JP2004315391A - Olive fruit extract and method for producing the same - Google Patents

Abstract

<P>PROBLEM TO BE SOLVED: To obtain an olive fruit extract which exhibits excellent physiological activities, and to provide a method for producing the same. <P>SOLUTION: The olive fruit extract is characterized by being obtained by the extraction of olive fruits with a mixture of 1,3-butylene glycol with water. A cosmetic is compounded with the olive fruit extract. The method for producing the olive fruit extract comprises extracting harvested olive fruits or oil-squeezed olive fruit residues with the mixture of 1,3-butylene glycol with water. The olive fruit extract has highly more excellent hyaluronidase activity-inhibiting action, esterase activity-inhibiting action, active oxygen-scavenging action, collagen degradation-depressing action, and the like, than those of conventional extracts. <P>COPYRIGHT: (C)2005,JPO&NCIPI

Description

【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は、オリーブ果実より抽出され、優れた生理活性を奏するオリーブ果実抽出物、およびその製造方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】
オリーブは、地中海沿岸を原産地とするモクセイ科の植物で、古くから食用および搾油用として栽培されている植物である。オリーブの果実は、通常１０月頃から大きくなって淡緑色となり、紫紅色の斑点を帯びてくるとグリーンピクルスへの加工に適した時期となる。その後、１１月頃には全体が紫黒色を帯びた所謂ライブオリーブスとなり塩漬け加工に適したものとなる。１２月頃の熟したオリーブ果実は１５〜３０％程度の油分を含み、この時期のオリーブ果実からオリーブ油が搾油される。こうして得られるオリーブ果実およびオリーブ油には、動脈硬化、胃潰瘍および便秘の軽減、骨の強化、老化の防止、美肌作用等、様々な優れた効果があることが知られている。
【０００３】
なかんずくオリーブ油は、オレイン酸、プロビタミンＡ、ビタミンＢ、ビタミンＫ類、ポリフェノール類等の様々な有効成分を含有する植物油であって、健康状態の改善効果について最近注目されており、特に、ビタミンＫ類およびポリフェノール類に基く癌発生の抑制効果、プロビタミンＡ、ビタミンＤおよびビタミンＫに基く骨形成の促進効果が報告されている。また、オリーブ油には、肌荒れを軽減する、皮膚を健やかに保つ、皮膚に潤いを与える、皮膚を保護する、皮膚の乾燥を防ぐ等の美肌効果もあり、化粧品、外用薬等への配合がなされている。
【０００４】
また、オリーブ果実から得られるオリーブ果実抽出物としては、オリーブ植物の実および／または種子を水および／または有機溶媒で抽出して得られるものが知られている（例えば、特許文献１参照。）この抽出物は、活性酸素除去作用、メラニン生成抑制作用および腫瘍細胞増殖抑制・死滅作用を奏することが報告されており、また抽出に用いる溶媒は、得られる抽出物について人体への安全性を付与しかつその作用を増大する観点から、水とアルコールとの混合溶媒を用いることが望ましいとされている。
【０００５】
【特許文献１】
特開２００１−１８１１９７号公報
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】
上記したようにオリーブ果実は、生体に有益な作用を奏する様々な有効成分（それらは総じて、“オリーブエキス”と称される。）を含有している。しかし、これらの有効成分をオリーブ果実から分離精製し、さらに濃縮する効率は現在のところ低い。オリーブ果実からさらに効率良く有効成分を抽出することができるようにし、そして食品、飲料、医薬品、外用薬等への配合に有利な形態としたオリーブ果実抽出物が得られるようにすることに対する要望が大きい。
【０００７】
本発明は上記の問題に鑑みて為されたものであり、その目的とするところは、オリーブ果実中が含有する有効成分を効率良く抽出し、その結果、優れた生理活性を奏するオリーブ果実抽出物およびその製造方法を提供することにある。
【０００８】
【課題を解決するための手段】
