ES2704740T3 - Derivados de pirazolo[1,5-a]pirimidina sustituida con piperidina con actividad inhibidora sobre la replicación del virus sincicial respiratorio (vsr) - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I), incluida cualquiera de sus formas estereoquímicamente isoméricas, donde**Fórmula** R1 es hidrógeno, hidroxi, alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1; R2 es hidrógeno o alquilo C1-4; R3 es alquilo C1-4, halo, cicloalquilo C3-6, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo2; R4 es hidrógeno, alquilo C1-6, hidroxi o halo; Heterociclilo1 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo1 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo; Heterociclilo2 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo2 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquiloxi C1-4)carbonilamino o (alquil C1-4)sulfonilo; Het se selecciona entre furanilo, tiofenilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, cinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1,5-naftiridinilo, 1,6-naftiridinilo, 1,7-naftiridinilo, 1,8- naftiridinilo, pirido[2,3-d]pirimidinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, 9H-purinilo, tiazolo[5,4-d]pirimidinilo, 7H-pirrolo[2,3- d]pirimidinilo, oxazolo[5,4-d]pirimidinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo o tieno[3,2-d]pirimidinilo; donde cada Het está sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1-4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, amino, mono- o di(alquil C1-4)amino, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1- 4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HONH-( C=NH)-; oxazolilo o triazolilo cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4; o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de pirazolo[1,5-a]pirimidina sustituida con piperidina con actividad inhibidora sobre la replicación del virus sincicial respiratorio (vsr)

Campo de la invención

La invención se refiere a compuestos de pirazolopirimidina bicíclicos sustituidos novedosos que tienen actividad antiviral, en particular, que tienen una actividad inhibidora sobre la replicación del virus sincicial respiratorio (VSR). La invención se refiere además a la preparación de tales compuestos novedosos, a composiciones que comprenden estos compuestos y a los compuestos para su uso en el tratamiento de la infección por el virus sincicial respiratorio. Antecedentes

El virus sincicial respiratorio o VSR humano es un virus de ARN grande, miembro de la familia Paramyxoviridae, subfamilia pneumoviridae junto con el virus VSR bovino. El VSR humano es el responsable de una gama de enfermedades de las vías respiratorias en personas de todas las edades en todo el mundo. Es la causa principal de enfermedades de las vías respiratorias inferiores durante la infancia y la niñez. Más de la mitad de los bebés entran en contacto con el VSR en su primer año de vida, y casi todos ellos en sus dos primeros años. La infección en niños pequeños puede provocar daño en los pulmones que persiste durante años y puede contribuir al desarrollo de una enfermedad pulmonar crónica en etapas posteriores de la vida (sibilancia crónica, asma). Los niños mayores y los adultos suelen padecer un resfriado común (fuerte) tras la infección por VSR. En la tercera edad, vuelve a aumentar la susceptibilidad y se ha relacionado el VSR con una serie de brotes de neumonía en personas de edad avanzada que provocan una mortalidad significativa.

La infección con un virus de un subgrupo determinado no protege contra una infección posterior con un VSR aislado del mismo subgrupo en la siguiente estación invernal. Por lo tanto, la reinfección con VSR es habitual, a pesar de la existencia de tan sólo dos subtipos, A y B.

En la actualidad, sólo se han aprobado tres fármacos para su uso contra la infección por VSR. El primero es ribavirina, un análogo nucleosídico que proporciona un tratamiento en forma de aerosol para infecciones por VSR graves en niños hospitalizados. La vía de administración por aerosol, la toxicidad (riesgo de teratogenicidad), el costo y la elevada variabilidad de su eficacia limitan su uso. Los otros dos fármacos, RespiGam® (IG-V^s R) y Synagis® (palivizumab), inmunoestimulantes de anticuerpos policlonales y monoclonales, están destinados a usarse de manera preventiva. Ambos son muy costosos y requieren administración parenteral.

Hasta la fecha, otros intentos de desarrollar una vacuna segura y eficaz contra el VSR han fracasado. Las vacunas desactivadas fracasaron a la hora de proteger contra la enfermedad y, de hecho, en algunos casos potenciaron la enfermedad durante una infección posterior. Se han probado vacunas vivas atenuadas y han tenido un éxito limitado. Obviamente, se necesita un fármaco atóxico, eficaz y fácil de administrar contra la replicación de VSR. Se preferiría especialmente el suministro de fármacos contra la replicación de VSR que pudieran administrarse por vía oral.

Los compuestos que exhiben actividad contra el VSR se divulgan en los documentos WO-2011/163518, WO-2013/096681 y WO-2013/158776.

Compendio de la invención

La presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I), incluida cualquiera de sus formas estereoquímicamente isoméricas, donde

R1 es hidrógeno, hidroxi, alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1;

R2 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R3 es alquilo C1-4, halo, cicloalquilo C3-6, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo 2

R4 es hidrógeno, alquilo C1-6, hidroxi o halo;

Heterociclilo1 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo1 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo; Heterociclilo2 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo2 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquiloxi C1-4)carbonilamino o (alquil C1-4)sulfonilo;

Het se selecciona entre furanilo, tiofenilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, cinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1,5-naftiridinilo, 1,6-naftiridinilo, 1,7-naftiridinilo, 1,8-naftiridinilo, pirido[2,3-d]pirimidinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, 9H-purinilo, tiazolo[5,4-d]pirimidinilo, 7H-pirrolo[2,3-djpirimidinilo, oxazolo[5,4-d]pirimidinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo o tieno[3,2-d]pirimidinilo; donde cada Het está sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1.4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, amino, mono- o di(alquil C1-4)amino, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1-4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HO-NH-(C=NH)-; oxazolilo o triazolilo cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4;

o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

Tal como se utiliza en las definiciones anteriores:

- halo es genérico para fluoro, cloro, bromo y yodo;

- alquilo C1-4 define radicales hidrocarbonados saturados de cadena lineal o ramificada que tienen de 1 a 4 átomos de carbono tales como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, butilo, 1 -metiletilo, 2 -metilpropilo y similares;

- se pretende que alquilo C1-6 incluya alquilo C1-4 y sus homólogos superiores que tengan 5 o 6 átomos de carbono tales como, por ejemplo, 2-metilbutilo, pentilo, hexilo y similares;

- cicloalquilo C3-6 es genérico para ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo;

- polihalo(alquilo C1-4) se define como alquilo C1-4 polisustituido con halo, en especial alquilo C1-4 (tal como se ha definido anteriormente en la presente) sustituido con de 2 a 6 átomos halógenos tal como difluorometilo, trifluorometilo, trifluoroetilo y similares.

Se pretende que la expresión "compuestos de la invención", tal como se utiliza en la presente, incluya los compuestos de fórmula (I) y sus sales y los solvatos.

Tal como se utiliza en la presente, cualquier fórmula química con enlaces mostrados únicamente como líneas continuas y no como enlaces en cuña continua o en cuña con trazo discontinuo, o en las que se indica de otra manera que tienen una configuración particular (por ejemplo, R, S) alrededor de uno o más átomos, contempla cada estereoisómero posible, o mezcla de dos o más estereoisómeros.

Se pretende que las expresiones "compuesto de fórmula (I)" e "intermedios de síntesis de fórmula (I)", anteriormente y a continuación en la presente, incluyan sus estereoisómeros y sus formas tautoméricas.

Los términos "estereoisómeros" y las expresiones "formas estereoisoméricas" o "formas estereoquímicamente isoméricas" anteriormente y a continuación en la presente se usan indistintamente.

La invención incluye todos los estereoisómeros de los compuestos de la invención, ya sea como un estereoisómero puro o como una mezcla de dos o más estereoisómeros. Los enantiómeros son estereoisómeros que son imágenes especulares no superponibles entre sí. Una mezcla 1:1 de un par de enantiómeros es un racemato o mezcla racémica. Los diastereómeros (o diastereoisómeros) son estereoisómeros que no son enantiómeros, es decir, que no están relacionados como imágenes especulares. Si un compuesto contiene un doble enlace, los sustituyentes pueden estar en la configuración E o Z. Los sustituyentes en radicales (parcialmente) saturados cíclicos bivalentes pueden tener tanto la configuración cis como la trans; por ejemplo, si un compuesto contiene un grupo cicloalquilo disustituido, los sustituyentes pueden estar tanto en la configuración cis como en la trans.

Por lo tanto, la invención incluye enantiómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de estos, siempre que sea químicamente posible.

Los expertos en la técnica estarán familiarizados con el significado de todos estos términos, es decir, enantiómeros, diastereómeros, racematos, isómeros E, isómeros Z, isómeros cis, isómeros trans y mezclas de estos.

Se especifica la configuración absoluta según el sistema de Cahn-Ingold-Prelog. Se especifica la configuración en un átomo asimétrico con R o S. Los estereoisómeros resueltos cuya configuración absoluta no se conoce se pueden designar con (+) o (-), dependiendo de la dirección en la que hagan rotar la luz polarizada en un plano. Por ejemplo, los enantiómeros resueltos cuya configuración absoluta no se conoce se pueden designar como (+) o (-), dependiendo de la dirección en la que hagan rotar luz polarizada en un plano.

Cuando se identifica un estereoisómero específico, esto quiere decir que dicho estereoisómero está sustancialmente exento, es decir, asociado con menos de un 50%, preferentemente menos de un 20%, más preferentemente menos de un 10%, aún más preferentemente menos de un 5%, en particular menos de un 2% y de la manera más preferida menos de un 1% de los otros estereoisómeros. Por lo tanto, cuando se especifica que un compuesto de fórmula (I) es, por ejemplo, (R), esto quiere decir que el compuesto está sustancialmente exento del isómero (S); cuando se especifica que un compuesto de fórmula (I) es, por ejemplo, E, esto quiere decir que el compuesto está sustancialmente exento del isómero Z; cuando se especifica que un compuesto de fórmula (I) es, por ejemplo, como cis, esto quiere decir que el compuesto está sustancialmente exento del isómero trans.

Algunos de los compuestos de acuerdo con la fórmula (I) también pueden existir en su forma tautomérica. Se pretende que tales formas, en la medida en que puedan existir, aunque no se indique explícitamente en la fórmula (I) anterior, se incluyan dentro del alcance de la presente invención.

Se entiende que un único compuesto puede existir tanto en forma estereoisomérica como tautomérica.

Con el fin de evitar dudas, los compuestos de fórmula (I) pueden contener los átomos indicados en cualquiera de sus formas isotópicas naturales o no naturales. A este respecto, las realizaciones de la invención que se pueden mencionar incluyen aquellas en las que (a) el compuesto de fórmula (I) no está enriquecido ni marcado isotópicamente con respecto a ningún átomo del compuesto; y (b) el compuesto de fórmula (I) está enriquecido o marcado isotópicamente con respecto a uno o más átomos del compuesto. Los compuestos de fórmula (I) que están enriquecidos o marcados isotópicamente (con respecto a uno o más átomos del compuesto) con uno o más isótopos estables incluyen, por ejemplo, compuestos de fórmula (I) que están enriquecidos o marcados isotópicamente con uno o más átomos tales como deuterio, 13C, 14C, 14N, 15O o similares.

Se pretende que las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables tal como se han mencionado anteriormente en la presente comprendan las formas de sales de adición de ácido atóxicas y terapéuticamente activas que pueden formar los compuestos de fórmula (I). Estas sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables se pueden obtener de manera conveniente tratando la forma de base con un ácido adecuado de este tipo. Los ácidos adecuados comprenden, por ejemplo, ácidos inorgánicos tales como ácidos halhídricos, por ejemplo, ácido clorhídrico o bromhídrico, sulfúrico, nítrico, fosfórico y los ácidos similares; o ácidos orgánicos tales como, por ejemplo, ácido acético, propanoico, hidroxiacético, láctico, pirúvico, oxálico (es decir, etanodioico), malónico, succínico (es decir, ácido butanodioico), maleico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, metanosulfónico, etanosulfónico, bencenosulfónico, p-toluenosulfónico, ciclámico, salicílico, p-aminosalicílico, pamoico y los ácidos similares.

En cambio, dichas formas de sales se pueden convertir en la forma de base libre mediante tratamiento con una base adecuada.

Los compuestos de fórmula (I) pueden existir tanto en formas solvatadas como no solvatadas. En la presente, el término “solvato” se utiliza para describir una asociación molecular que comprende un compuesto de la invención y una o más moléculas de disolvente farmacéuticamente aceptable, por ejemplo, el agua o etanol. El término "hidrato” se utiliza cuando dicho disolvente es el agua.

Los compuestos interesantes de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde se aplican una o más de las siguientes restricciones:

a) R1 es hidrógeno; o

b) R1 es alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1; o

c) R1 es heterociclilo1; o

d) R2 es hidrógeno; o

e) R2 es alquilo C1-4, o

f) R3 es cicloalquilo C3-6; o

g) R3 es alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino; o

h) R3 es heterociclilo2; o

i) R4 es hidrógeno; o

j) Heterociclilo1 es piperazinilo sustituido de manera opcional con uno sustituyente seleccionado entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo; o

k) Heterociclilo1 es morfolinilo sustituido de manera opcional con uno sustituyente seleccionado entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo; o

l) Het es quinazolinilo sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado independientemente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1-4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, amino, mono- o di(alquil C1-4)amino, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1-4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HO-NH-(C=NH)-; oxazolilo o triazolilo, cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4.

En una primera realización la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I), incluida cualquiera de sus formas estereoquímicamente isoméricas, donde

R1 es hidrógeno, alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1;

R2 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R3 es cicloalquilo C3-6 o heterociclilo2;

R4 es hidrógeno;

Heterociclilo1 es piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo1 está sustituido de manera opcional con un sustituyente seleccionado entre (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo;

Heterociclilo2 es azetidinilo o pirrolidinilo; donde cada heterociclilo2 está sustituido de manera opcional con un sustituyente seleccionado entre hidroxi o amino;

Het se selecciona entre quinazolinilo, pirido[2,3-d]pirimidinilo, tiazolo[5,4-d]pirimidinilo, 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidinilo, oxazolo[5,4-d]pirimidinilo o tieno[2,3-d]pirimidinilo; donde cada Het está sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1-4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1-4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HO-NH-(C=NH)-; oxazolilo o triazolilo cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4;

o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

Un primer grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es heterociclilo1, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

Un segundo grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es hidrógeno, R2 es alquilo C1-4 y R3 es heterociclilo2.

Un tercer grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

Un cuarto grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es alquilo C1-4, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

Un quinto grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es alquilo C1-4.

Un sexto grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es cicloalquilo C3-6.

Un séptimo grupo de compuestos de fórmula (I) son aquellos compuestos de fórmula (I) donde Het es quinazolinilo. Los compuestos de fórmula (I), o sus sales farmacéuticamente aceptables, se pueden preparar de acuerdo con los esquemas de reacción que se describen en la presente a continuación, utilizando métodos sintéticos conocidos en el campo de la química orgánica o modificaciones y derivatizaciones con las cuales estarán familiarizados los expertos en la técnica. Los materiales de partida utilizados en la presente se pueden adquirir de proveedores comerciales o se pueden preparar mediante métodos habituales conocidos en la técnica tales como los métodos descritos en libros de referencia estándar. Los métodos preferidos incluyen, sin carácter limitante, los que se describen a continuación.

Durante cualquiera de las siguientes secuencias sintéticas, puede ser necesario y/o deseable proteger grupos reactivos o sensibles en cualquiera de las moléculas implicadas. Esto se puede lograr por medio de grupos protectores tradicionales muy conocidos por el experto.

A menos que se indique lo contrario, los sustituyentes en los esquemas se definen como anteriormente. El aislamiento y la purificación de los productos se consiguen mediante procedimientos estándar, los cuales son conocidos por los químicos expertos.

Los esquemas generales 1-3 describen los métodos que se utilizaron para preparar los compuestos de la invención. Los métodos generales descritos en esos esquemas también se pueden utilizar para preparar compuestos adicionales de la invención.

El material de partida I es una piperidina protegida (PG) que porta un grupo carboxilo en el átomo de carbono adyacente al nitrógeno anular que tiene preferentemente la estereoquímica (S). Esta piperidina también puede estar sustituida con diferentes grupos. Los grupos protectores del nitrógeno anular de la piperidina son preferentemente BOC o CBZ y se pueden introducir o eliminar durante la síntesis utilizando los métodos descritos en: Green y Wutts, Protecting groups in Organic Synthesis, 3.a Edición. En el esquema 1, el grupo de ácido carboxílico del aminoheterociclo cíclico N-protegido I se activa en primer lugar con un grupo saliente Los grupos salientes típicos son ésteres de alquilo (por ejemplo, éster de metilo o etilo) y estos se generan mediante el tratamiento del ácido carboxílico con el alcohol adecuado en condiciones ácidas no acuosas o poco acuosas o mediante el tratamiento con yoduro de metilo en presencia de una base como carbonato de cesio o una similar. Como alternativa, el ácido se puede activar en forma de la amida de Weinreb utilizando procedimientos estándar de acoplamiento de péptidos, por ejemplo, EDCI/HOBT, HATU, DCC, etc. Una vez que el ácido está activado en forma de éster o amida de Weinreb II, se realiza la adición de un anión de acetonitrilo. El anión generado a partir del acetonitrilo y una base fuerte, por ejemplo, hexametildisilazida de litio o sodio (LiHMDS) o bases de alquillitio, por ejemplo, nBuLi, cuando se hace reaccionar con el éster o la amida de Weinreb genera la cianocetona III. La reacción de la cianocetona con una sal de acetato de hidrazina genera a continuación el aminopirazol intermedio IV. Este es un intermedio clave en la formación de los heterociclos bicíclicos VI con diferentes cadenas laterales mediante diferentes reacciones de condensación. La condensación del aminopirazol IV con el malonato V genera el análogo bicíclico VI. El tratamiento de VI con POCl3 puro a una temperatura elevada (en algunos casos las bases orgánicas como la diisopropiletilamina o trietilamina pueden mejorar la reacción) proporcionó a continuación el dicloruro VII. Normalmente, en las condiciones con POCh se produce la eliminación de los grupos protectores lábiles en condiciones ácidas, por ejemplo, BOC, pero si esta es parcial, se puede emplear un tratamiento adicional con ácido, por ejemplo, HCl 4 N en dioxano, para eliminar el material protegido con BOC restante. Si se utilizan otros grupos protectores, entonces se pueden utilizar los procedimientos descritos en Green y Wutts, Protecting groups in Organic Synthesis 3.a Edición para eliminar el grupo protector. El desplazamiento del cloruro adyacente al nitrógeno cabeza de puente en VII se puede llevar a cabo con nucleófilos VIII, normalmente a la temperatura ambiente para obtener IX. Un nucleófilo VIII típico sería una amina que se puede hacer reaccionar en ausencia o presencia de una base tal como la trietilamina. El segundo y menos reactivo cloruro se desplaza normalmente a continuación a una temperatura elevada superior a 50 °C. El resultado de estos desplazamientos nucleófilos con amina son los compuestos de estructura XI (esquema 1).

Esquema 1

Los compuestos XIII se pueden sintetizar de acuerdo con las realizaciones divulgadas en la presente a partir de un compuesto que tiene un grupo amino XI y un compuesto de tipo haluro heterocíclico XII. Esta reacción se puede llevar a cabo en presencia de una base y un catalizador con un metal de transición de los Grupos 8-10. Un ejemplo de una reacción entre un compuesto de tipo haluro heterocíclico y una amina para generar un compuesto de tipo amina W-heterocíclica se puede representar en el esquema 2. Resumiendo, se hace reaccionar un haluro heterocíclico XII con un compuesto de tipo amina XI en presencia de una base y un complejo con un metal (M) de transición de los Grupos 8-10 que incluye un ligando quelante (LL) para formar un compuesto de tipo W-arilamina. El catalizador con el metal de transición de acuerdo con las realizaciones divulgadas en la presente es un Het— X complejo con un metal de transición de los Grupos 8-10. En ciertas realizaciones, el metal de transición de los Grupos 8-10 comprende al menos uno de: paladio, platino y níquel. En algunas realizaciones, el metal de transición de los Grupos 8-10 es paladio.

El compuesto heterocíclico utilizado en el proceso de la presente invención puede ser un compuesto heterocíclico de fórmula XII:

fórmula XII

Grupos heterocíclicos preferidos en el compuesto de fórmula XII:

En la fórmula XII, X puede ser cualquier átomo de tipo haluro (F, Cl, Br, I) o cualquier grupo saliente que contiene azufre (por ejemplo, triflato, sulfonato, tosilato y similares) del que exista constancia en la técnica. Se prefieren especialmente los cloruros en el proceso de la presente invención.

Esquema 2

Una condensación alternativa del aminopirazol IV utilizando los beta-cetoésteres (por ejemplo, 2-metilacetoacetato) en presencia de ácido (ácido acético) a una temperatura elevada da lugar al esqueleto de pirazo-pirimidiona XV. El tratamiento de XV con POCh puro a una temperatura elevada (en algunos casos las bases impedidas como la diisopropiletilamina pueden mejorar la reacción) proporcionó a continuación el dicloruro XVI. Normalmente, en las condiciones con POCh se produce la eliminación de los grupos protectores lábiles en condiciones ácidas, por ejemplo, BOC, pero si esta es parcial, se puede emplear un tratamiento adicional con ácido, por ejemplo, HCl 4 N en dioxano, para eliminar el material protegido con ^bO^c restante. Si se utilizan otros grupos protectores, entonces se pueden utilizar los procedimientos descritos en Green y Wutts, Protecting groups in Organic Synthesis 3.a Edición para eliminar el grupo protector. El desplazamiento del cloruro adyacente al nitrógeno cabeza de puente en XVI se puede llevar a cabo con los nucleófilos VIII, normalmente a la temperatura ambiente para obtener compuestos de tipo XVII. Un nucleófilo típico sería una amina que se puede hacer reaccionar en ausencia o presencia de una base tal como trietilamina y que permite después alquilar la amina libre XVII mediante varios heterociclos tal como se describe en el esquema 2 para producir los compuestos finales XVIII del esquema 3.

Esquema 3

Una ciclación alternativa adicional del aminopirazol IV conlleva el tratamiento con un acrilato, por ejemplo, XIX en presencia de base, por ejemplo, carbonato de cesio, y calentar para generar XX. El tratamiento adicional de XX para activar ese OH como un grupo saliente puede incluir la conversión en un cloruro XXI utilizando POCl3 y calor. Los grupos protectores ácidos, por ejemplo, BOC, se pueden eliminar en las condiciones con POCl3 o si no, siguiendo los procedimientos descritos en Green y Wurtts, Protecting groups in Organic Synthesis 3.a Edición, se pueden eliminar cualesquiera grupos protectores. El cloruro se puede desplazar con nucleófilos X para generar los compuestos XXII. Finalmente, el compuesto XXII con la NH libre se alquila a continuación tal como se ha descrito previamente en el esquema 2 para obtener los compuestos de tipo XXIII (esquema 4).

Esquema 4

Los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar además interconvirtiendo los compuestos de fórmula (I) entre sí según reacciones de transformación de grupo conocidas en la técnica.

Los materiales de partida y algunos de los intermedios son compuestos conocidos y están comercializados o se pueden preparar de acuerdo con procedimientos de reacción tradicionales conocidos de manera general en la técnica.

Los compuestos de fórmula (I) tal como se preparan en los procedimientos descritos anteriormente en la presente se pueden sintetizar en forma de mezclas racémicas de enantiómeros que pueden separarse unos de otros mediante procedimientos de resolución conocidos en la técnica. Los compuestos de fórmula (I) que se obtienen en forma racémica se pueden convertir en las formas de sales diastereoméricas correspondientes mediante la reacción con un ácido quiral adecuado. Dichas formas de sales diastereoméricas se separan posteriormente, por ejemplo, mediante cristalización fraccionada o selectiva y los enantiómeros se liberan a partir de las ellas mediante álcali. Una manera alternativa de separar las formas enantioméricas de los compuestos de fórmula (I) conlleva la cromatografía líquida utilizando una fase estacionaria quiral. Dichas formas estereoquímicamente isoméricas puras también se pueden obtener a partir de las formas estereoquímicamente isoméricas puras correspondientes de los materiales de partida adecuados, siempre que la reacción se produzca de manera estereoespecífica. Preferentemente, si se desea un estereoisómero específico, dicho compuesto se sintetizará mediante métodos de preparación estereoespecíficos. Estos métodos emplearán convenientemente materiales de partida enantioméricamente puros.

Los compuestos de fórmula (I) muestran propiedades antivirales. Las infecciones virales que pueden tratarse utilizando los compuestos y métodos de la presente invención incluyen aquellas infecciones provocadas por orto- y paramixovirus y, en particular, por el virus sincicial respiratorio (VSR) humano y bovino. Además, varios compuestos de esta invención son activos contra cepas mutadas de VSR. Además, muchos de los compuestos de esta invención presentan un perfil farmacocinético favorable y tienen propiedades atractivas en cuanto a la biodisponibilidad, incluida una semivida, ABC y valores máximos aceptables, y no presentan fenómenos desfavorables tales como una retención en el tejido y una velocidad de inicio insuficientes.

La actividad antiviral in vitro contra VSR de los compuestos de la presente se estudió tal como se describe en la parte experimental de la descripción y también puede demostrarse en un ensayo de reducción del rendimiento vírico. La actividad antiviral in vivo contra VSR de los compuestos de la presente puede demostrarse en un modelo de prueba utilizando ratas algodoneras tal como se describe en Wyde et al. en Antiviral Research, 38, págs. 31 - 42 (1998).

Adicionalmente, en la presente invención se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula (I).

Para preparar las composiciones farmacéuticas de esta invención, se combina una cantidad eficaz del compuesto particular, en forma de sal de adición de ácido o base, como principio activo en mezcla íntima con al menos un portador farmacéuticamente aceptable, donde el portador puede adoptar una amplia variedad de formas dependiendo de la forma de preparación deseada para la administración. Se desea que estas composiciones farmacéuticas estén en una forma farmacéutica unitaria adecuada, preferentemente, para la administración oral, administración rectal, administración percutánea o inyección parenteral.

