JP2004315391A

JP2004315391A - オリーブ果実抽出物およびその製造方法

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Publication number: JP2004315391A
Application number: JP2003109083A
Authority: JP
Inventors: Yoshihiko Yagyu; 好彦柳生
Original assignee: SHODOSHIMA HEALTY LAND KK
Current assignee: SHODOSHIMA HEALTY LAND KK
Priority date: 2003-04-14
Filing date: 2003-04-14
Publication date: 2004-11-11

Abstract

【課題】優れた生理活性を奏するオリーブ果実抽出物およびその製造方法を提供する。
【解決手段】オリーブ果実を１，３−ブチレングリコールと水の混合液で抽出して得られることを特徴とするオリーブ果実抽出物、該オリーブ果実抽出物を配合してなる化粧料、並びに採取されたオリーブ果実または搾油後のオリーブ果実粕を１，３−ブチレングリコールと水との混合液で抽出することからなるオリーブ果実抽出物の製造方法。本発明のオリーブ果実抽出物は、なかんずくヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用、コラーゲン分解抑制作用等について、従来品と比較して格段に優れたものとなる。
【選択図】図１

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、オリーブ果実より抽出され、優れた生理活性を奏するオリーブ果実抽出物、およびその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
オリーブは、地中海沿岸を原産地とするモクセイ科の植物で、古くから食用および搾油用として栽培されている植物である。オリーブの果実は、通常１０月頃から大きくなって淡緑色となり、紫紅色の斑点を帯びてくるとグリーンピクルスへの加工に適した時期となる。その後、１１月頃には全体が紫黒色を帯びた所謂ライブオリーブスとなり塩漬け加工に適したものとなる。１２月頃の熟したオリーブ果実は１５〜３０％程度の油分を含み、この時期のオリーブ果実からオリーブ油が搾油される。こうして得られるオリーブ果実およびオリーブ油には、動脈硬化、胃潰瘍および便秘の軽減、骨の強化、老化の防止、美肌作用等、様々な優れた効果があることが知られている。
【０００３】
なかんずくオリーブ油は、オレイン酸、プロビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＫ類、ポリフェノール類等の様々な有効成分を含有する植物油であって、健康状態の改善効果について最近注目されており、特に、ビタミンＫ類およびポリフェノール類に基く癌発生の抑制効果、プロビタミンＡ、ビタミンＤおよびビタミンＫに基く骨形成の促進効果が報告されている。また、オリーブ油には、肌荒れを軽減する、皮膚を健やかに保つ、皮膚に潤いを与える、皮膚を保護する、皮膚の乾燥を防ぐ等の美肌効果もあり、化粧品、外用薬等への配合がなされている。
【０００４】
また、オリーブ果実から得られるオリーブ果実抽出物としては、オリーブ植物の実および／または種子を水および／または有機溶媒で抽出して得られるものが知られている（例えば、特許文献１参照。）この抽出物は、活性酸素除去作用、メラニン生成抑制作用および腫瘍細胞増殖抑制・死滅作用を奏することが報告されており、また抽出に用いる溶媒は、得られる抽出物について人体への安全性を付与しかつその作用を増大する観点から、水とアルコールとの混合溶媒を用いることが望ましいとされている。
【０００５】
【特許文献１】
特開２００１−１８１１９７号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
上記したようにオリーブ果実は、生体に有益な作用を奏する様々な有効成分（それらは総じて、“オリーブエキス”と称される。）を含有している。しかし、これらの有効成分をオリーブ果実から分離精製し、さらに濃縮する効率は現在のところ低い。オリーブ果実からさらに効率良く有効成分を抽出することができるようにし、そして食品、飲料、医薬品、外用薬等への配合に有利な形態としたオリーブ果実抽出物が得られるようにすることに対する要望が大きい。
【０００７】
本発明は上記の問題に鑑みて為されたものであり、その目的とするところは、オリーブ果実中が含有する有効成分を効率良く抽出し、その結果、優れた生理活性を奏するオリーブ果実抽出物およびその製造方法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は鋭意研究を行った結果、オリーブ果実を特に１，３−ジブチレングリコールと水の混合液で抽出することにより、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用、コラーゲン分解抑制作用等について、従来品と比較して格段に優れた特性を有するオリーブ果実抽出物が得られることを見出し、これに基いて本発明を完成させた。
