配列番号123及び124)とP461/P463(配列番号(123及び125)は両方ともヒトIL-15/IL-15Rα-抗HSA融合タンパク質であり、rhIL-15は組換えヒトIL-15である)。
パートA.
10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中でPfeiffer細胞を維持した。100,000個のPfeiffer細胞を、10mM HEPESを含有するハンクス平衡塩溶液中の示した濃度の組み換えヒトIL-21(rhIL-21)、P394(ヒトIL-21-GSG4-抗HSA、配列番号121の配列を有する)、P593(ヒトIL-21(1-122)-A(EAAAK)4A-抗-HSA)、P636(ヒトIL-21(1〜119)-GSG4-抗HSA)、P637(ヒトIL-21(1〜120)-GSG4-抗HSA)、P744(ヒトIL-21((1〜122)-A(EAAAK)4A-抗-HSA)、P748(抗HSA-A(EAAAK)4A-ヒトIL-21(1〜122)、P750(ヒトIL-21-GSG4-抗HSA)、P751(ヒトIL-21-A(EAAAK)4A-抗HSA)、及びP783(ヒトIL-21(1〜122)-A(EAAAK)4A-抗-HSA)で、37℃、5% CO2で30分間処理した。リン酸化STAT3を、製造業者の説明書に従って、リン酸化STAT3(Tyr705)均一時間分解蛍光(HTRF)アッセイ(Cisbio)を用いて測定した。665nm/620nmのシグナル比を1000倍し、用量応答曲線(Graphpad Prism)を用いてプロット及びフィッティングして、EC50を計算した。
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェル及び5,000個のNCI-H226細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P394)(ヒトIL-21-GSG4-抗HSA、配列番号121の配列を有する)、P593(ヒトIL-21(1〜122)-A(EAAAK)4A-抗-HSA)、P636(ヒトIL-21(1〜119)-GSG4-抗HSA)、P637(ヒトIL-21(1〜120))-GSG4-抗HSA)、P744(ヒトIL-21(1〜122)-A(EAAAK)4A-抗HSA)、P748(抗HSA-A(EAAAK)4A-ヒトIL-21(1〜122)、P750(ヒトIL-21-GSG4-抗HSA)、P751(ヒトIL-21-A(EAAAK)4A-抗-HSA)及びP783(ヒトIL-21(1〜122)-A(EAAAK)4A-抗-HSA))。
Balb/cJマウスに、100μlのPBSで希釈したrhIL-21、P325又はP394を腹腔内注射した。投与前の採血に続いて、P394の化合物注射後0.5、2、6、24、48、72、96時間の時点で、又はrhIL-21及びP325の化合物注射後0.25、0.5、1、2、6、24、48、72時間の時点でマウスから採血した。EDTAを有するマイクロテイナー(BD)に血液を入れ、凝血を防止した。IL-21タンパク質を製造業者の説明書に従って、IL-21 ELISA(Life Technologies)を用いて定量し、各化合物は自身の基準として機能した。
パートA. HPLC及びSDS-PAGE
IL-21融合タンパク質の精製後、それらのサイズ及び純度をSDS-PAGE及び/又は高速液体クロマトグラフィー(HPLC)によって測定した。SDS-PAGEについては、4〜12%のビス-トリスタンパク質ゲルプレキャストゲル(Thermofisher)を用い、各ウェルに約lμgのタンパク質を入れた。電気泳動後、タンパク質ゲル上のタンパク質を固定し、InstantBlueタンパク質染色(Expedeon)で染色した。図9Aに示すように、最適化したリンカーと組合せて、切断型IL-21(1〜122)-A(EAAAK)4A-抗HSA融合タンパク質(AWT-593)は、全長のIL-21-(GSG)4-抗HSA融合タンパク質(AWT-P394、レーン1)と比較して低下した分解(レーン3)を示す。
最良の配合条件及び異なる分子デザインの安定性を迅速に評価するために、2段階精製したIL-21融合タンパク質を、0.02% Tween 80と共に、異なるpH(3〜7)で様々な量のヒスチジン(5〜20mM)及びNaCl(0〜100mM)を含む異なる緩衝液に緩衝液交換した。タンパク質試料を40℃〜80℃に徐々に加熱し、各試料のリアルタイムタンパク質サイズ分布を、DynaPro Plate Reader III (Wyatt Technology)を用いる動的光散乱(DLS)によって測定した。2段階精製後、IL-21-抗HSA融合タンパク質の99%超が10nMより小さかった。温度勾配中、タンパク質製剤中で凝集を誘導するのに必要な最低温度を、T開始として決定した。全ての試験条件において最高のT開始(80℃超)を与える最良の製剤は、pH4.0の5mMのヒスチジン、25mMのNaCl及び0.02% Tween 80であった。図9C〜9Dを参照されたい。
IL-21-抗HSA融合タンパク質AWT-P394又はAWT-P593に対するヒトIL-21受容体の結合。Octet RED96 (ForteBio)を使用して、相互作用を特徴付けた。簡単に説明すると、ヒトIL-21受容体-hgG1 Fc融合タンパク質を、AHCバイオセンサー上に添加し、100nMの濃度でAWT-P394又はAWT-P593に浸漬した。一次実験データを、グローバルフィッティングを用いて分析し、KDを決定した。図9Eを参照されたい。
