FI66427C - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN NY SOM CEILING MODEL - Google Patents
FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN NY SOM CEILING MODEL Download PDFInfo
- Publication number
- FI66427C FI66427C FI800506A FI800506A FI66427C FI 66427 C FI66427 C FI 66427C FI 800506 A FI800506 A FI 800506A FI 800506 A FI800506 A FI 800506A FI 66427 C FI66427 C FI 66427C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- monacolin
- culture
- culture medium
- som
- foerfarande foer
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D309/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings
- C07D309/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member
- C07D309/28—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom, not condensed with other rings having one double bond between ring members or between a ring member and a non-ring member with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D309/30—Oxygen atoms, e.g. delta-lactones
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
- C12N1/145—Fungal isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
Description
55r*l M imKUULUTUS|ULKAI*U55r * l M ADVERTISEMENT |
m 0 ) utlAggningsskrift 6 6427 : (51) KwJKLflmjCL C 12 P 17/06, C 07 D 309/30 SUOMI—FINLAND pi) η*^^-***~~»*α* 800506 20.02.80 ' ' (23) ANcMfMv·—GtWglMtadaf 20.02.80 (41) TMmMUmW—MtvkoffmM· 21.08.80m 0) utlAggningsskrift 6 6427: (51) KwJKLflmjCL C 12 P 17/06, C 07 D 309/30 FINLAND — FINLAND pi) η * ^^ - *** ~~ »* α * 800506 20.02.80 '' ( 23) ANcMfMv · —GtWglMtadaf 20.02.80 (41) TMmMUmW — MtvkoffmM · 21.08.80
FatanttU jt nklrtwHwHHw PM«ife.och raglfntyralww ^ 12¾¾ 29-06.8^ (32)(33)(31) *rr***r·«*·»-··«»* phohm 20.02.79 Japani-JapaniJP) 17856/79 (71) Sankyo Company Limited, 1-6, 3-chome, Nihonbashi Honcho, Chuo-ku, Tokyo, Japani-Japan(Jp) (72) Akira Endo, Tokyo, Japani-Japan(JP) (7*0 Forssdn & Salomaa OyFatanttU jt nklrtwHwHHw PM «ife.och raglfntyralww ^ 12¾¾ 29-06.8 ^ (32) (33) (31) * rr *** r ·« * · »- ··« »* phohm 20.02.79 Japan-JapanJP) 17856 / 79 (71) Sankyo Company Limited, 1-6, 3-chome, Nihonbashi Honcho, Chuo-ku, Tokyo, Japan-Japan (Jp) (72) Akira Endo, Tokyo, Japan-Japan (JP) (7 * 0 Forssdn & Salomaa Oy
(5*0 Menetelmä uuden, lääkeaineena käyttökelpoisen yhdisteen Monacolin K valmistamiseksi - Förfarande för framställning av en ny som läkemedel användbar förening Monacolin K(5 * 0 Process for the preparation of a new drug-useful compound Monacolin K - Preparation for the preparation of a new compound monacolin K
Keksinnön kohteena on menetelmä uuden yhdisteen valmistamiseksi, joka yhdiste on antihyperkolesteroleemisesti aktiivinen ja jolle on annettu nimeksi Monacolin K.The present invention relates to a process for the preparation of a novel compound which is antihypercholesterolemically active and which is designated Monacolin K.
Yhdisteen Monacolin K kaava on:The formula for Monacol K is:
Ch3 2 66427Ch3 2 66427
Menetelmässä viljellään Monacolla K:ta tuottavaa mikro-organismia Monacus ruber 1005 FERM 4822 aerobisissa olosuhteissa viljelyväliaineessa, joka sisältää assimiloituvan hiililähteen ja typpilähteen ja otetaan talteen viljelyväliaineeseen kertynyt Monacolin K.The method comprises culturing the microorganism Monacus ruber 1005 FERM 4822 producing Monaco K under aerobic conditions in a culture medium containing an assimilable carbon source and a nitrogen source and recovering the Monaco K accumulated in the culture medium.
Korkeat veren kolesterolitasot on havaittu erääksi sydäntautien, kuten sydäninfarktin tai arterioskleroosin pääaiheuttajaksi. Tästä syystä on suoritettu huomattavia tutkimuksia, joiden tavoitteena on ollut löytää fysiologisesti käyttökelpoinen aine, joka pystyy estämään kolesterolibiosynteesin ja siten alentamaan veren kolesterolitasoja. Eräs tällainen yhdiste on ML-236, jota on kuvattu GB-patenttijulkaisussa n:o 1,453,425. ML-236 valmistetaan viljelemällä sukuun Penicillium kuuluvaa mikro-organismia.High blood cholesterol levels have been found to be a major cause of heart disease such as myocardial infarction or arteriosclerosis. For this reason, considerable studies have been conducted with the aim of finding a physiologically useful substance capable of inhibiting cholesterol biosynthesis and thus lowering blood cholesterol levels. One such compound is ML-236, described in GB Patent No. 1,453,425. ML-236 is produced by culturing a microorganism belonging to the genus Penicillium.
Tutkittaessa sukuun Monascus kuuluvia sieniä on havaittu, että nämä, etenkin Monascus ruber-laji 1005 (FERM 4822), tuottaa antihyperkolesteroleemista ainetta, jolla on olennaisesti parempi vaikutus kuin aineella ML-236. Tämän aineen nimeksi on annettu Monacolin K.When studying fungi belonging to the genus Monascus, it has been found that these, in particular Monascus ruber species 1005 (FERM 4822), produce an antihypercholesterolemic substance which has a substantially better effect than ML-236. This substance is called Monacolin K.
