JP2015507941A - シクロプロピルジエステルの分解方法 - Google Patents
シクロプロピルジエステルの分解方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2015507941A JP2015507941A JP2014558781A JP2014558781A JP2015507941A JP 2015507941 A JP2015507941 A JP 2015507941A JP 2014558781 A JP2014558781 A JP 2014558781A JP 2014558781 A JP2014558781 A JP 2014558781A JP 2015507941 A JP2015507941 A JP 2015507941A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- compound
- formula
- enzyme
- penicillin
- minutes
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 32
- -1 cyclopropyl diester Chemical class 0.000 title claims description 10
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 19
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 18
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 claims description 15
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 claims description 13
- 229930195708 Penicillin V Natural products 0.000 claims description 12
- 229940056367 penicillin v Drugs 0.000 claims description 12
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 8
- 108700023418 Amidases Proteins 0.000 claims description 7
- 102000005922 amidase Human genes 0.000 claims description 7
- 108090000371 Esterases Proteins 0.000 claims description 6
- 241000223221 Fusarium oxysporum Species 0.000 claims description 5
- 125000003342 alkenyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 4
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 4
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 4
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 claims description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 claims description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 claims description 2
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 claims description 2
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 claims description 2
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 claims description 2
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 claims description 2
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 abstract description 11
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 abstract description 11
- 230000000707 stereoselective effect Effects 0.000 abstract description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N methyl 2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-[2-[(2-acetyloxyphenyl)methyl-(2-methoxy-2-oxoethyl)amino]ethyl]amino]acetate Chemical compound C=1C=CC=C(OC(C)=O)C=1CN(CC(=O)OC)CCN(CC(=O)OC)CC1=CC=CC=C1OC(C)=O OJURWUUOVGOHJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 17
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 14
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 13
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 11
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 9
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 2-(diethylamino)ethyl n'-phenylcarbamimidothioate;dihydrobromide Chemical compound Br.Br.CCN(CC)CCSC(N)=NC1=CC=CC=C1 XILIYVSXLSWUAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N Methyl tert-butyl ether Chemical compound COC(C)(C)C BZLVMXJERCGZMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 6
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 5
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- RMXLHIUHKIVPAB-OWOJBTEDSA-N (e)-1,4-dibromobut-2-ene Chemical compound BrC\C=C\CBr RMXLHIUHKIVPAB-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 4
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000005690 diesters Chemical class 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001540 azides Chemical class 0.000 description 3
- 238000004296 chiral HPLC Methods 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- 239000000543 intermediate Substances 0.000 description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 229940126657 Compound 17 Drugs 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M Lithium hydroxide Chemical compound [Li+].[OH-] WMFOQBRAJBCJND-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N Tert-Butanol Chemical compound CC(C)(C)O DKGAVHZHDRPRBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000538 analytical sample Substances 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 2
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 description 2
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 2
- CLUPOLFGIGLMIQ-UHFFFAOYSA-N heptane;propan-2-ol Chemical compound CC(C)O.CCCCCCC CLUPOLFGIGLMIQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 2
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 125000004123 n-propyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 2
- 239000012450 pharmaceutical intermediate Substances 0.000 description 2
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 2
- BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N tetradecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCCC BGHCVCJVXZWKCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010626 work up procedure Methods 0.000 description 2
