ES2232736T3

ES2232736T3 - Derivados de naftostrilos y su empleo como inhibidores de kinasas dependientes de ciclina.

Info

Publication number: ES2232736T3
Application number: ES02706711T
Authority: ES
Inventors: Yi Chen; Apostolos Dermatakis; Frederick Martin Konzelmann; Jin-Jun Liu; Kin-Chun Luk
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2001-01-23
Filing date: 2002-01-16
Publication date: 2005-06-01
Anticipated expiration: 2022-01-16
Also published as: UY27132A1; DE60202131D1; US6504034B2; KR100563429B1; CA2434381C; ZA200305383B; WO2002059109A3; PE20020916A1; DE60202131T2; ATE283852T1; CA2434381A1; JP4091434B2; CN1487931A; US20020147343A1; CN1231479C; EP1358180B1; US6531598B1; JP2004517150A; BR0206621A; EP1358180A2

Abstract

Un compuesto de **fórmula** las sales o ésteres farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde: R1 es seleccionado del grupo consistente en -H, -OR5, halógeno, -CN, -NO2, , -COR5, -COOR5, - CONR5R6, -NR5R6, -S(O)nR5, -S(O)2NR5R6, y C1-C6- alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R7; R2 es seleccionado del grupo consistente en -H, -OR5, halógeno, -CN, -NO2, -COR5, -COOR5, - CONR5R6, -NR5R6, -S(O)nR5, -S(O)2NR5R6, C1-C6-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R7, ciclo- C3-C8-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R8, y heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R8.

Description

Derivados de naftostirilos y su empleo como inhibidores de kinasas dependientes de ciclina.

La presente invención está dirigida a nuevos naftostirilos de fórmula

1

Estos compuestos inhiben las quinasas dependientes de ciclina (CDKs), en particular CDK2. Estos compuestos y sus ésteres y sales farmacéuticamente aceptables y son agentes anti-proliferativos útiles en el tratamiento o control de desordenes celulares proliferativos, en particular cáncer. La invención también está dirigida a composiciones farmacéuticas que contienen estos compuestos, y a los métodos para el tratamiento y/o prevención de cáncer, particularmente en el tratamiento o control de tumores sólidos. Los compuestos de la invención son especialmente útiles en el tratamiento o control de tumores de mama, colon, pulmón y próstata. La invención también está dirigida a intermediarios útiles en la preparación de los agentes anti-proliferativos anteriores.

La proliferación celular incontrolada es el sello del cáncer. Las células tumorales cancerígenas típicamente poseen alguna forma de dañar a los genes que directamente o indirectamente regulan el ciclo de división celular.

Las quinasas dependientes de ciclina (CDKs) son enzimas que son críticos en el control del ciclo celular. Ver, pej., Coleman et al., "Chemical Inhibitors of Cyclin-dependent Kinases," Annual Reports in Medicinal Chemistry, vol. 32, 1997, p. 171-179. Estos enzimas regulan la transición entre las diferentes fases del ciclo celular, tanto como el paso de la fase G_{1} a la fase S (el peryodo de síntesis activa de DNA), o el paso de la fase G_{2} A la fase M, en las que acontece la mitosis y la división celular. Ver, pej., los artículos con este tema que aparecen en Science, vol. 274, 6 Diciembre 1996, p. 1643-1677.

Las CDKs están compuestas de una subunidad CDK catalítica y una subunidad de ciclina reguladora. La subunidad de ciclina es el regulador clave de la actividad CDK, con cada CDK que interacciona con un grupo específico de ciclinas: pej. ciclina A (CDK1, CDK 2). Los diferentes pares quinasa/ciclina regulan el paso a través de estadios específicos del ciclo celular. Ver, pej., Coleman, supra.

Las aberraciones en el control del sistema del ciclo celular se han visto implicadas en el crecimiento incontrolado de células cancerígenas. Ver, pej., Kamb, "Cell-Cycle Regulators and Cancer," Trends in Genetics, vol. 11, 1995, p. 136-140; y Coleman, supra. Además, en varios tipos de tumores se han observado cambios en la expresión de o en los genes que codifican para las CDK o en sus reguladores . Ver, pej., Webster, "The Therapeutic Potential of Targeting the Cell Cycle," Exp. Opin. Invest. Drugs, Vol. 7, p. 865-887 (1998), y las referencias citadas allí. Así, existe un gran volumen literario que valida el uso de compuestos que inhiben las CDK como agentes terapéuticos antiproliferativos. Ver, pej.. Patente Estadounidense No. 5,621,082 a Xiong et al; EP 0 666 270 A2; WO 97/16447; y las referencias citadas en Coleman, supra, en particular la referencia no. 10. De este modo, es deseable identificar los inhibidores químicos de la actividad de las CDK.

Es particularmente deseable identificar pequeños compuestos moleculares que sean fácilmente sintetizables y sean efectivos en la inhibición de CDK2 o complejos CDK2/ciclina, para el tratamiento de uno o más tipos de tumo-
res.

El 4-Alquenilo- y los 4-alquiniloxindoles son útiles en el tratamiento o control del cáncer, se revelan en la. Pat. EE.UU. No. 6,130,239. Los compuestos indolinona (también conocidos como oxindol) que se sostiene que son útiles en la regulación de proliferación celular anormal a través de la inhibición de la tirosina quinasa se discuten en WO 96/40116, WO 98/07695, WO 95/01349, WO 96/32380, WO 96/22976, WO 96/16964 (inhibidores de la tirosina quinasa), y WO 98/50356 (derivados de 2-indolinona como moduladores de la actividad proteína quinasa). Los derivados de oxindol también han sido descritos para otros usos terapéuticos: 5,206,261 (mejora de la función cerebral); WO 92/07830 (antagonistas de péptidos); PE 580 502 A1 (antioxidantes).

