FI74974C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara 7-/2-(2-aminotiazol-4-yl) iminoacetamido/cefalosporinderivat. - Google Patents

Description

1 74974

Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten l-f2-(2-aminotiatsol-4-yyli)iminoasetamidoTkefalosporiinijohdannaisten valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien terapeut tisesti käyttökelpoisten 1-R.~ (2-aminotiatsol-4-yyli) imi-noasetamidö7kefalosporiinijohdannaisten, joilla on kaava 0 N__ C - l - NH __S' S "S r3 1 h2n^\s ' \ N-γ/χ ch2 n ch3

0R COcP R

15 2 3 jossa ja kumpikin toisistaan riippumatta on metyyli tai etyyli ja R^ on alempi alkyyli, alempi alkenyyli, 20 2-hydroksialempialkyyli tai pyridyylialempialkyyli, tai niiden myrkyttömien farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen tai solvaattien valmistamiseksi.

GB-patenttijulkaisussa 1 399 086 esitetään laaja joukko kefalosporiineja, joilla on yleinen kaava: 25

B

R-C-CO-NH-Γ

11 A

N

0Ra '

30 C00H

jossa R on vety tai orgaaninen ryhmä, Ra on eetteröivä monovalenttinen orgaaninen ryhmä, joka on sitoutunut happeen hiiliatomin kautta, B on >S tai >S-?0 ja P on 35 orgaaninen ryhmä. 2-aminotiatsol-4-yyliryhmää ei ole kuitenkaan esitetty substituenttina R eikä ole esimerk- 74974 kejä, joissa P olisi kvaternäärinen ammoniummetyyliryhmä tyyppiä, joka on esitetty tässä kaavan I mukaisissa yhdisteissä. US-patenttijulkaisussa 3 971 778 ja siitä jaetuissa patenttijulkaisuissa 4 024 133, 4 024 137, 5 4 064 346, 4 033 950, 4 079 178, 4 091 209, 4 092 477 ja 4 093 803 on kuvattu samankaltaisia yhdisteitä.

US-patenttijulkaisussa 4 278 793 esitetään laaja joukko kefalosporiinijohdannaisia, joilla on kaava r4

O R

10 M ! X

"-rC—C — nh—-K ^ h i y li ^ r n Ns. I—N . a

Rj^-N^^S ^ ^0R2 o X

COOR3 15 jossa vaihtuvat ryhmät R^, R2, R3, R4, X ja A määritellään yleisesti vastaaviksi substituenteiksi kuin tässä esitetyissä kaavan I mukaisissa yhdisteissä. Kuitenkaan 20 palstalla, joilla kuvataan erilaisia substituenttiryh-20 miä, 78 sivulla, joilla on esitetty pitkä taulukko rakennekaavoja ja 225 esimerkissä ei ole esitetty, että A voisi olla kvaternäärinen ammoniummetyyliryhmä tyyppiä, jota on esitetty tässä kaavan I mukaisissa yhdisteissä. GB-patenttijulkaisu 1 604 971 on tätä vastaava ja siinä 25 on oleellisesti sama sisältö. GB-hakemusjulkaisussa 2 028 305 A kuvataan, vaikkakaan ei ilmeisen läheisiä rakenteeltaan, saman laajan yleisen kaavan mukaisia yhdisteitä, mutta esimerkkejä on vain sellaisisista, joissa A on vety.

30 US-patenttijulkaisussa 4 278 671 kuvataan l-[2- (2-aminotiatsol-4-yyli)-2-(syn)-metoksi-iminoasetamidö?-kefalosporiinijohdannaisia, joilla on kaava

R2n«s / S X

ti _ CONH . \ xndch3 J7 CH2R3

COOH

3 74974 jossa R2NH on mahdollisesti suojattu aminoryhmä ja Rj on vety tai "nukleofiilisen yhdisteen jäännös". Termi "nukleofiilisen yhdisteen jäännös" on laajasti määritelty ja lisäksi on esitetty, että R^ "voi vaihtoehtoisesti 5 olla kvaternäärinen ammoniumryhmä". Vain pyridinium, erilailla substituoitu pyridinium, kinolinium, pikolinium ja lutidinium kuvataan mahdollisina kvaternäärisinä ammo-niumryhminä. Julkaisussa ei ole ehdotettu, että kvaternäärinen ammoniumryhmä voisi olla samaa tyyppiä kuin 10 tässä esityissä kaavan I mukaisissa yhdisteissä. GB-pa-tenttijulkaisu 1 581 854 on tätä vastaava ja siinä on oleellisesti sama sisältö. Saman patentinhaltijan toiset patentit, jotka eivät ole muodollisesti läheisiä, mutta joilla on samantapainen sisältö, ovat US-patentti-15 julkaisu 4 098 888 ja siitä jaetut US-patenttijulkaisut 4 203 899, 4 205 180 ja 4 298 606 ja GB-patenttijulkaisu 1 536 281.

GB-hakemusjulkaisussa 2 040 921 kuvataan kefalos-poriinijohdannaisia, joilla on kaava 20 NH?

T

W

\C CONH \

Ti X

^O-C-COOH OT nv//N'CH2-N — R2 j^b COOO r3 30 jossa Ra ja R*5 ovat C^_4-alkyylejä tai muodostavat yhdessä hiiliatomin kanssa, johon ne ovat liittyneet, C3_7~sykloalkylideenirenkaan ja R^-, R2 ja R2 ovat kukin C1_4-alkyyliryhmiä.

