ES2269113T3 - Sintesis mejorada de -2.2.1 / biciclo-nucleosidos. - Google Patents
Sintesis mejorada de -2.2.1 / biciclo-nucleosidos. Download PDFInfo
- Publication number
- ES2269113T3 ES2269113T3 ES00912410T ES00912410T ES2269113T3 ES 2269113 T3 ES2269113 T3 ES 2269113T3 ES 00912410 T ES00912410 T ES 00912410T ES 00912410 T ES00912410 T ES 00912410T ES 2269113 T3 ES2269113 T3 ES 2269113T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- compound
- optionally substituted
- chloride
- alkyl
- benzyl
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Lifetime
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/16—Purine radicals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
Abstract
Procedimiento para la síntesis de un nuevo intermediario con la fórmula general II: en la que R1 se selecciona de entre arilo (alquilo C1-6) opcionalmente sustituido, tetrahidropiran-2-ilo opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente sustituido; cada uno de los sustituyentes R2 y R3 se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo C1-6 opcionalmente sustituido, arilo opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo C1-6) opcionalmente sustituido, o R2 y R3 representen conjuntamente alquileno C3-7; a condición de que R2 y R3 no sean ambos hidrógeno y cada uno de los sustituyentes R4 y R5 es independientemente R''SO2O-, en la que R'' se selecciona de entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente sustituido; comprendiendo dicho procedimiento la etapa siguiente: tratamiento de un compuesto (en lo sucesivo denominado "material de partida") con la fórmula general I: en la que R1, R2 y R3 son tal como se ha indicado anteriormente; con la fórmula R''SO2X, en la que R'' se selecciona de entre bencilo, o-, m-, y p-metilbencilo, 2-clorobencilo, 4-fenilbencilo, tetrahidropiran-2-ilo, benzoilo y fenilo.
Description
Síntesis mejorada de
[2.2.1]biciclo-nucleósidos.
La presente invención se refiere a una nueva
estrategia para la síntesis de los
[2.2.1]biciclo-nucleósidos que es más corta,
proporciona rendimientos totales más altos, y de esta manera resulta
más rentable que los procedimientos anteriormente conocidos para la
síntesis de los
[2.2.1]biciclo-nucleósidos.
La síntesis del monómero LNA (Ácido Nucléico
Cerrado)
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
uracilo fue descrita por primera vez por Obika (Satashi Obika et
al., Tetrahedron Lett.; 1997;
8735-8738), quien utilizó una estrategia lineal
basada en la uridina como material de partida para la síntesis del
intermediario
1-(3-O-bencil-4-C-tosiloximetil-\beta-D-ribofuranosil)uridina.
El tratamiento del intermediario nucleósido tosilado con el
hexametildisilácido de sodio en THF proporcionó el biciclonucleósido
2'-O,4'-C-metileno, que tras la desbencilación final
proporcionó el
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
uracilo con un rendimiento del 36% a partir del intermediario
nucleósido tosilado.
Wengel et al. (Singh, S.K.; Nielsen, P.,
Koshkin, A.A. y Wengel, J., Chem. Commun., 1998, 455;
Koshkin, A.A.; Singh, S.K.; Nielsen, P.; Rajwanshi, V.K.; Kumar, R.;
Melgaard, M.; Olsen, C.E. y Wengel, J., Tetrahedron,
1998, 54, 3607) describieron posteriormente una
estrategia convergente para la síntesis del análogo timina
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano.
Partiendo de
3-O-bencil-4-C-hidroximetil-1,2-O-isopropiliden-\alpha-D-ribofuranosa,
se obtuvo el intermediario clave para el acoplamiento con el
sililato de timina (u otras nucleobases sililadas),
4-C-obtuvo el intermediario clave para el acoplamiento con el
sililato de timina (u otras nucleobases silisadas),
4-C-acetoximetil-1,2-di-O-acetil-3,5-di-O-bencil-D-ribofuranosa
mediante, sucesivamente, bencilación-5-O
regioselectiva, acetilación, acetolisis, y otra acetilación. El
acoplamiento del intermediario clave con el sililato de timina
proporcionó el nucleósido 4'-C-acetoximetilo, que tras la
desacetilación y la monotosilación, seguidas del cierre del anillo
inducido por base, proporcionó el biciclonucleósido
2'-O,4'-C-metileno. La desbencilación final
proporcionó
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
con un rendimiento del 40% (calculado a partir del intermediario
clave). Se aplicaron procedimientos sintéticos análogos para la
síntesis del uracilo, de la 2-N-isobutirilguanina, de la
4-N-benzoilcitosina y de análogos nucleósidos LNA de la
6-N-benzoilcitosina. Los nucleósidos de pirimidina
2'-amino-LNA correspondientes se
obtuvieron llevando a cabo el cierre del anillo en benciloamina. La
desbencilación y a continuación la sililación utilizando
1,3-dicloro-1,1,3,3-tetraisopropildisiloxano
proporcionaron un intermediario bicíclico que fue convertido
fácilmente en el análogo 2'-tio-LNA
tras la reacción con el tioacetato de potasio en DMF y la
desililación final (Singh, S.K.; Kumar, R. y Wengel, J., J. Org.
Chem., 1998, 63, 6078).
Se ha descrito una síntesis convergente análoga
de la
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
tiamina utilizando
4-C-tosiloximetil-1,2-di-O-acetil-3,5-di-O-bencil-D
ribofuranosa como intermediario clave para el acoplamiento con
sililatos de nucleobase por el mismo grupo (Koshkin, A.A.,
Rajwanshi, V.K., y Wengel J., Tetrahedron Lett., 1998,
39, 4381).
Obika, S. et al. (patente nº WO 98/39352)
también se ha sugerido la utilización de un intermediario
4-C-tosiloxi-
metil ribofuranosa. En esta estrategia, el grupo protector 5-O-bencilo se intercambia por un grupo protector terc-butildimetilsililo, extendiendo de esa manera la síntesis total de los nucleósidos (1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano con una etapa.
metil ribofuranosa. En esta estrategia, el grupo protector 5-O-bencilo se intercambia por un grupo protector terc-butildimetilsililo, extendiendo de esa manera la síntesis total de los nucleósidos (1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano con una etapa.
Nielsen y Wengel (Chemm. Commnn.,
1998, 2645-2646) también han propuesto la
utilización de un intermediario
5-O-bencilo protegido
4-C-hidroximetil furanosa.
Las propiedades características de las
estrategias previamente conocidas anteriormente comentadas son los
rendimientos totales relativamente bajos y las numerosas etapas
sintéticas. De esta manera, hay una gran necesidad de desarrollar
una estrategia de síntesis más eficaz que dé lugar a una mejora del
rendimiento total y a una reducción de los costes de producción de
los [2.2.1]biciclo-nucleósidos.
La presente invención proporciona una estrategia
nueva para la síntesis de
[2.2.1]biciclo-nucleósidos, que comprende la
síntesis de un intermediario clave nuevo. La nueva estrategia se
demuestra mediante la síntesis del
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
y se ha extendido fácilmente a la síntesis de
[2.2.1]biciclo-nucleósidos que contienen
otras nucleobases y puede extenderse adicionalmente a otros
heteroátomos presentes en el biciclo además del oxígeno, tales como
amino y tio.
La presente invención se refiere a un
procedimiento para la síntesis de un nuevo intermediario con la
fórmula general II:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, tetrahidropiran-2-ilo
opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y
arilo opcionalmente
sustituido;
cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo
C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, a condición de
que R_{2} y R_{3} no sean ambos hidrógeno, o R_{2} y R_{3}
representen conjuntamente alquileno C_{3-7}; y
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente
sustituido;
comprendiendo dicho procedimiento la etapa
siguiente:
tratamiento de un compuesto (en lo sucesivo
denominado "material de partida") con la fórmula general I:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, tetrahidropiran-2-ilo
opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y
arilo opcionalmente
sustituido;
cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo
C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido,
a condición de que R_{2} y R_{3} no sean
ambos hidrógeno, o R_{2} y R_{3} representen conjuntamente
alquileno C_{3-7};
con la fórmula R'SO_{2}X, en la que R' se
selecciona de entre alquilo C_{1-6} opcionalmente
sustituido y arilo opcionalmente sustituido, y X representa
halógeno.
La presente invención asimismo se refiere al
compuesto con la fórmula general II tal como se ha indicado
anteriormente.
La presente invención además se refiere al
compuesto (en lo sucesivo denominado "intermediario clave") con
la fórmula general III:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, tetrahidropiran-2-ilo
opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y
arilo opcionalmente
sustituido;
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente
sustituido
R_{6} se selecciona de entre hidrógeno,
carbonilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido, arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido y
tri(alquil/aril)sililo;
R_{7} se selecciona de entre carboniloxi
(alquilo C_{1-6}) opcionalmente sustituido, alcoxi
C_{1-6} opcionalmente sustituido, halógeno,
ariltio opcionalmente sustituido, alquiltio
C_{1-6} opcionalmente sustituido, y ariloxi
opcionalmente sustituido.
Entre las principales ventajas de la presente
invención se encuentran las siguientes:
- \sqbullet
- obtención del intermediario clave con la fórmula general III listo para el acoplamiento con nucleobases sililato en muy pocas etapas a partir de la 3-O-bencil-4-C-hidroximetil-1,2-O-isopropiliden-\alpha-D-ribofuranosa.
- \sqbullet
- cierre del anillo inducido por base y desulfonación del [2.2.1]biciclo nucleósido en una etapa.
- \sqbullet
- la posibilidad de utilizar el intermediario de anillo cerrado 5'-sulfonato (compuesto 5a del Ejemplo 4) para la síntesis del 5'-amino- y del tio-LNA.
En un intento por mejorar la síntesis de los
[2.2.1]biciclo-nucleósidos, se sometió a
síntesis un intermediario clave nuevo para el acoplamiento con
diversas nucleobases. Utilizando esta nueva estrategia para la
síntesis que comprende el intermediario clave nuevo con la fórmula
general III, se sometió a síntesis el
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
en solamente cinco etapas partiendo de la
3-O-bencil-4-C-hidroximetil-1,2-O-isopropiliden-\alpha-D-ribofuranosa,
lo que hace que la nueva estrategia presente por lo menos dos etapas
sintéticas menos que cualquier estrategia previamente conocida. La
reducción del número de etapas sintéticas, así como el hecho de que
no se requiera la separación cromatográfica de isómeros y que se
requieran menos etapas de desprotección hace que la nueva síntesis
resulte más práctica y mucho más rentable que las estrategias
previamente conocidas. Esta nueva estrategia para la síntesis que
comprende el intermediario clave nuevo con la fórmula general III
también proporcionó de manera sorprendente un acceso fácil a los
[2.2.1]biciclo-nucleósidos que comprenden
otras nucleobases y a los intermediarios que son favorables a la
oligomerización.
La presente invención se refiere a un
procedimiento para la síntesis de un intermediario nuevo con la
fórmula general II:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido,
tetrahidropiran-2-iloopcionalmente
sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y arilo
opcionalmente sustituido. Algunas realizaciones preferentes
comprenden bencilo, o-, m-, y p-metilbencilo,
2-clorobencilo, 4-fenilbencilo,
tetrahidropiran-2-il, benzoilo,
fenilo, entre los que son preferentes bencilo y
4-fenilbencilo;
y
cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo
C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, a condición de
que R_{2} y R_{3} no sean ambos hidrógeno, tal como metilo,
trifluorometilo, etilo, propilo, iso-propilo,
butilo, t-butil, pentilo, ciclopentilo, hexilo, ciclohexilo,
fenilo, bencilo, feniletilo, o-, m-, y
p-metilbencilo, 2-clorobencilo, o R_{2} y
R_{3} representen conjuntamente alquileno
C_{3-7}, tal como 1,3-propileno,
1,4-butileno, 1,5-pentileno; y
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo C_{1-6} opcionalmente sustituido,
arilo opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, tal como
metilo, trifluorometilo, etilo,
2,2,2-trifluoroetilo, propilo, iso-propilo,
butilo, nonafluorobutilo, pentilo, ciclopentilo, hexilo,
ciclohexilo, bencilo, o-, m- o p-metilbencilo,
2-clorobencilo, fenilo, o-, m- o
p-bromofenilo, y p-nitrofenilo.
En una realización preferente de la invención,
los sustituyentes R_{2} y R_{3} representan independientemente
hidrógeno, metilo, fenilo, bencilo, feniletilo, preferentemente
metilo.
En una realización de la invención todavía más
preferente, los sustituyentes R_{2} y R_{3} ambos representan
metilo.
En otra realización de la invención, cada uno de
los sustituyentes R_{4} y R_{5} representan metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi,
2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi, propanosulfoniloxi,
iso-propanosulfoniloxi, butanosulfoniloxi,
nonafluorobutanosulfoniloxi, pentanosulfoniloxi,
ciclopentanosulfoniloxi, hexanosulfoniloxi, ciclohexanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
2-cloro-\alpha-toluenosulfoniloxi,
o-, m-, p-toluenosulfoniloxi,
benzenosulfoniloxi, o-, m-,
p-bromobenzenosulfoniloxi, y o-, m-,
p-nitrobenzenosulfoniloxi, preferentemente metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, p-toluenosulfoniloxi y
p-bromobenzenosulfoniloxi, más preferentemente
metanosulfoniloxi, y p-toluenosulfoniloxi, todavía mas
preferentemente metanosulfoniloxi.
En una realización preferente de la invención,
R_{4} y R_{5} representan metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi,
2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi, butanosulfoniloxi,
nonafluorobutanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi, benzenosulfoniloxi,
p-bromobenzenosulfoniloxi, y
p-nitrobenzenosulfoniloxi, preferentemente metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, p-toluenosulfoniloxi y
p-bromobenzenosulfoniloxi, más preferentemente
metanosulfoniloxi, y p-toluenosulfoniloxi, todavía mas
preferentemente metanosulfoniloxi.
En una realización de la invención especialmente
preferente, R_{4} y R_{5} son idénticos y se seleccionan de
entre metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi,
etanosulfoniloxi, 2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi,
butanosulfoniloxi, nonafluorobutanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi, benzenosulfoniloxi,
p-bromobenzenosul-
foniloxi, y p-nitrobenzeno-sulfoniloxi, preferentemente metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi, p-toluenosul-
foniloxi y p-bromobenzenosulfoniloxi, más preferentemente metanosulfoniloxi, y p-toluenosulfoniloxi, todavía más preferentemente metanosulfoniloxi.
foniloxi, y p-nitrobenzeno-sulfoniloxi, preferentemente metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi, p-toluenosul-
foniloxi y p-bromobenzenosulfoniloxi, más preferentemente metanosulfoniloxi, y p-toluenosulfoniloxi, todavía más preferentemente metanosulfoniloxi.
Comprendiendo dicho procedimiento las etapas
siguientes:
tratamiento de un compuesto con la fórmula
general I
en la que R_{1}, R_{2} y
R_{3} se representan como se ha indicado
anteriormente;
con R'SO_{2}X (en lo sucesivo "haluro o
haluros de sulfonilo"), en la que R' se selecciona de entre
alquilo C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, tal como
metilo, trifluorometilo, etilo,
2,2,2-trifluoroetilo, propilo,
iso-propilo, butilo, nonafluorobutilo,
pentilo, ciclopentilo, hexilo, ciclohexilo, bencilo, o-,
m- o p-metilbencilo, 2-clorobencilo,
fenilo, o-, m- o p-bromofenilo, y
p-nitrofenilo, y X representa halógeno, tal como fluoro,
cloro, bromuro, y yodo.
En una realización preferente de la invención,
R_{1} representa bencilo.
En otra realización preferente de la invención,
R_{2} y R_{3} se seleccionan de entre metilo, etilo, propilo,
iso-propilo, bencilo, feniletilo, fenilo, o R_{2} y R_{3}
representan conjuntamente 1,3-propileno,
1,4-butileno, 1,5-pentileno.
En una realización preferente de la invención,
R_{2} y R_{3} ambos representan metilo.
En una realización especialmente preferente de
la invención, R_{1} representa bencilo y R_{2} y R_{3} ambos
representan metilo.
En una realización preferente de la invención,
R'SO_{2}X representa haluros de sulfonilo, tales como cloruro de
metanosulfonilo, cloruro de trifluorometanosulfonilo, cloruro de
etanosulfonilo, 2,2,2-cloruro de
trifluoroetanosulfonilo, cloruro de propanosulfonilo, cloruro de
iso-propanosulfonilo, cloruro de butanosulfonilo, cloruro de
nonafluorobutanosulfonilo, cloruro de ciclopentanosulfonilo, cloruro
de hexanosulfonilo, cloruro de ciclohexanosulfonilo, cloruro de
\alpha-toluenosulfonilo, cloruro de
p-toluenosulfonilo, cloruro de
p-bromobenzenosulfonilo, cloruro de
p-nitrobenzenosulfonilo, preferentemente cloruro de
metanosulfonilo, cloruro de trifluorometanosulfonilo, cloruro de
etanosulfonilo, cloruro de
2,2,2-trifluoroetanosulfonilo, cloruro de
nonafluorobutanosulfonilo, cloruro de
\alpha-toluenosulfonilo, cloruro de
p-toluenosulfonilo, todavía más preferentemente cloruro de
metanosulfonilo.
La proporción entre el compuesto I y el haluro
de sulfonilo típicamente se encuentra en el intervalo de 1:2 a 1:10,
tal como 1:2 a 1:5, preferentemente 1:2 a 1:4, más preferentemente
1:2,5 a 1:3,5.
En una realización de la invención, el compuesto
I puede tratarse con dos haluros de sulfonilo diferentes,
R^{III}SO_{2}X y R^{IV}SO_{2}X, en los que R^{III} y
R^{IV} se seleccionan independientemente de entre grupo de
sustituyentes definidos para R', a condición de que R^{III} y
R^{IV} no representan el mismo grupo, y X se represente tal como
se ha indicado anteriormente.
Debe entenderse que el tratamiento del compuesto
I con R^{III}SO_{2}X y con R^{IV}SO_{2}X se lleva a cabo en
dos etapas separadas. Primero, el compuesto I se trata con
R^{III}SO_{2}X en la proporción 1:1 a 1:1,5, preferentemente
1:1-1:1,3, más preferentemente 1:1,1 a 1:1,2,
proporcionando el compuesto II, en el que R_{4} o R_{5} es
R^{III}SO_{2}O- y R_{5} o R_{4} es hidróxilo. A
continuación, el compuesto II formado se trata con R^{IV}SO_{2}X
en la proporción 1:1 a 1:2,5, preferentemente
1:1-1:2, más preferentemente 1:1,1 a 1:1,5,
proporcionando el compuesto II, en el que R_{4} es
R^{III}SO_{2}O- o R^{IV}SO_{2}O- y R_{5} es
R^{IV}SO_{2}O- si R_{4} es R^{III}SO_{2}O- y R_{5} es
R^{III}SO_{2}O- si R_{4} es R^{IV}SO_{2}O-.
Debe entenderse que en la reacción del compuesto
I con el haluro de sulfonilo, la presencia de una base anhidra, tal
como piridina, 4-dimetilaminopiridina, imidazol,
trietilamina, o hidruro de sodio, aumenta el rendimiento total de la
reacción.
En una realización preferente de la invención,
el tratamiento se lleva a cabo en presencia de piridina, imidazol, o
4-dimetilaminopiridina, preferentemente
piridina.
Para una persona experta en la materia debe
estar claro que en la reacción pueden utilizarse otros reactivos de
sulfonación además de los haluros de sulfonilo, tal como los ácidos
sulfónico y los anhídridos.
Para una persona experta en la materia, también
debe estar claro que el tratamiento del compuesto I con el haluro de
sulfonilo típicamente se lleva a cabo en presencia de un solvente,
tal como piridina, tetrahidrofurano, tolueno, xileno, benceno,
éter, etilacetato, acetonitrilo, trietilamina,
N,N-dimetilformamida, dimetilsulfoxido, diclorometano, y
1,2-dicloroetano.
Para una persona experta en la materia, también
debe estar claro que la base y el solvente se pueden constituir por
la misma sustancia, tal como la piridina.
El tratamiento del compuesto I con el haluro de
sulfonilo típicamente se lleva a cabo a una temperatura de -70ºC a
40ºC, tal como de -30ºC a 40ºC.
En una realización preferente de la invención,
el compuesto I se trata con el haluro de sulfonilo a una temperatura
de -5ºC a 30ºC, preferentemente de 0ºC a 25ºC.
La presente invención así mismo se refiere al
compuesto con la fórmula general II, tal como se ha indicado
anteriormente.
La presente invención además se refiere al
compuesto con la fórmula general III:
en la que R_{l}, R_{4}, y
R_{5} son tal como se ha indicado anteriormente;
y
R_{6} se selecciona de entre hidrógeno,
carbonilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido, arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido y
tri(alquil/aril)sililo, tal como acetilo, benzoilo,
m-trifluorometilbenzoilo, benzoilo,
terc-butildimetilsililo y terc-butildifenilsililo;
y
R_{7} se selecciona de entre carboniloxi
(alquilo C_{1-6}) opcionalmente sustituido, alcoxi
C_{1-6} opcionalmente sustituido, halógeno,
ariltio opcionalmente sustituido, alquiltio
C_{1-6} opcionalmente sustituido, y ariloxi
opcionalmente sustituido, tal como acetiloxi, metoxi, etoxi,
cloruro, fluoruro, bromuro o yoduro, o -SC_{6}H_{5}.
En una realización preferente de la invención
R_{1} representa bencilo o 4-fenilbencilo, más
preferentemente 4-fenilbencilo, y R_{4} y R_{5}
ambos se seleccionan de entre metanosulfonilo,
trifluorometanosulfonilo, etanosulfonilo,
2,2,2-trifluoroetanosulfonilo, butanosulfonilo,
nonafluorobutanosulfonilo,
\alpha-toluenosulfonilo,
p-toluenosulfonilo, benzenosulfonilo,
p-bromobenzenosulfonilo, y p-nitrobenzenosulfonilo,
preferentemente de entre metanosulfonilo, trifluorometanosulfonilo,
p-toluenosulfonilo y p-bromobenzenosulfonilo, más
preferentemente de entre metanosulfonilo, y
p-toluenosulfonilo, y todavía más preferentemente
metanosulfonilo.
