JP2005528907A - 液体試料の実地検査のための微生物用キットおよび方法 - Google Patents

Abstract

液体試料中の微生物濃度を現場で迅速に測定するためのキットおよび方法を提供する。キットは、液体流れから微生物を捕捉するフィルタを含む濾過デバイスを備える。第１の試薬を加えて微生物細胞を溶解し、次いで第２の試薬を加えて（同時に加えてもよい）、ルシフェリンおよびルシフェラーゼ、放射性標識または１つまたは複数のＰＮＡ標識などによって当該細胞を検出する手段を提供する。次いで、第２の試薬と溶解細胞との反応による信号をルミノメータの如き適切に選択したセンサによって検出する。

Description

本発明は、迅速な液体の微生物検査を現場（ｏｎ−ｓｉｔｅ）で行うためのキットおよび方法に関する。

現在、微生物量について、食品、飲料および化粧品の如き材料の調製に利用される装置を試験することが必要とされている。該装置を利用して所望の製品を調製し、それを停止し、ＣＩＰ（ｃｌｅａｎ−ｉｎ−ｐｌａｃｅ）洗浄し、次いで残留微生物量について装置を試験してから次の処理バッチを開始するのが現行の慣わしである。最初に、装置を洗剤、高温水、苛性アルカリ、酵素の如き適切な洗浄剤で洗浄し、次いで低温の洗浄水で一回または数回水洗することによって仕上げをする。１つの現行の方法において、洗浄水の放出流を処理装置から採取し、微生物を保持するフィルタを介して処理する。次いで、膜に回収された微生物を培養し、測定する。好適な微生物量を求めた後に、その情報を典型的には遡及的に傾向分析に用いる。一般に、微生物測定処理に使用される膜濾過法は、処理地域から離れた実験室環境で実施される。残念なことに、処理熟練要件、施設要件および時間対結果は時間を要し、試験結果が得られる前に食品処理装置が使用される。

よって、微生物を増殖する工程を必要としない食品、飲料または化粧品処理装置あるいは任意の他の処理装置の如き材料処理装置を微生物含有量について試験するための方法を提供することが望まれることになる。加えて、処理装置の部位で行うことができる当該方法を提供することが望まれる。当該方法は、装置における微生物量を正確に測定する迅速かつ便利な手段を提供することになる。

本発明は、食品処理装置の如き材料処理装置を、装置を介して材料を処理する前に微生物接触について試験するためのキットおよび方法を提供する。

キットは、真空ポンプを必要とせずに、液体、例えば滅菌水を材料処理装置から除去するとともに、微生物を保持するフィルタを介して除去液を濾過するためのデバイスおよびサンプリングポートを備える。濾過液の単位体積あたりの微生物の数を後で求めることができるように濾過液の体積を測定する。濾過体積を変更することによって分析の感度を調整することができる。デバイスが、試料体積の極めて大きな変化（フィルタの詰まりが生じなければミリリットルから１平方メートルまでの変化）に適するように、フィルタより下流で濾過液の体積を測定する。濾過に続いて、細胞を溶解することが可能で、溶解細胞成分と反応して、蛍光の如き可測放射エネルギーを生成するための試薬をデバイスに加えて、フィルタ上に単離された微生物と接触、反応させる。反応に続いて、溶解細胞から放射された放射エネルギーを測定するために、デバイスを放射エネルギー測定装置内に配置する。次いで、この測定値を、試料中の微生物濃度を求めるために、微生物濃度の関数としての放射エネルギーの測度を示す既に作成した標準と比較する。測定値が小さくて許容可能である場合に、材料処理装置の使用を再開する。模範的な試薬は、ルスフェリンとルシフェラーゼの混合物を含み、模範的な放射エネルギー測定デバイスはルミノメータである。

本発明は、試料中の微生物濃度を求めるためのキットおよび方法を提供する。キットは、微生物試料を回収、保持するためのデバイス、ならびに回収した微生物の細胞を溶解するとともに、溶解細胞と反応して、蛍光の如きエネルギー信号を生成する試薬組成物を備える。キットは、ルミノメータの如き液体試料からの放射エネルギーを検出、測定することができるデバイスとともに利用される。

