JP2001522350A

JP2001522350A - 疾患におけるエンドセリン−１の過剰産生の阻害のためのレチノイド関連分子

Info

Publication number: JP2001522350A
Application number: JP53134698A
Authority: JP
Inventors: ファール，マグヌス; ス，ジュ−ユ
Original assignee: シドニーキメルキャンサーセンター
Priority date: 1997-04-11
Filing date: 1998-04-10
Publication date: 2001-11-13
Also published as: AU6895198A; BR9808866A; EP0973390A4; EP0973390A1; WO1998046076A1

Abstract

(57)【要約】被験体に阻害量の適切なレチノイドまたはレチノイド関連分子を投与する工程を含む、被験体においてエンドセリン-1を阻害する方法、およびエンドセリン-1阻害量の適切なレチノイドまたはレチノイド関連分子を投与する工程を含む、被験体において増加したレベルのエンドセリン-1の存在に関連する痛みおよび疾患を処置する方法が提供される。

Description

【発明の詳細な説明】疾患におけるエンドセリン-1の過剰産生の阻害のためのレチノイド関連分子承認本発明は、国立衛生研究所の国立ガン研究所により授与された認可CA55681のもと、政府の支持によりなされた。政府は本発明について特定の権利を有する。発明の分野本発明は、概してエンドセリン-1メッセンジャーRNA転写の強力なインヒビターであり、従ってエンドセリン-1の産生を阻害し得るレチノイド分子に関する。本発明は、増加したレベルのエンドセリン-1の存在および生成に関する種々の疾患の処置、および増加したレベルのエンドセリン-1による痛みの処置に対する適用を有する。発明の背景エンドセリン-1(ET-1)は、非常に強力な血管収縮活性を有するポリペプチドである(38)。しかしながら、上昇した血漿ET-1レベルが、以下を含む種々の疾患において見いだされることもまた知られている(39〜50)：全身性硬化症、川崎病、心臓性ショック、急性心筋梗塞、進行性アテローム硬化症、進行性前立腺ガン、限局性前立腺ガン、血管内皮種、肺高血圧症、敗血症、鬱血性心不全、および肝腎症候群。 ET-1は血管収縮薬として機能するだけではなく、例えば、単独でまたは前立腺ガンにおけるように他のホルモンおよびペプチドとの組合せで、成長因子として働く他の機能もまた有することが発見されてきている(51)。さらに、ET-1は、At ractapsis属の特定の蛇の毒液中の有痛性で致死性の部分であるソラホトキシン( sorafotoxin)に関連している(52、53)。蛇の噛み付きにおける毒液と同様に、組換えET-1は、高濃度での局所注入後、ヒトにおいて強烈な痛みを生じることが報告されている(54)。従って、例えば前立腺ガンにおいて、ガン細胞により産生される局在化した高濃度のET-1は、疾患の末期の段階に伴う高度の痛みの主な誘因であるようである。それ故、ET-1の産生を予防または阻害する分子は、ET-1が過剰産生される疾患全ての処置に対して、およびまたET-1の産生または過剰産生が痛みを誘導する状況に置いて、有用であることが期待され得る。遺伝子発現を調節することにより細胞分化を調整し、従って細胞の新生物発生前の(preneoplastic)形質転換を逆転し得るレチノイドは、ガンの処置および予防のための治療薬として優れた可能性を有する(58、59)。レチノイド、特にレチノール酸(RA)アナログは、白血病、菌状息肉腫、基底細胞癌腫、乾癬および他の皮膚の過剰増殖疾患の処置において使用されてきた(60)。データの増加する量（１〜５）は、レチノイド(ビタミンＡ誘導体およびそれらの合成アナログ)が増殖性疾患に対する新規の治療薬を約束することを示唆している。しかしながら、それらの化合物の全身性副作用およびそれらの催奇形性はそれらの有用性を制限する。副作用は、例えば、骨再構築、掌蹠剥離(palmoplantar peeling)、皮膚炎、脱毛症、肝細胞毒性および全身性毒性を含む(61、62)。それ故に、レチノイドが機能する所以である機構は、有用な活性を望ましくないものから分離するという目的とともに、大きな関心を引き寄せ、そして多くのレチノイドが合成されてきた(６)。しかしながら、レチノイド活性の機構の詳細な理解の欠如は、臨床上の使用に対するレチノイドの開発における発展を、以前に阻害してきた。それらの応答経路の分子分析においてなされたより最近の進歩ならびに定義され得るレセプターおよび経路選択性化合物の観測(７〜10)は、狭い生物学的活性-従って減少された副作用-を持つレチノイドが設計され得る可能性を大きく向上させた。驚くべきことに、ET-1の発現を阻害するレチノイド化合物のクラスが同定されてきた。このレチノイドのクラスは、全-transレチノール酸(tRA)および9-cisレチノール酸(9-cisRA)と構造的に関連した非常に多数の小分子を含む。レチノイドは、ET-1の過剰産生に伴う疾患または痛みの処置において有用である。他のレチノイドとは異なり、本発明のレチノイド分子は副作用を減少し、このことは、 F9奇形ガン細胞(ATCC受託番号CRL 1720)およびS19多能性奇形ガン細胞(ATCC受託番号CRL 1825)における分化誘導の、それらの減少された能力または不能性と相関する。発明の要旨１つの実施態様において、本発明は被験体においてET-1を阻害する方法を提供し、これは被験体にET-1阻害量の適したレチノイドを投与する工程を含む。別の実施態様において、本発明は被験体において増加したレベルのET-1の存在が伴う疾患を処置する方法を提供し、これは被験体にET-1阻害量の適したレチノイドを投与する工程を含む。さらなる実施態様において、本発明は被験体において増加したレベルのET-1の存在が伴う痛みを処置する方法を提供し、これは被験体にET-1阻害量の適したレチノイドを投与する工程を含む。本発明のさらなる利点は、一部は以下に続く記載において記述され、そして一部は記載から明らかとなるか、または本発明の実施により学ばれ得る。本発明の利点は、特に添付される請求の範囲において指摘される要素および組合せにより理解され、そして達成される。前述の一般的な記載と以下の詳細な記載との両方が、例示的および説明的であるに過ぎず、そして請求されるように、本発明を制限するのではないことが理解されるべきである。