ES2271458T3

ES2271458T3 - Efectores de dipeptidil peptidasa iv.

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Publication number: ES2271458T3
Application number: ES03026947T
Authority: ES
Inventors: Hans-Ulrich Demuth; Konrad Glund; Dagmar Schlenzig; Susanne Kruber
Original assignee: Prosidion Ltd
Current assignee: Prosidion Ltd
Priority date: 1998-05-28
Filing date: 1999-05-28
Publication date: 2007-04-16
Anticipated expiration: 2019-05-28
Also published as: HUP0102001A2; US6548481B1; NZ508260A; PL344403A1; ATE272059T1; RU2003121766A; HK1033316A1; IS7764A; BR9910758A; DE59904100D1; WO1999061431A1; DE19823831A1; ES2193709T3; EP1398030B1; EP1215207A3; IS2089B; EP1214936A3; NZ525799A; CA2333603C; EP1304327B1

Abstract

Composición, que comprende un efector de la actividad enzimática de la dipeptidil peptidasa IV o análoga a la de la dipeptidil peptidasa IV, y otro agente antidiabético, en la que el efector es glutaminil pirrolidina, glutaminil tiazolidina, o sus sales.

Description

Efectores de dipeptidil peptidasa IV.

El presente invento se refiere a compuestos dipéptidos o bien a compuestos análogos a compuestos dipéptidos, que se forman a partir de un aminoácido y de un grupo de tiazolidina o pirrolidina, y a sus sales, que en lo sucesivo se denominan compuestos dipéptidos, y a la utilización de los compuestos para el tratamiento de una tolerancia perjudicada a la glucosa, de glucosuria, de hiperlipidemia, de acidosis metabólicas, de diabetes mellitus, de neuropatía y de nefropatía diabéticas, así como de enfermedades secuelas de mamíferos, causadas por una diabetes mellitus.

El invento se refiere, por lo tanto, también a un procedimiento sencillo para disminuir la concentración de azúcar en sangre de mamíferos con ayuda de compuestos dipéptidos como efectores aminoradores de la actividad (substratos, pseudosubstratos, inhibidores, proteínas de fijación, anticuerpos, y otros) para enzimas con una actividad comparable con la actividad enzimática de la enzima dipeptidil peptidasa IV, o idéntica a ella.

Una actividad de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV (p.ej. la DP II citosólica tiene una especificidad para substratos que es casi idéntica a la de la DP IV) se presenta en la circulación sanguínea, donde disocia de una manera muy específica dipéptidos desde el extremo terminal de N de péptidos biológicamente activos, cuando la prolina o la alanina constituyen los radicales contiguos del aminoácido terminal de N en su secuencia.

Los polipéptidos insulinotropos dependientes de glucosa: polipéptidos inhibidores gástricos 1-42 (GIP_{1-42} de Gastric Inhibitory Polypeptide) y las amidas de péptidos similares a glucagón-1 (GLP-1_{7-36} de Glucagon Like Peptide Amide-1), es decir hormonas, que estimulan la secreción de insulina, inducida por glucosa, por el páncreas (también denominadas incretinas), son substratos de la DP IV, puesto que ésta puede separar in vitro e in vivo los dipéptidos tirosinil-alanina o bien histidil-alanina desde las secuencias terminales de N de estos péptidos.

La reducción de tal actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV para el desdoblamiento in vivo de tales substratos, puede servir para reprimir eficazmente una actividad enzimática indeseada en condiciones de laboratorio, así como también en el caso de estados patológicos de organismos de mamíferos. P.ej. la diabetes mellitus del tipo II (también denominada diabetes senil) se basa en una secreción disminuida de insulina o bien en trastornos en la función de receptores, que están fundamentados, entre otras cosas, en anomalías de la concentración de las incretinas, debidas a causas proteolíticas.

La hiperglucemia y las causas o bien los fenómenos secuelas vinculados con ellas, (que también se conocen como diabetes mellitus) se tratan, de acuerdo con el estado actual de la técnica, mediante la administración de una insulina (p.ej. procedente de un material aislado desde páncreas de bovinos o también de un material obtenido por tecnología genética) a organismos enfermos en diferentes formas de presentación. Todos los procedimientos hasta ahora conocidos, así como también los procedimientos más modernos, se distinguen por un elevado consumo de material, altos costos y, con frecuencia, por decisivos perjuicios para la calidad de vida de los pacientes. El método clásico (inyección diaria i.v. (por vía intravenosa) de insulina, que es usual desde los años treinta del siglo pasado) trata los síntomas agudos de la enfermedad pero, después de una prolongada utilización, conduce entre otras cosas a graves alteraciones vasculares (arterioesclerosis) y a daños nerviosos.

