FI114219B

FI114219B - Aldehydikovetettu proteiiniliima

Info

Publication number: FI114219B
Application number: FI950024A
Authority: FI
Inventors: Nicholas Kowanko
Original assignee: Cryolife Inc
Priority date: 1992-07-06
Filing date: 1995-01-03
Publication date: 2004-09-15
Also published as: HK1013094A1; IL106248A0; NO950044L; CA2139590A1; CN1075952C; KR100305374B1; DK0650512T3; JPH07509262A; CA2139590C; FI950024A; US5385606A; BR9306683A; TW369418B; MX9304053A; NO950044D0; NO20034965L; ES2161719T3; PT650512E; IL106248A; CN1085451A

Description

1 114219

Aldehydikovetettu proteiiniliima Tämä keksintö koskee yleisesti liimakoostumuksia ja erityi-5 semmin kudosliimoja, jotka ovat hyödyllisiä lääketieteen ja kirurgian käytössä ihmis- ja eläinkohteisiin.

Alalla tunnetaan erilaisia kudosliimatyyppejä. Suurinta huomiota ovat saavuttaneet näistä kolme, nimittäin syanoak-10 rylaatit, gelatiini -formaldehydikoostumukset ja fibriinipoh-jaiset liimat. Esimerkiksi fibriiniä (veren hyytyrnisprote -iini) ja gelatiini - formaldehydiä on käytetty kirurgisiin liimakäyttöihin, kuten myös syanoakrylaatteja. Sellaiset liimat toimivat rajoitetussa määrin, mutta niillä on haitto-15 ja, kuten esitetään alla.

Useita syanoakrylaatteja on tutkittu kirurgiseen käyttöön. Esimerkiksi jotkut isobutyylisyanoakrylaattikoostumukset on hyväksytty eläinlääketieteelliseen käyttöön. Tyypillisesti 20 levitetään monomeeriä tai oligomeerien ja monomeerin seosta liimattavalle paikalle, jossa se polymeroituu nopeasti muodostaen kiinnittyvän kiintoaineen. Yksi syanoakrylaatti-liimojen haitta on siinä, että ne vaativat kuivan alueen.

Toinen on siinä, että tuotettu kiintoaine on absorboituina -•*•25 ton, mikä rajoittaa liiman hyötyä sisäisissä käytöissä. Myös : polymerointi pyrkii olemaan melko eksoterminen ja on rapor- ··*, toitu haitallinen kudosvaste. Ks. esimerkiksi Bonutti, P. et ai., Clinical Orthopedics and Related Research, Voi. 229, ss. 241-248 (1988); Nelson, R. et ai., Arch. Surg. Voi. 100, * ”.30 ss. 295-298 (1970); ja Celik, H., et ai., "Nonsuture closure '·’ ‘ of arterial defect by vein graft using isobutyl-2-cyanoacrylate as a tissue adhesive", Joural of Neurosurgical Sciences :.· · Vol. 35, No 2 (Huhti-kesäkuu, 1991) .

35 Liimoja, jotka perustuvat gelatiineihin, jotka on Verkin* koutettu formaldehydin kanssa, on käytetty koeluontoisesti, • · ’·;* etupäässä Euroopassa, vuodesta 1964 . Useista koostumuksista, : joita on ehdotettu on ehkä parhaiten tunnettu se, johon ·;**: viitataan "GRF" :nä (gelatiini, resorsinoli, formoli) . Kuumia 2 114219 gelatiiniliuoksia sekoitetaan in situ kovetusaineen kanssa, joka muodostuu pääasiassa formaldehydiliuoksesta. Seos kovettu nopeasti kiintoaineeksi, joka kiinnittyy kudoksiin. Pääasiallinen GRF-liimojen vastustus on ollut formaldehydin, 5 tunnetun vaarallisen aineen, pakollinen käyttö. Gelatiini täytyy myös levittää kuumana, huomattavasti ruumiin lämpötilaa kuumempana ja sekoituksen ja levityksen tekniikat ovat melko kriittisiä GRF:n menestykselliselle käytölle. Katso esimerkiksi, Fabiani, et ai., Ann. Thorac. Surg., 143-145 10 (1990); Fabiani, et ai., Supplement I Circulation Voi. 80,

No. 3 (Syyskuu 1989); Bachet, et ai., J. Thorac. Cardiovasc. Surg., Voi. 83 (1982), ja Braunwald, et ai., Surgery Voi.

59, NO. 6 (Kesäkuu 1966).

15 Fibriiniliimat käyttävät veren hyytymien muodostuksen luonnollista prosessia kehittääkseen liima- tai sulkukoostumuk-sen. Yksi kaupallinen tuote on "Tussicol®", joka on saatavilla Rugls'ilta, Ranskasta. Toinen on "Fibrin Sealant Kit 1.0", joka on saatavilla Östeneichisches Institut fur 20 Haemoderivate GmbH:sta (Immuno AG, A-1220 Wien, Itävalta tytäryhtiö). Fibriiniliimojen käytössä yhdistetään tyypillisesti kaksi komponenttia muodostamaan keinotekoinen verihyy-tymä. Yksi komponenteista on fibrinogeenin ja veren hyytymistekijän, kuten Tekijä XIII liuos ja toinen on etupäässä » ti‘*'25 trombiinin ja kalsiumionin liuos. Fibr iiniliimoj en haitta- puolet sisältävät niiden hyvin alhaisen vahvuuden (yleensä alempi kuin 50 g/crrr) ja suhteellisen hitaan kovettumisajan.

Monilta ihmisverenluovuttajilta peräisin olevien verituot- ,· ,·. teiden (f ibr inogeeni ja co-tekijät) käyttöön liittyy luon- ’!!.*30 taisesti riski tiettyjen tautien siirtymisestä potilaalle.

' Tuottajille on ehdotettu autologisen veren käyttämistä fibriinisideaineen valmistamiseksi. Katso esimerkiksi ja- c. : panilainen patentti No. 57149 -229, myönnetty syyskuussa V : 1982.

35 « · * ,*··. Tämä keksintö antaa liiman, joka on valmistettu kovettamalla • * koostumus, joka käsittää proteiinikomponentin ja di- tai ’· " polyfunktionaalisen aldehydikomponentin. Kovetettu liima antaa mieluummin sidoksen, jolla on ainakin noin 75 g/cm2 3 114219 repäisylujuus kudoskiinnittyvyystestissä (Tissue Adherence Test). Toisessa suoritusmuodossa keksintö antaa välinesar-jan, joka käsittää proteiini- ja aldehydikomponentit, jotka ovat hyödyllisiä sellaisen koostumuksen valmistuksessa.

5 Vielä muussa suoritusmuodossa keksintö antaa kudosliimakoos-tunnuksen, joka sinällään käsittää proteiini- ja aldehydikom-ponenttej a.

Tämän keksinnön liima antaa sellaisten ominaisuuksien, kuten 10 vahvuuden, käytön helppouden, kudosten kanssa yhteensopivuuden ja kustannusten, optimaalisen yhdistelmän. Keksinnön parhaana pidetty liima on vahvuudeltaan suuri, vahvempi kuin esimerkiksi ompeleet. Parhaana pidetty koostumus pystyy luomaan ei-myrkyllisen sidoksen 30 sekunnissa tai sen alle 15 ja se toimii hyvin jopa märissä olosuhteissa.