アルブミンは、ヒト血清中の最も豊富なタンパク質であり、3週間の半減期を有する。血清アルブミンの長い半減期は、大部分は、新生児Fc受容体(FcRn)からの保護に起因する。血清アルブミンは、液相ピノサイトーシスと命名されたプロセスを介して体細胞によって摂取され得る。ピノサイトーシス小胞は、その後エンドソーム区画と融合し、pHは4.5〜6.5の範囲内である。小胞中のタンパク質がそれらの受容体から放出される場合、それらはさらにリソソーム分解のために選別される。血清アルブミンとFcRnの結合は、酸性pH(6.5未満)でのみ生じ、FcRnがアルブミンをエンドソームからレスキューし、それらを血清に再循環させるのを可能にする(Grevysらの文献、2018)。したがって、アルブミン依存性半減期延長部分として、抗HSA抗体は、中性と酸性の両方のpHでそれらの結合親和性を保持する必要がある。
表9
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P303-R3C7抗MSLN抗体、フコシル化が低下したP303F-R3C7抗メソテリン抗体、P394-ヒトIL-21-抗HSA、P390-マウスIL-21-抗HSA、P431/435-ヒトIL-21-抗HSA-IgG1-R3C7、P479-抗HSA-ヒトIL-15RA スシ/IL-15、P480-抗HSA-ヒトIL-15RA スシ/IL-15、rhIL-21-組換えヒトIL-21、rhIL-15組換えヒトIL-15)。
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(フコシル化が低下したP303F-Anwita抗メソテリン抗体、P380-IL-33-抗HSA、P394-ヒトIL-21-抗HSA)。
10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中でPfeiffer癌細胞株を維持した。1日目に、10,000個のPfeiffer細胞/ウェルを96ウェル平底プレート中の培地中に播種した。RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、30,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で24時間インキュベートし、次いで、FACS分析のために、1μMのプロピジウムヨウ化物で染色した。Pfeiffer細胞を、FSC及びSSCゲーティングに基づいてNK細胞から分離し、合計Pfeiffer細胞数を決定した。Pfeiffer死細胞を、PI染色を用いて決定した。全生存細胞を、合計Pfeiffer細胞数からPI陽性細胞数を減算することにより計算した。より低い生細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(p394-ヒトIL-21-抗HSA、P480-抗HSA-ヒトIL-15RA スシ/IL-15)。
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で24時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(フコシル化が低下したP303F-Anwita抗メソテリンIgG1抗体R3C7、P480-抗HSA-ヒトIL-15RAスシ/IL-15、rhIL-21-組換えヒトIL-21、rhIL-15-組換えヒトIL-15)。
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P303-Anwita抗メソテリン抗体R3C7、P480-抗HSA-ヒトIL-15RA スシ/IL-15、P597-抗HSA-ヒトIL-15RA スシペプチドリンカー-IL-15、rhIL-15-組換えヒトIL-15)。
1 P480で使用したF2Aリンカーは、高い開裂効率(90%超)を有する切断可能なリンカーである。タンパク質合成後にIL15を切断する。しかし、IL15とIL15RA スシとの間の高い親和性のために、それらは依然として単一のタンパク質として結合したままである。
NCI-N87及びH226癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェル、5,000個のH226細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P129-Anwita抗メソテリン抗体R2G12、P126-ヒトIL-21-R2G12-IgG1融合、P107-ヒトIL-21-IgG1融合、P325-ヒトIL-21-R2D2融合、P286/288-ヒトIL-21-R3C7-IgG1-R2G12融合)。
NCI-N87癌細胞を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P197-Anwita抗メソテリン抗体R2G12、P390-マウスIL-21-抗HSA、P394-ヒトIL-21-抗HSA)。
ヒトバフィーコートから単離した凍結PBMC細胞を解凍し、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で増殖させた。1日目に、30,000個のPBMC細胞/ウェルを、示した処理と共に96ウェルプレートに添加した。プレートを、37℃、5% CO2で一晩インキュベートした。2日目に培地を回収し、遠心分離して、PBMC細胞をペレット化した。25μlの培地を、サイトカイン放出についてIFNγ及びIL-6ELISAアッセイにおいて試験した(P394-ヒトIL-21-抗HSA、P597-抗HSA-ヒトIL-15RA スシ(プラス)-IL-15)。
