ES2384365T3 - Nuevos derivados de indolin-2-ona sustituidos y su uso como inhibidores de la quinasa activada por mitógenos P38 - Google Patents

Abstract

Aparato numérico por chorros de material viscoso para aplicación de un recubrimiento sobre una cara de material plástico de un sustrato (13), que comprende: - un receptáculo (9) que contiene un producto viscoso de viscosidad inferior a 1000 centipoises (mPas), - un almacén de entrada (5) y un almacén de salida (8), - un medio informático (10) de gestión, - un medio de desplazamiento del sustrato entre los diferentes puestos de trabajo, - un medio (4) de sujeción y de transferencia del sustrato (13), desde el almacén de entrada hacia el medio de desplazamiento y del medio de desplazamiento hacia el almacén de salida, - un mecanismo de determinación de la posición del sustrato, - un puesto de aplicación (2, 9, 11, 12) compuesto, como mínimo, por una serie de agujas huecas, cuyos extremos constituyen toberas (12) dispuestas, según una alineación, estando controlada cada aguja hueca separadamente por medios de control y alimentada por dicho receptáculo (9) que contiene el producto viscoso que se debe proyectar sobre el sustrato durante un desplazamiento relativo entre el sustrato y el puesto de aplicación, para efectuar la aplicación del producto en una zona determinada del sustrato, recibiendo vibración cada una de las agujas huecas por acción de un accionador piezoeléctrico encolado sobre un resonador formado por el montaje de cada aguja hueca en alineación, - un puesto de secado (7) que presenta un horno de secado, caracterizado porque: - el mecanismo de determinación de la posición del sustrato está formado por un puesto de lectura (6) que lee y determina, como mínimo, una posición del sustrato o de referencias marcadas sobre el sustrato, - el horno de secado es un horno de infrarrojos o de corriente de aire caliente o UV, - el puesto de aplicación (2, 9, 11, 12) está previsto de manera que la excitación del accionador en duración y potencia determina la dimensión y la forma de la gota de producto viscoso, - el medio informático (10) de gestión controla, en función de un fichero de programación establecido: medios de control del puesto de aplicación, en función de la posición del sustrato, del puesto de lectura y del puesto de secado, o bien la gestión de las informaciones captadas en los diferentes puestos de trabajo para coordinar las operaciones sobre cada uno de dichos puestos.

Description

Nuevos derivados de indolin-2-ona sustituidos y su uso como inhibidores de la quinasa activada por mit6genos P38.

5 La presente invenci6n se refiere a nuevos inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38. Las MAP quinasas son enzimas conservadas evolutivamente que traducen las senales de la membrana a respuestas de expresi6n genica. En mamiferos, se pueden distinguir cuatro familias MAPK: las quinasas relacionadas con senales extracelulares (ERK1/2), quinasas de extremo amino terminal Jun (JNK1/2/3), proteinas p38 (alfa, beta, gamma y delta) y ERK5. La regulaci6n de estas proteinas es ejercida por una cascada de tres niveles compuesta por MAPK, MAPK quinasa y MAPK quinasa quinasa. MAPK p38 se identific6 originalmente como la diana de CSAID (farmacos antiinflamatorios supresores de citoquinas), que tienen una funci6n central en la via de transducci6n de senales que conduce a la producci6n de

15 TNF-alfa y otras citoquinas (Lee et al, 1984). p38 se activa por fosforilaci6n de Thr y Tyr por cualquiera de MKK3, MKK4 o MKK6 (Kyriakis y Avruch, 2001) en respuesta a estimulos estresores y proinflamatorios. A su vez, p38 fosforila sus efectores en residuos Ser y Thr, a saber proteina quinasas fosfatasas y factores de transcripci6n, tales como ATF-2, MEF2, MAPKAPK2, MSK1/2 o MNK1/2. En su conjunto, esta cascada de activaci6n da como resultado el control de la expresi6n genica a traves de cuatro mecanismos diferentes: activaci6n del factor de transcripci6n; estabilizaci6n de ARNm; traducci6n del ARNm; y fosforilaci6n de histona en los sitios de uni6n a NK-kb en cromatina (Shi y Gaestel, 2002; Sacanni et al, 2001). Existen cuatro isoformas diferentes de p38 codificadas por genes distintos: p38 alfa, beta, gamma y delta, cada una de las cuales muestra un modelo de expresi6n en tejidos caracteristico. Como se valora por los niveles de ARNm y

25 proteinas (Beardmore et al, 2005; Wang et al, 1997), p38 alfa y beta se expresan de forma ubicua, siendo la expresi6n de p38 beta mas relevante en tejidos del SNC (cerebro, corteza, cerebelo, hipocampo y similares). La expresi6n de p38 gamma se da de forma mas notable en el musculo esqueletico mientras que p38 delta esta localizada fundamentalmente en el coraz6n, rin6n, pulm6n y glandulas suprarrenales. A nivel celular, p38 alfa y delta parecen ser las isoformas mas relevantes en celulas inmunes (monocitos, macr6fagos, neutr6filos y linfocitos T) (Hale et al, 1999). La inhibici6n farmacol6gica con inhibidores especificos de p38 alfa/delta asi como los estudios de rastreo genico han indicado que p38 alfa es, de forma mas probable, la isoforma que regula las respuestas inflamatorias a traves de su substrato cadena abajo MAPKAP-K2 (Kotlyarov et al, 1999). De igual modo, esta isoforma es necesaria en el desarrollo embrionario temprano puesto que ratones con eliminaci6n genica de p38 alfa (p38 alfa EG) murieron en el dia 12,5 del desarrollo embrionario debido a insuficiencia placentaria y defectos

35 vasculares (Allen et al, 2000; Tamura et al, 2000; Adams et al, 2000), un fenotipo que tambien se reproduce en el rat6n con EG doble de MKK3/MKK6 (Brancho et al, 2003). Por el contrario, el rat6n con eliminaci6n genica de p38 beta, gamma y delta no mostr6 ninguna deficiencia en el desarrollo (Beardmore et al, 2005; Sabio et al, 2005). El rat6n con eliminaci6n genica de p38 beta parece responder de igual modo a estimulos proinflamatorios (LPS) que los controles de tipo salvaje, indicando que esta isoforma no tiene una funci6n en la inflamaci6n (Beardmore et al 2005). La contribuci6n de la via MAPK p38 a la inflamaci6n se ha estudiado tanto in vivo como in vitro empleando diferentes series quimicas de inhibidores de p38 (Pargellis y Regan, 2003; Kumar et al, 2003). La molecula inhibidora usada de forma mas extendida, SB203580, es, de hecho, un inhibidor doble p38alfa/beta. La inhibici6n de p38 abroga la

45 liberaci6n de TNF-alfa asi como de otras citoquinas proinflamatorias, tales como IL-1, IL-6 e IL-8, en PBMC, sangre entera o la linea de celulas de monocitos humanos THP-1. En virtud de la implicaci6n de p38 en la producci6n de TNF-alfa, se han ensayado inhibidores de p38 en modelos animales de enfermedades en las que TNF-alfa tiene una funci6n patofisiol6gica. La inhibici6n de p38 reduce la artritis murina inducida por colageno y la gravedad de la artritis inducida por adyuvantes en la rata (Pargellis y Regan, 2003). Por otro lado, los inhibidores de p38 tambien mejoran la resorci6n 6sea en modelos animales de artritis, probablemente debido a la implicaci6n de MAPK p38 en la diferenciaci6n de osteoclastos. La inhibici6n de p38 atenua la respuesta inflamatoria en un modelo murino de enfermedad de Crohn y disminuye la producci6n de TNF alfa en biopsias de pacientes humanos con enfermedad de Crohn (Hollenbach et al 2005; Waetzig et al, 2002).

55 Debido al uso exclusivo de la via p38 por los neutr6filos, tambien se ha considerado que p38 es una diana para enfermedad pulmonar obstructiva cr6nica (EPOC) (Nick et al, 2002). La inhibici6n de p38 reduce neutrofilia, citoquinas inflamatorias, MMP-9 y fibrosis en el pulm6n (Underwood et al, 2000). En modelos de piel de irradiaci6n, la inhibici6n de p38 protege la epidermis contra la exposici6n aguda a radiaci6n ultravioleta bloqueando la apoptosis y las respuestas inflamatorias (Hildesheim et al, 2004). La inhibici6n de p38 tambien revierte los efectos hematopoyeticos en la medula 6sea de pacientes con sindrome mielodisplasico en los que la sobreproducci6n de TNF alfa tiene una funci6n patofisiol6gica (Katsoulidis et al, 2005). En neoplasias hematopoyeticas, un estudio ha demostrado que los inhibidores de p38 pueden bloquear la proliferaci6n de celulas de mieloma multiple inhibiendo la producci6n de IL-6 y VEGF en celulas estromales de la

65 medula 6sea (Hideshima et al, 2002).

p38 esta implicada en mecanismos celulares clave tales como apoptosis, fibrosis e hipertrofia celular que son comunes a patologias cardiacas y vasculares. La inhibici6n farmacol6gica de p38 ha demostrado ser util en la mejoria de lesi6n por reperfusi6n isquemica, isquemia cerebral focal, sindrome coronario agudo, insuficiencia cardiaca cr6nica y remodelado despues de infarto de miocardio (See et al, 2004).

Se ha descrito que la inhibici6n experimental de p38 es eficaz en reducir el dolor en modelos animales de neuropatia que se basan en la expresi6n de COX-2 y la producci6n de TNF alfa por celulas de la glia (Schafers et al, 2003; Jin et al, 2003; Tsuda et al, 2004).

10 Por tanto, los compuestos de la invenci6n pueden ser utiles en la profilaxis o tratamiento de cualquier enfermedad o trastorno en el que la quinasa p38 desempene una funci6n, incluyendo estados patol6gicos causados por una producci6n excesiva o no regulada de citoquinas proinflamatorias, incluyendo, por ejemplo, producci6n excesiva o no regulada de TNF, IL-1, IL-6 e IL-8 en un ser humano o en otro animal. La invenci6n se extiende a dicho uso y al uso de los compuestos para la fabricaci6n de un medicamento para tratar dichas enfermedades o trastornos

15 mediados por citoquinas. Ademas, la invenci6n se extiende a la administraci6n a un ser humano de una cantidad eficaz de un inhibidor de p38 para tratar cualquiera de tales enfermedades o trastornos.

Enfermedades o trastornos en los que la quinasa p38 desempena una funci6n bien directamente o traves de citoquinas proinflamatorias incluyendo las citoquinas TNF, IL-1, IL-6 e IL-8 incluyen, sin limitaci6n, enfermedades

20 autoinmunes, enfermedades inmunes e inflamatorias, trastornos 6seos destructivos, trastornos neoplasicos, trastornos neurodegenerativos, enfermedades virales, enfermedades infecciosas, enfermedades cardiovasculares, trastornos relacionados con la angiogenesis y trastornos relacionados con el dolor.

Enfermedades autoinmunes que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas,

25 artritis reumatoide, artritis psoriasica, espondilitis anquilosante, sindrome de Reiter, fibromialgia, enfermedad inflamatoria del intestino tal como colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn, esclerosis multiple, diabetes, glomerulonefritis, lupus eritematoso sistemico, esclerodermia, tiroiditis cr6nica, enfermedad de Graves, anemia hemolitica, gastritis autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, hepatitis activa cr6nica autoinmune, miastenia grave o enfermedad de Addison.

30 Enfermedades inmunes e inflamatorias que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas, asma, EPOC, sindrome de dificultad respiratoria, pancreatitis aguda o cr6nica, enfermedad de injerto frente a huesped, sindrome de Behcet, estados inflamatorios del ojo tales como conjuntivitis y uveitis, psoriasis, dermatitis por contacto, dermatitis at6pica, sarcoidosis, gota, fiebre, rechazo de trasplantes, rinitis alergica y conjuntivitis

35 alergica.

Enfermedades cardiovasculares que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas, lesi6n por reperfusi6n isquemica, isquemia cerebral focal, sindrome coronario agudo, insuficiencia cardiaca congestiva, cardiomiopatia, miocarditis, aterosclerosis, vasculitis y reestenosis.

40 Trastornos destructivos 6seos que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos, osteoporosis, osteoartritis, y trastornos 6seos relacionados con mieloma multiple.

Trastornos neoplasicos que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos, tumores

45 s6lidos tales como sarcoma de Kaposi, melanoma metastasico y cancer hematopoyetico tal como leucemia miel6gena cr6nica y mieloma multiple.

Enfermedades neurodegenerativas que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, enfermedad neurodegenerativa causada por lesi6n

50 traumatica o enfermedad de Huntington.

Enfermedades virales que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas infecci6n por hepatitis aguda (incluyendo hepatitis A, hepatitis B y hepatitis C), infecci6n por VIH, infecci6n por virus de Epstein-Barr, retinitis por CMV, Sindrome Respiratorio Agudo Grave, SRAS o infecci6n por gripe aviar A.

55 Enfermedades infecciosas que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitadas a las mismas septicemia, choque septico, choque endot6xico, septicemia por gram-negativos, sindrome de choque t6xico, Shigellosis y malaria cerebral.

60 Trastornos relacionados con la angiogenesis que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos hemangiomas, neovascularizaci6n ocular, degeneraci6n macular y retinopatia diabetica.

Trastornos relacionados con el dolor que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos dolor neuropatico (tal como neuropatia diabetica, neuralgia postherpetica o del trigemino), dolor relacionado

65 con el cancer, dolor cr6nico (tal como sindrome de dolor lumbar) ydolor inflamatorio.

Otras enfermedades o trastornos que se pueden prevenir o tratar incluyen, aunque sin quedar limitados a los mismos sindrome mielodisplasico, caquexia, endometriosis, lesiones cutaneas agudas tales como quemaduras solares y cicatrizaci6n de heridas.

5 A la vista de los efectos fisiol6gicos mediados por la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38, se han descrito varios compuestos recientemente para el tratamiento o prevenci6n de artritis reumatoide, lesi6n por reperfusi6n isquemica, isquemia cerebral focal, sindrome coronario agudo, EPOC, enfermedad de Crohn, sindrome del intestino irritable, sindrome de dificultad respiratoria en el adulto, osteoporosis, enfermedades neurodegenerativas tales como enfermedad de Alzheimer, espondilitis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis,

10 osteoartritis y mieloma multiple. Veanse, por ejemplo, WO 99/01449, WO 00/63204, WO 01/01986, WO 01/29042, WO 02/046184, WO 02/058695, WO 02/072576, WO 02/072579, WO 03/008413, WO 03/033502, WO 03/087087, WO 03/097062, WO 03/103590, WO 2004/010995, WO 2004/014900, WO 2004/020438, WO 2004/020440, WO 2005/018624, WO 2005/032551, WO 2005/073219.

15 Ahora se ha encontrado que ciertos derivados de indolin-2-ona sustituidos son nuevos inhibidores potentes de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 y por tanto, se pueden usar en el tratamiento o prevenci6n de estas enfermedades.

Otros objetos de la presente invenci6n son proporcionar un procedimiento para preparar dichos compuestos;

20 composiciones farmaceuticas que comprenden una cantidad eficaz de dichos compuestos; el uso de los compuestos en la fabricaci6n de un medicamento para el tratamiento de estados patol6gicos o enfermedades susceptibles de mejoria mediante la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38; y se refiere a procedimientos de tratamiento de estados patol6gicos o enfermedades susceptibles de mejoria mediante la inhibici6n de proteina quinasa activada por mit6genos p38 que comprenden la administraci6n de los compuestos de la invenci6n a un

25 sujeto que necesita dicho tratamiento.

Asi, la presente invenci6n se refiere a nuevos derivados sustituidos representados por la f6rmula (I):

O R4

(I)

30 en la que

• R1 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un grupo cicloalquilo C3-6, un grupo cicloalquil C3-6-alquileno C1-2 y un grupo aril C5-10-alquileno C1-2, en donde el grupo cicloalquilo y el grupo arilo estan opcionalmente sustituidos con 1 o 2 sustituyentes seleccionados de grupos alquilo C1-4 o alcoxi C1-4 lineales o ramificados.

35 • R2 se selecciona del grupo que consiste en atomos de hidr6geno y grupos metilo.

•

R3 se selecciona del grupo que consiste en atomos de hidr6geno y atomos de hal6geno.

•

cada uno de R4 y R5, independientemente, representa un grupo alquilo C1-3, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo ciclico de f6rmula

en donde cada uno de n y m independientemente representan un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de -O-y -C(R7R8)- en donde

•

R7 se selecciona del grupo que consiste en atomo de hidr6geno, atomo de hal6geno, grupo hidroxilo, morfolina y grupo morfolino-etoxi,

•

R8 se selecciona del grupo que consiste en atomo de hidr6geno, atomo de hal6geno y grupo alquilo C1-4,

•

G1 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un grupo -CH=

•

G2 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un atomo de carbono aromatico, y

•

G3 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un atomo de oxigeno

5 y sus sales y N-6xidos farmaceuticamente aceptables.

Tal como se usaen esta memoria el termino alquilo C1-4 abarca radicales hidrocarbonados de 1 a 4 atomos de carbono, lineales o ramificados, por ejemplo de 1 a 3 atomos de carbono.

10 Ejemplos incluyen metilo, etilo, n-propilo, i-propilo, n-butilo, sec-butilo y terc-butilo.

Tal como se usaen esta memoria el termino alcoxi C1-4 abarca radicales que contienen oxigeno, de 1 a 4 atomos de carbono, lineales o ramificados.

15 Ejemplos incluyen metoxi, etoxi, n-propoxi, i-propoxi, n-butoxi, sec-butoxi y terc-butoxi.

Tal como se usa en la presente memoria, el termino cicloalquilo incluye radicales carbociclicos saturados y, a no ser que se indique de otro modo, un radical cicloalquilo tiene tipicamente de 3 a 7 atomos de carbono, preferiblemente de 3 a 5 atomos de carbono y, mas preferiblemente de 3 a 4 atomos de carbono.

Ejemplos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo.

Tal como se usa en la presente memoria, el termino radical arilo C5-C14 incluye tipicamente un radical arilo monociclico o policiclico tal como fenilo o naftilo, antranilo o fenantrilo. Se prefiere fenilo. Cuando un radical arilo

25 soporta 2 o mas sustituyentes, los sustituyentes pueden ser iguales o distintos.

Tal como se usa en la presente memoria, el termino atomo de hal6geno incluye atomos de cloro, fluor, bromo o yodo, tipicamente un atomo de fluor, cloro o bromo, lo mas preferible cloro o fluor. El termino halo cuando se usa como prefijo tiene el mismo significado.

30 Tal como se usa en la presente memoria, el termino sal farmaceuticamente aceptable incluye sales con un acido o base farmaceuticamente aceptable. Acidos farmaceuticamente aceptables incluyen tanto acidos inorganicos, por ejemplo, acidos clorhidrico, sulfurico, fosf6rico, difosf6rico, bromhidrico, yodhidrico y nitrico, como acidos organicos, por ejemplo, acidos citrico, fumarico, maleico, malico, mandelico, asc6rbico, oxalico, succinico, tartarico, benzoico,

35 acetico, metanosulf6nico, etanosulf6nico, bencenosulf6nico o p-toluenosulf6nico. Bases farmaceuticamente aceptables incluyen hidr6xidos de metales alcalinos (por ejemplo sodio o potasio) y de metales alcalinoterreos (por ejemplo calcio o magnesio) y bases organicas, por ejemplo, alquilaminas, arilalquilaminas y aminas heterociclicas.

Otras sales preferidas de acuerdo con la invenci6n son compuestos de amonio cuaternario en los que un

40 equivalente de un ani6n (X-) se asocia con la carga positiva del atomo de N. X-puede ser un ani6n de diversos acidos minerales tal como por ejemplo cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, nitrato, fosfato, o un ani6n de un acido organico tal como por ejemplo acetato, maleato, fumarato, citrato, oxalato, succinato, tartrato, maleato, mandelato, trifluoroacetato, metanosulfonato y p-toluenosulfonato. Preferiblemente, X-es un ani6n seleccionado de cloruro, bromuro, yoduro, sulfato, nitrato, acetato, maleato, oxalato, succinato o trifluoroacetato. Mas preferiblemente, X-es

45 cloruro, bromuro, trifluoroacetato o metanosulfonato.

Tal como se usa en la presente memoria, se forma un N-6xido a partir de las aminas o iminas basicas terciarias presentes en la molecula, usando un agente oxidante adecuado.