Tämän keksinnön proteiinikomponentti käsittää mieluummin ihmis- tai eläinperäistä proteiinimateriaalia. Verkkoutetta-essa proteiinimateriaali aldehydillä, tuloksena oleva liima 20 antaa vahvan ja nopean sitoutumisen laajaan luonnollista ja synteettistä alkuperää olevaan substraattien valikoimaan antaen mahdollisten käyttöjen laajan alueen. Täten tämän keksinnön koostumus voidaan kovettaa muodostamaan liima, joka voi sitoutua elävään kudokseen, mukaanlukien lihaksen, t, [· '2 5 ihon, sidekudoksen, hermokudoksen, verisuoni- ja sydänkudok- : ·,: sen, rasvakudoksen, ruston, luun ja sen kaltaiset ja myös vastaavat ruumiin kudokset, jotka voidaan säilöä tai muuten käsitellä kemiallisesti.

#·;·30 Vahva liitos voidaan muodostaa myös luonnon- tai synteettisiin materiaaleihin, esimerkiksi kiinnittämään bioyhteen-sopivia materiaaleja niiden kiinnittämiseksi toisiin sel-•y '· laisiin materiaaleihin ja myös kudokseen. Esimerkit sopivis-' ta materiaaleista sisältävät nahkan ja nahkamaiset materiaa-•/•.$5 lit, metallit ja polymeerimateriaalit.

Esimerkit sopivista nahkamaisista materiaaleista sisältävät * " päällystetyt ja päällystämättömät kudotut ja kutomattomat kankaat (esimerkiksi vinyylipäällysteiset tai uretaanipääl- 114219 4 lysteiset kankaat) ja porometrit (s.o. "synteettinen nahka") .

Esimerkit sopivista metalleista sisältävät bioyhteensopivat 5 metallit, kuten nikkeli, hopea, ruostumaton teräs ja alumiini ja myös metalloidut substraatit, kuten inertit polymeerimateriaalit, jotka on päällystetty jaloilla metalleilla .

10 Esimerkit sopivista polymeerimateriaaleista sisältävät polymeerit, kuten poly(vinyylikloridi), polyeteeni, ultra-korkean molekyylipainon polyeteeni, polypropeeni, polysty-reeni, silikonikumi, polykarbonaatti, polyesteri, polytetra-fluorietyleeni, fluoratut etyleeni-propyleenikopolymeerit, 15 polyolefiinikumi, polyuretaani, poly(vinyylialkoholi), poly(akrylonitriili) , polyakryyliamidi, polyakroleiini , polysulfoni, regeneroitu selluloosa ja selluloosa-asetaatti, poly(metyylimetakrylaatti), metyyli metakrylaatti-sty-reenikopolymeeri, poly(hydroksietyylimetakrylaatti) jne.

20

Sellaisia materiaaleja käytetään tyypillisesti jatkuva- tai kertakäyttöisten lääketieteellisten kappaleiden, kuten ruumiin ulkopuolisten laitteiden, katetrien, putkien, proteesien (sisältäen suonten siirrännäisproteesit) ja muiden ,j;‘25 keinotekoisten ruumiin osien ja elimien, membraanien, kirur -gisten teippien, harsojen, siteiden ja laastareiden, ompe-leiden, sunttien, sementtien, kiinnitysvälineiden, liitti-mien ja muiden lääketieteellisesti hyödyllisten komponent- • # · ; .·, tien valmistukseen.

po * Esimerkit sopivista hyödyllisistä materiaaleista sisältävät esimerkiksi kudotut dakronia olevat suoniproteesimateriaalit ·’·· '· (esim. VERI-SOFT, DuPont); PTFE-vaahtoa olevan suonten v : proteesimateriaalin (esimerkiksi saatavilla Gore Co:lta); :\35 kuminen virtsakatetriputki; silikonikumilla päällystetyt ,·*. elektrodit ja johdot sydäntahdistimia varten (kuten saatavilla Cardiac Pacemakers, Inc., St. Paul, MN).

Tämän keksinnön koostumuksia voidaan käyttää esimerkiksi I * · 5 114219 kirurgisten siirteiden ja laitteiden kiinnittämiseen ja myös haavojen sulkemiseen, vammojen korjaamiseen, verenvuodon tyrehdyttamiseen ja sen kaltaisiin ihmisten ja eläinten lääketieteen käytännössä. Liiman ei - lääketieteelliset käytöt 5 sisältyvät myös keksinnön suojapiiriin.

Kovetetun liiman ja siihen liittyvän koostumuksen lisäksi tämä keksintö antaa menetelmän liimakoostumuksen valmistamiseksi; menetelmän lukuisten kudos- ja/tai bioyhteensopivien 10 materiaalipintojen liittämiseksi yhteen käyttämällä koostumusta; ja yhdistelmän, joka käsittää kudospinnat, jotka on liitetty yhteen tämän keksinnön kovetetulla liimalla.

Tämä keksintö antaa liimakoostumuksen, joka käsittää plasma-15 proteiinin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin seoksen. Toisessa suoritusmuodossa keksintö antaa liimakoostumuksen, joka käsittää verisoluproteiinin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin seoksen, jossa parhaana pidetty verisolupro-teiini on albumiini. Keksinnön parhaana pidetyillä koostu-20 muksilla on kovettuneena repäisylujuus, joka on ainakin noin 75 g/cm2 ja mieluummin ainakin noin 400 g/cm2 mitattuna kudoskiinnittyvyystestillä.

Parhaana pidetty liimakoostumus on sellainen, jossa prote-•*'25 iinikomponenttia on läsnä noin 27 - noin 53 paino-% pitoi-suudessa perustuen koostumuksen painoon ja aldehydikom-***, ponenttia on läsnä noin 0,5 - noin 5 paino-% pitoisuudessa ···, koostumuksen painosta.

f * * •;;.30 Toisessa suoritusmuodossa keksintö antaa liimakoostumuksia, *·' ’ jotka käsittävät proteiinimateriaalin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin steriilin seoksen, jossa proteiinima-i teriaali valitaan ryhmästä, joka käsittää plasmaproteiinin V : ja verisoluproteiinin.

:*v?5 ί·. Vielä muussa suoritusmuodossa keksintö antaa välineet, jotka * t 'Γ käsittävät ensimmäisen säiliövälineen, jossa on plasma- tai :verisoluproteiinia asetettuna sen sisään ja toisen säiliövä-lineen, jossa on di- tai polyfunktionaalista aldehydiä 6 114219 asetettuna sen sisään. Parhaana pidetyssä suoritusmuodossa välineet käsittävät ensimmäisen säiliövälineen, jossa on plasmaproteiinikomponenttia asetettuna sen sisään noin 30 -55 paino-% pitoisuudessa ja toisen säiliövälineen, jossa on 5 di- tai polyaldehydiä asetettuna sen sisään noin 5 - noin 15 paino-% pitoisuudessa, jolloin proteiini- ja aldehydikom-ponentteja on läsnä määrissä, jotka ovat riittäviä sallimaan yhden paino-osan aldehydikomponenttia sekoittamisen 5 - 60 paino-osan kanssa proteiinikomponenttia.

10

Asiaan liittyvässä suoritusmuodossa keksintö antaa asetti-men liimakoostumuksen toimittamiseksi kudospinnalle, jolloin asettimessa on proteiinimateriaali ja di- tai polyfunktio-naalinen aldehydi asetettuna sen sisään. Asetin on mieluum-15 min ruisku.

Asetin käsittää mahdollisesti ensimmäisen ja toisen erillisen osaston, proteiinimateriaalin ollessa asetettuna ensimmäiseen osastoon ja aldehydin ollessa asetettu aset-20 timen toiseen osastoon.

Tämän keksinnön parhaana pidetty liima valmistetaan muodostamalla liitettävälle pinnalle tai pinnoille tai niiden läsnäollessa koostumus, joka käsittää: •••25 : Osan A, joka käsittää proteiinia, jota on läsnä noin 27 - noin 53 paino-% pitoisuudessa koostumuksen painosta; ja

Osan B, joka käsittää di- tai polyaldehydiä, jota on läsnä # * * ;;f30 noin 0,5 - noin 5 paino-% pitoisuudessa koostumuksen painos- ’·' ta.