パートA.
MC38細胞を、10%FBS+グルタマックス+NEAA+ピルビン酸ナトリウム+Pen/Strepを補充したDMEM培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、0.5×106細胞(50μlのPBS中)を、麻酔したC57BL/6マウス(Taconic)にl8ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を、投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回の投与について1週間に2回、PBS、100μlのPBS中25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)、100μgの抗CTLA-4、又は100μgの抗CTLA-4と組合せた25μgのP394をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38細胞を、10%FBS+グルタマックス+NEAA+ピルビン酸ナトリウム+Pen/Strepを補充したDMEM培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、0.5×106細胞(50μlのPBS中)を、麻酔したC57BL/6マウス(Taconic)にl8ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を、投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回の投与について1週間に2回、PBS、100μlのPBS中100μgの抗CTLA-4、100μgの抗CTLA-4と25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)、100μgの抗CTLA-4と5μgのP597(抗HSA-IL-15Ra-IL-15)、又は100μgの抗CTLA-4と25μgのP394と5μgのP597をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38細胞を、10%FBS+グルタマックス+NEAA+ピルビン酸ナトリウム+Pen/Strepを補充したDMEM培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、0.5×106細胞(50μlのPBS中)を、麻酔したC57BL/6マウス(Taconic)にl8ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を、投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回の投与について1週間に2回、PBS、100μlのPBS中25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)、5μgのP597(抗HSA-IL-15Ra-IL-15)、又は5μgのP597と組合せた25μgのP394をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(3×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。4日目、8日目、12日目及び16日目に、マウスをPBS、100μg抗PD-1、25μgのP390(mIL-21-抗HSA)、100μgの抗PD-1及び25μgのP390、又は100μgの抗PD-1及び5μgのP390のいずれかで処理した。腫瘍の大きさを、示した日にキャリパーを用いて測定し、腫瘍体積を計算した。
NCI-N87細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、3×l06個の細胞(100μlのPBS中)を、麻酔したNSGマウス(Jackson)に23ゲージ針を用いて皮下注射した。6日後、マウス1匹あたり100μlのPBS中の10×l06個のヒトPBMCを尾静脈に注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回、1週間に2回、100μgのP303F(抗メソトレリン抗体)、25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)又は100μgのP303Fと25μg若しくは5μgのP394のいずれかとの組合せをIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
NCI-N87細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、3×l06個の細胞(100μlのPBS中)を、麻酔したNSGマウス(Jackson)に23ゲージ針を用いて皮下注射した。6日後、マウス1匹あたり100μlのPBS中の10×l06個のヒトPBMCを尾静脈に注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回、1週間に2回、20μgのハーセプチン(抗HER2抗体)、25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)、又は20μgのハーセプチンと25μg若しくは5μgのP394のいずれかとの組合せをIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