Últimamente, se ha propuesto la instalación de implantes subcutáneos de depósito (la entrega de insulina se efectúa de una manera dosificada, y se suprimen las inyecciones diarias) así como la implantación (el trasplante) de células de Langerhans intactas en la glándula pancreática perturbada en su función, o en otros órganos y tejidos. Tales trasplantes son técnicamente costosos. Además, ellos constituyen una intervención quirúrgica, vinculada con riesgos, en el organismo receptor, y exigen, también en el caso de trasplantes de células, métodos para la supresión o la evitación del sistema inmunitario.

La utilización de la alanil-pirrolidida y de la isoleucil-tiazolidida como inhibidores de la actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV ya se conoce a partir del documento de solicitud de patente internacional PCT/DE 97/00820, y la utilización de la isoleucil-pirrolidida y del hidrocloruro de la isoleucil-tiazolidida ya se conocen a partir del documento de patente de la República Democrática Alemana DD 296.075. En el caso de la isoleucil-tiazolidida, empleada en este estado de la técnica, se trata de un compuesto natural, a saber la L-treo-isoleucil-tiazolidida: En la fecha de prioridad y todavía en el día de solicitud de ambos documentos estaba a disposición solamente ésta, es decir la forma natural de la isoleucil-tiazolidida.

Se ha comprobado que estos compuestos, en particular la L-treo-isoleucil-tiazolidida, son buenos efectores para actividades enzimáticas de la DP IV y análogas a la de la DP IV. En el caso de la utilización de este compuesto pueden aparecer, sin embargo, ciertos problemas en el caso de algunos pacientes o bien de algunas formas de enfermedad.

Dependiendo de los síntomas y de la gravedad, p.ej., de una diabetes mellitus, sería p.ej. deseable tener a disposición efectores que presentasen un efecto distinto del de los compuestos conocidos: Así, es conocido que los pacientes de diabetes mellitus se tienen que "ajustar" individualmente, para hacer posible un tratamiento óptimo de su enfermedad. Así, en algunos casos, debería ser suficiente p.ej. una actividad disminuida de efectores de la DP IV. También, una actividad inhibidora demasiado alta y la administración permanente del mismo medicamento podría tener como consecuencia efectos colaterales indeseados, en particular a causa de la duración del tratamiento por toda la vida del paciente. Además, podría ser deseable también mejorar in vivo determinadas propiedades de transporte, con el fin de aumentar la velocidad de resorción de los efectores.

Por lo tanto, es misión del invento poner a disposición nuevos efectores (que en particular disminuyan la actividad) para el tratamiento, p.ej., de una tolerancia perjudicada a la glucosa, de glucosuria, de hiperlipidemia, de acidosis metabólicas, de diabetes mellitus, de neuropatía y de nefropatía diabéticas, así como de enfermedades secuelas de mamíferos, causadas por la diabetes mellitus, y un procedimiento sencillo para el tratamiento de estas enfermedades.

El problema planteado por esta misión se resuelve conforme al invento mediante la puesta a disposición de compuestos dipéptidos o bien de compuestos análogos a dipéptidos, que se forman a partir de un aminoácido y de un grupo de tiazolidina o pirrolidina, como se define en la reivindicación 1, y sus sales.

En el caso de la administración - preferiblemente por vía oral - de estos efectores a un organismo de mamífero, los péptidos insulinotropos endógenos (o adicionalmente administrados por una vía exógena) GIP_{1-42} y GLP-1_{7-36} (o también GLP-1_{7-37} o sus compuestos análogos) son descompuestos de manera disminuida por la DP-IV o enzimas similares a la DP-IV, y por consiguiente se disminuye o retrasa la disminución de concentración de estas hormonas peptídicas o bien de sus compuestos análogos. El invento se basa, por lo tanto, en el hallazgo de que una reducción de la actividad enzimática de la DP IV o similar a la de la DP IV, que actúa en la circulación sanguínea, conduce a una influencia sobre el nivel de azúcar en sangre. Se encontró, que

1.: la disminución de la actividad de la DP-IV o bien análoga a la de la DP IV conduce a un aumento relativo de la estabilidad de las incretinas (o de sus compuestos análogos) estimuladas por glucosa, o aportadas por vía externa, es decir que, por aplicación de efectores de la DP IV o bien de proteínas análogas a la DP IV, se puede controlar la descomposición de las incretinas en la sangre;

2.: la estabilidad biológica aumentada frente a la descomposición de las incretinas (o de sus compuestos análogos) tiene como consecuencia una modificación del efecto de una insulina endógena;

3.: el aumento de la estabilidad de las incretinas, que se ha conseguido por reducción de la actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV en la sangre, da como resultado una subsiguiente alteración del efecto de la insulina, inducido por glucosa, y por consiguiente conduce a una modulación del nivel de glucosa en sangre, que es controlable mediante efectores de la DP IV.

Son apropiados para esto compuestos dipéptidos conformes al invento, en los cuales el aminoácido representa el aminoácido natural glutamina.