Monascus ruber-kanta 1005 (FERM 4822) on hiljattain eristetty mikro-organismi, jolla on seuraavassa esitetyt mikrobiologiset ominaisuudet. Se eristettiin Thaimaasta valmistetuista elintarvikkeista ja talletettiin 16.02.1979 numerolla FERM 4822 Japanissa (Fermentation Research Institute, Agency of International Trade and Industry) ja numerolla NRRL 12073 USA:ssa (Agricultural Research Service, Northern Regional Research Laboratory).Monascus ruber strain 1005 (FERM 4822) is a newly isolated microorganism with the following microbiological properties. It was isolated from foodstuffs made in Thailand and deposited on February 16, 1979 under number FERM 4822 in Japan (Fermentation Research Institute, Agency of International Trade and Industry) and number NRRL 12073 in the USA (Agricultural Research Service, Northern Regional Research Laboratory).
1. Kasvu1. Growth
Kasvu peruna-glukoosi-agar-väliaineessa 25°C:n lämpötilassa on nopea ja pesäkkeen läpimitta saavuttaa 6 - 6,5 cm 10 päivän kuluttua siirrostuksesta. Pesäke on tasainen ja suhteellisen ohut pohjakerros muodostuu hyyfeistä. Ilmahyyfien muodostuminen on heikkoa. Ilmahyyfit ovat valkoisia ja useimmat niistä ovat untuvaisia. Useita kleistoteekioita muodostuu hyyfin tyvikerrok-seen ja ne muuttuvat punertavan ruskeiksi kehittyneinä. Sekä pesäkkeen pinta että kääntöpuoli ovat väriltään ruskeista punertavan ruskeisiin.Growth in potato glucose-agar medium at 25 ° C is rapid and the colony diameter reaches 6 to 6.5 cm 10 days after inoculation. The colony is flat and the relatively thin base layer consists of hybrids. The formation of air clots is weak. The air hyphens are white and most of them are down. Several cleftothecia form in the basal layer of the hyphen and turn reddish brown when developed. Both the surface of the colony and the reverse side are brown to reddish brown in color.
3 664273 66427
Kasvu Sabourad-agar-väliaineessa 25°C:n lämpötilassa on erittäin nopeaa ja pesäkkeen läpimitta saavuttaa 6 - 6,5 cm 10 päivän kuluttua siirrostuksesta. Pesäkkeen pinta on erittäin tasainen ja tyvihyyfit ja ilmahyyfit kehittyvät paremmin kuin peruna-glukoosi-agar-väliaineessa. Kleistoteekiomäärät ovat hyvin vähäiset. Pesäkkeen pinta on väriltään keltaisesta punertavan ruskeaan ja kääntöpuoli on punertavan ruskeasta tumman ruskeaan.Growth in Sabourad agar at 25 ° C is very rapid and the colony diameter reaches 6 to 6.5 cm 10 days after inoculation. The surface of the colony is very smooth and the base hyphae and air hyphae develop better than in potato-glucose agar medium. The amounts of cleftothecia are very small. The surface of the colony is yellow to reddish brown and the reverse side is reddish brown to dark brown.
Kasvu Gzapek-agar-väliaineessa 25°C:n lämpötilassa on erittäin hidasta ja pesäkkeen läpimitta saavuttaa 1,6 - 1, 8 cm 10 päivän kuluttua siirrostuksesta.Growth in Gzapek agar at 25 ° C is very slow and the colony diameter reaches 1.6 to 1.8 cm 10 days after inoculation.
Kasvunopeudet kussakin yllä mainitussa väliaineessa ovat 37°C:n lämpötilassa olennaisesti samat kuin 25°C:n lämpötilassakin.The growth rates in each of the above media at 37 ° C are substantially the same as at 25 ° C.
2. Morfologiset ominaisuudet2. Morphological characteristics
Kleistoteekiot ovat pallomaisia ja läpimitaltaan 30 - 60 mikronia. Niiden seinämät ovat ohuet ja kalvomaiset. Niiden varsissa on väliseinäiset seinämät ja kukin muodostuu hyyfistä, jonka läpimitta on 3,5 - 4,5 mikronia ja pituus 15 - 80 mikronia. Askus muodostuu 8 itiöstä ja on lähes pallomainen ja tuskin huomattava. Askositlöt ovat värittömiä ja munamaisia tai ellipsoideja. Niiden koko on4-5x4-7 mikronia ja niiden pinnat ovat sileitä. Konidiat ovat värittömiä ja pallomaisia tai päärynämäisiä. Niiden koko on 6 - 9 x 6 - 11 mikronia. Niiden tyvet ovat typistettyjä ja niiden seinämät suhteellisen paksuja ja sileitä. Konidiat ovat yhdistyneet latvasta tyveen meristeemlatro-itiön tyyppisesti. Konidiofori on vegetatiivisen hyyfin kaltainen ja se on haarautunut tai haarautumaton. Konidia on muodostunut latvaan. Huovastot ovat värittömiä ja haarautuneita ja niissä on väliseinäiset seinämät. Useimmat niistä ovat läpimitaltaan 3-5 mikronia.Kleistothekia are spherical and 30 to 60 microns in diameter. Their walls are thin and film-like. They have partition walls at their stems and each consists of a hyphen with a diameter of 3.5 to 4.5 microns and a length of 15 to 80 microns. The asus consists of 8 spores and is almost spherical and barely noticeable. Ascites are colorless and ovoid or ellipsoidal. They are 4-5x4-7 microns in size and have smooth surfaces. Conidia are colorless and spherical or pear-like. They are 6 to 9 x 6 to 11 microns in size. Their bases are truncated and their walls relatively thick and smooth. The conidia are connected from the top to the base in the form of a meristem matrix. The conidiophore is similar to the vegetative hyphen and is branched or unbranched. Konidia has formed at the top. The mycelium is colorless and branched and has partition walls. Most of them are 3-5 microns in diameter.