Por ejemplo, al preparar las composiciones en una forma farmacéutica oral, se puede emplear cualquiera de los portadores farmacéuticos líquidos habituales tales como, por ejemplo, agua, glicoles, aceites, alcoholes y similares en el caso de preparados líquidos orales tales como suspensiones, jarabes, elixires y disoluciones; o portadores farmacéuticos sólidos tales como almidones, azúcares, caolín, lubricantes, aglutinantes, agentes disgregantes y similares en el caso de polvos, pastillas, cápsulas y comprimidos. Debido a su facilidad de administración, los comprimidos y las cápsulas representan la forma farmacéutica unitaria oral más conveniente, en cuyo caso se emplean obviamente portadores farmacéuticos sólidos. Para las composiciones de inyección parenteral, el portador farmacéutico comprenderá principalmente agua estéril, aunque se pueden incluir otros componentes para mejorar la solubilidad del principio activo. Las disoluciones inyectables se pueden preparar, por ejemplo, utilizando un portador farmacéutico que comprende una solución salina, una solución de glucosa o una mezcla de ambas. También se pueden preparar suspensiones inyectables utilizando portadores líquidos, agentes de suspensión y similares apropiados. En las composiciones adecuadas para la administración percutánea, el portador farmacéutico puede comprender de manera opcional un agente potenciador de la penetración y/o un agente humectante adecuado, de manera opcional combinados con proporciones minoritarias de aditivos adecuados que no provoquen un efecto perjudicial significativo en la piel. Dichos aditivos se pueden seleccionar con el fin de facilitar la administración del principio activo a la piel y/o ser útiles para preparar las composiciones deseadas. Estas composiciones tópicas se pueden administrar de varias formas, por ejemplo, como un parche transdérmico, una unción dorsal puntual o una pomada. Las sales de adición de los compuestos de fórmula (I), debido a su mayor solubilidad en agua en comparación con la forma de base correspondiente, son obviamente más adecuadas para preparar las composiciones acuosas.

Es especialmente conveniente formular las composiciones farmacéuticas de la invención en una forma farmacéutica unitaria debido a la uniformidad de la dosificación y a su facilidad de administración. La expresión "forma farmacéutica unitaria", tal como se utiliza en la presente, se refiere a unidades físicamente diferenciadas adecuadas como dosificaciones unitarias, conteniendo cada unidad una cantidad predeterminada del principio activo, calculada para producir el efecto terapéutico deseado, asociada con el portador farmacéutico requerido. Son ejemplos de tales formas farmacéuticas unitarias los comprimidos (incluidos los comprimidos recubiertos o ranurados), cápsulas, pastillas, sobres de polvos, obleas, soluciones o suspensiones inyectables, cucharaditas, cucharadas y similares y múltiplos segregados de estos.

Para la administración oral, las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden presentarse en forma de formas de dosis sólidas, por ejemplo, comprimidos (tanto formas deglutibles como masticables), cápsulas o cápsulas de gelatina, preparadas por medios tradicionales con excipientes y portadores farmacéuticamente aceptables tales como agentes aglutinantes (por ejemplo, almidón de maíz pregelatinizado, polivinilpirrolidona, hidroxipropilmetilcelulosa y similares), materiales de relleno (por ejemplo, lactosa, celulosa microcristalina, fosfato de calcio y similares), lubricantes (por ejemplo, estearato de magnesio, talco, sílice y similares), agentes disgregantes (por ejemplo, almidón de papa, glicolato sódico de almidón y similares), agentes humectantes (por ejemplo, laurilsulfato de sodio) y similares. Tales comprimidos también se pueden recubrir mediante métodos muy conocidos en la técnica.

Los preparados líquidos para la administración oral pueden presentarse en forma de, por ejemplo, soluciones, jarabes o suspensiones, o se pueden formular como un producto seco para su mezcla con agua y/u otro portador líquido adecuado antes de su uso. Tales preparados líquidos se pueden preparar utilizando métodos tradicionales, de manera opcional con otros aditivos farmacéuticamente aceptables tales como agentes de suspensión (por ejemplo, jarabe de sorbitol, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o grasas comestibles hidrogenadas), agentes emulsionantes (por ejemplo, lecitina o goma arábiga), portadores no acuosos (por ejemplo, aceite de almendras, ésteres oleosos o alcohol etílico), edulcorantes, saborizantes, agentes enmascarantes y conservantes (por ejemplo, p-hidroxibenzoatos de metilo o propilo, o ácido sórbico).

Los edulcorantes farmacéuticamente aceptables útiles en las composiciones farmacéuticas de la invención comprenden preferentemente al menos un edulcorante intenso tal como aspartamo, acesulfamo de potasio, ciclamato de sodio, alitamo, un edulcorante de dihidrochalcona, monelina, esteviósido, sucralosa (4,1',6'-tricloro-4,1',6'-tridesoxigalactosacarosa) o, preferentemente, sacarina, sacarina sódica o cálcica, y opcionalmente al menos un edulcorante espesante tal como sorbitol, manitol, fructosa, sacarosa, maltosa, isomalt, glucosa, jarabe de glucosa hidrogenada, xilitol, caramelo o miel. Convenientemente, los edulcorantes intensos se utilizan en concentraciones bajas. Por ejemplo, en el caso de la sacarina sódica, dicha concentración puede estar comprendida entre aproximadamente un 0.04% y un 0.1% (peso/volumen) de la formulación final. El edulcorante espesante se puede utilizar de forma eficaz en concentraciones más altas comprendidas entre aproximadamente un 10% y aproximadamente un 35%, preferentemente entre aproximadamente un 10% y un 15% (peso/volumen).

Los saborizantes farmacéuticamente aceptables que pueden enmascarar los ingredientes con sabor amargo en las formulaciones de dosis baja son preferentemente saborizantes con sabor a fruta tales como sabor a cereza, frambuesa, grosella negra o fresa. Una combinación de dos saborizantes puede proporcionar resultados muy buenos. En las formulaciones de dosis alta pueden necesitarse saborizantes farmacéuticamente aceptables más potentes tales como caramelo, chocolate, menta fresca, fantasía y similares. Cada saborizante puede estar presente en la composición final con una concentración comprendida entre aproximadamente un 0.05% y un 1% (peso/volumen). De manera conveniente, se utilizan combinaciones de dichos saborizantes potentes. Preferentemente, se utiliza un saborizante que no experimenta ningún cambio ni pérdida de sabor y/o color en las condiciones de la formulación.

Los compuestos de fórmula (I) se pueden formular para la administración parenteral mediante inyección, de manera conveniente inyección intravenosa, intramuscular o subcutánea, por ejemplo, mediante inyección intravenosa rápida o infusión intravenosa continua. Las formulaciones para inyección se pueden presentar en una forma farmacéutica unitaria, por ejemplo, en ampollas o recipientes multidosis, que incluyen un conservante añadido. Pueden adoptar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes isotonizantes, de suspensión, estabilizantes y/o dispersantes. Como alternativa, el principio activo puede estar presente en forma de polvo que ha de ser mezclado con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril exenta de pirógenos, antes de su uso.

Los compuestos de fórmula (I) también se pueden formular en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases de supositorios tradicionales tales como manteca de cacao y/u otros glicéridos.

En general se contempla que una cantidad diaria eficaz como antiviral será de 0.01 mg/kg a 500 mg/kg de peso corporal, más preferentemente de 0.1 mg/kg a 50 mg/kg de peso corporal. Puede resultar apropiado administrar la dosis requerida como dos, tres, cuatro o más subdosis en intervalos adecuados a lo largo del día. Dichas subdosis se pueden formular como formas farmacéuticas unitarias, por ejemplo, que contengan de 1 a 1000 mg y, en particular, de 5 a 200 mg de principio activo por forma farmacéutica unitaria.

La dosificación exacta y la frecuencia de administración dependen del compuesto de fórmula (I) particular utilizado, la afección particular que se está tratando, la gravedad de la afección que se está tratando, la edad, el peso, el sexo, el alcance del trastorno y el estado físico general del paciente particular así como también de otra medicación que pueda estar tomando el individuo, como bien conocen los expertos en la técnica. Además, es evidente que dicha cantidad diaria eficaz se puede reducir o aumentar dependiendo de la respuesta del sujeto tratado y/o dependiendo de la evaluación del médico que prescriba los compuestos de la presente invención. Por consiguiente, los intervalos de la cantidad diaria eficaz mencionados anteriormente en la presente son solamente orientativos.

También se puede utilizar como medicamento otro agente antiviral combinado con un compuesto de fórmula (I). Por tanto, la presente invención también se refiere a un producto que contiene (a) un compuesto de fórmula (I), y (b) otro compuesto antiviral, como un preparado combinado para uso simultáneo, por separado o secuencial en el tratamiento antiviral. Los diferentes fármacos se pueden combinar en un preparado individual junto con portadores farmacéuticamente aceptables. Por ejemplo, los compuestos de la presente invención se pueden combinar con interferón beta o factor alfa de necrosis tumoral con el fin de tratar o prevenir infecciones por VSR.

A continuación en la presente se ilustrará la invención con referencia a los siguientes ejemplos no limitantes.

Parte experimental

Abreviaturas

(M+H)+ ion molecular protonado

ac. acuoso

Boc ferc-butiloxicarbonilo

a ancho

CH3CI cloroformo

CH3CN acetonitrilo

CH3OH metanol

CH3ONa metanolato de sodio

d doblete

DCM diclorometano

DIEA W,W-diisopropiletilamina

DIPE éter diisopropílico

DMF dimetilformamida

DMSO Sulfóxido de dimetilo

Et etilo

eq. equivalente

EtOAc acetato de etilo

HOAc ácido acético

LiHMDS Bis(trimetilsilil)amida de litio

m/z: relación de la masa con respecto a la carga Me metilo

MeCN acetonitrilo

MeOH metanol

EtOH etanol

MHz megahercio

min minuto(s)

N2 nitrógeno

Na2SO4 sulfato de sodio

RMN resonancia magnética nuclear (espectroscopía) Pd(OAc)2 acetato de paladio (II)

Ph fenilo

c cuartete

TA temperatura ambiente

s singlete

sat saturado

t triplete

TEA trietilamina

TFA ácido trifluoroacético

THF tetrahidrofurano

RMN

Para varios compuestos, se registraron los espectros de 1H RMN en un espectrómetro DPX-400 de Bruker que funcionaba a 400 MHz o un DPX-360 de Bruker que funcionaba a 360 MHz utilizando como disolvente cloroformo-cf (cloroformo de o deuterado, CDCl3) o DMSO-cfe (DMSO deuterado, sulfóxido de dimetilo-d6) Los desplazamientos químicos (5) se indican como partes por millón (ppm) respecto al tetrametilsilano (TMS) que se utilizó como patrón interno.

Rotación óptica:

La rotación óptica se midió utilizando un polarímetro 341 de Perkin Elmer. [a]D20 indica la rotación óptica medida con luz en la longitud de onda de la línea D del sodio (589 nm) a una temperatura de 20 °C. La longitud del paso de la celda es de 1 dm. Después del propio valor, se menciona la concentración y el disolvente de la solución que se empleó para medir la rotación óptica.

Parte experimental

A. Síntesis química de los intermedios y compuestos de fórmula (I)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(6-cloroquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P1

Esquema 5

Etapa 1: Síntesis de (S)-piperidino-1,2-dicarboxilato de 1-tert-butilo y 2-metilo 2

Se añadió carbonato de potasio (108.50 g, 785.09 mmol) a una solución de ácido (S)-1-(tertbutoxicarbonil)piperidino-2-carboxílico 1 (90 g, 392.55 mmol) en DMF (900 mL). Se añadió yodometano (83.58 g, 588.82 mmol) a la mezcla. La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. Se añadió acetato de etilo a la mezcla de reacción. La mezcla resultante se lavó con agua y salmuera. La fase orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 2 (90 g, rendimiento: 85%).

m/z = 244 (M+H)+.

Etapa 2: síntesis de 2-(2-c¡anoacetil)p¡per¡d¡no-1-carbox¡lato de tert-butilo 3

A una solución de CH3CN (1.30 mL, 24.66 mmol) en THF seco (40 mL) se añadió gota a gota LiHMDS (22.61 mL, 22.61 mmol) a -78 oC. La solución se agitó durante 20 min a -78 oC. Se añadió una solución de 2 (5 g, 22.55 mmol) en THF seco (10 mL) gota a gota a la mezcla. Se agitó la mezcla resultante durante 2 h. A continuación, la mezcla se enfrió hasta -78 °C y se añadió gota a gota una solución de HOAc (5 mL, 76.67 mmol) en THF (50 mL) a la mezcla. La solución se calentó hasta la temperatura ambiente. El disolvente se eliminó al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo, se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 3 crudo (4 g, rendimiento: 69%).

m/z = 253 (M+H)+.

Etapa 3: 2-(5-amino-1H-pirazol-3-il)piperidino-1-carboxilato de tert-butilo 4

Se añadieron hidrazina hidratada (100 mL) y etanol (500 mL) al intermedio 3 (80 g, 317.70 mmol). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. El disolvente se eliminó al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con salmuera. La fase orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 4 (80 g, rendimiento: 76%).

m/z = 267 (M+H)+.

Etapa 4: síntesis de 2-(7-hidroxi-5-oxo-4,5-dihidropirazolor1,5-a1pirimidin-2-il)piperidino-1-carboxilato de tert-butilo 5 El intermedio 4 (70 g, 262.82 mmol) se disolvió en metanol (700 mL), a continuación se añadió malonato de dimetilo (85.19 g, 394.23 mmol) a la solución y después se añadió una solución de CHaONa en CH3OH (al 25%, 85.19 g, 394.23 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante toda la noche. El disolvente se eliminó al vacío. Se añadió agua al residuo, el pH se ajustó a 6-7 añadiendo ácido acético, la mezcla se extrajo con acetato de etilo, la fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 5 (85 g, rendimiento: 63%) el cual se utilizó directamente en la siguiente reacción.

m/z = 335 (M+H)+.

Etapa 5: síntesis de 5,7-dicloro-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidina 6

Se añadió el intermedio 5 (25 g, 74.77 mmol) a POCl3 puro (100 mL). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 3 h. El disolvente se evaporó para proporcionar el intermedio 6 (15 g, rendimiento: 63%) el cual se utilizó directamente en la siguiente reacción.

m/z = 272 (M+H)+.

Etapa 6: síntesis de 4-(5-cloro-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina 7

Se añadió el intermedio 6 (35 g, 129.08 mmol) a CH3CN (100 mL) y H2O (100 mL). A la mezcla anterior se añadieron NaHCO3 (21.69 g, 258.16 mmol) y morfolina (11.25 g, 129.08 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 1 h, a continuación se evaporaron los disolventes, se añadió diclorometano, la mezcla se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: diclorometano:acetato de etilo, de 1:0 a 0:1) para generar el intermedio 7 (25 g, rendimiento: 51%).

m/z = 322 (M+H)+.

Etapa 7: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina 8

Se añadieron clorhidrato de azetidina (29.07 g, 310.75 mmol) y TEA (62.89 g, 621.49 mmol) a una solución del intermedio 7 (20 g, 62.15 mmol) en etanol (1000 mL). La mezcla resultante se calentó a 80 °C durante 2 h. Se evaporó el disolvente. El material crudo resultante se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: metanol/acetato de etilo 1/10). Las fracciones recogidas se concentraron al vacío. El residuo se disolvió en CH3CN (200 mL). Se añadió K2CO3 (100 g, 723.54 mmol) a una solución. La mezcla se agitó durante toda la noche a la temperatura ambiente. La mezcla resultante se filtró y se evaporó para eliminar el disolvente al vacío. Se liofilizó el residuo. Se aisló el intermedio 8 (6 g, rendimiento: 27%).

m/z = 343 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 1.52-1.66 (m, 4 H) 1.90 (m, 1 H) 1.97 (m, 1 H) 2.37-2.40 (m, 2 H) 2.79 (m, 1 H) 3.31 (m, 1 H) 3.55-3.58 (m, 4 H) 3.81 (m, 1 H) 3.93-3.95(m, 4 H) 4.09-4.13(m, 4 H) 5.09 (s, 1 H) 6.04 (s, 1 H).

Etapa 8: síntesis de 4.6-dicloroquinazolina 9

Síntesis de 6-cloroquinazol¡n-4-ol 9-b

Se añadió ácido 2-amino-5-clorobenzoico 9-a (5 g, 29 mmol) a la formamida (30 mL). La mezcla de reacción se calentó a 100 °C durante 3 h. El sólido se recogió por filtración. El sólido se lavó varias veces con etanol para generar el intermedio 9-b (5 g, 86%). m/z = 181 (M+^h )+.

Síntesis de 4,6-dicloroquinazolina 9

El intermedio 9-b (3 g, 16.61 mmol) se disolvió en CHCh (30 mL). Se añadieron cloruro de oxalilo (2.8 g, 33.22 mmol) y DMF (0.1 mL). La mezcla se calentó a 100 °C durante 3 h. El disolvente se evaporó para proporcionar el intermedio 9 (2.5 g, rendimiento: 68%).

m/z = 200 (M+H)+.

Etapa 9: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(6-cloroquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolor1,5-alpirimidin-7-il)morfolina P1

La sal con TFA del intermedio 8 (400 mg, 0.87 mmol) se disolvió en metoxietanol (20 mL) y se añadieron el intermedio 9 (235 mg, 1.18 mmol) y diisopropiletilamina (0.6 mL, 3.5 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 24 h. La mezcla se vertió sobre una solución con agua helada y se agitó durante 15 min. El sólido se separó por filtración sucesivamente, se lavó con agua, se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se filtró. La solución resultante se concentró y el sólido se secó en el horno para generar un compuesto sólido amarillento P1 (380 mg, 85%).

m/z = 506 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.66 - 1.86 (m, 5 H), 1.99 -2.12 (m, 1 H), 2.25 - 2.37 (m, 3 H), 3.47 - 3.58 (m, 6 H), 3.63 - 3.75 (m, 5 H), 3.96 - 4.07 (m, 5 H), 4.21 (d, J=13.4 Hz, 1 H), 5.25 (s, 1 H), 5.81 - 5.86 (m, 1 H), 5.89 (s, 1 H), 7.72 (dd, J=9.0, 2.2 Hz, 1 H), 7.78 (d, J=9.0 Hz, 1 H), 8.07 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 8.57 (s, 1 H)

Síntesis de (S)-4-(5-(azet¡dm-1-M)-2-(1-(6-cloroqumazolm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-a]p¡r¡m¡dm-7-il)morfolina P2 y (R)-4-(5-(azet¡dm-1-M)-2-(1-(6-cloroqumazolm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[l,5-a]p¡r¡m¡dm-7-il)morfolina P3

Etapa 1: síntesis de 4-(5-cloro-2-(1-(6-cloroqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-alp¡r¡m¡d¡n-7-¡l)morfol¡na 10 A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 7 (1 g. 3.11 mmol) y el ¡ntermed¡o 9 (0.62 g. 3.11 mmol) en DMF (20 mL) se añad¡ó K2CO3 (2.15 g. 15.54 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó durante toda la noche a la temperatura amb¡ente. Se añad¡ó agua. la mezcla se extrajo con acetato de et¡lo, la fase orgán¡ca se lavó con salmuera. se secó con Na2SO4, se f¡ltró y se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna de gel de síl¡ce (eluyente: éter de petróleo:acetato de et¡lo de 10:1 a 0:1) para generar el ¡ntermed¡o 10 (450 mg. rend¡m¡ento: 27%).

m/z = 485 (M+H)+.

Etapa 2: síntes¡s de (S)-4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(6-cloroqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-alp¡r¡m¡d¡n-7-¡l)morfol¡na P2 y (ffl-4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(6-cloroqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-alp¡r¡m¡d¡n-7-¡l)morfol¡na P3

Se añad¡eron clorh¡drato de azet¡d¡na (0.39 g. 4.13 mmol) y TEA (0.84 g. 8.26 mmol) a una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 10 (0.4 g. 0.83 mmol) en etanol (50 mL). La soluc¡ón se calentó a 80 °C durante 2 h. Se evaporó el d¡solvente. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante SFC. Las fracc¡ones deseadas se recog¡eron y se evaporaron. El res¡duo se l¡of¡l¡zó para generar el compuesto P2 (44.10 mg. rend¡m¡ento: 10%) y el compuesto P3 (43.30 mg. rend¡m¡ento: 10%). m/z = 506 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz. CDCla) 8 ppm 1.79-1.83 (m. 4 H) 2.01-2.06 (m. 1 H) 2.37-2.49 (m. 3 H) 3.45-3.49 (m. 3 H) 3.55­ 3.63 (m. 2 H) 3.80-3.90 (m. 4 H) 4.15 (m. 4 H) 4.25 (m. 1 H) 5.10 (s. 1 H) 5.90 (s. 1 H) 6.10 (s. 1 H) 7.61(dd. J1= 9.2 Hz. J2= 2.4 Hz. 1 H) 7.80(d. J=9.2 Hz. 2 H) 8.03 (d. J=2.0 Hz. 1 H) 8.68 (s. 1 H).

P2: [a]D20 = -280.83° (589 nm. c = 0.24% p/v. DMF. 20 °C)

P3: [a]D20 = 270° (589 nm. c = 0.24% p/v. DMF. 20 °C)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P4

Etapa 1: síntes¡s de 4-(5-cloro-2-(1-(6-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-alp¡r¡m¡d¡n-7-¡l)morfol¡na 11 Síntes¡s de 6-met¡lqu¡nazol¡n-4-ol 12-b

Se añad¡ó ác¡do 2-am¡no-5-met¡lbenzo¡co 12-a (5 g. 33.08 mmol) a la formam¡da (30 mL). La mezcla de reacc¡ón se calentó a 100 °C durante 6 h. El sól¡do se recog¡ó por f¡ltrac¡ón y se lavó var¡as veces con etanol para obtener el ¡ntermed¡o 12-b (4.5 g. 76%).

m/z = 161 (M+H)+.

Síntes¡s de 4-cloro-6-met¡lqu¡nazol¡na 12

El ¡ntermed¡o 12-b (2.1 g. 13.11 mmol) se d¡solv¡ó en CHCh (30 mL). Se añad¡eron cloruro de oxal¡lo (1.97 g.

23.26 mmol) y DMF (0.1 mL). La mezcla se calentó a 100 °C durante 3 h. El d¡solvente se evaporó para obtener el ¡ntermed¡o 12 (1.5 g. 58%).

m/z = 179 (M+H)+.

A una solución del intermedio 7 (0.5 g, 1.55 mmol) y el intermedio 12 (0.28 g, 1.55 mmol) en CH3CN (10 mL) se añadió K2CO3 (1.07 g, 7.77 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 72 h a 50 °C. El disolvente se evaporó y el residuo se disolvió en CH2Cl2. La mezcla resultante se filtró y el filtrado se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo:acetato de etilo de 0:1 a 1 :1 ) para generar el intermedio 11 (350 mg, rendimiento: 44%).

m/z = 464 (M+H)+.

Etapa 2: síntesis de 4-(5-cloro-2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina P4

Se añadieron clorhidrato de azetidina (0.30 g, 3.24 mmol) y TEA (0.66 g, 6.47 mmol) a una solución del intermedio 11 (0.3 g, 0.65 mmol) en etanol (10 mL). La solución se calentó a 80 °C durante 2 h. Se evaporó el disolvente. El residuo se purificó mediante HPLC. La fracción deseada se recogió y se neutralizó hasta pH = 8-9 con una solución de NaHCO3 y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró al vacío. El residuo se liofilizó para generar el P4 (111.00 mg, 35%).

m/z = 485 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1.67-1.79 (m, 4 H) 2.17 (m, 1 H) 2.42 (m, 6 H) 3.43-3.45 (m, 3 H) 3.60-3.61 (m, 2 H) 3.81 (m, 4 H) 4.11 (m, 4 H) 4.23 (m, 1 H) 5.09 (s, 1 H) 5.89 (s, 1 H) 6.15 (s, 1 H) 7.52(d, J=9.2 Hz,1 H) 7.76-7.78(m, 2 H) 8.66 (s, 1 H).

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-N)-2-(1-(2-cloro-6-metNqumazolm-4-N)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P5

Una mezcla del intermedio 8 (500 mg, 1.460 mmol, 1 eq.), la 2,4-dicloro-6-metilquinazolina comercializada 13 (622 mg, 2.920 mmol, 2 eq.) y Et3N (443 mg, 4.38 mmol, 3 eq.) en etanol (20 mL) se agitó a 80 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado se filtró y se recogió. El sólido se lavó con etanol enfriado (2 x3 mL) para generar el compuesto P5 (540 mg, 69%).

m/z = 520 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm 1.66 - 1.88 (m, 4 H) 1.97 - 2.13 (m, 1 H) 2.32 - 2.54 (m, 6 H) 3.38 - 3.52 (m, 3 H) 3.55 - 3.68 (m, 2 H) 3.86 (m, 4 H) 4.13 (t, J=7.53 Hz, 4 H) 4.34 (d, J=12.80 Hz, 1 H) 5.10 (s, 1 H) 5.96 (s a, 1 H) 6.13 (s, 1 H) 7.51 (dd, J1=8.53, J2=1.51 Hz, 1 H) 7.69 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.74 (s, 1 H).

Síntesis de N-(4-(2-(5-(azetidm-1-N)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-il)piperidm-1-N)-6-metNqumazolm-2-il)metanosulfonamida P6

Se añadió acetato de paladio (8.6 mg, 0.038 mmol, 0.1 eq.) a una mezcla del compuesto P5 (200 mg, 0.385 mmol, 1 eq.), metanosulfonamida (73 mg, 0.77 mmol, 2eq.), Xantphos (22 mg, 0.038 mmol, 0.1 eq.) y Cs2CO3 (250 mg, 0.77 mmol, 2 eq.) en dioxano (6 mL). La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 1.5 h con microondas. El precipitado se filtró y se lavó con acetato de etilo para generar el compuesto del título P6 (98 mg, 42.34%).

m/z = 578 (M+H)+.

1HRMN (400MHz, CDCI3): 5 ppm 1.89 (m, 4H) 1.90 (m, 1H) 2.31 (s, 3 H) 2.40 (m, 2 H) 2.51 (m, 1H) 3.20 (s, 3H) 3.50 (m, 3H) 3.68 (m, 1H) 3.89 (m, 4H) 4.13 (m, 4H) 4.62 (a, 1H) 5.13 (s, 1H) 6.12 (s, 1H) 7.41-7.43 (d, J= 8.4 Hz, 1H) 7.46-7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1H) 7.66 (s, 1H).

