JP2001510777A

JP2001510777A - 化粧組成物

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Publication number: JP2001510777A
Application number: JP2000503809A
Authority: JP
Inventors: カーソン，ロバート・ジヨージ; パテル，クルパ; バラツト，マリーアン; ボスコ，キヤロル・アネツト; ピライ，スリークマー
Original assignee: ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ
Priority date: 1997-07-25
Filing date: 1998-07-07
Publication date: 2001-08-07
Also published as: DE69815099T2; EP0980235A2; CN1327380A; HK1024417A1; US6270780B1; CZ295608B6; PL338451A1; CN1162145C; WO1999004747A2; DE69815099D1; CA2299458A1; WO1999004747A3; PL193397B1; BR9810810A; ID23932A; BR9810810B1; KR100514271B1; RU2203036C2; AU8858498A; EP0980235B1

Abstract

(57)【要約】ピーナッツおよび赤ブドウを包含する種々の一般的食用植物の成分であるレスベラトロールは、フィトエストロゲンである。レスベラトロールは、皮膚の表皮細胞（ケラチノサイト）の増殖を阻害し、それの分化を刺激する。レスベラトロールは、α−ヒドロキシ酸によって生じる皮膚刺激を減少させることも見い出された。レスベラトロールは、シワのある、線のある、乾燥した、薄片状の、老化した、または光損傷した皮膚の外観を向上させ、ならびに、皮膚の厚み、弾力性、柔軟性、輝き、明るさ、およびふくらみを向上させるのに有効である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】（技術分野）植物に由来する天然エストロゲンであるレスベラトールを含有する化粧組成物
、およびそのような組成物を皮膚に適用することによって皮膚を整える化粧方法
。

【０００２】（背景技術）ヒトの皮膚は、２つの主要な層、すなわち、下部の厚い層である真皮、および
、上部の薄い層である表皮、から成る。真皮は、皮膚に、強さ、弾力性、および
厚みを付与する層である。加齢とともに皮膚層の厚みが減少し、これが、老化し
た皮膚におけるシワの形成に部分的に関係があると考えられる。皮膚の弾力性お
よびバリヤー特性を付与するヒトの皮膚の上部層または表皮は、多くの種々の細
胞型から成る。ケラチノサイトは、表皮の主要な細胞系である（ヒトの表皮にお
ける細胞の合計数の７５％〜８０％）。表皮内において、ケラチノサイトは、４
つの明確な分化段階において存在する。表皮の分化は、皮膚の本質的機能の付与
、即ち、外部環境に対する保護バリヤーの付与、および身体からの水分の損失の
防止、に重要である。角質化被膜の形成は、ケラチノサイト分化の最終段階であ
る。角質化被膜の形成に関係する酵素であるトランスグルタミナーゼは、表皮分
化のマーカーである。従って、皮膚層の厚みを増加させ、表皮層におけるケラチ
ノサイトの分化を増加させる薬剤は、皮膚調節および耐老化効果を付与する理想
的化合物である。

【０００３】エストロゲン、およびエストロゲンと同様に機能する合成化合物が、皮膚層の
厚みを増加せ、老化する皮膚におけるシワの形成を減少させることが知られてい
る。閉経後に生じる皮膚乾燥、皮膚弾力性およびふくらみ（ｐｌｕｍｐｎｅｓｓ
）の減少のような皮膚の変化は、エストロゲン産生の不足に起因する。エストロ
ゲン療法は、老化する皮膚に関係する変化の多くを防止するかまたは遅らせる（
Ｃｒｅｉｄｉら、Ｅｆｆｅｃｔｏｆａｃｏｎｊｕｇａｔｅｄｏｅｓｔｒ
ｏｇｅｎｃｒｅａｍ（Ｐｒｅｍａｒｉｎ（登録商標）ｏｎａｇｉｎｇ
ｆａｃｉａｌｓｋｉｎ，Ｍａｔｕｒｉｔａｓ，１９，ｐ．２１１−２３
，１９９４）。合成エストロゲン、ジエチルスチルベストロールは、下記構造
を有する：

【０００４】

【化１】この構造は、天然エストロゲン、エストラジオールの構造：

【０００５】

【化２】と非常に異なっている。

【０００６】近年、フィトエストロゲン（即ち、植物に見い出されるエストロゲン様活性を
有する天然化合物）が、治療目的に使用されることが多くなっている。記載され
ている用途のいくつかは、低コレステロール血症剤および抗粥状動脈腫剤として
の使用、特に閉経後の女性における心血管疾患の治療、年配者における骨粗鬆症
の治療、および特に女性における乳癌、子宮内膜および頸部癌に対する抗癌剤と
しての使用である（Ｋｎｉｇｈｔら、Ｐｈｙｔｏｅｓｔｒｏｇｅｎｓ − ａ
ｓｈｏｒｔｒｅｖｉｅｗ，Ｍａｔｕｒｉｔａｓ，２２：１６７−７５，
１９９５）。

【０００７】「天然」に基づく製品に対する消費者の要求が、近年、高まっている。消費者
は、化学合成は、環境的に安全でないと考えている。化学合成成分は、非常に強
い（ｈａｒｓｈ）化学物質を含有する場合がある。天然製品は純粋で穏やかであ
り、化学合成製品より優れていると考えられている。しかし、植物源から化粧的
利益を引き出すことは容易ではない。「天然」源から実際的利益を引き出すため
には、化粧的利益を実際に送達する植物中の特定の活性を同定する必要がある。

【０００８】１つの既知のフィトエストロゲンは、フォトアネトールである：

【０００９】

【化３】フォトアネトールは、局所または化粧用途に関して記載されたことがない。

【００１０】本発明は、レスベラトロールがフィトエストロゲンであり、それがケラチノサ
イト増殖を阻害し、ケラチノサイト分化を増加し、およびα−ヒドロキシ酸の使
用に潜在的に関係するヒリヒリする刺激（ｉｒｒｉｔａｔｉｏｎ）またはチクチ
クする刺激（ｓｔｉｎｇ）を減少させることを見い出したことに少なくとも部分
的に基づいている。