50 Cuando G2 representa un atomo de carbono aromatico y G3 representa un atomo de nitr6geno, uno de los atomos de nitr6geno en el sistema de anillos que incluye a G2 y G3 esta protonado.

Tipicamente, R1 representa un atomo de hidr6geno, un grupo ciclopropilo, un grupo ciclopropilmetilo, o un grupo bencilo en donde el grupo bencilo esta opcionalmente sustituido con un grupo metoxi.

55 Preferiblemente, R1 representa un atomo de hidr6geno o un grupo ciclopropilo.

Tipicamente, R2 representa un grupo metilo.

Tipicamente, R3 representa un atomo de hidr6geno.

60 Tipicamente, cada uno de R4 y R5 independientemente representa un grupo metilo, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo ciclico de f6rmula en donde cada uno de n y m independientemente representa un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de -O-y -C(R7R8)-, en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor, un grupo hidroxilo y un grupo morfolino-etoxi, R8 se selecciona de un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor o un grupo

5 metilo,

Tipicamente, G2 representa un atomo de carbono aromatico.

Tipicamente, G3 representa un atomo de oxigeno.

10 En una realizaci6n preferida de la invenci6n, R1 representa un atomo de hidr6geno o un grupo ciclopropilo, R2 representa un grupo metilo, R3 representa un atomo de hidr6geno, cada uno de R4 y R5 independientemente representa un grupo metilo, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo ciclico de f6rmula

en donde cada uno de n y m independientemente representa un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de -O-y -C(R7R8)-, en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor, un grupo hidroxilo y un grupo morfolino-etoxi, R8 se selecciona de un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor o un grupo

20 metilo, G2 representa un atomo de carbono aromatico y G3 representa un atomo de oxigeno.

Compuestos individuales particulares de la invenci6n incluyen:

6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona

25 6'-(3-(Ciclopropilamino)-benzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 5'-Cloro-6'-(3-(ciclopropilamino)benzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro-[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-3,3-dimetilindolin-2-ona

30 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2,3,5,6-tetrahidroespiro[piran-4,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]

35 2'(1'H)-ona 6-(3-(4-Metoxibencilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetra-hidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-(2-morfolinoetoxi)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona

40 6'-(3-Amino-6-metil-1,2-bencisoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6-(3-Amino-6-metil-1,2-bencisoxazol-7-il)-3,3-dimetil-1,3-dihidro-2H-indol-2-ona 6-(3-Amino-6-metil-1H-indazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6'-[3-(Ciclopropilamino)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il]espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6'-(3-Amino[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona

45 6'-3-(Ciclopropilmetil)amino[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il}espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilmetilamino)-7-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona

y sus sales y N-6xidos farmaceuticamente aceptables.

50 Son de excepcional interes: 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro-[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-3,3-dimetilindolin-2-ona

55 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-(2-morfolinoetoxi)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona

5 6'-(3-Amino-6-metil-1,2-bencisoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invenci6n, los compuestos de f6rmula general (I) tambien se pueden preparar por rutas sinteticas como se ilustra en la Figura 1.

Los compuestos de f6rmula (I) se pueden obtener acoplando un derivado halogenado adecuado (IIA) en donde R1,

10 R2, G2 y G3 son como se defini6 anteriormente, y y1 es un atomo de hal6geno tal como un atomo de yodo, con el correspondiente boronato de f6rmula (IIIA), R3, R4, R5 y G1 son como se defini6 anteriormente, o acido bor6nico de f6rmula (IIIB), usando una reacci6n de tipo Suzuki (Miyaura, N.; Suzuki, A. Chem. Rev. 1995, 95, 2457). Tales reacciones pueden estar catalizadas por un catalizador de paladio adecuado tal como complejo de [1,1'bis(difenilfosfino)-ferroceno] dicloropaladio (II) con diclorometano (1:1), en un disolvente como 1,4-dioxano, en

15 presencia de una base como carbonato de cesio acuoso, a una temperatura que varia de 80-120 °C.

Como alternativa, los compuestos de f6rmula (I) se pueden preparar siguiendo el esquema representado en la Figura 2, haciendo reaccionar acidos bor6nicos de f6rmula (IIB), en donde R1, R2, G2 y G3son como se defini6 anteriormente, con derivados halogenados de f6rmula (IIIC), en donde R3, R4, R5 y G1 son como se defini6

20 anteriormente e y2 es atomo de hal6geno tal como un atomo de bromo, en condiciones de acoplamiento de Suzuki, siguiendo el mismo procedimiento de sintesis que se ha descrito antes.

Los compuestos de f6rmula general (IIB) se pueden obtener a traves de la ruta sintetica que se representa en la Figura 3.

25 La adici6n de un reactivo organometalico adecuado tal como cloruro o bromuro de isopropilmagnesio a una soluci6n de (IIA), en donde R1, R2, G2, G3 e y1 son como se defini6 anteriormente, en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano a temperaturas dentro del intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente seguida de la adici6n de un borato de alquilo adecuado tal como borato de isopropilo y dejar que la reacci6n avance a temperaturas dentro del

30 intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente, da, despues del aislamiento del producto, acidos bor6nicos de f6rmula general (IIB).

En el caso particular en que G2 representa un atomo de carbono aromatico, los compuestos de f6rmula (IIAI) y (IIBI), se sintetizan siguiendo las rutas sinteticas que se representan en la Figura 4.

35 Los compuestos de f6rmula (V), en donde R2 e y1 son como se defini6 anteriormente, se pueden preparar por adici6n de una base fuerte tal como sal de litio de 2,2,6,6-tetrametilpiperidina a compuestos de f6rmula (IV) en un disolvente tal como tetrahidrofurano a una temperatura en el intervalo de -78 a -50°C seguida de la adici6n de un reactivo halogenante electr6filo tal como yodo molecular y subsiguientemente dejando que la reacci6n avance a

40 temperaturas en el intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente. El tratamiento de intermedios de tipo (V) con un medio acido tal como acido sulfurico en 1,4-dioxano a temperaturas dentro del intervalo de 50 °C a la temperatura de reflujo da lugar a intermedios de f6rmula (VI) que se pueden transformar en compuestos de f6rmula (VII) por reacci6n con un agente reductor adecuado tal como complejo de borano-sulfuro de metilo en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano a temperaturas dentro del intervalo de 0 °C a la temperatura ambiente.

45 Los aldehidos de f6rmula (VIII) se pueden preparar por adici6n de un agente oxidante adecuado tal como 6xido de manganeso (IV) a compuestos de f6rmula (VII) en un disolvente adecuado tal como diclorometano o cloroformo a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a 50 °C. Los compuestos de f6rmula (VIII) se pueden transformar en compuestos de f6rmula (IX) por tratamiento con hidrocloruro de hidroxilamina en un disolvente

50 adecuado tal como etanol a temperatura ambiente. La reacci6n de compuestos de tipo (IX) con un reactivo clorante electr6filo adecuado tal como N-clorosuccinimida en un disolvente tal como N,N'-dimetilformamida a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a 55 °C da lugar a compuestos de f6rmula (X) que se pueden hacer reaccionar subsiguientemente con aminas de f6rmula R1-NH2, en donde R1 es como se defini6 anteriormente, en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano o N,N'-dimetilformamida a temperatura ambiente para dar

55 intermedios de tipo (XI).

Los derivados de f6rmula (IIAI), en donde G3 representa un atomo de oxigeno, se pueden obtener calentando compuestos de f6rmula (XI) en un disolvente tal como tetrahidrofurano usando una base adecuada tal como 2,3,4,6,7,8,9,10-octahidropirimido[1,2-a]azepina o 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno a temperaturas dentro del

60 intervalo de 130 -180 °C en condiciones de microondas.

En el caso particular en que G3 representa un atomo de oxigeno y R1 representa un atomo de hidr6geno, los compuestos de f6rmula (IIAI), se pueden obtener a partir de compuestos de f6rmula (V) por tratamiento con Nhidroxiacetamida en presencia de una base adecuada tal como terc-but6xido de potasio en un disolvente tal como

65 N,N'-dimetilformamida a temperatura ambiente.

Los derivados de f6rmula (IIAI), en donde G3 representa un atomo de nitr6geno, se pueden obtener por tratamiento de compuestos de f6rmula (V) con un derivado de hidrazina en un disolvente adecuado tal como en etanol a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a 150 °C.

5 La adici6n de un reactivo organometalico adecuado tal como cloruro o bromuro de isopropilmagnesio a una soluci6n de (IIAI) en un disolvente adecuado tal como tetrahidrofurano a temperaturas dentro del intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente seguida de la adici6n de un borato de alquilo adecuado tal como borato de isopropilo y dejar que la reacci6n avance a temperaturas dentro del intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente, da, despues del aislamiento del producto, acidos bor6nicos de f6rmula general (IIBI).

En el caso particular en que tanto G2 como G3 son atomos de nitr6geno, los compuestos de f6rmula (IIAII), se pueden sintetizar siguiendo la ruta sintetica que se describe en la Figura 5.

Los compuestos de f6rmula (XIII), en donde R2 e y1 son como se defini6 anteriormente, se pueden obtener a partir

15 de compuestos de f6rmula (XII) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en J. Org. Cher., 1993, 58 (27), 7832-7838. El tratamiento de los intermedios (XIII) con hidrato de hidrazina en un disolvente tal como etanol a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a reflujo da lugar a compuestos de tipo (XIV). La reacci6n de compuestos de f6rmula (XIV) con un reactivo adecuado tal como trifosgeno en un disolvente tal como diclorometano a 0 °C seguida de la adici6n de una amina apropiada de f6rmula R1-NH2, en donde R1 es como se defini6 anteriormente, en presencia de una base adecuada tal como trietilamina en un disolvente tal como diclorometano a temperaturas dentro del intervalo de 0 °C a la temperatura ambiente da lugar a compuestos de f6rmula (XV). Los compuestos de f6rmula (IIAII) se obtienen por tratamiento de compuestos de f6rmula (XV) con un agente deshidratante adecuado tal como oxicloruro de f6sforo a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a reflujo.

25 Los intermedios de f6rmula (IIIA), (IIIC) y (IIICI) se pueden obtener siguiendo las rutas sinteticas que se representan en la Figura 6.

El tratamiento de hidrazinas de f6rmula (XVI), en donde G1, R3 y y2 son como se defini6 anteriormente, con un cloruro de acido o anhidrido de acido adecuado en presencia de una base tal como trietilamina en un disolvente tal como diclorometano a una temperatura en el intervalo de -40 °C a la temperatura ambiente da los intermedios de f6rmula (XVII). Los derivados de f6rmula (XVII) se ciclan por tratamiento con una base adecuada tal como hidruro de calcio u 6xido de calcio (II) ya sea en ausencia de disolvente o en un disolvente inerte adecuado, de alto punto de ebullici6n, tal como quinolina o tetralina a temperaturas dentro del intervalo de 200 - 280 °C para dar compuestos de

35 tipo (IIIC).

Los intermedios de f6rmula (IIIC) se pueden transformar en los correspondientes boronatos de f6rmula (IIIA) con un reactivo adecuado tal como bis(pinacolato)diboro en presencia de una base adecuada tal como acetato de potasio y un catalizador de paladio tal como el complejo de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paladio(II) con diclorometano (1:1) en un disolvente organico apr6tico tal como N,N'-dimetilformamida o dimetilsulf6xido a una temperatura en el intervalo de 80 a 120 °C.

Los intermedios de f6rmula (IIIC) tambien se pueden transformar en los correspondientes derivados de f6rmula (IIICI), por tratamiento de (IIIC) con un agente halogenante electr6filo adecuado tal como N-clorosuccinimida en un

45 disolvente tal como cloroformo a temperatura de reflujo.

Los compuestos intermedios de tipo (IIICI) tambien se pueden preparar siguiendo la ruta sintetica que se representa en la Figura 7.

Los intermedios (IIICI) se pueden obtener por reacci6n de los compuestos de f6rmula (XVIII) con una base adecuada tal como butil litio, bis(trimetilsilil)amiduro de litio, carbonato de cesio o bis(trimetilsilil)amiduro de sodio posiblemente en presencia de un aditivo tal como N,N,N',N'-tetrametiletilendiamina en un disolvente tal como tetrahidrofurano o N,N'-dimetilformamida a una temperatura en el intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente seguida de la adici6n de un derivado dihalo correspondiente y despues dejando que la reacci6n avance a temperaturas dentro del

55 intervalo de -78 °C a la temperatura ambiente. Alternativamente, los compuestos de f6rmula (XVIII) se pueden convertir primero en un intermedio de f6rmula (XIX) donde P1 representa un grupo protector adecuado tal como tercbutiloxicarbonilo (BOC). El tratamiento de compuestos de f6rmula (XIX) con un dihaloderivado de acuerdo con las condiciones que se han descrito anteriormente seguido de desprotecci6n subsiguiente con un reactivo adecuado proporciona compuestos de f6rmula (IIICI).

En el caso particular en donde el grupo espiroalquilo representa un resto ciclohexilo 4-sustituido, los compuestos de f6rmula (IIICII a IIICVI) se pueden sintetizar siguiendo las rutas sinteticas representadas en la Figura 8.

Los compuestos de f6rmula (XVIII), en donde G1, R3 y y2 son como se defini6 anteriormente, se pueden tratar con

65 acrilato de metilo en presencia de una base adecuada tal como terc-but6xido de potasio en un disolvente tal como dimetilsulf6xido para dar, despues de la hidr6lisis con agua, derivados de ciclohexanona de f6rmula (IIICII). Estos derivados se pueden transformar en los difluoro compuestos de f6rmula (IIICIII) por tratamiento con un reactivo adecuado tal como trifluoruro de (dietilamino)azufre en un disolvente tal como diclorometano a temperatura ambiente.

5 En otra ruta sintetica, los compuestos de f6rmula (IIICII) se pueden tratar con un reactivo organometalico tal como metil litio en un disolvente tal como tetrahidrofurano a temperaturas dentro del intervalo de -78 °C a reflujo para dar alcoholes de f6rmula (IIICIV).

Finalmente, los compuestos de f6rmula (IIICII) se pueden transformar en intermedios de tipo (IIICV) por tratamiento

10 de compuestos de f6rmula (IIICII) con 2-cloroetanol en presencia de un acido tal como acido metanosulf6nico en un disolvente tal como diclorometano/tolueno a temperatura ambiente seguida de tratamiento del compuesto intermedio con un agente reductor tal como borohidruro de zinc en presencia de cloruro de trimetilsililo en un disolvente tal como diclorometano o eter dietilico para dar compuestos de f6rmula (IIICV). Los compuestos de f6rmula (IIICV) se pueden convertir en compuestos de f6rmula (IIICVI) por tratamiento de (IIICV) con una amina (R4R5NH) tal como

15 morfolina en presencia de un agente activante tal como yoduro de sodio en un disolvente tal como N,N'dimetilformamida a temperaturas dentro del intervalo de temperatura ambiente a reflujo.

Los compuestos intermedios de f6rmula (XVIII) se pueden preparar siguiendo la ruta sintetica que se representa en la Figura 9.

20 Los nitroderivados de f6rmula (XX), en donde G1, R3 y y2 son como se defini6 anteriormente e y4 representa un atomo de hal6geno tal como un atomo de cloro o fluor, se hacen reaccionar con sales de malonato de alquilo, preparadas por adici6n del correspondiente malonato de alquilo a una mezcla de una base adecuada tal como hidruro de sodio en un disolvente apropiado tal como 1,2-dimetoxietano o N,N'-dimetilformamida a una temperatura

25 en el intervalo de 10 a 80 °C, para dar los correspondientes intermedios de f6rmula (XXI). El tratamiento de derivados de f6rmula (XXI) con un acido mineral inorganico tal como acido clorhidrico acuoso en un disolvente adecuado tal como dimetilsulf6xido a temperaturas dentro del intervalo de 20-130 °C, da derivados de acido carboxilico de f6rmula (XXII). Los derivados tanto de f6rmula (XXI) como (XXII) se pueden convertir en derivados de oxoindol de f6rmula (XVIII) por tratamiento con un agente reductor adecuado tal como hierro en polvo en un

30 disolvente tal como etanol/acido clorhidrico acuoso o acido acetico a temperaturas en el intervalo de 80 -150 °C.

Pruebas�boo6gioaa�

Ensayo de inhibici6n

35 El ensayo de actividad enzimatica se llev6 a cabo en placas de microvaloraci6n de 96 pocillos (Corning, numero de catalogo # 3686) usando un volumen total de 50 Il de un tamp6n de ensayo compuesto por HEPES 50 mM pH 7,5, MgCl2 10 mM, Na3VO4 1,75 mM. Se preincubaron diversas concentraciones de compuesto de ensayo o controles con vehiculo durante una hora con

40 0,055 Ig/ml de la enzima p38alfa humana (SAPKa) (obtenida de la Universidad de Dundee). La reacci6n se inici6 mediante la adici6n de sustrato ATF2 biotinilado y ATP en concentraciones pr6ximas a sus valores de Km (concentraci6n final 0,62IM y 60IM respectivamente) y tuvieron lugar durante una hora a 25°C. La adici6n de reactivos de detecci6n, estreptavidina -XL665 y anticuerpo anti-fosforesiduo acoplado a criptato de Europio, caus6 la yuxtaposici6n del criptato y el fluor6foro XL665, dando lugar a transferencia de energia por fluorescencia (FRET).

45 La intensidad de FRET depende de la cantidad de anticuerpo criptato ligado, que es proporcional al grado de fosforilaci6n del sustrato. La intensidad de FRET se midi6 usando un espectrofluor6metro Victor 2V. Los datos se analizaron por regresi6n no lineal (ecuaci6n de Hill) para generar una curva dosis-respuesta. El valor calculado de CI50 es la concentraci6n de compuesto de ensayo que causa una reducci6n del 50% en la intensidad de FRET maxima.

50 La Tabla 1 muestra los resultados obtenidos en el ensayo mencionado antes con una selecci6n de compuestos de la presente invenci6n.

Tabla 1

Ejemp6o

CI50�p38a�nM)�

1

0,9

2

39

3

4

4

0,2

5

0,06

6

0,4

7

6,3

8

0,65

9

0,4

11

10

12

0,9

13

3,3

14

1

15

38

20

20

Se puede apreciar de la Tabla 1 que los compuestos de f6rmula (I) son potentes inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38. Derivados preferidos de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n poseen un valor CI50 de inhibici6n de p38a menor que 100 nM, mas preferiblemente menor que 80 nM y, lo mas preferiblemente menor

5 que 50 nM.

Ensayo funcional

La actividad de los compuestos en la inhibici6n de la producci6n de TNFa se midi6 usando la linea celular

10 monocitica humana THP-1. Para este fin, se sembraron 2x105 celulas/pocillo en placas de 96 pocillos de fondo redondo tratadas con cultivo de tejidos en RPMI (que contenia FCS al 10%, L-Gln 2mM, tamp6n Hepes 10 mM, piruvato s6dico 1 mM, glucosa 4,5 g/l, HNaCO3 1,5 g/l y beta-mercaptoetanol 50 IM), junto con compuestos en la concentraci6n deseada de ensayo y LPS (Sigma, L2630) en una concentraci6n final de 10 Ig/ml. Los compuestos se resuspendieron en DMSO al 100% a una concentraci6n de 1 mM y se realizaron valoraciones de los mismos en

15 diluciones a la decima parte en medio. Los controles incluian solo celulas y celulas estimuladas tratadas con la mayor concentraci6n de vehiculo (DMSO al 1%). Las celulas se incubaron durante 5 horas a 37°C en una atm6sfera de CO2 al 5%. Se recuper6 el sobrenadante celular por centrifugaci6n y se diluy6 cinco veces antes de ensayar en un ELISA de TNFa humano convencional (RnD systems).

20 Los datos se analizaron por regresi6n no lineal (ecuaci6n de Hill) para generar una curva dosis-respuesta. El valor calculado de CI50 es la concentraci6n de compuesto de ensayo que causa una reducci6n del 50% en la producci6n de TNFa maxima.

Los compuestos de la presente invenci6n son buenos inhibidores de la producci6n de TNFa. Derivados preferidos de

25 la invenci6n poseen un valor de CI50 para inhibir la producci6n de TNFa menor que 100 mM, preferiblemente menor que 10 mM, mas preferiblemente menor que 1 mM y lo mas preferiblemente menor que 100 nM.

Los derivados de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n son utiles en el tratamiento o prevenci6n de enfermedades conocidas por ser susceptibles de mejoria mediante la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38.