·.· ; Aineksien parhaina pidetyt pitoisuudet voidaan ilmaista myös · niiden pitoisuuksina vastaavassa välinesarjan komponentissa, ,·, 35 s.o. ennen noiden komponenttien yhdistämistä muodostamaan • > » !..* koostumuksen. Välinesarjan komponentteina ilmaistuna vä- linesarjan komponentti Osa A käsittää mielellään proteiinia • ’·· noin 30 -'noin 55, mieluummin noin 35 - noin 47 ja kaikkein mieluiten noin 40 - noin 43 paino-% pitoisuudessa perustuen 7 114219

Osan A välinesarjan komponentin painoon.

Samoin välinesarjan komponentti Osa B käsittää di- tai polyaldehydiä noin 5 - noin 15, mieluummin noin 10 - noin 15 5 paino-% pitoisuudessa Osan B välinesarjan komponentista. Välinesarja sisältää mieluummin Osia A ja B riittävissä pitoisuuksissa ja määrissä sallimaan yhden paino-osan Osaa B sekoittamisen noin 5 - 60 osan, ja mieluummin noin 20 - 60 paino-osan kanssa Osaa A.

10

Sekä Osa A että B voivat mahdollisesti sisältää muita, ei-olennaisia aineksia tasapainottamaan koostumusta. Esimerkit sellaisista ei-olennaisista materiaaleista ovat neutraaleja suoloja, hiilihydraatteja, kuituja ja erilaisia biologisia 15 materiaaleja, kostutusaineita, antibiootteja, säilöntäaineita, värejä, paksunnosaineita ja sen kaltaisia. Osat A ja B sekoitettaessa proteiinimateriaali plasmaproteiinissa ver-kottuu aldehydikomponentilla muodostaakseen kovetetun liiman .

20

Lopullinen verkkoutunut, kovettunut liima on tyypillisesti veteen liukenemattoman, kumimaisen tai nahkamaisen prote-iinikiintoaineen muodossa, joka on olennaisen vapaa aldehy-deistä. Sopiva liima kiinnittyy tyypillisesti sidottavaan .•*•25 alustaan repäisylujuudella, joka on noin 75 g/cm2 ja noin 800 g/cm2 välillä määritettynä kudoskiinnittyvyystestillä, ···, kuten kuvataan täydellisemmin alla Esimerkeissä. Keksinnön parhailla liimoilla on repäisylujuus noin 100 g/cm2 ja noin 500 g/cm2 välillä ja erityisen parhaina pidettyjä ovat ne, • * * :;;/30 joilla on repäisylujuus noin 250 g/cm2 ja noin 400 g/cm2 i * * ’·’ ‘ välillä. Vertailun vuoksi ovat repäisylujuudet muilla materiaaleilla verrattavissa kudoskiinnittyvyystestillä seuraa-· via: » I » » · * ,·’ 35 Materiaali Kudoskiinnittvvvvs (g/cm2) proleenilanka (5-0) n. 300 * syanoakrylaattiliimat 130 - 360 ‘fi "GRF"- liima 130 - 280 8 114219 fibriiniliimat 7 - 16 härän fibrinogeeni (6,7 paino-%) n 25

Sitoutuminen (s.o. välinesarjan komponenttien sekoittaminen 5 sellaisen koostumuksen muodostamiseksi, joka kovettuu liimaksi) aikaansaadaan yhdistämällä kaksiosainen järjestelmä (osiin viitataan osana A ja vastaavasti osana B) ja sallimalla seoksen reagoiminen liitettävällä pinnalla tai pinnoilla. Sidoksen muodostuminen on nopeaa, se vaatii yleensä 10 alle minuutin ajan tullakseen suoritetuksi. Tuloksena oleva liitos on vahva antaen yleensä sidoksia, joiden repäisylu-juudet ovat noin 400 g/cnr - noin 600 g/citr. Termiä "re-päisylujuus" käytetään tässä vaihdellen termin "kudoskiin-nittyvyys" kanssa, joka on määritelty tässä kuvatussa Tissue 15 Adherence Tesfissä. On saatu repäisylujuuksia, jotka ovat 1300 g/crrr ja enemmänkin tätä keksintöä käyttäen. Repäisylu-juuden ylärajoja ei ole määritelty, eivätkä ne ole tarkoitettuja tulkittavaksi keksintöä rajoittavina.

20 Nyt vaaditun koostumuksen Osa A käsittää mieluummin vesi- liuoksen, joka sisältää noin 30 - noin 55 paino-% plasmapro-teiinikomponenttia. Alle noin 30 % pitoisuuksissa kovetettu tuote todennäköisemmin muodostaa suspensiossa hyytymiä kuin homogeenisen massa ja liimaominaisuudet ovat kehnoja. Yli 55 J*25 % pitoisuuksissa koostumus pyrkii kovettumaan liian nopeas- ti, kun proteiini- ja aldehydikomponentit sekoitetaan.

i

Pitoisuudet ilmaistaan tässä perustuen kuvattujen eri kiin- ,*·, toainekomponenttien lyofilisoituun painoon.

* * » * ‘ ’;;.'30 Parhaana pidetyssä suoritusmuodossa välinesarjan komponentti i * ‘ '*’ ' Osa A käsittää noin 35 - noin 55 paino-% plasmaproteiinikom-ponenttia ja erityisen parhaan pidetyssä suoritusmuodossa : noin 4 0 - noin 4 3 paino-%. Osan A tasapainottaja on tyypil- \· '· lisesti inertti väliaine, esimerkiksi vesi, laimea puskuri- ,.,35 ja/tai suolaliuos, joka sisältää mahdollisesti ei-olennaisia I I t t>*·, aineita, jotka eivät merkittävästi liity liimanmuodostus- reaktioon. Esimerkkejä sellaisista ei-olennaisista materiaa-: · leista ovat neutraalit suolat, hiilihydraatit, kuidut ja erilaiset biologiset materiaalit, kostutusaineet, antibioo- 9 114219 tit, säilöntäaineet, värit, paksunnosaineet ja sen kaltaiset. Esimerkiksi ei-olennaisia aineita, kuten fib-rinogeeniä tai poly(etyleeniglykolia), kuten esitetään esimerkeissä 5 ja 19 ja vastaavasti 9, voidaan sisällyttää.

5 Välinesarjan komponentti Osa B, jota käytetään valmistamaan nyt vaadittua koostumusta, käsittää mieluummin di- tai polyaldehydin liuoksen vedessä tai muussa sopivassa väliaineessa. Glutaarialdehydiä 5 - 15 % liuoksena (ja mieluummin 10 10 - 15 %) pidetään parhaana, mutta muut aldehydimateriaalit ovat sopivia. Esimerkiksi kun aldehydikomponentti käsittää dialdehydiä, sopivat dialdehydit valitaan ryhmästä, joka käsittää glyoksaalin, meripihkahappoaldehydin, maleiinihap-poanhydridin, ftaalihappoanhydridin gluraarihappoaldehydin 15 lisäksi. Täten vesipitoinen glyoksaali on tyydyttävä Osaa B varten, kuten ovat myös vesipitoiset di- ja polyaldehydien seokset, jotka on saatu hapettavalla hiilihydraattien ja niiden johdannaisten lohkaisulla perjodaatilla, otsonilla tai sen kaltaisilla. Muut vesiliukoiset di- ja polyaldehydit 20 tunnistetaan helposti yhtä hyödyllisiksi tämän keksinnön tarkoitukseen.

