JP2011515448A - ヒストンデアセチラーゼの新規インヒビターとしてのアザ−ビシクロヘキシル置換インドリルアルキルアミノ誘導体 - Google Patents

Abstract

【化１】

本発明は、ヒストンデアセチラーゼ阻害酵素活性を有する新規な式（Ｉ）［式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、ＡおよびＸは定義された意味を有する］の化合物；それらの製造、それらを含有する組成物および医薬としてのそれらの使用を含む。

Description

本発明はヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害酵素活性を有する化合物に関する。さらに、それは、それらの製造方法、それらを含んでなる組成物、ならびに両、インビトロおよびインビボにおいてＨＤＡＣを阻害するための、そして医薬、例えば、がんおよび乾癬のような増殖性症状を抑制するための医薬としての、それらの使用に関する。

核ヒストンは、遺伝子転写、ならびに複製、修復、組み換えおよび染色体分離のような他のＤＮＡを鋳型とするプロセスを調節するために関与する機構の全体的かつ動的な構成成分として知られる。それらは、アセチル化、リン酸化、メチル化、ユビキチン化およびＡＤＰ−リボシル化を含む翻訳後修飾の主題である。

本明細書において「ＨＤＡＣｓ」と呼ばれるヒストンデアセチラーゼは、コアヌクレオソームヒストンＨ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３およびＨ４を含む、タンパク質のリジン残基におけるアセチル修飾の除去を触媒する酵素である。本明細書において「ＨＡＴｓ」と呼ばれるヒストン・アセチルトランスフェラーゼとともに、ＨＤＡＣはヒストンのアセチル化のレベルを調節する。ヌクレオソームヒストンのアセチル化の平衡は、多くの遺伝子の転写において重要な役割を演じる。ヒストンの低アセチル化は、遺伝子転写の抑制をもたらす凝縮されたクロマチン構造に関連し、これに対してアセチル化ヒストンは、より開かれたクロマチン構造および転写の活性化に関連している。

１１種の構造的に関連するＨＤＡＣが記述されていて、３クラスに分類される。クラスＩ・ＨＤＡＣは、ＨＤＡＣ１、２、３、８からなり、クラスＩＩ・ＨＤＡＣは、ＨＤＡＣ４、５、６、７、９および１０からなり、一方、ＨＤＡＣ１１はクラスＩＶを代表する。ＨＤＡＣの第３クラスのメンバーはクラスＩ、ＩＩおよびクラスＩＶ・ＨＤＡＣとは構造的に関連していない。クラスＩ／ＩＩ／ＩＶ・ＨＤＡＣは亜鉛依存性メカニズムによって作動し、これに対してクラスＩＩＩ・ＨＤＡＣはＮＡＤ依存性である。

ヒストンに加えて、他のタンパク質もまたアセチル化の基質であった、特に、ｐ５３、ＧＡＴＡ−１およびＥ２Ｆのような転写因子；グルココルチコイド受容体、甲状腺受容体、エストロゲン受容体のような核受容体；およびｐＲｂのような細胞周期調節タンパク質である。タンパク質のアセチル化は、タンパク質の安定化、例えばｐ５３安定化、コ・ファクターの補充およびＤＮＡ結合の増大と結び付けられた。ｐ５３は、種々のストレスシグナル、例えばＤＮＡ損傷への応答に際して細胞周期の停止またはアポトーシスを誘導できる腫瘍サプレッサーである。ｐ５３に誘導される細胞周期停止の主な標的はｐ２１遺伝子であると思われる。ｐ５３によるその活性化に次いで、ｐ２１は、Ｇ１およびＧ２両期における細胞周期停止をもたらすサイクリン／サイクリン依存性キナーゼ複合体とそれとの会合、老化におけるそれの上方調節および増殖細胞の核抗原とのそれの相互作用によって同定された。

ＨＤＡＣのインヒビターの研究は、それらが、細胞周期停止、細胞分化、アポトーシスおよび形質転換された表現型の逆転において重要な役割を演じることを示している。

インヒビター、トリコスタチンＡ（ｔｒｉｃｈｏｓｔａｔｉｎＡ）（ＴＳＡ）は、例えば、Ｇ１およびＧ２両期における細胞周期停止を惹起し、種々の細胞系の形質転換された表現型を復帰し、そしてＦｒｉｅｎｄ白血病細胞およびその他細胞の分化を誘導する。Ｔ
ＳＡ（およびスベロイルアニリドヒドロキサム酸ＳＡＨＡ）は、細胞増殖を抑制し、最終（ｔｅｒｍｉｎａｌ）分化を誘導し、そしてマウスにおける腫瘍の形成を阻止すると報告された（非特許文献１）。

またトリコスタチンＡは、線維症、例えば肝線維症および肝硬変（ｌｉｖｅｒ ｃｈｉｒｒｈｏｓｉｓ）の処置において有用であることが報告された（特許文献１）。

ＨＤＡＣインヒビターのファーマコフォア（ｐｈａｒｍａｃｏｐｈｏｒｅ）は、ＨＤＡＣの亜鉛含有の活性部位と相互作用する金属結合ドメイン、リンカードメイン、および活性部位の縁における残基と相互作用する表面認識ドメインまたはキャッピング領域からなる。

また、ＨＤＡＣのインヒビターは、ｐ２１遺伝子の発現を誘導することが報告された。これらのインヒビターによるｐ２１遺伝子の転写活性化は、クロマチンの再構築と、それに続くｐ２１プロモーター領域におけるヒストンＨ３およびＨ４のアセチル化によって促進される。ｐ２１のこの活性化はｐ５３−非依存様式において起り、その結果、ＨＤＡＣインヒビターは、変異したｐ５３遺伝子、種々の腫瘍の特質を有する細胞において作動する。

その上、ＨＤＡＣインヒビターは、宿主免役応答の増大および腫瘍血管形成の抑制のような間接的な活性をもつことができ、その結果、一次腫瘍の増殖を抑制し、そして転移を阻止することができる（非特許文献２）。

上記を考慮すれば、ＨＤＡＣインヒビターは、変異したｐ５３遺伝子を有する腫瘍を含む、細胞増殖性疾患または症状の処置において大きな潜在能力をもつことができる。

特許文献２は、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとして二環式ヒドロキサメートを開示している。
特許文献３、４、５、６、７、８、９、１０は、なかんずく、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとして置換ピペラジニルピリミジニルヒドキサム酸を開示し、さらに特許文献８はＲ３０６４６５を開示している。
特許文献１１は、ＨＤＡＣインヒビターとして、ピペラジン結合を含むカルバミン酸化合物を開示している。
特許文献１２は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして置換ピペラジニルフェニルベンズアミド化合物を開示している。
特許文献１３は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、アリール基とヒドロキサメートの間にアルキル・リンカーを含有する誘導体を開示している。
特許文献１４は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、（ヘテロ）アリールアルケニル置換二環式ヒドロキサメートを開示している。
特許文献１５は、抗炎症および抗腫瘍活性をもつＮ−ヒドロキシル−ベンズアミド誘導体の誘導体を開示している。
特許文献１６は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして置換アリールヒドロキサメート誘導体を開示している。
特許文献１７は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてインドール、ベンズイミダゾールおよびナフイミダゾールを開示している。
特許文献１８は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、非芳香族複素環式環系に連結されたヒドロキサメートを開示している。
特許文献１９は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてヒドロキサメート誘導体を開示している。
特許文献２０は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてベンズイミダゾールを開示
している。
特許文献２１および２２は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてベンズアミドを開示している。
特許文献２３は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、アシル尿素結合およびスルホニル尿素結合ヒドロキサメートを開示している。
特許文献２４は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてビアリール結合ヒドロキサメートを開示している。
特許文献２５は、ヒストンデアセチラーゼの新規インヒビターを記述している。
特許文献２６は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして置換インドリルアルキルアミノ誘導体を開示している。
特許文献２７は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、なかんずくアザビシクロヘキシル誘導体を開示している。
特許文献２８は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして、なかんずくアザビシクロヘキシル誘導体を開示している。
特許文献２９は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとして有用なベンズアミド化合物を開示している。
特許文献３０は、ヒストンデアセチラーゼを阻害できるニコチンアミドの新規種類に関する。
特許文献３１、３２および３３は、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとしてピリミジン誘導体を開示している。
特許文献３４は、ヒストンデアセチラーゼインヒビターとしてピラジニルヒドロキシルアクリルアミドを開示している。
特許文献３５は、ヒストンデアセチラーゼのインヒビターとして（ヘテロ）アリールカルボキサミドを開示している。

本発明の化合物は、構造、それらの薬理学的活性および／または薬理学的効力において先行技術とは異なる。

Ｇｅｅｒｔｓら、１９９８年３月１１日公開、欧州特許出願ＥＰ ０ ８２７ ７４２ ２００３年８月１４日公開、特許出願ＥＰ１４７２２１６ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５０９９ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３４８ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３５３ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３５４ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３６４ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３６５ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３７０ ２００３年９月１８日公開、特許出願ＥＰ１４８５３７８ ２００３年１０月９日公開、特許出願ＥＰ１４９２５３４ ２００３年１０月２３日公開、特許出願ＥＰ１４９５００２ ２００４年１月２９日公開、特許出願ＷＯ０４／００９５３６ ２００４年２月１２日公開、特許出願ＥＰ１５２５１９９ ２００４年７月２９日公開、特許出願ＥＰ１５８１４８４ ２００４年７月２９日公開、特許出願ＥＰ１５８５７３５ ２００４年８月２６日公開、特許出願ＷＯ０４／０７２０４７ ２００４年９月３０日公開、特許出願ＥＰ１６０８６２８ ２００４年１０月２８日公開、特許出願ＥＰ１６１１０８８ ２００５年３月３１日公開、特許出願ＥＰ１５４６３２６ ２００５年４月７日公開、特許出願ＷＯ０５／０３０７０４ ２００５年４月７日公開、特許出願ＥＰ１６６３９５３ ２００５年５月６日公開、特許出願ＥＰ１６８５０９４ ２００５年５月６日公開、特許出願ＥＰ１６８２５３８ ２００５年１０月６日公開、特許出願ＥＰ１７３５３１９ ２００６年２月２日公開、特許出願ＥＰ１７８１６３９ ２００７年１０月２０日公開、特許出願ＵＳ０５／０２３４０３３Ａ１ ２００６年１１月２３日公開、特許出願ＥＰ１８８１９７７ ２００７年４月２６日公開、特許出願ＷＯ０７／０４５８４４ ２００７年５月１８日公開、特許出願ＷＯ０７／０５５９４２ ２００７年７月２６日公開、特許出願ＷＯ０７／０８２８７８ ２００７年７月２６日公開、ＷＯ０７／０８２８８０ ２００７年７月２６日公開、ＷＯ０７／０８２８８２ ２００７年８月１６日公開、特許出願ＷＯ０７／０９１７０３ ２００７年９月０７日公開、特許出願ＷＯ０７／１００６５７

Ｆｉｎｎｉｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎａｔｕｒｅ，４０１：１８８−１９３、１９９９ Ｍａｉ ｅｔ ａｌ．，Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｒｅｖｉｅｗｓ，２５：２６１−３０９、２００５

本発明は、式（Ｉ）

の化合物、そのＮ−オキシド形態物、製薬学的に許容できる付加塩および立体化学的異性形態物に関していて、式中、
各ｎは、値０、１または２をもつ整数であり、そしてｎが０である場合は直接結合が意図され；
各ｍは、値１または２をもつ整数であり；
Ｘは、独立してＮまたはＣＨであり；
Ａは、ヒドロキシまたは式：

の基であり；
Ｒ^１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルスルホニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノスルホニルであり；
Ｒ^２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、シアノ、Ｃ_２−６アルケニル、ポリハロＣ_１−６アルキル、ニトロ、フェニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ_１−６アルキルオキシ、またはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノであり；
Ｒ^３は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、またはＣ_１−６アルキルオキシであるか；あるいは
Ｒ^２およびＲ^３が、隣接する炭素原子上に存在する場合は、それらは二価の基：
−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ− （ａ−２）
を形成してもよく；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキルメチル、フェニルＣ_１−６アルキルであるか；あるいは
Ｒ^２がインドリルの７位に存在する場合は、Ｒ^２およびＲ^４は、一緒になって二価の基：
−（ＣＨ_２）_２− （ａ−３）または
−（ＣＨ_２）_３− （ａ−４）
を形成してもよく；
Ｒ^５は、水素またはチオフェニルである。

置換基から二環式環系にひかれた線は、結合が二環式環系の適当な環原子のいずれに結合されてもよいことを示している。

用語「ヒストンデアセチラーゼインヒビター」または「ヒストンデアセチラーゼのインヒビター」は、ヒストンデアセチラーゼと相互作用し、そしてその活性、より具体的にはその酵素活性を阻害することができる化合物を同定するために使用される。ヒストンデアセチラーゼ酵素活性を阻害することは、ヒストンからアセチル基を除去するヒストンデアセチラーゼの能力を低下させることを意味する。好ましくは、そのような阻害は特異的である、すなわち、ヒストンデアセチラーゼインヒビターは、いくつかの他の無関係な生物学的効果を生じるのに必要とされるインヒビターの濃度よりも低い濃度において、ヒストンからアセチル基を除去するヒストンデアセチラーゼの能力を低下させる。

前記定義およびこれ以降において使用されるように、ハロは、フルオロ、クロロ、ブロモおよびヨードに対する総称であり；Ｃ_１−２アルキルは、１または２個の炭素原子を有する直鎖飽和炭化水素基、例えば、メチルまたはエチルを定義し；Ｃ_１−６アルキルは、Ｃ_１−２アルキルおよびそれ自体３〜６個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖飽和炭化水素基、例えば、プロピル、ブチル、１−メチルエチル、２−メチルプロピル、ペンチル、２−メチル−ブチル、ヘキシル、２−メチルペンチルなどを定義し；そしてポリハロＣ_１−６アルキルは、３個の同じか異なるハロ置換基を含有するＣ_１−６アルキル、例えばトリフルオロメチルを定義し；Ｃ_２−６アルケニルは、１個の二重結合を含有し、かつそれ自体２〜６個の炭素原子を有する直鎖および分枝鎖炭化水素基、例えば、エテニル、２−プロペニル、２−ブテニル、２−ペンテニル、３−ペンテニル、３−メチル−２−ブテニルなどを定義し；Ｃ_３−６シクロアルキルは、３〜６個の炭素を有する環式炭化水素基、例えばシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロペンテニル、シクロヘキシル、シクロヘキセニルなどを含む。

製薬学的に許容できる付加塩は、製薬学的に許容できる酸付加塩および製薬学的に許容できる塩基付加塩を包含する。先に述べられたような製薬学的に許容できる酸付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成できる治療学的に活性のある非毒性の酸付加塩形態物を含むことを意味している。塩基性を有する式（Ｉ）の化合物は、適当な酸により該塩基形態物を処理することによってそれらの製薬学的に許容できる酸付加塩に変換できる。適当な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩化水素酸もしくは臭化水素酸；硫酸；硝酸；リン酸およびそれに類する酸のような無機酸；または、例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸、マロン酸、コハク酸（すなわちブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモ酸およびそれに類する酸のような有機酸を含む。酸性を有する式（Ｉ）の化合物は、適当な有機または無機塩基により該酸形態物を処理することによってそれらの製薬学的に許容できる塩基付加塩に変換されてもよい。適当な塩基塩形態物は、例えば、アンモニウム塩、アルカリおよびアルカリ土類金属塩、例えばリチウム、ナトリウム、カリウム、マグネシウム、カルシウム塩など、有機塩基との塩、例えば、ベンザシン、Ｎ−メチル−Ｄ−グルカミン、ヒドラバミン塩、およびアミノ酸、例えばアルギニン、リジンなどとの塩を含む。
また、用語「酸または塩基付加塩」は、式（Ｉ）の化合物が形成することができる水和物および溶媒付加形態物を含む。そのような形態物の例は、例えば水和物、アルコラートおよびそれに類するものである。

本明細書で使用されるような、用語「式（Ｉ）の化合物の立体化学的異性形態物」は、式（Ｉ）の化合物が保持してもよい、同じ結合配列によって結合された同じ原子から作成されるが、相互交換不可能である異なる三次元構造を有するすべての可能な化合物を定義する。別の方法で記述または指示されなければ、化合物の化学的名称は、該化合物が保持してもよい、すべての可能な立体化学的異性形態物の混合物を包含する。該混合物は、該化合物の基本分子構造のすべてのジアステレオマーおよび／または鏡像異性体を含有してもよい。純粋形態物または互いの混合物の両方における式（Ｉ）の化合物のすべての立体化学的異性形態物が、本発明の範囲内に包含されるように意図される。

式（Ｉ）の化合物のＮ−オキシド形態物は、１個または数個の窒素原子がいわゆるＮ−オキシドに酸化されるそれらの式（Ｉ）の化合物、特に、１個以上のピペリジン−、ピペラジンまたはピペラジニル窒素がＮ−酸化されるそれらのＮ−オキシドを含むことが意味される。

式（Ｉ）の化合物のあるものは、また、それらの互変異性形態物において存在してもよい。明白ではないが上記式において指示されるそのような形態物は、本発明の範囲内に含まれることが意図される。

また、これ以降で使用される場合は常に、用語「式（Ｉ）の化合物」は、製薬学的に許容できる付加塩およびすべての立体異性形態物を含むことを意味している。

本明細書で使用されるように、用語「ヒストンデアセチラーゼ」および「ＨＤＡＣ」は、ヒストンのＮ−末端におけるリジン残基のε−アミノ基からアセチル基を除去する酵素のファミリーのいずれか１つを指すことを意図している。文脈によって別に指示されない限り、用語「ヒストン」は、すべての種からのＨ１、Ｈ２Ａ、Ｈ２Ｂ、Ｈ３、Ｈ４およびＨ５を含む、いずれかのヒストンタンパク質を指すことを意味している。ヒトＨＤＡＣタンパク質または遺伝子産物は、限定されるものではないが、ＨＤＡＣ−１、ＨＤＡＣ−２、ＨＤＡＣ−３、ＨＤＡＣ−４、ＨＤＡＣ−５、ＨＤＡＣ−６、ＨＤＡＣ−７、ＨＤＡＣ−８、ＨＤＡＣ−９、ＨＤＡＣ−１０およびＨＤＡＣ−１１を含む。ヒストンデアセチラ
ーゼは、また、原生動物または真菌起源から得ることができる。

興味ある化合物の第１群は、次に示す制約の１つ以上が適合する式（Ｉ）のそれらの化合物からなる：
ａ）Ａはヒドロキシであり；
ｂ）Ｒ^１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルスルホニル、またはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノスルホニルであり；
ｃ）Ｒ^３は水素であるか；あるいは
ｄ）Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキルまたはＣ_３−６シクロアルキルメチルである。

興味ある化合物の第２群は、次に示す制約の１つ以上が適合する式（Ｉ）のそれらの化合物または興味ある化合物の第１群の化合物からなる：
ａ）各ｎは、値０または１をもつ整数であり；
ｂ）各ｍは、値１をもつ整数であり；
ｃ）Ｘは独立してＮであり；
ｄ）Ａはヒドロキシであり；
ｅ）Ｒ^１は水素であり；
ｆ）Ｒ^２は、水素、ハロまたはシアノであり；
ｇ）Ｒ^３は水素であるか；あるいは
ｇ）Ｒ^４はＣ_１−６アルキルである。

興味ある化合物の第３群は、次に示す制約の１つ以上が適合する式（Ｉ）のそれらの化合物、興味ある化合物の第１群の化合物または興味ある化合物の第２群の化合物からなる：
ａ）各ｎは値１をもつ整数であり；
ｂ）各ｍは値１をもつ整数であり；
ｃ）Ｘは独立してＮであり；
ｄ）Ａはヒドロキシであり；
ｅ）Ｒ^１は水素であり；
ｆ）Ｒ^２は水素であり；
ｇ）Ｒ^３は水素であるか；あるいは
ｇ）Ｒ^４はＣ_１−６アルキルである。

好適な化合物の群は、各ｎは値０または１をもつ整数であり；各ｍは値１をもつ整数であり；Ｘは独立してＮであり；Ａはヒドロキシであり；Ｒ^１は水素であり；Ｒ^２は、水素、ハロまたはシアノであり；Ｒ^３は水素であり；そしてＲ^４はＣ_１−６アルキルである、式（Ｉ）のそれらの化合物からなる。

より好適な化合物の群は、各ｎは値１をもつ整数であり；各ｍは値１をもつ整数であり；Ｘは独立してＮであり；Ａはヒドロキシであり；Ｒ^１は水素であり；Ｒ^２は水素であり；Ｒ^３は水素であり；そしてＲ^４はＣ_１−６アルキルである、式（Ｉ）のそれらの化合物からなる。

もっとも好適な化合物は化合物Ｎｏ １である。

式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物、それらの製薬学的に許容できる塩およびＮ−オキシドおよびそれらの立体化学的異性形態物は慣用の方式において製造されてもよい。出発材料および若干の中間体は、既知の化合物であり、そして市販されているか、または当該技術分野において一般に既知であるかまたは特許出願ＥＰ１４８５０９９、ＥＰ１４８５３４８、ＥＰ１４８５３５３、ＥＰ１４８５３５４、ＥＰ１４８５３６４、ＥＰ１４８５３６５、ＥＰ１４８５３７０およびＥＰ１４８５３７８において記述されているような慣用の反応手順にしたがって製造されてもよい。若干の製造方法がこれ以降、より詳細に記述されるであろう。式（Ｉ）の最終化合物を得るための他の方法が実施例において記述される。