Perustuen yllä olevien ominaisuuksien havaintoihin tämä mikro-organismi tunnistettiin kuuluvaksi lajiin Monascus ruber van Tleghem.Based on the observations of the above properties, this microorganism was identified as belonging to the species Monascus ruber van Tleghem.
Monascus ruber-lajin mikrobiologisia ominaisuuksia on kuvattu seuraavissa julkaisuissa: Takada, Transactions of the Micrological Society of Japan, 9^ 125 - 130 (1969) £*Materials for the Fungus Flora of Japan (7)^7; ja * 66427 van Tieghem, Bull. Soc. Botan. France, 31, 227 (1884). Lajin askospori-sukupolvea ovat kuvanneet Cole et ai julkaisussa Canadian Journal of Botany, 46, 987 (1968), "Conidium Ontogeny in hyphomycetes. The imperfect state of Monascus ruber and its meristem arthrospores".The microbiological properties of the species Monascus ruber are described in Takada, Transactions of the Micrological Society of Japan, 9 ^ 125-130 (1969) £ * Materials for the Fungus Flora of Japan (7) ^ 7; and * 66427 van Tieghem, Bull. Soc. Botan. France, 31, 227 (1884). The ascospori generation of the species has been described by Cole et al in Canadian Journal of Botany, 46, 987 (1968), "Conidium Ontogeny in Hyphomycetes. The Imperfect State of Monascus ruber and its meristem arthrospores."
Monacolin K voidaan valmistaa viljelemällä valittua mikro-organismia viljely-liemessä aerobisissa olosuhteissa käyttämällä samoja menetelmiä, jotka tunnetaan tekniikan tasolla sienten ja muiden mikro-organismien viljelyssä. Esimerkiksi Monacolin K:ta tuottavaa mikro-organismia voidaan ensin viljellä sopivassa väliaineessa ja sitten tuotetut mikro-organismit voidaan kerätä ja siirrostaa toiseen väliaineeseen ja viljellä toisessa väliaineessa halutun Monacolin K:n valmistamiseksi. Viljelyväliaineet, joita käytetään mikro-organismin viljelyyn ja Monacolin K:n valmistamiseen, voivat olla samoja tai erilaisia.Monacolin K can be prepared by culturing the selected microorganism in a culture broth under aerobic conditions using the same methods known in the art for culturing fungi and other microorganisms. For example, a Monacolin K-producing microorganism can first be cultured in a suitable medium, and then the produced microorganisms can be collected and inoculated into another medium and cultured in another medium to produce the desired Monacolin K. The culture media used for culturing the microorganism and producing Monacolin K may be the same or different.
Mitä tahansa tekniikan tasolla sienten viljelyyn käytettyä viljelyväli-ainetta voidaan käyttää, edellyttäen, että se sisältää, kuten hyvin tunnettua, tarpeelliset ravintoaineet, etenkin assimiloituvan hiililähteen ja assimiloituvan typpilähteen. Esimerkkejä sopivista assimiloituvan hiilen lähteistä ovat glukoosi, maltoosi, dekstriini, tärkkelys, laktoosi, sakkaroosi ja glyseriini. Näistä aineista pidetään parhaimpana Monacolin K:n valmistamiseksi etenkin glukoosia, glyseriiniä ja tärkkelystä. Esimerkkejä sopivista assimiloituvan typen lähteistä ovat peptoni, lihauute, hiiva, hiivauute, soijapapujauho, pähkinäjauho, maissinllotusvesi, riisilese ja epäorgaaniset typpilähteet. Näistä typpilähteistä parhaimpana pidetään etenkin peptonia. Kun valmistetaan Monacolin K:ta, voidaan lisätä epäorgaaninen ja/tai metallisuola tarvittaessa viljelyväliaineeseen. Edelleen, mikäli tarpeellista, voidaan lisätä myös pienehkö määrä raskasmetallia.Any culture medium used in the cultivation of mushrooms can be used, provided that it contains, as is well known, the necessary nutrients, in particular an assimilable carbon source and an assimilable nitrogen source. Examples of suitable sources of assimilable carbon include glucose, maltose, dextrin, starch, lactose, sucrose and glycerin. Of these substances, glucose, glycerin and starch are considered to be the best for the production of Monacolin K. Examples of suitable sources of assimilable nitrogen include peptone, meat extract, yeast, yeast extract, soybean meal, nut meal, corn stew water, rice bran, and inorganic nitrogen sources. Of these nitrogen sources, peptone in particular is considered the best. When preparing Monacolin K, an inorganic and / or metal salt may be added to the culture medium, if necessary. Furthermore, if necessary, a smaller amount of heavy metal can also be added.
Mikro-organismia viljellään parhaiten aerobisissa olosuhteissa käyttämällä tekniikan tasolla tunnettuja viljelymenetelmiä, kuten esimerkiksi kiinteää viljelyä, täryviljelyä tai ilmastuksella ja sekoituksella tapahtuvaa viljelyä. Mikro-organismi kasvaa laajalla lämpötila-alueella, esimerkiksi 7 - 40°C:n lämpötilassa, mutta etenkin Monacolin K:n valmistamiseksi parhaimpana pidetty viljelylämpötila on 20 - 35°C.The microorganism is best cultured under aerobic conditions using culture methods known in the art, such as solid culture, vibration culture, or aeration and mixing culture. The microorganism grows over a wide temperature range, for example at a temperature of 7 to 40 ° C, but especially for the production of Monacol K, the preferred culture temperature is 20 to 35 ° C.