(R)-N-(4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)pipendm-1-M)-6-metMqumazolm-2-il)metanosulfonamida P7 y (S)-W-(4-(2-(5-(azetidm-1-N)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-N)piperidm-1-N)-6-metilquinazolin-2-il)metanosulfonamida P8

Se llevó a cabo una purificación mediante SFC prep. (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AS 20 x 250 mm; fase móvil: CO2, EtOH con un 0.2% de iPrNH2) lo que proporcionó ambos enantiómeros relativos:

1HRMN (400MHz, CDCb): 5 ppm 1.89 (m, 4H) 1.90 (m, 1H) 2.31 (s, 3 H) 2.40 (m, 2 H) 2.51 (m, 1H) 3.20 (s, 3H) 3.50 (m, 3H) 3.68 (m, 1H) 3.89 (m, 4H) 4.13 (m, 4H) 4.62 (a, 1H) 5.13 (s, 1H) 6.12 (s, 1H) 7.41-7.43 (d, J= 8.4 Hz, 1H) 7.46-7.49 (d, J = 8.8 Hz, 1H) 7.66 (s, 1H).

Síntesis de N-(4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)pipendm-1-M)-5-metMqumazolm-2-il)metanosulfonamida P9

Etapa 1: síntesis de 5-metilquinazolino-2,4(1H,3H)-diona 14-b

Se calentaron el ácido 2-amino-6-metilbenzoico 14-a (10 g, 66.15 mmol) y la urea (39.73 g, 661.54 mmol) a 160 °C y se agitó durante 6 h, la mezcla de reacción se enfrió hasta 100 °C y se añadieron 40 mL de H2O. La suspensión obtenida se dejó en agitación durante 10 min y se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado se separó por filtración y se disolvió en una solución 0.2 M acuosa de hidróxido de sodio (100 mL). La solución se calentó a 100 °C durante 5 min, lo que provocó que se formara un precipitado blanco. La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche, la solución se neutralizó hasta pH = 7 con HCl concentrado y el sólido blanco se separó por filtración. El sólido obtenido se lavó con agua, se purificó disgregándolo en acetato de etilo caliente (100 mL) y se enfrió hasta la temperatura ambiente. El filtrado se recogió y se secó al vacío para generar el intermedio 14-b (6.4 g, rendimiento: 49%).

m/z = 177 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 2.64 (s, 3 H) 6.93 (d, J=7.48 Hz, 1 H) 7.01 (d, J=8.14 Hz, 1 H) 7.44 (t, J=7.81 Hz, 1 H) 10.99 (s, 1 H) 11.03 (s a, 1 H)

Etapa 2: síntesis de 2,4-dicloro-5-metilquinazolina 14

Una mezcla del intermedio 14-b (1 g, 5.68 mmol), dietilanilina (2.267 mL, 14.19 mmol) en POCl3 (5 mL) se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla se vertió con cuidado sobre hielo triturado. La mezcla se neutralizó hasta pH = 7 con NaHCO3 saturado. La mezcla resultante se extrajo con CH2Cl2 (2 x 15 mL). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4 y se filtraron. El filtrado se concentró al vacío para generar el intermedio 14 (950 g, rendimiento: 68%).

m/z = 214 (M+H)+.

Etapa 3: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(2-cloro-6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina 15

Una mezcla del intermedio 8 (500 mg, 1.46 mmol), el intermedio 14 (933.13 mg, 4.38 mmol) y trietilamina (443.21 mg, 4.38 mmol) en EtOH (20 mL) se agitó a 80 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado se filtró y se recogió. El sólido se lavó con etanol enfriado (2x5 mL) para generar el compuesto 15 deseado (400 mg, 48%).

m/z = 520 (M+H)+.

Etapa 4: síntesis de N-(4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a1pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolin-2-il)metanosulfonamida P9

A una mezcla del compuesto 15 (200 mg, 0.385 mmol), metanosulfonamida (73.24 mg, 0.77 mmol), xantphos (23.15 mg, 0.04 mmol) y Cs2CO3 (250.88 mg, 0.77 mmol) en dioxano (6 mL) se añadió Pd(OAc)2 (9 mg, 0.04 mmol). La mezcla resultante se agitó a 120 °C durante 1.5 h con microondas. La mezcla se filtró. El precipitado se trató con MeOH y se filtró. Los filtrados combinados se concentraron al vacío. El residuo se purificó y el pH de las fracciones que contenían el producto se ajustó a 7~8 con NaHCO3 saturado. El disolvente orgánico se evaporó al vacío. La fase acuosa se extrajo con CH2Cl2 (30 mL). La fase orgánica se concentró al vacío para generar el compuesto P9 (105 mg, rendimiento: 45%).

m/z = 578 (M+H)+.

1H RMN (400 MHz, CDCl3) 5 ppm 1.55-1.85 (m, 4 H) 2.10-2.62 (m, 5 H) 2.69-2.85 (m, 5 H) 3.35 (s, 3 H) 3.59-3.86 (m, 8 H) 4.07-4.17 (m, 4 H) 5.21 (s, 1 H) 5.75 (s, 1 H) 7.17-7.23 (m, 2 H) 7.55-7.58 (m,1 H).

Síntesis de W-(4-(2-(5-(azetidin-1 -M)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)piperidm-1 -M)-5-qumazolm-2-il)metanosulfonamida P10

Etapa 1: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(2-cloroquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina P16

La mezcla del intermedio 8 (250 mg, 0.73 mmol, 1 eq.), 2,4-dicloroquinazolina (290 mg, 1.46 mmol, 2 eq.) y trietilamina (221 mg, 2.19 mmol, 3 eq.) en etanol (20 mL) se agitó a 90 °C durante 4 h. La reacción se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (50% de EtOAc en éter de petróleo) para obtener 16 con una pureza de un 75%. Después de cristalizar en EtOAc y éter de petróleo, se obtuvo el intermedio del título 16 como un sólido blanco (160 mg, 43.42%)

m/z = 506 (M+H)+.

1HRMN (CDCl3400MHz) 5 ppm 1.72-1.84 (m, 4H) 2.03 (m, 1H) 2.38-2.50 (m, 3H) 3.47-3.52 (m, 3H) 3.61-3.68 (m, 2H) 3.84-3.93 (m, 4H) 4.12-4.15 (t, J = 7.4Hz, 4H) 4.41-4.45 (d, J=12.80 Hz, 1H) 5.11(s, 1H) 5.96 (s a, 1H) 6.15 (s, 1H) 7.29-7.33 (m, 1H) 7.66-7.70 (m, 1H) 7.78-7.80 (d, J = 8.5Hz, 1H) 7.98-8.00 (d, J = 8.3Hz, 1H).

Etapa 2: síntesis de N-(4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a1pirimidin-2-il)piperidin-1-il)quinazolin-2-il)metanosulfonamida P10

Una mezcla del intermedio 16 (60 mg, 119 ^mol, 1 eq.), metanosulfonamida (34 mg, 357 ^mol, 3 eq.), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (14 mg, 0.2 eq.), acetato de paladio (II) (5.3 mg, 0.2 eq.) y carbonato de cesio (116 mg, 357 ^mol, 3 eq.) en 1,4-dioxano (5 mL) se agitó a 110 °C durante 18 h en N2. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x 20 mL). Las fases orgánicas combinadas se concentraron. El residuo se purificó mediante HPLC y las fracciones se liofilizaron. El sólido se trató con SAX-SPE para obtener el compuesto P10 como un sólido amarillo (24 mg, 34%).

m/z = 564 (M+H)+.

1HRMN (400MHz, CD3OD,): 8 ppm 1.89 (a, 4H) 2.22 (m, 1H) 2.58 (m, 3H) 3.08 (s, 3H) 3.59 (a, 1H) 3.89 (d, 4H) 3.91 (m, 4H) 4.38 (t, J =7.5 Hz, 4H) 4.62 (a, 1H) 5.27 (s, 1H) 6.29 (s, 1H) 6.33 (a, 1H) 7.39 (t, J = 7.3 Hz, 1H) 7.49 (d, J= 8.5 Hz, 1H) 7.79 (t, J = 7.3 Hz, 1H) 8.01 (d, J = 8 Hz, 1H).

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidm-1-M)-6-metMpirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)piperidm-1-M)-6-metMqumazolma P11

Etapa 1: síntesis de 2-(6-metil-5-oxo-4,5-dihidropirazolor1,5-a1pirimidin-2-il)piperidino-1-carboxilato de terf-butilo 18 El intermedio 4 (5.00 g, 18.08 mmol) se disolvió en DMF seca (112 mL), a continuación se añadieron Cs2CO3 (9.00 g, 27.62 mmol) y (£)-3-etoxi-2-metilacrilato de etilo 17 (4.30 g, 27.18 mmol) y la mezcla se calentó a 130 °C durante 3 días. Se evaporó la DMF y el aceite marrón oscuro se vertió sobre agua helada. Después de calentar hasta la temperatura ambiente, el producto se extrajo con EtOAc (3 veces). Las fases orgánicas se secaron con Na2SO4, se filtraron y se evaporaron y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH y diclorometano. Después de evaporar las fracciones de interés, los autores obtuvieron el intermedio 18 como un sólido amarillo (1100 mg, 18%).1

1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 1.35 -1.71 (m, 13 H) 1.73 - 1.88 (m, 1 H) 2.09 (d, J=1.10 Hz, 3 H) 2.32 (d, J=13.64 Hz, 1 H) 2.70 - 2.92 (m, 1 H) 3.93 - 4.13 (m, 1 H) 5.35 - 5.54 (m, 1 H) 5.71 (s, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 10.56 - 10.76 (m, 1 H) m/z = 333.20 (M+H)+

Etapa 2: síntesis de 5-cloro-6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidina 19

Se añadió POCl3 (6.15 mL, 66.19 mmol) al intermedio 18 (1100 mg, 3.31 mmol) a la temperatura ambiente y a continuación, la mezcla se calentó a 100 °C durante 1.5 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se evaporó el POCl3. El residuo se coevaporó 3 veces con tolueno para obtener el intermedio 19 como una espuma marrón que se utilizó como tal en la siguiente etapa.

m/z = 250.96 (M+H)+

Etapa 3: síntesis de 4-(6-metil-2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-5-il)morfolina 20 Se disolvieron en el intermedio 19 (150 mg, 0.30 mmol) crudo y 4-cloro-6-metilquinazolina 12 (107 mg, 0.60 mmol) en 2-metoxietanol (3.79 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (619 pL, 3.59 mmol). La solución se calentó a 100 °C durante toda la noche. Se detuvo el calentamiento y la mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente. A la mezcla de reacción se añadió morfolina (1.035 mL, 11.97 mmol) y la mezcla se calentó hasta 70 °C durante 3 h. A continuación, se evaporó a sequedad. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un 2.5% (MeOH/NH3) y diclorometano. El aceite obtenido se recristalizó en éter diisopropílico. Los cristales blanquecinos formados se filtraron para obtener el intermedio 20 (52 mg, 38%).

m/z = 444.25 (M+H)+

PF = 180.64°C

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 1.57 - 1.80 (m, 4 H) 1.92 -2.08 (m, 1 H) 2.24 (s, 3 H) 2.34 -2.46 (m, 4 H) 3.20 -3.28 (m, 4 H) 3.45 (t a, J=11.20, 11.20 Hz, 1 H) 3.67 - 3.83 (m, 4 H) 4.21 (d a, J=13.90 Hz, 1 H) 5.85 (s a, 1 H) 6.20 (s, 1 H) 7.64 (d a, J=8.40 Hz, 1 H) 7.71 (d, J=8.58 Hz, 1 H) 7.83 (s a, 1 H) 8.56 (s, 1 H) 8.71 (s, 1 H)

Etapa 4: síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-6-metilpirazolo[1,5-a1pirimidin-2-N)piperidin-1-iD-6-metilquinazolina P11 Se calentó una solución del intermedio 20 (145 mg, 0.37 mmol), clorhidrato de azetidina (69 mg, 0.74 mmol) y éter diisopropiletílico (191 ^L, 1.11 mmol) en EtOH (10 mL) a 65 °C durante 3.5 h. Se evaporó todo el disolvente y el sólido húmedo amarillo se calentó a reflujo en acetonitrilo. El sólido insoluble restante se separó por filtración cuando estaba caliente y el filtrado se enfrió hasta la temperatura ambiente. Se agitó la mezcla durante la noche. Los cristales se separaron por filtración y se lavaron con acetonitrilo. El producto se recristalizó de nuevo en MeOH y acetonitrilo. Los cristales blancos se filtraron y se lavaron con acetonitrilo para obtener el producto del título P11 (72 mg, 47%).

m/z = 414.12 (M+H)+

PF = 205.49°C

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.58 - 1.79 (m, 4 H) 1.88 - 2.03 (m, 1 H) 2.15 (d, J=0.88 Hz, 3 H) 2.27 (cuin, J=7.59 Hz, 2 H) 2.32 - 2.40 (m, 1 H) 2.42 (s, 3 H) 3.37 - 3.49 (m, 1 H) 4.15 - 4.28 (m, 5 H) 5.77 - 5.84 (m, 1 H) 5.96 (s, 1 H) 7.63 (dd, J=8.58, 1.76 Hz, 1 H) 7.71 (d, J=8.58 Hz, 1 H) 7.82 (s a, 1 H) 8.40 - 8.45 (m, 1 H) 8.56 (s, 1 H) Síntesis de 1-(6-metN-2-(1-(6-metNqumazoNn-4-N)piperidm-2-N)pirazolo[1,5-a]pirimidm-5-N)azetidm-3-ol P12

Se preparó el compuesto P12 de la misma manera que el compuesto P11 utilizando el intermedio 20 y azetidin-3-ol como materiales de partida.

m/z = 430.12 (M+H)+

PF = 233.08°C

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.53 - 1.80 (m, 4 H) 1.87 - 2.03 (m, 1 H) 2.14 (s, 3 H) 2.31 - 2.40 (m, 1 H) 2.42 (s, 3 H) 3.38 - 3.50 (m, 1 H) 3.93 (dd, >9.13, 4.73 Hz, 2 H) 4.16 - 4.28 (m, 1 H) 4.32 - 4.44 (m, 2 H) 4.46 - 4.59 (m, 1 H) 5.61 - 5.71 (m, 1 H) 5.76 - 5.84 (m, 1 H) 5.98 (s, 1 H) 7.58 - 7.67 (m, 1 H) 7.67 - 7.75 (m, 1 H) 7.83 (s a, 1 H) 8.45 (s a, 1 H) 8.56 (s, 1 H)

Síntesis de 1-(6-metil-2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-amina P13

Se preparó el intermedio 21 de la misma manera que el compuesto P11 utilizando el intermedio 20 y azetidin-3-ilcarbamato de fe/f-butilo como materiales de partida.

m/z = 529.25 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.40 (s, 9 H) 1.67 - 1.89 (m, 4 H) 1.98 -2.11 (m, 1 H) 2.15 (d, J=0.88 Hz, 3 H) 2.41 - 2.46 (m, 4 H) 3.60 - 3.74 (m, 1 H) 4.02 - 4.11 (m, 2 H) 4.27 - 4.37 (m, 1 H) 4.37 - 4.46 (m, 2 H) 4.61 - 4.75 (m, 1 H) 6.12 (s, 1 H) 6.22 - 6.35 (m, 1 H) 7.10 - 7.30 (m, 1 H) 7.80 - 7.88 (m, 2 H) 7.97 (s a, 1 H) 8.37 (s, 1 H) 8.74 (s, 1 H)

Etapa 2: síntesis de 1-(6-metil-2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-5-il)azetidin-3-amina P13

Una solución del intermedio 21 (215 mg, 0.39 mmol) y una solución 4 M de HCl en dioxano (6 mL, 24 mmol) se agitó a la temperatura ambiente durante 2 h. Se evaporó el dioxano y el crudo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0.5% hasta un 10% (MeOH/NH3) y diclorometano. Después de evaporar el disolvente, los autores obtuvieron el compuesto P13 como un sólido blanco (18 mg, 10%).

m/z = 429.20 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.57 - 1.75 (m, 4 H) 1.88 -2.03 (m, 1 H) 2.11 -2.20 (m, 3 H) 2.31 -2.40 (m, 1 H) 2.42 (s, 3 H) 3.37 - 3.49 (m, 1 H) 3.70 - 3.89 (m, 3 H) 4.16 - 4.27 (m, 1 H) 4.29 - 4.39 (m, 2 H) 5.76 - 5.84 (m, 1 H) 5.96 (s, 1 H) 7.63 (dd, J=8.58, 1.76 Hz, 1 H) 7.71 (d, J=8.36 Hz, 1 H) 7.82 (s a, 1 H) 8.42 - 8.46 (m, 1 H) 8.55 (s, 1 H). Síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-6-morfolinoquinazolin-2-ilcarbamato de 2-metoxietilo P14

Síntesis de (4-cloro-6-morfolinoquinazolin-2-il)carbamato de metilo 22

Etapa 1: síntesis de 5-morfolino-2-n¡trobenzoato de etilo 22-a

Se disolvió 5-fluoro-2-nitrobenzoato de etilo (5 g, 23.46 mmol) en DMF (150 mL) y a continuación, se añadió morfolina (6.13 g, 70.37 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 4 h a la temperatura ambiente. El disolvente se eliminó a presión reducida y el crudo se redisolvió en diclorometano, se lavó con una solución 1 M de HCl, se secó con MgSO4, se filtró y se evaporó a sequedad para generar el intermedio 22-a.

Etapa 2: síntesis de 2-am¡no-5-morfol¡nobenzoato de etilo 22-b

Se disolvió 5-morfolino-2-nitrobenzoato de etilo 22-a (6.574 g, 23.46 mmol) en una mezcla de EtOH (150 mL) y THF (250 mL), a continuación se añadió Pd/C (10%) (2.496 g, 2.35 mmol) la mezcla de reacción se colocó en una atmósfera de hidrógeno durante 2 h. La mezcla de reacción se filtró sobre dicalite y el filtrado se evaporó a sequedad para generar el intermedio 22-b deseado como un sólido marrón (6.24 g, cuantitativo).

Etapa 3: síntesis de 4-h¡drox¡-6-morfol¡noqu¡nazol¡n-2-¡lcarbamato de metilo 22-c

Se disolvieron 2-amino-5-morfolinobenzoato de etilo 22-b (6.24 g, 24.93 mmol), 1,3-bis(metoxicarbonil)-2-metil-2-tiopseudourea (5.91 g, 28.67 mmol) y ácido acético (7.14 ml, 124.65 mmol) en 100 mL de MeOH y se agitó durante toda la noche a 75 °C. Se añadió más ácido acético (1 mL, 17.47 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a 75 °C durante 7 días. Se ajustó el pH a 5 con ácido acético. Los componentes volátiles se evaporaron a sequedad. A continuación, el residuo se redisolvió en 15 mL de MeOH y se añadieron 100 mL de agua. El precipitado se separó por filtración, se lavó con éter dietílico para generar el intermedio del título 22-c como un sólido marrón (5.28 g, 70%).

Etapa 4: síntesis de 4-cloro-6-morfolinoqu¡nazol¡n-2-¡lcarbamato de metilo 22

Se suspendió (4-hidrox¡-6-morfol¡noquinazol¡n-2-¡l)carbamato de metilo 22-c (1.00 g, 3.29 mmol) en acetonitrilo seco (12.38 mL), a continuación se añadió POCl3 (1.15 mL, 12.4 mmol) a la temperatura ambiente y la mezcla se calentó a reflujo durante 4.5 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, se evaporó la mezcla a sequedad. El residuo se coevaporó con tolueno. El crudo se disolvió en DCM y se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio en agua. La fase orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y se evaporó. El residuo se purificó con éter diisopropílico. El sólido se separó por filtración para obtener el intermedio del título 22 como un sólido marrón oscuro.

m/z = 323.15 (M+H)+

Etapa 5: síntesis de 4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolo[1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-6-morfol¡noquinazol¡n-2-¡lcarbamato de 2-metoxietilo P14

Se calentó una solución del intermedio 8 (80 mg, 0.23 mmol), (4-cloro-6-morfolinoquinazol¡n-2-¡l)carbamato de metilo 22 (152 mg, 0.23 mmol) y diisopropiletilamina (117 |jL, 0.68 mmol) en 2-metoxietanol (1.79 mL) a 100 °C durante toda la noche. Los disolventes se evaporaron y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0.5% hasta un 10% de MeOH en DCM. Después de evaporar el disolvente, los autores obtuvieron un aceite que se purificó con éter diisopropílico y la suspensión se sonicó durante 5 min. El sólido se filtró y se lavó con algo de éter diisopropílico para obtener el compuesto del título P14 como un polvo marrón (38 mg.

24%).

m/z = 673.34 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.58 - 1.80 (m. 4 H) 1.93 -2.06 (m. 1 H) 2.24 -2.40 (m. 3 H) 2.95 -3.11 (m. 4 H) 3.28 (s. 3 H) 3.30 - 3.34 (m. 1 H) 3.42 - 3.59 (m. 6 H) 3.64 - 3.75 (m. 8 H) 4.01 (t. J=7.37 Hz. 4 H) 4.14 - 4.22 (m. 2 H) 4.22 - 4.32 (m. 1 H) 5.33 (s. 1 H) 5.70 - 5.81 (m. 1 H) 6.00 (s. 1 H) 7.17 (d. J=2.20 Hz. 1 H) 7.51 (d. J=9.24 Hz. 1 H) 7.56 (dd. J=9.68. 2.64 Hz. 1 H) 9.83 (s a. 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azet¡dm-1-¡l)-2-(1-(2-met¡l-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡dm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-7-il)morfolina P15

Síntesis de 4-cloro-2-met¡l-7H-pirrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡na 23

Se disolvió 2-met¡l-3H-pirrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-4(7H)-ona 23-a (10.54 g. 70.6 mmol) en tolueno (20 mL) en una atmósfera inerte. Se añadieron gota a gota DlpEA (24 mL. 141 mmol. 2 eq.) y POCl3 (19.5 mL. 212 mmol. 3 eq.) a 70 °C y la mezcla se calentó a continuación hasta 106 °C. Después de 16 h. la solución se concentró al vacío. se extrajo con acetato de etilo y se lavó con una solución saturada de NaHCO3. Las fases orgánicas combinadas se secaron con Na2SO4. y se concentraron al vacío para generar un aceite gris que se suspendió en agua/heptanos para obtener el intermedio 23 (5.9 g. 50%) como un sólido blanco.

Síntes¡s de 4-(5-(azet¡dm-1-¡l)-2-(1-(2-met¡l-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡dm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-7-¡l)morfol¡na P15

A una solución del intermedio 8 (100 mg. 0.28 mmol) en isopropanol (3 mL) se añadió el intermedio 23 (47 mg.

0.28 mmol. 1 eq.) y Et3N (0.118 mL. 0.84 mmol. 3 eq.) en un tubo resistente a la presión sellado. La solución se calentó hasta 140 °C y se agitó durante 16 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC prep. para generar el compuesto del título P15 (36 mg, 27%). m/z = 474 (M+H)+

1H RMN (600 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.52 - 1.58 (m, 1 H) 1.58 - 1.69 (m, 2 H) 1.73 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 1.91 (s a, 1 H) 2.24 - 2.32 (m, 2 H) 2.32 - 2.38 (m, 1 H) 2.36 (s, 3 H) 3.27 (t, J=12.03 Hz, 1 H) 3.47 (s a, 4 H) 3.58 - 3.68 (m, 4 H) 3.97 (t, J=7.34 Hz, 4 H) 4.61 (d, J=11.74 Hz, 1 H) 5.23 (s, 1 H) 5.71 (s, 1 H) 6.21 (s a, 1 H) 6.42 (s a, 1 H) 6.98 (s a, 1 H) 11.17 (s a, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azet¡dm-1-M)-2-(1-(2-etox¡p¡r¡do[2,3-d]p¡r¡m¡dm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-7-il)morfolina P16

Etapa 1: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(2-cloropirido[2,3-d1pirimidin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina 25

El intermedio 8 (200 g, 0.584 mmol) se disolvió en etanol (10 mL), y a continuación se añadieron 2,4-dicloropirido[2,3-d]pirimidina 24 (117 mg, 0.58 mmol) y trietilamina (177 mg, 1.75 mmol). La mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 12 h. Se evaporó el disolvente. Este producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: metanol/acetato de etilo 1/10). El residuo resultante se liofilizó para generar un sólido blanco (78.3 mg, 27%).

Etapa 2: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(2-etoxipirido[2,3-d1pirimidin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-¡l)morfolina P16

A una solución del intermedio 25 (67 mg, 0.13 mmol) en EtOH (10 mL) se añadieron 100 pL de HCl iPrOH (6 N) y la solución se calentó a 40 °C durante 16 h. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en DCM. Después de evaporar, se obtuvo el compuesto del título P16 (20 mg, 25%).

m/z = 516 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.33 (t, J=7.04 Hz, 3 H) 1.71 (s a, 4 H) 1.92 -2.11 (m, 1 H) 2.23 -2.39 (m, 3 H) 3.40 - 3.58 (m, 5 H) 3.61 - 3.74 (m, 4 H) 4.01 (t, J=7.37 Hz, 4 H) 4.20 (d a, J=13.90 Hz, 1 H) 4.40 (c, J=7.00 Hz, 2 H) 5.28 (s, 1 H) 5.79 - 5.88 (m, 1 H) 5.91 (s, 1 H) 7.19 (dd, J=8.58, 4.40 Hz, 1 H) 8.38 (dd, J=8.14, 1.54 Hz, 1 H) 8.76 -8.82 (m, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡din-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)morfol¡na P17

Síntesis de 4-cloro-5-metilquinazolina 26

Etapa 1: síntesis de 5-metilquinazolin-4-ol 26-b

Se disolvió el ácido 2-amino-6-metilbenzoico 26-a (4 g, 26 mmol) en 10 mL de formamida y la solución se calentó hasta 120 °C. Después de 4 h, se añadió agua y el sólido se separó por filtración. El sólido se lavó adicionalmente con agua y se secó en el horno para generar el intermedio 26-b (3.25 g, 77%).

m/z = 160 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 2.77 (s, 3 H) 7.25 (d, J=7.48 Hz, 1 H) 7.46 (d, J=7.70 Hz, 1 H) 7.62 (t, J=7.90 Hz, 1 H) 7.98 (s, 1 H) 11.89 (s a, 1 H)

Etapa 2: síntesis de 4-cloro-5-metilquinazolina 26

A una solución del intermedio 26-b (100 mg, 0.62 mmol) en acetonitrilo (2 mL) se añadió DIPEA (0.23 mL, 1.88 mmol, 3 eq.). La solución resultante se calentó hasta 70 °C y se agitó durante 10 min. A continuación, se añadió POCh gota a gota a la solución. Después de 16 h, se concentró la solución al vacío para generar el intermedio 26.