30 Tales enfermedades son, por ejemplo, artritis reumatoide, lesi6n por isquemia-reperfusi6n, isquemia cerebral focal, sindrome coronario agudo, asma, EPOC, enfermedad de Crohn, sindrome del intestino irritable, sindrome de dificultad respiratoria en el adulto, osteoporosis, enfermedad de Alzheimer, espondilitis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, osteoartritis o mieloma multiple.

35 Por consiguiente, los derivados de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n y sus sales farmaceuticamente aceptables, y las composiciones farmaceuticas que comprenden dicho compuesto y/o sus sales, se pueden usar en un procedimiento de tratamiento de trastornos del cuerpo humano que comprenden administrar a un sujeto que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de derivados de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n o de una de sus sales farmaceuticamente aceptables.

40 Cuando los derivados de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n se usan para el tratamiento de enfermedades respiratorias como asma, enfermedad pulmonar obstructiva cr6nica, fibrosis pulmonar o enfisema, puede ser ventajoso usar los mismos en combinaci6n con otros compuestos activos conocidos por ser utiles en el tratamiento de enfermedades respiratorias como (1) antagonistas de receptores muscarinicos M3, (2) agonistas �2, (3)

45 inhibidores de PDE4, (4) corticosteroides, (5) antagonistas de leucotrieno D4, (6) inhibidores de egfr-quinasa, (7) antagonistas del receptor de adenosina A2B, (8) agonistas del receptor NK1, (9) antagonistas de CRTh2, (10) inhibidores de syk quinasa, (11) antagonistas de CCR3 y (12) antagonistas de VLA-4.

La presente invenci6n tambien proporciona composiciones farmaceuticas que comprenden un derivado de indolin-2

50 ona sustituido de la invenci6n y otro compuesto activo seleccionado de los grupos consistentes en (1) antagonistas de receptores muscarinicos M3, (2) agonistas �2, (3) inhibidores de PDE4, (4) corticosteroides, (5) antagonistas de leucotrieno D4, (6) inhibidores de egfr-quinasa, (7) antagonistas del receptor de adenosina A2B, (8) agonistas del receptor NK1, (9) antagonistas de CRTh2, (10) inhibidores de syk quinasa, (11) antagonistas de CCR3, (12) antagonistas de VLA-4 y (13) farmacos antirreumaticos modificadores de la enfermedad (DMARD) como

55 metotrexato.

Cuando los derivados de indolin-2-ona sustituidos de la invenci6n se usan para el tratamiento de enfermedades respiratorias como asma, enfermedad pulmonar obstructiva cr6nica, fibrosis pulmonar o enfisema, puede ser ventajoso usar los mismos en combinaci6n con otros compuestos activos conocidos por ser utiles en el tratamiento 60 de enfermedades respiratorias como (1) antagonistas de receptores muscarinicos M3, (2) agonistas �2, (3)

inhibidores de PDE4, (4) corticosteroides, (5) antagonistas de CysLT1 y/o CysLT2, (6) inhibidores de egfr-quinasa,

(7) antagonistas del receptor de adenosina A2B, (8) agonistas del receptor NK1, (9) antagonistas de CRTh2, (10) inhibidores de syk quinasa, (11) antagonistas de CCR3 y (12) antagonistas de VLA-4.

5 Cuando los derivados de indolin-2-ona de la invenci6n se usan para el tratamiento de enfermedades autoinmunes como psoriasis, artritis reumatoide, artritis psoriasica, espondilitis anquilosante, sindrome de Reiter, fibromialgia, enfermedad inflamatoria del intestino tal como colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn, esclerosis multiple, diabetes, glomerulonefritis, lupus eritematoso sistemico, esclerodermia, tiroiditis cr6nica, enfermedad de Grave, anemia hemolitica, gastritis autoinmune, neutropenia autoinmune, trombocitopenia, hepatitis activa cr6nica autoinmune,

10 miastenia grave, o enfermedad de Addison, puede ser ventajoso usar los mismos en combinaci6n con otros compuestos activos conocidos por ser utiles en el tratamiento de enfermedades autoinmunes tales como inhibidores de PDE4, antagonistas de CysLT1 y/o CysLT2, inhibidores de egfr-quinasa, antagonistas de A2b, agonistas de receptor NK1, antagonistas de CCR3, antagonistas de VLA-4 y farmacos antirreumaticos modificadores de la enfermedad (DMARD).

15 Ejemplos de antagonistas de M3 adecuados (anticolinergicos) que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son sales de tiotropio, sales de oxitropio, sales de flutropio, sales de ipratropio, sales de glicopirronio, sales de trospio, revatropato, espatropato, sales de 3[2-hidroxi-2,2-bis(2-tienil)acetoxi]-1-(3-fenoxipropil)-1-azoniabiciclo[2.2.2]octano, sales de 1-(2-feniletil)-3-(9H-xanten

20 9-ilcarboniloxi)-1-azoniabiciclo[2.2.2]octano, sales de ester endo-8-metil-8-azabiciclo[3.2.1]oct-3-ilico del acido 2-oxo1,2,3,4-tetrahidroquinazolin-3-carboxilico (DAU-5884), 3-(4-bencilpiperazin-1-il)-1-ciclobutil-1-hidroxi-1-fenilpropan-2ona (NPC-14695), N-[1-(6-aminopiridin-2-ilmetil)piperidin-4-il]-2(R)-[3,3-difluoro-1(R)-ciclopentil]-2-hidroxi-2fenilacetamida (J-104135), 2(R)-ciclopentil-2-hidroxi-N-[1-[4(S)-metilhexil]piperidin-4-il]-2-fenilacetamida (J-106366), 2(R)-ciclopentil-2-hidroxi-N-[1-(4-metil-3-pentenil)-4-piperidinil]-2-fenilacetamida (J-104129), 1-[4-(2

25 aminoetil)piperidin-1-il]-2(R)-[3,3-difluorociclopent-1(R)-il]-2-hidroxi-2-feniletan-1-ona (Banyu-280634), N-[N-[2-[N-[1(ciclohexilmetil)piperidin-3(R)-ilmetil]carbamoil]-etil] carbamoilmetil]-3,3,3-trifenilpropionamida (Banyu CPTP), ester 4(3-azabiciclo[3.1.0]hex-3-il)-2-butinilico del acido 2(R)-ciclopentil-2-hidroxi-2-fenilacetico (Ranbaxy 364057), UCB101333, OrM3 de Merck, sales de 7-endo-(2-hidroxi-2,2-difenilacetoxi)-9,9-dimetil-3-oxa-9azoniatriciclo[3.3.1.0*2,4*]nonano, sales de 7-(2,2-difenilpropioniloxi)-7,9,9-trimetil-3-oxa-9

30 azoniatriciclo[3.3.1.0*2,4*]nonano, sales del ester del acido 9-metil-9H-fluoren-9-carboxilico y 7-hidroxi-7,9,9-trimetil3-oxa-9-azoniatriciclo[3.3.1.0*2,4*]nonano, las cuales pueden estar todas en forma de sus racematos, sus enanti6meros, sus diastereois6meros y mezclas de los mismos y, opcionalmente en forma de sus sales de adici6n de acidos farmacol6gicamente compatibles. Entre las sales se prefieren cloruros, bromuros, yoduros y metanosulfonatos.

35 Ejemplos de agonistas 2 adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son: arformoterol, bambuterol, bitolterol, broxaterol, carbuterol, clenbuterol, dopexamina, fenoterol, formoterol, hexoprenalina, ibuterol, isoetarina, isoprenalina, levosalbutamol, mabuterol, meluadrina, metaprotenerol, nolomirol, orciprenalina, pirbuterol, procaterol, reproterol, ritodrina, rimoterol,

40 salbutamol, salmefamol, salmeterol, sibenadet, sotenerot, sulfonterol, terbutalina, tiaramida, tulobuterol, GSK597901, milveterol, GSK-678007, GSK-642444, GSK-159802, LAS100977, HOKU-81, KUL-1248, carmoterol, indacaterol y 5-[2-(5,6-dietilindan-2-ilamino)-1-hidroxietil]-8-hidroxi-1H-quinolin-2-ona, 4-hidroxi-7-[2-{[2-{[3-(2feniletoxi)propil]sulfonil} etil]amino}etil]-2(3H)-benzotiazolona, 1-(2-fluoro-4-hidroxifenil)-2-[4-(1-benzoimidazolil)-2metil-2-butilamino]etanol, 1-[3-(4-metoxibencilamino)-4-hidroxifenil]-2-[4-(1-benzoimidazolil)-2-metil-2

45 butilamino]etanol, 1-[2H-5-hidroxi-3-oxo-4H-1,4-benzoxazin-8-il]-2-[3-(4-N,N-dimetilaminofenil)-2-metil-2-propilamino]etanol, 1-[2H-5-hidroxi-3-oxo-4H-1,4-benzoxazin-8-il]-2-[3-(4-metoxifenil)-2-metil-2-propilamino]etanol, 1-[2H-5hidroxi-3-oxo-4H-1,4-benzoxazin-8-il]-2-[3-(4-n-butiloxifenil)-2-metil-2-propilamino]etanol, 1-[2H-5-hidroxi-3-oxo-4H1,4-benzoxazin-8-il]-2-{4-[3-(4-metoxifenil)-1,2,4-triazol-3-il]-2-metil-2-butilamino}etanol, 5-hidroxi-8-(1-hidroxi-2isopropilaminobutil)-2H-1,4-benzoxazin-3-(4H)-ona, 1-(4-amino-3-cloro-5-trifluorometilfenil)-2-terc-butilamino)etanol y

50 1-(4-etoxicarbonilamino-3-ciano-5-fluorofenil)-2-(terc-butilamino)etanol opcionalmente en forma de sus racematos, sus enanti6meros, sus diastereois6meros y sus mezclas, y opcionalmente sus sales de adici6n de acidos farmacol6gicamente compatibles y los compuestos reivindicados en las publicaciones de patente mundial numeros WO2006/122788A1 y WO2007/124898. Cuando los agonistas 2 estan en forma de una sal o derivado, se prefiere particularmente que este en una forma seleccionada de sales de sodio, sulfobenzoatos, fosfatos, isonicotinatos,

55 acetatos, propionatos, dihidrogenofosfatos, palmitatos, pivalatos, fumaratos, furoatos, xinafoatos o mezclas de los mismos.

Los siguientes agonistas 2 son de especial interes para la combinaci6n con los compuestos de f6rmula (I): arformoterol, bambuterol, bitolterol, broxaterol, carbuterol, clenbuterol, dopexamina, fenoterol, formoterol,

60 hexoprenalina, ibuterol, isoprenalina, levosalbutamol, mabuterol, meluadrina, nolomirol, orciprenalina, pirbuterol, procaterol, (R,R)-formoterol, reproterol, ritodrina, rimoterol, salbutamol, salmeterol, sibenadet, sulfonterol, terbutalina, tulobuterol, GSK-597901, milveterol, LAS100977, KUL-1248, carmoterol e indacaterol opcionalmente en forma de sus racematos, sus enanti6meros, sus diastereois6meros y sus mezclas, y opcionalmente sus sales de adici6n de acidos farmacol6gicamente compatibles.

Son todavia mas preferidos los siguientes agonistas 2: formoterol, salmeterol y GSK-597901, GSK-159797, indacaterol opcionalmente en forma de sus racematos, sus enanti6meros, sus diastereois6meros y mezclas de los mismos y, opcionalmente sus sales de adici6n de acidos farmacol6gicamente compatibles. Son todavia mas preferidos salmeterol y formoterol.

Ejemplos de inhibidores de PDE4 adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 en la presente invenci6n son denbufilina, rolipram, cipamfilina, arofilina, filaminast, piclamilast, mesopram, hidrocloruro de drotaverina, lirimilast, cilomilast, oglemilast, apremilast, acido 6-[2-(3,4dietoxifenil)tiazol-4-il]piridin-2-carboxilico (tetomilast), (R)-(+)-4-[2-(3-Ciclopentiloxi-4-metoxifenil)-2-feniletil]piridina, N-(3,5-Dicloro-4-piridinil)-2-[1-(4-fluorobencil)-5-hidroxi-1H-indol-3-il]-2-oxoacetamida (GSK-842470), 9-(2Fluorobencil)-N6-metil-2-(trifluorometil)adenina, N-(3,5-Dicloro-4-piridinil)-8-metoxiquinolin-5-carboxamida, N-[9-Metil4-oxo-1-fenil-3,4,6,7-tetrahidropirrolo[3,2,1-jk][1,4]benzodiazepin-3(R)-il]piridin-4-carboxamida, hidrocloruro de 3-[3(Ciclopentiloxi)-4-metoxibencil]-6-(etilamino)-8-isopropil-3H-purina, 4-[6,7-Dietoxi-2,3-bis(hidroximetil)naftalen-1-il]-1(2-metoxietil)piridin-2(1H)-ona, 2-carbometoxi-4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-diflurorometoxifenil)ciclohexan-1-ona,

15 cis[4-ciano-4-(3-ciclopropilmetoxi-4-difluorometoxifenil)ciclohexan-1-ol, ONO-6126 (Eur Respir J 2003, 22(Suppl. 45): Abst 2557) y los compuestos reivindicados en las solicitudes de patente PCT numero WO03/097613, WO2004/058729, WO 2005/049581, WO 2005/123693 y WO 2005/123692.

Ejemplos de corticosteroides y glucocorticoides adecuados que se pueden combinar con agonistas 2 son prednisolona, metilprednisolona, dexametasona, cipecilato de dexametasona, naflocort, deflazacort, acetato de halopredona, budesonida, dipropionato de beclometasona, hidrocortisona, triamcinolona acet6nido, fluocinolona acet6nido, fluocinonida, pivalato de clocortolona, aceponato de metilpredinosolona, palmitoato de dexametasona, tipredano, aceponato de hidrocortisona, prednicarbato, dipropionato de alclometasona, propionato de Butixocort, RPR-106541, halometasona, suleptanato de metilprednisolona, furoato de mometasona, rimexolona, farnesilato de

25 prednisolona, ciclesonida, propionato de deprodona, propionato de fluticasona, furoato de fluticasona, propionato de halobetasol, etabonato de loteprednol, butirato propionato de betametasona, flunisolida, prednisona, fosfato s6dico de dexametasona, triamcinolona, 17-valerato de betametasona, betametasona, dipropionato de betametasona, acetato de hidrocortisona, succinato s6dico de hidrocortisona, fosfato s6dico de prednisolona y probutato de hidrocortisona.

Ejemplos de antagonistas de CysLT1 y/o CysLT2 adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son tomelukast, Ibudilast, pobilukast, pranlukast hidrato, zafirlukast, ritolukast, verlukast, sulukast, tipelukast, cinalukast, iralukast s6dico, masilukast, montelukast s6dico, 5-[3-[3-(2-quinolinilmetoxi)fenoxi]propil]-1H-tetrazol, sal s6dica de (E)-8-[2-[4-[4-(435 fluorofenil)butoxi]fenil]vinil]-2-(1H-tetrazol-5-il)-4H-benzopiran-4-ona, acido 2-[N-[4-(4-clorofenilsulfonamido)butil]-N[3-(4-isopropiltiazol-2-ilmetoxi)bencil]sulfamoil]benzoico, acido (3R,4R)-3-[6-(5-fluorobenzotiazol-2-ilmetoxi)-4-hidroxi3,4-dihidro-2H-1-benzopiran-3-ilmetil]benzoico, hidrocloruro del acido 2-[2-[2-(4-terc-butiltiazol-2-il)benzofuran-5iloximetil]fenil]acetico, 5-[2-[4-(quinolin-2-ilmetoxi)fenoximetil]bencil]-1H-tetrazol, acido (E)-2,2-dietil-3'-[2-[2-(4isopropil)tiazolil]etenil]succinanilico; acido 4-[4-[3-(4-acetil-3-hidroxi-2-propilfenoxi)propilsulfonil]fenil]-4-oxobutirico, acido [[5-[[3-(4-acetil-3-hidroxi-2-propilfenoxi)propil]tio]-1,3,4-tiadiazol-2-il]tio]acetico, 9-[(4-acetil-3-hidroxi-2-npropilfenoxi)metil]-3-(1H-tetrazol-5-il)-4H-pirido[1,2-a]pirimidin-4-ona, sal s6dica del acido 5-[3-[2-(7-cloroquinolin-2il)vinil]fenil]-8-(N,N-dimetilcarbamoil)-4,6-ditiaoctanoico; sal s6dica del acido 3-[1-[3-[2-(7-cloroquinolin-2-il)vinil]fenil]1-[3-(dimetilamino)-3-oxopropilsulfanil]metilsulfanil]propi6nico, 6-(2-ciclohexiletil)-[1,3,4]tiadiazolo[3,2-a]-1,2,3triazolo[4,5-d]pirimidin-9(1H)-ona, (R)-3-[2-metoxi-4-[N-(2-metilfenilsulfonil)carbamoil]bencil]-1-metil-N-(4,4,4-trifluoro

45 2-metilbutil)indol-5-carboxamida, MCC-847 (de AstraZeneca), acido (+)-4(S)-(4-carboxifeniltio)-7-[4-(4fenoxibutoxi)fenil]-5(Z)-heptenoico y los compuestos reivindicados en la solicitud de patente PCT WO2004/043966A1.

Ejemplos de inhibidores de egfr-quinasa adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son palifermin, cetuximab, gefitinib, repifermin, hidrocloruro de erlotinib, dihidrocloruro de canertinib, lapatinib y N-[4-(3-cloro-4-fluorofenilamino)-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)-2(E)-butenamida.

Ejemplos de antagonistas del receptor de adenosina A2b adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de

55 la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son CVT-6883 de CV Therapeutics, acido 4-(1-butilxantin-8-il)benzoico, 8-[1-[3-(4-clorofenil)-1,2,4-oxadiazol-5-ilmetil]-1H-pirazol-4-il]-1,3-dipropilxantina, N(1,3-benzodioxol-5-il)-2-[5-(1,3-dipropilxantin-8-il)-1-metil-1H-pirazol-3-iloxi]acetamida, 8-[4-[5-(2-metoxifenil)-1,2,4oxadiazol-3-ilmetoxi]fenil]-1,3-dipropilxantina, 3-[5-(2-metil-1H-imidazol-1-il)-2-(pirazin-2-ilamino)tiazol-4il]benzonitrilo, acido 4-(2,6-dioxo-1-propil-2,3,6,7-tetrahidro-1H-purin-8-il)bencenosulf6nico, hidrocloruro de 1-[2-[8-(3fluorofenil)-9-metil-9H-adenin-2-il]etinil]ciclopentanol, N-(2-acetilfenil)-2-[4-(1,3-dipropilxantin-8-il)fenoxi]acetamida, N(4-acetilfenil)-2-[4-(1,3-dipropilxantin-8-il)fenoxi]acetamida, N-(4-cianofenil)-2-[4-(1,3-dipropilxantin-8il)fenoxi]acetamida, 4-(3,4-diclorofenil)-5-(4-piridinil)tiazol-2-amina o los compuestos de las solicitudes de patente internacional WO 2005/040155 A1, WO2005/100353 A1, WO2007/039297 A1 y WO2007/017096 A1.

