JP2003149096A - 血液濾過膜および方法 - Google Patents
血液濾過膜および方法Info
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Abstract
(57)【要約】
【課題】 微量の全血から血清あるいは血漿、血
球、さらには白血球を短時間で取得する方法を提供す
る。 【解決手段】 上記課題は、孔径が０．５〜４０μｍ
で、孔径のバラツキが変動係数２０％以下の膜からなる
血液濾過膜と、同一の平均孔径の膜あるいは異なる平均
孔径の膜を２枚以上用いることによる血液濾過方法によ
って解決される。
球、さらには白血球を短時間で取得する方法を提供す
る。 【解決手段】 上記課題は、孔径が０．５〜４０μｍ
で、孔径のバラツキが変動係数２０％以下の膜からなる
血液濾過膜と、同一の平均孔径の膜あるいは異なる平均
孔径の膜を２枚以上用いることによる血液濾過方法によ
って解決される。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、全血から血球を除
去するための濾過膜、およびその濾過膜を用いて全血か
ら赤血球あるいは白血球を捕捉して回収する方法に関す
る。
去するための濾過膜、およびその濾過膜を用いて全血か
ら赤血球あるいは白血球を捕捉して回収する方法に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】血液中の構成成分例えば代謝産物、蛋白
質、脂質、電解質、酵素、抗原、抗体などの種類や濃度
の測定は、通常全血を遠心分離して得られる血清または
血漿を検体として行われている。しかし、遠心分離には
手間と時間を要し、特に少数の検体を急いで処理したい
ときあるいは現場検査などには、電気を動力として遠心
分離機を必要とする遠心分離法は不向きである。そこ
で、濾過により全血から血清あるいは血漿を分離回収す
る方法が検討されてきた。
質、脂質、電解質、酵素、抗原、抗体などの種類や濃度
の測定は、通常全血を遠心分離して得られる血清または
血漿を検体として行われている。しかし、遠心分離には
手間と時間を要し、特に少数の検体を急いで処理したい
ときあるいは現場検査などには、電気を動力として遠心
分離機を必要とする遠心分離法は不向きである。そこ
で、濾過により全血から血清あるいは血漿を分離回収す
る方法が検討されてきた。
【０００３】濾過によって全血から血清あるいは血漿を
得る方法には、富士写真フイルム（株）製の「プラズマ
フィルターＰＦ」として市販され、特開平２０００−８
１４３２号公報で知られているように、３〜６枚のガラ
ス繊維濾紙をプラスチック製のホルダーに装填して、吸
引により全血を濾過する方法がある。しかし、この濾過
方法では、血漿を１５０μＬ程度濾過できるものの全血
を３ｍＬ程度必要とし、微量の全血を濾過することがで
きない。
得る方法には、富士写真フイルム（株）製の「プラズマ
フィルターＰＦ」として市販され、特開平２０００−８
１４３２号公報で知られているように、３〜６枚のガラ
ス繊維濾紙をプラスチック製のホルダーに装填して、吸
引により全血を濾過する方法がある。しかし、この濾過
方法では、血漿を１５０μＬ程度濾過できるものの全血
を３ｍＬ程度必要とし、微量の全血を濾過することがで
きない。
【０００４】濾過によって全血から血球を捕捉し、血清
あるいは血漿を得る方法には、特開平１０−１８５９１
０号公報に記載された３次元多孔質体を用る方法があ
り、ポリスルホン膜、酢酸セルロース膜などが知られて
いる。しかし、この膜は孔径を均一に作成するのは難し
い。
あるいは血漿を得る方法には、特開平１０−１８５９１
０号公報に記載された３次元多孔質体を用る方法があ
り、ポリスルホン膜、酢酸セルロース膜などが知られて
いる。しかし、この膜は孔径を均一に作成するのは難し
い。
【０００５】一方、全血から白血球を捕捉して採取し、
これをもとに遺伝子を回収して遺伝子解析あるいは遺伝
子診断に用いることが、近年盛んに行われるようになっ
てきており、全血から白血球を回収する技術が必要とな
ってきている。
これをもとに遺伝子を回収して遺伝子解析あるいは遺伝