Kun sopivan Osien A ja B seoksen annetaan reagoida liitettävällä pinnalla tai pinnoilla, muodostuu tarttuva koostumus, ••25 yleensä vähemmässä kuin minuutissa ja usein alle 30 sekun-* » · 2, ί nissa tai vähemmässäkin. Tällä prosessilla voidaan liittää >··. laaja alustojen alue, kuten esitettiin aikaisemmin. Mitään ψ merkittävää lämmön kehittymistä ei havaittu ja saatiin hyvä kiinnittyminen märkiin pintoihin, mikä antaa täten keksin- I i t » ♦ * **.’.30 nölle laajan käyttöalan.

« » · * »

Kirurgisena liimana keksinnön parhaana pidetty koostumus * * i,| i antaa kovetetun liiman, jolla on liitoslujuus, joka on monta » i - v 1 kertaa vahvempi kuin tavanomaisella fibriinillä ja perintei-\35 sillä ompeleilla. Suoritettiin useita kokeellisia kirurgisia t i \ toimenpiteitä menestyksekkäästi (sikamallilla) käyttäen ' * liimakoostumusta. Esimerkiksi reikäinen aortta ja suoli korjattiin liimaamalla vaurioalueisiin lappumateriaaleja ja i verenvuodon tyrehtyminen aikaansaatiin nopeasti poistetussa 10 114219 pernassa käyttämällä liimaa.

Kuten esitettiin aikaisemmin vaaditun koostumuksen hyödyllisyys aikaansaadaan sekoittamalla välinesarjan komponentit 5 Osa A ja Osa B. Koostumuksen ja tuloksena olevan liiman ominaisuudet määrittyvät suurelta osin proteiinityypillä ja Osan A sisällöllä ja Osan B aldehydikomponentin tyypillä ja painosuhteella. Tapa jolla sidoskoostumus todellisuudessa sekoitetaan käytännössä (s.o. välittömästi ennen kovettumis-10 ta) ei ole rajoittava tekijä ja se voi vaihdella aiotun käytön mukaan. Parhaina pidetyistä pitoisuusalueista Osalle A ja Osalle B, jotka sekoitettaessa tuottavat liimakoostu-muksen, keskustellaan alla ja myös esimerkeissä.

15 Kuten kuvattiin yllä, liimakoostumuksen Osa A käsittää mieluummin olennaisesti joko ovalbumiini- tai plasmaprote-iinikomponentin, esim. ihmis- tai eläinperäisen proteiinilta -teriaalin vesiliuoksen. Parhaana pidetty proteiinilähde käytettäväksi Osana A on plasmaproteiini, joka on valittu 20 ryhmästä, joka käsittää konsentroidun seerumin, seerumialbu-miinin ja niiden yhdistelmät. Albumiinit, jotka sisältävät ovalbumiinit, ovat parhaana pidettyjä proteiineja ja ihmis-tai muut eläinperäiset seerumialbumiinit ovat erityisen parhaina pidettyjä.

25

Proteiinimateriaali voidaan antaa puhdistettuna proteiinina tai seoksena, jossa proteiinit, kuten seerumialbumiinit ovat vallitsevia aineksia. Esimerkiksi plasmakomponentin fib-’.··* rinogeenin pienen määrän läsnäolon (esim. noin 1 % - 20 *.30 paino-% ja mieluummin noin 1 % - noin 10 paino-% osasta A) v · on havaittu parantavan tämän keksinnön kovetetun koostumuk sen liimaominaisuuksia. Esimerkiksi voidaan Osan A valmis-• tukseen käyttää kiinteitä seoksia, jotka on saatu poistamal- la vesi veriplasmasta tai seerumista tai kaupallisista ,· ,35 stabiloitujen plasmaproteiinien liuoksista. Nämä seokset, *·'· joihin yleensä viitataan plasmakiintoaineina tai yhdistel- , t *..·* mäseerumikiintoaineina, sisältävät albumiineja niiden pää-asiallisina aineksina noin 50 - noin 90 paino-% suuruusluo-kassa. Tässä käytettynä termi "plasma" viittaa kokovereen, 11 114219 josta solut on poistettu linkoamalla. Termi "seerumi" viittaa plasmaan, joka on lisäksi käsitelty estämään agglutinaa-tio poistamalla sen fibrinogeeni ja/tai fibriini tai inhiboimalla fibriinin hyytymän muodostuminen lisäämällä rea-5 gensseja, kuten sitraattia tai EDTA:ta.

Liimakoostumuksen Osa B käsittää mieluummin olennaisesti di-tai polyaldehydien vesiliuoksen. Näitä aineita on laaja joukko ja niiden käyttökelpoisuutta rajoittaa suurelta osin 10 saatavuus ja niiden liukoisuus veteen. Esimerkiksi glyoksaa-lin (etandiaali) vesiliuos on hyödyllinen, kuten on myös glutaarialdehydin (pentandiaali) vesiliuos. Di- ja polyaldehydien vesiliukoiset seokset, jotka on valmistettu sopivien hiilihydraattien hapettavalla lohkaisemisella perjodaatilla, 15 otsonilla tai sen kaltaisilla, ovat myös hyödyllisiä. Glutaar ialdehydi on parhaana pidetty Osan B dialdehydiaines.

Kun Osat A ja B tuodaan yhteen, kuten kuvataan alla esimerkeissä, tulokseksi saatu tuote kovettuu nopeasti vahvaksi 20 nahkamaiseksi tai kumimaiseksi materiaaliksi lyhyenä sekoi-tusaikana, joka on yleensä suuruusluokkaa 15-30 sekuntia. Vahva kiinnittyminen on tuloksena, jos liimakoostumusta on läsnä yhdellä tai molemmilla liitettävillä pinnoilla ja pinnat tuodaan yhteen ennenkuin sidos kovettuu. Täysi sidos-25 vahvuus saavutetaan alle yhdessä minuutissa, mutta tämän alan ammattilaiset tietävät, että muuttujia, kuten erityisiä Osiin A ja B käytettyjä aineksia, lämpötilaa ja niin edelleen voidaan käyttää vaikuttamaan sidoksen muodostuksen ’···' nopeuteen. Esimerkiksi huomattavasti alentuneita kovettumis- :.::30 nopeuksia havaitaan, kun Osana B käytetään hiilihydraattien V : hapettavalla lohkaisulla saatuja di- tai polyaldehydejä.

Samoin kun Osa A perustuu plasman kiintoaineisiin, saavute-• taan täysi sidosvahvuus yleensä noin kaksi kertaa niin nopeasti kuin silloin, kun käytetään puhdistettua härän ,· ,3 5 seerumialbumiinia.

Kuten tässä kuvataan, tehokas sitoutuminen on tuloksena, kun Osat A j a' B sisältävä parhaana pidetty koostumus osuu yllä ....: määriteltyjen hyväksyttävien rajojen sisään, s.o. noin 27 - 12 114219 noin 53 paino-% proteiinia ja myös viitattuja määriä dialde-hydiä ja vettä. Kuitenkin, jos koostumus täytyy tuottaa mekaanisesti Osat A ja B sekoittamalla liitettävillä pinnoilla, on joitakin parhaana pidettyjä pitoisuusalueita, 5 joiden sisälle Osien A ja B tulisi osua sekoituksen helpottamiseksi. Täten on parhaana pidettyä käyttää proteiiniliu-oksia (Osa A), joiden kiintoainepitoisuus on noin 30 - noin 50 paino-% Osaa A ja sekoittaa nämä dialdehydiliuoksien kanssa (Osa B) , jossa on noin 5 - noin 15 paino-% Osaa B.

10 Tämän keksinnön liimakoostumusten tekemisessä voidaan Osat A ja B esisekoittaa ja levittää liitettäville pinnoille välittömästi sekoituksen jälkeen ruiskulla, katetrilla tai muulla laitteella. Vaihtoehtoisesti Osat A ja B voidaan levittää 15 samanaikaisesti, kuten esimerkiksi kaksisuuttimisesta laitteesta ja sekoittaa liitettävällä pinnalla. Myös Osien A ja B jaksottainen levittäminen pinnoille on tyydyttävä, jaksotuksen B ja A, sitten B ollessa parhaana pidetty.