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-il)-2-(1-(5-metilqumazolm-4-il)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolma P17

A una solución del intermedio 8 (230 mg, 0.67 mmol) en CH3CN (10 mL) en un tubo sellado se añadieron DIPEA (2.3 mL, 13.4 mmol, 20 eq.) y 4-cloro-5-metilquinazolina 26 (120 mg, 0.67 mmol, 1 eq.). La solución se calentó a 120 °C y se agitó durante 16 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y el crudo se purificó mediante HPLC prep. para generar el compuesto P17 (28 mg, 9%).

m/z = 485 (M+H)+

1H RMN (600 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.54 - 1.86 (m, 4 H) 2.08 - 2.13 (m, 2 H) 2.28 - 2.33 (m, 2 H) 2.86 (s, 3 H) 3.28 -3.31 (m, 2 H) 3.39 - 3.44 (m, 2 H) 3.49 - 3.54 (m, 2 H) 3.62 - 3.69 (m, 4 H) 4.00 (t, >7.41 Hz, 4 H) 5.31 (s, 1 H) 5.75 (t, J=4.40 Hz, 1 H) 5.97 (s, 1 H) 7.37 (d, J=6.90 Hz, 1 H) 7.60 - 7.63 (m, 1 H) 7.67 - 7.71 (m, 1 H) 8.53 (s, 1 H) Síntesis de (R)-4-(5-(azetidm-1-il)-2-(1-(5-metilqumazolm-4-il)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P18 y (S)-4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[l,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P19

Se llevó a cabo una purificación mediante SFC prep. (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AS 20 x 250 mm; fase móvil: CO2, EtOH con un 0.2% de iPrNH2) lo que proporcionó ambos enantiómeros relativos:

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-il)-2-(1-(2-metiltiazolo[5,4-d]pirimidm-7-il)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P20

Síntesis de 7-cloro-2-met¡lt¡azolo[5,4-d]pmm¡dma 27

Etapa 1: síntesis de 5-am¡no-6-clorop¡rim¡d¡no-4-t¡ol 27-b

A una soluc¡ón de sulfan¡lo de sod¡o h¡dratado (2.48 g, 33.54 mmol) en agua (6 mL) se añad¡eron MeOH (50 mL) y 4,6-d¡clorop¡r¡m¡d¡n-5-am¡na 27-a (5 g, 30.49 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó a reflujo durante una hora a la temperatura amb¡ente durante toda la noche. La mezcla se evaporó y el res¡duo se secó al vacío para generar el ¡ntermed¡o 27-b (3.63 g, 74%).

m/z = 161 (M+H)+

Etapa 2: síntes¡s de 7-cloro-2-met¡lt¡azolo[5,4-cnp¡r¡m¡d¡na 27

Una soluc¡ón de 5-am¡no-6-clorop¡r¡m¡d¡no-4-t¡ol 27-b (4.7 g, 29.1 mmol) en ortoacetato de tr¡et¡lo (150 mL) se ag¡tó a 150 °C durante una hora. Se perm¡t¡ó que la mezcla de reacc¡ón se enfr¡ara hasta la temperatura amb¡ente y a cont¡nuac¡ón, se evaporó a sequedad. El res¡duo se pur¡f¡có en éter d¡¡sopropíl¡co con algo de aceton¡tr¡lo. Se recog¡ó prec¡p¡tado por f¡ltrac¡ón y se secó al vacío para generar el ¡ntermed¡o 27 (0.9 g, 4.85 mmol).

Síntesis de 4-(5-(azet¡dm-1-M)-2-(1-(2-metMt¡azolo[5,4-d]pmm¡dm-7-¡l)p¡per¡dm-2-N)p¡razolo[1,5-a]pmm¡dm-7-il)morfolina P20

Una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 8 (378.9 mg, 1 mmol),7-cloro-2-met¡lt¡azolo[5,4-d1p¡r¡m¡d¡na 27 (185.6 mg, 1 mmol), la base de Hun¡g (0.7 mL, 4.22 mmol) y 2-metox¡etanol (10 mL) se ag¡tó a 100 °C durante toda la noche. La mezcla se evaporó y el res¡duo se d¡solv¡ó en d¡clorometano y se lavó dos veces con agua. La fase orgán¡ca se secó con MgSO4, se f¡ltró y se evaporó. El res¡duo se pur¡f¡có en síl¡ce con un grad¡ente de d¡clorometano/metanol de 100/0 a 95/5. Se evaporaron las fracc¡ones correspondentes. El res¡duo se cr¡stal¡zó en éter d¡¡sopropíl¡co y un 10% de aceton¡tr¡lo. Los cr¡stales blancos se recog¡eron por f¡ltrac¡ón y se secaron al vacío para generar el compuesto P20 (163 mg, 33%).

m/z = 491.62 (M+H)+

mp: 229.8°C

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 1.48 - 1.83 (m, 2 H), 1.91 - 2.06 (m, 1 H), 2.29 (qu¡n, J=7.5 Hz, 1 H), 2.39 (d, J=13.7 Hz, 1 H), 2.72 (s, 3 H), 3.21 (m, J=2.4 Hz, 1 H), 3.42 - 3.54 (m, 4 H), 3.56 - 3.70 (m, 4 H), 3.98 (t, J=7.5 Hz, 4 H), 5.16 - 5.30 (m, 2 H), 5.73 (s, 1 H), 6.98 (s a, 1 H), 8.32 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-metMpirazolo[1,5-a]pmmidm-2-il)piperidm-1-M)-6-metMqumazolma P21

Etapa 1: síntesis de 7-met¡l-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-5(4H)ona 29

Se añad¡eron el (Z)-3-etox¡but-2-enoato de et¡lo 28 (33 g. 208.60 mmol) y CS2CO3 (54 g. 165.74 mmol) a una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 4 (30 g. 112.64 mmol) en DMF (180 mL). La mezcla se ag¡tó a 110 °C durante 12 h. El prec¡p¡tado se separó por f¡ltrac¡ón y se lavó con acetato de et¡lo (100 mL). El f¡ltrado se concentró al vacío. El res¡duo se d¡solv¡ó en acetato de et¡lo (300 mL) y se lavó con salmuera (2x100mL). La fase orgán¡ca se secó (MgSO4), se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró al vacío. El res¡duo se lavó con éter ¡sopropíl¡co (200 mL) y a cont¡nuac¡ón se secó (al vacío. 45 °C, 1 h) para generar el ¡ntermed¡o 29 (25 g. 65.37%).

m/z = 233 (M+H)+

Etapa 2: síntes¡s de 5-cloro-7-met¡l-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡na 30

Se ag¡tó una mezcla del ¡ntermed¡o 29 (22.5 g. 67.69 mmol) en POCh (377.5 g) a 100 °C durante 2 h. El d¡solvente se evaporó al vacío. Se añad¡ó aceton¡tr¡lo (200 mL). La mezcla se neutral¡zó con NH3 (7 M en metanol) hasta un pH = 8. El d¡solvente se evaporó al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna de gel de síl¡ce (eluyente: d¡clorometano/metanol. 10/1) para generar el ¡ntermed¡o 30 (13.97 g. 80.47%).

m/z = 251 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 6 ppm 1.52 - 1.73 (m. 4 H) 1.76 - 1.86 (m. 1 H) 1.99 -2.02 (m. 1 H) 2.70 (s. 3 H) 2.83­ 2.88 (m. 1 H) 3.15-3.18 (d. J=12.0 Hz. 1 H) 4.14-4.17 (dd. J1=10.8. J2=2.8 Hz. 1 H) 6.81 (s. 1 H) 7.14 (s. 1 H) Etapa 3: síntes¡s de 4-(2-(5-cloro-7-met¡lp¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-6-met¡lqu¡nazol¡na 31

Se ag¡tó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 30 (501.5 mg. 2 mmol). 4-cloro-6-met¡lqu¡nazol¡na 12 (535.9 mg. 3 mmol) y metox¡etanol (5 mL) a 120 °C durante toda la noche. La mezcla se evaporó y el res¡duo se d¡solv¡ó en d¡clorometano. se lavó dos veces con agua. se secó con MgSO4. se f¡ltró y se evaporó. El res¡duo se pur¡f¡có con síl¡ce con d¡clorometano/metanol-NH398/2. Las fracc¡ones correspondentes se evaporaron y el res¡duo se cr¡stal¡zó en éter d¡¡sopropíl¡co con un 10% de aceton¡tr¡lo. El prec¡p¡tado verdoso se separó por f¡ltrac¡ón y se secó al vacío para obtener el ¡ntermed¡o 31 (645 mg. 82%).

m/z = 392.9 (M+H)+

mp: 154.2°C

1H RMN (400 MHz. DMSO-cfe) 6 ppm 1.62 -1.81 (m. 2 H). 2.45 (s. 3 H). 2.69 (s. 2 H). 4.16 (s a. 1 H). 5.95 (s a. 1 H).

6.60 (s. 1 H). 7.00 (s. 1 H). 7.63 (d. J=1.6 Hz. 1 H). 7.66 - 7.79 (m. 1 H). 7.86 (s. 1 H). 8.55 (s. 1 H)

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-metMpirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)piperidm-1-M)-6-metMqumazolma P21 Se ag¡tó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 31 (196.45 mg. 0.5 mmol). clorh¡drato de azet¡d¡na (93.56 mg. 1 mmol). la base de Hun¡g (0.26 mL. 1.5 mmol) y etanol (5 mL) a 60 °C durante el f¡n de semana. La mezcla se evaporó y el res¡duo se pur¡f¡có con agua y se ag¡tó durante una hora. El prec¡p¡tado se separó por f¡ltrac¡ón y se recr¡stal¡zó en aceton¡tr¡lo. Los cr¡stales blancos se recog¡eron por f¡ltrac¡ón y se secaron al vacío para generar el compuesto P21 (175 mg. 84%).

m/z = 413.5 (M+H)+

mp: 192.43°C

1H RMN (360 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.58 - 1.78 (m, 4 H), 1.90 - 2.05 (m, 1 H), 2.25 - 2.39 (m, 3 H), 2.43 (s, 3 H), 2.54 (s, 3 H), 4.03 (t, J=7.5 Hz, 4 H), 5.80 (s a, 1 H), 6.00 (s, 1 H), 6.12 (d, J=1.1 Hz, 1 H), 7.65 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 7.68 - 7.74 (m, 1 H), 7.89 (s, 1 H), 8.57 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidm-1-M)-6-metM-7-(piperidm-1-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)piperidm-1-M)-6-metilquinazolina P22

Etapa 1: síntesis de 2-(7-h¡drox¡-6-met¡l-5-oxo-4,5-d¡h¡drop¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡no-1-carbox¡lato de tertbutilo 33

Se añad¡ó metanolato de sod¡o (50 mL; 93.87 mmol) rec¡én preparado a una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 4 (5 g, 18.77 mmol) y 2-met¡lmalonato de d¡et¡lo 32 (3.93 g, 22.53 mmol) en metanol (50 mL). La soluc¡ón se calentó a reflujo durante 15 h. El d¡solvente se evaporó al vacío. Se añad¡ó agua al res¡duo, el pH de la soluc¡ón se ajustó a 4­ 5 añad¡endo ác¡do acét¡co. La mezcla se extrajo con acetato de et¡lo (3 x 300 mL), las fases orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera (2 x 100 mL) se secaron (Na2SO4), se f¡ltraron y se concentraron al vacío para obtener el ¡ntermed¡o 33 crudo (8.5 g, rend¡m¡ento: 91%).

m/z = 349 (M+H)+

Etapa 2: 5,7-d¡cloro-6-met¡l-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡na 34

Se añad¡ó tr¡cloruro de fósforo (30 mL) al ¡ntermed¡o 33 (6.5 g, 18.66 mmol) a 0 °C. La mezcla se ag¡tó a 100 °C durante 15 h. El d¡solvente se evaporó al vacío. El res¡duo se d¡solv¡ó en CH3CN (30 mL). Se ajustó el pH de la soluc¡ón a 7 añad¡endo una soluc¡ón de amoníaco en metanol. El d¡solvente se evaporó al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna de gel de síl¡ce (eluyente: d¡clorometano/metanol 20 /1 (soluc¡ón de amoníaco al 0.5% en metanol)). Las fracc¡ones deseadas se recog¡eron y el d¡solvente se evaporó al vacío. El res¡duo se lavó con acetato de et¡lo. El sól¡do se secó al vacío para generar el ¡ntermed¡o 34 (1.12 g, 21%). m/z = 286 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 1.22-1.25 (m, 1 H) 1.65-1.68 (m, 2 H) 2.04 - 2.08 (m, 1 H) 2.24 - 2.28 (m, 2 H) 2.53 (s, 3 H) 3.08 (s a, 1 H) 3.57 (s a, 1 H) 3.69 - 3.80 (m, 1 H) 4.48 (s a, 1 H) 7.21 (s, 1 H).

Etapa 3: síntes¡s de 5-cloro-6-met¡l-7-(p¡per¡d¡n-1-¡l)-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡na 35

Se ag¡tó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 34 (1120 mg, 3.93 mmol), morfol¡na (377 mg, 4.32 mmol), la base de Hun¡g (1.35 mL, 7.85 mmol) en etanol (25 mL) a la temperatura amb¡ente durante toda la noche. La mezcla se evaporó y el res¡duo se cr¡stal¡zó en éter d¡¡sopropíl¡co con aprox¡madamente un 50% de aceton¡tr¡lo. Los cr¡stales se recog¡eron por f¡ltrac¡ón y se secaron al vacío para generar el ¡ntermed¡o 35 (1060 mg, 80%).

m/z = 335.8 (M+H)+

Etapa 4: 4-(2-(5-cloro-6-met¡l-7-(p¡per¡d¡n-1-¡l)p¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-6-met¡lqu¡nazol¡na 36 Una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 35 (1060 mg, 3.16 mmol), 4-cloro-6-met¡lqu¡nazol¡na 12 (845.7 mg, 4.73 mmol), la base de Hun¡g (1.1 mL, 6.32 mmol) y 2-metox¡etanol (20 mL) se ag¡tó a 100 °C durante toda la noche. La mezcla se evaporó, se añad¡ó agua al res¡duo y se extrajo con d¡clorometano 3 veces. La fase orgán¡ca comb¡nada se secó suces¡vamente con MgSO4, se f¡ltró y se evaporó. El res¡duo se pur¡f¡có con cromatografía en gel de síl¡ce con d¡clorometano/metanol 98/2 como eluyente. Las fracc¡ones correspondentes se evaporaron para generar el ¡ntermed¡o 36 (1400 mg, 92%).

Etapa 5: síntesis de 4-í2-í5-íazet¡d¡n-1-¡h-6-met¡l-7-Íp¡per¡d¡n-1-¡hp¡razolo-H.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡hp¡per¡d¡n-1-¡h-6-metilquinazolina P22

Se preparó el compuesto P22 de la misma manera que el compuesto P21 utilizando el intermedio 36 como material de partida.

m/z = 498.6 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.58 - 1.87 (m. 4 H) 1.98 - 2.06 (m. 1 H) 2.07 (s. 3 H) 2.24 (quin. J=7.57 Hz. 2 H) 2.34 - 2.40 (m. 1 H) 2.42 - 2.46 (m. 3 H) 3.34 - 3.40 (m. 4 H) 3.49 (br ddd. J=13.62. 10.60. 3.63 Hz. 1 H) 3.64 -3.71 (m. 4 H) 4.10 (t. J=7.67 Hz. 4 H) 4.19 (br d. J=14.13 Hz. 1 H) 5.81 - 5.88 (m. 1 H) 5.92 (s. 1 H) 7.59 (dd. J=8.48.

1.61 Hz. 1 H) 7.65 - 7.73 (m. 1 H) 7.86 (s. 1 H) 8.53 (s. 1 H)

Síntesis de 1-(6-metil-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-ol P23

P24: [a]D = 251.32° (589 nm. c = 0.3975% p/v. DMF. 20 °C)

P25: [a]D20 = -264.8° (589 nm. c = 0.375% p/v. DMF. 20 °C)

Etapa 1: síntesis de 4-(2-(5-cloro-6-met¡lp¡razolo[1.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡perid¡n-1-¡l)-5-met¡lqu¡nazol¡na 37

Se disolvió el intermedio 19 (500 mg. 1.72 mmol) en 2-metoxietanol (30 mL). Se añadieron DIPEA (0.89 mL.

5.17 mmol. 3 eq.) y 4-cloro-5-metilquinazolina 26 (324.26 mg. 1.72 mmol. 1 eq.) a la solución y se calentó hasta 80 °C. Después de agitar 16 h. la solución se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna (DCM/(NHs/MeOH) 7 N): 9/1) para generar el intermedio 37 deseado (735 mg. 86%).

LCMS m/z = 393 (M+H)+

Etapa 2: síntesis de 1-(6-met¡l-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-alp¡rim¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol P23 El intermedio 37 (735 mg. 1.5 mmol) se disolvió en EtOH (50 mL). Se añadieron el clorhidrato de azetidin-3-ol (327 mg. 3 mmol. 2 eq.) y DIPEA (0.77 mL. 4.5 mmol. 3 eq.) y la solución se calentó a reflujo durante 16 h. A cont¡nuac¡ón. se enfr¡ó la soluc¡ón hasta la temperatura amb¡ente. se añad¡ó h¡elo y la soluc¡ón se ag¡tó durante 1 h. El sólido se separó por filtración y se secó en el horno para generar el compuesto P23 (440 mg. 68%).

LCMS m/z = 430 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. 420 K. DMSO-cfe) 8 ppm 1.41 - 1.70 (m. 3 H) 1.76 - 1.89 (m. 1 H) 2.11 (d. J=1.21 Hz. 3 H) 2.13 -2.31 (m. 2 H) 2.81 (s. 3 H) 3.42 - 3.60 (m. 2 H) 3.90 (dd. J=9.28. 4.84 Hz. 2 H) 4.34 (t. J=8.10 Hz. 2 H) 4.46 - 4.55 (m.

1 H) 4.73 - 5.12 (m. 1 H) 5.47 - 5.58 (m. 1 H) 5.64 (s a. 1 H) 7.21 - 7.33 (m. 1 H) 7.46 - 7.63 (m. 2 H) 8.10 (s. 1 H) 8.45 (s. 1 H)

(R)-1-(6-met¡l-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-a]p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol P24 y (S)-1-(6-metil-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1.5-a]p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol P25

Estos dos enantiómeros se aislaron mediante separación SFC utilizando el compuesto P23.

Se llevó a cabo una purificación mediante SFC prep. (fase estacionaria: Chiralpak Diacel AS 20 x 250 mm; fase móvil: CO2. EtOH con un 0.2% de ¡PrNH2) lo que proporcionó ambos enantiómeros relativos:

Síntesis de 1-(6-metil-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-amina

Etapa 1: síntesis de (1-(6-met¡l-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-¡l)carbamato de terf-butilo 38 Se calentó una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 19 (1300 mg. 5.185 mmol). azet¡d¡n-3-¡lcarbamato de terf-but¡lo (1786 mg.

10.37 mmol) y la base de Hun¡g (2 mL, 11.606 mmol) en EtOH (30 mL) a 70 °C durante 3 h. Después de enfr¡ar hasta la temperatura amb¡ente, se añad¡ó d¡cal¡te y la mezcla se evaporó a sequedad. El crudo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna. La columna se eluyó con un grad¡ente desde un 100% de DCM hasta un 10% de MeOH y un 90% de DCM. Las fracc¡ones que contenían el producto se evaporaron y el res¡duo se recr¡stal¡zó en ACN. Después de la f¡ltrac¡ón, los autores obtuv¡eron un sól¡do cr¡stal¡no blanco. este es una mezcla del ¡ntermed¡o del título 38 deseado y el react¡vo de part¡da azet¡d¡n-3-¡lcarbamato de terf-but¡lo (2204 mg). que se ut¡l¡zó tal cual en la s¡gu¡ente etapa.

m/z = 387.26 (M+H)+

Etapa 2: síntes¡s de 1-(6-met¡l-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-¡lcarbamato de terf-but¡lo 39

El crudo obten¡do en la etapa 1. el ¡ntermed¡o 38 (250 mg. 0.647 mmol). 4-cloro-5-met¡lqu¡nazol¡na 26 (182 mg.

0.97 mmol) y la base de Hun¡g (368 pL. 2.135 mmol) se mezclaron en 2-metox¡etanol (4.36 mL) y se calentaron a 100 °C durante 3 h. La mezcla de reacc¡ón se evaporó y el res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna eluyendo con un grad¡ente desde un 100% de DCM hasta un 5% de MeOH y un 95% de DCM. Todas las fracc¡ones que contenían el producto se evaporaron para obtener una espuma amar¡lla que tenía tan solo una pureza de un 52% (315 mg). El crudo se ut¡l¡zó como tal en la etapa 3.

m/z = 529.28 (M+H)+

Etapa 3: 1-(6-met¡l-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razoloH.5-alp¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-am¡na P26 El crudo obten¡do en la etapa 2 y el ¡ntermed¡o 39 (157 mg. 0.297 mmol) se d¡solv¡eron en DCM (1.9 mL). A cont¡nuac¡ón. se añad¡ó TFA (227 pL. 2.97 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a la temperatura amb¡ente durante 16 h. La mezcla se bas¡f¡có con NH37 M en MeOH y se evaporaron todos los d¡solventes. El res¡duo se pur¡f¡có con agua y el sól¡do formado se separó por f¡ltrac¡ón y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna. La columna se eluyó con un grad¡ente desde un 100% de DCM hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Todas las vers¡ones puras se evaporaron para obtener el producto del título P26 como un sól¡do blanco (76 mg.

59%).

m/z = 429.30 (M+H)+

PF = 221.07°C

1H RMN at 150°C (400MHz. DMSO-d6) 8 ppm 8.46 (s. 1H). 8.10 (s. 1H). 7.64 - 7.53 (m. 2H). 7.28 (d. J=5.9 Hz. 1H).

5.75 - 5.37 (m. 2H). 4.41 - 4.22 (m. 2H). 3.87 - 3.71 (m. 3H). 3.60 - 3.37 (m. 2H). 2.81 (s. 3H). 2.31 - 2.12 (m. 2H).

2.10 (s. 3H). 1.94 - 1.32 (m. 6 H)

Síntesis de 1-(2-(1-(2,5-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-amina P27

Síntesis de 4-doro-2,5-dimetilquinazolina 40

Etapa 1: síntesis de 2,5-dimetil-4H-benzo[d1[1,31oxazin-4-ona 40-b

Una solución de ácido 2-amino-6-metilbenzoico 40-a (20.0 g, 132mmol) en anhídrido acético (100 mL) se agitó a 140 °C durante 3 h. La mezcla se concentró al vacío para obtener el intermedio del título 40 (20.0 g, 77.7%).

Etapa 2: síntesis de 2,5-dimetilquinazolin-4(3H)-ona 40-c

Se calentó a reflujo una mezcla del intermedio 40-b (20.0 g, 114 mmol) e hidróxido de amonio (50 mL) durante toda la noche. La mezcla se enfrió hasta 25 °C. El sólido se recogió por filtración y se lavó con agua. La masa retenida sobre el filtro se secó al vacío a 40 °C durante 1 h para generar el intermedio del título 40-c (20 g, 90.5%).

Etapa 3: síntesis de 4-cloro-2,5-dimetilquinazolina 40

Se añadió trietilamina (5.05 g, 49.9 mmol) a una mezcla del intermedio 40-c (2.90 g, 16.7 mmol) en oxicloruro de fósforo (108 g, 709 mmol) a 0 °C. La mezcla se calentó a reflujo durante 3 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en tolueno (50 mL) y la solución se añadió a agua hielo (50 g). La fase orgánica se separó y se lavó sucesivamente con agua (2 x 50 mL), una solución acuosa de NaHCO3 al 10% (2 x 50 mL), agua (2 x 50 mL) y salmuera (50 mL). La fase orgánica se secó (MgSO4), se filtró y el filtrado se concentró al vacío para generar el intermedio 40 (1.91 g, 58.61%).

1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm 2.80 (s, 3 H) 3.00 (s, 3H) 7.41 (d, J=7.28 Hz, 1 H) 7.68 - 7.76 (m, 1 H) 7.78 - 7.85 (m, 1 H).

