JP2000509047A

JP2000509047A - ３―アルコキシピリジン―２―カルボキサミドエステル類、その製法および薬剤としてのその使用

Info

Publication number: JP2000509047A
Application number: JP09538479A
Authority: JP
Inventors: ヴアイトマン，クラウス; バーリングハウス，カール―ハインツ; チヤンク，ゲーオルク; ビツケル，マルテイン
Original assignee: ヘキスト・アクチエンゲゼルシヤフト
Priority date: 1996-04-30
Filing date: 1996-04-30
Publication date: 2000-07-18
Also published as: NO984878D0; EP0900202A1; NO984878L; AU5762896A; CA2253282A1; KR20000065090A; WO1997041103A1

Abstract

(57)【要約】式

Description

【発明の詳細な説明】３−アルコキシピリジン−２−カルボキサミドエステル類、その製法および薬剤としてのその使用本発明は、３−アルコキシピリジン−２−カルボキサミドエステル類、その製法およびコラーゲン生合成の阻害のための使用および線維症性疾患の治療用の薬剤としての使用に関する。酵素プロリルおよびリシルヒドロキシラーゼを阻害する化合物は、コラーゲンに特異的なヒドロキシル化反応に影響を及ぼすことによってコラーゲン生合成のきわめて選択的な阻害を引き起こす。その過程で、タンパク質に結合したプロリンまたはリシンは、酵素プロリルまたはリシルヒドロキシラーゼによってヒドロキシル化される。もしこの反応が阻害剤によって抑制されるならば、非機能性の、ヒドロキシル化不足のコラーゲン分子が結果的に生じて、これは、細胞によって細胞外隙に少量だけ放出されることができる。このヒドロキシル化不足のコラーゲンはさらに、コラーゲンマトリックスに組込まれることができず、非常に簡単にタンパク分解によって分解される。これらの作用の結果、細胞外に蓄積するコラーゲンの量は、全体で減少する。プロリルヒドロキシラーゼの阻害剤は、このため、コラーゲンの蓄積が臨床的状況に決定的に寄与している病気の治療に適する物質である。これらは、なかんずく、肺、肝臓および皮膚の線維症（強皮症および熱傷、外傷および外科的介入後の瘢痕）、ならびにアテローム性動脈硬化症も包含する。酵素プロリルヒドロキシラーゼがピリジン−2,4−および−2,5−ジカルボン酸によって効果的に阻害されることは、公知である[K．Majamaa外、Eur．J．Bioch em．138(1984)239−245]。しかしながら、細胞培養においては、これらの化合物は、非常に高い濃度においてのみ阻害剤として活性である [Tschank．G.外、Biochem．J．238（1987）625-633]。ピリジン-2,4(5)−ジカルボキシレート類のプロドラッグもまた、公知である。これらは、特許出願EP−A −0 590 520およびDE−A−42 38 506およびEP−A−0 562 512に記載されている。プロリル−４−ヒドロキシラーゼの阻害剤としてのＮ−オキサリルグリシン類は、J．Med．Chem．1992，35，2652−2658（Cunliffe外）およびEP−A−0 457 1 63から公知である。さらに、３−ヒドロキシピリジン−２−カルボン酸（グリシルエチルエステル）アミドは、J．Org．Chem．31、636−638(1966)に記載されている。このため、特にその全身的および／または局所的使用において特に高い生体内および／または試験管内活性によって識別される化合物を提供することが、目的であった。驚くべきことに、今回、式Ｉの３−アルコキシピリジン−２−カルボキサミドエステルが特に強い活性をもつコラーゲン生合成の阻害剤であることがわかった。本発明の化合物は、EP−A−0 650 960に記載された化合物から選択される。この欧州特許出願に述べられた化合物と比べて、これらは、特にそれらが線維症性疾患に対する全身的および／または局所的使用について特に高い生体内および試験管内活性によって識別される。これらの疾患には、例えば肺、肝臓、腎臓、心臓、眼および皮膚の線維症ならびにアテローム性動脈硬化症におけるもの、が包含される。式Ｉの化合物は、最も多様な細胞（たとえば正常なヒト皮膚線維芽細胞、ラットの肝臓からの一次脂肪摂取細胞、ラットの肝臓の上皮細胞および頭蓋冠の器官培養で）におけるコラーゲン生合成の有効な阻害に導く。これらは特に、コラーゲン生合成の阻害剤としての局所使用、抗線維症活性化合物としての局所使用および結合組織（コラーゲン）の増大した形成によって引き起こされる病気の種類における局所使用に適する。このように、式Ｉの化合物は、例えば、人体に関する外科的介入後の瘢痕の回避／減少のための局所使用ならびに眼疾の術後処置、例えば緑内障の術後処置、および特に肺における、放射線に誘発された線維症または化学療法によって誘発された線維症における局所使用に適している。本発明に従う化合物は、Ｂがカルボキシル基である式Ｉの相当するカルボン酸のエステルプロドラッグである。式Ｉの化合物は、生体内で（生体内で）および細胞培養において（試験管内で）開裂して、Ｂがカルボキシル基またはその塩である式Ｉの化合物となる。式Ｉの化合物の投与後に、これらは生体内および試験管内で観察されるべきコラーゲン生合成の阻害を引き起こし、Ｂがカルボキシル基またはその塩である式Ｉの化合物が形成されでいる。これらの化合物は、プロリル−４−ヒドロキシラーゼを阻害し、このためコラーゲン生合成の阻害に導く。