Continua siendo una necesidad los compuestos moleculares pequeños, de fácil síntesis para el tratamiento de uno o más tipos de tumores, en particular a través de la regulación de CDK. Es objeto de esta invención proporcionar estos compuestos y las composiciones que contienen estos compuestos.

La presente invención se refiere a naftostirilos capaces de inhibir la actividad de una o más CDKs, en particular CDK2. Estos compuestos son útiles para el tratamiento o control de cáncer, en particular tumores sólidos. En particular esta invención se dirige al compuesto de la fórmula

2

Y los ésteres y sales farmacéuticamente aceptables de estos compuesto, en donde R^{1}-R^{4} son como se ha definido anteriormente.

La presente invención también está dirigida a composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad farmacéuticamente efectiva de uno o más compuestos de fórmula I y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

La presente invención está además dirigida a un método para el tratamiento de tumores sólidos, en particular tumores de mama, colon, pulmón y próstata, mediante la administración a un paciente humano con la necesidad de esta terapia de una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I, su sal y/o éster o una combinación de los mismos.

La presente invención también está dirigida al uso de naftostirilos de fórmula (I) para la preparación de medicamentos para el tratamiento de cáncer.

Finalmente, la presente invención está dirigida a los compuestos intermediarios para la preparación de compuestos de fórmula (I).

Tal como se usa aquí, los siguientes términos presentas las siguientes definiciones.

"Arilo" significa un grupo aromático que posee de 5 a 10 átomos y que consiste en 1 ó 2 anillos. Ejemplos de grupos arilo incluye fenilo y 1- ó 2-naftilo.

"Cicloalquilo" significa un grupo hidrocarburo alifático cíclico no-aromático, parcialmente o completamente saturado que contiene de 3 a 8 átomos. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluye ciclopropilo, ciclopentilo y ciclohexilo.

"Cantidad Efectiva" significa una cantidad de al menos un compuesto de fórmula I, o una sal o éster farmacéuticamente aceptable del mismo, que inhibe significativamente la proliferación y/o previene la diferenciación de un tumor de células humanas, incluyendo líneas tumorales de células humanas, y es de este modo efectiva en prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto tratado.

"Halógeno" significa flúor, cloro, bromo o yodo.

Los grupos "Heteroarilo" son grupos aromáticos que poseen de 5 a 10 átomos, uno o dos anillos, y que contienen uno o más hetero átomos. Ejemplos de grupos heteroarilo incluye 2, 3 ó 4-piridilo, tetrazolilo, oxadiazolilo, pirazinilo, quinolilo, pirrolilo, y imidazolilo.

"Hetero átomo" significa un átomo seleccionado de N, O y S.

"Heterociclo" significa un grupo hidrocarburo de 3- a 10-miembros no-aromático, parcialmente o completamente saturado, como es tetrahidroquinolilo, que contiene uno o dos anillos y al menos un hetero átomo. Ejemplos de compuestos heterocíclicos incluyen pirrolidinilo, tetrahidrofuranilo, morfolinilo, y similares.

"IC_{50}" se refiere a la concentración de un naftostirilo particular necesario para inhibir el 50% de una actividad específica medida. La IC_{50} puede ser medida, inter alia, como se describe en el Ejemplo 58, infra.

"Alquilo inferior" indica un hidrocarburo de una cadena simple o ramificada saturada o insaturada alifática que posee de 1 a 6, preferiblemente de 1 a 4, átomos de carbono. Grupos alquilo inferior típicos incluyen metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, 2-butilo, pentilo, hexilo, propenilo, propinilo, y similares.

"Éster farmacéuticamente aceptable " se refiere a un compuesto de fórmula I convencionalmente esterificado que posee un grupo carboxilo, cuyos ésteres retienen la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de fórmula I.

"Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a sales de adición ácida o básica convencionales que retienen la efectividad biológica y las propiedades de los compuestos de fórmula I y están formados de ácidos o bases orgánicas o inorgánicas no tóxicas. Muestras de sales de adición ácida incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos como el ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, sulfámico ácido, ácido fosfórico y ácido nítrico, y aquellos derivados de ácidos orgánicos como el ácido p-toluenosulfónico, ácido salicílico, ácido metano-sulfónico, ácido oxálico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido málico, ácido láctico, ácido fumárico, y similares. Muestras de sales de adición básica incluye aquellos derivados de amoniaco, potasio, sodio e, hidróxidos cuaternarios de amoniaco, como por ejemplo, hidróxido de tetrametilamonio.

"Farmacéuticamente aceptable," como vehículo farmacéuticamente aceptable, excipiente, profármaco, etc., significa farmacológicamente aceptable y sustancialmente no-tóxico para el sujeto al cual el compuesto particular es administrado.

"Sustituido," como en alquilo sustituido, significa que la substitución puede ocurrir en una o más posiciones y, hasta que se indique lo contrario, que los sustituyentes en cada sitio de sustitución están independientemente seleccionados de las opciones especificadas.