【００１１】レスベラトロールは、種々の植物中に見い出される化合物である。レスベラト
ロールの単離および特徴付けが、ニホンニワヤナギ（Ｊａｐａｎｅｓｅｋｎｏ
ｔｗｅｅｄ：Ｐｏｗｅｌｌら、Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ３５，ｐ．３３
５，１９９４）、ワインおよびブドウ（Ｇｏｌｄｂｅｒｇら、Ｊ．Ａｇｒｉｃ．
ＦｏｏｄＣｈｅｍ．，４３，ｐ．１８２０，１９９５、およびＣｅｌｌｏｔｔ
ｉら、「Ｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌｃｏｎｔｅｎｔｏｆｓｏｍｅｗｉｎｅ
ｓｏｂｔａｉｎｅｄｆｒｏｍｄｒｉｅｄＶａｌｐｏｌｉｃｅｌｌａｇ
ｒａｐｅｓ：ＲｅｃｉｏｔｏおよびＡｍａｒｏｎｅ．，Ｊｃｈｒｏｍａｔｏｇ
ｒＡ（Ｎｅｔｈｅｒｌａｎｄｓ）７３０：４７−５２，１９９６）、およびピ
ーナツ植物栽培物（ｐｅａｎｕｔｐｌａｎｔｃｕｌｔｕｒｅｓ）（Ｋｉｎｄ
ｌら、米国特許第５３９１７２４号）のような種々の植物に関して記載されてい
る。赤ブドウおよび赤ワインは、多量のレスベラトロールを含有し、この化合物
は、ワインを飲む人の心臓血管に関して健康である理由の１つとされている。さ
らに、レスベラトロールは、有効な癌の化学予防薬、および抗炎症薬であること
が示されている。レスベラトロールが、ヒト前骨髄球性白血病細胞の分化を誘発
させることも報告されている（Ｊａｎｇら、Ｃａｎｃｅｒｃｈｅｍｏｐｒｅｖ
ｅｎｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｒｅｓｖｅｒａｔｒｏｌ，ａｎａ
ｔｕｒａｌｐｒｏｄｕｃｔｄｅｒｉｖｅｄｆｒｏｍｇｒａｐｅｓ、Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ２７５：２１８−２２０，１９９７）。Ｊａｎｇらは、培養におけ
る発癌物質処置マウス皮膚細胞に対する抗癌剤としての、レスベラトロールの使
用を記載している。

【００１２】ブドウ抽出物を含有する化粧組成物が開示されている。例えば、化粧組成物に
おける０．５％のブドウ抽出物の使用を開示している日本特許出願第０６３３６
４２１号（ＪＰ ’４２１）の抄訳を参照。Ｓｃａｆｉｌｄｉら（米国特許第５
６８３６８３号）およびＺａｂｏｔｔｏら（米国特許第５４３９６７２号）は、
グレープシードオイルを含有する化粧組成物を開示している。Ｇｒｉａｔら（米
国特許第５１７１５７７号）は、化粧用種子（ｃｏｓｍｅｔｉｃｐｉｐｓ）を
含有する化粧用フォーム（ｃｏｓｍｅｔｉｃｆｏａｍｓ）を教示している。Ｊ
Ｐ ’４２１を除いて、これらはいずれも、使用されるブドウの量を開示してい
ない。ＪＰ ’４２１は、０．５％のブドウ抽出物の存在を開示している。米国
農務省のＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＲｅｓｅａｒｃｈＳｅｒｖｉｃｅによれ
ば、全液果（ｗｈｏｌｅｂｅｒｒｉｅｓ）中のレスベラトロール濃度は、約１
５ｐｐｍである。従って、０．５％のグレープシード抽出物中のレスベラトロー
ル濃度は、０．３３μＭまたは０．０００００７５重量％である。

【００１３】前記の文献は、スキンケアまたは化粧用途にレスベラトロールを使用すること
を開示しておらず、レスベラトロールがフィトエストロゲンであり、それがケラ
チノサイト増殖を阻害し、ケラチノサイトの分化を促進し、α−ヒドロキシ酸に
よって生じる皮膚刺激を調節することを開示していない。

【００１４】（発明の開示）本発明は、０．００００２〜１０重量％の量のレスベラトロール、および化粧
的に許容される賦形剤を含んで成るスキンケア組成物を包含する。

【００１５】本発明は、本発明の組成物を皮膚に適用することを含んで成る、シワのある、
線のある（ｌｉｎｅｄ）、乾燥した、薄片状の（ｆｌａｋｙ）、老化した、また
は光損傷した皮膚の状態を向上させるかまたは予防し、および皮膚の厚み、弾力
性、柔軟性、輝き（ｒａｄｉａｎｃｅ）、明るさ（ｇｌｏｗ）、およびふくらみ
（ｐｌｕｍｐｎｅｓｓ）を向上させる方法も包含する。本発明の組成物は、既に
乾燥した、薄片状の、線のある、シワのある、老化した、光損傷した、哺乳動物
の皮膚に局所適用されるか、または、正常な皮膚に予防的に適用して、衰える変
化を予防するかまたは減少させることができる。

【００１６】本発明は、皮膚にエストロゲン活性を付与し、ヒトの皮膚におけるケラチノサ
イトの増殖を阻害し、およびケラチノサイトの分化を増加させる化粧方法も包含
する。本発明はさらに、α−ヒドロキシ酸によって生じる皮膚刺激、ヒリヒリす
る刺激（ｓｔｉｎｇ）、または炎症を調節する化粧方法も包含する。この点につ
いて、本発明は、α−ヒドロキシ酸との組み合わせにおいてレスベラトロールを
含有する化粧組成物も包含する。

【００１７】（発明を実施するための最良の形態）レスベラトロール（５−パラヒドロキシスチリルレゾルシノール、または３，
４’，５−スチルベネトリオールとしても既知）は、新規組成物の本質的成分で
ある。レスベラトロールは下記構造：