微生物試料を回収、保持するとともに、微生物試料を液体試薬組成物と反応させるための好適なデバイスは、米国マサチューセッツ州Ｂｉｌｌｅｒｉｃａのミリポアコーポレーションから入手可能なＭｉｃｒｏＰｒｅＳｕｒｅ（商標）濾過デバイスで、国際出願第ＰＣＴ／ＩＢＯＯ／０１９０８号に記載され、国際公開第０１／４８１４２ Ａ１号パンフレットとして公表されている。濾過によって液体試料から微生物を回収するのに適し、反応の度合を測定できる液体試料との続く反応を可能にするデバイスはいずれも本発明に適することを理解すべきである。一般に、当該デバイスは、多孔質基板に支持されたフィルタと、フィルタ用筐体と、筐体への流体入口と、筐体からの流体出口とを含む。

本発明のキットの試薬組成物は、回収した微生物細胞を溶解し、溶解細胞の１つまたは複数の組成物と反応して、目視または機械によって検出できる放射エネルギーを生成する。細胞を溶解するための好適な試薬組成物としては、洗剤、アルコール、エステル、エーテル、ならびにメタン、エタン、メチレンおよびエチレンのハロゲン化誘導体、ならびにアセトニトリル、トリメチルアミンおよび他の当該知られた溶解剤が挙げられるが、それらに限定されない。メタノールおよびエタノールは、本発明に有用な当該溶解剤の２つの例である。蛍光誘導試薬としては、溶解細胞のＡＤＰおよび／またはＡＴＰと反応して、蛍光信号を生成するルシフェリンおよびルシフェラーゼ（特開平７−２１３２９７号公報参照）、または微生物のＤＮＡまたはＲＮＡと反応して、検出できる放射信号を供給する放射性標識およびペプチド核酸（ＰＮＡ）標識（米国特許５，７７３，５７１号明細書および国際公開第０２／２７０３６Ａ２号パンフレット参照）が挙げられるが、それらに限定されず、微生物の存在および／または存在する微生物の種類を示すための他の知られた放射エネルギー検出システムも本発明に使用できる。既存の細胞ＡＭＰを、後にルシフェリン／ルシフェラーゼとの反応によって検出されるＡＴＰに変換するピルベートオルトホスフェートジキナーゼ（ＰＰＤＫ）（英国特許出願第２３１７８９２Ａ号明細書参照）、細胞ＡＤＰを、後に蛍光試薬で検出されるＡＴＰに変換するアデニル酸キナーゼ（英国特許出願第２３０４８９２号明細書参照）、あるいは細胞ＡＴＰ信号のみが検出されるように細胞の溶解前に溶液またはフィルタからあらゆる非微生物ＡＴＰを削除するＡＴＰヒドロラーゼ（米国特許第５，９０８，７５１号明細書参照）またはアデノシンホスフェートデアミナーゼ（米国特許第５，８９１，７０２号明細書参照）等の、システムのバックグラウンドノイズを低減する試薬の如き他の試薬もこのシステムに使用できる。

図面、特に図１および図２に明確に示される、加圧下で液体の試料の微生物検査を行うためのデバイス１は、一般的に中心軸を中心とした回転の対称性を有する。デバイス１は、吸入体２と、排出体３と、濾過膜４とを含む。

吸入体２は、液溜め５と、液溜め５に外部から接続されるスカート６と、スカート６から軸方向に突出する４つのラッチングタブ７とを含む。

液溜め５は、透明な端壁８と側壁９を有する。

図５を参照しながら以下に説明するように、直径に沿う１つの導管１０が、スカート６の上方で側壁９から外方向に突出し、内部で雄型ルアーコネクタを受けるように構成された雌型ルアーコネクタを構成し、導管１０の内部の通路が壁９内に設けられた開口１１によって持続され、この開口は端壁８に隣接している。

後に図２、図３および図６を用いてより詳細に説明するように、側壁９は、封止部１３の一部を形成する縁における端壁８と反対側の末端で終端し、溝１４がこの効果により壁９の硬質部分に設けられている。

スカート６は、溝１４と導管１０の間の液面位置において、側壁９の外側により液溜め５に接続されている。スカート６は、円錐台形の壁１５と円筒形の壁１６とを有し、壁１５の小径端によって壁９に接続されている。壁１５と１６の接続は、壁１５の大径端によってなされる。