Tämä keksintö koskee siis menetelmää kaavan I mu-35 kaisten kefalosporiinijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava 4 74974 o

II

m-,— c C--NH —1-f N R I

5 VX il ' 1 ®i h2N^\ S/ N 0^-* ^^\CH2— N— CH3 ^OR2 1 <> R4 coa^ * 10 , 2 *5 jossa R ja RJ kumpikin toisistaan riippumatta on metyyli tai etyyli ja R4 on alempi alkyyli, alempi alkenyyli, 2-hydroksialempialkyyli tai pyridyylialempialkyyli, tai niiden myrkyttömien farmaseuttisesti hyväksyttävien suo-15 lojen tai solvaattien valmistamiseksi. Tämän keksinnön piiriin sisältyy mysö kaavan I mukaisten yhdisteiden sol-vaatit (käsittäen hydraatit), samoin kuin kaavan I mukaisten yhdisteiden tautomeeriset muodot, esim. 2-imino-tiatsolin-4-yylimuodot 2-aminitiatsol-4-yyliyhdisteistä. 20 Kuten rakennekaavasta näkyy, kaavan I mukaisilla yhdisteillä on "syn"- tai "Z"-konfiguraatio alkoksi-imi-noryhmän suhteen. Koska yhdisteet ovat geometrisia isomeerejä, jonkin verran anti-isomeeriä voi myös olla läsnä. Tämä keksintö pitää sisällään kaavan I mukaiset 25 yhdisteet, jotka sisältävät ainakin 90 % "syn"-isomeeriä. Edullisesti kaavan I mukaiset yhdisteet ovat "syn"-iso-meerejä, jotka ovat oleellisesti puhtaita vastaavasta anti-isomeeristä.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden myrkyttömät far-30 maseuttisesti hyväksyttävät happoadditiosuolat käsittävät suolat kloorivety-, bromivety-, muurahais-, typpi-rikki-, metaanisulfoni-, fosfori-, etikka- ja trifluori-etikkahappojen kanssa, samoin kuin muiden penisilliini-ja kefalosporiinikemiassa käytettyjen happojen kanssa.

Il 5 74974

On olemassa kaksi päämenetelmää muuttaa helposti saatavissa oleva kefalosporiini toiseksi kefalosporii-niksi, jolla on erilaiset substituentit 7- ja 3-asemissa. Voidaan ensin poistaa 7-asemassa oleva substituentti 5 ja korvata se halutulla substituentilla, ja sitten liittää haluttu substituentti 3-asemaan. Vaihtoehtoisesti voidaan ensin liittää haluttu substituentti 3-asemaan ja sen jälkeen vaihtaa 7-asemassa oleva substituentti. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan valmis-10 taa kummallakin tavalla, mutta on edullista ensin liittää haluttu substituentti 7-asemaan ja sitten liittää haluttu substituentti 3-asemaan. Edullinen menetelmä on kuvattu alla reaktiokaaviossa 1. Lyhennys "Tr" tarkoittaa trityyli(trifenyylimetyyli)ryhmää. Lyhennys 15 "Ph" tarkoittaa fenyyliryhmää. Niinpä -CH(Ph)2 on bents-hydryyliryhmä, joka on edullinen karboksyyliryhmän suojaryhmä.

6

Reaktiokaavio 1 7 4 9 7 4 N r- C-C00CoHc k 25 5 TrHN ^S ^ ΌΗ r2x 10 v N c C-COOC-H-

Ji \ li. ni

TrHN/X^ ^"OR2 15 OH~

V

N-T-C-COOH

20 2 h2n-v__y/S\

25 I V

V-N\ o CH2C1 COOCH (Ph) 2 N/ 30 -N T—C-CONH--S S ^ /11, M 1

TrHli^s^ ^OR2 CT v\^x:h2ci 33 COOCH(Ph)2

Nai Ψ

II

7 74974 /s\ N-Γί-C-CONH-1-f >

Ji y \ 2 J—V^XcH2I

5 TrHN S OR o' 2 COOCH (Ph) 2 XR3

1. CH,-N

N.4 10 2. Suojaryhmien poisto Ψ 1 5 N-\—C-CONH--\ -, iT k = ®i 20 H2N ^OR2 O' CH2-N-CH3 COO® j^4

Vaikkakin edellä oleva reaktiokaavio kuvaa edullista monivaiheista menetelmää kaavan I mukaisten yh-25 disteiden valmistamiseksi, on ymmärrettävää, että muita lähtöaineita ja menetelmiä voidaan käyttää valmistettaessa välituotteita, joita käytetään reaktiokaavion avainvaiheissa. Tärkein avainvaihe reaktiokaaviossa 1 on kaavan VII mukaisen yhdisteen reaktio tertiääri-30 sen amiinin kanssa. Yhdiste VII voidaan valmistaa muilla menetelmillä.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle kaavan I mukaisten yhdisteiden ja niiden suolojen ja solvaattien valmistamiseksi on tunnusomaista, että yhdisteen, 35 jolla on kaava 8 74974 o . ΓΤ Γ1 ~~ jlCL/" B2HN'/Xs-S s o 0// il 0RZ COOB1 10 jossa R2 on edellä määritelty» B1 on tavanomainen kar-boksyyliryhmän suojaryhmä ja B on tavanomainen amino-ryhmän suojaryhmä, annetaan reagoida tertiäärisen amiinin kanssa, jolla on kaava 15 . R3 CH3'N\ R4 jossa R3 ja R4 ovat edellä määriteltyjä, jolloin saa- 20 daan yhdiste, jolla on kaava

Il S. P r3 25 [[ A I_N 4"CH2— n —CH3 b2hi^^N'S'^ \or2 ''l !

coob1 R

30 ja tämän jälkeen poistetaan kaikki suojaryhmät tavanomaisin menetelmin ja/tai haluttaessa kaavan I mukainen yhdiste muutetaan myrkyttömäksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai solvaatiksi.

Reaktio suoritetaan vedettömässä orgaanisessa 35 liuottimessa, kuten metyleenikloridissa, kloroformissa, etyylieetterissä, heksaanissa, etyyliasetaatissa, tetra- 74974 hydrofuraanissa, asetonitriilissä tai vastaavassa tai näiden liuottimien seoksissa. Reaktio on tarkoituksenmukaista suorittaa lämpötilassa noin -10 - +50°C; tavallisesti on edullisinta suorittaa reaktio huoneen 5 lämpötilassa. Ainakin yksi mooli tertiääristä amiinia on tarpeen moolia yhdistettä XIV kohden; tavallisesti on edullista käyttää noin 50-100 % ylimäärin tertiääristä amiinia. Karboksyyliryhmän suojaryhmät, jotka ovat sopivia käytettäviksi substituettina B^- yllä 10 olevassa reaktiossa, ovat alan ammattimiesten hyvin tuntemia ja niihin kuulu aralkyyliryhmät, kuten bentsyy-li, p-metoksibentsyyli, p-nitrobentsyyli ja difenyyli-metyyli (bentshydryyli); alkayyliryhmät kuten t-butyyli; halogeenialkyyliryhmät, kuten 2,2,2-trikloorietyyli ja 15 muut kirjallisuudessa kuvatut karboksyyliryhmän suoja-ryhmät, esimerkiksi GB-patenttijulkaisussa 1 399 086 kuvatut. On edullista käyttää karboksyyliryhmän suoja-ryhmiä, jotka voidaan helposti poistaa happokäsittelyl-lä. Erityisen edullisia karboksyyliryhmän suojaryhmiä 20 ovat bentshydryyli ja t-butyyli.

