FI67378C - Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara tiazolidin- och tiazanderivat - Google Patents

Description

RSF^l M ««KUULUTUSJULKAISU 67 37 8 ^rjk lBJ *"> utlAggningsskkift ° ' ° c (45) t' :..i uy^nn·: lly ’i lv^5 sS£b2V ’“c 07 D 283/00 // C 07 ο 277/06, v (51) K**-/««.a. 279/06, 279/12, 265/30 SUOMI—FINLAND pi) ^tai^-p««wew<.| 7736^0 (22) —H»-—0'·'2·77 V 7 (23) AHcuplM—GIWftMtadag 01.12.77 (41) Tullut lulUMksI — BIlvH aff«ntN| 0*+ . 06.78

Patentti· ja rekiaterihallitut ... , , ,. „ , . . . . (44) NttitMUpmon ja kuuLIuiluOMn pvm. — n,

Patent- och registerityrelaan AmBkan utlagd odi uti^kitfMn pubiiearad 30.11 .oh (32)(33)(31) PjnMsejr utuoikaui —8*fird prtorltet 03.12.76 23.09.77 USA (US) 71+7281 , 836107 (71) E. R. Squibb & Sons, Inc., Lawrencevi1le-Princeton Road, Princeton,

New Jersey 085*10, USA(US) (72) Miguel Angel Ondetti, Princeton, New Jersey, USA(US) (7*+) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä uusien terapeuttisesti käytettävien tiatsolidiini- ja tiatsaanijohdannaisten valmistamiseksi - Förfarande för framställ-ning av nya terapeutiskt användbara tiazolidin- och tiazanderivat

Keksinnön kohteena on menetelmä uusien kaavan I mukaisten terapeuttisesti aktiivisten tiatsolidiini- ja tiatsaanikarboksyy-lihappojen ja niiden emäksisten suolojen valmistamiseksi, X, / \ j*3 ‘Vpm '“"Vn

R4 - S - (CH2) - CH - CO - N----CH - CO - OH I

jossa kaavassa R·^ ja R2 merkitsevät vetyä tai alempaa alkyyliä; on vety tai alempi alkyyli; on vety, alempi alkanoyyli tai bentsoyyli; X on O, S, SO tai S02> jolloin m on 2 ja n on 1, kun X on O; m on 1 tai 2, n on 0, 1 tai 2 ja 67378 m + n on 2 tai 3; p on 0 tai 1.

Kaavan I mukaisille yhdisteille on luonteenomaista substi-tuoimaton tai alempien alkyylien substituoima 5- tai 6-jäseninen heterosyklinen karboksyylihappo, jonka renkaassa on yksi typpiato-mi ja yksi rikki- tai happiatomi, jolloin jäljelle jäävinä renkaan jäseninä ovat hiiliatomit, ensisijaisia ovat tiatsoiidiini-, tiat-saani- ja morfoliinikarboksyylihapot. Kuten on osoitettu, renkaassa on typen lisäksi heteroatomi, joka on happi tai rikki tai rikki,

O

II

joka voi olla hapetettu sulfinyyliksi (—S—) tai sulfonyvliksi 0 0 ^ // (-S-). Heterosyklisen renkaan typpeen kiinnittynyt sivuketju on substituoimaton tai substituoitu merkapto-alkanoyyliryhmä.

Alempien alkyylien ryhmään, jota edustaa jokin vaihtoehdoista, sisältyy suoraketjuisia tai haarautuneitahiilivetyradikaa-leja metyylistä heptyyliin, esim. metyyli, etyyli, propyyli, isopro-pyyli, butyyli, isobutyyli, t-butyyli, pentyyli, isopentyyli ja niiden kaltaisia radikaaleja. Alemmat alkyleeniryhmät ovat samankaltaisia sisältäen myös 1-7 hiiliatomia. Samoin alemmat alkoksiryhmät ovat samankaltaisia ryhmiä, happoon sidottuina, esim. metoksi, etok-si, propoksi, isopropoksi, butoksi, isobutoksi, t-butoksi ja niiden kaltaisia ryhmiä, C^_^-ryhmät, erityisesti kaiken tyyppiset C^- ja C^-ryhmät ovat etusijalla. Alemmat alkanoyyliryhmät ovat alempien rasvahappojen (aina 7 hiileen saakka) asyyliradikaaleja, esim. ase-tyyli, propionyyli, butyryyli ja niiden kaltaisia radikaaleja, joista asetyyli on ensisijainen ryhmä.

Ensisijaisia ovat ne kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on hydroksi; R^ ja R2 ovat erityisesti vety, metyyli tai etyyli, aivan erityisesti vety; en erikoisesti vety, metyyli tai etyyli; I<4 on erikoisesti vety, asetyyli tai bentsoyyli; X on rikki tai happi, erityisesti rikki; m on 1 tai 2; n on 1; ja p on 0 tai 1, erityisesti 1.

Kaavan I mukaisia tuotteita valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että a) kaavan II mukainen yhdiste ^ X^ (R--CH) "(CH-R,)

2 | m | 1 n II

UN---------- CH - COOH

3 67378 asyloidaan yhdessä, vaiheessa antamalla sen reagoida kaavan III mukaisen yhdisteen tai sen reaktiivisen ekvivalentin kanssa, R-, I 3

R. - S - (CH0) - CH - COOH III

4 2 p tai b) kaavan II mukainen yhdiste asyloidaan asteittain liittämällä ensin osa asyloivaa ainetta III kaavan II mukaiseen happoon esim. siten, että tämän hapon annetaan reagoida kaavan (lila) mukaisen halogee-niasyylihalogenidin kanssa R3 hai - (CH-) -CH-CO-hal (Ula)

2 P

jolloin kaavassa hai merkistee halogeenia, ensisijaisesti klooria tai bromia, esim. 3-bromipropanoyylikloridia, jolloin muodostuu seu-raavan kaavan (Illb) mukainen tuote R- (R0-CH) (CH-R.) (Illb) 13 2 | m | in

hai- (CH~) -CH-CO- N---CH-CO-OH

2 p jonka annetaan sitten reagoida tioli-R^-SH:n kanssa, jolloin muodostuu kaavan I mukainen haluttu tuote, minkä jälkeen mahdollisesti hydrolysoidaan näin saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^ on muu kuin vety, kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R^ on vety, ja/tai mahdollisesti hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on S, kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on SO tai SO2, tai kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on SO, hapetetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on SO2, ja näin saatu kaavan I mukainen yhdiste mahdollisesti muutetaan emäksiseksi suolaksi.