詳細な説明本発明は、本発明の好適な実施態様についての、以下の詳細な説明を参考にすることにより、より容易に理解され得る。本発明の化合物、組成物、および方法が開示されそして記載される前に、本発明が特定の合成方法、特定の薬学的キャリアに、または特定の薬学的処方物もしくは投与レジメン(regimen)に、もちろん変化し得るように、制限されないことが理解されるべきである。本明細書中で使用される用語法が特定の実施態様を記述する目的のためのみであり、そして制限することを意図しないこともまた理解されるべきである。本明細書および添付の請求の範囲において使用されるように、単数形「a」「a n」および「the」は、文脈が明らかにその他のものを指図するのではない限り、複数形の指示物を含むことを注意されなければならない。従って、例えば、「芳香族化合物」に関して芳香族化合物の混合物を含み、「薬学的キャリア」に関して２種以上のそのようなキャリアの混合物を含む、などがある。本明細書中および続く請求の範囲において、多くの用語に対して指示がなされ、それらは以下の意味を有するとして定義される：本明細書中で使用されるように、用語「アルキル」は、メチル、エチル、n-プロピル、イソプロピル、n-ブチル、イソブチル、t-ブチル、オクチル、デシル、テトラデシル、ヘキサデシル、エイコシル、テトラコシルなどのような、１〜24 個の炭素原子を含む分岐した、または分岐していない飽和炭化水素基を示す。本明細書中の好ましいアルキル基は、１〜12個の炭素原子を含む。用語「低級アルキル」は、１〜６個の炭素原子を含む、好ましくは１〜４個の炭素原子を含む、さらにより好ましくは１〜２個の炭素原子を含むアルキル基を意味する。用語「シクロアルキル」は３〜８個、好ましくは５〜６個の炭素原子からなる環状アルキル基を意味する。本明細書中で使用されるように、用語「アルコキシ」は、単一の末端エーテル連結を通して結合されたアルキル基を意味する；すなわち、「アルコキシ」基は -ORとして定義され得、ここでRは上記で定義されるようなアルキルである。「低級アルコキシ」基は、１〜６個、より好ましくは１〜４個の炭素原子を含むアルコキシ基を意味する。本明細書中で使用されるように、用語「アルキレン」は、１〜24個の炭素原子を含む、二官能性の分岐した、または分岐していない飽和炭化水素鎖を示し、そして、例えばメチレン(-CH₂-)、エチレン(-CH₂-CH₂-)、プロピレン(-CH₂-CH₂-CH₂ -)、2-メチルプロピレン[-CH₂-CH(CH₃)-CH₂-]、ヘキシレン[-(CH₂)₆-]などを含む。「低級アルキレン」は１〜６個、より好ましくは１〜４個の炭素原子を含むアルキレン基を示す。本明細書中で使用されるように、用語「シクロアルキレン」は環状アルキレン基、代表的には５または６員環を示す。本明細書中で使用されるように、用語「アルケン」は２〜24個の炭素原子を含む一不飽和または二不飽和炭化水素基を意味する。このクラスの範囲内で好適な基は、２〜12個の炭素原子を含む。(AB)C=C(CD)のような非対称の構造は、EおよびZ異性体の両方を含むことが意図される。このことは、本明細書中の構造式において仮定され得、ここで非対称なアルケンは存在するか、またはそれは結合の記号＝により明示的に指示され得る。本明細書中で使用されるように、用語「アルキン」は、一般式C_nH_2n-2、および三重結合を含む構造式を有する、２〜24個の炭素原子を含む一不飽和または二不飽和炭化水素基を意味する。このクラスの範囲内で好適な基は、２〜12個の炭化水素を含む。用語「アリール」は、芳香族炭化水素から誘導される任意の化合物を含み、そして、例えばベンゼンおよびナフタレン、ならびにピリジン、フラン、およびピロールのようなヘテロアリールを含む。本明細書中で使用されるように、用語「ヘテロ原子」は、硫黄、酸素、または窒素を示し、そして好ましくは硫黄または酸素を示す。本明細書中で使用されるように、接頭辞「ヘテロ-」は、構造単位において、炭素原子の代わりに存在する少なくとも１個のヘテロ原子を有する化合物を示す。例えば、ヘテロアリールはアリール環にヘテロ原子を有するアリール基を示す。用語「Me」はメチルに対する略語である。「Ac」はアセチルに対する略語である。「Ad」はアダマンチルに対する略語である。「２つの結合部位を有する基(radical)」は、共有結合を通して他の２個の部分と結合しているが、しかし単離において、別の適した部分(単数または複数)と結合するために、部分との間の結合が切断され、そして２個の不対電子がその基の別々の位置において得られるかのように見られる部分を示す。従って、「２つの結合部位を有する基」は、例えば二価のラジカルを含む。「骨格」は、「２つの結合部位を有する基」を示すために使用される場合は、基に対する２つの結合部位の間の最も短い連続した炭素原子鎖を意味し、ここでそのような鎖にある炭素原子は、ヘテロ原子またはアリール部分により置換され得る。「アリールまたはヘテロアリール縮合による結合」は、２個のアリールまたはヘテロアリール部分それぞれの１側面に沿って生じる結合を意味する。それ故、アリール縮合による結合はナフチル結合を含む。増加したまたは上昇したレベルのET-1の存在が伴う疾患は、増加したまたは上昇したレベルのET-1の存在により引き起こされる任意の疾患、ならびにET-1の過剰産生を引き起こす任意の疾患を含む。本明細書中で使用されるように、ET-1の「増加したまたは上昇したレベル」は、当該分野で周知のプロトコルにより測定されるように、被験体にとって正常レベルのET-1よりも大きい、被験体における ET-1のレベルを意味する；すなわち正常レベルのET-1は、疾患または痛みを伴う状態が存在しない被験体において存在するものである。例えば、ヒト被験体におけるET-1の正常血漿レベルは、Nelsonらにおいて記載される(51)。また本明細書中で使用されるように、ET-1の「過剰産生」または「過剰産生された」ET-1は、疾患または痛みを伴う状態が存在しない被験体において通常産生される量よりも多い量での被験体におけるET-1の産生を意味する。「必要に応じた」または「必要に応じて」は、それに続いて記載される出来事または状況が生じてもまたは生じなくてもよく、そして記述が、前述の出来事または状況が生じる事例およびそれが生じない事例を含むことを意味する。例えば、語句「必要に応じて置換された低級アルキル」は、低級アルキル基が置換されてもまたは置換されていなくてもよく、そして記述が無置換の低級アルキルおよび置換が存在する低級アルキルの両方を含むことを意味する。本明細書中で提供されるように、用語「有効量」の化合物は、非毒性の、しかし遺伝子発現または他の活性の所望の調整を提供するために十分な量の化合物を意味する。