En una realización, la invención está dirigida a un compuesto de fórmula:

3

o las sales o ésteres farmacéuticamente aceptables de los mismos, en donde:

R^{1} es seleccionado del grupo consistente en

: -H,

: -OR^{5},

: halógeno,

: -CN,

: -NO_{2},

: -COR^{5},

: -COOR^{5},

: -CONR^{5}R^{6},

: -NR^{5}R^{6},

: -S(O)_{n}R^{5},

: -S(O)_{2}NR^{5}R^{6}, y

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

R^{2} está seleccionado del grupo consistente en

: -H,

: -OR^{5},

: halógeno,

: -CN,

: -NO_{2},

: -COR^{5},

: -COOR^{5},

: -CONR^{5}R^{6},

: -NR^{5}R^{6},

: -S(O)_{n}R^{5},

: -S(O)_{2}NR^{5}R^{6},

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7},

: ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}, y

: heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8};

R^{3} y R^{4} están cada uno independientemente seleccionados del grupo de

: -H,

: -OR^{5},

: -CN,

: -NO_{2},

: -COR^{5},

: -COOR^{5},

: -CONR^{5}R^{6},

: -NR^{5}R^{6},

: -S(O)_{n}R^{5},

: -S(O)_{2}NR^{5}R^{6}, y

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

R^{5} es seleccionado del grupo consistente en

: -H

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7},

: ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8},

: arilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8},

: heteroarilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}, y

: heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8};

R^{6} está seleccionado del grupo de

: -H

: -COR^{9},

: -CONR^{9}R^{10},

: -S(O)_{n}R^{9},

: -S(O)_{2}NR^{9}R^{10},

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}, y

: o, alternativamente, NR^{5}R^{6} opcionalmente puede formar un anillo de 5-6 átomos, dicho anillo opcionalmente puede incluir uno o más hetero átomos adicionales y estar opcionalmente sustituido por R^{8};

R^{7} es seleccionado del grupo de

: -OR^{9},

: halógeno

: -CN,

: -NO_{2},

: -COR^{9},

: -COOR^{9},

: -CONR^{9}R^{10},

: -NR^{9}R^{10},

: -S(O)_{n}R^{9},

: -S(O)_{n}NR^{9}R^{10};

R^{8} es seleccionado del grupo de

: -OR^{9},

: -CN,

: =O,

: -NO_{2},

: -COR^{9},

: -COOR^{9},

: -CONR^{9}R^{10},

: -NR^{9}R^{10},

: -S(O)_{n}R^{9},

: -S(O)_{2}NR^{9}R^{10}, y

: C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

R^{9} es seleccionado del grupo de

: -H,

: C_{1}-C_{6}-alquilo y

: ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo;

R^{10} es seleccionado del grupo consistente en

: -H,

: -COR^{11},

: C_{1}-C_{6}-alquilo y

: ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo,

o, alternativamente, NR^{9}R^{10} opcionalmente puede formar un anillo que posea 5-6 átomos, dicho anillo opcionalmente incluye uno o más hetero átomos adicionales;

R^{11} es seleccionado del grupo consistente en

: C_{1}-C_{6}-alquilo y

: ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo;

: a es un enlace opcional;

: n es 0, 1 ó 2; y

Las letras A, B, C y D en la fórmula I están meramente para identificar cada uno de los diferentes anillos en la fórmula.

En una realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{1} es seleccionado del grupo consistente en H, halógeno, C_{1}-C_{6}-alquilo sustituido por halógeno, -NO_{2}, -CONR^{5}R^{6}, y -CN. Los C_{1}-C_{6}-alquilo s sustituidos por halógeno más preferidos incluyen perfluoroalquilos. Perfluoro-alquilos preferidos incluyen -CF_{3}. Halógenos preferidos incluye F.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{2} es seleccionado del grupo consistente en -H, -OR^{5}, NO_{2}, -CONR^{5}R^{6}, -S(O)_{n}R^{5},

-NR^{5}R^{6}, y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}. Grupos -OR^{5} preferidos incluyen -OCH_{3}, -OCH_{2}CH_{3}, -OCH_{2}CH_{2}OH, -OCH_{2}CH_{2}CH_{2}OH, y -OCH_{2}CH_{2}NH_{2}. C_{1}-C_{6}-alquilos preferidos incluyen perfluoroalquilo. Perfluoroalquilos preferidos incluye -CF_{3}. Grupos -NR^{5}R^{6} preferido incluye -NHCH_{2}CH_{2}NH_{2}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{3} y R^{4} están seleccionados del grupo consistente en -H y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente pueden estar sustituido por R^{7}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{5} es seleccionado del grupo consistente en C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7} y heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{6} es C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, -NR^{5}R^{6} es un anillo que posee 5-6 átomos dicho anillo opcionalmente incluye uno o más hetero átomos adicionales y siendo opcionalmente sustituido por R^{8}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{7} es seleccionado del grupo consistente en -OR^{9} y -NR^{9}R^{10}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{8} es seleccionado del grupo consistente en -OR^{9} y -NR^{9}R^{10}.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{9} es seleccionado del grupo consistente en H y C_{1}-C_{6}-alquilo.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, R^{10} es seleccionado del grupo consistente en H y C_{1}-C_{6}-alquilo.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, n es 0.

En otra realización preferida de los compuestos de fórmula I, "a" es un enlace.