En una realización preferente de la invención
R_{6} se selecciona de entre acetilo, benzoilo y
m-trifluorometilbenzoilo, preferentemente del
acetilo, y R_{7} se selecciona de entre acetiloxi, metoxi, etoxi,
cloruro, fluoruro, bromuro, yoduro y del -SC_{6}H_{5},
preferentemente acetiloxi y metoxi, todavía más preferentemente
acetiloxi.
En la realización más preferente de la invención
R_{1} representa bencilo o 4-fenilbencilo, R_{4}
y R_{5} ambos representan metanosulfonilo, R_{6} representa
acetilo, y R_{7} representa acetiloxi.
El intermediario clave con la fórmula general
III se puede acoplar con nucleobases protegidas apropiadas dando
como resultado la formación de nucleósidos que experimentan el
cierre del anillo inducido por una base, proporcionando
biciclonucleósidos 2'-O,4'-C-metileno. Debe
entenderse que los nucleósidos formados pueden experimentar, además,
el cierre del anillo en presencia de diversas aminas,
preferentemente benciloamina, y tioacetato de potasio,
proporcionando análogos de 2'-N,4'-C-metileno y de
2'-S,4'-C-metileno, respectivamente.
Los compuestos con la fórmula general III se
pueden obtener a partir compuesto II mediante una de las estrategias
siguientes:
- tratamiento del compuesto II con el ácido acético al 80% o el ácido trifluoroacético seguido del tratamiento del intermediario formado con el anhídrido acético (un anhídrido ácido de cadena más larga correspondiente) en piridina, proporcionando el compuesto III, en el que R_{6} es acetilo y R_{7} es acetiloxi;
- tratamiento del compuesto II con HCl en metanol (o un alcohol de cadena más larga), proporcionando el compuesto III, en el que R_{6} es hidrógeno y R_{7} es metoxi (o un alcoxi de cadena más larga). El compuesto III formado se puede transformar adicionalmente para obtener compuestos con la fórmula III, en la que R_{6} es tal como se ha indicado anteriormente;
- tratamiento del compuesto II con HCl en metanol proporciona el compuesto III, en el que R_{6} es hidrógeno y R_{7} es metoxi. La transformación de R_{6} en uno de los grupos descritos anteriormente seguido del tratamiento del producto formado con HCl_{(g)} en diclorometano proporciona el compuesto III, en el que R_{7} es cloro y R_{6} es tal como se ha indicado anteriormente;
- conversión del compuesto II en el compuesto III, en el que R_{7} es C_{6}H_{5}S-, se lleva a cabo según lo descrito en la técnica.
A título ejemplo ilustrativo de la síntesis de
los [2.2.1]biciclo-nucleósidos utilizando el
procedimiento de la presente invención se sometió a síntesis
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
(7) utilizando
3-O-bencil-4-C-hidroximetil-1,2-O-isopropiliden-\alpha-D-ribofuranosa
(1) como material de partida (Figuras 1 y 3). Se añadió cloruro de
metanosulfonilo (2,7 equivalentes) al compuesto 1 (1 equivalente)
en piridina seca a 0ºC y se permitió que la mezcla de reacción se
calentase hasta la temperatura ambiente. Se agitó la mezcla de
reacción durante 1 hora a temperatura ambiente, proporcionando el
intermediario clave 2 con un rendimiento del 98% después de un
tratamiento acuoso. Se utilizó el compuesto 2 en la etapa siguiente
sin purificación adicional. Después, la acetolisis del intermediario
2 utilizando ácido trifluoroacético al 80% seguido de la acetilación
con el ácido acético (3 equivalentes) en piridina proporcionó el
intermediario clave 3 con un rendimiento del 92%. Se acopló el
compuesto 3 con sililato de nucleobase utilizando
trifluorometanosulfonato de trimetilsililo como ácido de Lewis de
acuerdo con el procedimiento desarrollado por Vorbrüggen, H.
(Vorbruggen, K.; Krolikiewicz, K. y Bennua, B., Chem.Ber.
114,1234-1255, (1981). Se llevó a cabo la
purificación por cromatografía flash en gel de sílice,
proporcionando el nucleósido 4 con un rendimiento del 85%. El cierre
del anillo inducido por base directo se llevó a cabo tratando el
compuesto 4 con NaOH 0,5 M (1,4-dioxano:H_{2}O,
1:1), y se sometió a reflujo durante la noche. El tratamiento acuoso
y la purificación por cromatografía flash en gel de sílice
proporcionaron el compuesto 6 con un rendimiento del 88%. La
hidrogenación catalítica proporcionó
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(timina-1-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
(7) con un rendimiento del 84% después de la cristalización a partir
de etanol al 10% en diclorometano.
Se llevó a cabo la síntesis del
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-(guanin-9-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
utilizando la misma estrategia. También se prepararon derivados de
la guanidina mediante una estrategia similar, tal como
(1S,3R,4R,7S)-7-hidroxi-1-hidroximetil-3-(2-N-isobutilguanin-9-il)-2,5-dioxabiciclo[2.2.1]heptano
16, tal como se ilustra en la Figura 2.
La ventajosa versatilidad de una estrategia
según la presente invención, en la que se emplea el intermediario
clave (compuestos con la fórmula general III), se ilustra
adicionalmente por el hecho de que los isómeros con inversión C2'
(numeración del nucleósido) resultan accesibles, proporcionando
azúcares \alpha-L-ribosa. De esta
manera, se preparó la
timidinil-\alpha-L-ribosa
12 a partir del intermediario clave. Esta preparación de
[2.2.1]biciclo-nucleósidos
\alpha-L-ribosa a partir del
intermediario clave ha resultado aplicable a otras nucleobases.
La versatilidad de esta ruta se ilustra
adicionalmente en las figuras 4 a 8, en las que los derivados
[2.2.1]biciclo-nucleósidos de adenosina, de
citosina, de uridina, de timidina y de guanidina resultan accesibles
a partir del intermediario clave con la fórmula general III. La
figura 6 ilustra una combinación de las realizaciones preferentes
para los compuestos que presentan la fórmula general III para la
preparación de los derivados
[2.2.1]biciclo-nucleósidos de la uridina, en
las que R_{7} es acetoxi, R_{4} y R_{5} son cada uno mesilato
y R_{1} es bencilarilo sustituido, fenilbencilo (compuesto
indicado con el número de referencia 106 en la figura 6).
Se describe una ruta sintética general. A partir
del diol conocido 1, se puede preparar convenientemente un
intermediario crítico 3. Utilizando el nucleobase deseado o sus
derivados (tales como timina, isobutirilguanidina,
N-acetilcitosina, 6-N-benzoiloadenina, hipoxantina),
puede accederse a los derivados ribonucleósidos 4A, 4B, 4C, 4D, y
4E. La manipulación selectiva del grupo protector permite la
2,4-ciclización y el acceso a muchos LNAs. Este
esquema se detalla en los Ejemplos 1 a 7.
Utilización del intermediario clave 3 hasta un
derivado de la guanidina LNA 16. Este esquema se detalla en el
Ejemplo 9.
Utilización del intermediario clave 3 hasta un
derivado de la timina LNA 12. Este esquema se detalla en el Ejemplo
8.
Utilización del intermediario clave 3 hasta un
derivado de la adenina LNA 20. Este esquema se detalla en el Ejemplo
10.
Utilización del intermediario clave 3 hasta un
derivado de la citosina LNA 7aC. La secuencia de la síntesis
comprende: a) N^{4}-acetilcitosina, BSA,
TMSTf, CH_{3}CN; b) LiOH, THF/H_{2}O; c) benzoato de sodio,
CsCO_{3}, DMF; d) Pd(OH)_{2}, ciclohexano, EtOH;
e) i. Bz-Cl, piridina, ii. NaOH, MeOH, piridina.
Este esquema se detalla en el Ejemplo 12.
Ruta modificada en la que el
bis-isopropilideno 101 se utiliza para acceder al
intermediario clave 106, que presenta la fórmula general III.
Se utiliza una estrategia de grupo protector
diferente y se accede a los derivados del uracilo LNA 110 y 112. La
secuencia de la síntesis comprende: a) NaH,
4-clorometilbifenilo, THF/DMF; b) AcOH al 80%; c) i.
NalO_{4}, THF/H_{2}O; ii. CH_{2}O al 37%, 2M, NaOH, dioxano,
d) MsCl, piridina; e) AcOH/Ac_{2}O/H_{2}SO_{4}; f) uracilo,
BSA, TMSTf, CH_{3}CN; g) LiOH, THF/H_{2}O; h) benzoato de sodio,
DMF; i) NH_{4}OH, MeOH; j) FeCl_{3}, CH_{2}Cl_{2}; k)
NH_{4}OH, MeOH. Este esquema se detalla en el Ejemplo 11.
Se puede acceder a diversos derivados de la
adenina LNA utilizando el intermediario clave 3. Estos ofrecen
posibles ventajas para etapas de oligomerización posteriores.
La utilización de la hipoxantina como nucleobase
permite el acceso al derivado de la hipoxantina LNA 25 y al derivado
de la adenina LNA 27. Este esquema se detalla en el Ejemplo 14.
En el contexto actual, el término "alquilo
C_{1-6}" hace referencia a un grupo
hidrocarburo lineal, cíclico o ramificado que presenta de 1 a 6
átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo,
iso-propilo, pentilo, ciclopentilo, hexilo,
ciclohexilo, ejemplos preferentes de "alquilo
C_{1-6}" son metilo, etilo, propilo,
iso-propilo, butilo, terc-butilo, iso-butilo,
pentilo, ciclopentilo, hexilo, ciclohexilo, particularmente metilo,
etilo, propilo, iso-propilo, terc-butilo,
iso-butilo y ciclohexilo.
En el contexto actual, el término "alquileno
C_{3-7}" hace referencia a un birradical lineal
que presenta de 3 a 7 átomos de carbono, tales como
1,3-propileno, 1,4-butileno,
1,5-pentileno, 1,6-hexileno, y
1,7-heptileno.
En el contexto actual, es decir con respecto al
término "alquilo", la expresión "opcionalmente sustituido"
hace referencia a que el grupo en cuestión puede sustituirse una o
varias veces, preferentemente de 1 a 3 veces, con uno o más grupos
seleccionados de entre hidroxilo, alcoxi C_{1-8},
carboxilo, alcoxicarbonilo C_{1-6},
alquilcarbonilo C_{1-6}, formilo, arilo,
ariloxicarbonilo, arilcarbonilo, heteroarilo, amino, mono- y
di(alquilo C_{1-6})amino,
carbamoilo, mono- y di(alquilo
C_{1-6})aminocarbonilo,
amino-alquilo
C_{1-8}-aminocarbonilo, mono- y
di(alquilo
C_{1-6})amino-alquilo
C_{1-6}-aminocarbonilo,
alquilcarbonilamino C_{1-6}, ciano, carbamido,
halógeno, en los que arilo y heteroarilo se pueden sustituir de 1 a
5 veces, preferentemente de 1 a 3 veces, con alquilo
C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, nitro,
ciano, amino o halógeno. Son ejemplos especialmente preferentes:
hidroxilo, alcoxi C_{1-6}, carboxilo, arilo,
heteroarilo, amino, mono- y di(alquilo
C_{1-6})amino, y halógeno, en los que arilo
y heteroarilo se pueden sustituir de 1 a 3 veces con alquilo
C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, nitro,
ciano, amino o halógeno. Arilo y heteroarilo se pueden sustituir tal
como se describe de forma específica a continuación por "arilo y
heteroarilo opcionalmente sustituidos".
En el contexto actual, el término "arilo"
hace referencia a un anillo o sistema de anillos carbocíclicos
completamente o parcialmente aromático, tal como fenilo, naftilo,
1,2,3,4-tetrahidronaftilo, antracilo, fenantracilo,
pirenilo, benzopirenilo, fluorenilo y xantenilo, entre los que el
fenilo es un ejemplo preferente.
El término "heteroarilo" hace referencia a
un anillo o sistema de anillos carbocíclicos completamente o
parcialmente aromático en el que uno o más de los átomos de carbono
ha sido sustituido por heteroátomos, por ejemplo átomos de nitrógeno
(=N-o -NH), de azufre, y/o de oxígeno. Son ejemplos
de dichos grupos heteroarilo: oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo,
isotiazolilo, pirrolilo, imidazolilo, pirazolilo, piridinilo,
pirazinilo, piridazinilo, piperidinilo, coumarilo, furilo,
quinolilo, benzotiazolilo, benzotriazolilo, benzodiazolilo,
benzooxozolilo, ftalazinilo, ftalanilo, triazolilo, tetrazolilo,
isoquinolilo, acridinilo, carbazolilo, dibenzazepinilo, indolilo,
benzopirazolilo, fenoxazonilo.
En el contexto actual, es decir con respecto a
los términos "arilo" y "heteroarilo", la expresión
"opcionalmente sustituido" hace referencia a que el grupo en
cuestión puede sustituirse una o varias veces, preferentemente de 1
a 5 veces, particularmente de 1 a 3 veces con uno o más grupos
seleccionados de entre hidroxilo (que, cuando se encuentra presente
en un sistema enol, se puede representar en la forma tautomérica
ceto), alquilo C_{1-6}, alcoxi
C_{1-6}, oxo (que se puede representar en la forma
tautomérica enol), carboxilo, alcoxicarbonilo
C_{1-6}, alquilcarbonilo
C_{1-6}, formilo, arilo, ariloxi,
ariloxicarbonilo, arilcarbonilo, heteroarilo, amino, mono- y di
(alquilo C_{1-6})amino; carbamoilo, mono- y
di(alquilo C_{1-6})aminocarbonilo,
amino-alquilo
C_{1-6}-aminocarbonilo, mono- y
di(alquilo
C_{1-6})amino-alquilo
C_{1-6}-aminocarbonilo,
alquilcarbonilamino C_{1-6}, ciano, guanidino,
carbamido, alcanoiloxi C_{1-6}, sulfono,
alquilsulfoniloxi C_{1-6}, nitro, sulfanil,
dihalogen-alquilo C_{1-4},
trihalogen-alquilo C_{1-4},
halógeno, en los que arilo y heteroarilo que representan
sustituyentes se pueden sustituir de 1 a 3 veces con alquilo
C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, nitro,
ciano, amino o halógeno. Son ejemplos preferentes: hidroxilo,
alquilo C_{1-6}, alcoxi C_{1-6},
carboxilo, alcoxicarbonilo C_{1-6},
alquilcarbonilo C_{1-6}, arilo, amino, mono- y di
(alquilo C_{1-6})amino, y halógeno, en los
que arilo se puede sustituir de 1 a 3 veces con alquilo
C_{1-4}, alcoxi C_{1-4}, nitro,
ciano, amino o halógeno.
En el contexto actual, el término
"tri(alquil/aril)sililo" hace referencia a un
grupo sililo sustituido con 0 a 3 grupos del alquilo y/o 0 a 3
grupos del arilo, a condición de que el número total de grupos del
alquilo y del arilo sea 3, seleccionados de entre trimetilsililo,
alidimetilsililo, dimetilfeniisililo, difenilmetilsililo,
isopropildimetilsililo, terc-butildimetilsililo, y
terc-butiidifenilsililo.
El "halógeno" comprende fluoro, cloro,
bromo, y yodo.
En el contexto actual, el término
"nucleobase" comprende nucleobases tanto de origen natural como
no natural. Debe estar claro para las personas expertas en la
materia que varios nucleobases que anteriormente se han considerado
"de origen no natural" se han encontrado posteriormente en la
naturaleza. De esta manera, el "nucleobase" comprende no
solamente los heterociclos de la purina y de la pirimidina
conocidos, sino también análogos heterocíclicos y tautómeros de los
mismos. Ejemplos ilustrativos de nucleobases son adenina, guanina,
timina, citosina, uracilo, purina, xantina, diaminopurina,
8-oxo-N^{6}-metiladenina,
7-desazaxantina, 7-desazaguanina ,
N^{4},N^{4}-etanocitosina,
N^{6},N^{6}-etano-2,6-diaminopurina,
5-metilcitosina,
5-(C^{3}-C^{6})-alquinilcitosina,
5-fluorouracil, 5-bromouracil,
pseudo-isocitosina,
2-hidroxi-5-metil-4-triazolopiridina,
isocitosina, isoguanin, inosina y los nucleobases "de origen no
natural" descritos en Benner et al., patente nº US
5.432.272. El término "nucleobase" está concebido para
comprender todos y cada uno de estos ejemplos así como análogos y
tautómeros de los mismos. Nucleobases especialmente interesantes son
adenina, guanina, timina, citosina, y el uracilo, los cuales se
consideran como los nucleobases de origen natural con respecto al
uso terapéutico y de diagnóstico en seres humanos.
En el contexto actual, el término
"nucleósido" hace referencia a un glucósido de base
heterocíclica. El término "nucleósido" se utiliza ampliamente
en cuanto a la inclusión de nucleósidos de origen no natural,
nucleósidos de origen natural así como otros análogos del
nucleósido. Son ejemplos ilustrativos de nucleósidos los
ribonucleósidos que comprenden un grupo ribosa, así como los
desoxiribonucleósidos, que comprenden un grupo desoxiribosa. Con
respecto a las bases de dichos nucleósidos, se debe entender que
puede tratarse de cualquiera de las bases de origen natural, es
decir adenina, guanina, citosina, timina, y uracilo, así como
cualquier variante modificada de las mismas o cualesquiera bases
artificiales posibles.
Ejemplo
1
Se enfrió una solución de
3-O-bencil-4-C-metanosulfonoximetil-5-metanosulfonil-1,2-O-isopropiliden-\alpha-D-ribofuranosa
(1, 11,1 g, 40 mmoles) (Youssefyeh, R.D.; Verheyden, J.P.H.;
Moffatt, J.G., J. Org. Chem., 1979,44,1301) en
piridina seca (30 ml), en un baño de hielo. A continuación se añadió
cloruro de metanosulfonilo (8,3 ml, 108 mmoles) bajo agitación. Se
permitió que se calentara la mezcla hasta la temperatura ambiente y
se agitó durante 1 hora. Se añadió éter (200 ml) y se lavó la
solución con agua (3 x 200 ml). Se secó la capa orgánica sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentró bajo presión reducida,
proporcionando 16,4 g (98%) del compuesto (2) en forma de sólido
ligeramente amarillo.
Ejemplo
2
Se agitó una solución del compuesto (2) (16 g,
34 mmoles) en ácido trifluoroacético al 80% (100 ml) a temperatura
ambiente durante 1 hora. Se evaporaron los solventes a sequedad bajo
presión reducida, se redisolvió el residuo en diclorometano (200
ml) y se lavó mediante una solución acuosa saturada de NaHCO_{3}
(2 x 200 ml). Se secaron las capas orgánicas sobre Na_{2}SO_{4}
y se concentraron bajo presión reducida, proporcionando un
intermediario aceitoso incoloro. Se evaporó el intermediario
conjuntamente con piridina seca (2 x 50 ml), se disolvió en piridina
y se trató mediante anhídrido acético (12 ml, 103 mmoles) durante la
noche. Se enfrió la mezcla de reacción mediante una solución acuosa
saturada de NaHCO_{3} (250 ml) y se lavó mediante diclorometano (2
x 200 ml). Se agruparon las capas orgánicas, se secaron sobre
Na_{2}SO_{4} y se concentraron bajo presión reducida,
proporcionando el compuesto (3) (15,9 g, 92%) en forma de material
aceitoso incoloro.
Ejemplo
3
Se añadió
N,O-bis-(trimetilsilil)acetamida (4,4 ml, 17,8 mmoles)
a una mezcla agitada de (3) (2,4 g, 4,7 mmmoles) y de timina (0,89
g, 7,1mmol) en acetonitrilo seco (200 ml). La mezcla de reacción se
sometió a reflujo durante 1 hora antes de la disolución completa de
la timina. A continuación se añadió triflato de trimetilsililo (1,8
ml, 9,4 mmoles) gota a gota y se continuó con el reflujo durante 2
horas más. Se enfrió la reacción a temperatura ambiente, se diluyó
con diclorometano (200 ml) y se lavó mediante una solución acuosa
saturada de hidrogenocarbonato de sodio (2 x 200 ml). Se secó la
capa orgánica sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró bajo presión
reducida y se purificó mediante cromatografía flash en gel de sílice
utilizando diclorometano/metanol (98:2 v/v) como eluyente,
proporcionando 2,4 g (85%) de nucleósido (4a) en forma de material
sólido blanco. \delta_{H} (CD_{3}Cl) 9,33 (1 H, br s, NH),
7,40-7,28 (5H, m, Bn), 7,08 (1 H, d, J1,2,
6-H), 5,71 (1H, d, J3,3,
1'-H), 5,58 (1H, dd, J'6,4, J''3,3,
2'-H), 4,70 (1H, d, J6,4,
3'-H), 4,60 (1H, d, J10,8), 4,55 (1H, d,
J10,8), 4,53 (1H, d, J11,7), 4,38 (1H, d,
J10,8), 4,34 (1H, d, J10,8), 4,32 (1H, d,
J11,7), 3,02, 3,00 (2 x 3H, 2 s, metanosulfonilos), 2,11 (3H,
s, acetilo), 1,92 (3H, d, J1,1,
CH_{3})-\delta_{C} (CD_{3}Cl) 170,0 (C=O),
163,7 (C-6), 150,1 (C-2), 137,9,
136,6, (C-5, Bn), 128,6, 128,5, 128,4 (Bn), 111,8
(C-4), 92,4, 84,0, 77,9, 74,8, 73,7, 68,4, 67,5
(ribosa, Bn), 37,7, 37,6 (metanosulfonilos), 20,7 (acetilo), 12,6
(CH_{3}).