【０００９】
従って本発明は、
オリーブ果実を１，３−ブチレングリコールと水の混合液で抽出して得られることを特徴とするオリーブ果実抽出物、
前記オリーブ果実抽出物を配合してなる化粧料、および
採取されたオリーブ果実または搾油後のオリーブ果実粕を１，３−ブチレングリコールと水との混合液で抽出することからなるオリーブ果実抽出物の製造方法
に関する。
【００１０】
【発明の実施の形態】
次に、本発明を図面を参照しながらより詳細に説明する。図１は、本発明のオリーブ果実抽出物の製造方法の一態様を図示する流れ図である。
【００１１】
本発明のオリーブ果実抽出物の製造では、先ずオリーブ果実抽出物の原料となるオリーブ果実と抽出溶媒である１，３−ブチレングリコールと水との混合液とを抽出容器中に仕込む。オリーブには様々な品種があり、例えばミッション（Ｍｉｓｓｏｎ）、マンザニロ（Ｍａｎｚａｎｉｌｌｏ）、ネバディロ・ブランコ（ＮｅｖａｄｉｌｏＢｌａｎｃｏ）、ピクアル（Ｐｉｃｕａｌ）、オヒブランカ（Ｈｏｊｉｂｌａｎｃａ）、アルベキナ（Ａｒｂｅｑｕｉｎａ）、コルニカブラ（Ｃｏｒｎｉｃａｂｒａ）マンザニリャ（Ｍａｎｚａｎｉｌｌａ）、ゴルダル（Ｇｏｒｄａｌ）、フラントイオ（Ｆｒａｎｔｏｉｏ）、モロイオロ（Ｍｏｒａｉｏｌｏ）、レッチーノ（Ｌｅｃｃｉｎｏ）、コラティーナ（Ｃｏｒａｔｉｎａ）、アスコラーナ・テレナ（ＡｓｃｏｌａｎａＴｅｒｅｎａ）等が知られており、これらの品種ではそれぞれ果実の平均重量および含油率が異なり、また適した用途も果実加工用種、油用種、兼用種等と異なっている。しかしながら、本発明のオリーブ果実抽出物は何れの品種のオリーブからも製造できる。
また原料のオリーブ果実は、オリーブ油を搾油した後のオリーブ果実粕であってもよく、凍結したオリーブ果実を用いることもできる。
【００１２】
抽出溶媒には、他の補助溶媒を全く含まない１００％１，３−ブチレングリコール溶媒を用いることができる。しかしながら、抽出溶媒を水と１，３−ブチレングリコールからなる混合溶媒とすることもできる。混合溶媒を採用する場合には、その濃度は例えば３０体積％である。
【００１３】
オリーブ果実と抽出溶媒を抽出容器に仕込んだ後、次いで抽出を行う。抽出は、抽出作用を促進するために室温よりもやや昇温して行うことができる、例えば抽出温度を５０〜６０℃とした場合、抽出時間は５時間程度となる。
【００１４】
抽出終了後、オリーブ果実と抽出液とを分離する。オリーブ果実の分離は濾過で行うことができる。得られた濾液は、その後の固形分分離に都合が良い場合には、全量を数倍程度に希釈してもよい。
【００１５】
次いで再度濾過を行い、抽出液中に含まれる固形分をさらに分離する。固形分分離に先立ち、珪藻土等の吸着材を濾過対象の液に添加して微細な固形分を吸着して分離するのが好ましい。吸着材の添加量は特に制限されないが、例えば濾過対象の液に対して１０体積％の量である。
【００１６】
こうして固形分を分離した後、得られた濾液を殺菌する。殺菌は通常の加熱殺菌で行うことができ、例えば８０〜９０℃で１時間程度保持する低温殺菌が好ましい。１００℃を超える温度を採用する高温殺菌は、殺菌時間を短くすることができるが、オリーブ果実が含有する有効成分の分解を引き起こすため好ましい方法でない。
【００１７】
殺菌済みの液を再度濾過することにより、本発明のオリーブ果実抽出物が得られる。この最終の濾過は、例えば０．５μｍカットオフの目が細かいフィルターを用いて行うのが好ましい。このような濾過により、オリーブ果実抽出物中に含まれる固形分の量を０．５％以下に低減することができる。
【００１８】
こうして製造される本発明のオリーブ果実抽出物は多くの優れた生理活性を奏するが、なかんずく特筆すべきものは、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用およびコラーゲン分解抑制作用である。これらの各作用について、以下に簡単に説明する。
【００１９】
・ヒアルロニダーゼ活性阻害作用
ヒアルロン酸は水分保持、柔軟性の維持等の機能を有し、皮膚の潤いを保つため重要である。ヒアルロン酸はその加水分解酵素であるヒアルロニダーゼにより分解されるが、ヒアルロニダーゼの活性を阻害することでヒアルロン酸の分解を抑制して、皮膚の保湿性、潤滑性、柔軟性の低下を防止できる。
【００２０】
・エラスターゼ活性阻害作用
エラスチンは皮膚中に含まれる弾力組織であり、これが分解されると皮膚は次第に張りと弾力性を失ってしまう。エラスチンの分解はエラスターゼにより行われ、またエラスターゼは加齢により、および紫外線等の外的、内的刺激により活性化する。従って、エラスチンの分解酵素であるエラスターゼの活性を阻害してエラスチンの分解を抑制することができれば、皮膚の弾力性をキープし張りと潤いのある肌を保つことができる。