20 Erityisen parhaana pidetyssä suoritusmuodossa on mukavinta sekoittaa Osa A (sisältäen noin 40 - noin 43 paino-% plasma-proteiineja) osan B kanssa (sisältäen noin 5 - noin 15 paino-% glutaarialdehydiä tai muuta di- tai polyaldehydiä). Joissakin käytöissä voi kuitenkin olla suositeltavampaa .:.25 poiketa ylläolevista A:n ja B:n pitoisuuksista, edellyttäen '*.’*· kuitenkin että tuloksena olevan seoksen koostumus jä ra- joihin, jotka määriteltiin aikaisemmin. On myös mukavaa käyttää joissakin käytöissä pientä B:n ylimäärää, koska reagoimaton materiaali voidaan neutraloida sidoksen muodosti 130 tumisen jälkeen. Laimeat proteiinien, peptidien tai v * aminohappojen liuokset, joita käytetään esimerkiksi noin 5 % pitoisuutena, ovat sopivia ylimääräisen aldehydikomponentin : neutraloimistarkoituksessa.

I I · • · · 35 Parhaana pidetyissä suoritusmuodoissa on välinesarjan kom-ponentti, osa A tyypillisesti tahnamainen materiaali ja osa 4 · -··* B on tyypillisesti neste. Yhdistettynä saadaan mielellään hunajamainen koostumus (sekä ulkonäön että konsistenssin suhteen) .

13 114219 Tämän keksinnön nyt kuvatun kovetetun liiman ja siihen liittyvän välinesarjan ja koostumuksen lisäksi tämä keksintö antaa lisäksi menetelmän kudosliiman valmistamiseksi käsittäen vaiheet, joissa (a) varataan tässä kuvattu koostumus, 5 joka käsittää proteiinikomponenttia ja di- tai polyfunktio-naalisen aldehydin komponenttia ja (b) kovetetaan koostumus muodostamaan liiman. Proteiinikomponentti on mieluummin plasmaproteiinia ja kovetettu koostumus pystyy antamaan liitoksen, jonka repäisylujuus on ainakin 75 g/cm2 kudos-10 kiinnittyvyystestillä.

Osa A voidaan valmistaa liuottamalla veteen kuivia prote-iinikiintoaineita, mahdollisesti sisältäen ei-olennaisia materiaaleja tai kiintoaineet voidaan liuottaa veteen, joka 15 voi mahdollisesti sisältää mainittuja ei-olennaisia aineita. Kuivat proteiinikiintoaineet voidaan valmistaa lyofilisoi-malla laimeita proteiiniliuoksia, kuten plasmaa tai seerumia tai kaupallisia plasmanjatkoaineita, kuten Plasma-Plex® (Plasma-Plex plasmaproteiinifraktio (ihmisen) USP 5 % liuos, 20 kuumennuskäsitelty, Armour Pharmaceutical Company, Kankakee, Illinois 60901) tai Plasmanate® (plasmaproteiinifraktio (ihmisen) USP 5 % liuos, Miles, Inc. Cutter Biological Elkhart, Indiana, 46515, USA, Miles Canada, Inc. Etobiocoke, Ontario Canada), jotka ovat stabiloituja, palautettuja •••25 plasmaproteiinien liuoksia , jotka sisältävät noin 5 paino-% ; proteiinia tai muita sopivia liuoksia. Puhdistettuja prote- ··, iinijauheita, kuten ihmisen tai eläinten seerumialbumiineja, .Γ. ovalbumiinia tai proteiinijauheiden seoksia voidaan myös käyttää osan A valmistukseen.

* » * :30 I * » '·' ' Vaihtoehtoinen tie osan A valmistukseen on laimeiden prote-iiniliuoksien konsentrointi vaadittuun kiintoainepitoisuu- • * ·,· · teen. Tämä lähestymistapa on erityisen hyödyllinen liiman : : : valmistukseen potilaan omasta verestä tai yhdeltä luovutta- ,•"•35 jalta saadusta seulotusta verestä. Monet tekniikat ovat saatavilla proteiiniliuoksien konsentrointiin ja ne ovat * · alan ammattilaisille hyvin tunnettuja. Niiden joukosta j "·· voidaan luetella pakastekuivaus ja palautus (mainittiin :··: yllä) , haihdutus, kosketus hygroskooppisten kiintoaineiden kanssa, dialyysi, ultrasuodatus ja tyhjölinkoushaihdutus.

Muut laimeiden liuosten konsentrointimenetelmät voivat olla suositeltavia erityisissä käytöissä.

14 114219 5 Nyt kuvatun kovetetun liiman ja siihen liittyvän tämän keksinnön koostumuksen lisäksi tämä keksintö antaa lisäksi menetelmän lukuisien kudos- ja/tai kudokseen koskettavien pintojen liittämiseksi yhteen käyttämällä koostumusta.

Menetelmä käsittää vaiheet, joissa (a) levitetään yhdelle 10 tai useammalle kudospinnalle koostumusta, joka käsittää proteiinikomponenttia ja di- tai polyfunktionaalisen aldehy-din komponenttia, koostumuksen ollessa kovetettavissa antamaan liimasidoksen, (b) saatetaan pinnat kosketuksiin toistensa kanssa ja (c) kovetetaan koostumus pintojen kiinnittä-15 miseksi toisiinsa. Proteiinikomponentti on mieluummin plas-maproteiinia ja kovetettu koostumus pystyy antamaan liitoksen, jonka repäisylujuus on ainakin 75 g/cm2 kudoskiinnitty-vyystestissä. Menetelmän käytäntöön sovellutuksessa voidaan koostumuksen komponentit levittää jaksottain pinnalle ja 20 sekoittaa yhteen in situ koostumuksen muodostamiseksi.

Vaihtoehtoisesti voidaan komponentit sekoittaa yhteen muodostamaan koostumuksen ennen levittämistään kudospinnalle.

Keksintö antaa siksi erään näkökohdan mukaisesti menetelmän 25 biologisen kudoksen kiinnittämiseksi aineeseen, käsittäen **.'_*; sen, että tuodaan kudos ja aine kosketuksiin liimakoostumuk- sen kanssa, joka käsittää proteiinin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin seoksen, olosuhteissa, joissa kudoksen ja *·' aineen välinen sidos muodostuu. Aine voi olla biologinen 30 kudos tai synteettinen materiaali.

• · · Tämän keksinnön menetelmässä voidaan proteiini ja aldehydi : levittää jaksottain pinnalle ja sekoittaa yhteen in situ muodostamaan koostumuksen. Vaihtoehtoisesti proteiini ja ,· ,35 aldehydi voidaan sekoittaa yhteen muodostamaan koostumus • '· ennen sen levittämistä kudospinnalle.

« I

Nyt kuvatun kovetetun liiman ja siihen liittyvän välinesar-·;··* jän ja tämän keksinnön koostumuksen lisäksi tämä keksintö 15 114219 antaa edelleen yhdistelmän, joka käsittää yhden tai useampia kudospintoja kiinnitettynä yhteen, mahdollisesti sisältäen yhden tai useampia bioyhteensopivia välinepintoja, kovetetulla tämän keksinnön liimalla. Yhdistelmä käsittää lukuisia 5 pintoja kiinnitettynä yhteen kovetetulla liimalla, joka on valmistettu koostumuksesta, joka käsittää proteiinikomponen-tin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin komponentin. Proteiinikomponentti käsittää mieluummin plasmaproteiinia ja koostumus voidaan kovettaa antamaan liitoskokeen, jonka 10 mukaan repäisylujuus on ainakin noin 75 g/cm2 kudoskiinnit-tyvyystestin mukaan.