Ejemplo
4
y
Se añadió una solución acuosa 1 M de NaOH (30
ml) a una solución del compuesto (4a) (2 g, 3,48 mmoles) en 30 ml de
1,4-dioxano y la mezcla se agitó durante 10 minutos
a temperatura ambiente. En el análisis TLC (gel de sílice,
metanol/diclorometano al 5%) se apreció una conversión cuantitativa
del material de partida en un intermediario con una movilidad
ligeramente baja. Se dividió una cantidad analítica de la mezcla de
reacción mediante extracción en un sistema diclorometano/saturado de
solución acuosa de NaHCO_{3}. Se lavó la capa orgánica mediante
agua, se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró bajo presión
reducida, proporcionando el compuesto (5a) en forma de material
sólido blanco. \delta_{H} (CD_{3}Cl) 9,24 (1 H, br s, NH),
7,41-7,22 (6H, m, 6-H, Bn), 5,68 (1
H, s, 1'-H), 4,66 (1H, d, J, 11,5, Bn), 4,61
(1 H, s, 2'-H), 4,59 (1H, d, J12,1,
5'-H), 4,56 (1H, d, J11,5, Bn), 4,52 (1H, d,
J12,1, 5'-H,), 4,08 (1 H, d, J7,9,
1''-H), 3,93 (1 H, s, 3'-H), 3,87
(1H, d, J7,9, 1''-H), 3,08 (3H, s,
metanosulfonilo), 1,93 (3H, s, CH_{3}). \delta_{C}
(CD_{3}Cl) 163,6 (C-6), 149,6
(C-2), 136,3, 134,0 (C-5, Bn),
128,4, 128,2, 127,8 (Bn), 110,7 (C-4), 87,5, 85,5,
76,6, 75,9, 72,3, 71,5, 64,0 (ribosa, Bn), 37,8 (metanosulfonilo),
12,4 (CH_{3}).
La mezcla de reacción se sometió a reflujo
durante la noche, se diluyó con 200 ml de diclorometano y se lavó
mediante una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 200 ml).
Se secó la fase orgánica, se eliminaron los solventes bajo presión
reducida y el se purificó residuo mediante cromatografía flash en
gel de sílice utilizando metanol/diclorometano al 3% como
diluyente. El compuesto (6a) (1,1 g, 88%) se obtuvo después de
eliminar los solventes en forma de material sólido blanco.
\delta_{H} (CD_{3}Cl) 9,28 (1H, brs, NH), 7,45 (1H, d,
J1,1, 6-H), 7,38-7,22 (5H, m,
Bn), 5,66 (1H, s, 1'-H), 4,67 (1 H, d, J11,6,
Bn), 4,56 (1H, d, J11,7, Bn), 4,54 (1 H, s,
2'-H), 4,05 (1 H, d,
J7,9,1''p-H), 4,01 (1 H, d,
J12,5,5'-H), 3,96 (1H, s,
3'-H), 3,95 (1H, d, J12,6,
5'-H), 3,83 (1H, d, J7,9,
1''-H), 1,88 (3H, d, J1,1, CH_{3}).
\delta_{C} (CD_{3}Cl) 163,9 (C-6), 149,8
(C-2), 137,0, 134,7 (C-5, Bn),
128,5, 128,2, 127,8 (Bn), 110,3 (C-4), 88,2, 87,3,
76,9, 75,9, 72,3, 72,0, 57,6 (ribosa, Bn), 12,7 (CH_{3}).
Ejemplo
5
Se suspendió una mezcla del compuesto (6a) (3 g,
8,4 mmoles), Pd(OH)_{2} /C (1,5 g) al 20% y formato
de amonio (1,6 g) en 20 ml de metanol. Después de someterlo a
reflujo durante 10 minutos, se filtraron los catalizadores a través
de una columna de celita y se lavaron mediante metanol. Se agrupó y
se concentró todo el filtrado, proporcionando un material sólido
blanco. Éste último se cristalizó a partir de etanol/diclorometano
al 10% produciendo 1,9 g (84%) del compuesto (7a), el cual
presentaba la misma movilidad cromatográfica (sílice TLC) y los
mismos espectros H^{1}- y C^{13}-RMN que el
compuesto auténtico (Koshkin, A. A.; Singh, S. K.; Nielsen, P.;
Rajwanshi, V. K.; Kumar, R.; Meldgaard, M.; Olsen, C. E.; Wengel,
J., Tetrahedron 1998,54(14), 3607).
Ejemplo
6
Se añadió
N,O-bis(trimetilsilil)acetamida (5 ml, 20,4
mmoles) a una suspensión agitada de la mezcla anomérica (3) (2,3 g,
4,6 mmoles) y de la 2-N-isobutirilguanina (1,8 g, 7,9 mmoles)
en 1,2-dicloroetano (150 ml) anhidro. La mezcla se
sometió a reflujo durante 1 hora antes de la disolución completa de
la 2-N-isobutirilguanina. A
continuación se añadió triflato de trimetilsililo (2 ml, 11,0
mmoles) y la solución se agitó durante más de 2 horas. Se permitió
que la mezcla de reacción se enfriara hasta la temperatura ambiente,
se diluyó mediante diclorometano (200 ml) y se lavó con una solución
acuosa saturada de hidrogenocarbonato de sodio (2 x 200 ml). Se
eliminaron los solventes bajo presión reducida y el residuo se
purificó mediante cromatografía flash en gel de sílice en
metanol/diclorometano de concentración gradiente
(1-2%) como eluyente, proporcionando 2,1 g (68%) de
material sólido blanco compuesto por tres isómeros (compuesto (4b)
ca. 90% de pureza).
Se purificó una cantidad analítica del compuesto
(4b) mediante re-cromatografía en las mismas
condiciones. \delta_{H} (CD_{3}Cl) 12,22 (1H, brs, NHCO), 9,34
(1H, brs, NH), 7,76 (1H, s, 8-H),
7,40-7,30 (5H, m, Bn), 6,03 (1 H, d, J3,9,
1'-H), 5,76 (1 H, dd, J'6,0, J''3,9,
2''-H), 5,08 (1H, d, J6,0,
3''-H), 4,91 (1H, d, J10,5), 4,67 (1H, d,
J10,9), 4,61 (2H, d, J11,1), 4,49 (1H, d,
J10,5), 4,39 (1H, d, J11,0), 4,32 (1H, d,
J11,7), 3,14, 3,02, (2 x 3H, 2 s, metanosulfonilos), 2,70
(1H, m, CHCO), 2,09 (3H, s, acetilo) 1,24 (6H, m, CH_{3}CH).
\delta_{C} (CD_{3}Cl) 179,3 (COCH), 169,8 (COCH_{3}), 155,0,
148,1, 147,1 (guanina), 138,9, 136,6 (guanina, Bn), 128,6, 128,4,
128,2 (Bn), 122,2 (guanina), 88,6, 84,4, 78,2, 74,8, 74,3, 67,9,
67,4 (ribosa, Bn), 37,8, 37,7, (metanosulfonilos), 36,3 (COCH), 20,6
(COCH_{3}), 19,0, 18,9 (CH_{3}CH).
Ejemplo
7
y
Se disolvió el nucleósido (4b) en una solución
acuosa 0,5 M de hidróxido de sodio y se mantuvo a temperatura
ambiente. A la reacción le siguió un análisis
RP-HPLC en el sistema A:
Columna: Delta-Pack, C18,
100A, 3,9 x 150 mm.
Gradiente: acetonitrilo a un porcentaje
del 0% al 50% en agua (0,05 M acetato de trietilamonio, pH 7,0)
durante 15 minutos.
Caudal: 1,5 ml/min.
Se consumió completamente el material de partida
(4b) (tiempo de retención 19,5 minutos) durante 1 hora a
temperatura ambiente, proporcionando varios productos
intermediarios. El producto principal presentaba un tiempo de
retención de 17,9 minutos y se asumió que era el derivado protegido
2-N-isobutirilo del nucleósido 5b. Se apreció la eliminación
completa del grupo isobutirilo después de 12 horas de reacción (5b;
tiempo de retención 14,7 minutos; ca. 90% de pureza mediante
análisis HPLC). Se encontraron solamente cantidades mínimas del
nucleósido (6b) en la mezcla de reacción. La reacción prosiguió
sometiéndose a reflujo durante más de 12 horas dando como resultado
una conversión completa del compuesto (5a) al compuesto (6b) (tiempo
de retención 12,6 minutos). Se neutralizó la mezcla de reacción
mediante ácido acético (hasta pH 7), se filtró a través de la
columna de gel de sílice y se concentró bajo presión reducida. Se
purificó una cantidad analítica del compuesto (6b) mediante
RP-HPLC semipreparativa (nucleosilo C18, 10 x 30 mm)
utilizando los mismos solventes que en el sistema A. Se disolvió el
compuesto (6b) (ca. 10 mg) en metanol, se añadieron Pd/C al 10% (50
mg) y formato de amonio (20 mg) y la mezcla se sometió a reflujo
durante 15 minutos. En el análisis de la mezcla de reacción en el
sistema A se apreció una formación cuantitativa del compuesto (7b)
(tiempo de retención 4,7 minutos) con la misma movilidad que el
compuesto auténtico preparado mediante el procedimiento descrito
anteriormente (Koshkin, A. A.; Singh, S. K.; Nielsen, P.; Rajwanshi,
V. K.; Kumar, R.; Meldgaard, M.; Olsen, C. E.; Wengel, J.,
Tetrahedron 1998,54(14), 3607).
Ejemplo
8
Se añadió una solución de hidróxido de amonio
concentrado a una solución del compuesto 4a (2,8 g, 4,8 mmoles) en
1,4-dioxano (10 ml). Después de 4 horas, se
eliminaron los solventes bajo presión reducida, se redisolvió el
residuo en diclorometano y se aplicó para el HPLC de gel de sílice
utilizando la mezcla de metanol/diclorometano a un porcentaje del
0% al 3% como eluyente, proporcionando 2,05 g (78%) del compuesto 8
en forma de material sólido blanco.
Se coevaporó el compuesto 8 (2 g, 3,7 mmoles)
con piridina anhidra (2 x 50 ml), se disolvió en piridina (50 ml) y
se reaccionó con cloruro de metanosulfonilo (0,35 ml, 4,5 mmoles)
durante la noche. Se diluyó la mezcla con diclorometano (100 ml), se
lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml) y
se concentró bajo presión reducida. La cromatografía columna en gel
de sílice (2% metanol/diclorometano como eluyente) proporcionó el
compuesto 9 (2,1 g, 92%) en forma de material sólido blanco.
\delta_{H} (CDCl_{3}) 9,67 (1H, s, NH),
7,38-7,15 (6H, m, 6-H, Bn), 5,81 (1
H, d, J 2,4, 1'-H), 5,58 (1H, dd, J'6,5,
J''2,4, 2'-H), 4,75 (1 H, d, J 11,0),
4,73 (1H, d, J6,6, 3'-H), 4,60 (1H, d,
J 10,8), 4,53 (1H, d, J 11,5), 4,41 (1H, d, J
11,0), 4,35 (1H, d, J 11,0), 4,33 (1H, d, J 11,6),
3,20, 3,12, 3,00 (3 x 3H, 3s, metanosulfonilos), 1,91 (3H, d,
J 1,1, 5-CH_{3}). \delta_{C}
(CDCl_{3}) 163,7 (C-6), 150,3
(C-2), 137,8, 136,2 (C-5, Bn),
128,6, 128,5, 128,4, 128,3 (Bn), 111,7 (C-4), 93,1,
84,2, 77,6, 76,8, 74,1, 68,1, 67,5, (ribosa, Bn), 38,5, 37,5, 37,4
(metanosulfonilos), 12,1 (5-CH_{3}).
Se disolvió el compuesto 9 (105 mg, 0,17 mmoles)
en una mezcla de dioxano en agua (2:1, 15 ml). Se añadió una
solución acuosa 2 M de NaOH mediante partes de 100 \mul cada 5
horas y a la reacción le siguió un TLC analítico (gel de sílice,
metanol/diclorometano al 5%). En la mezcla de reacción se detectaron
dos intermediarios con movilidad inferior que se convirtieron
completamente a un único producto después de añadir 1 ml de una
solución acuosa de NaOH. Se extrajo el producto mediante
diclorometano (50 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de
NaHCO_{3} (50 ml) y con una solución hipersalina (40 ml), y se
secó sobre Na_{2}SO_{4}. La concentración bajo presión reducida
proporcionó 72 mg (96%) del compuesto 10 en forma de material sólido
blanco. \delta_{H} (CDCl_{3}) 8,90 (1 H, br s, NH),
7,48-7,34 (6H, m, 6-H, Bn), 6,27 (1
H, s, 1'-H), 4,72 (1 H, d, J 11,7), 4,66 (1
H, d, J 11,7), 4,56 (1 H, d, J 11,7), 4,48 (1 H, d,
J 11,7), 4,48 (1H, dd, J'2,4, J''1,1,
2'-H), 4,25 (1H, d, J2,4,
3'-H), 4,10 (1H, d, J9,1), 4,05 (1H, d,
J 9,0), 3,05, (3H, s, metanosulfonilo), 1,95 (3H, d, J
1,1, 5-CH_{3}). \delta_{C} (CDCl_{3}) 163,5
(C-6), 150,1 (C-2), 136,2, 135,5
(C-5, Bn), 128,7, 128,6, 128,1, (Bn), 109,9
(C-4), 90,0, 86,0, 81,7, 75,9, 73,2, 67,0, 65,1
(ribosa, Bn), 37,5, (metanosulfonilo), 12,6
(5-CH_{3}).
Se suspendió el compuesto 9 (1,8 g, 2,94 mmoles)
en una solución acuosa 0,5 M de NaOH
(1,4-dioxano(agua 1/1, 80 ml) y se calentó la
mezcla a 90ºC durante 48 horas. Se enfrió la solución hasta la
temperatura ambiente, se diluyó con diclorometano (100 ml) y se lavó
con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml). Se
secó la capa orgánica sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró en el
vacío. Se purificó el producto final (compuesto 11, 800 mg, 76%)
mediante cromatografía columna en gel de sílice utilizando una
solución de etanol/diclorometano a un porcentaje del 1% al 4% como
eluyente. \delta_{H} (CDCl_{3}) 9,38 (1 H, br s, NH), 7,52 (1
H, d, J 1,1, 6-H), 7,40-7,31
(5H, m, Bn), 6,24 (1H, s, 1'-H), 4,72 (1H, d,
J 11,9), 4,65 (1H, d, J 11,9), 4,48 (1H, dd,
J2,2, J''0,8, 2'-H), 4,22 (1H, d,
J2,3, 3'-H), 4,08 (1H, d, J9,7), 4,05
(1H, d, J 12,3), 4,02 (1H, d, J9,8), 3,91 (1H, d,
J 12,2), 1,92 (3H, d, J 1,1,
5-CH_{3}). \delta_{C} (CDCl_{3}) 164,0
(C-6), 150,3 (C-2), 136,6, 135,9
(C-5, Bn), 128,6, 128,3, 127,8 (Bn), 109,5
(C-4), 89,8, 88,5, 81,8, 76,0, 73,8, 72,9, 59,0
(ribosa, Bn), 12,5 (5-CH_{3}).
Se suspendió una mezcla del compuesto 11 (750
mg, 2,09 mmoles) y Pd/C al 10% (50 mg) en metanol (20 ml) y se
añadió formato de sodio (700 mg, 11,1 mmoles). La reacción se
sometió a reflujo durante 10 minutos y se enfrió hasta la
temperatura ambiente. Se filtraron los catalizadores y se concentró
la mezcla bajo presión reducida, proporcionando el compuesto 12
(540 mg, 96%) en forma de material sólido blanco.
\delta_{H} (DMSO-d_{6})
11,32 (1H, br s, NH), 7,64 (1H, s, 6-H), 6,09 (1H,
s, 1'-H), 5,91 (1H, d, J 3,1,
3'-OH), 4,94 (1 H, br s, 5'-OH),
4,31, 4,17 (2 x s, 2'-H, 3'-H), 4,03
(2H, s, 1''-H), 3,71 (2H, s, 5'-H),
1,82 (3H, s, 5-CH_{3}). \delta_{C}
(DMSO-d_{6}) 163,9 (C-6), 150,4
(C-2), 136,5 (C-5), 108,0
(C-4), 2 (ribosa), 12,3
(5-CH_{3}).
Ejemplo
9
Se disolvió el compuesto 4b (1g, 1,49 mmoles) en
una mezcla de solución acuosa 0,5 M de NaOH/dioxano (1:1, 20 ml) y
la solución se mantuvo a temperatura ambiente durante 15 minutos. Se
añadió diclorometano (20 ml) y se lavó la mezcla con NaHCO_{3}
saturado (2 x 30 ml). Después de la separación se secó la capa
orgánica sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró bajo presión reducida,
y se purificó el residuo mediante cromatografía columna en gel de
sílice utilizando metanol/diclorometano a un porcentaje del 0% al 4%
como eluyente, proporcionando 620 mg (78%) del compuesto 13 en
forma de material sólido blanco.
\delta_{H} (CDCl_{3}) 12,14 (1 H, br s,
NHCO), 9,51 (1 H, br s, NH), 7,77 (1 H, s, 8-H),
7,30-7,26 (5H, m, Bn), 5,84 (1H, s,
1'-H), 4,67 (1H, d, J 11,5), 4,63 (1H, d,
J 12,0), 4,62 (1H, s, 2'-H), 4,62 (1H, d,
J 11,5), 4,56 (1H, d, J 11,9), 4,50 (1H, s,
3'-H), 4,12 (1H, d,
J8,0,1''-H), 3,93 (1 H, d, J 7,9,
1''-H), 3,06 (3H, s, metanosulfonilo), 2,77 (1 H, m,
CHCO), 1,26 (6H, m, CH_{3}).
Se suspendió una mezcla del compuesto 13 (600
mg, 1,26 mmoles) y benzoato de sodio (310 mg, 2,16 mmoles) en DMF
anhidro (25 ml) y se calentó a 100ºC durante 4 horas bajo agitación
intensiva. Se enfrió la solución hasta la temperatura ambiente, se
diluyó con diclorometano (50 ml) y se filtró a través de un filtro
de cristal. Se lavó el filtrado con una solución acuosa saturada de
NaHCO_{3} (2 x 50 ml), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se
concentró bajo presión reducida. Se purificó el producto final
mediante cromatografía columna en gel de sílice
(metanol/diclorometano a un porcentaje del 1% al 2,5% como
eluyente), proporcionando 560 mg (89%) del compuesto 14 en forma de
material sólido blanco. \deltaH (CDCl_{3}) 12,12 (1 H, br s,
NHCO), 9,30 (1H, br s, NH), 7,92 (m, 2H, Bz), 7,72 (1 H, s,
8-H), 7,57 (1 H, m, Bz), 7,42 (2H, m, Bz),
7,24-7,20 (5H, m, Bn), 5,81 (1H, s,
1'-H), 4,80 (1H, d, J 12,6), 4,66 (1H, s,
2'-H), 4,64 (1H, d, J 12,0), 4,61 (1H, d,
J 12,7), 4,21 (1H, d, J8,1, 1''-H),
4,20 (1H, s, 3'-H), 4,00 (1H, d, J7,9,
1''-H), 2,77 (1H, m, CHCO), 1,27 (6H, m, CH_{3}).
\delta_{C} (CDCl_{3}) 178,8 (CHCO), 165,7 (Bz), 154,9, 147,8,
146,9 (guanina), 136,4, 135,3, 133,4 (guanina, Bn, Bz), 129,3,
129,0, 128,6, 128,5, 128,2, 128,7 (Bn, Bz), 121,0 (guanina), 86,2,
85,5, 77,1, 72,4, 72,1, 59,3 (ribosa, Bn), 36,2 (CHCO), 18,8
(CH_{3}CH).
Se añadió una solución acuosa 2 M de NaOH (15,5
ml) a una solución del compuesto 14 (8,2 g, 14,7 mmoles) en
etanol/piridina (8:1, 450 ml) y se agitó la mezcla durante 30
minutos a temperatura ambiente. Se añadió ácido acético (25 ml) a la
mezcla de reacción y se eliminaron los solventes bajo presión
reducida. Se cristalizó el residuo a partir de una solución acuosa
de etanol al 20%, proporcionando 5,8 g (87%) del compuesto 15 en
forma de material sólido blanco. \delta_{H}
(DMSO-d_{6}) 8,05 (1H, s, 8-H),
7,33-7,26 (5H, m, Bn), 5,85 (1H, s,
1'-H), 5,17 (1H, t, J5,4,
5'-OH), 4,69 (1H, s, 2'-H), 4,64
(2H, s, Bn), 4,23 (1 H, s, 3'-H), 3,95 (1H, d,
J 7,9, 1''-H), 3,83 (2H, m,
5'-H), 3,80 (1H, d, J 8,0,
1''-H), 2,78 (1H, m, CHCO), 1,12 (6H, m,
CH_{3})-\delta_{C} (CDCl_{3}) 180,2 (CHCO),
154,8, 148,2, 147,7 (guanina), 137,9, 136,3, (guanina, Bn), 128,3,
127,6, 127,5 (Bn), 120,5 (guanina), 88,2, 85,2, 76,9, 72,1, 71,3,
56,7 (ribosa, Bn), 34,8 (CHCO), 18,9 (CH_{3}CH).
Se añadió Pd/C (2 g) al 10% y ácido fórmico (3
ml) a una solución del compuesto 15 (5,8 g, 12,7 mmoles) en metanol
(50 ml). La mezcla se sometió a reflujo durante 5 horas, se enfrió
hasta la temperatura ambiente y se filtró a través de la columna de
gel de sílice. Se lavó la columna con metanol (50 ml), se concentró
todo el filtrado bajo presión reducida, proporcionando 4,55 g (98%)
del compuesto 16 en forma de un sólido cristalino.
Ejemplo
10
Se añadió BSA (5,9 ml, 23,8 mmoles) a una
suspensión del compuesto 3 (4,8 g, 9,4 mmoles) y
6-N-benzoliadina (2,7 g, 11,3
mmoles) en 1,2-dicloroetano anhidro (40 ml) y la
mezcla se sometió a reflujo durante 1 hora. A continuación se añadió
triflato de trimetilsililo (2,6 ml, 14,3 mmoles), la reacción se
sometió a reflujo durante más de 4 horas y se mantuvo a temperatura
ambiente durante la noche. Se diluyó la mezcla de reacción con
diclorometano (100 ml), se lavó con una solución acuosa saturada de
NaHCO_{3} (200 ml), se concentró bajo presión reducida, y se
purificó el producto mediante cromatografía columna en gel de sílice
(metanol/diclorometano a un porcentaje del 1% al 3% como eluyente).