Aminoryhmän suojaryhmät, jotka ovat sopivia käy-

O

tettäviksi substituenttina B , ovat myös ennestään hyvin tunnettuja ja niihin kuuluu trityyliryhmä ja asyy-liryhmät, kuten klooriasetyyli. Aminoryhmän suojaryhmät, 25 jotka voidaan helposti poistaa käsittelemällä hapolla, esimerkiksi trityyliryhmä, ovat suositeltavia.

Seuraavan kaavan mukaisia tertiäärisiä amiineja 30 R3 ch3-n^ XR4 joita käytetään valmistettaessa kaavan I mukaisia 25 yhdisteitä, on saatavana kaupallisesti tai niitä voidaan helposti valmistaa ennestään tunnettujen menetelmin mukaisesti.

10 74974

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä on voimakas an-tibakteerinen vaikutus erilaisiin gram-positiivisiin ja gram-negatiivisiin bakteereihin ja ovat hyödyllisiä hoidettaessa bakteerien aiheuttamia tulehduksia eläi-5 missä, ihminen mukaan lukien. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muotoilla parenteraalista käyttöä varten tavanomaisella tavalla käyttäen tunnettuja farmaseuttisia kantajia ja laimentimia ja niitä voidaan säilyttää yksikköannoksina tai useamman annoksen säiliössä.

10 Valmisteet voivat olla liuosten, suspensioiden tai emulsioiden mudoossa öljymäisissä tai vesipitoisissa väliaineissa ja voivat sisältää tavanomaisia disper-gointi-, suspendointi- tai stabilointiaineita. Valmisteet voivat olla myös kuivan jauheen muodossa, jotka 15 sitten rekonstruoidaan ennen käyttöä, esim. steriilillä pyrogeenivapaalla vedellä. Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan myös valmistaa peräpuikoiksi käyttäen tavanomaisia peräpuikkoihin käytettäviä perustoja, kuten kaakaovoita tai muita glyseridejä. Kaavan I mu-20 kaiset yhdisteet voidaan haluttaessa antaa yhdistettyinä toisiin antibiootteihin, kuten penisilliineihin tai muihin kefalosporiineihin.

Yksikköannosmuodossa olevat valmisteet sisältävät edullisesti noin 50-1500 mg kaavan I mukaista ak-25 tiivistä ainetta. Kaavan I mukaisten yhdisteiden annos riippuu sellaisista tekijöistä kuten potilaan paino ja ikä samoin kuin taudin erityisluonne ja vaikeus ja on lääkärin arvioitavissa. Kuitenkin aikuisen ihmisen hoitoannos tavallisesti on välillä noin 500-5000 mg 30 päivässä, riippuen annostelun tiheydestä ja tavasta. Annosteltaessa lihaksen- tai suonensisäisesti aikuiselle ihmiselle annos noin 750-3000 mg päivässä, useisiin annoksiin jaettuna, on tavallisesti riittävä, vaikkakin joillekin yhdisteille voivat suuremmat-35 kin päiväannokset olla toivottavia Pseudomonas-infek-tioissa.

74974

Edullisia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat ne, joissa R2 on metyyli, R2 on metyyli tai etyyli ja R4 on metyyli, etyyli, 2-hydroksietyyli, allyyli tai pyri-dyylimetyyli. Erityisen edullisia ovat yhdisteet, joissa 5 R2 ja R^ ovat metyylejä ja R4 on metyyli, 2-hydroksietyy-li tai allyyli. Kaikkein edullisin on yhdiste, jossa R2, R2 ja R4 ovat metyylejä. Kaavan I mukaisten edullisten yhdisteiden alustavaa arviointia varten määritettiin pienimmät inhibointikonsentraatiot (MIC) yhdisteil-10 le kaksinkertaisella agarin sarjalaimennusmenetelmällä Mueller-Hintonin agarissa 32 testiorganismisuvulle kuudessa ryhmässä. Tässä testissä määritettyjen MIC-arvojen geometrisest keskiarvot on esitetty taulukossa 1.

12 74974 (d td

— +J

(0 a rd (0 4J x m c

•r—I <d CM

34 ~ ~T - rd m to HO 43-3 H CO) _ h m a) υ , i 1 -— in vo σι 34 am

g .—.VO·» » » » » -HO

\ I — <n m m r» r» 30 u ϋ *“ 0 i-i η, — m — £ rg

~ 3 E

tn <u <d VO <d 3

OH » ο σι σι -H CUM

>H O VO VO VO -sf 3 CL)

Ml — ·»*»»» O *01

<d — LOCTiOOO·— E H

Ml'— VO 3 X cd 34 U C a> -n co '—' o 2 3 fö O 2 CU ·Γ-1 34 O -h ' ' η4 <N Ä S * CT3 f§ Ö Λ » 00 04 04 O -< 2 H (d 43 <i) H O ·— (N (N Lfl 2 ·* >4 4-> 3 C· — ·- * * * ~ n m C2 H — vo m oooo 7, —· — (0r^

M l — <N = td 34 CM

o-uo» 2 en m — 34 O — o 3 4_) m 34 fi m o d - a) 3 0 — M td td

H Q) 3 ,y H O

3 0 id ω <d h <d td H 3 m 0 0

Eh e I — roooo^r-n- a) · — oh

o— mrocNm^moo Men O

r 1^-000000 3 -H

0 O »»»»»» td -H H w · > — OOOOOO 4-1 O 43 (d

M · 43 O H e — H

td ω g — +) w td 1 VO o · 3 43 3 :td

U X) » :(0 4JWtdC»4J-P

HH O 3410 430--3-(3 SI— Γ"ΐβΓ^ιη 34 H :td C 43 ^ td tl)

— m ·» » » » » M to 34 td en ΐ ry 4J

4- »— vo co »3· in 0034 34 H fS to

0 » JdMM CO 34 VO H

— ro UNO ^ d O O X — M r- 3d H i—I ' nj ϊ>-ν

_ H H O to o CO

/rt -H -H H H H H O :td frt vo 3sdHHHHjd:<d

td 4J ' -H -H H H -H 3 h M

Hcr- 'O TT T- — -H -H C 33 3 td Oi O

1 » » » » H H -H td -M Oi 3 — kv··» «— r- (S IN i—li—(43M4JMMld 4- ^ r- H H O H O O O 43 O CO COtOHEHStdtfl