65 Ejemplos de antagonistas del receptor NK1 adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son besilato de nolpitantio, dapitant, lanepitant, hidrocloruro de vofopitant, aprepitant, ezlopitant, N-[3-(2-pentilfenil)propionil]-treonil-N-metil-2,3-deshidrotirosil-leucilD-fenilalanil-alo-treonil-asparaginil-serina C-1,7-O-3,1 lactona, 1-metilindol-3-ilcarbonil-[4(R)-hidroxi]-L-prolil-[3-(2naftil)]-L-alanina N-bencil-N-metilamida, (+)-(2S,3S)-3-[2-metoxi-5-(trifluorometoxi)bencilamino]-2-fenilpiperidina, (2R,4S)-N-[1-[3,5-bis(trifluorometil)benzoil]-2-(4-clorobencil)piperidin-4-il]quinolina-4-carboxamida, sal bis(N-metil-D

5 glucamina) del acido 3-[2(R)-[1(R)-[3,5-bis(trifluorometil)fenil]etoxi]-3(S)-(4-fluorofenil)morfolin-4-ilmetil]-5-oxo-4,5dihidro-1H-1,2,4-triazol-1-fosfinico; sal 1-desoxi-1-(metilamino)-D-glucitol (1:2) del acido [3-[2(R)-[1(R)-[3,5bis(trifluorometil)fenil]etoxi]-3(S)-(4-fluorofenil)-4-morfolinilmetil]-2,5-dihidro-5-oxo-1H-1,2,4-triazol-1-il]fosf6nico, hidrocloruro del 2(S)-6xido de 1'-[2-[2(R)-(3,4-diclorofenil)-4-(3,4,5-trimetoxibenzoil)morfolin-2il]etil]espiro[benzo[c]tiofen-1(3H)-4'-piperidina] y el compuesto CS-003 descrito en Eur Respir J 2003, 22(Suppl. 45):

10 Abst P2664.

Ejemplos de antagonistas de CRTh2 adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son acido 2-[5-fluoro-2-metil-1-[4-(metilsulfonil)fenilsulfonil]-1Hindol-3-il]acetico, Ramatroban, acido [(3R)-4-(4-clorobencil)-7-fluoro-5-(metilsulfonil)-1,2,3,4-tetrahidrociclopenta

15 [b]indol-3-il]acetico y acido (1R,2R,3S,5S)-7-[2-(5-hidroxibenzotiofen-3-ilcarboxamido)-6,6-dimetilbiciclo[3,1,1]hept-3il]-5(Z)-heptenoico

Ejemplos de inhibidores de Syk quinasa adecuados que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son piceatannol, 2-(2-aminoetilamino)-4-[3

20 (trifluorometil)fenilamino] pirimidin-5-carboxamida, R-091 (de Rigel), R-112 (de Rigel), R-343 (de Rigel), R-788 (de Rigel), bencenosulfonato de 6-[5-fluoro-2-(3,4,5-trimetoxifenilamino)pirimidin-4-ilamino]-2,2-dimetil-3,4-dihidro-2Hpirido[3,2-b][1,4]oxazin-3-ona, 1-(2,4,6-trihidroxifenil)-2-(4-metoxifenil)etan-1-ona, N-[4-[6-(ciclobutilamino)-9H-purin2-ilamino]fenil]-N-metilacetamida, dihidrocloruro de 2-[7-(3,4-dimetoxifenil)imidazo[1,2-c]pirimidin-5-ilamino]piridin-3carboxamida y AVE-0950 (de Sanofi-Aventis).

25 Ejemplos de antagonistas de CCR3 que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son 4-[3-[4-(3,4-diclorobencil)morfolin-2(S)-ilmetil]ureidometil]benzamida, N[1(R)-[4-(3,4-diclorobencil)piperidin-1-ilmetil]-2-metilpropil]-N'-(3,4,5-trimetoxifenil)urea, N-[1(S)-[4-(4clorobencil)piperidin-1-ilmetil]-2-hidroxipropil]-N'-(3,4,5-trimetoxifenil)urea, 3-[3-(3-acetilfenil)ureido]-2-[4-(4-fluoro

30 bencil)piperidin-1-ilmetil]-N-metilbenzamida, cloruro de 4-(3,4-diclorobencil)-1-metil-1-[3-metil-2(R)-[3-(3,4,5trimetoxifenil)ureido]butil]piperidinio, N-[2-[4(R)-(3,4-diclorobencil)pirrolidin-2(S)-il]etil]-2-[5-(3,4-dimetoxifenil]pirimidin2-ilsulfanil]acetamida, CRIC-3 (de IPF Pharmaceuticals), acido 2(R)-[1-[1-(2,4-diclorobencil)-4(S)-(3-tienil)pirrolidin3(S)-ilmetil]piperidin-4-ilmetil]pentanoico, acido 8-[1-(2,4-diclorobencil)-4(S)-(3-tienil)pirrolidin-3(S)-ilmetil]-3,3-dipropil1-oxa-8-azaespiro[4,5]decano-2(S)-carboxilico, acido 11-[1-(2,4-diclorobencil)-4(S)-(3-tienil)pirrolidin-3(S)-ilmetil]

35 3,14-dioxa-11-azadiespiro[5,1,5,2]pentadecano-15(S)-carboxilico, W-56750 (de Mitsubishi Pharma), N-[1(S)-[3endo(4-clorobencil)-8-azabiciclo[3,2,1]oct-8-ilmetil]-2(S)-hidroxipropil]-N'-(3,4,5-trimetoxifenil)urea, bencenosulfonato de N(3-acetilfenil)-N'-[(1R,2S)-2-[3(S)-(4-fluorobencil)piperidin-1-ilmetil]ciclohexil]urea, yoduro de trans-1-(cicloheptilmetil)4-(2,7-dicloro-9H-xanten-9-ilcarboxamido)-1-metilpiperidinio, GW-782415 (de GlaxoSmithKline), GW-824575 (de GlaxoSmithKline), N-[1'-(3,4-diclorobencil)-1,4'-bipiperidin-3-ilmetil]quinolin-6-carboxamida, fumarato de N-[1-(6

40 fluoronaftalen-2-ilmetil)pirrolidin-3(R)-il]-2-[1-(3-hidroxi-5-metilpiridin-2-ilcarbonil)piperidin-4-iliden]acetamida y DIN106935 (de Bristol-Myers Squibb).

Ejemplos de antagonistas de VLA-4 que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son N-[4-[3-(2-metilfenil)ureido]fenilacetil]-L-leucil-L-aspartil-L-valil-L-prolina,

45 acido 3(S)-[2(S)-[4,4-dimetil-3-[4-[3-(2-metilfenil)ureido]bencil]-2,5-dioxoimidazolidin-1-il]-4-metilpentanoilamino]-3fenilpropi6nico, acido 2(S)-(2,6-diclorobenzamido)-3-(2',6'-dimetoxibifenil-4-il)propi6nico, RBx-4638 (de Ranbaxy), R411 (de Roche), RBx-7796 (de Ranbaxy), SB-683699 (de GlaxoSmithKline), DW-908e (de Daiichi Pharmaceutical), RO-0270608 (de Roche), AJM-300 (de Ajinomoto), PS-460644 (de Pharmacopeia) y los compuestos reivindicados en las solicitudes de patente PCT numeros WO 02/057242 A2 y WO 2004/099126 A1.

50 Ejemplos de farmacos antirreumaticos modificadores de la enfermedad (DMAR) que se pueden combinar con los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n son auranofina, azatioprina, bucilamina, ciclosporina, iguratimod, leflunomida, metotrexato, pentostatina, hidrocloruro de rimacalib, romazarit, salazodina, sulfasalazina, teriflunomida, 1,1-di6xido de (E)-5-(3,5-di-terc-butil-4-hidroxibenciliden)-2-etilisotiazolidina,

55 hidrocloruro de cis-2-(4-clorofenil)-4,5-difenil-4,5-dihidro-1H-imidazol, acido 2-[8-[2-[6-(metilamino)piridil-2-iletoxi]-3oxo-2-(2,2,2-trifluoroetil)-2,3,4,5-tetrahidro-1H-2-benzazepin-4-(S)-il]acetico, 4-acetoxi-2-(4-metilfenil)benzotiazol, 3[4-metil-3-[N-metil-N-(7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]piperidin-1-il]-3-oxopropionitrilo (CP-690550), 3-Desazaadenosina, bencenosulfonato de 6-[5-fluoro-2-(3,4,5-trimetoxifenilamino)pirimidin-4-ilamino]-2,2-dimetil-3,4dihidro-2H-pirido[3,2-b][1,4]oxazin-3-ona (R-406), AD-452 de Sosei, AD-827 de Arakis, BB-2983 de British Biotech,

60 SC-12267 de 4SC, CPH-82 de Conpharm, R-1295 de Roche, R-1503 de Roche e hidrocloruro de N2-[3-[1(S)-(2fluorobifenil-4-il)etil]isoxazol-5-il]morfolina-4-carboxamidina (SMP-114).

Las combinaciones de la invenci6n se pueden usar en el tratamiento de trastornos que son susceptibles de mejoria mediante la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38. Asi, la presente solicitud incluye

65 procedimientos de tratamiento de estos trastornos, asi como el uso de combinaciones de la invenci6n en la fabricaci6n de un medicamento para el tratamiento de estos trastornos, en especial para el tratamiento de artritis reumatoide.

La presente invenci6n tambien proporciona composiciones farmaceuticas que comprenden, como ingrediente activo

5 un derivado de indolin-2-ona sustituido de f6rmula (I) o una de sus sales farmaceuticamente aceptables, en asociaci6n con un excipiente farmaceuticamente aceptable tal como un vehiculo o diluyente. El ingrediente activo puede comprender del 0,001% al 99% en peso, preferiblemente del 0,01% al 90% en peso de la composici6n dependiendo de la naturaleza de la formulaci6n y de si la diluci6n se ha hecho antes de la aplicaci6n. Preferiblemente, las composiciones se preparan en una forma adecuada para administraci6n oral, t6pica, inhalada, nasal, rectal, percutanea o inyectable. Las composiciones para administraci6n oral pueden estar en forma de jarabes, comprimidos, capsulas, pastillas, preparaciones de liberaci6n controlada, preparaciones de soluci6n rapida, etc. Las composiciones para administraci6n t6pica pueden estar en forma de cremas, pomadas, lociones, pulverizadores nasales o aerosoles, etc. Las composiciones para administraci6n por inyecci6n pueden estar en forma de composiciones subcutaneas, intradermicas, intramusculares o intravenosas. Las composiciones para

15 administraci6n por inhalaci6n pueden estar en forma de un polvo seco, una soluci6n, una dispersi6n etc.

Los compuestos activos en la combinaci6n, es decir, los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la invenci6n, y el resto de compuestos activos opcionales se pueden administrar juntos en la misma composici6n farmaceutica o en diferentes composiciones destinadas a la administraci6n por separado, simultanea, concomitante o secuencial por la misma via o por una via diferente.

Una ejecuci6n de la presente invenci6n consiste en un kit de partes que comprende los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de la presente invenci6n junto con instrucciones para el uso simultaneo, concurrente, por separado o secuencial en combinaci6n con otro compuesto activo util en el tratamiento de una

25 enfermedad respiratoria que responde a la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38.

Otra ejecuci6n de la presente invenci6n consiste en un paquete que comprende los inhibidores de la proteina quinasa activada por mit6genos p38 de f6rmula (I) y otro compuesto activo util en el tratamiento de una enfermedad respiratoria para el uso simultaneo, concurrente, por separado o secuencial en el tratamiento de una enfermedad respiratoria que responde a la inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38.

Los excipientes farmaceuticamente aceptables que se mezclan con el compuesto activo, o sales de dicho compuesto, para formar las composiciones de esta invenci6n son bien conocidos per se y los excipientes que se usan realmente dependen, entre otros, del procedimiento deseado de administraci6n de las composiciones.

35 Los diluyentes que se pueden usar en la preparaci6n de las composiciones incluyen diluyentes liquidos y s6lidos que son compatibles con el ingrediente activo, junto con agentes colorantes o aromatizantes, si asi se desea. Los comprimidos o capsulas pueden contener, convenientemente, entre 1 y 500 mg de ingrediente activo o la cantidad equivalente de una sal del mismo.

La composici6n liquida concebida para uso oral puede estar en forma de soluciones o suspensiones. Las soluciones pueden ser soluciones acuosas de una sal u otro derivado soluble del compuesto activo junto con, por ejemplo, sacarosa para formar un jarabe. Las suspensiones pueden comprender un compuesto activo de la invenci6n, insoluble, o una sal del mismo farmaceuticamente aceptable en asociaci6n con agua, junto con un agente de

45 suspensi6n o un agente aromatizante.

Las composiciones para inyecci6n parenteral se pueden preparar a partir de sales solubles, que se pueden liofilizar

o no y que se pueden disolver en un medio acuoso apir6geno u otro fluido apropiado para inyecci6n parenteral.

Las composiciones de polvo seco para liberaci6n t6pica en el pulm6n por inhalaci6n pueden presentarse, por ejemplo, en capsulas o cartuchos de, por ejemplo, gelatina o blister de, por ejemplo, una hoja de aluminio laminada para usar en un inhalador o insuflador. Las formulaciones contienen por lo general una mezcla de polvo para inhalaci6n del compuesto de la invenci6n y una base de polvo adecuada (sustancia vehiculo) tal como lactosa o almid6n. Se prefiere el uso de lactosa.

55 El acondicionamiento o envasado de la formulaci6n puede ser adecuado para una administraci6n de dosis unitaria o de multidosis. En el caso de administraci6n multidosis, la formulaci6n puede estar previamente medida o medida en uso. Los inhaladores de polvo seco se clasifican asi en tres grupos: dispositivos de (a) dosis unitaria, (b) multiples dosis unitarias y (c) multidosis.

Para inhaladores de dosis unitaria del primer tipo, las dosis unitarias se han pesado por el fabricante en pequenos recipientes, que en la mayoria de los casos son capsulas de gelatina dura. Una capsula tiene que extraerse de una caja separada o recipiente e insertarse en el area de recepci6n del inhalador. A continuaci6n se tiene que abrir o perforar la capsula con pasadores o cuchillas con el fin de permitir que parte de la corriente de aire de la inspiraci6n pase a traves de la capsula para arrastrar el polvo o descargar el polvo desde la capsula a traves de estas perforaciones por medio de la fuerza centrifuga durante la inhalaci6n. Despues de la inhalaci6n, se debera retirar de nuevo la capsula vacia del inhalador. En la mayoria de los casos, es necesario desmontar el inhalador para insertar y retirar la capsula, que es una operaci6n que puede ser dificultosa y laboriosa para algunos pacientes. Otros

5 inconvenientes relacionados con el uso de capsulas de gelatina dura para polvos de inhalaci6n son (a) mala protecci6n frente a la absorci6n de humedad del aire ambiental; (b) problemas con la apertura o perforaci6n despues de que las capsulas han sido expuestas previamente a humedad relativa extrema, lo que causa fragmentaci6n o indentaci6n y, (c) posible inhalaci6n de fragmentos de la capsula. Por otro lado, se ha descrito para una serie de inhaladores de capsula la expulsi6n incompleta.

10 Algunos inhaladores de capsulas tienen un dep6sito desde el cual pueden transferirse capsulas individuales a una camara de recepci6n, en la que tiene lugar la perforaci6n y vaciado, como se describe en el documento WO 92/03175. Otros inhaladores de capsulas tienen dep6sitos giratorios con camaras para capsula que se pueden alinear con el conducto de aire para la descarga de la dosis (por ejemplo, documentos WO91/02558 y GB 2242134). Estos comprenden el tipo de inhaladores de multiples dosis unitarias junto con inhaladores de blister, que tienen un

15 numero limitado de dosis unitarias en el suministro a un disco o en una tira.

Los inhaladores de blister proporcionan una mejor protecci6n frente a la humedad del medicamento que los inhaladores de capsulas. El acceso al polvo se consigue perforando la cubierta, asi como la lamina del blister, o separando la lamina de cubierta. Cuando se usa una tira de blister en lugar de un disco, puede aumentar el numero de dosis, pero resulta inconveniente para el paciente reemplazar una tira vacia. Por tanto, dichos dispositivos son

20 con frecuencia desechables con el sistema de dosis incorporado, incluyendo la tecnica usada para transportar la tira y abrir las cavidades del blister.

Los inhaladores multidosis no contienen cantidades previamente medidas de la formulaci6n de polvo. Estos consisten en un recipiente relativamente grande y un principio de medida de dosis que debe ser accionado por el paciente. El recipiente tiene multiples dosis que se aislan individualmente del resto del polvo por desplazamiento 25 volumetrico. Existen diversos principios de medida de la dosis, incluyendo membranas giratorias (por ejemplo documento EP0069715) o discos (por ejemplo documentos GB 2041763; EP 0424790; DE 4239402 y EP 0674533), cilindros giratorios (por ejemplo documentos EP 0166294; GB 2165159 y WO 92/09322) y troncos de cono giratorios (por ejemplo documento WO 92/00771), teniendo todos cavidades que tienen que llenarse con el polvo del recipiente. Otros dispositivos multidosis tienen embolos de medida con un rebaje local o perimetral para desplazar

30 un cierto volumen de polvo del recipiente a una camara de administraci6n o un conducto de aire, por ejemplo, los documentos EP 0505321, WO 92/04068 y WO 92/04928, o placas deslizantes de medida como Novolizer SD2FL (de Sofotec) que se describe en las siguientes solicitudes de patente: WO 97/000703, WO 03/000325 y WO 03/061742.

35 Aparte de las aplicaciones a traves de inhaladores de polvo seco, las composiciones de la invenci6n se pueden administrar en aerosoles que funcionan a traves de gases propulsores o por medio de los denominados atomizadores, a traves de los cuales se pueden pulverizar soluciones de sustancias farmacol6gicamente activas a alta presi6n de modo que se produce una niebla de particulas inhalables. Tales atomizadores se describen, por ejemplo, en los documentos WO 91/Gc©4468 y WO 97/12687.

40 Las dosis eficaces estan, normalmente, en el intervalo de 1-2.000 mg de ingrediente activo por dia. La dosificaci6n diaria se puede administrar en uno o mas tratamientos, preferiblemente de 1 a 4 tratamientos, por dia.

La sintesis de los compuestos de la invenci6n y de los intermedios que se utilizan en la misma se ilustra por los

45 siguientes Ejemplos (1-20), incluyendo los Ejemplos de Preparaci6n (Intermedios 1-28) que no limitan el alcance de la invenci6n en modo alguno.

Los Espectros de Resonancia Magnetica Nuclear de 1H se registraron en un espectr6metro Varian Gemini 300. Los puntos de fusi6n se registraron usando un aparato BOchi B-540. Las separaciones cromatograficas LCMS se 50 obtuvieron usando un sistema Waters 2795 equipado con una columna Symmetry C18 (2,1 x 100 mm, 3,5 mm). Como detectores se usaron un espectr6metro de masas Micromass ZMD usando ionizaci6n ES y un detector Diode Array Waters 996. La fase m6vil fue acido f6rmico (0,46 ml), amoniaco (0,115 ml) y agua (1000 ml) (A) y acido f6rmico (0,4 ml), amoniaco (0,1 ml), metanol (500 ml) y acetonitrilo (500 ml) (B): inicialmente desde 0% a 95% de B durante 20 min, y luego 4 min. con 95% de B. El tiempo de reequilibrado entre dos inyecciones fue de 5 minutos. El

55 caudal fue 0,4 ml/min. El volumen de inyecci6n fue de 5 Il. Los cromatogramas obtenidos por detecci6n con haz de diodos se procesaron a 210 nm.

Preparaci6n 1

6-BromooMdo6oM-2-oMa

O2N

Br O 2NBr NBr6M HCl, O2HNaH, DMF Br

DMSO

Fe, AcOH NMeO2C

O MeO2C

F CO2Me O OHCO2Me

a)�2-n4-Bromo-2-MotrofeMo6)ma6oMato de dometo6o

Se anadi6 gota a gota malonato de dimetilo (40,34 g, 0,305 mol) en N,N'-dimetilformamida (45 ml) a una suspensi6n de hidruro s6dico (dispersi6n al 60% en aceite mineral, 16,2 g, 405 mmol) en N,N'-dimetilformamida (500 ml) a 10 cC. La mezcla se agit6 durante 1 hora a temperatura ambiente y luego se anadi6 gota a gota a la mezcla de reacci6n 4-bromo-1-fluoro-2-nitrobenceno (44,38 g, 202 mmol) en N,N'-dimetilformamida (45 ml). La mezcla se agit6 75 minutos a temperatura ambiente y luego se calent6 hasta 65 °C. Despues de 1 hora, el disolvente se elimin6 a presi6n reducida, el residuo se suspendi6 en una mezcla de acetato de etilo y agua y se anadi6 acido clorhidrico acuoso 2M hasta que la mezcla vir6 a un color amarillo palido. La fase organica se separ6, se lav6 con agua, salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El producto bruto se recristaliz6 en eter diisopropilico dando el compuesto del epigrafe (55,0 g, 83%) como un s6lido amarillo palido.

LRMS (m/z): 330/332 (M-1)-.