【００１８】

【化４】を有する。

【００１９】レスベラトロールはＳｉｇｍａから商業的に入手することができる。

【００２０】一般に、新規組成物におけるレスベラトロールの量は、組成物の重量の０．０
０００２〜１０％である。コストを下げ、効果を最大限にするために、レスベラ
トロールの量が、０．００１％〜５％であるのが好ましく、０．１％〜５％であ
るのが最も好ましい。

【００２１】本発明の組成物は、組成物中のレスベラトロールのために希釈剤、分散剤、ま
たは担体として機能する化粧的に許容される賦形剤も含んで成り、それによって
、組成物が皮膚に適用される際に組成物の分配を促進させる。

【００２２】水以外の、または水に付加される賦形剤は、液体または固体皮膚軟化剤、溶剤
、湿潤剤、増粘剤、および粉末を包含する。特に好ましい非水性担体は、ポリジ
メチルシロキサンおよび／またはポリジメチルフェニルシロキサンである。本発
明のシリコーンは、２５℃において約１０〜１０，０００，０００ｍｍ^２／秒（
センチストークス）の範囲の粘度を有する。特に望ましいのは、低粘度および高
粘度シリコーンの混合物である。これらのシリコーンは、商標Ｖｉｃａｓｉｌ、
ＳＥおよびＳＦとしてＧｅｎｅｒａｌＥｌｅｃｔｒｉｃＣｏｍｐａｎｙから
入手可能であり、ならびに、２００および５５０シリーズとしてＤｏｗＣｏｒ
ｎｉｎｇＣｏｍｐａｎｙから入手可能である。本発明の組成物に使用し得るシ
リコーンの量は、組成物の重量の５％〜９５％、好ましくは２５％〜９０％であ
る。

【００２３】化粧的に許容される賦形剤は一般に、組成物の重量の５％〜９９．９％、好ま
しくは２５％〜８０％を構成し、および、他の化粧補助剤の不存在においては、
組成物の残余部分を構成する。好ましくは賦形剤の重量の少なくとも８０重量％
が水である。好ましくは、水が、新規組成物の少なくとも５０重量％、最も好ま
しくは６０〜８０重量％を構成する。

【００２４】本発明の１つの実施形態においては、新規組成物が、α−ヒドロキシ酸も含有
する。

【００２５】ヒドロキシ酸は、ケラチノサイトにおいて、増殖を促進し、セラミド生合成を
増加し、表皮厚み増加し、正常な皮膚の落屑を増加し、その結果として、より滑
らかな若々しい皮膚を生じる。

【００２６】ヒドロキシ酸は、α−ヒドロキシ酸、β−ヒドロキシ酸（例えば、サリチル酸
）、他のヒドロキシカルボン酸（例えば、ジヒドロカルボン酸、ヒドロキシ−ジ
カルボン酸、ヒドロキシトリカルボン酸）、およびそれらの混合物またはそれら
の立体異性体（ＤＬ、Ｄ、またはＬ）の組み合わせから選択することができる。

【００２７】レスベラトロール抗刺激剤を含有する最も好ましい新規組成物は、グリコール
酸および／または乳酸を含有するが、それは、これらの成分が、刺激を生じる可
能性を有することが見い出されているが、それでもなおそれらが化粧的利益を送
達するのに特に有効であることが見い出されているからである。

【００２８】ヒドロキシ酸が、一般式（１）：

【００２９】

【化５】［式中、Ｍは、Ｈ、あるいは、１個〜２７個の炭素原子を有する飽和または不飽
和、直鎖または分岐鎖炭化水素である。］で示されるα−ヒドロキシ酸から選択されるのが好ましい。

【００３０】ヒドロキシ酸が、乳酸、２−ヒドロキシオクタン酸、ヒドロキシラウリン酸、
グリコール酸、およびそれらの混合物から選択されるのがさらに好ましい。立体
異性体が存在する場合は、Ｌ−異性体が最も好ましい。

【００３１】新規組成物の特に有益な点は、多量のヒドロキシ酸を、皮膚刺激を生じずに使
用できることである。好ましくは、本発明の組成物に存在するヒドロキシ酸成分
の量は、０．０１〜２０重量％、より好ましくは２〜１２重量％、最も好ましく
は４〜１２重量％である。

【００３２】組成物のｐＨに基づいて、ヒドロキシ酸が、塩として、例えば、アンモニウム
またはカリウムまたはナトリウム塩として存在し得ると理解すべきものとする。

【００３３】新規組成物は、２．５〜１０の一般的範囲のｐＨを有することができるが、新
規組成物は、それらが酸性ｐＨ（特に、それらがヒドロキシ酸を含有する場合）
、好ましくは３〜５、最も好ましくは３〜４のｐＨである場合に有益であり、そ
の理由は、そのような組成物が特に刺激性であるからである。

【００３４】任意の皮膚有益物質および化粧補助剤油および油状物質が乳化剤と一緒に存在して、使用される乳化剤の平均親水性
−親油性バランス（ＨＬＢ）に主に依存して油中水エマルジョンまたは水中油エ
マルジョンを得ることができる。

【００３５】新規組成物が日焼け止め剤を含有するのが好ましい。日焼け止め剤は、紫外線
をブロックするために一般に使用される物質を包含する。そのような化合物の例
は、ＰＡＢＡ、シンナメート、およびサリチレートの誘導体である。例えば、オ
クチルメトキシシンナメートおよび２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノ
ン（オキシベンゾンとしても既知）を使用することができる。オクチルメトキシ
シンナメートおよび２−ヒドロキシ−４−メトキシベンゾフェノンは、それぞれ
、商品名ＰａｒｓｏｌＭＣＸおよびベンソフェノン−３として商業的に入手し
得る。乳化剤中における日焼け止め剤の正確な量は、日光の紫外線からの所望さ
れる保護の程度に依存して、変化させることができる。

【００３６】皮膚軟化剤が、本発明の化粧組成物に組み込まれることが多い。そのような皮
膚軟化剤のレベルは、合計組成物重量の０．５％〜５０％、好ましくは５％〜３
０％である。皮膚軟化剤は、一般的化学種において、エステル、脂肪酸およびア
ルコール、ポリオールおよび炭化水素として分類することができる。

