ES2569929T3 - Formulaciones insecticidas con base oleosa que comprenden un hongo filamentoso insecticida - Google Patents
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Abstract
Formulación insecticida con base oleosa, que comprende un aceite hidrocarbonado de petróleo, un tensioactivo no iónico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petróleo, un agente desecante y un hongo filamentoso insecticida.
Description
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DESCRIPCION
Formulaciones insecticidas con base oleosa que comprenden un hongo filamentoso insecticida Antecedentes de la invencion Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a una formulacion insecticida con base oleosa que comprende un hongo filamentoso insecticida y al uso del mismo.
Antecedentes de la invencion
Como metodo para controlar plagas de insectos evitando el uso de un compuesto sintetizado qulmicamente como componente activo, ha llamado la atencion el uso de un hongo filamentoso insecticida y se han conocido formulaciones de hongo filamentoso insecticida que comprenden un hongo filamentoso insecticida (por ejemplo, las patentes estadounidenses n.os 5.730.973 y 6.030.924). Se conoce como metodo para aumentar un efecto insecticida de una formulacion de hongo filamentoso insecticida de este tipo, aplicar una mezcla de un hongo filamentoso insecticida y un aceite hidrocarbonado de petroleo (por ejemplo, documento WO 95/10597; Pestic. Sci. 46, 299-306 (1996); Biocontrol Science and Technology 3, 337-346 (1993); and Mycol. Res. 103,7 901-907 (1999)).
Con el fin de diluir con agua dicha formulacion de hongo filamentoso insecticida que comprende un hongo filamentoso insecticida y un aceite hidrocarbonado de petroleo que va a aplicarse, de manera similar a una formulacion con base oleosa convencional, es necesario anadir a la formulacion un tensioactivo que puede emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo. Sin embargo, muchos de esos tensioactivos afectan a la viabilidad del hongo filamentoso insecticida. Por consiguiente, ha existido el problema de que una formulacion de hongo filamentoso insecticida que comprende dicho tensioactivo ha disminuido la estabilidad de la viabilidad del hongo (Florida Entomologist 65,1 116-126 (1982); Neotropical Entomology 31,1 91-99 (2002)).
El documento US 5.512.280 da a conocer metodos para el mantenimiento y la estabilizacion a largo plazo de conidios fungicos usando tensioactivos. Esto se basa en el uso de tensioactivo anionico en un intervalo de concentracion de entre el 1 y el 2% (p/v) en una suspension acuosa de entre el 0,01 y el 5,0% (p/v) de conidios.
Se dan a conocer composiciones en forma de polvos humectables que comprenden hongos filamentosos tales como conidios en el documento US 2004/067851. El documento WO 93/24013 da a conocer metodos para almacenar cultivos fungicos, en los que se empaquetan conidios en condiciones que mantienen alta viabilidad, es decir oxlgeno y humedad relativa bajos.
Sumario de la invencion
La presente invencion proporciona una formulacion insecticida con base oleosa que comprende un hongo filamentoso insecticida, un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo que tiene una polaridad especlfica (es decir, un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo) y un agente desecante, que puede diluirse con agua y puede mantener una estabilidad de la viabilidad del hongo filamentoso insecticida.
Es decir, la presente invencion proporciona:
1. una formulacion insecticida con base oleosa, que comprende un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo, un agente desecante y un hongo filamentoso insecticida (a continuacion en el presente documento, tambien denominada formulacion con base oleosa);
2. la formulacion insecticida con base oleosa segun 1 anterior, en la que dicho tensioactivo no ionico tiene un HLB en el intervalo adecuado para emulsionar dicho aceite hidrocarbonado de petroleo;
3. la formulacion insecticida con base oleosa segun 1 o 2 anteriores, en la que dicho aceite hidrocarbonado de petroleo que tiene una caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de 350°C a 550°C;
4. la formulacion insecticida con base oleosa segun 1 anterior, en la que dicho aceite hidrocarbonado de petroleo tiene una caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de 400°C a 500°C, y dicho tensioactivo no ionico es uno o mas tensioactivos seleccionados del grupo que consiste en ester de acido
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graso de polioxietileno, alquil eter de polioxietileno, ester de acido graso de sorbitano y alquil eter de polioxialquileno, y tiene un HLB en el intervalo adecuado para emulsionar dicho aceite hidrocarbonado de petroleo;
5. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 4 anteriores, en la que dicho agente desecante es uno o mas agentes desecantes seleccionados de compuestos de oxido de silicio y compuestos de calcio;
6. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es una o mas cepas de hongos de generos seleccionados del grupo que consiste en genero Paecilomyces, genero Beauveria, genero Metarhizium, genero Nomuraea, genero Verticillium, genero Hirsutella, genero Culicinomyces, genero Sorosporella y genero Tolypocladium;
7. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso del genero Paecilomyces;
8. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso de Paecilomyces tenuipes;
9. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es Paecilomyces tenuipes cepa T1 (FERM BP-7861);
10. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso del genero Beauveria;
11. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso que pertenece a Beauveria bassiana;
12. la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 5 anteriores, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es una o mas cepas seleccionadas del grupo que consiste en Beauveria bassiana cepa F- 667 (FERM BP-10514), Beauveria bassiana cepa F-942 (FERM BP-10515), Beauveria bassiana cepa F-1134 (FERM BP-10516), Beauveria bassiana cepa F-1274 (FERM BP-10517) y Beauveria bassiana cepa F-1310 (FERM BP-10518); y
13. un metodo para controlar plagas de insectos, que comprende aplicar la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de 1 a 12 anteriores a una plaga de insectos, un habitat de la plaga de insectos o una planta vulnerable a la plaga de insectos (a continuacion en el presente documento, tambien denominado el presente metodo insecticida) y similares.
Segun la presente invention puede proporcionarse una formulacion insecticida con base oleosa que comprende un hongo filamentoso insecticida, que puede diluirse con agua manteniendo una estabilidad de la viabilidad del hongo filamentoso insecticida.
Description de la invencion
La presente invencion se describe en detalle a continuacion.
La presente formulacion con base oleosa es una formulacion insecticida con base oleosa que comprende un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo, un agente desecante y un hongo filamentoso insecticida, y se ejemplifica preferiblemente mediante una formulacion insecticida con base oleosa que consiste esencialmente de un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo, un agente desecante y un hongo filamentoso insecticida.
Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida usado en la presente formulacion con base oleosa incluyen una o mas cepas de hongos filamentosos seleccionados de uno o mas generos seleccionados del grupo que consiste en genero Paecilomyces, genero Beauveria, genero Metarhizium, genero Nomuraea, genero Verticillium, genero Hirsutella, genero Culicinomyces, genero Sorosporella y genero Tolypocladium.
Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida del genero Paecilomyces incluyen un hongo filamentoso de Paecilomyces tenuipes, un hongo filamentoso de Paecilomyces fumosoroseus y un hongo filamentoso de Paecilomyces farinosus y similares. Los ejemplos especlficos de los mismos incluyen Paecilomyces tenuipes cepa T1, Paecilomyces tenuipes cepa ATCC44818 (depositado en la Coleccion Americana de Cultivos Tipo, Virginia, EE.UU.) Paecilomyces fumosoroseus cepa IFO8555 (depositado en el Instituto de Fermentation, Osaka; Japon),
Paecilomyces fumosoroseus cepa IFO7072 (depositado en el Instituto de Fermentacion, Osaka, Japon) y similares. Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida del genero Beauveria incluyen un hongo filamentoso de Beauveria bassiana y un hongo filamentoso de Beauveria brongniartii y similares. Los ejemplos especlficos de los mismos incluyen Beauveria bassiana cepa F-667, Beauveria bassiana cepa F-942, Beauveria bassiana cepa F-1134, 5 Beauveria bassiana cepa F-1274 y Beauveria bassiana cepa F-1310 y similares. Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida del genero Metarhizium incluyen un hongo filamentoso de Metarhizium anisopliae, un hongo filamentoso de Metarhizium flavoviride y un hongo filamentoso de Metarhizium cylindrosporae y similares. Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida del genero Nomuraea incluyen un hongo filamentoso de Nomuraea rileyi y similares. Los ejemplos del hongo filamentoso insecticida del genero Verticillium incluyen un hongo filamentoso de Verticillium 10 lecanii y similares.
Entre estos hongos filamentosos insecticidas, por ejemplo, es preferible cualquier hongo filamentoso de los siguientes.
(1) un hongo filamentoso del genero Paecilomyces,
(2) un hongo filamentoso que tiene una secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 5,8S de 15 nucleo y una secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 28S de nucleo, que se muestran
en las SEQ ID NOS: 1 y 2, respectivamente
(3) un hongo filamentoso de Paecilomyces tenuipes
(4) un hongo filamentoso, Paecilomyces tenuipes cepa T1, depositado en el National Institute of Advanced Industrial Science and Technology International Patent Organism Depository con el numero de registro FERM BP-7861.
20 (5) un hongo filamentoso del genero Beauveria
(6) un hongo filamentoso de Beauveria bassiana
(7) hongos filamentosos, Beauveria bassiana cepa F-667 con el numero de registro FERM BP-10514, Beauveria bassiana cepa F-942 con el numero de registro FERM BP-10515, Beauveria bassiana cepa F-1134 con el numero de registro FERM BP-10516, Beauveria bassiana cepa F-1274 con el numero de registro FERM BP-10517 y
25 Beauveria bassiana cepa F-1310 con el numero de registro FERM BP-10518, que se depositaron en el National Institute of Advanced Industrial Science and Technology International Patent Organism Depository.
Estos hongos filamentosos insecticidas pueden aislarse de la naturaleza o pueden estar disponibles a partir de colecciones de cultivo y similares.
Cuando se alslan de la naturaleza, en primer lugar se coge un insecto muerto en el campo, que ya esta rlgido y tiene 30 un sinema creciendo de su cuerpo. Se toca un conidio formado en dicho insecto muerto con un asa de platino, y se frota el asa de platino sobre un medio de cultivo solido, tal como medio SDY (composition: 1% (p/v) de peptona, 1% (p/v) de extracto de levadura, 2% (p/v) de glucosa, 1,5% (p/v) de agar) y medio Czapek (composicion: 0,3% (p/v) de NaNOa, 0,1% (p/v) de K2HPO4, 0,05% (p/v) de MgSO4'7H2O, 0,05% (p/v) de KCl, 0,001% (p/v) de FeSO4'7H2O, 3% (p/v) de sacarosa, 1,5% (p/v) de agar) en un movimiento en llnea. El medio de cultivo se cultiva durante unos dlas a 35 25°C, y entonces se corta una colonia independiente de un hongo crecido y se transfiere a un medio de cultivo solido
nuevo tal como medio SDY y medio Czapek. La colonia se cultiva adicionalmente a 25°C. Un hongo filamentoso puede seleccionarse mediante identification de hongos crecidos (por ejemplo, determinando si el hongo filamentoso esta clasificado en Paecilomyces o si el hongo filamentoso esta clasificado en Beauveria) segun un metodo descrito en, por ejemplo, “ShokubutuBoeki (Plant Disease Protection)” un numero especial n.° 2, Tenteki-Biseibutu-No- 40 Kenkyu-Shuho, publicado por la asociacion de protection de plantas de Japon.
A continuation, se determina si el hongo filamentoso seleccionado tiene actividad insecticida. Se cultiva el hongo filamentoso seleccionado (por ejemplo, hongo filamentoso del genero Paecilomyces o del genero Beauveria) sobre un medio de cultivo solido tal como medio SDY y medio Czapek a 25°C. Se suspende un conidio formado en agua esteril de manera que la concentration del mismo es 1x108 UFC/ml. Se sumergen diez insectos que pertenecen a la 45 misma especie del insecto muerto del que se aislo el hongo en la suspension resultante durante 30 segundos y entonces se mantienen en condiciones de 25°C y el 100% de humedad. Si hay un insecto muerto 6 dlas despues de la inmersion, el hongo puede seleccionarse como un hongo filamentoso insecticida (por ejemplo, hongo filamentoso insecticida del genero Paecilomyces o del genero Beauveria).
Paecilomyces tenuipes cepa T1 es una cepa conocida descrita en la publication de solicitud de patente 50 estadounidense US2003-0124098 A1, que se deposito originalmente con el numero de registro FERM P-18487 y se ha depositado segun el Tratado de Budapest en el National Institute of Advanced Industrial Science and Technology International Patent Organism Depository con el numero de registro FERM BP-7861 tras transferirse del deposito
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original al deposito internacional. Las propiedades micologicas de la misma son tal como sigue.
(1) la velocidad de crecimiento (25°C, 7 dlas)
diametro de la colonia: de 25 a 30 mm (placa con medio agar de extracto de maltosa al 2%), de 25 a 30 mm (placa con medio agar de harina de avena)
(2) color de la superficie superior de la colonia
blanco (placa con medio agar de extracto de maltosa al 2%), blanco (placa con medio agar de harina de avena)
(3) color de la superficie inferior de la colonia
blanco (placa con medio agar de extracto de maltosa al 2%), de blanco a amarillo claro (placa con medio agar de harina de avena)
(4) textura de la superficie superior de la colonia de similar a lana a similar a pluma
(5) conidioforo
ramificacion de superficie lisa y verticilo desestructurado
(6) Conidio
union de forma ellptica a circular de superficie lisa, aproximadamente 4 pm x aproximadamente 2 pm
(7) clamidospora
ninguna (25°C, periodo de 9 dlas)
(8) secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 5,8S de nucleo y secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 28S de nucleo
la secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 5,8S de nucleo se muestra en SEQ ID NO: 1 y la secuencia de nucleotidos de ADN que codifica para ARN ribosomico 28S de nucleo se muestra en SEQ ID NO: 2.
Beauveria bassiana cepa F-667, Beauveria bassiana cepa F-942, Beauveria bassiana cepa F-1134, Beauveria bassiana cepa F-1274 y Beauveria bassiana cepa F-1310 son cepas conocidas descritas en, por ejemplo, la publicacion de solicitud de patente japonesa JPA2005304421, que se depositaron originalmente con los numeros de registro FERM P-19762, FERM P-19763, FERM P-19764, FERM P-19765, FERM P-19766, respectivamente y se han depositado segun el Tratado de Budapest en el National Institute of Advanced Industrial Science and Technology International Patent Organism Depository con los numeros de registro FERM BP-10514, FERM BP- 10515, FERM BP-10516, FERM BP-10517, FeRm BP-10518, respectivamente tras transferirse del deposito original al deposito internacional. Las propiedades micologicas de las mismas son tal como sigue.