1H-NMR δ (CDCl3): 3,81 (s, 6H), 5,28 (s, 1H), 7,43 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,78 (dd, J=9,0 y 3,0 Hz, 1H), 8,21 (d,

J=4,0 Hz, 1H).

b� Aaodo 2-n4-bromo-2-MotrofeMo6)aaetoao

Se anadi6 acido clorhidrico acuoso 6M (200 ml) a una soluci6n agitada de 2-(4-bromo-2-nitrofenil)malonato de dimetilo (preparaci6n 1a, 55,45 g, 170 mmol) en dimetilsulf6xido (250 ml) a temperatura ambiente y luego se calent6 la mezcla hasta 130 °C con agitaci6n. Despues de 5 horas, la mezcla se enfri6 y se anadi6 agua (400 ml) con agitaci6n y se dej6 enfriar las mezcla durante la noche. El precipitado se filtr6, se lav6 con agua y se sec6 a vacio dando el compuesto del epigrafe (41,0 g, 94%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 258/260 (M-1)-.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 3,98 (s, 2H), 7,53 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,95 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,27 (s, 1H), 12,66 (s,

1H).

a� 6-BromooMdo6oM-2-oMa

Se anadi6 lentamente hierro (40,0 g, 700 mmol) a una soluci6n agitada de acido2-(4-bromo-2-nitrofenil)acetico (preparaci6n 1b, 46,6 g, 200 mmol) en acido acetico (390 ml) a 75 °C, y luego se agit6 la mezcla durante 1 hora a 100 °C. La mezcla se enfri6 y se anadi6 acetato de etilo. La mezcla se filtr6 a traves de Celite® y se evapor6 el disolvente. El producto bruto se lav6 con acido clorhidrico acuoso 0,1M, agua, eter dietilico y se sec6 dando el compuesto del epigrafe (22,0 g, 58%) como un s6lido.

LRMS (m/z): 212/214 (M+1)+.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 3,45 (s, 2H), 6,94 (s, 1H), 7,09-7,17 (m, 2H), 10,50 (s, 1H).

Preparaci6n 2

6'-Bromoesporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

I

Br O

Se anadi6 gota a gota durante 30 minutos n-butil litio (2,5 M en hexanos, 3,8 ml, 9,5 mmol) a una suspensi6n agitada de 6-bromoindolin-2-ona (preparaci6n 1, 1,00 g, 4,7 mmol) y N,N,N',N'-tetrametiletilendiamina (1,42 ml, 9,4 mmol) en tetrahidrofurano (20 ml) a -78 cC. La mezcla se agit6 durante 1 hora, luego se anadi6 gota a gota durante 5 minutos 1,4-diyodobutano (3,11 ml, 23,6 mmol). La mezcla se calent6 hasta -20 °C durante un periodo de 1 hora, se agit6 durante otra hora a esta temperatura y se calent6 hasta temperatura ambiente. Despues de 3 horas agitando a temperatura ambiente, se anadi6 a la reacci6n soluci6n acuosa saturada de cloruro am6nico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con agua, salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 10:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (0,57 g, 45%) como un s6lido rosa palido.

LRMS (m/z): 266/268 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,81-2,20 (m, 8H), 7,02-7,06 (m, 2H), 7,14-7,18 (m, 1H), 7,83 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 3

6'-Bromo-5'-a6oroesporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

HH

Br NCS, CHCl3

Br

NN

O

O

Cl

Se anadi6 N-clorosuccinimida (500 mg, 3,75 mmol) a una soluci6n de 6'-bromoespiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'ona (preparaci6n 2, 0,20 g, 0,75 mmol) en cloroformo (5 ml). La mezcla se agit6 y calent6 a reflujo. Despues de 6 horas, la mezcla se enfri6 a la temperatura ambiente. Se anadi6 a la reacci6n soluci6n acuosa saturada de hidrogenocarbonato s6dico y la mezcla se extrajo con cloroformo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 8:2) proporcion6 el compuesto del epigrafe (0,17 g, 75%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 298/300 (M-1)-.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,84-1,99 (m, 4H), 2,07-2,14 (m, 2H), 2,18-2,24 (m, 2H), 7,26 (s ancho, 2H).

Preparaci6n 4

6'-n4,4,5,5-Tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

O H H

B

Br N

N

O O

O

Se calent6 a 120°C durante 30 minutos en un Biotage Initiator Microwave Synthesizer una mezcla de 6'bromoespiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 2, 0,20 g, 0,77 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,29 g, 1,15 mmol), acetato potasico (0,38 g, 3,85 mmol) y complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II) diclorometano (0,06 g, 0,08 mmol) en N,N'-dimetilformamida (2 ml). La mezcla despues se enfri6 y se evapor6 el disolvente. Se anadi6 acetato de etilo al residuo y la fase organica se lav6 con soluci6n acuosa saturada de hidr6genocarbonato s6dico, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 3:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (0,07 g, 30%) como un s6lido.

LRMS (m/z): 314 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,34 (s, 12H), 1,83-1,91 (m, 2H), 1,94-2,10 (m, 4H), 2,15-2,23 (m, 2H), 7,21 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,45 (s ancho, 1H), 7,45 (d, J=9,0 Hz, 1H).

Preparaci6n 5

6-Bromo-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

I

I H H

Br

Br O N

N

O O

BuLi, TMEDA

O Se obtuvo como un s6lido blanco (33%) a partir de 6-bromoindolin-2-ona (preparaci6n 1) y 1-yodo-2-(2yodoetoxi)etano siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 2 seguido de trituraci6n del producto bruto con eter dietilico/hexanos (1:1) seguido de acetato de etilo y finalmente eter dietilico.

LRMS (m/z): 282/284 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,71 (m, 4H), 3,81 (m, 2H), 4,01 (m, 2H), 6,98 (d, J=1,65 Hz, 1H), 7,14 (dd, J=7,97 Hz, J=1,65 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,97 Hz, 1H), 10,55 (s, NH).

Preparaci6n 6

6-Bromo-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

Br

O

O

a)�6-bromo-2-oxooMdo6oMa-1-aarboxo6ato de tera-buto6o

Se anadieron dicarbonato de di-terc-butilo (4,63 g, 21,2 mmol) e hidr6geno-carbonato de sodio (10,7 g, 127 mmol) a una soluci6n agitada de 6-bromoindolin-2-ona(preparaci6n 1, 3,0 g, 14,2 mmol) en tetrahidrofurano (150 mL) y la mezcla se calent6 a reflujo. Despues de 3 horas la mezcla se enfri6 y se filtr6 y el filtrado se concentr6 a vacio. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 10:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (3,58 g, 81%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 312/314 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,65 (s, 9H), 3,66 (s, 2H), 7,10(d, 1H), 7,27 (d, 1H), 8,03 (s, 1H).

b)�6-bromo-2-oxo-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-1-aarboxo6ato�de�tera-buto6o

Se anadi6 carbonato de cesio (20,7 g, 63,5 mmol) en pequenas porciones a lo largo de un periodo de 20 minutos a una soluci6n agitada de 6-bromo-2-oxoindolina-1-carboxilato de terc-butilo (preparaci6n 6a, 6,0 g, 16,0 mmol) y 1yodo-2-(2-yodoetoxi)etano (6,58 g, 17,6 mmol) en N,N'-dimetilformamida (250 mL) a -20 °C en atm6sfera de arg6n. Despues de la adici6n, la mezcla se calent6 a la temperatura ambiente y se agit6 durante 3 horas. Se anadieron a la mezcla de reacci6n acido acetico (1,1 mL) seguido de acetato de etilo y agua y la capa organica se separ6, se lav6 con agua, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 10:1 a 5:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (4,50 g, 61%) como un s6lido amarillo palido.

LRMS (m/z): 382/384 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,65 (s, 9H), 1,86 (m, 4H), 3,90 (m, 2H), 4,23 (m, 2H), 7,17(d, J=7,97 Hz, 1H), 7,33 (d,

J=7,97 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H)

a) 6-bromo-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

Una mezcla de 6-bromo-2-oxo-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-1-carboxilato de terc-butilo (preparaci6n 6b, 4,20 g, 11,0 mmol) y una soluci6n 5M de cloruro de hidr6geno en 1,4-dioxano (25 mL) se agit6 a temperatura ambiente. Despues de 5 horas, la mezcla se concentr6 a vacio para dar el compuesto del epigrafe (3,20 g, 98%) como un s6lido rosa palido.

LRMS (m/z): 278/280 (M-1)+.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,71 (m, 4H), 3,81 (m, 2H), 4,01 (m, 2H), 6,98 (d, J=1,65 Hz, 1H), 7,14 (dd, J=7,97

Hz, J=1,65 Hz, 1H), 7,47 (d, J=7,97 Hz, 1H), 10,55 (s, NH).

Preparaci6n 7

6-n4,4,5,5-Tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

O H N

HBr NB O O

O OO

Se carg6 un tubo Schlenk con tapa secado en horno con 6-bromo-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolin-3,4'-piran]-2-ona (preparaci6n 6, 0,10 g, 0,35 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,18 g, 0,71 mmol), acetato potasico (0,07 g, 0,70 mmol) y dimetilsulf6xido (1 ml). El tubo Schlenk se someti6 a tres ciclos de evacuaci6n-rellenado con argon y se anadi6 complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II) diclorometano (0,02 g, 0,02 mmol). Despues de otros tres ciclos de evacuaci6n-rellenado con argon, se tap6 el tubo Schlenk y se coloc6 en un bano de aceite a 90°C. Despues de 16h, la mezcla se enfri6 y se anadi6 acetato de etilo. La fase organica se lav6 con agua, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La mezcla se filtr6 a traves de un cartucho de silice eluyendo con hexanos/acetato de etilo dando el compuesto del epigrafe con rendimiento cuantitativo como un residuo oleoso amarillo palido, que se us6 sin purificaci6n posterior.

LRMS (m/z): 330 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,35 (m, 12H), 1,89-1,91 (m, 4H), 3,91-3,95 (m, 2H), 4,23-4,27 (m, 2H), 7,33 (s, 1H),

7,40 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,77 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 8

6-Bromo-3,3-dometo6oMdo6oM-2-oMa

O

H H

BrCaH2N

H

Br O OH2N

N

Br

O

O N H

a) N'-n3-BromofeMo6)osobutorohodrazoda

Se anadi6 anhidrido isobutirico (4,80 ml, 28,70 mmol) gota a gota a una soluci6n agitada de hidrocloruro de 3bromofenilhidrazina (6,10 g, 27,30 mmol) y trietilamina (7,60 ml, 54,50 mmol) en diclorometano a 0 cC. Despues de la adici6n, la mezcla se calent6 a la temperatura ambiente y se agit6 durante tres horas. La mezcla se concentr6 entonces a vacio y el residuo se reparti6 entre acetato de etilo y agua. La fase organica se separ6, se lav6 con hidr6geno carbonato de sodio acuoso saturado, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El residuo se tritur6 con eter dietilico y el s6lido se filtr6 y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (5,50 g, 78%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 257/259 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,22-1,25 (d, 6H), 2,43-2,51 (m, 1H), 6,16 (s ancho, 1H), 6,72-6,75 (m, 1H), 6,95 (s

ancho, 1H), 7,00-7,11 (m, 2H), 7,33 (s ancho, 1H).

b)�6-Bromo-3,3-dometo6oMdo6oM-2-oMa

Se calent6 hasta 180 °C durante 25 minutos, luego hasta 210 °C durante 15 minutos, y finalmente hasta 230 °C durante 30 minutos una mezcla de N'-(3-bromofenil)isobutirohidrazida (preparaci6n 8a, 3,10 g, 11,90 mmol) e hidruro de calcio (0,75 g, 17,9 mmol) en un tubo Schlenk equipado con un condensador de aire. La mezcla se enfri6 entonces hasta temperatura ambiente y se anadi6 con agitaci6n una mezcla de metanol y agua y, despues de que

5 ces6 la generaci6n de gas, se anadi6 acido clorhidrico concentrado hasta que el pH fue 1-2. Se anadi6 entonces agua y la mezcla se calent6 hasta 100 °C. Despues de 1 hora la mezcla se enfri6 hasta 0 °C, se llev6 hasta pH 3 con soluci6n acuosa 6N de hidr6xido s6dico y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con agua y salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 y el residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (hexanos/EtOAc 10:1) dando el compuesto del epigrafe (0,70 g, 24%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 240/242 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,39 (s, 6H), 7,06 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,09 (s, 1H), 7,19 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,24 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 9

15 3,3-Dometo6-6-n4,4,5,5-tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)oMdo6oM-2-oMa

O H H

B

Br N

N

O O

O

Se obtuvo como un s6lido a partir de 6-bromo-3,3-dimetilindolin-2-ona (preparaci6n 8) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 7. El compuesto bruto deseado se obtuvo con rendimiento cuantitativo y se us6 sin purificaci6n posterior.

LRMS (m/z): 288 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,26-1,40 (m, 18H), 7,23 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,54 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 8,00

(s ancho, 1H).

Preparaci6n 10

a)�6'-Bromoesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oMa]-2',4-dooMa

Se anadi6 terc-but6xido potasico (0,085 g, 0,8 mmol) a una suspensi6n de 6-bromoindolin-2-ona (preparaci6n 1, 3,00 g, 14,2 mmol) en dimetilsulf6xido (7 ml) y, despues de agitar durante 10 minutos a temperatura ambiente, la mezcla se calent6 hasta 40-45 cC y se anadi6 gota a gota durante 70 minutos acrilato de metilo (4,00 ml, 44,4 mmol). Despues de la adici6n, la mezcla se agit6 durante 1 hora y luego se anadi6 mas terc-but6xido potasico (3,82 g, 34,0 mmol) en varias porciones durante 30 minutos manteniendo la temperatura por debajo de 50 cC. La mezcla se calent6 entonces hasta 100 cC y se agit6 durante 1,5 horas. Se anadi6 agua (45 ml) y se continu6 calentando a

35 85 cC durante 4 horas y luego se dej6 que la mezcla se enfriara durante la noche. El precipitado resultante se filtr6 y el s6lido se lav6 con agua y hexanos dando el producto bruto. La recristalizaci6n en alcohol etilico proporcion6 el compuesto del epigrafe (1,95 g, 42%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 292/294 (M-1)-. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,99-2,08 (m, 2H), 2,13-2,22 (m, 2H), 2,41-2,50 (m, 2H), 2,82-2,92 (m, 2H), 7,07 (d, J=3,0 Hz, 1H), 7,21 (dd, J=9,0/3,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J=9,0 Hz, 1H), 10,70 (s ancho, 1H).

b) 6'-Bromo-4,4-dof6uoroesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se anadi6 trifluoruro de dietilaminoazufre (0,40 ml, 3,1 mmol) gota a gota a una suspensi6n de 6'bromoespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2',4-diona (preparaci6n 10a, 0,30 g, 1,0 mmol) en diclorometano (3 ml). La

45 mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante la noche y luego se anadi6 gota a gota a una mezcla hielo-agua. Despues de agitar durante 20 minutos, la mezcla se neutraliz6 con una soluci6n acuosa al 4% de hidrogenocarbonato s6dico y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar un aceite. La purificaci6n por cromatografia de fase inversa (Silice C-18 de Waters©, agua/acetonitrilo/metanol como eluyentes [acido f6rmico al 0,1% v/v tamponado] 0% hasta 60%) proporcion6 el compuesto del epigrafe (0,13 g, 41%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 314/316 (M-1)-. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,80-2,20 (m, 6H), 2,60 (m, 2H), 7,02-7,21 (m, 3H), 7,80 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 11

55 4,4-Dof6uoro-6'-n4,4,5,5-tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

O

H

H

B

Br N

N

O

O

O

F F F F

Se obtuvo como un s6lido blanco (76%) a partir de 6'-bromo-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 10) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 7, seguido por purificaci6n del producto bruto por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 1:1).

5 LRMS (m/z): 362 (M-1)-. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,36 (s, 12H), 1,94-2,18 (m, 6H), 2,54-2,75 (m, 2H), 7,27 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,55 (d, J=6,0 Hz, 1H), 8,26 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 12

10 6'-bromo-4-hodroxo-4-meto6esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

H N

Br H N

Br O

MeLi O

THF

O

OH Se anadi6 metil litio (1,6M en eter dietilico, 4,89 ml, 7,82 mmol) gota a gota a una soluci6n agitada de 6'bromoespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2',4-diona (preparaci6n 10a, 1,00 g, 3,40 mmol) en tetrahidrofurano (30 ml) a 78 °C. La mezcla se calent6 hasta 0 °C durante 3 horas y se agit6 a temperatura ambiente durante otras 4,5 horas.

15 Se anadi6 a la reacci6n soluci6n acuosa saturada de cloruro am6nico (20 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se separ6, se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 97:3) dio los dos is6meros puros del compuesto de epigrafe. Is6mero mayoritario (661 mg, 63%) como un s6lido blanco

LRMS (m/z): 310/312 (M+1)+. 20 1H-NMR δ (CDCl3): 1,39 (s, 3H), 1,47-1,60 (m, 3H), 1,78-1,97 (m, 4H), 2,16-2,26 (m, 2H), 7,08 (d, J=1,6 Hz, 1H), 7,15 (dd, J=8,0/1,65 Hz, 1H), 7,21 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,66 (s ancho, 1H).

El is6mero minoritario (244 g, 23%) se obtubvo como un s6lido blanco LRMS (m/z): 310/312 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 1,15 (s ancho, 1H), 1,39 (s, 3H), 1,61-1,73 (m, 2H), 2,02-2,12 (m, 3H), 2,19-2,28 (m,

25 3H), 7,01 (s, 1H), 7,16 (s, 2H), 7,51 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 13

4-hodroxo-4-meto6-6'-n4,4,5,5-tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

HO N

Br H

BNO

O O

OH OH 30 Se obtuvo como un s6lido a partir de 6'-bromo-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona(preparaci6n 12, is6mero mayoritario) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 7. El compuesto bruto deseado se obtuvo con rendimiento cuantitativo y se us6 sin purificaci6n posterior. LRMS (m/z): 358 (M+1)+.

35 Preparaci6n 14

6'-bromo-4-n2-morfo6oMoetoxo)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

H

BrH

Br H

HN Br

OBr O OO O

O O

O

O Cl N

Cl Cl

O

a)�6'-bromo-4,4-bosn2-a6oroetoxo)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se agit6 a temperatura ambiente durante 4 dias una mezcla de 6'-bromoespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2',4-diona (preparaci6n 10a, 4,0 g, 13,6 mmol), 2-cloroetanol (20 ml), acido metanosulf6nico (0,25 ml) y tamices moleculares recien activados (20 g) en diclorometano (20 ml) y tolueno (40 ml). Se anadi6 hidrogenocarbonato s6dico s6lido para

5 neutralizar la mezcla y la suspensi6n se filtr6 y se lav6 la torta del filtro con varias porciones de diclorometano. El filtrado y las aguas de lavado se combinaron y se evaporaron y el residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 200:1) dando el compuesto del epigrafe (3,9 g, 66%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 436 (M-1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,69 (m, 4H), 1,86 (m, 2H), 2,15 (m, 2H), 3,74 (m, 6H), 3,81 (m, 2H), 6,96 (s, 1H),

10 7,16 (m, 2H), 10,48 (s, 1H).

b)�6'-bromo-4-n2-morfo6oMoetoxo)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se anadi6 gota a gota una soluci6n de borohidruro de cinc (0,25 M en eter dietilico, 3,48 ml, 0,87 mmol) durante un periodo de 5 minutos a una suspensi6n agitada, enfriada (bano de hielo) de 6'-bromo-4,4-bis(215 cloroetoxi)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 14a, 0,81 g, 1,9 mmol) en diclorometano (5 ml). Seguidamente, se anadi6 gota a gota cloruro de trimetilsililo (0,46 ml, 3,64 mmol) y la mezcla se calent6 hasta temperatura ambiente y se agit6 durante la noche. Se anadieron a la mezcla soluci6n acuosa saturada de hidrogenocarbonato s6dico y acetato de etilo y se continu6 agitando durante 1 hora. La fase organica se separ6, se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar un s6lido blanco. El s6lido se recogi6 en N,N'20 dimetilformamida (6 ml) y se anadieron morfolina (0,45 ml, 5,1 mmol) y yoduro s6dico (0,2 g, 1,6 mmol) y la mezcla se calent6 con agitaci6n hasta 85 °C en un tubo sellado. Despues de agitar durante la noche, la mezcla se diluy6 con agua, se anadi6 soluci6n acuosa saturada de hidrogenocarbonato s6dico y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se extrajo con soluci6n acuosa 2M de acido clorhidrico (3 x 20 ml) y la fase acuosa combinada se lav6 con acetato de etilo. La soluci6n acuosa resultante se hizo fuertemente basica con hidr6xido s6dico s6lido y

25 luego se extrajo con acetato de etilo. Se sec6 la fase organica (MgSO4) y se evapor6 y el residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 100:1 hasta 25:1) dando el compuesto del epigrafe (0,21 g, 28%, mezcla 92:8 de is6meros) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 409/411 (M+1)+.