各々のラッチングタブ７は、軸方向に関して対称的な台形の形の概観を有し、タブ７の自由端１８を形成する側面が、このタブをスカート６に接続させる側面、より厳密には壁１６の縁に平行し、タブ７は、スカート６との接続部とその自由端との間で徐々に狭まっている。

各タブ７のいずれの側面にも、縁からの特定の距離にわたって、ノッチ１７が壁１６内に設けられている。

各タブ７は、その自由端１８から、真直の、いわゆる軸方向に平行な内面１９を、面１９がそこから内方向および壁１６の方向に傾斜する上反角２０まで有している。

各タブ１６の外面２１は、外方向および壁１６の方向に傾斜している。面２１は、面１８と、面２１と、その面２２が縁を構成する外部ショルダ２４と、面２１に対して内方向に傾いた面２５との間に位置する溝２３とを接続する横方向配向面２２との間に伸びる。面２５は、壁１６の外面の連続体を含む。

図４を見ればより明確に理解できるように、排出体３は、円形テーブル３０と、テーブル３０のまわりのステップに配置されたスカート３１とを有する。

後者は、主部は平坦であるが、外側に向くわずかな斜面を有する面４４によってスカート３１から反対側で区切られた環状の側壁３２を有する。

壁３２の内周は、主部が凹状で、面３２に対して、スカート３１の方へ軸方向に傾いた面３５によって、面３３側で区切られた壁３４に接続され、面３５の周囲と面３３の内周とがわずかに円錐台形の面３６によって接続されている。

壁３４は、その内部通路が出口開口３８によって壁３４内に伸びる導管３７に中央接続されている。同心排出管３８が、面３５から壁３４内に配置されている。半径方向に配向した管（不図示）が管３９と同じ深さで設けられ、これらの管は勿論出口開口３８内に開き、面３５に対して開けられた壁３４に設けられた管によって排出される液体がそこを流れる。

壁３２と３４の間の接続部に環状リブ４０が配置されている。リブ４０は、スカート３１の側で、壁３２および３４に対して突出している。リブは、Ｖ形の輪郭においてその自由端に向かって先細りになるため、この末端が鋭縁を構成する。

テーブル３０は、一端によって壁３２に接続される環状の側壁４１を有し、他端がスカート３１に接続される。スカート３１は、横方向に配向した環状の壁４２と、軸方向に配向した円筒状の壁４３とを有し、壁４２は、その末端の１つによって壁４１に接続され、他端によって壁４３に接続される。

壁４２では、壁４１の近隣に、４つの開口部４４が設けられ、それらの間にラッチングタブ７の間の空間と同じ角度の空間を有し、すなわち互いに９０°の角度を隔てて配置されている。開口部４４は、タブ７の最大の輪郭に対応する輪郭を有するため、タブ７はそれぞれの開口部４４を通ることができる。

各開口部４４は、反対側をテーブル３０から突出する軸方向に配向した歯４５によって外側で仕切られている。各々の歯４５は、溝２３の深さに対応する高さに突出し、その厚さは溝２３の幅より小さく、壁４３から各々の歯４５を隔てる距離は、ショルダ２４の厚さより大きい（図５を参照）。

各開口部４４の液面において、壁４３は、壁４３の高さのおよそ３分の２の高さに伸び、ラッチングタブ７の幅のおよそ２倍の幅に伸びる、角が丸まった長方形の全体形状を有するノッチ４８を有する。

壁４３は、それぞれが２つの連続的なノッチ４６の間の中間に配置された４つのノッチ４７をも有し、ノッチ４７は、その最大高さが壁４３の高さの３分の１にほぼ相当する丸形を有する。

排出体３は、一定の厚さを有し、２つの対向面が面３５と同じ形で、その直径および厚さが面３６の直径および厚さと同じである多孔質パッド４８をも有する（図４に示されていない）。

図１および図２に明確に示されているように、濾過体２と排出体３と膜４を集成するときは、膜４を吸入体２の液溜め５の側壁９の縁と、排出体３の円形テーブル３０の壁３２の面３３との間に保持する。濾過体２と排出体３をラッチングタブ７およびスカート３１によって互いに固定し、図５からより具体的にわかるように相互に配置させる。

壁４２の歯４５はタブ７の溝２３に嵌まり、このタブのショルダ２４は、壁４３と歯４５の間に位置する空間に嵌まるため、ショルダ２４と歯４５の協働によってスカート３１におけるタブ７の固定が極めて強くなり、濾過体２と排出体３を互いに引き離そうとする比較的大きな力に耐えることが可能である。