Preferiblemente, la presente invención se refiere a compuestos de la fórmula (I) anterior seleccionado del grupo consistente en;

a) 6-Fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

b) 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

c) 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro,

d) 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido metanosulfó-nico,

e) 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido trifluoroacé-tico,

f) 6-Fluoro-5-metoxi-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona,

g) 5-Etoxi-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona,

h) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etilamino)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

i) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

j) 6-Fluoro-5-(3-hidroxi-propoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

k) 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

l) 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido metanosulfónico,

m) 5-(3-Amino-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido acético,

n) 5-(2-Amino-2-metil-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

o) 6-Fluoro-5-morfolin-4-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

p) 6-Fluoro-5-piperazin-1-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido acético,

q) 6-Fluoro-5-metil-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona,

r) (rac)-5-sec-Butil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

s) 5-Etil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona,

t) 6-Fluoro-5-(2-oxo-imidazolidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

u) N-[2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilamino]-etil]-acetamida,

v) 5-(2-Dimetilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido trifluoroacético,

w) 5-(2-Dietilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

x) 6-Fluoro-5-[(R)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

y) 6-Fluoro-5-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

z) 6-Fluoro-5-(3-hidroximetil-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

aa) 6-Fluoro-5-(3-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

bb) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

cc) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfinil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

dd) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfonil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

ee) 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

ff) 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro,

gg) 5-(2-Amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

hh) 5-(2-Amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro,

ii) 5-(2-Amino-etanosulfonil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

jj) 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal del ácido trifluoroacético,

kk) 6-Fluoro-5-(-(S)-pirrolidin-2-ilmetilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona, y

ll) 6-Fluoro-5-[(S)-(pirrolidin-3-ilsulfanil)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona.

Los compuestos mostrados aquí y cubiertos por las fórmulas anteriores pueden mostrar tautomerismo, o isomerismo estructural o estéreo. Se pretende que la invención abarca cualquier forma tautomérica o estructural o estéreo isomérica de estos compuestos, o mezclas de estas formas, y no esta limitada a ninguna forma tautomérica o estructural o estéreo isomérica utilizada dentro de las fórmulas dibujadas anteriormente.

Síntesis general de compuestos de acuerdo con la invención

Los compuestos de la invención pueden estar preparados mediante procesos conocidos en el campo. Procesos adecuados para la síntesis de estos compuestos están proporcionados en los ejemplos. Generalmente, los compuestos de fórmula I pueden estar preparados de acuerdo con una de las rutas sintéticas descritas más abajo.

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Esquema 1

4

Donde PG es un grupo protector adecuado como es terc-butoxicarbonilo.

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Esquema 2

5

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Esquema 3

6

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Esquema 4

7

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Esquema 5

8

Donde "desprotección" significa usando métodos adecuados bien conocidos en el arte de la síntesis química para eliminar los grupos protectores, como el tratamiento con ácido para eliminar el grupo terc-butoxicarbonilo.

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Esquema 6

9

Bases preferidas incluye hidróxido sódico 1 N, que mientras se calienta en presencia de un compuesto VI proporciona un compuesto VII, y en calentamientos prolongados, proporciona un compuesto I.

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Esquema 7

10

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Esquema 8

11

Bases preferidas incluye NaH.

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Esquema 9

12

Esquema 10

13

La formación de un compuesto I puede alcanzarse usando reactivos organo-cúpricos.

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Esquema 11

14

La formación de compuesto I puede alcanzarse usando reactivos organo-zinc/cobre donde X es Br o I.

Esquema 12

Los compuestos de fórmula I también pueden obtenerse mediante modificación química de otros compuestos de fórmula I usando transformaciones químicas bien conocidas en el campo.

En una realización alternativa, la presente invención está dirigida a composiciones farmacéuticas que comprenden al menos un compuesto de fórmula I y/o una sal o éster farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Estas composiciones farmacéuticas pueden administrarse oralmente, por ejemplo, en forma de comprimidos, comprimidos recubiertos, grageas, cápsulas de gelatina dura o blandas, soluciones, emulsiones o suspensiónes. También pueden administrarse rectalmente, por ejemplo, en forma de supositorios, o parenteralmente, por ejemplo, en forma de soluciones inyectables.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención que comprenden un compuesto de fórmula I y/o la sal o éster del mismo, puede estar elaborado de una forma que es conocida en el campo, pej. por métodos de mezclado convencional, encapsulación, disolución, granulación, emulsificación, aprisionamiento, grageado, o procesos de liofilización. Estas preparaciones farmacéuticas pueden formularse con vehículos orgánicos o inorgánicos terapéuticamente inertes. Lactosa, almidón de maíz o los derivados de los mismos, talco, ácido esteárico o sus sales pueden usarse como estos vehículos para comprimidos, comprimidos recubiertos, grageas y cápsulas de gelatina dura. Vehículos adecuados para cápsulas de gelatina blandas incluye aceites vegetales, ceras y grasas. Dependiendo de la naturaleza de la sustancia activa, generalmente no son necesarios los vehículos en el caso de cápsulas de gelatina blanda. Vehículos adecuados para la elaboración de soluciones y jarabes son agua, polioles, sacarosa, azúcares invertidos y glucosa. Vehículos adecuados para inyección son agua, alcoholes, polioles, glicerina, aceites vegetales, fosfolípidos y surfactantes. Vehículos adecuados para supositorios son aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas y polioles semi-líquidos.

Las preparaciones farmacéuticas pueden también contener agentes preservantes, agentes solubilizantes, agentes estabilizantes, agentes humectantes, agentes emulsificantes, agentes edulcorantes, agentes colorantes, potenciadores del sabor, sales para variar la presión osmótica, tampones, agentes envolventes o antioxidantes. También pueden contener sustancias terapéuticamente valiosas, incluyendo ingredientes activos adicionales diferentes a aquellos de la

\hbox{fórmula I.}

Como se ha mencionado anteriormente, los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento o control de desordenes celulares proliferativos, en particular desordenes oncológicos. Estos compuestos y formulaciones que contienen dichos compuestos son particularmente útiles en el tratamiento o control de tumores sólidos, como, por ejemplo, tumores de mama, colon, pulmón y próstata.

Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con esta invención significa una cantidad de compuesto que es efectiva para prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto tratado. La determinación de una cantidad terapéuticamente efectiva está dentro del conocimiento en el campo.