30 Preparaci6n 15

4-n2-morfo6oMoetoxo)-6'-n4,4,5,5-tetrameto6-1,3,2-dooxaboro6aM-2-o6)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

O

O

Br

B

HN

HN

O

O

O

O

N

O

O

N

35 Se obtuvo como un aceite marr6n a partir de 6'-bromo-4-(2-morfolinoetoxi)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 14) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 7. El compuesto bruto deseado se obtuvo con rendimiento cuantitativo y se us6 sin purificaci6n posterior. LRMS (m/z): 457 (M+1)+.

40 Preparaci6n 16

6'-bromo-2,3,5,6-tetrahodroesporo[poraM-4,3'-porro6o[3,2-b]porodoM]-2'n1'H)-oMa a)�5-Bromo-2-a6oro-3-MotroporodoMa

Se anadi6 N,N'-dimetilformamida (3 ml) a una mezcla de 5-bromo-2-hidroxi-3-nitropiridina (16,54 g, 80 mmol) y

5 cloruro de tionilo (43 ml) y la mezcla se agit6 y se calent6 hasta reflujo. Despues de 1 hora, la soluci6n se enfri6 y el disolvente se evapor6. La mezcla was co-evaporated with toluene to give a dark solid. La purificaci6n por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 10:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (14,63 g, 82%) como un s6lido amarillo. 1H-NMR δ (CDCl3): 8,38 (d, J=3,0 Hz, 1H), 8,70 (d, J=3,0 Hz, 1H).

10 b)�2-n5-Bromo-3-MotroporodoM-2-o6)ma6oMate de dobeMao6o Se anadi6 malonato de dibencilo (14,35 g, 50,5 mmol) en dimetoxietano (40 ml) gota a gota a una suspensi6n de hidruro s6dico (60% en aceite mineral, 2,00 g, 50,5 mmol) en dimetoxietano (55 ml). Despues de la adici6n la mezcla se agit6 30 minutos mas, se anadi6 gota a gota una soluci6n de bromo-2-cloro-3-nitropiridina (preparaci6n 16a, 6,00

15 g, 25,3 mmol) en dimetoximetano (50 ml), y la mezcla roja se agit6 durante la noche. La mezcla se verti6 en agua, se ajust6 el pH de la soluci6n a 3 con acido clorhidrico acuoso 1M y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El residuo se disolvi6 en la cantidad minima de tolueno y se anadieron varios volumenes de hexanos mientras se raspaba el recipiente de reacci6n dando un s6lido que despues de filtrar y secar proporcion6 el compuesto del epigrafe (10,60 g, 80%).

20 LRMS (m/z): 485/487 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 5,24 (s, 1H), 5,25 (s, 1H), 7,30-7,35 (m, 10H), 8,61 (s, 1H), 8,80 (s, 1H).

a) 6-Bromo-1H-porro6o[3,2-b]porodoM-2n3H)-oMa

Se anadi6 polvo de hierro (0,82 g, 14,60 mmol) a una soluci6n de 2-(5-bromo-3-nitropiridin-2-il)malonato de dibencilo

25 (preparaci6n 16b, 1,78 g, 3,70 mmol) en acido acetico glacial (50 ml) y la mezcla se calent6 con agitaci6n hasta 120 cC. Despues de 7 horas, la mezcla se enfri6 y se dej6 reposar durante la noche. La reacci6n se verti6 en hielo-agua y se extrajo primero con acetato de etilo y luego con cloroformo. El extracto organico combinado se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 a vacio. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 98:2) proporcion6 el compuesto del epigrafe(0,42 g, 54%) como un s6lido rosa.

30 LRMS (m/z): 213/215 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 3,58 (s, 2H), 7,31 (d, J=3,0 Hz, 1H), 8,18 (d, J=3,0 Hz, 1H), 10,69 (s ancho, 1H). d)�6'-bromo-2,3,5,6-tetrahodroesporo[poraM-4,3'-porro6o[3,2-b]porodoM]-2'n1'H)-oMa Se obtuvo como un s6lido blanquecino (13%) a partir de 6-bromo-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-2(3H)-ona (preparaci6n 16c) y 1-yodo-2-(2-yodoetoxi)etano siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 2

35 seguido por purificaci6n por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 98:2). LRMS (m/z): 283/285 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,63-1,84 (m, 4H), 3,87-4,07 (m, 4H), 7,41 (s, 1H), 8,26 (s, 1H), 10,78 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 17

40 Aaodo 2'-oxo-1',2,2',3,5,6-hexahodroesporo[poraM-4,3'-porro6o[3,2-b]porodoM]-6'-o6borgMoao

OH

H

Br N

N

H B OH

O

O

N

N

O

O

Se carg6 un tubo Schlenk con tapa secado en horno con 6'-bromo-2,3,5,6-tetrahidroespiro[piran-4,3'-pirrolo[3,2b]piridin]-2'(1'H)-ona (preparaci6n 16, 0,350 g, 1,24 mmol), bis(pinacolato)diboro (0,470 g, 1,85 mmol), acetato 45 potasico (0,240 g, 2,48 mmol) y dimetilsulf6xido (4 ml). El tubo Schlenk se someti6 a tres ciclos de evacuaci6nrellenado con argon y se anadi6 complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II) diclorometano

(0,06 g, 0,07 mmol). Despues de otros tres ciclos de evacuaci6n-rellenado con argon, se tap6 el tubo Schlenk y se coloc6 en un bano de aceite a 110°C. Despues de 16 horas, la mezcla se enfri6 y se anadi6 acetato de etilo y la fase organica se extrajo con acido clorhidrico acuoso 2M. La fase acuosa se lav6 con acetato de etilo y luego se ajust6 el pH de la soluci6n a 6 con soluci6n acuosa 6M de hidr6xido s6dico y se extrajo con acetato de etilo. Se sec6 la fase

5 organica (MgSO4) y se evapor6 dando el compuesto del epigrafe con rendimiento cuantitativo como un residuo oleoso marr6n, que se us6 sin purificaci6n posterior. LRMS (m/z): 249 (M+1)+.

Preparaci6n 18

Se anadi6 terc-but6xido potasico (0,03 g, 0,27 mmol) a una suspensi6n de 6-bromo-1H-pirrolo[3,2-b]piridin-2(3H)ona (preparaci6n 16c, 0,87 g, 4,1 mmol) en dimetilsulf6xido (4 ml) y, despues de agitar durante 10 minutos a 15 temperatura ambiente, la mezcla se calent6 hasta 40-45 cC y se anadi6 gota a gota durante 60 minutos acrilato de metilo (1,14 ml, 12,71 mmol). Despues de la adici6n, la mezcla se agit6 durante 2 horas y luego se anadi6 mas tercbut6xido potasico (1,4 g, 12,21 mmol) en varias porciones durante 30 minutos manteniendo la temperatura por debajo de 50 cC. La mezcla se calent6 entonces hasta 100 cC y se agit6 durante 2 horas. Se anadi6 agua (20 ml) y se continu6 calentando a 85 cC durante 2 horas y luego se dej6 que la mezcla se enfriara durante la noche. Se 20 anadi6 acetato de etilo y la fase organica se lav6 con agua, salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 dando el

compuesto del epigrafe (0,60 g, 50%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 293/295 (M-1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,14 (m, 2H), 2,27 (m, 2H), 2,73 (m, 2H), 3,01 (m, 2H), 7,40 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,29 (d, J=1,5 Hz, 1H), 8,44 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 19

6'-bromo-4-hodroxo-4-meto6esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-porro6o[3,2-b]porodoM]-2'n1'H)-oMa

H

Br H NN

Br O

MeLi O

N N

THF

O

OH Se anadi6 gota a gota metil litio (1,6 M en eter dietilico, 4,88 mL, 7,81 mmol) a una soluci6n agitada de 6'

30 bromoespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridina]-2',4(1'H)-diona (preparaci6n 18, 1,00 g, 3,39 mmol) en tetrahidrofurano (30 mL) en -78 °C. La mezcla se calent6 hasta 0°C durante 3 h y se agit6 a temperatura ambiente. Se anadi6 gota a gota a -78 °C mas metil litio (1,6 M en eter dietilico, 4,24 mL, 6,78 mmol) y la mezcla se calent6 a temperatura ambiente y se agit6 durante una noche a temperatura ambiente. Se anadi6 a la reacci6n soluci6n acuosa saturada de cloruro am6nico (20 ml) y la mezcla se extrajo con acetato de etilo.

35 La fase organica se separ6, se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (0,1% de Et3N en hexanos/acetato de etilo 1:1 a 3:1) dio los dos is6meros puros del compuesto del epigrafe. El is6mero mayoritario (283 g, 27%) se obtuvo como un s6lido blanco

LRMS (m/z): 309/311 (M-1)-. 40 El is6mero minoritario (260 g, 25%) se obtuvo como un s6lido blanco LRMS (m/z): 309/311 (M-1)-.

Preparaci6n 20

Aaodo 4-hodroxo-4-meto6-2'-oxo-1',2'-dohodroesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-porro6o[3,2-b]porodoMa]-6'-o6borgMoao

H OH

BrN

H O

N BOH O

N N

OH OH Se obtuvo como un s6lido a partir de 6'-bromo-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]-2'(1'H)ona(preparaci6n 19, is6mero mayoritario) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n

17. El compuesto bruto deseado se obtuvo con rendimiento cuantitativo y se us6 sin purificaci6n posterior.

LRMS (m/z): 275 (M-1)-. Preparaci6n 21

Aaodo 4-hodroxo-4-meto6-2'-oxo-1',2'-dohodroesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-porro6o[3,2-b]porodoMa]-6'-o6borgMoao

H OH

BrN

H O

N BOH O

N N

OH

OH Se obtuvo como un s6lido blanco (27%) a partir de 6'-bromo-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2b]piridin]-2'(1'H)-ona (preparaci6n 19, is6mero minoritario) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 17 seguido de purificaci6n por cromatografia ultrarrapida(100% de diclorometano a diclorometano/metanol/acido acetico 70:29:1). El residuo obtenido se disolvi6 en diclorometano, se lav6 con una

10 soluci6n saturada de NaHCO3, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar el compuesto del epigrafe. LRMS (m/z): 275 (M-1)-.

Preparaci6n 22

a)�2-F6uoro-3-yodobeMzoMotro6o

Se anadi6 n-butil litio (2,5 M en hexanos, 16,8 mL, 42 mmol) gota a gota a una soluci6n agitada de 2,2,6,6tetrametilpiperidina (6,90 mL, 141 mmol) en tetrahidrofurano (60 mL) en -78 °C. La mezcla se agit6 durante 30 20 minutos a -50 °C, despues se anadi6 gota a gota 2-fluorobenzonitrilo (4,4 g, 37 mmol) en tetrahidrofurano (25 mL) a la mezcla a -78 °C. La reacci6n se calent6 hasta -50 °C a lo largo de un periodo de 30 minutos y despues se volvi6 a enfriar hasta -78 °C y se anadi6 una soluci6n de yodo (10,20 g, 40 mmol) en tetrahidrofurano (25 mL). Despues la mezcla se calent6 hasta la temperatura ambiente. Despues de 1 hora, se anadi6 una soluci6n acuosa de tiosulfato de sodio a la reacci6n y la mezcla se extrajo con eter dietilico. La fase organica se lav6 con agua, salmuera, se sec6

25 (MgSO4) y se evapor6. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 20:1) proporcion6 el compuesto del epigrafe (7,86 g, 87%) como un s6lido.1H-NMR δ (CDCl3): 7,04 (t, J=9,0 Hz, 1H), 7,60-7,65 (m, 1H), 7,99-8,04 (m, 1H).

b) Aaodo 2-f6uoro-3-yodobeMzooao

30 Una mezcla de 2-fluoro-3-yodobenzonitrilo (preparaci6n 22a, 5,00 g, 20,2 mmol), dioxano (16 mL) y acido sulfurico (25 mL) se calent6 hasta 115 °C. Despues de 4 horas, la mezcla se enfri6 y se filtr6. Se anadi6 agua al filtrado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La capa organica se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar el compuesto del epigrafe (4,42 g, 82%) como un s6lido. LRMS (m/z): 265 (M-1)-.

35 1H-NMR δ (CDCl3): 6,94-7,01 (m, 1H), 7,90-7,97 (m, 2H).

a) n2-F6uoro-3-yodofeMo6)metaMo6

Se anadi6 gota a gota borato de trimetilo (1,92 mL, 17,2 mmol) a una soluci6n agitada de acido 2-fluoro-3yodobenzoico (preparaci6n 22b, 4,39 g, 16,5 mmol) en tetrahidrofurano (25 mL) a 0 °C y la mezcla se agit6 durante 40 otros 15 minutos a esta temperatura. Despues se anadi6 complejo de borane-sulfuro de metilo (10 M, 4,4 mL, 44 mmol) en tetrahidrofurano (3 mL) a la mezcla a 0 °C y la mezcla despues se dej6 calentar a la temperatura ambiente. Despues de 1 hora, la mezcla se inactiv6 cuidadosamente por adici6n gota a gota de metanol (10 mL). Despues de

agitar durante una noche, la mezcla se concentr6 a vacio y se anadi6 acetato de etilo al residuo. La fase organica se lav6 con una soluci6n acuosa saturada de carbonato de potasio, salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 dando el compuesto del epigrafe (4,03 g, 97%) como un aceite.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,85 (t, J=6,0 Hz, 1H), 4,78 (d, J=6,0 Hz, 2H), 6,93 (t, J=9,0 Hz, 1H), 7,39-7,44 (m, 1H), 5 7,66-7,71 (m, 1H).

d)�2-F6uoro-3-yodobeMza6dehido

Se anadi6 6xido de manganeso (IV) (15,40 g, 177 mmol) en pequenas porciones a una soluci6n agitada de (2-fluoro3-yodofenil)metanol (preparaci6n 22c, 4,03 g, 16 mmol) en diclorometano (140 mL) y la mezcla se agit6 a 50 °C. 10 Despues de 3 horas, la mezcla se filtr6 a traves de Celite® y el disolvente se evapor6 para dar el compuesto del

epigrafe (2,10 g, 53%) como un s6lido blanco. 1H-NMR δ (CDCl3): 7,07 (t, J=9,0Hz, 1H), 7,82-7,88 (m, 1H), 7,99-8,04 (m, 1H), 10,34 (s, 1H).

e)�2-F6uoro-3-yodobeMza6dehido�oxoma

15 Se anadi6 una soluci6n acuosa al 50% de hidrocloruro de hidroxilamina (9 mL, 64,8 mmol) a una suspensi6n agitada de 2-fluoro-3-yodobenzaldehido (preparaci6n 22d, 2,10 g, 8,4 mmol) en etanol (10 mL) y la mezcla se calent6 ligeramente hasta que se form6 una soluci6n. Despues de agitar durante 3 dias a temperatura ambiente, la mezcla se concentr6 a vacio y se anadi6 agua al residuo. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y la capa organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar el compuesto del epigrafe (2,15 g, 97%) como un s6lido.

20 1H-NMR δ (CDCl3): 6,91-6,96 (m, 1H), 7,71-7,80 (m, 2H), 7,91 (s, 1H), 8,35 (s, 1H).

f) N-Coa6opropo6-2-f6uoro-N'-hodroxo-3-yodobeMaomodamoda

Se anadi6 N-clorosuccinimida (1,20 g, 8,9 mmol) en pequenas porciones a una soluci6n agitada de 2-fluoro-3yodobenzaldehido oxima (preparaci6n 22e, 2,15 g, 8,1 mmol) en N,N'-dimetilformamida (3 mL) y la mezcla se agit6 25 durante 15 minutos a 55 °C. Despues de enfriar hasta la temperatura ambiente, se anadi6 agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El residuo se recogi6 en tetrahidrofurano (10 mL), se enfri6 en un bano de hielo-agua y se anadi6 gota a gota ciclopropilamina (2,90 mL, 41,9 mmol). Despues de 3 horas agitando a temperatura ambiente, se anadi6 agua a la reacci6n y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para

30 dar el compuesto del epigrafe (2,53 g, 96%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 321 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,35-0,43 (m, 4H), 2,41-2,47 (m, 1H), 5,64 (s ancho, 1H), 6,96 (t, J=6,0Hz, 1H), 7,347,40 (m, 1H), 7,80-7,86 (m, 1H).

35 i) N-Coa6opropo6-7-yodobeMzo[d]osoxazo6-3-amoMa

Una mezcla de N-ciclopropil-2-fluoro-N'-hidroxi-3-yodobencimidamida (preparaci6n 22f, 2,15 g, 8,1 mmol) y 1,8diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (1,30 mL, 8,7 mmol) en tetrahidrofurano (13 mL) se calent6 a 150 °C durante 150 minutos en un Biotage Initiator Microwave Synthesizer. Despues, la mezcla se enfri6 hasta la temperatura ambiente y se evapor6. El residuo se reparti6 entre agua y acetato de etilo y la capa organica se lav6 con salmuera, se sec6 40 (MgSO4) y se evapor6. El residuo bruto se purific6 por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 3:1) para

dar el compuesto del epigrafe (1,61 g, 68%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 301 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,68-0,73 (m, 2H), 0,84-0,90 (m, 2H), 2,81-2,88 (m, 1H), 6,97 (t, J=9,0Hz, 1H), 7,55 (d, J=9,0Hz, 1H), 7,87 (d, J=9,0Hz, 1H).

h) Aaodo 3-naoa6opropo6amoMo)beMzo[d]osoxazo6-7-o6borgMoao

Se anadi6 gota a gota cloruro de isopropilmagnesio (2,0 M en tetrahidrofurano, 2,83 mL, 5,7 mmol) a lo largo de 20 minutos a una soluci6n agitada de N-ciclopropil-7-yodobenzo[d]isoxazol-3-amina (preparaci6n 22g, 0,50 g, 1,7 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL) a -10 °C. La mezcla se agit6 durante 1 hora a 0 °C, despues se anadi6 gota a gota 50 borato de triisopropilo (1,15 mL, 5,0 mmol) a lo largo de 10 minutos y la mezcla se agit6 durante 1 hora a 0 °C. Despues, la mezcla se calent6 a la temperatura ambiente y se agit6 durante una noche. Despues se anadi6 agua, la mezcla se enfri6 en un bano de hielo-agua y el pH se ajust6 a 1 con acido clorhidrico acuoso 2M. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y la capa organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El residuo se tritur6 con eter dietilico y el s6lido se filtr6 y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (140 mg, 39%) como un

55 s6lido blanco. LRMS (m/z): 219 (M+1)+.

Preparaci6n 23

7-Yodo-N-n4-metoxobeMao6)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-3-amoMa a)�2-F6uoro-N'-hodroxo-3-yodo-N-n4-metoxobeMao6)-4-meto6beMaomodamoda

S anadi6 gota a gota 4-metoxibencilamina (2,00 mL, 15,2 mmol) a una soluci6n de cloruro de 2-fluoro-N-hidroxi-3

5 yodo-4-metilbencimidoilo (WO2006094187, 1,46 g, 4,7 mmol) en tetrahidrofurano (20 mL) y la mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante una noche. Se anadi6 agua y el filtrado se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 para dar un semis6lido. El s6lido se tritur6 con una mezcla de hexanos/eter dietilico y el s6lido se filtr6 y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (1,66 g, 86%) como un s6lido blanco.

10 LRMS (m/z): 415 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,50 (s, 3H), 3,80 (s, 3H), 4,07 (d, J=6,0 Hz, 2H), 5,61 (s ancho, 1H), 6,60-6,86 (m, 2H), 7,04-7,12 (m, 3H), 7,21-7,26 (m, 1H).

b)�7-Yodo-N-n4-metoxobeMao6)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-3-amoMa

15 Se anadi6 gota a gota 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (0,31 mL, 2,0 mmol) a una soluci6n de 2-fluoro-N'-hidroxi3-yodo-N-(4-metoxibencil)-4-metilbencimidamida (preparaci6n 23a, 0,80 g, 1,9 mmol) en tetrahidrofurano (10 mL). La mezcla se calent6 despues en condiciones de microondas ("Initiator sixty" de Biotage®) a 150 °C durante 4 horas en atm6sfera de arg6n. La mezcla se verti6 despues en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6. El residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato

20 de etilo 10:1 a 4:1) para dar el compuesto del epigrafe (0,29 g, 38%) como un s6lido blanco. LRMS (m/z): 395 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,56 (s, 3H), 3,81 (s, 3H), 4,39 (s ancho, 1H), 4,51 (d, J=6,0 Hz, 2H), 6,90 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,07 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J=9,0 Hz, 2H).