本発明による化合物は、下記式Ｉに相当し、その生理学的に活性な塩を包含する。式中、 R¹、R²およびR³は、水素であり、 R⁴は、(C₁−C₆)−アルキルであり、Ａは、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢは、−CO₂Gであって、ここでＧは、アルコールGOHの基である。好ましい式Ｉの化合物は、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₆)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状(C₁−C₂₀)−アルキル基、または、分枝または非分枝または環状(C₂−C₂₀)−アルケニル基、相当する(C₂−C₂₀)−アルキニル基、相当する(C₄−C₂₀)−アルケニニル基またはレチニル基（ここでこれらの基は、各々の場合に１個以上の多重結合を有することができる）であるか、またはフェニルアルキル基であり、ここで上記の基は、特に、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、カルボキシル、(C₁−C₁₂)−アルキル、(C₃− C₈)−シクロアルキル、(C₅−C₈)−シクロアルケニル、(C₁−C₁₂)−アルコキシ、 (C₁−C₁₂)−アルコキシ−(C₁−C₁₂)−アルキル、(C₁−C₁₂)−アルコキシ−(C₁− C₁₂)−アルコキシ、フェニル−(C₁−C₄)−アルキルオキシ、(C₁−C₈)−ヒドロキシアルキル、(C₁−C₁₂)−アルキルカルボニルオキシ、(C₃−C₈)−シクロアルキルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシ、フェニル−(C₁−C₄)−アルキルカルボニルオキシより成る群から選択される１個以上の置換基を含む。好ましい式Ｉの化合物はさらに、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₄)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素原子はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状脂肪族(C₁−C₁₈)−アルキル基、（C₃−C₈) −シクロアルキル−(C₁−C₈)−アルキル基、ゲラニル、ファルネシルまたはレチニル基のような分枝または非分枝(C₂−C₁₈)−アルケニル基、または相当する(C₂ −C₁₈)−アルキニル基、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピルまたはフェニルブチル基であり、ここで上記の基は、ヒドロキシル、(C₁−C₄)−アルコキシ、 (C₁−C₆)−アルキルカルボニルオキシ、(C₃−C₈)−シクロアルキルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシまたはフェニル−(C₁−C₄)−アルキルカルボニルオキシより成る群から選ばれる１個の置換基を含む。特に好ましい式Ｉの化合物は、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₄)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素原子はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状脂肪族(C₁−C₁₈)−アルキル基、(C₃−C₈) −シクロアルキル−(C₁−C₄)−アルキル基、分枝または非分枝(C₂−C₁₈)−アルケニル基、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピルまたはフェニルブチル基である。特に好ましい式Ｉの化合物はさらに、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝(C₁−C₁₈)−アルキルまたは(C₂−C₁₈)−アルケニル基である。特に好ましい式Ｉの化合物はさらに、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝(C₁−C₁₈)−アルキルまたは(C₂−C₁₈)−アルケニル基である。特に、好ましい式Ｉの化合物は、下記の定義を有する化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する： R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基であり、Ｂが、−CO₂Gであって、ここでＧは、線状(C₁−C₁₈)−アルキル基である。特に好ましい式Ｉの化合物は、Ｇが線状(C₁−C₁₆)−アルキル基である化合物であり、その生理学的に活性な塩を包含する。本発明はさらに、式Ｉの化合物の塩を包含する。酸性試薬との塩形成は、ピリジンのＮ原子で実施することができる。使用される試薬は、例えば、トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、HCl、H₂ SO₄、H₃PO₄および酸性基を有する薬剤である。本発明は、特に種々の細胞における、コラーゲン生合成の阻害に使用するための式Ｉの化合物および生理学的に許容できる塩に関する。本発明は、生体内および試験管内でプロリル−４−ヒドロキシラーゼの阻害に使用するための式Ｉの化合物および生理学的に許容できる塩に関する。本発明はさらに、肺、肝臓、腎臓、心臓、眼および皮膚の線維症性疾患に使用するための式Ｉの化合物および生理学的に許容できる塩に関する。