- LTMRRSWNXVJMBA-UHFFFAOYSA-L 2,2-diethylpropanedioate Chemical compound CCC(CC)(C([O-])=O)C([O-])=O LTMRRSWNXVJMBA-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 6-aminopenicillanic acid Chemical compound [O-]C(=O)[C@H]1C(C)(C)S[C@@H]2[C@H]([NH3+])C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-ALEPSDHESA-N 0.000 description 1
- NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 6beta-amino-penicillanic acid Natural products OC(=O)C1C(C)(C)SC2C(N)C(=O)N21 NGHVIOIJCVXTGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical group C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 0 C=CC1C(*N)(*N)C1 Chemical compound C=CC1C(*N)(*N)C1 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010051152 Carboxylesterase Proteins 0.000 description 1
- 102000013392 Carboxylesterase Human genes 0.000 description 1
- 238000006969 Curtius rearrangement reaction Methods 0.000 description 1
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RWFPXJAUVOBOLJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethyl acetate;heptane Chemical compound CC(O)=O.CCOC(C)=O.CCCCCCC RWFPXJAUVOBOLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 description 1
- 239000012062 aqueous buffer Substances 0.000 description 1
- 239000012267 brine Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011203 carbon fibre reinforced carbon Substances 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000006184 cosolvent Substances 0.000 description 1
- NFKGQHYUYGYHIS-UHFFFAOYSA-N dibutyl propanedioate Chemical compound CCCCOC(=O)CC(=O)OCCCC NFKGQHYUYGYHIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BEPAFCGSDWSTEL-UHFFFAOYSA-N dimethyl malonate Chemical compound COC(=O)CC(=O)OC BEPAFCGSDWSTEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LWIWFCDNJNZEKB-UHFFFAOYSA-N dipropyl propanedioate Chemical compound CCCOC(=O)CC(=O)OCCC LWIWFCDNJNZEKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 238000002518 distortionless enhancement with polarization transfer Methods 0.000 description 1
- YIWFBNMYFYINAD-UHFFFAOYSA-N ethenylcyclopropane Chemical compound C=CC1CC1 YIWFBNMYFYINAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002024 ethyl acetate extract Substances 0.000 description 1
- RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N ethyl chloroformate Chemical compound CCOC(Cl)=O RIFGWPKJUGCATF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000003818 flash chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000007429 general method Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000002808 molecular sieve Substances 0.000 description 1
- 238000004305 normal phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N octane Chemical compound CCCCCCCC TVMXDCGIABBOFY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012044 organic layer Substances 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N phenoxymethylpenicillin Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)COC1=CC=CC=C1 BPLBGHOLXOTWMN-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229930195734 saturated hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N sodium aluminosilicate Chemical compound [Na+].[Al+3].[O-][Si]([O-])=O.[O-][Si]([O-])=O URGAHOPLAPQHLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P41/00—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture
- C12P41/003—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions
- C12P41/005—Processes using enzymes or microorganisms to separate optical isomers from a racemic mixture by ester formation, lactone formation or the inverse reactions by esterification of carboxylic acid groups in the enantiomers or the inverse reaction
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
Abstract
Description
本出願は、2012年2月24日に出願された米国仮特許出願第61/602,811号の利益を主張する。
スキーム1
この方法では、評価された全ての酵素は中程度のエナンチオ選択性のみを示し、最良の酵素でさえも、eeを医薬品中間体のエナンチオ選択的合成の実用化に必要なレベルにまで向上させるためには酵素的分割を2回行わなければならなかった。カルボキシルナプロキセンエステラーゼ(CENP)によるラセミのメチルエステル(2)の酵素加水分解によって、一酸のcis-(1S,2S)-(6a)(ee たった70%)、およびジメチルエステル(2R)-(2b)がリッチな未反応の出発物質(ee 95%)が得られた。該一酸のcis-(1S,2S)-(6a)(ee 70%)をジエステルに再エステル化し、CENPによる2回目の酵素加水分解によって、該一酸のcis-(1S,2S)-(6a)のeeを90%にまで向上させた。エステラーゼ30000によるリッチなジメチルエステル(2R)-(2b)(ee 95%)の2回目の酵素加水分解により、一酸のcis-(1R,2R)-(6a)(ee 95%)が得られた。
R1はアルキルであり;そして、
R2はアルケニルまたはアルキルから選択される)
で示される化合物の製造方法であって、
式(I):
スキーム4
250 mL フラスコに、(E)-1,4-ジブロモ-2-ブテン(92.6316 mmol, 20.014 g)、炭酸カリウム(無水, 231.802 mmol, 32.036 g)、メタノール(無水, 100 mL)、およびマロン酸ジメチル(101.8786 mmol, 13.4598 g)を加えた。該反応液は初めのうちは発熱性であった。該混合液を周囲温度で20時間撹拌した。溶媒を減圧下で除去した。残渣を200 mLの酢酸エチルおよび200 mLの水で処理した。有機層をさらに、水(2 x 100 mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過した。溶媒を濾過して除き、ジメチルエステル(2)(14.7833 g, 86.6%収率)を得た。純粋な分析試料を蒸留(89℃/5 mmHg)により得た。 1H NMR (CDCl3) δ 5.43〜5.36 (m, 1H), 5.26 (見かけ上のd, J = 16.7 Hz, 1H), 5.10 (見かけ上のd, J = 10.4 Hz, 1H), 3.703 (s, 3H), 3.700 (s, 3H), 2.55 (見かけ上のq, J = 8.5 Hz, 1H), 1.68 (dd, J = 7.63, 4.88 Hz, 1H), 1.55 (dd, J = 9.16, 4.89 Hz, 1H) ppm. 13C NMR (CDCl3) δ 170.01, 167.78, 133.05, 118.65, 52.68, 52.53, 35.81, 31.43, 20.58 ppm.