— *— t— H -H td td -M

----C 3 Ή · »H · - td

OOOMOMCOH

ACUUJOitfCUCUH

M

...... o

H -H

34 H to 340 td 33 td 33 H H 34 M 43 H H H H H H id o en lii i i i x •H Ό Id 4-4-1 I I I — tn .3 — OUCJ uuuid W ΪΜ — <n m Tr co — —-- ^ 13 74974

Edullisimman yhdisteen Ia (valmistettu esimerkissä 1) absorptio määritettiin hiiressä testiyhdisteen (liuotettu 0,1M fosfaattipuskuriin; pH 7) yksinkertaisen lihaksensisäisen injektion jälkeen annoksena 20 mg/kg. Veri-5 näytteet kerättiin silmäkuopan onteloista hepariinia sisältäviin kapillaariputkiin ja tutkittiin Mueller-Hinton'in alustalla käyttäen testiorganismina Morganella morganii A9695:a. Määrät veressä eri aikoina, puoliintumisajät (ti/2) ja käyrän (AUC) alapuolelle jäävät alueet on esi-10 tetty taulukossa 2.

Taulukko 2

Yhdisteen Ia määrä hiiren veressä 15 Määrä veressä 10 14 (|ig/ml) mi- 20 12 nuuttia annos- 30 8,8 telun jälkeen 40 7,5 50 4,7 20 60 4,4 90 1,5 120 0,74 tl/2 25 (minuuttia) 24

AUC

|ig.h/ml 10 30

Edullisimman yhdisteen Ia aktiivisuus in vitro 31 vaativaa bakteerikantaa kohtaan määritettiin GC-aga-rissa ja tulokset on esitetty taulukossa 3.

14 74974

Taulukko 3

Yhdisteen Ia aktiivisuus in vitro vaativia bakteereja kohtaan 5 Testiorganismi MIC-arvojen geometrinen __keskiarvo (pg/ml_ S. pyogenes (6 kantaa) 0,013 S. pneumoniae (6) 0,013 N. gonorrhoeae (4) 0,013 10 N. meningitidis (5) 0,016 H. influenzae (7) 0,013 (ampisilliinille herkkä) H. influenzae (3) 0,20 (ampisilliinille resis-15 tentti)

Valmistus nro 1 20

N_____ C_COOCtHc III

//Ti1

TrHN-A. s / \ OR2 25

Etyyli-(Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiat-sol-4-yyli)asetaatti (lila)

Seosta, joka sisälsi (Z)-2-hydroksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetaattia (II) (5,00 g, 30 10,9 mmol) , CHjIza (2,04 ml, 32,8 mmol) ja I^CC^ia (4,54 g, 32,8 mmol) kuivassa dimetyylisulfoksidissa (DMSO) (100 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa yön yli ja kaadettiin sitten veteen (250 ml). Muodostunut saostuma otettiin talteen suodattamalla, pes-35 tiin vedellä ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikko- 74974 yhdistettä (5,15 g, kvantitatiivinen saanto). Sp.

115°C (hajosi).

NMR: cf cdc13 ppm 1,32 (3H, t), 3,98 (3H, s), 4,30 (2H, q), 6,42 (1H, s), 7,2 (1H, m), 7,25 (15H, s).

5 Yhdiste Illb valmistettiin yllä kuvatulla mene telmällä, mutta korvaamalla metyylijodidi etyylijodi-dilla.

(1)

Kirjallisuudessa 10 Yhdiste R2_Saanto (%) Sp, (°C) annettu sp. (°C) lila metyyli 100 115 (haj.) noin 120°C (haj.)

Illb etyyli 67 97-98°C * * Esteri hydrolysoitiin eristämättä 15 (1)Tetrahedron 34 (1978) 2233

Valmistus 2

N-.— C - COOH

20 // 'T "

TrHN/\S/ N '\0R2 IV

25 (Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol- 4-yyli)etikkahappo (IVa)

Valmistuksessa nro 1 valmistettua etyyliesteriä lila (6,00 g, 12,7 mmol) etanolissa (120 ml) käsiteltiin 2N NaOH:lla (12,7 ml) huoneen lämpötilassa ja seoksen 30 annettiin seistä yön yli. Reaktioseoksen pH säädettiin kahdeksaan lisäämällä jauhemaista kuivaa jäätä ja liuotin haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös liuotettiin veteen (100 ml) ja liuos tehtiin happamaksi IN HClilla pH 2:een ja sitten uutettiin etyyliasetaatilla 16 74974 (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin.

Jäännös kiteytettiin etyyliasetaatti-heksaanista, jolloin saatiin 5,56 g (saanto 98 %) otsikkoyhdistettä.

5 Sp. 138-143°C (hajosi).

NMR:<*CDC13 ppm 3,89 (3H, s), 6,25 (1H, s), 7,2 (15H, s).

Yhdiste IVb valmistettiin yllä esitetyllä yleisellä menetelmällä 10

Kirjallisuudessa ^ annettu sp.

Yhdiste R2 Saanto (%) Sp. (°C, hai) (°C, hai.)_ IVa metyyli 98 138-143 noin 140 15 IV etyyli 85 140-145 ei raportoitu ^Tetrahedron 34 (1978) 2233

Valmistus nro 3

Bentshydryyli-3-hydroksimetyyli-7-fenyyliasetamido-20 3-kefeemi-4-karboksylaatti (VIII) S .

PhCH2CONH --j-"

/)—n\^'^^-ch2oh VIII

25 COOCH(Ph)2

Fosfaattipuskurin (pH 7, 162,5 ml) ja vehnäleseiden (20 g, kuivia) sekoitettuun suspensioon huoneen lämpötilassa lisättiin 7-fenyyliasetamidokefalosporaanihapon natrium-suolaa (5 g, 12,1 mmol) yhdessä erässä. Reaktion etenemis-30 tä seurattiin HPLC:llä, kunnes hydrolyysi oli täydellinen (5 tuntia). Suspensio suodatettiin vehnäleseiden poistamiseksi ja suodos jäähdytettiin 5-10°C:seen esterifiointia varten. Jäähdytettyyn liuokseen lisättiin metyleenikloridia (32 ml), jota seurasi 0,5M liuos difenyylidiatsometaania 35 metyleenikloridissa (24 ml). Sitten pH säädettiin 3,0:een 28-%:isella fosforihapolla. Tunnin kuluttua reaktioseoksen 17 74974 lämpötilan annettiin nousta 20°C:seen. Heptaania (56 ml) lisättiin hitaasti ja saatu kiteinen otsikkotuote otettiin talteen suodattamalla. Tuotteen saanto oli 3,0 g (50 %).