本化合物はまた、アテローム性動脈硬化症に使用することもできる。これに関して、全身および／または局所適用が使用される。特に本発明は、特にコラーゲン生合成の阻害剤として、抗線維症活性化合物として、および結合組織（コラーゲン）の増大した形成によって引き起こされる種類の病気において、局所使用するための式Ｉの化合物および生理学的に許容できる塩に関する。これらには、人体に関する外科的介入後の瘢痕の回避／減少のための使用、および眼の手術、例えば緑内障手術の術後処置における使用、および特に肺における、放射線で誘発された線維症または化学療法によって誘発された線維症における使用が包含される。結局、本発明は、薬剤として使用するための式Ｉの化合物に関する。特に本発明は、皮膚、肺および眼の線維症における、特に緑内障の術後処置のための、局所使用のための式Ｉの化合物に関する。本発明はさらに、式Ｉの化合物の製造方法に関する。Ａが−CH₂−基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、ＢがCO₂Gである式Ｉの化合物は、 i1）式II(R⁵＝H)のピリジン−２−カルボン酸を式IIIのアミノエステルまたはそれらの塩と反応させて式Ｉのアミドエステルを得るか；または i2）式II［R⁵＝(C₁−C₁₆−アルキル)のピリジン−２−カルボン酸エステルをアミノ分解の条件下で反応させて式Ｉの化合物を得るか；または ii）式IVの化合物をアルコールGOHでエステル化するか、または iii）式Ｖの化合物をR⁴X（ここでＸは、脱離基、特にハロゲン、−OSO₂Me、-OSO₂ フェニルなどである）でアルキル化することによって製造される。スキーム１アミド形成（反応i1）のための適当な工程は、ペプチド化学から公知のカルボニル活性化および縮合反応の方法である。カルボン酸活性化に使用する試薬は、塩化チオニル、塩化オキサリル、塩化ピバロイル、クロロギ酸エステル誘導体またはN,N'−カルボニルジイミダゾールのような当技術分野に習熟した人には公知の物質であることができる。式IIの化合物の活性化された誘導体は、製造後、現場で式IIIのアミド誘導体と反応させる。適当な縮合剤は、例えばN,N'−ジシクロヘキシルカルボジイミド／Ｎ−ヒドロキシ−1H−ベンゾトリアゾールおよびＮ−エチルモルホリンの組合せである。適当な溶媒は、ジクロロメタン、テトラクロロメタン、酢酸ブチル、酢酸エチル、トルエン、テトラヒドロフラン、ジメトキシエタン、1,4−ジオキサン、アセトニトリル、N,N−ジメチルホルムアミド、N,N−ジメチルアセトアミド、ジメチルスルホキシド、ニトロメタンおよび／またはピリジンである。本発明による式Ｉの化合物は、有用な薬理学的性質を有し、そして特に抗線維症活性を示す。抗線維症作用は、下記の動物モデルにおいて決定することができる： Unemori．E．N．外、J．Invest．Dermatol.，101：280−5（1993）の、皮下にインプラントされた浸透圧ミニポンプの周囲の結合組織カプセルの形成、 Boyle．E.、Mangan．F．R.，Br．J．Ep．Pathnol．61：351−60（1980）の、皮下にインプラントされた“コットンペレッド”またはポリビニルスポンジのコラーゲン含量；および Ward．H．E．外、Res.，136，15−21(1993)、およびSantana．A．外、Am．J． Respir．Cell．Mol．Biol．13：34−44（1995）の、放射線で誘発されたかまたは化学的に誘発された線維症後の肺のコラーゲン含量。細胞培養におけるプロピル−４−ヒドロキシラーゼの阻害：正常なヒト皮膚線維芽細胞（NHDF）、ラットの肝臓上皮細胞（参考文献１）およびこの肝臓からの脂肪摂取細胞（参考文献２）を物質試験の細胞モデルとして使用する。これを行うために、細胞を阻害剤の存在において培養する。同時に、今度新たに合成されるコラーゲンを、４−³H−Ｌ−プロリンおよび¹⁴ C−プロリンによって代謝的に標識付けする。次にコラーゲンのヒドロキシル化度に関する試験物質の効果を、Chojkier外の方法（参考文献３）に従って決定する。使用する標準物質は、2,2'−ジピリジルである。［１：Schrode．W.，Mec ke、D.，Gebhard．R.(1990)。門脈周囲の肝細胞における肝臓上皮細胞系との共培養によるグルタミン・シンセターゼの誘発(Induction of glutamine syntheta se in periportal hepatocytes by cocultivation with a liver epithelial ce ll line)。Eur．J．Cell．Biol．53：35−41、２：Blomhoff．R.，Berg T．(199 0)。ラットの肝臓の星状細胞の単離および培養(Isolation and cultivation of rat liver stellate cells)。Methods Enzymol．190：59−71および、３：Chojk ier．M.，Peterkofsky．B.，Bateman．J．(1980)。コラゲナーゼ消化物中のプロリンの[４−³H]：[¹⁴C]比の変化を測定することによるプロリンのヒドロキシル化の程度を測定するための新規方法（A new method for determining the exten t of proline hydroxylation by measuring changes in the ration of[４−³H] ：[¹⁴C]proline in collagenase digests）。Anal.Biochem．108：385−393］。 