250 mL フラスコに、(E)-1,4-ジブロモ-2-ブテン(92.63 mmol, 20.01 g)、炭酸カリウム(無水, 231.44 mmol, 31.99 g)、エタノール(100 mL)、およびマロン酸ジエチル(102.00 mmol, 16.34 g)を加えた。該混合液を周囲温度で46時間撹拌した。ジメチルエステルの製造に用いたものと同じワークアップ手順によって、ジエチルエステル(3)(20.473 g, 104%収率)を得た。純粋な分析試料を、蒸留(97℃/5 mmHg)により得た。 1H NMR (CDCl3) δ 5.47〜5.40 (m, 1H), 5.29 (見かけ上のd, J = 17.09 Hz, 1H), 5.13 (見かけ上のd, J = 10.1 Hz, 1H), 4.26〜4.12 (m, 4H), 2.56 (見かけ上のq, J = 8.24 Hz, 1H), 1.68 (dd, J = 7.33, 4.89, 1H), 1.54 (dd, J = 9.16, 4.89 Hz, 1H), 1.28〜1.23 (m, 6H) ppm. 13C NMR (CDCl3) δ 169.69, 167.44, 133.27, 118.39, 61.62, 61.44, 36.04, 31.08, 20.35, 14.23, 14.11 ppm.
250 mL フラスコに、(E)-1,4-ジブロモ-2-ブテン(92.598 mmol, 20.007 g)、炭酸カリウム(無水, 231.668 mmol, 32.018 g)、1-プロパノール(100 mL)、およびマロン酸ジプロピル(101.916 mmol, 19.183 g)を加えた。該混合液を60℃で24時間撹拌した。ジメチルエステルの製造に用いたものと同じワークアップ手順によって、ジプロピルエステル(4)(23.069 g, 103.7%収率)を得た。 1H NMR (CDCl3) δ 5.47〜5.40 (m, 1H), 5.28 (見かけ上のd, J = 17.09 Hz, 1H), 5.12 (見かけ上のd, J = 10.38 Hz, 1H), 4.15〜4.03 (m, 4H), 2.57 (見かけ上のq, J = 8.24 Hz, 1H), 1.70〜1.62 (m, 5H), 1.54 (dd, J = 8.85, 4.88, 1H), 0.95〜0.92 (見かけ上のt, J = 7.33 Hz, 6H) ppm. 13C NMR (CDCl3) δ 169.82, 167.57, 133.35, 118.40, 67.26, 67.20, 36.16, 31.13, 22.04, 21.97, 20.47, 10.42, 10.35 ppm.