【００３７】エステルは、モノ−またはジ−エステルである。許容される脂肪酸ジエステル
の例は、ジブチルアジペート、ジエチルセバケート、ジイソプロピルジメレート
、およびジオクチルスクシネートを包含する。許容される分岐鎖脂肪酸エステル
は、２−エチル−ヘキシルミリステート、イソプロピルステアレート、およびイ
ソステアリルパルミテートを包含する。許容される三塩基性酸エステルは、トリ
イソプロピルトリリノレエートおよびトリラウリルシトレートを包含する。許容
される直鎖脂肪酸エステルは、ラウリルパルミテート、ミリスチルラクテート、
およびステアリルオレエートを包含する。好ましいエステルは、ココ−カプリレ
ート／カプレート（ココ−カプリレートおよびココ−カプレートのブレンド）、
プロピレングリコールミリスチルエーテルアセテート、ジイソプロピルアジペー
ト、およびセチルオクタノエートを包含する。

【００３８】好適な脂肪アルコールおよび酸は、１０個〜２０個の炭素原子を有する化合物
を包含する。セチル、ミリスチル、パルミチン、ステアリルアルコールおよび酸
のような化合物が特に好ましい。

【００３９】皮膚軟化剤として機能するポリオールは、線状および分岐鎖アルキルポリヒド
ロキシル化合物を包含する。例えば、プロピレングリコール、ソルビトール、お
よびグリセリンが好ましい。ポリ−プロピレングリコールおよびポリエチレング
リコールのようなポリマーポリオールも有効である。ブチレンおよびプロピレン
グリコールも、浸透促進剤として特に好ましい。

【００４０】皮膚軟化剤として機能する炭化水素の例は、１２個〜３０個の炭素原子を有す
る炭化水素鎖を有する炭化水素である。特定の例は、鉱油、石油ゼリー、スクア
レン、イソパラフィンを包含する。

【００４１】本発明の化粧組成物中の機能成分の他の種類は、増粘剤である。増粘剤は一般
に、組成物に対して０．１〜２０重量％、好ましくは約０．５〜１０重量％の量
で存在する。増粘剤の例は、商標ＣａｒｂｏｐｏｌとしてＢ．Ｆ．Ｇｏｏｄｒｉ
ｃｈＣｏｍｐａｎｙから入手し得る架橋ポリアクリレート物質である。キサン
タン、カラギーナン、ゼラチン、カライア、ペクチンおよびイナゴマメ（ｌｏｃｕｓｔｂｅａｎｓ）ガムのようなガムを使用することもできる。ある場合に
おいては、シリコーンまたは皮膚軟化剤としても機能する物質によって、増粘剤
機能が得られる場合がある。例えば、１０センチストークスの過剰のシリコーン
ガム、およびグリセロールステアレートのようなエステルが、２重の機能を有す
る。

【００４２】本発明の化粧組成物に粉末を組み込むことができる。これらの粉末は、白亜、
タルク、カオリン、スターチ、スメクタイトクレー、化学的修飾珪酸アルミニウ
ムマグネシウム、有機的修飾モントモリロナイトクレー、水和珪酸アルミニウム
、ヒュームドシリカ、アルミニウムスターチオクテニルスクシネート、およびそ
れらの混合物を包含する。

【００４３】他の補助少量成分も、化粧組成物に組み込むことができる。これらの成分は、
着色剤、不透明剤、および香料を包含する。これらの他の補助少量成分の量は、
組成物に対して０．００１〜２０重量％である。

【００４４】組成物の使用本発明の組成物は、ヒトの皮膚に局所適用される製品、特に、皮膚を整え、潤
いを与え、滑らかにし、および、線のある、シワのある、または老化した皮膚の
外観を予防しまたは減少させる薬剤として使用することを主に意図している。

【００４５】使用に際して、少量の、例えば１〜１００ｍＬの組成物を、好適な容器または
アプリケーターから皮膚の露出面に適用し、および、必要であれば、手または指
または好適な器具を使用して、皮膚に拡げ、および／または擦り込む。

【００４６】製品形態および包装本発明の局所皮膚処置組成物は、ローション、クリーム、またはゲルとして製
剤化することができる。組成物を、それの粘度および消費者の意図する使用に適
した容器に包装することができる。例えば、ローションまたはクリームは、ボト
ルまたはロール−ボールアプリケーター、または噴射剤被動エアゾールデバイス
（ｐｒｏｐｅｌｌａｎｔ−ｄｒｉｖｅｎａｅｒｏｓｏｌｄｅｖｉｃｅ）また
は指での操作に好適なポンプ付き容器に包装することができる。組成物がクリー
ムの場合は、非変形性ボトルまたはスクィーズ容器、例えば、チューブまたは蓋
付き広口瓶に入れるだけでよい。引用によりここに援用する米国特許第５０６３
５０７号に開示されるようなカプセルに、組成物を入れることもできる。従って
、本発明は、前記に規定される化粧的に許容される組成物を含有する密閉容器も
提供する。

【００４７】下記の特定の実施例は本発明をさらに説明するものであるが、本発明はそれら
に限定されない。全ての実施例において、レスベラトロールはＳｉｇｍａから入
手した。スチューデントｔ−検定を使用して、全てのｐ値を算出した。

【００４８】（実施例）実施例１この実施例は、レスベラトロールがフィトエストロゲンであることを示すもの
である。

【００４９】下記試験を使用して、レスベラトロールがエストロゲン様活性を有するかどう
かを判断した。

【００５０】ＺＲ７５細胞系は、６３才の白色人種の女性の悪性***上皮から最初に単離さ
れた管乳癌細胞系（ｄｕｃｔａｌｂｒｅａｓｔｃａｒｃｉｎｏｍａｃｅｌ
ｌｌｉｎｅ）である（Ｅｎｇｅｌら、Ｈｕｍａｎｂｒｅａｓｔｃａｒｃｉ
ｎｏｍａｃｅｌｌｓｉｎｃｏｎｔｉｎｕｏｕｓｃｕｌｔｕｒｅ：Ａｒ
ｅｖｉｅｗ．，ＣａｎｃｅｒＲｅｓ．，３８：４３２７−４３３９，１９７８
）。この細胞系は、エストロゲン、プロゲステロン、および他のステロイドホル
モンの受容体を含有するが、増殖の増加に関してはエストロゲンだけに反応する
。この細胞系は、高親和性エストロゲン特異的受容体を含有する。従って、この
細胞系が、エストロゲン様活性の試験に使用される（Ｍａｒｋｉｅｗｉｃｚら、
Ｉｎｖｉｔｒｏｂｉｏａｓｓａｙｓｏｆｎｏｎ−ｓｔｅｒｏｉｄａｌ
ｐｈｙｔｏｅｓｔｒｏｇｅｎｓ，Ｊ．ＳｔｅｒｏｉｄＢｉｏｃｈｅｍ．Ｍｏ
ｌｅｃ．Ｂｉｏｌ．，４５：３９９−４０５，１９９３）。