Biochem．J．(1994)300，525−300による試験管内での（鶏の胚の頭蓋冠における）プロリル−４−ヒドロキシラーゼの阻害：１．代謝性標識付け頭蓋冠を、受精後15日の鶏の胚から切り離して、ハンクス液最小必須培地イーグル［HMEM、BioWhittaker，米国メリーランド州ウォーカーズビル］中で、37℃ で３分間洗浄する。４個の頭蓋冠の各々を、２mMグルタミンおよび１μCi[lacun a][U−14C]プロリンおよび種々の濃度の阻害剤を加えた1.5mlのHMEMを用いてガラス容器中で37℃で2.5時間培養する。この試料容器を氷中に差し込むことによってこの培養を終了させる。培地を除去し、頭蓋冠を、１mlの２回蒸留したH₂Oで簡単に洗浄する。次にこの頭蓋冠を、３mlの0.5Ｍ酢酸および18μｇのフッ化フェニルメタンスルホニルで処理して、16時間抽出する。この抽出溶液を、４℃で0.5Ｍ酢酸に対して透析して遊離の［U−14C］プロリンを除去し、そしてアリコートに分けて凍結乾燥する。２．ヒドロキシプロリン−分析凍結乾燥した試料のアリコートを、２mlの６Ｎ HClに溶解させて、105℃で24 時間加水分解する。次に塩酸を蒸発させる。残留物を300μｌの２回蒸留したH₂O 中に再懸濁させて、エッペンドルフ容器に移し、再び乾燥させる。残留する塩酸塩を、60μｌのエタノール／H₂O／トリエチルアミン２：２：１(v：v：v)[lacun a]に溶解させることによって中和し、乾燥を繰り返す。次にアミノ酸を、室温で 20分間、エタノール／トリエチルアミン／フェニルイソチオシアナート／H₂０７：１：１：１（v：v：v：v）の溶液中で誘導体化させ、再乾燥させる。HPLCを用いる分析のために、この試料を150μlのリン酸塩緩衝剤［５mM Na₂HPO₄、pH7. 4／アセトニトリル95：５(v：v)］に溶解させ、10,000ｇで５分間遠心分離する。50μｌを分析のために使用する。HPLCクロマトグラフィーは、下記の勾配系を使用して、C18逆相カラムウルトラスフェアーODS ３μｍ、4.6nim×7.5cm（ベックマン）上で50℃で実施する：時間緩衝剤Ａ緩衝剤Ｂ０分 100％０〜９分 100〜90％０〜10％９〜11分 90〜０％ 10−100％ 11〜12分０％ 100％ 12〜14分０〜100％ 100〜０％ 14〜19分 100％溶液Ａ：70mM 酢酸Na pH6.14／0.1％アセトニトリル溶液Ｂ：アセトニトリル／メタノール／水45：15：40（v：v：v）３．SDS−ポリアクリルアミド一ゲル電気泳動１.からの凍結乾燥させた試料のアリコートを、SDS−ポリアクリルアミド−ゲル電気泳動のために、10mMトリス／HCl、pH８／１mM EDTA／１％SDSおよび５％メルカプトエタノールを用いて溶解させ、95℃で５分間変性させる。電気泳動を直線勾配ゲル（５−15％）上で実施する。メタノール／氷酢酸／水３：１：６（ v：v：v）中で固定後、ゲルを乾燥させ、−70℃でコダックX−Oマット・フィルムの露光に使用する。以下に、EP−A−0 650 960からの化合物と比較した本発明による化合物の驚くべき利点を、ラットの肝臓細胞におけるプロリル−４−ヒドロキシラーゼ（コラーゲン生合成）の阻害による比較実験によって具体的に示す。この比較は、選択発明である本発明による化合物が、EP−A−0 650 960の化合物と比較して、驚くべき低濃度（≦10μｍ、実験モデルに依る）でさえ高い阻害率（−50％）を示すことを示している。式Ｉの化合物は、場合により許容できる製剤用賦形剤とともに、これらを含有する医薬製剤の形態で薬として使用することができる。本化合物は、例えば、これらの化合物を、例えば水、アラビアゴム、ゼラチン、乳糖、澱粉、ステアリン酸マグネシウム、滑石、植物油、ポリアルキレングリコール、黄色ワセリンなどのような腸内、経皮または非経口投与または吸入による投与に適する製剤用の有機または無機賦形剤との混合物として含有する医薬製剤の形態で、医薬として使用することができる。この目的のためには、これらは、0.1ないし25mg／kg／日、好ましくは１ないし５mg／kg／日、の用量で経口的に、または0.01ないし５mg／kg／日、好ましくは0.01ないし2.5mg／kg／日、特に0.5ないし1.0mg／kg／日、の用量で非経口的に、投与することができる。重篤な場合には、用量を増加させることもできる。しかしながら、多くの場合に、比較的低い用量で十分である。これらの詳細は、体重ほぼ75kgの成人に関するものである。３−メトキシピリジン−２−カルボン酸は、E．V．Brown、M．B．ShambhuによりJ．Org．Chem．36，2002（1971）から公知である(式II；R¹−R³＝H、R⁴＝Me、 R⁵＝Hと比較されたい)。さらに、３−メトキシピリジン−２−カルボン酸メチル（式II、R⁵＝CH₃と比較されたい）は、Acta Chem．Scand．23、1791(1969)から公知である。下記の実施例で出発物質として使用した３−メトキシピリジン−２−カルボン酸は、マルトールから得た４−クロロ−３−メトキシ−２−メチルピリジンから出発して得た（EP−A−0 208 452およびEP−A−0 304 732と比較されたい）。下記の実施例では、本発明による式Ｉの化合物は、置換されたピリジン−２− カルボン酸（グリシルエステル）アミドと表記する。この表記法は、置換されたピリジン−２−カルボン酸Ｎ−((アルコキシカルボニル)メチル)アミドを意味するものである。あるいはまた、置換されたＮ−(ピリジル−２−カルボニル)グリシンとしての分類も可能である。