本発明者等は鋭意研究を行った結果、オリーブ果実を特に１，３−ジブチレングリコールと水の混合液で抽出することにより、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用、コラーゲン分解抑制作用等について、従来品と比較して格段に優れた特性を有するオリーブ果実抽出物が得られることを見出し、これに基いて本発明を完成させた。
【０００９】
従って本発明は、
オリーブ果実を１，３−ブチレングリコールと水の混合液で抽出して得られることを特徴とするオリーブ果実抽出物、
前記オリーブ果実抽出物を配合してなる化粧料、および
採取されたオリーブ果実または搾油後のオリーブ果実粕を１，３−ブチレングリコールと水との混合液で抽出することからなるオリーブ果実抽出物の製造方法
に関する。
【００１０】
【発明の実施の形態】
次に、本発明を図面を参照しながらより詳細に説明する。図１は、本発明のオリーブ果実抽出物の製造方法の一態様を図示する流れ図である。
【００１１】
本発明のオリーブ果実抽出物の製造では、先ずオリーブ果実抽出物の原料となるオリーブ果実と抽出溶媒である１，３−ブチレングリコールと水との混合液とを抽出容器中に仕込む。オリーブには様々な品種があり、例えばミッション（Ｍｉｓｓｏｎ）、マンザニロ（Ｍａｎｚａｎｉｌｌｏ）、ネバディロ・ブランコ（Ｎｅｖａｄｉｌｏ Ｂｌａｎｃｏ）、ピクアル（Ｐｉｃｕａｌ）、オヒブランカ（Ｈｏｊｉｂｌａｎｃａ）、アルベキナ（Ａｒｂｅｑｕｉｎａ）、コルニカブラ（Ｃｏｒｎｉｃａｂｒａ）マンザニリャ（Ｍａｎｚａｎｉｌｌａ）、ゴルダル（Ｇｏｒｄａｌ）、フラントイオ（Ｆｒａｎｔｏｉｏ）、モロイオロ（Ｍｏｒａｉｏｌｏ）、レッチーノ（Ｌｅｃｃｉｎｏ）、コラティーナ（Ｃｏｒａｔｉｎａ）、アスコラーナ・テレナ（Ａｓｃｏｌａｎａ Ｔｅｒｅｎａ）等が知られており、これらの品種ではそれぞれ果実の平均重量および含油率が異なり、また適した用途も果実加工用種、油用種、兼用種等と異なっている。しかしながら、本発明のオリーブ果実抽出物は何れの品種のオリーブからも製造できる。
また原料のオリーブ果実は、オリーブ油を搾油した後のオリーブ果実粕であってもよく、凍結したオリーブ果実を用いることもできる。
【００１２】
抽出溶媒には、他の補助溶媒を全く含まない１００％１，３−ブチレングリコール溶媒を用いることができる。しかしながら、抽出溶媒を水と１，３−ブチレングリコールからなる混合溶媒とすることもできる。混合溶媒を採用する場合には、その濃度は例えば３０体積％である。
【００１３】
オリーブ果実と抽出溶媒を抽出容器に仕込んだ後、次いで抽出を行う。抽出は、抽出作用を促進するために室温よりもやや昇温して行うことができる、例えば抽出温度を５０〜６０℃とした場合、抽出時間は５時間程度となる。
【００１４】
抽出終了後、オリーブ果実と抽出液とを分離する。オリーブ果実の分離は濾過で行うことができる。得られた濾液は、その後の固形分分離に都合が良い場合には、全量を数倍程度に希釈してもよい。
【００１５】
次いで再度濾過を行い、抽出液中に含まれる固形分をさらに分離する。固形分分離に先立ち、珪藻土等の吸着材を濾過対象の液に添加して微細な固形分を吸着して分離するのが好ましい。吸着材の添加量は特に制限されないが、例えば濾過対象の液に対して１０体積％の量である。
【００１６】
こうして固形分を分離した後、得られた濾液を殺菌する。殺菌は通常の加熱殺菌で行うことができ、例えば８０〜９０℃で１時間程度保持する低温殺菌が好ましい。１００℃を超える温度を採用する高温殺菌は、殺菌時間を短くすることができるが、オリーブ果実が含有する有効成分の分解を引き起こすため好ましい方法でない。
【００１７】
殺菌済みの液を再度濾過することにより、本発明のオリーブ果実抽出物が得られる。この最終の濾過は、例えば０．５μｍカットオフの目が細かいフィルターを用いて行うのが好ましい。このような濾過により、オリーブ果実抽出物中に含まれる固形分の量を０．５％以下に低減することができる。
【００１８】
こうして製造される本発明のオリーブ果実抽出物は多くの優れた生理活性を奏するが、なかんずく特筆すべきものは、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用およびコラーゲン分解抑制作用である。これらの各作用について、以下に簡単に説明する。
【００１９】
・ヒアルロニダーゼ活性阻害作用
ヒアルロン酸は水分保持、柔軟性の維持等の機能を有し、皮膚の潤いを保つため重要である。ヒアルロン酸はその加水分解酵素であるヒアルロニダーゼにより分解されるが、ヒアルロニダーゼの活性を阻害することでヒアルロン酸の分解を抑制して、皮膚の保湿性、潤滑性、柔軟性の低下を防止できる。
【００２０】
・エラスターゼ活性阻害作用
エラスチンは皮膚中に含まれる弾力組織であり、これが分解されると皮膚は次第に張りと弾力性を失ってしまう。エラスチンの分解はエラスターゼにより行われ、またエラスターゼは加齢により、および紫外線等の外的、内的刺激により活性化する。従って、エラスチンの分解酵素であるエラスターゼの活性を阻害してエラスチンの分解を抑制することができれば、皮膚の弾力性をキープし張りと潤いのある肌を保つことができる。
【００２１】
・活性酸素消去作用
活性酸素は、皮膚の炎症や老化を引き起こす外的要因の一つであって、体内組織に損傷を与えて皺の発生の原因ともなる。よって、皮膚の老化や炎症を防止するには、抗酸化剤やラジカルスカベンジャーによる活性酸素の消去が有用である。活性酸素消去作用を奏するか否かは、ＳＯＤ様活性の有無や、その他の抗酸化性試験から決定することができる。
【００２２】
・コラーゲン分解抑制作用