子診断に用いることが、近年盛んに行われるようになっ
てきており、全血から白血球を回収する技術が必要とな
ってきている。
【０００６】全血から白血球のみを除去する方法には、
テルモ（株）社製の「イムノガード（登録商標） III−
ＲＣ」で実用化されているポリウレタン多孔質フィルタ
ー，日本ポール(株)社で販売している「ポール輸血フィ
ルターＰＬ１Ｊ」で実用化されているポリエステルフィ
ルターなどが知られている。しかし、このフィルターは
輸血用の全血から白血球を除去するためのものであり、
微量の全血から白血球を捕捉して白血球を回収すること
が難しい。
テルモ（株）社製の「イムノガード（登録商標） III−
ＲＣ」で実用化されているポリウレタン多孔質フィルタ
ー，日本ポール(株)社で販売している「ポール輸血フィ
ルターＰＬ１Ｊ」で実用化されているポリエステルフィ
ルターなどが知られている。しかし、このフィルターは
輸血用の全血から白血球を除去するためのものであり、
微量の全血から白血球を捕捉して白血球を回収すること
が難しい。
【０００７】
【発明が解決しようとする課題】新生児など微量の全血
しか採血できない場合など、微量の全血から血清あるい
は血漿を急いで得る方法が求められている。また、濾過
によって全血から血球を捕捉する方法において、遺伝子
診断等に用いるために白血球のみを分画して採取する方
法が求められている。
しか採血できない場合など、微量の全血から血清あるい
は血漿を急いで得る方法が求められている。また、濾過
によって全血から血球を捕捉する方法において、遺伝子
診断等に用いるために白血球のみを分画して採取する方
法が求められている。
【０００８】
【課題を解決するための手段】均一な孔径の薄い膜を用
いることで、微量の全血から血球のみを捕捉して血清あ
るいは血漿を回収することができること、および均一な
孔径の大きさによって全血の白血球のみを捕捉して回収
できることを見出した。
いることで、微量の全血から血球のみを捕捉して血清あ
るいは血漿を回収することができること、および均一な
孔径の大きさによって全血の白血球のみを捕捉して回収
できることを見出した。
【０００９】
【発明の実施の態様】膜の素材としては、ポリ−ε−カ
プロラクトン、ポリ−３−ヒドロキシブチレート、アガ
ロース、ポリ−２−ヒドロキシエチルアクリレート、ポ
リスルホンなどの非水溶性溶媒に溶解する高分子化合物
を用いることができるが、ポリ−ε−カプロラクトンを
用いることが好ましい。
プロラクトン、ポリ−３−ヒドロキシブチレート、アガ
ロース、ポリ−２−ヒドロキシエチルアクリレート、ポ
リスルホンなどの非水溶性溶媒に溶解する高分子化合物
を用いることができるが、ポリ−ε−カプロラクトンを
用いることが好ましい。
【００１０】これらの素材だけでもハニカム様の構造の
膜を形成させることができるが、両親媒性の素材を添加
することが好ましい。両親媒性の素材としては、例えば
両親媒性ポリアクリルアミドがある。
膜を形成させることができるが、両親媒性の素材を添加
することが好ましい。両親媒性の素材としては、例えば
両親媒性ポリアクリルアミドがある。
【００１１】膜の素材と両親媒性の素材の混合比率は、
重量比０：１〜１：０の範囲で使用することが好まし
い。より好ましくは、重量比５：１〜２０：１の範囲で
ある。
重量比０：１〜１：０の範囲で使用することが好まし
い。より好ましくは、重量比５：１〜２０：１の範囲で
ある。
【００１２】キャストする溶媒としては、クロロホル
ム、ジクロロメタン、四塩化炭素、シクロヘキサンなど
膜の素材となる高分子化合物を溶解させることができる
非水溶性の溶媒であればよい。キャストするときのポリ
マー濃度は、高分子膜を形成できる濃度であればよく、
工業的に大量生産をするためには、０．１ｗｔ％以上の
できる限り高い濃度で製膜することが望ましい。
ム、ジクロロメタン、四塩化炭素、シクロヘキサンなど
膜の素材となる高分子化合物を溶解させることができる
非水溶性の溶媒であればよい。キャストするときのポリ
マー濃度は、高分子膜を形成できる濃度であればよく、
工業的に大量生産をするためには、０．１ｗｔ％以上の
