FR2963563A1

FR2963563A1 - Composition pharmaceutique d'association et son utilisation dans des procedes pour traiter et prevenir les maladies infectieuses

Info

Publication number: FR2963563A1
Application number: FR1156483A
Authority: FR
Inventors: Oleg Iliich Epshtein; Sergey Alexandrovich Tarasov
Original assignee: Individual
Current assignee: Individual
Priority date: 2010-08-06
Filing date: 2011-07-15
Publication date: 2012-02-10
Also published as: MX2013001451A; WO2012017328A3; AU2011287292B2; GB2503066B8; NZ606993A; MX368313B; IL224545A; EA030513B1; US20150023972A1; US20130045237A1; KR20140012021A; EP2601219A2; SG187732A1; DE112011102640T5; GB201303867D0; GB2503066A8; EA201300135A1; CN103154030A; JP2013537532A; CZ2013159A3

Abstract

La présente invention concerne une composition pharmaceutique d'association comprenant a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur, et des procédés de traitement et de prévention des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA.

Description

COMPOSITION PHARMACEUTIQUE D'ASSOCIATION ET SON UTILISATION DANS DES PROCEDES POUR TRAITER ET PREVENIR LES MALADIES INFECTIEUSES

DOMAINE La présente invention concerne une composition pharmaceutique et son utilisation dans un procédé pour traiter et prévenir les maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies, et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA.

ARRIERE-PLAN L'invention concerne le domaine de la médecine et peut être utilisée pour le traitement et la prévention des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies, et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA, incluant les infections bactériennes et les infections virales comme la grippe, l'hépatite et les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA. Le traitement des maladies virales basé sur des doses ultra-basses d'anticorps dirigés contre un interféron est connu dans la technique (RU 2192888 Cl, A61K39/395, 11/20/2002). Cependant, le produit médical donné peut ne pas être suffisamment efficace pour le traitement des maladies associées avec le VIH.

L'effet thérapeutique d'une forme extrêmement diluée (ou forme ultra- basse) d'anticorps potentialisée par la technologie homéopathique (forme activée- potentialisée) a été découvert par le Dr. Oleg 1. Epshtein. Par exemple, le brevet US n° 7 582 294 décrit un médicament pour traiter l'hyperplasie prostatique bénigne ou la prostatite par administration d'une forme activée par voie homéopathique d'anticorps dirigés contre l'antigène prostatique spécifique (PSA).

On a montré que des doses ultra-basses d'anticorps dirigés contre l'interféron gamma sont utiles dans le traitement et la prophylaxie du traitement des maladies d'étiologie virale. Voir le brevet US n° 7 572 441. La présente invention concerne une composition pharmaceutique et son utilisation dans des procédés de traitement et de prévention des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies, et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA, causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA. La solution au problème existant est présentée sous forme d'une composition pharmaceutique d'association pour le traitement et la prophylaxie (prévention) des maladies infectieuses, qui comprend a) une forme activée- potentialisée d'anticorps dirigés contre une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'anticorps dirigés contre un récepteur. RESUME Dans un aspect, l'invention fournit une composition pharmaceutique d'association comprenant a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur. Dans un mode de réalisation, la composition pharmaceutique comprend en outre un support solide, où lesdites formes activées-potentialisées d'anticorps imprègnent ledit support solide. Dans une variante, la composition pharmaceutique est sous forme d'un comprimé. De préférence, la composition pharmaceutique incluant lesdites formes activées-potentialisées d'anticorps est sous forme d'un mélange de dilutions 2963563 homéopathiques C12, C30 et C200. II est spécifiquement envisagé que ledit mélange de dilutions homéopathiques C12, C30 et C200 imprègne un support solide. Les formes activées-potentialisées desdits anticorps peuvent être des 5 formes activées-potentialisées d'un anticorps monoclonal, polyclonal ou naturel. Il est spécifiquement envisagé que la forme activée-potentialisée desdits anticorps soit une forme activée-potentialisée d'un anticorps polyclonal. L'invention fournit des formes activées-potentialisées d'anticorps dirigés contre un ou des antigènes ayant les séquences décrites dans la description et revendiquées dans les 10 revendications annexées. Dans une variante, la composition pharmaceutique inclut des formes activées-potentialisées d'anticorps préparées par dilutions centésimales successives couplées avec une agitation de chaque dilution. Une agitation verticale est spécifiquement envisagée. 15 Dans un autre aspect, l'invention fournit une composition pharmaceutique d'association destinée à être utilisée dans un procédé pour traiter et prévenir les maladies infectieuses, ladite composition comprenant a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur. De 20 préférence, les formes activées-potentialisées d'anticorps sont administrées sous forme d'une composition pharmaceutique. Dans un mode de réalisation, la composition pharmaceutique est administrée sous forme d'une forme galénique orale solide qui comprend un support pharmaceutiquement acceptable et une forme activée-potentialisée d'un 25 anticorps dirigé contre au moins une cytokine et une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur, lesdites formes activées-potentialisées imprégnant ledit support. Dans une variante, ladite forme galénique orale solide est un comprimé. Des variantes et des modes de réalisation sont fournis. 30 Selon l'aspect de l'invention, la composition pharmaceutique peut être administrée dans une à trois formes galéniques unitaires, chacune des formes 4 galéniques étant administrée d'une fois par jour à six fois par jour. Dans une variante, la composition pharmaceutique est administrée deux fois par jour, chaque administration consistant en deux formes galéniques orales. Dans une variante, la composition pharmaceutique est administrée dans une à deux formes galéniques unitaires, chacune des formes galéniques étant administrée deux fois par jour. Dans une variante, la composition pharmaceutique est administrée dans une à deux formes galéniques unitaires, chacune des formes galéniques étant administrée quatre fois par jour. Dans un autre aspect, l'invention fournit un procédé pour produire une composition pharmaceutique comme décrit ci-dessus et dans les revendications annexées, ledit procédé comprenant les étapes de fourniture de a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur, préparées chacune par dilutions répétées consécutives et de multiples agitations de chaque solution obtenue selon la technologie homéopathique, puis combinaison des solutions potentialisées par mélange de celles-ci, ou, à titre d'alternative, imprégnation d'une masse de support avec ladite solution combinée ou avec les solutions séparément.

DESCRIPTION DETAILLEE L'invention est définie en référence aux revendications annexées. Concernant les revendications, le glossaire qui suit fournit les définitions pertinentes. Le terme "anticorps" tel qu'il est utilisé ici est destiné à désigner une immunoglobuline qui se lie spécifiquement à, et est donc définie comme étant complémentaire de, une organisation spatiale et polaire particulière d'une autre molécule. Les anticorps tels que cités dans les revendications peuvent inclure une immunoglobuline complète ou un fragment de celle-ci, peuvent être naturels, polyclonaux ou monoclonaux, et peuvent inclure différentes classes et isotypes, comme IgA, IgD, IgE, IgG1, IgG2a, IgG2b et IgG3, IgM, etc. Leurs fragments peuvent inclure Fab, Fv et F(ab')2r Fab', et analogues. "Anticorps" au singulier inclut « anticorps » au pluriel.

Le terme "forme activée-potentialisée" ou "forme potentialisée" respectivement, concernant les anticorps cités ici est utilisé pour désigner un produit de potentialisation homéopathique d'une quelconque solution initiale d'anticorps. "Potentialisation homéopathique" désigne l'utilisation de procédés d'homéopathie pour conférer une activité homéopathique à une solution initiale de substance pertinente. Bien qu'elle ne soit pas ainsi limitée, la « potentialisation homéopathique » peut impliquer, par exemple, des dilutions consécutives répétées combinées avec un traitement externe, en particulier une agitation (mécanique) verticale. En d'autres termes, une solution initiale d'anticorps est soumise à des dilutions répétées consécutives et de multiples agitations verticales de chaque solution obtenue conformément à la technologie homéopathique. La concentration préférée de la solution initiale d'anticorps dans le solvant, de préférence l'eau ou un mélange eau-alcool éthylique, va d'environ 0,5 à environ 5,0 mg/ml. Le processus préféré pour préparer chaque composant, c'est-à-dire la solution d'anticorps, est l'utilisation du mélange de trois dilutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de la solution de matrice primaire (teinture mère) d'anticorps diluée 10012, 10030 et 100200 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales (C12, C30, et C200) ou l'utilisation du mélange de trois dilutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de la solution de matrice primaire d'anticorps diluée 10012, 10030 et 10050 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales (C12, C30 et C50). Des exemples de potentialisation homéopathique sont décrite dans les brevets U.S. n°. 7 572 441 et 7 582 294. Tandis que le terme "forme activée-potentialisée" est utilisé dans les revendications, le terme "doses ultra-basses" est utilisé dans les exemples. Le terme "doses ultra-basses" est devenu un terme technique dans le domaine technique créé par l'étude et l'utilisation d'une forme de substance diluée et potentialisée par voie homéopathique. Le terme « dose ultra-basse » ou « doses ultra-basses » est considéré comme soutenant totalement et principalement synonyme du terme forme « activée-potentialisée » utilisé dans les revendications.

En d'autres termes, un anticorps est dans la forme « activée-potentialisée » ou « potentialisée » quand trois facteurs sont présents. Tout d'abord, la forme « activée-potentialisée » de l'anticorps est un produit d'un procédé de préparation bien accepté dans la technique homéopathique. Deuxièmement, la forme « activée-potentialisée » de l'anticorps doit avoir une activité biologique déterminée par des procédés bien acceptés en pharmacologie moderne. Et troisièmement, l'activité biologique présentée par la forme « activée potentialisée » de l'anticorps ne peut pas être expliquée par la présence de la forme moléculaire de l'anticorps dans le produit final du processus homéopathique. Par exemple, la forme activée potentialisée d'anticorps peut être préparée en soumettant un anticorps isolé initial sous une forme moléculaire à de multiples dilutions consécutives couplées avec un impact externe, comme une agitation mécanique. Le traitement externe au cours de la réduction de la concentration peut aussi être accompli, par exemple, par exposition à des facteurs ultrasoniques, électromagnétiques, ou d'autres facteurs physiques. V. Schwabe "Homeopathic medicines'', M., 1967, brevets U.S. No. 7 229 648 et 4 311 897, décrit de tels processus qui sont des procédés de potentialisation homéopathique bien acceptés dans la technique homéopathique. Ce processus donne naissance à une diminution uniforme de la concentration moléculaire de la forme moléculaire initiale de l'anticorps. Ce processus est répété jusqu'à ce que l'activité homéopathique souhaitée soit obtenue. Pour l'anticorps individuel, l'activité homéopathique requise peut être déterminée en soumettant les dilutions intermédiaires à des tests biologiques dans le modèle pharmacologique souhaité. Bien qu'elle ne soit pas ainsi limitée, la « potentialisation homéopathique » peut comprendre, par exemple, des dilutions consécutives répétées combinées avec un traitement externe, en particulier une agitation (mécanique) verticale. En d'autres termes, une solution d'anticorps initiale est soumise à des dilutions consécutives répétées et de multiples agitations verticales de chaque solution obtenue selon la technologie homéopathique. La concentration préférée de la solution initiale d'anticorps dans le solvant, de préférence, l'eau ou un mélange eau-alcool éthylique, va d'environ 0,5 à environ 5,0 mg/mi. Le processus préféré pour préparer chaque composant, c'est-à-dire la solution d'anticorps, est l'utilisation du mélange de trois dilutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de la solution de matrice primaire (teinture mère) d'anticorps diluée 10072, 10030 et 100200 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales C12, C30 et C200 ou le mélange de trois dilutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de la solution de matrice primaire (teinture mère) diluée 10012, 10030 et 10050 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales C12, C30 et C50. Des exemples de la façon d'obtenir l'activité souhaitée sont donnés aussi, par exemple, dans les brevets U.S. n°. 7 229 648 et 4 311 897. Le processus applicable à la forme « activée-potentialisée » des anticorps décrite ici est décrit de manière plus détaillée ci-dessous.

Il y a eu des controverses considérables concernant le traitement homéopathique de sujets humains. Tandis que la présente invention est basée sur des processus homéopathiques acceptés pour obtenir la forme « activée-potentialisée » d'anticorps, elle n'est pas basée seulement sur l'homéopathie chez des sujets humains pour mettre en évidence une activité. Il a été découvert de manière surprenante par l'inventeur de la présente demande et amplement démontré dans les modèles pharmacologiques acceptés que le solvant obtenu finalement à partir de dilutions multiples consécutives d'une forme moléculaire initiale d'un anticorps a une activité définitive non liée à la présence des traces de la forme moléculaire de l'anticorps dans la dilution cible. La forme « activée-potentialisée » de l'anticorps fournie ici est testée pour l'activité biologique dans des modèles pharmacologiques d'activité bien acceptés, dans des expériences in vitro appropriées, ou in vivo dans des modèles animaux appropriés. Les expériences présentées ci-dessous fournissent des indices d'activité biologique dans de tels modèles. Des études cliniques sur des humains fournissent aussi des indices que l'activité observée dans le modèle animal est bien traduite en thérapie humaine. Des études sur des humains ont fourni aussi des indices de disponibilité des formes « activées potentialisées » décrites ici pour traiter des maladies humaines ou troubles humains spécifiques bien acceptées comme états pathologiques dans la science médicale. Egalement, la forme « activée-potentialisée » d'anticorps revendiquée englobe seulement des solutions ou des préparations solides dont l'activité biologique ne peut pas être expliquée par la présence de la forme moléculaire de l'anticorps restant de la solution de départ initiale. En d'autres termes, tandis qu'il est envisagé que la forme « activée-potentialisée » de l'anticorps peut contenir des traces de la forme moléculaire initiale de l'anticorps, l'homme du métier ne pourrait pas attribuer l'activité biologique observée dans les modèles pharmacologiques acceptés à la forme moléculaire de l'anticorps restante avec un quelconque degré de plausibilité du fait des concentrations extrêmement faibles de la forme moléculaire de l'anticorps restant après les dilutions consécutives. Tandis que l'invention n'est pas limitée par une quelconque théorie spécifique, l'activité biologique de la forme « activée-potentialisée » des anticorps de la présente invention n'est pas attribuable à la forme moléculaire initiale de l'anticorps. Est préférée la forme « activée-potentialisée » d'anticorps sous forme liquide ou solide dans laquelle la concentration de la forme moléculaire de l'anticorps est inférieure à la limite de détection des techniques analytiques acceptées, comme l'électrophorèse capillaire et la chromatographie liquide à hautes performances. Est particulièrement préférée la forme « activée-potentialisée » d'anticorps sous forme liquide ou solide dans laquelle la concentration de la forme moléculaire de l'anticorps est inférieure au nombre d'Avogadro. Dans la pharmacologie des formes moléculaires de substances thérapeutiques, il est de pratique courante de créer une courbe dose-réponse dans laquelle le niveau de réponse pharmacologique est représenté graphiquement en fonction de la concentration du médicament actif administré au sujet ou testé in vitro. Le niveau minimal du médicament qui produit une quelconque réponse détectable est connu comme étant une dose seuil. Il est particulièrement envisagé et préféré que la forme « activée-potentialisée » des anticorps contienne un anticorps moléculaire, s'il y en a, à une concentration inférieure à la dose seuil pour la forme moléculaire de l'anticorps dans le modèle biologique donné.

La présente invention fournit une composition pharmaceutique d'association qui inclut une forme activée-potentialisée d'anticorps dirigés contre une cytokine et une forme activée-potentialisée d'anticorps dirigés contre un récepteur, préparées selon la technologie homéopathique de potentialisation par dilutions constantes répétées et action externe intermédiaire d'agitation comme décrit de manière plus détaillée ci-dessous. La composition pharmaceutique de l'invention est particulièrement utile dans le traitement et la prophylaxie des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies, et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA. Ainsi que cela est montré dans les exemples, la composition pharmaceutique de l'invention possède un effet thérapeutique synergique inattendu, qui se manifeste dans une efficacité thérapeutique particulière dans le traitement et la prévention des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes causées par différents agents infectieux comme la pseudotuberculose, la coqueluche, la yersiniose, la pneumopathie de différentes étiologies, et les infections virales aiguës et chroniques comme les infections aiguës des voies respiratoires, la grippe de différents types, l'hépatite virale A, B, C aiguë et d'autres types d'hépatite, les maladies et affections causées par le VIH ou associées avec le VIH, incluant le SIDA. La composition pharmaceutique de l'invention élargit l'arsenal de préparations disponibles pour la prophylaxie et le traitement des maladies infectieuses, incluant les infections bactériennes et les infections virales aiguës et chroniques. La composition pharmaceutique d'association selon cet aspect de l'invention peut être sous forme liquide ou sous forme solide. Chacune des formes activées potentialisées des anticorps incluses dans la composition pharmaceutique est préparée à partir d'une forme moléculaire initiale de l'anticorps via un processus accepté dans la technique homéopathique. Les anticorps de départ peuvent être des anticorps monoclonaux ou polyclonaux préparés selon des processus connus, par exemple comme décrit dans Immunotechniques, G. Frimel, M., "Meditsyna", 1987, p. 9-33; "Hum. Antibodies. Monoclonal and recombinant antibodies, 30 years alter" de Laffly E., Sodoyer R. - 2005 - Vol. 14. - N 1-2. P.33-55. Des anticorps monoclonaux peuvent être obtenus, par exemple, par la technologie des hybridomes. Le stade initial du processus comprend une immunisation basée sur les principes déjà développés au cours de la préparation d'antisérums polyclonaux. Les stades supplémentaires de l'opération comprennent la production de cellules hybrides générant des clones d'anticorps de spécificité identique. Leur isolement séparé est accompli au moyen des mêmes procédés que dans le cas de la préparation d'antisérums polyclonaux. Des anticorps polyclonaux peuvent être obtenus via l'immunisation active d'animaux. Dans ce but, par exemple, des animaux appropriés (par exemple des lapins) reçoivent une série d'injections de l'antigène approprié (cytokine et récepteur). Le système immunitaire des animaux génère des anticorps correspondants, qui sont recueillis auprès des animaux d'une manière connue. Ce processus permet la préparation d'un sérum riche en anticorps monospécifiques. Si on le souhaite, le sérum contenant des anticorps peut être purifié, par exemple par chromatographie d'affinité, fractionnement par précipitation de sels, ou chromatographie d'échange d'ions. Le sérum enrichi en anticorps purifié résultant peut être utilisé comme produit de départ pour la préparation de la forme activée-potentialisée des anticorps. La concentration préférée de la solution initiale d'anticorps résultante dans le solvant, de préférence l'eau ou un mélange eau-alcool éthylique, va d'environ 0,5 à environ 5,0 mg/ml.