【００５１】細胞におけるＤＮＡ合成率を測定するために使用される方法培養細胞による^３Ｈ−チミジンの取り込みを、細胞増殖のアッセイとして使用
した（ＺＲ７５細胞およびケラチノサイトの両方に関して）。チミジンは、ＤＮ
Ａのモノマー単位である４つのデオキシヌクレオシドの１つである。体細胞の細
胞***の前に、細胞***を起こす細胞の完全なゲノムが複製される。これは、細
胞による大規模なＤＮＡ合成を含み、両娘細胞が遺伝物質の同一の複製体を受け
取るのを可能にする。細胞***に備えてＤＮＡを合成する細胞の培養液に^３Ｈ−
チミジンを添加する場合に、新たに合成されるＤＮＡに標識チミジンが取り込ま
れる。細胞の集団への^３Ｈ−チミジンの取り込みの程度は、この細胞集団による
ＤＮＡ合成率に比例し、従って、それらの細胞増殖の指標である。

【００５２】ＺＲ７５細胞（Ｒｏｃｋｖｉｌｌｅ，ＭａｒｙｌａｎｄのＡｍｅｒｉｃａｎ
ＴｙｐｅＣｕｌｔｕｒｅＣｏｌｌｅｃｔｉｏｎから入手）を、１０％ウシ胎
児血清（ＦＢＳ）、１００単位ペニシリン／ｍＬ、および１００単位ストレプト
マイシン／ｍＬを含有するＲＰＭＩ１６４０培地（ＧｉｂｃｏＬｉｆｅＴｅ
ｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓから入手）において増殖させた。全ての培養を、３７℃に
おいて、５％ＣＯ_２中において行った。該培地は、フェノールレッドを含有しな
かった（弱いエストロゲン擬似体）。７５ｃｍ^２フラスコ当たり１０^６個の密度
において細胞を接種した。実験のために、１００，０００細胞／ｍＬ／穴におい
て、２４穴プレートに細胞を接種した。

【００５３】２４時間の増殖後、培地を除去し、細胞をＰＢＳ（燐酸緩衝生理食塩溶液、０
．０１Ｍ燐酸ナトリウム、０．１３８Ｍ塩化ナトリウム、０．００２７Ｍ塩化カ
リウム、ｐＨ７．４）で洗浄し、血清を含有しない（ストレプトマイシンおよび
ペニシリンは含有する）１ｍＬのＲＰＭＩ１６４０を加えた。ジメチルスルホキ
シド（ＤＭＳＯ）中のレスベラトロール、および水中のエストラジオールの原液
を製造した。次に、下記の表１に示される種々の濃度のレスベラトロールおよび
エストラジオールを、各穴に直接に加えた。２４時間後に、１μＣｉの［メチル
−３Ｈ］チミジンを各穴に加えた。２４時間後に培地を除去した。細胞をＰＢＳ
で１回洗浄し、ＰＢＳを完全に除去し、細胞を氷の上に置き、１ｍＬ／穴の１０
％ＴＣＡ（トリクロロ酢酸）で３０分間培養した。そのプレートを５％ＴＣＡで
３回洗浄して、細胞に取り込まれなかったチミジンのトレーサーを全て除去した
。５００μＬの０．１Ｍ水酸化ナトリウムを各穴に加え、そのプレートを室温で
少なくとも３０分間培養した。各サンプル２５０μＬをシンチレーションバイア
ルに移し、５ｍＬの計数液（ｃｏｕｎｔｉｎｇｆｌｕｉｄ）を加えた後、各バ
イアルをトリチウム測定用設定において５分間計数した。４重穴からのデータを
、レスベラトロールまたはエストラジオールを加えなかった対照穴に対しての、
ＤＮＡへのチミジン取り込みの％として算出した。数値を、４重穴の平均＋／−
標準偏差として表した。

【００５４】得られた結果を、表１に示す。

【００５５】

【表１】実験１に関する対照の^３Ｈチミジン取り込み値は７１５１３ｃｐｍであり、実
験２に関する対照の値は１１４９５８ｃｐｍであった。

【００５６】表１の結果は、既知のエストロゲンであるエストラジオールが、予期された通
りＺＲ７５細胞の増殖を刺激したことを示す。レスベラトロールは、５〜２０μ
Ｍの濃度において、ＺＲ７５細胞の増殖を増加させた。

【００５７】実施例２この実施例は、レスベラトロールがケラチノサイトの増殖を阻害することを示
すものである。

【００５８】１．細胞***しているケラチノサイトコロニーを確立するために、トリプシン
処置によって新生児***から単離した正常ヒトケラチノサイトを、Ｄｕｌｂｅｃ
ｃｏ改変イーグル培地（ＤＭＥ）／５％子牛胎児血清中において、マイトマイシ
ンＣ処理した３Ｔ３マウス繊維芽細胞の存在下に増殖させた。ケラチノサイトは
上記の条件下で第三継代まで増殖させた。

【００５９】２．実験のために、０．０９ｍＭのカルシウムを含有する、血清非含有ケラチ
ノサイト増殖培地（ＫＧＭ；Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，Ｃａｌ
ｉｆｏｒｎｉａから入手）に、第三継代ケラチノサイトを蒔いた。約３０，００
０個の細胞を６穴細胞培養プレートの各穴に蒔き、細胞が約４０％の集密度に達
するまで５日間増殖させた。