La cantidad terapéuticamente efectiva o dosis de un compuesto de acuerdo a esta invención puede variar dentro de amplios límites y puede ajustarse a los requisitos individuales en cada caso particular. En general, en el caso de la administración oral o parenteral a humanos adultos que pesan aproximadamente 70 Kg, una dosis diaria de alrededor de 10 mg a alrededor 10,000 mg, preferiblemente de alrededor de 200 mg a alrededor 1,000 mg, será apropiado, aunque el límite superior puede excederse cuando sea necesario. La dosis diaria puede administrarse en una dosis simple o en dosis divididas, o para la administración parenteral, puede darse como una infusión continua.

La presente invención se refiere también a un método para el tratamiento de un desorden celular proliferativo que comprende la administración a un sujeto que necesita una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de fórmula I de acuerdo con la presente invención. Específicamente, la presente invención se refiere a un método para el tratamiento de cáncer , más específicamente tumores sólidos y más específicamente tumor de mama, colon, pulmón o próstata.

La presente invención se refiere también al uso de compuestos de acuerdo con la presente invención para la preparación de medicamentos. Preferiblemente, para la preparación de medicamentos para el tratamiento de cáncer y más preferiblemente para el tratamiento de tumor de mama, colon, pulmón o próstata.

En otra realización, la presente invención también está dirigida a nuevos intermediarios útiles en la preparación de compuestos de fórmula I. Estos nuevos intermediarios incluyen los siguientes compuestos:

a) terc-butil éster del ácido 2-(1-Hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico,

b) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico,

c) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico,

d) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-
inil]-5-fluoro-4-indol-1-carboxílico,

e) 5-Fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona,

f) (Z)-5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona,

g) terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-iloxi]-etil]-carbámico,

h) terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico,

i) terc-butil éster del ácido 3,4-Dimetil-2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico,

j) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico,

k) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-
oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico,

l) 5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona,

m) terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo-[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico,

n) 5-Fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona,

o) éster del ácido-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentil](\pm)-trans-Tioacético,

p) (\pm)-5-[trans-3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentilsulfanil]-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]in-
dol-2-ona, y

q) terc-butil éster del ácido (S)-3-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-pi-
rrolidina-1-carboxílico.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos ilustran métodos preferidos para sintetizar los compuestos y formulaciones de la presente invención. en los siguientes ejemplos, se usan las siguientes abreviaciones:

EtOH = etanol

THF = tetrahidrofurano

DMAP = 4-dimetilaminopiridina

TFA = ácido trifluoroacético

DMF = N,N-dimetilformamida

mCPBA = ácido meta-cloroperbenzoico

Ejemplo 1 terc-butil éster del ácido 2-(1-Hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico

15

A una solución de terc-butil éster del ácido 2-formil-pirrol-1-carboxílico (23,4 g, 120 mmol) (preparado como se describe más abajo) en THF seco ( 275 mL) se añadió cloruro de etilmagnesio (Aldrich, solución 0,5 M en THF, 480 mL, 240 mmol) gota a gota a -65ºC y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 0,5 horas. El baño enfriado se quitó y la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora para dar una solución clara. La reacción se paró añadiendo lentamente EtOH (60 mL) y una solución saturada acuosa de NH_{4}Cl (200 mL) a 5ºC, y se extrajo con acetato de etilo (3 x 250 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (200 mL) y salmuera (200 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. La purificación por cromatografía flash (Biotage, 75-S, 92/8 hexanos/acetato de etilo) del aceite crudo proporcionó terc-butil éster del ácido 2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico como un aceite ambarino. (Rendimiento 25,0 g,
94,2%).

El material de partida terc-butil éster del ácido 2-formil-pirrol-1-carboxílico se preparó a partir de 2-formil-pirrol de acuerdo con Tietze, Lutz F.; Kettschau, Georg; Heitmann, Katja.; Synthesis 1996 , (7), 851-857.

Ejemplo 2 terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico

16

A una solución de 5-fluoro-4-yodo-1,3-dihidro-indol-2-ona (7,90 g, 28,5 mmol) (preparado como se describe más abajo) y di-terc-butil-dicarbonato (Bachem, 18,5 g, 85,5 mmol) en acetonitrilo (150 mL) se añadió DMAP (Aldrich, 0,35 g, 2,9 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 6 horas, y se concentró al vacío para eliminar el solvente (hasta \sim50 mL). El residuo se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (100 ml) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. La cromatografía flash proporcionó (Biotage, 75-S, 9/1 hexanos/acetato de etilo) terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico como un sólido blanco después de la re-cristalización a partir de hexanos y se usó en el siguiente paso sin más purificaciones. (Rendimiento 7,16 g, 52,0%).

El material de partida 5-fluoro-4-yodo-1,3-dihidro-indol-2-ona se preparó de acuerdo a "Preparación de 4-alquinil-3-(pirrolilmetileno)-2-oxoindoles como inhibidores de quinasas dependientes de ciclina, en particular CDK2" Chen, Yi; Corbet, Wendy, L.; Dermatakis, A.; Liu, Jin-Jun; Luk, Quin-Chun; Mahaney, Paige, E.; Mischke, Steven G.; WO 0035908).

Ejemplo 3 terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico

17

Una solución de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 2 anterior) (9,85 g, 20,0 mmol), y terc-butil éster del ácido 2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico (del Ejemplo 1 anterior) (7,96 g, 36,0 mmol) en THF seco (85 mL) y trietilamina (Aldrich, 85 mL) se desgasificó por burbujeo de argón a través de la solución durante 15 minutos. Justo entonces se añadió yoduro de cobre(I) (0,61 g, 3,2 mmol) y (Ph_{3}P)_{4}Pd (Aldrich, 1,85 g, 1,6 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3,5 horas. La mezcla de reacción se vertió entonces en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. La cromatografía flash (Biotage, 75-S, 9/1 hexanos/acetato de etilo) proporcionó terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico como un sólido amorfo anaranjado. (Rendimiento 9,5 g, 83%).