Se proporcionaron 3,5 g (53%) del compuesto 40 en forma de espuma
amarilla. \delta_{H} (CD_{3}Cl) 8,76 (1 H, s,
8-H), 8,12 (1H, s, 2-H), 8,02 (2H,
m, Bz), 7,61 (1 H, m, Bz), 7,51 (2H, m, Bz),
7,40-7,34 (5H, m, Bn), 6,23 (1H, d, J3,5,
1'-H), 6,08 (1H, dd, J'5,9, J''3,5,
2'-H), 5,12 (1H, d, J 6,0,
3'-H), 4,68 (1H, d, J 11,1), 4,67 (1H, d,
J 11,6), 4,64 (1H, d, J 11,0), 4,44 (1H, d, J
10,8), 4,39 (1H, d, J 11,7), 4,36 (1H, d, J 11,0),
3,03, 2,87 (2 x 3H, 2 s, metanosulfonilos), 2,13 (3H, s, acetilo).
\delta_{C} (CD_{3}Cl) 169,5 (CH_{3}CO), 164,5 (Bz), 152,5,
150,9, 149,7, 142,4 (adeninilo), 136,3, 133,2, 132,8, 128,7, 128,5,
128,4, 128,3, 128,2, 128,0, 127,9, 127,8 (Bn, Bz), 123,5
(adeninilo), 87,8, 84,1, 77,3, 74,6, 73,4, 67,3, 67,2 (ribosa, Bn),
37,6, 37,3 (metanosulfonilos), 20,5 (acetilo).
Se añadió hidróxido de amonio concentrado (30%,
20 ml) a una solución del compuesto 40 (2,5 g, 3,6 mmoles) en
1,4-dioxano (20 ml). La solución se mantuvo a
temperatura ambiente durante la noche y se diluyó con una solución
acuosa de NaOH (2 M, 5 ml). 30 minutos más tarde se eliminaron los
solventes bajo presión reducida y se suspendió el residuo en
diclorometano (100 ml), se lavó con NaCHO_{3} saturado (100 ml),
se secó sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró hasta proporcionar
una espuma sólida. Finalmente, se purificó el producto mediante
cromatografía columna en gel de sílice utilizando metanol en
diclorometano a un porcentaje del 2% al 5% como eluyente,
proporcionando 1,26 g (78%) del compuesto 18 en forma de material
sólido amarillo. \delta_{H} (CD_{3}Cl) 8,30 (1 H, s,
8-H), 7.90 (1 H, s, 2-H),
7,31-7,27 (5H, m, Bn), 6,04 (1 H, s,
1'-H), 4,93 (1 H, s, 2'-H), 4,68 (1
H, d, J 11,7), 4,60 (1H, d, J 11,7), 4,59 (1H, d,
J 11,7), 4,57 (1H, d, J 11,9), 4,35 (1H, s,
3'-H), 4,19 (1H, d, J7,9,
1''-H), 4,02 (1H, d, J7,9,
1''-H), 3,03 (3H, s, metanosulfonilo).
\delta_{C} (CD_{3}Cl) 155,4 (C-6), 152,9
(C-2), 148,6 (C-4), 138,0
(C-8), 136,4, 128,4, 128,2, 127,8 (Bn), 119,7
(C-5), 86,6, 85,1, 77,5, 76,8, 72,4, 72,2, 64,4
(ribosa, Bn), 37,7 (metanosulfonilo).
Se añadió benzoato de sodio (0,77 g, 5,38
mmoles) a una solución del compuesto 18 (1,2 g, 2,69 mmoles) en DMF
anhidro (50 ml). Se agitó la mezcla a 80ºC durante la noche, se
enfrió hasta la temperatura ambiente y se filtro a través de un
filtro de cristal. Se diluyó el filtrado con diclorometano (100 ml),
se lavó con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3}, se secó
sobre Na_{2}SO_{4}, y se concentró bajo presión reducida. Se
purificó el compuesto deseado en cromatografía en gel de sílice
(metanol/diclorometano a un porcentaje del 1,5% al 4%) y se
cristalizó a partir del etanol, proporcionando 1,04 g (82%) del
compuesto 19 en forma de material sólido blanco. \delta_{H}
(DMSO/metanol 1/10) 8,16 (1H, s, 8-H), 8,03 (1H, s,
2-H), 8,02 (2H, m, Bz), 7,63 (1H, m, Bz), 7,47 (2H,
m, Bz), 7,29-7,18 (5H, m, Bn), 6,07 (1H, s,
1'-H), 4,87 (1H, s, 2'-H), 4,83
(1H, d, J 12,8), 4,71 (1 H, d, J 11,9), 4,70 (1H, d,
J12,8), 4,62 (1 H, d, J 11,9), 4,47 (1H, s,
3'-H), 4,23 (1H, d, J
8,0,1''-H), 4,05 (1 H, d, J 7,9,
1''-H).
Se suspendió una mezcla del compuesto 19 (0,95
g, 2,01 mmoles) y Pd(OH)_{2}/C (20%, 1 g) en
metanol/ciclohexeno (1:1, 20 ml) y se sometió a reflujo durante la
noche. Se enfrió la mezcla de reacción hasta la temperatura
ambiente, se filtró a través de una columna de Celite™ y se
concentró bajo presión reducida. Se coevaporó el residuo con
piridina anhidra (2 x 200 ml), se disolvió en piridina anhidra, y se
enfrió en un baño de hielo. Se añadió cloruro de benzoilo (1,15 ml,
10 mmoles) gota a gota y se agitó la mezcla a temperatura ambiente
durante 20 horas. A continuación se enfrió la reacción añadiendo
agua helada (40 ml), y se lavó con diclorometano (2 x 50 ml). Se
agruparon las capas orgánicas, se concentraron bajo presión
reducida, se volvieron a disolver en piridina/metanol (1:2, 30 ml),
y se añadió una solución acuosa 2 M de NaOH (5 ml). Después de 15
minutos, se neutralizó la mezcla con ácido acético (5 ml) y se
eliminaron los solventes, proporcionando un residuo aceitoso. Este
último se suspendió en metanol/diclorometano al 5%, se aplicó a una
columna en gel de sílice y se eluyó mediante metanol/diclorometano a
un porcentaje del 5% al 15% como solvente. Se concentraron las
fracciones que contenían el compuesto 20, proporcionando 0,54 g
(70%) de un material sólido cristalino con la misma movilidad
cromatográfica que el compuesto auténtico.
Ejemplo
11
Se suspendió hidruro de sodio (1,15 g con una
dispersión del 60% en aceite mineral, 28,75 mmoles) en DMF seco (10
ml) bajo N_{2} y se enfrió en un baño de hielo. Se añadió una
mezcla de
1,2:5,6-di-O-isopropiliden-\alpha-D-alofuranosa
101 (5,0 g, 19,21 mmoles) y 4-(clorometil)-bifenilo
(4,67 g, 23,04 mmoles, Fluka, > 97%) en THF seco (50 ml) gota a
gota a lo largo de 45 minutos. Se eliminó el baño refrigerante y se
agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 24 horas. Se enfrió
la mezcla marronácea en un baño de hielo y se añadió agua (20 ml)
muy cuidadosamente. Se separaron las capas y se extrajo la capa
acuosa con éter (50 ml). Se lavaron las capas orgánicas agrupadas
con agua (2 x 50 ml) y con una solución hipersalina (50 ml), se
secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida. Se
añadió ácido acético al 80% (40 ml) al aceite marrón resultante, el
cual cristalizó en suspensión, y se agitó la mezcla de reacción a
temperatura ambiente durante 24 horas. Se extrajo la mezcla con
éter de petróleo ligero (2x 25 ml) y se evaporó el ácido acético
bajo presión reducida seguido de coevaporación con el etanol. Se
partió el residuo entre CH_{2}Cl_{2} (100 ml) y una solución
acuosa saturada de NaHCO_{3} (50 ml). Se separaron las capas y se
extrajo la capa acuosa con CH_{2}Cl_{2} (100 ml). Se lavaron las
capas orgánicas agrupadas con una solución hipersalina (50 ml), se
secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida,
proporcionando una espuma amarillo-pálido pegajosa
(6,9 g). Se disolvió este producto 5,6-diol crudo
103 (16,9 g) en THF/H_{2}O (50% v/v, 100 ml) y se añadió
NalO_{4} (4,6 g, 21,51 mmoles). Se agitó la mezcla de reacción a
temperatura ambiente durante 60 minutos y se filtró el lodo líquido
blanco espeso resultante. Se lavó el precipitado formado con éter
(100 ml) y se extrajeron los filtrados agrupados con éter (200 ml).
Se lavaron las capas agrupadas con agua (2 x 100 ml) y con una
solución hipersalina (100 ml). Se eliminaron los solventes bajo
presión reducida y se añadió p-dioxano (40 ml) a este
producto aldehido crudo. Se añadió una solución acuosa de
formaldehido al 37% (4,0 ml) a la solución agitada seguido de la
adición de una solución acuosa 2 M de NaOH (18 ml) y se agitó la
mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 21 horas. Se
añadió la solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (100 ml) y se
extrajo la mezcla con CH_{2}Cl_{2} (3 x 200 ml). Se lavaron las
capas orgánicas agrupadas con una solución acuosa saturada de
NaHCO_{3} (100 ml), se secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron
bajo presión reducida. Se recristalizó el material sólido
amarillo-pálido residual a partir del éter,
proporcionando diol 104 en forma de material sólido blanco (3,7 g).
El material restante en el licor madre no se repurificó por el
momento.^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta: 1,34 (3H, s,
CH_{3}), 1,65 (3H, s, CH_{3}) 3,61 (1H,"d", J 12,08,
H-1''a) 3,81 (1H, d, J 12,10,
H-1''b), 3,91 (1H, d, J 10,78,
H-5'a) 3,96 (1H, d, J 10,78,
H-5'b), 4,26 (1H, d, J 5,31,
H-3'), 4,61 (1 H, d, J 11,72,
fenilbencilo-CHa), 4,68 (1 H, dd, J 4,03 y
5,13, H-2'), 4,84 (1 H, d, J 11,72,
fenilbencilo-CHb), 5,78 (1 H, d, J 3,84,
H-1'), 7,36-7,58 (5H, m, Ar),
7,59-60 (4H, m, Ar). ^{13}C RMN (400 MHz,
CDCl_{3}) \delta: 25,78, 26,45 (C(CH_{3})_{2},
isopropilideno), 63,13, 64,14, 72,30, 77,22, 78,31
(C-1'', C-5',
CH_{2}-fenilbencilo, C-3',
C-2'), 86,16 (C-4'), 104,32
(C-1'), 113,40 (C(CH_{3})_{2}),
126,96, 127,17, 127,29, 128,14, 128,66, 136,08, 140,53, 141,00
(Ar).
Se añadió cloruro de metanosulfonilo (1,86 ml,
24,03 mmoles) a una solución agitada de diol 104 (3,69 g, 9,55
mmoles) en piridina seca (25 ml) bajo N_{2} a una temperatura de
0ºC a 5ºC gota a gota. Se eliminó el baño refrigerante y se agitó la
mezcla de reacción a temperatura ambiente durante 2,5 horas. Se
diluyó la mezcla con éter (100 ml) y se lavó con una solución
acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 30 ml), 1 M NaoH (2 x 30 ml),
agua (30 ml) y una solución hipersalina (30 ml). Se secó la solución
orgánica (MgSO_{4}) y se evaporaron los solventes bajo presión
reducida. Se eliminó la piridina residual mediante coevaporación
con tolueno y mediante secado bajo alto vacío durante la noche. Se
utilizó el producto bis-miselato 5 (4,75 g,
rendimiento del 95%, espuma amarilla) sin purificaciones
adicionales.
Se disolvió bis-miselato crudo
105 (4,75 g, 8,75 mmoles) en una mezcla de ácido acético (70 ml) y
anhídrido acético (7,0 ml) bajo N_{2}. Se añadió H_{2}SO_{4}
concentrado (0,07 ml) a la solución agitada y se agitó la mezcla de
reacción resultante a temperatura ambiente durante 3 horas. Se
vertió la mezcla en agua (150 ml) que contenía algo de hielo y se
agitó durante 20 minutos. A continuación se añadió una solución
acuosa saturada de NaHCO_{3} (10 ml) y CH_{2}Cl_{2} (200 ml) y
se agitó la mezcla durante 30 minutos. Se separaron las capas y se
lavó la capa orgánica con una solución acuosa saturada de
NaCHO_{3} (2 x 10 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó
bajo presión reducida. Se purificó el aceite marrón restante
mediante cromatografía columna en sílice: se empaquetó en
CH_{2}Cl_{2}; se eluyó con MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un
porcentaje del 0% al 2% v/v, proporcionando el compuesto
bis-acetilato 106 (3,91 g, rendimiento del 76%) en
forma de espuma blanca.
Se disolvió una mezcla anomérica 106 (3,91 g,
6,65 mmoles) en CH_{3}CN_{4} seco (40 ml) bajo N_{2}. Se
añadió uracilo (894 mg, 7,98 mmoles) seguido de la adición de
N,O-bis(trimetilsilil)acetamida (8,3 g, 33,58
mmoles). Se calentó la solución ligeramente túrbida hasta los 40ºC y
se agitó a esta temperatura durante 40 minutos. Se enfrió la
solución amarillo-claro hasta la temperatura
ambiente y se añadió triflato de trimetilsililo (1,54 ml, 7,97
mmoles) gota agota. Se calentó la mezcla de reacción hasta el
reflujo y se agitó a esta temperatura durante 5 horas. Se enfrió la
mezcla hasta la temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Se
diluyó la mezcla con CH_{2}Cl_{2} (150 ml) y se lavó con una
solución acuosa saturada de NaHcO_{3} (3 x 50 ml), se secó
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó bajo presión reducida. Se sometió el
residuo a la cromatografía columna en sílice: se empaquetó en
CH_{2}Cl_{2}; se eluyó con MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un
porcentaje del 1% al 2% v/v, proporcionando el producto acoplado 107
(2,99 g, rendimiento del 70%) en forma de espuma
amarillo-pálido.
Se añadió monohidrato de hidróxido de litio (953
mg, 22,7 mmoles) a una solución de nucleósido 107 (2,9 g, 4,5
mmoles) en THF (25 ml) y agua (20 ml) y se agitó la mezcla de
reacción a temperatura ambiente durante 2 horas. Se evaporó el
solvente orgánico bajo presión reducida y se diluyó el residuo con
CH_{2}Cl_{2} (150 ml), se lavó con una solución acuosa saturada
de NaHCO_{3} (2 x 50 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó
bajo presión reducida. Se purificó la espuma amarilla restante
mediante cromatografía columna en sílice: se empaquetó en
CH_{2}Cl_{2}; se eluyó con MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un
porcentaje del 0% al 1% v/v, proporcionando el producto ciclizado
108 (1,64 g, rendimiento del 73%) en forma de espuma
blanco-sucio.
^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta: 3,06
(3H, s, CH_{3}), 3,91 (1 H, d, J7,87,
H-1''a), 3,94 (1H, s, H-3'), 4,12
(1H, d, J 8,06, H-1''b), 4,58 (2H, s,
CH_{2}), 4,59 (1H, d, J 12,81, H-5'a), 4,67
(1H, s, H-2'), 4,70 (1H, d, J 11,53,
H-5'b), 5,67 (1H, s, H-1'), 5,75 (1
H, d, J 8,24, H-5), 7,33-7,45
(5H, m, fenilbencilo), 7,56-7,59 (5H, m,
fenilbencilo, H-6), 9,32 (1H, bs, NH). ^{13}C RMN
(400 MHz, CDCl_{3}) \delta: 37,76 (CH_{3}), 63,94
(C-5'), 71,61, 72,10, 76,25, 76,56
(C-2', C-3', C-1'',
CH_{2}), 85,61, 87,68 (C-1',
C-4'), 102,12 (C-5), 126,91, 127,17,
127,36, 128,27, 128,67, 135,24 (Ar), 138,31 (C-6),
140,28, 141,20 (Ar), 149,54 (C-2), 162,94
(C-4).
Se disolvió el nucleósido 108 (1,56 g, 2,11
mmoles) en N,N-dimetilacetamida seca (40 ml) bajo N_{2}, y
se añadió benzoato de sodio (2,25 g, 15,61 mmoles). Se calentó el
lodo líquido hasta los 100ºC y se agitó a esta temperatura durante 3
horas. Se filtró la mezcla a través de una placa de Celite™, la cual
se lavó con una cantidad grande de CH_{2}Cl_{2}. Se diluyeron
los filtrados agrupados con CH_{2}Cl_{2} (150 ml) y se lavaron
con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (3 x 50 ml), se
secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida. Se
pasó el material restante a través de una pequeña columna de sílice;
se eluyó con MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un porcentaje del 0% al 1%
v/v, proporcionando un sirope incoloro claro. Se disolvió este
material en una cantidad mínima de EtOH caliente al 96%, y tras
refrigerarse se formó un producto cristalino blanco, el cual se
aisló mediante filtración y se secó bajo alto vacío, proporcionando
el benzoato 109 (1,41 g, 86%).
Se desbenzoilizó una muestra analítica 109
mediante tratamiento con NH_{4}OH en MeOH, proporcionando el
5'-alcohol 110 en forma de polvo blanco después de
la recristalización a partir de EtOH/agua (1:1, v/v). ^{1}H RMN
(400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta: 3,72 (1H, d, J7,88,
H-1''a), 3,81 (2H, d, J 5,31,
H-5'a + b), 3,89 (1 H, d, J 7,88,
H-1''b), 3,97 (1 H, s, H-3'), 4,50
(1H, s, H-2'), 4,66 (2H, s, CH_{2}, fenilbencilo),
5,31 (1H, t, J 5,50, 5'-OH), 5,51 (1 H, s,
H-1'), 5,64 (1 H, d, J 8,06,
H-5), 7,34-7,45 (m, 5H,
fenilbencilo), 7,48-7,67 (m, 4H, fenilbencilo), 7,76
(1 H, d, J 8,24, H-6), 11,38 (1 H, s, NH),
^{13}C RMN (RMN (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta: 56,05
(C-5'), 70,89, 71,65, 75,93, 76,56
(C-2', C-3', CH2,
C-1''), 86,55, 88,38 (C-1',
C-4'), 100,95 (C-5), 126,60, 126,68,
127,46, 128,08, 128,96, 137,15 (Ar), 139,07 (C-6),
139,52, 139,91 (Ar), 150,04 (C-2), 163,37.
Se añadió FeCl_{3} anhidro (Aldrich, 99,99 +
%, 560 mg, 3,45 mmoles) a una solución agitada del nucleósido 109
(910 mg, 1,73 mmoles) en CH_{2}Cl_{2} seco (20 ml) bajo N_{2}.
Se agitó la mezcla de reacción (inicialmente una solución
marrón-negro-claro. Después de ca.
durante 30 minutos se apreció un precipitado marrón, el cual cambió
a azul-verde después de otros 30 minutos) a
temperatura ambiente durante 2,5 horas. Se enfrió la reacción
añadiendo agua (10 ml) y se diluyó con CH_{2}Cl_{2}. Se filtró
la mezcla a través de una placa fina de Celite™, la cual se lavó
con CH_{2}Cl_{2} y con MeOH. Se lavaron los filtrados agrupados
con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 50 ml), se
secaron (Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida. Se
purificó el residuo mediante cromatografía columna en sílice: se
empaquetó en MeOH en CH_{2}Cl_{2} al 1% v/v, y se eluyó con MeOH
en CH_{2}Cl_{2} a un porcentaje del 2% al 5% v/v, proporcionando
el 3'-alcohol 111 (344 mg, rendimiento del 56%) en
forma de sólido material blanco.
Se desbenzoilizó una cantidad analítica del
compuesto 111 mediante tratamiento con NH_{4}OH en MeOH
proporcionado LNA-U-diol 112 en
forma de polvo blanco después de la recristalización a partir de
MeOH. ^{1}H RMN (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta: 3,62 (1
H, d, J 7,87, H-1''a), 3,75 (2H, bd,
J4,39, H-5'a+b), 3,83 (1H, d, J 7,87,
H-1''b), 3,87 (1 H, bd, J 2,75,
H-3'), 4,14 (1H, s, H-2'), 5,14 (1
H, bt, J4,95, 5'-OH), 5,42 (1H, s,
H-1'), 5,62 (1H, d, J 8, 06,
H-5), 5,66 (1 H, bd, J 3,66, 3'-OH),
7,75 (1 H, d, J 8,24, H-6), 11,34 (1 H, bs, NH),),
^{13}C RMN (RMN (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta: 56,03
(C-5'), 68,71, 71,07, 78,96 (C-2',
C-3', C-1''), 86,43, 88,93
(C-1', C-4'), 100,89
(C-5), 139,20 (C-6), 150,04
(C-2), 163,31 (C-4).
Ejemplo
12
Se añadió
N,O-bis(trimetilsilil)acetamida (25,0 ml,
102,25 mmoles, Fluka, 97%) a una suspensión agitada de bismesilato 3
(13,0 g, 24,47 mmoles) y N_{4}-acetilcitosina
(6,24 g, 40,75 mmoles) en CH_{3}CN seco (250 ml) bajo N_{2}. Se
calentó la mezcla hasta los 40ºC y se agitó a esa temperatura hasta
proporcionar una solución transparente (ca. 20 minutos). Se enfrió
la mezcla hasta la temperatura ambiente y se añadió triflato de
trimetilsililo (10,0 ml, 55,34 mmoles) gota a gota. Se calentó la
reacción resultante hasta reflujo y se agitó a esta temperatura
durante 2,5 horas. Se enfrió la mezcla en un baño de hielo y se
añadió una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (100 ml). Se
filtró el material sólido formado y se lavó con CH_{2}Cl_{2} (60
ml). Se separaron las capas y se extrajo la capa acuosa con
CH_{2}Cl_{2} (100 ml). Se diluyeron las capas orgánicas
agrupadas con CH_{2}Cl_{2} (250 ml) y se lavaron con una
solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml), se secaron
(MgSO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida. Se sometió el
residuo (aceite amarillo) a cromatografía columna en sílice: se
empaquetó en MeOH en CH_{2}Cl_{2} al 1% v/v, se eluyó con MeOH
en CH_{2}Cl_{2} a un porcentaje del 1% al 2% v/v, proporcionando
el compuesto del título 4C (9,16 g, rendimiento del 60%) en forma de
una espuma amarillo-pálido.