Keksinnön parhaina pidettyjä suoritusmuotoja kuvataan lisää seuraavissa esimerkeissä.

15 ESIMERKKI 1

Kuivia plasmakiintoaineita saatiin pakastekuivaamalla tuoretta, pakastettua ihmisen plasmaa. Kiintoaineeseen lisät-20 tiin vettä antamaan viskoosi liuos, joka sisälsi 45 paino-% kiintoaineita. Tätä liuosta käytettiin Osana A. Osa B oli glutaarialdehydin vesiliuos, joka sisälsi 10 paino-% glutaa-rialdehydiä. Kahta suorakulmaista lihapalaa ruiskutettiin kevyesti B:llä liitettäville pinnoille. Sitten pinnat pei-25 tettiin A: 11a noin 1 mm - noin 2 mm paksuuteen ja ruiskutet-: tiin taas B:llä. Suhde A:B oli 7:1 painon mukaan. Pinnat !.. liitettiin noin 10 sekunnissa A:n levittämisestä ja niitä pidettiin asemassaan, kunnes kovettuminen oli täydellinen, • t ‘ yleensä 15-60 sekuntia riippuen lämpötilasta ja A:n ja B:n * * * ·>; ’· 3o sekoituksen tehokkuudesta.

4 » t

Kudoskiinnittvvvvstesti « * t * » ; ·'; Repäisylujuuden määrittämiseksi liimattu suorakulmainen .35 lihapala kiinnitettiin pinteillä jousivaakaan yhdestä päästä ja muutettavaan painoon toisesta. Painoa lisättiin progres- i * '··' siivisesti, kunnes liitos tai viereinen liha repesi. Re- päisylujuiis pantiin muistiin g/cm2, mikä vaadittiin liitok- ».

·;··· sen rikkoontumiseen. Repäisyluj uudet määritettiin yhden ie 114219 minuutin päästä pintojen liittämisestä, ellei muuten ole merkitty. Ylläolevalle koostumukselle olivat tyypilliset repäisylujuudet 445 g/cm2. Itse lihan lujuus toimii määrittääkseen kudoksen kiinnittymiselle ylemmän rajan, joka 5 sellaista koetta käytettäessä voidaan määrittää. Tässä erityisessä kokeessa yläraja on suunnilleen 1200 g/cm2 (merkitty "1200+ g/cm2") .Vaikka yläraja kaikissa erityisissä kokeissa riippuu esimerkiksi lihan tyypistä, leikkaussuun-nasta ja niin edelleen, alla saadut arvot ovat vertailukel- 10 poisia eri näytteiden välillä. Vaikka sellaiset vahvat liimat saattaisivat olla vähemmän hyödyllisiä käytettäväksi pehmytkudoksen liittämiseen, ne ovat erityisen hyödyllisiä sellaisissa käytöissä, kuten jänteiden ja sidekudoksen liimaamisessa.

15

Kun A:n ja B:n levittämisen järjestys käännettiin tai kun A ja B levitettiin samanaikaisesti tai kun A ja B esisekoitet-tiin välittömästi ennen levittämistä, havaittiin olennaisesti samat sidosvahvuudet.

20 ESIMERKKI 2

Sama kuin esimerkki l, paitsi että käytettiin kuumennuskäsi-teltyä 5 % plasmafraktiota (ihmisen) USP tuottamaan kuivat i, 25 kiintoaineet ja se pitoisuus Osassa A oli 47 paino-%. Saa-.tiin liimautuminen, kuten kuvattiin yllä. Repäisylujuus oli f * * k. alueella 550 -624 g/cm2.

* '*·'* ESIMERKKI 3 » ! * ♦ * : 30 V : Härän seerumialbumiinia liuotettiin veteen antamaan liuos, joka sisälsi 40 paino-% kiintoaineita, jota sitten käytet- • tiin Osana A, kuten kuvattiin esimerkissä l liimaamaan } t · * • lihakimpaleita. Repäisylujuudet olivat alueella 514 - 629 ,35 g/cm2.

• » « ! ’ » I f ' > *’ * ESIMERKKI 4 $ .....! Ihmisen seerumialbumiiniliuoksia, jotka sisälsivät 40-45 t * 17 114219 paino-% proteiinia, valmistettiin konsentroimalla 25 % liuoksia dialyysillä. Kun näitä liuoksia käytettiin Osana A liimattaessa, kuten kuvattiin yllä, repäisylujuudet olivat alueella 605-922 g/cm2.

5 ESIMERKKI 5

Kun Osa A oli liuos, jonka kiintoainepitoisuus oli 45,5 paino-% ja muodostui härän seerumialbumiinin ja härän fib-10 rinogeenin seoksesta, jossa albumiini muodosti 90-97 %, tulokseksi saadun sidoksen repäisylujuudet olivat alueella 786 - yli 1280 g/cm2.

ESIMERKKI 6 15

Synteettistä suoniproteesia, joka oli tehty Dacron-materiaalista (TM) ja proteeseja, jotka oli tehty Teflon(TM)-materiaalista ja myös kuolleesta peräisin olevia suonisiirrännäis-materiaaleja liitettiin onnistuneesti lihaan tai toisiinsa 20 käyttäen mitä tahansa koostumusta, joka on kuvattu kaikissa tähän sisältyvissä esimerkeissä. Esimerkiksi repäisylujuus, joka saavutettiin esimerkin 5 koostumuksella pihvin ja kudotun Dacronia olevan suoniproteesin välille oli yli 890 g/cm2 mitattuna leikkausmoodissa, kun taas Teflonsiirrän-25 näisen lujuus oli 67 0 g/cm2. Samoin oli lääketieteellisten » » implantoitavien silikonikumilla päällystettyjen elektrodien • / repäisyluj uus 1080 g/cm2 käyttäen härän seerumialbumiinia :* : Osana A.

.•‘.•30 ESIMERKKI 7 . . Osa A, joka sisälsi 30-32 paino-% ihmisen seerumialbumiinia, valmistettiin joko tuoreesta plasmasta tai stabiloidusta 5 % plasmaproteiiniliuoksista ultrasuodatuksella. Kun 50 % :/.35 glutaarialdehydin vesiliuosta käytettiin komponenttina B, tuloksena olevien sidosten repäisylujuudet olivat alueella ..* 267 -335 g/cm2.

ESIMERKKI 8 18 114219

Osa A oli 30 paino-% ihmisen plasmaproteiinia, joka oli valmistettu 5 % stabiloidusta liuoksesta (USP), kuten kuvattiin yllä esimerkissä 7. Osa B oli 25 paino-% glutaarialde-hydin vesiliuos. Osat A ja B sekoitettiin painosuhteessa 10 5 osaa A:ta ja 1 osa B:tä( mistä oli tuloksena seos, joka sisälsi 27 paino-% proteiineja. Tämä seos levitettiin välittömästi kahden lihakimpaleen pinnoille ja kimpaleet liitettiin yhteen. Tulokseksi saadulla sidoksella on repäisylujuus 7 5 g/crrr.

. 10 ESIMERKKI 9

Kun lihakimpaleet liitettiin kuten kuvattiin esimerkissä 1, mutta käyttäen 47 % härän seerumialbumiinin vesiliuosta A:na 15 ja 10 % glyoksaalin vesiliuosta B:nä, repäisylujuus oli 333 g/cm2.

ESIMERKKI 10 20 Näyte, joka sisälsi korkean osuuden ihoa ja rasvakudos liitettiin käyttäen Osana A vesiliuosta, joka sisälsi noin 41 % härän seerumialbumiinia ja 4 % polyetyleeniglykolia, jonka molekyylipaino oli 15000-20000 ja 10% glutaarialdehy-diä Osana B. Tuotetun sidoksen repäisylujuus oli 1300 g/cm2.