Ejemplo 4 terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-4-indol-1-carboxílico

18

A una solución de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 3 anterior) (7,60 g, 13,3 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (400 ml) se añadió MnO_{2} (Aldrich, 11,5 g, 130 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente toda la noche y luego se filtró a través de Celite® y el sólido se lavó con CH_{2}Cl_{2} (200 mL). Los filtrados combinados se concentraron al vacío. Terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico se obtuvo como un sólido amorfo anaranjado que se usó en el siguiente paso sin más purificaciones. (Rendimiento 7,0 g, 92,5%).

Ejemplo 5 5-Fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona

19

Una suspensión de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (342,0 mg, 0,60 mmol) y catalizador de Lindlar (Aldrich, 250 mg) en THF seco (9 mL) se agitó bajo atmósfera de hidrógeno a 45ºC durante 3,0 horas. La mezcla de reacción se filtró entonces a través de Celite® y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar un sólido amorfo amarillento. (Rendimiento 331 mg).

El sólido anterior (300 mg) se disolvió en CH_{2}Cl_{2} seco (2,0 mL) y la solución se trató con TFA (Aldrich, 2,0 mL) a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se trató con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (40 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 5-fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 127 mg, 86,7%).

Ejemplo 6 6-Fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-4,5-dihidro-1H-benzo[cd]indol-2-ona

20

Una suspensión de 5-fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 5 anterior) (50 mg, 0,184 mmol) en NaOH 1,0 N (10 mL se calentó bajo reflujo toda la noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-4,5-dihidro-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 42,2 mg, 90,4%).

Ejemplo 7 6-Fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

21

Una suspensión de 5-fluoro-4-[3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 5 anterior) (20 mg, 0,073 mmol) en NaOH 1,0 N (10 mL) se calentó bajo reflujo durante 2,5 días. La reacción se diluyó con agua (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 16,5 mg,
89,0%).

Ejemplo 8 (Z)-5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona

22

A una mezcla de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (5,90 g, 10,4 mmol) y yoduro sódico (Aldrich, 4,67 g, 31,4 mmol) se añadió TFA (Aldrich, 35 mL)lentamente a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos, y se vertió entonces en una mezcla una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (400 mL) y acetato de etilo (500 mL). Después de la separación, la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 x 100 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (200 mL) y salmuera (200 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se trituró con acetato de etilo, se filtró, y se secó para dar (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona como un sólido marrón que se usó en el siguiente paso sin más purificaciones. (Rendimiento 3,86 g, 93,7%).

Ejemplo 9 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

23

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (1,58 g, 4,0 mmol) en etilendiamina (Aldrich, 70 mL) se añadió NaH (Aldrich, 95%, 1,0 g, 40 mmol) en pequeñas porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 1,5 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (200 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 150 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona bruta como un sólido marrón. (Rendimiento 1,1 g, 88,7%).

Ejemplo 10 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro

24

Se disolvió 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 9 anterior) (350 mg, 1,13 mmol) en 1,4-dioxano caliente (Fisher Scientific, 22 mL) y la solución se filtró a través de un filtro de vidrio. Se añadió gota a gota al filtrado clarificado una solución 1N de HCl en 1,4-dioxano (Aldrich, 3 mL) a temperatura ambiente. El precipitado se recogió y se lavó con 1,4-dioxano, éter y se secó al vacío para dar 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro como un sólido amarillo. (Rendimiento 212 mg, 54,0%).

Ejemplo 11 Sal del ácido 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico

25

Se disolvió 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 9 anterior) (1,38 g, 4,4 mmol) en 1,4-dioxano caliente (100 mL) y la solución se filtró a través de un filtro de vidrio. Al filtrado clarificado se añadió gota a gota una solución de ácido metanosulfónico (Aldrich, 380 mg, 3,95 mmol) en 1,4-dioxano (5 mL) a temperatura ambiente y la mezcla se dejó agitar durante 10 minutos. El precipitado se recogió y lavó con 1,4-dioxano, éter y se secó al vacío para dar el producto crudo (1,52 g) que se re-cristalizó a partir de DMF/1,4-dioxano (14 mL/50 mL) para proporcionar sal del ácido 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico como un sólido verde oscuro. (Rendimiento 1,0 g, 55,9%).

Ejemplo 12 Sal del ácido 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético

26

5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 9 anterior) (160 mg, 0,52 mmol) se purificó por RP-HPLC (C-18, eluido con 1% acetonitrilo/0,05% TFA en H_{2}O) para proporcionar la sal del ácido 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético después de la liofilización como un sólido amarillo verdoso. (Rendimiento 33 mg, 10,0%).

Ejemplo 13 6-Fluoro-5-metoxi-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

27

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (200 mg, 0,5 mmol) en metanol (20 mL) se añadió NaH (Aldrich, 60%, 0,6 g, 15 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 1,5 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada(20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 25% acetato de etilo en hexanos) para dar 6-fluoro-5-metoxi-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 73,2 mg, 51,9%).

Ejemplo 14 5-Etoxi-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

28

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (19,8 mg, 0,05 mmol) en EtOH (5 mL) se añadió NaH (Aldrich, 60%, 0,1 g, 2,5 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 2 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por TLC preparativa (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 5-etoxi-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 3,0 mg, 20,1%).