^{1}H RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta: 2,12
(3H, s, CH_{3} (Ac)), 2,26 (3H, s, CH_{3} (Ac)), 3,00 (3H, s,
CH_{3} (Ms)), 3,01 (3H, s, CH_{3} (Ms)),
4,35-4,80 (8H, m, H-2',
H-3', H-1''a+b,
H-5'a+b, CH_{2}-bencilo),
5,72-5,73 (2H, m, H-1',
H-5), 7,27-7,42 (5H, m, Ar), 7,70 (1
H, d, J7,50, H-6), 9,50 (1 H, bs, NH),
^{13}C RMN (400 MHz, CDCl_{3}) \delta: 20,66, 24,86 (2 x
CH_{3} (Ac)), 37,40, 37,51 (2 x CH_{3} (Ms)), 67,67, 68,05,
73,84, 74,35, 77,89 (C-2', C-3',
C-5', C-1'', CH_{2} (Bn)), 84,62
(C-4'), 94,58 (C-1'), 96,88
(C-5), 128,24, 128,27, 128,47, 136,59 (Ar), 146,72
(C-6), 154,25 (C-2'), 163,19
(C-4), 169,75, 170,59 (2 x CO).
\newpage
Se disolvió el nucleósido 4C (5,6 g, 9,28
mmoles) en THF/H_{2}O (90 ml, 1/1, v/v), y se añadió LiOH.H_{2}O
(2,34 g, 55,76 mmoles). Se agitó la mezcla de reacción a temperatura
ambiente durante 4 horas y se concentró la mezcla bajo presión
reducida hasta ca. 50 ml. Se partió el residuo entre
CH_{2}Cl_{2} (200 ml) y una solución acuosa saturada de
NaHCO_{3} (100 ml). Se extrajo la capa acuosa
amarillo-brillante con CH_{2}Cl_{2} (2 x 100
ml). Se añadió MeOH a las capas orgánicas agrupadas que contenían el
producto precipitado, hasta que se obtuvo una solución
transparente, la cual se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó bajo
presión reducida. El material sólido amarillo-pálido
restante se secó bajo alto vacío, proporcionando el compuesto 5aC
(3,75 g, rendimiento del 95%), el cual se utilizó sin purificaciones
adicionales. ^{1}H RMN (400 MHz, CD_{3}OD) \delta: 3,15 (3H,
s, CH_{3} (Ms)), 3,89 (1 H, d, J 8, 06,
H-1''a), 3,92 (1 H, s, H-3'), 4,06
(1 H, d, J 7, 87, H-1''b), 4,52 (1 H, s,
H-2'), 4,56 (1 H, d, J 11, 54, CHaHb
(Bn)), 4,60 (1H, d, J 2, 93, H-5'a), 4,64 (1
H, d, J 2,38, H-5'b), 4,67 (1 H, d, J
12,08, ChaHb (Bn)), 5,63 (1 H, s, H-1'), 5,89
(1 H, d, J 7, 51, H-5),
7,28-7,32 (5H, m, Ar), 7,70 (1 H, d, J 7,69,
H-6), ^{13}C RMN (400 MHz, CD_{3}OD) \delta:
35,53 (CH_{3} (Ms)), 64,19, 70,97, 71,32, 75,31, 76,25
(C-2', C-3', C-5',
C-1'', CH_{2} (Bn)), 84,98 (C-4'),
87,56 (C-1'), 93,88 (C-5), 127,22,
127,32, 127,57, 136,53 (Ar), 139,05 (C-6), 155,61
(C-2), 165,81 (C-4).
Se disolvió mesilato crudo 5C (3,75 g, 8,86
mmoles) en DMF seco (100 ml) bajo N_{2} y se añadieron benzoato de
sodio (3,88 g, 26,58 mmoles) y Cs_{2}CO_{3} (4,33 g, 13,29
mmoles). Se calentó la suspensión hasta los 50ºC y se agitó a esta
temperatura durante 17 horas. El lodo sólido
amarillo-pálido muy grueso resultante se diluyó con
DMF (100 ml), y se añadió más benzoato de sodio (2,6 g, 18,04
mmoles) y se incrementó la temperatura hasta los 65ºC. Se continuó
agitando durante 5 horas a esta temperatura. A continuación se
añadió más Cs_{2}CO_{3} (2,2 g) y se agitó la mezcla durante
otras 2,5 horas. Se enfrío la mezcla de reacción hasta la
temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida. Se partió
el residuo entre CH_{2}Cl_{2} (250 ml) y una solución acuosa
saturada de NaHCO_{3} (250 ml). Se extrajo la capa acuosa con
CH_{2}Cl_{2} (2 x 150 ml) y se lavaron las capas orgánicas
agrupadas con una solución hipersalina (100 ml), se secaron
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporaron bajo presión reducida. Se
purificó el producto crudo mediante cromatografía columna en sílice:
se empaquetó en MeOH en CH_{2}Cl_{2} al 2% v/v, y se eluyó con
MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un porcentaje del 2% al 4% v/v,
proporcionando benzoato 5aC (3,35 g, 84%) en forma de material
sólido amarillo-pálido.
Se añadió hidróxido de paladio (carbono húmedo
al 20%, 174 mg) a una solución agitada del nucleósido 5aC (694 mg,
1,54 mmoles) en etanol (15 ml) y ciclohexano (6 ml). Se calentó la
mezcla hasta reflujo y se agitó a esta temperatura durante 6 horas.
Se añadió más hidróxido de paladio (87 mg) y más ciclohexeno (3 ml)
y se continuó agitando hasta reflujo durante 17 horas. A
continuación se añadió más hidróxido de paladio (68 mg) y más
ciclohexeno (2 ml) y se agitó la mezcla durante 2,5 horas más. Se
enfrió la mezcla de reacción hasta la temperatura ambiente y se
filtraron los catalizadores a través de una placa pequeña de
Celite™. Se evaporaron los solventes bajo presión reducida,
proporcionando el 3'-alcohol libre 6aC (416 mg,
rendimiento del 75%) en forma de material sólido blanco. ^{1}H RMN
(400 MHz, CD_{3}OD) \delta: 3,96 (1H, d, J8,97,
H-1''a), 4,12 (1H, s, H-3'), 4,13
(1H, d, J 9, 00, H-1''b), 4,39 (1H, s,
H-2'), 4,73 (1H, d, J 9,83,
H-5'a), 4,84 (1 H, d, J 9,85,
H-5'b), 5,59 (1 H, s, H-1'), 5,76 (1
H, d, J 7,41, H-5), 7,56-7,72
(3H, m, Ar), 7,75 (1H, d, J 7,45, H-6),
8,07-8,10 (2H, m, Ar), ^{13}C RMN (400 MHz,
CD_{3}OD) \delta: 59,27, 69,12, 70,55, 78,80
(C-5', C-3', C-2',
C-1''), 85,92, 87,26 (C-1',
C-4'), 93,54 (C-5), 128,02, 128,69,
128,98, 132,82 (Ar), 139,04 (C-6), 155,56
(C-2), 165,16 (C-4), 165,74
(CO).
Se coevaporó el nucleósido 6aC (390 ml, 1,08
mmoles) con piridina seca (3x) y se redisolvió en piridina seca (5,0
ml) bajo N_{2}. Se añadió cloruro de benzoilo (0,25 ml, 2,15
mmoles) gota a gota y se agitó la mezcla de reacción a temperatura
ambiente durante 60 minutos. Se enfrió la mezcla en un baño de hielo
y se añadió MeOH (20 ml) seguido de la adición de 2 M NaOH (5,0
ml). La mezcla de reacción se agitó a una temperatura entre 0ºC y
5ºC durante 20 minutos, a continuación se diluyó con
CH_{2}Cl_{2} (100 ml) y se lavó con una solución acuosa
saturada de NaHCO_{3} (2 x 50 ml). Se secó la capa orgánica
(Na_{2}SO_{4}) y se evaporó bajo presión reducida. Se sometió el
residuo a cromatografía columna en sílice: se empaquetó en MeOH en
CH_{2}Cl_{2} al 2% v/v, y se eluyó con MeOH en CH_{2}Cl_{2}
a un porcentaje del 5% al 7% v/v, proporcionando el nucleósido
protegido 7aC (97 mg, rendimiento del 25%) en forma de material
sólido blanco. ^{1}H RMN (400 MHz, DMSO-d_{6}) \delta:
3,71 (1 H, d, J 7,69, H-1''a),
3,79-3,82 (2H, m, H-5'a+b),
3,87-3,89 (2H, m, H-1''b,
H-3'), 4,24 (1H, s, H-2'), 5,17 (1H,
t, J 5,67, OH), 5,53 (1H, s, H-1'), 5,68 (1H,
d, J 7,48, H-5), 7,40-7,65
(3H, m, Ar), 7,99 (2H, d, J 7,33, Ar), 8,25 (1 H, d, J
7, 51, H-6), 11,26 (1 H, bs, NH), ^{13}C RMN (400
MHz, DMSO-d_{6}) \delta: 56,31, 68,53, 71,20, 78,69
(C-1'', C-2', C-3',
C-5'), 87,50, 89,25 (C-1',
C-4'), 96,03 (C-5), 128,52, 132,83
(Ar), 144,31 (C-6), 163,35
(C-4).
Ejemplo
13
Se secó
6-N-Benzoiloadenina (11,02 g.; 46,1
mmoles) en el vacío durante la noche. Se coevaporó
1,2-Di-O-acetil-3-O-bencil-4-C-methansulfoniloximetil-5-O-metanosulfonil-D-ribofuranosa
(19,6 g.; 38,4 mmoles) (3) en acetonitrilo anhidro (3 x 50 ml) y se
secó en el vacío durante la noche. Se redisolvió en
1,2-dicloroetano anhidro (almacenados sobre filtros
moleculares) (175 ml), se añadió 6-N-benzoiladenina seguido
de N,O-bistrimetilsililacetamida (25,1 ml, 101,3 mmoles). La
mezcla se sometió a reflujo durante 1 hora y se enfrió hasta la
temperatura ambiente. Se añadió TMS-trifilato (13,9
ml, 76,8 mmoles) y la mezcla se sometió a reflujo durante 5 horas,
se agitó durante la noche a temperatura ambiente, y se sometió a
reflujo por encima de 24 horas (solución
marrón-rojo) y se enfrió hasta la temperatura
ambiente. Se vertió la solución en una solución acuosa saturada
helada de NaHCO_{3} (200 ml) y se agitó durante 5 horas. Se filtró
el precipitado, se separaron las fases y se lavó la fase orgánica
con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (3 x 150 ml), se
secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. Se purificó mediante
cromatografía columna en sílice (con MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un
porcentaje del 1% al 1,55%), proporcionando el compuesto 4D en forma
de sólido ligeramente amarillo en un porcentaje del 68% (18,0 g). El
RMN resultó compatible con los datos descritos en una patente
anterior.
Se disolvió el compuesto 4D (17,9 g.; 26,1
mmoles) en THF (160 ml) y agua (110 ml). Se añadió LiOHxH_{2}O
(5,5 g.; 131 mmoles y se agitó la mezcla durante 3,5 horas a
temperatura ambiente. Se neutralizó la solución con ACOH (\sim6
ml), proporcionando un precipitado. Se filtró el precipitado y se
lavó con agua, proporcionando 5D en forma de sólido
blanco-sucio con un rendimiento del 80% (11,6 g). Se
aisló el compuesto 5D adicional a partir del licor madre mediante
filtración en forma de sólido amarillo (940 mg; 6%). \delta_{H}
(DMSO-d_{6}/CDCl_{3}): 8,63 (1H, s), 8,30 (lH, s), 8,04
(2H, m) 7,53-7,42 (3H, m), 7,25-7,21
(5H, m), 6,10 (1H, s), 4,82 (1H, s), 4,67-4,56 (4H,
m), 4,41 (1H, s), 4,11 (1H, d, J= 7,9 Hz), 3,96 (1H, d,
J=8,1 Hz), 3,04 (s, 3H), \delta_{C}
(DMSO-d^{6}/CDCl_{3}): 165,5, 151,5, 150,8, 150,1, 140,6,
136,6, 133,1, 132,0, 128,2, 128,0, 127,9, 127,6, 127,3, 124,5, 86,0,
84,8, 78,1, 76,6, 71,8, 71,7, 64,7, 37,1.
Se disolvió
(1S,3R,4R,7S)-7-Benciloxi-1-metanosulfoniloximetil-3-(6-N-benzoil-adenina-9-il)-2,5-dioxabiciclo-
[2.2.1]heptano (5D) (11,5 g.; 20,8 mmoles) en DMF anhidro (450 ml). Se añadió benzoato de sodio (5,40 g.; 37,4 mmoles) y se calentó la mezcla hasta los 90ºC durante 7 horas. La solución se enfrió hasta la temperatura ambiente, se filtró, se evaporizó y se coevaporizó con AcCN. Se redisolvió el residuo en diclorometano (150 ml) y se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (150 ml). Se separaron las fases y se lavó la fase orgánica con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml) y una solución hipersalina (100 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó proporcionando 12,5 g de un sólido amarillento. Se recristalizó a partir de EtOH:H_{2}O (1250 ml; 1:1 v/v), proporcionando el compuesto 28 con un rendimiento del 88% (10,63 g). \delta_{H} (DMSO-d_{6}): 11,2 (1H, br s), 8,72 (1H, s), 8,48 (1H, s), 8,06 (2H, m), 7,94 (2H, m), 7,66 (2H, m), 7,54 (4H, m), 7,36-7,26 (5H, m), 6,11 (1 H, s), 4,97 (1 H, s), 4,82 (2H, s), 4,77 (1 H, s), 4,75 (1 H, d, J= 12,4 Hz), 4,69 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,19 (1H, d, J=8,0 Hz), Hz), \delta_{C} (DMSO-d_{6}): 165,3, 150,5, 141,9, 137,7, 133,7, 132,5, 129,3, 129,1, 128,9, 128,6, 128,5, 128,3, 127,7, 127,6, 125,7, 85,9, 85,3, 77,9, 77,1, 72,0, 71,3, 60,6.
[2.2.1]heptano (5D) (11,5 g.; 20,8 mmoles) en DMF anhidro (450 ml). Se añadió benzoato de sodio (5,40 g.; 37,4 mmoles) y se calentó la mezcla hasta los 90ºC durante 7 horas. La solución se enfrió hasta la temperatura ambiente, se filtró, se evaporizó y se coevaporizó con AcCN. Se redisolvió el residuo en diclorometano (150 ml) y se añadió una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (150 ml). Se separaron las fases y se lavó la fase orgánica con una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml) y una solución hipersalina (100 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó proporcionando 12,5 g de un sólido amarillento. Se recristalizó a partir de EtOH:H_{2}O (1250 ml; 1:1 v/v), proporcionando el compuesto 28 con un rendimiento del 88% (10,63 g). \delta_{H} (DMSO-d_{6}): 11,2 (1H, br s), 8,72 (1H, s), 8,48 (1H, s), 8,06 (2H, m), 7,94 (2H, m), 7,66 (2H, m), 7,54 (4H, m), 7,36-7,26 (5H, m), 6,11 (1 H, s), 4,97 (1 H, s), 4,82 (2H, s), 4,77 (1 H, s), 4,75 (1 H, d, J= 12,4 Hz), 4,69 (1H, d, J=11,9 Hz), 4,19 (1H, d, J=8,0 Hz), Hz), \delta_{C} (DMSO-d_{6}): 165,3, 150,5, 141,9, 137,7, 133,7, 132,5, 129,3, 129,1, 128,9, 128,6, 128,5, 128,3, 127,7, 127,6, 125,7, 85,9, 85,3, 77,9, 77,1, 72,0, 71,3, 60,6.
Se suspendió el compuesto 28 (10,6 g.; 18,4
mmoles) en una mezcla de MeOH (100 ml) y hidróxido de amonio (250
ml). Se agitó la solución durante la noche a temperatura ambiente y
se añadió más hidróxido de amonio (100 ml). Se añadió más hidróxido
de amonio (50 ml) y después de 7 horas se agitó la mezcla durante
la noche. Se volvió a añadir más hidróxido de amonio (50 ml) y se
agitó la mezcla durante la noche, se filtró y se secó,
proporcionando el compuesto 27 (6,12 g.; 90%) en forma de sólido
blanco-sucio. \delta_{H}
(DMSO-d_{6}): 8,19 (1H, s), 8,15 (1H, s),
7,33-7,30 (5H, m), 5,97 (1H, s), 5,19 (1H, t), 4,74
(1H, s), 4,63 (2H, s), 4,36 (1H, s), 3,96 (1H, d), 3,83 (3H, m),
\delta_{C} (DMSO-d_{6}): 88,0, 85,4, 77,3,
77,0, 72,1, 71,3, 56,8.
Se suspendió el compuesto 27 (6,0 g.; 16,2
mmoles) en MeOH (100 ml). Se añadió
Pd(OH)_{2}-C (2g) seguido de formato
de amonio (8,2 g.; 130 mmoles) y se calentó la solución hasta los
60ºC. Después de 3 horas se añadió más cantidad de catalizador (1
g.) seguido de formato de amonio (2 g). Después de 4 horas más, se
filtró la solución caliente a través de un papel fino y se lavó con
MeOH hirviendo (500 ml). Se agitó el catalizador en MeOH (200 ml)
durante la noche y se filtró y a continuación se hirvió en
MeOH:H_{2}O (200 ml; 1:1 v/v). La evaporación proporcionó el
compuesto 30 (\sim4 g.; 88%). \delta_{H}
(DMSO-d_{6}): 8,22 (1H, s), 8,15 (1H, s), 7,30
(2H, br s), 5,89 (1H, s), 5,68 (1 H, d, J=4,2 Hz), 5,05 (1H,
t, J=5,8 Hz), 4,41 (1H, s), 4,25 (1H, d, J=3,7 Hz),
3,92 (1H, d, J=7,8 Hz), 3,82 (2H, m), 3,76 (2H, d,
J=7,9 Hz), \delta_{C} (DMSO-d_{6}):
88,6, 85,4, 79,3, 71,5, 70,0, 56,8.
Se coevaporó el compuesto 30 (\sim4 g.; 14,3
mmoles) varias veces con piridina anhidra. Se resuspendió el
compuesto en piridina anhidra (70 ml). Se añadió DMTCI (6,78g.; 20
mmoles), NEt_{3} (2,8 ml; 20 mmoles) y DMAP (44 mg; 0,36 mmoles).
Después de 4,5 horas a temperatura ambiente de añadió TMSCI (9,1 ml;
71,5 mmoles). Después de 45 minutos más se añadió BzCl (8,3 ml; 71,5
mmoles) y se agitó la mezcla durante la noche, se enfrió hasta la
temperatura de 0ºC seguido de la adición de agua (18 ml). Después de
5 minutos, se añadió hidróxido de amonio ((solución acuosa) del 25%
al 32%) (35 ml). Se eliminó el baño refrigerante y se agitó al
mezcla durante 35 minutos y se evaporó. Se redisolvió el residuo en
diclorometano (150 ml) y en una solución hipersalina (150 ml). Se
separaron las fases y se lavó la fase orgánica en una solución
hipersalina (150 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y se evaporó. Se
purificó (2 veces) mediante cromatografía columna en gel de sílice
(MeOH en CH_{2}Cl_{2} a un porcentaje del 0,5% al 2,5% con
NEt_{3} al 0,5%), proporcionando el compuesto 31 en forma de
sólido ligeramente amarillo, el cual se disolvió en diclorometano (5
ml) y se precipitó en hexanos de vórtice rápido (400 ml) y se
filtró. Rendimiento (7,0 g.; 63% a partir del compuesto 27). El RMN
resultó compatible con datos anteriormente descritos (A. A. Koshkin,
S. K. Singh, P. Nielsen, V. K. Rajwanshi, R. Kumar, M. Meldgaard, C.
E. Olsen y J. Wengel; Tetrahedron, 1998, 54,
3607-3630).
Ejemplo
14
Se añadió BSA (5,3 ml, 21,8 mmoles) a un mezcla
del compuesto 3 (4,65 g, 9,13 mmoles) e hipoxantina (1,5 g, 10,9
mmoles) en 1,2-dicloroetano anhidro (45 ml) y la
mezcla se sometió a reflujo durante 1 hora. Se añadió triflato de
trimetilsililo (1,8 ml, 10,0 mmoles) gota a gota, la mezcla se
sometió a reflujo durante 6 horas y se enfrió hasta la temperatura
ambiente. Se añadió diclorometano (50 ml), se lavó la solución con
una solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (2 x 100 ml), se secó
(Na_{2}SO_{4}), y se concentró bajo presión reducida. Se
purificó el residuo mediante cromatografía columna en gel de sílice
(metanol/diclorometano al porcentaje del 1,4% al 6% como eluyente),
proporcionando 4,5 g (84%) de material sólido blanco que consistía
de dos isómeros (ca. una relación 1:4 mediante
^{1}H-MR), el cual se utilizó síntesis posteriores
sin purificación adicional. Para el compuesto 4E:
\delta_{H} (CD_{3}Cl) 12,83 (1 H, br s,
NH), 8,32, 7,95 (2H, 2 x s, 8-H,
2-H), 7,40-7,31 (5H, m, Bn), 6,18
(1H, d, J3,5,1'-H), 6,00 (1H, dd,
J'5,9, J''3,5, 2'-H), 5,03 (1H, d,
J6,0,3'-H), 4,65 (2H, s), 4,64 (1 H, d,
J 11,0), 4,47 (1H, d, J 10,6), 4,42 (1H, d, J
10,5), 4,39 (1H, d, J11,4), 3,03, 2,96 (2 x 3H, 2 s,
metanosulfonilos), 2,11 (3H, s, acetilo), \delta_{C}
(CD_{3}Cl) 169,5 (CH_{3}CO), 158,4 (C-6), 148,0
(C-4), 145,8 (C-2), 139,6
(C-8), 136,4, 128,5, 128,4, 128,3, (Bn), 125,4
(C-5), 87,8, 84,2, 77,6, 74,6, 73,8, 67,6, 67,4
(ribosa, Bn), 37,6, 37,4 (metanosulfonilos), 20,5 (acetilo).