Valmistus nro 4 5 Bentshydryyli-7-amino-3-kloorimetyyli-3-kefeemi-4-kar- boksylaatti (V) PCl^:n (8,3 g, 40 mmol) seokseen Ci^C^rssa (100 ml) lisättiin pyridiiniä (3,2 g, 40 mmol) ja seosta sekoitettiin 20 minuuttia 20°C:Ssa. Seokseen lisättiin valmistuk-10 sessa nro 3 valmistettua bentshydryyli-3-hydroksimetyyli-7-fenyyliasetamido-3-kefeemi-4-karboksylaattia (5,1 g, 10 nmol) sekoittaen -iO^Cissa, yhdessä erässä. Seosta sekoitettiin -10°C:ssa 15 minuuttia ja sen annettiin seistä -10-'-15°c:ssa seitsemän tuntia. Jäähdytettyyn liuokseen (-20°C) lisättiin 15 propaani-1,3-diolia (10 ml) ja seoksen annettiin seistä -20°C:ssa 16 tuntia ja sitten huoneen lämpötilassa 20 minuuttia sekoittaen. Saatua liuosta pestiin jäävedellä (2 x 20 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella (10 ml), kuivattiin MgSO^slla ja konsentroitiin vakuumissa.

20 Kumimainen jäännös (12 g) liuotettiin CHCl^:n ja n-heksaanin liuokseen (2:1), tämä kromatografoitiin käyttäen silikagee-lipylvästä (200 g) ja samaa liuotinta eluenttina. Otsikko-yhdistettä sisältävät jakeet haihdutettiin vakuumissa ja jäännöstä trituroitiin n-heksaanissa, jolloin saatiin ot-25 sikkoyhdistettä (2,1 g, 51 %), joka suli yli 110°C:ssa hajoten .

IR: VKBr 3400, 2800, 1785, 1725 cm-1.

UV: A^tOH 265 nm (eJ * 160).

illäX I cm NMR: $^°"d6 + CDC13 3,69 (2H, s), 4,43 (2H, s), 30 5,09 (1H, d, J = 4,5 Hz), 5,24 (1H, d, J = 4,5 Hz), 6,87 (1H, s), 7,3 (10H, m).

Valmistus nro 5

Bentshydryyli-3-kloorimetyyli-7-/*(Z) -2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamidq7-3-kefeemi-4-kar-35 boksylaatti (Via)

Valmistuksessa nro 4 valmistettua bentshydryyli-7-amino-3-kloorimetyyli-3-kefeemi-4-karboksylaattia (2,29 g, 18 74974 5.52 mmol) CH^CNissä (57 ml) käsiteltiin bis(trimetyylisi-lyyli)asetamidilla (BSA, 4,09 ml, 16,6 mmol) huoneen lämpötilassa 50 minuutin ajan, jolloin saatiin kirkas liuos. Liuokseen lisättiin happokloridiliuos, joka oli valmistettu 5 (Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)etik- kahaposta (IVa) (2,04 g, 4,60 mmol) ja Pellistä (1,15 g, 5.52 mmol) metyleenikloridissa (20 ml). Seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, se kaadettiin kylmään veteen (200 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 100 ml).

10 Yhdistetyt uutteet pestiin NaCl:n vesiliuoksella, kuivattiin ja haihdutettiin. Jäljelle jäänyt siirappi (4 g) kro-matografoitiin silikageelillä (150 g) pylväässä tolueenin ja etyyliasetaatin seoksilla (10:1 ja 3:1 peräkkäin). Haluttua tuotetta sisältävät jakeet yhdistettiin ja haihdutet-15 tiin, jolloin saatiin 2,61 g (68 %) tuotetta Via amorfisena j auheena.

NMR: 6CDC13 ppm 3,50 (2H, s), 4,02 (3H, s), 4,33 (2H, s), 4,98 (1H, d), 5,87 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s) , 7,3 (25H, m) .

20 Valmistus nro 6

Bentshydryyli-3-jodimetyyli-7-/"(Z) -2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamido7-3-kefeemi-4-karb-oksylaatti (Vila)

Seosta, joka sisälsi valmistuksessa nro 5 saatua 25 3-kloorimetyylijohdannaista (Via) (1,50 g, 1,79 mmol) ja Nal:a (1,34 g, 8,93 mmol) metyylietyyliketonissa (30 ml), sekoitettiin huoneen lämpötilassa yksi tunti. Liuotin haihdutettiin ja jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin (100 ml) ja pestiin vedellä, Na2S203-liuoksella ja NaCl-liuoksella, 30 kuivattiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin otsikkoyhdis-tettä Vila (1,47 g, 89 %) amorfisena jauheena.

NMR: 6CDC13 ppm 3,55 (2H, ABq), 4,00 (3H, s), 4,25 (2H, s), 4,97 (1H, d), 5,80 (1H, q), 6,65 (1H, s), 6,90 (1H, s), 7,3 (25H, m).

19 74974

Valmistus nro 7

Bentshydryyli-3-kloorimetyyli-7-/*(Z) -2-etoksi-imino- 2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamidq7~3-kefeemi-4-karb-oksylaatti (VIb) 5 Liuokseen, joka sisälsi (Z)-2-etoksi-imino-2-(2- trityyliaminotiatsol-4-yyli)etikkahappoa (IVb) (1,095 g, 2,4 mmol) dikloorimetaanissa (20 ml), lisättiin fosfori-pentakloridia (500 mg). Seosta sekoitettiin yksi tunti huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen se kaadettiin yhdessä eräs-10 sä jäillä jäähdytettyyn liuokseen, joka sisälsi yhdistettä V (1,083 g, 2,4 mmol) ja BSA:a (1 ml) dikloorimetaanissa (20 ml). Reaktioseosta sekoitettiin 0,5 tuntia, jonka jälkeen se kaadettiin 10-%:iseen NaHCO^-liuokseen (200 ml) ja uutettiin CHCl^Ha (100 ml). Uute pestiin vedellä, kuivat-15 tiin MgSO^:llä ja haihdutettiin alennetussa paineessa. Jäännös kromatografoitiin silikageelipylväässä. Eluointi CHCl.j:lla antoi yhdisteen VIb amorfisena jauheena, 1,76 g (86 %) .

cnc 1 NMR: $ 3 ppm 1,40 (3H, 6, CH2CH3), 3,53 (2H, ABq, 20 2-CH2), 4,37 (2H, s, -CH2C1), 4,60 (2H, q, -CH2CH3), 4,90 (1H, d, 6-H), 5,89 (1H, d, 7-H), 6,88 (1H, s, tiatsoli-H), 6,91 (1H, s, bentshydryyli-CH).