以下で指摘されるように、必要とされる正確な量は、被験体にわたり変化し、被験体の種、年齢、および一般的な状態、処置されている疾患の重篤度、使用される特定の化合物、その投与様態などに依存する。従って、正確な「有効量」を指定することは不可能である。しかしながら、適切な有効量は、日常的な実験法を使用してのみ、当業者により決定され得る。「薬学的に受容可能」は、生物学的でないか、またはそうでなければ望ましくなくはない材料を意味する、すなわち、材料は、任意の望ましくない生物学的効果を生じることなく、または材料が包含される薬学的組成物の任意の他の成分を用いて有害な様式で相互作用することなく、選択された化合物とともに個体に投与され得る。選択的遺伝子発現の「顕在化」、「調節」または「調整」は、化合物が特定の機構(例えばリガンドがレチノール酸ファミリーにおいてレセプターと結合する) により遺伝子発現の活性化因子またはアンタゴニストとして作用し得ることを意味することを意図する。利点を達成するために、および本発明の目的に従って、本明細書中で具体化されそして広く記載されるように、本発明は、第一の実施態様において、被験体においてエンドセリン-1を阻害する方法を包含し、これは被験体にET-1阻害量の適切なレチノイドを投与する工程を含む。本発明の適切なレチノイドは、レチノール酸レセプターRARα、β、もしくはγ、またはRXRα、β、もしくはγを介して結合することにより機能する。このクラスの適切なレチノイド分子は、ET-1メッセンジャーRNA転写の強力なインヒピターを含み、これはET-1の産生を効果的に阻害する。しかしながら、これらの分子は典型的なレチノイドについて周知である代表的な活性、とりわけ種々の細胞株において分化を誘導する能力を所有しない。詳細には、本発明の適切なレチノイドは、10^-6Ｍ以下の濃度で、F9奇形ガン細胞および／またはP19多能性奇形ガン細胞において分化を誘導し得ない。さらに、本発明の適切なレチノイドは、代表的なレチノイド毒性をインビボで示さず、それ故、哺乳動物およびヒトにおいて十分に許容される。適切なレチノイドは、逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)アッセイを使用することにより、ET-1メッセンジャーRNA(mRNA)転写の阻害についてスクリーニングされ得る。RNAは、試験されるべきレチノイド分子の非存在下または存在下で、培地で増殖した細胞から単離される。細胞は、ET-1発現を試験することが望まれる任意の細胞型であり得、血管細胞、心筋細胞、および前立腺ガン細胞、ならびにET-1が産生される任意の細胞型を含むが、それらに限定されない。RNA単離は、当該分野で周知の手順に従うか、または市販されるキットを使用することにより行われる。単離されたRNAは、その後、逆転写酵素、DNAポリメラーゼ、適切な緩衝液およびET-1遺伝子配列に対して特異的な上流および下流プライマーとともにインキュベートされる。例えば、これらの全ての成分を含むPromega製の試薬キットが使用され得る。コントロールとして、GAPDHのような、レチノイドの活性により調整されないハウスキーピング遺伝子に対して特異的なプライマーを用いて、同じ反応が行われ得る。RT-PCR反応は、当該分野で周知の手順により、サーマルサイクラーで行われる。その後、増幅されたDNAサンプルが２％アガロースゲル上にロードされ、そしてET-1 mRNA転写の阻害について分析される。 ET-1 mRNA転写を阻害するレチノイドはまた、本発明に適切な特定のレチノイドを同定するために、アッセイされて細胞分化の誘導の程度を測定し得る。先に注記されるとおり、適切なレチノイドは10^-6Ｍ以下の濃度で、F9奇形ガン細胞および／またはP19多能性奇形ガン細胞において分化を誘導し得ない。本発明のレチノイドの、この細胞分化誘導活性は、F9奇形ガン細胞および／またはP19多能性奇形ガン細胞において簡便にアッセイされ、ここで分化は、全-トランスレチノール酸の分化誘導活性と比較して、本発明のレチノイドにより誘導されないか、またはごくわずかに誘導されるのみである。分化誘導活性は、化合物(10^-6Ｍ以下の濃度で)にさらされた後、形態的変化について、細胞を検査することにより測定され得る(55)。あるいは、分化誘導活性は、F9および／またはP19細胞における分化の誘導が細胞増殖の強力な阻害を伴うという前提において、本発明のレチノイドに曝露する際に、F9および／またはP19細胞増殖の阻害を測定することによりアッセイされ得る。細胞増殖を測定するために、Promegaまたは他の製造者製の標準比色分析アッセイキット(MTTまたはMTS)が使用され得る。本発明の適切なレチノイドは、本明細書中以下、ときどき本発明の化合物として参照される。本発明の化合物は、少なくとも１種以上の特定の細胞型において、ET-1 mRNA転写の強力なインヒビターである。これらのレチノイドによるET-1 転写の阻害は、ET-1ペプチドの濃度の減少を生じ、これはET-1が過剰産生されている疾患において、または上昇したET-1濃度による痛みの緩和において、有益な効果を有する。本発明の化合物は、AP-1選択的レチノイドとしてすでに記載されている特定の公知の構造的実体(55)、およびRXR選択的化合物としてすでに報告されている分子(56、57)もまた含み得るが、ただしこれらの化合物はET-1阻害活性を有する。さらに、適切なレチノイドは、その選択性がこれまでに報告されていなかった分子を含み、それは本明細書中で議論される。特に適切なレチノイド化合物は、以下の構造A(i)〜A(ii)の化合物を含む：ここで：(a)R₁₁は以下の構造B(i)〜B(iv)の化合物であり： (b)R₁は２つの結合部位を有する基であり、ここで結合は、単一の共有結合により、またはアリールもしくはヘテロアリール縮合により、２つの結合部位のそれぞれにおいて独立して生じ得、(c)R₂、R₃、R₄、R₅、およびR₁₀は独立して同一のまたは異なる低級アルキルであり、(d)R₆は水素またはメチルであり、(e)R₇、R₈ 、およびR₉は、水素、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アルキル、またはアダマンチルであり、そして(f)XおよびYは、独立してヘテロ原子である。本明細書中なら合または二重結合を表す。上記ならびに本願および請求の範囲全体にわたり使用適切なレチノイド化合物はまた、前述の化合物の塩、アミド、およびエステルを含む。本発明の特定の実施態様において、R₁₁のための式B(i)においてCOOHはパラ位にある。