Asylointireaktiossa käytetään tunnettuja menetelmiä, joilla happo III aktivoidaan ennen hapon II kanssa tapahtuvaa reaktiota, mihin menetelmin sisältyy seka-anhydridin, symmetrisen anhydridin, happo-kloridin, aktiivisen esterin Woodward'in reagenssi K,N,N'-karbonyyli-bisimidatsolin, EEDQ (N-metoksikarbonyyli-2-etoksi-1,2-dihydrokinolii-ni)n tai sen kaltaisen yhdisteen muodostus.

4 67378

Kaavan I mukaisilla tuotteilla on ainakin yksi tai saattaa olla aina neljä asymmetristä hiiliatomia. Nämä hiiliatomit on merkitty tähdellä kaavassa I. Sen mukaisesti yhdisteet esiintyvät dia-stereoisomeerisissä muodoissa tai niiden raseemisinä seoksina. Ne kaikki kuuluvat keksinnön piiriin. Yllä kuvatussa synteesissä voidaan käyttää lähtöaineena rasemaattia tai yhtä enantiomeereistä.

Kun raseemista lähtöainetta on käytetty synteesissä, tuotteena saadut stereoisomeerit voidaan erottaa tavanomaisin kromatografisin menetelmin tai fraktioivin kiteyttämismenetelmin. Yleensä L-iso-meeri aminohapon hiilen suhteen on ensisijainen isomeerinen muoto.

Keksinnön yhdisteet muodostavat erilaisten epäorgaanisten ja orgaanisten emästen kanssa emäksisiä suoloja, jotka ovat myös keksinnön piirissä. Sellaisiin suoloihin kuuluvat ammoniumsuolat, alkalimetallien suolat, kuten natrium- ja kaliumsuolat (jotka ovat ensisijaisia), maa-alkalimetallien suolat, kuten kalsium- ja magne-siumsuolat, orgaanisten emästen kanssa muodostetut suolat, esim. disykloheksyyliamiinisuolat, bentsatiini, N-metyyli-D-glukamiini, hydrabamiinisuolat, aminohappojen, kuten argoniinin ja lysiinin suolat ja yms. b.i-myrkylliset, fysiologisesti hyväksyttävät suolat ovat ensisijaisia, vaikka muut suolat ovat myös käyttökelpoisia, esim. eristettäessä ja puhdistettaessa tuotetta, kuten disyklohek-syyliamiinisuolan tapauksessa.

Suolat muodostetaan tavanomaisella menetelmällä siten, että tuotteen vapaa happomuoto reagoi yhden tai useamman, toivotun kationin sisältävän emäsekvivalentin kanssa, liuottimessa tai väliaineessa, johon suola on liukenematon ja josta se on suodatettavissa, tai vedessä ja vesi poistetaan lyofilisoinnin avulla. Neutraloimalla suola liukenemattomalla hapolla, kuten vetyionimuodossa olevalla kationinvaihtohartsilla pesiin, polystyreenisulfonihappohartsilla - Dowex 50 (Mikes, Laboratory Handbook of Chromatographie Methods, Van Nostrand, 1961) sivu 256./ tai hapon vesiliuoksella ja uuttamalla orgaanisella liuottimena, esim. etyyliasetaatilla, dikloorime-taanilla tai yms., voidaan saada vapaa happo, ja jos halutaan, toinen suola muodostuu.

Muita kokeen yksityiskohtia löytyy esimerkeistä, jotka ovat patentin ensisijaisia suoritusmuotoja ja toimivat myös malleina valmistettaessa muita ryhmän jäseniä.

67378

Keksinnön yhdisteet inhiboivat dekapeptidin, angiotensiini I:n muuttumisen angiotensiini II:ksi ja ovat sen tähden käyttökelpoisia vähennettäessä tai lievennettäessä angiotensiiniin liittyvää hypertensiota. Reniinientsyymin vaikuttaessa angiotensinogee-niin,veriplasman psendoglobuliiniin, muodostuu angiotensiini I:tä. Angiotensiini I muuttuu angiotensiiniä "konvertoivalla" entsyymillä (ACE) angiotensiini II:ksi. Viimeksi mainittu on aktiivinen verenpainetta kohottava aine, joka on kohonneen verenpaineen aiheuttaja eri nisäkäslajeilla, esim. rotilla, koirilla jne. Keksinnön yhdisteet kytkeytyvät reaktiosarjaan angiotensinogeeni -> an giotensiini I —> angiotensiini II inhiboiden angiotensiiniä "konvertoivan" entsyymin ja vähentäen verenpainetta kohottavan aineen angiotensiini II:n muodostumista tai estäen sen muodostumisen.

Angiotensiiniä "konvertoivan" entsyymin inhibitiokaavan I mukaisilla yhdisteillä voidaan mitata in vitro kaniinin keuhkoista eristetyn angiotensiiniä "konvertoivan" entsyymin avulla käyttäen Cushman'n ja Cheung'n kuvaamaa menettelyä ^Biochem. Pharmacol., 20, 1637 (1971 )J ja määrittämällä pehmeän lihaksen avulla /E. O'Keefe, et ai., Federation Proc. 3_1, 511 (1972),7, missä kokeissa näiden yhdisteiden on osoitettu olevan angiotensiini I:n aikaansaaman supistumisen voimakkaita inhibiittoreita ja bradykiniiniä aikaansaavan supistumisen tehostajia.