ａ）本明細書において式（Ｉ−ａ）の化合物と呼ばれる式（Ｉ）のヒドキサム酸は、本明細書において式（ＩＩ−ａ）の中間体と呼ばれる、Ｑがテトラヒドロピラニルオキシアミノカルボニルである式（ＩＩ）の中間体を、適当な酸、例えばトリフルオロ酢酸と反応させることによって製造されてもよい。該反応は、適当な溶媒、例えばメタノールまたはジクロロメタン中で実施される。

ｂ）Ａが、本明細書において式（Ｉ−ｂ）の化合物と呼ばれる式（ａ−１）の基である式（Ｉ）の化合物は、Ｍが水素またはアルカリ金属、例えばナトリウムまたはリチウムを表す式（ＩＶ）の中間体を、例えば、トリエチルアミンのような塩基およびヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾル−１−イルオキシ−トリピロリジノ−ホスホニウム（ＰｙＢＯＰ）の存在下で、式（ＩＩＩ）のアニリンと、反応させることによって製造されてもよい。該反応は、適当な溶媒、例えばテトラヒドロフランまたはジクロロメタンまたはそれらの混合液中で実施される。

また、式（Ｉ）の化合物は、技術上既知の反応または官能基変換により互いに転化されてもよい。多数のそのような変換は既に上述されている。他の例は、対応するカルボン酸またはアルコールへのカルボン酸エステルの加水分解；対応するカルボン酸またはアミンへのアミドの加水分解；対応するアミドへのニトリルの加水分解である；イミダゾールまたはフェニル上のアミノ基は、技術的に既知のジアゾ化反応、続いてのジアゾ基の水素による置換により水素で置換されてもよく；アルコールはエステルおよびエーテルに転化されてもよく；第１級アミンは第２級または第３級アミンに転化されてもよい；二重結合は対応する単結合に水素添加されてもよい；フェニル基上のヨード基は、適当なパラジウム触媒の存在下で一酸化炭素挿入によってエステル基に転化されてもよい。

また、本発明は、式（ＩＩ）

の中間体、そのＮ−オキシド形態物、製薬学的に許容できる付加塩および立体化学的異性形態物に関していて、式中、
各ｎは、値０、１または２をもつ整数であり、そしてｎが０である場合は直接結合が意図され；
各ｍは、値１または２をもつ整数であり；
Ｘは、独立してＮまたはＣＨであり；
Ｑは、Ｃ_１−２アルキルオキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルまたはテトラヒドロピラニルオキシアミノカルボニルであり；
Ｒ^１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルスルホニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノスルホニルであり；
Ｒ^２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、シアノ、Ｃ_２−６アルケニル、ポリハロＣ_１−６アルキル、ニトロ、フェニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ_１−６アルキルオキシ、またはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノであり；
Ｒ^３は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、またはＣ_１−６アルキルオキシであり；そして
Ｒ^２およびＲ^３が、隣接する炭素原子上に存在する場合、それらは二価の基：
−Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ− （ａ−２）
を形成してもよく；
Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキルメチル、フェニルＣ_１−６アルキルであるか；あるいは
Ｒ^２がインドリルの７位に存在する場合は、Ｒ^２およびＲ^４は、一緒になって二価の基：
−（ＣＨ_２）_２− （ａ−３）または
−（ＣＨ_２）_３− （ａ−４）
を形成してもよく；
Ｒ^５は、水素またはチオフェニルである。

興味ある、好適な、より好適な、そしてもっとも好適な化合物の群は、式（Ｉ）の化合物について定義された基にしたがって、式（ＩＩ）の化合物について定義することができる。

ａ）式（ＩＩ−ａ）の中間体は、Ｍがナトリウムのようなアルカリ金属陽イオンを表す式（ＩＶ）の中間体を、適当な試薬、例えばＮ’−（エチルカーボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン・一塩酸塩（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の存在下で、式（Ｖ）の中間体と反応させることによって製造されてもよい。この反応は、適当な溶媒、例えばジクロロメタンおよびテトラヒドロフランの混合液中、トリエチルアミンのような塩基の存在下で実施されてもよい。

式（Ｉ）の化合物および若干の中間体は、それらの構造において少なくとも１個の立体形成中心を有してもよい。この立体形成中心はＲまたはＳ配置において存在してもよい。

先に製造されたような式（Ｉ）の化合物は、一般に、鏡像異性体のラセミ混合物であり、これらは、技術上既知の分割手順にしたがって互いに分離することができる。式（Ｉ）のラセミ化合物は、適当なキラル酸との反応によって対応するジアステレオマー塩形態物に転化されてもよい。該ジアステレオマー塩形態物は、続いて、例えば、選択もしくは分画晶出によって分離され、そして鏡像異性体はアルカリによってそこから遊離される。式（Ｉ）の化合物の鏡像異性形態物を分離するその他の方式は、キラル固定相を使用する液体クロマトグラフィーを必要とする。該純粋な立体化学的異性形態物もまた、反応が立体化学的に起きるならば、適当な出発材料の対応する純粋な立体化学的異性形態物から得られてもよい。好ましくは、特定の立体異性体が所望される場合は、該化合物は立体特異的
製造方法によって合成できる。これらの方法は、有利には、鏡像異性体として純粋な出発材料を使用できる。

式（Ｉ）の化合物、製薬学的に許容できる酸付加塩およびその立体異性形態物は、それらがヒストンデアセチラーゼ（ＨＤＡＣ）阻害効果を有する点で、価値ある薬理学的特性を有する。

本発明は、本発明の化合物の有効量を投与することによって、形質転換細胞を含む、細胞の異常増殖を抑制する方法を提供する。細胞の異常増殖は、正常な調節機構に依存しない細胞増殖（例えば、接触阻止の喪失）を指す。このことは、直接的に、増殖停止、最終分化および／またはがん細胞のアポトーシスを惹起すること、および間接的に、腫瘍の新血管形成を抑制することの両方による腫瘍増殖の抑制を含む。

また、本発明は、そのような処置を必要とする被験者、例えば、哺乳動物（およびより具体的には、ヒト）に対して本発明の化合物の有効量を投与することによって、腫瘍増殖の抑制をする方法を提供する。特に、本発明は、本発明の化合物の有効量の投与によって腫瘍の増殖を抑制をする方法を提供する。抑制されてもよい腫瘍の例は、限定されるものではないが、肺がん（例えば、腺がん、そして非小細胞肺がんを含む）、膵臓がん（例えば、外分泌膵臓がん腫のような膵臓がん腫）、結腸がん（例えば、結腸腺がんおよび結腸腺腫のような結腸直腸がん腫）、後生的疾病を含む前立腺がん、リンパ様系統の造血性腫瘍（例えば、急性リンパ性白血病、Ｂ細胞リンパ腫、バーキットリンパ腫）、骨髄性白血病（例えば、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ））、甲状腺胞状がん、脊髄異形成症候群（ＭＤＳ）、間葉原発の腫瘍（例えば、線維肉腫および横紋筋肉腫）、黒色腫、奇形がん、神経芽細胞腫、膠腫、皮膚の良性腫瘍（例えば、角化棘細胞腫）、乳がん（例えば、後生的乳がん）、腎臓がん、卵巣がん、膀胱がんおよび表皮がんである。

本発明による化合物は、他の治療目的のために使用されてもよい、例えば：
ａ）がんを処置するための腫瘍の放射前、放射中もしくは放射後に、本発明による化合物を投与することによる放射線療法への腫瘍の感作；
ｂ）リューマチ様関節炎、骨関節炎、若年性関節炎、痛風、多発関節炎、乾癬性関節炎、硬直性脊椎炎および全身性紅斑性狼瘡のような関節症および骨病理学的症状の処置；
ｃ）血管増殖性疾患、アテローム性動脈硬化症および再狭窄を含む平滑筋細胞増殖の抑制；
ｄ）潰瘍性大腸炎、クローン病、アレルギー性鼻炎、移植片対宿主病、結膜炎、喘息、ＡＲＤＳ、ベーチェット病、移植拒絶、蕁麻疹（ｕｔｉｃａｒｉａ）、アレルギー性皮膚炎、円形脱毛症、強皮症、発疹、湿疹、皮膚筋炎、面皰、糖尿病、全身性紅斑性狼瘡、川崎病、多発性硬化症、気腫、嚢胞性繊維症および慢性気管支炎のような炎症症状および皮膚症状の処置；
ｅ）子宮内膜症、子宮類繊維腫、異機能子宮出血および子宮内膜過形成の処置；
ｆ）網膜および脈絡膜血管を障害する血管病を含む眼の血管新生の処置；
ｇ）心機能不全の処置；
ｈ）ＨＩＶ感染症の処置のような免疫抑制症状の抑制；
ｉ）腎不全の処置；
ｊ）内分泌障害の抑制；
ｋ）糖新生の機能障害の抑制；
ｌ）神経病理学的疾患、例えばパーキンソン病、または認知障害をもたらす神経病理学的疾患、例えばアルツハイマー病またはポリグルタミン関連ニューロン疾患の処置；
ｍ）精神医学的障害、例えば精神***病、双極性障害、うつ病、不安および精神病の処置；
ｎ）神経筋病、例えば、筋委縮性側索硬化症の抑制；
ｏ）脊髄筋性委縮の処置；
ｐ）遺伝子の発現を強化することによって処置を受け入れる他の病理学的症状の処置；
ｑ）遺伝子治療の増進；
ｒ）脂質生成の抑制；
ｓ）マラリアのような寄生虫病の処置。

したがって、本発明は、医薬として使用するための式（Ｉ）の化合物、ならびに１つ以上の上記症状を処置する薬物の製造のためのこれらの式（Ｉ）の化合物の使用を開示する。

式（Ｉ）の化合物、その製薬学的に許容できる酸付加塩および立体異性形態物は、それらが、標識化合物とＨＤＡＣ間の複合体の形成を検出または測定することを含む、生物学的サンプル中のＨＤＡＣを検出または同定するために使用できる点で、価値ある診断上の特性を有することができる。

検出または同定方法は、放射性同位元素、酵素、蛍光物質、発光物質などのような標識作用物により標識されている化合物を使用することができる。放射性同位元素の例は、^１２５Ｉ、^１３１Ｉ、^３Ｈおよび^１４Ｃを含む。酵素は、通常、検出可能な反応を順次触媒する適当な基質の共役によって検出可能にされる。それらの例は、例えば、β−ガラクトシダーゼ、β−グルコシダーゼ、アルカリホスファターゼ、ペルオキシダーゼおよびリンゴ酸デヒドロゲナーゼ、好ましくは西洋ワサビ・ペルオキシダーゼを含む。発光物質は、例えば、ルミノール、ルミノール誘導体、ルシフェリン、エクオリンおよびルシフェラーゼを含む。