コラーゲンは、皮膚の張りや弾力性の保持に重要な働きを有する物質である。しかしながら、紫外線等の外部ストレスや生体内老化によりコラーゲン分解酵素であるコラゲナーゼが活性化されると、皮膚中のコラーゲン量が減少して皺や弛みの原因となる。コラゲナーゼの活性を阻害することができれば、コラーゲンの分解を抑制できて肌を健やかに保つことができる。
【００２３】
本発明のオリーブ果実抽出物は、様々な剤形とすることができる。例えば、経口で摂取される食品、飲料、医薬品等に配合することができる。なかんずく、優秀な美肌作用を奏するので、直接皮膚に適用する外用薬、例えば軟膏、クリーム、乳液、懸濁液、溶液等に配合することが好ましい。これらへの配合量は、例えば１〜５０重量％である。
【００２４】
【実施例】
以下の例で本発明をより詳細に説明するが、これらの例は本発明をある特定の態様に制限することを意図しない。
【００２５】
実施例１：オリーブ果実抽出物の製造
以下のようにして、オリーブ果実抽出物を製造した。
仕込み：凍結させたオリーブ果実１００ｇと、３０％１，３−ブチレングリコール水溶液１０００ｇを抽出容器に仕込んだ。
抽出：抽出容器を加熱して内部を５０〜６０℃に保った。この温度で５時間、攪拌しながら抽出を行った。
オリーブ果実分離：抽出終了後、オリーブ果実を除去し、３０％１，３−ブチレングリコール水溶液１０００ｇ添加して、抽出液を２倍に希釈した。
固形分分離：希釈液に珪藻土（ラジオライト＃２００）２００ｇを添加し、１時間攪拌して微細な固形物を吸着させた。その後、希釈液を濾過し、固形分および珪藻土を分離した。
殺菌：濾液を８０〜９０℃に加熱し、１時間、攪拌しながら加熱殺菌を行った。
最終濾過：殺菌後の濾液を、０．４５μｍカットオフのフィルターを用いて最終濾過した。
上記の手順により、固形分０．３８％を含むオリーブ果実抽出物１５４１．２ｇを得た。
【００２６】
試験例１：ヒアルロニダーゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の代わりに、抽出に３０％１，３−ブチレングリコール水溶液でなく水を用いた以外は実施例１と全く同様な工程で得たオリーブ果実水抽出物について、そのヒアルロニダーゼ活性阻害作用を評価した。抽出に水を用いた理由は、オリーブ果実抽出物がアルコールを含む場合、ヒアルロニダーゼ活性の測定が不可能だからである。
オリーブ果実水抽出物０．２ｍＬ、ヒアルロニダーゼ溶液０．１ｍＬ、Ｃｏｍｐｏｕｎｄ ４８／８００．２ｍＬ、ヒアルロン酸カリウム溶液０．２ｍＬを混和し、３７℃で反応させた後、０．４Ｎ水酸化ナトリウム０．３ｍＬを添加して反応を停止させた。次いで、ホウ酸溶液を添加して混和した。得られた溶液を沸騰湯浴で加熱し酵素を失活させ、氷上で室温まで冷却し、ｐ−ＤＡＢ６ｍＬを添加して３７℃で２０分間静置し、その後５８５ｎｍでの吸光度を測定してヒアルロン酸を定量した。
結果は、ヒアルロニダーゼ活性を５０％阻害するに要する抽出物の濃度（ＩＣ_５０）で示し、０．３１８ｍｇ／ｍＬであった。
水抽出物について得られた結果はそれ自体良好なものである。しかしながら、ヒアルロニダーゼ活性阻害能を有する物質はペプチン等の多糖類であることが従来技術で知られており、また多糖類は一般にエタノールよりも水および１，３−ブチレングリコールを用いた方が効率良く抽出し得ることも知られている。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物は、本試験例で試験した水抽出物と同程度またはむしろそれよりも高く、エタノール抽出物よりも格段に優れたヒアルロニダーゼ活性を奏するものと予測される。
【００２７】
試験例２：エラスターゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の代わりに、抽出に３０％１，３−ブチレングリコール水溶液でなく水を用いた以外は実施例１と全く同様な工程で得たオリーブ果実水抽出物について、そのエラスターゼ活性阻害作用を評価した。抽出に水を用いた理由は、試験例１と同様、オリーブ果実抽出物がアルコールを含む場合、エラスターゼ活性の測定が不可能だからである。
オリーブ果実水抽出物５０μＬ、１２μｇ／ｍＬの人白血球由来エラスターゼ（ＥＬＡＳＴＩＮ ＰＲＯＤＵＣＴ ＣＯ． ＩＮＣ製）２５μＬ、および８ｍＭに調製したメトキシ−スクシニル−アラニル−アラニル−プロピルバリン−ｐ−ニトロアニリド２５μＬを混和し、３７℃で２０分間反応させた。反応後の溶液について４０５ｎｍの吸光度を測定し、生成したニトロアニリンを定量した。
結果は、エラスターゼ活性を５０％阻害するに要する抽出物の濃度（ＩＣ_５０）で示し、１１．８ｍｇ／ｍＬであった。
水抽出物について得られた結果はそれ自体良好なものである。しかしながら、エラスターゼ活性阻害能を有する物質はペプチン等の多糖類であることが従来技術で知られており、また多糖類は一般にエタノールよりも水および１，３−ブチレングリコールを用いた方が効率良く抽出し得ることも知られている。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物は、本試験例で試験した水抽出物と同程度またはむしろそれよりも高く、エタノール抽出物よりも格段に優れたエラスターゼ活性を奏するものと予測される。
【００２８】
試験例３：活性酸素消去作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物（固形分０．１９％）の活性酸素消去作用を、ＳＯＤ様作用および抗酸化性試験の双方により評価した。