できる限り高い濃度で製膜することが望ましい。
【００１３】非水溶性の膜の素材、例えばポリ−ε−カ
プロラクトンを、非水溶性の溶媒、例えばクロロホルム
に溶解させているので、高湿度空気によって溶媒を蒸発
させるときに気化熱により空気中の水分が結露し、それ
が溶媒の蒸発とともに徐々に成長して直径０．５〜４０
μｍ程度のサイズの水滴になる。この水滴には非水溶性
のポリ−ε−カプロラクトンは溶解できないから、この
部分が孔（ポア）となった膜が得られる。例えばシャー
レに２次元的にキャストしているので、成長した水滴
は、球の２次元的最密充填構造様に規則正しく配列し、
結果としてハニカム構造の膜が得られる。
プロラクトンを、非水溶性の溶媒、例えばクロロホルム
に溶解させているので、高湿度空気によって溶媒を蒸発
させるときに気化熱により空気中の水分が結露し、それ
が溶媒の蒸発とともに徐々に成長して直径０．５〜４０
μｍ程度のサイズの水滴になる。この水滴には非水溶性
のポリ−ε−カプロラクトンは溶解できないから、この
部分が孔（ポア）となった膜が得られる。例えばシャー
レに２次元的にキャストしているので、成長した水滴
は、球の２次元的最密充填構造様に規則正しく配列し、
結果としてハニカム構造の膜が得られる。
【００１４】孔径は、キャストする液の濃度及び液量を
調節してシャーレ等の支持層に供給し、雰囲気あるいは
吹き付ける空気の温度、湿度を制御することで、溶媒の
蒸発スピード、結露スピードを制御することによって、
制御することができる。更に、微量の界面活性剤を添加
して水滴の融合を抑えて安定化させることによって、よ
り規則正しいハニカム構造の膜を作成することができ
る。
調節してシャーレ等の支持層に供給し、雰囲気あるいは
吹き付ける空気の温度、湿度を制御することで、溶媒の
蒸発スピード、結露スピードを制御することによって、
制御することができる。更に、微量の界面活性剤を添加
して水滴の融合を抑えて安定化させることによって、よ
り規則正しいハニカム構造の膜を作成することができ
る。
【００１５】膜に吹き付ける高湿度空気は、相対湿度３
０％および８０％のものを主に用いたが、膜の表面に空
気中の水分を結露させることができる湿度であればよ
く、温度によって２０〜１００％の相対湿度であればよ
いし、空気に限らず窒素、アルゴンなどの比較的不活性
なガスを用いてもよい。
０％および８０％のものを主に用いたが、膜の表面に空
気中の水分を結露させることができる湿度であればよ
く、温度によって２０〜１００％の相対湿度であればよ
いし、空気に限らず窒素、アルゴンなどの比較的不活性
なガスを用いてもよい。
【００１６】膜に吹き付ける高湿度空気の流量は、膜の
表面に空気中の水分を結露させることができ、キャスト
に用いた溶媒を蒸発させることができる流量であればよ
い。
表面に空気中の水分を結露させることができ、キャスト
に用いた溶媒を蒸発させることができる流量であればよ
い。
【００１７】高湿度空気を吹き付けるときの雰囲気の温
度は、キャストに用いた溶媒が蒸発することができる温
度であればよく、実験室レベルでは１５〜３２℃、生産
レベルでは５〜８０℃の温度であることが望ましい。
度は、キャストに用いた溶媒が蒸発することができる温
度であればよく、実験室レベルでは１５〜３２℃、生産
レベルでは５〜８０℃の温度であることが望ましい。
【００１８】キャストする溶液の濃度、溶液の量、溶媒
の種類、吹き付ける空気の相対湿度・温度・流量を変え
ることによって、結露、水滴の成長、溶媒の蒸発速度を
制御し、様々な孔径の規則正しいハニカム様の構造の膜
を得ることができ、血液中の成分である、直径約３μｍ
の血小板、直径約１５μｍの白血球、変形能が大きいが
直径約７μｍの赤血球を、孔径のサイズを変えることに
より各々を分離できるフィルターとして使用できる。
の種類、吹き付ける空気の相対湿度・温度・流量を変え
ることによって、結露、水滴の成長、溶媒の蒸発速度を
制御し、様々な孔径の規則正しいハニカム様の構造の膜
を得ることができ、血液中の成分である、直径約３μｍ
の血小板、直径約１５μｍの白血球、変形能が大きいが
直径約７μｍの赤血球を、孔径のサイズを変えることに
