KR102106440B1 - 블루베리 및 흑미 추출물 배양 유산균을 포함하는 피부상태 개선용 조성물 - Google Patents
블루베리 및 흑미 추출물 배양 유산균을 포함하는 피부상태 개선용 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 블루베리 및 흑미 추출물 배양 유산균을 포함하는 피부상태 개선용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 식품 조성물; 피부상태 개선용 화장료 조성물; 피부염의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물 및 상기 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체의 피부상태를 개선시키는 방법에 관한 것이다.
본 발명의 발효 추출물은 세포 독성을 나타내지 않으면서도, 미세먼지를 비롯한 환경성 인자에 의해 유도된 염증성 사이토카인인 IL-6 및 IL-1β의 분비를 감소시켜 피부염의 예방 또는 개선 효과가 있으며, 상처 치유 효과를 통해 피부상태를 개선시킬 수 있다.
본 발명의 발효 추출물은 세포 독성을 나타내지 않으면서도, 미세먼지를 비롯한 환경성 인자에 의해 유도된 염증성 사이토카인인 IL-6 및 IL-1β의 분비를 감소시켜 피부염의 예방 또는 개선 효과가 있으며, 상처 치유 효과를 통해 피부상태를 개선시킬 수 있다.
Description
본 발명은 블루베리 및 흑미 추출물 배양 유산균을 포함하는 피부상태 개선용 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 식품 조성물; 피부상태 개선용 화장료 조성물; 피부염의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물 및 상기 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체의 피부상태를 개선시키는 방법에 관한 것이다.
피부는 노화 등의 내재적 요인 또는 자외선, 외부 오염 물질 및 스트레스 등 외부적 요인에 의해 점점 손상되며, 이러한 요인들로부터 피부를 보호하는 기능이 약화됨으로써 세포 보호 및 증식 능력이 떨어지게 된다. 이 경우 개체에서는 손상된 피부에 대한 재생 과정을 시작하는데, 이러한 피부 재생 과정은 손상에 대한 피부 조직의 반응으로, 피부가 손상된 후 2일부터 길게는 3주까지 지속된다.
한편, 최근에는 외부의 환경적 요인으로 인한 피부 손상 문제가 점점 커지고 있으며, 이러한 피부 손상을 유발하는 대표적인 환경적 요인으로는 최근 급증한 미세먼지가 있다. 먼지는 입자의 크기에 따라 50㎛ 이하인 총먼지(TSP, Total Suspended Particles)와 입자크기가 매우 작은 미세먼지(PM, Particulate Matter)로 구분되며, 미세먼지는 다시 지름이 10㎛보다 작은 미세먼지(PM10)와 지름이 2.5㎛보다 작은 초미세먼지(PM2.5)로 구분된다. 미세먼지가 체내로 들어오면 면역세포가 먼지를 제거 및 배출하는 작용을 하며 그 부작용으로 염증을 수반할 수 있다. 미세먼지는 기도, 기관지, 폐 등 호흡기뿐만 아니라 피부의 모공 속까지 침투하여 피부를 자극하게 되고 트러블 및 염증을 유발하여 피부 상태를 더욱 악화시키고, 나아가 아토피성 피부염 등의 만성적 피부 질환에도 부정적인 영향을 줄 수 있다.
현재까지 염증원의 제거, 염증에 의한 반응 및 증상을 감소시키는 항염 목적으로 이용되고 있는 물질로는 프루페나믹산(flufenamic acid), 이부프로펜(ibuprofen), 벤지다민(benzydamine), 인도메타신(indomethacin) 등 비스테로이드제, 프레드니솔론(prednisolone), 덱사메타손(dexamethasone) 등과 같은 스테로이드제 등이 있으나, 피부에 대한 안전성 면에서 대부분 문제점을 안고 있어서 그 사용이 제한되고 있다.
한편, 블루베리(blueberry)는 월귤나무의 일종으로 미국 타임지가 선정한 10대 슈퍼푸드 중 하나로 알려져 있으며, 안토시아닌을 다량 함유되어 있어 항산화 효과 및 노화 억제, 눈 건강의 개선 등의 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 또한, 검은 쌀인 흑미(black Rice) 내에도 안토시아닌이 포함되어 있어 항산화 및 항암 효과가 있는 것으로 알려져 있다. 이에 블루베리와 흑미 추출물을 포함하는 다양한 목적의 건강기능식품 등이 알려져 있으나(한국 등록공보 10-0491106 B1), 블루베리 및 흑미의 복합 발효 추출물이 갖는 항염 활성에 대해서는 알려진 바가 없다.
이에, 본 발명자들은 미세먼지 등 외부적 요인으로 유발된 피부 염증 및 아토피성 피부염 등의 질환을 개선하고, 나아가 손상된 피부 조직의 회복능을 증가시켜 피부 상태 개선에 도움이 되는 물질을 발굴하고자 예의 노력한 결과, 블루베리 및 흑미를 락토바실러스 속 미생물로 발효시킨 추출물이 독성이 없어 안전하면서도, 우수한 항염 활성 및 상처 치유 효과를 나타냄을 최초로 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 하나의 목적은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 하나의 목적은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부염의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 하나의 목적은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체의 피부상태를 개선시키는 방법을 제공하는 것이다.
이를 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 한편, 본 발명에서 개시된 각각의 설명 및 실시형태는 각각의 다른 설명 및 실시 형태에도 적용될 수 있다. 즉, 본 발명에서 개시된 다양한 요소들의 모든 조합이 본 출원의 범주에 속한다. 또한, 하기 기술된 구체적인 서술에 의하여 본 출원의 범주가 제한된다고 볼 수 없다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 하나의 양태는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 식품 조성물을 제공한다.
본 발명의 블루베리 및 흑미 발효 추출물은 락토바실러스 속 미생물로 발효시킨 블루베리 및 흑미의 복합 추출물로서, "블루베리 및 흑미 추출물 배양 유산균"이라는 용어와 혼용될 수 있다. 본 발명의 블루베리 및 흑미 발효 추출물은 세포 독성을 나타내지 않아 안전하면서도 미세먼지를 비롯한 환경성 인자에 의해 유도된 염증성 사이토카인의 분비를 감소시켜 피부염을 개선하고 우수한 상처 치유 효과를 나타낸다. 블루베리 및 흑미의 복합 발효 추출물이 갖는 이러한 항염 효과 및 상처 치유 효과는 지금까지 알려진바가 없으며, 본 발명을 통해 최초로 개발되었다는 점에서 그 의의가 매우 크다.
본 발명에서 용어 "블루베리(blueberry)"는 쌍떡잎식물 진달래목 진달래과의 식물을 의미하는 것으로, 이는 북아메리카가 원산지로 형태가 포도와 비슷하다. 안토시아닌, 펙틴 등을 주로 포함하며, 항산화 효과가 있고 눈 망막의 로돕신 재합성, 모세혈관 보호 작용 등이 알려져 있다.
본 발명에서 용어 "흑미(black rice)"는 안토시아닌 색소를 포함하여 표면이 검은색을 띄는 쌀을 의미하는 것으로, 안토시아닌 외에 비타민 B, 철, 아연 및 셀레늄 등의 무기염류를 다량 포함하고 있다. 흑미는 체내의 활성산소를 제거하여 항노화, 항산화 효과를 나타내고 심장 질환, 뇌졸중 및 각종 성인 병의 예방에 도움이 되는 것으로 알려져 있다.
본 발명에서 용어 "발효"는 미생물이 가지고 있는 효소를 이용하여 유기물을 분해시키는 것을 의미한다. 본 발명에서는 블루베리 및 흑미의 추출물을 식용 가능한 미생물을 이용하여 발효시킬 수 있으며, 상기 미생물은 유산균, 구체적으로 락토바실러스 속(Lactobacillus sp .) 미생물, 보다 구체적으로 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)일 수 있다. 본 발명에서 상기 유산균은 발효를 위한 균주로서 이용되기도 하지만, 최종 산물인 추출물 내에 포함되어 기능하기도 한다.
본 발명에서 용어 "추출물"은 목적하는 물질을 다양한 용매에 침지한 다음, 상온, 저온 또는 가온 상태에서 일정시간 동안 추출하여 수득한 액상성분, 상기 액상성분으로부터 용매를 제거하여 수득한 고형분 등의 결과물을 의미한다. 뿐만 아니라, 상기 결과물의 희석액, 이들의 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이들의 조정제물, 정제물 등을 모두 포함하는 것으로 포괄적으로 해석될 수 있다.
본 발명에서 상기 추출물은 천연, 잡종 또는 변종식물로부터 제한없이 추출될 수 있으며, 물(정제수), 탄소수 1 내지 4의 알코올 또는 이들의 혼합용매를 이용하여 추출하여 수득될 수 있다. 또한, 상기 추출물을 수득하기 위한 방법은 블루베리 또는 흑미 추출물을 수득할 수 있는 한 특별히 이에 제한되지 않으나, 구체적으로는 상기 블루베리 또는 흑미를 상기 용매에 침지하고 상온에서 추출하는 냉침추출법, 가열추출법, 초음파를 가하여 추출하는 초음파추출법, 환류 냉각기를 이용한 환류추출법 등의 방법을 사용할 수 있다.
본 발명에서 용어 "발효 추출물"은 상기 블루베리 및 흑미 추출물을 발효시켜 생성된 유용한 물질 자체뿐만 아니라, 발효 균주 및 발효물이 공존하는 발효 균주 배양 배지, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 원심분리하여 제거한 발효물, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 여과시킨 발효물, 상기 배양 배지로부터 발효 균주를 멸균처리하고 이를 여과시킨 발효물, 상기 발효물을 희석시킨 희석액, 상기 발효물을 건조시킨 건조물 등을 모두 포함할 수 있다.
본 발명에 있어서, 상기 발효 추출물은 블루베리 및 흑미 추출물을 발효시킨 블루베리 및 흑미의 복합 발효 추출물일 수 있다. 구체적으로, 블루베리 및 흑미의 복합 발효 추출물은 락토바실러스 속 미생물, 보다 구체적으로는 미생물은 락토바실러스 플란타룸에 의해 발효된 것일 수 있다. 본 발명에서 상기 발효 추출물은 "블루베리 및 흑미의 복합 발효 추출물"과 혼용될 수 있다.
본 발명에서 용어 "피부상태 개선"은 피부 세포, 조직에서 나타날 수 있는 각종 트러블과 염증 반응 등이 완화 또는 개선되거나, 손상됨 피부조직의 재생 및 회복능이 증가되는 것을 모두 포함하는 것으로, 구체적으로 피부염의 완화 또는 상처 치유일 수 있으며, 보다 구체적으로 아토피 피부염의 증상 개선 및 치료일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 보다 더 구체적으로, 상기 피부염의 완화는 염증성 사이토카인 IL-6 및 IL-1β의 분비를 감소시키는 것일 수 있으며, 상기 상처 치유는 미세먼지에 의해 감소된 상처 회복능을 증가시키는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 일 실시예에서는, 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 처리 농도에 의존적으로 IL-6와 IL-1β 분비량이 감소하는 것을 확인하였고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 1 μg/mL의 저농도로 처리한 경우 대조군(정상세포)과 동일한 수준으로 상처 회복능이 증가된 것을 확인하였다.
본 발명에서 용어 "식품"은 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강기능(성)식품류 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다. 상기 식품은 공지의 제조방법에 따라 정제, 과립, 분말, 캅셀, 액상의 용액 및 환 등의 제형으로 제조할 수 있으며, 본 발명에 따른 발효 추출물의 함량은 제형에 따라 식품 조성물 총 중량을 기준으로 0.001 중량% 내지 100 중량%로 조절할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 블루베리 및 흑미 발효 추출물 또는 이로부터 유래된 화합물을 유효성분으로 포함하는 외에는 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며, 통상의 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 포함할 수 있으며, 이외에 식품학적으로 허용 가능한 식품보조첨가제를 포함할 수 있다.
상기 "식품보조첨가제"란 식품에 보조적으로 첨가될 수 있는 구성요소를 의미하며, 각 제형의 건강기능식품을 제조하는데 첨가되는 것으로서 당업자가 적절히 선택하여 사용할 수 있다. 식품보조첨가제의 예로는 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 충진제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등이 포함되지만, 상기 예들에 의해 본 발명의 식품보조첨가제의 종류가 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 식품 조성물에는 건강기능(성)식품이 포함될 수 있다. 상기 "건강기능(성)식품"은 특정 보건용 식품(food for special health use, FoSHU)와 동일한 용어로, 영양 공급 외에도 생체조절기능이 효율적으로 나타나도록 가공된 의학, 의료효과가 높은 식품을 의미한다. 상기 "기능(성)"은 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 당 업계에서 통상적으로 사용되는 방법에 의하여 제조가능하며, 상기 건강기능식품의 제조시 당 업계에서 통상적으로 첨가하는 원료 및 성분을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 상기 건강기능식품의 제형 또한 식품으로 인정되는 제형이면 제한 없이 제조될 수 있다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 다양한 형태의 제형으로 제조될 수 있으며, 일반 약품과는 달리 식품을 원료로 하여 약품의 장기 복용 시 발생할 수 있는 부작용 등이 없으며, 휴대성이 뛰어난 장점이 있다.
본 발명의 건강기능식품이 취할 수 있는 형태에는 제한이 없으며, 통상적인 의미의 식품을 모두 포함할 수 있고, 기능성 식품 등 당업계에 알려진 용어와 혼용 가능하다. 아울러 본 발명의 건강기능식품은 당업자의 선택에 따라 식품에 포함될 수 있는 적절한 기타 보조성분과 공지의 첨가제를 혼합하여 제조할 수 있다. 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 본 발명에 따른 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 주성분으로 하여 제조한 즙, 차, 젤리 및 주스 등에 첨가하여 제조할 수 있다. 또한 동물을 위한 사료로 이용되는 식품도 포함한다.
또한, 본 발명의 건강기능식품 조성물은 생리학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다. 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 않으며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 또한, 상기 건강기능식품 조성물은 식품 조성물에 통상 사용되어 냄새, 맛, 시각 등을 향상시킬 수 있는 추가 성분을 제한없이 포함할 수 있으며, 식품의 종류에 따라 선별되고 적절한 양으로 사용될 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 다른 하나의 양태는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부상태 개선용 화장료 조성물을 제공한다. 상기 블루베리, 흑미, 발효, 추출물 및 피부상태 개선은 전술한 바와 같다.
본 발명에 있어서 상기 "화장료 조성물"은 용액, 외용연고, 크림, 폼, 영양화장수, 유연화장수, 팩, 유연수, 유액, 메이크업베이스, 에센스, 비누, 액체 세정료, 입욕제, 선 스크린크림, 선오일, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션, 패취 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형으로 제조할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명의 화장료 조성물은 일반 피부 화장료에 배합되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체를 1 종 이상 추가로 포함할 수 있으며, 통상의 성분으로 예를 들면 유분, 물, 계면활성제, 보습제, 저급 알콜, 증점제, 킬레이트제, 색소, 방부제, 향료 등을 적절히 배합할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 화장품학적으로 허용 가능한 담체는 제형에 따라 다양하다.
본 발명의 제형이 연고, 페이스트, 크림 또는 젤인 경우에는, 담체 성분으로서 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화아연 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는, 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록사이드, 칼슘 실케이트, 폴리아미드 파우더 또는 이들의 혼합물이 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진제를 포함할 수 있다.
본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되며, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알콜, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일이 이용될 수 있으며, 특히, 목화씨 오일, 땅콩 오일, 옥수수 배종 오일, 올리브오일, 피마자 오일 및 참깨 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는, 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알콜, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 제형이 비누인 경우에는 담체 성분으로서 지방산의 알칼리 금속염, 지방산 헤미에스테르 염, 지방산 단백질 히드롤리제이트, 이세티오네이트, 라놀린 유도체, 지방족 알콜, 식물성 유지, 글리세롤, 당 등이 이용될 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물은 블루베리 및 흑미 발효 추출물 이외에 통상적으로 이용되는 보조제 예컨대 친수성 또는 친지성 겔화제, 친수성 또는 친지성 활성제, 보존제, 항산화제, 용매, 방향제, 충전제, 차단제, 안료, 흡취제 및 염료 등을 함유할 수 있다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는, 피부염의 예방 또는 치료용 의약외품 조성물을 제공한다. 상기 블루베리, 흑미, 발효, 추출물 및 피부상태 개선은 전술한 바와 같다.
본 발명에 있어서 상기 "의약외품 조성물"은 블루베리 및 흑미 발효 추출물 이외에 필요에 따라 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더욱 포함할 수 있다. 상기 약학적으로 허용 가능한 담체, 부형제 또는 희석제는 본 발명의 효과를 해하지 않는 한 제한되지 않으며, 예를 들어 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제, 윤활제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 포함할 수 있다.
상기 "약학적으로 허용 가능한 담체"는 생물체를 자극하지 않으면서, 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 활성 및 특성을 저해하지 않는 담체, 부형제 또는 희석제를 의미할 수 있다. 본 발명에 사용 가능한 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되고 약학적으로 허용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충식염수, 알부민 주사 용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.
약학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 상기 의약외품 조성물은 경구 또는 비경구의 여러 가지 제형일 수 있다. 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 구체적으로, 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 액체 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 의약외품 조성물은 소독 청결제, 샤워폼, 연고액, 물티슈, 코팅제 등을 예시할 수 있으나 이에 제한되는 것이 아니며, 의약외품의 제제화 방법, 용량, 이용방법, 구성성분 등은 기술분야에 공지된 통상의 기술로부터 적절히 선택될 수 있다.
본 발명에서 용어 "예방"은 본 발명의 조성물을 섭취하거나 투여하여 피부염 또는 피부 손상의 진행을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미한다.
본 발명에서 용어 "치료"는 본 발명의 조성물을 섭취하거나 투여하여 피부염, 보다 구체적으로는 아토피성 피부염 등 피부 염증성 질환을 호전시키거나 사라지게 하는 모든 행위를 의미한다.
상기 목적을 달성하기 위한 본 발명의 또 다른 하나의 양태는 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 개체에 투여하는 단계를 포함하는, 개체의 피부상태를 개선시키는 방법을 제공한다. 상기 블루베리, 흑미, 발효, 추출물 및 피부상태 개선은 전술한 바와 같다.
본 발명에서 용어 "개체"는 피부 염증이 발생하였거나 발생할 가능성이 있는, 피부 손상 증상이 있는 인간을 포함한 쥐, 생쥐, 가축 등의 모든 동물, 보다 구체적으로는 포유동물을 의미할 수 있다.
본 발명에서 용어 "투여"는 어떠한 적절한 방법으로 환자에게 본 발명의 조성물을 도입하는 것을 의미하며, 상기 조성물의 투여 경로는 목적 조직에 도달할 수 있는 한 어떠한 일반적인 경로를 통하여 투여될 수 있다. 구체적으로, 복강 내 투여, 정맥 내 투여, 근육 내 투여, 피하 투여, 피내 투여, 경구 투여, 국소 투여, 비내 투여될 수 있고, 피부염의 완화 및 상처 치유 활성을 갖는 본 발명 조성물의 특성상, 상기 조성물은 피부에 도포하여 투여될 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.
본 발명의 발효 추출물은 세포 독성을 나타내지 않으면서도, 미세먼지를 비롯한 환경성 인자에 의해 유도된 염증성 사이토카인인 IL-6 및 IL-1β의 분비를 감소시켜 피부염의 예방 또는 개선 효과가 있으며, 상처 치유 효과를 통해 피부상태를 개선시킬 수 있다.
도 1은 HaCaT 세포에 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도별로 처리하여 세포 생존율을 확인한 결과이다. 각 값은 평균 ± 표준편차로 나타내었다.
도 2는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도별로 처리하여 항알러지 관련 염증성 사이토카인인 IL-6와 IL-1β를 측정한 결과이다. ### 정상세포 대비 P<0.001; *** 대조군 대비 p<0.001.
도 3은 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 세포 생존율을 확인한 결과이다.
도 4는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 IL-6 분비량을 확인한 결과이다.
도 5는 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도별로 처리하여 항알러지 관련 염증성 사이토카인인 IL-6와 IL-1β를 측정한 결과이다. ## 정상 세포 대비 P<0.01, ### 정상 세포 대비 P<0.001; * 대조군 대비 p < 0.05.
도 6은 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 세포 생존율을 확인한 결과이다.
도 7은 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 IL-6 분비량을 확인한 결과이다. ### 정상 세포 대비 P<0.001; *** 대조군 대비 p < 0.001.
도 8은 HaCaT 세포에 TNF-α(0.1 ng/mL)+IFN-γ(0.1 ng/mL) 또는 미세먼지(500 μg/mL)를 처리한 경우, 대조군(정상세포) 대비 상처 회복능이 저하됨을 확인한 결과를 나타낸 분석 사진이다.
도 9는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 상처를 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도 별로 처리할 경우 상처 치유효과가 있는지를 하기 위한 생체외 상처 치유 분석 사진이다.
도 10은 HaCaT 세포에 미세먼지(500 μg/mL)를 처리하여 상처를 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도 별로 처리할 경우 상처 치유효과가 있는지를 확인하기 위한 생체외 상처 치유 분석 사진이다.
도 2는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도별로 처리하여 항알러지 관련 염증성 사이토카인인 IL-6와 IL-1β를 측정한 결과이다. ### 정상세포 대비 P<0.001; *** 대조군 대비 p<0.001.
도 3은 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 세포 생존율을 확인한 결과이다.
도 4는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 염증 반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 IL-6 분비량을 확인한 결과이다.
도 5는 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도별로 처리하여 항알러지 관련 염증성 사이토카인인 IL-6와 IL-1β를 측정한 결과이다. ## 정상 세포 대비 P<0.01, ### 정상 세포 대비 P<0.001; * 대조군 대비 p < 0.05.
도 6은 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 세포 생존율을 확인한 결과이다.
도 7은 HaCaT 세포에 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리하여 염증반응을 유도하고, 블루베리 추출물, 흑미 추출물, 및 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)을 처리하여 IL-6 분비량을 확인한 결과이다. ### 정상 세포 대비 P<0.001; *** 대조군 대비 p < 0.001.
도 8은 HaCaT 세포에 TNF-α(0.1 ng/mL)+IFN-γ(0.1 ng/mL) 또는 미세먼지(500 μg/mL)를 처리한 경우, 대조군(정상세포) 대비 상처 회복능이 저하됨을 확인한 결과를 나타낸 분석 사진이다.
도 9는 HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리하여 상처를 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도 별로 처리할 경우 상처 치유효과가 있는지를 하기 위한 생체외 상처 치유 분석 사진이다.
도 10은 HaCaT 세포에 미세먼지(500 μg/mL)를 처리하여 상처를 유도하고, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 농도 별로 처리할 경우 상처 치유효과가 있는지를 확인하기 위한 생체외 상처 치유 분석 사진이다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명의 구성 및 효과를 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.
실시예
1: 세포 배양
각질 형성 세포주인 HaCaT 세포는 한국세포주은행 (Seoul National University, Seoul, Korea)에서 구입하였다. HaCaT 세포는 10% FBS (fetal bovine serum) 및 1% 페니실린-스트렙토마이신 (PS)을 포함하는 고글루코스 DMEM (Thermo Sientific, Massachusetts, USA)에서 배양하였다.
실시예
2: 통계 처리
각 데이터는 평균 ± 표준편차로 나타내었고, 유의적인 차이는 ANOVA에 대한 검정법과 unpared t-test에 의한 검정법을 이용하였다. 모든 테스트는 P value 값이 0.05 이하일 경우 유의성이 있는 것으로 표시하였다.
실시예
3:
블루베리
및
흑미
발효 추출물 처리에 따른 세포독성 평가
블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)의 세포독성 측정을 위해 HaCaT 세포주를 3Х105/mL로 96 well에 분주하고 24시간 동안 안정화시켰다. 상기 추출물을 1, 10, 100, 250, 500 μg/mL의 농도별로 각각 처리하고 24시간 동안 CO2배양기에 배양하였다. 이후, 배양액을 버리고 PBS로 세척한 후 MTT 시약(0.5 mg/mL)을 처리하여 2시간 동안 CO2배양기에 두었다. MTT 시약을 버리고 DMSO를 처리하여 다시 30분 동안 CO2배양기에 두었다가 570 nm 파장에서 마이크로스펙트로포토미터로 분석하였다.
그 결과, 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 최고 처리 농도인 500 μg/ml로 처리한 경우에도 HaCaT 세포주의 세포 생존율이 대조군과 유사하게 약 100%에 해당함을 확인하였다(도 1). 즉, 이는 본 발명의 발효 추출물이 세포독성을 나타나지 않는 안전한 물질임을 나타내는 것이다.
실시예
4:
블루베리
및
흑미
발효 추출물 처리에 따른 염증성 사이토카인 측정
환경성 인자 자극으로 유도된 염증성 사이토카인 분비량에 대한 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 효과를 평가하고자 하였다. 구체적으로, 염증성 사이토카인인 IL-6와 IL-1β 측정을 위해 HaCaT 세포를 2Х105/mL로 48 well에 분주하고 24시간 동안 안정화시켰다. 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 1, 10, 100, 250, 500 μg/mL의 농도별로 각각 처리하고, 한 시간 후 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL) 또는 미세먼지 (500 μg/mL)로 활성화시켜 24시간 동안 CO2배양기에 배양하였다. 이후 각각의 배양액을 얻어 농도별로 희석한 뒤 제조사의 지시에 따라 ELISA를 수행하였으며, 450nm 파장에서 마이크로스펙트로포토미터로 분석하였다.
그 결과, 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 처리에 의한 우수한 효과를 다음과 같이 확인할 수 있었다.
구체적으로, 먼저 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)로 활성화 시킨 군에서 IL-6와 IL-1β 분비량이 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 처리 농도에 의존적으로 감소하는 것을 확인하였다(도 2).
다음으로 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)의 시너지 효과를 확인하기 위하여, 블루베리 단독 추출물 및 흑미 단독 추출물과 비교하였다. 그 결과, 모든 군에서 세포 생존율은 우수하였으며(도 3), TNF-α 및 IFN-γ에 의해 증가된 IL-6 분비량은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 처리한 군에서 특히 현저하게 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 4).
한편, 미세먼지(500 μg/mL)로 활성화시킨 군에서도 블루베리 및 흑미 발효 추출물의 처리에 따라 IL-6 분비량이 감소하는 것을 확인하였다(도 5).
또한, 다음으로 블루베리 및 흑미 발효 추출물(블루베리 흑미 유산균)의 시너지 효과를 확인하기 위하여, 블루베리 단독 추출물 및 흑미 단독 추출물과 비교하였다. 그 결과, 모든 군에서 세포 생존율은 우수하였으며(도 6), 미세먼지(PM2.5)에 의해 증가된 IL-6 분비량은 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 처리한 군에서 특히 현저하게 감소하는 것을 확인할 수 있었다(도 7).
이를 종합하면, 본 발명의 발효 추출물이 미세먼지를 비롯한 환경성 인자 자극으로 유도된 피부염에 대해 예방 또는 개선 효과가 있음을 나타낸다.
실시예 5: 블루베리 및 흑미 발효 추출물 처리에 따른 세포 이동 분석
블루베리 및 흑미 발효 추출물 처리에 따른 치유 효과가 있는지 여부를 확인하고자 하였다. 구체적으로, 접종된 HaCaT 세포 세포 층에 상처를 내고 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 1, 10, 100, 250, 500 μg/mL의 농도별로 각각 처리하고, 한 시간 후 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL) 또는 미세먼지 (500 μg/mL)로 활성화시켜 Incucyte Zoom (Essen Bioscience, Michigan, USA)에서 2시간 간격으로 스캔하면서 24시간 동안 배양하였다. 배지만으로 세포를 배양한 경우를 대조군으로 사용하였다.
그 결과, HaCaT 세포에 TNF-α(0.1 ng/mL)+IFN-γ(0.1 ng/mL) 또는 미세먼지(500 μg/mL)를 처리한 경우, 대조군(정상세포) 대비 상처 회복능이 저하됨을 확인하였다(도 8).
반면, HaCaT 세포에 TNF-α(1 ng/mL)+IFN-γ(1 ng/mL)를 처리한 군에 대해 본 발명의 발효 추출물을 처리한 경우, 1 μg/mL 농도로 처리시에도 정상 대조군 수준으로 상처 회복능이 증가된 것을 확인하였다(도 9). 또한, 미세먼지(PM2.5, 500 μg/mL)를 처리한 군에 대해 본 발명의 발효 추출물을 처리한 경우에도 농도 의존적으로 상처 회복능이 증가됨을 확인하였다(도 10).
즉, 이는 본 발명의 발효 추출물이 상처 치유 효과를 통해 피부상태를 개선시킬 수 있음을 나타낸다.
이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.
Claims (9)
- 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는 상처 개선용 식품 조성물로서, 상기 블루베리 및 흑미 발효 추출물은 블루베리 및 흑미의 복합 추출물을 유산균으로 발효시켜 제조된 것인, 식품 조성물.
- 제1항에 있어서, 상기 발효는 락토바실러스 속(Lactobacillus sp .) 미생물에 의해 수행되는 것인, 조성물.
- 제2항에 있어서, 상기 락토바실러스 속 미생물은 락토바실러스 플란타룸(Lactobacillus plantarum)인 것인, 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 포함하는 상처 개선용 화장료 조성물로서, 상기 블루베리 및 흑미 발효 추출물은 블루베리 및 흑미의 복합 추출물을 유산균으로 발효시켜 제조된 것인, 화장료 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 블루베리 및 흑미 발효 추출물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 단계를 포함하는 개체의 상처를 치유하는 방법으로서, 상기 블루베리 및 흑미 발효 추출물은 블루베리 및 흑미의 복합 추출물을 유산균으로 발효시켜 제조된 것인, 방법.
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| KR102283096B1 (ko) * | 2020-04-02 | 2021-07-29 | 주식회사 휴먼피부임상시험센터 | 블루베리 및 흑미 추출물의 유산균 발효물을 포함하는 미세먼지에 의한 피부 염증 예방 또는 개선용 화장료 조성물 |
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