Tabla 1
- Hongos de la presente invention
- F-667 F-942 F-1134 F-1274 F-1310
- Hifas vegetativas
- Que tienen un septo
- Conidioforo
- Que no forma un microquiste radiculiforme
- Celula conidiogenica
- Las celulas se forman frecuentemente como un agregado similar a un racimo de uvas (agrupacion) o en aislamiento y no se forman como una serie en empalizada. La base esta agrandada y el apice es de forma extendida hacia delante en zigzag. Se genera un conidio en una protuberancia denticulada formada en el apice.
- Conidio
- Se genera un simpodioconidio a partir de una celula conidiogenica, subglobosa, de 2 a 3 pm.
- Color de la superficie superior de la colonia
- Blanco De blanco a amarillo claro Blanco Blanco Blanco
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- Hongos de la presente invention
- F-667 F-942 F-1134 F-1274 F-1310
- Color de la superficie inferior de la colonia
- Amarillo claro Amarillo claro Amarillo claro Amarillo claro Amarillo claro
- Cromogenesis roja (*1)
- Ninguno Ninguno Ninguno Ninguno Ninguno
- Temperatura optima de crecimiento
- Aprox. 30°C Aprox. 25°C Aprox. 25°C Aprox. 25°C Aprox. 25°C
- Crecimiento a 35°C
- Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial
- Crecimiento a 15°C (*2)
- De 0,35 a 0,45 De 0,45 a 0,55 De 0,35 o menos (viable) De 0,35 a 0,45 De 0,55 o mas
- Crecimiento a 4°C
- Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial Crecimiento no sustancial
(*1) resultado de la observation tras el cultivo en un medio de cultivo llquido que comprende 30 g/l de glucosa, 10 g/l de peptona y 10 g/l de extracto de levadura durante 3 dlas a 25°C.
(*2) diametro relativo de un colonia en comparacion con el diametro de un colonia crecida a 25°C (durante 7 dlas) ajustado a 1__________________________________________________________________________________
El hongo filamentoso insecticida usado en la presente formulation con base oleosa puede prepararse mediante cultivo en un medio de cultivo llquido o un medio de cultivo solido.
El medio de cultivo usado para cultivar dicho hongo no esta especlficamente limitado siempre que permita que dicho hongo prolifere, y pueden usarse aquellos usados convencionalmente para cultivar microorganismos y contienen apropiadamente una fuente de carbono, una fuente de nitrogeno, una sal organica y una sal inorganica.
El medio de cultivo llquido puede prepararse habitualmente mezclando de manera apropiada agua con una fuente de carbono, una fuente de nitrogeno, una sal organica, una sal inorganica, vitaminas y similares.
Los ejemplos de la fuente de carbono usada en el medio de cultivo llquido incluyen azucares tales como glucosa, dextrina y sacarosa; alcoholes de azucar tales como glicerol; acidos organicos tales como acido fumarico, acido cltrico y acido piruvico; aceites animales; aceites vegetales; melazas y similares. La cantidad de la fuente de carbono contenida en el medio de cultivo es habitualmente del 0,1 al 20% (p/v).
Los ejemplos de la fuente de nitrogeno usada en el medio de cultivo llquido incluyen fuentes de nitrogeno organicas naturales tales como extracto de carne, peptona, extracto de levadura, extracto de malta, polvo de soja, licor de malz macerado, polvo de semilla de algodon, levadura secada y casaminoacido; sales de amonio o nitratos de acidos inorganicos tales como nitrato de sodio, cloruro de amonio, sulfato de sodio y fosfato de amonio; sales de amonio de acidos organicos tales como fumarato de amonio y citrato de amonio; urea; aminoacidos y similares. La cantidad de la fuente de nitrogeno contenida en el medio de cultivo
Los ejemplos de la sal organica y la sal inorganica usadas en el medio de cultivo llquido incluyen cloruros, sulfatos, acetatos, carboxilatos o fosfatos de potasio, sodio, magnesio, hierro, manganeso, cobalto y cinc y similares, y mas especlficamente, incluyen cloruro de sodio, cloruro de potasio, sulfato de magnesio, sulfato de hierro (I), sulfato de manganeso, cloruro de cobalto, sulfato de cinc, sulfato de cobre, acetato de sodio, carboxilato de calcio, carboxilato de sodio, fosfato de potasio monohidratado y fosfato de potasio dihidratado y similares. La cantidad de sal inorganica o sal organica contenida en el medio de cultivo es habitualmente del 0,0001 al 5% (p/v).
Los ejemplos de la vitamina incluyen tiamina y similares.
Los ejemplos del medio de cultivo solido incluyen cultivos principales tales como arroz, trigo y similares y cereales tales como malz, mijo, grama de agua, kaoliang, trigo sarraceno y similares y serrln, bagazo, cascaras de arroz, salvado de trigo, vaina de semilla, paja, mazorca de malz, posos de semilla de algodon, desecho de tofu, agar y gelatina y similares. Estos pueden usarse como una mezcla de dos o mas de ellos. Tambien se incluyen los que contienen la fuente de carbono, la fuente de nitrogeno, la sal organica, la sal inorganica y/o la vitamina y similares usados en el medio de cultivo llquido descrito anteriormente.
Los ejemplos especlficos del medio de cultivo usado en cultivar el hongo filamentoso insecticida incluyen medios de cultivo llquidos tales como medio llquido de extracto de maltosa al 2%, medio llquido de harina de avena, medio llquido de dextrosa de patata, medio llquido de Sabouraud y medio llquido de caldo L y medios de cultivo solidos tales como arroz, cebada, salvado de trigo y un medio agar (medio agar de extracto de maltosa al 2%, medio agar de harina de avena, medio agar de dextrosa de patata, medio agar de Sabouraud, medio agar de caldo L y
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similares).
El cultivo del hongo puede realizarse segun metodos convencionalmente utilizados para cultivar microorganismos.
Es decir, los ejemplos de un metodo para cultivar en un medio de cultivo liquido incluyen cultivo en agitacion en tubo de ensayo, cultivo en movimiento alternativo, fermentador en frasco y cultivo en tanque, y los ejemplos de un metodo para cultivar en un medio de cultivo solido incluyen cultivo en reposo, que puede cambiarse segun se necesite.
La temperatura de cultivo puede cambiar apropiadamente en el intervalo que permite que el hongo crezca, pero esta habitualmente en el intervalo de 10°C a 35°C, y preferiblemente de 15°C a 35°C. El pH del medio de cultivo esta habitualmente en el intervalo de aproximadamente 4 a 11, y preferiblemente de aproximadamente 5 a 7. El periodo de cultivo puede cambiar con las condiciones de cultivo, pero esta habitualmente en el intervalo de aproximadamente 1 dia a aproximadamente 2 meses.
El hongo puede obtenerse mediante el metodo de centrifugar un fluido de cultivo en el que se cultiva el hongo de la presente invencion, un metodo de anadir agua destilada y similares a y raspar el hongo de la superficie de un medio de cultivo solido sobre el que se cultiva el hongo de la presente invencion o un metodo de secar y triturar el medio de cultivo solido y entonces fraccionarlo con tamiz.