250 mL フラスコに、(E)-1,4-ジブロモ-2-ブテン(92.784 mmol, 20.047 g)、炭酸カリウム(無水, 231.430 mmol, 31.985 g)、1-ブタノール(100 mL)、およびマロン酸ジブチル(101.869 mmol, 22.032 g)を加えた。ジメチルエステルの製造に用いた方法によって、ジブチルエステル(5)(23.933 g, 96.1%収率)を得た。 1H NMR (CDCl3) δ 5.42 (m, 1H), 5.27 (見かけ上のd, J = 16.78 Hz, 1H), 5.10 (見かけ上のd, J = 10.37 Hz, 1H), 4.17〜4.05 (m, 4H), 2.54 (見かけ上のq, J = 8.54 Hz, 1H), 1.66 (dd, J = 7.63, 4.88 Hz, 1H), 1.62〜1.56 (m, 4H), 1.52 (dd, J = 8.85, 4.89 Hz, 1H), 1.40〜1.32 (m, 4H), 0.93〜0.89 (m, 6H). 13C NMR (CDCl3) δ 169.80, 167.55, 133.33, 118.34, 65.51, 65.37, 36.12, 34.96, 31.09, 30.69, 30.63, 20.44, 19.10, 13.65, 13.63 ppm.
酵素を含むマルチウェルプレートを、低温室から取り出した。各ウェルは、約10 mgの凍結乾燥または固定化された酵素を含んでいた。リン酸バッファー, 100 mM, pH 7(1 mL)を各ウェルに加えた。該プレートを、Thermomixer Rにおいて、28℃にて5分間、600 rpmで振盪させた。20 μL DMSO中の1 μL(1.097 mg)のラセミのジメチルエステル(±)-(2)の溶液を、各ウェルに加えた。加水分解を、同じ振盪機において、28℃にて24時間、600 rpmで振盪させることにより、行った。24時間後、アセトニトリル(1 mL)を各ウェルに加えた。該混合液を、振盪機に、300 rpmにて室温で10分間入れて混合させた後、0.2 μフィルターによって濾過し、逆相HPLC(メソッド1)により分析して、加水分解の程度を判定した。10%以上の変換を示す酵素の加水分解からの反応混合液を、キラルHPLCにより分析して、エナンチオマーの組成を決定した。酵素加水分解からの該反応混合液に、0.1 mLの1 N HClを加えて該混合液を酸性(pH 〜2.5)にして、2 mLの酢酸エチルで抽出した。酢酸エチル層を分離し、窒素の気流でエバポレートした。残渣をヘプタン-イソプロパノール(95:5, 1 mL)に溶解させ、キラルHPLC(メソッド4)により分析した。
*HPLCピークの帰属は、(6a)の公知化合物(1)への変換により確認された。
**フサリウム・オキシスポラム由来のPen V アミダーゼは固定化リコンビナントペニシリンVアミドヒドロラーゼであり、もともとペニシリンVの6-アミノペニシラン酸への酵素加水分解に用いられていたものであって、Bristol-Myers Squibbにより社内製造されたものである(米国特許第5,516,679号、およびLowe, D. et al. Biotechnol. Lett. 1986, 8, 151-156参照)。
該反応を、ジャケット付き2 L フラスコ中でpHスタットにて実施して、温度を30℃に維持し、1 M NaOH水溶液の自動添加によりpH 8.0を維持した。該フラスコに、60 gのPen V アミダーゼおよび1.5 Lの0.1 M リン酸バッファー(pH 8.0)を充填した。撹拌下において、該ジエチルエステル(±)-(3)(30.5 g)を加えた。48時間後、NaOH消費率によって加水分解の完了が示された。該反応を、該混合液を濾過して酵素を取り除くことによって、終わらせた。該固形物を0.1 M リン酸バッファー, pH 8.0(200 mL)および酢酸エチル(3 × 200 mL)で洗浄した。濾液およ洗液を合わせて、2相を分離させた。水相をさらに酢酸エチル(2 × 600 mL)で抽出した。有機相を合わせて、300 mLの5% NaHCO3、300 mLの水で洗浄した。室温で溶媒を除去して、16.7 gの残留ジエチルエステル(2R)-(3b)を得た。 単離収率55%, AP 97, [α]D = + 23.98 (c=2.16, CHCl3). NMR (CDCl3) 1H δ 5.46 (m, 1H), 5.30 (dd, 1H), 5.14 (dd, 1H), 4.19 (m, 4H), 2.58 (q, 1H), 1.69 (m, 1H), 1.56 (m, 1H), 1.27 (2つの三重線, 6H) ppm.