実施例１Ｎ−(((１−ブチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド a）３−メトキシピリジン−２−カルボン酸塩酸塩 a1）４−クロロ−３−メトキシ−２−メチルピリジン１−オキシド 100mlのオキシ塩化リン中の11.2ｇ（80.5ミリモル）の３−メトキシ−２−メチル−４(1H)−ピリドンを、10時間還流下に加熱した。混合物を続いて濃縮し、２mlを30mlのトルエンと毎回混合し、再濃縮し、そして残留物を150mlの水に溶解させ、K₂CO₃を用いてpH11に調整してジクロロメタンで抽した。有機相を水で洗浄し、乾燥させ、溶媒を除去した。この淡褐色油(９ｇ)から、標準的な条件下でジクロロメタン中のｍ−クロロ過安息香酸を用いて８ｇの生成物を得た。融点 88〜89℃（石油エーテルから）。 a2）４−クロロ−２−ヒドロキシメチル−３−メトキシピリジン 30ｇ（173ミリモル）の４−クロロ−３−メトキシ−２−メチルピリジンＮ− オキシドを100mlの氷酢酸に溶解させ、80℃で撹拌しながら滴加して150mlの無水酢酸と混合して、混合物を110℃で２時間撹拌した。次に混合物を80℃まで冷まして、200mlのメタノールを滴加し、混合物を加熱して15分間沸騰させ、そして冷却後に減圧濃縮し、残留物をメタノールに溶解させて、300mlの1.5Ｎ水酸化ナトリウムのメタノール溶液中に注加し、20℃で30分間撹拌し、そして減圧濃縮した。残留物を水に溶解させて、ジクロロメタンで３回抽出し、有機相を乾燥させ、濃縮した。残留物を石油エーテルで結晶させた。これにより23ｇの生成物を得た。融点64〜66℃。 a3）４−クロロ−３−メトキシピリジン−２−カルボン酸 20℃で、52.2g（0.3モル）の上記アルコールを、900mlの水に溶解させた24ｇのKOHに加えて、混合物を、70ｇ（0.44モル）の過マンガン酸カリウムと１度に少量づつ、各場合に変色が起こるまで50〜60℃で混合した。50℃で１時間撹拌した後、この熱混合物を吸引濾過し、濾過ケークを湯で３回すすぎ、濾液を300mlまで減圧濃縮し、冷却しながら濃HClを用いてpH１に調整した。吸引濾過し、乾燥させると、50ｇの生成物が得られた。融点121℃（分解せず）。 a4）500mlのメタノール／テトラヒドロフラン（１：１）中の29ｇ（0.15モル）の上記４−クロロピリジンカルボン酸を、水素化装置内でPd／C（10％）を用いて水素化した。3.1lの水素が吸収された後、触媒を吸引濾過によって除去し、濾液を濃縮した。結晶質の残留物を酢酸エチルで処理し、吸引濾過して取り、乾燥させた；収量29ｇ、融点170℃（分解を伴う）。 b）3.8ｇ（20ミリモル）の３−メトキシピリジン−２−カルボン酸塩酸塩を、50 0mlの無水ジクロロメタン中に懸濁させ、20℃で撹拌しながら、6.1ｇ（20ミリモル）のグリシン１−ブチルエステルトシレート（水分離器上のグリシン、１− ブタノール、ｐ−トルエンスルホン酸とトルエンから製造された）と混合し、次に7.5ml（60ミリモル）のＮ−エチルモルホリン、３ｇ（22.5ミリモル）の１− ヒドロキシ−1H−ベンゾトリアゾールおよび8.5ｇ（20ミリモル）のＮ−シクロヘキシル−N'−（２−モルホリノエチル）カルボジイミドメト−ｐ−トルエンスルホネート（CMC）と混合し、20℃で24時間撹拌した。次に未溶解粒子を吸引濾過して取り、濾液を重炭酸Na水溶液、１Ｎ塩酸水溶液そして水で順次抽出した。有機相を乾燥させ、減圧濃縮し、油状残留物を引っ掻きによって結晶させた。これにより1.76ｇの無色の標題化合物を得た。融点60〜62℃。実施例２Ｎ−(((１−オクチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２− カルボキサミド 2.5ｇ（13ミリモル）の３−メトキシピリジン−２−カルボン酸塩酸塩、5.5ml （45ミリモル）のＮ−エチルモルホリン、２ｇ（15ミリモル）の１−ヒドロキシ −1H−ベンゾトリアゾール、4.7ｇ（13ミリモル）のグリシンオクチルエステルトシレート（水分離器上でトルエンを用いてグリシン、１−オクタノールおよびｐ−トルエンスルホン酸から製造した）および6.3ｇ（15ミリモル）のCMC（実施例１を参照）を、350の無水ジクロロメタン中で48時間撹拌した。実施例１の方法によって仕上げた後、粗生成物をジクロロメタン（溶離中に2.5％までのメタノールを添加した）を使用するシリカゲル上のクロマトグラフにかけた。これにより3.6ｇの無色油状の標題化合物を得た。¹H NMR（CDCl₃）：δ＝4.26（ｄ、 CH₂−グリシン）。実施例３Ｎ−(((１−ドデシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２− カルボキサミド実施例１の方法によって、400mlの無水ジクロロメタン中の2.8ｇ（15ミリモル）の３−メトキシピリジン−２−カルボン酸塩酸塩を、20℃で、6.2ｇ（15ミリモル）のグリシン１−ドデシルエステルトシレート［水分離器上で38ｇ（0.5モル）のグリシン、93.2ｇ（0.5モル）の１−ドデカノールおよび115ｇ（0.6モル）のｐ−トルエンスルホン酸から製造し；140ｇの生成物がジエチルエーテルで結晶した、融点約106℃、80℃で焼結］、8.2ml（60ミリモル）のＮ−エチルモルホリン、２ｇ（15ミリモル）の１−ヒドロキシ−1H−ベンゾトリアゾールおよび 6.3ｇ（15ミリモル）のCMCとともに24時間撹拌した。強いエマルジョン形成のため、実施例１と同様に仕上げるためにジクロロメタンを減圧蒸留して除去し、残留物をジエチルエーテルに溶解させた。有機相を、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧濃縮し、得られた4.7ｇの黄色油を次に、酢酸エチルを使用するシリカゲル上のクロマトグラフにかけた。