生物学的サンプルは、体組織または体液として定義できる。体液の例は、脳脊髄液、血液、血漿、血清、尿、喀痰、唾液などである。

その有用な薬理学的性質にかんがみて、主題の化合物は、投与目的のために種々の製薬学的形態物に調合されてもよい。

本発明の製薬学的組成物を製造するために、有効成分として、塩基もしくは酸付加塩形態物における特定の化合物の有効量が、製薬学的に許容できる担体との直接混合物において組み合わされるが、この担体は、投与のために望ましい調製物の形態に応じて、広範な種々の形態をとることができる。これらの製薬学的組成物は、好ましくは、経口的、直腸内、経皮的、または非経口的注射による投与のために適当な単位用量形態物で存在するのが望ましい。例えば、経口用量形態物の組成物を製造するには、例えば、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤および液剤のような経口液状形態物の場合には、水、グリコール、油、アルコール等：あるいは散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には、澱粉、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤等のような固形担体のように、いかなる通常の製薬学的媒質が使用されてもよい。

投与が容易であることから、錠剤およびカプセル剤が、もっとも有利な経口用量単位形態物を表し、この場合には、固形製薬学的担体が使用されることは明らかである。非経口組成物では、他の成分が、例えば溶解性を助けるために含まれてもよいけれども、担体は通常、少なくとも大部分、滅菌水を含むであろう。例えば、注射用液剤が製造されてもよく、この場合、担体は、生理食塩溶液、グルコース溶液もしくは生理食塩水とグルコース溶液の混合液を含む。また、注射用懸濁剤が製造されてもよく、この場合は、適当な液状担体、懸濁化剤等が使用されてもよい。経皮投与に適する組成物では、担体は、添加物が皮膚に対して有意な悪影響を惹起しない微量で何らかの性質をもつ適当な添加物と場合によっては組み合わされて、浸透促進剤および／または適当な湿潤剤を場合によっては含む
。該添加物は、皮膚への投与を容易にし、そして／または所望の組成物を製造するのに役立つであろう。これらの組成物は、種々の方法、例えば経皮パッチとして、スポット・オン剤として、または軟膏剤として投与されてもよい。

前述の製薬学的組成物を、投与の簡易性および用量の均一性のために、用量単位形態物において調合することは、特に得策である。本明細書および請求範囲において使用される用量単位形態物は、単位用量として適当な物理的に分割された単位を指し、各単位は、必要な製薬学的担体と一緒になって所望の治療効果を生むように計算された有効成分の予め決定された量を含有する。そのような用量単位形態物の例は、錠剤（刻み目をつけたり、コーティングされた錠剤を含む）、カプセル剤、丸剤、粉末包装剤、ウェーファー剤、注射用液剤もしくは懸濁剤、ティースプーン剤（ｔｅａｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）、テーブルスプーン剤（ｔａｂｌｅｓｐｏｏｎｆｕｌｓ）等、およびそれらの分割される集合物である。

当業者は、これ以降に提示される試験結果から、有効量を容易に決定できるであろう。一般には、治療学的有効量は、０．００５ｍｇ／ｋｇ〜１００ｍｇ／ｋｇ体重、特に、０．００５ｍｇ／ｋｇ〜１０ｍｇ／ｋｇ体重であろうと考えられる。１日を通じて適当な間隔で、２、３、４またはそれ以上のサブ用量として、必要とされる用量を投与するのが適当であろう。該サブ用量は、例えば、１単位用量形態物当たり有効成分０．５〜５００ｍｇ、特に、１０ｍｇ〜５００ｍｇを含んでいる単位用量形態物として製剤化されてもよい。

本発明のその他の態様として、ＨＤＡＣ−インヒビターとその他の抗がん作用物との組合せ物は、特に、医薬としての使用のために、より具体的には、がんまたは関連疾患の処置において期待される。

上記症状の処置のために、本発明の化合物は、１種以上の他の医学的作用物、より具体的には他の抗がん作用物と組み合わせて有利に用いることができる。抗がん作用物の例は：
− 白金配位化合物、例えば、シスプラチン、カルボプラチンまたはオキサリプラチン；− タキサン化合物、例えば、パクリタキセルまたはドセタキセル；
− カンプトテシン化合物のようなトポイソメラーゼＩインヒビター、例えば、イリノテカンまたはトポテカン；
− 抗腫瘍ポドフィロトキシン誘導体のようなトポイソメラーゼＩＩインヒビター、例えば、エトポシドまたはテニポシド；
− 抗腫瘍ビンカ・アルカロイド、例えば、ビンブラスチン、ビンクリスチンまたはビノレルビン；
− 抗腫瘍ヌクレオシド誘導体、例えば、５−フルオロウラシル、ゲムシタビンまたはカペシタビン；
− ナイトロジェンマスタードまたはニトロソ尿素のようなアルキル化剤、例えば、シクロホスファミド、クロラムブシル、カルムスチンまたはロムスチン；
− 抗腫瘍アントラサイクリン誘導体、例えば、ダウノルビシン、ドキソルビシン、イダルビシンまたはミトキサントロン；
− ＨＥＲ２抗体、例えば、トラスツズマブ；
− エストロゲン受容体アンタゴニストまたは選択性エストロゲン受容体モジュレーター、例えば、タモキシフェン、トレミフェン、ドロロキシフェン、ファスロデックスまたはラドキシフェン；
− アロマターゼインヒビター、例えば、エクセメスタン、アナストロゾール、レトラゾールおよびボロゾール；
− レチノイド類、ビタミンＤおよびレチノイン酸代謝阻止作用物（ＲＡＭＢＡ）のよう
な分化性作用物、例えば、アキュタン；
− ＤＮＡメチルトランスフェラーゼインヒビター、例えば、アザシチジン；
− キナーゼ阻害剤、例えば、フラボペリドール、イマチニブメシレートまたはゲフィチニブ；
− ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター；
− 他のＨＤＡＣインヒビター；
− ユビキチン−プロテアソーム経路のインヒビター、例えば、Ｖｅｌｃａｄｅ；あるいは
− Ｙｏｎｄｅｌｉｓ；
である。

用語「白金配位化合物」は、イオンの形態で白金を提供する、すべての腫瘍細胞増殖抑制性白金配位化合物を指すように本明細書では使用される。

用語「タキサン化合物」は、タキサン環系を有し、そしてセイヨウイチイ（Ｔａｘｕｓ）樹のある種からの抽出物に関連するかまたはそれから得られる化合物の種類を指す。

用語「トポイソメラーゼインヒビター」は、真核生物においてＤＮＡトポロジーを変えることができる酵素を示すために使用される。それらは、重要な細胞機能および細胞増殖のためには決定的である。真核生物においては２種類のトポイソメラーゼ、すなわちＩ型およびＩＩ型が存在する。トポイソメラーゼＩは、約１００，０００分子量の単量体酵素である。この酵素はＤＮＡに結合し、そして一過性の一本鎖切断を導入し、二重らせんをほどき（またはそれをほどかせ）、続いて、切断を再閉鎖した後ＤＮＡ鎖から解離する。トポイソメラーゼＩＩは、ＤＮＡ鎖切断の導入または遊離基の形成を伴う類似の作用機構を有する。

用語「カンプトテシン化合物」は、中国の樹、カンプトテシン・アクミナータ（Ｃａｍｐｔｏｔｈｅｃｉｎ ａｃｕｍｉｎａｔａ）およびインド樹ノタポディテス・フォエチダ（Ｎｏｔｈａｐｏｄｙｔｅｓ ｆｏｅｔｉｄａ）から得られる水不溶性アルカロイドである親のカンプトテシン化合物に関連するか、またはそれから誘導される化合物を示すために使用される。

用語「ポドフィロトキシン化合物」は、マンダラケ植物から抽出される親のポドフィロトキシンに関連するか、またはそれから誘導される化合物を示すために使用される。

用語「抗腫瘍ビンカアルカロイド」は、ツルニチニチソウ植物（ビンカ・ロセア（Ｖｉｎｃａ ｒｏｓｅａ））の抽出物に関連するか、またはそれから誘導される化合物を示すために使用される。

用語「アルキル化剤」は、それらが、生理学的条件下で、ＤＮＡのような生物学的に活性のある高分子に対してアルキル基を賦与する能力を有する共通の特徴をもつ種々の群の化学製品を包含する。ナイトロジェンマスタードおよびニトロソ尿素のようなより重要な作用物の大多数に関しては、活性なアルキル化部分は、複合分解反応（あるものは酵素的である）の後にインビボで生成される。アルキル化剤のもっとも重要な薬理学的作用は、特定のＤＮＡ合成および細胞***において細胞増殖に関する基本的なメカニズムを乱す作用である。急速に増殖中の組織におけるＤＮＡの機能と完全性を妨害するアルキル化剤の能力は、それらの治療学的応用および多くのそれらの毒性についての基礎を提供する。

用語「抗腫瘍アントラサイクリン誘導体」は、グリコシド結合によって結合された通常にはない糖、ダウノサミンとともにテトラサイクリン環構造を有することを特徴とする、
真菌、ストレプトミセス・ペウチカス変種カエシウス（Ｓｔｒｅｐ．ｐｅｕｔｉｃｕｓ ｖａｒ．ｃａｅｓｉｕｓ）から得られる抗生物質を含む。

原発性乳がんにおけるヒト表皮増殖因子受容体２タンパク質（ＨＥＲ２）の増幅は、ある種の患者に関する乏しい臨床予後と相関することが示された。トラスツズマブは、高度に精製された組み換えＤＮＡ−誘導のヒト化モノクローナルＩｇＧ１κ抗体であり、これはＨＥＲ２受容体の細胞外ドメインに対して高親和力と特異性により結合する。

多くの乳がんはエストロゲン受容体を有し、そしてこれらの腫瘍の成長はエストロゲンによって刺激することができる。用語「エストロゲン受容体アンタゴニスト」および「選択性エストロゲン受容体モジュレーター」は、エストロゲン受容体（ＥＲ）に結合するエストラジオールの競合的インヒビターを示すために使用される。選択性エストロゲン受容体モジュレーターは、ＥＲに結合した場合、受容体の３次元型の変化を誘導し、ＤＮＡにおけるエストロゲン応答性要素（ＥＲＥ）へのその結合を調節する。

閉経期後の女性では、循環エストロゲンの主な起源は、末梢組織におけるアロマターゼ酵素によって、副腎および卵巣アンドロゲン（アンドロステンジオンおよびテストステロン）のエストロゲン（エストロンおよびエストラジオール）への変換に由来する。アロマターゼの阻害または不活性化によるエストロゲン奪取は、ホルモン依存性乳がんを有する若干の閉経期後の患者に対する有効かつ選択的な処置である。