Etapa 4: síntesis de (1-(2-(1-(2,5-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-a1pirimidin-5-il)azetidin-3-il)carbamato de fe/f-butilo 41

El intermedio 38 crudo (250 mg, 0.647 mmol), el intermedio 40 (190 mg, 0.97 mmol) y la base de Hunig (368 ^L, 2.135 mmol) se mezclaron en 2-metoxietanol (4.36 mL) y se calentaron a 100 °C durante 3 h. La mezcla de reacción se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 5% de MeOH y un 95% de DCM. Todas las fracciones que contenían el producto se evaporaron para obtener una espuma amarilla del intermedio 41 que tenía tan solo una pureza de un 55% (427 mg). El crudo se utilizó como tal en la etapa 5.

m/z = 543.36 (M+H)+

Etapa 5: síntesis de 1-(2-(1-(2,5-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-a1pirimidin-5-il)azetidin-3-amina P27

Se disolvió el intermedio 41 crudo (427 mg (pureza de tan solo un 55%), 0.433 mmol) en una solución 4 M de HCl en dioxano (21.64 mL, 86.551 mmol) y la mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 2 h. La mezcla se diluyó con diclorometano y a continuación se basificó con una solución saturada de Na2CO3. El producto se extrajo con diclorometano (3x15 mL). Las fases orgánicas se secaron con Na2SO4, se filtraron y se evaporaron. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna. La columna de sílice se eluyó con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 4% de (MeOH/NH3) y un 96% de DCM. Todas las fracciones puras se evaporaron. El residuo se purificó con DIPE para obtener el producto del título P27 como un sólido blanco (11 mg, 6%).

m/z = 443.6 (M+H)+

PF = 176.85°C

1H RMN at 150°C (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 8.10 (s, 1H), 7.56 - 7.43 (m, 2H), 7.19 (d, J=6.8 Hz, 1H), 5.74 - 5.44 (m, 2H), 4.39 - 4.25 (m, 2H), 3.83 - 3.71 (m, 3H), 3.53 - 3.38 (m, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.26 - 2.13 (m, 2H), 2.11 (s, 3H), 1.94 - 1.38 (m, 6 H)

Síntesis de (4-{2-[5-(azetidin-1-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il]piperidin-1-il}-5-metilquinazolin-2-il)imidodicarbonato de dimetilo P28

Etapa 1: síntesis de 4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-5-met¡lqu¡nazol¡n-2-amina 42

Una suspens¡ón del ¡ntermed¡o 15 (1031 mg, 1.902 mmol) en una soluc¡ón 7 M de NH3 en MeOH (25 mL, 175 mmol) se calentó en un reactor metál¡co sellado a 120 °C durante 4 días. Después de la evaporac¡ón, el res¡duo se pur¡f¡có med¡ante pur¡f¡cac¡ón por HPLC. El producto pur¡f¡cado se d¡solv¡ó en una mezcla de DCM y DIPE y la soluc¡ón se evaporó de nuevo para obtener el ¡ntermed¡o del título 42 como un sól¡do blanco (473 mg, 47%).

m/z = 500.3 (M+H)+

PF = 252.24°C

1H RMN at 150°C (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7.36 - 7.27 (m, 1H), 7.16 - 7.10 (m, 1H), 6.90 - 6.83 (m, 1H), 5.71 -5.60 (m, 1H), 5.54 - 5.41 (m, 2H), 5.31 - 5.22 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 3.98 (t, J=7.5 Hz, 4H), 3.78 - 3.28 (m, 10H), 2.76 (s, 3H), 2.28 (qu¡n, J=7.4 Hz, 2H), 2.21 - 2.07 (m, 2H), 1.90 - 1.44 (m, 4H)

Etapa 2: síntes¡s de (4-(2-r5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-(morfol¡n-4-¡l)p¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l1p¡per¡d¡n-1-¡l}-5-met¡lqu¡nazol¡n-2-¡l)¡m¡dod¡carbonato de d¡met¡lo P28

El ¡ntermed¡o 42 (100 mg, 0.188 mmol) se d¡solv¡ó en DCM (2.21 mL). A cont¡nuac¡ón, se añad¡eron DIPEA (117 pL, 0.678 mmol) y cloroform¡ato de met¡lo (cas = 79-22-1, 29 pL, 0.376 mmol). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a la temperatura amb¡ente durante 2 h. Se evaporó el DCM y el res¡duo se pur¡f¡có con agua. La suspens¡ón se son¡có durante 30 m¡n y se ag¡tó a la temperatura amb¡ente durante toda la noche. El sól¡do se f¡ltró y se lavó con agua y DIPE para obtener el compuesto del título P28 como un polvo blanco (40 mg, 31%).

m/z = 616.6 (M+H)+

PF = 136.62°C

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7.79 - 7.66 (m, 1H), 7.65 -7.55 (m, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 1H), 6.05 -4.99 (m, 3H), 4.09 - 3.02 (m, 20H), 2.89 - 2.73 (m, 3H), 2.38 - 1.94 (m, 4H), 1.87 - 1.40 (m, 4H)

Síntesis de (4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolin-2-il)carbamato de metilo P29

El compuesto P28 (200 mg, 0.279 mmol) se disolvió en MeOH (6.0 mL) y THF (6.0 mL). A continuación, se añadió una solución de LiOH (17 mg, 0.722 mmol) en agua (4.3 mL). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 3 h. A continuación, se neutralizó con una solución 1 M de HCl y se diluyó con algo de agua. La suspensión se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. El sólido blanco se recogió por filtración y el producto deseado se secó en un horno a vacío durante toda la noche para generar un sólido blanco P29 (71 mg, 43%).

1H RMN at 80°C (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 9.70 - 9.32 (m, 1H), 7.53 (dd, J=7.3, 8.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.14 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.25 - 4.79 (m, 3H), 3.99 (t, J=7.4 Hz, 4H), 3.80 - 3.67 (m, 5H), 3.65 (s, 3H), 3.60 - 3.32 (m, 5H), 2.77 (s, 3H), 2.35 - 2.13 (m, 4H), 1.91 -1.33 (m, 4H)

m/z = 558.3 (M+H)+

Síntesis de 4-(2-(5-(azet¡dm-1-¡l)-7-morfolmop¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-2-¡l)p¡per¡dm-1-M)-W-h¡drox¡-5-metilquinazolino-2-carboximidamida P30

Etapa 1: síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolor1,5-a1pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolino-2-carbonitrilo 43

Una solución amarilla de 15 (2000 mg, 3.689 mmol), cianuro de zinc (cas = 557-21-1, 521 mg, 4.433 mmol) y 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno (cas = 12150-46-8, 372 mg, 0.671 mmol) en NMP (44.6 mL) se desgasificó con N2 durante 30 min. A continuación, se añadió tris(dibencilidenoacetona)dipaladio(0) (cas = 51364-51-3, 327 mg, 0.357 mmol) y el recipiente de reacción se selló y calentó a 90 °C durante 20 h. La mezcla de reacción se desactivó con agua (176 mL) e inmediatamente se formó un precipitado. Esta suspensión se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. El sólido se filtró y se lavó con agua para obtener un sólido marrón oscuro. El sólido marrón húmedo se disolvió en DCM y se eliminó el agua restante mediante separación y secado con Na2SO4. El residuo se recristalizó en ACN y la mezcla se agitó durante toda la noche. Los cristales negros se filtraron y se lavaron con ACN y MeOH para obtener cristales púrpura/gris. El sólido se recristalizó de nuevo en ACN y se agitó durante 6 h. A continuación, los cristales púrpura formados del intermedio 43 se filtraron, se lavaron con un poco de ACN y se secaron en el horno a vacío (1685 mg, 81%).

m/z = 510.3 (M+H)+

Etapa 2: síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolor1,5-a1pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-N-hidroxi-5-metilquinazolino-2-carboximidamida P30

A una solución de clorhidrato de hidroxilamina (3753 mg, 54 mmol) en agua (12.5 mL) se añadió Na2CO3 (625 mg, 5.9 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min. A continuación, se añadió una suspensión del intermedio 43 (1132 mg, 2 mmol) en EtOH (50 mL) a la temperatura ambiente. Se agitó la mezcla resultante durante 16 h. Se añadió agua helada. Después de agitar durante 2 h, se filtró el sólido beige y se lavó con DIPE. El crudo se suspendió en una mezcla de un 95% de DCM y un 5% de MeOH y el precipitado restante se separó por filtración. El filtrado se purificó mediante cromatografía en columna. La columna de sílice se eluyó con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones puras, los autores obtuvieron el producto deseado P30 como un sólido beige (38 mg, 3%).

m/z = 543.6 (M+H)+

PF = 205.46°C

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9.82 - 9.46 (m, 1H), 7.71 - 7.56 (m, 2H), 7.32 (dd, J=1.4, 6.3 Hz, 1H), 5.97 -5.40 (m, 4H), 5.20 (s, 1H), 3.98 (t, J=7.4 Hz, 4H), 3.81 - 3.29 (m, 10H), 2.84 (s, 3H), 2.28 (quin, J=7.4 Hz, 2H), 2.23 -2.11 (m, 2H), 1.90 - 1.38 (m, 4H)

Síntes¡s de 4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(2-etox¡-5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolo[1,5- 3 ]p¡r¡m¡d¡n-7-il)morfolina P31

Una suspensión del intermedio 15 (150 mg, 0.277 mmol) en EtOH (2.39 mL) se trató con NaOEt (al 21% en EtOH) (525 |jL, 1.407 mmol). La mezcla se purgó con N2, se selló y se calentó a 80 °C durante 48 h. La mezcla de reacción se evaporó a sequedad y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de MeOH y un 90% de DCM. Todas las fracciones que contenían el producto se evaporaron para obtener una espuma blanca. La espuma se recristalizó con DIPE y un 5% de ACN y la mezcla se agitó durante 3 días. Se obtuvo el compuesto del título P31 cristalino blanco mediante filtración (46 mg, 29%). m/z = 529.3 (M+H)+

PF = 186.90°C

1H RMN (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 7.52 - 7.42 (m, 1H), 7.35 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.09 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.70 - 5.58 (m, 1H), 5.41 -5.28 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 4.39 -4.27 (m, 2H), 4.05 - 3.90 (m, 4H), 3.74 -3.57 (m, 4H), 3.56 -3.37 (m, 6 H), 2.80 (s, 3H), 2.35 -2.23 (m, 2H), 2.22 -2.11 (m, 2H), 1.94 - 1.40 (m, 4H), 1.27 (t, J=6.9 Hz, 3H)

Síntesis de (S)-W-(4-(2-(5-(azetidm-1-N)-7-morfolmopirazolo[1,5-3]pmmidm-2-il)piperidm-1-M)-6-cloroquinazolin-2-il)metanosulfonamida P32

P33: [a]D20 = -209.83° (589 nm, c = 0.3765% p/v, DMF, 20 °C)

P34: [a]D20 = 192.15° (589 nm, c = 0.242% p/v, DMF, 20 °C)

Etapa 1: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(2,6-dicloroquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina P45

El intermedio 8 (1341 mg, 2.92 mmol), 2,4,6-tricloroquinazolina 44 (cas = 20028-68-6, 768 mg, 2.83 mmol) y DIPEA (cas = 7087-68-5, 1.24 mL, 7.183 mmol) se mezclaron en 2-metoxietanol (14.7 mL) y se calentaron a 60 °C durante 2 h. La mezcla de reacción enfriada se añadió lentamente sobre agua helada y la mezcla se calentó hasta la temperatura ambiente. El precipitado amarillo brillante formado se filtró sucesivamente, se lavó con agua y DIPE y se secó en el horno a vacío. El producto se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 5% de MeOH y un 95% de DCM. Después de evaporar las fracciones, se aisló el intermedio 45 (781 mg, 49%) como una espuma amarilla.

1H RMN (400MHz, DMSO-da) 8 ppm 8.12 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.85 (dd, J=2.2, 9.0 Hz, 1H), 7.74 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 5.97 - 5.88 (m, 1H), 5.35 (s, 1H), 4.34 - 4.20 (m, 1H), 4.02 (t, J=7.5 Hz, 4H), 3.77 - 3.60 (m, 4H), 3.59 -3.34 (m, 5H), 2.42 - 2.22 (m, 3H), 2.09 - 1.93 (m, 1H), 1.79 - 1.59 (m, 4H)

m/z = 539.3 (M+H)+

Etapa 2: síntesis de N-(4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡din-1-¡l)-6-cloroqu¡nazol¡n-2-il)metanosulfonamida P32

Se mezclaron en dioxano (10 mL) el intermedio 45 (750 mg, 1.39 mmol), metanosulfonamida (264 mg, 2.781 mmol), carbonato de cesio (cas = 534-17-8, 1132 mg, 3.476 mmol), 4,5-bis(d¡fen¡lfosf¡no)-9,9-d¡met¡lxanteno (cas = 161265­ 03-8, 241 mg, 0.417 mmol) y acetato de paladio(II) (cas = 3375-31-3, 94 mg, 0.417 mmol). La suspensión se desgasificó con N2 durante 10 min. El recipiente de reacción se selló y a continuación, se calentó a 110 °C durante 30 min en un horno de microondas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se evaporó a sequedad para purificarlo mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones de interés, los autores obtuvieron el producto del título P32 como un sólido marrón (507 mg, 59%).

m/z = 598.2 (M+H)+

1H RMN (400MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12.06 (s a, 1H), 8.13 - 7.91 (m, 1H), 7.76 (dd, J=2.2, 9.0 Hz, 1H), 7.41 (d, J=8.8 Hz, 1H), 6.38 - 5.80 (m, 2H), 5.37 (s, 1H), 4.56 - 4.30 (m, 1H), 4.03 (t, J=7.5 Hz, 4H), 3.79 - 3.64 (m, 4H), 3.60 - 3.35 (m, 5H), 3.11 - 2.87 (m, 3H), 2.44 - 2.25 (m, 3H), 2.09 - 1.89 (m, 1H), 1.82 - 1.60 (m, 4H)

Etapa 3: síntesis de (S)-A/-(4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1,5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡perid¡n-1-¡l)-6-cloroquinazol¡n-2-¡l)metanosulfonam¡da P33 y (ffl-N-(4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1,5-a1p¡rim¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-6-cloroquinazol¡n-2-¡l)metanosulfonam¡da P34

El compuesto P32 (400 mg, 0.669 mmol) se purificó mediante SFC para obtener el compuesto el título, el enantiómero puro P33, como un sólido amarillento (173 mg, 43%) y el enantiómero puro p34, como un sólido amarillento (187 mg, 46%).

P33, SFC: 100% puro, tR = 1.94 min

m/z = 598.2 (M+H)+

P34, SFC: 98.65% puro, 1.35% tR = 1.89 min y 98.65% tR = 2.74 min.

m/z = 598.2 (M+H)+

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-M)-2-(1-(5-doroqumazoMn-4-M)piperidm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-M)morfolma P35

A una solución del intermedio 8 (300 mg, 0.63 mmol) en 2-metoxietanol (20 mL) se añadió 4,5-dicloroquinazolina 46 (CAS: 2148-55-2, 1.1 eq., 139 mg, 0.7 mmol) y DIPEA (3 eq., 0.33 mL, 1.9 mmol). La solución se calentó a 80 °C durante 16 h. La solución se concentró al vacío, se extrajo con DCM y se lavó con agua. Se recogieron las fases orgánicas combinadas, se secaron con MgSO4, se separaron por filtración y se concentraron al vacío. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en DCM. Después de evaporar, se obtuvo el compuesto P35 (190 mg, 57%).

LCMS m/z = 505 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1.48 - 1.90 (m, 4 H) 2.22 - 2.35 (m, 4 H) 3.43 - 3.56 (m, 5 H) 3.64 - 3.76 (m, 4 H) 3.84 (d, J=13.89 Hz, 1 H) 3.93 - 4.04 (m, 4 H) 5.18 (s, 1 H) 5.62 (s, 1 H) 5.66 (s a, 1 H) 7.51 (dd, J=7.16, 1.61 Hz, 1 H) 7.61 - 7.66 (m, 1 H) 7.67 - 7.70 (m, 1 H) 8.45 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-morfolmopirazolo[1,5-3]pirimidm-2-N)piperidm-1-M)-W-(W,W-dimetilsulfamoil)quinazolino-2-carboxamida P36

Etapa 1: síntesis de 4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡din-1-¡l)qu¡nazol¡no-2-carboxilato de etilo 48

A una solución del intermedio 8 (1.2 g. 3.4 mmol) en 2-metoxietanol (40 mL) se añadió 4-cloroquinazolino-2-carboxilato de etilo 47 (0.97 g. 4.06 mmol) y DIPEA (3 eq., 1.75 mL. 10 mmol). La solución se agitó a 80 °C durante 48 h. Después de enfriar hasta a temperatura ambiente. la solución se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en DCM para obtener el intermedio 48 (998 mg. 75% puro. 40% de rendimiento) el cual se utilizó tal cual en la siguiente etapa.

LCMS m/z = 543 (M+H)+

Etapa 2: síntesis del ácido 4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡perid¡n-1-¡l)qu¡nazol¡no-2-carboxílico 49

A una solución del intermedio 48 (998 mg. 75% puro. 1.3 mmol) en 25 mL de THF/agua (3/1). se añadió LiOH (3 eq..

93 mg. 3.9 mmol). La solución se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h. A continuación. se ajustó el pH de la solución a 6 y la mezcla se concentró al vacío para obtener intermedio 49 (828 mg. 76% puro. 94% de rendimiento) el cual se utilizó tal cual en la siguiente etapa.

LCMS m/z = 515 (M+H)+

Etapa 3: síntesis de 4-(2-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-7-morfol¡nop¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡perid¡n-1-¡l)-N-(N.N-d¡met¡lsulfamoil)qu¡nazol¡no-2-carboxam¡da P36

A una solución del intermedio 49 (300 mg. 0.37 mmol) se añadió CDI (120 mg. 0.73 mmol) en 3 mL de una solución de THF/DMF (1/1). La solución se calentó hasta 50 °C y se agitó durante una hora. Se añadieron N.N-dimetilsulfamida (136 mg. 1.1 mmol) y DBU (0.165 mL. 1.1 mmol) a la solución y se agitó durante una hora más a 50 °C. La solución se extrajo con DCM y se lavó con agua. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4 y se concentraron al vacío. El crudo se purificó después mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10 % de MeOH en dCm . Después de la evaporación. se añadió agua al crudo y el sólido se separó por filtración y se secó en el horno para generar el compuesto P36 (53 mg. 22%) como un sólido blanco.

LCMS m/z = 621 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. 360 K. DMSO-d6) 8 ppm 1.69 - 1.81 (m. 4 H) 2.02 - 2.13 (m. 1 H) 2.26 - 2.35 (m. 3 H) 2.35 - 2.42 (m. 1 H) 2.90 (s. 6 H) 3.49 - 3.57 (m. 5 H) 3.62 - 3.72 (m. 4 H) 4.01 (t. J=7.48 Hz. 4 H) 4.37 (d. J=13.42 Hz. 1 H) 5.27 (s. 1 H) 5.94 (s. 1 H) 6.05 (s a. 1 H) 7.57 - 7.61 (m. 1 H) 7.83 - 7.88 (m. 1 H) 7.93 (dd. J=8.36. 1.10 Hz. 1 H) 8.15 (d. J=8.58 Hz. 1 H)

Síntesis de 1-(2-(1-(2, 5-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-3]pirimidin-5-il)azetidin-3-ol P37

Etapa 1: síntesis de 4-(2-(5-cloro-6-met¡lp¡razoloH.5-alp¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-2.5-d¡met¡lqu¡nazol¡na 50

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 19 (200 mg. 0.58 mmol) en 2-metox¡etanol (40 mL) se añad¡ó 4-cloro-2,5-d¡met¡lqu¡nazol¡na 40 (1 eq., 114 mg. 0.58 mmol. n.° CAS 147006-57-3) y DIPEA (3 eq.. 0.3 mL. 1.7 mmol). La soluc¡ón se calentó a 80 °C durante 16 h. Después de enfr¡ar hasta la temperatura amb¡ente. la soluc¡ón se concentró al vacío y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna eluyendo con un grad¡ente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en dCm . Tras la evaporac¡ón. el crudo se pur¡f¡có con éter d¡etíl¡co para obtener el ¡ntermed¡o 50 (140 mg. 90% puro. 53% de rend¡m¡ento). El sól¡do se ut¡l¡zó tal cual en la s¡gu¡ente etapa.

LCMS m/z = 407 (M+H)+

Etapa 2: síntes¡s de 1-(2-(1-(2.5-d¡met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)-6-met¡lp¡razolor1.5-alp¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol P37

El ¡ntermed¡o 50 (140 mg. 0.31 mmol) se d¡solv¡ó en 5 mL de EtOH a la temperatura amb¡ente. A cont¡nuac¡ón. se añad¡eron clorh¡drato de azet¡d¡n-3-ol (68 mg. 0.62 mmol) y DIPEA (0.16 mL. 0.92 mmol). La soluc¡ón se calentó a reflujo durante 16 h. A cont¡nuac¡ón. la mezcla se concentró al vacío y se añad¡ó agua/EtOH (3/1). el sól¡do resultante se separó por f¡ltrac¡ón y se secó en el horno para obtener el compuesto P37 (65 mg. 48%).

LCMS m/z = 444 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. 420 K. DMSO-d6) 8 ppm 1.41 - 1.70 (m. 3 H) 1.76 - 1.89 (m. 1 H) 2.12 (d. J=0.81 Hz. 3 H) 2.23 -2.33 (m. 2 H) 2.49 (s. 3 H) 2.75 (s. 3 H) 3.53 - 3.64 (m. 2 H) 3.94 (dd. J=9.69. 4.04 Hz. 2 H) 4.36 (t. J=8.10 Hz. 2 H) 4.48 - 4.56 (m. 1 H) 5.74 (s a. 1 H) 5.79 (s a. 1 H) 7.27 (d. J=7.27 Hz. 1 H) 7.43 - 7.54 (m. 1 H) 7.55 - 7.63 (m. 1 H) 8.12 (s. 1 H)

El compuesto P37 (400 mg. 0.669 mmol) se pur¡f¡có med¡ante SFC para obtener el compuesto del título. el enant¡ómero puro P38 (44 mg):

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.47 - 1.77 (m. 4 H) 1.86 - 2.00 (m. 1 H) 2.13 (d. J=0.66 Hz. 3 H) 2.25 - 2.43 (m. 4 H) 2.50 (s. 3 H) 3.32 - 3.46 (m. 1 H) 3.92 (dd. J=9.79. 4.73 Hz. 2 H) 4.20 (d. J=12.76 Hz. 1 H) 4.28 - 4.42 (m. 2 H) 4.43 - 4.57 (m. 1 H) 5.65 (d. J=6.16 Hz. 1 H) 5.78 (s a. 1 H) 5.96 (s. 1 H) 7.56 (dd. J=8.80. 1.76 Hz. 1 H) 7.60 (d. J=8.36 Hz. 1 H) 7.76 (s. 1 H) 8.45 (s. 1 H)

y el enant¡ómero puro P39 (55 mg):

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6 ) 8 ppm 1.45 - 1.77 (m. 4 H) 1.89 - 2.03 (m. 1 H) 2.15 (s. 3 H) 2.28 - 2.43 (m. 4 H) 2.51 (s a. 3 H) 3.35 - 3.47 (m. 1 H) 3.94 (dd. J=9.79. 4.73 Hz. 2 H) 4.23 (d. J=12.76 Hz. 1 H) 4.38 (t. J=8.80 Hz. 2 H) 4.45 - 4.62 (m. 1 H) 5.62 (s a. 1 H) 5.83 (s a. 1 H) 5.98 (s. 1 H) 7.57 (dd. J=8.58. 1.32 Hz. 1 H) 7.62 (d. J=8.58 Hz. 1 H) 7.78 (s. 1 H) 8.46 (s. 1 H).

Síntesis de W-(4-(2-(5-(3-h¡drox¡azet¡dm-1-M)-6-met¡lp¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-2-¡l)p¡per¡dm-1-M)-5-metilquinazolin-2-il)metanosulfonamida P41

Etapa 1: síntesis de 1-(6-met¡l-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol 51

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 19 (4.1 g. 11.9 mmol) en EtOH (50 mL) se añad¡ó clorh¡drato de azet¡d¡n-3-ol (1.04 g.

14.3 mmol. 1.2 eq.) y DIPEA (10.2 mL. 60 mmol. 5 eq.) y la soluc¡ón se calentó a reflujo durante toda la noche. Tras enfr¡ar hasta la temperatura amb¡ente. la soluc¡ón se concentró al vacío. El crudo se d¡solv¡ó en DCM/MeOH (9/1) y las sales se separaron por f¡ltrac¡ón. El f¡ltrado se concentró al vacío y se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna (DCM/NH3(MeOH 7 N): 9/1) para obtener el ¡ntermed¡o 51 (1.9 g. 56%).

LCMS m/z = 288 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 1.56 - 1.84 (m. 5 H) 1.96 - 2.07 (m. 1 H) 2.16 (d. J=0.88 Hz. 3 H) 2.82 - 2.96 (m.

1 H) 3.16 - 3.23 (m. 1 H) 3.95 (dd. J=9.57. 4.95 Hz. 2 H) 4.12 (dd. J=11.11. 2.97 Hz. 1 H) 4.34 -4.44 (m. 2 H) 4.48 -4.58 (m. 1 H) 6.16 (s. 1 H) 8.40 (s. 1 H).

Etapa 2: síntes¡s de 1-(2-(1-(2-cloro-5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)-6-met¡lp¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-5-¡l)azet¡d¡n-3-ol P40

A una soluc¡ón del ¡ntermed¡o 51 (500 mg. 1.74 mmol) en 2-metox¡etanol (30 mL) se añad¡eron 2.4-d¡cloro-5-met¡lqu¡nazol¡na 14 (1.2 eq.. 808 mg. 2.08 mmol) y DIPEA (3 eq.. 0.9 mL. 5.2 mmol). La soluc¡ón se ag¡tó a 50 °C durante 2 h. la mezcla se concentró al vacío. se extrajo con DCM y se lavó con agua. Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron con MgSO4 y se concentraron al vacío. El crudo se pur¡f¡có después med¡ante HPLC para obtener el compuesto del título P40 (130 mg. 16%).

LCMS m/z = 464 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 1.39 - 1.55 (m. 1 H) 1.55 - 1.70 (m. 2 H) 1.73 - 1.89 (m. 1 H) 2.05 -2.20 (m. 4 H) 2.23 - 2.32 (m. 1 H) 3.43 - 3.70 (m. 2 H) 3.89 - 3.98 (m. 2 H) 4.32 - 4.41 (m. 2 H) 4.47 - 4.56 (m. 1 H) 5.06 - 5.18 (m.

1 H) 5.59 - 5.68 (m. 1 H) 5.68 -5.79 (m. 1 H) 7.25 - 7.33 (m. 1 H) 7.44 -7.52 (m. 1 H) 7.58 -7.66 (m. 1 H) 8.11 -8.19 (m. 1 H)

Etapa 3: síntes¡s de A/-(4-(2-(5-(3-h¡drox¡azet¡d¡n-1-¡l)-6-met¡lp¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-1-¡l)-5-met¡lqu¡nazol¡n-2-¡l)metanosulfonam¡da P41

A una soluc¡ón del compuesto P40 (130 mg. 0.28 mmol) en 1.4-d¡oxano (5 mL) se añad¡ó metanosulfonam¡da (2 eq..