25 Preparaci6n 24

7-Yodo-6-meto6-1,2-beMaosoxazo6-3-amoMa

H N

NH2

HO

CN O N

F

I I

Se anadi6 terc-but6xido de potasio (2,20 g, 19,2 mmol) a una soluci6n de N-hidroxiacetamida (1,44 g, 19,2 mmol) en

30 N,N'-dimetilformamida (25 mL) en arg6n. La suspensi6n blanca resultante se agit6 a temperatura ambiente durante 30 minutos y despues se anadi6 2-fluoro-3-yodo-4-metilbenzonitrilo (WO2006094187, 2,00 g, 7,7 mmol) y la mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante 6 horas. Se anadieron cantidades adicionales de N-hidroxiacetamida (0,29 g, 3,9 mmol) y terc-but6xido de potasio (0,45 g, 3,9 mmol) y la mezcla se agit6 a temperatura ambiente durante una noche. El disolvente se evapor6 a presi6n reducida y se anadieron agua y acetato de etilo. La fase organica se

35 separ6 y la fase acuosa se extrajo con mas acetato de etilo. Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron (MgSO4) y se evaporaron. El residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (hexanos/acetato de etilo 9:1) para dar el compuesto del epigrafe (1,79 g, 81%) como un s6lido.

LRMS (m/z): 275 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,58 (s, 3H), 7,13 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,36 (d, J=9,0 Hz, 1H). 40

Preparaci6n 25

7-Yodo-6-meto6-1H-oMdazo6-3-amoMa

NH2N

N F

N H II Una soluci6n de monohidrato de hidrazina (0,56 mL, 11,6 mmol) y 2-fluoro-3-yodo-4-metilbenzonitrilo 45 (WO2006094187, 1,00 g, 3,8 mmol) en etanol (7 mL) se agit6 y se calent6 a 100 °C en un tubo sellado. Despues de agitar durante una noche, la mezcla se enfri6 y se anadi6 agua. El precipitado resultante se filtr6, se lav6 con agua y hexanos, y despues se sec6 a vacio dando el compuesto del epigrafe (0,91 g, 87%) como un s6lido amarillo.

1H-NMR δ (CDCl3): 2,55 (s, 3H), 4,09 (s ancho, 2H), 6,96 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,41 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,87 (s ancho, 1H).

Preparaci6n 26

N-Coa6opropo6-8-yodo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

H

N

N

N

NN

HHH2N-NH2

N F

NH2 NH2

N

N

NN NF H H

N

II IO I

a)�2-F6uoro-3-yodoporodoMa Se obtuvo como un s6lido amarillo (63%) siguiendo el procedimiento que se describe en J. Org. Cher. 1993, 58 (27), 7832-7838.

b)�2-HodrazoMo-3-yodoporodoMa

Se anadi6 gota a gota hidrato de hidrazina (12,50 mL, 256 mmol) a una soluci6n de 2-fluoro-3-yodopiridina (preparaci6n 26a, 5,72 g, 25,7 mmol) en etanol (43 mL) y la mezcla resultante se agit6 a temperatura ambiente durante 24 horas y despues a 35 °C durante 24 horas mas. Despues, el disolvente se evapor6 a vacio y se anadi6 agua. El s6lido blanco que se form6 se separ6 por filtraci6n, se lav6 con agua y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (2,78 g, 46%) como un s6lido blanco que se us6 sin mas purificaci6n.

LRMS (m/z): 236 (M+1)+.

a) N-Coa6opropo6-2-n3-yodoporodoM-2-o6)hodrazoMaaarboxamoda

Se anadi6 ciclopropilamina (0,12 g, 2,2 mmol) en diclorometano (3 mL) a una soluci6n de trifosgeno (0,22 g, 0,74 mmol) en diclorometano (5 mL) a 0 °C en arg6n. Despues se anadi6 trietilamina (0,59 mL, 4,2 mmol) en diclorometano (3 mL) y la mezcla resultante se agit6 a temperatura ambiente durante 2 horas y despues se enfri6 a 0 °C. Se anadi6 2-hidrazino-3-yodopiridina (preparaci6n 26b, 0,50 g, 2,1 mmol) en diclorometano (5 mL) y la mezcla resultante se agit6 a temperatura ambiente durante una noche. La soluci6n se enfri6 a 0 °C y precipit6 un s6lido. El s6lido se filtr6, se lav6 con eter dietilico y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (0,56 g, 83%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 319 (M+1)+.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,37 (m, 2H), 0,55 (m, 2H), 2,45 (m, 1H), 6,48 (s ancho, 1H), 6,49 (s ancho, 1H),

6,52 (dd, J = 7,4/4,7 Hz, 1H), 7,51 (s ancho, 1H), 7,64 (s ancho, 1H), 7,98 (dd, J = 7,4/1,4 Hz, 1H), 8,07

(dd, J = 4,7/1,4 Hz, 1H).

d) N-Coa6opropo6-8-yodo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

Una mezcla de N-ciclopropil-2-(3-yodopiridin-2-il)hidrazinacarboxamida (preparaci6n 26c, 0,56 g, 1,8 mmol) y oxicloruro de f6sforo (7 mL) se agit6 a 75 °C durante una noche. La mezcla de reacci6n se enfri6 hasta la temperatura ambiente, se anadi6 lentamente a una mezcla de hielo y agua y despues se alcaliniz6 a pH 8 con soluci6n acuosa de hidr6xido de sodio. La soluci6n acuosa se extrajo con acetato de etilo y la capa organica se lav6 con salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 el disolvente a vacio para dar el compuesto del epigrafe (0,50 g, 88%) como un s6lido.

LRMS (m/z): 301/302 (M+1)+.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,50-0,55 (m, 2H), 0,71-0,77 (m, 2H), 2,75-2,82 (m, 1H), 6,52 (dd, J = 6,0/6,0 Hz,

1H), 7,00 (s, 1H), 7,62 (d, J =6,0 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 6,0 Hz, 1H).

Preparaci6n 27

N-nCoa6opropo6meto6)-8-yodo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

I

a) N-nCoa6opropo6meto6)-2-n3-yodoporodoM-2-o6)hodrazoMaaarboxamoda

Se obtuvo como un s6lido blanco (85%) a partir de 2-hidrazino-3-yodopiridina (preparaci6n 26b) y

ciclopropilmetanamina siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 26c. LRMS (m/z): 333 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,15 (m, 2H), 0,43 (m, 2H), 0,92 (m, 1H), 3,13 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 5,76 (s ancho, 1H), 6,51-6,65 (m, 3H), 7,96 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 5,0 Hz, 1H).

b) N-nCoa6opropo6meto6)-8-yodo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

Se obtuvo como un s6lido (33%) a partir de N-(ciclopropilmetil)-2-(3-yodopiridin-2-il)hidrazinacarboxamida (preparaci6n 27a) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en la preparaci6n 26d.

5 LRMS (m/z): 315 (M+1)+. 1H-NMR δ (MeOD): 0,39 (m, 2H), 0,67 (m, 2H), 1,29 (m, 1H), 3,74 (m, 2H), 6,97 (m, 1H), 8,21 (m , 1H), 8,46 (m , 1H).

Preparaci6n 28

10 N-nCoa6opropo6meto6)-8-yodo-7-meto6-[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

IIH2N

Cl N Cl N HN N NH2

I

I NN HN N

HN NH

N

HN O

a)�2-C6oro-3-yodo-4-meto6porodoMa

Una mezcla de 2-cloro-4-metilpiridin-3-amina (1,0 g, 7,0 mmol) y acido clorhidrico concentrado (4,4 mL) se enfri6 a 0 °C y se anadi6 gota a gota una soluci6n de nitrito de sodio (0,5 g, 7,5 mmol) en agua (8 mL). La mezcla se agit6

15 durante 1 hora a 0 °C y despues se anadi6 gota a gota a una soluci6n agitada de yoduro de potasio (1,6 g, 9,6 mmol) en agua (9 mL). La mezcla se calent6 a la temperatura ambiente y se agit6 durante una noche. La mezcla se extrajo con eter dietilico y la fase organica se lav6 con tiosulfato de sodio acuoso, salmuera, se sec6 (MgSO4) y se evapor6 a vacio. El producto bruto se recristaliz6 en hexano dando el compuesto del epigrafe (0,88 g, 47%) como un s6lido blanco.

20 LRMS (m/z): 254 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,50 (s, 3H), 7,05 (d, J=4,9 Hz, 1H), 8,15 (d, J=4,9 Hz, 1H).

b)�2-HodrazoMo6-3-yodo-4-meto6porodoMa

Una mezcla de 2-cloro-3-yodo-4-metilpiridina (preparaci6n 28a, 2,0 g, 7,9 mmol) e hidrato de hidazina (1,2 mL, 24,2

25 mmol) en piridina (12 mL) en atm6sfera de arg6n se agit6 y se calent6 a reflujo. Despues de 24 horas, la mezcla se enfri6 y se evapor6 a sequedad. La mezcla bruta se tritur6 con agua y el s6lido se filtr6 y se lav6 con agua para dar el compuesto del epigrafe (1,71 g, 87%) que se us6 sin mas purificaci6n en la siguiente reacci6n. LRMS (m/z): 250 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 2,36 (s, 3H), 4,00 (s ancho, 2H), 6,25 (s ancho, 1H), 6,57 (d, J=5,0 Hz, 1H), 7,95 (d,

30 J=5,0 Hz, 1H).

a)�N-nCoa6opropo6meto6)-2-n3-yodo-4-meto6porodoM-2-o6)hodrazoMaaarboxamoda

Se anadi6 gota a gota una soluci6n de ciclopropilmethanamina (0,33 mL, 3,7 mmol) en diclorometano (2 mL) a una soluci6n de trifosgeno (0,39 g, 1,3 mmol) en diclorometano (15 mL) mantenida a 0 °C en atm6sfera de arg6n.

35 Despues de 5 minutos, se anadi6 gota a gota una soluci6n de trietilamina (1,0 mL, 7,2 mmol) en diclorometano y la mezcla se calent6 a temperatura ambiente. Despues de agitar dos horas, la mezcla se enfri6 a 0 °C y se anadi6 gota a gota 2-hidrazinyl-3-yodo-4-metilpiridina (preparaci6n 28b, 0,91 g, 3,6 mmol) en diclorometano (8 mL). La mezcla se calent6 a la temperatura ambiente y se agit6 durante una noche. El s6lido precipitado se filtr6, se lav6 con eter dietilico y se sec6 para dar el compuesto del epigrafe (0,85 g, 68%) como un s6lido beige.

40 LRMS (m/z): 347 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,13-0,18 (m, 2H), 0,40-0,46 (m, 2H), 0,91-0,96 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 3,11 (t, J=6,3 Hz, 2H), 5,69 (s ancho, 1H), 6,20 (s ancho, 1H), 6,60 (s ancho, 1H), 6,74 (d, J=5,0 Hz, 1H), 8,01 (d, J=5,0 Hz, 1H).

45 d)�N-nCoa6opropo6meto6)-8-yodo-7-meto6-[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-3-amoMa

Una mezcla de N-(ciclopropilmetil)-2-(3-yodo-4-metilpiridin-2-il)hidrazinacarboxamida (preparaci6n 28c, 0,85 g, 2,5 mmol) y oxicloruro de f6sforo (10 mL) se agit6 a 75 °C durante una noche. La mezcla de reacci6n se enfri6 hasta la temperatura ambiente y anadi6 lentamente a una mezcla de hielo-agua y despues se anadi6 acetato de etilo. A la mezcla bifasica, agitada, enfriada, se anadi6 una soluci6n acuosa de hidr6xido de sodio hasta que la capa acuosa 5 alcanz6 un pH de 8. La fase organica se lav6 con agua, salmuera, se sec6 (MgSO4) y el disolvente se evapor6 a

vacio dando el compuesto del epigrafe (0,77 g, 96%) como un s6lido amarillo palido. LRMS (m/z): 329 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,24-0,29 (m, 2H), 0,44-0,50 (m, 2H), 1,11-1,21 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 3,21 (m, 2H), 6,66 (d, J=7,0 Hz, 1H), 6,70 (t, J=5,5 Hz, 1H), 8,02 (d, J=7,0 Hz, 1H).

Ejemplo 1

6'-n3-nCoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzobeMzo[d]osoxazo6-7-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

15 Se carg6 un tubo Schlenk con tapa secado en horno con 6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona(preparaci6n 4, 0,060 g, 0,19 mmol), N-ciclopropil-7-yodo-6metilbenzo[d]isoxazol-3-amina (WO2006094187, 0,090 g, 0,29 mmol), 1,4-dioxano (1,2 mL) y una soluci6n 2M acuosa de carbonato de cesio (0,29 mL, 0,58 mmol). El tubo Schlenk se someti6 a tres ciclos de evacuaci6nrellenado con argon y se anadi6 complejo de dicloruro de 1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno-paladio(II) diclorometano

20 (0,015 g, 0,02 mmol). Despues de otros tres ciclos de evacuaci6n-retrollenado con argon, el tubo Schlenk se cerr6 y la mezcla se agit6 y calent6 en un bano de aceite a 100-110 °C. Despues de 20 horas, la mezcla se enfri6 y se reparti6 entre agua y acetato de etilo. El extracto organico se sec6 (MgSO4) y se evapor6 a vacio. La purificaci6n del residuo por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 98:2) proporcion6 el compuesto del epigrafe (0,017 g, 28%) como un s6lido amarillo.

25 LRMS (m/z): 374 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,71-0,77 (m, 2H), 0,86-0,92 (m, 2H), 1,90-2,30 (m, 8H), 2,38 (s, 3H), 2,79-2,86 (m, 1H), 6,94 (s, 1H), 7,05 (dd, J=1,4, 7,7 Hz, 1H), 7,15 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,26 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,45 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 8,27 (s ancho, 1H).

30 Ejemplo 2

6'-n3-nCoa6opropo6amoMo)beMzo[d]osoxazo6-7-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (70%) a partir de acido 3-(ciclopropilamino)benzo[d]isoxazol-7-ilbor6nico (preparaci6n 22) y 6'-bromoespiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona(preparaci6n 2) siguiendo el procedimiento 35 experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (99:1

diclorometano/metanol). LRMS (m/z): 360 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,71-0,77 (m, 2H), 0,86-0,92 (m, 2H), 1,89-1,99 (m, 2H), 2,00-2,15 (m, 4H), 2,17-2,30 (m, 2H), 2,84-2,97 (m, 1H), 7,27 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,29 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,31 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,51 (s,

40 1H), 7,55 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,67 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,86 (s ancho, 1H).

Ejemplo 3

5'-C6oro-6'-n3-naoa6opropo6amoMo)beMzo[d]osoxazo6-7-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (14%) a partir de acido 3-(ciclopropilamino)benzo[d]isoxazol-7-ilbor6nico

5 (preparaci6n 22) y 6'-bromo-5'-cloroespiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 3) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (hexano/acetato de etilo 1:1 a 1:3).

LRMS (m/z): 394 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,71-0,76 (m, 2H), 0,85 -0,91 (m, 2H), 1,62 (s, 3H), 1,90-2,15 (m, 6H), 2,18-2,28 (m, 10 2H), 2,85-2,91 (m, 2H), 4,81 (s, 1H), 7,04 (s, 1H), 7,27 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 7,56 (dd, J=7,0/1,5 Hz, 1H), 7,62 (dd, J=7,0/1,5 Hz, 1H), 7,95 (s ancho, 1H).

Ejemplo 4

6-n3-nCoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-2',3',5',6'-tetrahodroesporo-[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (42%) a partir de 6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2',3',5',6'tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona (preparaci6n 7) y N-ciclopropil-7-yodo-6-metilbenzo[d]isoxazol-3-amina (WO2006094187) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 98:2).

20 LRMS (m/z): 390 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,48-0,57 (m, 2H), 0,66-0,75 (m, 2H), 1,72-1,83 (m, 4H), 2,30 (s, 3H), 2,57-,2,70 (m, 1H), 3,80-3,92 (m, 4H), 4,01-4,14 (m, 4H), 6,85 (s ancho, 1H), 6,99 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,19-7,27 (m, 2H), 7,64 (d, J=9,0 Hz, 1H), 10,52 (s ancho, 1H).

25 Ejemplo 5

6'-n3-nCoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-4,4-dof6uoroesporo�[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

F

Se obtuvo como un s6lido blanco (35%) a partir de 4,4-difluoro-6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 11) y N-ciclopropil-7-yodo-6-metilbenzo[d]isoxazol-3-amina 30 (WO2006094187) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n

por cromatografia instantanea (hexano/acetato de etilo 60:40 a 25:75). LRMS (m/z): 424 (M+1)+. 1H-NMR δ (CDCl3): 0,69-0,74 (m, 2H), 0,84-0,90 (m, 2H), 2,05-2,10 (m, 4H), 2,12-2,22 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 2,55-2,77 (m, 2H), 2,82-2,90 (m, 1H), 4,70 (s, 1H), 6,98 (d, J=1,5 Hz, 1H), 7,10 (dd, J=8,0/1,5 Hz, 1H), 7,17 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,31 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,46 (d, J=7,0 Hz, 1H).

Ejemplo 6

6-n3-nCoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-3,3-dometo6oMdo6oM-2-oMa

10 Se obtuvo como un s6lido amarillento (10%) a partir de 3,3-dimetil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)indolin-2-ona (preparaci6n 9) y N-ciclopropil-7-yodo-6-metilbenzo[d]isoxazol-3-amina (WO2006094187) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 98:2). LRMS (m/z): 348 (M+1)+.

15 1H-NMR δ (CDCl3): 0,91-0,99 (m, 2H), 1,05-1,14 (m, 2H), 1,72 (s, 6H), 2,33 (s, 1H), 2,66 (s, 3H), 3,03-3,18 (m, 1H), 5,08 (s, 1H), 7,33 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,42 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,73 (d, J=9,0 Hz, 1H), 8,66 (s ancho, 1H).

Ejemplo 7

20 6'-n3-naoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-2,3,5,6-tetrahodroesporo[poraM-4,3'-porro6o[3,2-b]porodoM]2'n1'H)-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (64%) a partir de N-ciclopropil-7-yodo-6-metil-1,2-bencisoxazol-3-amina (WO2006094187) y acido 2'-oxo-1',2,2',3,5,6-hexahidroespiro[piran-4,3'-pirrolo[3,2-b]piridina]-6'-ilbor6nico

25 (preparaci6n 17) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia en fase inversa (silice C-18 de Waters©, agua/acetonitrilo/metanol as eluyentes [0,1% v/v de acido f6rmico tamponado] 0% a 60%).

LRMS (m/z): 391 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,54 (m, 2H), 0,73 (m, 2H), 1,78-1,88 ( m, 4H), 2,33 (s, 3H), 2,66 (m, 1H), 3,98 (m, 30 2H), 4,14 (m, 2H), 7,24-7,29 (m, 2H), 7,70 (d, 1H), 8,17 (s, 1H), 10,77 (s, NH).

Ejemplo 8

6'-n3-naoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-4-hodroxo-4-meto6esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-porro6o[3,2b]porodoM]-2'n1'H)-oMa

NH

Se obtuvo como un s6lido gris (31%) a partir de acido 4-hidroxi-4-metil-2'-oxo-1',2'-dihidroespiro[ciclohexano-1,3'pirrolo[3,2-b]piridina]-6'-ilbor6nico (preparaci6n 21) y N-ciclopropil-7-yodo-6-metil-1,2-bencisoxazol-3-amina (WO2006094187) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n

5 por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 94:6). LRMS (m/z): 417 (M-1)-. 1H-NMR δ (CD3OD): 0,63 (m, 2H), 0,78 (m, 2H), 1,29 (m, 2H), 1,36 (s, 3H), 1,63 (m, 2H), 1,81 (m, 2H), 2,29 (d, J=6,6 Hz, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,66 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 3,47 (m, 1H), 7,24 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,62 (d, J=7,9 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H).

Ejemplo 9

6'-n3-naoa6opropo6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-4-hodroxo-4-meto6esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-porro6o[3,2

b]porodoM]-2'n1'H)-oMa

NH N

O

N

HN O

OH

15 Se obtuvo como un s6lido blanco (47%) a partir de acido 4-hidroxi-4-metil-2'-oxo-1',2'-dihidroespiro[ciclohexano-1,3'pirrolo[3,2-b]piridina]-6'-ilbor6nico (preparaci6n 20) y N-ciclopropil-7-yodo-6-metil-1,2-bencisoxazol-3-amina (WO2006094187) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia en fase inversa (silice C-18 de Waters©, agua/acetonitrilo/metanol as eluyentes [0,1% v/v de acido f6rmico tamponado] 30% a 50%).