5 664275 66427
Mikro-organismien viljelyn aikana Monacolin K:n valmistusta voidaan tarkkailla ottamalla kokeita viljelyväliaineesta ja mittaamalla Monacolin K:n fysiologinen aktiivisuus viljelyväliaineessa seuraavassa esitetyn testin avulla. Viljelyä voidaan jatkaa, kunnes on saavutettu Monacolin K:n olennainen akku-mulaatio viljelyväliaineessa, jolloin Monacolin K voidaan eristää ja ottaa talteen viljelyliemestä millä tahansa eristysmenetelmien yhdistelmällä, jotka menetelmät valitaan ottaen huomioon niiden fysikaaliset ja kemialliset ominaisuudet. Esimerkiksi voidaan käyttää mitä tahansa tai kaikkia seuraavista eristysmenetelmistä: nesteen uuttaminen viljelyliemestä hydrofiilisen liuottimen avulla (esimerkiksi dietyylieetteri, etyyliasetaatti, kloroformi tai bentseeni), organismin uuttaminen hydrofiilisen liuottimen avulla (kuten asetoni tai alkoholi), konsentrointi, liuottaminen polaarisemmalla liuottimena (esim. asetoni tai alkoholi), epäpuhtauksien poistaminen vähemmän polaarisella liuottimella (kuten petrolieetteri tai heksaani), geelisuodatus esim. Sephadex-pylvään läpi (Sephadex on kaupallinen nimi aineelle, jota valmistaa Pharmacia, Co., Ltd., USA), absorptiokromatografia aktiivihiilellä tai silikageelillä jne. Käyttämällä sopivaa näiden menetelmien yhdistelmää haluttu Monacolin K voidaan eristää viljelyväliaineesta puhtaana aineena.During the cultivation of microorganisms, the production of Monacolin K can be monitored by taking experiments on the culture medium and measuring the physiological activity of Monacolin K in the culture medium by the following test. The culture can be continued until a substantial accumulation of Monacolin K in the culture medium is achieved, whereby Monacolin K can be isolated and recovered from the culture broth by any combination of isolation methods selected taking into account their physical and chemical properties. For example, any or all of the following isolation methods can be used: extracting the liquid from the culture broth with a hydrophilic solvent (e.g., diethyl ether, ethyl acetate, chloroform, or benzene), extracting the organism with a hydrophilic solvent (such as acetone or alcohol), concentrating, dissolving with a more polar acetone or alcohol. ), removal of impurities with a less polar solvent (such as petroleum ether or hexane), gel filtration e.g. through a Sephadex column (Sephadex is the trade name for a substance manufactured by Pharmacia, Co., Ltd., USA), absorption chromatography on activated carbon or silica gel, etc. the combination of methods desired Monacolin K can be isolated from the culture medium as a pure substance.
Todettiin seuraavat Monacolin K:n ominaisuudet: 1. Väri ja muoto: värittömiä kiteitä.The following properties of Monacol K were found: 1. Color and shape: colorless crystals.
2. Sulamispiste: 157 - 159°C (hajaantumisella).2. Melting point: 157-159 ° C (with decomposition).
3. Alkuaineanalyysi: C, 71,56 %; H, 8,85 %, 0 19,59 %.3. Elemental Analysis: C, 71.56%; H, 8.85%, O 19.59%.
4. Molekyylipaino: 404 (massaspektrometrialla).4. Molecular weight: 404 (by mass spectrometry).
5. Molekyylikaava: C24H36°5* 6. UV-absorptiospektri (metanoli): kuten nähdään oheisten piirustusten kuvioissa 1 maksimit ovat kohdissa 232, 238 ja 246 inp, 7. Infrapuna-absorptiospektri (KBr): esitetty kuviossa 2.5. Molecular formula: C24H36 ° 5 * 6. UV absorption spectrum (methanol): as seen in Figures 1 of the accompanying drawings, the maxima are at 232, 238 and 246 inp, 7. Infrared absorption spectrum (KBr): shown in Figure 2.
6 66427 8. NMR-spektri (60 MHz protoni): esitetty kuviossa 3, deuteroidussa kloroformissa, kun käytetään tetrametyylisilaania sisäisenä normina.6 66427 8. NMR spectrum (60 MHz proton): shown in Figure 3, in deuterated chloroform using tetramethylsilane as an internal standard.
13 9. NMR-spektri ( C): esitetty kuviossa 4, deuteroidussa metanolissa.13. NMR spectrum (C): shown in Figure 4, in deuterated methanol.
10. Liuokoisuus: liukeneva alempiin alkoholeihin (esim. metanoli, etanoli propanoli), asetoniub, kloroformiin, etyyliasetaatiin ja bentseeniln.10. Solubility: soluble in lower alcohols (e.g. methanol, ethanol propanol), acetonium, chloroform, ethyl acetate and benzene.