より各々を分離できるフィルターとして使用できる。
【００１９】また、孔径のほぼ等しい膜を積層すること
によって、フィルターとして分離できる能力を高めるこ
とができる。更に、孔径の異なる複数の膜を積層するこ
とによって、幾つかの生体物質を同時に分離する或いは
分画することができる。例えば、孔径５．５〜８．５μ
ｍの膜と孔径３．５μｍ以下の膜を積層して孔径の大き
い膜側から全血を供給することによって、孔径の大きい
膜で白血球を捕捉し、孔径の小さい膜で赤血球を捕捉す
ることが同時に達成できる。
によって、フィルターとして分離できる能力を高めるこ
とができる。更に、孔径の異なる複数の膜を積層するこ
とによって、幾つかの生体物質を同時に分離する或いは
分画することができる。例えば、孔径５．５〜８．５μ
ｍの膜と孔径３．５μｍ以下の膜を積層して孔径の大き
い膜側から全血を供給することによって、孔径の大きい
膜で白血球を捕捉し、孔径の小さい膜で赤血球を捕捉す
ることが同時に達成できる。
【００２０】更に、孔径をサブミクロンオーダーに設定
することで、透析などの血液浄化に代表されるような標
的生体物質の選択的分離回収技術としての期待ができ
る。
することで、透析などの血液浄化に代表されるような標
的生体物質の選択的分離回収技術としての期待ができ
る。
【００２１】本発明においてハニカム様構造とは、孔径
がほぼ一定の複数の孔が規則正しく配列し、このような
孔が膜を貫通している構造をいう。孔の断面に特に限定
は無く、円形、楕円形、六角形、長方形、正方形等の形
状でよい。
がほぼ一定の複数の孔が規則正しく配列し、このような
孔が膜を貫通している構造をいう。孔の断面に特に限定
は無く、円形、楕円形、六角形、長方形、正方形等の形
状でよい。
【００２２】
【実施例】以下、実施例により本発明をさらに具体的に
説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定される
ことはない。
説明するが、本発明の範囲は下記の実施例に限定される
ことはない。
【００２３】実施例１ ハニカム様構造の膜の作成
（１） 平均分子量７万〜１０万のポリ−ε−カプロラクトン
（化合物１）と両親媒性ポリアクリルアミド（化合物
２）を重量比で１０：１の割合で混合したクロロホルム
溶液（ポリマー濃度として０．１〜２ｗｔ％）を、直径
１０ｃｍのシャーレ上に５ｍＬキャストし、相対湿度３
０〜８０％の高湿度空気を毎分１〜２０Ｌの流量で吹き
付け、クロロホルム溶媒を蒸発させることによって、柔
軟性、弾性を有し、力学強度の強いハニカム様構造の膜
を得た。
（１） 平均分子量７万〜１０万のポリ−ε−カプロラクトン
（化合物１）と両親媒性ポリアクリルアミド（化合物
２）を重量比で１０：１の割合で混合したクロロホルム
溶液（ポリマー濃度として０．１〜２ｗｔ％）を、直径
１０ｃｍのシャーレ上に５ｍＬキャストし、相対湿度３
０〜８０％の高湿度空気を毎分１〜２０Ｌの流量で吹き
付け、クロロホルム溶媒を蒸発させることによって、柔
軟性、弾性を有し、力学強度の強いハニカム様構造の膜
を得た。
【００２４】
【化１】
【００２５】
【化２】
【００２６】上記の様々な条件で作成した膜の構造を、
光学顕微鏡、走査型電子顕微鏡で観察したところ、０．
５〜４０μｍの孔径のハニカム様の構造の膜であり、表
面から裏面へ単一層の孔で貫通している構造であった。
孔径はキャストした全面にわたってきれいな円形をして
おり、サイズもほぼ同一であった。撮影した写真から孔
径を計測し、孔径の分布を求めると変動係数でＣＶ１０
％以下であることがわかった。また、レーザーを用いた
光散乱の評価でキャストした膜全面にわたって１０次以
上の回折光が観測できたことから、規則性の極めて高い
ポーラスフィルムを作成することができたことがわかっ
た。
光学顕微鏡、走査型電子顕微鏡で観察したところ、０．
５〜４０μｍの孔径のハニカム様の構造の膜であり、表
面から裏面へ単一層の孔で貫通している構造であった。
孔径はキャストした全面にわたってきれいな円形をして
おり、サイズもほぼ同一であった。撮影した写真から孔
径を計測し、孔径の分布を求めると変動係数でＣＶ１０