Valmistus nro 8

Difenyylimetyyli-7-/’(Z) -2-etoksi-imino-2- (2-trityy-25 liaminotiatsol-4-yyli) asetamido_7-3-jodimetyyli-3-kef eemi-4-karboksylaatti (Vllb)

Seosta, joka sisälsi valmistuksessa nro 7 saatua yhdistettä VIb (1,97 g, 1,25 mmol) ja Nal:a (562 mg, 2,75 mmol) asetonissa (20 ml), sekoitettiin yksi tunti. Seos suodatet-30 tiin ja suodos kaadettiin veteen ja uutettiin etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestiin 5-%:isella Na2S203:n vesi-liuoksella, sitten vedellä ja lopuksi NaCl:n kyllästetyllä vesiliuoksella, kuivattiin MgSO^:llä ja haihdutettiin, jolloin saatiin 1,04 g (89 %) yhdistettä Vllb.

ΡΠΠ 35 NMR: 6 3 ppm 3,55 (2H, q, 2-CH2), 4,27 (2H, s, CH2I), 5,02 (1H, d, 6-H), 5,87 (1H, d, 7-H), 6,68 (1H, s, tiatsolirenkaan H), 6,93 (1H, s, bentshydryyli-CH).

20 74974

Esimerkki 1 ~1-[VZ) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset-amidq7~3-(trimetyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-karboksylaat-ti (Ia) 5 Trimetyyliamiinin IM liuosta dietyylieetterissä (1 ml, 1 mmol) lisättiin sekoitettuun suspensioon, joka sisälsi bentshydryyli-3-jodimetyyli-7-/'(Z) -2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamido.7-3-kefeemi-4-karboksy-laattia (Vila) 468 mg, 0,5 mmol) dietyylieetterissä (30 ml) 10 ja seosta sekoitettiin 1,5 tuntia. Saostunut kvaternäärinen suola otettiin talteen suodattamalla (410 mg, saanto 82 %) ja siihen lisättiin trifluorietikkahappoa (TFA) (3 ml).

Seosta sekoitettiin 1,5 tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten se haihdutettiin kuiviin alennetussa paineessa alle 20°C:ssa. 15 Jäännöstä trituroitiin eetterissä ja saostunut TFA-suola otettiin talteen suodattamalla (saanto 365 mg), liuotettiin pieneen määrään metanolia ja kromatografoitiin HP-20-hart-sia sisältävässä pylväässä (1,8 x 20 cm). Pylväs eluoitiin ensin vedellä (noin 1 litra) ja sitten 30-%:isella vesipi-20 toisella metanolilla (0,5 1). Metanolipitoinen eluaatti haihdutettiin alennetussa paineessa alle 40°C:ssa ja jäännös kyl- mäkuivattiin, jolloin saatiin raakaa otsikkotuotetta (saanto 2 3 129 mg). a /a -isomeerien suhde raakatuotteessa oli 1:2, mitattuna HPLC:llä. Tuote puhdistettiin HPLCillä (Lichrosorb 25 RP-18, 8 x 300 mm, eluenttina 1/100M NH4H2PC>4 (pH 7,2): CH^OH = 85:15). HPLC-eluaatti kromatografoitiin HP-20-pyl-väässä (1,8 x 15 cm) epäorgaanisen suolan poistamiseksi.

Pylväs eluoitiin vedellä (0,5 1) ja sitten 30-%:isella vesipitoisella metanolilla (0,5 1). Metanolipitoinen eluaatti 30 haihdutettiin alennetussa paineessa alle 40°C:ssa ja jäännös kylmäkuivattuin, jolloin saatiin otsikkoyhdistettä (Ia) amorfisena jauheena. Saanto 75 mg (33 %, laskettuna VIIa:sta). Tuote hajosi vähitellen 160°C:n yläpuolella. Arvioitu puhtaus 80 %.

35 IRi ^max cm~1 3600-3000, 1775, 1660, 1610, 1540, 1350, 1030.

21 74974 UV: Xf0afaattipUSkuri (1''15M> ΡΠ 7> nm (e) 235

• ITlclX

(15700) , 257 (15400) .

NMR: λ°2° ppm 3,25 (9H, S, N+(CH3)3), 4,10 (3H, s, OCH3), 5,47 (1H, d, 4 Hz, 6-H), 5,96 (1H, d, 4 Hz, 7-H), 5 7,10 (1H, s, tiatsoli-H).

Esimerkki 2 7-/(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoaset-amidp7-3-ZM,N-dimetyyli-N-(2-hydroksietyyli)ammonium7metyy1i- 3- kefeemi-4~karboksylaatti (Ib) 10 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että siinä käytetty trimetyyliamiini korvattiin ek- vivalenttisella määrällä N,N-dimetyylietanoliamiinia. Raa-2 3 katuotteen Δ :Δ -suhde oli 1:2. Puhdistettaessa saatiin ot-sikkoyhdistettä 17 %:n saannolla ja tuote hajosi 160°C:n 15 yläpuolella. Arvioitu puhtaus 90 %.

Esimerkki 3 7-/ΪΖ) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset-amidq7~3-(N,N-dimetyyli-N-allyyliammonium)metyyli-3-kefeemi- 4- karboksylaatti (Ie) 20 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että siinä käytetyn trimetyyliamiinin tilalla käytettiin ekvivalenttista määrää N,N-dimetyyliallyyliamiinia.

2 3

Raakatuotteen A :Δ -suhde oli 1:4,5. Puhdistettaessa saatiin otsikkoyhdistettä 14 %:n saannolla ja tuote hajosi 25 150°C:n yläpuolella. Arvioitu puhtaus 80 %.