これによって４ｇの淡黄色油を得たが、このものはガラスロッドで引っ掻いた後２日間放置した後結晶化した。3.6ｇの無色の標題化合物（融点47〜49℃）を単離した。実施例４Ｎ−(((１−ペンチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２ −カルボキサミド。実施例５Ｎ−(((１−ヘキシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２ −カルボキサミド。実施例６Ｎ−(((１−ヘプチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２ −カルボキサミド。実施例７Ｎ−(((１−ノニルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２− カルボキサミド。実施例８Ｎ−(((１−デシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２− カルボキサミド。実施例９Ｎ−(((１−テトラデシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン −２−カルボキサミド。実施例10 Ｎ−(((１−オクタデシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン −２−カルボキサミド。実施例11 Ｎ−(((１−プロピルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２ −カルボキサミド。実施例12 Ｎ−(((２−プロピルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２ −カルボキサミド。実施例13 Ｎ−(((１−トリデシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン− ２−カルボキサミド。実施例14 Ｎ−(((１−ヘキサデシルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン− ２−カルボキサミド 300mlのジクロロメタン中の5.7ｇ（30ミリモル）の４−クロロ−３−メトキシピリジン−２−カルボン酸および14.2ｇ（30ミリモル）のグリシンヘキサデシルエステルトシレート(融点約90℃、水分離器上でグリシン、１−ヘキサデカノール、ｐ−トルエンスルホン酸からトルエンを用いて製造した)を、実施例１の方法によって、7.7（60ミリモル）のＮ−エチルモルホリン、4.5ｇ（33ミリモル）の１−ヒドロキシ−1H−ベンゾトリアゾールおよび12.8ｇ（30ミリモル）のＮ− シクロヘキシル−N'−（２−モルホリノエチル）カルボジイミドメト−ｐ−トルエンスルホネート（CMC）と混合し、24時間撹拌した。その後未溶解粒子を吸引濾過して除去し、濾液を重炭酸Na水溶液、水そして塩酸水溶液で抽出し、有機相を濃縮して、残留物（14ｇ）を500mlのテトラヒドロフラン／メタノール（１：１）に溶解させ、Pd／C（10％）と混合して、水素化装置内で水素化した。水素の吸収が終わった後、触媒を吸引濾過して除去し、濾液を濃縮して、残留物を酢酸エチルを使用するシリカゲル上のクロマトグラフにかけた。適当な分画を濃縮し、残留物をジイソプロピルエーテルを用いて結晶化させた。これにより2.1ｇの標題化合物を無色の物質として得た。融点63〜65℃。実施例15 Ｎ−((エチルオキシカルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド塩酸塩 a）Ｎ−((エチルオキシカルボニル)メチル)−４−クロロ−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド製造のために、4.7ｇ（25ミリモル）の４−クロロ−３−メトキシピリジン− ２−カルボン酸を200mlの無水ジクロロメタン中に懸濁させて、20℃で撹拌しながら連続的に3.5ｇ（25ミリモル）のグリシンエチルエステル塩酸塩、6.4ml（50 ミリモル）のＮ−エチルモルホリン、3.8ｇ（28ミリモル）の１−ヒドロキシ-(1 H)−ベンゾトリアゾールおよび5.15ｇ（25ミリモル）のN,N'−ジシクロヘキシルカルボジイミドと混合し、20℃で20時間撹拌した。次いで未溶解粒子を濾過して除去し、有機相を飽和炭酸ナトリウム水溶液とともに震盪し、乾燥し、減圧濃縮した。残留物（６ｇの油）を酢酸エチルを使用するシリカゲル上のクロマトグラフにかけて、5.4ｇの油状生成物を得た。 B）上記の物質を水素化装置内でPd／C（10％）を用いて水素化することによって標題化合物を得た。融点141〜142℃（ガスの発生を伴う、ジエチルエーテルから）。実施例16 Ｎ−(((２−ノニルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミドラセミ化合物 2.5ｇ（10ミリモル）のＮ−（カルボキシメチル）−３−メトキシピリジン− ２−カルボキサミド塩酸塩（融点157℃、ガスの発生を伴う）を100mlの無水テトラヒドロフラン中に懸濁させて、1.6ml（12ミリモル）のトリエチルアミンと混合し、次に少量のテトラヒドロフランに溶解させた2.4ｇの塩化ピバロイルに撹拌しながら滴加してこれと混合した(温度が35〜40℃まで上昇する)。