４−１：ＳＯＤ様作用
キサンチンとキサンチンオキシダーゼで発生させたＯ_２ ⁻によりＮＢＴを還元し、生成したフォルマザンの量を５６０ｎｍでの吸光度測定により定量してＳＯＤ様活性をＮＢＴ法で評価した。
結果は、実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物のＳＯＤ様作用が７６．０％であることを示した。
４−２：抗酸化性試験
紫色で５１７ｎｍに紫外部吸収を持つ安定なラジカル：ジフェニルピクリルヒドラジル（ＤＰＰＨ）を用い、このラジカルの示す紫色が抗酸化物質の作用で消失するのを測定することにより、活性酸素消去作用を評価した。
また比較として、水での抽出により製造したオリーブ果実抽出物およびエタノールでの抽出により製造したオリーブ果実抽出物を添加した場合についても同様の試験を行った。
結果は、実施例１で得たオリーブ果実抽出物の２倍希釈物が７５．０％の抗酸化性を有することを示した。
以上の結果より、ＳＯＤ様作用および抗酸化性試験のどちらの方法により評価した場合についても、実施例１で得たオリーブ果実抽出物は高い活性酸素消去作用を奏することが解る。
【００２９】
試験例４：コラゲナーゼ活性阻害作用の評価
実施例１で得たオリーブ果実抽出物のコラゲナーゼ活性阻害作用を評価した。
実施例１のオリーブ果実抽出物５０μＬ、０．１ｍｇ／ｍＬのコラゲナーゼタイプＩＶ（シグマ社製）５０μＬ、および０．３９ｍｇ／ｍＬのＰＺ−ｐｅｐｔｉｄｅ（ＢＡＣＨＥＭ Ｆｅｎｉｃｈｅｍｉｋａｌｉｅｎ ＡＧ製）４００μＬを混和し、３７℃で３０分間反応させた。反応溶液に、２５ｍＭクエン酸溶液１ｍＬを添加して反応を終了させた。この溶液にさらに酢酸エチル５ｍＬを添加して抽出し、遠心分離により酢酸エチル層を分離し、３２０ｎｍの吸光度を測定した。
結果は、オリーブ果実抽出物の代わりに蒸留水を添加したときの阻害作用コラーゲン分解量を１００とした場合に、１０．４であった。従って、実施例１のオリーブ果実抽出物はコラゲナーゼの活性を阻害し、コラーゲンの分解を大幅に抑制し得る。
【００３０】
試験例５：オリーブ果実抽出物配合ハンドクリームの製造
以下の基本成分に加え、実施例１のオリーブ果実抽出物をその他の成分の合計に対して３重量％配合して、ハンドクリームを得た。
基本成分：水、ミネラルオイル、ワセリン、グリセリン、水添ポリイソブテン、マイクロクリスタリンワックス、シクロメチコン、ラノリンアルコール、パラフィン、スクワラン、ホホバ油、オレイン酸デシル、オクチルドデカノール、ジステアリン酸アルミニウム、ステアリン酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、クエン酸、安息香酸塩、トコフェロール、ブチルヒドロキシアニソール、ジブチルヒドロキシトルエン、香料。
こうして製造したハンドクリームおよびオリーブ果実抽出物を含まない以外は同一の組成を有するハンドクリームを被験者の皮膚に１日１回塗布し、１０日後の塗布部の変化を潤い、張りおよび艶の３項目について観察した。
結果を表１に示す。表１の結果は、それぞれの項目について改善された被験者の数を示す。
【表１】

表１から解るように、本発明のオリーブ果実抽出物を配合したハンドクリームは、従来品を越える著しい美肌作用を奏する。
【００３１】
試験例６：オリーブ果実抽出物配合ボディーソープの製造
以下の基本成分に加え、実施例１のオリーブ果実抽出物をその他の成分の合計に対して２重量％配合して、ハンドクリームを得た。
基本成分：
ラウリル硫酸アンモニウム ８％
ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸ナトリウム ２％
椰子油脂肪酸アミドプロピルベタイン ７％
椰子油脂肪酸モノエタノールアミド ４％
エデト酸２ナトリウム ０．２％
安息香酸ナトリウム ０．２％
クエン酸 ０．２％
水 残部
こうして製造したボディーソープおよびオリーブ果実抽出物を含まない以外は同一の組成を有するボディーソープを被験者に１日１回使用させ、１０日後の皮膚の変化を潤い、張りおよび艶の３項目について観察した。
結果を表２に示す。表２の結果は、それぞれの項目について改善された被験者の数を示す。
【表２】

表２から解るように、本発明のオリーブ果実抽出物を配合したボディーソープは、従来品を越える著しい美肌作用を奏する。
【００３２】
【発明の効果】
本発明によれば、１，３−ジブチルエーテルで抽出することにより、ヒアルロニダーゼ活性阻害作用、エラスターゼ活性阻害作用、活性酸素消去作用、コラーゲン分解抑制作用等について、従来品と比較して格段に優れたオリーブ果実抽出物を提供することができる。係るオリーブ果実抽出物は、特に軟膏、クリーム、乳液、懸濁液、溶液等の外用薬に好ましく配合することができる。
【図面の簡単な説明】
【図１】図１は、本発明のオリーブ果実抽出物の製造方法を図示する流れ図である。[0001]
TECHNICAL FIELD OF THE INVENTION
The present invention relates to an olive fruit extract that is extracted from olive fruits and exhibits excellent physiological activity, and a method for producing the same.