11. Ominaiskiertokyky:[d0 ^ “ +307,6 (c=l, metanoli).11. Specific rotation: [d0 ^ + + 307.6 (c = 1, methanol).
12. Ohutkerroskromatografia: Rf = 0,47 [n:o 5715 Kieselgel 60F silikageeli (Merck & Co., Ltd.) kehitettiin tilavuussuhteessa 4:1 metyleenikloridin ja asetonin seoksesta, havaittavissa UV-säteilyä absorboivana kappaleena, 50 % v/v rikkihappoa (vaalean punaisesta punertavan ruskeaan oleva väri kehittyy kuumennettaessa) tai jodin kanssal7.12. Thin layer chromatography: Rf = 0.47 [No. 5715 Kieselgel 60F silica gel (Merck & Co., Ltd.) was developed from a 4: 1 by volume mixture of methylene chloride and acetone, detectable as a UV absorbing body, 50% v / v sulfuric acid ( light red to reddish brown develops on heating) or with iodine7.
Yhdiste on neutraali ja liukenematon neutraaleissa tai happamissa vesipitoisissa väliaineissa. Se muutetaan happameksi aineeksi käsittelemällä sitä alkalilla ja se voidaan sitten liuottaa veteen. Tämä hapan aine voidaan uuttaa etyyliasetaatilla tai kloroformilla hapon pH-arvossa ja se muuttuu Monacolin K:ksi haihdutettaessa liuotin.The compound is neutral and insoluble in neutral or acidic aqueous media. It is converted to an acidic substance by treatment with alkali and can then be dissolved in water. This acidic substance can be extracted with ethyl acetate or chloroform at the pH of the acid and is converted to Monacol K by evaporation of the solvent.
Monacolln K:n fysiologinen aktiivisuus voidaan analysoida ja määrittää kvantitatiivisesti seuraavalla in vivo-testillä.The physiological activity of Monacolln K can be analyzed and quantified by the following in vivo test.
Kaniineilla suoritettu in vivo-testi Tässä testissä mitattiin Monacolin K:n kyky alentaa kaniinin veren kolesterolitasoja. Käytettyjen eläinten paino oli 2,5 - 3,0 kg. Välittömästi ennen testin alkua otettiin verta kunkin kaniinin korvan laskimosta ja mitattiin veriseerumin kolesterolitaso tavanomaisten menetelmien avulla. Ennalta määrätty määrä Monacolin K:ta annettiin sitten suun kautta keskeytymättä 1-5 päivää ja kolesterolitaso veren seerumissa mitattiin Monacolin K:n antamisen jälkeen. Monacolin K:n tai Monacolin K:ta sisältävän viljelyväli-aineen tehokkuus voidaan määrittää kvantitatiivisesti kolesteroliarvoista, jotka on saatu ennen Monacolin K:n antamista tai sen jälkeen.In vivo test in rabbits This test measured the ability of Monacol K to lower blood cholesterol levels in rabbits. The animals used weighed 2.5 to 3.0 kg. Immediately before the start of the test, blood was taken from the vein of the ear of each rabbit and serum cholesterol levels were measured using standard methods. A predetermined amount of Monacolin K was then administered orally continuously for 1-5 days, and serum cholesterol levels were measured after administration of Monacolin K. The efficacy of Monacolin K or Monacolin K-containing culture medium can be quantified from cholesterol values obtained before or after administration of Monacolin K.
7 664277 66427
Monacolin K:n kykyä alentaa veren ja maksan kolesteroliarvoja on esitetty useissa in vivo-testeissä.The ability of Monacol K to lower blood and liver cholesterol has been demonstrated in several in vivo tests.
Rottien veren kolesterolitasojen aleneminenDecreased blood cholesterol levels in rats
Eläminä käytettiin Wistar Imamichi-rotuun kuuluvia rottia, jotka painoivat n. 300 g. Testit suoritettiin rottien ryhmillä ja kukin ryhmä käsitti 5 eläintä. Kuhunkin eläimeen ruiskutettiin laskimon sisäisesti 400 mg/kg Triton WR-1339 nimistä ainetta (kaupallinen nimitys aineelle, jonka tiedetään lisäävän veren kolesterolitasoa), samalla kun annettiin intraperitoneaalisesti 10 mg/kg Monacolin K:ta. 14 tuntia intraperitoneaallsen annostuksen jälkeen rotista otettiin verta ja veren kolesterolitaso määritettyyn tavanomaisten menetelmien avulla. Tuloksena havaittiin, että veren kolesterolitasot olivat alentuneet 23,9 %:lla verrattuna eläinten kontrolliryhmään, jolle oli annettu yksistään Triton WR-1339 nimistä ainetta.Wistar Imamichi rats weighing about 300 g were used as lives. The tests were performed on groups of rats and each group comprised 5 animals. Each animal was injected intravenously with 400 mg / kg of Triton WR-1339 (a trade name for a substance known to increase blood cholesterol levels) while receiving 10 mg / kg of Monacolin K intraperitoneally. Fourteen hours after intraperitoneal dosing, rats were bled and blood cholesterol levels were determined by standard methods. As a result, it was found that blood cholesterol levels were reduced by 23.9% compared to a control group of animals given Triton WR-1339 alone.
Kaniinien veren kolesterolitasojen aleneminen Käytetyt testieläimet olivat painoltaan 2,7 - 2,9 kg. Kullekin kaniinille annettiin suun kautta 1 mg/kg Monacolin K:ta kahdesti päivässä (aamuin ja illoin) keskeytymättä viiden päivän ajan. Ennen annostuksen aloittamista ja 3 ja 5 päivää annostuksen jälkeen otettiin verta korvan laskimosta ja määritettiin veren seerumin kolesterolitasot. Tuloksena havaittiin, että kolesterolitasot olivat 3 ja 5 päivää Monacolin K:n annostuksen jälkeen vastaavasti 15 % ja 29 % alhaisemmat kuin ennen Monacolin K:n antamista.Reduction of blood cholesterol levels in rabbits The test animals used weighed 2.7 to 2.9 kg. Each rabbit was orally administered 1 mg / kg Monacolin K twice daily (morning and evening) without interruption for five days. Before the start of dosing and 3 and 5 days after dosing, blood was taken from the vein of the ear and blood serum cholesterol levels were determined. As a result, cholesterol levels were found to be 15% and 29% lower at 3 and 5 days after Monacolin K administration, respectively, than before Monacolin K administration.