別の特定の実施態様において、R₁₁のための式B(iii)においてCOO Hは2位にある。好ましくは、R₁は、１〜５個、好ましくは１〜３個の炭素原子、ヘテロ原子、および／またはアリール部分をその骨格中に有する炭化水素またはヘテロ炭化水素であるが、ただし骨格中に１個より多いアリール部分は存在しない。 R₁はまた好ましくは以下のものである：(a)ヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、または二重結合もしくは単結合を通して低級アルキルもしくはメチルアリールで置換された二価のメチル；(b) 以下の式C(i)の化合物：ここで、R¹およびR²は、メチルまたはヘテロ原子であり、必要に応じて一緒に連結して、3、5、または6員の環状脂肪族環またはヘテロ環状脂肪族環を形成する；あるいは(c)以下の式C(ii)の化合物：ここで、R³はヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、二重結合もしくは単結合を通して低級アルキルもしくはメチルアリールで置換された二価のメチルであり；そしてR⁴はヘテロ原子、カルボニル、メトキシカルボニル、エテン、メトキシ、アセチレン、アリール、またはカルボニルアミンである。本発明のさらに別の実施態様において、R₁は式C(iii)からC(xxiv)までの中から選択される部分である： R₁₂およびR₁₃は、好ましくはそれぞれ独立して、低級アルキルであり、そしてより好ましくは、独立してメチルであり、そしてXおよびYは、それぞれ独立してヘテロ原子である。 C(iii)からC(xxiv)までにより表される部分は、２つの結合部位を有する基であり、ここで結合は、単一の共有結合により、またはアリールもしくはヘテロアリール縮合により、２つの結合部位のそれぞれにおいて独立して生じ得る。結合部位は、波線により表され、波線を１本だけ有する構造において、第二の結合部位は末端のアリール基の１側面に沿っている。例えば、構造C(xxii)において、１つの波線により表される１つの結合部位とアリール基とが存在し、それを通してアリール縮合による結合が生じる。特に適切なレチノイドはまた、以下の構造D(i)からD(xxxx)までの化合物を含み得る：上記の構造Ｄにおいて、結合の記号−および＝は、低級アルキル基、好ましくはメチルにより末端された結合を表す。本発明はまた、カルボン酸部分を含む本発明の化合物の薬学的に受容可能な非毒性のエステル、アミド、および塩誘導体を包含する。薬学的に受容可能な塩は、遊離の酸を適切な量の薬学的に受容可能な塩基で処理することにより調製される。代表的な薬学的に受容可能な塩基は、水酸化アンモニウム、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化鉄(II)、水酸化亜鉛、水酸化銅、水酸化アルミニウム、水酸化鉄(III)、イソプロピルアミン、トリメチルアミン、ジエチルアミン、トリエチルアミン、トリプロピルアミン、エタノールアミン、2-ジメチルアミノエタノール、2-ジエチルアミノエタノール、リジン、アルギニン、ヒスチジンなどである。反応は、約０℃〜約100℃の温度で、好ましくは室温で、水中で、単独または不活性物（水混和性有機溶媒）と組み合わせて行われる。レチノイド対使用される塩基のモル比は、任意の特定の塩に対して望まれる比を提供するように選択される。例えば、遊離酸である出発物質のアンモニウム塩を調製するために、出発物質はほぼ１当量の薬学的に受容可能な塩基で処理されて中性の塩を生じ得る。カルシウム塩が調製される場合、ほぼ1/2モル当量の塩基が使用されて中性の塩を生じるが、一方アンモニウム塩については、ほぼ1/3モル当量の塩基が使用される。エステル誘導体は、代表的には化合物の酸型に対する前駆体として調製され、従ってプロドラッグとして働き得る。一般に、これらの誘導体はメチル、エチルなどのような低級アルキルエステルである。アミド誘導体である-(CO)NH₂、-(CO )NHR、および-(CO)NR₂（ここで、Rは低級アルキルである)は、カルボン酸含有化合物の反応性誘導体と、アンモニアまたは置換アミンとの反応により調製され得る。本発明はまた、本発明の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む薬学的組成物を提供する。好ましいのは、治療的量の本発明の化合物および薬学的に受容可能なキャリアを含む、ET-1 mRNA転写を阻害するための薬学的組成物である。合成方法：本発明の化合物は、合成有機化学者に一般に知られている技術を使用して、容易に合成され得る。化合物を合成し、そして誘導するための一般に適切な実験的方法が記載される(例えば、参考文献63〜72を参照のこと、これらの開示は参考として本明細書中で援用される)。有用性および投与：本発明の化合物（薬理学的に受容可能なエステル、アミドまたはそれらの塩を含む）は、多くの意図される適用において、有用である。本発明の化合物と方法についての主な使用は、種々の疾患（種々の疾患と関連する疼痛を含む）の予防および処置においてである。このような疾患としては、例えば、全身性硬化症、川崎病、心臓性ショック、急性心筋梗塞、進行性アテローム硬化症、進行性前立腺ガン、限局性前立腺ガン、血管内皮腫、肺高血圧症、敗血症、鬱血性心不全および肝腎症候群が、挙げられる。本発明のレチノイドの別の使用は、増大したレベルのET-1の存在に関連する疼痛の処置においてである。本発明の化合物および方法はまた、ET-1発現を阻害するために投与され得る治療用化合物の同定を可能とする。具体的には、本発明は、ET-1産生の阻害活性についてレチノイドをスクリーニングする方法を提供し、この方法は、レチノイドを、ET-1産生細胞と接触させる工程およびET-1産生について細胞をアッセイする工程を包含し、ここでレチノイドと接触しないET-1産生細胞と比較したET-1産生の減少がET-1産生を阻害する活性を有するレチノイドを示す。ET-1産生は、当該分野のプロトコル標準に従って、細胞培養上清中に分泌されるET-1の量を測定することにより、ならびに本明細書で記載するようにRT-PCRによって転写されたET -1 mRNAの量をアッセイすることにより、アッセイされ得る。