La cantidad del hongo filamentoso insecticida formulada en la presente formulacion con base oleosa no esta limitada especificamente, siempre que la presente formulacion con base oleosa se prepare para conseguir un efecto insecticida requerido cuando se use, pero es habitualmente de 102 3 a 1013 UFC (UFC: unidad formadora de colonias) del hongo de la presente invencion por 1 g de la presente formulacion con base oleosa.
El hongo filamentoso insecticida formulado en la presente formulacion con base oleosa esta presente en una cantidad de generalmente el 0,05 al 20% en peso, preferiblemente del 0,1 al 20% en peso, y mas preferiblemente del 1 al 20% en peso, y de manera especialmente preferible del 1 al 10% en peso del peso total de la presente formulacion con base oleosa.
El aceite hidrocarbonado de petroleo usado en la presente formulacion con base oleosa es un aceite hidrocarbonado derivado de petroleo, que tiene una caracteristica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen (en otras palabras, temperatura de destilacion del 50%, la temperatura a la que el 50% en volumen del aceite se evapora) de 350°C a 550°C y preferiblemente de 400°C a 500°C. Los ejemplos mas preferibles del presente aceite hidrocarbonado de petroleo incluyen un aceite hidrocarbonado de petroleo en el que un hidrocarburo de parafina representa del 50 al 100% en peso (por ejemplo, mediante analisis n-d-M, 20°C) de los componentes y similares. Los ejemplos especialmente preferibles del presente aceite hidrocarbonado de petroleo incluyen un aceite hidrocarbonado de petroleo en el que un hidrocarburo de parafina representa del 60 al 90% en peso (por ejemplo, mediante analisis n-d-M, 20°C) y un hidrocarburo aromatico representa no mas del 3% en peso (por ejemplo, mediante analisis n-d-M, 20°C) de los componentes y similares.
Los ejemplos especificos incluyen:
(1) un aceite hidrocarbonado de petroleo que tiene una caracteristica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de alrededor de 419°C, y en el que un hidrocarburo de parafina representa el 80% en peso (mediante analisis n-d-M, 20°C) y un hidrocarburo aromatico representa el 0% en peso (mediante analisis n- d-M, 20°C) de los componentes; y
(2) un aceite hidrocarbonado de petroleo que tiene una caracteristica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de alrededor de 472°C, y en el que un hidrocarburo de parafina representa el 74% en peso (mediante analisis n-d-M, 20°C) y un hidrocarburo aromatico representa el 1,3% en peso (mediante analisis n-d-M, 20°C) de los componentes; y similares.
Esos aceites hidrocarbonados de petroleo pueden estar comercialmente disponibles como articulos comerciales (por ejemplo, un aceite pesticida y un aceite P de maquina pesticida), por ejemplo, de NICHIBEIKOYU Co., Ltd.
La caracteristica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen y la composicion de un aceite hidrocarbonado de petroleo pueden determinarse segun los siguientes metodos oficiales.
(1) Metodo de analisis para una caracteristica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen: norma JIS K2254 (pags. 37-44), “Productos de petroleo - Determination de caracteristicas de destilacion: Metodo de ensayo para destilacion mediante cromatografo de gases”
(2) Metodo de analisis para una composicion de un aceite hidrocarbonado de petroleo (analisis n-d-M): norma ASTM
D3238-95 (pags. 1-3). “Standard test method for calculation of carbon distribution and structural group analysis of
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petroleum oils by the n-d-M”
Una cantidad del aceite hidrocarbonado de petroleo contenido en la presente formulacion con base oleosa es habitualmente del 30 al 99% en peso, preferiblemente del 50 al 98% en peso, mas preferiblemente del 50 al 97% en peso, incluso mas preferiblemente del 70 al 97% en peso y de manera especialmente preferible del 70 al 95% en peso del peso total de la presente formulacion con base oleosa.
El tensioactivo no ionico usado en la presente formulacion con base oleosa es un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo descrito anteriormente. Dicho tensioactivo no esta especlficamente limitado siempre que no afecte a un hongo filamentoso insecticida contenido en la presente formulacion con base oleosa o plantas objeto de la solicitud y similares, e incluye especlficamente, sulfosuccinato de dialquilo, alquil eter de polioxietileno, ester de acido graso de polioxietileno, ester de acido graso de sorbitano, alquil eter de polioxialquileno, aceite de ricino hidrogenado de polioxietileno, amida de acido graso de polioxietileno, ester de alcohol polihidroxilado, derivados de alcohol de azucar y tensioactivos a base de silicona y similares. Los ejemplos especlficos incluyen, como ester de acido graso de polioxietileno, Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., LTD.), como alquil eter de polioxietileno, Pegnol O-4 (TOHO Chemical Industry Co., LTD.) y Pegnol ST-3 (TOHO Chemical Industry Co., LTD.), como mezcla de ester de acido graso de sorbitano y alquil eter de polioxialquileno Sorpol 4274. Los ejemplos preferibles incluyen ester de acido graso de polioxietileno, alquil eter de polioxietileno, ester de acido graso de sorbitano y alquil eter de polioxialquileno y similares. Para esos tensioactivos no ionicos, un unico tensioactivo no ionico puede usarse solo, o puede usarse una mezcla de dos o mas tensioactivos no ionicos.
El HLB preferible mas adecuado para la presente invencion de un tensioactivo no ionico o una mezcla de tensioactivos no ionicos adecuados para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo anteriormente descrito, que puede determinarse segun una clase y una cantidad de un aceite hidrocarbonado de petroleo usado conjuntamente, se ejemplifica generalmente en el intervalo de 7 a 10.
El intervalo de HLB de tensioactivo no ionico o la mezcla de tensioactivos no ionicos adecuado para emulsionar es preferiblemente de 7 a 10, y mas preferiblemente de 7 a 9, cuando se usa conjuntamente con un aceite hidrocarbonado de petroleo que tiene una caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de 350°C a 550°C y en el que un hidrocarburo de parafina representa del 50 al 100% en peso de los componentes.
La cantidad del tensioactivo no ionico o la mezcla de tensioactivos no ionicos contenidos en la presente formulacion con base oleosa es generalmente del 0,1 al 50% en peso, preferiblemente del 1 al 20% en peso, y mas preferiblemente del 1 al 10% en peso, y de manera especlficamente preferible del 3 al 10% en peso del peso total de la presente formulacion con base oleosa.
El agente desecante usado en la presente formulacion con base oleosa no esta especlficamente limitado siempre que tenga capacidad para absorber agua y no afecte al hongo filamentoso insecticida, incluyendo preferiblemente compuestos de oxido de silicio tales como gel de sllice, zeolita y tamices moleculares y compuestos de calcio tales como cloruro de calcio y sulfato de calcio. Puede usarse un unico agente desecante solo, o puede usarse una mezcla de dos o mas agentes desecantes.
La cantidad del agente desecante contenido en la presente formulacion con base oleosa es generalmente del 0,05 al 20% en peso, preferiblemente del 0,5 al 10% en peso, y mas preferiblemente del 1 al 10% en peso del peso total de la presente formulacion con base oleosa.