Se añadió una solución acuosa 1 M de NaOH a una
solución del compuesto 4E en 1,4-dioxano (80 ml) y
se agitó la mezcla durante 1 hora. Se añadió ácido acético (20 ml),
se concentró la solución bajo presión reducida hasta ca. la mitad de
su volumen y se enfrió en un baño de hielo. El precipitado formado
se filtró, se lavó con agua helada y se secó en el vacío.
Rendimiento: 2,4 g (73%) de material sólido blanco que consistía de
dos isómeros (ca. 1:10 mediante ^{1}H-RMN). Para
el compuesto 21:
\delta_{H}
(CD_{3}Cl/DMSO-d_{6}) 12,31 (1 H, br s, NH),
7,92, 7,86 (2H, 2 x s, 8-H, 2-H),
7,32-7,28 (5H, m, Bn), 6,02 (1 H, s,
1'-H), 4,75 (1 H, s, 2'-H), 4,65
(2H, s), 4,63 (1 H, d, J 7,5), 4,60 (1 H, d, J 7,2),
4,31 (1 H, s, 3'-H), 4,18 (1 H, d, J 8,1),
4,01 (1H, d, J 8,1), 3,08 (3H, 2 s, metanosulfonilo),
\delta_{C} (CD_{3}Cl/DMSO-d_{6}) 156,7
(C-6), 146,6 (C-4), 144,9
(C-2), 136,4, 136,3, 127,9, 127,6, 127,3,
(C-8, Bn), 125,0 (C-5), 85,9, 84,7,
77,0, 76,7, 71,8, 71,7, 64,5 (ribosa, Bn), 37,1,
(metanosulfonilo).
Se agitó una mezcla del compuesto 21 (dos
isómeros; 1,95 g, 4,36 mmoles) y benzoato de sodio (0,94 g, 6,54
mmoles) en DMF anhidro (100 ml) a 80ºC durante 24 horas. Se enfrió
la solución hasta la temperatura ambiente, se filtró y se concentró
en un aceite. Se separó el residuo mediante cromatografía columna en
gel de sílice (metanol/diclorometano al porcentaje del 2% al 3,5%
como eluyente), proporcionando 1,5 g (73%) del compuesto 22 en forma
de material sólido blanco.
\delta_{H} (CD_{3}Cl) 13,08 (1 H, br s,
NH), 8,23, (1 H, s 8-H), 7,98 (2H, m, Bz), 7,89 (1
H, s, 2-H), 7,60 (1H, m, Bz), 7,46 (2H, m, Bz),
7,25-7,23 (5H, m, Bn), 6,05 (1H, s,
1'-H), 4,83 (1 H, s, 2'-H), 4,80
(1H, d, J 12,6), 4,68 (1H, d, J 11,9), 4,67 (1H, d,
J 12,8), 4,57 (1H, d, J 11,7), 4,28 (1H, d,
J8,2), 4,27 (1H, s, 3'-H), 4,10 (1H, d,
J7,9), \delta_{C} (CD_{3}Cl) 165,7 (Bz), 158,8
(C-6), 147,6 (C-4), 145,3
(C-2), 137,2 (C-8), 136,4, 133,4,
129,4, 129,0, 128,5, 128,4, 128,1, 127,7 (Bz, Bn), 125,1
(C-5), 86,6, 85,8, 77,1, 77,0, 72,5, 72,4, 59,6
(ribosa, Bn).
Se añadió NaOH 2M (2 ml) a una solución del
compuesto 22 en metanol (20 ml) y 15 minutos más tarde se añadió
ácido acético (2 ml). Se enfrió la mezcla en un baño de hielo, el
precipitado se filtró, se lavó con agua y se secó en el vacío.
Rendimiento: 0,69 g (85%) del compuesto 23 en forma de material
sólido blanco.
\delta_{H} (DMSO-d_{6})
8,16, (1H, s 8-H), 8,06 (1H, s,
2-H), 7,30-7,20 (5H, m, Bn), 5,95
(1H, s, 1'-H), 4,69 (1H, s, 2'-H),
4,63 (2H, s, Bn), 4,28 (1 H, s, 3'-H), 3,95 (1 H, d,
J 7,7), 3,83 (3H, m), \delta_{C}
(DMSO-d_{6}) 156,6 (C-6), 147,3
(C-4), 146,1 (C-2), 137,9
(C-8), 137,3, 128,3, 127,6, 127,5 (Bn), 124,5
(C-5), 88,2, 85,4, 77,0, 72,1, 71,3, 56,7 (ribosa,
Bn).
Se añadió cloruro-DMTF (0,7 g,
2,07 mmoles) a una suspensión del compuesto 23 en piridina anhidra y
se agitó la mezcla a 80ºC (baño de aceite) durante 2 horas. Se
diluyó la solución con acetato de etilo (150 ml), se lavó con
NaHCO_{3} (200 ml), agua (2x200 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}) y
se concentró bajo presión reducida. Se purificó el residuo mediante
HPLC en gel de sílice (metanol/diclorometano al porcentaje del 1% al
4% como eluyente conteniendo piridina al 0,5%), proporcionando 1,02
g (92%) del compuesto 24 en forma de material sólido blanco.
\delta_{H} (CD_{3}Cl) 13,15 (1H, br s,
NH), 8,23, (1 H, s 8-H), 8,15 (1H, s,
2-H), 7,45 (m, 2H, DMT), 7,36-7,12
(12H, m, Bn, DMT), 6,86-6,80 (m, 4H, DMT), 6,07 (1H,
s, 1'-H), 4,71 (1H, s, 2'-H), 4,56
(1H, d, J 11,7, Bn), 4,61 (1H, d, J11,7, Bn), 4,32 (1
H, s, 3'-H), 4,03 3,95 (1H, d, J 7,8), 3,95
(1 H, d, J 7,8), 3,78, 3,77 (6H, 2 x s, DMT), 3,58 (1 H, d,
J 10,9), 3,45 (1 H, d, J 11,0), \delta_{C}
(CD_{3}Cl) 159,1, 158,5, 147,6, 145,1, 144,2, 137,5, 136,7, 135,3,
135,2, 129,9, 129,8, 128,9, 128,3, 128,1, 127,9, 127,6, 126,9,
125,2, 113,2 (DMT, Bn, hipoxantina), 4 (ribosa, Bn), 55,1 (DMT).
Se añadió formato de sodio (1,2 g) a una mezcla
del compuesto 24 (1,02 g, 0,52 mmoles) y Pd/C (10%, 0,5 g) en
metanol (20 ml). La mezcla se sometió a reflujo durante 20 minutos,
se enfrió hasta la temperatura ambiente y se diluyó con
diclorometano (20 ml). Se filtró el catalizador y se concentró el
filtrado bajo presión reducida, proporcionando un material sólido
blanco, el cual se cristalizó a partir de etanol/agua al 50%,
proporcionando 680 mg (77%) del compuesto 25.
\delta_{H} (DMSO-d_{6})
8,12, (1H, s 8-H), 8,09 (1H, s,
2-H), 7,43-7,24 (m, 9H, DMT), 6,90
(m, 4H, DMT), 5,97 (1H, s, 1'-H), 4,44 (1H, s,
2'-H), 4,33 (1 H, s, 3'-H), 3,97
(1H, d, J 7,5, Bn), 3,91 (1 H, d, J 7,7), 3,74 (6H, s,
DMT), 3,55 (1 H, d, J 10,6), \delta_{C}
(DMSO-d_{6}) 158,2, 156,6, 147,3, 146,1, 144,8,
137,1, 135,5, 135,3, 129,8, 127,9, 127,7, 126,8, 124,6, 113,3 (DMT,
hipoxantina), 87,1, 85,6, 79,3, 71,8, 70,5, 59,9 (ribosa), 55,1
(DMT).
Se añadieron cloruro de tionilo (2,1 ml, 29
mmoles) y DMF (1 ml) a una solución del compuesto 22 (1,24 g, 2,62
mmoles) en diclorometano. Se agitó la mezcla a 30ºC (baño de aceite)
durante la noche, se diluyó con acetato de etilo (50 ml), se lavó
con NaHCO_{3} (solución acuosa saturada, 100 ml) y con agua (2 x
50 ml), se secó (Na_{2}SO_{4}), y se concentró bajo presión
reducida. Se purificó un residuo sólido blanco mediante
cromatografía columna en gel de sílice utilizando
metanol/diclorometano al porcentaje del 0% al 2% como eluyente.
Rendimiento: 1,2 g (93%) del compuesto 26 en forma de material
sólido blanco.
\delta_{H} (CD_{3}Cl) 8,69 (1H, s,
8-H), 8,16 (1H, s, 2-H), 7,95 (2H,
m, Bz), 7,62 (1H, m, Bz), 7,46 (2H, m, Bz),
7,25-7,20 (5H, m, Bn), 6,11 (1H, s,
1'-H), 4,93 (1H, s, 2'-H), 4,82 (1H,
d, J 12,7), 4,68 (1H, d, J 11,9), 4,65 (1H, d,
J 12,7), 4,57 (1H, d, J 11,9), 4,31 (1H, d,
J8,0), 4,26 (1H, s, 3'-H), 4,12 (1H, d,
J8,0), \delta_{C} (CD_{3}Cl) 165,7 (Bz), 152,0, 151,3,
150,1, 142,4, 136,2, 133,5, 132,0, 129,4, 129,0, 128,5, 128,4,
128,2, 127,7, 86,9, 86,0, 77,1, 76,7, 72,6, 72,4, 59,5.
Se añadió NH_{4}OH al 32% (20 ml) a una
solución del compuesto 26 (1,2 g, 2,43 mmoles) en THF (20 ml) y se
agitó la mezcla durante 48 horas a temperatura ambiente. Se
eliminaron parcialmente los solventes bajo presión reducida (ca. la
mitad del volumen) y se enfrió la solución en un baño de hielo. Se
recogió el precipitado y se recristalizó a partir de agua,
proporcionando el compuesto 27 (450 mg, 50,3%) en forma de material
sólido blanco.
\delta_{H} (DMSO-d_{6})
8,17, (1H, s 8-H), 8,13 (1H, s,
2-H), 7,30-7,20 (5H, m, Bn), 5,95 (1
H, s, 1'-H), 5,15 (1H, t, J5,1,
5'-OH), 4,72 (1H, s, 2'-H), 4,61
(2H, s, Bn), 4,34 (1H, s, 3'-H), 3,94 (1H, d,
J7,7), 3,81 (3H, m), \delta_{C}
(DMSO-d_{6}) 156,0 (C-6), 152,7
(C-4), 148,6 (C-2), 137,9
(C-8), 128,2, 127,6, 127,5 (Bn), 119,0
(C-5), 77,0, 72,0, 71,2, 56,8 (ribosa, Bn).
Claims (50)
1. Procedimiento para la síntesis de un nuevo
intermediario con la fórmula general II:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, tetrahidropiran-2-ilo
opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y
arilo opcionalmente
sustituido;
cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo
C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, o R_{2} y
R_{3} representen conjuntamente alquileno
C_{3-7}; a condición de que R_{2} y R_{3} no
sean ambos hidrógeno y
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente
sustituido;
comprendiendo dicho procedimiento la etapa
siguiente:
tratamiento de un compuesto (en lo sucesivo
denominado "material de partida") con la fórmula general I:
en la que R_{1}, R_{2} y
R_{3} son tal como se ha indicado
anteriormente;
con la fórmula R'SO_{2}X, en la que R' se
selecciona de entre bencilo, o-, m-, y
p-metilbencilo, 2-clorobencilo,
4-fenilbencilo,
tetrahidropiran-2-ilo, benzoilo y
fenilo.
2. Procedimiento según la reivindicación 1, en
el que R_{1} se selecciona de entre bencilo, o-, m-,
y p-metilbencilo, 2-clorobencilo,
4-fenilbencilo,
tetrahidropiran-2-ilo, benzoilo y
fenilo.
3. Procedimiento según la reivindicación 1 ó
2, en el que cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
representa independientemente hidrógeno, metilo, trifluorometilo,
etilo, propilo, iso-propilo, butilo, t-butilo,
pentilo, ciclopentilo, hexilo, ciclohexilo, fenilo, bencilo,
feniletilo, o-, m-, y p-metilbencilo,
2-clorobencilo, o R_{2} y R_{3} representan
conjuntamente 1,5-pentileno.
4. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 3, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{2} y R_{3} representa independientemente hidrógeno, metilo,
fenilo, bencilo o feniletilo.
5. Procedimiento según las reivindicaciones 1
a 4, en el que R' se selecciona de entre metilo, trifluorometilo,
etilo, 2,2,2-trifluoroetilo, propilo,
iso-propilo, butilo, nonafluorobutilo, pentilo, ciclopentilo,
hexilo, ciclohexilo, bencilo, o-, m- o
p-metilbencilo, 2-clorobencilo, fenilo,
o-, m- o p-bromofenilo, p-nitrofenilo, y
X se selecciona de entre halógeno, tal como fluoro, cloro, bromo y
yodo.
6. Procedimiento según la reivindicación 5, en
el que R'SO_{2}X se selecciona de entre cloruro de
metanosulfonilo, cloruro de trifluorometanosulfonilo, cloruro de
etanosulfonilo, 2,2,2-cloruro de
trifluoroetanosulfonilo, cloruro de propanosulfonilo, cloruro de
iso-propanosulfonilo, cloruro de butanosulfonilo, cloruro de
nonafluorobutanosulfonilo, cloruro de ciclopentanosulfonilo, cloruro
de hexanosulfonilo, cloruro de ciclohexanosulfonilo, cloruro de
\alpha-toluenosulfonilo, cloruro de
p-toluenosulfonilo, cloruro de p-bromobenzenosulfonilo
y cloruro de p-nitrobenzenosulfonilo.
7. Procedimiento según la reivindicación 6, en
el que R'SO_{2}X se selecciona de entre cloruro de
metanosulfonilo, cloruro de trifluorometanosulfonilo, cloruro de
etanosulfonilo, 2,2,2-cloruro de
trifluoroetanosulfonilo, cloruro de nonafluorobutanosulfonilo,
cloruro de \alpha-toluenosulfonilo, cloruro de
p-toluenosulfonilo.
8. Procedimiento según la reivindicación 7, en
el que R'SO_{2}X es cloruro de metanosulfonilo.
\newpage
9. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 8, en el que la proporción entre el compuesto I
y R'SO_{2}X se encuentra comprendida en el intervalo entre 1:2 y
1:10.
10. Procedimiento según la reivindicación 9, en
el que la proporción entre el compuesto I y R'SO_{2}X se encuentra
comprendida en el intervalo entre 1:2 y 1:5.
11. Procedimiento según la reivindicación 10,
en el que la proporción entre el compuesto I y R'SO_{2}X se
encuentra comprendida en el intervalo entre 1:2 y 1:4.
12. Procedimiento según la reivindicación 11,
en el que la proporción entre el compuesto I y R'SO_{2}X se
encuentra comprendida en el intervalo entre 1:2,5 y 1:3,5.
13. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 7, en el que el compuesto I se trata
posteriormente con dos haluros de sulfonilo diferentes,
R^{III}SO_{2}X y R^{IV}SO_{2}X, en los que R^{III} y
R^{IV} se seleccionan independientemente de entre el grupo de
sustituyentes definidos para R', a condición de que R^{III} y
R^{IV} no representen el mismo grupo, y X sea un halógeno.
14. Procedimiento según la reivindicación 13,
en el que el compuesto I se trata primero con R^{III}SO_{2}X en
la proporción 1:1 a 1:1,5, proporcionando el compuesto II, en el que
R_{4} es R^{III}SO_{2}O- y R_{5} es hidróxilo, y a
continuación, el compuesto II formado se trata con R^{IV}SO_{2}X
en la proporción 1:1 a 1:2,5, proporcionando el compuesto II en el
que R_{4} es R^{III}SO_{2}O- y R_{5} es
R^{IV}SO_{2}O-.
15. Procedimiento según las reivindicaciones 1
a 4, en el que el tratamiento del compuesto I con el haluro de
sulfonilo se lleva a cabo en presencia de una base, tal como
piridina, 4-dimetilaminopiridina, trietilamina e
hidróxido de sodio.
16. Procedimiento según la reivindicación 15,
en el que el tratamiento del compuesto I con el haluro de sulfonilo
se lleva a cabo en presencia de piridina,
4-dimetilamino-piridina.
17. Procedimiento según la reivindicación 16,
en el que el tratamiento del compuesto I con el haluro de sulfonilo
se lleva a cabo en presencia de piridina.
18. Procedimiento según cualqueira de las
reivindicaciones 1 a 7, en el que el tratamiento del compuesto I con
el haluro de sulfonilo se lleva a cabo en presencia de un solvente
seleccionado de entre, piridina, tetrahidrofurano, tolueno, xileno,
benceno, éter, acetato de etilo, acetonitrilo, trietilamina,
N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, diclorometano, y
1,2-dicloroetano.
19. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 15 a 18, en el que la base y el solvente están
constituidos por la misma sustancia.
20. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 19, en el que el tratamiento del compuesto I
con el haluro de sulfonilo se lleva a cabo a una temperatura
comprendida entre -30ºC y 40ºC.
21. Procedimiento según la reivindicación 20,
en el que el tratamiento del compuesto I con el haluro de sulfonilo
se lleva a cabo a una temperatura comprendida entre -5ºC y 30ºC.
22. Procedimiento según la reivindicación 21,
en el que el tratamiento del compuesto I con el haluro de sulfonilo
se lleva a cabo preferentemente a una temperatura comprendida entre
0ºC y 25ºC.
23. Procedimiento según cualqueira de las
reivindicaciones 1 a 22, en el que R_{1} es bencilo.
24. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 23, en el que R_{2} y R_{3} se seleccionan
de entre metilo, etilo, propilo, iso-propilo, fenilo,
bencilo, feniletilo, o R_{2} y R_{3} representan conjuntamente
1,5-pentileno.
25. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 24, en el que R_{2} y R_{3} representan
ambos metilo.
26. Procedimiento según cualquiera de las
reivindicaciones 1 a 25, en el que R_{1} representa bencilo y
R_{2} y R_{3} representan ambos metilo.
27. Compuesto con la fórmula general II:
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, tetrahidropiran-2-ilo
opcionalmente sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y
arilo opcionalmente
sustituido;
cada uno de los sustituyentes R_{2} y R_{3}
se selecciona independientemente de entre hidrógeno, alquilo
C_{1-6} opcionalmente sustituido, arilo
opcionalmente sustituido, y arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, o R_{2} y
R_{3} representen conjuntamente alquileno
C_{3-7}; a condición de que R_{2} y R_{3} no
sean ambos hidrógeno y
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente
sustituido.
28. Compuesto según la reivindicación 27, en el
que R_{1} se selecciona de entre bencilo, o-, m-, y
p-metilbencilo, 2-clorobencilo,
tetrahidropiranilo, benzoilo y fenilo.
29. Compuesto según la reivindicación 28, en el
que R_{1} representa bencilo.
30. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 27 a 29, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{2} y R_{3} representa independientemente hidrógeno, metilo,
trifluorometilo, etilo, propilo, iso-propilo,
butilo, t-butilo, pentilo, ciclopentilo, hexilo, ciclohexilo,
fenilo, bencilo, feniletilo, o-, m-, y
p-metilbencilo, 2-clorobencilo, o R_{2} y
R_{3} se seleccionan conjuntamente de entre
1,3-propileno, 1,4-butileno y
1,5-pentileno.
31. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 27 a 30, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{2} y R_{3} se selecciona independientemente de entre
hidrógeno, metilo, fenilo, bencilo y feniletilo.
32. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 27 a 31, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{2} y R_{3} es metilo.
33. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 27 a 32, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{4} y R_{5} se selecciona de entre metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi,
2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi, propanosulfoniloxi,
iso-propanosulfoniloxi, butanosulfoniloxi,
nonafluorobutanosulfoniloxi, pentanosulfoniloxi,
ciclopentanosulfoniloxi, hexanosulfoniloxi, ciclohexanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
2-cloro-\alpha-toluenosulfoniloxi,
o-, m-, p-toluenosulfoniloxi,
benzenosulfoniloxi, o-, m-,
p-bromobenzenosulfoniloxi, y o-, m-,
p-nitrobenzenosulfoni-
loxi.
loxi.
34. Compuesto según la reivindicación 33, en el
que cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5} se selecciona de
entre metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi, y p-bromobenzenosulfoniloxi.
35. Compuesto según la reivindicación 34, en el
que los sustituyentes R_{4} y R_{5} son metanosulfoniloxi.
36. Compuesto con la fórmula general III:
\vskip1.000000\baselineskip
en la que R_{1} se selecciona de
entre arilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido,
tetrahidropiran-2-iloopcionalmente
sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido y arilo
opcionalmente sustituido;
y
cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5}
es independientemente R'SO_{2}O-, en la que R' se selecciona de
entre alquilo opcionalmente sustituido y arilo opcionalmente
sustituido; y
R_{6} se selecciona de entre hidrógeno,
carbonilo (alquilo C_{1-6}) opcionalmente
sustituido, arilocarbonilo opcionalmente sustituido, arilo (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido, (alquilo
C_{1-6}) opcionalmente sustituido y
tri(alquil/aril)sililo; y
R_{7} se selecciona de entre carboniloxi
(alquilo C_{1-6}) opcionalmente sustituido, alcoxi
C_{1-6} opcionalmente sustituido, halógeno,
ariltio opcionalmente sustituido, alquiltio
C_{1-6} opcionalmente sustituido, y ariloxi
opcionalmente sustituido.
37. Compuesto según la reivindicación 36, en el
que R_{1} se selecciona de entre bencilo, o-, m-, y
p-metilbencilo, 2-clorobencilo,
tetrahidropiran-2-ilo, benzoilo,
fenilo.
38. Compuesto según la reivindicación 31, en el
que R_{1} es bencilo.
39. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 36 a 38, en el que cada uno de los sustituyentes
R_{4} y R_{5} se selecciona de entre metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi,
2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi, propanosulfoniloxi,
iso-propanosulfoniloxi, butanosulfoniloxi,
nonafluorobutanosulfoniloxi, pentanosulfoniloxi,
ciclopentanosulfoniloxi, hexanosulfoniloxi, ciclohexanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
2-cloro-\alpha-toluenosulfoniloxi,
o-, m-, p-toluenosulfoniloxi,
benzenosulfoniloxi, o-, m-,
p-bromobenzenosulfoniloxi, y o-, m-,
p-nitrobenzenosulfoni-
loxi.
loxi.
40. Compuesto según la reivindicación 39, en el
que cada uno de los sustituyentes R_{4} y R_{5} se selecciona de
entre metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi, y p-bromobenzenosulfoniloxi.
41. Compuesto según la reivindicación 40, en el
que los sustituyentes R_{4} y R_{5} son metanosulfoniloxi.
42. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 36 a 41, en el que R_{6} representa acetilo,
benzoilo, m-triflurometilbenzoilo y bencilo.
43. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 36 a 42, en el que R_{7} representa acetiloxi,
metoxi, etoxi, cloruro, fluoruro, bromuro, yoduro y
-SC_{6}H_{5}.
44. Compuesto según cualquiera de las
reivindicaciones 36 a 43, en el que R_{1} representa bencilo y
R_{4} y R_{5} se seleccionan ambos de entre metanosulfoniloxi,
trifluorometanosulfoniloxi, etanosulfoniloxi,
2,2,2-trifluoroetanosulfoniloxi, butanosulfoniloxi,
nonafluorobutanosulfoniloxi,
\alpha-toluenosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi, benzenosulfoniloxi,
p-bromobenzenosulfoniloxi, y
p-nitrobenzenosulfoniloxi.
45. Compuesto según la reivindicación 44, en el
que R_{4} y R_{5} se seleccionan ambos de entre
metanosulfoniloxi, trifluorometanosulfoniloxi,
p-toluenosulfoniloxi y p-bromobenzenosulfoniloxi.
46. Compuesto según la reivindicación 45, en el
que R_{4} y R_{5} se seleccionan ambos de entre
metanosulfoniloxi y p-toluenosulfoniloxi.
47. Compuesto según la reivindicación 46, en el
que R_{4} y R_{5} representan ambos metanosulfoniloxi.
48. Compuesto según la reivindicación 46, en el
que R_{1} representa bencilo, R_{4} y R_{5} representan
metanosulfoniloxi, R_{6} representa acetilo, y R_{7} representa
acetiloxi.
49. Utilización del compuesto de la fórmula II,
tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 27 a 35,
para la preparación de [2.2.1]biciclo nucleósidos y derivados
de los mismos.
50. Utilización del compuesto de la fórmula
III, tal como se define en cualquiera de las reivindicaciones 36 a
48, para la preparación de [2.2.1]biciclo nucleósidos y
derivados de los mismos.
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DKPA199900407 | 1999-03-24 | ||
| DK199900407 | 1999-03-24 | ||
| DK200000099 | 2000-01-21 | ||
| DKPA200000099 | 2000-01-21 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2269113T3 true ES2269113T3 (es) | 2007-04-01 |
Family
ID=26063935
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES00912410T Expired - Lifetime ES2269113T3 (es) | 1999-03-24 | 2000-03-24 | Sintesis mejorada de -2.2.1 / biciclo-nucleosidos. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6639059B1 (es) |
| EP (1) | EP1163250B1 (es) |
| JP (1) | JP4768132B2 (es) |
| AT (1) | ATE332909T1 (es) |
| AU (1) | AU3418800A (es) |
| DE (1) | DE60029314T2 (es) |
| DK (1) | DK1163250T3 (es) |
| ES (1) | ES2269113T3 (es) |
| IL (1) | IL145496A0 (es) |
| WO (1) | WO2000056746A2 (es) |
Families Citing this family (195)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6734291B2 (en) | 1999-03-24 | 2004-05-11 | Exiqon A/S | Synthesis of [2.2.1]bicyclo nucleosides |
| DE60029314T2 (de) * | 1999-03-24 | 2007-07-12 | Exiqon A/S | Verbesserte Synthese für -2.2.1. I Bicyclo-Nukleoside |
| CA2402319A1 (en) | 2000-03-14 | 2001-09-20 | Active Motif | Oligonucleotide analogues, methods of synthesis and methods of use |
| US6962906B2 (en) | 2000-03-14 | 2005-11-08 | Active Motif | Oligonucleotide analogues, methods of synthesis and methods of use |
| EP1334109B1 (en) * | 2000-10-04 | 2006-05-10 | Santaris Pharma A/S | Improved synthesis of purine locked nucleic acid analogues |
| WO2003020739A2 (en) | 2001-09-04 | 2003-03-13 | Exiqon A/S | Novel lna compositions and uses thereof |
| US20030166282A1 (en) | 2002-02-01 | 2003-09-04 | David Brown | High potency siRNAS for reducing the expression of target genes |
| US20060009409A1 (en) | 2002-02-01 | 2006-01-12 | Woolf Tod M | Double-stranded oligonucleotides |
| EP3415625A1 (en) | 2002-02-01 | 2018-12-19 | Life Technologies Corporation | Double-stranded oligonucleotides |
| SI2264172T1 (sl) | 2002-04-05 | 2017-12-29 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Oligomerne spojine za modulacijo izražanja HIF-1alfa |
| US20040033602A1 (en) * | 2002-06-12 | 2004-02-19 | Ambion, Inc. | Methods and compositions relating to polypeptides with RNase III domains that mediate RNA interference |
| US20040248094A1 (en) * | 2002-06-12 | 2004-12-09 | Ford Lance P. | Methods and compositions relating to labeled RNA molecules that reduce gene expression |
| US20040219565A1 (en) | 2002-10-21 | 2004-11-04 | Sakari Kauppinen | Oligonucleotides useful for detecting and analyzing nucleic acids of interest |
| EP2112229A3 (en) | 2002-11-25 | 2009-12-02 | Sequenom, Inc. | Methods for identifying risk of breast cancer and treatments thereof |
| MXPA05008319A (es) | 2003-02-10 | 2006-02-28 | Santaris Pharma As | Compuestos oligomericos para la modulacion de la expresion de survivina. |
| US7713738B2 (en) | 2003-02-10 | 2010-05-11 | Enzon Pharmaceuticals, Inc. | Oligomeric compounds for the modulation of survivin expression |
| DK1606406T4 (da) | 2003-03-21 | 2013-12-16 | Santaris Pharma As | Short Interfering RNA (siRNA) Analogues |
| ES2385828T3 (es) | 2003-06-20 | 2012-08-01 | Exiqon A/S | Sondas, bibliotecas y kits para análisis de mezclas de ácidos nucleicos y procedimientos para construirlos |
| AU2004303464B2 (en) | 2003-12-23 | 2009-10-01 | Santaris Pharma A/S | Oligomeric compounds for the modulation of BCL-2 |
| US8192937B2 (en) | 2004-04-07 | 2012-06-05 | Exiqon A/S | Methods for quantification of microRNAs and small interfering RNAs |
| WO2006085964A2 (en) | 2004-06-30 | 2006-08-17 | Applera Corporation | Log-linear amplification |
| WO2006048262A2 (en) * | 2004-11-04 | 2006-05-11 | Roche Diagnostics Gmbh | Classification of acute myeloid leukemia |
| AU2005304112B2 (en) | 2004-11-09 | 2009-06-04 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Potent LNA oligonucleotides for the inhibition of HIF-1a expression |
| WO2006050732A2 (en) | 2004-11-09 | 2006-05-18 | Santaris Pharma A/S | Lna oligonucleotides and the treatment of cancer |
| US7842794B2 (en) | 2004-12-17 | 2010-11-30 | Roche Molecular Systems, Inc. | Reagents and methods for detecting Neisseria gonorrhoeae |
| US20060142228A1 (en) * | 2004-12-23 | 2006-06-29 | Ambion, Inc. | Methods and compositions concerning siRNA's as mediators of RNA interference |
| EP1838870A2 (en) | 2004-12-29 | 2007-10-03 | Exiqon A/S | NOVEL OLIGONUCLEOTIDE COMPOSITIONS AND PROBE SEQUENCES USEFUL FOR DETECTION AND ANALYSIS OF MICRORNAS AND THEIR TARGET MRNAs |
| US7838502B2 (en) | 2005-05-06 | 2010-11-23 | University Of Massachusetts Medical School | Compositions and methods to modulate H. influenzae pathogenesis |
| US8067208B2 (en) | 2005-06-30 | 2011-11-29 | Roche Molecular Systems, Inc. | Probes and methods for hepatitis C virus typing using multidimensional probe analysis |
| EP3000480A1 (en) | 2005-12-01 | 2016-03-30 | ProNAi Therapeutics, Inc. | Cancer therapies and pharmaceutical compositions used therein |
| WO2007087113A2 (en) | 2005-12-28 | 2007-08-02 | The Scripps Research Institute | Natural antisense and non-coding rna transcripts as drug targets |
| US7296313B2 (en) * | 2006-01-13 | 2007-11-20 | Matthaus Hense | Inflatable knee pillow having thin profile and foldability when deflated |
| ES2556128T3 (es) | 2006-03-23 | 2016-01-13 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | ARN interfiriente pequeño internamente segmentado |
| NZ571569A (en) | 2006-04-03 | 2011-09-30 | Santaris Pharma As | Pharmaceutical compositions comprising anti miRNA antisense oligonucleotides |
| CA2649045C (en) | 2006-04-03 | 2019-06-11 | Santaris Pharma A/S | Pharmaceutical composition comprising anti-mirna antisense oligonucleotides |
| RU2009102155A (ru) | 2006-06-30 | 2010-08-10 | Апплера Корпорейшн (Us) | Способы анализирования связывающих взаимодействий |
| US8188255B2 (en) | 2006-10-20 | 2012-05-29 | Exiqon A/S | Human microRNAs associated with cancer |
| WO2008046911A2 (en) | 2006-10-20 | 2008-04-24 | Exiqon A/S | Novel human micrornas associated with cancer |
| WO2008086807A2 (en) | 2007-01-19 | 2008-07-24 | Exiqon A/S | Mediated cellular delivery of lna oligonucleotides |
| WO2008113830A1 (en) | 2007-03-22 | 2008-09-25 | Santaris Pharma A/S | Rna antagonist compounds for the inhibition of apo-b100 expression |
| DK2149605T3 (da) | 2007-03-22 | 2013-09-30 | Santaris Pharma As | Korte RNA antagonist forbindelser til modulering af det ønskede mRNA |
| WO2008153933A2 (en) | 2007-06-06 | 2008-12-18 | Avi Biopharma, Inc. | Soluble her2 and her3 splice variant proteins, splice-switching oligonucleotides, and their use in the treatment of disease |
| US8097422B2 (en) | 2007-06-20 | 2012-01-17 | Salk Institute For Biological Studies | Kir channel modulators |
| WO2009027978A1 (en) | 2007-08-30 | 2009-03-05 | Hadasit Medical Research Services & Development Ltd. | NUCLEIC ACID SEQUENCES COMPRISING NF-ϰB BINDING SITE WITHIN O(6)-METHYLGUANINE-DNA-METHYLTRANSFERASE (MGMT) PROMOTER REGION AND USES THEREOF FOR THE TREATMENT OF CANCER AND IMMUNE-RELATED DISORDERS |
| EP2548962B1 (en) | 2007-09-19 | 2016-01-13 | Applied Biosystems, LLC | Sirna sequence-independent modification formats for reducing off-target phenotypic effects in rnai, and stabilized forms thereof |
| WO2009043353A2 (en) | 2007-10-04 | 2009-04-09 | Santaris Pharma A/S | Micromirs |
| EP2212437A4 (en) | 2007-11-07 | 2011-09-28 | Univ British Columbia | MICROFLUIDIC DEVICE AND METHOD OF USING THE DEVICE |
| ES2916498T3 (es) | 2007-12-06 | 2022-07-01 | Genalyte Inc | Método para identificar una secuencia de nucleótidos en una especie desconocida de ácido nucleico; y dispositivo para llevar a cabo el método |
| EP3699291A1 (en) | 2008-01-17 | 2020-08-26 | Sequenom, Inc. | Single molecule nucleic acid sequence analysis processes and compositions |
| US8404659B2 (en) | 2008-03-07 | 2013-03-26 | Santaris Pharma A/S | Pharmaceutical compositions for treatment of MicroRNA related diseases |
| US10150990B2 (en) | 2008-04-21 | 2018-12-11 | Roche Molecular Systems, Inc. | Ribonucleotide tag nucleic acid detection |
| CA2635187A1 (en) * | 2008-06-05 | 2009-12-05 | The Royal Institution For The Advancement Of Learning/Mcgill University | Oligonucleotide duplexes and uses thereof |
| ES2575005T3 (es) | 2008-06-13 | 2016-06-23 | Codexis, Inc. | Método de síntesis de variantes de polinucleótidos |
| US20090312196A1 (en) | 2008-06-13 | 2009-12-17 | Codexis, Inc. | Method of synthesizing polynucleotide variants |
| EP2315832B1 (en) | 2008-08-01 | 2015-04-08 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Micro-rna mediated modulation of colony stimulating factors |
| US8962247B2 (en) | 2008-09-16 | 2015-02-24 | Sequenom, Inc. | Processes and compositions for methylation-based enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non invasive prenatal diagnoses |
| US8476013B2 (en) | 2008-09-16 | 2013-07-02 | Sequenom, Inc. | Processes and compositions for methylation-based acid enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non-invasive prenatal diagnoses |
| ES2727549T3 (es) | 2008-10-03 | 2019-10-17 | Curna Inc | Tratamiento de las enfermedades relacionadas con la apolipoproteína a1 por inhibición del transcrito antisentido natural a la apolipoproteína a1 |
| EP3572796B8 (en) | 2008-10-27 | 2023-01-18 | Genalyte, Inc. | Biosensors based on optical probing and sensing |
| KR101829469B1 (ko) | 2008-12-04 | 2018-03-30 | 큐알엔에이, 인크. | Ｅｐｏ에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의해 에리트로포에틴(ｅｐｏ) 관련된 질환의 치료 |
| JP5923306B2 (ja) | 2008-12-04 | 2016-05-24 | クルナ・インコーポレーテッド | 腫瘍抑制遺伝子に対する天然アンチセンス転写物の抑制による腫瘍抑制遺伝子関連疾患の治療 |
| ES2600781T3 (es) | 2008-12-04 | 2017-02-10 | Curna, Inc. | Tratamiento para enfermedades relacionadas con el factor de crecimiento del endotelio vascular (vegf) mediante la inhibición de transcritos antisentido naturales de vegf |
| US8206929B2 (en) | 2009-01-07 | 2012-06-26 | Roche Molecular Systems, Inc. | Nucleic acid amplification with allele-specific suppression of sequence variants |
| WO2010087994A2 (en) | 2009-01-30 | 2010-08-05 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Methods for ligation and uses thereof |
| WO2010093904A2 (en) | 2009-02-12 | 2010-08-19 | Curna, Inc. | Treatment of brain derived neurotrophic factor (bdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to bdnf |
| EP2408919B1 (en) | 2009-03-16 | 2017-10-18 | CuRNA, Inc. | Treatment of nuclear factor (erythroid-derived 2)-like 2 (nrf2) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf2 |
| ES2627763T3 (es) | 2009-03-17 | 2017-07-31 | Curna, Inc. | Tratamiento de enfermedades relacionadas con el homólogo tipo delta 1 (dlk1) por inhibición de transcrito antisentido natural a dlk1 |
| US20100297127A1 (en) | 2009-04-08 | 2010-11-25 | Ghilardi Nico P | Use of il-27 antagonists to treat lupus |
| ES2599979T3 (es) | 2009-04-24 | 2017-02-06 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Composiciones farmacéuticas para el tratamiento de pacientes de VHC que no responden al interferón |
| JP6250930B2 (ja) | 2009-05-06 | 2017-12-20 | クルナ・インコーポレーテッド | トリステトラプロリン（ｔｔｐ）に対する天然アンチセンス転写物の抑制によるｔｔｐ関連疾患の治療 |
| CN102459596B (zh) | 2009-05-06 | 2016-09-07 | 库尔纳公司 | 通过针对脂质转运和代谢基因的天然反义转录物的抑制治疗脂质转运和代谢基因相关疾病 |
| EP2427554B1 (en) | 2009-05-08 | 2016-11-16 | CuRNA, Inc. | Treatment of dystrophin family related diseases by inhibition of natural antisense transcript to dmd family |
| CN102575251B (zh) | 2009-05-18 | 2018-12-04 | 库尔纳公司 | 通过抑制针对重编程因子的天然反义转录物来治疗重编程因子相关的疾病 |
| JP2012527248A (ja) | 2009-05-22 | 2012-11-08 | クルナ・インコーポレーテッド | 転写因子ｅ３（ｔｆｅ３）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるｔｆｅ３およびインスリン受容体基質２（ｉｒｓ２）関連疾患の処置 |
| KR101704988B1 (ko) | 2009-05-28 | 2017-02-08 | 큐알엔에이, 인크. | 항바이러스 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 항바이러스 유전자 관련된 질환의 치료 |
| CA2765509C (en) | 2009-06-16 | 2021-08-17 | Joseph Collard | Treatment of paraoxonase 1 (pon1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to pon1 |
| WO2010148050A2 (en) | 2009-06-16 | 2010-12-23 | Curna, Inc. | Treatment of collagen gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a collagen gene |
| KR101807323B1 (ko) | 2009-06-24 | 2017-12-08 | 큐알엔에이, 인크. | Ｔｎｆｒ2에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 종양 괴사 인자 수용체 2(ｔｎｆｒ2) 관련된 질환의 치료 |
| CA2765815A1 (en) | 2009-06-26 | 2010-12-29 | Opko Curna, Llc | Treatment of down syndrome gene related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a down syndrome gene |
| WO2011009697A1 (en) | 2009-07-21 | 2011-01-27 | Santaris Pharma A/S | Antisense oligomers targeting pcsk9 |
| CA2768947C (en) | 2009-07-24 | 2018-06-19 | Opko Curna, Llc | Treatment of sirtuin (sirt) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a sirtuin (sirt) |
| EP2462229B1 (en) | 2009-08-05 | 2016-05-11 | CuRNA, Inc. | Treatment of insulin gene (ins) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to an insulin gene (ins) |
| CN102625841A (zh) | 2009-08-11 | 2012-08-01 | 欧科库尔纳有限责任公司 | 通过抑制脂连蛋白(adipoq)的天然反义转录物治疗脂连蛋白(adipoq)相关疾病 |
| US8409802B2 (en) | 2009-08-14 | 2013-04-02 | Roche Molecular Systems, Inc. | Format of probes to detect nucleic acid differences |
| US8791087B2 (en) | 2009-08-21 | 2014-07-29 | Curna, Inc. | Treatment of ‘C terminus of HSP70-interacting protein’ (CHIP)related diseases by inhibition of natural antisense transcript to CHIP |
| CA2771172C (en) | 2009-08-25 | 2021-11-30 | Opko Curna, Llc | Treatment of 'iq motif containing gtpase activating protein' (iqgap) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to iqgap |
| JP6175236B2 (ja) | 2009-09-25 | 2017-08-09 | カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド | フィラグリン（ｆｌｇ）の発現および活性の調整によるｆｌｇ関連疾患の処置 |
| KR101823702B1 (ko) | 2009-12-16 | 2018-01-30 | 큐알엔에이, 인크. | 막 결합 전사 인자 펩티다제, 부위 １(ｍｂｔｐｓ１)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 ｍｂｔｐｓ１ 관련 질환의 치료 |
| ES2577017T3 (es) | 2009-12-22 | 2016-07-12 | Sequenom, Inc. | Procedimientos y kits para identificar la aneuploidia |
| WO2011087789A2 (en) | 2009-12-22 | 2011-07-21 | Becton, Dickinson And Company | Methods for the detection of microorganisms |
| RU2619185C2 (ru) | 2009-12-23 | 2017-05-12 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с разобщающим белком 2 (ucp2), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта к ucp2 |
| CN102869776B (zh) | 2009-12-23 | 2017-06-23 | 库尔纳公司 | 通过抑制肝细胞生长因子(hgf)的天然反义转录物而治疗hgf相关疾病 |
| WO2011090740A2 (en) | 2009-12-29 | 2011-07-28 | Opko Curna, Llc | Treatment of nuclear respiratory factor 1 (nrf1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to nrf1 |
| US8962585B2 (en) | 2009-12-29 | 2015-02-24 | Curna, Inc. | Treatment of tumor protein 63 (p63) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to p63 |
| KR101853511B1 (ko) | 2009-12-31 | 2018-06-20 | 큐알엔에이, 인크. | 인슐린 수용체 기질 2 및 전사 인자 ｅ3(ｔｆｅ3)에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 ｉｒｓ2 관련된 질환의 치료 |
| KR101878501B1 (ko) | 2010-01-04 | 2018-08-07 | 큐알엔에이, 인크. | 인터페론 조절 인자 8 (ｉｒｆ8)에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 인터페론 조절 인자 8 (ｉｒｆ8) 관련된 질환의 치료 |
| KR101853509B1 (ko) | 2010-01-06 | 2018-04-30 | 큐알엔에이, 인크. | 췌장 발달 유전자에 대한 천연 안티센스 전사체의 억제에 의한 췌장 발달 유전자와 관련된 질환의 치료 |
| CA2786535C (en) | 2010-01-11 | 2019-03-26 | Curna, Inc. | Treatment of sex hormone binding globulin (shbg) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to shbg |
| JP5981850B2 (ja) | 2010-01-25 | 2016-08-31 | カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド | ＲＮａｓｅＨ１に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるＲＮａｓｅＨ１関連疾患の治療 |
| JP5976548B2 (ja) | 2010-02-22 | 2016-08-23 | カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド | Ｐｙｃｒ１に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるピロリン−５−カルボン酸レダクターゼ１（ｐｙｃｒ１）関連疾患の治療 |