Jos koostumusta, joka käsittää yhden kaavan I mukaisen yhdisteen tai kaavan I mukaisten yhdisteiden kombinaation tai niiden fysiologisesti hyväksyttävän suolan, annetaan hypertensiivisten nisäkkäiden lajeille, se lievittää tai vähentää angiotensiinistä johtuvaa kohonnutta painetta. Yksi annos tai ensisijaisesti kahteen tai neljään osaan jaettu päiväannos, päiväannoksen ollessa 5-1000 mg, mieluummin 10-500 mg kilogrammaa kohti, vähentää sopivasti verenpainetta. Eläimillä suoritetut mallikokeet, joita ovat kuvanneet S.L. Engel, T.R. Schaeffer, M.H. Waugh ja B. Rubin,

Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 143, 483 (1973), ovat käyttökelpoisia ohjeita.

Aine annetaan mieluummin suun kautta, mutta parenteraalisia teitä, kuten ihonalaista, lihakseen suoritettua, suonensisäistä tai vatsaonteloon suoritettua annostua voidaan myös käyttää.

Keksinnön yhdisteitä voidaan käyttää verenpaineen alentami- 67378 miseen formuloimalla ne kokoonpanoltaan esim. tableteiksi, kapseleiksi tai eliksiireiksi suun kautta suoritettavaa annostelua varten tai steriileiksi liuoksiksi tai suspensioiksi ruoansulatuskanavan ulkopuolista annostelua varten. Noin 10-500 mg kaavan I mukaista yhdistettä tai kaavan I mukaisten yhdisteisen seosta tai fysiologisesti hyväksyttävää suolaa yhdistetään fysiologisesti hyväksyttävän apuaineen, kantaja-aineen sidosaineen, säilytysaineen, stabiloimisaineen, mausteen jne. kanssa annosyksikön muotoon, kuten edellytetään hyväksyttävältä farmaseuttiselta käyttötekniikalta. Näiden koostumusten tai valmisteiden aktiivisen aineen määrä on sellainen, että saadaan sopiva annos, joka on ilmoitetuissa rajoissa.

Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä ja ovat patentin ensisijaiset suoritusmuodot. Kaikki lämpötilat ovat Celsius-asteina.

Esimerkki 1 3-(3-bentsoyylitiopropanoyyli)-4-L-tiatsolidiinikarboksyyli- haPP° Jäähauteella jäähdytettyyn L-4-tiatsolidiinikarboksyyliha-pon (6,6 g) liuokseen 1N NaOH:ssa (50 ml) lisätään 2N natriumhydr-oksidia (25 ml) ja 3-bromipropionyylikloridia (8,5 g) mainitussa järjestyksessä, voimakkaasti sekoittaen. Kolmen tunnin kuluttua lisätään veteen (50 ml) tehty suspensio, jossa on tiobentsoehap-poa (7,5 g) ja kaliumkarbonaattia (4,8 g). Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa yön yli ja seos suodatetaan. Suodos tehdään happameksi konsentroidulla suolahapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros kuivataan ja konsentroidaan kuivaksi. Jäännös puhdistetaan silikageelikromatografiän avulla (bentseeni:etikkahappo, 7:1) ja puhdistettu aine kiteytetään etyy-liasetaatti-eetteri-heksaanista, jolloin saadaan 3-(3-bentsoyyli-tiopropanoyyli)-4-L-tiatsolidiinikarboksyylihappoa, sp. 105-106°.

Yllä mainittu tuote liuotetaan veteen ja siihen lisätään ekvivalentti määrä natriumhydroksidiliuosta. Liuos lyofilisoidaan, jolloin saadaan natriumsuola.

Esimerkki 2 3-(3-merkaptopronoyyli)-L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappo 3-(3-bentsoyylitiopropanoyyli)-L-4-tiatsolidiinikarboksyy-lihappo (6,7 g) liuotetaan argonkehän alla veden (15 ml) ja kon- 7 67378 sentroidun ammoniakin (7,5 ml) seokseen. Yhden tunnin ajan huoneen lämpötilassa tapahtuvan varastoinnin jälkeen reaktioseos laimennetaan vedellä (20 ml) ja suodatetaan. Suodos uutetaan etyyliasetaatilla, tehdään happameksi konsentroidulla suolahapolla ja uutetaan uudelleen etyyliasetaatilla. Toinen etyyliasetaattiuute kuivataan ja konsentroidaan kuivaksi. Jäännös, 3-(3-merkaptopropanoyy1i)-L- 4-tiatsolidiinikarboksyylihappo kiteytetään etyyliasetaatista, sp. 110-112°.

Esimerkki 3 a) 3-asetyylitio-2-metyylipropionihappo (lähtöaine)

Tioetikkahapon (50 g) ja metakryylihapon (40,7 g) seosta kuumennetaan höyryhauteella yhden tunnin ajan ja säilytetään sitten huoneen lämpötilassa yhdentoista tunnin ajan. Reaktioseos tislataan tyhjössä ja kerätään fraktio, jonka kp. on 128,5 - 131°, 2,6 mm.