【００６０】３．培地を新たな培地（ＫＢＭ；Ｃｌｏｎｅｔｉｃｓから入手）と交換し、表
２に示される種々の濃度のレスベラトロールを、ＤＭＳＯ（ジメチルスルホキシ
ド）原液から培地に加えた。培養物における最終ＤＭＳＯ濃度は０．１％であっ
た。対照培養物にはレスベラトロールを添加せず、０．１％ＤＭＳＯを添加した
。各濃度を、３つの分離した穴において試験した。４時間後、１μＣｉの^３Ｈ−
チミジン（ＡｍｅｒｓｈａｍＣｏｒｐ．、Ｓｐ活性４０Ｃｉ／ミリモル）を各
穴の培地１ｍＬに加えた。細胞を２時間培養した。ケラチノサイトの細胞ＤＮＡ
に関係する^３Ｈ−チミジンの量を下記のように評価した。

【００６１】４．培地を吸引し、穴を１ｍＬのＰＢＳで洗浄した。次に、プレート上の細胞
のＤＮＡおよびタンパク質を、１ｍＬの氷冷１０％ＴＣＡを加えることによって
沈殿させた。プレートを３０分間氷の上に置いて、沈殿プロセスを完了させた。
次にＴＣＡを吸引し、各穴を５％ＴＣＡで４回洗浄した。穴中の細胞を、０．５
ｍＬの０．１Ｎ水酸化ナトリウムに溶解させた。次に、チミジン取り込みを測定
するために、２００μＬをシンチレーションバイアルに移し、下記に示されるＢ
ＣＡタンパク質アッセイ試薬を使用するタンパク質アッセイのために、２５μＬ
を使用した。５ｍＬのシンチレーション液（Ｓｃｉｎｔｉｖｅｒｓｅ）をバイア
ル中の溶液の残りに加え、バイアルをシンチレーションカウンターで計数して、
各バイアルにおける放射能の量を測定した。

【００６２】ＢＣＡ（ＢｉｃｉｎｃｈｏｎｉｎｉｃＡｃｉｄ）−タンパク質アッセイ２５μＬの細胞懸濁液を９６穴プレートに入れた。０．１Ｎ水酸化ナトリウム
中のＢＳＡ（ウシ血清アルブミン）の標準液も、同じ９６穴プレートに３重にお
いてピペットで入れた。ＰｉｅｒｃｅＢＣＡタンパク質アッセイ試薬を加え（
２００μＬ／穴）、プレートを室温で２時間培養した。ＤｙｎａｔｅｃｈＭＲ
７０００プレートリーダーによって、５７０ｎｍの波長において吸光度を測定し
た。

【００６３】次に、個々の穴に関して、総細胞ＤＮＡに取り込まれた^３Ｈ−チミジンのｃｐ
ｍ／（細胞タンパク質）μｇとして、ＤＮＡ合成率を算出した。各群の平均およ
び標準偏差も算出した。これらの数字はまた対照プレートの％として表された。
各データポイントを、３重穴の平均±標準偏差として表す。

【００６４】得られた結果を表２に示す。

【００６５】０．５未満のｐ値は、統計的有意性を示すと考えられた。

【００６６】

【表２】表２の結果から分かるように、１．５６μＭのレスベラトロール濃度が、ケラ
チノサイトのＤＮＡ合成を有意に減少させた。１．５６μＭのレスベラトロール
は、ケラチノサイトの増殖を５０％減少させた。両方の実験において、５０μＭ
のレスベラトールが、ＤＮＡ合成を完全に阻害した。

【００６７】実施例３レスベラトロールの種々の追加濃度において、実施例２を繰り返した。得られ
た結果を表３にまとめる。

【００６８】

【表３】表３の結果から、ＪＰ６３３６４２１によって開示される０．５％ブドウ抽出
物に存在する最大濃度である０．３３μＭの非常に低い濃度を包含する０．８μ
Ｍ（または０．００００１８重量％）未満の濃度において、レスベラトロールが
ケラチノサイト増殖の減少において有効でないことが分かる。

【００６９】実施例４この実施例は、レスベラトロールがケラチノサイトの分化を誘発することを示
すものである。

【００７０】トランスグルタミナーゼ測定方法表皮における最終分化のプロセスの間に、角質化被膜（ＣＥ）として既知の１
５ｎｍの厚みのタンパク質層が、細胞周辺の内部表面に形成される。ＣＥは、表
皮に発現される少なくとも２種類のトランスグルタミナーゼの作用によるＮ’−
（−グルタミル）リジンイソジペプチド結合の形成によってたがいに架橋される
多数の異なったタンパク質から成る。トランスグルタミナーゼ（ＴＧ−１）は、
表皮の分化した層、特に顆粒層に豊富に発現されるが、未分化基底層には存在し
ない。従って、ＴＧ−１は表皮ケラチノサイト分化の有用なマーカーであり、高
いＴＧ１レベルは高分化状態を示す。ＴＧ−１抗体を使用するＴＧ−１アッセイ
に基づくＥＬＩＳＡを使用して、下記実施例において培養ケラチノサイトの分化
の状態を評価した。

【００７１】ＴＧ−１のレベルを、下記のように測定した。ケラチノサイトを実施例２に記
載のようにして得た。実験のために、約３０，０００個の細胞を６穴プレートの
各穴に蒔き、細胞が約２０％〜３０％の集密に達するまで５日間増殖させた。２
ｍＬ／穴の新たなＫＧＭを、２〜５０ｍＭレスベラトロールのＤＭＳＯ溶液２μ
Ｌと一緒に、３日間にわたって毎日添加した。対照穴にも２μＬのＤＭＳＯを添
加した。処置から３日後、細胞をＰＢＳで２回洗浄し、冷凍器に２時間入れた。
次に、細胞を２時間にわたって解凍した。ＤＮＡ結合発蛍光団、ビス−ベンズイ
ミダゾール（Ｈｏｅｃｈｓｔ３３２５８）を使用し、４５０ｎｍ（３６０ｎｍ
における励起）におけるＤＮＡ結合発蛍光団の特異的蛍光を測定することによっ
て、細胞のＤＮＡ含有量を定量した。