El agente desecante usado en la presente formulacion con base oleosa puede anadirse a la presente formulacion con base oleosa mediante cualquier metodo, incluyendo un metodo de mezclar el agente dentro de la presente formulacion con base oleosa y un metodo de colocar el agente en un recipiente para el almacenamiento de la presente formulacion con base oleosa y similares.
La razon en peso (partes en peso) de los respectivos componentes contenidos en la presente formulacion con base oleosa es, por ejemplo, tal como se representa por el aceite hidrocarbonado de petroleo; el tensioactivo no ionico o la mezcla de tensioactivos no ionicos; el agente desecante; el hongo filamentoso insecticida, de 30 a 99 partes en peso; de 0,1 a 50 partes en peso; de 0,05 a 20 partes en peso; de 0,05 a 20 partes en peso, preferiblemente de 50 a 98 partes en peso; de 1 a 20 partes en peso; de 0,5 a 10 partes en peso; de 0,1 a 20 partes en peso, mas preferiblemente de 50 a 97 partes en peso; de 1 a 20 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso; de 1 a 20 partes en peso, incluso mas preferiblemente de 70 a 97 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso, y de manera especialmente preferible de 70 a 95 partes en peso; de 3 a 10 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso; de 1 a 10 partes en peso.
La presente formulacion con base oleosa puede comprender adicionalmente otro submaterial frecuentemente usado
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en pesticidas tal como un portador solido, un portador llquido, un agente de control de propiedades llquido (por ejemplo, un ajustador del pH), un propagador, un agente humectante, un estabilizador (un agente antiseptico, un agente anticongelante, un agente antiapelmazante, un agente antioxidante, un absorbente de UV) y un agente de prevencion de deriva de los componentes descritos anteriormente, como otro componente o el resto segun se necesite, dentro de un margen que no produzca una perdida de actividad insecticida del hongo filamentoso insecticida usado en la presente invencion y de caracterlsticas de la formulacion.
Cuando se anaden esos submateriales, una cantidad total de submateriales anadidos es generalmente del 0,1% en peso al 50% en peso, preferiblemente del 0,5% en peso al 20% en peso del peso total de la presente formulacion con base oleosa.
Puede aplicarse cualquier metodo habitual para preparar una formulacion pesticida para un metodo para preparar la presente formulacion con base oleosa. Por ejemplo, la presente formulacion con base oleosa puede prepararse mezclando celulas fungicas del hongo filamentoso insecticida obtenidas segun el metodo anteriormente descrito con un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo no ionico y un agente desecante, y si se necesita, un submaterial como otro componente o el resto. En el mezclado, puede usarse un mortero y una mano de almirez, una espatula y similares, o puede usarse una mezcladora tal como una mezcladora horizontal con cinta helicoidal y una mezcladora nauta.
Los ejemplos de plaga de insectos sobre la que la presente formulacion con base oleosa tiene efecto insecticida incluyen las siguientes plagas de insectos.
Hemiptera: saltahojas (Delphacidae) tales como saltahojas pequeno marron (Laodelphax striatellus), saltahojas marron del arroz (Nilaparvata lugens) y saltahojas de dorso blanco del arroz (Sogatella furcifera); chicharras (Deltocephalidae) tales como chicharra verde del arroz (Nephotettix cincticeps) y chicharra verde del te (Empoasca onukii); pulgones (Aphididae) tales como pulgon del algodon (Aphis gossypii), pulgon verde del melocotonero (Myzus persicae) y pulgon del nabo (Lipaphis pseudobrassicae); chinches (Pentatomidae); moscas blancas (Aleyrodidae) tales como mosca blanca de invernadero (Trialeurodes vaporariorum), mosca blanca de la batata (Bemisia tabaci) y mosca blanca de la hoja plateada (Bemisia argentifolii); escalas; chinches de encaje (Tingidae); psllidos (Psyllidae) y similares.
Diptera: Mosquitos (Culicidae) tales como Culex (por ejemplo, mosquito comun domestico (Culex pipiens pallens)), Aedes, Anopheles y Chironomus spp.; moscas domesticas (Muscidae) tales como mosca domestica (Musca domestica); moscardones (Calliphoridae); moscardas de la carne (Sarcophagidae); antomidos (Anthomyiidae); moscas de las agallas (Cecidomyiidae); moscas minadoras de hojas (Agromyzidae); moscas de la fruta (Tephritidae); moscas del vinagre (Drosophilidae); moscas de la humedad (Psychodidae); tabanos (Tabanidae); moscas negras (Simuliidae); moscas de establo (Muscidae) y similares.
Lepidoptera: polillas (Pyralidae) tales como barrenador del arroz (Chilo suppressalis), enrollador de la hoja de arroz (Cnaphalocrocis medinalis), taladro del malz europeo (Ostrinia nubilalis) y Parapediasia teterrella; mariposas nocturnas (Noctuidae) tales como oruga del tabaco (Spodoptera litura), gusano soldado (Spodoptera exigua), oruga del corte del arroz (Pseudaletia separata), mariposa de la col (Mamestra brassicae), gusano trozador (Agrotis ipsilon), Trichoplusia spp., Heliothis spp., Helicoverpa spp. (por ejemplo, gusano cogollero (Helicoverpa armigera)), Earias spp. y Autographa spp. (por ejemplo, oruga semi-entrelazadora de la remolacha (Autographa nigrisigna)); pieridos (Pieridae) tales como blanquita de la col (Pieris rapae crucivora); iponomeutoideos (Yponomeutidae) tales como palomilla dorso de diamante (Plutella xylostella); limantridos (Lymantriidae) tales como polilla de las matas de hierba oriental (Euproctis taiwana), polilla gitana (Lymantria dispar), polilla de cola parda (Euproctis similis); polillas oruga babosa (Limacodidae) tales como Scopelodes contracus; polillas oruga de las carpas (Lasiocampidae) tales como oruga del pino (Dendrolimus spectabilis); tortrlcidos (Tortricidae) tales como tales como palomilla oriental de la fruta (Adoxophyes orana fasciata), polilla oriental de frutales (Grapholita molesta) y polilla del manzano (Cydia pomonella); Carposinidae tales como polilla del melocoton (Carposina niponensis); Lyonetiidae tales como minadora sinuosa (Lyonetia clerkella); Gracillariidae tales como minadora de la manzana (Phyllonorycter ringoniella); Phyllocnistidae tales como minador de hojas de los cltricos (Phyllocnistis citrella); Yponomeuta evonymella tales como polilla del repollo (Plutella xylostella); gelequlidos (Gelechii) tales como gusano rosado del algodon (Pectinophora gossypiella); arctidos (Arctiidae); Tineidae y similares.
Coleoptera: escarabajo de la hoja (Chrysomelidae), cucarachas (Scarabaeidae), escarabajos de hocico (Curculionidae), gorgojos enrolladores de hojas (Attelabidae), mariquitas (Coccinellidae), escarabajos longicornios (Cerambycidae), escarabajos oscuros (Tenebrionidae) y similares.
Thysanoptera: trips (Thripidae) tales como el genero Thrips (por ejemplo, trips de melon (Thrips palmi)), el genero Frankliniella (por ejemplo, trips de las flores (Frankliniella occidentalis)) y el genero Scirtothrips (por ejemplo, trips amarillo del te (Scirtothrips dorsalis)); trips con cola de tubo (Phlaeotripidae) y similares.