NCI-N87細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、3×l06個の細胞(100μlのPBS中)を、麻酔したSCIDマウス(Taconic)に18ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回、1週間に2回、100μlのPBS中100μgのP303F(抗メソトレリン抗体)又は25μgのP390(マウスIL-21-抗HSA)と組合せたP303F、5μgのP390、又は2.5μgの組換えマウスIL-21(5μgのP390用量に相当するモル濃度)をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(1×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。PBS、25μgのP390(マウスIL-21-抗HSA)又は組換えマウスIL-21のいずれかで、2週間、1週間に2回(全4回投与)でマウスを処置した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に3回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
ヒトメソテリン(CT26/MSLN)でトランスフェクトしたCT26マウス細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、1×106個の細胞(100μlのPBS中)を、麻酔したBALB/cマウスに23ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計4回、1週間に2回、5mg/kgの抗-PD-1抗体、1.25mg/kgのP390(マウスIL-21-抗HSA)又は抗PD-1とP390の組合せをIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38細胞を、10% FBS+グルタマックス+NEAA+ピルビン酸ナトリウム+Pen/Strepを補充したDMEM培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、0.5×106個の細胞(50μlのPBS中)を、麻酔したC57BL/6マウス(Taconic)に18ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回、1週間に2回、PBS、100μlのPBS中100μgの抗PD-1抗体、25μgのP394(ヒトIL-21-抗HSA)又は25μgのP394と組合せた100μgの抗PD-1をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(1×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。マウスをPBS又は25μgのP380(抗HSA-ヒトIL-33)のいずれかで2週間処置した(全4回投与)。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に3回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(1×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。マウスを、全5回投与について、5日目から始めて1週間に2回、PBS、100μgの抗PD-1、25μgのP390(マウスIL-21-抗HSA)又は100μgの抗PD-1+25μgのP390のいずれかで処置した。24日目に、マウスを屠殺し、腫瘍を摘出した。細胞を放出させるために腫瘍をホモジナイズし、細胞をCD45、CD8、NK1.1及びグラザイムBについて染色した。CD8 T細胞とNK細胞のうちのグラザイムB陽性細胞の割合をプロットする。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(1×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。マウスを、全5回投与について、5日目から始めて1週間に2回、PBS、100μgの抗PD-1、25μgのP390(マウスIL-21-抗HSA)又は100μgの抗PD-1+25μgのP390のいずれかで処置した。24日目に、マウスを屠殺し、腫瘍を摘出した。細胞を放出させるために腫瘍をホモジナイズし、細胞をCD45、CD8、CD4、NK1.1及びIL-21Rについて染色した。CD4 T細胞、CD8 T細胞及びNK細胞のうちのIL-21R陽性細胞の割合をプロットする。
MC38マウス結腸直腸癌細胞(1×106個の細胞)を、0日目にC57BL/6マウスの脇腹に皮下移植した。マウスを、全5回投与について、5日目から始めて1週間に2回、PBS、100μgの抗PD-1、25μgのP390(マウスIL-21-抗HSA)又は100μgの抗PD-1+25μgのP390のいずれかで処置した。24日目に、マウスを屠殺し、マウス脾臓を摘出した。脾臓をホモジナイズして脾細胞を放出し、脾細胞を新鮮なMC38細胞を用いるIFN-γELISpotアッセイに入れた。ELISpotアッセイを製造業者の説明書に従って実行し、MC38応答性免疫細胞の数を表すIFN-gスポットの数を計数した。