cis-(1S,2S)-(7a)(3.684 g, de 99%, ee 90%)/アセトン(50 mL, モレキュラーシーブで乾燥させた)溶液に、-5〜0℃にて、トリエチルアミン(3.35 mL)を加え、次いで10 mLの乾燥アセトン中のクロロギ酸エチル(2.49 mL)の溶液を滴下した。-5〜0℃にて30分後、該混合液を室温で18時間撹拌した。生じた白色の沈殿物を濾過により除去した。該濾過物を-5℃まで冷却し、10 mLの水中のアジ化ナトリウム(1.95 g)の溶液を滴下した。該混合液を-5〜0℃で1時間撹拌した。該混合液に100 mLの冷たい(5℃)水を加えた。該混合液をMTBE(3 × 80 mL)で抽出した。MTBE相をMgSO4で乾燥させ、濾過した。溶媒をロータリーエバポレーターにおいて20-25℃で除去して、4.118 gの薄黄色のアジド(16a)(全収率 98%)を得た。
前項で得られた粗製物(17a)の混合物、10 mLのTHFおよび40 mLの2 M LiOH水溶液を室温で5日間撹拌した。該混合液を100 mLのMTBEで抽出した。MTBE相を20 mLの水で逆抽出した。水相を合わせて、KHSO4(10.9 g)および水(30 mL)の混合液で酸性化し、酢酸エチル(2 × 100 mL)で抽出した。酢酸エチル抽出物を合わせて、食塩水(2 × 50 mL)、水(2 × 50 mL)で洗浄し、MgSO4で乾燥させ、濾過した。溶媒を室温で除去して、3.192 gの粗生成物を得た(AP 77)。該粗生成物をフラッシュクロマトグラフィー(80 g シリカゲル)で処理し、ヘプタン-酢酸エチル-酢酸(50:50:1)で溶出して、2.448 g(54% (7a)からの全収率)の白色の固形物 trans-(1R,2S)-(1)を得た。 AP 95, ee 90%, [α]D +22.34 (c 1.41, MeOH). LCMS m/z ES-メソッドにより226 (M-H)およびES+メソッドにより250 (M+Na). 1H, 1H-1H COSY, (1)の13CおよびDEPT NMRスペクトルを、DMSO-d6で記録した。1H-1H COSYに基づいてプロトンの帰属を行い、DEPT実験に基づいて炭素の帰属を行った。 1H δ 12.41 (ブロード, 1H, CO2H), 7.52 (ブロード, 0.74H, 主要な回転異性体のNH), 7.18 (ブロード, 0.26H, 少量の回転異性体のNH), 5.67 (m, 1H, 4-CH), 5.21 (d, J = 15.8 Hz, 1H, 5-CH2-A), 5.02 (d, J = 10.3 Hz, 1H, 5-CH2-B), 2.02 (m, 1H, 2-CH), 1.49 (m, 1H, 3-CH2-A), 1.35 (s, 9H, Boc), 1.22 (m, 1H, 3-CH2-B) ppm. 主要な回転異性体の13C δ 172.41 (C-6), 155.51 (C-7), 134.95 (C-4 DEPTで上向き), 116.78 (C-5 DEPTで下向き), 77.95 (C-8), 39.92 (C-1 DEPTで示されず), 32.45 (C-2 DEPTで上向き), 28.18 (C-9, 10および11 DEPTで上向き), 22.52 (C-3 DEPTで下向き) ppm.