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Blattaria: cucarachas blatidas (Blattidae), cucarachas blatelidas (Blattellidae) y similares. Orthoptera: saltamontes (Acrididae), alacran cebollero (Gryllotalpidae).
Siphonaptera: pulgas de ser humano (Pulex irritans), pulgas de gato (Ctenocephalides felis) y similares.
Anoplura: piojo del cuerpo humano (Pediculus humanus) y similares.
Isoptera: termita japonesa (Reticulitermes speratus), termita subterranea de Formosa (Coptotermes formosanus) y similares.
La presente formulacion con base oleosa se usa generalmente aplicandola a la plaga de insectos, a un habitat de la plaga de insectos o a una planta vulnerable a la plaga de insectos. Cuando se aplica a una planta vulnerable a la plaga de insectos, es generalmente preferible que la presente formulacion con base oleosa se diluya con agua, y la disolucion resultante se usa en aplicacion foliar a la planta.
Cuando se aplica la presente formulacion con base oleosa a la plaga de insectos, a un habitat de la plaga de insectos o a una planta vulnerable a la plaga de insectos la cantidad de aplicacion de la misma es una cantidad eficaz desde el punto de vista insecticida, habitualmente de 105 a 1019 UFC, preferiblemente de 107 a 1017 UFC del cuerpo del hongo filamentoso insecticida en la presente formulacion con base oleosa usada para 1000 m2.
Ejemplos
La presente invencion se describe con mas detalle mediante los siguientes ejemplos.
Ejemplo 1 (aislamiento de un hongo filamentoso insecticida del genero Paecilomyces)
Se coge un insecto muerto en el campo, que ya esta rlgido y tiene un sinema creciendo de su cuerpo. Se toca un conidio formado en dicho insecto muerto con un asa de platino, y se frota el asa de platino sobre un medio SDY de modo que se traza una llnea. Se cultiva el medio de cultivo durante unos dlas a 25°C, y entonces se corta una colonia independiente de un hongo crecido y se transfiere a un nuevo medio SDY. La colonia se cultiva adicionalmente a 25°C.
Entre los hongos resultantes, se selecciona un hongo que tiene las siguientes propiedades a) a h) como hongo filamentoso del genero Paecilomyces.
a) Una hifa vegetativa tiene un septo.
b) No existe reproduccion sexual.
c) No se forma conidio en un picnidio, un aparato similar a un crisol, sino que es un exoconidio.
d) Un conidio es un fiaoconidio formado de un apice del fialido, seco y catenulado.
e) Un conidioforo no tiene microquistes en la parte superior del mismo.
f) Un fialido no se dispone en forma en empalizada sobre un coremio.
g) Conidos catenulados no forman un haz.
h) El fialido tiene un cuello verticilado transparente, deformado o laxo.
A continuacion, se cultiva el hongo filamentoso seleccionado del genero Paecilomyces en un medio SDY a 25°C. Se suspende un conidio formado en agua esteril de manera que la concentracion del mismo es de 1x108 UFC/ml. Se alslan diez insectos que pertenecen a la misma especie que el insecto muerto del que se aislo el hongo en la suspension resultante durante 30 segundos, y entonces se hacen crecer en condiciones de 25°C y el 100% de humedad. Si existe un insecto muerto 6 dlas despues de la inmersion, el hongo puede seleccionarse como hongo filamentoso insecticida del genero Paecilomyces.
Ejemplo 2 (aislamiento de un hongo filamentoso insecticida del genero Beauveria)
Se coge un insecto muerto en el campo, que ya esta rlgido y tiene un sinema creciendo de su cuerpo. Se toca un conidio formado en dicho insecto muerto con un asa de platino, y se frota el asa de platino sobre un medio SDY de
modo que se traza una ilnea. Se cultiva el medio de cultivo durante unos dlas a 25°C, y entonces se corta una colonia independiente de un hongo crecido y se transfiere a un nuevo medio SDY. La colonia se cultiva adicionalmente a 25°C.
Entre los hongos resultantes, se selecciona un hongo que tiene las siguientes propiedades a) a g) como hongo 5 filamentoso del genero Beauveria.
a) Una hifa vegetativa tiene un septo.
b) No existe reproduccion sexual.
c) No se forma conidio en un picnidio, un aparato similar a un crisol, sino que es un exoconidio.
d) U conidio es un simpodioconidio formado de una celula conidiogenica, y la celula conidiogenica es raquis u 10 odontoide.
e) No se forma una celula conidiogenica en una capa membranosa.
f) Un conidioforo no tiene microquistes
g) Una celula conidiogenica es lageniforme, que tiene una base turgente y un apice con raquis.
A continuacion, se cultiva el hongo filamentoso seleccionado del genero Beauver/acultivo en un medio SDY a 25°C. 15 Se suspende un conidio formado en agua esteril de manera que la concentracion del mismo es de 1x108 UFC/ml. Se alslan diez insectos que pertenecen a la misma especie que el insecto muerto del que se aislo el hongo en la suspension resultante durante 30 segundos, y entonces se hacen crecer en condiciones de 25°C y el 100% de humedad. Si existe un insecto muerto 6 dlas despues de la inmersion, el hongo puede seleccionarse como hongo filamentoso insecticida del genero Beauveria.
20 Ejemplo 3 (Preparacion de un hongo filamentoso insecticida 1)
En un matraz de 500 ml, se inoculo un cuerpo de hongo de Paecilomyces tenuipes cepa T1, que se cultivo previamente en medio agar de dextrosa de patata (Difco Laboratories), a 100 ml de medio de dextrosa de patata (Difco Laboratories), y entonces se cultivo con agitacion durante 3 dlas a 25°C para obtener un fluido de cultivo. A continuacion, se pretrituraron 80 g de cebada en copos con la vaina (Matsukage Seibaku Co. ltd.) para dar partlculas 25 que tenlan un diametro de 1 a 5 mm mediante un triturador de mano HC-1 (Osaka Chemical Co.,) y entonces se esterilizo en un autoclave. El producto se coloco en una cubeta transparente de PET (longitud: 310 mm, anchura: 220 mm, altura: 80 mm), y entonces se anadio y se mezclo con 20 g de dicho fluido de cultivo y 100 g de agua esteril. La cubeta se cubrio con un trozo de tejido esteril y se cultivo durante 17 dlas con irradiacion continua con una luz a una iluminancia de 6.000, en una sala de control ambiental con una temperatura de 25°C y una humedad del 30 90% HR. Despues del cultivo, se seco la cebada en copos con la vaina sobre la que creclan cuerpos de hongo (que
contenlan muchos conidios). Se colocaron la cebada en copos seca con la vaina y 5 bolas de agata de 20 mm de diametro en un tamiz convencional segun la norma JIS (norma JIS Z 8801: se uso un tamiz de 60 de malla), se apilo sobre un tamiz convencional segun la norma JIS (norma JIS Z 8801: se usaron tamices de 100 y 200 de malla), y entonces se agito durante 10 minutos en un agitador de tamiz automatizado (Fritsch GmbH) para obtener de 2 a 3 g 35 de polvo de hongo en una fraccion de no mas de 200 de malla, que contenla 1x1011 UFC/g del cuerpo de hongo de la cepa T1.