本発明はさらに、ET-1過剰発現により生じる疾患または疼痛関連状態を有する被験体の処置に適切なレチノイドを同定する方法を提供し、この方法は、レチノイドをET-1産生細胞と接触させる工程、ET-1産生について細胞をアッセイする工程、レチノイドを、レチノイド存在下で分化する細胞（例えば、F9奇形ガン細胞およびSl9奇形ガン多能性細胞）と接触させる工程、および分化について細胞をアッセイする工程を包含し、ここでレチノイドと接触しないET-1産生細胞と比較したET-1産生の減少およびレチノイド存在下で分化する細胞の分化誘導の不能が、ET-1過剰発現により生じる疾患または疼痛関連状態を有する被験体の処置に適切なレチノイドを示す。上記のように、ET-1産生は、当該分野のプロトコル標準に従って、細胞培養上清中に分泌されるET-1の量を測定することにより、ならびに本明細書で記載するようにRT-PCRによって転写されたET-1 mRNAの量をアッセイすることにより、アッセイされ得る。レチノイド存在下で分化する細胞における、レチノイドの分化誘導の不能は、本明細書に記載する分化および/または増殖アッセイにより判定され得る。それによって、種々の疾患および疼痛関連状態は、本方法によって本発明の化合物（特に、増加したET-1レベルの存在または発現と関連する化合物）であるとして同定されるレチノイドにより処置され得る。ET-1 mRNA転写の阻害は、ET-1 ペプチドのレベルの減少を生じる。この減少は、ET-1が過剰産生される上述の疾患または疼痛状態に有利な効果を有する。言及されるべき特定の疾患と関連した本発明のいくつかの特定の実施態様が存在する。例えば、前立腺ガンを処置する場合、好ましくは、構造D(i)-D(xxii)およびD(xxxv)から選択されるレチノイドが使用される。なおより好ましくは、構造D(i)-D(v)、D(vii)、D(xiv)、D(xix)-D(xxi)およびD(xxv)から選択されるレチノイドが使用される。なおよりさらに好ましくは、構造D(xxxvii)のレチノイドが使用される。卵巣ガンの処置の場合、レチノイドは、好ましくは、構造D(i)-D(xxi)およびD (xxxv)から選択され、なおより好ましくは、構造D(i)-D(v)、D(vii)、D(xiv)、D (xix)-D(xxi)およびD(xxv)から選択される。***ガンを処置する場合、レチノイドは、好ましくは、構造D(i)-D(xiv)、D(xvi)-D(xxi)およびD(xxxv)から選択され、さらにより好ましくは、構造D(i)-D(v)、D(vii)、D(xiv)、D(xix)-D(xxi)およびD(xxv)から選択され、なおよりさらに好ましくは、構造D(xxxvii)である。前記したように、本発明の方法はまた、心臓に関連した状態（例えば、心臓性ショック、急性心筋梗塞および鬱血性心不全）の処置に使用され得る。本発明は、慢性心臓疾患および/または心筋肥大を抑制するため、心筋梗塞の経験を有する患者の処置に対する特定の適用を有する。心臓疾患を処置する場合、レチノイドは、好ましくは、構造D(xxiv)-D(xxxiv)およびD(xxxvi)-D(xxxx)から選択される。もっとも好ましくは、レチノイドは、構造D(xxxvii)である。本発明はまた、増大したレベルのエンドセリン-1の存在と関連することが公知である疾患から特定の疾患を除外することにより特徴付けられ得る。例えば、１つの実施態様において、本発明は、適切なレチノイドを投与することにより、増加したレベルのエンドセリン-1の存在と関連する、ガンおよび心臓疾患以外の疾患の処置方法を提供する。好ましい実施態様において、ガンまたは心臓疾患以外の疾患を処置するために本発明の方法を用いる場合、レチノイドは、好ましくは、構造D(i)-D(xxii)およびD(xxxv)から選択される。別の実施態様において、ガンまたは心臓疾患以外の疾患を処置するために本発明を用いる場合、レチノイドは、構造D(xxiv)-D(xxxiv)およびD(xxxvi)-D(xxxx)から、好ましくは、選択される。別の特に適切な実施態様において、レチノイドは、上記の構造A(ii)を有し、ここでR₇はアダマンチル、R₈はアルコキシ（好ましくはメトキシ）、R₉は水素、 R₁は構造C(ii)（ここでR³はカルボニル、およびR⁴はヘテロ原子（好ましくは硫黄））、ならびにR₁₁は、構造B(i)（ここでCOOHはパラ位にある）であり、ここのような実施態様は、特に心臓疾患、前立腺ガン、卵巣ガン、および/または乳ガンの処置に適切である。本発明のレチノイドは、ET-1を産生する任意の被験体に投与され得る。被験体は、哺乳動物であり得、そしてもっとも好ましくは、ヒトである。本発明のこれらの使用および他の使用は、当業者にとって明らかである。本発明の化合物は、薬学的に受容可能なキャリアに関連する１つ以上の化合物より構成される薬学的組成物に、都合よく処方され得る。例えば、Remington's Pharmaceutical Sciences(74)を参照のこと。これは、代表的なキャリアおよび、本発明の化合物の処方物の調製に関連して用いられ得る薬学的組成物の調製の従来の方法を開示し、本明細書において参考として援用される。経口投与が好ましいが、化合物は、経口的に、非経口的に（例えば、静脈内に）、筋肉内注射により、腹腔内注射により、局所的に、経皮的になどで、投与され得る。投与される活性化合物の量は、当然、処置される被験体、被験体の重量、投与の様式および処方する医師の判断に依存する。しかし、一般的に、投薬量は、レチノイン酸の投与について代表的である量に近似であり、好ましくはヒトについて約0.5μg/kg/日〜60mg/kg/日であり、ヒトについてさらにより好ましくは約2.0μg/kg/日〜30mg/kg/日の範囲である。正確な投薬量は、レチノイドを投与する臨床医によって決定され、所定の被験体についてのバイオアベイラビリティー、毒性症状の存在または不在、および他の副作用に基づき最適化される。このような毒性症状および副作用としては、悪心、骨成長に対する副作用；催奇形性、頭痛、皮膚発疹などが挙げられ得るが、これらに限定されない。レチノイドは、疾患の症状または疼痛関連状態が鎮静するかまたは減少するまで被験体に治療的に投与され得るか、あるいは、レチノイドは予防的に延長した不定期間投与され得、例えば、慢性心臓疾患を予防し得る。疾患または疼痛関連状態の処置においてレチノイドの効力を測定する場合、臨床医によってモニターされ得る種々の臨床的パラメーターとしては、全体的症候の減少（例えば、痛覚の低下；運動機能または運動性の増加；全体としての状態の改善；重量または成長速度の変化）；血漿または血清中のET-1レベルの減少；特異的腫瘍マーカー（例えば、前立腺血清抗原）のレベルの減少；腫瘍サイズの縮小などが挙げられ得るが、これらに限定されない。これらのパラメーターは、当該分野で周知のプロトコルに従い、モニターされ、測定される。