25 ESIMERKKI 11 t i i i /· Liimakoostumusta, joka on kuvattu esimerkissä l, käytettiin ; ·.*: menestyksellisesti useissa kirurgisissa toiminnoissa 15,8- ;':*:30 18 kg sialla. Suoritetut toimenpiteet olivat paikkojen paneminen (ilman ompeleita) rei'itettyyn vatsa-aorttaan ja ; ,·, suoleen ja poistetun pernan verenvuodon tyrehdyttäminen.

Paikat leikattiin ihmisen ruumiin keuhkovaltimokudoksesta, '. joka oli käsitelty käytettäväksi siirrännäismateriaalina ‘*.‘•55 ihmisen sydän-verisuonikirurgiassa.

ESIMERKKI 12

Osa A oli 47 % härän seerumialbumiini. Osa B valmistettiin 19 114219 seuraavasti: metyyliglukosidia (0,5 g) liuotettiin veteen (4,1 ml) ja hapetettiin natriumperjodaatilla (1,0 g) natriumbikarbonaatin läsnäollessa jääkylvyssä 45 minuutin aikana. Tämän reaktion tuotteiden tiedetään olevan komplek-5 sinen dialdehydi noin 10 paino-% pitoisuudessa ja myös epäolennaisia suoloja. Tätä liuosta käytettiin Osana B puhdistamatta. Seos kovettui joustavaksi sidokseksi noin yhdessä tunnissa repäisylujuuden ollessa 320 g/cm2.

. 10 ESIMERKKI 13

Sama kuin esimerkki il, mutta käytettiin trehaloosia (0,5 g), natriumperjodaattia (1,2 g) ja natriumbikarbonaattia (0,5 g) reagensseina liuotettuna veteen (4,0 ml) jääkylvyssä 15 Osan B tuottamiseksi. Tuotteen tiedetään sisältävän seoksen kompleksisia di-, tetra- ja polymeerisiä aldehydejä noin 10 % liuoksena yhdessä epäolennaisten suolojen kanssa. Repäisyluj uus yhden tunnin jälkeen oli 245 g/cm2.

20 ESIMERKKI 14

Kuten esimerkki 11, mutta käytettiin sukroosia (0,5 g), natriumperjodaattia (1,0 g), natriumbikarbonaattia (1,0 g) . ja vettä (5,0 ml). Tuloksena olevan tuoteliuoksen tiedetään ···· 25 sisältävän seoksen kompleksisia di-, tetra- ja polyaldehyde-• · ·. ” jä noin 8 %:na. Tulokseksi saatu sidoslujuus oli 364 g/cm2.

ESIMERKKI 15 :’:';30 Kiintoaineseos, joka saatiin lyofilisoimalla munanvalkuaista ja jossa oli pääasiallisesti ovalbumiinia, liuotettiin ·, veteen liuoksien tekemiseksi, joiden kiintoainepitoisuus oli alueella 44,0 - 44,8 %. Kun näitä liuoksia käytettiin Osana A liimaustutkimuksissa käyttäen 10 % glutaarialdehydin •.‘*•35 vesiliuosta osana B, oli saatu repäisylujuus alueella 255 -'• S 339 g/cm2.

» · ESIMERKKI 16 Härän seerumialbumiinia (BSA) liuotettiin veteen esitetyissä pitoisuuksissa ja käytettiin osana A. Osa B oli 10 % glutaa- rialdehydin vesiliuos. Mitattiin seuraavat repäisylujuudet: 20 114219 5 BSA paino-% Repäisvluiuus (a/cnr) 25 < 50 30 < 50 35 100 10 40 514-629 45 610 50 96-557* * liian viskoosia levitettäväksi tasaisesti.

15 ESIMERKKI 17

Plasma -Plex®, 5 % ihmisen proteiinifraktion liuos (USP) pakastekuivattiin, jolloin tulokseksi saadut kiintoaineet 20 palautettiin vedellä alla esitettyihin pitoisuuksiin ja liuoksia käytettiin osana A. Osa B oli 10 % glutaarialdehy-din vesiliuos. Havaittiin seuraavat repäisylujuudet: HSA paino-% Repäisvluiuus (g/cm2) 25 35 <50 37 163-257 41 250-381 i 43 358-413 • ‘•':30 45 423-567* 47 550-624 51 400-527* 53 338-500 *\ ’ 55 85-390* *. *' b 5 : : * Merkitsee, että alustakudos repesi mieluummin kuin sidos ;·* * Liian viskoosia levittyäkseen tasaisesti * * * ESIMERKKI 18 114219

Kuten esimerkki 17, mutta käyttäen kiintoaineita, jotka saatiin lyofilisoimalla tuoretta pakasteplasmaa, saatiin seuraavia repäisylujuuksia: 5 HSA paino-¾ Reoäisvluiuus (g/cm2) 30 136-269 35 486 40 550" . 10 45 544-445, 50 278-361 55 150-226* 60 Ei liukoinen 15 * Merkitsee, että alustakudos repesi mieluummin kuin sidos * Liian viskoosia levittyäkseen hyvin ESIMERKKI 19 20 Proteiinien seoksia voidaan käyttää keksinnön pitoisuusalu-eilla osalle A. Esimerkiksi härän seerumialbumiini (BSA) ja härän fibrinogeeni (BF) tuottavat erinomaisia liimoja: kokonaiskiintoainetta (sekoitettuna) 45,5 paino-%.

» · · 25 BSA (%) BF (%) Repäisvluiuus (g/cm2) 97 3 708-1280* 93,3 6,7 797* : 90 10 7 86 .:*:30 80 20 736-237* . t>( * Merkitsee, että alustakudos repesi mieluummin kuin sidos * BF ei ollut täysinliukoinen, liuos on kumimainen.

•.‘••35 Seokset, kuten nämä, esimerkiksi sisältäen 93 osaa BSA:ta ja 7 osaa BF:ää 45-46 % kiintoainepitoisuudessa sitoutuivat erityisesti aggressiivisesti Dacroniin (TM) ja PTFE:hen vahvuuksilla 890* - 1200*.

114219

Yleisesti aikaansaadaan hyvä sitoutuminen joko levittämällä A tai B ensin tai samanaikaisesti, esim. kaksoissuuttimesta.

Myös in situ sekoitusmenetelmät antavat hyvin sidoksia. Osat A ja B voidaan levittää sarjassa B, sitten A, sitten B; tai 5 A, sitten B; tai samanaikaisesti sekoittaen liimattavilla pinnoilla; tai katetrilla tai katetreilla; tai ruiskulla tai sen kaltaisella laitteella välittömästi esisekoitusta seuraten.

10 vaikka tätä keksintöä voidaan soveltaa monissa erilaisissa muodoissa, tässä on kuvattu yksityiskohtaisesti erityisiä parhaina pidettyjä keksinnön suoritusmuotoja. Tämä esitys on keksinnön periaatteiden esimerkki, eikä se ole tarkoitettu rajoittamaan keksintöä kuvattuihin erityisiin suoritusmuo-15 töihin.

Tämä saattaa loppuun keksinnön parhaana pidettyjen ja vaihtoehtoisten suoritusmuotojen kuvauksen. Alan ammattilaiset saattavat havaita muita ekvivalentteja niille erityisille 20 suoritusmuodoille, jotka on kuvattu tässä, jotka ekvivalentit ovat tarkoitettuja sisältymään oheisiin patenttivaatimuksiin .

I I · * • · I « · > · · · » 1 · f · 1 » · 1 • · » I I | · < · · » I I I · · • · 1 f · t

I I

I I I

* » · » · » ·

Claims

1. Liimakoostumus, tunnettu siitä, että se käsittää seoksena plasmaproteiinia tai verisoluproteiinia ja di- tai polyfunk- 5 tionaalista aldehydiä, jolloin koostumuksessa ei ole kloori-heksidiiniglukonaattia eikä insuliinia.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että proteiini on albumiini. 10

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että liimalla kovetettuna on repäisylujuus ainakin 75 g/cm2 mitattuna kudoskiinnittyvyystestillä.