ヒトメソテリン(CT26/MSLN)でトランスフェクトしたCT26マウス細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、1×106細胞(100μlPBS中)を、麻酔したBALB/cマウスに23ゲージ針を用いて皮下注射した。ストック試験薬を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に全5回投与について、1週間に2回、1.25mg/kg(100μl)P375(IL-21-抗アルブミン-抗MSLN)をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
NCI-N87細胞を、10% FBS+グルタマックス+Pen/Strepを補充したRPMI培地中で培養及び維持した。細胞をトリプシン処理し、培地で洗浄し、計数した。次いで、細胞をPBSで洗浄し、3×l06個の細胞(100μlのPBS中)を、麻酔したNSGマウス(Jackson)に23ゲージ針を用いて皮下注射した。6日後、マウス1匹あたり100μlのPBS中の10×l06個のヒトPBMCを尾静脈に注射した。ストック試験薬P197を投与の日にPBSで適当な濃度に希釈し、動物に合計5回、1週間に2回、0.25mg/kg(100μl)P669(抗MSLN-抗アルブミン-IL-15Ra-IL-15)をIP投与した。腫瘍測定(長さ(L)及び幅(W))を、デジタルキャリパーを使用して1週間に2回収集し、腫瘍体積を計算した(L×W×W)/2。
Pfeiffer細胞を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。100,000個のPfeiffer細胞を、5% CO2、37℃で30分間、10mM HEPESを含有するハンクス平衡塩溶液中の示した濃度の組換えヒトP394(IL-21-(GSG)4-HSA)、P593 (IL21-A(EAAAK)4A-HAS)、P795 (IL21[1-122]-(GSG)4-HSA)、P796 (IL21[1-122]-(G4S)3-HSA)、P797 (IL21[1-122]-HSA)、P799 (IL21[1-122]-VLLC-HSA)、P800 (IL21[1-122]-VHCH1-HSA)、P750 (IL21-(GSG)4-HSA)、P751 (IL21-A(EAAAK)4A-HSA)、又はP744 (IL21[1-122]-A(EAAAK)4A-HSA)で処理した。リン酸化STAT3は、製造業者の説明書に従って、リン酸化STAT3(Tyr705)均一時間分解蛍光(HTRF)アッセイ(Cisbio)を用いて測定した。665nm/620nmのシグナル比を1000倍し、用量応答曲線(Graphpad Prism)を用いてプロット及びフィッティングして、EC50を計算した。
NCI-N87癌細胞株を、10%ウシ胎仔血清及びペニシリン/ストレプトマイシンを含有するRPMI-1640中で維持した。0日目に、10,000個のNCI-N87細胞/ウェルを、96ウェル平底プレート中の培地に播種した。1日目に、RosetteSep NK単離キット(Stemcell Technologies)を用いて、ヒトのバフィーコートからNK細胞を単離し、示した処理とともに、100,000個のNK細胞/ウェルを癌細胞に添加した。プレートを37℃、5% CO2で48時間インキュベートし、次いで、細胞を4%パラホルムアルデヒドで固定し、核をSytoxオレンジで染色した。Cytation 1(Biotek)を用いて、各ウェル内に残存する癌細胞の核の数を計数することにより、残りの癌細胞の数を算出した。より低い細胞数は、より良好なNK媒介細胞殺傷を示した(P593 (IL21-A(EAAAK)4A-HAS)、P795 (IL21[1-122]-(GSG)4-HSA)、P796 (IL21[1-122]-(G4S)3-HSA)、P797 (IL21[1-122]-HSA)、P799 (IL21[1-122]-VLLC-HSA)、P800 (IL21[1-122]-VHCH1-HSA)、P750 (IL21-(GSG)4-HSA)、P751 (IL21-A(EAAAK)4A-HSA)、又はP744 (IL21[1-122]-A(EAAAK)4A-HSA))。
Claims (47)
- a)サイトカイン、及びb)アルブミン結合部分を含む融合タンパク質であって、前記サイトカインが、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される、前記融合タンパク質。
- a)アルブミン結合部分と融合したサイトカイン(「サイトカイン-ALBBM」)、及びb)抗原結合部分を含む融合タンパク質であって、前記サイトカイン-ALBBMと前記抗原結合部分との間の結合が、任意に切断可能である、前記融合タンパク質。
- 前記サイトカインが、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、IL-33、及びIL-22からなる群から選択される、請求項2記載の融合タンパク質。
- 前記サイトカインが、IL-21、IL-33及びIL-7から選択される、請求項1〜3のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記サイトカインがIL-21である、請求項4記載の融合タンパク質。
- 前記IL-21が、配列番号1、2、126、171、若しくは172、又は配列番号1、2、126、171、若しくは172と少なくとも約80%の配列同一性を含むそのバリアントのアミノ酸配列を含む、請求項5記載の融合タンパク質。
- 前記IL-21が、配列番号126、171、若しくは172のアミノ酸配列を含む切断型IL-21である、請求項5又は請求項6記載の融合タンパク質。
- 前記サイトカインがIL-33である、請求項4記載の融合タンパク質。