Ejemplo 15 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etilamino)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

29

A una solución de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (396 mg, 1,0 mmol) en DMF (4,0 mL) y etanolamina (Aldrich, 0,6 mL, 610 mg, 10,0 mmol) se añadió NaH (Aldrich, 95%, 270 mg, 10,0 mmol) en porciones a 0ºC. Después de agitar a la misma temperatura durante 10 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 130ºC durante 2 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (30 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 20% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etilamino)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 25,0 mg, 8,0%).

Ejemplo 16 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

30

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (396 mg, 1,0 mmol) en etilen glicol (Fisher Scientific, 60 mL) se añadió NaH (Aldrich, 95%, 2,0 g, 79,2 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 2 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 200 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (100 mL) y salmuera (100 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) para dar 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 127,0 mg, 40,7%).

Ejemplo 17 6-Fluoro-5-(3-hidroxi-propoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

31

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (198 mg, 0,5 mmol) en 1,3-propanodiol (Fluka, 7,0 g, 92 mmol) se añadió NaH (Aldrich, 60%, 0,5 g, 12,5 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 110ºC durante 2,5 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 6-fluoro-5-(3-hidroxi-propoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 51,5 mg, 31,6%).

Ejemplo 18 terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-iloxi]-etil]-carbámico

32

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (79,2 mg, 0,2 mmol) en terc-butilo N-(2-hidroxietil)-carbamato (Aldrich, 3 mL, 18,9 mmol) se añadió NaH (Aldrich, 60%, 0,2 g, 5,0 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 3,0 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) para dar terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-iloxi]-etil]-carbámico como un sólido amarillo. (Rendimiento 17,7 mg, 21,5%).

Ejemplo 19 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

33

A una solución de terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-iloxi]-etil]-carbámico (del Ejemplo 18 anterior) (16,5 mg, 0,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (1 mL) se añadió ácido trifluoro-acético (0,5 mL) a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se paró con NaOH 1,0 N (2,0 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 5-(2-amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 11,2 mg, 89,7%).

Ejemplo 20 Sal del ácido 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico

34

Se disolvió 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 19 anterior)
(62,3 mg, 0,20 mmol) en 1,4-dioxano caliente (2,5 mL) y la solución se filtró a través de un filtro de vidrio. Al filtrado clarificado se añadió gota a gota una solución de ácido metanosulfónico (Aldrich, 16,0 mg, 0,16 mmol) en 1,4-dioxano (0,2 mL) a temperatura ambiente y la mezcla se agitó durante 10 minutos. El precipitado formado se recogió y se lavó con 1,4-dioxano, éter y se secó al vacío para proporcionar sal del ácido 5-(2-amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico como un sólido amarillo. (Rendimiento 52,5 mg, 64,5%).

Ejemplo 21 Sal del ácido 5-(3-Amino-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona acético

35

A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (118,8 mg, 0,3 mmol) en 1,3-diaminopropano (Aldrich, 3 mL, 35,6 mmol) se añadió NaH (Aldrich, 90%, 53 mg, 6,6 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 2,5 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar 5-(3-amino-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (Rendimiento 25,3 mg, 26,0%) como la base libre que además fue purificada por RP-HPLC (C-18, elución con 1% acetonitrilo/0,05% ácido acético en H_{2}O) para proporcionar sal del ácido 5-(3-amino-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona acético.

Ejemplo 22 5-(2-Amino-2-metil-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

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A una suspensión de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (79,2 mg, 0,2 mmol) en 1,2-diamino-2-metilpropano (Aldrich, 3 mL, 28,4 mmol) se añadió NaH (Aldrich, 90%, 36 mg, 1,4 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó bajo reflujo durante 1 hora. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por TLC preparativa (gel de sílice, 5% metanol en acetato de etilo) para proporcionar 5-(2-amino-2-metil-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido marrón. (Rendimiento 4,4 mg,
6,5%).

Ejemplo 23 6-Fluoro-5-morfolin-4-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

37

A un recipiente cargado con terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxí-lico (del Ejemplo 4 anterior) (220 mg, 0,39 mmol) se añadió morfolina (Aldrich, 2 mL, 23 mmol) y la solución roja se agitó bajo argón a temperatura ambiente durante 10 minutos. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El residuo obtenido se redisolvió en CH_{2}Cl_{2} (2 mL) y se trató con ácido trifluoroacético a 0ºC durante 1 hora. La reacción se paro entonces con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El material marrón oscuro se suspendió entonces en NaOH 0,5 N (8 mL) y se calentó a 90ºC durante 6 horas. La reacción se paró vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por TLC preparativa (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 6-fluoro-5-morfolin-4-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 15,1 mg,
11,6%).

Ejemplo 24 Sal del ácido 6-Fluoro-5-piperazin-1-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona acético

38

A una suspensión de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (310 mg, 0,54 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL) se añadió piperacina (Aldrich, 56 mg, 65 mmol) y la solución roja se agitó bajo argón a temperatura ambiente durante 30 minutos. La reacción se paró entonces vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío.

El sólido marrón obtenido se redisolvió en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) y se trató con piperacina (Aldrich, 340 mg, 395 mmol) a temperatura ambiente durante 5 horas. La reacción se paró entonces vertiendo la mezcla de reacción en una solución acuosa saturada de cloruro de amonio enfriada (50 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 50 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (50 mL) y salmuera (50 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío.