La aplicación, en lo posible por vía oral, de los inhibidores de enzimas de bajo peso molecular, muy afines, conformes al invento, es una alternativa más barata p.ej. con respecto a técnicas quirúrgicas invasivas en el tratamiento de fenómenos patológicos. Mediante un diseño químico de las propiedades de estabilidad, transporte y aclaramiento (clearancia), su modo de acción se puede modificar y adaptar a propiedades individuales.

Tal como se ha mencionado precedentemente, p.ej. en el caso del tratamiento permanente de la diabetes mellitus puede ser necesario poner a disposición efectores con una actividad definida, con los cuales se puedan satisfacer necesidades individuales de los pacientes o bien se puedan tratar sus síntomas. Los compuestos dipéptidos conformes al invento tienen por lo tanto, en el caso de una concentración (de los compuestos dipéptidos) de 10 \muM, en particular en las condiciones que se indican en la Tabla 1, una disminución de la actividad de la dipeptidil peptidasa IV o bien de actividades de enzimas análogas a la DP IV, de por lo menos 10%, preferiblemente de por lo menos 40%. Con frecuencia se necesita también una disminución de la actividad de por lo menos 60% o bien de por lo menos 70%. Los efectores preferidos pueden tener también una disminución de la actividad de como máximo 20% o bien 30%. Además, las propiedades de transporte de los presentes compuestos son mejoradas manifiestamente, en particular, por el transportador de péptidos Pep T1.

Las sales de los compuestos dipéptidos conformes al invento pueden ser p.ej. sales orgánicas, tales como acetatos, succinatos, tartratos o fumaratos, o radicales de ácidos inorgánicos, tales como fosfatos o sulfatos. Se prefieren especialmente los fumaratos, que tienen un efecto sobresaliente junto con una estabilidad sorprendentemente alta frente a la hidrólisis, y son esencialmente menos solubles que los hidrocloruros. Estas propiedades son ventajosas también en la galénica.

Las sales de los compuestos dipéptidos pueden presentarse en una relación molar del componente (compuesto análogo a) dipéptido al componente sal de 1 : 1 ó de 2 : 1.

El invento se refiere por consiguiente a efectores de la actividad enzimática de la dipeptidil peptidasa IV (DP IV) o bien análoga a la de la DP IV y a su utilización para la disminución del nivel de azúcar en sangre, por debajo de la concentración de glucosa, que es característica de hiperglucemias, en el suero de un organismo de mamífero. En particular, el invento se refiere a la utilización de los efectores conformes al invento de la actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV con el fin de evitar o aliviar anomalías patológicas del metabolismo de organismos de mamíferos, tales como p.ej. de una tolerancia perjudicada a la glucosa, de glucosuria, hiperlipidemia, de acidosis metabólicas, de diabetes mellitus, de neuropatía y de nefropatía diabéticas, así como de enfermedades secuelas de mamíferos, causadas por la diabetes mellitus. En una forma de realización preferida adicional, el invento se refiere a un procedimiento para la disminución del nivel de azúcar en sangre por debajo de la concentración de glucosa que es característica para hiperglucemias, en el suero de un organismo de mamífero, el cual está caracterizado porque a un organismo de mamífero se le administra una cantidad eficaz terapéuticamente de por lo menos un efector conforme al invento de la actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV.

En otra forma preferida adicional de realización, el invento se refiere a composiciones farmacéuticas de acuerdo con la reivindicación 2, es decir a medicamentos, que contienen por lo menos un compuesto conforme al invento o sus sales, en combinación con uno o varios vehículos y/o disolventes farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar p.ej. en forma de formulaciones parenterales o enterales y pueden contener vehículos correspondientes, o bien se pueden presentar como formulaciones orales, que pueden contener vehículos correspondientes, apropiados para la administración por vía oral. Preferiblemente, se presentan como formulaciones orales.

Adicionalmente, las composiciones farmacéuticas pueden contener una o varias sustancias activas con acción hipoglucémica, que pueden ser sustancias activas de por sí conocidas.

Los efectores conformes al invento de la actividad enzimática de la DP IV o bien análoga a la de la DP IV se pueden utilizar para la disminución del nivel de azúcar en sangre por debajo de la concentración de glucosa que es característica para hiperglucemias, en el suero de un organismo de mamífero, o bien para la preparación de un correspondiente medicamento.