タブ７の末端１８は壁４３の自由端に対して窪んでいるため、排出体３を下にしてデバイス１を面に置いたときに、そのスカート３１によってデバイス１がこの面に支えられ、このためタブ７に力が加わらないため、タブ７が偶発的に壊れる危険性がない。

図２に見られるように、デバイス１を組み立てるときに、封止部１３、より具体的にはそのクッションが、図６に示されるこの封止部のオフロード形態に比べて、強く圧縮される。封止部１３はＴ形の全体的な輪郭を有し、その縦方向の枝が、溝１４に挿入されるように設計されたリブ５０を形成し、その横方向の枝が、膜４と接触するように設計されたクッション５１を形成する。クッション５１の自由端は、２つの環状縁５３を解放することを可能にする中央溝穴５２を有し、クッション５１と膜４の最良の協働を可能にする。リブ５０とクッション５１の接続は、内側の真直面によってなされ、外側には斜面５４が存在する。斜面５４は、壁９の硬質部分の末端の外周の面取り縁５５に対応し、この面取り縁は、クッション５１を、主に内側、すなわち膜４および液溜め５によって区切られた室に向かって流れるように水平方向に含有することを可能にする。

吸入体２は、封止部１３を除き、比較的硬質で透明なプラスチックの成形によって得られ、次いでこの部分にエラストマーで構成された封止部１３を成形するが、この重ね成形は、ここに示される例では二重射出によって行われる。図４に示されている排出体３のこの部分は多孔質パッド４８を含む。

デバイス１を組み立てるために、排出体３と膜４を同心配置する。吸入体２は、ラッチングタブ７と開口部４４の位置を合わせて、排出体３に直面している。タブ７が、傾斜路として作用する傾斜面２１によってわずかに屈曲する開口部４４に嵌め合わされるように、吸入体２は排出体３の方へ強く押される。加えられた力は、ショルダ２４の面２２が、タブ７のバネによって、移動に際する押し込みの最後に歯４５に重なることを可能にする。タブ７とスカート３１の間の遊びが完全に吸収されるように、封止部１３が緩む。次いで、封止部１３の弾力を圧縮し、それにより確保された固定を維持する。封止部を圧縮状態に維持することによって、膜４と壁９の縁との間に優れた密封性が提供され、膜４と面３３の反応によってさらに優れた密封性が提供される。

壁１６の内面は、壁４１の外面に接触する追加的な厚さ（図３）の局所的領域を有し、壁４１はこれらの面の間に横方向のくさび割を提供し、これらの面は類似の形を有し、より一般的には吸入体２と排出体３の間に位置する。このようにしてデバイス１を組み立てると、それを梱包し、酸化エチレンの如き気体、または放射線照射によって滅菌することが可能である。組み立てたデバイス１を梱包し、滅菌する前に、導管１０および３７のそれぞれに栓を装備する。

デバイス１を使用するときは、導管１０を遮断する栓および導管３７を遮断する栓４０ａを除去し、次いで例えば、図７に示すように、雄型ルアーチップ６１を有するサンプリングコネクタ６０を使用して、導管１０を加圧下で液体源に接続する。チップ６１を導管１０の通路に挿入し、コネクタ６０のバルブ６２を操作することで、液溜め５および膜４によって形成された室を大気圧と装置内部の液圧との中間の圧力（液体を槽の底からサンプリングする場合の数ｐｓｉから、液体を加圧管からサンプリングする場合の数バールまで）、例えば３バールに加圧する。コネクタ６０は、食品処理導管の如き導管６０ａと流体連通する。膜４を通ることによって液溜め５に入る液体は、多孔質パッド４８上に支えられる。膜４を通った液体は、管３９によって開口３８に導かれる。液体は導管３７によりデバイス１から出る。試料に必要な体積が膜４を通ったときを判断するために、導管３７から液体を回収するために、目盛容器７１をデバイス１の下に配置するのが好ましい。

所望の測定体積に達すると、バルブ６２を閉鎖し、デバイス１をコネクタ６０から取り外す。次いで、デバイスの下で密封可能なシリンジまたはハンド真空ポンプまたは他の真空生成装備品を排出ユニットの下の所定の位置に配置する。次に、出口開口３８を介する吸入によって、液溜め５にまだはっきりと存在する液体を排出する。