[0002]
[Prior art]
Olives are plants of the Oleaceae family that originate from the Mediterranean coast, and have been cultivated for food and oil for a long time. The olive fruit usually grows from about October and becomes pale green, and when it has purple-red spots, it is a time suitable for processing into green pickles. Then, around November, the whole will become so-called live olives, which have a purple-black color, and will be suitable for salting. Ripe olive fruits around December contain about 15 to 30% of oil, and olive oil is pressed from the olive fruits at this time. The olive fruits and olive oil thus obtained are known to have various excellent effects such as reduction of arteriosclerosis, stomach ulcer and constipation, strengthening of bones, prevention of aging, and beautiful skin effect.
[0003]
Above all, olive oil is a vegetable oil containing various active ingredients such as oleic acid, provitamin A, vitamin B, vitamin Ks, polyphenols and the like. Effects of cancer and polyphenols on cancer development and promotion of bone formation based on provitamin A, vitamin D and vitamin K have been reported. Olive oil also has beautiful skin effects such as reducing rough skin, keeping the skin healthy, moisturizing the skin, protecting the skin, and preventing the skin from drying out, and is used in cosmetics and external medicines. ing.
[0004]
Further, as an olive fruit extract obtained from olive fruits, those obtained by extracting fruits and / or seeds of olive plants with water and / or an organic solvent are known (for example, see Patent Document 1). It has been reported that this extract has an active oxygen scavenging effect, a melanin production inhibitory effect and a tumor cell growth inhibitory / killing effect, and the solvent used for extraction imparts safety to the human body for the resulting extract. From the viewpoint of increasing the effect and increasing the action, it is considered desirable to use a mixed solvent of water and alcohol.
[0005]
[Patent Document 1]
JP 2001-181197 A
[Problems to be solved by the invention]
As described above, olive fruits contain various active ingredients that have beneficial effects on living organisms (these are generally referred to as “olive extracts”). However, the efficiency of separating and purifying these active ingredients from olive fruits and further concentrating them is currently low. There is a need for more efficient extraction of active ingredients from olive fruits, and to obtain olive fruit extracts in a form that is advantageous for incorporation into foods, beverages, pharmaceuticals, and topical medicines. large.
[0007]
The present invention has been made in view of the above problems, and an object thereof is to efficiently extract an active ingredient contained in olive fruits, and as a result, an olive fruit extract exhibiting excellent physiological activity. And a method of manufacturing the same.
[0008]
[Means for Solving the Problems]
The present inventors have conducted intensive studies, and as a result, by extracting olive fruits, particularly with a mixture of 1,3-dibutylene glycol and water, a hyaluronidase activity inhibitory effect, an elastase activity inhibitory effect, an active oxygen scavenging effect, collagen The present inventors have found that an olive fruit extract having remarkably superior properties as compared with conventional products can be obtained with respect to the decomposition inhibitory action and the like, and based on this, the present invention has been completed.
[0009]
Therefore, the present invention
Olive fruit extract obtained by extracting olive fruit with a mixture of 1,3-butylene glycol and water,
A cosmetic comprising the olive fruit extract, and an olive fruit extract obtained by extracting a collected olive fruit or olive fruit cake after oil extraction with a mixed solution of 1,3-butylene glycol and water. It relates to a manufacturing method.
[0010]
BEST MODE FOR CARRYING OUT THE INVENTION
Next, the present invention will be described in more detail with reference to the drawings. FIG. 1 is a flowchart illustrating one embodiment of the method for producing an olive fruit extract of the present invention.