％以下であることがわかった。また、レーザーを用いた
光散乱の評価でキャストした膜全面にわたって１０次以
上の回折光が観測できたことから、規則性の極めて高い
ポーラスフィルムを作成することができたことがわかっ
た。
【００２７】実施例２ ハニカム様構造の膜の作成
（２） 膜となる物質として化合物２からなる両親媒性ポリアク
リルアミドを用い、キャストする溶媒をクロロホルム、
ベンゼン、トルエン、キシレンと変え、溶液濃度を１．
０ｇ／Ｌ、キャスト量を３０μＬとし、キャストさせる
基板にガラスを用い、高湿度空気の流量を０．０９Ｌ／
分にし、相対湿度を８５％にし、温度を２０℃にしたと
きに作成できる膜の溶媒依存を評価した。このときの形
態観察結果を図１に示す。図１において、孔径は、上か
ら０．５μｍ〜１０μｍである。
（２） 膜となる物質として化合物２からなる両親媒性ポリアク
リルアミドを用い、キャストする溶媒をクロロホルム、
ベンゼン、トルエン、キシレンと変え、溶液濃度を１．
０ｇ／Ｌ、キャスト量を３０μＬとし、キャストさせる
基板にガラスを用い、高湿度空気の流量を０．０９Ｌ／
分にし、相対湿度を８５％にし、温度を２０℃にしたと
きに作成できる膜の溶媒依存を評価した。このときの形
態観察結果を図１に示す。図１において、孔径は、上か
ら０．５μｍ〜１０μｍである。
【００２８】実施例３ ハニカム様構造の膜の作成
（３） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンと化合物２からなる両親媒性ポリアクリルアミ
ドを重量比で１０：１の割合で用い、溶媒としてクロロ
ホルムを用い、溶液濃度を１０．０ｇ／Ｌにし、キャス
トする量を５、１０、２０ｍＬと変え、キャストさせる
基板にガラスを用い、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／分
にし、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたとき
に作成できる膜のキャスト量依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図２に示す。図２において、孔径は、
上から８μｍ〜３５μｍである。
（３） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンと化合物２からなる両親媒性ポリアクリルアミ
ドを重量比で１０：１の割合で用い、溶媒としてクロロ
ホルムを用い、溶液濃度を１０．０ｇ／Ｌにし、キャス
トする量を５、１０、２０ｍＬと変え、キャストさせる
基板にガラスを用い、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／分
にし、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたとき
に作成できる膜のキャスト量依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図２に示す。図２において、孔径は、
上から８μｍ〜３５μｍである。
【００２９】実施例４ ハニカム様構造の膜の作成
（４） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンと化合物２からなる両親媒性ポリアクリルアミ
ドを重量比で１０：１の割合で用い、溶媒としてクロロ
ホルムを用い、溶液濃度を１、５、１０、２０ｇ／Ｌと
変え、キャスト量を１０ｍＬとし、キャストさせる基板
にハイドロゲルを用い、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／
分にし、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたと
きに作成できる膜の溶液濃度依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図３に示す。図３において、孔径は、
最小１５μｍ、最大２５μｍである。
（４） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンと化合物２からなる両親媒性ポリアクリルアミ