Esimerkki 4 7-/·(Ζ) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset- amido.7-3-ZI'J,N-dimetyyli-N- (3-pyridyylimetyyli) ammonium7me- tyyli-3-kefeemi-4-kar.boksylaatti (Id) 30 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että siinä käytetty trimetyyliamiini korvattiin ekvi- valenttisella määrällä 3-(dimetyyliaminometyyli)pyridiiniä.

2 3

Raakatuotteen Δ :Δ -suhde oli 1:4,3. Puhdistettaessa saatiin otsikkoyhdistettä 17 %:n saannolla ja tämä tuote hajosi 35 170°C:n yläpuolella. Arvioitu puhtaus 75 %.

22 7 4 9 7 4

Esimerkki 5 7-/1(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset- amidq7-3-/iii/N-dimetyyli-N- (2-dimetyyliaminoetyyli) ammonium^- metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ie) 5 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että siinä käytetty trimetyyliamiini korvattiin ekvi- valenttisella määrällä 1,2-bis(dimetyyliamino)etaania. Raa-2 3 katuotteen A :A -suhde oli 1:1. Puhdistettaessa saatiin ot-sikkoyhdistettä 14 %:n saannolla ja tuote hajosi 150°C:n 10 yläpuolella. Arvioitu puhtaus 65 %.

Esimerkki 6 7—/"(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset-amidqi7-3- (N,N-dimetyyli-N-etyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (If) 15 Esimerkin 1 yleinen menetelmä toistettiin, paitsi et tä siinä käytetty trimetyyliamiini korvattiin ekvivalentti- sella määrällä Ν,Ν-dimetyylietyyliamiinia. Raakatuotteen 2 3 A :Δ -suhde oli 1:1. Puhdistettaessa saatiin otsikkoyhdistet-tä 15 %:n saannolla ja tuote hajosi 150°C:n yläpuolella. Ar-20 vioitu puhtaus oli 77 %.

Esimerkki 7 7-/(Z)-2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoaset-amido^-3-(N,N-dietyyli-N-metyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti (Ig) 25 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että siinä käytetty trimetyyliamiini korvattiin ekvi- valenttisella määrällä dietyylimetyyliaraiinia. Raakatuotteen 2 3 A :A-suhde oli 1:1. Puhdistettaessa saatiin otsikkoyhdis-tettä 10 %:n saannolla ja tämä tuote hajosi 150°C:n yläpuo-30 lella. Arvioitu puhtaus 65 %.

Esimerkki 8 7-/'(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-etoksi-iminoaset-amidq7~3-(trimetyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaat-ti (Ih) 35 Esimerkin 1 mukainen yleinen menetelmä toistettiin, paitsi että bentshydryyli-3-jodimetyyli-7-/'(Z)-2-metoksi-imino-2-(2-trityyliaminotiatsol-4-yyli)asetamido7-3-kefeemi-4-

II

23 74974 karboksylaatti (Vila) korvattiin ekvivalenttisella määrällä vastaavaa etoksi-iminoyhdistettä (Vllb) (valmistuksesta nro 8 saatu). Raakatuotteen Δ ^-suhde oli 3:1.

Puhdistettaessa saatiin otsikkoyhdistettä 3 %:n saannol-5 la ja tämä yhdiste hajosi 150°C:n yläpuolella. Arvioitu puhtaus 70 %.

Esimerkkien 2-8 yhdisteiden spektritiedot (a) Infarapunaspektri (KBr)

Kaikilla tuotteilla oli samanlainen infarapunaspektri: 10 1770-1775 cm-^ (^-laktaami C=0), 1660 cm-^ (CONH), 1610 cm-1 (COO").

(b) UItraviolettispektri (1/15 M fosfaattipuskuri; pH 7)

Kaikilla tuotteilla esimerkkiä 4 lukuun ottamatta 15 oli samanlainen spektri: 235 nm (£15700-16400), 257 nm (£15400-16000). Esimerkin 4 yhdisteen spektri: 235 nm (£ 17600), 255 nm ( € 18600, sh), 260 nm (£ 19000), 266 nm (C17900, sh).

(c) NMR-spektri (D2O) 24 74974

Kemiallinen siirtymä ' +

Esim. N -CH^ O-CH^ 6-H 7-H tiatsoli-H muut yhdis- (s) (3H,s) (lH,d, (lH,d, (lH,s) te____4-5Hz) 4-5Hz__ 5 2 3,20(3Hl 4,10 5,46 5,90 7,10 3,25(3H) 3 3,08(3H) 4,10 5,46 7,10 5,6-6,4 3,15(3H) (4H,m,7-H, ch=ch2) 10 4 3,04(3H) 4,09 5,45 5,94 7,06 4,75(2H,s, 3,21(3H) PyrCH2) 7,66(lH,d-d, 8&4Hz,Pyr-H) 4 8,12(lH,d, 15 8Hz,Pyr-H) 8,74(2H,s, Pyr-H) 5 3,18 (3H) 4,10 5,45 5,90 7,10 2,50 (6H,s, 3,25(3H) N(CH3)2) 20 6 3,10(3H) 4,10 5,45 5,90 7,10 l,48(3H,t 3,15 (3-H) 7Hz,CH2CH3) 7 3,05(3H) 4,10 5,44 5,95 7,10 l,45(6H,t, 7Hz,CH2CH3) 8 3,25(9Η) — 5,50 5,97 7,10 l,45(3H,t 25 7Hz,CH2CH_3) _______

On havaittu, että tuotteen sekä Δ^: Δ ^-suhde että saanto paranee, jos alkuperäisestä saostuneesta kvater-30 näärisestä suolasta (XV) saadun suodoksen annetaan seistä jonkin aikaan ja sitten suodatetaan uudelleen alkuperäistä talteen otettua yhdistettä XV sisältävän kerroksen läpi, erityisesti jos tämä uudellensuodatusvaihe toistetaan useita kertoja. Saantoa voidaan myös nostaa jonkin verran, 35 jos pieni määrä alkuperäistä reagoivaa tertiääristä amiinia lisätään tähän suodokseen. Tämä on osoitettu seuraa-valla esimerkillä, joka on muunnos esimerkistä 1.