Le processus préféré pour préparer chaque composant du médicament d'association selon la présente invention est l'utilisation du mélange de trois dilutions aqueuses-alcooliques de la solution de matrice primaire d'anticorps diluée 10012, 10030 et 10050 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, et C50 ou diluée 10012, 10030 et 100200 fois, respectivement, qui équivaut à des dilutions homéopathiques centésimales C12, C30 et C200. Pour préparer une forme galénique solide, un support solide est traité avec la dilution souhaitée obtenue via le processus homéopathique. Pour obtenir une forme galénique unitaire solide de l'association de l'invention, la masse du support est imprégnée de chacune des dilutions. Les deux ordres d'imprégnation sont appropriés pour préparer la forme galénique d'association souhaitée. Dans un mode de réalisation préféré, le produit de départ pour la préparation de la forme activée potentialisée qui comprend l'association de l'invention est un anticorps polyclonal produit dans des animaux dirigé contre l'antigène correspondant. Pour obtenir la forme activée-potentialisée d'anticorps polyclonaux dirigés une cytokine ou un récepteur, l'antigène souhaité peut être injecté comme immunogène à un animal de laboratoire, de préférence des lapins. Des anticorps polyclonaux dirigés contre le récepteur CD4 peuvent être obtenus au moyen de la molécule entière de récepteur CD4 humain de séquence suivante : 11 SEQ. ID. NO. 1 Met Asn Arg Gly Val Pro Phe Arg His Leu Leu Leu Val Leu Gln 1 5 10 15 Leu Ala Leu Leu Pro Ala Ala Thr Gln Gly Lys Lys Val Val Leu 16 20 25 30 Gly Lys Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gln 31 35 40 45 Lys Lys Ser Ile Gin Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gln Ile Lys 46 50 55 60 Ile Leu Gly Asn Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro Ser Lys 61 65 70 75 Leu Asn Asp Arg Ala Asp Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gln Gly 76 80 85 90 Asn Phe Pro Leu Ile Ile Lys Asn Leu Lys Ile Glu Asp Ser Asp 91 95 100 105 Thr Tyr Ile Cys Glu Val Glu Asp Gln Lys Glu Glu Val Gin Leu 106 110 115 120 Leu Val Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr His Leu Leu Gln 121 125 130 135 Gly Gln Ser Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser Pro Pro Gly Ser Ser 136 140 145 150 Pro Ser Val Gln Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys Asn Ile Gln Gly 151 155 160 165 Gly Lys Thr Leu Ser Val Ser Gln Leu Glu Leu Gin Asp Ser Gly 166 170 175 180 Thr Trp Thr Cys Thr Val Leu Gln Asn Gln Lys Lys Val Glu Phe 181 185 190 195 Lys Ile Asp Ile Val Val Leu Ala Phe Gln Lys Ala Ser Ser Ile 196 200 205 210 Val Tyr Lys Lys Glu Gly Glu Gln Val Glu Phe Ser Phe Pro Leu 211 215 220 225 Ala Phe Thr Val Glu Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp Trp 226 230 235 240 Gln Ala Glu Arg Ala Ser Ser Ser Lys Ser Trp Ile Thr Phe Asp 241 245 250 255 Leu Lys Asn Lys Glu Val Ser Val Lys Arg Val Thr Gln Asp Pro 256 260 265 270 Lys Leu Gln Met Gly Lys Lys Leu Pro Leu His Leu Thr Leu Pro 271 275 280 285 Gln Ala Leu Pro Gln Tyr Ala Gly Ser Gly Asn Leu Thr Leu Ala 286 290 295 300 Leu Glu Ala Lys Thr Gly Lys Leu His Gln Glu Val Asn Leu Val 301 305 310 315 Val Met Arg Ala Thr Gln Leu Gln Lys Asn Leu Thr Cys Glu Val 316 320 325 330 Trp Gly Pro Thr Ser Pro Lys Leu Met Leu Ser Leu Lys Leu Glu 331 335 340 345 Asn Lys Glu Ala Lys Val Ser Lys Arg Glu Lys Ala Val Trp Val 346 350 355 360 Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met Trp Gln Cys Leu Leu Ser Asp Ser 361 365 370 375 Gly Gln Val Leu Leu Glu Ser Asn Ife Lys Val Leu Pro Thr Trp 376 380 385 390 Ser Thr Pro Val Gln Pro Met Ala Leu Ile Val Leu Gly Gly Val 391 395 400 405 Ala Gly Leu Leu Leu Phe Ile Gly Leu Gly Ile Phe Phe Cys Val 406 410 415 420 Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu Arg Met Ser Gln Ile 421 425 430 435 Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gln Cys Pro His Arg 436 440 445 450 Phe Gln Lys Thr Cys Ser Pro Ile 451 445 458 Les anticorps polyclonaux dirigés contre le récepteur CD4 peuvent être obtenus en utilisant un fragment de polypeptide du récepteur CD4 choisi, par exemple, parmi les sequences d'aminoacides suivantes: SEQ. ID. NO. 2 Gly Lys Lys Val Val Leu 25 30 Gly Lys Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gln 31 35 40 45 Lys Lys Ser Ile Gln Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gln Ile Lys 46 50 55 60 Ile Leu Gly Asn Gln Gly Ser Phe Leu Thr Lys Gly Pro Ser Lys 61 65 70 75 Leu Asn Asp Arg Ala Asp Ser Arg Arg Ser Leu Trp Asp Gln Gly 76 80 85 90 Asn Phe Pro Leu Ile Ile Lys Asn Leu Lys Ile Glu Asp Ser Asp 91 95 100 105 Thr Tyr Ile Cys Glu Val Glu Asp Gln Lys Glu Glu Val Gln Leu 106 110 115 120 Leu Val Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr His Leu Leu Gln 121 125 130 135 Gly Gln Ser Leu Thr Leu Thr Leu Glu Ser Pro Pro Gly Ser Ser 136 140 145 150 Pro Ser Val Gln Cys Arg Ser Pro Arg Gly Lys Asn Ile Gln Gly 151 155 160 165 Gly Lys Thr Leu Ser Val Ser Gln Leu Glu Leu Gln Asp Ser Gly 166 170 175 180 Thr Trp Thr Cys Thr Val Leu Gln Asn Gln Lys Lys Val Glu Phe 181 185 190 195 Lys Ile Asp Ile Val Val Leu Ala Phe Gln Lys Ala Ser Ser Ile 196 200 205 210 Val Tyr Lys Lys Glu Gly Glu Gln Val Glu Phe Ser Phe Pro Leu 211 215 220 225 Ala Phe Thr Val Glu Lys Leu Thr Gly Ser Gly Glu Leu Trp Trp 226 230 235 240 Gln Ala Glu Arg Ala Ser Ser Ser Lys Ser Trp Ile Thr Phe Asp 241 245 250 255 Leu Lys Asn Lys Glu Val Ser Val Lys Arg Val Thr Gln Asp Pro 256 260 265 270 Lys Leu Gln Met Gly Lys Lys Leu Pro Leu His Leu Thr Leu Pro 271 275 280 285 Gln Ala Leu Pro Gln Tyr Ala Gly Ser Gly Asn Leu Thr Leu Ala 286 290 295 300 Leu Glu Ala Lys Thr Gly Lys Leu His Gln Glu Val Asn Leu Val 301 305 310 315 Val Met Arg Ala Thr Gln Leu Gln Lys Asn Leu Thr Cys Glu Val 316 320 325 330 Trp Gly Pro Thr Ser Pro Lys Leu Met Leu Ser Leu Lys Leu Glu 331 335 340 345 Asn Lys Glu Ala Lys Val Ser Lys Arg Glu Lys Ala Val Trp Val 346 350 355 360 Leu Asn Pro Glu Ala Gly Met Trp Gln Cys Leu Leu Ser Asp Ser 361 365 370 375 Gly Gln Val Leu Leu Glu Ser Asn Ile Lys Val Leu Pro Thr Trp 376 380 385 390 Ser Thr Pro Val Gln Pro Met Ala Leu Ile Val Leu Gly Gly Val 391 395 400 405 Ala Gly Leu Leu Leu Phe Ile Gly Leu Gly Ile Phe Phe Cys Val 406 410 415 420 Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu Arg Met Ser Gln Ile 421 425 430 435 Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gln Cys Pro His Arg 436 440 445 450 Phe Gln Lys Thr Cys Ser Pro Ile 451 445 458 SEQ. ID. NO. 3 Ile Gly Leu Gly Ile Phe Phe Cys Val 412 415 420 Arg Cys Arg His Arg Arg Arg Gln Ala Glu Arg Met Ser Gln Ile 421 425 430 435 Lys Arg Leu Leu Ser Glu Lys Lys Thr Cys Gln Cys Pro His Arg 436 440 445 450 Phe Gln Lys Thr Cys Ser Pro Ile 451 445 458 SEQ. ID. NO. 4 Gly Lys Lys Val Val Leu 26 30 Gly Lys Lys Gly Asp Thr Val Glu Leu Thr Cys Thr Ala Ser Gln 31 35 40 45 Lys Lys Ser Ile Gln Phe His Trp Lys Asn Ser Asn Gln Ile Lys 46 50 55 60 SEQ. ID. NO. 5 Asp 91 95 100 105 Thr Tyr Ile Cys Glu Val Glu Asp Gln Lys Glu Glu Val Gin 106 110 115 119 SEQ. ID. NO. 6 Lys Glu Glu Val Gln Leu 115 120 Leu Val Phe Gly Leu Thr Ala Asn Ser Asp Thr His Leu Leu Gln 121 125 130 135 Gly Gln Ser Leu 136 139 Le processus cité à titre d'exemple pour la préparation des anticorps polyclonaux de départ dirigés contre le récepteur CD4 peut être décrit comme suit. 7-9 jours avant le prélèvement d'échantillons sanguins, 1-3 injections intraveineuses de l'antigène souhaité sont faites aux lapins pour augmenter le niveau d'anticorps polyclonaux dans la circulation sanguine des lapins. Lors de l'immunisation, des échantillons sanguins sont prélevés pour tester le niveau d'anticorps. Typiquement, le niveau maximum de réaction immunitaire de l'antigène soluble est obtenu dans un intervalle de 40 à 60 jours après la première injection de l'antigène. A l'achèvement du premier cycle d'immunisation, les lapins ont une période de réhabilitation de 30 jours, après quoi une ré-immunisation est accomplie avec 1-3 injections intraveineuses supplémentaires.

Pour obtenir un antisérum contenant les anticorps souhaités, le sang des lapins immunisés est recueilli sur les lapins et placé dans un tube de centrifugeuse de 50 ml. Les caillots de produit formés sur les côtés du tube sont retirés avec une spatule en bois, et une baguette est placée dans le caillot au centre du tube. Le sang est ensuite placé dans un réfrigérateur pendant une nuit à une température d'environ 4°C. Le jour suivant, le caillot sur la spatule est retiré, et le liquide restant est centrifugé pendant 10 min à 13000 tours par minute. Le fluide surnageant est l'antisérum cible. L'antisérum obtenu est typiquement jaune. 20 % de NaN3 (concentration en poids) est ajouté à l'antisérum à une concentration finale de 0,02 % et conservé avant l'utilisation à l'état congelé à la température de -20°C ou sans NaN3 à la température de -70°C. Pour séparer les anticorps cibles dirigés contre l'interféron gamma de l'antisérum, la séquence d'absorption sur une phase solide suivante est appropriée : 10 ml d'antisérum de lapins sont dilués deux fois avec NaCl 0,15 M, après quoi 6,26 g de Na2SO4 sont ajoutés, mélangés et incubés pendant 12-16 heures à 4°C. Le sédiment est retiré par centrifugation, dilué dans 10 ml de tampon phosphate et dialysé contre le même tampon pendant une nuit à la température ambiante. Après le retrait du sédiment, la solution est appliquée à une colonne de DEAE-cellulose équilibrée par du tampon phosphate. La fraction d'anticorps est déterminée en mesurant la densité optique de l'éluat à 280 nm. Les anticorps bruts isolés sont purifiés par le procédé de chromatographie d'affinité en fixant les anticorps obtenus dirigés contre le récepteur CD4 situés sur la matrice insoluble du milieu de chromatographie, avec élution subséquente par des solutions salines aqueuses concentrées. La solution tampon résultante est utilisée comme solution initiale pour le processus de dilution homéopathique utilisé pour préparer la forme activée-potentialisée des anticorps. La concentration préférée de la solution de matrice initiale des anticorps polyclonaux de lapin purifiés sur antigène dirigés contre le récepteur CD4 est 0,5 à 5,0 mg/ml, de préférence 2,0 à 3,0 mg/ml. Les anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron gamma peuvent aussi être obtenus par une méthodologie similaire à la méthodologie décrite pour les anticorps anti-récepteur CD4 au moyen d'un adjuvant. Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron gamma peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron gamma de séquence suivante : SEQ ID NO: 7 Met Lys Tyr Thr Ser Tyr Ile Leu Ala Phe Gln Leu Cys Ile Val 1 5 10 15 Leu Gly Ser Leu Gly Cys Tyr Cys Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 16 20 25 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 60 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gin Met Leu Phe Arg Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gln 166 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron gamma peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron gamma de séquence suivante: SEQ ID NO: 8 20 Met Lys Tyr Thr Ser Tyr Ile Leu Ala Phe Gln Leu Cys Ile Val 1 5 10 15 Leu Gly Ser Leu Gly Cys Tyr Cys Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 16 20 25 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 25 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 6015 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gln Met Leu Phe Gln Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gln 166 L'utilisation de fragments d'interféron gamma comme antigène est envisage aussi. La sequence appropriée pour un tel antigène est la suivante: 20 SEQ ID NO: 9 Ile Leu Ala Phe Gln Leu Cys Ile Val 7 10 15 Leu Gly Ser Leu Gly Cys Tyr Cys Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 16 20 25 30