Los efectores, aplicados conforme al invento, de las enzimas DP IV o bien análogas a la DP IV pueden pasar a emplearse en formulaciones, o complejos de formulaciones utilizables farmacéuticamente, como inhibidores, substratos, pseudosubstratos, inhibidores de la expresión de DP IV, proteínas de fijación o anticuerpos de estas proteínas enzimáticas o en combinaciones de estas diferentes sustancias, que reducen la concentración de la proteína DP IV o bien análoga a la DP IV en el organismo de un mamífero. Son efectores conformes al invento glutaminil pirrolidina y glutaminil tiazolidina (Tabla 1) y sus sales de ácido fumárico. Los efectores conformes al invento hacen posible un tratamiento ajustable individualmente de pacientes o bien de enfermedades, pudiéndose evitar en particular incompatibilidades, alergias y efectos colaterales que aparezcan individualmente.

También los compuestos presentan diferentes evoluciones en el tiempo de la actividad. Con esto se pone a disposición del médico, que efectúa el tratamiento, la posibilidad de reaccionar de una manera diferenciada a la situación individual de un paciente: Éste puede ajustar con exactitud, por una parte, la velocidad de la iniciación del efecto y, por otra parte, la duración del efecto y en particular la intensidad del efecto.

El procedimiento conforme al invento constituye un nuevo modo de aproximarse a la disminución de una concentración elevada de glucosa en sangre en el suero de mamíferos. Es sencillo, comercialmente útil y apropiado para la utilización en la terapia, en particular de enfermedades, que se basan en unos valores de glucosa en sangre superiores a los promedios, en el caso de mamíferos y en particular en la medicina humana.

Los efectores se administran p.ej. en forma de formulaciones farmacéuticas, que contienen la sustancia activa en combinación con materiales de vehículo usuales, conocidos por el estado de la técnica. Por ejemplo, se aplican por vía parenteral (p.ej. i.v. (intravenosa) en una solución fisiológica de cloruro de sodio) o enteral (p.ej. por vía oral, formulados con materiales de vehículo usuales, tales como p.ej. glucosa).

Dependiendo de su estabilidad endógena y de su biodisponibilidad, se deben efectuar por cada día tomas únicas o también múltiples de los efectores, a fin de conseguir la deseada normalización de los valores de glucosa en sangre. P.ej. un intervalo de dosis de este tipo puede estar situado, en el caso de seres humanos, en el intervalo de 0,01 mg a 30,0 mg por día, preferiblemente en el intervalo de 0,01 a 10 mg de sustancia efectora por kilogramo de peso corporal.

Se encontró que, por administración de efectores de las actividades enzimáticas de dipeptidil peptidasa IV o bien análogas a las de DP IV en la sangre de un mamífero, mediante cuya reducción provisional de la actividad, vinculada con ella, en una secuencia causal los péptidos insulinótropos endógenos (o adicionalmente administrados por vía exógena), polipéptidos inhíbidores gástricos 1-42 (GIP_{1-42}) o amidas de péptidos similares a glucagón-1 7-36 (GLP-1_{7-36}) (o también GLP-1_{7-37} o sus compuestos análogos) son descompuestos de una manera disminuida por la DP IV y enzimas similares a la DP IV, y con esto se disminuyen o retrasan las reducciones de concentraciones de estas hormonas peptídicas o bien de sus compuestos análogos. La estabilidad aumentada, conseguida por la acción de efectores de la DP IV, de las incretinas (presentes por vía endógena o aportadas por vía exógena) o de sus compuestos análogos, que por consiguiente están a disposición de manera aumentada para la estimulación insulinotropa de los receptores de incretinas de las células de Langerhans en el páncreas, modifica, entre otras cosas, la actividad de la insulina propia del cuerpo, lo cual trae consigo una estimulación del metabolismo de hidratos de carbono del organismo tratado.

Como resultado, el nivel de azúcar en sangre disminuye por debajo de la concentración de glucosa, que es característica para hiperglucemias, en el suero del organismo tratado. Con esto se pueden evitar o aliviar anomalías del metabolismo, tales como tolerancia perjudicada a la glucosa, glucosuria, hiperlipidemia así como posibles acidosis metabólicas graves y diabetes mellitus, cuadros morbosos que son la secuela de una concentración de glucosa en sangre aumentada durante un período de tiempo prolongado.

En la serie de los agentes antidiabéticos, eficaces por vía oral, conocidos a partir del estado de la técnica, no se conoce hasta ahora ninguna clase de sustancias de bajo peso molecular, que sean eficaces de este modo (con excepción de la biguanida metformina: peso molecular 130). Los pesos moleculares de las aminoacil tiazolididas fluctúan entre 146 (de la glicil tiazolidida), 203 (de la isoleucil tiazolidida) y 275 (de la triptofanoíl tiazolidida). En comparación con esto, los pesos moleculares de las sulfonilureas (de la glibenclamida: 494), de los sacáridos (de la acarbosa: 630) así como de las tiazolidinadionas (de la pioglitazona: 586), fluctúan en el intervalo situado en torno a 500 hasta 700 Da. Fisiológicamente, las aminoacil tiazolididas son hidrolizadas mediante aminopeptidasas, así como mediante hidrólisis en condiciones ácidas, en sustancias propias del cuerpo, tales como aminoácidos y cisteamina, por lo que la utilización de los compuestos conformes al invento como agentes antidiabéticos disponibles por vía oral constituye un enriquecimiento de la farmacia.

