JP2020529420A - ネフェリウム・ラパセウム(Nephelium lappaceum)抽出物の新規な美容的使用 - Google Patents
ネフェリウム・ラパセウム(Nephelium lappaceum)抽出物の新規な美容的使用 Download PDFInfo
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Abstract
Description
実施例1a)溶媒及び種子の全重量に対して10重量%の量のN.ラパセウム(N. lappaceum)粉砕種子を、20℃の温度で2時間にわたり溶媒としての水中で浸軟することによって得た。粗抽出物を遠心し、デカントし、次いでろ過した。
実施例2a)皮膚線維芽細胞におけるATP合成
プロトコル:DMEM及び10%のウシ胎仔血清を含む増殖培地において、37℃(CO2=5%、95%相対湿度)で6日間、正常、すなわち非病的なヒト線維芽細胞をインキュベートした。本発明に係る抽出物を含む又は含まない(対照)Hanks生理食塩水溶液で培地を置き換えた。24時間のインキュベーション期間の後、細胞をUVA下で照射し、次に37℃で24時間にわたって培養に戻した。
プロトコル:毛包乳頭由来の非病的ヒト線維芽細胞をDMEM培地で24時間培養した後、培地の全容積に対して0.03%及び0.01%の容積による最終濃度で、本発明に係るN.ラパセウム水性種子抽出物で6日間処理した。本発明に係る抽出物の非存在下で同一培地を培養した(対照)。ATP量は酵素的方法(ルシフェリン/ルシフェラーゼ複合体;ATP Bioluminescence kit ROCHE Diagnostics)により6日終了時に測定した。
プロトコル:非病理学的ヒト毛包乳頭線維芽細胞を24時間培養した後、培地の全容積に対して0.1%及び0.3%の容積の最終濃度で、N.ラパセウム水性種子抽出物で6日間処理した。本発明に係る抽出物の非存在下で同一培地を培養した(対照)。線維芽細胞ミトコンドリア活性は、コハク酸デヒドロゲナーゼの存在下でMTT(3-[4,5-ジメチルチアゾール-2-イル]-2,5ジフェニルテトラゾリウムブロミド)還元により測定した。得られた沈殿をDMSOで抽出し、次いでDMSO溶液の光学密度を540nmで測定した。
プロトコル:正常で非病的なヒト線維芽細胞を、培地の全容積に対して1容積%の最終濃度で、実施例1a)に従って調製した本発明に係る種子抽出物を含むDMEM培地中に懸濁させた。本発明に係る抽出物の非存在下で同一培地を培養した(対照)。遠心後、凝集体を37℃(5%CO2)で5日間インキュベートした。凝集体をPBS緩衝液で洗浄した後、細胞をEDTAとのプロテアーゼ混合物中で溶解した。
プロトコル:非病的ヒト真皮乳頭線維芽細胞の懸濁液を、増殖因子溶液(0.2%v/v)の存在下で基底培養培地中にその線維芽細胞を培養して調製し、これに5又は10μmol/L最終培地の最終濃度でベンゾピレン(BaP)を添加し、従って実施例1a)に従って調製したN.ラパセウム種子抽出物の最終濃度0.5%(w/v培地)又は抽出物なし(対照)とした。懸濁液を遠心(5分、200g)し、得られた凝集体を37℃(5%CO2)で5日間インキュベートした。
微小濾胞(micro-follicle)の再構築法:
微小濾胞モデルは、乳頭線維芽細胞、毛包の外鞘からのケラチノサイト及びメラノサイトの3D共培養からなる。この細胞モデルは、異なるタイプの細胞間の神経、表皮及び間葉の相互作用の統合を可能にすることにより、毛包に最も近い再構築された器官分子である。微小毛包を培養した。非病理学的乳頭線維芽細胞を3日間培養した。次にメラノサイトと毛包の外鞘からのケラチノサイトを新生乳頭に加えて微小毛包を形成した。培養24時間後、N.ラパセウム水性種子抽出物を添加した。本発明に係る抽出物なしで同一培地を培養した(対照)。培養培地及び微小毛包を、試験のために処理の48時間後にサンプリングした。
プロトコル:
微小毛包細胞生存率はPrestoBlue(Thermo Fisher Scientific)法で測定した。この比色法は、生細胞によるレザズリン試薬の還元及び蛍光発光に基づいている。測定は処理48時間後に行った。値は、未処理の対照による正規化後の平均%で表す。
プロトコル:乳酸デヒドロゲナーゼ存在下で比色法により細胞損傷を測定し、培養培地中の損傷細胞における乳酸デヒドロゲナーゼ活性の測定で抽出物の細胞毒性の定量を可能にした。細胞膜損傷と細胞溶解の増加は、溶解細胞数に比例した乳酸デヒドロゲナーゼ活性の増加をもたらす。この活性はホルマザン存在下で示され、その量は光学密度(500nm)を測定することによって評価した。測定は、培地の全容積に対して0.02容積%の最終濃度での本発明に係る抽出物の存在下での、又は抽出物なし(対照)での処理の48時間後に培養培地で実施した。