53 mg. 0.56 mmol). carbonato de ces¡o (2.5 eq.. 0.7 mmol. 228 mg). 4.5-b¡s(d¡fen¡lfosf¡no)-9.9-d¡met¡lxanteno (0.3 eq..

48.6 mg. 0.084 mmol) y Pd(OAc)2 (0.3 eq.. 18.87 mg. 0.084 mmol) en un tubo sellado. La mezcla se calentó hasta 120 °C durante 5 m¡n en un m¡croondas. La soluc¡ón se f¡ltró sobre d¡cal¡te. se lavó con d¡clorometano y se concentró al vacío. El crudo se pur¡f¡có después med¡ante HPLC para obtener el compuesto P41 (42 mg. 30%) como un polvo blanco.

LCMS m/z = 523 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. 420 K. DMSO-d6) 8 ppm 1.46 (m. J=9.46 Hz. 1 H) 1.62 (m. 2 H) 1.80 (m. 1 H) 2.07 - 2.18 (m. 4 H) 2.24 - 2.36 (m. 1 H) 2.63 (s. 3 H) 2.97 (s. 3 H) 3.57 (m. 1 H) 3.68 - 3.80 (m. 1 H) 3.90 - 3.98 (m. 2 H) 4.33 - 4.41 (m. 2 H) 4.45 - 4.59 (m. 1 H) 5.05 (s a. 1 H) 5.82 (s a. 1 H) 5.94 (s a. 1 H) 7.05 (d. J=7.04 Hz. 1 H) 7.22 (d. J=8.14 Hz.

1 H) 7.47 (t. J=7.05 Hz. 1 H) 8.16 (s. 1 H) 9.88 - 11.04 (m. 1 H).

Síntesis de 1-(2-(1- (2,6-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-ol P42

Síntesis de 4-doro-2,6-dimetilquinazolina 52

Etapa 1: síntesis de 2.6-dimet¡lqu¡nazol¡n-4-ol 52-b

Se disolvió el ácido 2-amino-5-metilbenzoico 52-a (8 g. 53 mmol) en anhídrido acético (80 mL) se calentó a 130 °C durante 2 h. A continuación. la solución se concentró al vacío para obtener el intermedio sólido que se disolvió después en una solución de EtOH (100 mL) y NH3 H2O (80 mL) y se calentó hasta 80 °C. Después de 48 h. la solución se enfrió. el sólido se separó por filtración y se secó en el horno para obtener 2.6-dimetilquinazolin-4-ol 52-b (6.3 g. 70%).

LCMS m/z = 175 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-d6) 8 ppm 2.32 (s. 3 H) 2.41 (s. 3 H) 7.46 (d. J=8.36 Hz. 1 H) 7.56 (dd. J=8.14. 1.98 Hz. 1 H) 7.76 -7.92 (m. 1 H) 11.91 (s a. 1 H)

Etapa 2: síntesis de 4-cloro-2.6-d¡met¡lqu¡nazol¡na 52

A una solución de 2.6-dimetilquinazolin-4-ol 52-b (500 mg. 2.87 mmol) en tolueno (10 mL) se añadió DIPEA (0.989 mL. 5.74 mmol. 2 eq.) y POCh (0.4 mL. 4.3 mmol. 1.5 eq.). La solución se calentó hasta 80 °C y se agitó durante 2 h. La mezcla se concentró al vacío y se diluyó con diclorometano; después. se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO3. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4. se concentraron al vacío y se purificaron por cromatografía en columna (heptano/EtOAc: 1/1) para obtener el intermedio 52 (300 mg. 90% de pureza. 48%).

LCMS m/z = 193 (M+H)+

Etapa 3: síntesis de 1-(2-(1-(2.6-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazoloH.5-alpirimidin-5-il)azetidin-3-ol P42

Se añadió el intermedio 51 (240 mg. 0.83 mmol) a una solución de 4-cloro-2.6-dimetilquinazolina 52 (1.7 eq.. 300 mg.

1.4 mmol) y DIPEA (3 eq. 0.43 mL. 2.5 mmol) en 2-metoxietanol (5 mL). La solución se calentó a 140 °C y se agitó durante 16 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente. la mezcla se extrajo con DCM y se lavó con agua. Se recogieron las fases orgánicas combinadas y se secaron con MgSO4. se separaron por filtración y se concentraron al vacío. El crudo se purificó después mediante HPLC para obtener el compuesto P42 (167 mg. 45%). LCMS m/z = 444 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. DMSO-cfe) 8 ppm 1.56 - 1.75 (m. 4 H) 1.88 - 2.02 (m. 2 H) 2.14 (s. 3 H) 2.34 (s. 1 H) 2.39 (s. 3 H) 3.94 (dd. J=9.46. 5.28 Hz. 2 H) 4.20 (d. J=12.76 Hz. 1 H) 4.37 (t. J=8.10 Hz. 2 H) 4.51 (s a. 1 H) 5.54 - 5.72 (m. 1 H) 5.81 (s a. 1 H) 5.96 (s. 1 H) 7.53 - 7.63 (m. 2 H) 7.77 (s. 1 H) 8.45 (s. 1 H)

Síntesis de (S)-1-(2-(1-(2,6-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)-6-metilpirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)azetidin-3-ol P43 y (R)-1-(2-(1-(2,6-d¡metMqumazolm-4-¡l)p¡pe^Ndm-2-M)-6-metMp¡razolo[1,5-a]pmm¡dm-5-¡l)azet¡dm-3-ol P44

Se realizó una purificación adicional mediante SFC prep. (fase estacionaria: chiralpak Diacel AS 20 x250 mm, fase móvil: CO2, EtOH con un 0.2% de iPrNH2) para obtener ambos enantiómeros relativos:

P43:

LCMS m/z = 444 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.68 (s, 4 H) 1.89 - 2.03 (m, 1 H) 2.15 (s, 3 H) 2.28 - 2.43 (m, 4 H) 2.51 (s a, 3 H) 3.35 - 3.47 (m, 1 H) 3.94 (dd, J=9.79, 4.73 Hz, 2 H) 4.23 (d, J=12.76 Hz, 1 H) 4.38 (t, J=8.80 Hz, 2 H) 4.45 - 4.62 (m, 1 H) 5.62 (s a, 1 H) 5.83 (s a, 1 H) 5.98 (s, 1 H) 7.57 (dd, J=8.58, 1.32 Hz, 1 H) 7.62 (d, J=8.58 Hz, 1 H) 7.78 (s, 1 H) 8.46 (s, 1 H)

P44:

LCMS m/z = 444 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 1.47 - 1.77 (m, 4 H) 1.86 -2.00 (m, 1 H) 2.13 (d, J=0.66 Hz, 3 H) 2.25 -2.43 (m, 4 H) 2.50 (s, 3 H) 3.32 - 3.46 (m, 1 H) 3.92 (dd, J=9.79, 4.73 Hz, 2 H) 4.20 (d, J=12.76 Hz, 1 H) 4.28 - 4.42 (m, 2 H) 4.43 - 4.57 (m, 1 H) 5.65 (d, J=6.16 Hz, 1 H) 5.78 (s a, 1 H) 5.96 (s, 1 H) 7.56 (dd, J=8.80, 1.76 Hz, 1 H) 7.60 (d, J=8.36 Hz, 1 H) 7.76 (s, 1 H) 8.45 (s, 1 H)

P43: [a]D20 = 295.23° (589 nm, c = 0.377% p/v, DMF, 20 °C)

P44: [a]D20 = -269.05° (589 nm, c = 0.378% p/v, DMF, 20 °C)

Síntesis de (4-(2-(5-(azetidm-1-N)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-N)piperidm-1-N)-5-metNqumazoNn-2-ol P45

Una solución del intermedio 15 (100 mg, 0.193 mmol) en ácido acético (2 mL) se calentó a 70 °C durante 3 h. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se añadió agua. La mezcla resultante se diluyó con diclorometano y se lavó con una solución acuosa de bicarbonato de sodio. Las fases orgánicas se secaron con MgSO4 y el disolvente se evaporó para generar el producto P45 (80 mg, 80%).

m/z = 501.6 (M+H)+

PF = 223.59°C

1H RMN at 100°C (400MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 10.31 (s a, 1H), 7.35 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.02 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.90 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.24 -5.34 (m, 2H), 5.24 (s, 1H), 4.10 -3.43 (m, 14H), 2.65 (s, 3H), 2.37 -2.06 (m, 4H), 1.89 - 1.39 (m, 4H)

Síntesis de (4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolino-2-carboxamida P46

A una solución del intermedio 43 (100 mg, 0.17 mmol) en DMF (5 mL) se añadieron 10 mL de NaOH (1 M en H2O) en un tubo sellado. La solución se calentó hasta 130 °C durante 10 min en un microondas. A continuación, se ajustó el pH de la solución a 6-7 con una solución acuosa 1 M de ácido clorhídrico. La solución se extrajo después con DCM y las fases orgánicas combinadas se lavaron con una solución saturada de NaHCO3 y salmuera. La fase orgánica se secó después con MgSO4 y se concentró al vacío. El material resultante se purificó mediante HPLC para obtener el compuesto P46 (68 mg, 73%).

LCMS m/z = 528 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.14 -1.87 (m, 4 H) 1.98 -2.41 (m, 4 H) 2.84 (s, 3 H) 3.19 -3.27 (m, 2 H) 3.40 -3.83 (m, 7 H) 3.85 - 4.28 (m, 5 H) 5.12 - 5.44 (m, 2 H) 5.87 (s, 1 H) 7.38 - 7.50 (m, 1 H) 7.55 - 7.81 (m, 3 H) 7.89 -8.03 (m, 1 H).

Síntesis de 4-(5-cidopropM-6-metM-2-(1-(5-metMqumazoMn-4-M)piperidm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P47

Etapa 1: síntesis de 5-ciclopropil-6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-7-ol 54

A una solución del intermedio 4 (16 g, 60 mmol) en ácido acético (100 mL) se añadió 3-ciclopropil-2-metil-3-oxopropanoato de metilo 53 (30 g, 180 mmol). La mezcla resultante se agitó a 100 °C durante toda la noche.

La mezcla resultante se concentró al vacío y el residuo (46 g, 98%) se utilizó tal cual en la siguiente etapa.

Etapa 2: síntesis de 7-cloro-5-ciclopropil-6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidina 55

La mezcla del intermedio 54 (45 g, 79 mmol) y tricloruro de fosforilo (220 g) se agitó a 110 °C durante una hora. Se eliminó el disolvente y el residuo se disolvió en una solución de hielo-agua y se basificó añadiendo carbonato de sodio (19.8 g, 238 mmol). Esta solución se utilizó tal cual en la siguiente etapa.

Etapa 3: síntesis de 4-(5-ciclopropil-6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina 56

A la solución del intermedio 55 se añadieron acetonitrilo (250 mL) y morfolina (20.7 g, 238 mmol). La mezcla resultante se calentó a reflujo durante toda la noche. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se eliminó el disolvente al vacío. La solución acuosa resultante se extrajo con diclorometano, las fases orgánicas se secaron con Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna utilizando diclorometano y metanol como eluyente. Se aisló el intermedio 56 (2 g, 7%).

E tap a 4: s ín te s is de 4 -(5 -c ic lo p ro p il-6 -m e til-2 -(1 -(5 -m e tilq u in a z o lin -4 -il)p ip e rid in -2 -il)p ira z o lo r1 ,5 -a 1 p irim id in -7 -^{¡l)m orfo lina} P47

A una solución del intermedio 56 (200 mg, 0.56 mmol) en 5 mL de 2-metoxietanol se añadió 4-cloro-5-metilquinazolina 26 (1.2 eq., 126 mg, 0.67 mmol) y DIPEA (3 eq., 0.289 mL, 1.68 mmol). La solución se agitó a 80 °C durante 48 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC para obtener el producto del título P47 (110 mg, 41%).

LCMS m/z = 484 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 0.90 - 1.11 (m, 4 H) 1.50 - 1.61 (m, 1 H) 1.61 - 1.76 (m, 2 H) 1.80 - 1.92 (m, 1 H) 2.07 - 2.18 (m, 1 H) 2.20 - 2.32 (m, 2 H) 2.35 (s, 3 H) 2.84 (s, 3 H) 3.28 - 3.40 (m, 4 H) 3.47 - 3.65 (m, 2 H) 3.66 - 3.78 (m, 4 H) 5.56 - 5.67 (m, 1 H) 6.00 (s a, 1 H) 7.30 (d, J=6.46 Hz, 1 H) 7.55 - 7.66 (m, 2 H) 8.46 (s, 1 H) Síntesis de (3S)-1-(6-metil-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-amina P48

Etapa 1: síntesis de 2-(5-hidroxi-6-metilpirazolor1,5-a1pirimidin-2-il)piperidino-1-carboxilato de ted-butilo 58

A una solución del intermedio 4 (14.43 g, 54.18 mmol) en DMF (270 mL), se añadieron (£)-3-etoxi-2-metilacrilato de etilo 57 (9.00 g, 56.9 mmol) y Cs2CO3 (26.48 g, 81.27 mmol). La mezcla resultante se agitó a 130 °C durante 12 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió sucesivamente con acetato de etilo (300 mL), se lavó con una solución acuosa saturada de NH4Cl, con salmuera y se secó con Na2SO4. Después de filtrar, el filtrado se concentró al vacío hasta un volumen de 100 mL. Después de 16 h, el precipitado se separó por filtración. La masa retenida sobre el filtro se lavó con acetato de etilo (2 x 30 mL) y se secó (al vacío, 45 °C, 1 h) para obtener el intermedio 58 (11.80 g, 65.52%).

Etapa 2: síntesis de 5-cloro-6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidina 59

Una mezcla del intermedio 58 (11.80 g, 35.50 mmol) y tricloruro de fosforilo (178 mL) se agitó a 80 °C durante 1 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en acetonitrilo (200 mL). La mezcla se neutralizó con amoniaco (7 M en metanol) hasta un pH = 7-8. El precipitado se separó por filtración y se concentró el filtrado. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna flash de gel de sílice (eluyente: diclorometano/1 % de NH3 en metanol 10/1). Las fracciones recogidas se concentraron para obtener el intermedio 59 (3.715 g, 40.44%).

Etapa 3: síntesis de ((3S)-1-(6-metil-2-(piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)carbamato de ted-butilo 61

La solución del intermedio 59 (3.58 g, 10.0 mmol, 70% de pureza), (S)-pirrolidin-3-ilcarbamato de ted-butilo 60 (2.33 g, 12.5 mmol) y Et3N (3.04 g, 30.0 mmol) en MeOH (50 mL) se agitó durante toda la noche a 70 °C. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en CH2O 2 y se lavó con salmuera. La fase orgánica separada se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de sílice (eluyente: CH2Cl2/MeOH, 10:1). Después de la concentración, el producto crudo se purificó con CH3CN. El sólido se filtró y se lavó con CH3CN para obtener el intermedio del título 62(768 mg, 12% de rendimiento).

1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 1.45 (s, 9 H) 1.62 (m, 1 H) 1.90 (m, 3 H) 2.16 (m, 3 H) 2.26 (s, 3 H) 3.12 (m, 1 H) 3.47 (m, 1 H) 3.49 (s, 3 H) 3.65 (m, 1 H) 3.72 (m, 1 H) 3.84 (m, 1 H) 4.26 (m, 1 H) 4.37 (m, 1 H) 4.90 (d, 1 H, J=6.8 Hz) 6.39 (s, 1 H) 7.99 (d, 1 H, J=4.8 Hz).

Etapa 4: síntesis de ((3S)-1-(6-metil-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolor1,5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-ilcarbamato de ted-butilo 62

El intermedio 61 (300 mg, 0.694 mmol), 4-cloro-5-metilquinazolina 26 (170 mg, 0.902 mmol) y la base de Hunig (395 ^|j L, 2.291 mmol) se mezclaron en 2-metoxietanol (4.7 mL) y se calentaron a 80 °C durante 2 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se añadió lentamente a una solución de agua helada. La suspensión se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. El precipitado se separó por filtración, se lavó con agua y a continuación, se secó en el horno al vacío durante 16 h. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de MeOH y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones puras, los autores obtuvieron el crudo del intermedio del título 62 (238 mg).

m/z = 543.4 (M+H)+

Etapa 5: síntesis de (3S)-1-(6-metil-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolor1.5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-amina P48

El intermedio 62 (238 mg. 0.386 mmol) se disolvió en DCM (2.5 mL) y se añadió ácido trifluoroacético (295 j L.

3.859 mmol). La mezcla se agitó a la temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se añadió gota a gota a una solución enfriada saturada de NaHCO3. El producto se extrajo con DCM (3 veces). Las fases orgánicas se secaron con Na2SO4. se filtraron y se evaporaron a sequedad. El crudo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de dCm hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones puras. se aisló una espuma amarilla. La espuma se purificó con éter dietílico para obtener el producto del título P48 como un sólido blanco (152 mg. 85%).

1H RMN (400MHz. DMSO-d6) 8 ppm 8.46 (s. 1H). 8.15 (s. 1H). 7.68 - 7.51 (m. 2H). 7.29 (d. J=6.4 Hz. 1H). 5.79 -5.42 (m. 2H). 3.85 -3.19 (m. 7H). 2.80 -2.75 (m. 3H). 2.28 (s. 3H). 2.25 - 1.28 (m. 8 H)

m/z = 443.3 (M+H)+

PF = 124.92°C

Síntesis de (3S)-1-(2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-5-il)pirrolidin-3-amina P49

Etapa 1: síntesis de 2-(5-hidroxipirazolor1.5-a1pirimidin-2-il)piperidino-1-carboxilato de ted-butilo 64

A una solución del intermedio 4 (5.00 g. 18.8 mmol) y 1.3-dimetilpirimidina-2.4(1H.3H)-diona 63 (2.90 g. 20.7 mmol) en etanol (50 mL) se añadió etóxido de sodio (22 mL. 66 mmol). La solución resultante se calentó a reflujo durante toda la noche. El disolvente se evaporó al vacío. Se añadió agua al residuo y el pH de se ajustó a 4-5 con HCl (1 N). La mezcla se extrajo con acetato de etilo. la fase orgánica se lavó con salmuera. se secó con Na2SO4. se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 64 crudo (5 g. 75%).

Etapa 2: síntesis de 5-cloro-2-(piperidin-2-il)pirazolor1.5-a1pirimidina 65

Una mezcla del intermedio 64 (5 g. 15.7 mmol) en POCl3 (50 mL) se agitó a 100 °C durante 2 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se lavó con éter ted-butil metílico para generar el intermedio 65 (4.5 g. 19 mmol).

Etapa 3: síntesis de ((3S)-1-(2-(piperidin-2-il)pirazolor1.5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-il)carbamato de ted-butilo 66 Se calentó a reflujo durante toda la noche una mezcla del intermedio 65 (4.5 g. 19 mmol). (S)-butilpirrolidin-3-ilcarbamato de ted-butilo 60 (7.0 g. 38 mmol) y trietilamina (7.7 g. 76 mmol) en metanol (50 mL). La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se disolvió en CH3CN y se agitó con K2CO3 (5.0 g. 38 mmol). La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se trató con H2O y CH2O 2. La fase orgánica separada se secó con Na2SO4. se filtró y se concentró al vacío para obtener el intermedio 66 (1.65 g. 22%).

1H RMN (400 MHz. CDCla) 8 ppm 1.45 (s. 9 H) 1.51-1.72 (m. 1 H) 1.83-1.93 (m. 2 H) 1.94-2.07 (m. 3 H) 2.20-2.39 (m. 1 H) 2.73-2.93 (m. 1 H) 3.11-3.28 (m. 1 H) 3.35-3.49 (m. 1 H) 3.53-3.74 (m. 1 H) 3.75-3.95 (m. 1 H) 4.24-4.45 (m.

1 H) 4.59-4.90 (m. 1 H) 5.96-6.19 (m. 1 H) 8.12-8.30 (m. 1 H).

Etapa 4: síntesis de ((3S)-1-(2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolor1.5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-ilcarbamato de ted-butilo 67

El intermedio 66 (250 mg, 0.624 mmol), 4-cloro-6-metilquinazolina 12 (145 mg, 0.811 mmol) y DIPEA (355 j L, 2.058 mmol) se mezclaron en 2-metoxietanol (4.2 mL) y se calentaron a 80 °C durante 16 h y a 90 °C durante 1 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la mezcla de reacción se añadió lentamente a agua helada. La suspensión se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. El precipitado marrón se separó por filtración, se lavó con agua y a continuación, se secó en el horno a vacío durante 16 h. El crudo del intermedio del título 67 (250 mg) se utilizó tal cual en la siguiente etapa.

m/z = 529.4 (M+H)+

Etapa 5: síntesis de (3S)-1-(2-(1-(6-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-5-il)pirrolidin-3-amina P49

El intermedio 67 (250 mg, 0.473 mmol) se disolvió en DCM (3.0 mL) y se añadió ácido TFA (362 j L, 4.729 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 h. La mezcla de reacción se desactivó con una solución saturada de Na2CO2 y el producto se extrajo 3 veces con DCM. Las fases orgánicas se evaporaron y el producto se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones puras, los autores obtuvieron el producto deseado P49 como una espuma amarilla (122 mg, 56%).

m/z = 429.3 (M+H)+

1H RMN (400MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 8.63 - 8.53 (m, 2H), 7.82 (s a, 1H), 7.71 (d, J=8.6 Hz, 1H), 7.63 (dd, J=1.5, 8.6 Hz, 1H), 6.30 (d, J=7.7 Hz, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.84 - 5.77 (m, 1H), 4.29 - 4.17 (m, 1H), 3.72 - 2.99 (m, 6 H), 2.47 -1.58 (m, 13H)

1H RMN at 100°C (400MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 8.52 (s, 1H), 8.42 (dd, J=0.7, 7.7 Hz, 1H), 7.86 - 7.81 (m, 1H), 7.68 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J=1.8, 8.6 Hz, 1H), 6.24 (d, J=7.7 Hz, 1H), 5.86 (s, 1H), 5.84 - 5.79 (m, 1H), 4.26 - 4.18 (m, 1H), 3.66 - 3.43 (m, 5H), 3.19 - 3.12 (m, 1H), 2.42 (s, 3H), 2.40 - 2.30 (m, 1H), 2.14 - 1.92 (m, 3H), 1.86 - 1.59 (m, 6 H)

Síntesis de (S)-1-(2-((R)-1-(6-met¡lqumazolm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-5-¡l)p¡rrol¡dm-3-amma P50

El producto P49 (100 mg, 0.233 mmol) se purificó mediante SFC para obtener el compuesto del título P50 (51 mg, 51%), enantiómero puro, como un sólido blanquecino.

SFC: 100% puro con tR = 2.64 min

m/z = 429.2 (M+H)+

P50: [a]o20 = -268.64° (589 nm, c = 0.354% p/v, DMF, 20 °C)

Síntes¡s de (S)-1-(2-((S)-1-(6-met¡lqumazolm-4-¡l)p¡per¡dm-2-¡l)p¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-5-¡l)p¡rrol¡dm-3-amma P51

El producto P49 (100 mg, 0.233 mmol) se purificó mediante SFC para obtener el compuesto del título P51 (17 mg, 17%), enantiómero puro, como un sólido blanquecino.

SFC: 100% puro con tR = 3.68 min

m/z = 429.3 (M+H)+

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)piperazino-1-carboxilato de íerí-butilo P52

Etapa 1: síntesis de 4-(5-cloro-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)p¡peraz¡no-1-carbox¡lato de tert-but¡lo 69 Una mezcla del ¡ntermed¡o 6 (40.0 g. 125 mmol). p¡peraz¡no-1-carbox¡lato de tert-but¡lo 68 (25.7 g. 138mmol) y NaHCO3 (26.30 g. 313.5 mmol) en CH3CN (300 mL) y H2O (300 mL) se ag¡tó a la temperatura amb¡ente durante 1 h. El d¡solvente se concentró al vacío. El concentrado se trató con CH2O 2 (500 mL). La fase orgán¡ca separada se lavó con salmuera (200 mL). se f¡ltró y se concentró al vacío para obtener el ¡ntermed¡o del título 69 (40 g. rend¡m¡ento: 68 %).

Etapa 2: síntes¡s de 4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)p¡peraz¡no-1-carbox¡lato de tertbutílo 70

Se calentó a reflujo durante toda la noche una mezcla del ¡ntermed¡o 69 (40 g. 95 mmol). clorh¡drato de azet¡d¡na (47.7 g. 510 mmol) y TEA (155.0 g. 1530 mmol) en etanol (500 mL). La mezcla se f¡ltró y el f¡ltrado se concentró al vacío. El res¡duo se trató con CH2O 2 y H2O. La fase orgán¡ca separada se concentró al vacío. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna de gel de síl¡ce (eluyente: d¡clorometano/metanol (que contenía un 1 % de TEA) = 15/1). Las fracc¡ones con el producto se recog¡eron y se evaporó el d¡solvente para obtener el ¡ntermed¡o del título 70 (17.96 g. rend¡m¡ento 42.71%).

m/z = 515 (M+H)+

1H RMN (400 MHz. CDCl3) 8 ppm 1.49 (s. 9 H) 1.52 - 1.68 (m. 4 H) 1.91 - 2.05 (m. 4 H) 2.37 - 2.41 (m. 2 H) 2.78 -2.83 (m. 1 H) 3.16 - 3.18 (m. 1 H) 3.51-3.53 (m. 4 H) 3.67 - 3.68 (m. 4 H) 3.79 - 3.82 (m. 1 H) 4.09 - 4.4.13 (m. 4 H) 5.10 (s. 1 H) 6.04 (s. 1 H).