25 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 4 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile 46 50 55 SEQ ID NO: 10 Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 24 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 60 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gln Met Leu Phe Arg Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gin 166 22 SEQ ID NO: 11 Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 24 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 60 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gln Met Leu Phe Gin Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gln 166 SEQ IDNO:12 Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 69 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val 121 123 SEQ ID NO: 13 Met Asn Val Lys Phe Phe 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro 136 140 145 SEQ ID NO: 14 Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 92 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg 121 125 130 SEQ ID NO: 15 Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 123 125 130 135 Leu Ile Gin Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala 136 140 145 147 SEQ ID NO: 16 Ser Tyr Ile Leu Ala Phe Gln Leu Cys Ile Val 5 10 15 Leu Gly Ser Leu Gly Cys Tyr Cys Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 16 20 25 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 SEQ IDNO:17 Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 94 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp 106 110 114 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron gamma peuvent être obtenus en utilisant la molécule d'interféron gamma recombinant de l'une des séquences suivantes : SEQ ID NO: 18 Met Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 24 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 60 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gin Met Leu Phe Gln Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gln 166 SEQ ID NO: 19 Met Gln Asp Pro Tyr Val Lys Glu 24 30 Ala Glu Asn Leu Lys Lys Tyr Phe Asn Ala Gly His Ser Asp Val 31 35 40 45 Ala Asp Asn Gly Thr Leu Phe Leu Gly Ile Leu Lys Asn Trp Lys 46 50 55 60 Glu Glu Ser Asp Arg Lys Ile Met Gln Ser Gln Ile Val Ser Phe 61 65 70 75 Tyr Phe Lys Leu Phe Lys Asn Phe Lys Asp Asp Gln Ser Ile Gln 76 80 85 90 Lys Ser Val Glu Thr Ile Lys Glu Asp Met Asn Val Lys Phe Phe 91 95 100 105 Asn Ser Asn Lys Lys Lys Arg Asp Asp Phe Glu Lys Leu Thr Asn 106 110 115 120 Tyr Ser Val Thr Asp Leu Asn Val Gln Arg Lys Ala Ile His Glu 121 125 130 135 Leu Ile Gln Val Met Ala Glu Leu Ser Pro Ala Ala Lys Thr Gly 136 140 145 150 Lys Arg Lys Arg Ser Gln Met Leu Phe Arg Gly Arg Arg Ala Ser 151 155 160 165 Gln 166 Les anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent aussi être obtenus par une méthodologie similaire à la méthodologie décrite pour les anticorps anti-récepteur CD4 au moyen d'un adjuvant. Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 8 de séquence suivante : SEQ ID NO: 20 Met Ala Leu Thr Phe Tyr Leu Leu Val Ala Leu Val Val Leu Ser 1 5 10 15 Tyr Lys Ser Phe Ser Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Ala Gln Met Arg 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Glu 46 50 55 60 Phe Pro Gin Glu Glu Phe Asp Asp Lys Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gin Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Leu Asp Glu Thr Leu Leu 91 95 100 105 Asp Glu Phe Tyr Ile Glu Leu Asp Gin Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ser Cys Val Met Gln Glu Val Gly Val Ile Glu Ser Pro Leu Met 121 125 130 135 Tyr Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Ser Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Ile Asn 166 170 175 180 Leu Gln Lys Arg Leu Lys Ser Lys Glu 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 2 de séquence suivante : SEQ ID NO: 21 Met Ala Leu Thr Phe Ala Leu Leu Val Ala Leu Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 Cys Lys Ser Ser Cys Ser Val Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Gly Ser Arg Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Arg 31 35 40 45 Lys Ile Ser Leu Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 46 50 55 60 Phe Pro Gin Glu Glu Phe Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Glu Thr 61 65 70 75 Ile Pro Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Ile Phe Asn Leu Phe 76 80 85 90 Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu Leu Asp 91 95 100 105 Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu Ala 106 110 115 120 Cys Val Ile Gln Gly Val Gly Val Thr Glu Thr Pro Leu Met Lys 121 125 130 135 Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile Thr 136 140 145 150 Leu Tyr Leu Lys Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu Val 151 155 160 165 Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Thr Asn Leu 166 170 175 180 Gln Glu Ser Leu Arg Ser Lys Glu 181 185 188 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 17 de séquence suivante : SEQ ID NO: 22 Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 Tyr Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Ala Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 46 50 55 60 Leu Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Thr Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Glu Asp Ser Ser Ala Ala Trp Glu Gin Ser Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Ser Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asn Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Ile Gln Glu Val Gly Met Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Phe Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Gln Lys Ile Leu Arg Arg Lys Asp 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha 10 humain de type 4 de séquence suivante : SEQ ID NO: 23 Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 15 Tyr Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Ala Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg Ile Ser His Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 20 46 50 55 60 Phe Pro Glu Glu Glu Phe Asp Gly His Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 25 Phe Ser Thr Glu Asp Ser Ser Ala Ala Trp Glu Gln Ser Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Ser Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Ile Gin Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Phe Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Gln Lys Arg Leu Arg Arg Lys Asp 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 21 de séquence suivante : SEQ ID NO: 24 Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 Tyr Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Ala Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 46 50 55 60 Phe Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Thr Trp Glu Gln Ser Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Ser Thr Glu Leu Asn Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val I1e Gln Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Val Asp Ser Ile Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Lys Ile 166 170 175 180 Phe Gln Glu Arg Leu Arg Arg Lys Glu 181 185 189

Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha 15 peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 1/13 de séquence suivante : SEQ ID NO: 25 20 Met Ala Ser Pro Phe Ala Leu Leu Met Val Leu Val Val Leu Ser 1 5 10 15 Cys Lys Ser Ser Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Glu Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Asp Asn Arg Arg Thr Leu Met Leu Leu Ala Gln Met Ser 25 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Ser Ser Cys Leu Met Asp Arg His Asp Phe Gly 46 50 55 60 Phe Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Pro 61 65 70 75 Ala 11e Ser Val Leu His Glu Leu Ile Gln Gln Ile Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Thr Thr Lys Asp Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Asp Leu Leu 91 95 100 105 Asp Lys Phe Cys Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Met Gin Glu Glu Arg Val Gly Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Ala Asp Ser Ile Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Arg Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu I1e Met Arg Ser Leu Ser Leu Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Gln Glu Arg Leu Arg Arg Lys Glu 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha 20 humain de type 10 de séquence suivante : SEQ ID NO: 26 Met Ala Leu Ser Phe Ser Leu Leu Met Ala Val Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 Tyr Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gin Thr His 25 16 20 25 30 Ser Leu Gly Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Gly Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg I~.e Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Arg 46 50 55 60 Ile Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gin Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Glu Asp Ser Ser Ala Ala Trp Glu Gin Ser Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Ser Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Ile Gln Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Ile Glu Arg Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Phe Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Gln Lys Arg Leu Arg Arg Lys Asp 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha 20 peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 5 de séquence suivante : SEQ ID NO: 27 Met Ala Leu Pro Phe Val Leu Leu Met Ala Leu Val Val Leu Asn 25 1 5 10 15 Cys Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Ser Asn Arg Arg Thr Leu Met Ile Met Ala Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Gly 46 50 55 60 Phe Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Lys Asp Ser Ser Ala Thr Trp Asp Glu Thr Leu Leu 91 95 100 105 Asp Lys Phe Tyr Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Met Met Gln Glu Val Gly Val Glu Asp Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Val Asp Ser Ile Leu Thr Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Thr Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Leu Ser Ala Asn 166 170 175 180 Leu Gln Glu Arg Leu Arg Arg Lys Glu 181 185 189

Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 7 de séquence suivante : SEQ ID NO: 28 Met Ala Arg Ser Phe Ser Leu Leu Met Val Val Leu Val Leu Ser 1 5 10 15 Tyr Lys Ser Ile Cys Ser Leu Gly Cys Asp Leu Pro Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Arg Asn Arg Arg Ala Leu Ile Leu Leu Ala Gln Met Gly 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Glu Phe Arg 46 50 55 60 Phe Pro Glu Glu Glu Phe Asp Gly His Gln Phe Gln Lys Thr Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Ile Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Glu Asp Ser Ser Ala Ala Trp Glu Gln Ser Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Ser Thr Glu Leu Tyr Gln Gln Leu Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Ile Gln Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Glu Asp Phe Ile Leu Ala Val Arg Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Met Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Phe Ser Phe Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Lys Lys Gly Leu Arg Arg Lys Asp 181 185 189 Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'interféron alpha peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière d'interféron alpha humain de type 14 de séquence suivante : SEQ ID NO: 29 Met Ala Leu Pro Phe Ala Leu Met Met Ala Leu Val Val Leu Ser 1 5 10 15 Cys Lys Ser Ser Cys Ser Leu Gly Cys Asn Leu Ser Gln Thr His 16 20 25 30 Ser Leu Asn Asn Arg Arg Thr Leu Met Leu Met Ala Gln Met Arg 31 35 40 45 Arg Ile Ser Pro Phe Ser Cys Leu Lys Asp Arg His Asp Phe Glu 46 50 55 60 Phe Pro Gln Glu Glu Phe Asp Gly Asn Gln Phe Gln Lys Ala Gln 61 65 70 75 Ala Ile Ser Val Leu His Glu Met Met Gln Gln Thr Phe Asn Leu 76 80 85 90 Phe Ser Thr Lys Asn Ser Ser Ala Ala Trp Asp Glu Thr Leu Leu 91 95 100 105 Glu Lys Phe Tyr Ile Glu Leu Phe Gln Gln Met Asn Asp Leu Glu 106 110 115 120 Ala Cys Val Ile Gln Glu Val Gly Val Glu Glu Thr Pro Leu Met 121 125 130 135 Asn Glu Asp Ser Ile Leu Ala Val Lys Lys Tyr Phe Gln Arg Ile 136 140 145 150 Thr Leu Tyr Leu Met Glu Lys Lys Tyr Ser Pro Cys Ala Trp Glu 151 155 160 165 Val Val Arg Ala Glu Ile Met Arg Ser Leu Ser Phe Ser Thr Asn 166 170 175 180 Leu Gln Lys Arg Leu Arg Arg Lys Asp 181 185 189 Les anticorps polyclonaux dirigés contre le récepteur CD8 peuvent aussi être obtenus par une méthodologie similaire à la méthodologie décrite pour les anticorps anti-récepteur CD4 au moyen d'un adjivant. Des anticorps polyclonaux dirigés contre le récepteur CD8 peuvent être obtenus en utilisant la molécule entière de récepteur CD8 de séquence suivante :

SEQ ID NO: 42 Met Ala Leu Pro Val Thr Ala Leu Leu Leu Pro Leu Ala Leu Leu 1 5 10 15 Leu His Ala Ala Arg Pro Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp 16 20 25 30 Arg Thr Trp Asn Leu Gly Glu Thr Val Glu Leu Lys Cys Gln Val 31 35 40 45 Leu Leu Ser Asn Pro Thr Ser Gly Cys Ser Trp Leu Phe Gln Pro 46 50 55 60 Arg Gly Ala Ala Ala Ser Pro Thr Phe Leu Leu Tyr Leu Ser Gln 61 65 70 75 Asn Lys Pro Lys Ala Ala Glu Gly Leu Asp Thr Gln Arg Phe Ser 76 80 85 90 Gly Lys Arg Leu Gly Asp Thr Phe Val Leu Thr Leu Ser Asp Phe 91 95 100 105 Arg Arg Glu Asn Glu Gly Tyr Tyr Phe Cys Ser Ala Leu Ser Asn 106 110 115 120 Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala 121 125 130 135 Lys Pro Thr Thr Thr Pro Ala Pro Arg Pro Pro Thr Pro Ala Pro 136 140 145 150 Thr Ile Ala Ser Gln Pro Leu Ser Leu Arg Pro Glu Ala Cys Arg 151 155 160 165 Pro Ala Ala Gly Gly Ala Val His Thr Arg Gly Leu Asp Phe Ala

166 170 175 180 Cys Asp Ile Tyr Ile Trp Ala Pro Leu Ala Gly Thr Cys Gly Val 181 185 190 195 Leu Leu Leu Ser Leu Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn

196 200 205 210 Arg Arg Arg Val Cys Lys Cys Pro Arg Pro Val Val Lys Ser Gly 211 215 220 225 Asp Lys Pro Ser Leu Ser Ala Arg Tyr Val

226 230 235 L'utilisation de fragments de récepteur CD8 comme antigène est envisagée aussi. Les séquences appropriées pour un tel antigène sont les suivantes: SEQ ID NO: 43 Pro Leu Ala Leu Leu 11 15 Leu His Ala Ala Arg Pro Ser Gln Phe Arg Val Ser Pro Leu Asp

16 20 25 30 SEQ ID NO: 44 Ala Glu Gly Leu Asp Thr Gln Arg Phe Ser

81 85 90 Gly Lys Arg Leu Gly Asp Thr Phe Val Leu

91 95 100 SEQ ID NO: 45 Ser Ile Met Tyr Phe Ser His Phe Val Pro Val Phe Leu Pro Ala 121 125 130 135 Lys Pro Thr Thr Thr 136 140

SEQ ID NO: 46 Val Ile Thr Leu Tyr Cys Asn His Arg Asn 201 205 210 SEQ ID NO: 47 Val Val Lys Ser Gly 221 225 Asp Lys Pro Ser Leu Ser Ala Arg Tyr Val 15 226 230 235

Des anticorps polyclonaux dirigés contre le facteur alpha de nécrose des tumeurs (TNF-a) peuvent être obtenus par le procédé d'obtention d'anticorps contre le récepteur CD4 mentionné ci-dessus en utilisant une molécule entière de 20 facteur alpha de nécrose des tumeurs de séquence suivante:

SEQ ID NO: 30 Met Ser Thr Glu Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu 1 5 10 15 25 Ala Leu Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gln Gly Ser Arg Arg Cys 16 20 25 3010 Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr 31 35 40 45 Thr Leu Phe Cys Leu Leu His Phe Gly Val Ile Gly Pro Gln Arg 46 50 55 60 Glu Glu Phe Pro Arg Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu Ala Gln 61 65 70 75 Ala Val Arg Ser Ser Ser Arg Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala 76 80 85 90 His Val Val Ala Asn Pro Gln Ala Glu Gly Gln Leu Gln Trp Leu 91 95 100 105 Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg 106 110 115 120 Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr 121 125 130 135 Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val 136 140 145 150 Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr 151 155 160 165 Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu 166 170 175 180 Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr 181 185 190 195 Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala 196 200 205 210 Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln 211 215 220 225 Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu 226 230 233 Pour obtenir des anticorps polyclonaux dirigés contre le facteur alpha de nécrose des tumeurs (TNF-a) il est possible aussi d'utiliser un fragment polypeptidique du facteur de nécrose des tumeurs, choisi par exemple parmi les séquences suivantes : SEQ ID NO: 31 Pro Ser Asp Lys Pro 84 88 SEQ ID NO: 32 Val Ala Asn Pro Gln 93 97 SEQ ID NO: 33 Arg Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu Ala Gln 65 70 75 Ala Val Arg Ser Ser Ser Arg Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala 76 80 85 90 His Val Val Ala Asn Pro Gin Ala Glu Gly Gln Leu Gin Trp Leu 91 95 100 105 Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg 106 110 115 120 Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr 121 125 130 135 Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val 136 140 145 150 Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr 151 155 160 165 Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu 166 170 175 180 Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr 181 185 190 195 Leu Gly Gly Val

196 199 SEQ ID NO: 34 Val Arg Ser Ser Ser Arg Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala 77 80 85 90 His Val Val 91 93 SEQ ID NO: 35 Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr 32 35 40 45 Thr Leu Phe Cys Leu Leu His Phe Gly

46 50 54 SEQ ID NO: 36 Ile Gly Pro Gln Arg 56 60 Glu Glu Phe Pro Arg Asp Leu Ser Leu Ile Ser Pro Leu

61 65 70 73 SEQ ID NO: 37 Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr

123 125 130 135 Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val

136 140 145 150 Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala 151 155 160 SEQ ID NO: 38 Pro Cys Gin Arg Glu

176 180

Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp 181 185 190 SEQ IDNO:39 Ser Met Ile Arg Asp Val Glu Leu Ala Glu Glu

5 10 15

Ala Leu Pro Lys Lys Thr Gly Gly Pro Gin Gly Ser Arg Arg Cys

16 20 25 30 Leu Phe Leu Ser Leu Phe Ser Phe Leu Ile Val Ala Gly Ala Thr

31 35 40 45 SEQ ID NO: 40 Val 150 Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr

151 155 160 165 Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu

166 170 175 180 Thr Pro Glu Gly

181 184 SEQ ID NO 41 Val Arg Ser Ser Ser Arg Thr Pro Ser Asp Lys Pro Val Ala 77 80 85 90 His Val Val Ala Asn Pro Gln Ala Glu Gly Gin Leu Gln Trp Leu 91 95 100 105 Asn Arg Arg Ala Asn Ala Leu Leu Ala Asn Gly Val Glu Leu Arg 106 110 115 120 Asp Asn Gln Leu Val Val Pro Ser Glu Gly Leu Tyr Leu Ile Tyr 121 125 130 135 Ser Gln Val Leu Phe Lys Gly Gln Gly Cys Pro Ser Thr His Val 136 140 145 150 Leu Leu Thr His Thr Ile Ser Arg Ile Ala Val Ser Tyr Gln Thr 151 155 160 165 Lys Val Asn Leu Leu Ser Ala Ile Lys Ser Pro Cys Gln Arg Glu 166 170 175 180 Thr Pro Glu Gly Ala Glu Ala Lys Pro Trp Tyr Glu Pro Ile Tyr 181 185 190 195 Leu Gly Gly Val Phe Gln Leu Glu Lys Gly Asp Arg Leu Ser Ala 196 200 205 210 Glu Ile Asn Arg Pro Asp Tyr Leu Asp Phe Ala Glu Ser Gly Gln 211 215 220 225 Val Tyr Phe Gly Ile Ile Ala Leu 226 230 233