4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että repäisylujuus on ainakin 400 g/cm2.

5. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 1-4 mukainen liima-koostumus, tunnettu siitä, että proteiinikomponenttia on 20 läsnä noin 27 - noin 53 paino-% pitoisuudessa perustuen koostumuksen painoon.

6. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 1-5 mukainen liima- koostumus, tunnettu siitä, että aldehydikomponenttia on läs- .·. : 25 nä noin 0,5 - noin 5 paino-% pitoisuudessa perustuen koos-• · .·*. tumuksen painoon.

; ,·. 7. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 1-6 mukainen liima- koostumus, tunnettu siitä, että aldehydikomponentti on dial- » · · 30 dehydi, joka on valittu ryhmästä, joka käsittää glyoksaalin, .···. meripihkahapon aldehydin, glutaarialdehydin, maleiinihapon .···, aldehydin ja ftaalihapon aldehydin.

* '·' 8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen liimakoostumus, tunnettu • · · · · 35 siitä, että aldehydi on glutaarialdehydi. „ 114219

9. Minkä tahansa edellisen patenttivaatimuksen mukainen lii-makoostumus, tunnettu siitä, että seos on steriili.

10. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 1-9 mukainen liima-5 koostumus, tunnettu siitä, että se on steriili lääketieteellinen liimakoostumus, joka käsittää seoksena verisoluproteii-nia ja di- tai polyfunktionaalista aldehydiä, jolloin liiman repäisylujuus on kovetettuna ainakin 75 g/cm2 mitattuna kudos-kiinnittyvyystestillä. 10

11. Välinesarja, tunnettu siitä, että se käsittää ensimmäisen säiliövälineen, jossa on plasmaproteiinia tai verisoluprote-iinia sisällään ja toisen säiliövälineen, jossa on di- tai polyfunktionaalista aldehydiä sisällään, käytettäväksi lääke- 15 tieteellisen liiman, joka käsittää plasmaproteiinin tai ve-risoluproteiinin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin seoksen, terapeuttiseen annosteluun.

12. Patenttivaatimuksen 11 mukainen välinesarja, 'tunnettu 20 siitä, että proteiini on albumiini.

13. Patenttivaatimuksen 11 mukainen välinesarja, tunnettu siitä, että ensimmäisessä säiliövälineessä on plasmaprote-iinikomponenttia pitoisuudessa noin 30 - 55 paino-% ja toi- » 25 sessa säiliövälineessä on di- tai polyaldehydikomponenttia l pitoisuudessa noin 5 - noin 15 paino-%, jolloin proteiini- ja aldehydikomponenttja on läsnä määrissä, jotka ovat riittäviä I » i ·’. sallimaan yhden paino-osan aldehydiä sekoittamisen 5-60 * 1 ► · paino-osaa proteiinikomponenttia, käytettäväksi lääketieteel- • · · » 30 lisen liiman, joka käsittää plasmaproteiinin tai verisolupro-teiinin ja di- tai polyfunktionaalisen aldehydin seoksen, terapeuttiseen annosteluun. • » ’:2

14. Asetin liimakoostumuksen toimittamiseksi kudospinnalle, :3: 35 tunnettu siitä, että asettimessa on plasmaproteiinimateriaa- lia tai verisoluproteiinia ja di- tai polyfunktionaalista » » · » t • · t 2 • ·» 3 • · 25 1 14219 aldehydiä sisällään, asettimen käsittäessä ensimmäisen ja toisen erillisen osaston, jolloin proteiini on asetettu asettimen ensimmäiseen osastoon ja aldehydi on asetettu toiseen osastoon. 5

15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen asetin, tunnettu siitä, että asetin on ruisku.

16. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 1-10 mukainen liima-10 koostumus käytettäväksi menetelmässä, jossa kiinnitetään biologista kudosta aineeseen, tunnettu siitä, että se käsittää sen, että saatetaan kudos ja aine kosketuksiin toistensa kanssa.

17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että aine on biologista kudosta.

18. Patenttivaatimuksen 16 tai 17 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että aine on synteettistä materiaalia. 20

19. Patenttivaatimuksen 16, 17 tai 18 mukainen liimakoostumus, tunnettu siitä, että proteiinia ja aldehydiä annostellaan jaksottain pinnalle ja sekoitetaan in situ muodostamaan • i ’ koostumuksen. : : 25

• ,·' 20. Patenttivaatimuksen 16, 17 tai 18 mukainen liimakoostu- : : mus, tunnettu siitä, että proteiini ja aldehydi sekoitetaan • yhteen muodostamaan koostumuksen ennen sen annostelemista kudospinnalle. 30

21. Sellaisen liimakoostumuksen, joka käsittää seoksena plas- » '!!! maproteiinia tai verisoluproteiinia ja di- tai polyfunktio- • ♦ ·;· naalista aldehydiä, käyttö lääketieteellisen liiman valmistani1 miseen. 35

22. Patenttivaatimuksen 21 mukainen käyttö, tunnettu siitä, M M I J • · · » · » • » » • · 26 114219 että proteiini on albumiini.

23. Patenttivaatimuksen 21 tai 22 mukainen käyttö, -tunnettu siitä, että liimalla kovetettuna on repäisylujuus ainakin 75 5 g/cm2 mitattuna kudoskiinnittyvyystestillä.

23 1 14219

24. Patenttivaatimuksen 23 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että repäisylujuus on ainakin 400 g/cm2.

25. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21-24 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että proteiinikomponenttia on läsnä 27 - 53 paino-% pitoisuudessa perustuen koostumuksen painoon.

26. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21-25 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että aldehydikomponenttia on läsnä noin 0,5 - noin 5 paino-% pitoisuudessa perustuen koostumuksen painoon.

27. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21-26 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että aldehydikomponentti on dialde-hydi, joka on valittu ryhmästä, joka käsittää glyoksaalin, meripihkahapon aldehydin, glutaarialdehydin, maleiinihapon aldehydin ja ftaalihapon aldehydin. 25

28. Patenttivaatimuksen 27 mukainen käyttö, tunnettu siitä, • · että aldehydi on glutaarialdehydi.

« « ;;/ 29. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21 - 28 mukainen * 30 käyttö, tunnettu siitä, että seos on steriili.

30. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21-29 mukainen käyt-*;·’ tö, tunnettu siitä, että se käsittää seoksena verisoluprote- iinia ja di- tai polyfunktionaalista aldehydiä, jolloin lii-’·”· 35 man repäisylujuus on kovetettuna ainakin 75 g/cm2 mitattuna : .'. kudoskiinnittyvyystestillä. 27 1 14 219

31. Minkä tahansa patenttivaatimuksista 21 - 30 mukainen käyttö biologisen kudoksen kiinnittämiseksi aineeseen, tunnettu siitä, että kudos ja aine saatetaan kosketuksiin 5 toistensa kanssa.

32. Patenttivaatimuksen 31 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että aine on biologinen kudos.

33. Patenttivaatimuksen 32 tai 32 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että aine on synteettinen materiaali.

34. Patenttivaatimuksen 31, 32 tai 33 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että proteiini ja aldehydi levitetään jaksot- 15 tain pinnalle ja sekoitetaan in situ muodostamaan koostumuksen .

35. Patenttivaatimuksen 31, 32 tai 33 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että proteiini ja aldehydi sekoitetaan yhteen 20 muodostamaan koostumuksen ennen sen levittämistä kudospin-nalle. • · · « · · • · · * · · · » 1 ♦ • ♦ » • ♦ • · · • · · * · * « • » • » » · · M * · 28 1 14219