20 LRMS (m/z): 417 (M-1)-. 1H-NMR δ (CD3OD): 0,63 (s ancho, 2H), 0,79 (s ancho, 2H), 1,34 (s, 3H), 1,72 (d,J=11,8 Hz, 2H), 1,89 (d,J=12,4 Hz, 2H), 2,16 (t,J=11,8 Hz, 2H), 2,31 (t,J=11,5 Hz, 2H), 2,38 (s, 3H), 2,67 (m, 1H), 7,24 (d,J=7,2 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,63 (d,J=7,2 Hz, 2H), 8,14 (s, 1H).

25 Ejemplo 10

6-n3-n4-)etoxobeMao6amoMo)-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

H

Se obtuvo como un s6lido blanco (30%) a partir de 6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2',3',5',6'tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona (preparaci6n 7) y 7-yodo-N-(4-metoxibencil)-6-metilbenzo[d]isoxazol-3

30 amina (preparaci6n 23) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 97:3). LRMS (m/z): 470 (M+1)+.

1H-NMR δ (CDCl3): 1,70 (m, 4H), 2,05 ( s, 3H), 2,39 (s, 3H), 3,81 (s, 2H), 3,95-3,99 (m, 2H), 4,25-4,27 (m, 2H). 6,92 (m, 1H), 6,89 (s, 1H), 7,08-7,17 (m,1H), 7,32-7,47 (m, 5H).

Ejemplo 11

6-n3-AmoMo-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

A una soluci6n de 6-(3-(4-metoxibencilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'piran]-2-ona (ejemplo 10, 0,12 g, 0,26 mmol) en diclorometano (2 mL) se anadi6 acido trifluoroacetico (2 mL) y la soluci6n se agit6 a temperatura ambiente durante 5 horas. Se anadieron agua e hidr6geno-carbonato de sodio para

10 neutralizar el acido trifluoroacetico. Se anadi6 acetato de etilo y la fase organica se separ6, se sec6 (MgSO4), se filtr6 y se evapor6 a presi6n reducida. El residuo se purific6 por cromatografia ultrarrapida (diclorometano/metanol 96:4) para dar el compuesto del epigrafe (38 mg, 44%) como un s6lido blanco.

LRMS (m/z): 350 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,76-1,86 (m, 4H), 2,31 (s, 3H), 3,80-3,95 (m, 2H), 4,03-4,12 (m, 2H), 6,36 (s, 2H), 15 6,85 (s, 1H), 6,99 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,63 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,67 (d, J=6,0 Hz, 1H), 10,49 (s, 1H).

Ejemplo 12

6'-n3-AmoMo-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-4-hodroxo-4-meto6esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

Se obtuvo como un s6lido beige (62%) a partir de 4-hidroxi-4-metil-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2il)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2-ona (preparaci6n 13) y 7-yodo-6-metil-1,2-benzoisoxazol-3-amina (preparaci6n 24) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 94:6).

25 LRMS (m/z): 378 (M+1)+. 1H-NMR δ (CD3OD): 1,44 (s, 3H), 1,56 (d, J=13,2 Hz, 2H), 2,00 (m, 4H), 2,35 (m, 2H), 2,42 (s, 3H), 7,02 (s, 1H), 7,09 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,28 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,65 (m, 2H).

Ejemplo 13

30 6'-n3-AmoMo-6-meto6beMzo[d]osoxazo6-7-o6)-4-n2-morfo6oMoetoxo)esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

NH2

Se obtuvo como un s6lido blanco (16%, sin determinar la forma isomerica exacta) a partir de 7-yodo-6-metil-1,2benzoisoxazol-3-amina (preparaci6n 24) y 4-(2-morfolinoetoxi)-6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-25 il)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 15) siguiendo el procedimiento experimental que se describe

en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano/metanol 97:3). LRMS (m/z): 477 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,61 (m, 2H), 1,91 (m, 4H), 2,0 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,44-2,53 (m, 6H), 3,57 (m, 7H), 6,36 (s ancho, NH2), 6,83 (s, 1H), 6,96 (d, J=7,69 Hz, 1H), 7,21 (d, J=7,97 Hz, 1H), 7,48 (d, J=7,69 Hz, 1H),

10 7,67 (d, J=7,97 Hz, 1H), 10,36 (s ancho, NH)

Ejemplo 14

6'-n3-AmoMo-6-meto6-1,2-beMaosoxazo6-7-o6)-4,4-dof6uoroesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6]-2'n1'H)-oMa

F

15 a) 4,4-dof6uoro-6'-{3-[n4-metoxobeMao6)amoMo]-6-meto6-1,2-beMaosoxazo6-7-o6}esporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6]2'n1'H)-oMa

Se obtuvo como un s6lido amarillo claro (96%) a partir de 7-yodo-N-(4-metoxibencil)-6-metilbenzo[d]isoxazol-3amina (preparaci6n 23) y 4,4-difluoro-6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'ona (preparaci6n 11) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de

20 purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano a diclorometano/metanol 9:1). LRMS (m/z): 384 (M+1)+.

b) 6'-n3-AmoMo-6-meto6-1,2-beMaosoxazo6-7-o6)-4,4-dof6uoroesporo[aoa6ohexaMo-1,3'-oMdo6]-2'n1'H)-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (57%) a partir de 4,4-difluoro-6'-{3-[(4-metoxibencil)amino]-6-metil-1,2

25 bencisoxazol-7-il}espiro[ciclohexano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona (ejemplo 14a) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 11 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano a diclorometano/metanol 90:10).

LRMS (m/z): 504 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,89-2,00 (m, 4H), 2,08-2,20 (m, 2H), 2,31 (s, 3H), 2,39-2,50 (m, 2H), 6,36 (s, 1H), 30 6,85 (s, 1H), 6,99 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,50 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,67 (d, J=9,0 Hz, 1H), 10,57 (s, 1H).

Ejemplo 15

6-n3-AmoMo-6-meto6-1,2-beMaosoxazo6-7-o6)-3,3-dometo6-1,3-dohodro-2H-oMdo6-2-oMa

NH2

Se obtuvo como un s6lido (94%) a partir de 7-yodo-6-metilbenzo[d]isoxazol-3-amina (preparaci6n 24) y 3,3-dimetil-6(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)indolin-2-ona(preparaci6n 9) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano a

5 diclorometano/metanol 9:1). LRMS (m/z): 308 (M+1)+. 1H-NMR δ (CD3OD): 1,41 (s, 6H), 2,35 (s, 3H), 6,93 (s, 1H), 7,03 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,21 (d, J=9,0 Hz, 1H), 7,35 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,60 (d, J=8,0 Hz, 1H).

10 Ejemplo 16

6-n3-AmoMo-6-meto6-1H-oMdazo6-7-o6)-2',3',5',6'-tetrahodroesporo[oMdo6oMa-3,4'-poraM]-2-oMa

Se obtuvo como un s6lido blanco (29%) a partir de 6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-2',3',5',6'tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona(preparaci6n 7) y 7-yodo-6-metil-1H-indazol-3-amina (preparaci6n 25) 15 siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia

instantanea (diclorometano/metanol 95:5). LRMS (m/z): 349 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,75-1,85 (m, 4H), 2,20 (s, 3H), 3,80-3,90 (m, 2H), 4,03-4,12 (m, 2H), 5,26 (s, 2H), 6,79 (s, 1H), 6,84 (d, J=8,0 Hz, 1H), 6,93 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,61 (d, J=8,0 Hz, 1H),

20 10,48 (s, 1H), 10,90 (s, 1H).

Ejemplo 17

6'-[3-nCoa6opropo6amoMo)[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-8-o6]esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6]-2'n1'H)-oMa

25 Se obtuvo como un s6lido blanco (2%) a partir de N-ciclopropil-8-yodo-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (preparaci6n 26) y 6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 4) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (diclorometano a 85:15 diclorometano/metanol). LRMS (m/z): 360 (M+1)+.

Ejemplo 18

6'-n3-AmoMo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-8-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6]-2'n1'H)-oMa

NH2

Se obtuvo como un subproducto (12%) a partir de N-ciclopropil-8-yodo-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (preparaci6n 26) y 6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n 4) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por

5 cromatografia instantanea (diclorometano a diclorometano/metanol 85:15). LRMS (m/z): 320 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 1,75-2,05 (m, 8H), 6,44 (s, 2H), 6,85 (d, J=8,0, 1H), 7,34 (d, J=6,0 Hz, 1H), 7,62 (d,

J=8,0 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 8,04 (d, J=6,0 Hz, 1H).

10 Ejemplo 19

6'-3-nCoa6opropo6meto6)amoMo[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-8-o6}esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6]-2'n1'H)-oMa

Se obtuvo como un s6lido (20%) a partir de N-(ciclopropilmetil)-8-yodo[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (preparaci6n 27) y 6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona (preparaci6n

15 4) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1. LRMS (m/z): 374 (M+1)+. 1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,28-0,33 (m, 2H), 0,47-0,53 (m, 2H), 1,17-1,26 (m, 1H), 1,78-2-02 (m, 8H), 3,28 (m, 2H), 6,80 (t, J=5,5 Hz, 1H), 6,86 (m, 1H), 7,33 (d, J=6,9 Hz, 1H), 7,36 (d, J=7,7 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=1,4/7,7 Hz, 1H), 7,75 (d, J=1,4 Hz, 1H), 8,14 (d, J=6,9 Hz, 1H), 10,47 (s, 1H).

Ejemplo 20

6'-n3-nCoa6opropo6meto6amoMo)-7-meto6-[1,2,4]troazo6o[4,3-a]porodoM-8-o6)esporo[aoa6opeMtaMo-1,3'-oMdo6oM]-2'-oMa

H

25 Se obtuvo como un s6lido blanco (49%) a partir de 6'-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)espiro[ciclopentano1,3'-indolin]-2'-ona(preparaci6n 4) y N-(ciclopropilmetil)-8-yodo-7-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-3-amina (preparaci6n 28) siguiendo el procedimiento experimental que se describe en el ejemplo 1 seguido de purificaci6n por cromatografia instantanea (98:2 diclorometano/metanol). LRMS (m/z): 388 (M+1)+.

1H-NMR δ (DMSO-d6): 0,27-0,31 (m, 2H), 0,45-0,52 (m, 2H), 1,11-1,21 (m, 1H), 1,80-2-05 (m, 8H), 2,16 (s, 3H), 3,27 (m, 2H), 6,64 (t, J=6,6 Hz, 1H), 6,71 (d, J=7,0 Hz, 1H), 6,89 (s, 1H), 7,00 (d, J=7,6 Hz, 1H), 7,33 (d, J=7,6 Hz, 1H), 8,02 (d, J=7,0 Hz, 1H), 10,37 (s, 1H).

Claims (12)

1. REIVINDICACIONES

   1. Un compuesto de f6rmula (I)

   O R4

   (I)

   5 en la que R1 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un grupo cicloalquilo C3-6, un grupo cicloalquil C3-6-alquileno C1-2 y un grupo aril C5-10-alquileno C1-2, en donde el grupo cicloalquilo y el grupo arilo estan opcionalmente sustituidos con 1 o 2 sustituyentes seleccionados de grupos alquilo C1-4 o alcoxi C1-4 lineales o ramificados.

   10 • R2 se selecciona del grupo que consiste en atomos de hidr6geno y grupos metilo.

   •

   R3 se selecciona del grupo que consiste en atomos de hidr6geno y atomos de hal6geno.

   •

   cada uno de R4 y R5, independientemente, representa un grupo alquilo C1-3, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo ciclico de f6rmula

   15 en donde cada uno de n y m independientemente representa un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de -O-y -C(R7R8)-en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en atomo de hidr6geno, atomo de hal6geno, grupo hidroxilo, morfolina y grupo morfolino-etoxi, R8 se selecciona del grupo que consiste en atomo de hidr6geno, atomo de hal6geno y grupo alquilo C1-4,

   20 • G1 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un grupo -CH=

   •

   G2 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un atomo de carbono aromatico, y

   •

   G3 se selecciona de un atomo de nitr6geno o un atomo de oxigeno

   y sus sales y N-6xidos farmaceuticamente aceptables.
2. 2. Un compuesto segun la reivindicaci6n 1, en donde R1 representa un atomo de hidr6geno, un grupo ciclopropilo, un grupo ciclopropilmetilo, o un grupo bencilo en donde el grupo bencilo esta opcionalmente sustituido con un grupo metoxi.

   30 3. Un compuesto segun la reivindicaci6n 2, en donde R1 representa un atomo de hidr6geno o un grupo ciclopropilo.

3. 4. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde R2 representa un grupo metilo.

   35 5. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde R3 representa un atomo de hidr6geno.

4. 6. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde cada uno de R4 y R5

   independientemente representa un grupo metilo, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan 40 unidos un grupo ciclico de f6rmula

   en donde cada uno de n y m independientemente representa un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de -O-y -C(R7R8)-, en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor, un grupo hidroxilo y grupos morfolino-etoxi, R8 se selecciona de un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor o un

   5 grupo metilo,
5. 7. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde G2 representa un atomo de carbono aromatico.

   10 8. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en donde G3 representa un atomo de oxigeno.
6. 9. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, donde R1 representa un atomo de hidr6geno

   o un grupo ciclopropilo, R2 representa un grupo metilo, R3 representa un atomo de hidr6geno, cada uno de R4 y

   15 R5 independientemente representa un grupo metilo, o R4 y R5 forman junto con el atomo de carbono al que estan unidos un grupo ciclico de f6rmula

   en donde cada uno de n y m independientemente representa un numero entero de 1 a 2 y G5 se selecciona de

   20 -O- y -C(R7R8)-, en donde R7 se selecciona del grupo que consiste en un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor, un grupo hidroxilo y grupos morfolino-etoxi, R8 se selecciona de un atomo de hidr6geno, un atomo de fluor o un grupo metilo, G2 representa un atomo de carbono aromatico y G3 representa un atomo de oxigeno.
7. 10. Un compuesto segun la reivindicaci6n 1, que es uno de:

   25 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-benzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 5'-Cloro-6'-(3-(ciclopropilamino)benzo[d]isoxazol-7-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro-[indolina-3,4'-piran]-2-ona

   30 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-3,3-dimetilindolin-2-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2,3,5,6-tetrahidroespiro[piran-4,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]

   35 2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-pirrolo[3,2-b]piridin]2'(1'H)-ona 6-(3-(4-Metoxibencilamino)-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetra-hidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona 6-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona

   40 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-hidroxi-4-metilespiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6'-(3-Amino-6-metilbenzo[d]isoxazol-7-il)-4-(2-morfolinoetoxi)espiro[ciclohexano-1,3'-indolin]-2'-ona 6'-(3-Amino-6-metil-1,2-bencisoxazol-7-il)-4,4-difluoroespiro[ciclohexano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6-(3-Amino-6-metil-1,2-bencisoxazol-7-il)-3,3-dimetil-1,3-dihidro-2H-indol-2-ona 6-(3-Amino-6-metil-1H-indazol-7-il)-2',3',5',6'-tetrahidroespiro[indolina-3,4'-piran]-2-ona

   45 6'-[3-(Ciclopropilamino)[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il]espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6'-(3-Amino[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6'-3-(Ciclopropilmetil)amino[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il}espiro[ciclopentano-1,3'-indol]-2'(1'H)-ona 6'-(3-(Ciclopropilmetilamino)-7-metil-[1,2,4]triazolo[4,3-a]piridin-8-il)espiro[ciclopentano-1,3'-indolin]-2'-ona

   50 11. Un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para uso en el tratamiento de un estado patol6gico o enfermedad susceptible de mejorar por inhibici6n de la proteina quinasa activada por mit6genos p38.
8. 12. Un compuesto segun la reivindicaci6n 11, donde el estado patol6gico o enfermedad es artritis reumatoide, 55 lesi6n por isquemia-reperfusi6n, isquemia cerebral focal, sindrome coronario agudo, EPOC, enfermedad de Crohn, sindrome del intestino irritable, sindrome de dificultad respiratoria en el adulto, osteoporosis, enfermedad de Alzheimer, espondilitis reumatoide, psoriasis, aterosclerosis, osteoartritis o mieloma multiple.
9. 13. Una composici6n farmaceutica que comprende un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 10 en mezcla con un diluyente o vehiculo farmaceuticamente aceptable.
10. 14. Uso de un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en la fabricaci6n de un medicamento para el tratamiento de un estado patol6gico o enfermedad segun una cualquiera de las reivindicaciones 11 o
11. 12.
12. 15. Un producto de combinaci6n que comprende:

    (i)

    un compuesto segun una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10; y

    (ii)

    otro compuesto seleccionado de (1) antagonistas de receptores muscarinicos M3, (2) agonistas 2, (3) inhibidores de PDE4, (4) corticosteroides, (5) antagonistas de leucotrieno D4, (6) inhibidores de egfr

    15 quinasa, (7) antagonistas del receptor de adenosina A2B, (8) agonistas del receptor NK1, (9) antagonistas de CRTh2, (10) inhibidores de syk quinasa, (11) antagonistas de CCR3, (12) antagonistas de VLA-4, (13) metotrexato, (14) inhibidores de JAK3, (15) inhibidores de DHODH y (16) un DMARD (farmaco antirreumatico modificador de la enfermedad).

    O B G2

    HNR1 O

    R3

    N G3

    R2

    G1 y1 HN

    HN R1 R5

    (IIA) O R4

    N (IIIA) R2

    HO

    OH

    HNR1 B R3 G2

    O R4N

    G1 R2

    G3 HN (I)

    y1 R5 O R4 (IIA)

    (IIIB)

    FI��RA1

    R1HN

    R1HN y2

    N R3 G3 G2 R2

    N R3G3R2

    G1 HN

    B HO OH R5 O R4

    (IIB)

    R5 O R4

    (IIIC)

    (I)

    FI��RA2

    HN R1 HN R1

    G2 G2

    N N

    G3 R2

    R2

    G3 B y1 HO OH

    (IIB)

    (IIA)

    FI��RA3

    O CN CN

    OH OH

    R2

    F R2

    R2 F R2F

    F y1

    y1(IV) y1

    (V) (VII)

    (VI)

    R1

    HN

    R1

    HN CHO N N

    G3R2 R2

    FG3

    R2 B HO OH

    y1 (IIAI) y1 (VIII) (IIBI)

    NOH NOH NOH

    NH2

    R1

    R1

    N

    Cl H

    R2

    F R2

    F R2 F

    y1 y1y1

    (XI) (X) (IX)

    FI��RA4

    N N

    N

    NH2

    R2

    F R2

    N

    R2

    F

    yyH (XIV)

    (XII) (XIII)

    R1

    H2N

    HN R1

    N

    HH

    N

    N

    N

    N

    R2

    R1

    N

    H

    R2 N

    yO

    y1

    (XV)

    (IIAII)

    FI��RA5

    R3 G1 R3G1 R4 y2

    R3 R5

    NH2 G1y2 N y2 N

    HNH

    H O R4

    (XVI) O R5

    (XVII)

    (IIIC)

    y2 Cl O

    OG1 B

    HN R3

    R4 O R5

    G1HN R4 (IIICI) O R5

    (IIIA)

    FI��RA6

    y2

    y2

    G5 R3

    R3

    n y5 y5 G1

    m

    G1 HN

    HN n O OG5

    m

    (XVIII) (IIICI)

    y2

    y2

    G5

    R3

    R3

    n y5 y5 G1

    m

    G1

    P1

    N

    P1

    N n O G5

    Om

    (XIX)

    FI��RA7

    y2 R3

    G1 HN OH

    O R8

    (IIICIV)

    y2 y2 R3 y2

    R3 R3

    G1

    G1 HN HN

    G1 HN

    O O F

    (XVIII) O O (IIICII) F

    (IIICIII)

    y2 y2 R3

    R3

    G1

    G1HN

    HN

    O

    Cl

    N O OO

    O (IIICV)

    (IIICVI)

    FI��RA8

    y2 y2

    R3

    y2

    R3 R3 G1

    G1

    O2N

    O2NG1 OOO2N O

    (XXI)y

    OO

    OH

    R9

    R9 (XX)

    (XXII)

    (XVIII)

    FI��RA9