【００２１】
・活性酸素消去作用
活性酸素は、皮膚の炎症や老化を引き起こす外的要因の一つであって、体内組織に損傷を与えて皺の発生の原因ともなる。よって、皮膚の老化や炎症を防止するには、抗酸化剤やラジカルスカベンジャーによる活性酸素の消去が有用である。活性酸素消去作用を奏するか否かは、ＳＯＤ様活性の有無や、その他の抗酸化性試験から決定することができる。
【００２２】
・コラーゲン分解抑制作用
コラーゲンは、皮膚の張りや弾力性の保持に重要な働きを有する物質である。しかしながら、紫外線等の外部ストレスや生体内老化によりコラーゲン分解酵素であるコラゲナーゼが活性化されると、皮膚中のコラーゲン量が減少して皺や弛みの原因となる。コラゲナーゼの活性を阻害することができれば、コラーゲンの分解を抑制できて肌を健やかに保つことができる。
【００２３】
本発明のオリーブ果実抽出物は、様々な剤形とすることができる。例えば、経口で摂取される食品、飲料、医薬品等に配合することができる。なかんずく、優秀な美肌作用を奏するので、直接皮膚に適用する外用薬、例えば軟膏、クリーム、乳液、懸濁液、溶液等に配合することが好ましい。これらへの配合量は、例えば１〜５０重量％である。
【００２４】
【実施例】
以下の例で本発明をより詳細に説明するが、これらの例は本発明をある特定の態様に制限することを意図しない。
【００２５】
実施例１：オリーブ果実抽出物の製造
以下のようにして、オリーブ果実抽出物を製造した。
仕込み：凍結させたオリーブ果実１００ｇと、３０％１，３−ブチレングリコール水溶液１０００ｇを抽出容器に仕込んだ。
抽出：抽出容器を加熱して内部を５０〜６０℃に保った。この温度で５時間、攪拌しながら抽出を行った。
オリーブ果実分離：抽出終了後、オリーブ果実を除去し、３０％１，３−ブチレングリコール水溶液１０００ｇ添加して、抽出液を２倍に希釈した。
固形分分離：希釈液に珪藻土（ラジオライト＃２００）２００ｇを添加し、１時間攪拌して微細な固形物を吸着させた。その後、希釈液を濾過し、固形分および珪藻土を分離した。
殺菌：濾液を８０〜９０℃に加熱し、１時間、攪拌しながら加熱殺菌を行った。
最終濾過：殺菌後の濾液を、０．４５μｍカットオフのフィルターを用いて最終濾過した。
上記の手順により、固形分０．３８％を含むオリーブ果実抽出物１５４１．２ｇを得た。
【００２６】
試験例１：ヒアルロニダーゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の代わりに、抽出に３０％１，３−ブチレングリコール水溶液でなく水を用いた以外は実施例１と全く同様な工程で得たオリーブ果実水抽出物について、そのヒアルロニダーゼ活性阻害作用を評価した。抽出に水を用いた理由は、オリーブ果実抽出物がアルコールを含む場合、ヒアルロニダーゼ活性の測定が不可能だからである。
オリーブ果実水抽出物０．２ｍＬ、ヒアルロニダーゼ溶液０．１ｍＬ、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ４８／８００．２ｍＬ、ヒアルロン酸カリウム溶液０．２ｍＬを混和し、３７℃で反応させた後、０．４Ｎ水酸化ナトリウム０．３ｍＬを添加して反応を停止させた。次いで、ホウ酸溶液を添加して混和した。得られた溶液を沸騰湯浴で加熱し酵素を失活させ、氷上で室温まで冷却し、ｐ−ＤＡＢ６ｍＬを添加して３７℃で２０分間静置し、その後５８５ｎｍでの吸光度を測定してヒアルロン酸を定量した。
結果は、ヒアルロニダーゼ活性を５０％阻害するに要する抽出物の濃度（ＩＣ_５０）で示し、０．３１８ｍｇ／ｍＬであった。
水抽出物について得られた結果はそれ自体良好なものである。しかしながら、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する物質はペプチン等の多糖類であることが従来技術で知られており、また多糖類は一般にエタノールよりも水および１，３−ブチレングリコールを用いた方が効率良く抽出し得ることも知られている。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物は、本試験例で試験した水抽出物と同程度またはむしろそれよりも高く、エタノール抽出物よりも格段に優れたヒアルロニダーゼ活性を奏するものと予測される。
【００２７】
試験例２：エラスターゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の代わりに、抽出に３０％１，３−ブチレングリコール水溶液でなく水を用いた以外は実施例１と全く同様な工程で得たオリーブ果実水抽出物について、そのエラスターゼ活性阻害作用を評価した。抽出に水を用いた理由は、試験例１と同様、オリーブ果実抽出物がアルコールを含む場合、エラスターゼ活性の測定が不可能だからである。