ドを重量比で１０：１の割合で用い、溶媒としてクロロ
ホルムを用い、溶液濃度を１、５、１０、２０ｇ／Ｌと
変え、キャスト量を１０ｍＬとし、キャストさせる基板
にハイドロゲルを用い、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／
分にし、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたと
きに作成できる膜の溶液濃度依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図３に示す。図３において、孔径は、
最小１５μｍ、最大２５μｍである。
【００３０】実施例５ ハニカム様構造の膜の作成
（５） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンを用い、溶媒としてクロロホルムを用い、溶液
濃度を１．０ｇ／Ｌとし、キャスト量を５ｍＬとし、キ
ャストさせる基板をアガロースゲル、ガラス、マイカ、
ＰＨＥＭＡと変え、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／分に
し、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたときに
作成できる膜のキャスト基板依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図４に示す。図４において、孔径は、
最小７μｍ、最大１４μｍである。
（５） 膜となる物質として化合物１からなるポリ−ε−カプロ
ラクトンを用い、溶媒としてクロロホルムを用い、溶液
濃度を１．０ｇ／Ｌとし、キャスト量を５ｍＬとし、キ
ャストさせる基板をアガロースゲル、ガラス、マイカ、
ＰＨＥＭＡと変え、高湿度空気の流量を２．０Ｌ／分に
し、相対湿度を３０％にし、温度を２０℃にしたときに
作成できる膜のキャスト基板依存を評価した。このとき
の形態観察結果を図４に示す。図４において、孔径は、
最小７μｍ、最大１４μｍである。
【００３１】なお、図１〜図４において、バーの長さは
すべて２０μｍである。
すべて２０μｍである。
【００３２】実施例６ 濾過性能の評価（１）
作成したハニカム様の構造の膜の血液濾過性能を評価す
るに先立ち、粒径が既知のポリスチレン粒子の通過実験
を行い、孔径を変えることによって通過する粒子の種類
と通過率を調べた。結果を表１に示す。孔径５．５〜
８．５μｍの膜を用いると、直径３μｍの粒子は通過す
るが直径１０μｍ以上の粒子は全く通過しないことを初
めて明らかにすることができた。
るに先立ち、粒径が既知のポリスチレン粒子の通過実験
を行い、孔径を変えることによって通過する粒子の種類
と通過率を調べた。結果を表１に示す。孔径５．５〜
８．５μｍの膜を用いると、直径３μｍの粒子は通過す
るが直径１０μｍ以上の粒子は全く通過しないことを初
めて明らかにすることができた。
【００３３】
【表１】
粒子通過率は、パーティクルカウンターで計測。
【００３４】実施例７ 濾過性能の評価（２）
作成したハニカム様の構造の膜を用いて、ヒト全血中の
白血球の捕捉実験を行った。孔径５．２μｍ、９．８μ
ｍの膜を用い、ヘパリン採血管で採血した人全血を濾過
させ、血球計算板に血液をキャストして白血球の数を計
測したところ、濾過前では４８００個／μＬあった白血
球数が、濾過後は０個／μＬになっていることがわかっ
た（表２）。また、濾過した濾液を３０００回転で１０
分遠心分離して得られた上清の色を目視で確認したとこ
ろ、溶血は確認されなかった。
白血球の捕捉実験を行った。孔径５．２μｍ、９．８μ
ｍの膜を用い、ヘパリン採血管で採血した人全血を濾過
させ、血球計算板に血液をキャストして白血球の数を計
測したところ、濾過前では４８００個／μＬあった白血
球数が、濾過後は０個／μＬになっていることがわかっ
た（表２）。また、濾過した濾液を３０００回転で１０
分遠心分離して得られた上清の色を目視で確認したとこ
ろ、溶血は確認されなかった。
【００３５】
【表２】
濾過前の白血球数４８００個／μＬ