[0011]
In the production of the olive fruit extract of the present invention, first, an olive fruit, which is a raw material of the olive fruit extract, and a mixture of 1,3-butylene glycol, which is an extraction solvent, and water are charged into an extraction container. There are various varieties of olives, such as Misson, Manzanillo, Nevadiro Blanco, Picual, Hojiblanca, Arbequina, and Niconica abraña Cranica abraña Mánica bráná zánánánánica or Manica nilica. ), Gordal, Francoisio, Moroiolo, Leccino, Corlatina, Ascolana Terena, etc., and the average of the fruits in each of these varieties. The weight and oil content are different, and the suitable applications are different from those for fruit processing, oil, To have. However, the olive fruit extract of the present invention can be produced from any variety of olives.
Also, the olive fruit as a raw material may be olive fruit cake after olive oil has been pressed, or frozen olive fruit may be used.
[0012]
As the extraction solvent, a 100% 1,3-butylene glycol solvent containing no other auxiliary solvent can be used. However, the extraction solvent can be a mixed solvent composed of water and 1,3-butylene glycol. When a mixed solvent is employed, its concentration is, for example, 30% by volume.
[0013]
After charging the olive fruit and the extraction solvent in the extraction container, extraction is then performed. The extraction can be performed at a slightly higher temperature than room temperature to promote the extraction action. For example, when the extraction temperature is 50 to 60 ° C., the extraction time is about 5 hours.
[0014]
After completion of the extraction, the olive fruit and the extract are separated. The separation of olive fruits can be performed by filtration. The obtained filtrate may be diluted to several times the whole amount if it is convenient for the subsequent solid content separation.
[0015]
Next, filtration is performed again to further separate the solid content contained in the extract. Prior to the solid content separation, it is preferable to add an adsorbent such as diatomaceous earth to the liquid to be filtered to adsorb and separate fine solid content. The amount of the adsorbent is not particularly limited, but is, for example, 10% by volume based on the liquid to be filtered.
[0016]
After the solid content is separated in this way, the obtained filtrate is sterilized. Sterilization can be performed by ordinary heat sterilization, and for example, pasteurization that is maintained at 80 to 90 ° C. for about 1 hour is preferable. Although high-temperature sterilization employing a temperature exceeding 100 ° C. can shorten the sterilization time, it is not a preferable method because it causes decomposition of the active ingredient contained in olive fruits.
[0017]
The olive fruit extract of the present invention is obtained by filtering the sterilized liquid again. This final filtration is preferably performed using a fine filter having a cutoff of, for example, 0.5 μm. By such filtration, the amount of solids contained in the olive fruit extract can be reduced to 0.5% or less.
[0018]
The olive fruit extract of the present invention thus produced exhibits many excellent physiological activities, but the most notable ones are an inhibitory action on hyaluronidase activity, an inhibitory action on elastase activity, a scavenging action on active oxygen, and an inhibitory action on collagen degradation. Each of these operations will be briefly described below.
[0019]
-Hyaluronidase activity inhibitory action Hyaluronic acid has functions such as water retention and flexibility, and is important for keeping skin moist. Hyaluronic acid is degraded by its hydrolyzing enzyme, hyaluronidase. By inhibiting the activity of hyaluronidase, it is possible to suppress the degradation of hyaluronic acid and to prevent a decrease in the moisturizing property, lubricity and flexibility of the skin.
[0020]
Elastase activity inhibitory action Elastin is an elastic tissue contained in the skin, and when it is decomposed, the skin gradually loses its elasticity and elasticity. Elastin degradation is carried out by elastase, which is activated by aging and by external and internal stimuli such as ultraviolet rays. Therefore, if the activity of elastin, which is a degrading enzyme of elastin, can be inhibited to suppress the degradation of elastin, the elasticity of the skin can be maintained and the skin can be kept firm and moist.
[0021]
-Reactive oxygen scavenging action Reactive oxygen is one of the external factors that cause skin inflammation and aging, and it also damages internal tissues and causes wrinkles. Therefore, in order to prevent skin aging and inflammation, elimination of active oxygen by an antioxidant or a radical scavenger is useful. Whether or not an active oxygen scavenging effect is exhibited can be determined from the presence or absence of SOD-like activity and other antioxidant tests.
[0022]
-Collagen degradation inhibitory action Collagen is a substance that has an important function in keeping the skin firm and elastic. However, when collagenase, which is a collagen-degrading enzyme, is activated by external stress such as ultraviolet rays or aging in a living body, the amount of collagen in the skin decreases, which causes wrinkles and loosening. If the activity of collagenase can be inhibited, the degradation of collagen can be suppressed and the skin can be kept healthy.
[0023]
The olive fruit extract of the present invention can be in various dosage forms. For example, it can be blended with foods, drinks, pharmaceuticals, and the like that are taken orally. Above all, it exhibits an excellent skin-beautifying effect, and is therefore preferably formulated into an external preparation directly applied to the skin, for example, an ointment, cream, emulsion, suspension, solution or the like. The compounding amount in these is, for example, 1 to 50% by weight.