En el caso de ratas y ratones, una hiperglucemia inducida experimentalmente se puede tratar bien de una manera superior al promedio mediante una administración por vía oral con los compuestos utilizados conformes al invento (Tablas 2 y 3). La administración de una dosis de 500 a 1.000 veces mayor que la dosis eficaz no conduciría a ninguna alteración patológica detectable en experimentos toxicológicos realizados durante tres semanas en ratas y ratones.

El ventajoso efecto de compuestos conformes al invento sobre la DP IV se demuestra a modo de ejemplo en la Tabla 1.

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(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 1 Acción de diferentes efectores sobre la hidrólisis catalizada por la dipeptidil peptidasa IV de 0,4 mM del substrato H-Gly-Pro-pNA a 30ºC, a un pH de 7,6 y con una fuerza iónica de 0,125

1

Es conocido que las aminoacil pirrolididas y aminoacil tiazolididas pueden ser descompuestas por las enzimas prolina aminopeptidasa y prolidasa, que están presentes en las células mucosales del intestino delgado, en el suero y en las células hepáticas, y que el anillo de tiazolidina tiene tendencia a la apertura en presencia de ácidos (por ejemplo en el estómago) mediando formación del adecuado derivado de cisteamina [compárese el documento de patente de los EE.UU US 458.407]. Por lo tanto, resultó sorprendente encontrar una actividad dependiente de la dosis de las sustancias activas después de una administración por vía oral. La dependencia de la dosis con respecto del efecto de la L-alo-Ile-tiazolidida sobre la actividad de la DP IV en el suero, después de una aplicación por vía oral de L-alo-isoleucil-tiazolidida en ratas Wistar sanas, se demuestra con la siguiente Tabla:

TABLA 2 Actividad restante de la DP IV en el suero frente a 0,4 mM del substrato H-Gly-Pro-pNA a 30ºC, a un pH de 7,6 y con una fuerza iónica de 0,125, después de una administración por vía oral y en función de la dosis de L-alo-isoleucil-tiazolidida, determinada a los 30 min después de la aplicación del inhibidor

Dosis por animal sometido a ensayo	Actividad restante de la DP IV en %
0 mg	100
2,5 mg	52
5,0 mg	40
10 mg	28
20 mg	29

Es manifiestamente sorprendente y deseable el efecto reductor de la cantidad de glucosa, conseguido en un modelo de animal diabético, de la sustancia activa conforme al invento L-alo-isoleucil-tiazolidida después de su administración por vía oral, en el caso de una simultánea estimulación oral con glucosa (Tabla 3).

Con el fin de reforzar el efecto de disminución del azúcar en sangre de diferentes agentes antidiabéticos, se emplean con frecuencia combinaciones de diferentes agentes antidiabéticos eficaces por vía oral. Puesto que el efecto anti-hiperglucémico de los efectores conformes al invento se desarrolla de una manera independiente de la de otros conocidos agentes antidiabéticos aplicables por vía oral, las sustancias activas conformes al invento son apropiadas análogamente en una correspondiente forma galénica, para conseguir el deseado efecto normoglucémico, para el empleo en el caso de terapias combinadas.

Por consiguiente, los compuestos utilizados conforme al invento se pueden transformar de una manera en sí conocida en las usuales formulaciones, tales como p.ej. tabletas, cápsulas, grageas, píldoras, supositorios, granulados, aerosoles, jarabes emulsiones y suspensiones y soluciones líquidas, sólidas y a modo de cremas, mediando utilización de sustancias de vehículo y aditivas o disolventes, inertes, no tóxicas y farmacéuticamente apropiadas. En este caso, los compuestos eficaces terapéuticamente están situados, en cada caso de modo preferido, en una concentración de aproximadamente 0,1 a 80, de modo más preferido de 1 a 50 por ciento en masa de la mezcla total, es decir en unas cantidades que sean suficientes a fin de conseguir el indicado margen de maniobra de dosificación.

TABLA 3 Reducción de la glucosa circulante en sangre en el transcurso de 60 min después de una administración por vía oral de 20 \muM de L-alo-Ile-tiazolidida en ratas de diferentes modelos de animales con un simultáneo ensayo de tolerancia a la glucosa (datos en % referidos a valores normoglucémicos)

Modelo de animal	Concentración de glucosa	Concentración de glucosa en % de
	en % del testigo	tratados con L-alo-Ile-tiazolidida
Rata Wistar, normal	100	82
Rata Wistar (modelo de diabetes 2b, gruesa)	100	73

La buena resorción de los compuestos utilizados conforme al invento a través de las mucosas del tracto gastrointestinal, hace posible la utilización de muchas formulaciones galénicas:

: Las sustancias se pueden utilizar como un medicamento en forma de grageas, cápsulas, cápsulas masticables, tabletas, gotas, jarabes, pero también como supositorios o como proyecciones nasales.