Il 25 74974

Esimerkki 9 7-/*(Z) -2- (2-aminotiatsol-4-yyli) -2-metoksi-iminoaset-amidoJ-3-(trimetyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaat-ti (Ia) 5 Trimetyyliamiinin liuos (1M liuos eetterissä, 10 ml) lisättiin yhdessä erässä sekoitettuun liuokseen, joka sisälsi jodidiyhdistettä Vila (4,68 g, 5 mmol) eetterissä (500 ml). Seosta sekoitettiin 10 minuuttia ja saostunut kvaternääri-nen suola (XVa) otettiin talteen suodattamalla ja pestiin 10 pienellä määrällä eetteriä. Suodos ja pesuliuokset yhdistettiin ja niiden annettiin seistä huoneen lämpötilassa toiset 10 minuuttia ja toinen saostuma, joka erottui, otettiin talteen suodattamalla samassa suppilossa, jossa ensimmäinen saostuma oli suodattavana kerroksena. Suodos suodatettiin 15 kolme kertaa samalla tavalla 10 minuutin väliajoin, jolloin saatiin kvaternäärinen suola (XVa) (3,58 g, 72 % VIIa:sta). Lopulliseen suodokseen lisättiin trimetyyliamiiniliuosta (1M liuos eetterissä, 2 ml) ja sama uudelleensuodatus toistettiin vielä kolme kertaa 10 minuutin välein, jolloin saatiin 20 lisää yhdistettä XVa (0,56 g, 11 %). Saatuun suodokseen lisättiin lisää 1M trimetyyliamiiniliuosta (1 ml) ja uudelleensuodatus toistettiin kahdesti 10 minuutin välein, jolloin saatiin kolmas annos yhdistettä XVa (0,134 g, 2,7 %). Kokonaissaanto oli 4,27 g (86 %). Seosta, joka sisälsi yh-25 distettä XVa (4,20 g, 4,22 mmol), anisolia (1 ml) ja TFA:a (40 ml), sekoitettiin 1,5 tuntia huoneen lämpötilassa. Seos haihdutettiin alennetussa paineessa alle 20°C:n ja tummaa jäännöstä trituroitiin isopropyylieetterissä (300 ml) TFA-suolan saostamiseksi (3,50 g), joka otettiin talteen suodat-30 tamalla ja kuivattiin alennetussa paineessa. TFA-suola liuotettiin metanoliin (50 ml), sitä käsiteltiin pienellä määrällä hiiltä ja suodatettiin. Suodos konsentroitiin alennetussa paineessa ja natrium-2-etyyliheksanoaattia (1M liuos etyyliasetaatissa, 15 ml) lisättiin konsentraattiin. Seos 35 laimennettiin etyyliasetaatilla (300 ml) raa'an otsikko- tuotteen saostamiseksi (2,36 g, arvioitu puhtaus 50 %), joka otettiin talteen suodattamalla, pestiin pienellä 2 26 74974 määrällä etyyliasetaattia ja kuivattiin. Δ -isomeerin suhde Δ 3-isaneeriin tuotteessa oli 1:4 (HPLC, Lichrosorb RP-18; liikkuva faasi, 1/100M ammoniumfosfaattipuskuri, pH 7 - 2 3 CH^OH, 90:10; retentioaika, Δ -isomeeri 6' 54", A -isomeeri 5 8' 29").

Raakatuote (2,36 g) liuotettiin pieneen määrään vettä ja puhdistettiin käyttäen HPLC:a (Waters Associates, System 500, PrepPAK 500/C^g; liikkuva faasi, 7 % metanoli). Tuotetta sisältävä HPLC-eluaatti konsentroitiin alennetussa 10 paineessa alle 35°C:n ja konsentraatti kylmäkuivattiin, jolloin saatiin otsikkoyhdistettä. Saanto 959 mg (42 %, laskettuna jodidi-VIIa:sta). Amorfinen jauhe. Arvioitu puh- 2 3 taus 80 % (HPLC:llä). Isomeerin Δ suhde isomeeriin Δ oli 1:17. Se hajosi vähitellen 160°C:n yläpuolella.

Claims (3)

27 74974

1. Menetelmä uusien terapeuttisesti käyttökelpoisten 7-^2-(2-aminotiatsol-4-vvli)iminoasetamidd7kefalos-5 poriinijohdannaisten, joilla on kaava 0 il N-,— C - C- NH —-/ \ R3 1 10. ii \\ II I yjl y N J-N . h9n \ 9 CH- —N-CH, * OR I 1 | J coo® I R4 15 2 3 jossa R ja R kumpikin toisistaan riippumatta on metyyli 4 tai etyyli ja R on alempi alkyyli, alempi alkenyyli, 2-hydroksialempialkyyli tai pyridyylialempialkyyli, tai niiden myrkyttömien farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen 20 tai solvaattien valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdisteen, jolla on kaava 0 Il N-Γ-C - C-NH _\ 25. ii \\ Il I I XIV B2HN or2 0 | CH2I COOB1 2 1 30 jossa R on edellä määritelty, B on tavanomainen karbok- 2 syyliryhmän suojaryhmä ja B on tavanomainen aminoryhmän suojaryhmä, annetaan reagoida tertiäärisen amiinin kanssa, jolla on kaava R·3 /

35 CH0-N 3 4 jossa R ja R ovat edellä määriteltyjä, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava o 28 74974 II s N-t-C— C-NH—.-f N c 3 XV ilJk , TXA ®i <2 S OR2 O T CHo- N-CH- B HN | ^ I 3 COOB1 >4 R ja tämän jälkeen poistetaan kaikki suojaryhmät tavanomai-10 sin menetelmin ja/tai haluttaessa kaavan I mukainen yh diste muutetaan myrkyttömäksi farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi tai solvaatiksi.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan I mu- 2 3 15 kainen yhdiste, jossa R on metyyli, R on metyyli tai 4 etyyli ja R on metyyli, etyyli, 2-hydroksietyyli, allyy-li tai pyridyylimetyyli, tai sen myrkytön farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola tai solvaatti.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että valmistetaan 7-£(Z)-2-(2- aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamido7“3-(trime-tyyliammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti, 7-0Z)- 2-(2-aminotiatsol-4-yyli)-2-metoksi-iminoasetamidq7-3-£N,N-dimetyyli-N- (2-hydroksietyyli) ammoniuia7metyyli-3-25 kefeemi-4-karboksylaatti tai 7-^JZ)-2-(2-aminotiatsol-4- yyli)-2-metoksi-iminoasetamido7“3-(N,N-dimetyyli-N-allyy-liammonium)metyyli-3-kefeemi-4-karboksylaatti tai niiden myrkytön farmaseuttisesti hyväksyttävä happoadditiosuola tai solvaatti. li 29 74974