3-asetyylitio-2-metyylipropionihappo voidaan eristää myös siten, että reaktioseoksen annetaan kiteytyä heksaanilla suoritetun laimentamisen jälkeen, sp. 40-42°.

b) 3-(3-asetyylitio-2-metyylipropanoyyli)-2-tiatsolidiini-karboksyylihapon metyyliesteri 2- t.iatsolidiinikarboksyylihapon metyyliesteriä (C.A. 53, 12,281d) (4,4 g) ja 3-hydroksibentsotriatsolia (4,0 g) liuotetaan dikloorimetaaniin (40 ml) ja liuosta sekoitetaan ja jäähdytetään jäähauteessa. Lisätään disykloheksyylikarbodi-imidiä (6,2 g) liuotetaan dikloorimetaaniin (15 ml) ja sen jälkeen välittömästi 3-asetyyli-2-metyylipropionihapon (4,9 g) liuosta dikloorimetaanissa ( 5 ml). 15 minuutin jäähauteessa ja 16 tunnin huoneen lämpötilassa suoritetun sekoituksen jälkeen sakka poistetaan suodattamalla ja suodos pestään neutraaliksi. Orgaaninen kerros kuivataan ja konsentroidaan kuivaksi tyhjössä, jolloin saadaan 3-(3-asetyylitio- 2-metyylipropanoyyli)-2-tiatsolidiinikarboksyylihapon metyyliesteri.

c) 3-(3-merkapto-2-metyylipropanoyyli)-2-tiatsolidiinikarbok-syylihappo 3- (3-asetyylitio-2-metyylipropanoyyli)-2-tiatsolidiinikar-boksyylihapon metyyliesteriä (2,9 g) liuotetaan metanoliin (30 ml) ja lisätään N natriumhydroksidia (30 ml). Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa, tietty osa poistetaan joka tunti ja tarkistetaan paperielektroforeesin avulla metyyliesterin hydrolyysin suh 8 67378 teen. Kun tämä hydrolyysi on suoritettu loppuun (noin kolme tuntia) , reaktioseos neutraloidaan, konsentroidaan tyhjössä metanolin poistamiseksi, tehdään happameksi konsentroidulla suolahapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros kuivataan ja konsentroidaan kuivaksi, jolloin saadaan 3-(3-merkapto-2-metyylipropano-yyli)-2-tiatsolidiinikarboksyylihappo, sp. 96-101°C.

Laskettu CqH^NO^ : lie: C 40,83, H 5,57, N 5,95, S 27,25 Löydetty: C 40,45, H 5,38, N 5,73, S 26,97 SH-titraus 99,4 %.

Esimerkki 4 3-(3-merkaptopropanoyyli)-1,3-tiatsaani-4-karboksyylihappo

Korvaamalla esimerkin 1 mukaisessa menetelmässä 4-L-tiatso-lidiinikarboksyylihappo 1,3-tiatsaani-4-karboksyylihapolla £j.

Biol. Chem. , 607 (1957)^7 ja käyttämällä tuotetta esimerkin 2 mukaisessa menetelmässä, saadaan 3-(3-bentsoyylitiopropanoyyli)-1,3-tiatsaani-4-karboksyylihappo ja 3-(3-merkaptopropanoyyli)-1,3-tiatsaani-4-karboksyylihappo.

Lopputuote (3-merkaptoyhdiste) saadaan vaalean keltaisena, viskoosina siirappina, jonka R^-arvo oli 0,32 (silikageeli-bentsee-ni/etikkahappo (7:1)) ja jonka alkuaineanalyysi oli seuraava: Laskettu C8H13No3S2: lie: C 40,83 , H 5,57, N 5,95, S 27,25 Löydetty: C 40,96, H 5,54, N 6,02, S 26,94.

Esimerkki 5 3-(3-merkapto-2-metyylipropanoyyli)-L-4-tiatsolidiinikar-boksyylihappo 3-asetyylitio-2-metyylipropaanihappokloridia (5,4 g, valmistettu 3-asetyylitio-2-metyylipropaanihaposta ja tionyylikloridista, kp.80°C) ja 2-n natriumhydroksidia (15 ml) lisätään liuokseen, jossa on L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappoa (Z. Naturforschg., 17b (1962) 765)(5,2 g) 1-n natriumhydroksidissa (30 ml), ja joka on jäähdytetty jää/vesi-hauteessa. Seosta sekoitetaan 3 tuntia huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen se uutetaan eetterillä, vesifaasi tehdään happameksi ja uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen faasi kuivataan magnesiumsulfaatilla ja konsentroidaan kuiviin vakuumis-sa, jolloin saadaan 3-(3-asetyylitio-2-metyylipropanoyyli)-L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappo.

9 67378 3- (3-asetyylitio-2-metyylipropanoyyli)-L-4-tiatsolidiini-karboksyylihappo (1 g) liuotetaan veden (3 ml) ja konsentroidun ammoniakin (3 ml) seokseen argonin suojaamana. Seosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 30 minuuttia, ja se tehdään happameksi konsentroidulla suolahapolla. Orgaaninen kerros konsentroidaan kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan 3-(3-asetyylitio-2-metyylipropa-noyyli)-L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappo (asetonitriilistä kiteytetty disykloheksyyliammoniumsuola, sp. 172-186°C (sint. 130°C))ja 3-(3-merkapto-2-metyylipropanoyyli)-L-4-tiatsolidiinikarboksyyli-happo (etyyliasetaatti/heksaanista kiteytetty disykloheksyyliammoniumsuola, sp. 180-188°C (sintraantuminen 170°C)).

Esimerkki 6 4- (3-asetyylitiopropanoyyli)-L-l,4-tiatsaani-5-karboksyyli- happo L-4-tiomorfoliini-2-karboksyylihapon hydrokloridia (6,6 g, 0,036 m) liuotetaan 150 ml:aan dimetyyliasetamidia ja lisätään 3-asetyylitiopropanoyylikloridia (5,97 g, 0,036 m). Lämpötila nostetaan 28°:seen. Tähän liuokseen lisätään N-metyylimorfoliinia (10,9 g, 0,108 m). Lämpötila nostetaan 42°:seen, jolloin valkoinen saostuma muodostuu välittömästi. Seosta kuumennetaan höyryhauteella yhden tunnin ajan ja sen annetaan olla huoneen lämpötilassa yön yli. Kiinteä aine poistetaan suodattamalla, jolloin saadaan 9,7 g 4-(3-asetyy-litiopropanoyyli)-L-l,4-tiatsaani-5-karboksyylihappoa, sp. 202-204°. Liuotin poistetaan, jolloin saadaan viskoosinen jäännös, joka hierotaan jauheeksi veden ja 20-%:isen suolahapon kanssa. Saostunut öljy uutetaan 3 x 150 ml:11a etyyliasetaattia ja uutteet kuivataan magnesiumsulfaatin päällä. Liuotin poistetaan ja viskoosinen tähde (7,5 g) kiteytyy seisoessa. Asetoni-heksaanista suoritetun uudelleen-kiteyttämisen jälkeen tuotteen muuttumaton sulamispiste on 122-125°.