Arvokkaan kolesterolibiosynteesiä ehkäisevän vaikutuksena lisäksi Monacolin K:11a on hyvin alhainen toksisuus. Siten Monacolin K:n akuutti oraalinen toksisuus (LD,.q) hiiressä on 1 g/kg eläimen painosta tai enemmän.In addition to its valuable cholesterol biosynthesis inhibitory effect, Monacolin K: 11a has very low toxicity. Thus, the acute oral toxicity (LD, .q) of Monacol K in mice is 1 g / kg animal weight or more.
Monacolin K voidaan antaa suun kautta tai parenteraalisesti kapseleiden, tablettien, ruiskeiden tai minkä muun tunnetun lääkemuodon muodossa, vaikkakin normaalisti pidetään suun kautta tapahtuvaa annostusta parhaimpana. Annostus valhtelee riippuen potilaan iästä ja ruumiin painosta sekä tilan vakavuudesta, mutta yleensä päivittäinen annos täysikasvuisella on 0,5 - 50 mg joko yksittäisannoksena tai 2 tai 3 jaettuna annoksena. Kuiten- 8 66427 kin yhdisteen alhaisen toksisuuden johdosta voidaan käyttää tarvittaessa myös suurempia annoksia.Monacolin K may be administered orally or parenterally in the form of capsules, tablets, injections, or any other known dosage form, although oral administration is normally preferred. The dosage varies depending on the age and body weight of the patient and the severity of the condition, but usually the daily dose for an adult is 0.5 to 50 mg, either as a single dose or as 2 or 3 divided doses. However, due to the low toxicity of the compound, higher doses may be used if necessary.
Keksintö on esitetty seuraavassa esimerkissä.The invention is illustrated in the following example.
EsimerkkiExample
Monascus ruber-kanta 1005 siirrostettiin nestemäiseen viljelyväliaineeseen, joka sisälsi 6 % w/v ammoniumkloridia. Viljelyä jatkettiin aerobisissa olosuhteissa 28°C:n lämpötilassa 10 päivää. Syntynyt viljelyliemen suodate (5 litraa) asetettiin pH-arvoon 3 lisäämällä siihen 6N suolahappoa ja sitten se uutettiin yhtä suurella määrällä etyyliasetaattia. Liuotin haihdutettiin alipaineessa uutteesta ja syntynyt tähde liuotettiin 100 ml:aan bentseeniä. Liukenematon osa suodatettiin pois.Monascus ruber strain 1005 was inoculated into a liquid culture medium containing 6% w / v ammonium chloride. The culture was continued under aerobic conditions at 28 ° C for 10 days. The resulting broth filtrate (5 liters) was adjusted to pH 3 by adding 6N hydrochloric acid and then extracted with an equal amount of ethyl acetate. The solvent was evaporated under reduced pressure from the extract, and the resulting residue was dissolved in 100 ml of benzene. The insoluble matter was filtered off.
Suodate pestiin kahdesti, kulloinkin 100 ml:lla 5 % w/v vesipitoista natrium-bikarbonaattiluosta. 100 ml 0,2N vesipitoista natriumhydroksidiliuosta lisättiin sitten pestyyn suodatteeseen ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa. Sen jälkeen, kun oli varmistettu Monacolin K:n häviäminen bentseenikerrok-sesta ohutkerroskromatografiällä, vesipitoinen kerros erotettiin. Vesipitoisen kerroksen pH-arvo saatettiin sitten arvoon 3 lisäämällä siihen 6N suolahappoa ja syntynyt liuos uutettiin kaksi kertaa kulloinkin 100 ml:11a etyyliasetaattia. Uute haihdutettiin kuivaksi alipaineessa, jolloin saatiin 260 mg öljyä. Tämä öljy liuotettiin bentseenissä ja sen annettiin kiteytyä ja sitten se kiteytettiin uudestaan vesipitoisesta asetoniliuoksesta, jolloin saatiin 87 mg värittömiä Monacolin K:n kiteitä, joilla oli edellä kuvatut ominaisuudet.The filtrate was washed twice, each time with 100 ml of 5% w / v aqueous sodium bicarbonate solution. 100 ml of 0.2N aqueous sodium hydroxide solution was then added to the washed filtrate, and the mixture was stirred at room temperature. After confirming the disappearance of Monacol K from the benzene layer by thin layer chromatography, the aqueous layer was separated. The pH of the aqueous layer was then adjusted to 3 by adding 6N hydrochloric acid, and the resulting solution was extracted twice with 100 ml of ethyl acetate each time. The extract was evaporated to dryness under reduced pressure to give 260 mg of an oil. This oil was dissolved in benzene and allowed to crystallize and then recrystallized from aqueous acetone to give 87 mg of colorless crystals of Monacolin K having the properties described above.