Etapa 3: síntes¡s de 4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(5-met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1.5-a1p¡r¡m¡d¡n-7-¡l)p¡peraz¡no-1-carbox¡lato de ferf-but¡lo P52

La mezcla del ¡ntermed¡o 70 (3 g. 5.83 mmol) y el ¡ntermed¡o 26 (1.56 g. 8.75 mmol) se d¡solv¡ó en 2-metox¡etanol (100 mL) y después se añad¡ó d¡¡soprop¡let¡lam¡na (2 mL. 11.66 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó a 50 °C durante tres días. Se perm¡t¡ó que la mezcla de reacc¡ón se enfr¡ara hasta la temperatura amb¡ente y se vert¡ó sobre una soluc¡ón con agua helada. La mezcla resultante se ag¡tó hasta que todo el h¡elo se hubo fund¡do y a cont¡nuac¡ón. el sól¡do resultante se separó por f¡ltrac¡ón. El sól¡do se lavó suces¡vamente con agua. se d¡solv¡ó en d¡clorometano. se secó con MgSO4 y se concentró. El res¡duo resultante se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en columna ut¡l¡zando d¡clorometano y metanol para generar P52 (3.3 g. 87%) como un sól¡do amar¡llo claro blanco. m/z = 584 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm 1.39 - 1.49 (m, 9 H), 1.53 - 1.91 (m, 4 H), 2.03 - 2.36 (m, 4 H), 2.87 (s, 3 H), 3.29 - 3.51 (m, 8 H), 3.53 - 3.67 (m, 4 H), 3.90 - 4.04 (m, 2 H), 5.40 - 5.51 (m, 1 H), 5.64 (s, 1 H), 6.25 (s a, 1 H), 7.27 - 7.42 (m, 1 H), 7.52 - 7.70 (m, 2 H), 8.47 (s, 1 H).

Síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-(piperazin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolina P53

El compuesto P52 (3 g, 5.139 mmol) se disolvió en DCM (150 mL) y se añadió ácido TFA (4mL, 51 mmol). La mezcla de reacción se agitó a la temperatura ambiente durante 5 días. La mezcla de reacción se desactivó con una solución saturada de NaHCO2 y el producto se extrajo 3 veces con DCM. Las fases orgánicas evaporaron y el producto se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 100% de DCM hasta un 10% de (MeOH/NH3) y un 90% de DCM. Después de evaporar las fracciones de interés, los autores obtuvieron el producto deseado P53 como una espuma amarilla (2.3 g, 92%).

m/z = 484 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.57 (s a, 1 H), 1.63 - 1.76 (m, 2 H), 1.80 - 1.95 (m, 1 H), 2.15 - 2.27 (m, 2 H), 2.32 (quin, J=7.4 Hz, 2 H), 2.90 - 3.08 (m, 5 H), 3.42 - 3.67 (m, 7 H), 3.77 - 3.96 (m, 1 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.20 (s, 1 H), 5.52 (s a, 1 H), 5.63 (s, 1 H), 7.28 - 7.39 (m, 1 H), 7.57 - 7.68 (m, 2 H), 8.49 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-il)-2-(1-(5-metilqumazolm-4-il)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-M)-W-isopropilpiperazino-1-carboxamida P54

El compuesto P53 (550 mg, 1.058 mmol) se suspendió en dioxano y se añadió la base de Hunig. La mezcla resultante se agitó durante 10 min. A continuación, se añadió el 2-isocianatopropano (125 pL, 1.269 mmol) a la temperatura ambiente. La mezcla se agitó durante toda la noche a la temperatura ambiente. A la solución se añadió un exceso de MeOH y la mezcla se agitó durante toda la noche. Se evaporó el disolvente. El residuo se disolvió en diclorometano (50 mL) y la solución resultante se lavó con agua tres veces (20 mL). Las fases acuosas se extrajeron con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4 y se filtraron. El disolvente se eliminó y el residuo se purificó con éter dietílico y se agitó durante toda la noche en este disolvente. El polvo blanco claro se filtró y se secó en el horno a 50 °C para generar (85 mg, 14%) del producto P54.

m/z = 569 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.11 (d, J=6.4 Hz, 6 H), 1.52 (s a, 1 H), 1.66 (d, J=9.9 Hz, 2 H), 1.84 (s a, 1 H), 2.21 (s a, 2 H), 2.28 (dt, J=14.5, 7.2 Hz, 2 H), 2.85 (s a, 3 H), 3.30 - 3.62 (m, 10 H), 3.73 - 3.86 (m, 1 H), 3.98 (t, J=7.3 Hz, 4 H), 5.19 (s, 1 H), 5.42 - 5.81 (m, 3 H), 7.30 (d, J=5.7 Hz, 1 H), 7.50 - 7.70 (m, 2 H), 8.46 (s, 1 H) Síntesis de 4-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-(4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-5-metilquinazolina P55

El compuesto P53 (500 mg, 1.03 mmol) se disolvió en diclorometano (25 mL) y se añadió diisopropiletilamina (0.445 mL, 2.58 mmol). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante 10 min y a continuación se añadió cloruro de metanosulfonilo (0.2 mL, 1.55 mmol). La mezcla resultante se agitó a la temperatura ambiente durante toda la noche. La mezcla resultante se vertió sobre agua, se extrajo con diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en columna utilizando diclorometano y metanol como eluyente para generar el compuesto P55, 71% puro. Este se purificó adicionalmente mediante HPLC para generar (28 mg, 5%) del compuesto P55 como un sólido blanco.

m/z = 562 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm 1.58 (s a, 1 H), 1.65 - 1.77 (m, 2 H), 1.78 - 1.94 (m, 1 H), 2.20 - 2.27 (m, 2 H), 2.27 - 2.38 (m, 2 H), 2.87 (s, 3 H), 2.91 (s, 3 H), 3.22 - 3.35 (m, 4 H), 3.44 - 3.68 (m, 6 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.26 (s, 1 H), 5.49 (s a, 1 H), 5.67 (s a, 1 H), 7.30 - 7.36 (m, 1 H), 7.58 - 7.67 (m, 2 H), 8.49 (s, 1 H)

Síntesis de 7-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-2-metiloxazolo[5,4-djpirimidina P56

Síntesis de 7-cloro-2-metiloxazolo[5,4-d]pirimidina 71

Etapa 1: síntesis de 2-metiloxazolo[5,4-d1pirimidin-7-ol 71-b

Una solución de 5-aminopirimidino-4,6-diol 71-a (5 g, 39 mmol) en anhídrido acético (80 mL) se calentó a 120 °C durante 16 h. A continuación, la solución se enfrió y el sólido se separó por filtración y se purificó con Et2O. Después de la filtración, el sólido se secó en el horno para generar el intermedio 71-b (4 g, 68 %).

m/z = 152 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2.54 (s, 3 H) 8.18 (s, 1 H) 12.84 (s a, 1 H)

Etapa 2: síntesis de 7-cloro-2-metiloxazolo[5,4-d1pirimidina 71

El intermedio 71-b (100 mg, 0.66 mmol) se disolvió en acetonitrilo (20 mL) en una atmósfera inerte. Se añadieron gota a gota DIPEA (0.28 mL, 2.5 eq.) y PoCl3 (0.15 mL, 2.5 eq.) y la mezcla se calentó hasta 70 °C. Después de 3 h, la solución se concentró al vacío, se extrajo con acetato de etilo y se lavó con una solución saturada de NaHCO3. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4, se filtraron y se utilizaron tal cual en la siguiente etapa. LCMS m/z = 170 (M+H)+

Síntesis de 7-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-2-metiloxazolo[5,4-d]pirimidma P56

A una solución del intermedio 71 (20 mg, 0.12 mmol) en iPrOH (2 mL) se añadió trietilamina (0.05 mL, 0.35 mmol, 3 eq.) y el intermedio 8 (40 mg, 0.12 mmol, 1 eq.). La solución se sometió a irradiación de microondas durante 3 h a 120 °C. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC prep. para generar el compuesto del título P56 (21 mg, 37%) como un sólido blanco.

m/z = 476 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.49 - 1.79 (m, 4 H) 1.84 - 2.02 (m, 1 H) 2.20 - 2.34 (m, 2 H) 2.40 (s a, 1 H) 2.53 (s, 3 H) 3.15 - 3.27 (m, 1 H) 3.36 - 3.54 (m, 4 H) 3.55 - 3.69 (m, 4 H) 3.99 (t, J=7.70 Hz, 4 H) 4.99 (d, J=13.32 Hz, 1 H) 5.22 (s, 1 H) 5.73 (s, 1 H) 6.53 (d, J=5.65 Hz, 1 H) 8.24 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(6-metil-2-(metiltio)quinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-ajpirimidin-7-il)morfolina P57

El intermedio 8 (1000 mg, 2.41 mmol), 4-cloro-6-metil-2-(metiltio)quinazolina 72 (649.2 mg, 2.89 mmol) y DIPEA (0.83 mL, 4.8 mmol) se mezclaron en 2-metoxietanol (30 mL) y se calentaron a 50 °C durante 16 h. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. Se formó un sólido el cual se separó por filtración. El sólido se disolvió en diclorometano y la solución obtenida se secó sucesivamente con MgSO4 y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna para generar P57 (1.2 g, 78% puro).

m/z = 531 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm 1.69 (s a, 4 H), 2.04 (dd, J=13.1, 5.2 Hz, 1 H), 2.24 - 2.38 (m, 3 H), 2.40 (s, 3 H), 2.48 (s, 3 H), 3.37 - 3.41 (m, 1 H), 3.49 (t, J=4.5 Hz, 4 H), 3.62 - 3.76 (m, 4 H), 4.00 (t, J=7.5 Hz, 4 H), 4.13 (d, J=13.2 Hz, 1 H), 5.30 (s, 1 H), 5.82 (d, J=2.2 Hz, 1 H), 5.93 (s, 1 H), 7.76 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-etilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-ajpirimidin-7-il)morfolina P58

Síntesis de 4-cloro-5-etilquinazolina 73

Etapa 1: síntesis de 5-etilqu¡nazol¡n-4-ol 73-b

Una mezcla de ácido 2-amino-6-etilbenzoico 73-a (18.0 g, 109mmol) en formamida (200 mL) se agitó a 130 °C durante 16 h. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente. El precipitado se separó por filtración y se lavó con agua. La masa retenida sobre el filtro se secó al vacío a 45 °C durante 1 h. Se recuperó el intermedio sólido resultante 73-b (8.5 g, pureza: 90%, rendimiento: 40.3%).

Etapa 2: síntesis de 4-cloro-5-et¡lqu¡nazol¡na 73

Se añadió trietilamina (19.51 mL, 140.0 mmol) a una mezcla de 5-etilquinazolin-4-ol 73-b (7.0 g, 40 mmol) en oxicloruro de fósforo (100 mL) a 0 °C. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 3 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en tolueno (100 mL) y la mezcla se añadió gota a gota sobre hielo (100 g). La fase orgánica se lavó sucesivamente con agua (2 x 100 mL), una solución de bicarbonato de sodio al 10% (2 x 100 mL), agua (2 x 100 mL) y salmuera (1 x 100 mL). La fase orgánica se secó (Na2SO4), se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna flash de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo 10/1 para obtener el intermedio 73 (3.313 g, pureza: 96%, rendimiento: 41.37%).

1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 1.39 (t, J=7.46 Hz, 3 H) 3.48 (c, J=7.34 Hz, 2 H) 7.56 (d, J=7.34 Hz, 1 H) 7.84 (t, J=7.83 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=8.31 Hz, 1 H) 8.96 (s, 1 H)

Etapa_^^_sIntesis__de_4-£5-£azetidin-1^il)-2-(1^(5-etilqulDazolln-4-iDplperidin-2-iljplrazolo£1,5-a2plrimidin-7-il)morfolina P58

La mezcla de la sal de HCl del intermedio 8 (500 mg, 1.2 mmol) y el intermedio 73 (348 mg, 1.5 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (15 mL) y se añadió trietilamina (0.415 mL, 2.4 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 16 h. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que se fundió el hielo y a continuación, se filtró y el sólido se lavó con agua. El sólido se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró. El sólido se purificó mediante cromatografía en columna utilizando diclorometano y metanol para generar P58 como un polvo blanco (400 mg, 63%).

m/z = 499 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6 ) 8 ppm 1.05 - 1.23 (m, 3 H), 1.42 - 1.57 (m, 1 H), 1.66 (d, J=8.1 Hz, 2 H), 1.73 - 1.91 (m, 1 H), 2.06 - 2.35 (m, 4 H), 3.10 - 3.41 (m, 3 H), 3.40 - 3.55 (m, 5 H), 3.58 - 3.78 (m, 5 H), 3.89 - 4.06 (m, 4 H), 5.18 (s, 1 H), 5.35 - 5.66 (m, 2 H), 7.37 (d, J=7.0 Hz, 1 H), 7.50 - 7.68 (m, 2 H), 8.43 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5,7-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P59

Síntesis de 4-cloro-5,7-d¡met¡lqu¡nazol¡na 74

Etapa 1: síntesis de (B-N-(3,5-dimetilfenir)-2-(hidroxiimino)acetamida 74-b

Se añadió sulfato de sodio (390.7 g, 2.750 mol) a una solución de hidrato de cloral (76.5 g, 0.520 mol) en agua (1500 mL) a la temperatura ambiente. A continuación, se añadió una suspensión de clorhidrato de hidroxilamina (91.8 g, 1.32 mol), 3,5-dimetilanilina 74-a (50 g, 0.41 mol) y se añadió ácido clorhídrico concentrado (36.5%, 50 mL). La mezcla se calentó a 45 °C durante 1.5 h y a continuación a 75 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente. El sólido marrón que precipitó se filtró y se lavó con agua fría y hexano. El compuesto crudo se secó al vacío para obtener el intermedio 74-b (70 g, rendimiento: 83.78%).

Etapa 2: síntesis de 4.6-dimetilindolino-2.3-diona 74-c

El intermedio 74-b (15.00 g, 78.04 mmol) se disolvió en ácido sulfúrico concentrado (75 mL). La mezcla se agitó a 80 °C durante 30 min. A continuación, la mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre hielo-agua. El intermedio 75-c precipitó, se filtró y se lavó con agua (8.50 g, 49.74%).

Etapa 3: síntesis del ácido 2-amino-4,6-dimetilbenzoico 74-d

Se añadió H2O2 (123.7 g, 1200 mmol) a una mezcla del intermedio 74-C (35.00 g, 199.8 mmol) en una solución de NaOH (1225 mL, 0.33 g/mL) a 70 °C, durante 5 min. La mezcla se calentó durante 15 min más y a continuación, se enfrió hasta 15 °C. Se añadió hielo a la mezcla. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo (300 mL x 2). El pH de la solución se ajustó a 8 añadiendo HCl concentrado a 0 °C y se acidificó hasta un pH~ 6 con ácido acético. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (300 mL x 2). Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron con MgSO4 y se filtraron. El filtrado se concentró para obtener el intermedio 74-d (17 g, rendimiento: 41.20%).

Etapa 4: síntesis de 5,7-dimetilquinazolin-4-ol 74-e

Una mezcla del intermedio 74-d (15.0 g, 90.8 mmol) y acetato de formamidina (94.5 g, 908 mmol) se agitó durante 5 h a 150°C. Se añadió H2O a la mezcla y la mezcla se agitó 10 min a la temperatura ambiente. El precipitado se separó por filtración y se lavó con agua. La masa retenida sobre el filtro se secó al vacío para obtener el intermedio 74-e (17.5 g, rendimiento: 39.83%).

Etapa 5: síntesis de 4-cloro-5,7-dimetilquinazolina 74

Se añadió trietilamina (30.50 mL, 301.4 mmol) a una mezcla del intermedio 74-e (17.50 g, 100.5 mmol) en POCl3 (300 g, 1.96 mol) a 0 °C. La mezcla resultante se calentó a reflujo durante 3 h y a continuación, se vertió sobre hieloagua. La mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con una solución (al 1%) de NaHCO3 y salmuera, se secó con MgSO4 y se filtró. El filtrado se concentró. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (eluyente: hexanos/acetato de etilo, de 0/1 a 1:1). Las fracciones deseadas se recogieron y se concentraron para obtener el intermedio 74 (4.806 g, 23.69%).

1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm 2.53 (s, 3 H) 3.00(s, 3 H) 7.34 (s, 1 H) 7.71 (s, 1 H) 8.90 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-N)-2-(1-(5,7-dimetNqumazolm-4-N)piperidm-2-N)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P59

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (300 mg, 0.66 mmol) y el intermedio 74 (177 mg, 0.92 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (15 mL) y se añadió trietilamina (0.34 mL, 1.97 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 16 h. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que se fundió el hielo y a continuación, se filtró y el sólido se lavó con agua. El sólido se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró. El sólido se purificó mediante cromatografía en columna utilizando diclorometano y metanol para generar P59 como un polvo blanco (212 mg, 64%).

m/z = 499 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.52 (s a, 1 H), 1.65 (d, J=5.1 Hz, 2 H), 1.74 - 1.90 (m, 1 H), 2.17 (s a, 2 H), 2.28 (quin, J=7.3 Hz, 2 H), 2.41 (s, 3 H), 2.80 (s, 3 H), 3.35 - 3.58 (m, 6 H), 3.60 - 3.77 (m, 4 H), 3.98 (t, J=7.3 Hz, 4 H), 5.17 (s, 1 H), 5.41 (s a, 1 H), 5.53 - 5.73 (m, 1 H), 7.14 (s, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 8.42 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-fluoroquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P60

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (400 mg, 0.87 mmol) y 4-doro-5-fluoroquinazolina 75 (208 mg, 1.14 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (20 mL) y se añadió trietilamina (0.604 mL, 3.5 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 2 h. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que se fundió el hielo y a continuación, se filtró y el sólido se lavó con agua. El sólido se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró para generar un sólido blanco, P60 (145 mg, 34%).

m/z = 489 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.57 - 1.90 (m, 4 H), 2.06 -2.20 (m, 1 H), 2.26 -2.43 (m, 3 H), 3.38 -3.51 (m, 1 H), 3.54 (s a, 4 H), 3.65 - 3.79 (m, 4 H), 3.92 (d, J=12.8 Hz, 1 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.23 (s, 1 H), 5.75 (s, 1 H), 5.80 (s a, 1 H), 7.23 (dd, J=11.7, 7.9 Hz, 1 H), 7.61 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.68 -7.79 (m, 1 H), 8.51 (s, 1 H) Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-etoxiquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P61

Síntesis de 4-cloro-5-etoxiquinazolina 76

Etapa 1: síntesis de 5-etox¡quinazol¡n-4-ol 76-b

Se añadió hidruro de sodio (8.00 g, 200 mmol, 60% en aceite mineral) a etanol (300 mL) a 0 °C. Después de agitar durante 30 min a 0 °C, se añadieron 5-bromoquinazolin-4-ol 76-a (15.00 g, 66.65 mmol) y cobre (1.70 g, 26.7 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80 °C durante 18 h y a continuación, se enfrió hasta la temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de un lecho de Celite. El filtrado se concentró al vacío. Al residuo se añadió agua y el pH se ajustó a 8 añadiendo una solución de ácido clorhídrico al 37%. La solución se extrajo con CH2Cl2. La fase orgánica se secó con Na2SÓ4, se filtró y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo 2/1) para obtener el intermedio 76-b (5 g, rendimiento: 35%). Etapa 2: síntesis de 4-cloro-5-etox¡qu¡nazol¡na 76

Se añadió gota a gota cloruro de oxalilo (12.5 mmol) a una solución del intermedio 76-b (5.00 g, 26.3 mmol) y DMF (2.5 mL) en CH3G (100 mL). La solución se calentó a reflujo durante toda la noche. La solución de la reacción se concentró al vacío. El residuo se purificó en gel de sílice sobre un filtro de vidrio (eluyente: CH2Cl2/acetato de etilo 1/1). Las fracciones deseadas se recogieron y el disolvente se evaporó para obtener el intermedio 77 (2.81 g, rendimiento: 49%).

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1.34 - 1.48 (m, 3 H) 4.14 -4.23 (m, 2 H) 7.15 -7.23 (m, 1 H) 7.27 -7.36 (m, 1 H) 7.77 - 7.87 (m, 1 H) 8.90 (s, 1 H)

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (500 mg, 1.1 mmol) y 4-cloro-5-etoxiquinazolina 76 (320 mg, 1.5 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (20 mL) y se añadió trietilamina (0.566 mL, 3.3 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 4 días. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que se fundió el hielo y a continuación, se filtró y el sólido se lavó con agua. El sólido se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró para generar un residuo que se purificó mediante HPLC preparativa para generar P61 como un sólido blanco (76 mg, 13%).

m/z = 515 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1.33 - 1.49 (m, 3 H), 1.51 - 1.92 (m, 4 H), 2.08 - 2.24 (m, 1 H), 2.25 - 2.43 (m, 3 H), 3.27 - 3.47 (m, 1 H), 3.48 - 3.63 (m, 4 H), 3.65 - 3.82 (m, 4 H), 3.87 - 4.10 (m, 5 H), 4.15 - 4.35 (m, 2 H), 5.22 (s, 1 H), 5.67 (s a, 1 H), 5.83 (s a, 1 H), 6.98 (d, J=7.7 Hz, 1 H), 7.31 (d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.55 - 7.69 (m, 1 H), 8.38 (s a, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1 -il)-2-(1 -(5-(trifluorometM)qumazoMn-4-M)piperidm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P62

Síntesis de 4-cloro-5-(trifluorometil)quinazolina 77

Etapa 1: síntesis de 5-(trifluorometil)quinazolin-4(3H)-ona 77-b

Una mezcla de ácido 2-amino-6-(trifluorometil)benzoico 77-a (9.00 g, 22.84 mmol) y acetato de formamidina (22.84 g, 219.4 mmol) en n-butanol (180 mL) se agitó a 100 °C durante 5 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se lavó con etanol (2 x 50 mL) y a continuación, se secó al vacío a 45 °C durante 1 h para obtener el intermedio 77-b (9 g, rendimiento: 91%).

Etapa 2: síntesis de 4-cloro-5-(trifluorometil)quinazolina 77

Se añadió trietilamina (29.3 mL, 210 mmol) a una mezcla del intermedio 77-b (8.00 g, 37.4 mmol) en oxicloruro de fósforo (331 g, 2.16 mol) a 0 °C. La mezcla se calentó a reflujo durante 2 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo (200 mL) y la mezcla se añadió sobre hielo (200 g). La fase orgánica separada se lavó sucesivamente con agua (1 x 100 mL), una solución acuosa de bicarbonato de sodio al 10% (2x 100 mL), agua (1 x 100 mL) y salmuera (1 x 100 mL). La fase orgánica separada se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo, de 1/0 a 1/1) para obtener el intermedio 77 (7.97 g, 91.38%).

1H RMN (400 MHz, CDCb) 5 ppm 7.89 - 8.06 (m, 1 H) 8.22 (d, J=7.50 Hz, 1 H) 8.31 (d, J=8.38 Hz, 1 H) 9.11 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1 -il)-2-(1 -(5-(trifluorometM)qumazoMn-4-M)piperidm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P62

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (300 mg, 0.65 mmol) y el intermedio 77 (183 mg, 0.78 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (20 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (0.45 mL, 2.6 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante toda la noche. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que todo el hielo se hubo fundido y a continuación, el sólido resultante se separó por filtración. El sólido se lavó sucesivamente con agua, se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró para generar P62 (250 mg, 70%) como un sólido claro blanco.

m/z = 539 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 1.37 - 1.60 (m, 1 H), 1.69 (s a, 2 H), 1.82 (d, J=11.9 Hz, 1 H), 2.07 -2.40 (m, 4 H), 3.32 - 3.59 (m, 5 H), 3.62 - 3.80 (m, 5 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.20 (s, 1 H), 5.46 - 5.70 (m, 2 H), 7.81 - 7.91 (m, 2 H), 7.94 - 8.01 (m, 1 H), 8.49 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-M)-2-(1-(6-etM-5-metMqumazolm-4-M)pipendm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P63

Síntesis de 4-cloro-6-etil-5-metilquinazolina 78

Una solución de ácido 6-amino-3-yodo-2-metilbenzoico 78-a (35.0 g, 126 mmol) y acetato de formamidina (59.0 g, 567 mmol) en EtOH (500 mL) se calentó a reflujo durante toda la noche. El precipitado se separó por filtración y se lavó con etanol para obtener el intermedio 78-b (21 g, 52% de rendimiento).

Etapa 2: síntesis de 5-metil-6-vinilquinazolin-4-ol 78-c

Una solución del intermedio 78-b (15.0 g, 52.4 mmol), trifluoro(vinil)borato de potasio (10.6 g, 79.0 mmol), Pd(dppf)2Cl2 (1.7 g, 2.6 mmol) y K2CO3 (21.74 g, 157.3 mmol) en EtOH (150 mL) se calentó a reflujo durante toda la noche. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se trató con H2O y CH2Cl2. La fase orgánica separada se secó con MgSO4, se filtró y se evaporó al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía líquida de alta resolución en SYNERGI (eluyente: TFA agua/acetonitrilo 30/70 v/v). Las fracciones con el producto se recogieron y se evaporó el disolvente orgánico. El pH del se ajustó a 7 con NaHCO3 saturado. El concentrado acuoso se extrajo con CH2Cl2. La fase orgánica separada se concentró al vacío para obtener el intermedio 78-c (3 g, 29% de rendimiento).

Etapa 3: síntesis de 6-etil-5-metilquinazolin-4-ol 78-d

Una solución del intermedio 78-c (3.0 g, 16 mmol) y HCl (11.5 mL) en MeOH (30 mL) se hidrogenó a la temperatura ambiente (50 psi) con Pd/C (0.6 g) como catalizador durante 15 h. Tras la captación de H2 (32.50 mg, 16.11 mmol), el catalizador se separó por filtración y se lavó con metanol. El disolvente se evaporó al vacío para obtener el intermedio 78-d (2.1 g, 66% de rendimiento).

Etapa 4: síntesis de 4-cloro-6-etil-5-metilquinazolina 78

Una mezcla del intermedio 78-d (1.80 g, 9.56 mmol), trietilamina (2.220 mL, 15.95 mmol) y oxicloruro de fósforo (60 mL) se calentó a reflujo durante 2 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo (200 mL) y la mezcla se añadió gota a gota sobre hielo (200 g). La fase orgánica separada se lavó sucesivamente con agua (1 x100mL), una solución acuosa de bicarbonato de sodio al 10% (2x100mL), agua (1 x100mL) y salmuera (1 x 100 mL). La fase orgánica se secó (MgSO4), se filtró y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo, de 1/0 a 5/1) para obtener el intermedio 78 (1.434 g, 68.94%).