Des anticorps polyclonaux dirigés contre l'histamine, qui est une amine biogène (4(2-aminoéthyl)-imidazole ou bêta-imidazolyléthylamine ayant la formule chimique C5H9N3), peuvent être obtenus par le procédé d'obtention d'anticorps contre CD4 mentionné ci-dessus en utilisant un adjuvant et le dichlorhydrate d'histamine produit industriellement (antigène) pour l'immunisation de lapins. La forme activée potentialisée d'un anticorps dirigé contre le récepteur CD4 peut être préparée à partir d'une solution initiale par potentialisation homéopathique, de préférence en utilisant le procédé de diminution de concentration proportionnelle par dilution successive de 1 partie de chaque solution précédente (en commençant avec la solution initiale) dans 9 parties (pour une dilution décimale), ou dans 99 parties (pour une dilution centésimale), ou dans 999 parties (pour une dilution millésimale) d'un solvant neutre, en commençant avec une concentration de la solution initiale d'anticorps dans la solvant, de préférence l'eau ou un mélange eau-alcool éthylique, dans la plage d'environ 0,5 à environ 5,0 mg/ml, couplée avec un impact externe. De préférence, l'impact externe comprend de multiples agitations verticales (dynamisation) de chaque dilution. De préférence, des récipients séparés sont utilisés pour chaque dilution subséquente jusqu'au niveau d'activité requis, ou le facteur de dilution requis. Ce procédé est bien accepté dans la technique homéopathique. Voir par exemple V. Schwabe "Homeopathic medicines", M., 1967, p. 14-29. Par exemple, pour préparer une dilution 12-centésimale (appelée C12), une partie de la solution de matrice initiale d'anticorps dirigés contre le récepteur CD4 d'une concentration de 3,0 mg/ml est diluée dans 99 parties de solvant neutre aqueux ou aqueux-alcoolique (de préférence d'alcool éthylique à 15 %) puis agitée verticalement de nombreuses fois (10 et plus) pour créer la 1" dilution centésimale (appelée Cl). La 2ème dilution centésimale (C2) est préparée à partir de la 1" dilution centésimale Cl. Ce processus est répété 11 fois pour préparer la 12ème dilution centésimale C12. Ainsi, la 12éme dilution centésimale C12 représente une solution obtenue par 12 dilutions successives d'une partie de la solution de matrice d'anticorps initiale d'une concentration de 3,0 mg/ml dans 99 parties d'un solvant neutre dans des récipients différents, ce qui équivaut à la dilution homéopathique centésimale C12. Des processus similaires avec le facteur de dilution pertinent sont accomplis pour obtenir les dilutions souhaitées. Les dilutions intermédiaires peuvent être testées dans un modèle biologique souhaité pour vérifier l'activité. Les formes activées potentialisées préférées pour des anticorps comprenant l'association de l'invention sont des dilutions C12, C30 et C200 pour chaque forme activée-potentialisée. Quand le mélange de différentes dilutions homéopathiques (principalement centésimales) de la substance active est utilisé comme composant liquide biologiquement actif, chaque composant de la composition (par exemple C12, C30, C50, C200) est préparé séparément selon le processus décrit ci-dessus jusqu'à ce que l'avant-dernière dilution soit obtenue (par exemple jusqu'à C11, C29, C49 et C199 respectivement), puis une partie de chaque composant est ajoutée dans un récipient selon la composition du mélange et mélangée avec la quantité requise de solvant (par exemple avec 97 parties pour une dilution centésimale).

Il est possible d'utiliser la substance active sous forme d'un mélange de différentes dilutions homéopathiques, par exemple décimales et/ou centésimales (D20, C30, C100 ou C12, C30, C50 ou C12, C30, C200, etc.), dont l'efficacité est déterminée expérimentalement en testant la dilution dans un modèle biologique approprié, par exemple dans des modèles décrits dans les présents exemples. Au cours de la potentialisation et de la diminution de la concentration, l'agitation verticale peut être remplacée par une exposition externe à des ultrasons, un champ électromagnétique ou tout processus d'impact externe similaire accepté dans la technique homéopathique.

De préférence, la composition pharmaceutique de l'invention peut être sous forme d'un liquide ou d'une forme galénique unitaire solide. Le vecteur liquide préféré est l'eau ou un mélange eau-alcool éthylique. La forme galénique unitaire solide de la composition pharmaceutique de l'invention peut être préparée par imprégnation d'un support solide pharmaceutiquement acceptable avec le mélange de la forme activée potentialisée de solutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de composant actif. A titre d'alternative, le support peut être imprégné de manière consécutive avec chaque dilution requise. Les deux ordres d'imprégnation sont acceptables. De préférence, la composition pharmaceutique dans la forme galénique unitaire solide est préparée à partir de granules du support pharmaceutiquement acceptable qui a été préalablement saturé avec les dilutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques de la forme activée potentialisée d'anticorps. La forme galénique solide peut être sous toute forme connue dans la technique pharmaceutique, incluant un comprimé, une capsule, une pastille, et d'autres.

Comme ingrédients pharmaceutiques inactifs on peut utiliser le glucose, le saccharose, le maltose, l'amidon, l'isomaltose, l'isomalt et d'autres mono-, oligo- et polysaccharides utilisés dans la fabrication de produits pharmaceutiques ainsi que des mélanges technologiques des ingrédients pharmaceutiques inactifs mentionnés ci-dessus avec d'autres excipients pharmaceutiquement acceptables, par exemple l'isomalt, la crospovidone, le cyclamate de sodium, la saccharine sodique, l'acide citrique anhydre, etc.), incluant les lubrifiants, les désintégrants, les liants et les agents colorants. Les supports préférés sont le lactose et l'isomalt. La forme galénique pharmceutique peut inclure en outre des excipients pharmaceutiques standard, par exemple la cellulose microcristalline, le stéarate de magnésium et l'acide citrique.

Pour préparer la forme orale solide, des granules de 100-300 pm de lactose sont imprégnés de solutions aqueuses ou aqueuses-alcooliques des formes activées potentialisées d'anticorps dans le rapport de 1 kg de solution d'anticorps pour 5 ou 10 kg de lactose (1 : 5 à 1 : 10). Pour réaliser l'imprégnation, les granules de lactose sont exposés à une irrigation à saturation dans le lit bouillonnant fluidisé dans une installation à lit bouillonnant (par exemple "Hüttlin Pilotlab" de Hüttlin GmbH) avec séchage subséquent via un courant d'air chauffé à une température inférieure à 40°C. La quantité estimée des granules séchés (10 à 34 parties en poids) saturés de la forme activée potentialisée d'anticorps est placée dans le mélangeur, et mélangée avec 25 à 45 parties en poids de lactose pur « non saturé » (utilisé dans le but de réduction des coûts et de simplification et d'accélération du processus technologique sans diminuer l'efficacité du traitement), avec 0,1 à 1 partie en poids de stéarate de magnésium, et 3 à 10 parties en poids de cellulose microcristalline. La masse pour comprimés obtenue est mélangée uniformément, et mise sous forme de comprimés par pressage à sec direct (par exemple dans une presse à comprimés Korsch - XL 400) pour former des pilules rondes de 150 à 500 mg, de préférence de 300 mg. Après la formation des comprimés, des pilules de 300 mg sont obtenues, qui sont saturées de solution aqueuse-alcoolique (3,0-6,0 mg/pilule) de la forme activée-potentialisée d'anticorps sous forme d'un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30 et C50 ou d'un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30 et C200. Tandis que l'invention n'est pas limitée par une quelconque théorie spécifique, on considère que la forme activée-potentialisée des anticorps décrits ici ne contient pas la forme moléculaire de l'anticorps en une quantité suffisante pour avoir l'activité biologique attribuée à une telle forme moléculaire. L'activité biologique du médicament d'association (composition pharmaceutique) de l'invention est amplement démontrée dans les exemples annexés.

De préférence, pour les besoins du traitement, l'association de l'invention est administrée d'une fois par jour à six fois par jour, de préférence deux fois par jour ou quatre fois par jour, chaque administration incluant une ou trois formes galéniques unitaires d'association. L'invention est illustrée encore en se référant aux exemples non limitatifs annexés.

EXEMPLES Exemple 1. Etude de l'effet d'une préparation complexe contenant des doses ultra- basses (ULD) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité dirigés contre le récepteur CD 4 (anti-CD4) et l'interféron gamma (anti-IFN-y), obtenues par super-dilution d'une solution de matrice initiale (concentration : 2,5 mg/ml) (10012,10030, 100200 fois), ce qui équivaut à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C200 (rapport : 1:1) (« anti- CD4 + anti-IFN-'y), ainsi que ses composants - forme activée-potentialisée d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité contre le récepteur CD4, purifiés sur antigène, obtenues par super-dilution de solution de matrice initiale (10012, 10030, 10050 fois, ce qui équivaut à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 (« anti-CD4 ») et de forme activée- potentialisée d'anticorps polyclonaux de lapin contre l'interféfon gamma, obtenues par super-dilution de solution de matrice initiale (10012, 10030, 10050 fois), équivalant à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 («anti-IFN-y») in vitro sur la liaison du ligand standard [3H]pentazocine au récepteur recombinant humain al a été évalué au moyen d'un procédé à radioligand. De l'eau distillée potentialisée (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) a été utilisée comme témoin de préparations test. Le récepteur sigma-1 (ai) - un récepteur intracellulaire qui est localisé dans les cellules du sytème nerveux central, les cellules de la plupart des tissus périphériques et les cellules immunocompétentes. Ce récepteur via le contrôle de l'homéostase du calcium intracellulaire régule les événements de signalisation intracellulaire conduisant à l'activation des facteurs de transcription correspondants et à la transcription de toute une famille de gènes codant en particulier les facteurs de résistance aux agents infectieux et aux cytokines. A ce sujet, l'aptitude de médicaments à influencer l'efficacité d'interaction de ligands avec le récepteur sigma-1 indique la présence de composants antiviraux et immunomodulateurs dans le spectre de son activité pharmacologique qui permet de considérer ces médicaments comme des préparations efficaces pour le traitement et la prophylaxie de différentes maladies infectieuses.

Pendant le test (pour mesurer la liaison totale), 20 pl de préparation complexe anti-CD4 + anti-IFN-y ou 10 pI d'anti-CD4 ou 10 pl d'anti-IFN-y ont été transférés dans le milieu d'incubation. Ainsi, la quantité d'anti-CD4 + anti-IFN-y transférée dans le bassin de test lors du test de la préparation complexe était identique à celle d'anti-CD4 et d'ULD d'anti-IFN-y testés sous forme de monopréparations, ce qui permet de comparer l'efficacité de la préparation à ses composants séparés. 20 pl et 10 pI d'eau potentialisée ont été transférés dans le milieu d'incubation. De plus, 160 pl (environ 200 pg de protéine) d'homogénat de membranes de lignée cellulaire Jurkat (lignée de lymphocytes T leucémique humaine), et finalement 20 pl de radioligand marqué au tritium [3Hjpentazocine (15 nm) ont été transférés. Pour mesurer la liaison non spécifique, 20 pI de ligand non marqué halopéridol (10 pM) ont été transférés dans le milieu d'incubation à la place des préparations ou de l'eau potentialisée.

La radioactivité a été mesurée au moyen d'un scintillomètre (Topcount, Packard) et d'un mélange de scintillation (Microscint 0, Packard) après l'incubation 10 15 dans un intervalle de 120 minutes à 22°C dans du tampon Tris-HCI 50 mM (pH 7,4) et filtration avec des filtres en fibres de verre (GF/B, Packard). La liaison spécifique (pendant le test ou témoin) a été calculée comme différence entre la liaison totale (pendant le test ou témoin) et la liaison non spécifique.

Les résultats sont représentés en pourcentage d'inhibition de la liaison spécifique dans le témoin (de l'eau distillée a été utilisée comme témoin) (tableau 1). Tableau 1. Groupe test Quantité % de liaison spécifique de radioligand dans d'inhibition par bassin le témoin de liaison de test de radioligand dans le témoin le test 2`d test Moyenne anti-CD4 + 20 pl 50,8 49,1 49,9 50,1 anti-lFN-y Anti-CD4 10 pl 74,0 76,2 75,1 24,9 ULD anti- 10 pl 158,9 149,8 154,3 -54,3 eNOS Anti-IFN-y 20 pl 98,1 75,8 86,9 13,1 Eau 10 pl 140,1 106,2 123,2 -23,2 potentialisée Effet des préparations et de l'eau potentialisée sur la liaison du ligand standard [3H]pentazocine au récepteur a 1 recombinant humain Note: % de liaison spécifique dans le témoin = (liaison spécifique pendant le test/ liaison spécifique dans le témoin)* 100%; 0/0 d'inhibition de liaison spécifique dans le témoin = 100% - (liaison spécifique pendant le test/ liaison spécifique dans le témoin) * 100%). Les résultats reflétant une inhibition au-delà de 50 % représentent des effets significatifs des composés testés ; une inhibition de 25 % à 50 % confirme des effets doux à modérés ; une inhibition inférieure à 25 % est considérée comme étant un effet insignifiant du composé testé et est dans les limites du niveau de fond. De ce fait, les conditions de ce modèle de test montraient que la préparation complexe d'anti-CD4 + anti-IFN-y est plus efficace que ses composants séparés (anti-CD4 et anti-IFN-y) pour inhiber la liaison du radioligand standard [3H]pentazocine au récepteur al recombinant humain ; anti-CD4, transféré dans le bassin de test, à savoir 10 pI, inhibe la liaison du radioligand standard [3H]pentazocine au récepteur al recombinant humain, mais l'intensité de l'effet est inférieure à celle de la préparation complexe d'anti-CD4 + anti-IFN-y; anti-IFN-y, transféré dans le bassin de test, à savoir 10 p1, n'avait pas d'effet sur la liaison du radioligand standard [3H]pentazocine au récepteur al recombinant humain; l'eau potentialisée, transférée dans le bassin de test, à savoir 10 pl ou 20 pl, n'avait pas d'effet sur la liaison du radioligand standard [3H]pentazocine au récepteur al recombinant humain.

Exemple 2 (cellules mononucléées ; transcriptase inverse ; mode "traitement") Liste des acronymes : - TCID50 représente la dose infectant 50 % d'une culture de tissu L'évaluation de l'activité antirétrovirale d'un médicament complexe qui contient des doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) et des doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) dans le rapport 1:1 (appelé dans la suite médicament complexe) et de composants qui font partie de celui-ci (doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelé dans la suite ULD AB contre CD4) et de doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50 (appelé dans la suite ULD AB contre IFN gamma)) a été réalisée en utilisant des cellules mononucléées du sang périphérique d'un être humain infecté avec une souche HIV-1-LAI in vitro. L'azidothymidine a été utilisée comme médicament comparatif (Sigma - AZ169-100 mg, lot 107 K 1578). Des cellules mononucléées du sang périphériques d'un être humain ont été séparées du sang d'un donneur séronégatif sain par centrifugation dans un gradient de densité ficcol-gipaque. Les cellules ont été activées pendant 3 jours en utilisant 1 mkg/ml de phytohémagglutinine P et 5 ME/mi d'interleukine-2 recombinante d'un être humain dans le milieu RPMI1640 (DIFCO) avec 10 % de sérum foetal bovin (le complément a été retiré par chauffage pendant 45 minutes à une température de 56°C), solution à 1 % d'antibiotique (PSN Gibco contenant 50 pg/ml de pénicilline, 50 pg/ml de streptomycine et 100 p/ml de néomycine). Pour l'évaluation de l'activité antirétrovirale, des médicaments d'association ont été introduits dans un puits 15-30 minutes après la contamination des cellules avec la souche HIV-1-LAI à une dose de 100 TCID50 (inoculums de 50 mkl de la souche HIV-1-LAI). Le 7ème jour après l'infection des cellules, le surnageant utilisé pour l'évaluation de l'influence des médicaments pour l'inhibition de la réplication de VIH a été choisi. Avant l'introduction dans un puits contenant 150 pl de culture de cellules, les médicaments ont été dilués avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) jusqu'à ce qu'un volume final de 50 pl soit atteint. ULD AB contre CD4 et ULD AB contre IFN gamma ont été diluées dans du milieu RPMI1640 (DIFCO) 8 fois (degré de dilution 1/4). Ainsi, la quantité d'ULD AB contre CD4 et d'ULD AB contre IFN gamma introduite dans un puits expérimental pendant le test du médicament complexe était similaire à la quantité d'ULD AB contre CD4 et d'ULD AB contre IFN gamma testée comme mono-composant, ce qui permet de comparer l'efficacité du médicament complexe avec ses composants séparés. L'azidothymidine a été diluée avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) jusqu'à ce qu'une concentration de 8 nM soit atteinte. L'efficacité des médicaments était définie sur l'inhibition de la réplication de VIH qui a été évaluée sur l'activité enzymatique de la transcriptase inverse de VIH dans des surnageants de macrophages du sang périphérique d'un être humain avec l'ensemble de production HIV RT RetroSys INNOVAGEN (lot 10- 059C). Pour le calcul du % d'inhibition de la réplication de VIH, comme témoin un surnageant de cellules a été utilisé dans lequel les médicaments testés n'ont pas été introduits (voir le tableau 2). Tableau 2 Activité antirétrovirale de médicaments avec des cellules mononucléées du sang 5 périphérique d'un être humain infecté in vitro avec la souche HIV-1-LAI. Médicament Degré de dilution Inhibition de l'activité dans le milieu enzymatique de la RPMI1640 (DIFCO) transcriptase inverse de VIH (% par rapport au témoin) 7gme jour ULD AB contre IFN gamma 1/8 0±5 ULD AB contre CD4 1 /8 67±22 Médicament complexe (ULD AB 1 /4 85±1 contre IFN gamma et ULD AB contre CD4 dans le rapport 1 : 1) Azidothymidine (8 nM) - 58±7 Ainsi, dans les conditions de ce modèle expérimental, il est montré que l'activité antirétrovirale du médicament complexe dépassait l'activité antirétrovirale de ses composants séparés (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB contre CD4). 10 Exemple 3 (macrophages ; transcriptase inverse ; mode "prophylaxie") Liste des acronymes : - TCID50 représente la dose infectant 50 % d'une culture de tissu L'évaluation de l'activité antirétrovirale d'un médicament complexe qui 15 contient des doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) et des doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) dans le rapport 1:1 (appelé dans la suite médicament complexe) et de composants qui font partie de celui-ci 20 (doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelé dans la suite ULD AB contre CD4) et de doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50 (appelé dans la suite ULD AB contre IFN gamma)) a été réalisée en utilisant des macrophages provenant de cellules mononucléées du sang périphérique d'un être humain infecté avec une souche HIV-1-LAI in vitro. L'azidothymidine a été utilisée comme médicament comparatif (Sigma - AZ169-100 mg, lot 107 K 1578). Des macrophages de sang périphérique de donneur provenant de cellules mononucléées de sang périphérique humain ont été isolés du sang de deux donneurs séronégatifs sains par centrifugation en gradient de densité ficcolgipaque.