**
Claims (3)
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1785679 | 1979-02-20 | ||
| JP54017856A JPS5925599B2 (en) | 1979-02-20 | 1979-02-20 | New physiologically active substance monacolin K and its production method |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI800506A FI800506A (en) | 1980-08-21 |
| FI66427B FI66427B (en) | 1984-06-29 |
| FI66427C true FI66427C (en) | 1984-10-10 |
Family
ID=11955290
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI800506A FI66427C (en) | 1979-02-20 | 1980-02-20 | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN NY SOM CEILING MODEL |
Country Status (27)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS5925599B2 (en) |
| KR (1) | KR830002801B1 (en) |
| AT (1) | AT373915B (en) |
| AU (1) | AU532626B2 (en) |
| BE (1) | BE881825A (en) |
| CA (1) | CA1129794A (en) |
| CH (1) | CH645890A5 (en) |
| DD (1) | DD154494A5 (en) |
| DE (2) | DE3006216C2 (en) |
| DK (2) | DK149095C (en) |
| ES (1) | ES8103171A1 (en) |
| FI (1) | FI66427C (en) |
| FR (1) | FR2449685B1 (en) |
| GB (1) | GB2046737B (en) |
| HU (1) | HU182069B (en) |
| IE (1) | IE49743B1 (en) |
| IT (1) | IT1175260B (en) |
| MX (1) | MX6314E (en) |
| NL (1) | NL191540C (en) |
| NO (1) | NO153974C (en) |
| NZ (1) | NZ192919A (en) |
| PH (1) | PH15145A (en) |
| PL (1) | PL124304B1 (en) |
| SE (1) | SE453301B (en) |
| SG (1) | SG6784G (en) |
| SU (2) | SU1158048A3 (en) |
| ZA (1) | ZA80962B (en) |
Families Citing this family (34)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
| US4231938A (en) * | 1979-06-15 | 1980-11-04 | Merck & Co., Inc. | Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation |
| JPS5621594A (en) * | 1979-07-27 | 1981-02-28 | Sankyo Co Ltd | Mb-530b carboxylic acid metal salt and its preparation |
| AU548996B2 (en) * | 1980-02-04 | 1986-01-09 | Merck & Co., Inc. | Tetrahydro-2h-pyran-2-one derivatives |
| PT72394B (en) * | 1980-02-04 | 1982-09-06 | Merck & Co Inc | Process for preparing dihydro and tetrahydromevinoline hypocholesterolimics |
| JPH0692381B2 (en) * | 1980-03-31 | 1994-11-16 | 三共株式会社 | MB-530A derivative |
| JPS56142236A (en) | 1980-04-08 | 1981-11-06 | Sankyo Co Ltd | Ml-236a and mb-530a derivative |
| MX7065E (en) * | 1980-06-06 | 1987-04-10 | Sankyo Co | A MICROBIOLOGICAL PROCEDURE FOR PREPARING DERIVATIVES OF ML-236B |
| JPS5835144A (en) * | 1981-08-27 | 1983-03-01 | Sankyo Co Ltd | Mb-530b derivative and its preparation |
| US4782084A (en) * | 1987-06-29 | 1988-11-01 | Merck & Co., Inc. | HMG-COA reductase inhibitors |
| US4997848A (en) * | 1987-10-27 | 1991-03-05 | Sankyo Company, Limited | Octahydronaphthalene oxime derivatives for cholesterol synthesis inhibition |
| CA2062023A1 (en) | 1992-02-10 | 1993-08-11 | Jagroop S. Dahiya | Novel fungal strains and use thereof in antibiotic production |
| WO1993017991A1 (en) * | 1992-03-04 | 1993-09-16 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | TETRALIN DERIVATIVES AS HMG-CoA REDUCTASE INHIBITORS |
| ZA933359B (en) | 1992-05-15 | 1993-12-08 | Sankyo Co | Octahydronaphthalene oxime derivatives for cholesterol biosynthesis inhibition, their preparation and use |
| HU210867B (en) * | 1992-11-04 | 1995-10-30 | Biogal Gyogyszergyar | Method for extraction and purification of mevinolin from culture medium |
| US6812007B1 (en) * | 1992-11-04 | 2004-11-02 | Keri Vilmos | Process for the isolation and purification of mevinolin |
| SI9300303A (en) * | 1993-06-08 | 1994-12-31 | Krka Tovarna Zdravil | Process for isolation of hypolipemic effective substance |
| US5409820A (en) * | 1993-08-06 | 1995-04-25 | Apotex, Inc. | Process for the production of lovastatin using Coniothyrium fuckelii |
| US7238348B2 (en) | 1996-09-30 | 2007-07-03 | Beijing Peking University Wbl Corporation Ltd. | Method of treatment of osteoporosis with compositions of red rice fermentation products |
| US6046022A (en) | 1996-09-30 | 2000-04-04 | Peking University | Methods and compositions employing red rice fermentation products |
| CZ300153B6 (en) | 1998-03-20 | 2009-02-25 | Teva Gyógyszergyár Zártkörüen Müködö Részvénytársaság | Metabolically controlled fermentation process when preparing lovastatin hydroxy acid |
| YU63602A (en) | 2000-02-24 | 2006-01-16 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Method of purifying a fermentation broth |
| AU4183301A (en) | 2000-03-03 | 2001-09-17 | Biogal Gyogyszergyar | A process for purifying lovastatin and simvastatin with reduced levels of dimeric impurities |
| KR20010095780A (en) * | 2000-04-12 | 2001-11-07 | 나가오카 마사시 | Embryo monascus |
| IN192861B (en) | 2000-06-30 | 2004-05-22 | Ranbaxy Lab Ltd | |
| EP1357807B1 (en) * | 2001-02-09 | 2007-03-14 | Unilever N.V. | Food product comprising soy protein and statins |
| KR100379075B1 (en) | 2002-03-07 | 2003-04-08 | Jinis Biopharmaceuticals Co | Method for producing low cholesterol animal food product and food product therefrom |