オリーブ果実水抽出物５０μＬ、１２μｇ／ｍＬの人白血球由来エラスターゼ（ＥＬＡＳＴＩＮＰＲＯＤＵＣＴＣＯ．ＩＮＣ製）２５μＬ、および８ｍＭに調製したメトキシ−スクシニル−アラニル−アラニル−プロピルバリン−ｐ−ニトロアニリド２５μＬを混和し、３７℃で２０分間反応させた。反応後の溶液について４０５ｎｍの吸光度を測定し、生成したニトロアニリンを定量した。
結果は、エラスターゼ活性を５０％阻害するに要する抽出物の濃度（ＩＣ_５０）で示し、１１．８ｍｇ／ｍＬであった。
水抽出物について得られた結果はそれ自体良好なものである。しかしながら、エラスターゼ活性阻害能を有する物質はペプチン等の多糖類であることが従来技術で知られており、また多糖類は一般にエタノールよりも水および１，３−ブチレングリコールを用いた方が効率良く抽出し得ることも知られている。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物は、本試験例で試験した水抽出物と同程度またはむしろそれよりも高く、エタノール抽出物よりも格段に優れたエラスターゼ活性を奏するものと予測される。
【００２８】
試験例３：活性酸素消去作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物（固形分０．１９％）の活性酸素消去作用を、ＳＯＤ様作用および抗酸化性試験の双方により評価した。
４−１：ＳＯＤ様作用
キサンチンとキサンチンオキシダーゼで発生させたＯ_２ ⁻によりＮＢＴを還元し、生成したフォルマザンの量を５６０ｎｍでの吸光度測定により定量してＳＯＤ様活性をＮＢＴ法で評価した。
結果は、実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物のＳＯＤ様作用が７６．０％であることを示した。
４−２：抗酸化性試験
紫色で５１７ｎｍに紫外部吸収を持つ安定なラジカル：ジフェニルピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）を用い、このラジカルの示す紫色が抗酸化物質の作用で消失するのを測定することにより、活性酸素消去作用を評価した。
また比較として、水での抽出により製造したオリーブ果実抽出物およびエタノールでの抽出により製造したオリーブ果実抽出物を添加した場合についても同様の試験を行った。
結果は、実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物が７５．０％の抗酸化性を有することを示した。
以上の結果より、ＳＯＤ様作用および抗酸化性試験のどちらの方法により評価した場合についても、実施例１で得たオリーブ果実抽出物は高い活性酸素消去作用を奏することが解る。
【００２９】
試験例４：コラゲナーゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物のコラゲナーゼ活性阻害作用を評価した。
実施例１のオリーブ果実抽出物５０μＬ、０．１ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼタイプＩＶ（シグマ社製）５０μＬ、および０．３９ｍｇ／ｍＬのＰＺ−ｐｅｐｔｉｄｅ（ＢＡＣＨＥＭＦｅｎｉｃｈｅｍｉｋａｌｉｅｎＡＧ製）４００μＬを混和し、３７℃で３０分間反応させた。反応溶液に、２５ｍＭクエン酸溶液１ｍＬを添加して反応を終了させた。この溶液にさらに酢酸エチル５ｍＬを添加して抽出し、遠心分離により酢酸エチル層を分離し、３２０ｎｍの吸光度を測定した。
結果は、オリーブ果実抽出物の代わりに蒸留水を添加したときの阻害作用コラーゲン分解量を１００とした場合に、１０．４であった。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物はコラゲナーゼの活性を阻害し、コラーゲンの分解を大幅に抑制し得る。
【００３０】
試験例５：オリーブ果実抽出物配合ハンドクリームの製造
以下の基本成分に加え、実施例１のオリーブ果実抽出物をその他の成分の合計に対して３重量％配合して、ハンドクリームを得た。
基本成分：水、ミネラルオイル、ワセリン、グリセリン、水添ポリイソブテン、マイクロクリスタリンワックス、シクロメチコン、ラノリンアルコール、パラフィン、スクワラン、ホホバ油、オレイン酸デシル、オクチルドデカノール、ジステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、クエン酸、安息香酸塩、トコフェロール、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、香料。
こうして製造したハンドクリームおよびオリーブ果実抽出物を含まない以外は同一の組成を有するハンドクリームを被験者の皮膚に１日１回塗布し、１０日後の塗布部の変化を潤い、張りおよび艶の３項目について観察した。
結果を表１に示す。表１の結果は、それぞれの項目について改善された被験者の数を示す。
【表１】

