JP2010112960A - 液体クロマトグラフ装置、および分析用プログラム - Google Patents
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Abstract
【解決手段】本発明は、液体クロマトグラフ分析において、試料注入から次の試料注入までのサイクル時間を一定とし、カラムが溶離液により平衡化する前に試料を注入することに関する。各注入分析サイクルにおける溶離液の切り替えタイミングおよびサンプル注入のタイミングを同期させることにより、カラムが必ずしも平衡状態に至らなくとも、各成分ピークの保持時間が比較的再現性良く溶出される性質を応用したものである。
【選択図】 図1
Description
従来からイオン交換クロマトグラフィーを用いるアミノ酸分析法では、イオン交換カラムを約0.1mol/Lの水酸化ナトリウムもしくは水酸化リチウムの再生液で洗浄した後、クエン酸ナトリウムか、またはクエン酸リチウム溶離液を十分な時間を送液して、カラムを平衡化していた。再生液から溶離液に切り替えてサンプルを注入するまでの、所謂、カラム平衡化液量は、表1に示すように従来例PF−94法では9.5ml(流量:0.56ml/min、送時間:17分間)であった。カラムは、内径5.4mm長さ50mm相当であり、容積は1.1mlとなる。平衡化液量は、カラム容積で規格化すると、カラム容積の8.4倍量を送液している換算になる。イオン交換樹脂の場合、充填剤内部まで溶離液が浸透するため、カラム内の空隙率は考慮しないものとする。カラム容器中の再生液を溶離液の送液により置き換えていく場合、送り込んだ溶離液が速やかにカラム容器内で一様になるモデルでは、自然対数の底eの累乗に反比例した比率で再生液が残る。即ち、前述の例では、カラム容積の8.4倍量を送液すれば、e-8.4=0.000225=0.0225%の再生液しかカラム内に残っていない計算になる。
分析プログラムはカラムに吸着した成分を分離する溶出工程,強アルカリの再生液によってカラムを再生するカラム再生工程,引き続き行われる分析に備えるための第1緩衝液でカラムを平衡化するカラム平衡化工程から構成される。また、分析プログラムはポンプの流速,カラムオーブンの温度等も時間軸に沿って指定するものである。
Claims (2)
- 液体クロマトグラフ装置であって、
第一グラジエント溶出プログラムから第二グラジエント溶出プログラムに移行する間に挿入する接続用グラジエント溶出プログラムに、第一グラジエント溶出プログラムおよび第二グラジエント溶出プログラムそれぞれの構成要素を含めた接続用グラジエント溶出プログラムを備えることを特徴とする液体クロマトグラフ装置。 - 液体クロマトグラフ装置に用いる分析用プログラムであって、
第一グラジエント溶出プログラムから第二グラジエント溶出プログラムに移行する間に挿入する接続用グラジエント溶出プログラムと、
第一グラジエント溶出プログラムおよび第二グラジエント溶出プログラムそれぞれの構成要素を含めた接続用グラジエント溶出プログラムとを含む分析用プログラム。
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