用語「抗エストロゲン作用物」は、エストロゲン受容体アンタゴニストおよび選択性エストロゲン受容体モジュレーターのみならず、また先に議論されたようなアロマターゼインヒビターも含むように本明細書では使用される。

用語「分化性作用物」は、種々の方法で、細胞増殖を抑制し、そして分化を誘導できる化合物を包含する。ビタミンＤおよびレチノイド類は、広い種類の正常および悪性細胞型の増殖および分化の調節において大きな役割を演じることが知られている。レチノイン酸代謝阻止作用物（ＲＡＭＢＡ）は、レチノイン酸のチトクロームＰ４５０媒介の異化を抑制することによって内因性レチノイン酸のレベルを増加させる。

ＤＮＡメチル化の変化は、ヒト新生物におけるもっとも共通の異常性の中にはいる。選択された遺伝子のプロモーター内の高メチル化は、通常、関与する遺伝子の不活性化に関連している。用語「ＤＮＡメチルトランスフェラーゼインヒビター」は、ＤＮＡメチルトランスフェラーゼの薬理学的阻害および腫瘍サプレッサー遺伝子発現の再活性化をとおして作用する化合物を示すために使用される。

用語「キナーゼインヒビター」は、細胞周期の進行およびプログラム化された細胞死（アポトーシス）に伴われるキナーゼの強力なインヒビターを含む。

用語「ファルネシルトランスフェラーゼインヒビター」は、Ｒａｓおよび他の細胞内タンパク質のファルネシル化を防ぐために設計された化合物を示すために使用される。それらは、悪性細胞の増殖および生残に及ぼす効果を有することが示された。

用語「他のＨＤＡＣインヒビター」は、限定されるものではないが：
− カルボン酸塩、例えば、酪酸塩、桂皮酸、４−フェニル酪酸塩またはバルプロ酸；
− ヒドロキサム酸、例えば、スベロイルアニリドヒドロキサム酸（ＳＡＨＡ）、ピペラジン含有ＳＡＨＡ類似体、ヒドロキサム酸ビアリール Ａ−１６１９０６およびそのカルボゾリルエーテル−、テトラヒドロピリジン−およびテトラロン−類似体、二環式アリール−Ｎ−ヒドロキシカルボキサミド、ピロキサミド、ＣＧ−１５２１、ＰＸＤ−１０１、
ヒドロキサム酸スルホンアミド、ＬＡＱ−８２４、ＬＢＨ−５８９、トリコスタチンＡ（ＴＳＡ）、オキサムフラチン、スクリプタイド関連三環式分子、ｍ−カルボキシ桂皮酸、ビスヒドロキサム酸（ＣＢＨＡ）、ＣＢＨＡ様ヒドロキサム酸、トラポキシン−ヒドロキサム酸類似体、Ｒ３０６４６５および関連ベンゾイル−およびヘテロアリール−ヒドロキサム酸、アミノスベレートおよびマロニルジアミド；
− 環状テトラペプチド、例えば、トラポキシン、アピジシン、デプシペプチド、スピルコスタチン−関連化合物、ＲｅｄＦＫ−２２８、スルフヒドリル含有環状テトラペプチド（ＳＣＯＰ）、ヒドロキサム酸含有環状テトラペプチド（ＣＨＡＰ）、ＴＡＮ−１７４ｓおよびアズムアミド；
− ベンズアミド、例えば、ＭＳ−２７５またはＣＩ−９９４、または
− デプデシン
を含む。

用語「ユビキチン−プロテアソーム経路のインヒビター」は、細胞周期調節タンパク質を含む、プロテアソームにおける細胞タンパク質の標的破壊を抑制する化合物を同定するために使用される。

がんの処置では、本発明による化合物は、放射と同時に前記患者に対して投与されてもよい。放射は具体的には今日普通に使用されている線形加速器か、または放射性ヌクレオチドによる、電離性放射および特にガンマ放射を意味する。放射性ヌクレオチドによる腫瘍の放射は外部でもまた内部であってもよい。

また、本発明は、抗がん作用物および本発明によるＨＤＡＣインヒビターの本発明による組み合わせ物に関する。

また、本発明は、例えば、腫瘍細胞の増殖を抑制するために医学治療において使用するための本発明による組み合わせ物に関する。

また、本発明は、腫瘍細胞の増殖を抑制するための本発明による組み合わせ物に関する。

また、本発明は、本発明による組み合わせ物の有効量を被験者に投与することを含む、ヒト被験者における腫瘍細胞の増殖を抑制する方法に関する。

さらに、本発明は、本発明による組み合わせ物の有効量を投与することによって、形質転換細胞を含む、細胞の異常増殖を抑制する方法を提供する。

他の医薬作用物およびＨＤＡＣインヒビターは、同時に（例えば、別個または単位の組成物において）、またはいずれの順序でも連続して投与されてもよい。後者の場合は、２種の化合物は、ある期間内に、そして確実に有利または相乗的な効果が達成されるのに十分である量および方法で投与されるであろう。投与の好適な方法および順序、ならびに組み合わせ物の各成分についてのそれぞれ投薬量および療法は、投与される特定の他の医薬作用物およびＨＤＡＣインヒビター、それらの投与経路、処置される特定の腫瘍および処置される特定の宿主によって異なるであろうことは理解できる。投与の最適な方法および順序ならびに投薬量および療法は、慣用の方法を使用し、そして本明細者において述べられた情報を考量して当業者によって容易に決定することができる。

白金配位化合物は、有利には、体表面の１平方メートル当たり１〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、５０〜４００ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてシスプラチンでは約７５ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてカルボプラチンでは約３００
ｍｇ／ｍ^２において投与される。

タキサン化合物は、有利には、体表面の１平方メートル当たり５０〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、７５〜２５０ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてパクリタキセルでは約１７５〜２５０ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてドセタキセルでは約７５〜１５０ｍｇ／ｍ^２において投与される。

カンプトテシン化合物は、有利には、体表面の１平方メートル当たり０．１〜４００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、１〜３００ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてイリノテカンでは約１００〜３５０ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてトポテカンでは約１〜２ｍｇ／ｍ^２において投与される。

抗腫瘍性ポドフィロトキシン誘導体は、有利には、体表面の１平方メートル当たり３０〜３００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、５０〜２５０ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてエトポシドでは約３５〜１００ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてテニポシドでは約５０〜２５０ｍｇ／ｍ^２において投与される。

抗腫瘍性ビンカアルカロイドは、有利には、体表面の１平方メートル当たり２〜３０ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）の用量において、具体的には、処置の１工程についてビンブラスチンでは約３〜１２ｍｇ／ｍ^２の用量で、ビンクリスチンでは約１〜２ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてビンレルビンでは約１０〜３０ｍｇ／ｍ^２の用量で投与される。

抗腫瘍性ヌクレオシド誘導体は、有利には、体表面の１平方メートル当たり２００〜２５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、７００〜１５００ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程について５−ＦＵでは２００〜５００ｍｇ／ｍ^２の用量で、ゲムシタビンでは約８００〜１２００ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてカペシタビンでは約１０００〜２５００ｍｇ／ｍ^２において投与される。

ナイトロジェンマスタードもしくはニトロソ尿素のようなアルキル化剤は、有利には、体表面の１平方メートル当たり１００〜５００ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、１２０〜２００ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてシクロホスファミドでは約１００〜５００ｍｇ／ｍ^２の用量で、クロラムブシルでは約０．１〜０．２ｍｇ／ｋｇの用量で、カルムスチンでは約１５０〜２００ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてロムスチンでは約１００〜１５０ｍｇ／ｍ^２の用量で投与される。

抗腫瘍性アントラサイクリン誘導体は、有利には、体表面の１平方メートル当たり１０〜７５ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、例えば、１５〜６０ｍｇ／ｍ^２の用量において、具体的には、処置の１工程についてドキソルビシンでは約４０〜７５ｍｇ／ｍ^２の用量で、ダウノルビシンでは約２５〜４５ｍｇ／ｍ^２の用量で、そしてイダルビシンでは約１０〜１５ｍｇ／ｍ^２の用量で投与される。

トラストズマブは、有利には、体表面の１平方メートル当たり１〜５ｍｇ（ｍｇ／ｍ^２）、具体的には、処置の１工程について２〜４ｍｇ／ｍ^２の用量で投与される。

抗エストロゲン作用物は、有利には、特定の作用物および処置される症状に応じて１日に約１〜１００ｍｇの用量において投与される。タモキシフェンは、有利には、治療効果を達成し、かつ維持するのに十分な時間、治療を継続しながら、１日２回５〜５０ｍｇ、好ましくは１０〜２０ｍｇの用量において経口投与される。トレミフェンは、有利には、治療効果を達成し、かつ維持するのに十分な時間、治療を継続しながら、１日１回約６０ｍｇの用量において経口投与される。アナストロゾールは、有利には、１日１回約１ｍｇ
の用量で経口投与される。ドロロキシフェンは、有利には、１日１回約２０〜１００ｍｇの用量で経口投与される。ラロキシフェンは、有利には、１日１回約６０ｍｇの用量で経口投与される。エクセメスタンは、有利には、１日１回約２５ｍｇの用量で経口投与される。

これらの用量は、処置の１工程について、例えば、１回、２回またはそれ以上投与されてもよく、これらは例えば、７、１４、２１または２８日毎に繰り返されてもよい。

それらの有用な薬理学的性質にかんがみて、本発明による組み合わせ物の成分、すなわち、他の医薬作用物およびＨＤＡＣインヒビターは、投与目的のために種々の製薬学的形態物に調合されてもよい。この成分は個々の製薬学的組成物において別々に、または両成分を含有する単位の製薬学的組成物において調合されてもよい。

したがって、本発明はまた、１種以上の製薬学的担体と一緒に他の医薬作用物およびＨＤＡＣインヒビターを含んでなる製薬学的組成物に関する。

また、本発明は、１種以上の製薬学的担体と一緒に抗がん作用物および本発明によるＨＤＡＣインヒビターを含んでなる製薬学的組成物の形態における本発明による組み合わせ物に関する。

さらに、本発明は、腫瘍細胞の増殖を抑制するための製薬学的組成物の製造における本発明による組み合わせ物の使用に関する。

さらに、本発明は、がんを罹患している患者の処置において、同時、別個または連続の使用のための、第１の有効成分として本発明によるＨＤＡＣインヒビターおよび第２の有効成分として抗がん作用物を含有する生産物に関する。

実験の部
次に示す実施例は具体的に説明するために提供される。これ以降、「ＤＣＭ」はジクロロメタンとして定義され、「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドとして定義され、「ＥＤＣ」はＮ’−（エチルカーボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン・１塩酸塩として定義され、「ＨＯＢｔ」は１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾールとして定義され、「ＭｅＯＨ」はメタノールとして定義され、「ＴＦＡ」はトリフルオロ酢酸として定義され、そして「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランとして定義される。