【００３６】実施例８ 濾過性能の評価（３）
作成したハニカム様の構造の膜を用いて、ヒト全血中の
赤血球の捕捉実験を行った。孔径３．５〜５．５μｍの
膜を用い、各々直径５ｍｍに３枚打ち抜いて積層してニ
トロセルロース膜の上に静置した。ヘパリン採血管で採
血したヘマトクリット値４０％のヒト全血を、同一全血
を遠心分離して得られた血漿で希釈してヘマトクリット
値２．５％に調製した全血にしたものを、積層した膜の
上に５μＬ点着して１０秒間放置し、その後に積層した
膜を持ち上げ、濾過されてニトロセルロース膜に転写し
た血漿に赤血球の赤い色が残存しているかどうかの評価
を行ったところ、孔径が３．５μｍの膜で赤い色が見と
められず、赤血球を捕捉できていることが確認できた
（表３）。
赤血球の捕捉実験を行った。孔径３．５〜５．５μｍの
膜を用い、各々直径５ｍｍに３枚打ち抜いて積層してニ
トロセルロース膜の上に静置した。ヘパリン採血管で採
血したヘマトクリット値４０％のヒト全血を、同一全血
を遠心分離して得られた血漿で希釈してヘマトクリット
値２．５％に調製した全血にしたものを、積層した膜の
上に５μＬ点着して１０秒間放置し、その後に積層した
膜を持ち上げ、濾過されてニトロセルロース膜に転写し
た血漿に赤血球の赤い色が残存しているかどうかの評価
を行ったところ、孔径が３．５μｍの膜で赤い色が見と
められず、赤血球を捕捉できていることが確認できた
（表３）。
【００３７】
【表３】
【００３８】
【発明の効果】本発明により、微量の全血から、血清あ
るいは血漿と血球を分離し、さらには白血球のみを捕捉
して分離することができる。
るいは血漿と血球を分離し、さらには白血球のみを捕捉
して分離することができる。
【図１】 ハニカム様の膜を作成するときの孔径の溶媒
依存を示したものである。
依存を示したものである。
【図２】 ハニカム様の膜を作成するときの孔径のキャ
スト量依存を示したものである。
スト量依存を示したものである。
【図３】 ハニカム様の膜を作成するときの孔径の濃度
依存を示したものである。
依存を示したものである。
【図４】ハニカム様の膜を作成するときの孔径のキャス
トする基板依存を示したものである。
トする基板依存を示したものである。
─────────────────────────────────────────────────────
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(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考）
Ｂ０１Ｄ 69/12 Ｂ０１Ｄ 69/12
71/48 71/48
Ｇ０１Ｎ 33/48 Ｇ０１Ｎ 33/48 Ｈ
(72)発明者 境野 佳樹
埼玉県朝霞市泉水三丁目11番46号 富士写
真フイルム株式会社内
(72)発明者 伊藤 敏古
埼玉県朝霞市泉水三丁目11番46号 富士写
真フイルム株式会社内
(72)発明者 寺島 薫
埼玉県朝霞市泉水三丁目11番46号 富士写
真フイルム株式会社内
Ｆターム(参考） 2G045 CA25 HA06 HA14 JA07
2G052 AA30 AD26 CA40 EA03 EA11
JA16
4C077 AA12 BB02 EE01 KK11 LL02
LL13 NN02 PP13 PP15
4D006 GA02 GA13 MA04 MA08 MA22
MB06 MC48X MC54X NA10
NA34 NA41 PB44 PB45 PC41
PC80
Claims (4)
- 【請求項１】 孔径が０．５〜４０μｍで、孔径のバラ
ツキが変動係数２０％以下の膜からなる血液濾過膜 - 【請求項２】 ハニカム様構造を有する請求項１に記載
の血液濾過膜 - 【請求項３】 ポリ−ε−カプロラクトンを主とする物
質からなる請求項１または請求項２に記載の血液濾過膜 - 【請求項４】 請求項１〜請求項３のいずれかに記載
の、同一の平均孔径の膜あるいは異なる平均孔径の膜を
２枚以上用いることによる血液濾過方法
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