JP2017099372A - 発酵ショウガ含有組成物の製造方法 - Google Patents
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Abstract
Description
本発明の製法は、さらに、加熱工程で処理した発酵物を乾燥する乾燥工程を有することが好ましい。
さらに、本発明の製造方法により得られた発酵ショウガ含有組成物は、ショウガオール含有量が飛躍的に増加しており、これによる生理活性の増加も期待することができる。
グルコース及び酵母エキスを含むGE培地(液体培地)に、黒麹菌であるA.awamoriを添加し、28℃にて2日間、液体用の培養タンクで培養した。その後、培養した培地の濃度が3.8%となるようにGE培地で希釈し、ショウガの乾燥粉末(国産ショウガパウダー)を濃度が1%となるように添加した。このショウガの乾燥粉末を添加した培地を、28℃にて6日間、液体用の培養タンクで培養し、ショウガの乾燥粉末を発酵させた(発酵工程)。発酵後、発酵工程で用いたものと同じショウガの乾燥粉末を濃度が3%となるように添加した(添加工程)。添加後すぐに加圧条件下で115〜120℃にて2時間、加熱処理を行った(加熱工程)。その後、凍結乾燥によって乾燥し(乾燥工程)、本発明の実施例1に係る発酵ショウガ含有組成物を得た。
本抗糖化確認試験は、「Inhibitory effect of the compounds isolated from Rhus verniciflua on aldose reductase and advanced glycation endproducts.」(Lee EH, Song DG, Lee JY, Pan CH, Um BH, Jung SH. Biol Pharm Bull. 2008 Aug;31(8):1626-30.)に記載の手法に若干の修正を施して行った。具体的には、以下のように行った。
リン酸緩衝剤粉末(1/15mol/L pH7.2)(和光純薬工業(株))を蒸留水に溶解して、67mMリン酸緩衝液(以下、67mM PBと略する)を調製した。また、D(+)グルコース(ナカライテスク(株))を67mM PBで溶解して、200mg/mLグルコース溶液を調製した。さらに、アルブミン(ウシ血清由来コーンフラクションV、pH7.0、生化学用)(和光純薬工業(株))(以下、BSAと略する)を67mM PBで溶解して、40mg/mL BSAを調製した。
被験物質(実施例1に係る発酵ショウガ含有組成物又は比較例に係るショウガ乾燥粉末)の所定量をそれぞれ67mM PBで溶解して、被験物質溶液を調製した。この被験物質溶液とグルコース溶液及びBSA溶液とを下記表1に示す割合で配合して、試験溶液(test)を調製した。同様に、下記の割合にて配合して、試験溶液(blank)、コントロール(test)、及びコントロール(blank)を調製した。被験物質の最終濃度は、図1の横軸(mg/mL)に示される通りである。
=(1 - [(Sample test - Sample blank) / (Control test - Control blank)])×100
(サンプル液の調製)
0.1%BSA(ウシ血清アルブミン)含有ダルベッコPBS(Phosphate Buffered Saline)(−)を用いて、被験物質(実施例1に係る発酵ショウガ含有組成物又は比較例に係るショウガの乾燥粉末)が、20mg/mLとなるように調製した。ボルテックスミキサーにて60分間振盪した後、遠心し上清を回収し、さらに、0.1%BSA含有ダルベッコPBS(−)を用いて被験物質が所定濃度となるように希釈し、試験溶液を調製した。なお、被験物質の最終濃度が、図2の横軸(μg/mL)に示される値となるように調製を行った。
コラゲナーゼB(Roche製)を、0.1%BSA含有ダルベッコPBS(−)を用いて10μg/mLとなるよう調製した。
DMSOで溶解した蛍光基質(MOCAc−Pro−Leu−Gly−Leu−A2pr(DNP)−Ala−Arg−NH2、ペプチド研究所製)を、0.1%BSA含有ダルベッコPBS(−)を用いて5μMに希釈したものを蛍光基質溶液として用いた。
96well black plateへ試験溶液またはコントロールとして0.1%BSA含有ダルベッコPBS(−)を50μL/wellで添加した。その後、酵素溶液(test)又は0.1%BSA含有ダルベッコPBS(−)(blank)を100μL/wellで添加し、37℃で10分間インキュベートした。さらに、蛍光基質溶液を50μL/wellで添加し、遮光して37℃、60分間インキュベートした。320nmで励起し、405nmにおける蛍光強度を測定した。
コラゲナーゼ阻害率
=(1 - [(Sample test - Sample blank) / (Control test - Control blank)])×100
実施例1に係る発酵ショウガ含有組成物のショウガオール量の測定は、HPLCを用いて行った。
発酵工程においてショウガの乾燥粉末(国産ショウガパウダー)を濃度が5%となるように添加し、添加工程を省略した以外は、実施例1と同じ方法で、比較例1に係る発酵ショウガ含有組成物を製造した。
発酵工程においてショウガの乾燥粉末(国産ショウガパウダー)を濃度が10%となるように添加した以外は、比較例1と同じ方法で、比較例2に係る発酵ショウガ含有組成物を製造した。
発酵工程においてショウガの乾燥粉末(国産ショウガパウダー)を添加することなく6日間培養し、その後ショウガの乾燥粉末(国産ショウガパウダー)を濃度が4%となるように添加して同様の条件で1日間培養(発酵)した以外は、実施例1と同じ方法で、比較例3に係る発酵ショウガ含有組成物を製造した。
Claims (6)
- ショウガ科植物原料を発酵させる発酵工程と、
前記発酵物に対してショウガ科植物原料を添加する添加工程と、
前記ショウガ科植物原料を添加した発酵物を、加圧下、100℃を超える温度で加熱処理する加熱工程と、
を有することを特徴とする発酵ショウガ含有組成物の製造方法。 - さらに、加熱工程で処理した発酵物を乾燥する乾燥工程を有することを特徴とする請求項1記載の発酵ショウガ含有組成物の製造方法。
- 発酵工程及び/又は添加工程で用いるショウガ科植物原料が、ショウガ科植物の粉末であることを特徴とする請求項1又は2記載の発酵ショウガ含有組成物の製造方法。
- 発酵工程において、麹菌を用いることを特徴とする請求項1〜3のいずれか記載の発酵ショウガ含有組成物の製造方法。
- 加熱工程の加熱処理が、105〜200℃で1〜24時間行われることを特徴とする請求項1〜4のいずれか記載の発酵ショウガ含有組成物の製造方法。
- 請求項1〜5記載の発酵ショウガ含有組成物の製造方法における各工程と、
該各工程における処理を経た発酵ショウガ含有組成物を基材に配合する配合工程と、
を有することを特徴とする美容組成物の製造方法。
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