Las formulaciones se preparan por ejemplo por extensión o dilución de la sustancia activa con disolventes y/o sustancias de vehículo, eventualmente mediando utilización de emulsionantes y/o agentes dispersantes, pudiéndose utilizar como disolventes auxiliares, p.ej. en el caso del empleo de agua como agente diluyente, eventualmente disolventes orgánicos.

Como sustancias coadyuvantes se han de señalar a modo de ejemplo: agua, disolventes orgánicos no tóxicos, tales como parafinas (p.ej. fracciones del petróleo), aceites vegetales (p.ej. aceite de colza, aceite de cacahuete, aceite de sésamo), alcoholes (p.ej. alcohol etílico, glicerol), glicoles (p.ej. propilenglicol, polietilenglicol); sustancias de vehículo sólidas, tales como p.ej. polvos finos de piedra natural (p.ej. ácido silícico muy disperso, silicatos), azúcares (p.ej. azúcar en bruto, lactosa y glucosa); agentes emulsionantes, tales como emulsionantes no ionógenos y aniónicos (p.ej. polioxietilen - ésteres de ácidos grasos, polioxietilen - éteres de alcoholes grasos, alquilsulfonatos y arilsulfonatos), agentes dispersantes (p.ej. lignina, lejías residuales del procedimiento al sulfito, metilcelulosa, almidones y poli(vinil-pirrolidonas) y agentes de deslizamiento (p. ej. estearato de magnesio, talco, ácido esteárico y laurilsulfato de sodio) y eventualmente sustancias aromatizantes.

La aplicación se efectúa de un modo usual, preferiblemente por vía enteral o parenteral, en particular por vía oral. En el caso de la aplicación por vía enteral, las tabletas, aparte de las sustancias de vehículo mencionadas, pueden contener otros aditivos tales como citrato de sodio, carbonato de calcio y fosfato de calcio, juntamente con diferentes sustancias aditivas suplementarias, tales como un almidón, preferiblemente almidón de patata, gelatina y productos similares. Además, se pueden utilizar conjuntamente agentes de deslizamiento o lubricantes, tales como estearato de magnesio, laurilsulfato de sodio y talco, para la compresión de tabletas. En el caso de suspensiones acuosas y/o elixires, que están concebidos para administraciones por vía oral, las sustancias activas se pueden mezclar, aparte de con las sustancias coadyuvantes antes mencionadas, de modo adicional con diferentes agentes mejoradores del sabor o colorantes.

En el caso de una administración por vía parenteral, se pueden emplear soluciones de las sustancias activas mediando utilización de apropiados materiales de vehículo líquidos. Por lo general, se ha manifestado como ventajoso, en el caso de una aplicación por vía intravenosa, administrar unas cantidades de aproximadamente 0,01 a 2,0 mg/kg, de modo preferido de aproximadamente 0,01 a 1,0 mg/kg de peso corporal por día, a fin de conseguir unos resultados eficaces, y en el caso de una administración por vía enteral, la dosificación es de aproximadamente 0,01 a 2 mg/kg, de modo preferido de aproximadamente 0,01 a 1 mg/kg de peso corporal por día.

A pesar de todo, puede ser eventualmente necesario apartarse de las cantidades mencionadas, y concretamente en función del peso corporal del animal sometido a ensayo o del paciente o bien del tipo de la vía de aplicación, pero también basándose en el tipo de animal y en su comportamiento individual frente al medicamento o bien en el intervalo durante el que se efectúa la administración. Así, en algunos casos, puede ser suficiente contentarse con menos que la cantidad mínima antes mencionada, mientras que en otros casos se tiene sobrepasar el límite superior mencionado. En el caso de la aplicación de grandes cantidades, puede ser recomendable distribuir éstas en varias tomas individuales a lo largo del día. Para la aplicación en la medicina humana, está previsto el mismo margen de maniobra de dosificación. Convenientemente, son válidas en este caso también las manifestaciones anteriores.

Ejemplos de formulaciones farmacéuticas 1. Cápsulas con 100 mg de L-alo-isoleucil tiazolidida por cápsula

Para aproximadamente 10.000 cápsulas se prepara una solución con la siguiente composición:

Hidrocloruro de L-alo-isoleucil tiazolidida	1,0 kg
Glicerol	0,5 kg
Polietilen-glicol	3,0 kg
Agua	0,5 kg
	\overline{5.0 \ kg}

La solución se envasa de una manera de por sí conocida dentro de cápsulas de gelatina blanda. Las cápsulas son apropiadas para masticar y para tragar.