| KR20020093147A (en) * | 2002-05-30 | 2002-12-13 | 지니스생명공학 주식회사 | Preventive and Dietary Supplement for adult chronic disease |
| KR100710500B1 (en) | 2005-05-18 | 2007-04-24 | 고려대학교 산학협력단 | Method for producing Monacolin K using Monascus sp |
| EP2327682A1 (en) | 2009-10-29 | 2011-06-01 | KRKA, D.D., Novo Mesto | Use of amphiphilic compounds for controlled crystallization of statins and statin intermediates |
| SI2373609T1 (en) | 2008-12-19 | 2013-12-31 | Krka, D.D., Novo Mesto | Use of amphiphilic compounds for controlled crystallization of statins and statin intermediates |
| RO128803A0 (en) | 2012-10-12 | 2013-09-30 | Ion Gigel Fulga | Composition for the treatment or prevention of dyslipidemias |
| CN110331151A (en) * | 2019-04-11 | 2019-10-15 | 北京工商大学 | The construction method of purple Monascus mokH gene overexpression bacterial strain |
| CN111297938A (en) * | 2020-03-11 | 2020-06-19 | 北京康立生医药技术开发有限公司 | Method for detecting lovastatin in composition for assisting in reducing blood fat |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS5612114B2 (en) * | 1974-06-07 | 1981-03-18 | ||
| JPS55150898A (en) * | 1979-05-11 | 1980-11-25 | Sankyo Co Ltd | Preparation of a new physiologically active substance mb-530b |
| AU535944B2 (en) * | 1979-06-15 | 1984-04-12 | Merck & Co., Inc. | Hypocholestermic fermentation products from aspergillus |
-
1979
- 1979-02-20 JP JP54017856A patent/JPS5925599B2/en not_active Expired
-
1980
- 1980-02-19 CA CA345,983A patent/CA1129794A/en not_active Expired
- 1980-02-19 KR KR1019800000654A patent/KR830002801B1/en active
- 1980-02-19 IE IE321/80A patent/IE49743B1/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-19 AU AU55673/80A patent/AU532626B2/en not_active Expired
- 1980-02-20 DE DE3006216A patent/DE3006216C2/en not_active Expired
- 1980-02-20 GB GB8005748A patent/GB2046737B/en not_active Expired
- 1980-02-20 DK DK73080A patent/DK149095C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 NL NL8001041A patent/NL191540C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 NO NO800451A patent/NO153974C/en unknown
- 1980-02-20 AT AT0092980A patent/AT373915B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 IT IT67262/80A patent/IT1175260B/en active
- 1980-02-20 MX MX808652U patent/MX6314E/en unknown
- 1980-02-20 ZA ZA00800962A patent/ZA80962B/en unknown
- 1980-02-20 BE BE0/199476A patent/BE881825A/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 FR FR8003662A patent/FR2449685B1/en not_active Expired
- 1980-02-20 SU SU802887300A patent/SU1158048A3/en active
- 1980-02-20 DE DE3051175A patent/DE3051175C2/de not_active Expired
- 1980-02-20 SE SE8001339A patent/SE453301B/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 CH CH136680A patent/CH645890A5/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 HU HU80397A patent/HU182069B/en unknown
- 1980-02-20 PH PH23668A patent/PH15145A/en unknown
- 1980-02-20 DD DD80219159A patent/DD154494A5/en unknown
- 1980-02-20 PL PL1980222120A patent/PL124304B1/en unknown
- 1980-02-20 FI FI800506A patent/FI66427C/en not_active IP Right Cessation
- 1980-02-20 NZ NZ192919A patent/NZ192919A/en unknown
- 1980-02-20 ES ES488796A patent/ES8103171A1/en not_active Expired
- 1980-09-12 SU SU802977031A patent/SU969702A1/en active
-
1984
- 1984-01-24 SG SG67/84A patent/SG6784G/en unknown
-
1989
- 1989-01-18 DK DK021889A patent/DK21889A/en not_active Application Discontinuation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI66427C (en) | FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN NY SOM CEILING MODEL | |
| FI67231C (en) | FRAMEWORK FOR HYPOKOLESTEREMISK FOERENING | |
| CA1129795A (en) | Preparation of monacolin k | |
| AU656028B2 (en) | Antifungal agent | |
| US5756472A (en) | Antifungal agent obtained from hormonema | |
| EP0396378B1 (en) | Antifungal agent | |
| US5276055A (en) | Antibiotic agents | |
| JP3026864B2 (en) | New sesquiterpene derivatives | |
| CA2244142C (en) | Antifungal compound from hormonema sp. | |
| US5304485A (en) | Antibiotic producing microorganism | |
| US5426038A (en) | Process for production of an antibiotic compound with Zalerion arboricola | |
| US4902781A (en) | Novel tripetide derivatives | |
| US5441987A (en) | Antifungal agent | |
| JPS6113798B2 (en) | ||
| GB2265147A (en) | Antibiotic eicosenoic acids | |
| JPH0676434B2 (en) | Novel antibiotic PF1032 substance and its production method | |
| JP2815166B2 (en) | New antibiotic MK1688 and its production | |
| JPH0532656A (en) | Decalin-based compound | |
| DK165990B (en) | Hypocholesterolaemic agent monacolin K - produced by culturing Monascus strain | |
| JPH1129561A (en) | New compound am6105 and its production | |
| JPH04368378A (en) | New metabolite azistatines from phthalium species, method for manufacturing same and use of same | |
| JPH06157419A (en) | Compound ps-990 | |
| JPH10139771A (en) | New compound am6927 and its production | |
| JPS6210998B2 (en) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: SANKYO COMPANY LIMITED |