Ａ．中間化合物の製造
例Ａ１
ａ）中間体１の製造

ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中２−（６−アミノメチル−３−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキシ−３−イル）−ピリミジン−５−カルボン酸エチルエステル（０．１１ｇ，０．００
０４２ｍｏｌ）および１−メチル−１Ｈ−インドール−３−カルボキシアルデヒド（０．１ｇ，０．０００６３ｍｏｌ）の混合液を撹拌し、そして４８時間還流し、次いで１０℃まで冷却した。ＤＣＭ（５ｍｌ）を添加し、そしてテトラヒドロホウ酸ナトリウム（０．０２５ｇ，０．０００６７ｍｏｌ）を少しずつ添加した。混合液を室温で４時間撹拌し、水中に注入し、そしてＤＣＭにより抽出した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．１７ｇ）を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ）（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．５）により精製した。純画分を回収し、そして溶媒を蒸発させて、中間体１の０．０３ｇ（１８％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３）：０．７５−０．９（ｍ，１Ｈ）；１．３（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ）；１．５（ｓ，２Ｈ）；２．６（ｄ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）；３．４５−３．６（ｍ，２Ｈ）；３．７（ｓ，３Ｈ）；３．８−４．０（ｍ，４Ｈ）；４．３（ｑ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，２Ｈ）；６．９５（ｓ，１Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；７．１５−７．３（ｍ，３Ｈ）；７．５（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ）；８．７（ｓ，２Ｈ）．
ｂ）中間体２の製造

ＴＨＦ（１ｍｌ）およびＭｅＯＨ（１７５μｌ）中、中間体１（０．０３ｇ，０．０００７４ｍｏｌ）および水酸化ナトリウム１Ｍ（０．５９ｍｌ，０．０００６ｍｏｌ）の混合液を、室温で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させ、そして得られる水溶液を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ：３〜４まで酸性にし、残渣を蒸発乾固させて、中間体２の０．０２８ｇを得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：０．９（ｍ，１Ｈ）；１．８（ｓ，２Ｈ）；２．９（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．５５（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．８（ｓ，３Ｈ）；３．８５（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ）；４．２５（ｓ，２Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．４５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．５（ｓ，１Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；
８．７（ｓ，２Ｈ）．
ｃ）中間体３の製造

ＥＤＣ（０．０５５１ｇ，０．０００３５５ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（０．０４７９ｇ，０．０００３５５ｍｏｌ）、次いでトリエチルアミン（０．０６３ｍｌ，０．０００４４ｍｏｌ）およびＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（０．０４１６ｇ，０．０００３５５ｍｏｌ）を、室温、Ｎ_２ガス流動下で、ＤＣＭ（０．８
ｍｌ）およびＴＨＦ（４ｍｌ）中中間体２（０．０２８ｇ，０．００００７４ｍｏｌ）の混合液に添加した。室温で７日間撹拌後、同量のＥＤＣ、ＨＯＢｔ、トリエチルアミンおよびＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミンを再び添加し、混合液を室温でさらに７日間撹拌した。この溶液を氷水中に注入し、そしてＤＣＭにより抽出した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．１５５ｇ）を、シリカゲル（３．５μｍ）でのカラムクロマトグラフィー（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９８／２／０．２）により精製した。純画分を回収し、そして溶媒を蒸発乾固して、中間体３の０．０１６ｇ（４６％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：０．７−０．８５（ｍ，１Ｈ）；１．５−１．７５（ｍ，８Ｈ）；３．３５（ｓ，２Ｈ）；３．５−３．５５（ｍ，３Ｈ）；３．７５（ｓ，３Ｈ）；３．８（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．８５（ｓ，２Ｈ）；３．９５−４．０５（ｍ，１Ｈ）；４．９−４．９５（ｍ，１Ｈ）；７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｓ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．６５（ｓ，２Ｈ）；１１．３（ｂｒ ｓ，１Ｈ）．

例Ａ２
ａ）中間体４の製造

Ｎ_２下、室温で、２−クロロ−ピリミジン−５−カルボン酸メチルエステル（４．７５ｇ，０．０２８ｍｏｌ）を、アセトニトリル（８０ｍｌ）中３−アザ−ビシクロ［３．１．０］ヘキシ−６−イルアミン（３ｇ，０．０３０６ｍｏｌ）および炭酸カリウム（６．３２７ｇ，０．０４６ｍｏｌ）の溶液に少しずつ添加した。この溶液を室温で３時間撹拌した。溶液を冷水中に注入し、生成物をＤＣＭにより抽出し、有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。残渣（３ｇ）を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ）（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９７／３／０．５）により精製した。純画分を回収し、そして溶媒を蒸発乾固した。残渣（１．６０ｇ）をジエチルエーテルにより取り上げた。沈殿物を濾過し、そして乾燥して、中間体４、融点：１４９℃の５５ｇ（２２％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）１．５５（ｓ，２Ｈ）；１．９（ｂｒ ｓ，２Ｈ）；１．９５（ｓ，１Ｈ）；３．５−３．６（ｍ，２Ｈ）；３．７（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ）；３．８（ｓ，３Ｈ）；８．７５（ｓ，２Ｈ）．
ｂ）中間体５の製造

Ｄ（５０ｍｌ）中中間体４（１．５ｇ，０．００６４ｍｏｌ）および１−メチルインドール−３−カルボキシアルデヒド（１．５３ｇ，０．００９６ｍｏｌ）の溶液を２４時間加熱した。この溶液を５℃において冷却し、ＤＣＭ（５０ｍｌ）およびテトラヒドロホウ酸ナトリウム（０．３９ｇ，０．０１０２５ｍｏｌ）を添加した。溶液を室温で４時間撹拌した。この溶液を冷水中に注入し、そしてＤＣＭにより抽出した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥し、濾過し、そして蒸発乾固した。残渣（５．２ｇ）を、シリカゲルでのカラムクロマトグラフィー（１５〜４０μｍ）（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９７／３／０．１）により精製した。純画分を回収し、そして溶媒を蒸発乾固した。残渣（１．７３ｇ，７２％）をジエチルエーテルにより取り上げた。沈殿物を濾過し、そして乾燥して、中間体５、融点：１７９℃の１．６ｇ（６６％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）１．７（ｓ，２Ｈ）；１．８（ｓ，１Ｈ）；；３．５−３．６（ｍ，２Ｈ）；３．７−３．７５（ｍ，５Ｈ）；３．８（ｓ，３Ｈ）；３．８５（ｓ，２Ｈ）；７．０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｓ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．７５（ｓ，２Ｈ）．
ｃ）中間体６の製造

ＭｅＯＨ（１．９ｍｌ）およびＴＨＦ（９．８ｍｌ）中、中間体５（１．６ｇ，０．００４２４ｍｏｌ）および水酸化ナトリウム１Ｍ（３３．９ｍｌ，０．０３４ｍｏｌ）の混合液を、室温で２４時間撹拌した。溶媒を真空下で除去し、そして得られる水溶液をｐＨ：３〜４まで酸性にした。沈殿物を濾過し、乾燥させて、中間体６の１．４７ｇ（９３％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：１．８（ｂｒ ｓ，２Ｈ）；２（ｂｒ
ｓ，１Ｈ）；３．５−３．６（ｍ，２Ｈ）；３．７−３．８（ｍ，５Ｈ）；４（ｂｒ ｓ，２Ｈ）；７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１５（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．３（ｓ，１Ｈ）；７．４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．６５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．７（ｓ，２Ｈ）．
ｄ）中間体７の製造

ＥＤＣ（１．２ｇ，０．００７７ｍｏｌ）、ＨＯＢｔ（１．０４４ｇ，０．００７７ｍｏｌ）、次いでトリエチルアミン（１．３６ｍｌ，０．００９７ｍｏｌ）およびＯ−（テトラヒドロ−２Ｈ−ピラン−２−イル）−ヒドロキシルアミン（０．０４２ｇ，０．００９７ｍｏｌ）を、室温で、Ｎ_２ガス流動下、ＤＣＭ（６ｍｌ）およびＴＨＦ（３０ｍｌ）中中間体６（１．１７ｇ，０．００３２２ｍｏｌ）の混合液に添加した。室温で６日間撹拌後、この溶液を氷水中に注入し、そしてＤＣＭにより抽出した。有機層を分離し、乾燥（ＭｇＳＯ_４）し、濾過し、そして溶媒を蒸発させた。残渣（０．１７ｇ）を、シリカゲル（１５〜４０μｍ）でのカラムクロマトグラフィー（溶出液：ＤＣＭ／ＭｅＯＨ／ＮＨ_４ＯＨ ９５／５／０．５）により精製した。純画分を回収し、そして溶媒を蒸発乾固して、中間体７の０．７ｇ（４７％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：１．５−１．７３（ｍ，８Ｈ）；１．８（ｓ，１Ｈ）；３．５−３．５５（ｍ，３Ｈ）；３．６５−３．７５（ｍ，５Ｈ）；３．８５（ｓ，２Ｈ）；３．９５−４．０５（ｍ，１Ｈ）；４．９−４．９５（ｍ，１Ｈ）；７．０（ｔ，Ｊ＝７，６Ｈｚ，１Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｓ，１Ｈ）；７．３５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．６（ｓ，２Ｈ）；１１．４（ｂｒ ｓ，１Ｈ）

Ｂ．最終化合物の製造
例Ｂ１
化合物１の製造

ＴＦＡ（７８μｌ）を、ＭｅＯＨ（１．６ｍｌ）中中間体３（１６ｍｇ，０．００００３４ｍｏｌ）の混合液に添加した。混合液を室温で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発させた。その残渣をジエチルエーテルから結晶化した。沈殿物を濾過し、そして乾固して、トリフルオロ酢酸塩としての化合物１、融点：１５０℃の９ｍｇ（５２％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：０．８５−０．９５（ｍ，１Ｈ）；１．８（ｓ，２Ｈ）；２．９５−３．０（ｍ，２Ｈ）；３．５−３．５５（ｍ，２Ｈ）；３．８（ｓ，３Ｈ）；３．８５（ｄ，Ｊ＝１１．６Ｈｚ，２Ｈ）；４．３（ｓ，２Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．４５−７．５（ｍ，２Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．５５−８．７（ｍ，３Ｈ）；９．０（ｓ，１Ｈ）；１１．１（ｓ，１Ｈ）．