30 分後に、この混合物を減圧濃縮し、赤みがかった残留物を100mlの無水テトラヒドロフランに溶解させて、1.6mlのトリエチルアミンと混合した後、この混合物を20℃で、２−ノナノール中のNa 2−ノナノラートの溶液［30mlの２−ノナノールおよび0.8ｇ（20ミリモル）のNaHから製造した］に加えた。１時間後に、混合物を減圧濃縮して、残留物をジクロロメタンと混合し、２Ｎ塩化アンモニウム水溶液で抽出した。有機相を乾燥し、減圧濃縮して、残留物（９ｇ）を酢酸エチルを使用するシリカゲル上のクロマトグラフにかけた。これによって1.1ｇの油状で無色の標題化合物を得た。¹ H NMR（DMSO）：δ＝3.95（ｄ、CH₂−グリシン）。実施例17 Ｎ−(((4−ヘプチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２− カルボキサミド 2.5ｇ（10ミリモル）のＮ−（カルボキシメチル）−３−メトキシピリジン− ２−カルボキサミド塩酸塩を実施例16におけるように処理した後、20℃で、140m lの４−ヘプタノール中のNa ４−ヘプタノラートの溶液［140mlの４−ヘプタノールおよび0.6ｇ（25ミリモル）のナトリウムから製造した、超音波浴］と混合した。30分後に、混合物を１時間70ないし80℃に加熱し、冷却後に減圧濃縮して、残留物を水に溶解し、ジクロロメタンで抽出した。有機相を減圧濃縮して、油ポンプで乾燥した。油状粗生成物がほぼ15時間後に結晶化した。融点75〜78℃。実施例18 Ｎ−(((３−ペンチルオキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド。実施例19 Ｎ−(((１−（シス−９−オクタデセニル）オキシ)カルボニル)メチル)−３− メトキシピリジン−２−カルボキサミド。実施例20 Ｎ−(((１−（トランス−３−ヘキセニル）オキシ)カルボニル)メチル)−３− メトキシピリジン−２−カルボキサミド。実施例21 Ｎ−(((１−（３−メチルブヂル）オキシ)カルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド。実施例22 Ｎ−((メチルオキシカルボニル)メチル)−３−メトキシピリジン−２−カルボキサミド。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 43/00 Ａ６１Ｋ 31/00 ６４３ＤＡ６１Ｋ 31/44 31/44 (72)発明者チヤンク，ゲーオルクドイツ連邦共和国デー―55270クライン― ヴインテルンハイム．パリーザーシユトラーセ30 (72)発明者ビツケル，マルテインドイツ連邦共和国デー―61348バートホムブルク．ミツテルシユテツターヴエーク３

Claims

【特許請求の範囲】１．下記式Ｉを有する化合物およびその生理学的に活性な塩。式中、 R¹、R²およびR³は、水素であり、 R⁴は、(C₁−C₆)−アルキルであり、Ａは、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢは、−CO₂Gであって、ここでＧは、アルコールGOHの基である。２．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₆)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状(C₁−C₂₀)−アルキル基、または、分枝または非分枝または環状(C₂−C₂₀)−アルケニル基、相当する(C₂-C₂₀)−アルキニル基、相当する(C₄−C₂₀)−アルケニニル基またはレチニル基（ここでこれらの基は、各々の場合に１個以上の多重結合を有することができる）であるか、またはフェニルアルキル基であり、ここで上記の基は、特に、ヒドロキシル、ハロゲン、シアノ、トリフルオロメチル、カルボキシル、(C₁−C₁₂)−アルキル、(C₃ −C₈)−シクロアルキル、(C₅−C₈) −シクロアルケニル、(C₁−C₁₂)−アルコキシ、(C₁−C₁₂)−アルコキシ−(C₁−C₁₂ )−アルキル、(C₁−C₁₂)−アルコキシ−(C₁−C₁₂)−アルコキシ、フェニル−( C₁−C₄)−アルキルオキシ、(C₁−C₈)−ヒドロキシアルキル、(C₁−C₁₂)−アルキルカルボニルオキシ、(C₃−C₈)−シクロアルキルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシ、フェニル−(C₁−C₄)−アルキルカルボニルオキシより成る群から選択される１以上の置換基を含むで表わされる請求項１に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。３．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₄)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素原子はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状脂肪族(C₁−C₁₈)−アルキル基、(C₃−C₈ )−シクロアルキル−(C₁−C₈)−アルキル基、ゲラニル、ファルネシルまたはレチニル基のような分枝または非分枝(C₂−C₁₈)−アルケニル基、または相当する( C₂−C₁₈)−アルキニル基、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピルまたはフェニルブチル基であり、ここで上記の基は、ヒドロキシル、(C₁−C₄)−アルコキシ、(C₁−C₆)−アルキルカルボニルオキシ、(C₃−C₈)−シクロアルキルカルボニルオキシ、ベンゾイルオキシまたはフェニル−(C₁−C₄)−アルキルカルボニルオキシより成る群からの１の置換基を含むで表わされる請求項１または２に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。