増加したET-1レベルにより生じる疾患または疼痛関連状態の処置または予防における、本発明のレチノイドの効力を試験するための適切なモデルとしては、腫瘍増殖および悪性腫瘍により生じる死亡率についての動物モデル、ならびに急性および慢性心臓疾患についての動物モデルが挙げられる。例えば、Sakaiら（74 ）のラットモデル（急性心筋梗塞が誘導される）は、これらの動物における心臓血管組織に対する本発明の化合物の影響の研究に用いられ得る。別の例として、ガンの動物モデルを本発明において使用し得る。例えば、腫瘍増殖が確立された動物モデルは、本発明のレチノイドの投与による腫瘍サイズの減少についてアッセイされ得るか、または悪性腫瘍細胞はレチノイドが投与された動物に導入され得、動物における悪性腫瘍細胞の生存または確立についてのアッセイが行われ得る。さらに、本発明のレチノイドは、ガンおよび上昇したET-1レベルにより生じる他の疾患または疼痛関連状態を有するヒト被験体に投与され得る。例えば、本発明の化合物は、前立腺ガンについて診断されるヒト患者に投与され得る（51）。これらの患者におけるレチノイドの効力は、前立腺血清抗原レベル；ET-1の血清または血漿レベル、腫瘍サイズの縮小、重量の減少または獲得などのような臨床パラメーターをアッセイすることによりモニターされ得る。このような患者はまた、本発明のレチノイドの投与の疼痛減少効果を評価するために、適切な被験体である。この評価は、前立腺ガン患者（特にガンの後期段階の）は、骨疼痛の有意な程度を経験し、一般的に、これは従来の鎮痛治療では、軽減され得ないことに基づく。従って、本発明の化合物の前立腺ガン患者での疼痛減少における効力はまた、痛覚を評価する当該分野で公知の標準的な方法により測定され得る。投与の意図される様態に依存し、薬学的組成物は、固形、半固形または液体投薬形態（例えば、錠剤、坐薬、丸薬、カプセル、粉末、液体、懸濁液、ローション、クリーム、ゲルなど）の形態であり得、好ましくは、正確な投薬量の単独投与に適切な単位投薬形態であり得る。組成物は、上記のように、薬学的に受容可能なキャリアと組み合わせられた選択された薬物の有効量を含み、それに加えて、他の薬用薬物、医薬品薬物、キャリア、アジュバント、希釈剤などを含み得る。固形組成物において、通常の非毒性固形キャリアとしては、例えば、製薬等級のマンニトール、乳糖、デンプン、ステアリン酸マグネシウム、サッカリンナトリウム、タルク、セルロース、ブドウ糖、ショ糖、炭酸マグネシウムなどが挙げられる。液体の薬学的投与可能組成物は、例えば、本明細書記載の活性化合物および任意の賦形剤（例えば、水、生理食塩水、水性デキストロース、グリセロール、エタノールなど）中の薬学的アジュバントを、溶解すること、分散することなどにより調製され得、これにより溶液または懸濁液を形成し得る。所望される場合、投与されるべき薬学的組成物はまた、少量の非毒性の補助的物質（例えば、湿潤剤、乳化剤、pH緩衝剤など）、例えば、酢酸ナトリウム、モノラウリン酸ソルビタン、トリエタノールアミン酢酸ナトリウム、オレイン酸トリエタノールアミンなどの少量を含み得る。このような投薬形態を調製する実際の方法は、当業者にとって公知または明らかである。例えば、Remlngton's Pharmaceutical S ciences(73)を参照のこと。経口投与のために、微粉末または顆粒は、希釈剤、分散剤、および/または界面活性剤を含み得、水中またはシロップ中、乾燥状態におけるカプセル中またはサシェ(sachet)中、あるいは懸濁剤が含まれ得る非水性溶液中または懸濁液中、結合剤と潤滑剤が含まれ得る錠剤中、あるいは水またはシロップ中の懸濁液中に存在し得る。所望される場合または必要とされる場合、香味料、保存剤、懸濁剤、増粘剤(thickening agent)、または乳化剤が、含まれ得る。錠剤および顆粒は、経口投与形態に好ましく、これらはコーティングされ得る。用いられる場合、非経口的投与は、一般的に、注入により特徴付けられる。注入可能物は、従来の形態（液体溶液または懸濁液、注入の前の液体中の溶液または懸濁液に適切な固体形態、あるいは乳濁液としてのいずれか）で調製され得る。より近年、修正された非経口的投与のためのアプローチは、低速放出系または持続放出系の使用を含み、これにより一定レベルの投薬量が維持される。例えば、米国特許第3,710,795号を参照のこと（これは、本明細書において参考として援用される）。局所的な投与のために、液体、懸濁液、ローション、クリーム、ゲルなどが、活性化合物が皮膚表面に送達され得る限り、使用され得る。本願の全体に渡り、種々の刊行物が列挙されるかまたは参照される。これら刊行物のその全体としての開示は、本発明の属する最新技術をより十分に記載するために、本願における参考として本明細書において援用される。本発明は、本発明の特定の実施態様の具体的な詳細に対する参考文献を用いて記載されてきたが、このような詳説は、本発明の範囲の限定とみなされないことが、意図される。当業者にとって、本発明の範囲または精神を逸脱することなく種々の修飾および改変が本発明においてなされ得ることは、明らかである。本発明の他の実施態様は、本明細書において開示する明細書および本発明の実施の考慮により、当業者に明らかである。明細書および実施例は、例示のみとして考慮されることを意図し、本発明の真の範囲および精神は、以下の請求の範囲によって示される。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｋ 31/343 Ａ６１Ｋ 31/343 31/357 31/357 31/381 31/381 31/382 31/382 31/385 31/385 Ａ６１Ｐ 1/16 Ａ６１Ｐ 1/16 9/02 9/02 9/04 9/04 9/10 9/10 １０１１０１ 9/12 9/12 13/08 13/08 13/12 13/12 17/00 17/00 25/04 25/04 35/00 35/00 43/00 １１１ 43/00 １１１Ｃ０７Ｄ 307/79 Ｃ０７Ｄ 307/79 317/30 317/30 319/06 319/06 // Ｃ０７Ｄ 333/40 333/40 333/54 333/54 339/06 339/06 339/08 339/08 (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ

Claims