- 前記アルブミン結合部分が、アルブミンに特異的に結合する単一ドメイン抗体(sdAb)を含む、請求項1〜8のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記抗アルブミンsdAbが、約5.5のpH及び約7.5のpHで約1〜約200nMの解離定数(KD)を有する、請求項9記載の融合タンパク質。
- 前記アルブミン結合部分が、前記サイトカインのC末端と融合する、請求項1〜10のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記アルブミン結合部分が、前記サイトカインのN末端と融合する、請求項1〜10のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記サイトカイン及び前記アルブミン結合部分が、第1のリンカーを介して連結されている、請求項1〜12のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記第1のリンカーが、配列番号12〜26及び158〜159からなる群から選択される、請求項13記載の融合タンパク質。
- 前記第1のリンカーが可撓性リンカーである、請求項13又は請求項14記載の融合タンパク質。
- 前記第1のリンカーが剛性リンカーである、請求項13又は請求項14記載の融合タンパク質。
- 前記融合タンパク質が、配列番号120〜125、129〜154、及び160〜167のいずれか1つ、又は配列番号120〜125、129〜154、及び160〜167のいずれか1つと少なくとも約80%の配列同一性を含むそのバリアントのアミノ酸配列を含む、請求項1〜16のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記抗原結合部分が、第2のリンカーを介して前記サイトカイン-ALBBMと融合する、請求項2〜17のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記第2のリンカーが切断可能である、請求項18記載の融合タンパク質。
- 前記切断可能なリンカーが、マトリックスメタロプロテアーゼ、レグマイン、マトリプターゼ、又はウロキナーゼ感受性である、請求項19記載の融合タンパク質。
- 前記抗原結合部分が腫瘍抗原に結合する、請求項2〜20のいずれか一項記載の融合タンパク質。
- 前記腫瘍抗原が、メソテリン(「MSLN」)、GPA33、Her-2、EGFR、及びCD20からなる群から選択される、請求項21記載の融合タンパク質。
- 前記腫瘍抗原が、CEA、MUC16、MUC1、AFP、EPCAM、CD19、CD21、CD22、CD30、CD33、CD37、CD45、PSMA、及びBCMAからなる群から選択される、請求項21記載の融合タンパク質。
- 請求項1〜23のいずれか一項記載の融合タンパク質を含む医薬組成物。
- 個体における疾患又は病態を治療する方法であって、請求項1〜23のいずれか一項記載の融合タンパク質又は請求項24記載の医薬組成物を前記個体に投与することを含む、前記方法。
- 第2の薬剤を投与することをさらに含む、請求項25記載の方法。
- 個体における疾患又は病態を治療する方法であって、i)サイトカイン及びii)前記サイトカインと融合した半減期延長ドメインを含む融合タンパク質;並びにb)第2の薬剤を前記個体に投与することを含む、前記方法。
- 前記第2の薬剤が、治療抗体、免疫チェックポイント阻害剤、第2のサイトカイン、化学療法剤、チロシンキナーゼ阻害剤、又は免疫細胞を含む、請求項26又は請求項27記載の方法。
- 前記半減期延長ドメインがアルブミン結合部分である、請求項27又は請求項28記載の方法。
- 前記疾患又は病態が癌である、請求項25〜29のいずれか一項記載の方法。
- 前記癌が、中皮腫、肺癌、乳癌、卵巣癌、膵臓癌、リンパ腫、白血病、頭頸部癌、肝臓癌、食道癌、胃癌、及び結腸直腸癌からなる群から選択される、請求項30記載の方法。
- 前記癌が、中皮腫、肺癌、卵巣癌、及び胃癌からなる群から選択される、請求項31記載の方法。
- 前記サイトカインが、IL-21、IL-7、IL-15、IL-15Rα又はその断片に結合したIL-15、及びIL-33からなる群から選択される、請求項30〜32のいずれか一項記載の方法。
- 前記方法が第2の薬剤を投与することを含み、前記第2の薬剤が治療抗体である、請求項33記載の方法。
- 前記治療抗体が、メソテリン(MSLN)、GPA33、Her-2(ERBB2)、EGFR、及びCD20(MS4A1)からなる群から選択される腫瘍抗原に結合する、請求項34記載の方法。
- 前記治療抗体が、CEA、MUC16、MUC1、AFP、EPCAM、CD19、CD21、CD22、CD30、CD33、CD37、CD45、PSMA、及びBCMAからなる群から選択される腫瘍抗原に結合する、請求項34記載の方法。
- 前記治療抗体がメソテリンに結合する、請求項35記載の方法。
- 前記治療抗体がHer2に結合する、請求項35記載の方法。
- 前記方法が、第2の薬剤を投与することを含み、前記第2の薬剤が免疫チェックポイント調節剤である、請求項33記載の方法。
- 前記免疫チェックポイント調節剤が、PD-L1、CTLA4、PD-L2、PD-1、4-1BB、CD47、TIGIT、GITR、TIM3、LAG3、CD27及びB7H4からなる群から選択される免疫チェックポイントタンパク質の阻害剤である、請求項39記載の方法。
- 前記免疫チェックポイント調節剤が、PD-1に結合する抗体である、請求項40記載の方法。