1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 ppm 1.27 (t, J=7.65 Hz, 3 H) 2.88 (c, J=7.53 Hz, 2 H) 2.94 (s, 3 H) 7.75 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 7.87 (d, J=8.53 Hz, 1 H) 8.89 (s, 1 H)

Etapa 5: síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(6-etil-5-metilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a1pirimidin-7-il)morfolina P63

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (400 mg, 0.87 mmol) y el intermedio 78 (235 mg, 1.14 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (20 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (0.604 mL, 3.5 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante 4 días. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que todo el hielo se hubo fundido y a continuación, el sólido resultante se separó por filtración. El sólido se lavó sucesivamente con agua, se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró; el residuo se purificó mediante HPLC preparativa para generar P63 (198 mg, 44%) como un sólido claro blanco.

m/z = 513 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1.26 (t, J=7.5 Hz, 3 H), 1.37 - 1.58 (m, 1 H), 1.67 (s a, 2 H), 1.77 - 1.94 (m, 1 H), 2.12 - 2.39 (m, 6 H), 2.75 - 2.89 (m, 6 H), 3.52 (s a, 5 H), 3.65 - 3.80 (m, 4 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.21 (s, 1 H), 5.61 (s, 2 H), 7.49 - 7.63 (m, 2 H), 8.40 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-M)-2-(1-(5,6-dimetMqumazolm-4-M)piperidm-2-M)pirazolo[1,5-a]pirimidm-7-il)morfolina P64

Síntesis de 4-cloro-5,6-dimetilquinazolina 79

Etapa 1: síntesis de 5,6-dimetilquinazolin-4-ol 79-a

Se añadieron PdCh(dppf)2 (114 mg, 0.180 mmol) y PPh3 (183 mg, 0.700 mmol) a una mezcla del intermedio 78-b (1.0 g, 3.5 mmol), Me4Sn (940 mg, 5.20 mmol) y Cul (67 mg, 0.35 mmol) en NMP (15 mL) en N2. La mezcla se agitó con microondas a 150 °C durante 0.5 h. La mezcla resultante se vertió sobre agua. El precipitado se separó por filtración y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: metanol/acetato de etilo 1/10) para obtener el intermedio 79-a (0.7 g, rendimiento: 27%).

Etapa 2: síntesis de 4-cloro-5,6-dimetilquinazolina 79

Una mezcla del intermedio 79-a (700 mg, 4.02 mmol), oxicloruro de fósforo (20 mL) y trietilamina (2.80 ml, 20.1 mmol) se calentó a reflujo durante 2 h. El disolvente se evaporó al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo (50 mL) y la mezcla se añadió sobre hielo (20 g). La fase orgánica separada se lavó sucesivamente con agua (1 x 20 mL), una solución acuosa de bicarbonato de sodio al 10% (2x20mL), agua (1 x20mL) y salmuera (1 x20mL). La fase orgánica se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice (eluyente: éter de petróleo/acetato de etilo, de 1 /0 a 10 / 1 ) para obtener el intermedio 79 (598.30 g, 73%).

1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 2.53 (s, 3 H) 2.92 (s, 3 H) 7.68 - 7.78 (m, 1 H) 7.80 - 7.89 (m, 1 H) 8.89 (s, 1 H). Etapa 3: síntesis de 4-(5-(azet¡d¡n-1-¡l)-2-(1-(5,6-d¡met¡lqu¡nazol¡n-4-¡l)p¡per¡d¡n-2-¡l)p¡razolor1,5-a1p¡rim¡d¡n-7-il)morfolina P64

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (300 mg, 0.65 mmol) y el intermedio 79 (183 mg, 0.95 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (15 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (0.45 mL, 2.6 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante tres días. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que todo el hielo se hubo fundido y a continuación, el sólido resultante se separó por filtración. El sólido se lavó sucesivamente con agua, se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró para generar el compuesto P64 (150 mg, 45%) como un sólido claro blanco.

m/z = 499 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.67 (s a, 3 H), 1.82 (d, J=11.7 Hz, 1 H), 2.09 - 2.37 (m, 4 H), 2.41 (s, 3 H), 2.67 - 2.86 (m, 4 H), 3.52 (s a, 5 H), 3.65 - 3.83 (m, 4 H), 4.02 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.21 (s, 1 H), 5.40 - 5.90 (m, 2 H), 7.48 -7.59 (m, 2 H), 8.40 (s, 1 H)

Síntesis de 7-(2-(5-(azetidin-1-il)-7-morfolinopirazolo[1,5-a]pirimidin-2-il)piperidin-1-il)-2-metiloxazolo[5,4-d]pirimidma P65

A una solución del intermedio 71 (20 mg, 0.12 mmol) en ¡PrOH (2 mL) se añadió trietilamina (0.05 mL, 0.35 mmol, 3 eq.) y el intermedio 8 (40 mg, 0.12 mmol, 1 eq.). La solución se sometió a irradiación de microondas durante 3 h a 120 °C. La solución resultante se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC prep. para generar el compuesto del título P65 (21 mg, 37%) como un sólido blanco.

m/z = 476 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.49 - 1.79 (m, 4 H) 1.84 - 2.02 (m, 1 H) 2.20 - 2.34 (m, 2 H) 2.40 (s a, 1 H) 2.53 (s, 3 H) 3.15 - 3.27 (m, 1 H) 3.36 - 3.54 (m, 4 H) 3.55 - 3.69 (m, 4 H) 3.99 (t, J=7.70 Hz, 4 H) 4.99 (d, J=13.32 Hz, 1 H) 5.22 (s, 1 H) 5.73 (s, 1 H) 6.53 (d, J=5.65 Hz, 1 H) 8.24 (s, 1 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5,8-dimetilquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P66

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (300 mg, 0.65 mmol) y 4-cloro-5,8-dimetilqu¡nazol¡na 80 (175 mg, 0.9 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (15 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (0.45 mL, 2.6 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante tres días. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que todo el hielo se hubo fundido y a continuación, el sólido resultante se separó por filtración. El sólido no estaba puro y se disolvió en diclorometano, la fase acuosa se extrajo con diclorometano, todas las fases orgánicas se combinaron y se secaron con MgSO4.

El disolvente se eliminó y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna utilizando diclorometano y metanol. El compuesto P66 se aisló como un sólido blanco (150 mg, 46%).

m/z = 499 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 1.51 (s a, 1 H), 1.64 (d, J=7.7 Hz, 2 H), 1.82 (d, J=7.9 Hz, 1 H), 2.18 (s a, 2 H), 2.28 (quin, J=7.4 Hz, 2 H), 2.56 (s, 3 H), 2.78 (s, 3 H), 3.35 - 3.56 (m, 6 H), 3.61 - 3.74 (m, 4 H), 3.98 (t, J=7.4 Hz, 4 H), 5.17 (s, 1 H), 5.46 (s a, 1 H), 5.62 (s a, 1 H), 7.18 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 7.46 (d, J=7.3 Hz, 1 H), 8.50 (s, 1 H) Síntesis de (4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-morfoMnopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-M)piperidm-1-M)-5-metMqumazoMno-2-carboxilato de metilo P67

El intermedio 15 (100 mg, 0.13 mmol) se disolvió en 30 mL de THF/MeOH (3/1) en un autoclave. Se añadieron acetato de potasio (20 mg, 0.20 mmol, 1.5 eq.), Pd(OAc)2 (3 mg, 0.013 mmol, 0.1 eq.) y 1,3­ bis(difenilfosfino)propano (11 mg, 0.027 mmol, 0.2 eq.). El autoclave se calentó hasta 120 °C con una presión de monóxido de carbono de 50 bar durante 8 h. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, la solución se concentró al vacío y se diluyó con diclorometano; a continuación, se lavó con una solución saturada de NaHCO3. Las fases orgánicas combinadas se secaron con MgSO4, se separaron por filtración y se concentraron al vacío. El crudo se purificó después mediante HPLC, lo que proporcionó el compuesto metílico p67 (43 mg, 60%).

m/z = 543 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, 420 K, DMSO-d6) 8 ppm 1.42 - 1.59 (m, 1 H) 1.62 - 1.70 (m, 2 H) 1.77 - 1.88 (m, 1 H) 2.14 -2.33 (m, 4 H) 2.80 (s, 3 H) 3.43 - 3.55 (m, 5 H) 3.64 - 3.74 (m, 5 H) 3.85 (s, 3 H) 3.99 (t, J=7.41 Hz, 4 H) 5.18 (s, 1 H) 5.61 (m, J=3.98 Hz, 1 H) 5.66 (s, 1 H) 7.39 (t, J=4.22 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=4.30 Hz, 2 H)

Síntesis del ácido (4-(2-(5-(azetidm-1-N)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-N)piperidm-1-M)-5-metilquinazolino-2-carboxílico P68

A una solución del compuesto P67 (300 mg, 0.38% mmol) en 30 mL de THF/agua (3/1), se añadió LiOH (28 mg, 1.16 mmol, 3 eq.). La mezcla de reacción se agitó durante 2 días a la temperatura ambiente. A continuación, se ajustó el pH de la mezcla de reacción a 6 con HCl (1 M en agua) y se concentró al vacío. El crudo se purificó mediante HPLC para obtener el compuesto P68 (110 mg, 53%).

m/z = 529 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.44 - 1.62 (m, 1 H) 1.64 - 1.76 (m, 2 H) 1.78 - 1.91 (m, 1 H) 2.16 - 2.37 (m, 4 H) 3.24 (s, 3 H) 3.46 - 3.59 (m, 5 H) 3.68 - 3.77 (m, 5 H) 4.02 (t, J=7.37 Hz, 4 H) 5.22 (s, 1 H) 5.54 - 5.88 (m, 2 H) 7.39 - 7.44 (m, 1 H) 7.68 - 7.73 (m, 2 H)

Síntesis de (4-(2-(5-(azetidm-1-M)-7-morfolmopirazolo[1,5-a]pirimidm-2-N)piperidm-1-M)-5-metil-W-(metilsulfonil)quinazolino-2-carboxamida P69

El compuesto P68 (150 mg, 0.28 mmol) se disolvió en 10 mL de THF y se añadió CDI (92 mg, 0.56 mmol, 2 eq.). La mezcla se calentó hasta 50 °C y después de agitar durante una hora, se añadieron DBU (0.08 mL, 0.56 mmol, 2 eq.) y metilsulfonamida (70 mg, 0.74 mmol, 2.6 eq.) a la solución. Después de agitar durante 1 h a 50 °C, la solución se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en DCM lo que proporcionó el compuesto P69 (65 mg, 38%).

m/z = 606 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.46 - 1.60 (m, 1 H) 1.62 - 1.73 (m, 2 H) 1.77 - 1.89 (m, 1 H) 2.15 -2.38 (m, 4 H) 2.80 (s, 3 H) 3.27 (s, 3 H) 3.42 - 3.60 (m, 5 H) 3.64 - 3.77 (m, 5 H) 4.00 (t, J=7.42 Hz, 4 H) 5.20 (s, 1 H) 5.68 - 5.77 (m, 2 H) 7.38 - 7.47 (m, 1 H) 7.65 - 7.76 (m, 2 H)

Síntesis de (4-(2-(5-(azet¡dm-1-¡l)-7-morfolmop¡razolo[1,5-3]p¡r¡m¡dm-2-¡l)p¡per¡dm-1-¡l)-W,5-dimetilquinazolino-2-carboxamida P70

A una solución del compuesto P68 (240 mg, 0.45 mmol) en DMF (5 mL) se añadieron DIPEA (0.23 mL, 1.36 mmol, 3 eq.), metilamina (0.08 mL, 0.90 mmol, 2 eq.) y HATU (431.5 mg, 1.135 mmol, 2.5 eq.). La solución resultante se agitó durante 1 h a la temperatura ambiente. Se añadió agua (5 mL), la solución se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC para obtener el compuesto P70 (87 mg, 36%).

m/z = 542 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 1.45 - 1.60 (m, 1 H) 1.67 (s a, 2 H) 1.76 - 1.90 (m, 1 H) 2.10 - 2.24 (m, 2 H) 2.28 (quin, J=7.37 Hz, 2 H) 2.79 - 2.87 (m, 6 H) 3.35 - 3.62 (m, 6 H) 3.61 - 3.75 (m, 4 H) 3.98 (t, J=7.37 Hz, 4 H) 5.19 (s, 1 H) 5.54 (s a, 1 H) 5.68 (s a, 1 H) 7.29 - 7.42 (m, 1 H) 7.58 - 7.72 (m, 2 H) 8.04 (s a, 1 H)

Síntes¡s de (4-(2-(5-(azet¡dm-1-¡l)-7-morfolmop¡razolo[1,5-3]pmm¡dm-2-¡l)p¡pendm-1-¡l)-W-(c¡cloprop¡lsulfoml)-5-met¡lqu¡nazol¡no-2-carboxam¡da P71

El compuesto P68 (150 mg, 0.28 mmol) se disolvió en 10 mL de THF y se añadió CDI (92 mg, 0.56 mmol, 2 eq.). La mezcla se calentó hasta 50 °C y después de agitar durante una hora, se añadieron DBU (0.12 mL, 0.85 mmol, 3 eq.) y ciclopropilsulfonamida (85 mg, 0.709 mmol, 2.5 eq.) a la solución. Después de agitar durante 1 h a 50 °C, la solución se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente desde un 0% hasta un 10% de MeOH en DCM y se purificó después mediante HPLC lo que proporcionó el compuesto P71 (65 mg, 44%).

m/z = 632 (M+H)+

1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 0.99 -1.10 (m, 2 H) 1.13 -1.26 (m, 2 H) 1.44 - 1.93 (m, 4 H) 2.12 -2.35 (m, 4 H) 2.81 (s, 3 H) 2.95 - 3.02 (m, 1 H) 3.41 - 3.60 (m, 5 H) 3.63 - 3.75 (m, 5 H) 3.99 (t, J=7.42 Hz, 4 H) 5.19 (s, 1 H) 5.65 -5.77 (m, 2 H) 7.42 (d, J=6.67 Hz, 1 H) 7.67 - 7.75 (m, 2 H)

Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-M)-2-(1-(2-(isoxazol-4-M)-5-metilqumazolm-4-il)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P72

El intermedio 15 (200 mg, 0.369 mmol), el ácido isoxazol-4-ilborónico (cas = 1008139-25-0, 83 mg, 0.738 mmol) y K2CO3 (cas = 584-08-7, 102 mg, 0.738 mmol) se disolvieron en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.3 mL). La solución se desgasificó con N2 durante 5 min. El tubo de reacción se selló y la mezcla se calentó a 120 °C durante 30 min en un horno de microondas. A continuación, la solución se diluyó con DCM y agua. El producto se extrajo 2 veces con DCM. Las fases orgánicas se secaron con Na2SO4, se filtraron, se evaporaron a sequedad y el crudo se purificó mediante cromatografía en columna eluyendo con un gradiente de MeOH en DCM, desde un 0% hasta un 5% de MeOH. Después de evaporar las fracciones de interés, los autores obtuvieron un sólido marrón. El sólido se purificó con DIPE caliente. Después de enfriar hasta la temperatura ambiente, se filtró el precipitado. Debido a que el producto todavía no estaba puro, el sólido marrón se purificó de nuevo con DIPE caliente. Después de enfriar, se obtuvo el compuesto del título P72 mediante filtración (21 mg, 10%).

m/z = 552.3 (M+H).

1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 1.25 -2.46 (m, 8 H) 2.66 (s, 3 H) 3.24 -4.72 (m, 14 H) 5.09 -9.25 (m, 8 H) Síntesis de 4-(5-(azetidm-1-M)-2-(1-(2-(1,4-dimetil-1H-1,2,3-triazol-5-M)-5-metilqumazolm-4-N)piperidm-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P73

Se preparó el compuesto P73 de la misma manera que el compuesto P72 utilizando el intermedio 15 y 1,4-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1H-1,2,3-triazol como materiales de partida.

m/z = 580 (M+H).

PF : 238,91°C.

1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 1.29 - 2.05 (m, 4 H) 2.12 - 2.49 (m, 4 H) 2.55 - 2.76 (m, 3 H) 2.82 - 3.00 (m, 3 H) 3.13 -4.16 (m, 14 H) 4.30 -4.49 (m, 3 H) 4.93 -6.11 (m, 3 H) 7.27 - 7.34 (m, 1 H) 7.53 -7.79 (m, 2 H) Síntesis de 4-(5-(azetidin-1-il)-2-(1-(5-metoxiquinazolin-4-il)piperidin-2-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)morfolina P74

La mezcla de la sal de TFA del intermedio 8 (300 mg, 0.65 mmol) y 4-cloro-5-metoxiquinazolina 81 (153 mg, 0.78 mmol) se disolvió en 2-metoxietanol (15 mL) y a continuación, se añadió diisopropiletilamina (0.45 mL, 2.6 mmol). La mezcla resultante se agitó a 50 °C durante toda la noche. Se permitió que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente y se vertió sobre una solución con agua helada. La mezcla resultante se agitó hasta que todo el hielo se hubo fundido y a continuación, el sólido resultante se separó por filtración. El sólido se lavó sucesivamente con agua, se disolvió en diclorometano, se secó con MgSO4 y se concentró para generar el compuesto P74 (267 mg, 81%) como un sólido claro blanco.

m/z = 501 (M+H).

1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 1.58 - 1.82 (m, 4 H), 2.02 - 2.14 (m, 1 H), 2.22 - 2.39 (m, 3 H), 3.28 - 3.41 (m, 1 H), 3.45 - 3.56 (m, 4 H), 3.66 - 3.75 (m, 4 H), 3.92 (s, 3 H), 3.99 (t, J=7.5 Hz, 5 H), 5.18 (s, 1 H), 5.63 (s, 1 H), 5.68 (s a, 1 H), 6.95 (d, J=7.5 Hz, 1 H), 7.28 (d, J=8.4 Hz, 1 H), 7.59 (t, J=8.1 Hz, 1 H), 8.35 (s, 1 H).

B. Ejemplos farmacológicos

B.1 Actividad antiviral

Se rellenaron placas de microvaloración de fondo transparente de 384 pocillos negras (Corning, Ámsterdam, Países Bajos) mediante eyección acústica de gotas usando el dispositivo de manipulación de líquidos Echo (Labcyte, Sunnyvale, California). Se transfirieron 200 nL de disoluciones madre del compuesto (DMSO al 100%) a las placas de ensayo. Se realizaron 9 diluciones en serie por un factor de 4 del compuesto, lo que dio lugar a la misma concentración del compuesto por cuadrante. Se inició el ensayo añadiendo 10 pL de medio de cultivo a cada pocillo (medio RPMI sin rojo de fenol, 10% de FBS inactivado térmicamente, 0.04% de gentamicina (50 mg/mL)). Todas las etapas de adición se realizan utilizando un dispensador Multidrop (Thermo Scientific, Erembodegem, Bélgica). A continuación, se añadió a las placas el virus rgVSR224 (MDI (multiplicidad de infección) = 1) diluido en medio de cultivo. El virus rgVSR224 es un virus modificado que incluye un gen GFP adicional (Hallak LK, Spillmann D, Collins PL, Peeples ME. Glycosaminoglycan sulfation requirements for respiratory syncytial virus infection; Journal of virology (2000), 74(22), 10508-13) y se obtuvo una licencia del NlH (Bethesda, MD, EE. UU.). Finalmente, se sembraron en placas 20 pL de una suspensión de células HeLa (3000 células/pocillo). En cada prueba se incluyeron controles de medio, infectados por virus y de infección simulada. Los pocillos contenían un 0.05% de DMSO en volumen. Se incubaron las células a 37 °C en una atmósfera de CO2 al 5%. Tres días tras la exposición al virus, se cuantificó la replicación viral midiendo la expresión de GFP en las células mediante un microscopio láser MSM desarrollado en las propias instalaciones (Tibotec, Beerse, Bélgica). Se definió la CE50 como la concentración que inhibe en un 50% la expresión de GFP. En paralelo, se incubaron los compuestos durante tres días en un conjunto de placas de microvaloración de 384 pocillos blancas (Corning) y se determinó la citotoxicidad de los compuestos en las células HeLa midiendo el contenido de ATP de las células utilizando el kit ATPlite (Perkin Elmer, Zaventem, Bélgica) según las instrucciones del fabricante. Se definió la CC50 como la concentración que genera una citotoxicidad de un 50%.

Tabla B-1: datos antivirales e índice de selectividad

C. Ejemplos de composición teóricos

La expresión “principio activo”, tal como se utiliza en estos ejemplos, se refiere a un compuesto final de Fórmula (I), a sus sales farmacéuticamente aceptables, sus solvatos y formas estereoquímicamente isoméricas y tautómeros. A continuación se describen ejemplos típicos de recetas para la formulación de la invención:

C.1. Comprimidos

Principio activo 5-50 mg

Fosfato de dicalcio 20 mg

Lactosa 30 mg

Talco 10 mg

Estearato de magnesio 5 mg

Almidón de papa hasta 200 mg

En este ejemplo, se puede reemplazar el principio activo por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos según la presente invención, en particular por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos mostrados a modo de ejemplo.

C.2. Suspensión

Se prepara una suspensión acuosa para la administración oral de modo que cada mililitro contenga 1-5 mg de uno de los compuestos activos, 50 mg de carboximetilcelulosa de sodio, 1 mg de benzoato de sodio, 500 mg de sorbitol y agua hasta 1 mL.

C.3. Inyectable

Se prepara una composición parenteral agitando un 1.5% en peso de un principio activo de la invención en propilenglicol al 10% en volumen en agua.

C.4. Pomada

Principio activo 5-1000 mg

Alcohol estearílico 3 g

Lanolina 5 g

Petrolato blanco 15 g

Agua hasta 100 g

En este Ejemplo, el principio activo se puede reemplazar por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos de acuerdo con la presente invención, en particular por la misma cantidad de cualquiera de los compuestos empleados como ejemplo.

Claims (13)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I), incluida cualquiera de sus formas estereoquímicamente isoméricas, donde

R1 es hidrógeno, hidroxi, alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1;

R2 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R3 es alquilo C1-4, halo, cicloalquilo C3-6, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo2;

R4 es hidrógeno, alquilo C1-6, hidroxi o halo;

Heterociclilo1 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo1 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo;

Heterociclilo2 es azetidinilo, pirrolidinilo, piperidinilo, piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo2 está sustituido de manera opcional con uno o dos sustituyentes seleccionados entre alquilo C1-4, hidroxi, halo, polihalo(alquilo C1-4), (alquiloxi C1-4)carbonilo, amino, (alquiloxi C1-4)carbonilamino o (alquil C1-4)sulfonilo;

Het se selecciona entre furanilo, tiofenilo, pirazolilo, oxazolilo, tiazolilo, piridilo, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, quinolilo, isoquinolilo, cinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, 1,5-naftiridinilo, 1,6-naftiridinilo, 1,7-naftiridinilo, 1,8-naftiridinilo, pirido[2,3-d]pirimidinilo, pirido[3,2-d]pirimidinilo, 9H-purinilo, tiazolo[5,4-d]pirimidinilo, 7H-pirrolo[2,3-djpirimidinilo, oxazolo[5,4-d]pirimidinilo, tieno[2,3-d]pirimidinilo o tieno[3,2-d]pirimidinilo; donde cada Het está sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1.4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, amino, mono- o di(alquil C1-4)amino, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1-4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HO-NH-(C=NH)-; oxazolilo o triazolilo cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4;

o una de sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

2. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1, donde

R1 es hidrógeno, alquilo C1-4, mono- o di(alquil C1-4)amino o heterociclilo1;

R2 es hidrógeno o alquilo C1-4;

R3 es cicloalquilo C3-6 o heterociclilo2;

R4 es hidrógeno;

Heterociclilo1 es piperazinilo o morfolinilo; donde cada heterociclilo1 está sustituido de manera opcional con un sustituyente seleccionado entre (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo o (alquil C1-4)sulfonilo;

Heterociclilo2 es azetidinilo o pirrolidinilo; donde cada heterociclilo2 está sustituido de manera opcional con un sustituyente seleccionado entre hidroxi o amino;

Het se selecciona entre quinazolinilo, pirido[2,3-d]pirimidinilo, tiazolo[5,4-d]pirimidinilo, 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidinilo, oxazolo[5,4-d]pirimidinilo o tieno[2,3-d]pirimidinilo; donde cada Het está sustituido de manera opcional con uno, dos o tres sustituyentes, cada uno seleccionado de manera independiente entre halo, alquilo C1-4, alquiloxi C1-4, (alquil C1-4)tio, hidroxi, hidroxicarbonilo, (alquiloxi C1-4)carbonilo, (alquil C1-4)sulfonilamino, aminocarbonilo, trifluorometilo, (alquiloxi C1-4)carbonilamino, di[(alquiloxi C1-4)carbonil]amino, (alquil C1-4)sulfonilaminocarbonilo, (alquil C1-4)aminocarbonilo, (alquiloxi C1-4)(alquiloxi C1-6)carbonilamino, di(alquil C1-4)aminosulfonilaminocarbonilo, (cicloalquil C3-6)sulfonilaminocarbonilo, HO-NH-(C=NH)-; oxazolilo o triazolilo cada uno sustituido de manera opcional con uno o dos alquilo C1-4.

3. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1, donde R1 es heterociclilo1, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

4. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1, donde R1 es hidrógeno, R2 es alquilo C1-4 y R3 es heterociclilo2.

5. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1 , donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

6. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1, donde R1 es alquilo C1-4, R2 es hidrógeno y R3 es heterociclilo2.

7. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1 , donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es alquilo C1-4.

8. El compuesto tal como se reivindica en la reivindicación 1 , donde R1 es hidrógeno, R2 es hidrógeno y R3 es cicloalquilo C3-6.

9. El compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 , donde Het es quinazolinilo.

10. Una composición farmacéutica que comprende un portador farmacéuticamente aceptable y una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9.

11. Un proceso para preparar una composición farmacéutica tal como se reivindica en la reivindicación 8 , donde una cantidad terapéuticamente activa de un compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 se combina en mezcla íntima con un portador farmacéuticamente aceptable.

12. El compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para su uso como un medicamento.

13. El compuesto tal como se reivindica en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 o una composición farmacéutica tal como se reivindica en la reivindicación 10 para su uso en el tratamiento de una infección por el virus sincicial respiratorio.