【特許請求の範囲】１．被験体においてエンドセリン-1を阻害する方法であって、該被験体にエンドセリン-1阻害量の適切なレチノイドを投与する工程を含む、方法。２．請求項１に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、以下のＡ (i)からA(ii)からなる構造の群から選択される化合物、またはそれらの塩、アミド、もしくはエステルであり：ここで：ａ．R₁₁は以下のB(i)からB(iv)からなる構造の群から選択される化合物であり：ｂ．R₁は２つの結合部位を有する基であり、ここで結合は、単一の共有結合により、またはアリールもしくはヘテロアリール縮合により、該２つの結合部位のそれぞれにおいて独立して生じ得、ｃ．R₂、R₃、R₄、R₅、およびR₁₀は独立して同一のまたは異なる低級アルキルであり、ｄ．R₆は水素またはメチルであり、ｅ．R₇、R₈、およびR₉は、水素、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アルキル、またはアダマンチルであり、そしてｆ．XおよびYは、独立してヘテロ原子である、方法。３．R₁₁が式B(i)であり、R₁₁のための式B(i)においてCOOHがパラ位にある、請求項２に記載の方法。４．R₁が、１〜５個の炭素原子、ヘテロ原子、および／またはアリール部分をその骨格中に有する炭化水素またはヘテロ炭化水素であるが、ただし該骨格中に１個より多いアリール部分は存在しない、請求項２に記載の方法。５．R₁が以下のものである、請求項２に記載の方法： (a)ヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、二重結合または単結合を通して低級アルキルまたはメチルアリールで置換された二価のメチル； (b)以下の構造C(i)の化合物、ここで、R¹およびR²は、メチルまたはヘテロ原子であり、必要に応じて一緒に連結して、３、５、または６員の環状脂肪族環またはヘテロ環状脂肪族環を形成する；あるいは (c)以下の構造C(ii)の化合物、ここで、R³はヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、または二重結合もしくは単結合を通して低級アルキルもしくはメチルアリールで置換された二価のメチルであり；そしてR⁴はヘテロ原子、カルボニル、メトキシカルボニル、エテン、メトキシ、アセチレン、アリール、またはカルボニルアミンである。６．請求項２に記載の方法であって、ここでR₁はC(iii)からC(xxiv)の構造から選択される部分であり：そしてR₁₂およびR₁₃は、それぞれ独立して、低級アルキルであり、そしてXおよびYは、それぞれ独立してヘテロ原子である、方法。７．請求項１に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、D(i)から D(xxxx)から選択される化合物であり：ここで、該結合の記号−または＝は、低級アルキルにより末端をなされる、方法。８．前記被験体が哺乳動物である、請求項１に記載の方法。９．前記哺乳動物がヒトである、請求項８に記載の方法。１０．被験体において増加したレベルのエンドセリン-1の存在に関連する疾患を処置する方法であって、該被験体にエンドセリン-1阻害量の適切なレチノイドを投与する工程を含む、方法。１１．請求項１０に記載の方法であって、ここで前記疾患が全身性硬化症、川崎病、心臓性ショック、急性心筋梗塞、進行性アテローム硬化症、進行性前立腺ガン、限局性前立腺ガン、血管内皮種、肺高血圧症、敗血症、鬱血性心不全、および／または肝腎症候群である、方法。１２．請求項１０に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、以下のA(i)からA(ii)からなる構造の群から選択される化合物、またはそれらの塩、アミド、もしくはエステルであり：ａ．R₁₁は以下のB(i)からB(iv)からなる構造の群から選択される化合物であり：ｂ．R₁は２つの結合部位を有する基であり、ここで結合は、単一の共有結合により、またはアリールもしくはヘテロアリール縮合により、該２つの結合部位のそれぞれにおいて独立して生じ得、ｃ．R₂、R₃、R₄、R₅、およびR₁₀は独立して同一のまたは異なる低級アルキルであり、ｄ．R₆は水素またはメチルであり、ｅ．R₇、R₈、およびR₉は、水素、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アルキル、またはアダマンチルであり、そしてｆ．Xおよび7は、独立してヘテロ原子である、方法。１３．R₁₁が式B(i)であり、R₁₁のための式B(i)においてCOOHがパラ位にある、請求項１２に記載の方法。１４．R₁が、１〜５個の炭素原子、ヘテロ原子、および／またはアリール部分をその骨格中に有する炭化水素またはヘテロ炭化水素であるが、ただし該骨格中に１個より多いアリール部分は存在しない、請求項１２に記載の方法。１５．R₁が以下のものである、請求項１２に記載の方法： (a)ヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、二重結合または単結合を通して低級アルキルまたはメチルアリールで置換された二価のメチル； (b)以下の構造C(i)の化合物、ここで、R¹およびR²は、メチルまたはヘテロ原子であり、必要に応じて一緒に連結して、３、５、または６員の環状脂肪族環またはヘテロ環状脂肪族環を形成する；あるいは (c)以下の構造C(ii)の化合物、ここで、R³はヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、または二重結合もしくは単結合を通して低級アルキルもしくはメチルアリールで置換された二価のメチルであり；そしてR⁴はヘテロ原子、カルボニル、メトキシカルボニル、エテン、メトキシ、アセチレン、アリール、またはカルボニルアミンである。１６．請求項１２に記載の方法であって、ここでR₁はC(iii)からC(xxiv)の構造から選択される部分であり：そしてR₁₂およびR₁₃は、それぞれ独立して、低級アルキルであり、そしてXおよびYは、それぞれ独立してヘテロ原子である、方法。１７．請求項１０に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、D(i) からD(xxxx)の構造から選択される化合物であり：ここで、該結合の記号−および／または＝は、低級アルキルにより末端をなされる、方法。１８．前記被験体が哺乳動物である、請求項１０に記載の方法。１９．前記哺乳動物がヒトである、請求項１８に記載の方法。２０．被験体において増加したレベルのエンドセリン-1の存在に関連する痛みを処置する方法であって、該被験体にエンドセリン-1阻害量の適切なレチノイドを投与する工程を含む、方法。