- 前記免疫チェックポイント調節剤が、CTLA4に結合する抗体である、請求項40記載の方法。
- 前記方法が第2の薬剤を投与することを含み、前記第2の薬剤が第2のサイトカインである、請求項33記載の方法。
- 前記融合タンパク質中のサイトカインがIL-21であり、前記第2のサイトカインが、IL-7、IL-15、IL-15Rαに結合したIL-15又はその半減期延長バリアントからなる群から選択される、請求項43記載の方法。
- 前記疾患又は病態が炎症性疾患である、請求項30記載の方法。
- 前記サイトカインがIL-22である、請求項45記載の方法。
- 前記個体がヒトである、請求項25〜46のいずれか一項記載の方法。
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CN115006517A (zh) * | 2021-03-03 | 2022-09-06 | 上海君实生物医药科技股份有限公司 | Il-21-抗白蛋白单域抗体融合蛋白药物组合物及其用途 |
CA3208069A1 (en) * | 2021-03-09 | 2022-09-15 | Mary Ellen Molloy | Combination therapy with immune cell engaging proteins and immunomodulators |
WO2023009975A2 (en) * | 2021-07-24 | 2023-02-02 | Anwita Biosciences, Inc. | Fusion proteins comprising suppression of tumorigenicity 2 or interleukin-33, pharmaceutical compositions, and therapeutic applications |
CN116134139A (zh) * | 2021-09-09 | 2023-05-16 | 深圳市菲鹏生物治疗股份有限公司 | 一种转基因免疫效应细胞及其应用 |
CN115838424A (zh) * | 2021-09-22 | 2023-03-24 | 上海康岱生物医药技术股份有限公司 | 靶向tigit的单克隆抗体 |
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WO2023160721A1 (en) * | 2022-02-28 | 2023-08-31 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | Heterodimeric polypeptide complexes comprising il-15 variants and uses thereof |
WO2024051796A1 (en) * | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Wuxi Biologics (Shanghai) Co., Ltd. | Albumin binding proteins, fusion proteins and uses thereof |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN105198999A (zh) * | 2014-05-27 | 2015-12-30 | 上海生物制品研究所有限责任公司 | 一种融合蛋白、其制备方法及其应用 |
Family Cites Families (27)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MXPA06014031A (es) * | 2004-06-01 | 2007-10-08 | Domantis Ltd | Anticuerpos de fusion biespecificos con vida media de serica mejorada. |
ES2386367T3 (es) * | 2005-03-10 | 2012-08-17 | Morphotek, Inc. | Anticuerpos anti-mesotelina |
KR101554848B1 (ko) * | 2007-10-01 | 2015-09-21 | 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 | 메소텔린에 결합하는 인간 항체 및 이의 용도 |
AR076284A1 (es) * | 2009-04-29 | 2011-06-01 | Bayer Schering Pharma Ag | Inmunoconjugados de antimesotelina y usos de los mismos |
TW201138808A (en) * | 2010-05-03 | 2011-11-16 | Bristol Myers Squibb Co | Serum albumin binding molecules |
PH12018500046A1 (en) * | 2010-12-20 | 2019-04-08 | Genentech Inc | Anti-mesothelin antibodies and immunoconjugates |
WO2013063419A2 (en) * | 2011-10-28 | 2013-05-02 | The Trustees Of The University Of Pennsylvania | A fully human, anti-mesothelin specific chimeric immune receptor for redirected mesothelin-expressing cell targeting |