Des cellules mononucléées du sang périphérique humain ont été cultivées pendant 3 jours dans du milieu RPMI1640 (DIFCO) qui était additionné de 10 % de sérum foetal bovin (le complément a été retiré par chauffage pendant 45 minutes à une température de 56°C), solution à 1 % d'antibiotiques (PSN Gibco contenant 50 pg/ml de pénicilline, 50 pg/ml de streptomycine et 100 p/ml de néomycine), 15 ng/ml de GM-CSF (facteur stimulant les colonies de macrophages et de granulocytes). Puis, les cellules ont été placées dans des plaques de culture (150000 cellules/puits dans une plaque à 48 puits), cultivées pendant 7 jours avec 1 ng/ml de GM-CSF (facteur stimulant les colonies de macrophages et de granulocytes) et 10 ng/ml de M-CSF (facteur stimulant les colonies de macrophages) de sorte que les cellules pouvaient être totalement différenciées en macrophages. Pour l'évaluation de l'activité antirétrovirale, des médicaments d'association ont été introduits dans un puits 15-30 minutes avant la contamination des cellules avec la souche HIV-1-LAI à une dose de 100 TCID50 (inoculums de 100 mkl de la souche HIV-1-LAI) et le 3ème, 7ème, 10ème, 14ème, 17ème jour après la contamination. Le 3ème, 7ème, 10ème, 14ème, 17ème jour après l'infection des cellules, le surnageant utilisé pour l'évaluation de l'influence des médicaments pour l'inhibition de la réplication de VIH a été choisi. Avant l'introduction dans un puits contenant 150 pl de culture de cellules, les médicaments ont été dilués avec du milieu RPM11640 (DIFCO) jusqu'à ce qu'un volume final de 50 pl soit atteint. ULD AB contre CD4 et ULD AB contre IFN gamma ont été diluées dans du milieu RPMI1640 (DIFCO) 8 fois (degré de dilution 1/4). Ainsi, la quantité d'ULD AB contre CD4 et d'ULD AB contre IFN gamma introduite dans un puits expérimental pendant le test du médicament complexe était similaire à la quantité d'ULD AB contre CD4 et d'ULD AB contre IFN gamma testée comme mono-composant, ce qui permet de comparer l'efficacité du médicament complexe avec ses composants séparés.

L'azidothymidine a été diluée avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) jusqu'à ce qu'une concentration de 8 nM soit atteinte. L'efficacité des médicaments était définie par l'inhibition de la réplication de VIH qui a été évaluée sur l'activité enzymatique de la transcriptase inverse de VIH dans des surnageants de macrophages du sang périphérique d'un être humain avec l'ensemble de production HIV RT RetroSys INNOVAGEN (lot 10-059C). Pour le calcul du % d'inhibition de la réplication de VIH, comme témoin un surnageant de cellules a été utilisé dans lequel les médicaments testés ou l'azidothymidine n'ont pas été introduits (voir les tableaux 3 et 4).

Tableau 3 Activité antirétrovirale de médicaments avec des macrophages de sang périphérique humain (donneur n°. 1) infecté in vitro avec la souche HIV-1-Ba-L. Médicament Degré de dilution Inhibition de l'activité enzymatique dans le milieu de la transcriptase inverse de VIH RPMI1640 (DI FCO) (% par rapport au témoin) 14ème jour our 21 ème jour 17eme jour ULD AB contre IFN 1 /8 241-4 241-4 01-0 gamma ULD AB contre 1 /8 53±13 37±7 0±0 CD4 Médicament 1/4 69±1 74±9 37±3 complexe (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB contre CD4 dans le rapport 1: 1) Azidothymidine (8 _ 97±1 97±0 98±2 nM) 20 Tableau 4. Activité antirétrovirale de médicaments avec des macrophages de sang périphérique humain (donneur n°. 2) infecté in vitro avec la souche HIV-1-Ba-L. Médicament Degré de dilution Inhibition de l'activité enzymatique de la dans le milieu transcriptase inverse de VIH (% par RPMI1640 rapport au témoin) (DIFCO) 14éme jour 176me jour 21 Ôme jour ULD AB contre 1 /8 39±20 0±0 O±0 IFN gamma ULD AB contre 1/8 0±0 0±0 0±0 CD4 Médicament 1 /4 50±5 42±4 30±6 complexe (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB contre CD4 dans le rapport 1:1) Azidothymidine _ 82±2 54+1 41±1 (8 nM) Ainsi, dans les conditions de ce modèle expérimental, il est montré que : 1. l'activité antirétrovirale du médicament complexe dépasse l'activité antirétrovirale de ses composants séparés (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB 10 contre CD4). 2. l'activité antirétrovirale du médicament complexe dure pendant toute la période expérimentale contrairement à l'activité antirétrovirale de ses composants séparés (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB contre CD4). 3. Seul le médicament complexe présentait une activité antirétrovirale dans le 15 modèle in vitro de macrophages infectés de sang périphérique humain provenant de différents donneurs séronégatifs, ce qui est l'indice d'un effet antirétroviral du médicament complexe plus marqué que celui de ses composants (ULD AB contre IFN gamma et ULD AB contre CD4), dont l'activité antirétrovirale était notée dans le modèle in vitro de macrophages infectés de sang périphérique humain provenant seulement d'un donneur séronégatif. Exemple 4 (cellules mononuclées ; transcriptase inverse schéma thérapeutique) Liste des abréviations : - TCID50 représente la dose infectant 50 % d'une culture de tissu. L'évaluation de l'activité antirétrovirale d'un produit complexe consistant en une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron alpha, une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma, une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 et une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD8 sous forme de rapport 1:1:1:1 (un mélange de dilutions homéopathiques Cl2+C30+C50) (appelé dans la suite produit complexe), a été réalisée en utilisant des cellules mononucléées de sang périphérique humain infectées avec la souche HIV-1 LAI in vitro. L'azidothymidine (Sigma - AZ169-100 mg, Lot 107 K1578) a été utilisée comme produit comparatif. Les cellules mononucléées de sang périphérique humain ont été isolées à partir du sang d'un donneur sain séronégatif par centrifugation sur un gradient de densité Ficoll-Hypaque. Les cellules ont été stimulées pendant 3 jours avec 1 pg/mL de phytohémagglutinine P et 5 Ul/mL d'interleudine-2 humaine recombinante dans du milieu RPMI1640 (DIFCO) additionné de 10 % de sérum foetal bovin (le complément a été retiré par chauffage pendant 45 minutes à 56°C), 1 % de solution d'antibiotique (PSN Gibco contenant 50 pg/mL de pénicilline, 50 pg/mL de streptomycine et 100 pg/mL de néomycine).

Pour évaluer l'activité antirétrovirale, les produits ont été placés dans un puits 15-30 minutes après l'infection des cellules avec la souche HIV-1-LAI à la dose de 100 TCID50 (50 pL d'inoculum de la souche HIV-1-LAI). Les fluides surnageants utilisés pour évaluer l'effet des produits sur l'inhibition de la réplication de VIH ont été recueillis aussi le jour 7 après l'infection des cellules.

Avant la mise en place dans un puits, qui contenait 150 pL de culture cellulaire, le produit complexe a été dilué avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) à une dilution de 4 fois (à une dilution 1/4) jusqu'à un volume final de 50 pL. L'azidothymidine a été diluée avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) pour donner une concentration de 8 nM. L'efficacité des produits a été établie par l'inhibition de la réplication du VIH qui a été évaluée par l'activité de la transcriptase inverse de VIH dans le fluide surnageant provenant de cellules mononucléées de sang périphérique humain avec le kit HIV RT RetroSys produit par INNOVAGEN (Lot 10-059C). Le fluide surnageant des cellules, auquel les produits tests ou l'azidothymidine n'ont pas été inoculés, a été utilisé comme témoin pour calculer le pourcentage d'inhibition de la réplication de VIH (voir le tableau 5). Tableau 5 Activité antirétrovirale du produit complexe avec des cellules mononucléées de sang périphérique humain infectées avec la souche HIV-1-LAI in vitro.

Produit Rapport de dilution Inhibition de l'activité du milieu de la transcriptase RPMI1640 inverse de VIH (% du (DIFCO) témoin) Jour 7 Produit complexe (dose ultra- 1/4 81±11 basse d'anticorps contre IFN- alpha, dose ultra-basse d'anticorps contre IFN-gamma, dose ultra-basse d'anticorps contre CD4 et dose ultra-basse d'anticorps contre CD8 dans le rapport 1:1:1:1) Azidothymidine (8 nM) - 58±7 Ainsi, ce modèle expérimental démontrait l'activité antirétrovirale du produit complexe comprenant une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron alpha, une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron gamma, une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD4 et une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre CD8 sous forme d'un rapport 1:1:1:1 (un mélange de dilutions homéopathiques Cl2+C30+C50). Exemple 5 Cellules mononucléées ; protéine de nucléocapside 5 p24 ; schéma de prévention et thérapeutique L'évaluation de l'activité antirétrovirale d'une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron-alpha (un mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50), d'une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre l'interféron-gamma (un mélange de dilutions 10 homéopathiques C12+C30+C50) (ULD IFN-y)), d'une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre le récepteur CD4 (un mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) et d'une dose ultra-basse d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre le récepteur CD8 (un mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (ULD Ab IFN-a+ IFN-71-CD4+CD8) a été réalisée 15 en utilisant des cellules mononucléées de sang périphérique humain infectées avec la souche HIV-1 LAI in vitro. Des cellules mononucléées de sang périphérique humain ont été isolées à partir du sang d'un donneur sain séronégatif par centrifugation sur un gradient de densité Ficoll-Hypaque. Les cellules ont été stimulées pendant 3 jours 20 avec 1 pg/mL de phytohémagglutinine P et 5 Ul/mL d'interleukine-2 humaine recombinante. Pour évaluer l'activité antirétrovirale, les produits ont été placés dans un puits contenant 100 pL de cellules mononucléées activées 24 heures avant ou 15 min après l'infection des cellules avec la souche HIV-1-LAI à la dose de 100 25 TCID50 (50 pL d'inoculum de la souche HIV-1-LAI). Avant l'addition à un puits, ULD Ab IFN-a+ IFN-y+CD4+CD8 (12,5 pL) ou l'azidotimidine de référence (1000 nM) ont été mélangées avec du milieu RPMI1640 (DIFCO) pour obtenir un volume d'échantillon final de 50 pL. Les fluides surnageants ont été recueillis le jour 7 après l'infection des 30 cellules. L'activité des produits a été mesurée par l'inhibition de la réplication de VIH qui a été évaluée par le niveau de protéine de nucléocapside p24 dans le fluide surnageant provenant de cellules mononucléées de sang périphérique humain avec le kit Elisa Retrotek. Il a été montré que ULD Ab IFN-a+ IFN-yy CD4+CD8 inhibait la réplication de VIH de 94 + 6 % quand elle était ajoutée à un puits 24 heures avant l'infection, et de 46 ± 13 % quand elle était ajoutée à un puits 15 min après l'infection de cellules avec la souche HIV-1 LAI. L'azidotimidine à une dose de 1000 nM inhibait la réplication de VIH de 99 ± 0 et 99 ± 1 % ajoutée à un puits 24 heures avant et 15 min après l'infection des cellules avec la souche HIV-1 LAI, respectivement.

Ainsi, ce modèle expérimental démontrait l'activité antirétrovirale de doses ultra-basses d'anticorps polyclonaux de lapin dirigés contre ULD Ab IFN-a+ IFN-y+CD4+CD8 (un mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50).

Exemple 6 L'évaluation de l'efficacité de l'utilisation combinée de doses ultra-basses d'anticorps dirigés contre l'interféron alpha (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelées dans la suite ULD AB contre IFNalpha) et de doses ultra-basses d'anticorps dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelées dans la suite ULD AB contre CD4) et d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 séparément dans le contexte d'une infection grippale sur des souris femelles de la lignée Balb/c a été réalisée sur la base de FSBI "SRI of influenza" Ministry of health of social development of Russia (Saint Petersburg) en deux stades. Dans le premier stade, l'efficacité d'ULD AB contre l'IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 a été évaluée, dans le second stade l'efficacité de l'utilisation combinée d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 (dans le rapport 1:1) (appelée dans la suite médicament d'association) a été évaluée. Pendant le test du médicament d'association et pendant le test d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4, l'oseltamivir a été utilisé comme médicament comparatif.

Le processus infectieux a été simulé par l'introduction intranasale du virus grippal A/California/07/2009swl (HI NI) à une dose de 1OLD50.

ULD AB contre IFNalpha, ULD AB contre CD4 et le médicament d'association ont été introduits par voie intragastrique dans des souris (n=20 dans chaque groupe) à raison de 0,2 mUsouris deux fois par jour (dose journalière 0,4 mi/souris) pendant 5 jours avant l'infection et pendant 10 jours après l'infection. En outre, ULD AB contre IFNalpha, ULD AB contre CD4 et le médicament d'association ont été ajoutés à des récipients de boisson d'animaux de groupes expérimentaux correspondants (un accès libre était autorisé). Le médicament de référence oseltamivir a été introduit par voie intragastrique dans des souris (n=20) deux fois par jour à une dose de 10 mg/kg (dose journalière 20 mg/kg) à partir de 1 heure avant l'infection. L'oseltamivir a été introduit pendant 5 jours après l'infection. Pendant 4 jours avant l'infection et à partir de 6 jours après l'infection, de l'eau distillée à une dose de 0,2 ml/souris deux fois par jour (dose journalière 0,4 ml/souris) a été introduite par voie intragastrique à la place de l'oseltamivir dans les souris de ce groupe expérimental. De l'eau distillée a été introduite par voie intragastrique dans les souris du groupe témoin (n=20) deux fois par jour à une dose de 0,2 ml/souris (dose journalière 0,4 ml/souris). Pendant toute la période expérimentale, les récipients de boisson d'animaux de ces deux groupes expérimentaux contenaient de l'eau distillée (un accès libre était autorisé).

L'efficacité des médicaments a été évaluée par le taux de survie des animaux. Les résultats de l'étude de l'activité antivirale d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 (stade 1) voir le tableau 6, les résultats de l'étude de l'activité antivirale du médicament d'association (stade 2) voir le tableau 7. La signification statistique des différences entre les groupes expérimentaux et le témoin (eau distillée) a été calculée en utilisant un critère chi-carré non paramétrique.

Tableau 6 Activité antivirale d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 dans le modèle d'infection grippale sur des souris Balb/c femelles infectées par introduction intranasale du virus grippal A/California/ 07/2009sw1 (H1 Ni) à une 5 dose de 10LD50 (10è' jour après l'infection). No. Groupe expérimental Survie, % Différence entre le % de survie _ dans le groupe qui a reçu le médicament et le °l° de survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée 10LD50 1 ULD AB contre 25 +5% IFNalpha 2. ULD AB contre CD4 30 +10% 3. Oseltamivir 80* +60% 4. Eau distillée 20 - * - p < 0,05 par rapport au témoin

Tableau 7 Activité antivirale du médicament d'association contenant ULD AB contre IFNalpha et ULD AB contre CD4 dans le modèle d'infection grippale sur des souris Balb/c 10 femelles infectées par introduction intranasale du virus grippal A/California/ 07/2009sw1(HI Ni) à une dose de 10LD50 (10ème jour après l'infection). No. Groupe expérimental Survie, % Différence entre le % de survie dans le groupe qui a reçu le médicament et le % de survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée 10LD50 1. Médicament 30* +25% d'association (ULD AB contre IFNalpha + ULD AB contre CD4 dans le rapport 1:1) 2. Oseltamivir 70* +65% 3. Eau distillée 5 - * - p < 0,05 par rapport au témoin.