[0024]
【Example】
The following examples illustrate the invention in more detail, but these examples are not intended to limit the invention to certain embodiments.
[0025]
Example 1: Production of olive fruit extract An olive fruit extract was produced as follows.
Charging: 100 g of frozen olive fruits and 1000 g of a 30% 1,3-butylene glycol aqueous solution were charged in an extraction container.
Extraction: The extraction vessel was heated to maintain the inside at 50-60 ° C. Extraction was performed at this temperature for 5 hours with stirring.
Olive fruit separation: After completion of the extraction, the olive fruit was removed, and 1000 g of a 30% aqueous solution of 1,3-butylene glycol was added to dilute the extract twice.
Solid separation: 200 g of diatomaceous earth (Radiolite # 200) was added to the diluted solution, and the mixture was stirred for 1 hour to adsorb fine solids. Thereafter, the diluent was filtered to separate the solid content and diatomaceous earth.
Sterilization: The filtrate was heated to 80 to 90 ° C. and sterilized by heating for 1 hour with stirring.
Final filtration: The sterilized filtrate was finally filtered using a 0.45 μm cut-off filter.
According to the above procedure, 1541.2 g of an olive fruit extract containing 0.38% of solids was obtained.
[0026]
Test Example 1: Evaluation of hyaluronidase activity inhibitory action Except that olive fruit extract obtained in Example 1 was replaced with water instead of a 30% 1,3-butylene glycol aqueous solution, the same as Example 1 was used. The olive fruit water extract obtained in the process was evaluated for its hyaluronidase activity inhibitory action. The reason for using water for the extraction is that when the olive fruit extract contains alcohol, it is impossible to measure the hyaluronidase activity.
0.2 mL of olive fruit water extract, 0.1 mL of hyaluronidase solution, Compound 48 / 800.2 mL, and 0.2 mL of potassium hyaluronate solution were mixed and reacted at 37 ° C., followed by 0.3 mL of 0.4N sodium hydroxide. Was added to stop the reaction. Then, the boric acid solution was added and mixed. The resulting solution was heated in a boiling water bath to inactivate the enzyme, cooled to room temperature on ice, added with 6 mL of p-DAB, allowed to stand at 37 ° C for 20 minutes, and then measured for absorbance at 585 nm for hyaluronan. The acid was quantified.
The result was the concentration of the extract required to inhibit the hyaluronidase activity by 50% (IC ₅₀ ), and was 0.318 mg / mL.
The results obtained for the water extract are in themselves good. However, it is known in the prior art that the substance having the ability to inhibit hyaluronidase activity is a polysaccharide such as peptin, and the polysaccharide is generally more efficient using water and 1,3-butylene glycol than ethanol. It is also known that it can be extracted. Therefore, the olive fruit extract of Example 1 is expected to exhibit hyaluronidase activity that is comparable to or higher than the water extract tested in this test example, and that is much better than the ethanol extract.
[0027]
Test Example 2: Evaluation of elastase activity inhibitory action Exactly the same as Example 1 except that instead of the olive fruit extract obtained in Example 1, water was used for extraction instead of an aqueous 30% 1,3-butylene glycol solution. The elastase activity inhibitory effect of the olive fruit water extract obtained in the process was evaluated. The reason why water was used for the extraction was that, as in Test Example 1, when the olive fruit extract contained alcohol, the elastase activity could not be measured.
50 μL of olive fruit water extract, 25 μL of 12 μg / mL human leukocyte-derived elastase (manufactured by ELASTIN PRODUCT CO. INC), and 25 μL of methoxy-succinyl-alanyl-alanyl-propyl valine-p-nitroanilide prepared to 8 mM, were mixed. The reaction was performed at 37 ° C. for 20 minutes. The absorbance at 405 nm of the solution after the reaction was measured, and the amount of nitroaniline produced was quantified.
The result was the concentration of the extract required to inhibit elastase activity by 50% (IC ₅₀ ), and was 11.8 mg / mL.
The results obtained for the water extract are in themselves good. However, it is known in the prior art that the substance having elastase activity inhibitory ability is a polysaccharide such as peptin, and the polysaccharide is generally more efficiently used with water and 1,3-butylene glycol than with ethanol. It is also known that it can be extracted. Thus, the olive fruit extract of Example 1 is expected to exhibit elastase activity that is comparable to or higher than the water extract tested in this test example, and that is significantly better than the ethanol extract.
[0028]
Test Example 3: Evaluation of active oxygen scavenging action The active oxygen scavenging action of a two-fold dilution (solid content 0.19%) of the olive fruit extract obtained in Example 1 was evaluated for both the SOD-like action and the antioxidant test. Was evaluated.
4-1: SOD-like action NBT was reduced by xanthine and O ₂ ⁻ generated by xanthine oxidase, and the amount of formazan produced was quantified by measuring absorbance at 560 nm, and the SOD-like activity was evaluated by the NBT method.
The results showed that the 2-fold dilution of the olive fruit extract obtained in Example 1 had a SOD-like effect of 76.0%.