PT2802606T (pt) * | 2012-01-10 | 2018-07-13 | Biogen Ma Inc | Melhoramento do transporte de moléculas terapêuticas através da barreira hematoencefálica |
EP2900695B1 (en) * | 2012-09-27 | 2018-01-17 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services | Mesothelin antibodies and methods for eliciting potent antitumor activity |
WO2014182532A1 (en) * | 2013-05-07 | 2014-11-13 | The Usa, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services | Mesothelin-specific immunocytokine and use thereof |
BR112016004355A2 (pt) * | 2013-08-30 | 2017-10-17 | Aprilbio Co Ltd | constructo de fusão de parte efetora de fab anti-soroalbumina e método de preparação do mesmo |
ES2791953T3 (es) * | 2014-06-06 | 2020-11-06 | Us Health | Receptores de antígeno quimérico dirigidos a mesotelina y usos de los mismos |
ES2710444T3 (es) * | 2014-07-17 | 2019-04-25 | Inst Nat Sante Rech Med | Un polipéptido de interleucina 34 aislado para uso en la prevención del rechazo de trasplante y el tratamiento de enfermedades autoinmunitarias |
CA3133162C (en) * | 2014-08-12 | 2024-02-13 | Massachusetts Institute Of Technology | Synergistic tumor treatment with il-2 and integrin-binding-fc-fusion protein |
CN114621969A (zh) * | 2014-09-17 | 2022-06-14 | 诺华股份有限公司 | 用于过继免疫疗法的具有嵌合受体的靶向细胞毒性细胞 |
PL3233910T3 (pl) * | 2014-12-19 | 2020-06-01 | Ablynx N.V. | Dimery nanociał połączone cysteiną |
EP3064507A1 (en) * | 2015-03-06 | 2016-09-07 | Deutsches Krebsforschungszentrum Stiftung des öffentlichen Rechts | Fusion proteins comprising a binding protein and an interleukin-15 polypeptide having a reduced affinity for IL15ra and therapeutic uses thereof |
IL293719B2 (en) * | 2015-05-21 | 2023-07-01 | Harpoon Therapeutics Inc | Trispecific binding proteins and methods of use |
WO2016196211A1 (en) * | 2015-05-29 | 2016-12-08 | Armo Biosciences, Inc. | Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders |
AU2016312015A1 (en) * | 2015-08-21 | 2018-04-12 | Crage Medical Co., Limited | Fully human anti-mesothelin antibodies and immune effector cells targeting mesothelin |
US11186641B2 (en) * | 2016-03-17 | 2021-11-30 | Oslo Universitetssykehus Hf | Fusion proteins targeting tumour associated macrophages for treating cancer |
US20180002439A1 (en) * | 2016-06-30 | 2018-01-04 | Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) | Anti-mesothelin antibodies and uses thereof |
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