各バイアル(4 mL)に、Pen V アミダーゼ(10 mgまたは指定の量)および1 mLのバッファーを充填した。該バイアルをマルチウェルプレートのウェルに設置し、Thermomixer 振盪機において振盪させた。10分後、基質ジエステル(2、3、4または5) 10 μLまたは指定の量を加え、振盪を続けた。24時間または指定された時間の後、20 μLの4 M HClおよび3 mLのアセトニトリルを加えた。該混合液を0.2 μmフィルターにより濾過した。1 mLの濾液をアキラル分析のためのHPLCメソッド-1で処理した。該変換は、相対HPLC面積により推定された。残りの濾液を窒素の気流である程度濃縮し、酢酸エチルで抽出した。該抽出物を乾燥させ、残渣をイソプロパノール-ヘプタン(1:1)に溶解させ、0.2 μmフィルターにより濾過し、キラル分析のためのHPLCメソッド-4で処理した。
該反応を、ジャケット付き500 mL フラスコ中においてpH STATで実施して、32℃の温度および1 M NaOH水溶液の自動添加によるpH 7.0を維持した。該フラスコに、30 gのPen V アミダーゼ、240 mLの0.1 M リン酸バッファー, pH 7.0および60 mLのヘプタンを充填した。撹拌下において、該ジメチルエステル(±)-(2)(6.47 g)を加えた。22時間後、試料の分析により48%の変換が示された。NaOH消費によっても、反応の完了が示された。反応混合液全体を1 M NaOHでpH 8.0に調整し、酢酸エチル(3 × 200 mL)で抽出した。有機相を合わせて、0.1 M リン酸バッファー, pH 8.0(200 mL)および水(200 mL)で洗浄した。溶媒を除去して、3.1 gの残留ジメチルエステル(2R)-(2b)を得た。 単離収率48%, AP 98, [α]D + 34.15 (c 1.95, CHCl3). NMR (CDCl3) 1H δ 5.38-5.49 (m, 1H), 5.30 (dd, J = 17.0, 1.8 Hz, 1H), 5.15 (dd, J = 10.0, 1.8 Hz, 1H), 3.75 (s, 6H), 2.60 (m, 1H), 1.73 (dd, J = 7.5, 4.9 Hz, 1H), 1.59 (dd, J = 9.0, 4.9 Hz, 1H) ppm. 13C δ 169.59, 167.37, 132.74, 118.29, 52.33 (2C), 35.42, 31.04, 20.20 ppm.
上記の酵素加水分解実験から得た(2R)-(2b)(840 mg, 4.6 mmol)の5 mLのMeOH中の溶液を氷浴において冷却した。撹拌後、330 mgのKOH(5.9 mmol)を、3分割して10分で加えた。5時間後、該反応混合液を濃縮し、10 mLの水と混合し、酢酸エチル(3 × 10 mL)で抽出した。水相を1 M HClでpH 4.5まで酸性化し、酢酸エチル(2 × 10 mL)で抽出した。該酸性の有機抽出物溶媒を除去して、272 mgの一酸の混合物を得た。アキラルHPLCメソッド-1により、全AP 98およびde 85%が決定された。キラルHPLCメソッド-4により、得られたcis-(1R,2R)-(6b)のeeは82%であると決定された。
Claims (14)
- 該酵素が加水分解酵素である、請求項1に記載の方法。
- 該加水分解酵素がリパーゼ、エステラーゼ、プロテアーゼ、またはアミダーゼから選択される、請求項2に記載の方法。
- 該酵素が、枯草菌由来のエステラーゼ、ペニシリンVアミドヒドロラーゼ、またはコウジカビ由来のプロテアーゼから選択される、請求項3に記載の方法。
- 該酵素がペニシリンVアミドヒドロラーゼである、請求項4に記載の方法。
- 該ペニシリンVアミドヒドロラーゼがフサリウム・オキシスポラム由来である、請求項5に記載の方法。
- 該ペニシリンVアミドヒドロラーゼが、フサリウム・オキシスポラムのペニシリンVアミドヒドロラーゼ遺伝子を有する組み換え生物から得られる、請求項6に記載の方法。
- R1がメチル、エチル、プロピル、またはブチルから選択されるアルキルである、請求項1に記載の方法。
- R2がC2アルケニルである、請求項1に記載の方法。
- 該式(II)で示される化合物が90%以上のジアステレオマー過剰率で得られる、請求項1に記載の方法。
- 該式(II)で示される化合物が95%以上のジアステレオマー過剰率で得られる、請求項1に記載の方法。
- 該式(II)で示される化合物が70%以上のエナンチオマー過剰率で得られる、請求項1に記載の方法。
- 該式(II)で示される化合物が90%以上のエナンチオマー過剰率で得られる、請求項1に記載の方法。
- 該式(II)で示される化合物が95%以上のエナンチオマー過剰率で得られる、請求項1に記載の方法。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201261602811P | 2012-02-24 | 2012-02-24 | |
US61/602,811 | 2012-02-24 | ||
PCT/US2013/026706 WO2013126337A1 (en) | 2012-02-24 | 2013-02-19 | Process for resolving cyclopropyl diesters |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2015507941A true JP2015507941A (ja) | 2015-03-16 |
JP6214567B2 JP6214567B2 (ja) | 2017-10-18 |
Family
ID=47755071
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014558781A Expired - Fee Related JP6214567B2 (ja) | 2012-02-24 | 2013-02-19 | シクロプロピルジエステルの分解方法 |