【００７２】ＴＧ−１特異性モノクローナル抗体（ＢＣ１）（第一抗体）（Ａｍｅｒｓｈａ
ｍＬｉｆｅＳｃｉｅｎｃｅｓから入手）、およびペルオキシダーゼ標識ウサ
ギ抗マウスＩｇＧフラグメント（ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅｌａｂｅｌｅｄｒａ
ｂｂｉｔａｎｔｉｍｏｕｓｅＩｇＧｆｒａｇｍｅｎｔ）（第二抗体）を使
用して、穴中の細胞のＴＧ−１レベルを測定した。プレートを、ＴＢＳ（トリス
緩衝溶液、０．０１ＭＴｒｉｓ、０．１５０Ｍ塩化ナトリウム、ｐＨ８．０
）中の５％脱脂乳でブロックし、次に、室温において、１％ミルク／ＴＢＳ中の
第一抗体（１：４，０００倍希釈）で２時間培養した。０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０を含有する１％ミルク／ＴＢＳで３回、プレートを濯いだ後、室温におい
て２時間にわたって、１：４０００希釈の第二抗体で培養した。１％ミルク／Ｔ
ＢＳ／Ｔｗｅｅｎで３回、およびＴＢＳで３回、プレートを濯いだ。ｏ−フェニ
レンジアミンおよび過酸化水素を用いてインキュベートすることによって発色さ
せた。Ｕｌｔｒｏｓｐｅｃ３０００分光光度計（ＰｈａｒｍａｃｉａＢｉｏ
ｔｅｃｈ）によって４９２ｎｍにおいて吸収を読み取り、ＴＧ−１レベルをＡｂ
ｓ／ＤＮＡ蛍光として算出した。データの算出および統計的分析のために、少な
くとも３個の分離穴の平均±標準偏差を使用した。３重穴のＤＮＡ蛍光の任意ユ
ニット当たりのＴＧ−１に関する吸収±標準偏差として、数値を示した。結果を
対照に対する％として示した。

【００７３】得られた結果を表４にまとめる。

【００７４】

【表４】生物学的測定系における一般的な実験的バラツキにより、１０μＭのレスベラ
トロールは、実施例１における対照と有意な差異がなかったが、他の全ての濃度
は、ケラチノサイトのトランスグルタミナーゼ発現を有意に増加させ、従って、
レスベラトロールがケラチノサイト分化を増加させることが証明された。実験２
において、２μＭおよびそれ以上のレスベラトロールの全濃度が、ケラチノサイ
トの分化を有意に増加させた。

【００７５】実施例５この実施例は、レスベラトロールが、α−ヒドロキシ酸によって起こる皮膚の
炎症を減少させることを示すものである。

【００７６】レスベラトロールは既知のシクロオキシゲナーゼ阻害剤である。シクロオキシ
ゲナーゼの阻害は、アラキドン酸の、ＰＧＥ２を包含するプロスタグランジンの
ような前炎症物質（ｐｒｏ−ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ
）への変換を減少させる。シクロオキシゲナーゼの阻害が炎症を減少させること
が予期されるが、全てのシクロオキシゲナーゼ阻害剤が、αヒドロキシ酸のよう
な化粧成分に潜在的に伴う刺激を減少させるわけではない。

【００７７】実施例５Ａ刺激試験の方法４暴露パッチ試験：目的は、パッチ適用を繰り返した後に、種々の試験物質
によって生じる刺激のレベルを比較することであった。試験物質を、閉塞条件下
に皮膚と接触に維持した。パネリストの外部上腕を、適用部位として指定した。
包帯型の手当用品（Ｓｃａｎｐｏｒテープ）を使用して、パッチ（Ｗｅｂｒｉｌ
パッディングの１８ｍｍ直径ディスクを有する２５ｍｍＨｉｌｌＴｏｐＣ
ｈａｍｂｅｒ）を所定の位置に保持した。パネリストの両上腕を使用した。パッ
チを均等ランダム順序（ａｂａｌａｎｃｅｄｒａｎｄｏｍｏｒｄｅｒ）に
おいて適用した。

【００７８】パッチを、月曜日の午前９時に適用し、火曜日の午前９時に除去した（２４時
間暴露）。新たなパッチの組を、火曜日の午後３時に適用し、水曜日の午前９時
に除去した（１８時間暴露）。第三のパッチの組を、水曜日の午後３時に適用し
、木曜日の午前９時に除去した（１８時間暴露）。最後のパッチの組を、木曜日
の午後３時に適用し、金曜日の午前９時に除去した（１８時間暴露）。

【００７９】パッチを除去するごとに、その部位を温水で濯ぎ、叩いて乾燥させた。次に、
試験部位を外科用皮膚マーキングペンで印を付けて、評価および次のパッチ適用
のための位置を確保した。試験日の火曜日、水曜日、木曜日、および金曜日の午
後３時に、再パッチングの前に試験部位を評価した。

【００８０】中度の赤味、乾燥、および／または痒みのような皮膚刺激が予期される。試験
部位の腫れの可能性があった。評価時に、試験部位が中度の赤味または腫れを有
する場合は、その特定試験部位に再パッチを行わなかった。

【００８１】２人の訓練を受けた検査者によって、一定の採光の下で、それぞれの腕におけ
る試験部位を視覚的に格付けした。試験部位を、厳しさの程度において格付けし
た。初めの評価期間に反応を格付けする検査者が引き続いて、試験期間中、毎日
、その部位を格付けした。

【００８２】反応の格付けにおいて、最も厳しい反応を有する部位に、最も低い評価点を与
えた。二番目に厳しい反応を有する部位は、二番目に低い評価点を与えた。強制
的格付けは行わなかった。２つまたはそれ以上の部位が反応がないかまたは同じ
反応（部位間に差異がない）場合、それらの格付けの平均が与えられた。刺激の
程度の故にその部位が中止された場合は、その部位は、投与が中止された時点で
与えられた格付けを保持した。