Esimerkki 7 4-(3-merkaptopropanoyyli)-L-l,4-tiatsaani-5-karboksyylihappo

Ammoniakin vesiliuosta (13 ml väkevää ammoniumhydroksidia 30 mlrssa vettä) sekoitetaan typpikaasun suojaamana 15 minuutin ajan ja lisätään kiinteää 4-(3-asetyylitiopropanoyyli)-L-l,4-tiatsaani- 5-karboksyylihappoa (6,8 g, 0,024 m). Kirkas liuos muodostuu äkkiä 5-10°;ssa. Liuosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa typpikehän alla yhden tunnin ajan. Liuos uutetaan 100 ml:11a etyyliasetaattia 10 67378 ja vesikerros tehdään voimakkaasti happameksi 20-%:sella suolahapolla. Saostunut öljy uutetaan 3 x 150 ml :11a etyyliasetaattia. Uutteet yhdistetään ja kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, sitten liuotin poistetaan, jolloin saadaan 5,6 g suurikiteistä ainetta, joka näyttää sisältävän huomattavasti lähtöainetta. Saatu aine (5,5 g) hydrolysoidaan uudelleen vielä kahden tunnin ajan liuoksella, jossa on, kuten yllä on mainittu, 12 ml:aa konsentroitua ammo-niumhydroksidia 25 ml:ssa vettä. Liuos tehdään happameksi ja saostunut öljy uutetaan 3 x 150 ml :11a etyyliasetaattia. Uutteet yhdistetään ja kuivataan magnesiumsulfaatin päällä, sitten liuotin poistetaan, jolloin saadaan 2,7 g (48 %) 4-(3-merkaptopropanoyyli)-L- 1,4-tiatsaani-5-karboksyylihappoa viskoosina massana, sen jälkeen, kun on kuivattu yön yli huoneen lämpötilassa ja 1 mm:ssä.

Analyysi laskettu C0H.oN0-,Sn:lie: N, 5,95, C, 40,82; H, 5,56, O 1 J O L· S, 27,25, SH, 100 % Löydetty: N, 6,13, C, 40,85, H, 5,46, S, 27,38, SH, 96 %.

Esimerkki 8 3-(3-merkapto-2-D-metyyli-l-oksopropyyli)-L-4-tiatsolidiini-karboksyylihappo-l-oksidi a) 3- (3-asetyylitio-2-D-metyyli-l--oksopropyyli) -L-4-tiatsoli-diinikarboksyylihappo-l-oksidi 2,76 g 3-(3-asetyylitio-2-D-metyyli-l-oksopropyyli)-L-4-tiat-solidiinikarboksyylihappoa lisätään seokseen, jossa oli 20 ml mety-leenikloridia ja 1,84 ml muurahaishappoa, sekoittaen huoneen lämpötilassa. Tähän seokseen lisätään 1,04 ml 30-% vetyperoksidia. 3,5 tunnin kuluttua seos konsentroidaan kuiviin vakuumissa, käsitellään etyyliasetaatilla, suodatetaan ja konsentroidaan kuiviin vakuumissa, jolloin saadaan 2,5 g tuotetta.

b) 3-(3-merkapto-2-D-metyyli-l-oksopropyyii)-L-4-tiatsolidii-nikarboksyylihappo-l-oksidi

Vaiheesta a) saatua materiaalia käsitellään 20 minuuttia kylmällä veden (20 ml) ja konsentroidun ammoniumhydroksidin (10 ml) liuoksella, seos tehdään happameksi AG50WX2-hartsilla ja kromato-grafioidaan AG50WX2-hartsilla, jolloin saadaan 1 g tuotetta hygros-kooppisena lyofilisaattina, jonka optinen kiertokulma / oc _7D on -183,1 (c = 1,42, raetanolissa).

6737 8

Analyysi yhdisteelle C^gH^^N0^S2.1/2 1^0

Laskettu: C 36,95, H 5,43, N 5,39, S 24,66 Löydetty: C 36,94, H 5,45, N 5,45, S 24,82.

Esimerkki 9 3-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-2-metyyli-L-4-tiatsolidiini-karboksyylihappo 3-(asetyylitio)propionyylikloridia (9,0 g, 0,07 m) lisätään hitaasti liuokseen, jossa oli 2-metyyli-L-4-tiatsolidiinikarbok^ syylihappoa (8,0 g, 0,0544 m) ja natriumkarbonaattia (2,9 g) 70 ml:ssa tislattua vettä samalla pitäen pH arvossa 9 lämpötilan ollessa 6°C lisäämällä 24-% natriumkarbonaattiliuosta. Seosta sekoitetaan 30 minuuttia jäähauteessa, minkä jälkeen lisätään 70 ml vettä, jolloin saadaan kirkas liuos. Sekoitusta jatketaan edelleen huoneen lämpötilassa yhden tunnin ajan, minkä jälkeen seos uutetaan kaksi kertaa etyyliasetaatilla ja jäähdytetään 6-7°C:seen, tehdään happameksi väkevällä suolahapolla pH-arvoon 2,5. Sen jälkeen reak-tioseos kyllästetään natriumkloridilla ja uutetaan kahdesti etyyliasetaatilla. Etyyliasetaattiuutteet kuivataan magnesiumsulfaatilla ja haihdutetaan kuiviin, jolloin saadaan 13,32 g 3-(3-asetyylitio)- 1-oksopropyyli)-2-metyyli-L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappoa, joka sitten muutetaan disykloheksyyliamiinisuolaksi, kiteytetään isopro-panolista ja muutetaan vapaaksi hapoksi, joka sulaa 119-122°C:ssa (kiteytetty etyyliasetaatti/heksaanista).