Il est montré que la survie de souris infectées avec la grippe A/California/07/2009sw1 (H1 N1) à une dose de 10LD50 était plus élevée au stade 15 1 qu'au stade 2 : la survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée était 20 % et 5 % respectivement ; la survie dans le groupe du médicament comparatif oseltamivir était 80 % et 70 % respectivement. C'est le signe d'un effet létal plus exprimé induit par l'introduction intranasale du virus grippal A/California/07/2009swl (H1 N1) à une dose de 1OLD50, au stade 2 de l'étude. Cependant, le médicament d'association augmentait de 25 % la survie des animaux d'expérience infectés avec le virus grippal A/California/07/2009swl (H 1 N 1) à une dose de 10LD50 par rapport au témoin. Tandis que la survie dans le groupe qui a reçu ULD AB contre IFNalpha était supérieure de seulement 5 % à la survie dans le groupe témoin, et le taux de survie dans le groupe qui a reçu ULD AB contre CD4 était supérieur de 10 % seulement à la survie dans le groupe témoin.

Concernant le résultat de l'étude réalisée, il a été montré que l'utilisation combinée d'ULD AB contre IFNalpha et ULD AB contre CD4 (médicament d'association) fournit un effet antiviral plus prononcé que les composants séparés, malgré le fait que la dose d'ULD AB contre IFNalpha et ULD AB contre CD4 dans le cadre du médicament d'association soit deux fois plus basse que la dose d'ULD AB contre IFNalpha et d'ULD AB contre CD4 testées comme médicaments séparés. Exemple 7. L'évaluation de l'efficacité de l'utilisation combinée de doses ultra- basses d'anticorps dirigés contre le facteur alpha de nécrose des tumeurs (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelées dans la suite ULD AB contre TNFalpha) et de doses ultra-basses d'anticorps dirigés contre CD4 (mélange de dilutions homéopathiques C12+C30+C50) (appelées dans la suite ULD AB contre CD4) et d'ULD AB contre TNFalpha et d'ULD AB contre CD4 séparément dans le contexte d'une infection grippale sur des souris femelles de la lignée Balb/c a été réalisée sur la base de FSBI "SRI of influenza" Ministry of health of social development of Russia (Saint Petersburg) en deux stades. Dans le premier stade, l'efficacité d'ULD Ab contre TNFalpha et d'ULD Ab contre CD4 a été évaluée, dans le second stade l'efficacité de l'utilisation combinée d'ULD AB contre TNFalpha et d'ULD AB contre CD4 (dans le rapport 1:1) (appelée dans la suite médicament d'association) a été évaluée. Pendant le test du médicament d'association et pendant le test d'ULD AB contre TNFalpha et d'ULD AB contre CD4, l'oseltamivir a été utilisé comme médicament comparatif. Le processus infectieux a été simulé par l'introduction intranasale du virus grippal A/California/07/2009swl (Hl N1) à une dose de 1 OLD50.

ULD Ab contre TNFalpha, ULD Ab contre CD4 et le médicament d'association ont été introduits par voie intragastrique dans des souris (n=20 dans chaque groupe) à raison de 0,2 mUsouris deux fois par jour (dose journalière 0,4 ml/souris) pendant 5 jours avant l'infection et pendant 10 jours après l'infection. En outre, ULD AB contre TNFalpha, ULD AB contre CD4 et le médicament d'association ont été ajoutés à des récipients de boisson d'animaux de groupes expérimentaux correspondants (un accès libre était autorisé). Le médicament de référence oseltamivir a été. introduit par voie intragastrique dans des souris (n=20) deux fois par jour à une dose de 10 mg/kg (dose journalière 20 mg/kg) à partir de 1 heure avant l'infection. L'oseltamivir a été introduit pendant 5 jours après l'infection. Pendant 4 jours avant l'infection et à partir de 6 jours après l'infection, de l'eau distillée à une dose de 0,2 ml/souris deux fois par jour (dose journalière 0,4 ml/souris) a été introduite par voie intragastrique à la place de l'oseltamivir dans les souris de ce groupe expérimental. De l'eau distillée a été introduite par voie intragastrique dans les souris du groupe témoin (n=20) deux fois par jour à une dose de 0,2 mi/souris (dose journalière 0,4 ml/souris). Pendant toute la période expérimentale, les récipients de boisson d'animaux de ces deux groupes expérimentaux contenaient de l'eau distillée (un accès libre était autorisé). L'efficacité des médicaments a été évaluée par le taux de survie des animaux. Les résultats de l'étude de l'activité antivirale d'ULD Ab contre TNFalpha et d'ULD Ab contre CD4 (stade 1) voir le tableau 1, les résultats de l'étude de l'activité antivirale du médicament d'association (stade 2) voir le tableau 2. La signification statistique des différences entre les groupes expérimentaux et le témoin (eau distillée) a été calculée en utilisant un critère chi-carré non paramétrique.

Tableau 8. Activité antivirale d'ULD Ab contre TNFalpha et d'ULD Ab contre CD4 dans le modèle d'infection grippale sur des souris Balb/c femelles infectées par introduction intranasale du virus grippal A/California/ 07/2009swi (H1 Ni) à une 5 dose de 10LD50 (108me jour après l'infection). No. Groupe expérimental Survie, % Différence entre le % de survie dans le groupe qui a reçu le médicament et le % de survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée 10LD50 1 ULD Ab contre 25 +5% TNFalpha 2. ULD Ab contre CD4 30 +10% 3. Oseltamivir 80* +60% 4. Eau distillée 20 - - p < 0,05 par rapport au témoin

Tableau 9. Activité antivirale du médicament d'association contenant ULD Ab contre TNFalpha et ULD Ab contre CD4 dans le modèle d'infection grippale sur des 10 souris Balb/c femelles infectées par introduction intranasale du virus grippal A/California/ 07/2009sw1(HlN1) à une dose de 10LD50 (10è' jour après l'infection). No. Groupe expérimental Survie, % Différence entre le % de survie dans le groupe qui a reçu le médicament et le % de survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée 10LD50 1 Médicament 30* +25% d'association (ULD Ab contre TNFalpha + ULD Ab contre CD4 dans le rapport 1:1) 2. Oseltamivir 70* +65% 3. Eau distillée 5 _ < 0,05 par rapport au témoin.

Il est montré que la survie de souris infectées avec la grippe A/California/07/2009swl (H1N1) à une dose de 10LD50 était plus élevée au stade 1 qu'au stade 2 : la survie dans le groupe qui a reçu de l'eau distillée était 20 % et 5 % respectivement ; la survie dans le groupe du médicament comparatif oseltamivir était 80 % et 70 % respectivement. C'est le signe d'un effet létal plus exprimé induit par l'introduction intranasale du virus grippai A/California/07/2009sw1 (H1 N1) à une dose de 10LD50, au stade 2 de l'étude. Cependant, le médicament d'association augmentait de 25 % la survie des animaux d'expérience infectés avec le virus grippal A/California/07/2009swl (H1N1) à une dose de 10LD50 par rapport au témoin. Tandis que la survie dans le groupe qui a reçu ULD Ab contre TNFalpha était supérieure de seulement 5 % à la survie dans le groupe témoin, et le taux de survie dans le groupe qui a reçu ULD Ab contre CD4 était supérieur de 10 % seulement à la survie dans le groupe témoin.

Concernant le résultat de l'étude réalisée, il a été montré que l'utilisation combinée d'ULD Ab contre TNFalpha et d'ULD Ab contre CD4 (médicament d'association) fournit un effet antiviral plus prononcé que les composants séparés, malgré le fait que la dose d'ULD Ab contre TNFalpha et ULD Ab contre CD4 dans le cadre du médicament d'association soit deux fois plus basse que la dose d'ULD Ab contre TNFalpha et d'ULD Ab contre CD4 testées comme médicaments séparés. Exemple 8. Une composition pharmaceutique (comprimés) contenant une forme activée-potentialisée de doses ultra-basses (ULD) d'anticorps dirigés contre l'interféron gamma (Ab IFNgamma), d'anticorps dirigés contre CD4 (Ab CD4), d'anticorps dirigés contre l'histamine (Ab His), imprégnant le lactose sous forme de solution aqueuse alcoolique de mélange de dilutions homéopathiques C12, C30, C200 de chacun (Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab contre His) a été utilisée dans l'étude. Dans l'étude contre placebo en double insu réalisée actuellement, des hommes et des femmes âgés de 18-60 ans ayant des URI virales accompagnées d'intoxication, de signes de catarrhe sont engagés. Les patients ayant une température corporelle de 37,8°C et plus (à condition que la température soit mesurée au déclenchement de la maladie), la durée de la maladie ne dépassant pas 48 heures au moment du déclenchement de la thérapie, n'ayant pas de complications graves ont été inclus dans l'étude. Un test express pour détecter des antigènes du virus de la grippe a été réalisé. Les patients ayant des résultats du test positifs n'étaient pas inclus dans l'étude. Avant le début de tous les processus, les patients ont signé un consentement informé pour participer à l'étude. Les patients ont reçu des agendas dans lesquels la température corporelle, la thérapie concomitante, etc., étaient notées deux fois par jour. Les patients ont reçu Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His ou le placebo à une dose de 8 comprimés par jour le jour 1 et à une dose de 3 comprimés par jour les jours 2-5. Si nécessaire, les patients ont été autorisés à prendre des antipyrétiques. La prise d'antiviraux, d'immunomodulateurs, d'antihistaminiques et d'antibiotiques n'est pas autorisée.

Avant de commencer la thérapie et lors de la dernière visite, des échantillons de sang et d'urine sont recueillis pour évaluer les paramètres du laboratoire destinés à suivre l'innocuité de la thérapie réalisée. La durée totale de la thérapie est 5 jours, la durée de la période d'observation de suivi est 2 jours. Ainsi, la durée de la participation de chaque patient à l'étude est 7 jours.

Le temps pour réduire la température corporelle à 37,0°C et plus bas était considéré comme le critère d'efficacité de la thérapie ; en outre, le nombre de prises d'antipyrétiques a été comparé. Lorsque l'analyse a été réalisée, 78 patients ont terminé la thérapie (40 patients ont reçu Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His, 38 patients ont reçu le placebo). La proportion de patients dont la température corporelle était réduite à 37,0°C et plus bas est représentée sur la figure 1. La figure montre que l'administration de AB IFNgamma + Ab CD4 + Ab His à la fin du jour 2 à partir du déclenchement de la thérapie conduisait à une réduction de 17,4 % de la température corporelle des patients par comparaison avec le groupe du placebo (p<0,05). Ainsi, le nombre de prises d'antipyrétiques dans les groupes était sensiblement plus bas que dans le groupe anti-Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His (3,5 ± 0,25 prises d'antipyrétiques à la fin du jour 2 du traitement contre 3,9 ± 0,32 dans le groupe du placebo, p<0,05). La supériorité de Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His par rapport au groupe du placebo a été observée aussi précocement que le matin du jour 2 du traitement et s'est maintenue pendant toute la période de la thérapie. Les données des 78 patients impliqués dans l'étude et ayant terminé le traitement dans les délais ont été incluses dans l'analyse d'innocuité ; aucun retrait de patients n'a été noté. Une bonne tolérabilité du médicament a été observée pendant toute la période d'observation. Aucun effet indésirable lié à l'administration d'Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His n'a été noté. Les tests sanguins réalisés au déclenchement du traitement et à la fin de celui-ci ne montraient aucun écart pathologique par rapport à la norme. L'analyse d'urine réalisée le jour 1 et le dernier jour de l'étude ne révélait aucun changement pathologique chez aucun des patients. Quand on compare les données avec les résultats obtenus pendant l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint-Petersburg, 2005), il apparaît que Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His réduit la température corporelle plus efficacement que Ab IFNgamma (figure 1, tableau 10 et tableau 11). Tableau 10. Proportion de patients ayant une température corporelle réduite à 37,0°C et plus bas sur le fond de l'administration de Ab IFNgamma + Ab CD4 +Ab Mis /placebo Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour Jour 7, 1, 1, 2, 2, 3, 3, 4, 4, 5, 5, 6, 6, matin matin soir matin soir matin soir matin soir matin soir matin soir o w .o Nombre total de patients 40 40 40 40 40 40 _40 40 40 40 40 40 40 Q ç E a+ c Nombre de patients ayant 19 20 24 28 27 30 31 33 36 38 40 40 40 + .o 3 1i une température normale 0 Ç + uu.. Proportion de patients ayant 47,5 50,0 60,0 70,0 67,5 75,0 77,5 82,5 90,0 95,0 100,0 100,0 100,0 < v une température normale, % .o <0< +± Nombre total de patients 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 38 2 0 Nombre de patients ayant 18 17 19 20 23 24 27 24 29 30 33 37 38 une température normale Proportion de patients ayant 47'4 44,7 50,0 52,6 60,5 63,2 71,1 63,2 76,3 78,9 86,8 97,4 100,0 7 une température normale, % Nombre total de patients 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 E Nombre de patients ayant 0 3 14 12 18 19 25 29 29 30 29 30 29 E c ch une température normale LL c Proportion de patients ayant 0 10,0 46,7 40,0 60,0 63,3 83,3 96,7 96,7 100 96,7 100 96,7 a - * " une température normale, 0/0 Nombre total de patients 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 u o Nombre de patients ayant 0 0 10 7 16 15 28 28 28 30 30 30 30 une température normale `;; Proportion de patients ayant 0 0 33,3 23,3 53,3 50,0 93,3 93,3 93,3 100 100 100 100 a = une température normale, * Selon les résultats de l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint- Petersburg, 2005) Tableau 11. Valeurs moyennes de la température corporelle chez les patients selon les groupes de traitement, 4C, M ± ET Jour 1, Jour 1, Jour 2, Jour 2, Jour Jour 3, Jour 4, Jour 4, Jour 5, Jour 5, Jour 6, Jour 6, Jour 7, matin soir matin soir matin soir matin soir matin soir matin soir matin CU ,0 Éa0 37,5±0 37,7t 37,2± 37,1± 36,8± 36,8± 36,7± 36,6±0, 36,6±0, 36,6±0 36,6± 36,6± 36,6± z 54 0,56 0,67 0,53 0,43 0,49 0,31 33 25 ,23 0,22 0,15 0,18 £ Q = Q t 0 37,6±0 37,6± 37,2± 37,1± 36,9± 36,9± 36,8± 36,71-0, 36,6±0, 36,61-0 36,6± 36,5± 36,5± ,71 0,63 0,48 0,49 0,41 0,36 0,49 37 32 ,21 0,28 0,18 0,18 o_ ,0 as il ` 38,1±0 38,0± 37,4± 37,3± 37,1± 37,0± 36,8± 36,6±0, 36,6±0, 36,5±0 36,6± 36,6± 36,6± ,62 0,58 0,80 0,61 0,50 0,47 0,35 32 21 ,26 0,21 0,26 0,26 LLCI 0 a M 38,0±0 38,0± 37,4± 37,4± 37,0± 37,0± 36,8± 36,61-0, 36,6±0, 36,6±5 36,6± 36,5± 36,6± â Ç ,48 0,50 0,60 0,47 0,37 0,42 0,23 34 28 ,42 0,21 0,24 0,18 * Selon les résultats de l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint- Petersburg, 2005) Exempte 9. Une composition pharmaceutique (comprimés) contenant des formes activées-potentialisées de doses ultra-basses (ULD) d'anticorps dirigés contre l'interféron gamma (Ab IFNgamma), d'anticorps dirigés contre CD4 (Ab CD4), d'anticorps dirigés contre l'histamine (Ab His), imprégnant le lactose sous forme de solution aqueuse alcoolique de mélange de dilutions homéopathiques C12, C30, C200 de chacun (Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab contre His) a été utilisée dans l'étude. Dans l'étude clinique contrôlée comparative à marqueur ouvert de Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His et de Tamiflu® (F. Hoffmann-La Roche Ltd - Suisse, Oseltamivir) l'étude étant réalisée actuellement, des hommes et des femmes âgés de 18-60 ans ayant une grippe accompagnée d'intoxication, de signes de catarrhe sont engagés. Les patients ayant une température corporelle de 37,8°C et plus (à condition que la température soit mesurée au déclenchement de la maladie), la durée de la maladie ne dépassant pas 48 heures au moment du déclenchement de la thérapie, n'ayant pas de complications graves ont été inclus dans l'étude. Un test express pour détecter des antigènes du virus de la grippe a été réalisé. Les patients ayant des résultats du test positifs étaient inclus dans l'étude. Avant le début de tous les processus, les patients ont signé un consentement éclairé pour participer à l'étude. Les patients ont reçu des agendas dans lesquels la température corporelle, la thérapie concomitante, etc., étaient notées deux fois par jour. Les patients ont reçu Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His à une dose de 8 comprimés par jour le jour 1 et à une dose de 3 comprimés par jour les jours 2-5 ou le Tamiflu à une dose de 75 mg 2 TID selon la feuille d'information du patient. Si nécessaire, les patients ont été autorisés à prendre des antipyrétiques. La prise d'antiviraux, d'immunomodulateurs, d'antihistaminiques et d'antibiotiques n'est pas autorisée. Avant de commencer la thérapie et lors de la dernière visite, des échantillons de sang et d'urine sont recueillis pour évaluer les paramètres du laboratoire destinés à suivre l'innocuité de la thérapie réalisée. La durée totale de la thérapie est 5 jours, la durée de la période d'observation de suivi est 2 jours. Ainsi, la durée de la participation de chaque patient à l'étude est 7 jours.