2. Tabletas o bien tabletas barnizadas o grageas con 100 mg de L-alo-isoleucil tiazolidida

Las siguientes cantidades se refieren a la producción de 100.000 tabletas:

Hidrocloruro de L-alo-isoleucil tiazolidida, finamente molido	10,0 kg
Glucosa	4,35 kg
Lactosa	4,35 kg
Almidón	4,50 kg
Celulosa, finamente molida	4,50 kg

Los ingredientes anteriores se mezclan y a continuación se proveen de una solución, preparada a partir de

Poli(vinil-pirrolidona)	2,0 kg
Polisorbato	0,1 kg
y agua	aproximadamente 5,0 kg

y se granulan de una manera en sí conocida, siendo la masa húmeda raspada y, después de la adición de 0,2 kg de estearato de magnesio, secada. La mezcla terminada para tabletas, de 30,0 kg, se transforma en tabletas abombadas con un peso de 300 mg. Las tabletas se pueden barnizar o gragear de una manera de por sí conocida.

Los datos técnicos de compuestos preferidos se indican seguidamente:

Investigaciones acerca de Ile-Thia*Fumarato (isómeros) y otras sales

2

Condiciones de medición para la determinación de las K_{I} de las sustancias

Enzima: DP IV_{riñón \ de \ porcino}, 0,75 mg/ml, 18 U/ml (GPpNA)

\quad: en Tris 25 mM de pH 7,6, sulfato de amonio 30%

\quad: EDTA 0,5 mM, DTE 0,5 mM

\quad: Solución original: diluida a 1:250 en un tampón de medición

Tampón: 40 mM de HEPES de pH 7,6, I = 0,125 (en KCl)

Substrato: GppNA*HCl

\quad: Solución original: 2,1 mM

Aparato de medición: Lector de bioanálisis Perkin-Elmer, HTS 7000 Plus

\quad: T = 30ºC

\quad: \lambda = 405 nm

Tanda de medición: 100 \mul de un tampón

\quad: 100 \mul de un substrato (3 diferentes concentraciones 0,8 mM - 0,2 mM)

\quad: 50 \mul de una mezcla de agua y un inhibidor (7 diferentes concentraciones 2,1 \muM - 32,8 nM)

\quad: 10 \mul de una enzima

El tampón, la mezcla de agua y un inhibidor y la enzima se atemperaron previamente a 30ºC y se comenzó la reacción por medio de la adición de un substrato, asimismo atemperado previamente.

Se llevaron a cabo determinaciones cuádruples.

El tiempo de medición fue de 10 min.

Determinación del punto de fusión

Los puntos de fusión se determinaron en un microscopio de mesa con calefacción de Kofler de la sociedad Leica Aktiengesellschaft, los valores no están corregidos, o se determinan en un aparato para DSC (calorimetría con barrido diferencial) (de Heumann-Pharma).

Rotación óptica

Los valores de rotación se registraron a diferentes longitudes de onda en un "Polarimeter 341" o más alto, de la entidad Perkin Elmer.

Condiciones de medición para la espectrometría de masas

Los espectros de masas (MS) se registraron en un aparato "API 165" o bien "API 365" de la entidad PE Sciex mediante ionización por proyección de electrones (ESI).

Se trabaja con una concentración aproximada de c = 10 \mug/ml, la sustancia se recoge en una mezcla de MeOH y H_{2}O 50:50, con 0,1% de HCO_{2}H, la infusión se efectúa con una bomba de jeringa (20 \mul/min). Las mediciones se efectuaron en una modalidad positiva [M+H]^{+}, la tensión de la ESI es U = 5.600 V.

Las sales tienen los siguientes datos:

Sal de IT*	K_{I}	M (g\cdotmol^{-1})	P.f. (ºC)
Succinato	5,1 e-8	522,73	116
Tartrato	8,3 e-8	352,41	122
Fumarato	8,3 e-8	520,71	156
Hidrocloruro	7,2 e-8	238,77	169
Fosfato	1,3 e-7	300,32	105

Investigación de las solubilidades de las sales de Ile-Thia

Ile-Thia*Fum

: Cantidad pesada introducida 10,55 mg

: corresponde a 0,02 mmol (520,72 g/mol)

: Adición de 100 \mul de H_{2}O_{destilada},

: 100 \mul ninguna disolución, ópticamente: ninguna mojadura superficial

: a partir de 200 \mul, comienzo sucesivo de la solubilidad

: con 400 \mul se puede observar una disolución total

: 2,63%.

: En el caso de esta sal se comprobó también que es apenas humectable y no se descompone.