Edellä saatu tuote lisätään seokseen, jossa on 12 ml vettä ja 8 ml ammoniumhydroksidia jäähauteessa, ja sen jälkeen seosta sekoitetaan yksi tunti huoneen lämpötilassa, minkä jälkeen seokseen lisätään 40 ml vettä, ja seos uutetaan kaksi kertaa etyyliasetaatilla. Sen jälkeen vesikerros jäähdytetään, tehdään happameksi väkevällä suolahapolla ja uutetaan etyyliasetaatilla. Etyyliasetaatti-kerros kuivataan magnesiumsulfaatilla ja konsentroidaan kuiviin va-kuumissa, jolloin saadaan 2,3 g öljyä, jota sen jälkeen sekoitetaan heksaanissa 72 tuntia, jolloin saadaan 1,75 g 3-(3-merkapto-l-oksopropyyli) -2-metyyli-L-4-tiatsolidiinikarboksyylihappoa värittömänä materiaalina, sp. 69-95°C.

Analyysi yhdisteelle CgH^S^NOg

Laskettu: C 40,83, H 5,57, S 27,25, N 5,95 Löydetty: C 40,96, H 5,60, S 27,39, N 5,89.

67378 12

Esimerkit 10 ja 11 D,L-/3-(asetyylitio)-1-oksopropyyl :iJ7-2-tiatsolidiinikarbok-syylihappo ja disykloheksyyliamiinisuola (1:1) a) DL-tiatsolidiini-2-karboksyylihappo

Seos, jossa on 19,0 g (0,167 mol) kysteamiinihydrokloridia ja 14,9 g (0,201 mol) glyoksyylihappohydraattia, liuotetaan 15 mitään vettä. Seokseen lisätään 50 ml vedetöntä etanolia, minkä jälkeen reaktioseoksen annetaan seisoa huoneen lämpötilassa 45 minuuttia, ja sen jälkeen sitä käsitellään 13,8 gtlla (0,168 mol) natriumasetaattia. Reaktioseoksen annetaan sen jälkeen seisoa suljettuna huoneen lämpötilassa yön yli, ja sitten sitä jäähdytetään yhden tunnin ajan, ja sitten se suodatetaan käyttäen jäähdytettyä 95-% etanolia pesuun. Tuote kuivataan, ja raakatuotteen (16,4 g) sulamispiste oli 178-180°C. (haj.). Analyysi osoitti, että raaka-tuote sisältää noin 0,93 mooliekvivalenttia natriumkloridia.

Analyysi yhdisteelle C4H7NC>2.0,93 NaCl

Laskettu: C 25,62, H 3,76, N 7,47, S 17,10, Na 11,40, Cl 17,58 Löydetty: C 25,79, H 3,99, N 7,32, S 17,36, Na 11,59, Cl 18,21.

b) DL-3-/13- (asetyylitio) -l-oksopropyyli7-2-tiatsoliidinikar-boksyylihappo-disykloheksyyliamiinisuola

Seokseen, jossa on 56 ml vettä ja 63 ml tetrahydrofuraania ja joka on jäähdytetty jää/vesi-hauteessa, lisätään 7 g (37,3 mmol) tiatsolidiini-2-karboksyylihappoa (.0,93 NaCl) ja 9,1 g (112 mmol) natriumbikarbonaattia. Seosta voimakkaasti sekoittaen ja jäähdyttäen siihen lisätään pisaroittain 5,0 ml (37,4 mmol) 3-asetyylitiopropio-nyylikloridia. Lisäyksen aikana pH pidetään arvon 7 läheisyydessä lisäämällä kiinteää natriumbikarbonaattia. 45 minuutin kuluttua pH lakkaa muuttumasta, jolloin reaktio päätetään lisäämällä 1-n HC1 niin, että pH saadaan arvoon 1, minkä jälkeen reaktioseos uutetaan etyyliasetaatilla. Orgaaninen kerros pestään vedellä ja suolaliuoksella, kuivataan natriumsulfaatilla ja konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan 10,0 g raakatuotetta. Tuote kromatografoltiin käyttäen 850 g Baker-silikageeliä ja eluenttina seosta CHCl:MeOH:HOAc (20:2:1), jolloin saatiin 9,2 g raakatuotetta, jossa ohutkerros-kromatografiän mukaan oli pieniä määriä epäpuhtauksia ja pieni määrä liuotinjäännöksiä.

Kromatografoitu vapaa happo (9,3 g) liuotetaan 6 ml:aan 67378 etyyliasetaattia ja tämä liuos lisätään 300 ml:aan eetteriä. Noin 200 ml etyyliasetaattia lisätään, jolloin saadaan kirkas liuos, josta kahden tunnin kuluessa huoneen lämpötilassa saostuu 13,3 g (89 %) analyyttisesti puhdasta tuotetta, sp. 195-196°C ja neutralointiekvi-valentti 444 (laskettu 445). Metanoli/eetteristä uudelleenkiteytetyn tuotteen sulamispiste on 197-198°^·

Vaiheesta b) saatu disykloheksyyliamiinisuola (3 g, 6,72 mmol) käsitellään erotussuppilossa 67,2 ml :11a 0,2-n rikkihapon vesiliuosta ja 67 ml :11a etyyliasetaattia. Vesifaasi uutetaan edelleen 60 ml:n ja 30 ml:n erillä etyyliasetaattia, ja yhdistetyt etyyliasetaatti-liuokset pestään 15 ml:n erillä vettä ja 15 ml:11a suolaliuosta. Etyyliasetaattiliuos kuivataan Ν32δ0^:1ΐ3, minkä jälkeen liuotin haihdutetaan tyhjössä, jolloin saadaan 1,9 g raakatuotetta. Puoli-kiinteä tuote liuotetaan CH2Cl2:iin ja jaetaan ampulleihin, minkä jälkeen liuotin poistetaan niin täydellisesti kuin mahdollista konsentroimalla tuote typpivirrassa, minkä jälkeen suoritetaan lopullinen kuivaus korkeavakuumissa. Saatu tuote on homogeenista ana-lyyttisen ohutkerroskromatografiän mukaan: = 0,47 silikageelilla, CHC13:MeOH:HOAc (12:2:1).