| WO2011105900A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 8-alpha (c8-alpha) and uses thereof |
| WO2011105901A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 9 (c9) and uses thereof |
| WO2011105902A2 (en) | 2010-02-23 | 2011-09-01 | Academisch Ziekenhuis Bij De Universiteit Van Amsterdam | Antagonists of complement component 8-beta (c8-beta) and uses thereof |
| US8980856B2 (en) | 2010-04-02 | 2015-03-17 | Curna, Inc. | Treatment of colony-stimulating factor 3 (CSF3) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to CSF3 |
| WO2011127337A2 (en) | 2010-04-09 | 2011-10-13 | Opko Curna Llc | Treatment of fibroblast growth factor 21 (fgf21) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to fgf21 |
| WO2011133931A1 (en) | 2010-04-22 | 2011-10-27 | Genentech, Inc. | Use of il-27 antagonists for treating inflammatory bowel disease |
| SG184938A1 (en) | 2010-04-30 | 2012-11-29 | Exiqon As | In situ hybridization method and buffer |
| CA2798218A1 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-10 | Curna, Inc. | Treatment of sirtuin (sirt) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to a sirtuin (sirt) |
| TWI531370B (zh) | 2010-05-14 | 2016-05-01 | 可娜公司 | 藉由抑制ｐａｒ４天然反股轉錄本治療ｐａｒ４相關疾病 |
| JP5917497B2 (ja) | 2010-05-26 | 2016-05-18 | カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド | メチオニンスルホキシドレダクターゼａ（ｍｓｒａ）に対する天然アンチセンス転写物の阻害によるｍｓｒａ関連疾患の治療 |
| EP2576783B1 (en) | 2010-05-26 | 2017-11-29 | CuRNA, Inc. | Treatment of atonal homolog 1 (atoh1) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to atoh1 |
| CN103025873B (zh) | 2010-06-23 | 2018-05-08 | 库尔纳公司 | 通过抑制电压门控钠通道α亚基(SCNA)的天然反义转录物而治疗SCNA相关疾病 |
| JP5998131B2 (ja) | 2010-07-14 | 2016-09-28 | カッパーアールエヌエー，インコーポレイテッド | Ｄｉｓｃｓｌａｒｇｅｈｏｍｏｌｏｇ（ｄｌｇ）ｄｌｇ１への天然アンチセンス転写物の阻害によるｄｌｇ関連疾患の治療 |
| GB201012418D0 (en) | 2010-07-23 | 2010-09-08 | Santaris Pharma As | Process |
| EP3372684B1 (en) | 2010-08-24 | 2020-10-07 | Sirna Therapeutics, Inc. | Single-stranded rnai agents containing an internal, non-nucleic acid spacer |
| RU2624048C2 (ru) | 2010-10-06 | 2017-06-30 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с геном сиалидазы 4 (neu4), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта гена neu4 |
| WO2012054723A2 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Opko Curna Llc | Treatment of alpha-l-iduronidase (idua) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to idua |
| CA2816995C (en) | 2010-11-05 | 2019-12-31 | THE BOARD OF TRUSTEES OF THE UNIVERSITY OF ILLINOIS, a body corporate and politic | Optical analyte detection systems and methods of use |
| US10000752B2 (en) | 2010-11-18 | 2018-06-19 | Curna, Inc. | Antagonat compositions and methods of use |
| KR102010598B1 (ko) | 2010-11-23 | 2019-08-13 | 큐알엔에이, 인크. | Nanog에 대한 자연 안티센스 전사체의 저해에 의한 nanog 관련된 질환의 치료 |
| US20120208189A1 (en) | 2011-01-14 | 2012-08-16 | Life Technologies Corporation | Methods for isolation, identification, and quantification of mirnas |
| RU2620980C2 (ru) | 2011-06-09 | 2017-05-30 | Курна, Инк. | Лечение заболеваний, связанных с фратаксином (fxn), путем ингибирования природного антисмыслового транскрипта fxn |
| EA029151B1 (ru) | 2011-09-06 | 2018-02-28 | Курна, Инк. | ЛЕЧЕНИЕ ЗАБОЛЕВАНИЙ, СВЯЗАННЫХ С АЛЬФА-СУБЪЕДИНИЦАМИ ПОТЕНЦИАЛЗАВИСИМЫХ НАТРИЕВЫХ КАНАЛОВ (SCNxA), С ПОМОЩЬЮ МАЛЫХ МОЛЕКУЛ |
| EP3757210B1 (en) | 2012-03-02 | 2022-08-24 | Sequenom, Inc. | Methods for enriching cancer nucleic acid from a biological sample |
| EP2825885B1 (en) | 2012-03-12 | 2021-05-12 | The Board of Trustees of the University of Illinois | Optical analyte detection systems with magnetic enhancement |
| WO2013138374A2 (en) | 2012-03-15 | 2013-09-19 | Curna, Inc. | Treatment of brain derived neurotrophic factor (bdnf) related diseases by inhibition of natural antisense transcript to bdnf |
| EP2852666B1 (en) | 2012-05-21 | 2016-11-23 | The Scripps Research Institute | Ribosomal polynucleotides and related expression systems |
| US9920361B2 (en) | 2012-05-21 | 2018-03-20 | Sequenom, Inc. | Methods and compositions for analyzing nucleic acid |
| CA2878979C (en) | 2012-07-13 | 2021-09-14 | Sequenom, Inc. | Processes and compositions for methylation-based enrichment of fetal nucleic acid from a maternal sample useful for non-invasive prenatal diagnoses |
| KR20150087270A (ko) | 2012-11-05 | 2015-07-29 | 프로나이 테라퓨틱스, 인코포레이티드 | Bcl2 발현 조절에 의한 암치료용 바이오마커 이용 방법 |
| EP2943570B1 (en) | 2013-01-14 | 2018-01-03 | Pierfrancesco Tassone | Inhibitors of mirnas 221 and 222 for anti-tumor activity in multiple myeloma |
| EP2961386B1 (en) | 2013-02-28 | 2019-07-10 | The General Hospital Corporation | Mirna profiling compositions and methods of use |
| EP2971100A1 (en) | 2013-03-13 | 2016-01-20 | Sequenom, Inc. | Primers for dna methylation analysis |
| US9828629B2 (en) | 2013-03-15 | 2017-11-28 | Roche Molecular Systems, Inc. | Nucleic acid target identification by structure based probe cleavage |
| US9983206B2 (en) | 2013-03-15 | 2018-05-29 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Methods and compositions for enhancing immunoassays |
| EP3591054A1 (en) | 2013-06-27 | 2020-01-08 | Roche Innovation Center Copenhagen A/S | Antisense oligomers and conjugates targeting pcsk9 |
| JP2016537965A (ja) | 2013-10-11 | 2016-12-08 | ジェネンテック， インコーポレイテッド | Ｎｓｐ４阻害剤及び使用方法 |
| EP3063272A2 (en) | 2013-10-30 | 2016-09-07 | Green Life Biotech, LLC | Pathogenesis quantification systems and treatment methods for citrus greening blight |
| WO2015075166A1 (en) | 2013-11-22 | 2015-05-28 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Methods and pharmaceutical compositions for treatment of a bacterial infection |
| US9637791B2 (en) | 2013-12-20 | 2017-05-02 | Roche Molecular Systems, Inc. | Multiplexed nucleic acid target identification by strucutre based probe cleavage |
| EP3099798B1 (en) | 2014-01-29 | 2018-06-27 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Oligonucleotides and methods for inhibiting or reducing bacterial biofilms |
| WO2015138774A1 (en) | 2014-03-13 | 2015-09-17 | Sequenom, Inc. | Methods and processes for non-invasive assessment of genetic variations |
| GB201410693D0 (en) | 2014-06-16 | 2014-07-30 | Univ Southampton | Splicing modulation |
| WO2016041058A1 (en) | 2014-09-18 | 2016-03-24 | The University Of British Columbia | Allele-specific therapy for huntington disease haplotypes |
| JP6867945B2 (ja) | 2014-10-03 | 2021-05-12 | コールド スプリング ハーバー ラボラトリー | 核内遺伝子出力の標的とされた増強 |
| TWI698444B (zh) * | 2014-10-29 | 2020-07-11 | 美商基利科學股份有限公司 | 製備核糖苷的方法 |
| US11174313B2 (en) | 2015-06-12 | 2021-11-16 | Alector Llc | Anti-CD33 antibodies and methods of use thereof |
| EP3307771A2 (en) | 2015-06-12 | 2018-04-18 | Alector LLC | Anti-cd33 antibodies and methods of use thereof |
| CA2996059A1 (en) | 2015-08-28 | 2017-03-09 | Alector Llc | Anti-siglec-7 antibodies and methods of use thereof |
| WO2017060731A1 (en) | 2015-10-09 | 2017-04-13 | University Of Southampton | Modulation of gene expression and screening for deregulated protein expression |
| EP3368575A2 (en) | 2015-10-29 | 2018-09-05 | Alector LLC | Anti-siglec-9 antibodies and methods of use thereof |
| SG11201804443UA (en) | 2015-12-14 | 2018-06-28 | Cold Spring Harbor Laboratory | Antisense oligomers for treatment of autosomal dominant mental retardation-5 and dravet syndrome |
| US11096956B2 (en) | 2015-12-14 | 2021-08-24 | Stoke Therapeutics, Inc. | Antisense oligomers and uses thereof |
| EP3463388A4 (en) | 2016-05-24 | 2020-01-01 | Emory University | PARTICLES CONJUGATED TO RNA-DIVIDING NUCLEOBASE POLYMERS AND USES THEREOF IN THE MANAGEMENT OF INFLAMMATORY DISORDERS |
| WO2018024849A1 (en) | 2016-08-03 | 2018-02-08 | Aalborg Universitet | ANTISENSE OLIGONUCLEOTIDES (ASOs) DESIGNED TO INHIBIT IMMUNE CHECKPOINT PROTEINS |
| US11147249B2 (en) | 2016-12-08 | 2021-10-19 | Alector Llc | Siglec transgenic mice and methods of use thereof |
| AR111490A1 (es) | 2017-05-01 | 2019-07-17 | Gilead Sciences Inc | Formas cristalinas de propanoato de (s)-2-etilbutil 2-(((s)-(((2r,3s,4r,5r)-5-(4-aminopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-7-il)-5-ciano-3,4-dihidroxitetrahidrofuran-2-il)metoxi)(fenoxi)fosforil)amino) |
| US11359014B2 (en) | 2017-05-16 | 2022-06-14 | Alector Llc | Anti-siglec-5 antibodies and methods of use thereof |
| CN117700548A (zh) | 2017-08-03 | 2024-03-15 | 艾利妥 | 抗cd33抗体及其使用方法 |
| LT3673080T (lt) | 2017-08-25 | 2023-12-27 | Stoke Therapeutics, Inc. | Priešprasminiai oligomerai, skirti būklėms ir ligoms gydyti |
| US11261445B2 (en) | 2017-10-17 | 2022-03-01 | Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) | Combination treatment for cystic fibrosis |
| US11470827B2 (en) | 2017-12-12 | 2022-10-18 | Alector Llc | Transgenic mice expressing human TREM proteins and methods of use thereof |
| JP2021528068A (ja) | 2018-06-21 | 2021-10-21 | エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲーＦ． Ｈｏｆｆｍａｎｎ−Ｌａ Ｒｏｃｈｅ Ａｋｔｉｅｎｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ | 全ｌｎａオリゴヌクレオチドのハイブリダイズ |
| KR20210049106A (ko) | 2018-07-27 | 2021-05-04 | 알렉터 엘엘씨 | 항-siglec-5 항체 및 이의 사용 방법 |
| CN110818748A (zh) * | 2018-08-07 | 2020-02-21 | 广州市锐博生物科技有限公司 | 核苷化合物与其中间体的合成方法 |
| WO2020068398A2 (en) | 2018-09-07 | 2020-04-02 | The General Hospital Corporation | Compositions and methods for immune checkpoint inhibition |
| CA3113676A1 (en) | 2018-09-21 | 2020-03-26 | President And Fellows Of Harvard College | Methods and compositions for treating diabetes, and methods for enriching mrna coding for secreted proteins |
| US20220011301A1 (en) | 2018-11-16 | 2022-01-13 | Roche Diagnostics Operations, Inc. | Streptavidin-coated solid phases with a member of a binding pair |
| WO2020245377A1 (en) | 2019-06-07 | 2020-12-10 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Hybridizing all-lna oligonucleotides |
| US20220251567A1 (en) | 2019-07-10 | 2022-08-11 | Inserm (Institut National De La Santè Et De La Recherche Médicale) | Methods for the treatment of epilepsy |
| IT201900017234A1 (it) | 2019-09-25 | 2021-03-25 | Int Centre For Genetic Engineering And Biotechnology | Anti-miRNA per il trattamento del leiomioma |
| WO2021074657A1 (en) | 2019-10-17 | 2021-04-22 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Combination treatment for cystic fibrosis |
| US20230016983A1 (en) | 2019-11-19 | 2023-01-19 | lNSERM (INSTITUT NATIONAL DE LA SANTÉ ET DE LA RECHERCHE MÉDICALE) | Antisense oligonucleotides and thier use for the treatment of cancer |
| TW202309061A (zh) | 2020-03-12 | 2023-03-01 | 美商基利科學股份有限公司 | 1’-氰基核苷之製備方法 |
| MX2022014151A (es) | 2020-05-11 | 2022-11-30 | Stoke Therapeutics Inc | Oligomeros antisentido de opa1 para tratamiento de afecciones y enfermedades. |
| WO2021243271A2 (en) | 2020-05-29 | 2021-12-02 | Front Range Biosciences, Inc. | Methods and compositions for pathogen detection in plants |
| AU2021281351A1 (en) | 2020-05-29 | 2023-01-19 | Gilead Sciences, Inc. | Remdesivir treatment methods |
| WO2022006019A1 (en) | 2020-06-29 | 2022-01-06 | Front Range Biosciences, Inc. | Characterization of cannabis cultivars based on terpene synthase gene profiles |
| IL299771A (en) | 2020-07-10 | 2023-03-01 | Inst Nat Sante Rech Med | Methods and compounds for the treatment of epilepsy |
| IL304956A (en) | 2021-02-12 | 2023-10-01 | Merand Pharmaceuticals Inc | Materials, compositions and methods for treating hypoxia and ischemia-related disorders |
| BR112023019582A2 (pt) | 2021-03-26 | 2023-12-05 | Neumirna Therapeutics Aps | Oligonucleotídeo antissenso inibidor de microrna-27b |
| EP4313073A1 (en) | 2021-03-26 | 2024-02-07 | Neumirna Therapeutics ApS | Microrna-134 inhibitors |
| EP4347824A1 (en) | 2021-06-04 | 2024-04-10 | Neumirna Therapeutics ApS | Antisense oligonucleotides targeting adenosine kinase |
| AU2022329834A1 (en) | 2021-08-17 | 2024-03-07 | Korea Advanced Institute Of Science And Technology | Antisense oligonucleotide targeting cav3.1 gene and uses thereof |
| EP4388096A1 (en) | 2021-08-19 | 2024-06-26 | Neumirna Therapeutics ApS | Antisense oligonucleotides targeting adenosine kinase |
| WO2023092102A1 (en) | 2021-11-19 | 2023-05-25 | Sanegene Bio Usa Inc. | Double stranded rna targeting angiopoietin-like 3 (angptl-3) and methods of use thereof |
| WO2023104812A1 (en) | 2021-12-09 | 2023-06-15 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Mass based detection of pcr amplicons |
| WO2023152369A1 (en) | 2022-02-14 | 2023-08-17 | INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) | Nucleic acid mir-9 inhibitor for the treatment of cystic fibrosis |
| US20240002857A1 (en) | 2022-05-09 | 2024-01-04 | Sanegene Bio Usa Inc. | Double stranded rna targeting 17-beta hydroxysteroiddehydrogenase 13 (hsd17b13) and methods of use thereof |
| WO2024017990A1 (en) | 2022-07-21 | 2024-01-25 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Methods and compositions for treating chronic pain disorders |
| WO2024031101A1 (en) | 2022-08-05 | 2024-02-08 | Sanegene Bio Usa Inc. | Double stranded rna targeting angiotensinogen (agt) and methods of use thereof |
| EP4332239A1 (en) | 2022-08-30 | 2024-03-06 | Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. | Mir-based assay for gastro-entero-pancreatic neuroendocrine tumor diagnosis and prognosis |
| US20240175026A1 (en) | 2022-10-14 | 2024-05-30 | Sanegene Bio Usa Inc. | Small interfering rna targeting c3 and uses thereof |
| WO2024137590A2 (en) | 2022-12-19 | 2024-06-27 | Sanegene Bio Usa Inc. | Small interfering rna targeting cfb and uses thereof |
| WO2024146935A1 (en) | 2023-01-06 | 2024-07-11 | Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale | Intravenous administration of antisense oligonucleotides for the treatment of pain |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0538194B1 (de) | 1991-10-17 | 1997-06-04 | Novartis AG | Bicyclische Nukleoside, Oligonukleotide, Verfahren zu deren Herstellung und Zwischenprodukte |
| JPH0680688A (ja) * | 1992-09-03 | 1994-03-22 | Asahi Breweries Ltd | ４’−メチルヌクレオシド誘導体 |
| ATE232880T1 (de) * | 1996-11-18 | 2003-03-15 | Takeshi Imanishi | Neue nucleotidanaloga |
| JP3756313B2 (ja) * | 1997-03-07 | 2006-03-15 | 武 今西 | 新規ビシクロヌクレオシド及びオリゴヌクレオチド類縁体 |
| EP2253639A1 (en) | 1997-09-12 | 2010-11-24 | Exiqon A/S | Bi- and tri-cyclic nucleoside, nucleotide and oligonucleoide analogues |
| WO2000056748A1 (en) * | 1999-03-18 | 2000-09-28 | Exiqon A/S | Xylo-lna analogues |
| DE60029314T2 (de) * | 1999-03-24 | 2007-07-12 | Exiqon A/S | Verbesserte Synthese für -2.2.1. I Bicyclo-Nukleoside |
| EP1178999B1 (en) * | 1999-05-04 | 2007-03-14 | Santaris Pharma A/S | L-ribo-lna analogues |
| WO2000078775A1 (fr) * | 1999-06-22 | 2000-12-28 | Sankyo Company, Limited | Nouveaux nucleosides pontes en 3'-4' et analogues d'oligonucleotides |
-
2000
- 2000-03-24 DE DE60029314T patent/DE60029314T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-24 IL IL14549600A patent/IL145496A0/xx unknown
- 2000-03-24 ES ES00912410T patent/ES2269113T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-24 JP JP2000606607A patent/JP4768132B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-24 WO PCT/DK2000/000141 patent/WO2000056746A2/en active IP Right Grant
- 2000-03-24 AT AT00912410T patent/ATE332909T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-03-24 US US09/534,769 patent/US6639059B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-24 EP EP00912410A patent/EP1163250B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-03-24 DK DK00912410T patent/DK1163250T3/da active
- 2000-03-24 AU AU34188/00A patent/AU3418800A/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US6639059B1 (en) | 2003-10-28 |
| IL145496A0 (en) | 2002-06-30 |
| EP1163250B1 (en) | 2006-07-12 |
| EP1163250A2 (en) | 2001-12-19 |
| WO2000056746A3 (en) | 2001-10-18 |
| ATE332909T1 (de) | 2006-08-15 |
| AU3418800A (en) | 2000-10-09 |
| WO2000056746A2 (en) | 2000-09-28 |
| DE60029314D1 (de) | 2006-08-24 |
| JP4768132B2 (ja) | 2011-09-07 |
| DE60029314T2 (de) | 2007-07-12 |
| JP2002540116A (ja) | 2002-11-26 |
| DK1163250T3 (da) | 2006-11-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2269113T3 (es) | Sintesis mejorada de -2.2.1 / biciclo-nucleosidos. | |
| US6734291B2 (en) | Synthesis of [2.2.1]bicyclo nucleosides | |
| ES2222619T3 (es) | Agonistas de receptores adenosina a1. | |
| ES2201552T3 (es) | Agonistas del receptor a1 de la adenosina. | |
| ES2217279T3 (es) | Compuestos con propiedades antihipertensivas, cardioprotectoras, anti-isquemicas y antilipoliticas. | |
| EP0637315B1 (en) | Adenosine derivatives having a2 agonist activity | |
| CA2470255C (en) | N4-acylcytosine nucleosides for treatment of viral infections | |
| ES2199365T3 (es) | Compuestos con propiedades antihipertensivas, cardioprotectoras, anti-isquemicas y antilipoliticas. | |
| AU784374B2 (en) | Synthesis of 2'-deoxy-L-nucleosides | |
| US10961269B2 (en) | Bridged nucleic acid GuNA, method for producing same, and intermediate compound | |
| BG106636A (bg) | Съединения за лечението на исхемия | |
| SK47199A3 (en) | Monocyclic l-nucleosides, analogs and uses thereof | |
| JP6175553B2 (ja) | チオラン骨格型糖化合物の製造方法およびチオラン骨格型糖化合物 | |
| AU2011341441A1 (en) | Modulators of histone methyltransferase, and methods of use thereof | |
| CA2379554A1 (en) | Benzimidazolone derivatives and their use as phosphodiesterase inhibitors | |
| WO2009115893A2 (en) | Novel nucleoside derivatives | |
| AU2002365234A1 (en) | N4-acylcytosine nucleosides for treatment of viral infections | |
| CA2706432A1 (en) | Antiviral nucleoside compounds | |
| Gondela et al. | Versatile synthesis of 2′-amino-2′-deoxyuridine derivatives with a 2′-amino group carrying linkers possessing a reactive terminal functionality | |
| ES2553404T3 (es) | Nucleósidos para suprimir o reducir el desarrollo de resistencia en el tratamiento con citostáticos | |
| EP0292101A2 (en) | Process for the preparation of 3'-azido-3'-deoxythymidine and intermediates | |
| ES2200794T3 (es) | Nuevos derivados dimericos sustituidos, procedimiento para su preparacion y composiciones farmaceuticas que los contienen. | |
| JP5091126B2 (ja) | α−アノマーが濃厚な２−デオキシ−２，２−ジフロロ−Ｄ−リボフラノシルスルホネートの製造方法およびβヌクレオシドを製造するためのその使用 | |
| AU626600B2 (en) | Nucleoside derivatives | |
| ES2638915T3 (es) | Procedimiento de preparación de compuestos usados como inhibidores de SGLT-22 |