N.ラパセウム種子抽出物(実施例1c) 20重量%
マルトデキストリン 80重量%
特に種々の相を混ぜ合わせることに関して当業者に知られている方法に従って、以下の組成物が調製される。示される量は、組成物の全重量に対する重量百分率である。
相 名称 量(全重量%)
A 水 94.75
A 防腐剤 100になるまで
A グリセリン 1.00
B キサンタンガム 0.2
B ポリアクリル酸ナトリウム 0.25
C 実施例7に係る化粧品成分 1〜5
実施例7に係る化粧品成分 1.00〜10%
キサンタンガム 0.50
EDTA 0.05
ステアレス-2 2.00
ステアレス-21 2.50
セテアリルアルコール 1.00
カプリル酸プロピルヘプチル 15.00
水酸化ナトリウム(30%溶液) 0.10
フェノキシエタノール、クロルフェネシン、 1.25
安息香酸、ブチレングリコール、
ソルビン酸の混合物(Germazide(商標)PBS)
ポリアクリレート-X、イソヘキサデカン及び 4.00
ポリソルベート60の混合物(Sepigel(商標)SMS 60)
水 100になるまで
Claims (12)
- 皮膚、有利には頭皮、及び/又は皮膚付属器、有利には毛髪に対する汚染の有害な影響を低減するための、ネフェリウム・ラパセウム(Nephelium lappaceum)抽出物の美容的使用。
- 前記ネフェリウム・ラパセウム抽出物が、葉、果肉、果皮及び/又は種子の抽出物、好ましくは種子抽出物である、請求項1に記載の使用。
- 前記抽出物が、溶媒又は溶媒混合物、好ましくはプロトン性極性溶媒、有利には水、アルコール、グリコール、ポリオール、99/1〜1/99(w/w)の水/アルコール、水/グリコール又は水/ポリオール混合物(例えば、水と、エタノール、グリセロール及び/若しくはブチレングリコール、並びに/又は他のグリコール、例えばキシリトール及び/若しくはプロパンジオールとの混合物)中、有利には唯一の溶媒としての水中での抽出によって得られる、請求項1又は2に記載の使用。
- 前記抽出物が、皮膚、有利には頭皮、及び/又は皮膚付属器、有利には毛髪に対する汚染物質の非審美的な及び/又は不快な影響を低減する、請求項1〜3のいずれか1項に記載の使用。
- 前記抽出物が、皮膚及び/又は皮膚付属器の刺激及び/又は発赤の感覚、並びに/あるいは皮膚のくすんだ色つや及び/又は色つやの輝きの喪失、並びに/あるいは皮膚及び/又は皮膚付属器の感作を低減する、請求項1〜4のいずれか1項に記載の使用。
- 細胞生存率及び/又はATP合成及び/又はミトコンドリア活性を増加させるため、並びに/あるいは細胞損傷及び/又は細胞老化を減少させるための、請求項1〜5のいずれか1項に記載の使用。
- 前記使用が局所適用によるものである、請求項1〜6のいずれか1項に記載の使用。
- 前記抽出物が、少なくとも1つの化粧品的に許容される賦形剤を含む化粧品組成物中に、該化粧品組成物の全重量に対して1×10-4重量%〜10重量%、好ましくは1×10-4重量%〜5重量%、より好ましくは1×10-3重量%〜3重量%の最終濃度で存在する、請求項1〜7のいずれか1項に記載の使用。
- 皮膚及び/又は皮膚付属器、有利には毛髪のための活性化及び/又は汚染除去剤としての、請求項1〜8のいずれか1項に記載の使用。
- 前記抽出物が、水性若しくは油性溶液、クリーム又は水性ゲル若しくは油性ゲル、特にシャワーゲル、乳液、エマルション、マイクロエマルション又はナノエマルション、特に水中油型若しくは油中水型若しくは多重若しくはシリコーン系エマルション、マスク、セラム、ローション、液体セッケン、皮膚用バー、軟膏、フォーム、パッチ、無水製品、好ましくは液体、ペースト若しくは固体の無水製品、シャンプーから選択される化粧品組成物中に存在する、請求項1〜9のいずれか1項に記載の使用。
- 細胞生存率及び/又はATP合成及び/又はミトコンドリア活性を増加させるため、並びに/あるいは細胞老化を減少させるため、並びに/あるいは皮膚、有利には頭皮及び/又は皮膚付属器、有利には毛髪に対する汚染の有害な影響を低減するために、請求項1〜10のいずれか1項に記載の抽出物又はそれを含有する化粧品組成物の局所又は経口投与を含む、美容ケア方法。
- 脚、足、脇の下、手、大腿、腹、胸、首、腕、胴、背中及び顔、有利には顔、より有利には頭皮及び/又は皮膚付属器、有利には毛髪から選択される、ヒトの体の全て又は一部に局所適用することからなる、請求項11に記載の美容ケア方法。
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