表１から解るように、本発明のオリーブ果実抽出物を配合したハンドクリームは、従来品を越える著しい美肌作用を奏する。
【００３１】
試験例６：オリーブ果実抽出物配合ボディーソープの製造
以下の基本成分に加え、実施例１のオリーブ果実抽出物をその他の成分の合計に対して２重量％配合して、ハンドクリームを得た。
基本成分：
ラウリル硫酸アンモニウム８％
ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム２％
椰子油脂肪酸アミドプロピルベタイン７％
椰子油脂肪酸モノエタノールアミド４％
エデト酸２ナトリウム０．２％
安息香酸ナトリウム０．２％
クエン酸０．２％
水残部
こうして製造したボディーソープおよびオリーブ果実抽出物を含まない以外は同一の組成を有するボディーソープを被験者に１日１回使用させ、１０日後の皮膚の変化を潤い、張りおよび艶の３項目について観察した。
結果を表２に示す。表２の結果は、それぞれの項目について改善された被験者の数を示す。
【表２】

表２から解るように、本発明のオリーブ果実抽出物を配合したボディーソープは、従来品を越える著しい美肌作用を奏する。
【００３２】
【発明の効果】
本発明によれば、１，３−ジブチルエーテルで抽出することにより、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用、コラーゲン分解抑制作用等について、従来品と比較して格段に優れたオリーブ果実抽出物を提供することができる。係るオリーブ果実抽出物は、特に軟膏、クリーム、乳液、懸濁液、溶液等の外用薬に好ましく配合することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、本発明のオリーブ果実抽出物の製造方法を図示する流れ図である。

Claims

オリーブ果実を１，３−ブチレングリコールと水の混合液で抽出して得られることを特徴とするオリーブ果実抽出物。
請求項１記載のオリーブ果実抽出物を配合してなる化粧料。
採取されたオリーブ果実または搾油後のオリーブ果実粕を１，３−ブチレングリコールと水との混合液で抽出することからなるオリーブ果実抽出物の製造方法。