Ejemplo 4 (Preparacion de un hongo filamentoso insecticida 2)
En un matraz de 500 ml, se inoculo un cuerpo de hongo de Beauveria bassiana F-667, que se cultivo previamente en medio de dextrosa de patata (Difco Laboratories), a 100 ml de medio agar de dextrosa de patata (Difco 40 Laboratories), y entonces se cultivo con agitacion durante 3 dlas a 25°C para obtener un fluido de cultivo. A continuacion, se pretrituraron 80 g de cebada en copos con la vaina (Matsukage Seibaku Co. ltd.) para dar partlculas que tenlan un diametro de 1 a 5 mm mediante un triturador de mano HC-1 (Osaka Chemical Co., Ltd.), y entonces se esterilizo en un autoclave. El producto se coloco en una cubeta transparente de PET (longitud: 310 mm, anchura: 220 mm, altura: 80 mm), y entonces se anadio y se mezclo con 20 g de dicho fluido de cultivo y 100 g de agua 45 esteril. La cubeta se cubrio con un trozo de tejido esteril y se cultivo durante 17 dlas con irradiacion continua con una luz a una iluminancia de 6.000 lux, en una sala de control ambiental con una temperatura de 25°C y una humedad del 90% HR. Despues del cultivo, se seco la cebada en copos con la vaina sobre la que creclan cuerpos de hongo (que contenlan muchos conidios). Se colocaron la cebada en copos seca con la vaina y 5 bolas de agata de 20 mm de diametro en un tamiz convencional segun la norma JIS (norma JIS Z 8801: se uso un tamiz de 60 de malla), se 50 apilo sobre un tamiz convencional segun la norma JIS (norma JIS Z 8801: se usaron tamices de 100 y 200 de malla), y entonces se agito durante 10 minutos en un agitador de tamiz automatizado (Fritsch GmbH) para obtener de 4 a
5 g de polvo de hongo en una fraccion de no mas de 200 de malla que contenla 1x1011 UFC/g del cuerpo de hongo. Ejemplo 5 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 1)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 88,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, 5 cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 2,0% en peso de cloruro de calcio (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) que se habla machacado en un mortero para obtener la presente 10 formulacion con base oleosa (1).
Ejemplo 6 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 2)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo 15 aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol ST-3 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un alquil eter de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de gel de sllice granular (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (2).
20 Ejemplo 7 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 3)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol ST-3 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un 25 alquil eter de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (3).
Ejemplo 8 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 4)
30 En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo 35 de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (4).
Ejemplo 9 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 5)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., 40 Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Pegnol O-4 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un alquil eter de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 45 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (5).
Ejemplo 10 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 6)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, 50 cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Pegnol ST-3 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un alquil eter de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo
obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (6).
Ejemplo 11 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 7)
5 En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Sorpol 4274 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de una mezcla de un ester de acido graso de sorbitano y un alquil eter de polioxialquileno, HLB 8,2) y se mezclaron bien y 10 entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (7).
Ejemplo 12 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 8)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., 15 Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol 24-6 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz 20 molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (8).
Ejemplo 13 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 9)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, 25 cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de gel de sllice granular(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente 30 formulacion con base oleosa (9).
Ejemplo 14 (Preparacion de la presente formulacion con base oleosa: 10)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,5% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo 35 aromatico) y el 10,0% en peso de Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 4 y se mezclo. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener la presente formulacion con base oleosa (10).
40 Ejemplo comparativo 1 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 1)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol 24-O (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un 45 ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3. La mezcla se mezclo adicionalmente para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (1).
Ejemplo comparativo 2 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 2)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 90,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., 50 Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 5,0% en peso de Pegnol ST-3 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un
alquil eter de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3. La mezcla se mezclo adicionalmente para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (2).
Ejemplo comparative 3 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 3)
5 En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Sorpol 5060 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo anionico de dodecilbencenosulfonato de sodio) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo 10 obtenido en el ejemplo 3. Dicha mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (3).
Ejemplo comparativo 4 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 4)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., 15 Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Soprophor 4D384 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo anionico de triestirilfenil eter de acido sulfurico de polioxietileno) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz 20 molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (4).
Ejemplo comparativo 5 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 5)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, 25 cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Soprophor 3D33 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo anionico de triestirilfenil eter de acido fosforico de polioxietileno) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3. Dicha mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de dicha mezcla para obtener una 30 formulacion con base oleosa comparativa (5).
Ejemplo comparativo 6 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 6)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo 35 aromatico) y el 10,0% en peso de Catinal LTC-35A (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo cationico de cloruro de lauriltrimetilamonio) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 3. La mezcla se mezclo adicionalmente con el 5% en peso de tamiz molecular 4A 1/16 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) por el 100% en peso de la mezcla para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (6).
40 Ejemplo comparativo 7 (Preparacion de una formulacion con base oleosa comparativa: 7)
En un frasco de vidrio, se cargaron el 85,0% en peso de un aceite hidrocarbonado de petroleo (NICHIBEIKOYU Co., Ltd., la caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen es de 472°C, cantidades de componentes: el 74% en peso de un hidrocarburo de parafina, el 1,3% en peso de un hidrocarburo aromatico) y el 10,0% en peso de Pegnol 24-0 (TOHO Chemical Industry Co., Ltd., un tensioactivo no ionico de un 45 ester de acido graso de polioxietileno, HLB 7,9) y se mezclaron bien y entonces se anadio el 5,0% en peso del polvo de hongo obtenido en el ejemplo 4. La mezcla se mezclo adicionalmente para obtener una formulacion con base oleosa comparativa (7).
Ejemplo de ensayo 1 (estabilidad de la viabilidad del hongo filamentoso insecticida en la presente preparacion con base oleosa: 1)
50 Se tomaron 20 mg de una muestra de cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (1), (2), (3), (8) y (9) y de las formulaciones con base oleosa comparativas (1) y (2), y se anadieron a 20 ml de agua esteril de dilucion para preparar una suspension. La suspension se diluyo hasta una concentracion apropiada con el agua esteril de
5
10
15
20
25
30
35
40
45
50
dilucion. Se anadieron gota a gota 100 ml de la suspension diluida resultante y se extendieron sobre un medio agar de dextrosa de patata y se cultivo durante 2 dias a 25°C. Despues del cultivo, se determino un recuento de viables de hongos filamentosos insecticidas en dicha formulacion mediante el recuento de las colonias crecidas. Al mismo tiempo, se coloco cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (1), (2), (3), (8) y (9) y las formulaciones con base oleosa comparativas (1) y (2) en un frasco de vidrio con tapon de rosca y se cerro y entonces se almaceno en la oscuridad durante 12 semanas a 25°C. Se tomaron 20 mg de una muestra de cada una de las presentes formulaciones con base oleosa 1 a 3 y de las formulaciones con base oleosa comparativas 1 y 2 almacenadas y se anadieron a 20 ml de agua esteril de dilucion para preparar una suspension. La suspension se diluyo hasta una concentracion apropiada con el agua esteril de dilucion. Se anadieron gota a gota 100 ml de la suspension diluida resultante y se extendieron sobre un medio agar de dextrosa de patata y se cultivo durante 2 dias a 25°C. Despues del cultivo, se determino un recuento de viables de hongos filamentosos insecticidas en dicha formulacion mediante el recuento de las colonias crecidas. Se calculo la razon de recuentos viables de hongos filamentosos insecticidas en la formulacion antes y despues del almacenamiento asi obtenido para determinar la tasa de supervivencia del hongo filamentoso insecticida despues de 12 semanas de almacenamiento. El agua esteril de dilucion usada se preparo anadiendo Shin Lino (Nihon Nohyaku Co., Ltd., un propagador) y Silwet L-77 (Nippon Unica Co., un tensioactivo) a una concentracion del 0,1% (p/v) cada uno a una disolucion acuosa del 0,85% (p/v) de cloruro de sodio y esterilizando. Las tasas de supervivencia de los hongos filamentosos insecticidas en las presentes formulaciones con base oleosa (1), (2), (3), (8) y (9) y las formulaciones con base oleosa comparativas (1) y (2) despues de 12 semanas de almacenamiento se muestran en la tabla 2.