Esimerkki 12 DL-4-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-3-morfollinikarboksyylihappo a) DL-4-(3-asetyylitio-l-oksopropyyli)-3-morfoliinikarboksyy- lihappo 0,0207 mol 3-morfoliinikarboksyylihappohydrokloridia saatetaan reagoimaan 0,023 moolin kanssa 3-asetyylitiopropionyylikloridia 50 ml:ssa vettä, joka sisälsi 2,2 g natriumkarbonaattia, jäähauteen lämpötilassa. Reaktioseoksen pH pidetään arvossa 8-8,2 lisäämällä yhteensä 17 ml 25-% natriumkarbonaatin vesiliuosta reaktion aikana. Kun pH-arvo lakkaa muuttumasta, reaktio päätetään suolahapolla, ja reaktioseos uutetaan etyyliasetaatilla. Uutossa saadaan 5,0 g raakaa, siirappimaista tuotetta, joka muutetaan disykloheksyyliamiini-suolaksi 50 ml:ssa etyyliasetaattia, saanto 7,1 g, sp. 182-185°C (sintraantuu 170°C:ssa). Kiteytettäessä tuote 300 ml:sta asetonit-riiliä saadaan 5,7 g väritöntä suolaa, sp. 187-189°C.

Analyysi yhdisteelle C^QH1^NOgS.C^2H23N Laskettu: C 59,70, H 8,65, N 6,33, S 7,25 Löydetty: C 59,46, H 8,53, N 6,22, S 7,53.

14 67378

Disykloheksyyliamiinisuola muutetaan vapaaksi hapoksi käyttäen 50 ml 10-% kaliumbisulfaatin vesiliuosta, sp. 110-112°C.

Analyysi yhdisteelle

Laskettu: C 45,96, H 5,79, N 5,36 Löydetty: C 46,26, H 6,01, N 5,51.

b) DL-4-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-3-morfoliinikarboksyyli- happo 0,013 mol vaiheesta a) saatua tuotetta hydrolysoidaan 8 ml :11a konsentroitua ammoniumhydroksidia 19 ml:ssa vettä kahden tunnin ajan huoneen lämpötilassa samalla sekoittaen. Saadun värittömän tuotteen paino oli 2,75 g.

Analyysi yhdisteelle CgH^^NO^S.1/4 t^O

Laskettu: C 42,94, H 6,08, N 6,26, S 14,33 Löydetty: C 42,84, H 6,22, N 6,30, S 14,12.

Esimerkki 13 3-(3-merkapto-2D-metyyli-l-oksopropyyli)-L-4-tiatsolidiini-karboksyylihappo-1,1-dioksidi 3-(3-asetyylitio-2D-metyyli-l-oksopropyyli)-L-4-tiatsolidii-nikarboksyylihappo-1,1-dioksidia (2,9 g) lisätään voimakkaasti sekoittaen seokseen, jossa on 100 ml vettä, 30 ml metanolia ja 100 ml konsentroitua ammoniumhydroksidia ja joka on jäähdytetty jäähautees-sa. 4 5 minuutin kuluttua reaktioseos pestään voimakkaasti 150 ml :11a etyylieetteriä ja 50 ml:11a etyyliasetaattia, ja sen jälkeen se tehdään happameksi pH-arvoon 1 väkevällä suolahapolla. Seos uutetaan etyyliasetaatilla, ja etyyliasetaatista saatu öljymäinen tuote liuotetaan 50 ml:aan etyyliasetaattia ja käsitellään 1,3 ml:11a disyklo-heksyyliamiinia ja laimennetaan eetterillä, jolloin saadaan 2,1 g tuotetta disykloheksyyliamiinisuolana, sp. 221-222 C, LoC 1D = -71,4° (c = 1, metanolissa).

Disykloheksyyliamiinisuolasta saadaan neutraloitaessa 1,11 g vapaata happoa hygroskooppisena, puolikiinteänä aineena.

Analyysi yhdisteelle CQH.^NOcS„.1/2 Ho0 o -L J j 2 2

Laskettu: C 34,77, H 5,10, N 5,07, S 23,21 Löydetty: C 34,92, H 5,16, N 9,85, S 23,50

Neutralointiekvivalentti, laskettu 276,3, löydetty 279.

15 67378

Esimerkki 14 DL-3-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-2-tiatsolidiinikarboksyyli-happo ja disykloheksyyliamiinisuola a) DL-3-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-2-tiatsolidiinikarboksyy lihappo-disyk lohek syy liamiinisuol a