Country Status (6)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US8828691B2 (ja) |
EP (1) | EP2817412B1 (ja) |
JP (1) | JP6214567B2 (ja) |
CN (1) | CN104114711B (ja) |
ES (1) | ES2714312T3 (ja) |
WO (1) | WO2013126337A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
TWI693286B (zh) * | 2017-02-01 | 2020-05-11 | 美商艾伯維有限公司 | (±)-2-(二氟甲基)-1-(烷氧羰基)-環丙烷甲酸及(±)-2-(乙烯基)-1-(烷氧羰基)-環丙烷甲酸之酶催化製法 |
Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011102388A1 (ja) * | 2010-02-16 | 2011-08-25 | 株式会社エーピーアイ コーポレーション | 1-アミノ-1-アルコキシカルボニル-2-ビニルシクロプロパンの製造方法 |
Family Cites Families (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5516679A (en) * | 1994-12-23 | 1996-05-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Penicillin V amidohydrolase gene from Fusarium oxysporum |
KR100650798B1 (ko) * | 2004-07-19 | 2006-11-27 | (주)제이코통상 | 광학활성 카복실산의 제조방법 |
KR100650797B1 (ko) * | 2005-12-12 | 2006-11-27 | (주)케미코월드 | 광학활성 사이클로프로판 카복사미드의 제조방법 |
KR100839442B1 (ko) * | 2006-09-11 | 2008-06-19 | 건국대학교 산학협력단 | 로도코코스 에리쓰로폴리스 균주를 이용한 (에스)-디메틸 사이클로프로판 카르복실산의 제조방법 |
CN100593569C (zh) * | 2007-11-28 | 2010-03-10 | 浙江工业大学 | 蜡状芽孢杆菌及其制备手性2,2-二甲基环丙甲酸/酰胺 |
-
2013
- 2013-02-19 JP JP2014558781A patent/JP6214567B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-19 EP EP13706896.1A patent/EP2817412B1/en not_active Not-in-force
- 2013-02-19 US US13/770,219 patent/US8828691B2/en active Active
- 2013-02-19 WO PCT/US2013/026706 patent/WO2013126337A1/en active Application Filing
- 2013-02-19 CN CN201380010594.8A patent/CN104114711B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2013-02-19 ES ES13706896T patent/ES2714312T3/es active Active
Patent Citations (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011102388A1 (ja) * | 2010-02-16 | 2011-08-25 | 株式会社エーピーアイ コーポレーション | 1-アミノ-1-アルコキシカルボニル-2-ビニルシクロプロパンの製造方法 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
MACROMOLECULAR RAPID COMMUNICATIONS, vol. 22, no. 16, JPN5015004263, 2001, pages 1350 - 1353, ISSN: 0003631116 * |
SYNTHETIC COMMUNICATIONS, vol. 22, no. 9, JPN6016048731, 1992, pages 1155 - 1158, ISSN: 0003466815 * |
SYNTHETIC COMMUNICATIONS, vol. 24, no. 20, JPN5015004262, 1994, US, pages 2873 - 2876, ISSN: 0003466814 * |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN104114711A (zh) | 2014-10-22 |
EP2817412A1 (en) | 2014-12-31 |
ES2714312T3 (es) | 2019-05-28 |
US8828691B2 (en) | 2014-09-09 |
CN104114711B (zh) | 2017-05-03 |
WO2013126337A1 (en) | 2013-08-29 |
EP2817412B1 (en) | 2018-12-26 |
JP6214567B2 (ja) | 2017-10-18 |
US20130224812A1 (en) | 2013-08-29 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2016366795B2 (en) | New process and intermediates | |