４．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、(C₁−C₄)−アルキルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素原子はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝または環状脂肪族(C₁−C₁₈)−アルキル基、(C₃−C₈ )−シクロアルキル−(C₁−C₄)−アルキル基、分枝または非分枝(C₂−C₁₈)−アルケニル基、ベンジル、フェネチル、フェニルプロピルまたはフェニルブチル基であるで表わされる請求項１〜３のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。５．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基（ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝(C₁−C₁₈)−アルキルまたは(C₂−C₁₈)−アルケニル基であるで表わされる請求項１〜４のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。６．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基であり、そしてＢが、−CO₂Gであって、ここでＧは、分枝または非分枝(C₁−C₁₈)−アルキルまたは(C₂−C₁₈)−アルケニル基であるで表わされる請求項１〜５のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。７．R¹、R²およびR³が、水素であり、 R⁴が、メチルであり、Ａが、−CH₂基であり、Ｂが、−CO₂Gであって、ここでＧは、線状(C₁−C₁₈)−アルキル基であるで表わされる請求項１〜６のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物およびその生理学的に活性な塩。８．i1）式II(R⁵＝H)のピリジン−２−カルボン酸を式IIIのアミノエステルまたはそれらの塩と反応させて式Ｉのアミドエステルを得るか；または i2）式II［R⁵＝(C₁−C₁₆)−アルキル）］のピリジン−２−カルボン酸エステルをアミノ分解の条件下で反応させて式Ｉの化合物を得るか；または ii）式IVの化合物をアルコールGOHでエステル化するか；または iii）式Ｖの化合物をR⁴X（ここでＸは、脱離基、特にハロゲン、−OSO₂Me、 −OSO₂フェニルなどである）でアルキル化することより成る、Ａが−CH₂基〔ここで、１個の水素はメチル基によって置換されていてもよい）であり、そしてＢがCO₅Gである、請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物を製造する方法。９．生体内でプロリル−４−ヒドロキシラーゼを阻害するための請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 10．コラーゲン生合成を阻害するための請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 11．病気になったヒトの器官における結合組織（コラーゲン）の蓄積（線維症）を回避する／減少させるための請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 12．線維症性疾患に使用するための請求項１〜７のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 13．肺、肝臓、腎臓、心臓、眼および皮膚の線維症性疾患、ならびにアテローム性動脈硬化症に使用するための請求項12に記載の式Ｉの化合物。 14．使用を局所的および／または全身的に行う、請求項12または13に記載の式Ｉの化合物。 15．人体に関する外科的介入後の瘢痕を回避する／減少させるために局所使用するための請求項14に記載の式Ｉの化合物。 16．皮膚における結合組織の増大した形成（線維症）の場合に局所使用するための請求項９〜14のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 17．肺における結合組織の増大した形成（線維症）の場合に局所使用する（吸入による）ための請求項９〜14のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 18．眼における結合組織の増大した形成（線維症）の場合に局所使用するための請求項９〜14のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 19．緑内障の術後処置のために眼において局所使用するための請求項９〜14のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 20．放射線で誘発された線維症または化学療法によって誘発された線維症、特に肺の線維症において局所使用するための請求項９〜14のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物。 21．請求項１〜８のいずれか１項に記載の式Ｉの化合物の１種以上を含有する薬剤。 22．プロリル−４−ヒドロキシラーゼを阻害するための、および線維症性疾患における本化合物の使用。