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Ile-Thia*Succ

: Cantidad pesada introducida 16,6 mg

: corresponde a 0,031 mmol (522,73 g/mol)

: Adición de 16 \mul de H_{2}O_{destilada}

: 16 \mul ninguna disolución, ópticamente "aspiración" de la humedad

: desde 66 \mul - 1,5 \mul no se puede observar una disolución total de la sustancia

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Ile-Thia*Tartrato

: Cantidad pesada introducida 17,3 mg

: corresponde a 0,049 mmol (352,41 g/mol)

: Adición de 100 \mul de H_{2}O_{destilada}

: con 100 \mul disolución total

: 17,3%.

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Ile-Thia*Phos

: Cantidad pesada introducida 15,5 mg

: corresponde a 0,051 mmol (300,32 g/mol)

: Adición de 100 \mul de H_{2}O_{destilada}

: con 100 \mul se puede observar una disolución incipiente

: Adición sucesiva de 100 \mul de H_{2}O

: con 400 \mul disolución total

: 3,87%

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Ile-Thia*HCl

: Cantidad pesada introducida 16,1 mg

: corresponde a 0,067 mmol (238,77 g/mol)

: Adición de 100 \mul de H_{2}O_{destilada}

: con 100 \mul disolución total

: 16,1%

Síntesis general de una Ile-Thia*Sal

El aminoácido protegido con Boc, Boc-Ile-OH, se dispone previamente en éster etílico de ácido acético, la tanda se enfría a aproximadamente -5ºC. Se añade gota a gota N-metil-morfolina, se añade gota a gota a temperatura constante cloruro de ácido piválico (de calidad de laboratorio) o cloruro de neo-hexanoílo (de calidad técnica). La mezcla de reacción se agita durante unos pocos minutos para la activación. Se añaden gota a gota consecutivamente N-metil-morfolina (de calidad de laboratorio) e hidrocloruro de tiazolidina (de calidad de laboratorio), y se añade tiazolidina (de calidad técnica). El tratamiento a escala de laboratorio se efectúa de una manera clásica con soluciones de sales, a escala técnica la tanda se purifica con soluciones de NaOH y de CH_{3}COOH.

La separación del grupo protector Boc se consigue mediante una mezcla de HCl y dioxano (de calidad de laboratorio) o bien mediante H_{2}SO_{4} (de calidad técnica).

A escala de laboratorio el hidrocloruro se cristaliza a partir de una mezcla de EtOH y un éter.

A escala técnica la amina libre se prepara por adición de una mezcla de NaOH y NH_{3}.

El ácido fumárico se disuelve en etanol caliente, la amina libre se añade gota a gota, y precipita el fumarato de (Ile-Thia)_{2} (PM = 520,71 g.mol^{-1}).

El examen analítico de isómeros o bien enantiómeros se efectúa mediante electroforesis.

Claims

1. Composición, que comprende un efector de la actividad enzimática de la dipeptidil peptidasa IV o análoga a la de la dipeptidil peptidasa IV, y otro agente antidiabético, en la que el efector es glutaminil pirrolidina, glutaminil tiazolidina, o sus sales.

2. Composición farmacéutica, que comprende un efector de la actividad enzimática de la dipeptidil peptidasa IV o análoga a la de la dipeptidil peptidasa IV, y otro agente antidiabético, y uno o varios vehículos y/o disolventes farmacéuticamente aceptables, en la que el efector es glutaminil pirrolidina, glutaminil tiazolidina, o sus sales.

3. Utilización de glutaminil pirrolidina, glutaminil tiazolidina, o de sus sales, para la preparación de un medicamento destinado al uso en unión con otro agente antidiabético para el tratamiento de enfermedades del metabolismo en mamíferos

4. Utilización de una composición o de una composición farmacéutica según una de las precedentes reivindicaciones para la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de enfermedades del metabolismo en mamíferos.

5. La utilización según una de las reivindicaciones 3 o 4, caracterizada porque la enfermedad del metabolismo se selecciona entre el conjunto que consiste en una tolerancia perjudicada a la glucosa, glucosuria, hiperlipidemia, acidosis metabólicas, diabetes mellitus, nefropatía y neuropatía diabéticas, así como entre el conjunto de enfermedades secuelas de mamíferos, causadas por la diabetes mellitus.

6. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 5 para la elevación de la estabilidad de por lo menos un GIP_{1-42}, GLP-1_{7-36} o GLP-1_{7-37} o uno de sus compuestos análogos, ya sea presentes por vía endógena o administrados por vía exógena.

7. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 6 para la elevación del nivel de incretinas y para la estimulación de los receptores de incretinas de las células de Langerhans.

8. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 7 para la elevación de la efectividad de las células de Langerhans.

9. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 8 para la estimulación del metabolismo de hidratos de carbono en mamíferos.

10. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 9 para la disminución del nivel de glucosa en sangre en el suero de un mamífero, por debajo de la concentración de glucosa, que es característica de hiperglucemias.

11. La utilización según una de las reivindicaciones 3 a 10, en la que el medicamento está destinado al tratamiento por vía oral de mamíferos.