EA011765B1 (ru) | Получение прегабалина и родственных соединений | |
US20100087525A1 (en) | Stereoselective enzymatic synthesis of (s) or (r)-iso-butyl-glutaric ester | |
EP2017259A2 (en) | Preparation of gamma-amino acids having affinity for the alpha-2-delta protein | |
JP6214567B2 (ja) | シクロプロピルジエステルの分解方法 | |
Enoki et al. | Preparation of optically pure flurbiprofen via an integrated chemo-enzymatic synthesis pathway | |
Belkacemi et al. | Diastereoselective and enantioselective alkaline-hydrolysis of 2-aryl-1-cyclohexyl acetate: a CAL-B catalyzed deacylation/acylation tandem process | |
US20160122289A1 (en) | Process for the preparation of an anticonvulsant agent pregabalin hydrochloride | |
Yamada et al. | Optically active cyclohexene derivative as a new antisepsis agent: an efficient synthesis of ethyl (6R)-6-[N-(2-chloro-4-fluorophenyl) sulfamoyl] cyclohex-1-ene-1-carboxylate (TAK-242) | |
Fryszkowska et al. | One-pot enzymatic desymmetrization and Ugi MCR | |
US20080249310A1 (en) | Process For the Preparation of (2R,3R)-2-Hydroxy-3-Amino-3-Aryl-Propionamide and (2R,3R)-2-Hydroxy-3-Amino-3-Aryl-Propionic Acid Alkyl Ester | |
US8742161B2 (en) | Process for producing optically active bicyclo [3.1.0] hexane derivative using enzyme | |
Laı̈b et al. | Horse liver esterase catalyzed enantioselective hydrolysis of N, O-diacetyl-2-amino-1-arylethanol | |
JP5329973B2 (ja) | リパーゼ触媒を用いるエナンチオ選択的アシル化とその後の硫酸による沈殿によって、ラセミ体の4−(1−アミノエチル)安息香酸メチルエステルから(r)−および(s)−4−(1−アンモニウムエチル)安息香酸メチルエステル硫酸塩を調製する方法 | |
KR20180127420A (ko) | 삼중 결합-함유 광학 활성 카르복실산, 카르복실레이트 염 및 카르복실산 유도체의 제조 방법 | |
EP0239122A2 (en) | Process for the enzymatic resolution of racemic 2-amino-1-alkanols | |
EP0559927A1 (en) | A simplified method for the production of vinyl glycine (2-aminobut-3-enioc acid) and a convenient resolution of a derivative | |
US20120330030A1 (en) | Enantioselective Synthesis of y-amino-a, B-unsuturated carboxylic acid derivatives | |
US8236853B1 (en) | Formation of cyclopentene nitro-ester and derivatives | |
JP5092465B2 (ja) | ピペコリン酸の立体選択的なエステル化方法 | |
MX2008008282A (en) | Preparation of gamma-amino acids having affinity for the alpha-2-delta protein |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20160118 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20160219 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20161129 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170110 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170407 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20170905 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20170919 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6214567 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |