JP2003501418A - 細胞死を阻害するための組成物および方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 細胞死、特にアポトーシス細胞死を阻害する際に有効である、化合物、この化合物またはその薬学的に受容可能な塩を薬学的に受容可能なキャリア中に含む薬学的組成物、ならびにこの化合物および組成物の使用方法、この組成物の製造方法、および細胞死を阻害する方法が記載される。この組成物は、発作または心筋梗塞、外傷、神経変性、および炎症などから生じるような、虚血を含む細胞死に関連する傷害の予防および処置のために、使用され得る。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 （発明の分野） 本発明は、細胞死（例えば、ニューロン細胞死および心筋細胞死）を阻害する
ための化合物および方法に関する。この化合物およびその薬学的組成物は、アポ
トーシス細胞死において特に有効であり、従って、虚血、外傷、神経変性および
炎症に関連する細胞死から細胞を保護するために使用され得る。

【０００２】 （参考文献）

【０００３】

【表１】 （発明の背景） アポトーシスは、虚血性障害（代表的には、発作、心筋梗塞および再灌流障害
の場合に生じるようなもの）と関連している（Ｗａｌｔｏｎら、１９９７；Ｍａ
ｃＭａｎｕｓら、１９９３）。アポトーシスはまた、免疫反応性状態および免疫
変性状態ならびに種々の神経変性障害にも関連する。実験的緑内障における網膜
神経節細胞死の機構に関する最近の研究はまた、アポトーシスによりその細胞が
死ぬことを示す（Ｎｉｃｋｅｌｌｓ、１９９６；Ｇａｒｃｉａ−Ｖａｌｅｎｚｕ
ｅｌａら、１９９５；Ｌａｑｕｉｓら、１９９８）。

【０００４】 アポトーシスは、プログラムされた細胞死であり、年齢または細胞の健康およ
び状態が指令した場合に、正常に機能するヒトおよび動物の細胞において生じる
。アポトーシスは、その死ぬ細胞による、代謝活性を必要とする能動的なプロセ
スであり、しばしば、いわゆるゲル上のラダーパターンを生じる、フラグメント
へのＤＮＡの切断により特徴付けられる。アポトーシスにより死ぬ細胞は、内部
ホメオスタシスの崩壊が細胞分解をもたらす受動的プロセスである、壊死と関連
する炎症応答を通常は惹起しない。

【０００５】 アポトーシスは、通常は再生しない細胞（例えば、ニューロン）において病理
学的に生じる場合に、特に破壊的な結果を有し得る。このような細胞は、死んだ
場合に置き換わらないので、その損失は、冒された器官の衰弱、そして時には致
命的機能不全をもたらし得る。

【０００６】 種々の薬物ストラテジーが、発作の処置および虚血に関連する他のニューロン
状態の処置のために提案されている。しかし、今日、これらの薬物は、望まれな
い副作用が観察される場合、比較的効果がないかまたは投薬レベルでのみ有効で
あるかのいずれかである。例えば、抗凝固剤（例えば、ヘパリン）、抗血管収縮
剤（例えば、フルナリジン）、興奮性神経伝達物質アンタゴニスト（例えば、Ｍ
Ｋ−８０１およびＡＰ７）および抗水腫化合物は、混合した結果を示し、種々の
副作用（神経毒性または感染に対する感受性の増加を含む）に勝る明らかな利益
はない。平滑筋および横紋筋へのカルシウムの侵入を妨げるベラパミルおよび関
連化合物は、重篤な心臓毒性効果が生じ得る、高い薬物濃度でのみ有効であるよ
うである。脳水腫の増加が、ジヒドロピリジン（例えば、ニモジピン）での処置
における副作用として観察されている。ジルチアゼムにより例示されるようなベ
ンゾチアゼピンは、中程度の防御効果を示したが、これらの薬物はまた、望まれ
ない副作用（例えば、高血圧）を引き起こすようであり、処置に有害であり得る
。

【０００７】 （発明の要旨） １つの局面において、本発明は、細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物
を提供し、この組成物は、有効量の式Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な
塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含む。

【０００８】

【化１３】 式Ｉにおいて、Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アルキル、アルコ
キシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエステル、アミノ
、アルキルアミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択される。リンカ
ーＬは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択される。部分Ａ−−−− −− Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環、オキサゾー
ル環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、ここで、Ａお
よびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、Ｏ、またはＳ
から選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素であり、そし
てここで、リンカーＬの反対側にあるＡ−−−−−−Ｂ基は、同一であっても異
なってもよい。基ＹおよびＹ’は独立して、炭素および窒素から選択される。

【０００９】 選択された実施形態において、リンカーＬは、ＣＨ₂、ＣＨＣＨ₃、またはカル
ボニルであり、そして好ましくは、ＣＨ₂である。Ａ−−−−−−Ｂが、隣接す
る６員環に縮合したイミダゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、さ
らなる実施形態において、ＮＲ¹は、好ましくは、ＮＨ、ＮＣＨ₃、またはＮＣＨ ₂ Ｃ₆Ｈ₅（Ｎ−ベンジル）である。ＹおよびＹ’は、好ましくは、炭素である。

【００１０】 さらなる実施形態において、Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アル
キル、カルボン酸またはエステル、アミノ、ニトロ、クロロおよびフルオロから
選択される。好ましくは、ＸおよびＸ’のうちの少なくとも一方は、アミノまた
はニトロであり、そしてＺおよびＺ’は独立して、水素、カルボン酸、クロロ、
およびフルオロから選択される。式Ｉにおいて、ＬがＣＨ₂であり、Ｙが炭素で
あり、Ａ−−−−−−Ｂがイミダゾール環またはピロール環を形成するに効果的
な三原子結合を表し、Ｘ、Ｘ’およびＲ¹が水素であり、そしてＺおよびＺ’の
各々が、水素、ニトロ、アミノ、またはハロゲンから選択される組成物は、含ま
れない。しかし、以下に記載するように、細胞死を阻害するためにこれらの組成
物を投与する方法は、本発明に含まれる。

【００１１】 あるいは、本発明の薬学的組成物は、有効量の式ＩＩの化合物またはその薬学
的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み得る。

【００１２】

【化１４】 式ＩＩにおいて、Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であ
り、ここで、Ｒ¹およびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラ
ルキルから選択され、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキ
ルアミノ、ニトロ、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択される
。Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択され；そして
Ｒ⁵は、電子対、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択される
。Ｒ⁵が電子対ではない場合には、この化合物は正電荷を有することが理解され
る（例えば、化合物ＳＮＸ−９８０）。Ｌは、好ましくはＣＲ²Ｒ³であり、ここ
でＲ²およびＲ³は独立して、水素および低級アルキルから選択される。

【００１３】 式Ｉにおいてと同様に、Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミ
ダゾール環、ピロール環、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果
的な三原子結合を表し、ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、
そして他方は、ＮＲ¹、Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうち
の少なくとも一方は窒素であり；そしてＹは、炭素または窒素である。

【００１４】 基Ｗは、示した２つの窒素原子を連結して５〜７員の複素環式環を形成する、
２〜４個の炭素のアルキル鎖を表す。このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換で
あるか、または１つもしくは２つの低級アルキル基もしくはヒドロキシル基で置
換されている。好ましくは、このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換であるか、
またはメチル置換されている。

【００１５】 Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、この置換基は独立し
て、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホ
ン酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され
る。好ましくは、Ｚは、水素、メチル、アミノ、ニトロ、クロロ、およびフルオ
ロから選択される。

【００１６】 選択された実施形態において、Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合し
たイミダゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、そしてＹおよびＹ’
は炭素である。さらなる実施形態において、Ｒ⁴は水素、低級アルキル、および
ベンジルから選択され、そしてＲ⁵は電子対である。

【００１７】 あるいは、この薬学的組成物は、有効量の式ＩＩＩの化合物またはその薬学的
に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み得る。

【００１８】

【化１５】 式ＩＩＩにおいて、Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合で
あり、ここで、Ｒ¹およびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびア
ラルキルから選択され、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アル
キルアミノ、ニトロ、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され
；各Ｒ⁴は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
れ；そしてＭは、−ＣＲ⁶Ｒ⁷−ＣＲ⁸Ｒ⁹−または−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、ここ
でＲ⁶〜Ｒ⁹は独立して、水素および低級アルキルから選択される。

【００１９】 選択された実施形態において、Ｌは、ＣＨ₂、ＣＨＮＨ₂、ＣＨＮＯ₂、カルボ
ニル、または直接結合である。さらなる実施形態において、Ｒ⁴は、水素または
低級アルキルである。１つの実施形態において、Ｍは−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、
そしてＲ⁶およびＲ⁸は独立して、水素またはメチルである。

【００２０】 さらなる実施形態において、この薬学的組成物は、有効量の式ＩＶの化合物ま
たはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含む。

【００２１】

【化１６】 式ＩＶにおいて、上記のように、Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合
したイミダゾール環、ピロール環、オキサゾール環またはチアゾール環を形成す
るに効果的な三原子結合を表し、ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素
であり、そして他方は、ＮＲ¹、Ｏ、またはＳから選択され、ここで、Ａおよび
Ｂのうちの少なくとも一方は窒素であり、そしてＹは、炭素または窒素である。
Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、この置換基は独立して
、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン
酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択される
。Ｑは、ニトロおよび２−ピリジルから選択される。好ましくは、Ｙは炭素であ
り、そしてＡ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環を形
成するに効果的な三原子結合を表す。選択された実施形態において、Ｚは水素で
ある。

【００２２】 別の局面において、本発明は、細胞死を阻害する方法を提供する。この方法に
従って、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式Ｉの化合物またはその薬
学的に受容可能な塩が、このような処置を必要とする被験体に投与される。

【００２３】

【化１７】 式Ｉにおいて、上記のように、Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、ア
ルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエ
ステル、アミノ、アルキルアミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択
され；Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、
Ｒ¹およびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選
択され、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニ
トロ、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され；Ａ−−−−− − Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環、オキサゾール
環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、ここで、Ａおよ
びＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、Ｏ、またはＳか
ら選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素であり、そして
ここで、リンカーＬの反対側にあるＡ−−−−−−Ｂ基は、同一であっても異な
ってもよく；そしてＹおよびＹ’は独立して、炭素および窒素から選択される。

【００２４】 選択された実施形態において、リンカーＬは、ＣＨ₂、ＣＨＣＨ₃、またはカル
ボニルであり、そして好ましくは、ＣＨ₂である。Ａ−−−−−−Ｂが隣接する
６員環に縮合したイミダゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、さら
なる実施形態において、ＮＲ¹は、好ましくは、ＮＨ、ＮＣＨ₃、またはＮＣＨ₂
Ｃ₆Ｈ₅（Ｎ−ベンジル）である。ＹおよびＹ’は、好ましくは、炭素である。

【００２５】 さらなる実施形態において、Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アル
キル、カルボン酸またはエステル、アミノ、ニトロ、クロロおよびフルオロから
選択される。好ましくは、ＸおよびＸ’のうちの少なくとも一方は、アミノまた
はニトロであり、そしてＺおよびＺ’は独立して、水素、カルボン酸、クロロ、
およびフルオロから選択される。

【００２６】 あるいは、本発明の方法は、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式Ｉ
Ｉの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含する。

【００２７】

【化１８】 式ＩＩにおいて、上記のように、Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、また
は直接結合であり、ここで、Ｒ¹およびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリー
ル、およびアラルキルから選択され、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミ
ノ、低級アルキルアミノ、ニトロ、ハロゲン、および低級アルキルスルホネート
から選択される。Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選
択され；そしてＲ⁵は、電子対、水素、アルキル、アリール、およびアラルキル
から選択される。Ｒ⁵が電子対ではない場合には、この化合物は正電荷を有する
ことが理解される（例えば、化合物ＳＮＸ−９８０）。Ｌは、好ましくはＣＲ²
Ｒ³であり、ここでＲ²およびＲ³は独立して、水素および低級アルキルから選択
される。

【００２８】 Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
であり；Ｙは、炭素または窒素である。

【００２９】 Ｗは、示した２つの窒素原子を連結して５〜７員の複素環式環を形成する、２
〜４個の炭素のアルキル鎖を表す。このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換であ
るか、または１つもしくは２つの低級アルキル基もしくはヒドロキシル基で置換
されている。好ましくは、このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換であるかまた
はメチル置換されている。

【００３０】 Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、この置換基は独立し
て、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホ
ン酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され
る。この方法において使用され得る式ＩＩの化合物の選択される実施形態は、上
に記載される。

【００３１】 あるいは、本発明の方法は、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式Ｉ
ＩＩの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含する。

【００３２】

【化１９】 式ＩＩＩにおいて、Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合で
あり、ここで、Ｒ¹およびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびア
ラルキルから選択され、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アル
キルアミノ、ニトロ、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され
；各Ｒ⁴は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
れ；そしてＭは、−ＣＲ⁶Ｒ⁷−ＣＲ⁸Ｒ⁹−または−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、ここ
でＲ⁶〜Ｒ⁹は独立して、水素およびアルキルから選択される。この方法において
使用され得る式ＩＩＩの化合物の選択される実施形態は、上に記載される。

【００３３】 さらなる実施形態において、本発明の方法は、薬学的に受容可能なキャリア中
の、有効量の式ＩＶの化合物またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を
包含する。

【００３４】

【化２０】 式ＩＶにおいて、Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾー
ル環、ピロール環、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三
原子結合を表し、ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして
他方は、ＮＲ¹、Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少な
くとも一方は窒素であり；Ｙは、炭素または窒素であり；Ｚは、Ｙを含むアリー
ル環上の１つ以上の置換基を表し、この置換基は独立して、水素、アルキル、ア
ルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエステル、ア
ミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され；そしてＱは、水素、ニ
トロ、シアノ、および２−ピリジルからなる群から選択される。この方法におい
て使用され得る式ＩＶの化合物の選択される実施形態は、上に記載される。

【００３５】 本方法の１つの実施形態において、処置または予防される細胞死は、発作、虚
血、神経変性、外傷、自己免疫応答、または炎症に関連する細胞死のような、ア
ポトーシスニューロン細胞死である。別の実施形態において、細胞死は、心筋梗
塞形成およびその結果生じる虚血、低酸素症、および罹患領域において引き続い
て生じる再潅流のような、心筋損傷、または治療的介入（例えば、冠状動脈バイ
パス移植片（ＣＡＢＧ）または経皮的経腔的冠状動脈血管形成術（ＰＴＣＡ；「
バルーン」血管形成術））から生じる心筋損傷に関連する。

【００３６】 この方法のさらなる実施形態において、式Ｉ〜ＩＶの化合物は、抗高血圧薬剤
、抗生物質、免疫調節剤、または抗炎症性薬剤と組み合わせて、投与される。

【００３７】 また、ＬがＣＨ₂であり、ＹおよびＹ’が炭素であり、そしてＡ−−−−−−
Ｂが隣接する６員環に縮合したピロール環を形成するに効果的な三原子結合を表
す上記式Ｉの特定のメチレンビス（ベンゾイミダゾール）化合物、ならびにその
薬学的に受容可能な塩が、本発明に含まれる。この化合物は、以下の構造Ｉａに
より表され、ここで、Ｚ’は、最も右に示す環上の４’または５’の置換基を表
し、そしてＺおよびＺ’の各々は、水素、クロロ、フルオロ、カルボキシ、およ
びメチルからなる群から選択される。

【００３８】

【化２１】 これらの化合物としては、以下の４−アミノ置換化合物が挙げられる： ２−（ベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノベンゾイミダゾー
ル（本明細書中においてＳＮＸ ９１２と称する）； ２−（５’−クロロベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノベン
ゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９２３と称する）； ２−（ベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノ−５−クロロベン
ゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９４７と称する）； ２−（４’−フルオロベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノベ
ンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９４０と称する）； ２−（５’−フルオロベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノベ
ンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９４２と称する）； ２−（５’−カルボキシベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノ
ベンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９７７と称する）；および ２−（４’−メチルベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−アミノベン
ゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９４４と称する）。

【００３９】 式Ｉの化合物はまた、本発明の一部を形成し、４−ニトロ置換化合物である、
２−（ベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−ニトロ−５−クロロベン
ゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９３７と称する）および２−（４
’−ニトロ−５’−クロロベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル−４−ニト
ロ−５−クロロベンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９３４と称す
る）、ならびにケト連結化合物である２−（２−インドリルカルボニル）ベンゾ
イミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ １７７２と称する）および２，２−
カルボニルビスベンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ １７１９と称
する）を含む。

【００４０】 また、構造ＩＩａ：

【００４１】

【化２２】 により表される、上記式ＩＩの選択された化合物が、本発明に含まれ、ここで、
Ｒ、Ｒ’およびＲ”の各々は、水素およびメチルから選択され、そしてＷは、結
合した２つの窒素原子を連結して５〜７員の複素環式環を形成する、２〜４個の
炭素原子のアルキル鎖を表す。このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換であるか
、または１つもしくは２つの低級アルキル基もしくはヒドロキシル基で置換され
ている。好ましくは、このアルキル鎖の各炭素原子は、非置換であるか、または
メチル置換されている。これらは、以下の化合物を含む：２−（３，４，５，６
−テトラヒドロ−５−ヒドロキシピリミジン−２−イル）メチルベンゾイミダゾ
ール（本明細書中においてＳＮＸ−１８１７と称する）；２−（３，４，５，６
−テトラヒドロピリミジン−２−イル）メチルベンゾイミダゾール（本明細書中
においてＳＮＸ−１８１８と称する）；２−（４，５，６，７−テトラヒドロ−
１，３−ジアゼピン−２−イル）メチルベンゾイミダゾール（本明細書中におい
てＳＮＸ−１８１９と称する）；および１−メチル−２−［（１−メチル−４，
５−ジヒドロイミダゾール−２−イル）エチルベンゾイミダゾール（本明細書中
においてＳＮＸ−１７７１と称する）。また、上記式ＩＩの化合物である、２−
（１，３−ジメチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル
）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（本明細書中においてＳＮＸ ９８０と称する）
が、本発明に含まれる。

【００４２】 本発明のこれらおよび他の目的および特徴は、以下の発明の詳細な説明を、添
付の図面とともに読む際に、より完全に明らかとなる。

【００４３】 （発明の詳細な説明） （Ｉ．定義） 以下の用語は、他に示されない限り、以下の意味を有する。

【００４４】 「アルキル」とは、炭素および水素を含有する完全に飽和した非環式一価基で
あり、分枝鎖であっても、直鎖であってもよい。アルキル基の例は、メチル、エ
チル、ｎ−ブチル、ｎ−ヘプチルおよびイソプロピルである。このクラスのサブ
セットである「低級アルキル」とは、１〜６個の炭素原子、そしてより好ましく
は、１〜４個の炭素原子を有するアルキルをいう。

【００４５】 「アリール」とは、単環（例えば、ベンゼン）または２以上の縮合環（例えば
、ナフチル）を有する、置換または非置換の一価芳香族基をいう。単環アリール
基が、一般的に好ましい。環内に１以上の窒素原子、酸素原子または硫黄原子を
有する複素環式芳香族環（例えば、フリル、ピロール、ピリジルおよびインドー
ル）は、含まれる。炭素環式アリール基が、一般的に好ましい。「置換（された
）」によって、アリール基中の１以上の環水素が、非水素基（好ましくは、ハロ
ゲン、メチル、メトキシ、ヒドロキシル、ニトロ、シアノ、アミノ、メチルアミ
ノ、ジメチルアミノ、カルボン酸またはカルボン酸エステル、およびスルホン酸
またはスルホン酸エステルから選択される）で置き換えられていることを意味す
る。非置換型の基または低級アルキルで置換された基が、一般的に好ましい。

【００４６】 「アラルキル」とは、上記で定義されたようなアリール基で置換された一価ア
ルキル基をいう（例えば、ベンジル基（−ＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₅））。

【００４７】 「脂肪族」化合物は、芳香族化合物を除く、非環式または環式（脂環式）の飽
和または不飽和炭素化合物である。

【００４８】 本明細書中に記載される化合物の「薬学的に受容可能な塩」とは、以下のよう
な１以上のアニオン性対イオンを有するプロトン化形態の化合物をいう：クロリ
ド、サルフェート、ホスフェート、アセテート、スクシネート、シトレート、ラ
クテート、マレート、フマレート、パルミテート、コレート、グルタメート、グ
ルタラート、タータレート、ステアレート、サリチレート、メタンスルホネート
、ベンゼンスルホネート、ソルベート、ピクレート、ベンゾエート、シンナメー
トなど。塩酸塩が、好ましい群である。

【００４９】 （ＩＩ．細胞死阻害化合物） 本発明は、細胞培養物またはインビボで投与した場合に、細胞死（特に、アポ
トーシス細胞死）のインヒビターとして効果的である、薬学的組成物を提供する
。これらのインヒビターとしては、以下の一般式Ｉによって特徴付けられる化合
物が挙げられる：

【００５０】

【化２３】 ここで、 Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン
酸またはカルボン酸エステル、スルホン酸またはスルホン酸エステル、アミノ、
アルキルアミノ、ニトロおよびハロゲンからなる群より、独立して選択され； Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³または直接結合であり、ここで、Ｒ¹およ
びＲ²は、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから独立して選択され、
そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ、ハ
ロゲンおよび低級アルキルスルホネートから選択され； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接６員環に縮合されたイミダゾール環、ピロール環、
オキサゾール環またはチアゾール環を形成するのに効果的な３原子連結を表し、
ここで、ＡおよびＢのうちの一方が、窒素または炭素であり、そして他方が、Ｎ
Ｒ¹、ＯまたはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢの少なくとも一方が、窒素
であり、そしてリンカーＬの反対側のＡ−−−−−−Ｂ基は、同じであっても、
異なってもよく；そして ＹおよびＹ’は、炭素および窒素から独立して選択される。

【００５１】 好ましくは、化合物中のこの２つの基Ａ−−−−−−Ｂは、同じである。好ま
しい実施形態において、リンカーＬは、ＣＨ₂、ＣＨＣＨ₃またはカルボニルから
選択される。さらなる実施形態は、Ａ−−−−−−Ｂが、イミダゾール環（例え
ば、Ｎ＝Ｃ−ＮＲ¹）またはピロール環（Ｃ＝Ｎ−ＮＲ¹）を形成するのに効果的
な３原子連結を表す化合物（すなわち、ベンゾイミダゾールまたはインドール化
合物）を含み、ベンゾイミダゾールが好ましい。このベンゾイミダゾールまたは
インドールのアミン窒素は、好ましくは、水素またはメチルで置換される；すな
わち、ＮＲ₁が、ＮＨまたはＮＣＨ₃である。置換基Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は、
好ましくは、水素、アルキル、カルボン酸またはカルボン酸エステル、アミノ、
ニトロ、クロロおよびフルオロからなる群より独立して選択される。さらに好ま
しい実施形態において、ＸおよびＸ’のうちの少なくとも一方は、アミノまたは
ニトロであり、アミノが最も好ましい。ＺおよびＺ’は、最も好ましくは、水素
、カルボン酸、クロロおよびフルオロからなる群より選択される。

【００５２】 これらの組成物はまた、以下の一般式ＩＩを有する化合物を含む：

【００５３】

【化２４】 ここで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³または直接結合であり、ここで、Ｒ¹およ
びＲ²は、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから独立して選択され、
そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ、ハ
ロゲンおよび低級アルキルスルホネートから選択され； Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから選択され；そしてＲ⁵ は、電子対、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから選択され； Ａ−−−−−−Ｂは、上記のように、隣接６員環に縮合されたイミダゾール環
、ピロール環、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するのに効果的な３原
子連結を表し、ここで、ＡおよびＢのうちの一方が、窒素または炭素であり、そ
して他方が、ＮＲ¹、ＯまたはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢの少なくと
も一方が、窒素であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｗは、５〜７員複素環式環を形成するためにその２つの示された窒素原子を連
結する、２〜４炭素のアルキル鎖を表し、ここで、このアルキル鎖の各炭素原子
は、置換されていないか、または１個もしくは２個の低級アルキル基または１個
のヒドロキシル基で置換されており、そして好ましくは、置換されていないか、
またはメチル置換されており；そして Ｚは、Ｙを含有するアリール環上の１以上の置換基を表し、これらは、水素、
アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはカルボン酸エステル、スルホ
ン酸またはスルホン酸エステル、アミノ、ニトロおよびハロゲンからなる群より
独立して選択される。

【００５４】 上記のように、Ａ−−−−−−Ｂは、好ましくは、イミダゾール環（例えば、
Ｎ＝Ｃ−ＮＲ¹）またはピロール環（Ｃ＝Ｎ−ＮＲ¹）を形成するのに効果的な３
原子連結を表し、すなわち、ベンゾイミダゾールまたはインドール化合物であり
、ベンゾイミダゾールが好ましい。式ＩＩ中のリンカーの右側の環は、代表的に
は、イミダゾールまたはイミダゾリン（すなわち、ジヒドロイミダゾール）であ
り、ここで、Ｌは、ＣＲ²Ｒ³であり、そしてＲ⁵は、電子対、水素、アルキル、
アリールまたはアラルキルを表す。Ｒ⁵が電子対でない場合、その結合する窒素
原子は、正味の正電荷（形式的には、この環のＮ−Ｃ＝Ｎ部分にわたって分布さ
れる）を有する；例えば、化合物ＳＮＸ９８０を参照のこと。式ＩＩにおいては
このように示されていないが、この環はまた、イミダゾイルイデニル（ｉｍｉｄ
ａｚｏｌｙｉｄｅｎｙｌ）基であり得る；すなわち、ここでＬは、環外二重結合
の１つの炭素であり、そしてこの環自体は、飽和である。

【００５５】 好ましくは、リンカーＷ上の置換基は、水素および低級アルキルから選択され
、そして最も好ましくは、水素およびメチルである。Ｗを含むこの複素環式環は
また、さらなる炭素環式環に縮合され得る。置換基Ｚは、好ましくは、水素、ア
ルキル、カルボン酸またはカルボン酸エステル、アミノ、ニトロ、クロロおよび
フルオロからなる群より選択され；より好ましくは、水素、低級アルキル、カル
ボン酸、クロロおよびフルオロから選択され；そして最も好ましくは、水素であ
る。

【００５６】 以下の一般式ＩＩＩのビス−イミダゾール化合物またはビス−イミダゾリン化
合物を含む組成物もまた、提供される：

【００５７】

【化２５】 ここで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³または直接結合であり、ここで、Ｒ¹およ
びＲ²は、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから独立して選択され、
そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ、ハ
ロゲンおよび低級アルキルスルホネートから選択され； 各Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリールおよびアラルキルから独立して選択され
；そして Ｍは、−ＣＲ⁶Ｒ⁷−ＣＲ⁸Ｒ⁹−または−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、ここで、Ｒ⁶
〜Ｒ⁹は、水素およびアルキルから独立して選択される。

【００５８】 好ましい実施形態において、リンカーＬは、ＣＨ₂、ＣＨＮＨ₂、ＣＨＮＯ₂、
カルボニルおよび直接結合から選択される。アミン窒素は、好ましくは、水素ま
たは低級アルキル（Ｒ⁴）で置換され、そしてリンカーＭは、好ましくは、−Ｃ
Ｒ⁶＝ＣＲ⁸−であり、その結果、この環は、イミダゾール環であり、ここで、Ｒ ⁶ およびＲ⁸は、好ましくは、水素またはメチルである。

【００５９】 本発明に含まれる化合物のさらなるクラスは、以下の式ＩＶによって表される
：

【００６０】

【化２６】 ここで、 Ａ−−−−−−Ｂは、隣接６員環に縮合されたイミダゾール環、ピロール環、
オキサゾール環またはチアゾール環を形成するのに効果的な３原子連結を表し、
ここで、ＡおよびＢのうちの一方が、窒素または炭素であり、そして他方が、Ｎ
Ｒ¹、ＯまたはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢの少なくとも一方が、窒素
であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｚは、Ｙを含有するアリール環上の１以上の置換基を表し、これらは、水素、
アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはカルボン酸エステル、スルホ
ン酸またはスルホン酸エステル、アミノ、ニトロおよびハロゲンからなる群より
独立して選択され；そして Ｑは、シアノ、ニトロおよび２−ピリジルから選択される。

【００６１】 この群の化合物において、Ｙは、好ましくは、炭素であり、そしてＡ−−−− −− Ｂは、隣接６員環に縮合されたイミダゾール環（すなわち、ベンゾイミダゾ
ール）を形成するのに効果的な３原子連結を表し；そしてＺは、好ましくは、水
素である。

【００６２】 本発明の化合物は、溶媒、ｐＨ、温度および当業者に公知の他の変量に依存し
て、他の形態で存在し得ることが理解される。例えば、これらの化合物の多くの
平衡形態には、互変異性形態が含まれ得る。

【００６３】 これらの化合物は、特定の生物学的特性（例えば、生物学的浸透性、溶解度、
経口適用性、安定性、代謝または***）を増強するために、化学的に改変され得
る。これらの化合物はまた、プロドラッグ形態に改変され得、その結果、活性成
分は、このプロドラッグに対する代謝プロセスまたは生化学的プロセスの作用か
ら生じる。

【００６４】 （ＩＩＩ．化合物の調製） 式Ｉ〜ＩＶの化合物は、当業者に公知の種々の経路を使用して合成され得る。
式Ｉの化合物の調製のために、合成は、置換ベンゼン（Ｒが炭素である）または
置換ピリジン（Ｒが窒素である）で開始し得る。多様に置換されたベンゼンおよ
びピリジンが、しばしば市販されており、またこれらは、公知の方法によって（
代表的には、求電子性芳香族置換を使用して）調製され得る。

【００６５】 対称性の式Ｉのビス−ベンゾイミダゾール化合物（Ｌが、−ＣＨ₂−である）
は、図１Ａに示されるように、対応して官能化した２当量のオルト−ジアミノベ
ンゼンを１当量のジエチルマロンジイミデートと反応させることによって合成し
得る。ビス−（４−アザ）ベンゾイミダゾール化合物は、２，３−ジアミノピリ
ジンを使用して同様に調製し得る。Ａ（またはＢ）がＯまたはＳである化合物（
すなわち、それぞれ、ビス−ベンゾオキサゾールまたはビス−ベンゾチアゾール
）は、上記で言及したオルト−ジアミノベンゼン（または、ピリジン）を、オル
ト−アミノフェノールまたはチオフェノールで置き換えることによって調製し得
る。例えば、Ｈａｒｎｉｓｃｈ、米国特許第３，９８５，７６３号を参照のこと
。ＬがＮＨまたはＮＲ¹である化合物は、２−アミノ−ベンゾイミダゾールまた
は２−（アルキルアミノ）−ベンゾイミダゾール（あるいは、ベンゾオキサゾー
ルまたはベンゾチアゾール）と第２位に脱離基を含有するベンゾイミダゾール（
あるいは、ベンゾオキサゾールまたはベンゾチアゾール）（例えば、２−ブロモ
ベンゾイミダゾール）との間の、求核置換反応によって調製される。

【００６６】 非対称的に置換された化合物は、例えば、実施例１〜８によって例示されるよ
うに、１当量の官能化されたオルト−ジアミノベンゼン（あるいは、アミノフェ
ノールまたはアミノチオフェノール）および１当量の異なるように官能化された
オルト−ジアミノベンゼン（あるいは、アミノフェノールまたはアミノチオフェ
ノール）を、１当量のジエチルマロンジイミデートまたは置換マロンジイミデー
トと反応させることによって合成され得る。しかし、このような経路は、混合物
を導き得る。ビス−ベンゾイミダゾールの調製のための実施例９および図１Ｃに
例示される代替的経路は、対応する２−シアノメチルベンゾイミダゾール（Ａｌ
ｄｒｉｃｈから市販される）から調製した、ベンゾイミダゾール２−イルイミド
エートを使用する。示されるように、この中間体を、置換オルト−ジアミノベン
ゼン（この場合、３−ニトロ−１，２−フェニレンジアミン）と反応させて、ビ
ス−ベンゾイミダゾール（本明細書中ＳＮＸ９００と称する）を生じる。ニトロ
基の還元は、４−アミノ化合物（本明細書中ＳＮＸ９１２と称する）を生じた。
所望の場合、対応する２−シアノメチルベンゾオキサゾール、ベンゾチアゾール
、４−アザ−ベンゾイミダゾールまたはインドールを、このベンゾイミダゾール
と置き換え得る。

【００６７】 架橋炭素が、例えば、メチル、ニトロ、アミノまたはオキソ（カルボニル）で
置換されている化合物は、対応する置換マロンジイミデート（必要な場合、保護
化形態の）を使用して調製され得る。例えば、図１Ｂは、ニトロ誘導体化ビス−
ベンゾイミダゾール化合物の調製を例示する。反応条件は変化し得；図１Ｂに示
される化合物は、トリクロロベンゼン中１８０℃〜２１０℃で２〜５時間加熱す
ることによって調製された。架橋基がカルボニル基である化合物を形成するため
の好ましい方法を、実施例１４〜１５に例示する。この経路に従って、２−リチ
ウム化（ｌｉｔｈｉａｔｅｄ）ベンゾイミダゾールを、ベンゾイミダゾール２−
カルボキシレートと反応させる。いずれかの反応物はまた、インドール、２−ア
ザベンゾイミダゾール、置換イミダゾールなどから誘導され得る。

【００６８】 グループＩＩの化合物は、フェニレンジアミンを適切な脂肪族または脂環式１
，２−ジアミンと置換することによる、図１Ｃおよび上記に示される反応に類似
の反応によって調製され得る。例えば、化合物９７８（以下の表３を参照のこと
）は、２−シアノメチルベンゾイミダゾールの１，２−エチレンジアミンとの反
応によって調製され得る。このグループの他の化合物の調製を、実施例１０〜１
３に示す。

【００６９】 グループＩＩＩのビス−イミダゾール化合物またはビス−イミダゾリン化合物
は、上記のビス−ベンゾイミダゾールの調製のために記載した方法と類似の方法
（すなわち、置換または非置換ジエチルマロンジイミデートの２当量の脂肪族１
，２−ジアミンとの反応による）によって調製され得る。直接結合リンカーを有
する化合物（例えば、以下の化合物９３９（表４））について、ジエチルエタン
ジイミデートを、マロンジイミデートの代わりに使用する。異なる経路によるケ
ト−、ニトロメチレン−、アミノメチレン−およびヒドロキシメチレン−連結ビ
スイミダゾール（例えば、以下の化合物９４９〜９５１）の合成は、Ｊｏｓｅｐ
ｈら（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ７：４５９，１９７７）によって報告されている。

【００７０】 グループＩＶの化合物は、また代表的にオルト−官能化アニリンのシクロ縮合
反応に基づく、報告された方法に従って調製され得る。例えば、Ａｌｃａｌｄｅ
ら（Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ４：１９５，１９９２）、Ａｄｄｉｓｏｎら（Ｊ．Ｈ
ｅｔｅｒｏｃｙｃ．Ｃｈｅｍ．２０（６）：１４８１，１９８３；Ｌｏｅｗら（
米国特許第４，０６４，１３６号）を参照のこと。例えば、化合物９５３である
、２−ニトロメチルベンゾイミダゾールは、１，２−フェニレンジアミンのエチ
ル２−ニトロアセテートとの反応によって調製され得；化合物９１４である、２
−シアノメチルベンゾイミダゾールは、エチルマロニトリル（エチル２−シアノ
アセテート）との類似の反応によって調製され得る。

【００７１】 （ＩＶ．細胞死の機構） （Ａ．アポトーシスと壊死との間の区別） 病原性の細胞死の２つの別個のパターンが文献において記載されている。第１
のパターンは、壊死と一致し、内部のホメオスタシスの崩壊が細胞の溶解をもた
らす受動的なプロセスである（Ｗｙｌｌｉｅら、１９８０ａ）。このプロセスは
、原形質膜の完全性の喪失および引き続く膨張、その後の細胞の溶解を含む（Ｓ
ｃｈｗａｒｔｚら、１９９３）。このパターンは、膜の完全性の早期の喪失、異
常なオルガネラの形態、細胞の膨張、病巣における発生、およびリソソームの破
裂を表す。

【００７２】 第２のパターンは、アポトーシスと一致し、病巣においてではなく分散した細
胞において起こり、そしてクロマチンの凝縮、核のフラグメント化、細胞の体積
の減少、原形質膜の小疱形成、オルガネラ構造および膜の完全性の形態学的な保
存、細胞フラグメントの小疱形成、ならびにリソソーム内容物の保持を特徴とす
る（Ｗｙｌｌｉｅら、１９９４）。アポトーシスの観察は、細胞質の凝集および
死滅しつつある細胞の核によって特徴付けられる。超微細構造的には、クロマチ
ンは電子密度が高まり、核のエンベロープの内表面で蓄積し始め、そして最終的
には核全体を満たす。この細胞は、より小さな膜結合フラグメントに分解する。
このフラグメントは、個々のオルガネラおよび核の残余物を含み得、これらは、
周りを取り囲む細胞によって迅速に食作用を受ける。結果として、アポトーシス
は、他の形態の細胞死（例えば、壊死）に典型的な古典的な炎症応答とは関連性
がない。

【００７３】 いくつかの組織における細胞死は、アポトーシスおよび壊死の両方に特有の特
徴を示し得る。これらの場合において、アポトーシスの速度は、食作用の速度を
はるかにしのぎ得、その結果、アポトーシス細胞の残渣は蓄積し、そして二次壊
死と呼ばれるプロセスによって分解される。

【００７４】 （Ｂ．ニューロンのアポトーシス） アポトーシスは、虚血性傷害（例えば、代表的には、心筋梗塞、再灌流障害、
および発作の場合において起こる）と関連付けられてきた（Ｗａｌｔｏｎら、１
９９７；ＭａｃＭａｎｕｓら、１９９５）。アポトーシスはまた、免疫反応性状
態および免疫変性性状態ならびに種々の神経変性性障害（アルツハイマー病、Ａ
ＬＳ、および運動ニューロン変性、パーキンソン病、末梢性ニューロパシー、ダ
ウン症候群、加齢性黄斑変性（ＡＲＭＤ）、ハンティングトン病、棘筋萎縮症、
およびＨＩＶ脳炎を含む）と関連付けられてきた。

【００７５】 アポトーシスはまた、ラットにおける眼圧の増加（ＩＯＰ）のモデルおよび網
膜神経節細胞損失をもたらす他の実験的手順（サル、ウサギ、およびラットにお
ける視神経切除を含む）における細胞死の初期のモードとして関連付けられてき
た。実験的な緑内障における網膜神経節細胞死の機構についての最近の研究は、
この細胞がアポトーシスによって死滅することを示す（Ｎｉｃｋｅｌｌｓ、１９
９６；Ｌａｑｕｉｓら、１９９８）。

【００７６】 アポトーシスは、それが通常再生しない細胞（例えば、ニューロン）において
病理学的に起こる場合に、特に破滅的な結果を有し得る。このような細胞は、死
滅した場合に置き換わられないので、その損失は、罹患した器官の衰弱および、
時には、致命的な機能不全をもたらし得る。

【００７７】 （Ｖ．アポトーシスのインビトロモデル：酸素／グルコース欠乏網膜神経節細
胞） 網膜神経節細胞のアポトーシスおよび／または壊死についてのアッセイは、虚
血に関連する疾患状態（例えば、発作、緑内障、および他の神経変性性疾患）の
処置において有効は化合物を選択するために有用である。ＲＧＣ培養系（同時係
属中であり、共有に係る米国仮出願（米国シリアル番号６０／１００，２４１を
有する）において記載されている）は、特定の形態の虚血（例えば、脳の虚血お
よび緑内障において表されるもの）についてのモデル系と同様に、虚血について
、ならびに一般的な神経変性性疾患についての一般的なインビトロモデルを樹立
した。虚血についてのインビトロモデルにおいて、細胞死は、増殖因子欠乏およ
び／または酸素／グルコース欠乏（ＯＧＤ）によって誘導される。

【００７８】 （Ａ．網膜神経節細胞の入手および培養） 網膜神経節細胞（ＲＧＣ）は、その軸索が網膜から視神経を通って膝状体の核
または（ラットにおけるように）上丘もしくは視蓋（ｏｐｔｉｃ ｔｅｃｔｕｍ
）に直接にのいずれかで伸長している中枢神経系ニューロンである。ＲＧＣは、
網膜からの視覚シグナルを脳の残余（ｒｅｓｔ）に中継する。これらのグルタミ
ン酸作動性ニューロンは、実施例１６に記載されているようなイムノパニング法
によって、表面タンパク質Ｔｈｙ １に対するモノクローナル抗体を使用して、
ラットまたはマウスのいずれかの網膜からほぼ１００％の純度にまで精製され得
る。ＲＧＣは、４週間またはそれ以上の期間の間、培養中に維持され得る。

【００７９】 （Ｂ．ＲＧＣにおける細胞死を検出する方法） 壊死的な細胞死は、上記のように、細胞膜の完全性の損失、および色素（例え
ば、ヨウ化プロピジウム（ＰＩ））（これは、一次壊死および二次壊死を被る細
胞のＤＮＡに結合する）に対する透過性によって特徴付けられる（Ｖｉｔａｌｅ
ら、１９９３）。壊死は、細胞膜がアポトーシスの初期の段階においてインタク
トなままであるという意味において、アポトーシスと区別可能である。従って、
以下に記載されるように、アポトーシスについてのアッセイと並行して使用され
るＰＩ色素除外アッセイは、壊死的な細胞死からアポトーシスを区別し得る。

【００８０】 プログラムされた細胞死、すなわちアポトーシスの検出は、当該分野で公知の
技術であるアネキシンＶ−ＦＩＴＣでの染色を介して達成され得る。プログラム
された細胞死の最も初期の事象の１つは、膜脂質であるホスファチジルセリンの
、原形質膜の内側から外側へのトランスロケーションである。従って、アネキシ
ンＶ（膜結合ホスファチジルセリンについて高い親和性を有する、カルシウム依
存性リン脂質結合タンパク質）は、フローサイトメトリーまたは任意の他の蛍光
検出方法によるアポトーシス細胞の検出および定量とともに、アポトーシスを起
こした細胞を染色するために使用され得る（Ｖｅｒｍｅｓら、１９９５；Ｗａｌ
ｔｏｎら、１９９７）。

【００８１】 （Ｃ．細胞の生存の定量） 壊死的な細胞死は、上記に記載したように、、細胞膜の完全性の損失、ならび
に一次壊死および二次壊死を起こした細胞のＤＮＡに結合する色素（例えば、ヨ
ウ化プロピジウム（ＰＩ））に対する透過性によって特徴付けられる（Ｖｉｔａ
ｌｅら、１９９３）。壊死は、細胞膜がアポトーシスの初期の段階においてイン
タクトなままであるという意味において、アポトーシスと区別可能である。従っ
て、以下に記載されるように、アポトーシスについてのアッセイと並行して使用
されるＰＩ色素除外アッセイは、壊死的な細胞死からアポトーシスを区別し得る
。

【００８２】 プログラムされた細胞死、すなわちアポトーシスの検出は、当該分野で公知の
技術であるアネキシンＶ−ＦＩＴＣでの染色を介して達成され得る。プログラム
された細胞死の最も初期の事象の１つは、膜脂質であるホスファチジルセリンの
、原形質膜の内側から外側へのトランスロケーションである。従って、アネキシ
ンＶ（膜結合ホスファチジルセリンについて高い親和性を有する、カルシウム依
存性リン脂質結合タンパク質）は、フローサイトメトリーまたは任意の他の蛍光
検出方法によるアポトーシス細胞の検出および定量とともに、アポトーシスを起
こした細胞を染色するために使用され得る（Ｖｅｒｍｅｓら、１９９５；Ｗａｌ
ｔｏｎら、１９９７）。

【００８３】 （ＶＩ．虚血のインビボモデル） 本発明の好ましい組成物は、上記Ｖ節に記載されるように、インビトロ酸素／
グルコース欠乏ＲＧＣにおいて細胞生存を増大させる際に、処理されていないコ
ントロールＲＧＣと比較して、少なくとも２５％、好ましくは４０％、より好ま
しくは７５％、そして最も好ましくは１００％以上、有効であると決定された組
成物である。このような組成物は、虚血について確立された動物モデルにおいて
さらに試験される。虚血の症状を模倣する種々のインビボモデルが記載されてい
る。これらには、アレチネズミの頸部の頸動脈の一過性の閉塞によって生成され
る全体的な虚血についてのアレチネズミモデル（Ｋｉｒｉｎｏ、１９８２）、全
体的な虚血についてのラットの４つの血管の閉塞モデル（Ｐｕｌｓｉｎｅｌｌｉ
ら、１９７９）、および局所的虚血のラットの中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）モデ
ル（Ｔａｍｕｒａら、１９８１）が含まれる。

【００８４】 局所的脳閉塞を使用する動物の発作モデルは、ネコ、イヌ、霊長類、アレチネ
ズミ、およびラットにおいて樹立されており、そして臨床的な経験と直接的に関
連すると考えられている。ラットにおいて最も一般的に使用される局所的虚血モ
デルは、右中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）モデルであり、これは、Ｋｏｉｚｕｍｉ
および共同研究者（Ｋｏｉｚｕｍｉら、１９８６）によって開発され、以下の実
施例１８に記載されている。手短には、中大脳動脈を、外部の頸動脈から挿入す
ることによって、ナイロンフィラメントを用いて閉塞させる。ＭＣＡＯモデルは
、頭蓋骨局部切除術を必要とせず、そして容易な再灌流を可能にする。このモデ
ルにおける対象化合物の神経保護的効果は、以下のＶＩＩＢ節において記載され
る。

【００８５】 （ＶＩＩ．対象化合物の生物学的活性） （Ａ．化合物の酸素／グルコース欠乏ＲＧＣに対する効果） 試験化合物によるＲＧＣの保護の程度を、上記のＶ節および実施例１６〜１７
において記載したように決定した。各化合物を、コントロール細胞ならびに、Ｏ
ＧＤの３０分前、ＯＧＤの間、ならびにＯＧＤの２４時間後および４８時間後の
時間の期間、酸素およびグルコース欠乏させた細胞に添加した。表６は、構造Ｉ
〜ＩＶに従う代表的な化合物のシリーズについてのＥＣ₅₀（コントロールと比較
して、５０％の細胞が細胞死から保護される濃度）の値を示す。

【００８６】 表５において、アスタリスクで表される、２，２’−メチレンビスベンゾイミ
ダゾールの誘導体（すなわち、式Ｉ、ここでＬは−ＣＨ₂−であり、そしてＹお
よびＹ’は炭素である）を、ベンゾイミダゾールのベンゼン環上の置換によって
命名する。構造式Ｉ〜ＩＶの、さらなる選択される化合物の構造を、それぞれ、
表１〜４に示す。

【００８７】

【表２】

【００８８】

【表３】 以下の表５におけるデータから見られ得るように、化合物は、処理していない
コントロールＯＧＤと比較して、いくつかは非常に低い濃度で、アポトーシス性
の細胞死からニューロンを保護した。

【００８９】 以下の表６は、式Ｉの選択したビス−ベンゾイミダゾール化合物についての用
量依存性データ（類似のアッセイにおけるＯＧＤコントロールと比較した生存の
増加）を示す。表中の記号は以下のように解釈される： ＋ ５０％までの増加 ＋＋ ５０％〜１００％の増加 ＋＋＋ １００％より多い増加 −− 無視できるかまたは増加なし ｎｄ 測定していない

【００９０】

【表４】 表５および６に示されるように、一方または両方の４位に置換基（例えば、ア
ミノ、ニトロ、メチル、トリフルオロメチル、フルオロまたはヒドロキシル）を
有するビス−ベンゾイミダゾール化合物（構造Ｉ）（ＳＮＸ９００、ＳＮＸ９０
１、ＳＮＸ９０３、ＳＮＸ９０４、ＳＮＸ９０９、ＳＮＸ９１２、ＳＮＸ９２３
、ＳＮＸ９２９およびＳＮＸ９３０）は、置換されていない化合物よりも全体的
にみてより有効であったが、メチル置換化合物およびトリフルオロメチル置換化
合物については、より高い用量（すなわち、１０μＭ）で、毒性効果の徴候が存
在した。４−アミノ置換を有する化合物は、特に有効であった。環窒素にメチル
置換を有する化合物（ＳＮＸ９０４）または架橋炭素にメチル置換を有する化合
物（ＳＮＸ９２５）、ならびにピリジン環を有する化合物（ＳＮＸ９１１）もま
た、非常に有効であった。５置換または５，５’置換のみを有するビス−ベンゾ
イミダゾール化合物（例えば、表６の最後の４つのエントリー）は、一般的に、
４−置換対応物よりも有効ではなかった。構造ＩＩ〜ＩＶの化合物（すなわち、
種々の置換ビス−イミダゾール）（例えば、ＳＮＸ９４９、ＳＮＸ９５１、ＳＮ
Ｘ９３９）およびベンゾイミダゾールジヒドロイミダゾール、ベンゾイミダゾー
ルテトラヒドロピリミジンおよびベンゾイミダゾールテトラヒドロ−１，３−ジ
アゼピン化合物（例えば、ＳＮＸ９７８、ＳＮＸ９７９、ＳＮＸ９８０、ＳＮＸ
１０１９、ＳＮＸ１０２０、ＳＮＸ１７７１、ＳＮＸ１８１８およびＳＮＸ１８
１９）もまた、非常に有効であり、いくつかは、ｎＭ下の範囲にＥＣ₅₀を与えた
（表５）。

【００９１】 （Ｂ．インビボ発作モデルにおける梗塞量に対する本発明の化合物の効果） 化合物を、上記および実施例１８に記載されるＭＣＡＯモデルに、ＩＶ（静脈
内）またはＩＣＶ（脳室内）のいずれかの経路によって投与した。化合物の非存
在および存在下における虚血損傷の程度を、冠状脳スライスの可視化によって評
価した。正常組織におけるホルマザンへの２，３，５−トリフェニルテトラゾリ
ウムクロリド（ＴＴＣ）の転換は、赤色を産生する。非染色領域（白）は、梗塞
を構成し、一方、白（梗塞形成）と赤染色領域（正常脳）との間のピンクの領域
は、虚血半影を規定する。予備研究は、ピンクで染色された組織は、生細胞およ
び死細胞の混合集団を含むことを確認した。

【００９２】 表３は、脱イオン水を受けるコントロールの被験体と比較して、示されるよう
な投薬（ＩＣＶ ＭＣＡＯ前、または２時間のＭＣＡＯ後の再灌流直後のＩＶ）
において、試験化合物ＳＮＸ９１２（４−アミノ化合物）を受ける被験体におけ
る梗塞量および浮腫量の減少（すなわち、％保護）を示す。結果はまた、ＩＣＶ
投与については図２〜３に、そしてＩＶ投与については図４〜５に例示する。

【００９３】 データが示すように、有意な保護が、虚血量および梗塞量に関して与えられた
。送達のより効率的な経路であるＩＣＶ投与は、一般的に、より少ない用量でよ
り大きな保護を与えた。

【００９４】

【表５】 （Ｃ．酸素／グルコース欠乏心筋細胞に対する化合物の効果） 低酸素症心筋細胞（ＣＭ）は、心筋虚血の単純化モデルとして使用されている
。本研究において、ＣＭの培養物は、酸素およびグルコースを８時間欠乏し、次
いでまた、２４〜４８時間の再酸素化に暴露された。損傷領域の再灌流が、心筋
細胞性傷害の主要な機構のうちの１つであり得ることが公知である。ＯＧＤ細胞
ならびに非ＯＧＤコントロール細胞を、ＯＧＤの３０分前から、ＯＧＤの間、な
らびにＯＧＤ後２４時間および４８時間の間、ＳＮＸ９１２で処理した。細胞生
存を、上記のように定量化した。

【００９５】 ＳＮＸ９１２の投与は、用量依存様式で、未処理ＯＧＤ細胞と比較して、アポ
トーシス細胞死から心筋細胞を保護した。試験におけるＳＮＸ９１２についての
ＥＣ₅₀およびＴＩ（治療指標）は、以下の通りであった：８時間のＯＧＤ／２４
時間の再酸素化について、ＥＣ₅₀＝３１０ｎＭおよびＴＩ＞３０；８時間のＯＧ
Ｄおよび４８時間の再酸素化について、ＥＣ₅₀＝５５ｎＭおよびＴＩ＞２００。

【００９６】

【表６】 （ＶＩＩ．処置方法） 本発明に従って、細胞死は、薬学的に受容なキャリア中の、上記の式Ｉ〜ＩＶ
のいずれかにより示される化合物、または薬学的に受容可能な塩の投与によって
阻害される。好ましい化合物はまた上記で議論され、そして特に、表１に示され
るアッセイについて、約５００ｎＭ以下、好ましくは約１００ｎＭ以下およびよ
り好ましくは約５０ｎＭ以下のＥＣ₅₀値を与える化合物を含む。

【００９７】 組成物は、アポトーシス細胞死または介入性（ｉｎｔｅｒｖｅｎｔｉｏｎａｌ
）細胞死の他の形態を含む疾患の処置のために使用され得る。処置方法、投薬レ
ベル、投与模範などは、従来方法および従来技術から選択され得る。例えば、本
発明の化合物は、突然の細胞死および／または病理学的な細胞死から生じる疾患
または障害をこうむる患者に、薬学的に受容可能なアジュバントを用いて投与し
得る。この化合物は、生物学的な細胞死を減少する結果として、疾患の重篤度を
減少するに有効な量で、受容可能なアジュバントまたはキャリアと組み合わせて
投与される。

【００９８】 式Ｉ〜ＩＶの化合物は、単独または組み合わせて使用され得、そしてこれらの
化合物は、細胞死阻害化合物の他のクラスと組み合わせられ、治療効果を増大し
得るか、または予防として細胞死誘導性疾患の進行を減少し得る。本発明の化合
物はまた、他の治療剤（抗高血圧剤、抗生物質、免疫調節剤または抗炎症剤を含
む）と組み合わせて使用され得る。組み合わせ治療において、この化合物は、連
続的または同時のいずれかで投与され得る。

【００９９】 本発明の薬学的組成物は、薬学的に受容可能なキャリア、アジュバントまたは
ビヒクルとともに、式Ｉ〜ＩＶの化合物およびそれらの薬学的に受容可能な塩の
いずれかを含む。薬学的組成物は、経口、非経口（これは、皮下、静脈内、筋肉
内、関節内、皮内、滑液包内、胸骨下、鞘内、硬膜外、病変内（ｉｎｔｒａｌｅ
ｓｉｏｎａｌ）、脳室内または頭蓋内を含む）、吸入スプレーにより、局所、直
腸、鼻、頬、膣または移植リザーバを介して投与され得る。注射可能な調製物は
、滅菌注射可能な水性組成物または懸濁液、あるいは滅菌注射可能な油性組成物
または懸濁液を含む。心臓細胞における治療的介入（例えば、動脈移植または血
管形成術の間）から生じる損傷の処置または予防のために、この化合物が、罹患
動脈に局所的に（例えば、カテーテルまたはステントによって）投与され得る。

【０１００】 上記で示されたように、５ｍｇ／ｋｇのＳＮＸ９１２の投薬は、ＩＣＶ投与を
介したラットにおける虚血後損傷の減少に有効であり、そしてＩＶ投与（より簡
便であるが、効率は劣る経路）を介したより高い用量（２５ｍｇ／ｋｇ）が、有
効であった。化合物のｎＭ濃度は、インビトロでの心臓細胞の保護に有効であっ
た。本発明の他の化合物の適切な投薬は、特定の化合物の効力に依存して、より
高いかまたはより低いものであり得る。種々の化合物の相対的な効力は、上記で
与えられ、そして他の効力は、本明細書中で記載されるようなアッセイにおいて
決定され得る。例のごとく、ヒト治療における最適投薬は、投与経路、患者の年
齢、他の既存の医学的状態、ならびに症状の型および重篤度のような因子に従っ
て変化し、そして当業者に公知の標準的方法に従って決定され得る。

【０１０１】 （ＶＩＩＩ．適応） 本発明の組成物によって処置または予防され得る細胞死媒介性状態としては、
虚血障害（例えば、発作または心筋梗塞）虚血疾患、炎症性疾患、外傷（心筋損
傷を含む）、自己免疫疾患および神経変性疾患が挙げられる。

【０１０２】 中枢神経系（ＣＮＳ）に対する虚血損傷は、全体または局所の虚血状態のいず
れかから生じ得る。全体の虚血は、脳全体への血流が一定期間中断する状態（例
えば、心停止から生じ得る）の下で生じる。局所の虚血は、脳の一部が、その正
常な血液供給を欠乏する状態（例えば、大脳脈管の血栓塞栓症閉塞、外傷性頭部
障害、浮腫および脳腫瘍から生じ得る）の下で生じる。虚血疾患としては、大脳
虚血（例えば、発作から生じる）、心筋梗塞形成、網膜虚血、黄斑変性および緑
内障が挙げられる。

【０１０３】 アポトーシス細胞死に関与し得る種々の神経変性疾患としては、アルツハイマ
ー病（Ｋｉｍら、１９９７）、ＡＬＳおよび運動ニューロン変性（Ｇｒｅｅｎｌ
ｕｎｄら、１９９５）、パーキンソン病（Ｇｈｏｓｈら、１９９４）、末梢性ニ
ューロパシー（Ｂａｔｉｓｔａｔｏｕら、１９９３）、ダウン症候群（Ｂｕｓｃ
ｉｇｌｉｏら、１９９５）、加齢性黄斑変性（ＡＲＭＤ）（Ｈｉｎｔｏｎら、１
９９８）、ハンティングトン病（Ｇｏｌｄｂｅｒｇら、１９９６）、棘筋萎縮症
（Ｌｉｓｔｏｎら、１９９６）ならびにＨＩＶ脳炎（Ｌａｚｄｉｎｓら、１９９
７）が挙げられる。

【０１０４】 本発明は、特定の処置方法および組成物に関して記載しているが、当業者に、
種々の変化および改変が、本発明を逸脱することなく行われ得ることが明らかで
ある。

【０１０５】 （実施例） 以下の実施例は例示であるが、いかなる方法においても本発明を限定すること
を意図しない。

【０１０６】 （実施例１：２−［（５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチ
ル］−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾールの調製） 撹拌棒および還流冷却器を備えたフレーム乾燥した１００ｍＬの丸底フラスコ
に、４−クロロ−１，２−フェニレンジアミン（１ｇ；７．０ミリモル）、３−
ニトロ−１，２−フェニレンジアミン（１．０７ｇ；７．０ミリモル）、ジエチ
ルマロンイミデートジヒドロクロリド（１．６２ｇ；７．０ミリモル）および超
高純度酢酸（約３５ｍＬ；Ａｌｄｒｉｃｈから）を窒素雰囲気下で添加した。こ
の混合物を２時間還流し、次いで室温まで冷却し、そして酢酸を除去した（ロト
バップ（ｒｏｔｏ−ｖａｐ）を介して）。残渣を０．５Ｍ ＨＣｌ中で懸濁およ
び超音波処理し（約５分）、そして残りの沈殿物を濾過によって除去し、そして
乾燥した（Ｐ₂Ｏ₅および高真空）。この手順は、０．８ｇの所望の２−［（５−
クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチル］−４−ニトロ−１Ｈ−ベ
ンゾイミダゾールを、茶褐色の固体として３５％の収率で与えた。これは、ＨＰ
ＬＣによって１つの主要なピークを与え、そして（ＦＢ＋）：ｍ／ｚ＝３２８．
０［Ｍ＋］の質量スペクトルを有した。

【０１０７】 （実施例２：２−［（５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチ
ル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール４−アミン（ＳＮＸ９２３）の調製）

【０１０８】

【化２７】 （一般的手順１（環化縮合））：還流冷却器および撹拌棒を備えた１００ｍＬ
の丸底フラスコ（ＲＢＦ）に、窒素ブランケットの下で、３−ニトロ−１，２−
フェニレンジアミン（０．５０ｇ；３．２６ミリモル）、４−クロロ−１，２−
フェニレンジアミン（０．４６ｇ；３．２６ミリモル）、ジエチルマロンイミデ
ートジヒドロクロリド（１．１ｅｑ．；０．８３ｇ；３．６０ミリモル）および
酢酸（２５ｍＬ）を添加した。反応を２時間還流で維持し、次いで室温まで冷却
した。溶媒をロトベーパー（ｒｏｔｏｖａｐｏｒ）で取り除き、そして残りの固
体を、希塩酸（約７５ｍＬ）に懸濁した。ｐＨを５Ｍ ＮａＯＨを使用して約６
にし、沈殿物を収集し、そして室温で数時間風乾した。

【０１０９】 （一般的手順２（還元））：３つの化合物の粗混合物を、２５０ｍＬのＲＢＦ
に添加し、そしてメタノール（約３５ｍＬ）に溶解した。デグッサの触媒（５０
ｍｇ）を添加し、フラスコをゴム隔壁で密閉し、そして水素ガスを１０分間フラ
スコに流した。この反応混合物を、水素雰囲気下で一晩維持し（バルーンを介し
て）、次いで、Ｃｅｌｉｔｅを用いて濾過した。メタノールを取り除き、そして
粗固体を１０ｍＬの希塩酸に溶解して、分離用ＨＰＬＣによって精製し（５分間
の０．１％ ＴＦＡを含む５％アセトニトリル、次いで、４５分間に渡る５％か
ら９５％アセトニトリル）、そして希塩酸を用いた３回の凍結乾燥サイクルによ
ってＨＣｌ塩へ転換した。この手順は、０．１１０ｇの純粋な２−［（５−クロ
ロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール
４−アミンジヒドロクロリドを１０％の収率で与えた。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝
２９７．１［Ｍ⁺¹］ａｍｕを有し、そして２１０ｎｍおよび２８０ｎｍの両方で
、ＨＰＬＣ上に１つのピークを与えた（ＪＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して１４．３
２分）。

【０１１０】 （実施例３：５−クロロ−２−［（５−クロロ−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾイ
ミダゾール２−イル）メチル］−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール（ＳＮ
Ｘ９３４）の調製）

【０１１１】

【化２８】 以下の成分を、上記の一般的手順１に従って反応させた：４−クロロ−３−ニ
トロ−１，２−ベンゼンジアミン（１．０ｇ；５．３３ミリモル）、ジエチルマ
ロンイミデートジヒドロクロリド（１．１ｅｑ．；０．９５ｇ；２．９３ミリモ
ル）および酢酸（３５ｍＬ）。得られた固体を希塩酸に溶解し（熱を伴う）、そ
して凍結乾燥して、１．５６ｇの５−クロロ−２−［（５−クロロ−４−ニトロ
−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチル］−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾイ
ミダゾールを６１％の収率で与えた。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝４０６．０［Ｍ⁺¹ ］ａｍｕを有し、そして２１０ｎｍおよび２８０ｎｍの両方で、ＨＰＬＣ上に１
つのピークを与えた（ＪＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して２６．９９分）。

【０１１２】 （実施例４：２−［（４−アミノ−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２
−イル）メチル］−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール４−アミン（ＳＮＸ
９３５）の調製）

【０１１３】

【化２９】 ＳＮＸ９３４（５−クロロ−２−［（５−クロロ−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾ
イミダゾール２−イル）メチル］−４−ニトロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール；１
２５ｍｇ；３．１ミリモル）を、上記の一般的手順２に従って還元した。粗固体
生成物を１０ｍＬの希塩酸に溶解して、分離用ＨＰＬＣによって精製し（５０分
間に渡る２５％アセトニトリル／０．１％ ＴＦＡから７５％アセトニトリル）
、そして希塩酸を用いた３回の凍結乾燥サイクルによってＨＣｌ塩へ転換した。
この手順は、８９ｍｇの２−［（４−アミノ−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダ
ゾール２−イル）メチル］−５−クロロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール４−アミン
ジヒドロクロリドを６８％の収率で与えた。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝３４６．１
［Ｍ⁺¹］ａｍｕを有し、そして２１０ｎｍおよび２８０ｎｍの両方で、ＨＰＬＣ
上に１つのピークを与えた（ＪＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して１７．８８分）。

【０１１４】 （実施例５：２−［（４−フルオロ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メ
チル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール４−イルアミン（ＳＮＸ９４０）の調製）

【０１１５】

【化３０】 以下の成分を、上記の一般的手順１に従って反応させた：３−ニトロ−１，２
−フェニレンジアミン（０．５０ｇ；３．２６ミリモル）、３−フルオロ−１，
２−フェニレンジアミン（０．４１ｇ；３．２６ミリモル）、ジエチルマロンイ
ミデートジヒドロクロリド（１．１ｅｑ．；０．８３ｇ；３．６０ミリモル）お
よび酢酸（２５ｍＬ）。次いで、３つの化合物の粗混合物を、上記の一般的手順
２に従って還元した。粗固体生成物を１０ｍＬの希塩酸に溶解して、分離用ＨＰ
ＬＣによって精製し（５０分間に渡る２５％から７５％アセトニトリル（０．１
％ ＴＦＡを含む））、そして希塩酸を用いた３回の凍結乾燥サイクルによって
ＨＣｌ塩へ転換した。この手順は、０．２０８ｇの純粋な２−［（４−フルオロ
−１Ｈ−ベンゾイミダゾール２−イル）メチル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール４
−イルアミンジヒドロクロリドを１８％の収率で与えた。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ
＝２８２．２［Ｍ⁺¹］ａｍｕを有し、そして２１０ｎｍおよび２８０ｎｍの両方
で、ＨＰＬＣ上に１つのピークを与えた（ＪＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して１２．
９９分）。

【０１１６】 （実施例６：２−［（４−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）メ
チル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−イルアミン（ＳＮＸ ９４４）の調製
）

【０１１７】

【化３１】 以下の成分を、上記の一般手順１に従って反応させた：３−ニトロ−１，２−
フェニレンジアミン（０．５ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、３−メチル−１，２−フ
ェニレンジアミン（０．４ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、ジエチルマロンイミデート
二塩酸塩（１．１当量；０．８３ｇ；３．６０ｍｍｏｌ）および酢酸（２５ｍＬ
）。次いで、３つの化合物の粗混合物を、上記の一般手順２に従って還元した。
粗固体生成物を、希ＨＣｌ（１０ｍＬ）にとり、分取用ＨＰＬＣ（６０分にわた
って、１５〜７５％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡを含む））により精製し、
そして希ＨＣｌを用いる３回の凍結乾燥サイクルにより、ＨＣｌ塩に変換した。
この手順により、０．４２ｇの純粋な２−［（４−メチル−１Ｈ−ベンゾイミダ
ゾール−２−イル）メチル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−イルアミン二塩
酸塩を収率３７％で得た。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝２７８．２［Ｍ⁺¹］ａｍｕを
有し、そしてＨＰＬＣにおいて２１０および２８０ｎｍの両方に１つのピークを
示した（ＪＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して１２．０１分）。

【０１１８】 （実施例７：２−［（４−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）メ
チル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸（ＳＮＸ ９７７）の調製
）

【０１１９】

【化３２】 以下の成分を、上記の一般手順１に従って反応させた：３−ニトロ−１，２−
フェニレンジアミン（０．５０ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、３，４−ジアミノ安息
香酸（０．４０ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、ジエチルマロンイミデート二塩酸塩（
１．１当量；０．８３ｇ；３．６０ｍｍｏｌ）および酢酸（２５ｍＬ）。次いで
、３つの化合物の粗混合物を、上記の一般手順２に従って還元した。粗固体生成
物を、希ＨＣｌ（１０ｍＬ）にとり、分取用ＨＰＬＣ（６０分にわたって、２〜
４０％アセトニトリル（０．１％ＴＦＡを含む））により精製し、そして希ＨＣ
ｌを用いる３回の凍結乾燥サイクルにより、ＨＣｌ塩に変換した。この手順によ
り、０．２１３ｇの純粋な２−［（４−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２
−イル）メチル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−５−カルボン酸二塩酸塩を収率
１７％で得た。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝３０８．２［Ｍ⁺¹］ａｍｕを有し、そし
てＨＰＬＣにおいて２１０および２８０ｎｍの両方に１つのピークを示した（Ｊ
ＷＴＦＡＣＮ勾配を使用して１０．２０分）。

【０１２０】 （実施例８：２−［（４−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）メ
チル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−カルボン酸（ＳＮＸ １７９９）の調
製）

【０１２１】

【化３３】 以下の成分を、上記の一般手順１に従って反応させた：３−ニトロ−１，２−
フェニレンジアミン（０．５０ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、２，３−ジアミノ安息
香酸（０．４０ｇ；３．２６ｍｍｏｌ）、ジエチルマロンイミデート二塩酸塩（
１．１当量；０．８３ｇ；３．６０ｍｍｏｌ）および酢酸（２５ｍＬ）。次いで
、３つの化合物の粗混合物を、上記の一般手順２に従って還元した。粗固体を、
希ＨＣｌ（１０ｍＬ）にとり、分取用ＨＰＬＣ（６０分にわたって、２〜４０％
アセトニトリル（０．１％ＴＦＡを含む））により精製し、そして希ＨＣｌを用
いる３回の凍結乾燥サイクルにより、ＨＣｌ塩に変換した。この手順により、０
．１０３ｇの純粋な２−［（４−アミノ−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル
）メチル］−１Ｈ−ベンゾイミダゾール−４−カルボン酸二塩酸塩を収率８％で
得た。これは、ＭＳ：ｍ／ｚ＝３０８．２［Ｍ⁺¹］ａｍｕを有し、そしてＨＰＬ
Ｃにおいて２１０および２８０ｎｍの両方に１つのピークを示した（ＪＷＴＦＡ
ＣＮ勾配を使用して１０．２０分）。

【０１２２】 （実施例９：２，２’−メチレンビス（４−ニトロ）ベンゾイミダゾール（Ｓ
ＮＸ ９００）および２，２’−メチレンビス（４−アミノ）ベンゾイミダゾー
ル（ＳＮＸ ９１２）の調製） フレーム乾燥した３Ｌの三口丸底フラスコに、スターラーバー、温度計および
２−ベンゾイミダゾリルアセトニトリル（３５．９ｇ；２２８ｍｍｏｌ）を備え
付け、次いで栓をした。このフラスコをオイルバブラーに開放して、緩やかな乾
燥窒素流を通した。次いで、無水トルエン（７５０ｍＬ）をカニューレにより添
加し、続いて、無水変性エタノール（３３ｍＬ；２．４当量）をシリンジで添加
した。この懸濁液を０℃の温度で冷却し、窒素流を止め、そしてＨＣｌガスをバ
ブリングした。ＨＣｌを、溶液の温度が１５℃を越えないような速度で、飽和す
るまで添加し、飽和するとすぐに氷浴を取り除いた。この反応物を室温で一晩撹
拌した。無水ジエチルエーテル（３Ｌ）を添加し、そしてこの混合物を氷浴中で
冷却した。窒素下でＳｃｈｌｅｎｋ管に濾過することにより固体を収集し、そし
て高真空下で乾燥した。生成物のエチル２−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−
イル）エタンイミダゾエート（図１Ｃを参照のこと）を、さらに分析または精製
することなく、次の工程に使用した。

【０１２３】 Ａｉｒｌｅｓｓ−Ｗａｒｅ（登録商標）を使用して、エチル２−（１Ｈ−ベン
ゾイミダゾール−２−イル）エタンイミドエートを、窒素雰囲気下で、スターラ
ーバーおよび還流凝縮器を備え、一方の口に乾燥管、他方の口にゴムセプタムを
備え付けたフレーム乾燥した二口３Ｌ丸底フラスコに移した。無水エタノール（
約５００ｍＬ）をカニューレを通して、撹拌しながら添加した。別のフレーム乾
燥した１Ｌ丸底フラスコに、３−ニトロ−１，２−フェニレンジアミン（３５ｇ
；２２８ｍｍｏｌ）および無水エタノール（約５００ｍＬ）を、窒素雰囲気下で
添加した。このニトロ化合物が溶解するまで、このフラスコを加熱し、そして内
容物を、熱いうちにカニューレを介してエチル２−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール
−２−イル）エタンイミダゾールの撹拌溶液に素早く添加した。この内容物を、
すぐに還流し、そして一晩、撹拌しながら還流した。溶媒を除去し（ロータリー
エバポレーター）、そして固体残渣を１Ｎ ＨＣｌ（約１Ｌ）に懸濁し、そして
溶解するまで加熱した。この熱い溶液を濾過し、そして室温まで冷却し、冷却す
ると、２−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イルメチル）−４−ニトロ−１Ｈ
−ベンゾイミダゾールが、二塩酸塩として結晶化した。この固体を濾過により除
去し、そして高真空下で乾燥した。この手順により、５７ｇ（６９％）の純粋な
２−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イルメチル）−４−ニトロ−１Ｈ−ベン
ゾイミダゾール二塩酸塩を灰色の固体として得た。これは、ＨＰＬＣによる１つ
のピークを示し、そして質量スペクトル（ＦＢ＋）：ｍ／ｚ＝２９４［Ｍ＋］を
有した。

【０１２４】 ニトロ基の還元により、本明細書中でＳＮＸ ９１２として示される、４−ア
ミノ化合物を得た。ＭＳ：［Ｍ＋１］２６４。

【０１２５】 （実施例１０：２−（６−エチル−１，４，５，６−テトラヒドロ−ピリミジ
ン−２−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール二塩酸塩（ＳＮＸ １０２１
）の調製）

【０１２６】

【化３４】 （一般手順３（環縮合））：実施例９に記載されるように調製した中間体のエ
チル２−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）エタンイミダゾエート（５〜
１０ｍｍｏｌ）を、貯蔵Ｓｃｈｌｅｎｋ管から、スターラーバーを備え付けたオ
ーブン乾燥した二口丸底フラスコに、緩やかなアルゴン流下で、この固体を空気
に曝すことなく移した。この二口フラスコおよび内容物を空のＳｃｈｌｅｎｋ管
から取り除き、そしてアルゴン下で栓をし、そしてこの固体の重量を差から得た
。一方の栓を、Ｄｒｉｅｒｉｔｅを入れた乾燥管を備え付けたオーブン乾燥した
ウオータージャケット凝縮器に替えた。エチルアルコール（無水）をこのフラス
コに、アルゴン圧下でカニューレで入れ、そして得られた懸濁液を撹拌し、そし
て加熱マントルに入れた。内容物が還流に達する前に、１．１当量の１，３−ジ
アミノペンタンを、シリンジでこの懸濁液にゆっくりと添加した。熱は、還流が
続くための可能な限り低い設定に調節した。１２時間後、得られた溶液をロータ
リエバポレーターにより濃縮し、そして残渣を水に溶解し、濾過し、そして逆相
ＨＰＬＣにより分離した。所望の生成物を含む画分（予測分子量を有する）をプ
ールし、そして乾固するまで濃縮した。得られた固体を１５ｍＬの０．５Ｍ Ｈ
Ｃｌに溶解し、そして濃縮した。この手順を２回繰り返した。得られた白色固体
は、以下の分析データを示した：¹Ｈ ＮＭＲ：０．９３８ｐｐｍ（ｔ，３Ｈ）
；１．５２６（５重線、１Ｈ）；１．６９４（５重線，２Ｈ）；２．０４６（５
重線，１Ｈ）；３．４２１（ｔ，２Ｈ）；３．５１８（５重線，１Ｈ）；４．５
９４ｐｐｍ（ｄ，２Ｈ）；７．４８８ｐｐｍ（ｑ，２Ｈ）；７．７８５ｐｐｍ（
ｑ，２Ｈ）。質量スペクトル：［Ｍ＋１］⁺＝２４３．２。

【０１２７】 （実施例１１：２−（５，５−ジメチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ
ール−２−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール二塩酸塩（ＳＮＸ １０２
０）の調製）

【０１２８】

【化３５】 １，３−ジアミノ−ペンタンの代わりに１，２−ジアミノ−２−メチルプロパ
ンを使用して、一般手順３を繰り返した。得られた白色個体は、以下の分析結果
を示した：¹Ｈ ＮＭＲ：１．３８８ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ）；３．６５７ｐｐｍ（
ｓ，２Ｈ）；４．６２０ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ）；７．４８４ｐｐｍ（ｑ，２Ｈ）；
７．７８４（ｑ，２Ｈ）。質量スペクトル：［Ｍ＋１］⁺＝２２９．１。

【０１２９】 （実施例１２：（４−ニトロ−５−クロロ−ベンゾイミダゾール−２−イル−
ベンゾイミダゾール）メタン二塩酸塩（ＳＮＸ ９３７）の調製） １，３−ジアミノペンタンの代わりに１，２−ジアミノ−２−メチルプロパン
を使用して、一般手順３を繰り返した。粗生成物の暗褐色の固体を、１５ｍＬの
０．５Ｍ ＨＣｌに溶解し、そして濃縮した。この手順を２回繰り返した。得ら
れた固体は、以下の分析データを示した：¹Ｈ ＮＭＲ：５．０２９ｐｐｍ（ｓ
，２Ｈ）；７．４６５ｐｐｍ（ｄ，１Ｈ）；７．５０ｐｐｍ（ｄｄ，２Ｈ）；７
．７５ｐｐｍ（ｄｄ，２Ｈ）；７．８８５（ｄ，１Ｈ）。質量スペクトル：［Ｍ
＋１］⁺＝３２９。

【０１３０】 （実施例１３：２−（１，３−ジメチル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾ
ール−２−イルメチル）−１Ｈ−ベンゾイミダゾール二塩化水素（ＳＮＸ ９８
０）の調製）

【０１３１】

【化３６】 １，３−ジアミノ−ペンタンの代わりにＮ，Ｎ’−ジメチルエチレンジアミン
を使用して、一般手順３を繰り返した。得られた白色固体は、以下の分析データ
を示した：：¹Ｈ ＮＭＲ：７．６７０ｐｐｍ（ｑ，２Ｈ）；７．３４０ｐｐｍ
（ｑ，２Ｈ）；４．６５４ｐｐｍ（ｓ，２Ｈ）；４．６ｐｐｍ（非常にブロード
ｓ，１Ｈ）；３．９１７ｐｐｍ（ｓ，４Ｈ）；３．１１９ｐｐｍ（ｓ，６Ｈ）。
質量スペクトル：［Ｍ＋１］⁺＝２２９．１。

【０１３２】 （実施例１４：（１Ｈ−インドール−２−イル）−（１−メチル−１Ｈ−ベン
ゾイミダゾール−２−イル）−メタノン塩酸塩（ＳＮＸ １０１７）の調製）

【０１３３】

【化３７】 無水テトラヒドロフラン（５０ｍｌ）中のＮ−メチル−ベンゾイミダゾール（
１．３２ｇ、１０．０ｍｍｏｌ）の溶液を、窒素雰囲気下で−８７℃まで冷却し
た。ｎ−ブチルリチウム（４．０８ｍｌ、１０．２ｍｍｏｌ；ヘキサン中２．５
Ｍ）を、−７８℃でゆっくりと添加した。３０分間撹拌した後、この溶液を、−
７８℃で、５０ｍｌのテトラヒドロフラン中のインドール−２−カルボン酸エチ
ル（１．９８ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）の溶液でクエンチした。次いで、この溶液
を室温まで加温した。６時間後、この溶液を、ジエチルエーテル（１５０ｍｌ）
で希釈した塩化アンモニウム水溶液（２０ｍｌ）でクエンチした。有機層を無水
硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、そして濃縮して、粗生成物を得、これをＨＰ
ＬＣで精製した。収量１５０ｍｇ（４０％）。ＭＳ：［Ｍ＋１］２７６。

【０１３４】 （実施例１５：ビス−（１Ｈ−ベンゾイミダゾール−２−イル）メタノン二塩
酸塩（ＳＮＸ １７１９）の調製）

【０１３５】

【化３８】 テトラヒドロフラン中のベンゾイミダゾール（１．１８ｇ、１０．０ｍｍｏｌ
）の懸濁液に、ホルムアルデヒド（１ｍｌ）（１．０当量、３７％水溶液）を室
温で添加した（環アミノ基の保護のため）。１０分後、溶媒をロータリーエバポ
レーターで除去し、そして中間体の（１−ヒドロキシメチル）ベンゾイミダゾー
ルを、減圧下で２４時間乾燥した。

【０１３６】 無水ＴＨＦ（５０ｍｌ）中の（１−ヒドロキシメチル）ベンゾイミダゾールの
溶液を−７８℃まで、窒素雰囲気下で冷却し、そしてｔｅｒｔ−ブチルリチウム
（６．８ｍｌ、１０．２ｍｍｏｌ；ペンタン中１．５Ｍ）を、−７８℃でゆっく
りと添加した。この溶液を−２０℃まで加温し、そして撹拌しながら１時間維持
して、均一な黄色から燈色の溶液を得た。この溶液を５０ｍｌのＴＨＦ中のカル
ボニルジイミダゾール（０．０８ｇ、０．５ｍｍｏｌ）の溶液で、−７８℃で処
理し、次いで、室温まで加温した。６時間後、この溶液を、ジエチルエーテル（
１５０ｍｌ）で希釈したＮＨ₄Ｃｌ水溶液（２０ｍｌ）でクエンチし、そして２
Ｎ 塩酸水溶液（４×２５ｍｌ）で慎重に抽出した。水性の酸性抽出物を合わせ
、そして０℃で撹拌しながら、ＮＨ₄ＯＨ水溶液で塩基性にして、沈殿を得、こ
の沈殿を濾去し、そして減圧下で乾燥した。生成物をＨＰＬＣにより精製した。
収量：１．２ｇ、４６％。ＳＭ：［Ｍ＋１］２６３。

【０１３７】 （実施例１６：網膜神経節細胞（ＲＧＣ）の精製および培養） 出生後８日（Ｐ８）のＳｐｒａｇｕｅ−Ｄａｗｌｅｙラット由来のＲＧＣを、
以前に記載された（Ｂａｒｒｅｓら、１９８８；Ｍｅｙｅｒ−Ｆｒａｎｋｅら、
１９９５）ように精製した。精製した網膜神経節細胞を、ポリ−Ｄ−リジンおよ
びメロシンで事前にコーティングした組織培養プラスチック上に置き、そして種
々の補充物を含む無血清Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｇｉｂｃｏ）にて培養した
。

【０１３８】 （Ａ．ＲＧＣの単離） Ｐ８のＳｐｒａｇｕｅ／Ｄａｗｌｅｙラット網膜由来の組織（Ｓｉｍｏｓｅｎ
Ｌａｂｓ、ＣＡ）を酵素により分離して、単一細胞の懸濁物を得た。これは、
Ｌ−システインを含むＥａｒｌｅ平衡化塩溶液（ＥＢＳＳ、Ｇｉｂｃｏ）中のパ
パイン溶液（１５Ｕ／ｍｌ／網膜、Ｗｏｒｔｈｉｎｇｔｏｎ）中に適切な時間、
３７℃でこの組織をインキュベートして、この組織を分離することによった。次
いでこの組織を、オボムコイド（Ｂｏｅｈｒｉｎｇｅｒ−Ｍａｎｎｈｅｉｍ）、
ＤＮａｓｅ（Ｓｉｇｍａ）およびウシ血清アルブミン（ＢＳＡ；Ｓｉｇｍａ）を
含む溶液中にて、１ｍｌピペットを用いて連続して破壊して、単一細胞懸濁物を
得た。次いでこの細胞を、オボムコイド／ＢＳＡの懸濁物中で洗浄した。

【０１３９】 （Ｂ．パニング手順） 連続的免疫パニングを使用して、ＲＧＣを９９％を超える均一性にまで精製し
得る。代表的には、ＲＧＣの２０〜３０％を単離する。これは、Ｐ８（出生後８
日）動物１匹あたり約４０，０００〜６０，０００個のＲＧＣを示す。

【０１４０】 パニングプレートをペトリ皿（抗ウサギＩｇＧプレートについては１５０ｍｍ
、そしてＴ１１Ｄ７プレートについては１００ｍｍ）にて調製した。これは、１
０ｍｇ／ｍｌの二次抗体を含むＴｒｉｓ緩衝溶液（ｐＨ９．５）とともに４℃で
約１２時間インキュベートすることによった。アフィニティー精製したヤギ抗ウ
サギＩｇＧ（Ｈ＋Ｌ鎖特異的；Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）ま
たはアフィニティー精製したヤギ抗マウスＩｇＭ（ｍｕ鎖特異的；Ｊａｃｋｓｏ
ｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ）のいずれかを二次抗体として使用した。次いで
、このプレートをリン酸緩衝化生理食塩水（ＰＢＳ）で３回洗浄し、そして抗マ
ウスＩｇＭ抗体を含む皿を、Ｔｈｙ １．１ ＩｇＭモノクローナル上清（マウ
スＴｈｙ １．１に対する抗体、Ｔ１１Ｄ７ｅ２、ＡＴＣＣ、ＴＩＢ １０３）
とともに室温でさらに約２時間インキュベートした。血清の除去後、このプレー
トをＰＢＳで３回洗浄した。パニング皿への細胞の非特異的結合を防ぐために、
２ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）を含むＰＢＳをこのパニング皿に配
置した。

【０１４１】 網膜細胞懸濁物を、抗ラットマクロファージ抗血清（Ａｘｅｌｌ）中で約２０
分間インキュベートし、遠心分離し、ＰＢＳ中に再懸濁し、そして抗ウサギパニ
ングプレート上で約４５分間インキュベートした。１５分ごとに穏やかにプレー
トに渦を起こして、すべての細胞がプレートの表面に確実に接触するようにした
。この後、細胞懸濁物を約３０分間、第２の抗ウサギパニングプレートに移した
。非接着細胞を上清と共に取り出し、１５μｍ Ｎｙｔｅｘメッシュ（Ｔｅｔｋ
ｏ）を通して濾過し、そしてＴ１１Ｄ７パニングプレート上に配置した。約４５
分後、プレートをＰＢＳで８回洗浄して、非接着細胞を除去した。

【０１４２】 （Ｃ．接着細胞の取り出し） トリプシン溶液（０．１２５％）を、ＥＢＳＳ（Ｃａ²⁺およびＭｇ²⁺を含まな
いＥａｇｌｅ平衡塩溶液）中にトリプシンストック（Ｓｉｇｍａ）を希釈するこ
とによって調製した。パニング皿中の細胞を、５％ ＣＯ₂インキュベーター中
で１０分間、この溶液４ｍｌとともにインキュベートした。このプレートの周囲
でトリプシン溶液を穏やかにピペッティングすることによって、細胞を取り除い
た。２５％ウシ胎仔血清培地１０ｍｌを添加して、トリプシンを不活化し、そし
て細胞を遠心分離し、そして培養培地に再懸濁した。

【０１４３】 （Ｄ．ＲＧＣの培養） 約５，０００個の精製ＲＧＣを、ポリ−Ｄ−リジン（ＰＤＬ，７０ｋＤ、１０
ｍｇ／ｍｌ；Ｓｉｇｍａ）およびメロシン（２ｍｇ／ｍｌ；Ｇｉｂｃｏ）で事前
にコーティングした９６ウェルプレート（Ｆａｌｃｏｎ）にて培養した。このＲ
ＧＣを、以下を含む無血清Ｎｅｕｒｏｂａｓａｌ培地（Ｂｒｅｗｅｒら、１９９
３；Ｇｉｂｃｏ）にて培養した：Ｓａｔｏ−ＢｏｔｔｅｎｓｔｅｉｎおよびＢ２
７（Ｇｉｂｃｏ）補充物、インスリン（Ｓｉｇｍａ、５ｍｇ／ｍｌ）、脳由来神
経栄養因子（ＢＤＮＦ、２５ｎｇ／ｍｌ；Ｐｒｅｐｒｏｔｅｃｈ）、毛様体神経
栄養因子（ＣＮＴＦ、２０ｎｇ／ｍｌ；Ｐｒｅｐｒｏｔｅｃｈ）およびフォルス
コリン（１０ｍＭ、Ｓｉｇｍａ）。生存する細胞の割合を、ＭＴＴアッセイによ
って、３日目、７日目および１４日目に評価した。

【０１４４】 （実施例１７：虚血についての酸素／グルコース欠乏（ＯＧＤ）モデル） 網膜神経節細胞を、上記の無血清培地にて５日間、９６ウェルプレートにて増
殖させた。６日目に、コントロール細胞についてはグルコースを含み、そして試
験細胞（酸素／グルコース欠乏細胞）についてはグルコースを欠く、塩溶液（例
えば、Ｅａｒｌｅ平衡塩溶液（ＥＢＳＳ、Ｇｉｂｃｏ））中で３回洗浄した。コ
ントロール細胞は、５％ＣＯ₂インキュベーター中でさらにインキュベートし、
一方ＯＧＤ細胞は、嫌気チャンバー中で酸素を欠乏させた（３時間）。試験化合
物を、コントロール細胞およびＯＧＤ細胞に、ＯＧＤの３０分前から、ＯＧＤの
間、ならびにＯＧＤの後２４時間、およびＯＧＤの後４８時間の期間、添加した
。

【０１４５】 ＯＧＤの３時間後、コントロール細胞および試験細胞をグルコースを含む増殖
培地に移し、そして５％ ＣＯ₂インキュベーター中でさらに４８時間培養し、
続いて、ＭＴＴアッセイ、ヨウ化プロピジウムアッセイおよびアネキシンアッセ
イを使用して、細胞の生存度を決定した。

【０１４６】 細胞生死判別アッセイについて、ＭＴＴを培養物に添加し、そして３７℃で１
時間インキュベートした。活性なミトコンドリアを有する生存細胞は、テトラゾ
リウム環を切断して、目に見える暗青色のホルマザン産物を形成する。生存細胞
および死細胞を、酸素／グルコース欠乏および／または増殖因子欠乏後の種々の
時点（例えば、２４時間、４８時間、または７２時間）に、暗視野顕微鏡により
計数する。すべての値は、少なくとも３連の培養物についての平均＋／−平均の
標準誤差（ＳＥＭ）として記録する。

【０１４７】 酸素／グルコース欠乏（ＯＧＤ）の２４時間後、非欠乏コントロール細胞と比
較して、約２５％少ない網膜神経節細胞が生存していることを決定した。４８時
間後、非欠乏コントロール細胞と比較して、４０％少ない細胞が生存した。死細
胞は、アポトーシス細胞の代表的な縮んだ形態を示した。この網膜神経節細胞が
ＯＧＤの後に、プログラムされた細胞死（アポトーシス）で死んだことを確認す
るために、細胞培養物を、ＯＧＤの２４時間後および４８時間後に、ＦＩＴＣ結
合アネキシンＶ（ＡｐｏＡｌｅｒｔ Ｋｉｔ、Ｃｌｏｎｔｅｃｈ）およびＰＩで
標識し、その後、光学顕微鏡および蛍光顕微鏡検査した。３連の値につき、２０
０個の細胞を計数した。アネキシン陽性細胞の割合は、以前の実験にて観察され
た死細胞の割合と一致した。全死ＲＧＣの約８０％もまた、２４時間および４８
時間の両方でアネキシンＶ陽性であった。このことは、細胞の大多数がアポトー
シスで死んだことを示す。

【０１４８】 （実施例１８：インビボ局所虚血モデル） （Ａ．ラットフィラメントモデル） ３１０〜３８０ｇの重量の成体雄性Ｗｉｓｔｅｒラットを使用した。動物を一
晩断食させたが、水は自由に与えた。０．８％酸素中の３％イソフランを用いて
麻酔を誘導しそして維持した。全身血圧を、中大脳動脈閉塞（ＭＣＡＯ）の前、
間および後、そして試験化合物の投与直前に記録した。被験体に、試験化合物Ｓ
ＮＸ ９１２を、５ｍｇ／ｋｇ ＩＣＶ（ＭＣＡＯ前）または２５ｍｇ／ｋｇ
ＩＶ（再灌流直後、ＭＣＡＯ２時間後）を与え、脱イオン水を与えたコントロー
ル被験体と比較した。温度を制御し、そして再灌流前、間、および後に記録した
。再灌流後、再灌流後４時間の間、毎時間に温度を測定した。

【０１４９】 すべての動物を、Ｋｏｉｚｕｍｅら（１９８６）の管腔内フィラメント技術を
Ｚｈａｏら（１９９４）により改変されたように使用して、２時間のＭＣＡＯに
供した。外科的正中切開を行って、右の総頸動脈、外頸動脈および内頸動脈を曝
した。この総頸動脈、外頸動脈および後頭動脈をきつく結紮し、そして内頸動脈
を微小血管クリップを用いて一時的に閉鎖した。小切開を総頚動脈にて行い、そ
してナイロンモノフィラメントを総頚動脈を通して内頚動脈へと挿入した。次い
でこのフィラメントを注意深く頭方向に１９ｍｍ前進させて、中大脳動脈をウィ
リス輪中にあるその起点部位で閉塞させた。麻酔を終了させ、そして覚醒の際に
、ＭＣＡＯの間の神経学的欠損の出現について動物を観察した。ＭＣＡＯの２時
間後、１．５％ハロタンを用いて再び動物を麻酔し、そして閉塞フィラメントを
引き抜いて再灌流させた。

【０１５０】 管腔内フィラメント技術によるＭＣＡＯは虚血中高体温および虚血後高体温を
生じ得るので、網膜温度を、ＭＣＡＯを開始して６時間の間の外部加熱および冷
却により制御した。網膜温度は、３７．５＋／−０．５℃に維持された。

【０１５１】 （Ｂ．ＭＣＡＯ後の虚血損傷の評価） 動物を、再灌流の２４時間後にＣＯ₂窒息により殺傷した。窒息後、脳を素早
く取り出し、そして氷冷０．９％生理食塩水中にて１０分間冷却した。虚血損傷
の程度を可視化するために、２ｍｍ厚の冠状切片７個を、組織スライサーを用い
て各脳から前極の１ｍｍ後ろから始めて切断した。この切片を、１．０％の塩化
２，３，５−トリフェニルテトラゾリウム（２，３，５−ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｔ
ｅｔｒａｚｏｌｉｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ）（ＴＴＣ）を含む０．９％生理食塩水
溶液中に浸漬し、そして３７℃で３０分間インキュベートし、そしてホルマザン
（赤）の存在について観察した。ホルマザンは、正常な生存組織において内因性
デヒドロゲナーゼ活性によるＴＴＣの還元により生成される。

【図面の簡単な説明】

【図１】 図１Ａ〜１Ｃは、本発明の化合物を調製するための合成方法を例示する。

【図２】 図２は、ＭＣＡＯインビボ発作モデルにおける虚血容量および梗塞容量に対す
る、ＳＮＸ９１２のＩＣＶ（脳室内）投与の効果を示す（ＣＩＶ＝皮質梗塞容量
；ＥＶ＝水腫；ＳＰＶ＝皮質下半影；ＣＰＶ＝皮質半影；ＳＩＶ＝皮質下梗塞容
量）。

【図３】 図３は、図２に例示された研究におけるＳＮＸ９１２についての用量応答デー
タを示す。

【図４】 図４は、ＭＣＡＯインビボ発作モデルにおける虚血容量および梗塞容量に対す
る、ＳＮＸ９１２のＩＶ（静脈内）投与の効果を示す。

【図５】 図５は、図４に例示された研究におけるＳＮＸ９１２についての用量応答デー
タを示す。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ａ６１Ｐ 25/00 Ａ６１Ｐ 25/00 25/28 25/28 29/00 29/00 37/06 37/06 43/00 １０５ 43/00 １０５ Ｃ０７Ｄ 403/06 Ｃ０７Ｄ 403/06 (31)優先権主張番号 ６０／１６８，２５６ (32)優先日 平成11年11月30日(1999．11．30) (33)優先権主張国 米国（ＵＳ） (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ， ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，Ｋ Ｅ，ＬＳ，ＭＷ，ＭＺ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＴＺ，ＵＧ ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ， ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＧ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ， ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，Ｃ Ｈ，ＣＮ，ＣＲ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＤＭ，ＤＺ ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ， ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，Ｋ Ｇ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＡ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ， ＭＸ，ＭＺ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，Ｓ Ｄ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ ，ＴＴ，ＴＺ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ， ＺＡ，ＺＷ (72)発明者 ウッド， ポール エル． アメリカ合衆国 カリフォルニア 95037， モーガン ヒル， キャスル ヒル ド ライブ 18600 (72)発明者 アンスタイン， ドュラン ティー． アメリカ合衆国 アイダホ 83686， ナ ンパ， イー． ハーバー グローブ ド ライブ 2305 (72)発明者 メイヤー−フランケ， アンケ アメリカ合衆国 カリフォルニア 94025， メンロ パーク， ローレライ レーン 69 (72)発明者 ツァオ， チ アメリカ合衆国 カリフォルニア 94536， フレモント， キローグリン コモン 35863 (72)発明者 カーン， モハメド エイ． アメリカ合衆国 カリフォルニア 94087， サニーベイル， グレープ アベニュー 756 Ｆターム(参考） 4C063 AA01 BB03 BB04 CC26 CC29 DD25 DD26 EE01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC38 BC39 BC42 GA06 GA07 MA01 MA04 ZA02 ZA15 ZA36 ZA89 ZB08 ZB11 ZB21

Claims (63)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 細胞死を阻害する際に使用するための医薬の製造のための、
   式Ｉの化合物： 【化１】 またはその薬学的に受容可能な塩の使用であって、ここで、 Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、
   カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエステル、アミノ、アルキルアミ
   ノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され； Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
   よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
   れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
   、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
   、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
   ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
   Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
   であり、そしてここで、リンカーＬの反対側にあるＡ−−−−−−Ｂ基は、同一
   であっても異なってもよく；そして ＹおよびＹ’は独立して、炭素および窒素から選択され； 但し、Ｘ、Ｘ’およびＲ¹が水素である場合には、ＬはＣＨ₂であり、Ｙは炭素
   であり、そしてＡ−−−−−−Ｂはインドール環またはイミダゾール環を形成す
   るに効果的な三原子結合を表し、ＺおよびＺ’が、同時には、水素、ニトロ、ア
   ミノ、およびハロゲンから選択されることはない、化合物またはその薬学的に受
   容可能な塩の使用。
2. 【請求項２】 ＬがＣＨ₂、ＣＨＣＨ₃、またはカルボニルである、請求項１
   に記載の使用。
3. 【請求項３】 ＬがＣＨ₂である、請求項２に記載の使用。
4. 【請求項４】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾー
   ル環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項１に記載の使用。
5. 【請求項５】 ＮＲ¹が、ＮＨ、ＮＣＨ₃、またはＮＣＨ₂Ｃ₆Ｈ₅（Ｎ−ベン
   ジル）である、請求項４に記載の使用。
6. 【請求項６】 ＹおよびＹ’が炭素である、請求項４に記載の使用。
7. 【請求項７】 細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物であって、有効
   量の式Ｉの化合物： 【化２】 またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み、こ
   こで、 Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、
   カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエステル、アミノ、アルキルアミ
   ノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され； Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
   よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
   れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
   、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
   、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
   ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
   Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
   であり、そしてここで、リンカーＬの反対側にあるＡ−−−−−−Ｂ基は、同一
   であっても異なってもよく；そして ＹおよびＹ’は独立して、炭素および窒素から選択され、 ここで、ＸおよびＸ’のうちの少なくとも一方は、アミノまたはニトロである
   、組成物。
8. 【請求項８】 Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’が独立して、水素、アルキル、カル
   ボン酸またはエステル、アミノ、ニトロ、クロロおよびフルオロから選択される
   、請求項７に記載の組成物。
9. 【請求項９】 ＺおよびＺ’が独立して、水素、カルボン酸、クロロ、およ
   びフルオロから選択される、請求項８に記載の組成物。
10. 【請求項１０】 細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物であって、有
    効量の式ＩＩの化合物： 【化３】 またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み、こ
    こで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
    よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
    、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択され； Ｒ⁵は、電子対、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択され
    ； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
    、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
    ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
    Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
    であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｗは、示した２つの窒素原子を連結して５〜７員の複素環式環を形成する、２
    〜４個の炭素のアルキル鎖を表し、ここで該アルキル鎖の各炭素原子は、非置換
    であるか、または１つもしくは２つの低級アルキル基もしくはヒドロキシル基で
    置換されており；そして Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、該置換基は独立して
    、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン
    酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択される
    、薬学的組成物。
11. 【請求項１１】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾ
    ール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項１０に記載の組成物。
12. 【請求項１２】 Ｙが炭素である、請求項１１に記載の組成物。
13. 【請求項１３】 Ｗにより表される前記アルキル鎖の各炭素原子が、非置換
    であるか、またはメチル置換されている、請求項１０に記載の組成物。
14. 【請求項１４】 ＬがＣＲ²Ｒ³である、請求項１０に記載の組成物。
15. 【請求項１５】 Ｒ²およびＲ³が独立して、水素および低級アルキルから選
    択される、請求項１４に記載の組成物。
16. 【請求項１６】 Ｒ⁵が電子対である、請求項１０に記載の組成物。
17. 【請求項１７】 細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物であって、有
    効量の式ＩＩＩの化合物： 【化４】 またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み、こ
    こで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
    よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
    、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； 各Ｒ⁴は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ；そして Ｍは、−ＣＲ⁶Ｒ⁷−ＣＲ⁸Ｒ⁹−または−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、ここでＲ⁶〜
    Ｒ⁹は独立して、水素およびアルキルから選択される、組成物。
18. 【請求項１８】 Ｌが、ＣＨ₂、ＣＨＮＨ₂、ＣＨＮＯ₂、カルボニル、また
    は直接結合である、請求項１７に記載の組成物。
19. 【請求項１９】 Ｒ⁴が水素または低級アルキルである、請求項１７に記載
    の組成物。
20. 【請求項２０】 Ｍが−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−である、請求項１８に記載の組成物
    。
21. 【請求項２１】 Ｒ⁶およびＲ⁸が独立して、水素またはメチルである、請求
    項２０に記載の組成物。
22. 【請求項２２】 細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物であって、有
    効量の式ＩＶの化合物： 【化５】 またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み、こ
    こで、 Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
    、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
    ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
    Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
    であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、該置換基は独立して
    、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン
    酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され；
    そして Ｑは、ニトロおよび２−ピリジルから選択される、薬学的組成物。
23. 【請求項２３】 Ｙが炭素である、請求項２２に記載の組成物。
24. 【請求項２４】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾ
    ール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項２３に記載の組成物。
25. 【請求項２５】 Ｚが水素である、請求項２４に記載の組成物。
26. 【請求項２６】 細胞死を阻害する方法であって、このような処置を必要と
    する被験体に、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式Ｉの化合物： 【化６】 またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含し、ここで、 Ｘ、Ｘ’、ＺおよびＺ’は独立して、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、
    カルボン酸またはエステル、スルホン酸またはエステル、アミノ、アルキルアミ
    ノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され； Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
    よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
    、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
    、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
    ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
    Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
    であり、そしてリンカーＬの反対側にあるＡ−−−−−−Ｂ基は、同一であって
    も異なってもよく；そして ＹおよびＹ’は独立して、炭素および窒素から選択される、方法。
27. 【請求項２７】 ＬがＣＨ₂、ＣＨＣＨ₃、またはカルボニルである、請求項
    ２６に記載の方法。
28. 【請求項２８】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾ
    ール環またはピロール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項２６に
    記載の方法。
29. 【請求項２９】 ＸおよびＸ’のうちの少なくとも一方がアミノまたはニト
    ロである、請求項２６に記載の方法。
30. 【請求項３０】 ＺおよびＺ’が独立して、水素、カルボン酸、クロロ、お
    よびフルオロから選択される、請求項２９に記載の方法。
31. 【請求項３１】 細胞死を阻害する方法であって、このような処置を必要と
    する被験体に、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式ＩＩの化合物： 【化７】 またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含し、ここで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
    よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
    、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； Ｒ⁴は、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択され； Ｒ⁵は、電子対、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択され
    ； Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
    、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
    ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
    Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
    であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｗは、示した２つの窒素原子を連結して５〜７員の複素環式環を形成する、２
    〜４個の炭素のアルキル鎖を表し、ここで該アルキル鎖の各炭素原子は、非置換
    であるか、または１つもしくは２つの低級アルキル基もしくはヒドロキシル基で
    置換されており；そして Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、該置換基は独立して
    、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン
    酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択される
    、方法。
32. 【請求項３２】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾ
    ール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項３１に記載の方法。
33. 【請求項３３】 Ｗにより表される前記アルキル鎖の各炭素原子が、非置換
    であるかまたはメチル置換されている、請求項３１に記載の方法。
34. 【請求項３４】 Ｒ⁴が、水素、低級アルキル、およびベンジルから選択さ
    れ、そしてＲ⁵が電子対である、請求項３１に記載の方法。
35. 【請求項３５】 細胞死を阻害する方法であって、このような処置を必要と
    する被験体に、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式ＩＩＩの化合物： 【化８】 またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含し、ここで、 Ｌは、ＮＲ¹、カルボニル、ＣＲ²Ｒ³、または直接結合であり、ここで、Ｒ¹お
    よびＲ²は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ、そしてＲ³は、水素、低級アルキル、アミノ、低級アルキルアミノ、ニトロ
    、ハロゲン、および低級アルキルスルホネートから選択され； 各Ｒ⁴は独立して、水素、アルキル、アリール、およびアラルキルから選択さ
    れ；そして Ｍは、−ＣＲ⁶Ｒ⁷−ＣＲ⁸Ｒ⁹−または−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−であり、ここでＲ⁶〜
    Ｒ⁹は独立して、水素およびアルキルから選択される、方法。
36. 【請求項３６】 ＬがＣＨ₂、ＣＨＮＨ₂、ＣＨＮＯ₂、カルボニル、または
    直接結合である、請求項３５に記載の方法。
37. 【請求項３７】 Ｍが−ＣＲ⁶＝ＣＲ⁸−である、請求項３５に記載の方法。
38. 【請求項３８】 細胞死を阻害する方法であって、このような処置を必要と
    する被験体に、薬学的に受容可能なキャリア中の、有効量の式ＩＶの化合物： 【化９】 またはその薬学的に受容可能な塩を投与する工程を包含し、ここで、 Ａ−−−−−−Ｂは、隣接する６員環に縮合したイミダゾール環、ピロール環
    、オキサゾール環またはチアゾール環を形成するに効果的な三原子結合を表し、
    ここで、ＡおよびＢの一方は、窒素または炭素であり、そして他方は、ＮＲ¹、
    Ｏ、またはＳから選択され、ここで、ＡおよびＢのうちの少なくとも一方は窒素
    であり； Ｙは、炭素または窒素であり； Ｚは、Ｙを含むアリール環上の１つ以上の置換基を表し、該置換基は独立して
    、水素、アルキル、アルコキシ、シアノ、カルボン酸またはエステル、スルホン
    酸またはエステル、アミノ、ニトロ、およびハロゲンからなる群から選択され；
    そして Ｑは、水素、ニトロ、シアノ、および２−ピリジルからなる群から選択される
    、方法。
39. 【請求項３９】 Ａ−−−−−−Ｂが、隣接する６員環に縮合したイミダゾ
    ール環を形成するに効果的な三原子結合を表す、請求項３８に記載の方法。
40. 【請求項４０】 Ｚが水素である、請求項３８に記載の方法。
41. 【請求項４１】 前記細胞死がアポトーシス細胞死である、請求項２６に記
    載の方法。
42. 【請求項４２】 前記細胞が、ニューロン細胞または心臓細胞である、請求
    項２６に記載の方法。
43. 【請求項４３】 前記細胞死が、発作、虚血、心筋損傷、神経変性、外傷、
    自己免疫応答、または炎症に関連する、請求項４１に記載の方法。
44. 【請求項４４】 構造ＩＩａ： 【化１０】 を有する化合物であって、ここで、Ｒ、Ｒ’、およびＲ”の各々は独立して、水
    素およびメチルから選択され、そしてＷは、結合した２つの窒素原子を連結して
    ５〜７員の複素環式環を形成する、２〜４個の炭素のアルキル鎖を表し、ここで
    、該アルキル鎖の各炭素原子は、非置換であるか、または１つもしくは２つのメ
    チル基で置換されている、化合物。
45. 【請求項４５】 Ｒ、Ｒ’、およびＲ”が、水素であり、そしてＷが−ＣＨ ₂ ＣＨ（ＣＨ₃）−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は、本
    明細書中においてＳＮＸ−１０１８と称される、化合物。
46. 【請求項４６】 Ｒ、Ｒ’、およびＲ”が、水素であり、そしてＷが−ＣＨ ₂ Ｃ（ＣＨ₃）₂−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は、本
    明細書中においてＳＮＸ−１０２０と称される、化合物。
47. 【請求項４７】 Ｒ、Ｒ’、およびＲ”が、水素であり、そしてＷが−（Ｃ
    Ｈ₂）₃−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中
    においてＳＮＸ−１８１８と称される、化合物。
48. 【請求項４８】 Ｒ、Ｒ’、およびＲ”が、水素であり、そしてＷが−（Ｃ
    Ｈ₂）₄−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中
    においてＳＮＸ−１８１９と称される、化合物。
49. 【請求項４９】 Ｒがメチルであり、Ｒ’およびＲ”が、水素であり、そし
    てＷが−（ＣＨ₂）₂−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は
    、本明細書中においてＳＮＸ−１０１９と称される、化合物。
50. 【請求項５０】 Ｒ、Ｒ’、およびＲ”が、メチルであり、そしてＷが−（
    ＣＨ₂）₂−である、請求項４４に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書
    中においてＳＮＸ−１７７１と称される、化合物。
51. 【請求項５１】 構造Ｉａ： 【化１１】 を有する、４−アミノ−２−（ベンゾイミダゾール−２’−イル）メチル化合物
    であって、ここで、Ｚ’は、最も右に示す環上の４’または５’の置換基を表し
    、そしてＺおよびＺ’の各々は独立して、水素、クロロ、フルオロ、カルボキシ
    、およびメチルからなる群から選択される、化合物。
52. 【請求項５２】 ＺおよびＺ’の一方が水素である、請求項５１に記載の化
    合物。
53. 【請求項５３】 ＺおよびＺ’の両方が水素である、請求項５１に記載の化
    合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９１２と称される、化
    合物。
54. 【請求項５４】 Ｚが水素であり、そしてＺ’が５’−クロロである、請求
    項５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９２
    ３と称される、化合物。
55. 【請求項５５】 Ｚ’が水素であり、そしてＺが５−クロロである、請求項
    ５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９４７
    と称される、化合物。
56. 【請求項５６】 Ｚが水素であり、そしてＺ’が４’−フルオロである、請
    求項５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９
    ４０と称される、化合物。
57. 【請求項５７】 Ｚが水素であり、そしてＺ’が５’−フルオロである、請
    求項５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９
    ４２と称される、化合物。
58. 【請求項５８】 Ｚが水素であり、そしてＺ’が５’−カルボキシである、
    請求項５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−
    ９７７と称される、化合物。
59. 【請求項５９】 Ｚが水素であり、そしてＺ’が４’−メチルである、請求
    項５２に記載の化合物であって、該化合物は、本明細書中においてＳＮＸ−９４
    ４と称される、化合物。
60. 【請求項６０】 本明細書中においてＳＮＸ １７７２（２−（２−インド
    リルカルボニル）ベンゾイミダゾール）と称される、式Ｉの化合物。
61. 【請求項６１】 本明細書中においてＳＮＸ １７１９（２，２−カルボニ
    ルビスベンゾイミダゾール）と称される、式Ｉの化合物。
62. 【請求項６２】 本明細書中においてＳＮＸ ９８０（２−（１，３−ジメ
    チル−４，５−ジヒドロ−１Ｈ−イミダゾール−２−イルメチル）−１Ｈ−ベン
    ゾイミダゾール）と称される、式ＩＩの化合物。
63. 【請求項６３】 細胞死を阻害するために有用な薬学的組成物であって、有
    効量の以下の式の化合物： 【化１２】 またはその薬学的に受容可能な塩を、薬学的に受容可能なキャリア中に含み、こ
    こで、該化合物において： Ｒ’＝Ｒ”＝Ｒ’’’＝水素であり、そしてＹ＝Ａ＝窒素であり、該化合物が
    本明細書中においてＳＮＸ−９１１と称されるか； Ｒ’＝Ｒ”＝水素であり、Ｒ’’’＝メチルであり、Ｙ＝炭素であり、そして
    Ａ＝窒素であり、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−９２５と称されるか； Ｒ’＝Ｒ”＝Ｒ’’’＝メチルであり、Ｙ＝炭素であり、そしてＡ＝窒素であ
    り、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−９５２と称されるか； Ｒ’＝メチルであり、Ｒ”＝水素であり、Ｒ’’’＝オキソであり、Ｙ＝炭素
    であり、そしてＡ＝窒素であり、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−１０１
    ７と称されるか； Ｒ’＝Ｒ”＝水素であり、Ｒ’’’＝オキソであり、Ｙ＝炭素であり、そして
    Ａ＝窒素であり、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−１７１９と称されるか
    ； Ｒ’＝Ｒ”＝メチルであり、Ｒ’’’＝オキソであり、Ｙ＝炭素であり、そし
    てＡ＝窒素であり、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−１７２０と称される
    か；または Ｒ’＝Ｒ”＝水素であり、Ｒ’’’＝オキソであり、そしてＹ＝Ａ＝炭素であ
    り、該化合物が本明細書中においてＳＮＸ−１７７２と称される、薬学的組成物
    。