Le temps pour réduire la température corporelle à 37,0°C et plus bas était considéré comme le critère d'efficacité de la thérapie ; en outre, le nombre de 35 prises d'antipyrétiques a été comparé. Lorsque l'analyse a été réalisée, 17 patients ont terminé la thérapie (6 patients dans le groupe de Ab lFNgamma + Ab CD4 + Ab His et 11 patients dans le groupe de l'Oseltamivir). La proportion de patients dont la température corporelle était réduite à 37,0°C et 40 plus bas dans les groupes ne différait pas sensiblement au cours de la thérapie. Aussi précocement que le jour 4 du traitement, les patients des deux groupes étaient pratiquement guéris (voir figure 2). Aussi précocement que le jour 2 du traitement, chez 1/3 des patients des deux groupes, une normalisation de la température corporelle était notée. La différence dans le nombre moyen de prises 45 d'antipyrétiques n'était pas significative non plus et le matin du jour 4 de la thérapie il était 7,6 ± 0,8 dans le groupe recevant Ab lFNgamma + Ab CD4 + Ab His et 7,4 ± 0,90 dans le groupe de l'Oseltamivir, respectivement. Les données des 17 patients impliqués dans l'étude et ayant terminé le traitement dans les délais ont été incluses dans l'analyse d'innocuité ; aucun retrait 50 de patients n'a été noté. Une bonne tolérabilité du médicament a été observée pendant toute la période d'observation. Aucun effet indésirable lié à l'administration d'Ab lFNgamma + Ab CD4 + Ab His n'a été noté. Les tests sanguins réalisés au déclenchement du traitement et à la fin de celui-ci ne montraient aucun écart pathologique par rapport à la norme. L'analyse d'urine 55 réalisée le jour 1 et le dernier jour de l'étude ne révélait aucun changement pathologique chez aucun des patients. Quand on compare les données avec les résultats obtenus pendant l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab lFNgamma dans la grippe et d'autres URI 60 virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint-Petersburg, 2005), il apparaît que Ab lFNgamma + Ab CD4 + Ab His réduit la température corporelle plus efficacement que Ab lFNgamma (figure 2, tableau 12 et tableau 13). Tableau 12. Proportion de patients ayant une température corporelle réduite à 37,0°C et plus bas sur le fond de l'administration de Ab IFNgamma + Ab CD4 +Ab His/Oseltamivir Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, jour 1 jour 1 jour 2 jour 2 jour 3 jour 3 jour 4 jour 4 jour 5 jour 5 jour 6 jour 6 jour 7 jour 7 jour 8 Nombre total de 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 5 5 4 4 N/A Q co patients + Nombre de patients É ç ayant une 0 0 2 3 4 4 6 5 6 6 5 5 4 4 N/A E = température normale ô) Proportion de 0 0 33,3 50,0 66,7 66,7 100,0 83,3 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 N/A LI. + patients ayant une température normale, â Û /o Nombre total de 11 11 11 11 11 11 11 10 10 10 9 7 5 4 3 patients Nombre de patients 0 1 4 5 5 6 10 8 9 9 9 7 5 4 3 ayant une température normale 'È" Proportion de 0 9,1 36,4 45,5 45,5 54,5 90,9 80,0 90,0 90,0 100,0 100,0 100,0 100,0 100,0 patients ayant une O température normale, % o Nombre total de 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 patients e. Nombre de patients 0 3 14 12 18 19 25 29 29 30 29 30 29 30 30 cd ayant une E température normale c, Proportion de 0 10,0 46,7 40,0 60,0 63,3 83,3 96,7 96,7 100 96,7 100 96,7 100 100 patients ayant une < température normale, Matin, Soir, Matin, Soir, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, Soir, Matin, jour 1 jour 1 jour 2 jour 2 jour 3 jour 4 jour 4 jour 5 jour 5 jour 6 jour 6 jour 7 jour 7 jour 8 Nombre total de 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 30 patients o Nombre de patients Ç ayant une 0 0 10 7 16 15 28 28 28 30 30 30 30 30 30 température normale Proportion de patients 0 ayant une 0 0 33,3 23,3 53,3 50,0 93,3 93,3 93,3 100 100 100 100 100 100 s température normale, ~- % * Selon les résultats de l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint- Petersburg, 2005) Tableau 13. Valeurs moyennes de la température corporelle chez les patients selon les groupes de traitement, 2C, M ± ET Matin Soir, Matin Soir, Matin Soir, Matin Soir, Matin Soir, Matin Soir, Matin Soir, Matin jour 2 jour 2 jour 3 jour 3 jour 4 jour 4 jour 5 jour 5 jour 6 jour 6 jour 7 jour 7 jour 8 jour 1, jour 1 ++vs 38,5 38,1 37,2 37,2 36,5 36,8 36,5 36,6 36,5 36,6 36,4 36,5 36,4 36,5 E E E E Q Q,vrn+ ± t t t t t t t t t t t t ± ND tL,z Û 0,49 0,62 1,01 0,67 0,61 0,47 0,37 0,46 0,26 0,28 0,35 0,20 0,26 0,22 -~ 38,1 37,3 37,3 36,9 36,9 36,7 36,8 36,5 36,7 36,5 36,6 36,3 36,5 36,6 36,5 0,82 0,71 0,72 0,53 0,47 0,46 0,37 0,38 0,25 0,21 0,21 0,19 0,10 0,12 0,14 O - as 38,1 38,0 37,4 37,3 37,1 37,0 36,8 36,6 36,6 36,5 36,6 36,6 36,6 36,5 36,5 E o) 0,62 0,58 0,80 0,61 0,50 0,47 0,35 0,32 0,21 0,26 0,21 0,26 0,26 0,27 0,23 z o Q M o 38,0 38,0 37,4 37,4 37,0 37,0 36,8 36,6 36,6 36,6 36,6 36,5 36,6 36,5 36,4 a) cl) 0,48 0,50 0,60 0,47 0,37 0,42 0,23 0,34 0,28 5,42 0,21 0,24 0,18 0,19 0,21 * Selon les résultats de l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales réalisée en 2005 (Influenza RI, RAMS, Saint- Petersburg, 2005) Exemple 10. Une composition pharmaceutique (comprimés) contenant des formes activées-potentialisées de doses ultra-basses (ULD) d'anticorps contre l'interféron gamma (Ab IFNgamma), d'anticorps contre CD4 (Ab contre CD4), d'anticorps contre l'histamine (Ab contre His), imprégnant le lactose sous forme d'un mélange aqueux alcoolique de dilutions homéopathiques C12, C30, C200 de chacun (Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His) a été utilisée dans l'étude. Dans la présente étude contre placebo en double insu de l'efficacité et de l'innocuité de Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His dans des URI virales (exemple 8) et dans la présente étude comparative à marqueur ouvert de l'efficacité et de l'innocuité de Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His dans la grippe (exemple 9), le nombre de complications incluant les complications bactériennes (pneumonie bactérienne, trachéite, otite, glomérulonéphrite, etc.) développées sur le fond d'un processus infectieux aigu a été évalué aussi.

Si le système de défense de l'organisme fonctionne de manière appropriée, un processus infectieux peut être arrêté ou localisé, de sorte qu'il ne conduit pas au développement de symptômes cliniques évidents, c'est-à-dire qu'une réaction de défense adéquate provoque une inactivation rapide de l'agent infectieux, un rétablissement des fonctions dégradées de l'organisme et la guérison. Une situation différente peut être observée chez les sujets très sensibles à un agent infectieux et dépourvus du mécanisme approprié de défense spécifique et non spécifique (patients immunocompromis). Dans de tels cas, des agents infectieux répliqués de manière croissante et les produits de leur interaction avec les cellules épithéliales et les cellules immunitaires ainsi que des cellules endommagées pénètrent dans le sang en provoquant le développement d'une évolution grave de la maladie, le développement de complications et une issue médiocre potentielle. L'utilisation d'Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His dans la grippe et les URI virales provoquait une réduction considérable de la fréquence des complications bactériennes par rapport au placebo (tableau 14) et donc à une réduction de la thérapie antibactérienne. Il semble que le médicament inhibe le développement d'un déficit immunitaire secondaire au stade de guérison, en exerçant un effet immunomodulateur et en augméntant la défense naturelle de l'organisme. L'aptitude de Ab IFNgamma + Ab CD4 + Ab His à réduire la fréquence du développement de complications bactériennes dépassait celle de Ab IFNgamma.

Tableau 14. Fréquence des complications bactériennes Médicament Nombre Complications bactériennes de patients Otite Trachéite Pneumonie Total n/% n/% n/% n/% Ab IFNgamma + Ab 40 0/0 1/2,5 0 / 0 1 / 2,5 CD4 +Ab His (URI virales) Placebo (URI virales) 38 3 / 7,9 7 / 18,4 0/0 10 / 26,3 Ab IFNgamma +Ab 6 0/0 0/0 0/0 0/0 CD4 +Ab His (grippe) Oseltamivir (grippe) 11 0 / 0 2 / 18,2 1 / 9,1 3 /27,2 Ab IFNgamma (grippe 30 1 / 3,3 2 / 6,7 0/0 3 / 10,0 et URI virales) * Placebo (grippe et 30 4 / 13,3 5 / 16,7 0 / 0 9 / 30 URI virales)* * Selon les résultats de l'étude randomisée contre placebo en double insu de l'efficacité clinique et de l'innocuité de l'administration de Ab IFNgamma dans la grippe et d'autres URI virales (Influenza RI, RAMS, Saint-Petersburg, 2005). Exemple 11. Pour étudier l'activité de compositions pharmaceutiques pour le traitement des patients du groupe n° 1, des comprimés de 300 mg imprégnés d'une composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses-alcooliques (6 mg/comprimé) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifié par affinité contre l'interféron gamma humain (anti-lFN-y) et CD4 (anti- CD4) à des doses ultra-basses (ULD) obtenues par ultra dilution d'une solution de matrice initiale 10012, 10030, 10050 fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C200 ont été utilisés; pour le traitement des patients du groupe n° 2, 300 mg imprégnés d'une composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses-alcooliques (6 mg/comprimé) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité dirigés contre l'interféron gamma humain (anti-IFN-y) et contre CD4 (anti- CD4) et l'histamine (anti-His) à des doses ultra-basses (ULD) obtenues par ultra dilution d'une solution de matrice initiale 10072, 10030, 10050 fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C200 ont été utilisés ; pour le traitement de patients du groupe n° 3, des comprimés de 300 mg imprégnés de composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses- alcooliques (3 mg/comprimé) de forme activée-potentialisée d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité contre l'interféron gamma humin (anti-IFN-'y) à des doses ultra-basses (ULD) obtenues par ultra dilution de solution de matrice initiale 10012, 10030, 10050 fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 ont été utilisés.

L'activité antirétrovirale de compositions pharmaceutiques ULD anti-IFNI, + anti-CD4 et ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His a été évaluée au cours de l'essai clinique comparatif à marqueur ouvert avec la participation des patients infectés avec le virus d'immunodéficience humaine (VIH) au centre local pour la prévention et la lutte contre le SIDA et les maladies infectieuses. L'étude incluait 97 patients (65 hommes et 32 femmes) âgés de 18-48 ans, avec une charge virale d'ARN de VIH-1 > 150 copies/ml dans le plasma sanguin et des nombres de lymphocytes CD-4 > 250 cellules/pl (ou > 0,25 x 109/I). Trente-quatre participants parmi 97 participants à l'étude étaient des patients naïfs pour le traitement. Soixante-trois patients parmi 97 ont reçu une thérapie antirétrovirale (ART) pendant un ou deux ans. Les patients ayant une cirrhose du foie, une hépatite virale C, de graves maladies concomitantes dans la période d'exacerbation, les femmes enceintes, ainsi que ceux prenant des substances narcotiques par voie intraveineuse n'étaient pas inclus dans l'étude. L'essai a été réalisé pendant la période d'automne et d'hiver quand l'augmentation saisonnière de la grippe et des infections virales respiratoires aiguës est commune. Soixante-quinze participants à l'étude ont été randomisés en trois groupes auxquels ont été prescrites les compositions pharmaceutiques de l'étude (groupes n° 1 et n° ?) ou une composition pharmaceutique de référence (groupe n° 3) dans un schéma correspondant à la prophylaxie ARVI - 1 comprimé une fois par jour pendant 6 semaines : - les patients du groupe n° 1 (n=25) se sont vus prescrire ULD anti-IFN-y+ anti-CD4 (sous-groupe 1A : patients naïfs pour le traitement, n=12) ou se sont vus prescrire ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + ART (sous-groupe 1B, n=13) ; - les patients du groupe n° 2 (n=23) se sont vus prescrire ULD anti- IFN-y+ anti-CD4 + anti-His (sous-groupe 2A : patients naïfs pour le traitement, n=11) ou se sont vus prescrire ULD anti-IFN-y + anti- CD4 + anti-His + ART (sous-groupe 2B, n=12) ; - les patients du groupe n° 3 (n=27) se sont vus prescrire ULD anti-IFN-y (sous-groupe 3A : patients naïfs pour le traitement, n=11) ou se sont vus prescrire ULD anti-IFN-y + ART (sous-groupe 3B, n=16). 15 Le groupe témoin (groupe n° 4, n=22) incluait des patients qui ont continué à recevoir une ART seule selon la prescription précédente (groupe ART). A une ligne de base et après une thérapie de 6 semaines, la charge virale, les nombres de lymphocytes CD4 et CD8, l'indice immunorégulateur CD4/CD8 ont été testés chez tous les patients. Pour détecter des copies d'ARN de 20 VIH-1 dans le plasma sanguin, le kit COBAS AMPLICOR HIV-1 MONITOR Kit (version 1,5 pour l'analyseur PCR automatique COBAS AMPLICOR, Roche, Suisse) a été utilisé. Le phénotypage des lymphocytes circulant dans le sang périphérique a été réalisé sur un cytofluorimètre de flux FACSCount (Becton Dickinson, USA) avec le kit FACSCount Reagent Kit, qui contient des anticorps 25 contre CD3, CD4, CD8 marqués avec le fluorochrome FITC PE. Les données sur la charge virale (le nombre de copies d'ARN de VHC) présentées dans le tableau 15 comme médiane (Me) et la plage entre les premier et troisième quartiles [Q1-Q3]. Les résultats de l'étude indiquent qu'un traitement de 6 semaines avec ULD anti-IFN-y + anti-CD4 diminuait le nombre de copies 30 d'ARN de VIH-1 chez 58 % des patients naïfs pour le traitement (chez 7 personnes parmi 12 du sous-groupe 1A), la diminution moyenne de la charge virale était 16,9 %. L'association ULD anti-IFN-y + anti-CD4 et ART présentait une efficacité 10 comparable, le nombre de copies d'ARN de VIH-1 diminuait chez 62 % des patients (chez 8 personnes parmi 13 dans le sous-groupe 1 B), et la diminution moyenne de la charge virale par rapport à la ligne de base était 18,2 %. Des résultats similaires ont été obtenus chez les patients recevant ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His : une activité antivirale était notée chez 55 % des patients naïfs pour le traitement infectés avec le VIH (chez 6 personnes parmi 11 dans le sous-groupe 2A) et chez 67 % des patients recevant l'association d'ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His et ART (chez 8 personnes parmi 12 dans le sous-groupe 2B) ; la diminution moyenne de la charge virale était 17,3 % et 18,9 % respectivement.

L'activité antirétrovirale observée dans les deux premiers groupes était légèrement supérieure à l'issue du traitement dans le groupe témoin. Une monothérapie avec ULD ani-IFN-y pendant 6 semaines diminuait le nombre de copies d'ARN de VIH-1 chez 36 % des patients naïfs pour le traitement (chez 4 personnes parmi 11 dans le sous-groupe 3A), la diminution moyenne de la charge virale était 9,5 %.

L'association d'ULD anti-IFN-y et ART améliorait l'efficacité de la thérapie : la diminution de la charge virale était notée chez 50 % des patients (chez 8 personnes parmi 16 dans le sous-groupe 3B), la diminution moyenne de la charge virale était 14,2 %. Chez les patients prenant seulement ART (groupe n° 4), la diminution de la charge virale a été détectée chez 32 % des patients (chez 7 patients parmi 22) et une diminution moyenne de la charge virale de 13,3 %. Une évaluation des sous-populations de lymphocytes circulants pendant l'étude (tableau 16) révélait une augmentation plus prononcée par rapport à l'augmentation dans le groupe témoin du nombre de lymphocytes CD4 après 6 semaines de thérapie dans ULD anti-IFN-y + anti-CD4, ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His et ULD anti-IFN-y sous forme de monothérapie chez les patients naïfs pour le traitement (groupes 1A, 2A et 3A) ou en association avec ART (sous-groupes 1 B, 2B et 3B). Le nombre de lymphocytes CD8 après 6 semaines de thérapie (sans ou en association avec ART) restait inchangé dans tous les groupes de l'étude. La dynamique positive dans le nombre de lymphocytes CD4 au cours du traitement conduisait à une augmentation de l'indice immunorégulateur CD4/CD8, qui était la plus significative dans les sous-groupes de patients prenant ULD anti-IFN-y+ anti-CD4 et ULD anti-IFN-y+ anti-CD4 + anti-His (sans ART ou en combinaison avec ART, c'est-à-dire les groupes 1 et 2) et ULD anti-IFN-y+ ART (sous-groupe 3B).