例Ｂ２
化合物２の製造

ＴＦＡ（０．５ｍｌ）を、ＭｅＯＨ（１０ｍｌ）中中間体７（０．１ｇ，０．０００２２ｍｏｌ）の混合液に室温で添加した。混合液を室温で２４時間撹拌した。溶媒を蒸発乾固させた。その残渣をＣＨ_３ＣＮ／ジエチルエーテルから結晶化した。沈殿物を濾過し、そして乾固して、トリフルオロ酢酸塩としての化合物２、融点：１５７℃の９０ｍｇ（８７％）を得た。
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ_６−ＤＭＳＯ）：２．１５（ｓ，２Ｈ）；２．５５（ｓ，１Ｈ）；３．５−３．５５（ｍ，２Ｈ）；３３．８−３．８５（ｍ，５Ｈ）；４．４５（ｓ，２Ｈ）；７．１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．２（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；７．５−７．５５（ｍ，２Ｈ）；７．７５（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ）；８．６５（ｓ，２Ｈ）；９．１−９．２（ｍ，３Ｈ）；１１．１（ｓ，１Ｈ）．

表Ｆ−１は、上記実施例の１つにしたがって製造された化合物を列挙する。次の略語がこの表において使用された：・Ｃ_２ＨＦ_３Ｏ_２はトリフルオロ酢酸塩を表す。

Ｃ．薬理学的実施例
ヒストンデアセチラーゼの阻害に関するインビトロ・アッセイ（参照、例Ｃ．１）は、式（Ｉ）の化合物を用いて得られるＨＤＡＣ酵素活性の阻害を測定する。

式（Ｉ）に化合物の細胞活性は、細胞の毒性または生残に関して比色アッセイを用いてＨＣＴ１１６腫瘍細胞において決定された（Ｍｏｓｍａｎｎ Ｔｉｍ，Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｅｔｈｏｄｓ ６５：５５−６３，１９８３）（参照、例Ｃ．２）。

例Ｃ．１．：ヒストンデアセチラーゼの阻害に関するインビトロ・アッセイ：
例Ｃ．１．ａ．：［ ^３ Ｈ］−標識基質を用いるインビトロ・アッセイ：
ＨｅＬａ核抽出物（供給者：Ｂｉｏｍｏｌ）が７５μＭの基質を用いて６０μｇ／ｍｌにおいてインキュベートされた。ＨＤＡＣ活性測定するための基質として、合成ペプチド、すなわちヒストンＨ４のアミノ酸１４−２１が使用された。基質は、６−アミノヘキサン酸・スペーサーをもつＮＨ_２−末端部分においてビオチン化され、そしてアミド基によってＣＯＯＨ−末端部分において保護され、かつリジン１６において特異的に［^３Ｈ］アセチル化されている。基質、ビオチン−（６−アミノヘキサン酸）Ｇｌｙ−Ａｌａ−（［^３Ｈ］−アセチル−Ｌｙｓ−Ａｒｇ−Ｈｉｓ−Ａｒｇ−Ｌｙｓ−Ｖａｌ−ＮＨ_２）は、２５ｍＭ Ｈｅｐｅｓ、１Ｍスクロース、０．１ｍｇ／ｍｌ ＢＳＡおよび０．０１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含有するバッファー、ｐＨ７．４中に添加された。３０分後に、脱
アセチル反応はＨＣＬおよび酢酸（それぞれ、最終濃度０．０３５ｍＭおよび３．８ｍＭ）の添加によって終了された。反応を停止後、遊離^３Ｈ−酢酸を酢酸エチルにより抽出した。混合し、遠心した後、上（有機）相の一定分量中の放射能をβ−カウンターにおいてカウントした。
各実験では、対照（ＨｅＬａ核抽出物および化合物なしのＤＭＳＯを含有）、ブランクインキュベーション（ＤＭＳＯを含有するがＨｅＬａ核抽出物または化合物を含まない）および試料（ＤＭＳＯ中に溶解された化合物およびＨｅＬａ核抽出物を含有）が並行して実施された。第１例では、化合物が１０^−５Ｍの濃度で試験された。化合物が１０^−５Ｍで活性を示した場合に濃度−反応曲線が作成され、この場合、化合物が１０^−５Ｍと１０^−１２Ｍとの間の濃度で試験された。各試験では、ブランク値を対照および試料の両値から差し引いた。対照サンプルは１００％の基質脱アセチルを表した。各サンプルでは、放射能は対照の平均値のパーセンテージとして表示された。適当であれば、ＩＣ_５０値（代謝物の量を対照の５０％まで低下させるのに必要とされる薬物の濃度）が級別データのためにプロビット解析を用いて算出された。ここでは、試験化合物の効果は、ｐＩＣ_５０（ＩＣ_５０値の負のｌｏｇ値）として表された（参照、表Ｆ−３）。

例Ｃ．１．ｂ．：蛍光−標識基質を用いるインビトロ・アッセイ：
ＢｉｏｍｏｌのＨＤＡＣ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ Ａｓｓａｙ／Ｄｒｕｇ Ｄｉｓｃｏｖｅｒｙ Ｋｉｔ（ｃａｔ．Ｎｏ：ＡＫ−５００−０００１）を使用した。ＨＤＡＣ Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ＡｓｓａｙはＦｌｕｏｒ ｄｅ Ｌｙｓ（Ｆｌｕｏｒｏｇｅｎｉｃ Ｈｉｓｔｏｎｅ ｄｅＡｃｅｔｙｌａｓｅ
Ｌｙｓｙｌ）基質およびデベロッパー組み合わせ物に基づく。Ｆｌｕｏｒ ｄｅ Ｌｙｓ基質は、アセチル化されたリジン側鎖を含む。基質の脱アセチルは基質を感作し、その結果、第２の段階で、Ｆｌｕｏｒ ｄｅ Ｌｙｓ デベロッパーによる処理が蛍光団を生成する。
ＨｅＬａ核抽出物（供給者：Ｂｉｏｍｏｌ）が７５μＭの基質を含んで６０μｇ／ｍｌにおいてインキュベートされた。Ｆｌｕｏｒ ｄｅ Ｌｙｓ基質は、２５ｍＭ Ｔｒｉｓ、１３７ｍＭ ＮａＣｌ、２．７ｍＭ ＫＣｌおよび１ｍＭ ＭｇＣｌ_２を含有するバッファーｐＨ７．４中に添加された。３０分後、デベロッパー１容量が添加された。蛍光団は３５５ｎｍの光で励起され、そして発光（４５０ｎｍ）が蛍光測定プレートリーダーにおいて検出された。
各実験では、対照（ＨｅＬａ核抽出物およびバッファーを含有）、ブランクインキュベーション（バッファーを含有するがＨｅＬａ核抽出物を含まない）および試料（ＤＭＳＯ中に溶解され、さらにバッファー中に希釈された化合物およびＨｅＬａ核抽出物を含有）が並行して実施された。第１例では、化合物が１０^−５Ｍの濃度で試験された。化合物が１０^−５Ｍで活性を示した場合に濃度−反応曲線が作成され、この場合、化合物は１０^−５Ｍ〜１０^−９Ｍの濃度で試験された。全サンプルを４回試験した。各試験では、ブランク値を対照および試料の両値から差し引いた。対照サンプルは１００％の基質脱アセチルを表した。各サンプルでは、蛍光は対照の平均値のパーセンテージとして表示された。適当であれば、ＩＣ_５０値（代謝物の量を対照の５０％まで低下させるのに必要とされる薬物の濃度）が格付けデータのためにプロビット解析を用いて算出された。ここでは、試験化合物の効果は、ｐＩＣ_５０（ＩＣ_５０値の負のｌｏｇ値）として表された（参照、表Ｆ−２）。

例Ｃ．１．ｃ．：ヒストンデアセチラーゼの阻害に関するインビトロ・アッセイ：
ＨｅＬａ核抽出物（ＨｅＬａ核の高塩抽出によって調製、Ｊ．Ｄ．Ｄｉｇｎａｍら、Ｓ．Ｍ．Ａｂｍａｙｒら）が、０．１Ｍ ＫＣｌ、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ／ＮａＯＨ，ｐＨ７．９、２０％（ｖ／ｖ）グリセロール、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、０．５ｍＭ ＤＴＴ，０．５ｍＭ ＰＭＳＦ中、酵素の９ｍｇ／ｍｌとともにインキュベートされた。４５分後、３７℃において脱アセチル反応は終了された。デベロッパー反応（また３７℃において
）は、１時間、時間依存方式で読み取られた。各実験では、対照（ＨｅＬａ核抽出物および化合物なしのＤＭＳＯを含有）および試料（ＤＭＳＯ中に溶解された化合物およびＨｅＬａ核抽出物を含有）が並行して実施された。化合物は１０^−５Ｍ〜１０^−１２Ｍの濃度で試験された。対照サンプルは１００％の基質脱アセチルを表した。各サンプルでは、活性は対照の平均値のパーセンテージとして表示された。適当なＩＣ_５０値（代謝物の量を対照の５０％まで低下させるのに必要とされる薬物の濃度）がＰｒｉｓｍプログラムを用いて算出された。ここでは、試験化合物の効果は、ｐＩＣ_５０（ＩＣ_５０値の負のｌｏｇ値）として表された（参照、表Ｆ−２）。作業はＲｅａｃｔｉｏｎ Ｂｉｏｌｏｇｙ Ｃｏｒｐ．（Ｍａｌｖｅｒｍ，ＰＡ，ＵＳＡ）によって実施された。

参考文献：
１：Ｊ．Ｄ．Ｄｉｇｎａｍ ｅｔ ａｌ．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９８３，１１，１４７５
２：Ｓ．Ｍ．Ａｂｍａｙｒ ｅｔ ａｌ．Ｇｅｎｅｓ Ｄｅｖｅｌ．１９８８，２，５４２

例Ｃ．２：ＨＣＴ１１６細胞における抗増殖活性の決定
ＡＴＣＣから得られたヒト結腸がん腫ＨＣＴ１１６細胞が、２ｍＭ Ｌ−グルタミン、５０μｇ／ｍｌのゲンタマイシンおよび１０％の熱失活胎児ウシ血清を補足されたＭｃ Ｃｏｙ’ｓ ５Ａ培養液において培養された。

Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅアッセイにおいて使用される試薬
ＲｅｓａｚｕｒｉｎはＡｌｄｒｉｃｈ（Ｐｒｏｄ．Ｎｏ．１９９３０３）から購入した。フェロシアン化カリウム、フェリシアン化カリウム、ＫＨ_２ＰＯ_４およびＫ_２ＨＰＯ_４は、Ｓｉｇｍａ（それぞれ、Ｐｒｏｄ．Ｎｏ．Ｐ９３８７，Ｐ８１３１，Ｐ５６５５およびＰ８２８１）から購入した。
リン酸カリウムバッファー０．１Ｍ（ＰＰＢ）は次のとおり作成された：２．７２ｇのＫＨ_２ＰＯ_４および１３．８６ｇのＫ_２ＨＰＯ_４が、５００ｍｌのｍｉｌｌｉ−Ｑ Ｈ_２Ｏ中に溶解され、ｐＨがｐＨ７．４に調節され、そして容量はｍｉｌｌｉ−Ｑ Ｈ_２Ｏにより１リットルにもたらされた；このバッファーはフィルター滅菌され、そして室温で保存された。ｒｅｓａｚｕｒｉｎ保存液（ＰＰＢ−Ａ）は、１５ｍｌのＰＢＳ中に４５ｍｇのｒｅｓａｚｕｒｉｎを溶解することによって新たに調製された。３０ｍＭフェリシアン化カリウム（ＰＰＢ−Ｂ）は、１００ｍｌのＰＰＢ中に０．９８７ｇのフェリシアン化カリウムを溶解することによって調製された。３０ｍＭフェロシアン化カリウム（ＰＰＢ−Ｃ）は、１００ｍｌのＰＰＢ中に１．２６６ｇのフェロシアン化カリウムを溶解することによって調製された。