２１．請求項２０に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、以下のA(i)からA(ii)からなる構造の群から選択される化合物、またはそれらの塩、アミド、もしくはエステルであり：ここで：ａ．R₁₁は以下のB(i)からB(iv)の構造の化合物であり：ｂ．R₁は２つの結合部位を有する基であり、ここで結合は、単一の共有結合により、またはアリールもしくはヘテロアリール縮合により、該２つの結合部位のそれぞれにおいて独立して生じ得、ｃ．R₂、R₃、R₄、R₅、およびR₁₀は独立して同一のまたは異なる低級アルキルであり、ｄ．R₆は水素またはメチルであり、ｅ．R₇、R₈、およびR₉は、水素、ヒドロキシ、低級アルコキシ、アルキル、またはアダマンチルであり、そしてｆ．XおよびYは、独立してヘテロ原子である、方法。２２．R₁₁が式B(i)であり、R₁₁のための式B(i)においてCOOHがパラ位にある、請求項２１に記載の方法。２３．R₁が、１〜５個の炭素原子、ヘテロ原子、および／またはアリール部分をその骨格中に有する炭化水素またはヘテロ炭化水素であるが、ただし該骨格中に１個より多いアリール部分は存在しない、請求項２１に記載の方法。２４．R₁が以下のものである、請求項２１に記載の方法： (a)ヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、二重結合または単結合を通して低級アルキルまたはメチルアリールで置換された二価のメチル； (b)以下の構造C(i)の化合物、ここで、R¹およびR²は、メチルまたはヘテロ原子であり、必要に応じて一緒に連結して、３、５、または６員の環状脂肪族環またはヘテロ環状脂肪族環を形成する；あるいは (c)以下の構造C(ii)の化合物、ここで、R³はヘテロ原子、メチル、メチルヒドロキシ、カルボニル、イミン、ヘテロアリール、または二重結合もしくは単結合を通して低級アルキルもしくはメチルアリールで置換された二価のメチルであり；そしてR⁴はヘテロ原子、カルボニル、メトキシカルボニル、エテン、メトキシ、アセチレン、アリール、またはカルボニルアミンである。２５．請求項２１に記載の方法であって、ここでR₁はC(iii)からC(xxiv)の構造から選択される部分であり：そしてR₁₂およびR₁₃は、それぞれ独立して、低級アルキルであり、そしてXおよびYは、それぞれ独立してヘテロ原予である、方法。２６．請求項２０に記載の方法であって、ここで前記適切なレチノイドは、D(i) からD(xxxx)の構造から選択される化合物であり：ここで、該結合の記号−および／または＝は、低級アルキルにより末端をなされる、方法。２７．前記被験体が哺乳動物である、請求項２０に記載の方法。２８．前記哺乳動物がヒトである、請求項２７に記載の方法。２９．R₂、R₃、R₄、およびR₅が全てメチルである、請求項２に記載の方法。３０．R₂、R₃、R₄、およびR₅が全てメチルである、請求項１２に記載の方法。３１．R₂、R₃、R₄、およびR₅が全てメチルである、請求項２１に記載の方法。３２．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(xxii)およびD(xxxv)から選択される、前立腺ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３３．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(v)、D(vii)、D(xiv)、D(xix)〜D( xxi)およびD(xxxv)から選択される、前立腺ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３４．前記適切なレチノイドが構造D(xxxvii)である、前立腺ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３５．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(xxii)およびD(xxxv)から選択される、卵巣ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３６．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(v)、D(vii)、D(xiv)、D(xix)〜D( xxi)およびD(xxxv)から選択される、卵巣ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３７．前記適切なレチノイドが構造D(xxxvii)である、卵巣ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３８．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(xiv)、D(xvi)〜D(xxii)、およびD (xxxv)から選択される、乳ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。３９．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(v)、D(vii)、D(xiv)、D(xix)〜D( xxi)およびD(xxxv)から選択される、乳ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。４０．前記適切なレチノイドが構造D(xxxvii)である、乳ガンを処置するための請求項１７に記載の方法。４１．前記適切なレチノイドが、構造D(xxiv)〜D(xxxiv)、およびD(xxxvi)〜D(x xxx)から選択される、心疾患を処置するための請求項１７に記載の方法。４２．前記適切なレチノイドが構造D(xxxvii)である、心疾患を処置するための請求項１７に記載の方法。４３．前記適切なレチノイドが、構造D(i)〜D(xxii)およびD(xxxv)から選択される、増加したレベルのエンドセリン-1の存在に関連する、ガンまたは心疾患以外の疾患を処置するための請求項１７に記載の方法。４４．前記適切なレチノイドが、構造D(xxiv)〜D(xxxiv)、およびD(xxxvi)〜D(x xxx)から選択される、増加したレベルのエンドセリン-1の存在に関連する、ガンまたは心疾患以外の疾患を処置するための請求項１７に記載の方法。４５．ガンまたは心疾患以外の疾患を処置するための請求項１０に記載の方法。