Aucun effet indésirable lié aux médicaments n'a été noté pendant l'étude, ce qui indique leur bonne tolérance. L'absence de variations pathologiques dans l'analyse du sang et de l'urine incluant les marqueurs d'insuffisance rénale et hépatique confirmait l'innocuité du traitement.

Ainsi, la présente étude démontrait l'activité antirétrovirale de compositions pharmaceutiques ULD anti-IFN-y + anti-CD4 et ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti His, peut être à médiation par le changement dans l'activité fonctionnelle des récepteurs CD4, ce qui bloque ta pénétration de VIH dans les cellules, et aussi supprime la réplication de VIH dans la cellule du fait de l'activation de la transcription d'ARNm de protéines antivirales. II a été montré que la diminution de la charge virale à la fin de la période de 6 semaines d'ULD anti-IFN-y + anti-CD4 et d'ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His à la dose de 1 comprimé par jour était plus prononcée que celle du traitement de 6 semaines avec ULD anti-IFN-y à la même dose ou chez les patients qui continuaient à recevoir ART seule selon la prescription antérieure. L'association de médicament ULD anti-IFN-y + anti-CD4, d'ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His ou ULD anti-IFN-y avec ART augmente quelque peu l'activité antivirale de cette dernière, ce qui était révélé sous forme de diminution de la charge virale moyenne après 6 semaines dans une plus grande proportion de patients.

L'influence d'ULD anti-IFN-y + ànti-CD4 et d'ULD anti-iFN-y + anti-CD4 + anti-His sur le rapport de lymphocytes CD4/CD8 chez les patients infectés avec le VIH (du fait d'une diminution du nombre de cellules CD4) a été montrée, qui était la plus évidente quand elles étaient associées avec ART. En prenant en compte une diminutionsimultanée de la charge virale chez les patients prenant ULD anti-IFN-y + anti-CD4 et ULD anti-IFN-y + anti-CD4 + anti-His, on peut admettre que l'augmentation du nombre de cellules CD4 est associée avec un recrutement de population aux dépens des cellules saines (non infectées). L'association d'ART avec ULD anti-IFN-y + anti-CD4, ULD and-IFN-y+ anti-CD4 + anti-His ou ULD anti-IFN-y rétablit plus efficacement l'indice immunorégulateur CD4/CD8 qu'ART seule. L'activité antirétrovirale observée de compositions pharmaceutiques contenant ULD anti-IFN-y + anti-CD4 et ULD anti-iFN-y + anti-CD4 + anti-His permet de les utiliser pour le traitement et la prophylaxie d'une infection à VIH dans le traitement de patients infectés avec ViH naïfs et de patients prenant ART.

Tableau 15 Dynamique de la charge virale selon la thérapie Charge virale. copies/ml Diminution moyenne de la charge virale. % ULD anti-IFN- y + anti-CD4 (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 5769 [368-62584] 16,9 Après 6 semaines de 4575 [337-58526] traitement ART et ULD anti-IFN- y + anti-CD4 (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 5238 [385-59695] 18,2 Après 6 semaines de 4408 [320-50197] traitement ULD anti-IFN- y + anti-CD4 + anti-H (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 5638 [385-61742] 17,3 Après 6 semaines de 4754 [278-57426] traitement ART et ULD anti-IFN- y + anti-CD4 + anti-H (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 5189 [350-59798] 18,9 Après 6 semaines de 46108 [269-47987] traitement ULD anti-IFN- y (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 5813 [150-33356] 9,5 Après 6 semaines de 5786 [150-38359] traitement ART et ULD anti-IFN- y (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 4680 [274-9838] Après 6 semaines de 14,2 traitement 4652 [272-8874] ART (Me [Q 1-Q3]) Ligne de base 5547 [385-58996] Après 6 semaines de 13,3 traitement 5308 [338-57709] 84 Tableau 16 Niveau de sous-population de lymphocytes circulants chez les patients des groupa de l'étude Période d'observation CD4. cI/mcl (M ±SE) CD4 / CD8 (M ±SE) ULD anti-IFN- y + anti-CD4 (n=12) Ligne de base 516±33 0,46±0,09 Après 6 semaines de 712±24 0,58±0,07* traitement ART et ULD anti-IFN- y + anti-CD4 (n=13) Ligne de base 499±41 0,50±0,08 Après 6 semaines de 728±29 0,60±0,06* traitement ULD anti-IFN- y + anti-CD4 + anti-H (n=11) Ligne de base 509±45 0,49±0,06 Après 6 semaines de 706±27 0,58±0,08* traitement ART et ULD anti-IFN- y + anti-CD4 + anti-H (n=12) Ligne de base 521±37 0,48±0,09 Après 6 semaines de 734122 0,62±0,10* traitement ULD anti-IFN- y (n=11) Ligne de base 513 ± 98 0,38±0,19 Après 6 semaines de 563 0,44 traitement ART et ULD anti-IFN- y (n=16) Initialement 491 ± 49 0,55 Après 6 semaines de 623 0,6710,05* traitement ART (n=22) Initialement 510129 0,44±0,06 Après 6 semaines de 595 0,50 traitement * la difference est significative par rapport à la ligne de base à p<0,05 Exemple 12, Pour étudier l'activité de compositions pharmaceutiques pour le traitement des patients du groupe n° 1, des comprimés de 300 mg imprégnés de composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses-alcooliques (6 mg/comprimé) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité dirigés contre l'interféron gamma humain (anti-IFN-y) et CD4 (anti-CD4) à des doses ultra-basses (ULD) obtenues par ultra dilution d'une solution de matrice initiale 10012, 1003°, 100° fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 ont été utilisés ; pour le traitement des patients du groupe n° 2, 300 mg imprégnés de composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses-alcooliques (6 mg/comprimé) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité contre l'interféron gamma humain (anti-IFN-y) et CD4 (anti-CD4) et l'histamine (anti-His) à des doses ultra-basses (ULD) obtenues par ultra dilution d'une solution de matrice initiale 10012, 1003°, 1005° fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 ont été utilisés ; pour le traitement de patients du groupe n° 3, des comprimés de 300 mg imprégnés de composition pharmaceutique contenant des solutions aqueuses-alcooliques (3 mg/comprimé) de formes activées-potentialisées d'anticorps polyclonaux de lapin purifiés par affinité contre l'interféron gamma humain (anti-IFN-y) à des doses ultra-basses (d'ULD) obtenues par ultra dilution d'une solution de matrice initiale 10012, 10030, 1005° fois égales à un mélange de dilutions homéopathiques centésimales C12, C30, C50 ont été utilisés. L'évaluation de l'efficacité de trois compositions pharmaceutiques contenant ULD anti-IFN-y+ anti-CD4, ULD anti-IFN-y+ anti-CD4 + anti-His et ULD anti-IFN-y dans le traitement de l'hépatite virale C chronique a été réalisée au cours d'une étude à groupes parallèles comparative. Dix-huit patients (14 hommes et 4 femmes) âgés de 27-52 ans ont été engagés. Le diagnostic d'hépatite C a été confirmé par des marqueurs sériques (anti-VHC et ARN de VHC). Tous les patients inclus dans l'étude avaient un VHC de 2ème ou 3ème génotype, une évolution progressive lente atténuée d'hépatite C chronique avec une faible activité de la maladie (aminotransférases sériques < 3 fois les valeurs normales ou < 100 U!1) ; aucun des patients n'a reçu antérieurement une thérapie antivirale spécifique. Les patients ayant un résultat positif de l'analyse sérologique pour VIH, RW, anti-HCA, HBsAg ou HBcorAg Ab, avec une cirrhose, des maladies concomitantes graves au stade d'exacerbation, une thalassémie ou une autre hémoglobinopathie, une dépendance alcoolique et/ou aux médicaments/drogues, les patients après transplantation d'organes qui prenaient de manière constante des médicaments immunosuppresseurs ainsi que les femmes enceintes et les femmes qui allaitent n'étaient pas inclus dans l'étude. Les patients des trois groupes de l'étude ont reçu les compositions pharmaceutiques selon le schéma suivant : 1 comprimé trois fois par jour pendant 24 semaines ; les patients du 1er groupe (n=5) -ULD anti-IFN-y+anti-CD4 ; les patients du 2ème groupe (n=4) -ULD anti-IFN-y+anti-CD4+anti-His ; les patients du 3ème groupe (n=4) - ULD anti-IFN-y. Le groupe témoin consistait en 5 patients ayant une virémie persistante et des niveaux normaux stables d'aminotransférases (<20 U/I) n'ont reçu aucune thérapie spécifique. Pendant le cours de l'étude, des examens réguliers, un contrôle de la charge virale et les taux au laboratoire ont été réalisés, une thérapie concomitante a été notée ainsi que les événements indésirables. L'efficacité de la thérapie a été évaluée la semaine 24 par la charge virale avec l'ARN de VHC et l'activité de l'alanine-aminotransférase (ALT). Les données sur la charge virale (le nombre de copies d'ARN de VHC) présentées dans le tableau comme médiane (Me) et la plage entre les premier et troisième quartiles [Q1-Q3], montraient un effet positif de la thérapie chez les patients des groupes 1-3 à la fin des 24 semaines de traitement. La prise de composition pharmaceutique d'ULD anti-IFN-y+anti-CD4 provoquait une réduction du nombre de copies d'ARN de VHC chez deux personnes parmi les 5 du premier groupe et une réduction moyenne de la charge virale était 75 %. Des résultats similaires ont été obtenus chez les patients auxquels était administrée une composition pharmaceutique d'ULD anti-IFN-y+anti-CD4+anti-His : son activité antivirale a été notée chez tous les patients (4 sujets parmi 4 du groupe 2), la réduction moyenne de la charge virale était 70 %. De plus, une disparition complète du virus a été notée chez 2 patients (l'un du groupe 1 et l'un du groupe 2) à la fin de la thérapie. L'activité antivirale de monocomposant ULD anti-IFN-y était légèrement plus basse et une réduction du nombre de copies d'ARN de VHC a été notée chez 3 patients parmi les 4 du 3ème groupe, une réduction moyenne de la charge virale était 55 %. Dans le groupe témoin, aucun changement positif dans la charge virale n'a été révélé. L'activité antivirale des compositions pharmaceutiques de l'étude s'accompagnait de changements positifs dans le niveau d'ALT notés chez les patients des groupes 1-3 à la fin des 24 semaines de thérapie. Une normalisation du niveau d'ALT a été trouvée chez 2 patients du groupe ULD anti-IFN-y+anti- CD4, chez 1 patient du groupe ULD anti-IFN-y+anti-CD4+anti-His et chez 1 patient du groupe ULD anti-IFN-y. Chez un patient du groupe témoin, le niveau d'ALT dépassait la limite supérieure de la norme (>20 U/I) du fait d'une augmentation de la charge virale à la fin de la période d'étude de 24 semaines. Aucun effet indésirable lié aux médicaments n'a été noté pendant l'étude, ce qui montre leur bonne tolérance. L'absence de variations pathologiques dans l'analyse du sang et de l'urine incluant des marqueurs d'insuffisance rénale et hépatique confirmait l'innocuité du traitement. Ainsi, l'étude de l'efficacité et de l'innocuité de compositions pharmaceutiques contenant I'ULD anti-IFN-y+anti-CD4, ULD anti-IFN-y+anti-CD4+anti-His et l'ULD anti-lFN-y chez les patients ayant une hépatite C chronique a été réalisée. Le plus fort effet antiviral était noté pour ULD anti-IFN-y+anti-CD4, ULD anti-IFN-y+anti-CD4+anti-His, ce qui était confirmé par la dynamique positive de la charge virale et la disparition ou clairance virale à la fin de la thérapie de 24 semaines chez 2 patients. L'efficacité antivirale d'ULD anti-IFN-y+anti-CD4, d'ULD anti-lFN-y+anti-CD4+anti-His et d'ULD anti-IFN-y s'accompagnait d'une réduction de l'activité de l'hépatite C chronique, qui était confirmée par la réduction et même la normalisation du niveau d'ALT chez certains patients à la fin de la période de traitement de 24 semaines.

Tableau 17 Dynamique de la charge virale dans les groupes de l'étude ARN de VHC, copies/ml Reduction moyenne de la charge virale, /0 ULD anti- IFN-y+anti-CD4 (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 66200 [450-181400] Traitement de 24 semaines 12500 [50-30560] 75 ULD anti- IFN-y+anti-CD4+anti-His (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 58900 [600-124500] 70 Traitement de 24 semaines 15600 [50-45700] ULD anti- IFN-y (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 84700 [350-172800] 55 Traitement de 24 semaines 22400 [150-58500] Groupe témoin (Me [Q1-Q3]) Ligne de base 79500 [300-155600] Traitement de 24 semaines 87900 [450-164300]

Claims

REVENDICATIONS1. Composition pharmaceutique d'association comprenant a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur.
2. Composition pharmaceutique d'association selon la revendication 1, où la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur sont préparées indépendamment par dilutions centésimales successives couplées avec une agitation de chaque dilution.
3. Composition pharmaceutique selon la revendication 1 ou 2, où la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine est sous forme d'un mélange de dilutions homéopathiques C12, C30 et C50 imprégnant un support solide et la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur est sous forme d'un mélange de dilutions homéopathiques C12, C30 et C50 imprégnant ledit support solide.
4. Composition pharmaceutique d'association selon la revendication 1 ou 2, où la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine est sous forme d'un mélange de dilutions homéopathiques C12, C30 et C200 imprégnant un support solide et la forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur est sous forme d'un mélange de dilutions homéopathiques C12, C30 et C200 imprégnant ledit support solide.
5. Composition pharmaceutique d'association selon la revendication 3 ou 4, où ledit support est imprégné d'un mélange desdites dilutions.
6. Composition pharmaceutique d'association selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, où ledit anticorps est un anticorps monoclonal, polyclonal ou naturel, de préférence un anticorps polyclonal.
7. Composition pharmaceutique d'association selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, où ladite au moins une cytokine est l'interféron gamma et 30 où ledit au moins un récepteur est le récepteur CD4.
8. Composition pharmaceutique d'association selon la revendication 7, comprenant en outre une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre l'histamine.
9. Composition pharmaceutique d'association selon l'une quelconque 5 des revendications 1 à 6, où ladite au moins une cytokine et ledit au moins un récepteur sont choisis dans le groupe consistant en : - ladite au moins une cytokine est l'interféron gamma et l'interféron alpha, et ledit au moins un récepteur et le récepteur CD4 et le récepteur CD8 ; - ladite au moins une cytokine est l'interféron alpha et ledit au moins un 10 récepteur est le récepteur CD4 ; et - ladite au moins une cytokine est le facteur alpha de nécrose des tumeurs et ledit au moins un récepteur est le récepteur CD4.
10. Composition pharmaceutique d'association selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, destinée à être utilisée dans un procédé pour traiter une 15 maladie infectieuse.
11. Composition destinée à être utilisée selon ta revendication 10, où lesdites formes activées-potentialisées d'anticorps sont administrées sous forme d'une composition pharmaceutique d'association.
12. Composition destinée à être utilisée selon la revendication 10 et 11, 20 où ladite maladie infectieuse est une maladie infectieuse virale ou une maladie infectieuse bactérienne.
13. Composition destinée à être utilisée selon la revendication 12, où ladite maladie infectieuse virale est choisie dans le groupe consistant en une maladie ou affection causée par le VIH ou associée avec le VIH, de préférence le 25 SIDA, l'hépatite virale, de préférence l'hépatite C chronique, la grippe et une infection aiguë des voies respiratoires.
14. Composition destinée à être utilisée selon les revendications 10 à 13, où ta composition pharmaceutique d'association est administrée dans une à trois formes galéniques unitaires, chacune des formes galéniques étant 30 administrée d'une fois par jour à six fois par jour.
15. Procédé pour produire une composition pharmaceutique selon les revendications 1 à 9 comprenant les étapes de fourniture de a) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins une cytokine et b) une forme activée-potentialisée d'un anticorps dirigé contre au moins un récepteur, préparées chacune par dilutions répétées consécutives et agitations multiples de chaque solution obtenue selon la technologie homéopathique, puis combinaison des solutions potentialisées par mélange de celles-ci, ou, à titre d'alternative, imprégnation d'une masse de support avec ladite solution combinée ou avec les solutions séparément.