Tabla 2
- Formulacion
- Tasa de supervivencia (%)
- Presente formulacion con base oleosa (1)
- 100
- Presente formulacion con base oleosa (2)
- 100
- Presente formulacion con base oleosa (3)
- 100
- Presente formulacion con base oleosa (8)
- 100
- Presente formulacion con base oleosa (9)
- 100
- Formulacion con base oleosa comparativa (1)
- 50
- Formulacion con base oleosa comparativa (2)
- 75
Ejemplo de ensayo 2 (estabilidad de la viabilidad del hongo filamentoso insecticida en la presente formulacion con base oleosa: 2)
Se tomaron 20 mg de una muestra de cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (10) y de la formulacion con base oleosa comparativa (7), y se anadieron a 20 ml de agua esteril de dilucion para preparar una suspension. La suspension se diluyo hasta una concentracion apropiada con el agua esteril de dilucion. Se anadieron gota a gota 100 ml de la suspension diluida resultante y se extendieron sobre un medio agar de dextrosa de patata y se cultivo durante 2 dias a 25°C. Despues del cultivo, se determino un recuento de viables de hongos filamentosos insecticidas en dicha formulacion mediante el recuento de las colonias crecidas. Al mismo tiempo, cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (10) y la formulacion con base oleosa comparativa (7) se colocaron en un frasco de vidrio con tapon de rosca y se cerro y entonces se almaceno en la oscuridad durante medio ano a 25°C. Se tomaron 20 mg de una muestra de cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (10) y de la formulacion con base oleosa comparativa (7) almacenadas, y se anadieron a 20 ml de agua esteril de dilucion para preparar una suspension. La suspension se diluyo hasta una concentracion apropiada con el agua esteril de dilucion. Se anadieron gota a gota 100 ml de la suspension diluida resultante y se extendieron sobre un medio agar de dextrosa de patata y se cultivaron durante 2 dias a 25°C. Despues del cultivo, se determino un recuento de viables de hongos filamentosos insecticidas en la formulacion mediante el recuento de las colonias crecidas. Se calculo la razon de recuentos de viables de hongos filamentosos insecticidas en dicha formulacion antes y despues del almacenamiento asi obtenido para una tasa de supervivencia del hongo filamentoso insecticida despues de medio ano de almacenamiento. El agua esteril de dilucion usada se preparo anadiendo Shin Lino (Nihon Nohyaku Co., Ltd., un propagador) y Silwet L-77 (Nippon Unica Co., un tensioactivo) a una concentracion del 0,1% (p/v) de cada una de una disolucion acuosa del 0,85% (p/v) de cloruro de sodio y esterilizando. La comparacion entre tasas de supervivencia de hongos filamentosos insecticidas en la presente formulacion con base oleosa (10) despues de 1 ano de almacenamiento y la formulacion con base oleosa comparativa (7) despues de 1 ano de almacenamiento muestran que la presente formulacion con base oleosa (10) tiene mayor tasa de supervivencia que la formulacion con base oleosa comparativa (7).
Ejemplo de ensayo 3 (estabilidad de la viabilidad del hongo filamentoso insecticida en la presente formulacion con base oleosa: 3)
Se tomaron 20 mg de una muestra de cada una de las presentes formulaciones con base oleosa (4) a (7) y de las formulaciones con base oleosa comparativas (3) a (6), y se anadieron a 20 ml de agua esteril de dilucion para preparar una suspension. La suspension se diluyo hasta una concentracion apropiada con el agua esteril de dilucion.
Claims (13)
- 5101520253035REIVINDICACIONES1. Formulacion insecticida con base oleosa, que comprende un aceite hidrocarbonado de petroleo, un tensioactivo no ionico adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo, un agente desecante y un hongo filamentoso insecticida.
- 2. Formulacion insecticida con base oleosa segun la reivindicacion 1, en la que dicho tensioactivo no ionico tiene un HLB en el intervalo adecuado para emulsionar el aceite hidrocarbonado de petroleo.
- 3. Formulacion insecticida con base oleosa segun la reivindicacion 1 o 2, en la que dicho aceite hidrocarbonado de petroleo que tiene una caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de 350°C a 550°C.
- 4. Formulacion insecticida con base oleosa segun la reivindicacion 1, en la que dicho aceite hidrocarbonado de petroleo tiene una caracterlstica de destilacion de una temperatura de recuperacion del 50% en volumen de 400°C a 500°C, y dicho tensioactivo no ionico es uno o mas tensioactivos seleccionados del grupo que consiste en ester de acido graso de polioxietileno, alquil eter de polioxietileno, ester de acido graso de sorbitano y alquil eter de polioxialquileno, y tiene un HLB en el intervalo adecuado para emulsionar dicho aceite hidrocarbonado de petroleo.
- 5. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que dicho agente desecante es uno o mas agentes desecantes seleccionados de compuestos de oxido de silicio y compuestos de calcio.
- 6. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es una o mas cepas de hongos de generos seleccionados del grupo que consiste en genero Paecilomyces, genero Beauveria, genero Metarhizium, genero Nomuraea, genero Verticillium, genero Hirsutella, genero Culicinomyces, genero Sorosporella y genero Tolypocladium.
- 7. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en la que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso del genero Paecilomyces.
- 8. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso de Paecilomyces tenuipes.
- 9. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho hongo filamentoso insecticida es Paecilomyces tenuipes cepa T1 (FERM BP-7861).
- 10. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso del genero Beauveria.
- 11. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho hongo filamentoso insecticida es un hongo filamentoso de Beauveria bassiana.
- 12. Formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho hongo filamentoso insecticida es una o mas cepas seleccionadas del grupo que consiste en Beauveria bassiana cepa F- 667 (FERM BP-10514), Beauveria bassiana cepa F-942 (FERM BP-10515), Beauveria bassiana cepa F-1134 (FERM BP-10516) Beauveria bassiana cepa F-1274 (FERM BP-10517) y Beauveria bassiana cepa F-1310 (FERM BP-10518).
- 13. Metodo para controlar plagas de insectos, que comprende aplicar la formulacion insecticida con base oleosa segun cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 a una plaga de insectos, un habitat de la plaga de insectos o una planta vulnerable a la plaga de insectos.
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