Argonia johdetaan 40 ml:aan vettä 5 minuutin ajan. Tähän lisätään 35 ml 58-% NH^oH:n vesiliuosta, ja seosta sekoitetaan voimakkaasti argonkaasun suojaamana lisäämällä samalla 7,00 g (15,7 mmol) DL-3-(3-asetyylitio-l-oksopropyyli)-2-tiatsolidiinikarbok-syylihappo-disykloheksyyliamiinisuolaa annoksittain kiinteässä muodossa. Reaktioseosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa 20 minuuttia, minkä jälkeen se jäähdytetään jäähauteen lämpötilaan ja uutetaan 40 ml:n ja 30 ml:n erillä CI^C^· Vesifaasi jäähdytetään sen jälkeen nopeasti uudelleen argonkaasun suojaamana ja tehdään happa-meksi pH-arvoon 1 väkevällä suolahapolla ja uutetaan sen jälkeen 100 ml:11a ja 3 x 50 ml:11a etyyliasetaattia. Orgaaniset liuokset yhdistetään ja pestään 25 ml:11a vettä, 25 ml:11a suolaliuosta, kuivataan Na2SO^:Ha ja konsentroidaan vakuumissa, jolloin saadaan raaka öljymäinen tuote, öljy liuotetaan 30 ml:aan metanolia ja käsitellään 3,13 ml:lla (15,7 mmol) disykloheksyyliamiinia. Seokseen lisätään 250 ml eetteriä, ja sen annetaan seisoa huoneen lämpötilassa 3 tuntia, jolloin saadaan 5,71 g (90 %:n saanto) disykloheksyyli-amiinisuolaa, sp. 206-210°C (haj.), sintraantuu 200°C:ssa.

Analyysi yhdisteelle .DCHA-suola

Laskettu: C 56,68, H 8,51, N 6,96, S 15,93 Löydetty: C 56,41, H 8,37, N 6,80, S 16,10.

SH-titraus: 99,3 %.

b) DL-3-(3-merkapto-l-oksopropyyli)-2-tiatsolidiinikarbok- syylihappo

Disykloheksyyliamiinisuolaa (5,60 g, 13,9 mmol) lisätään erotussuppiloon, joka sisältää 100 ml etyyliasetaattia ja 140 ml jääkylmää, 0,3-n I^SO^-liuosta, joka on huuhdeltu argonilla. Kerrokset erotetaan, ja vesikerros uutetaan edelleen kolmella 50 ml:n erällä etyyliasetaattia. Yhdistetyt etyyliasetaattiuutteet pestään 25 ml :11a vettä ja suolaliuosta kuivataan (Na2SO^,argonissa) ja sen jälkeen konsentroidaan vakuumissa. Etyyliasetaattijäänteet poistetaan liuottamalla öljymäinen konsentraatti kolme kertaa noin 150 67378 16 ml:aan CH Cl0 ja haihduttamalla liuokset kuiviin.

2

Analyyttinen ohutkerroskromatografia: Rf = 0,37, silikageeli, Et0Ac:pyridiini:Me0H:H20 (60:20:6:11).

Claims (1)

1. 67378 17 Patenttivaatimus Menetelmä uusien kaavan I mukaisten terapeuttisesti aktiivisten tiatsolidiini- ja tiatsaanikarboksyylihappojen ja niiden emäksisten suolojen valmistamiseksi, R (R -CH) (CH-R,) I | -5 2 | m | 1 R4 - s - (CH2)p - CH - CO - N-CH - CO - OH jossa kaavassa R^ ja R2 merkitsevät vetyä tai alempaa alkyyliä; R^ on vety tai alempi alkyyli; R^ on vety, alempi alkanoyyli tai bentsoyyli; X on 0, S, SO tai S02, jolloin m on 2 ja n on 1, kun X on 0; m on 1 tai 2, n on 0, 1 tai 2 ja m + n on 2 tai 3; p on 0 tai 1; tunnettu siitä, että a) kaavan II mukainen yhdiste Xx\ (R_-CH) (CH-R1) 2. m | 1 n HN-CH - COOH 11 asyloidaan yhdessä vaiheessa antamalla sen reagoida kaavan III mukaisen yhdisteen tai sen reaktiivisen ekvivalentin kanssa, T3 R4 - S - (CH-,) - CH - COOH IIT jolloin saadaan kaavan I mukainen yhdiste, tai b) kaavan II mukainen yhdiste asyloidaan asteittain antamalla sen reagoida kaavan lila mukaisen halogeeniasyylihalogenidin kanssa f3 hai- (CH0) -CH-CO-hal (Ula) '* Γ 18 67378 jossa kaavassa hai merkitsee halogeenia, jolloin muodostuu kaavan Illb mukainen tuote R, (R -CH) (CH-R1) (Illb) | ^ j in j in hal-(CH2)p-CH-CO--N--CH-CO-OH jonka annetaan sitten reagoida tioli-R4~SH:n kanssa, jolloin muodostuu kaavan I mukainen tuote, minkä jälkeen mahdollisesti hydrolysoidaan näin saatu kaavan I mukainen yhdiste, jossa R^ on muu kuin vety, kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa R^ on vety, ja/tai mahdollisesti hapetetaan kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on S, kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on SO tai SO^, tai kaavan I mukainen yhdiste, jossa X on SO, hapetetaan kaavan I mukaiseksi yhdisteeksi, jossa X on SO2, ja näin saatu kaavan I mukainen yhdiste mahdollisesti muutetaan emäksiseksi suolaksi. 19 67378 Förfarande för framställning av nya terapeutiskt aktiva tiazc-lidin- och tiazankarboxylsyror med formeln X och deras basiska salter, h m «CH-R,) j R. - S - (CH_t - CH - CO - N -CH - CO - OH 4. p i vilken formel R.| och R2 betyder väte eller lägre alkyl; R^ är väte eller lägre alkyl; är väte, lägre alkanoyl eller bensoyl; X är 0, S, SO eller S02, varvid m är 2 och n är 1, da X är 0; m är 1 eller 2, n är 0, 1 eller 2 och m + n är 2 eller 3; p är 0 eller 1; kännetecknat därav, att man a) acylerar en förening med formeln II X (R„-CH) (bn-R,) 2. m j In HN-CH - COOH II i ett steg genom omsättande av densamma med en förening med formeln ITI eller en reaktiv ekvivalent därav, R3 I3 R4 - S - (CH2) - CH - COOH III för erhällande av en förening med formeln I, eller b) acylerar föreningen med formeln II stegvis genom omsättande av densamma med en halogenacylhalogenid med formeln lila