4-2: Antioxidant test A stable radical having an ultraviolet absorption at 517 nm in a purple color: diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) is used, and the disappearance of the purple color of the radical by the action of an antioxidant is measured. Thereby, the active oxygen scavenging action was evaluated.
As a comparison, the same test was carried out when an olive fruit extract produced by extraction with water and an olive fruit extract produced by extraction with ethanol were added.
The results showed that a two-fold dilution of the olive fruit extract obtained in Example 1 had 75.0% antioxidant properties.
From the above results, it can be seen that the olive fruit extract obtained in Example 1 exerts a high active oxygen scavenging effect in both cases of evaluation by the SOD-like action and the antioxidant test.
[0029]
Test Example 4: Evaluation of collagenase activity inhibitory action The olive fruit extract obtained in Example 1 was evaluated for collagenase activity inhibitory action.
50 μL of the olive fruit extract of Example 1, 50 μL of 0.1 mg / mL collagenase type IV (manufactured by Sigma), and 400 μL of 0.39 mg / mL PZ-peptide (manufactured by BACHEM Fenichemikalian AG) were mixed, and the mixture was added at 37 ° C. The reaction was performed for 30 minutes. The reaction was terminated by adding 1 mL of a 25 mM citric acid solution to the reaction solution. The solution was further extracted by adding 5 mL of ethyl acetate, the ethyl acetate layer was separated by centrifugation, and the absorbance at 320 nm was measured.
The result was 10.4, assuming that the inhibitory action collagen degradation amount when distilled water was added instead of the olive fruit extract was 100. Therefore, the olive fruit extract of Example 1 can inhibit the activity of collagenase and significantly suppress the degradation of collagen.
[0030]
Test Example 5: Production of hand cream containing olive fruit extract In addition to the following basic components, the olive fruit extract of Example 1 was blended at 3% by weight based on the total amount of other components to obtain a hand cream.
Basic ingredients: water, mineral oil, petrolatum, glycerin, hydrogenated polyisobutene, microcrystalline wax, cyclomethicone, lanolin alcohol, paraffin, squalane, jojoba oil, decyl oleate, octyldodecanol, aluminum distearate, magnesium stearate, magnesium sulfate Magnesium, citric acid, benzoate, tocopherol, butylhydroxyanisole, dibutylhydroxytoluene, fragrance.
The hand cream thus prepared and the hand cream having the same composition except that it does not contain the olive fruit extract are applied to the skin of the subject once a day, and after 10 days, the change of the applied area is moistened, and the three items of tension and gloss are applied. Was observed.
Table 1 shows the results. The results in Table 1 show the number of subjects who improved for each item.
[Table 1]

As can be seen from Table 1, the hand cream containing the olive fruit extract of the present invention has a remarkably beautiful skin effect exceeding that of the conventional product.
[0031]
Test Example 6: Production of body soap containing olive fruit extract In addition to the following basic components, the olive fruit extract of Example 1 was blended at 2% by weight based on the total of other components to obtain a hand cream.
Basic ingredients:
8% ammonium lauryl sulfate
Sodium polyoxyethylene lauryl ether sulfate 2%
Coconut oil fatty acid amidopropyl betaine 7%
Coconut oil fatty acid monoethanolamide 4%
Edetate disodium 0.2%
Sodium benzoate 0.2%
0.2% citric acid
Water balance The body soap having the same composition except that the body soap and the olive fruit extract thus produced are not used is used by the test subject once a day. Observed.
Table 2 shows the results. The results in Table 2 show the number of subjects who improved for each item.
[Table 2]

As can be seen from Table 2, the body soap containing the olive fruit extract of the present invention has a remarkably beautiful skin effect exceeding conventional products.
[0032]
【The invention's effect】
According to the present invention, by extracting with 1,3-dibutyl ether, the hyaluronidase activity inhibitory action, elastase activity inhibitory action, active oxygen scavenging action, collagen degradation inhibitory action, etc. are significantly superior to conventional products. An olive fruit extract can be provided. Such an olive fruit extract can be preferably incorporated into an external preparation such as an ointment, a cream, an emulsion, a suspension, or a solution.
[Brief description of the drawings]
FIG. 1 is a flow chart illustrating a method for producing an olive fruit extract of the present invention.

Claims (3)

オリーブ果実を１，３−ブチレングリコールと水の混合液で抽出して得られることを特徴とするオリーブ果実抽出物。An olive fruit extract obtained by extracting olive fruits with a mixture of 1,3-butylene glycol and water. 請求項１記載のオリーブ果実抽出物を配合してなる化粧料。A cosmetic comprising the olive fruit extract according to claim 1. 採取されたオリーブ果実または搾油後のオリーブ果実粕を１，３−ブチレングリコールと水との混合液で抽出することからなるオリーブ果実抽出物の製造方法。A method for producing an olive fruit extract, comprising extracting a collected olive fruit or olive fruit cake after oil extraction with a mixed solution of 1,3-butylene glycol and water.

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