【００８３】統計的分析パッチ処置からの格付け結果を、非母数統計法によって統計的に比較した。各
評価点においてＦｒｉｅｄｍａｎ’ｓＲａｎｋＳｕｍを使用し、パネリスト
がブロックとして役割を果たし（即ち、各パネリストが各試験処置で試験された
）、抗刺激剤を含有する試験物質を、ヒドロキシ酸だけを含有する対応する対照
と比較した。０．１０未満のｐ値は、統計的有意性を示すと考えられた。

【００８４】表５Ａに示す成分を含有する組成物を、刺激試験法を使用して試験した。２０
の対象を試験した。得られた結果を表５Ａにまとめる。格付け合計が大きいほど
、刺激が少ない。

【００８５】

【表５】

【００８６】

【表６】表５Ａの結果から、レスベラトロール（組成物３）が、組成物番号２（８％グ
リコール酸を含有する）によって誘発される刺激を、組成物番号２への初期暴露
後１日めにおいて有意に減少させたことが分かる。

【００８７】比較例５Ｂ表５Ｂに示す成分を含有する組成物を、実施例５Ａに記載の刺激試験法を使用
して試験した。２２の対象を試験した。得られた結果を表５Ｂにまとめる。格付
けの合計が大きいほど、刺激が少ない。

【００８８】

【表７】表５Ｂの結果から、既知の抗炎症成分であるイブプロフェン（組成物番号４）
が、８％グリコール酸を含有する配合（組成物番号２）の刺激を減少させなかっ
たことが分かる。

【００８９】比較例５Ｃ表５Ｃに示す成分を含有する組成物を、実施例５Ａに記載の刺激試験法を使用
して試験した。１９の対象を試験した。得られた結果を表５Ｃにまとめる。格付
けの合計が大きいほど、刺激が少ない。

【００９０】

【表８】表５Ｃの結果から、既知のシクロ−オキシゲナーゼ阻害剤であり抗炎症成分で
あるインドメタシン（組成物番号５）が、８％グリコールを含有する配合（組成
物番号２）の刺激を減少させなかったことが分かる。

【００９１】実施例６〜１１は、本発明のスキンケア組成物を例示するものである。該組成
物は、従来法によって製造することができる。それらは、化粧用途に好適である
。特に、該組成物は、シワのある、線のある、乾燥した、薄片状の、老化した、
および／または紫外線により損傷した皮膚に適用して、それらの外観および触感
を向上させるのに好適であり、ならびに、健康な皮膚に適用して、それらの低下
を予防しまたは遅らせるのに好適である。該組成物は特に、α−ヒドロキシ酸の
使用に伴う刺激、刺痛（ｓｔｉｎｇ）、または炎症を減少させるのに好適である
。

【００９２】実施例６この実施例は、新規組成物を組み込んだ高分散相油中水エマルジョンを例示す
るものである。

【００９３】

【表９】実施例７この実施例は、新規組成物を含有する水中油クリームを例示するものである。

【００９４】

【表１０】実施例８この実施例は、本発明の組成物を含有するアルコールローションを例示するも
のである。

【００９５】

【表１１】実施例９この実施例は、新規組成物を含有する他のアルコールローションを例示するも
のである。

【００９６】

【表１２】実施例１０この実施例は、本発明の組成物を含有するサンケアクリームを例示するもので
ある。

【００９７】

【表１３】実施例１１この実施例は、新規組み合わせを含有する非水性スキンケア組成物を例示する
ものである。

【００９８】

【表１４】

【手続補正書】特許協力条約第３４条補正の翻訳文提出書

【提出日】平成１２年１月２４日（２０００．１．２４）

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】特許請求の範囲

【補正方法】変更

【補正内容】

【特許請求の範囲】

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＧＷ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者バラツト，マリーアンアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07020、エツジウオーター、リバー・ロード・45、ユニリーバー・リサーチ・ユー・エス・インコーポレイテツド気付 (72)発明者ボスコ，キヤロル・アネツトアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07649、オラデル、セコンド・ストリート・428 (72)発明者ピライ，スリークマーアメリカ合衆国、ニユー・ジヤージー・ 07020、エツジウオーター、リバー・ロード・45、ユニリーバー・リサーチ・ユー・エス・インコーポレイテツド気付Ｆターム(参考） 4C083 AA112 AA122 AB362 AB442 AC022 AC072 AC082 AC102 AC122 AC182 AC252 AC301 AC302 AC312 AC342 AC422 AC471 AC472 AC542 AC852 AD152 AD162 AD172 AD352 AD492 AD591 AD592 AD662 CC02 CC04 CC05 DD22 DD23 DD27 DD33 EE06 EE07 EE12 EE13 EE16 EE17 FF01

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】０．００００２〜１０重量％の量のレスベラトロール、およ
び化粧的に許容される賦形剤を含んで成るスキンケア組成物。
【請求項２】０．００００２〜１０重量％の量のレスベラトロール、およ
び化粧的に許容される賦形剤を含んで成る組成物を皮膚に適用することを含んで
成る、フィトエストロゲンをヒトの皮膚に送達する化粧法。
【請求項３】請求項１に記載の組成物を皮膚に適用することを含んで成る
、シワのある、線のある、乾燥した、薄片状の、老化した、または光損傷した皮
膚の外観を向上させ、ならびに、皮膚の厚み、弾力性、柔軟性、およびふくらみ
を向上させる化粧法。
【請求項４】請求項１に記載の組成物を皮膚に適用することを含んで成る
、ヒトの皮膚におけるケラチノサイトの分化を増強させる方法。
【請求項５】請求項１に記載の組成物を皮膚に適用することを含んで成る
、ヒトの皮膚におけるケラチノサイトの増殖を阻害する方法。
【請求項６】（ａ）０．００００２〜１０重量％の量のレスベラトロール
；（ｂ）０．０１％〜２０％の量のヒドロキシ酸；および（ｃ）化粧的に許容される賦形剤；を含んで成るスキンケア組成物。
【請求項７】ヒドロキシ酸の量が２％〜１２％である請求項７に記載の組
成物。