ＰＰＢ−Ａ、ＰＰＢ−ＢおよびＰＰＢ−Ｃの混合液は、それぞれの溶液の等量を混合することによって調製された。ｒｅｓａｚｕｒｉｎ作業溶液（ここでは、「Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ」液と呼ばれる）は、ＰＰＢにおいて該混合液を２０ｘ（ｖｏｌ／ｖｏｌ）希釈し、そしてフィルター滅菌することによって調製された；Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ液は４℃で最大２週間保存できるであろう。

Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅアッセイの手順
３８４穴プレートにおける実験では、細胞は、透明な底をもつ黒色のＦａｌｃｏｎ３８４穴培養プレート（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｍｅｒｅｌｂｅｋｅ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）において、４５μｌ培養基中に４．５ｘ１０^３細胞／ｍｌの濃度で接種された。細胞を２４時間プラスチックに接着させた。試験される化合物は、予備希釈（培養液中１／５０）され、そして５μｌの予備希釈化合物がこのウェルに添加された。４日の培養後、Ａｌａｍａｒ Ｂｌｕｅ液の１０μｌが各ウェルに添加され、そして細胞は３７℃で
さらに４時間（ＨＣＴ１１６）または２４時間（ＰＣ−３）インキュベートされた。蛍光強度は、Ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｃｅ ｐｌａｔｅ ｒｅａｄｅｒ（Ｆｌｕｏｒｓｋａｎ，Ｌａｂｓｙｓｔｅｍ，５４０ｎｍ励起および５９０ｎｍ発光）において各ウェルについて測定された。
抗増殖活性は、処理ｖｓ対照（未処理細胞）条件下での残存する生存細胞のパーセンテージとして計算された。実験内で、各実験条件についての結果は３並行ウェルの平均値である。適当であれば、実験が反復されて完全な濃度−応答曲線が確立された。適当であれば、ＩＣ５０−値（対照の５０％まで細胞増殖を低下させるのに必要とされる薬物の濃度）が、格付けデータのためにプロビット解析を用いて算定された（Ｆｉｎｎｅｙ，Ｄ．Ｊ．，Ｐｒｏｂｉｔ Ａｎａｌｙｓｅｓ，２ｎｄ Ｅｄ．Ｃｈａｐｔｅｒ １０，Ｇｒａｄｅｄ Ｒｅｓｐｏｎｓｅｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ １９６２）。ここでは、試験化合物の効果は、ｐＩＣ５０（ＩＣ５０−値の負のｌｏｇ値）として表される（参照、表２）。

表Ｆ−２：は、例Ｃ．１．およびＣ．２．にしたがって試験された化合物の結果を列挙している。

Ｄ．組成物実施例：剤皮を施した錠剤
錠剤コアの製造
式（Ｉ）の化合物 １００ｇ、ラクトース ５７０ｇおよび澱粉 ２００ｇの混合物を十分に混合し、その後、水約２００ｍｌ中ドデシル硫酸ナトリウム ５ｇおよびポリビニル−ピロリドン １０ｇの溶液により湿潤化した。湿潤粉末混合物を篩にかけ、乾燥し、そして再び篩にかけた。次いで、微結晶セルロース １００ｇおよび水素化植物油 １５ｇを添加した。全体を良く混合し、錠剤に圧縮して、１０，０００個の錠剤を生成したが、この各々は式（Ｉ）の化合物の１０ｍｇを含む。

コーティング
変性エタノールの７５ｍｌ中メチルセルロース１０ｇの溶液に、ジクロロメタン１５０ｍｌ中エチルセルロースの５ｇ溶液を添加した。次いで、ジクロロメタン ７５ｍｌおよび１，２，３−プロパントリオール２．５ｍｌを添加した。ポリエチレングリコールの１０ｇが融解され、そしてジクロロメタン７５ｍｌ中に溶解された。後者の溶液を前者に添加し、次いで、オクタデカン酸マグネシウム２．５ｇ、ポリビニル−ピロリドン ５ｇおよび濃厚色素懸濁液３０ｍｌを添加し、そして全体を均質にした。錠剤コアは、このようにして得られた混合液を用いてコーティング装置において剤皮を施された。

Claims (12)

1. 式（Ｉ）
   

   

   ［式中、
   各ｎは、値０，１または２をもつ整数であり、そしてｎが０である場合は直接結合が意図され；
   各ｍは、値１または２をもつ整数であり；
   Ｘは、独立してＮまたはＣＨであり；
   Ａは、ヒドロキシまたは式：
   

   

   の基であり；
   Ｒ^１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルスルホニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノスルホニルであり；
   Ｒ^２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、シアノ、Ｃ_２−６アルケニル、ポリハロＣ_１−６アルキル、ニトロ、フェニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ_１−６アルキルオキシ、またはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノであり；
   Ｒ^３は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、またはＣ_１−６アルキルオキシであるか；あるいは
   Ｒ^２およびＲ^３が、隣接する炭素原子上に存在する場合は、それらは二価の基：
   −Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ− （ａ−２）
   を形成してもよく；
   Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキルメチル、フェニルＣ_１−６アルキルであるか；あるいは
   Ｒ^２がインドリルの７位に存在する場合は、Ｒ^２およびＲ^４は、一緒になって二価の基：
   −（ＣＨ_２）_２− （ａ−３）または
   −（ＣＨ_２）_３− （ａ−４）
   を形成してもよく；
   Ｒ^５は、水素またはチオフェニルである］
   の化合物、そのＮ−オキシド形態物、製薬学的に許容できる付加塩および立体化学的異性形態物。
2. 各ｎは値０または１をもつ整数であり；各ｍは値１をもつ整数であり；Ｘは独立してＮであり；Ａはヒドロキシであり；Ｒ^１は水素であり；Ｒ^２は、水素、ハロまたはシアノで
   あり；Ｒ^３は水素であり；そしてＲ^４はＣ_１−６アルキルである、請求項１記載の化合物。
3. 各ｎは値１をもつ整数であり；各ｍは値１をもつ整数であり；Ｘは独立してＮであり；Ａはヒドロキシであり；Ｒ^１は水素であり；Ｒ^２は水素であり；Ｒ^３は水素であり；そしてＲ^４はＣ_１−６アルキルである、請求項１または２記載の化合物。
4. 該化合物が化合物Ｎｏ．１
   

   

   である、請求項１〜３に記載の化合物。
5. 製薬学的に許容できる担体および有効成分として請求項１〜４に記載の化合物の治療学的有効量を含んでなる、製薬学的組成物。
6. 製薬学的に許容できる担体および請求項１〜４に記載の化合物が直接に混合される、請求項５記載の製薬学的組成物の製造方法。
7. 医薬として使用するための請求項１〜４のいずれかに記載の化合物。
8. 増殖性疾患を処置する薬物の製造のための請求項１〜４のいずれかに記載の化合物の使用。
9. 抗がん作用物および請求項１〜４のいずれかに記載のＨＤＡＣインヒビターの組み合わせ物。
10. ａ）本明細書において式（ＩＩ−ａ）の中間体と呼ばれる、Ｑがテトラヒドロピラニルオキシアミノカルボニルである式（ＩＩ）の中間体を、適当な酸と反応させて、式（Ｉ−ａ）のヒドキサム酸を生成すること、
    

    

    ｂ）Ｍが水素またはアルカリ金属を表す式（ＩＶ）の中間体を、適当な溶媒中、塩基およびヘキサフルオロリン酸ベンゾトリアゾル−１−イルオキシ−トリピロリジノ−ホスホニウム（ＰｙＢＯＰ）の存在下で、式（ＩＩＩ）のアニリンと、反応させること、
    

    

    を特徴とする、請求項１記載の化合物の製造方法。
11. 式（ＩＩ）
    

    

    ［式中、
    各ｎは、値０，１または２をもつ整数であり、そしてｎが０である場合は直接結合が意図され；
    各ｍは、値１または２をもつ整数であり；
    Ｘは、独立してＮまたはＣＨであり；
    Ｑは、Ｃ_１−２アルキルオキシカルボニル、ヒドロキシカルボニルまたはテトラヒドロピラニルオキシアミノカルボニルであり；
    Ｒ^１は、水素、Ｃ_１−６アルキル、ヒドロキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルスルホニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルまたはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノスルホニルであり；
    Ｒ^２は、水素、ヒドロキシ、アミノ、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、シアノ、Ｃ_２−６アルケニル、ポリハロＣ_１−６アルキル、ニトロ、フェニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニル、ヒドロキシカルボニル、Ｃ_１−６アルキルカルボニルアミノ、Ｃ_１−６アルキルオキシ、またはモノ−もしくはジ（Ｃ_１−６アルキル）アミノであり；
    Ｒ^３は、水素、ハロ、Ｃ_１−６アルキル、またはＣ_１−６アルキルオキシであり；そしてＲ^２およびＲ^３が、隣接する炭素原子上に存在する場合、それらは二価の基：
    −Ｏ−ＣＨ_２−Ｏ− （ａ−２）
    を形成してもよく；
    Ｒ^４は、水素、Ｃ_１−６アルキル、Ｃ_１−６アルキルオキシＣ_１−６アルキル、Ｃ_３−６シクロアルキル、Ｃ_３−６シクロアルキルメチル、フェニルＣ_１−６アルキルであるか；あるいは
    Ｒ^２がインドリルの７位に存在する場合は、Ｒ^２およびＲ^４は、一緒になって二価の基；
    −（ＣＨ_２）_２− （ａ−３）または
    −（ＣＨ_２）_３− （ａ−４）
    を形成してもよく；
    Ｒ^５は、水素またはチオフェニルである］
    の化合物、そのＮ−オキシド形態物、製薬学的に許容できる付加塩および立体化学的異性形態物。
12. Ｍがアルカリ金属陽イオンを表す式（ＩＩ）の化合物（以下において式（ＩＩ−ａ）の化合物と称す）を、適当な試薬、例えばＮ’−（エチルカーボンイミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン・一塩酸塩（ＥＤＣ）および１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（ＨＯＢＴ）の存在下で、式（Ｖ）の中間体と反応させて、式（ＩＩ−ａ）の化合物を生成すること
    

    

    を特徴とする、請求項１１記載の化合物の製造方法。