壁４３に設けられたノッチ４７は、そのうちの２つが図８に示されている互いに９０度隔てた４つの位置において、デバイス１に対してポンプまたはシリンジ６４を正確に配置することを可能にする。

図８に示されるように、サンプリング後にデバイス１に残留する液体を真空フラスコで除去することもできる。例示される真空フラスコ７１は、首の高さにおいて図示されていない方法で真空ポンプに接続された管７３を有し、首の最上部において、中央開口７５が設けられた軟質の栓７４を有するガラス体７２を有し、フラスコ７１は、実際に広く認められるタイプのものである。デバイス１を単に栓７４の上に置き、管３７を開口７５に嵌め合わせ、リブ４０を栓７４の最上部で支持する。リブ４０の先細りの輪郭を考慮すれば、後者は栓７４を局所的に変形させ、密封性を与えて、残留する液体を吸い出すことを可能にする。

デバイス１に残留する液体がそこから除かれると、液体をフラスコ７１から除去し、導管３７を栓４０ａで密栓する。上述のように細胞を溶解し、溶解細胞と反応することが可能な試薬７６をアンプル７７に封入する。中空チップ７８を壊して、導管１０に挿入する。アンプル７７を重力で支えるのではなく、圧搾して、試薬７６を容器５に供給して、その存在により所望の反応を行うのが好ましい。次いで、ルミノメータなどの透明な面８を介して、反応によって生成された放射エネルギー（蛍光）を測定する。

微生物細胞を保持するのに使用できるフィルタは、単に目的などに応じて業界で広く使用されているフィルタである。典型的には、公称孔径が０．２μｍと１．２μｍの間の任意のフィルタが本発明に有用である。しかし、十分な流速を維持したいときは、公称孔径が約０．４５ミクロンのフィルタが好ましい。これらは、セルロースエステル、再生セルロース、ＰＶＤＦ、ＰＥＳ、ナイロン等を含むが、それらに限定される様々な材料で構成されうる。当該フィルタは、Ｄｕｒａｐｏｒｅ（登録商標）ＰＶＤＦフィルタ、Ｓ−Ｐａｋ（商標）ＨＡ、ＨＣ、ＡＯおよびＳＯ混合セルロースエステルフィルタおよびＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）およびＥｘｐｒｅｓｓ（登録商標）Ｐｌｕｓ ＰＥＳ非対称フィルタの如き様々な商品名で、マサチューセッツ州Ｂｉｌｌｅｒｉｃａのミリポアコーポレーションから市販されている。

システムに対するさらなる有用なパラメータは、システムの様々な成分から発生し、例えばルミノメータによる溶解細胞の読取り値に干渉しうるバックグラウンド蛍光またはノイズのレベルを最小にするように、蛍光の小さいデバイスまたはフィルタ用材料を選択することを含む。

上述したように、ＡＴＰ、ＤＮＡのような試薬と競合する非微生物細胞および／またはそれらの成分を除去するための試薬を加えることも有用である。例えば、哺乳動物の細胞を選択し、溶解し、酵素で処理して、アデノシントリホスファターゼを含むが、それに限定されない酵素を加水分解するＡＴＰの如き、それらの細胞内のＡＴＰを分解または除去し、次いでフィルタを洗浄工程にかけてから、微生物細胞を溶解することが、非微生物細胞汚染が把握されるか、または疑われるときに本発明に有用であり、より真実性のある結果を導く方法である、米国特許第６，４６５，２０１号明細書を参照されたい。

フィルタと照明センサの間の距離を最小にすることは、システムの光学的検出を最大にするため好ましい。同様に、照明センサと同一または同様の表面積および構成の濾過領域を有することは、フィルタの領域上に存在するが、センサの検出領域内に存在しない微生物によるあらゆる損失信号の可能性を低減または排除するため好ましい。

本発明に有用なデバイスを示す正面図である。 図１のデバイスを示す断面正面図である。 図１および図２と類似の図であるが、吸入体のみを示す図である。 図１および図２と類似の図であるが、排出体のみを示す図である。 図２の右下に位置する部分を示す拡大図である。 図１のデバイスの封止部を示す部分断面図である。 本発明に利用されるサンプリングデバイスを、検査対象液をサンプリングするのに使用する方法を示す断面正面図である。 本発明の使用形態を示す部分断面図である。

Claims (14)

1. 放射エネルギー検出器と併用して液体試料中の微生物濃度を迅速に測定する、現場で使用するキットであって、
   （ａ）加圧下での大量試料の連続濾過に好適な装置であって、入口と、出口と、前記入口と前記出口の間に配置された膜フィルタを支持する手段と、微生物を保持するためのフィルタを支持する手段に取りつけられたフィルタと、透明な上面と、筐体を周囲の大気から密封する手段とを有する筐体を備えた装置と、
   （ｂ）微生物細胞を溶解するための第１の反応物と、溶解細胞と反応して放射エネルギーを生成するための第２の反応物とを含む試薬組成物を収容するための少なくとも１つの容器と、
   （ｃ）フィルタ装置を試薬に接触させる時間の測定、全反応時間の測定、ならびに予め設定した許容値と比較して放射エネルギーを表し、読取り時に環境の放射線による読取り汚染から濾過デバイスを保護する手段を含む、放射エネルギーの検出および測定を行う携帯式装置とを備えたキット。
2. 前記第１の反応物および前記第２の反応物を収容する２つの容器を含む請求項１に記載のキット。
3. 前記フィルタは、多孔質パッドに支持されている請求項１に記載のキット。
4. 前記フィルタは多孔質パッドに支持され、前記筐体は前記多孔質パッドの下に排出管を含み、前記排出管は前記出口に開く請求項１に記載のキット。
5. 前記第１の反応物は、洗剤、アルコール、エステル、エーテルと、メタン、エタン、メチレンおよびエチレンのハロゲン化誘導体と、アセトニトリル、トリメチルアミンと、ならびにそれらの混合物よりなる群から選択され、前記第２の反応物は、ルシフェリンおよびルシフェラーゼ、放射性標識および１つまたは複数のＰＮＡ標識よりなる群から選択される請求項１に記載のキット。
6. 前記第１の反応物は、洗剤、メタノールおよびエタノールよりなる群から選択され、前記第２の反応物は、ルシフェリンおよびルシフェラーゼである請求項１に記載のキット。
7. 前記第１の反応物は、洗剤、メタノールおよびエタノールよりなる群から選択され、前記第２の反応物は、１つまたは複数のＰＮＡ標識である請求項１に記載のキット。
8. 液体試料中の微生物濃度を測定する方法であって、
   入口と、出口と、前記入口と前記出口の間に配置された膜フィルタを支持する手段と、膜フィルタを支持する前記手段に取りつけられた膜フィルタと、透明な上面と、筐体を周囲の大気から密封し、前記液体試料中の微生物を前記膜フィルタ上に隔離する手段とを有する筐体を備えた装置に液体試料を通すこと、
   微生物細胞を溶解するための第１の反応物と、溶解細胞と反応して、放射エネルギーを生成するための第２の反応物とを備えた試薬組成物を導入すること、および
   第１の反応物および第２の反応物を含む前記筐体、前記大気を密封し、前記筐体からの放射エネルギーを測定することを含む方法。
9. 前記第１の反応物は、洗剤、アルコール、エステル、エーテルと、メタン、エタン、メチレンおよびエチレンのハロゲン化誘導体と、アセトニトリル、トリメチルアミンと、ならびにそれらの混合物よりなる群から選択され、前記第２の反応物は、ルシフェリンおよびルシフェラーゼ、放射性標識および１つまたは複数のＰＮＡ標識よりなる群から選択される請求項８に記載の方法。
10. フィルタは、センサの活性検出面とほぼ同じ大きさおよび構成を有する請求項１に記載のデバイス。
11. 微生物細胞を溶解する前に微生物細胞以外のあらゆる細胞を除去することをさらに含む請求項８に記載の方法。
12. 微生物細胞以外のあらゆる細胞を選択的に溶解し、酵素でその内容物を分解し、フィルタを洗浄して分解内容物を除去することによって、微生物細胞を溶解する前に微生物細胞以外のあらゆる細胞を除去することをさらに含む請求項８に記載の方法。
13. 装置は低レベルの蛍光を有する請求項１に記載のデバイス。
14. 装置は、第２の試薬と反応することが可能な低レベルの物質を有する請求項１に記載のデバイス。

Images