El residuo marrón oscuro se suspendió entonces en NaOH 0,5 N (5 mL) y se calentó bajo reflujo toda la noche. La reacción se diluyó con agua (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por RP-HPLC (C-18, elución con 1% acetonitrilo/0,05% ácido acético en H_{2}O) para proporcionar sal del ácido 6-fluoro-5-piperazin-1-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona acético como un sólido amarillo. (Rendimiento 9,5 mg, 4,4%).

Ejemplo 25 6-Fluoro-5-metil-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

39

A una suspensión de yoduro de cobre(I) (Aldrich, 190 mg, 1,0 mmol) en THF seco (2 mL) se añadió metil litio (Aldrich, 1,4 M solución en éter, 1,42 mL, 2,0 mmol), bajo argón, a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó durante 15 minutos. A la solución incolora obtenida se añadió gota a gota una solución de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (39,6 mg, 0,1 mmol) en THF (2 mL). Después de agitar a 0ºC durante otros 45 minutos, la mezcla de reacción se paró con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar el producto crudo (28,5 mg) que se purifico además por TLC preparativa (gel de sílice, 20% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 6-fluoro-5-metil-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 12,6 mg, 47,4%).

Ejemplo 26 (rac)-5-sec-Butil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

40

A una suspensión de yoduro de cobre(I) (Aldrich, 190 mg, 1,0 mmol) en THF seco (2 mL) se añadió sec-butil litio (Aldrich, 1,3 M solución en éter, 1,53 mL, 2,0 mmol) , bajo argón, a 0ºC y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos. A la solución marrón obtenida se añadió gota a gota una solución de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (39,6 mg, 0,1 mmol) en THF (2 mL). Después de agitar a 0ºC durante 45 minutos, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante otras 2 horas, después se paró con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (10 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (10 mL) y salmuera (10 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar el producto crudo que además fue purificado por TLC preparativa (gel de sílice, 20% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar (rac)-5-sec-butil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 3,6 mg, 11,7%).

Ejemplo 27 5-Etil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

41

A una suspensión de cianuro de cobre(I) (Aldrich, 27 mg, 0,3 mmol) y cloruro de litio (Fluka, 25,5 mg, 0,6 mmol) en THF seco (2 mL) se añadió dietilzinc (Aldrich, 1,0 M solución en n-hexano, 3,0 mL, 3,0 mmol), bajo argón, a -20ºC y la mezcla de reacción se agitó durante 30 minutos a la misma temperatura. La mezcla de reacción ligeramente verdosa se enfrió entonces a -78ºC y se trató gota a gota con una solución de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (79,2 mg, 0,2 mmol) en THF seco (4 mL). Después de agitar a la misma temperatura durante 1 hora, la mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente toda la noche, luego se calentó bajo reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacción se paró con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (20 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 30 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (20 mL) y salmuera (20 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío para dar el producto crudo que fue purificado además por TLC preparativa (gel de sílice, 20% acetato de etilo en hexanos) para proporcionar 5-etil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 10,6 mg, 18,9%).

Ejemplo 28 6-Fluoro-5-(2-oxo-imidazolidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

42

A una suspensión de 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 9 anterior) (31,1 mg, 0,1 mmol) en 1,2-dicloroetano (3 mL) se añadió 1,1'-carbonildiimidazol (Aldrich, 162 mg, 1,0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó bajo reflujo toda la noche. La reacción se paró entonces con una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se trituró con acetato de etilo y hexanos, se filtró, y se secó para dar 6-fluoro-5-(2-oxo-imidazolidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 19,5 mg, 58,0%).

Ejemplo 29 N-[2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilamino]-etil]-acetamida

43

A una suspensión de 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidroclo-ruro (del Ejemplo 10 anterior) (35,5 mg, 0,1 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (2 mL) se añadió anhídrido acético (Fisher Scientific, 10,2 mg, 0,1 mmol) y trietilamina (Aldrich, 20,2 mg, 0,2 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a la misma temperatura y se paró entonces con una solución acuosa saturada de cloruro de amonio (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 10 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se trituró con acetato de etilo y hexanos, se filtró, y se secó para dar N-[2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilamino]-etil]-acetamida como un sólido marrón. (Rendimiento 13,5 mg, 38,4%).

Ejemplo 30 Sal del ácido 5-(2-Dimetilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd] indol-2-ona trifluoroacético

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A una suspensión de 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro (del Ejemplo 10 anterior) (69,4 mg, 0,2 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) se añadió paraformaldehído (Aldrich, 10,0 mg, 0,32 mmol) y cianoborohidruro sódico (Aldrich, 20,0 mg, 0,32 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó toda la noche. La reacción se paró entonces con agua (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se purificó por RP-HPLC (C-18, elución con 1% acetonitrilo/0,05% TFA en H_{2}O) para dar sal del ácido 5-(2-dimetilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético como un sólido marrón. (Rendimiento 10,0 mg, 11,1%).

Ejemplo 31 5-(2-Dietilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

45

A una suspensión de sal del ácido 5-(2-amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico (del Ejemplo 11 anterior) (58,04 mg, 0,14 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) se añadió acetaldehído (Aldrich, 0,39 mg, 0,39 mmol) y cianoborohidruro sódico (Aldrich, 20,0 mg, 0,32 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora. La reacción se paró entonces con agua (5 mL) y se extrajo con acetato de etilo (3 x 20 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron sucesivamente con agua (5 mL) y salmuera (5 mL), se secó sobre sulfato sódico anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se trituró con acetato de etilo y hexanos, se filtró, y se secó para dar 5-(2-dietilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido marrón. (Rendimiento 12,0 mg, 23,4%).

Ejemplo 32 6-Fluoro-5-[(R)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

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Una mezcla de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (250 mg, 0,504 mmol) y 3-R-hidroxi pirrolidina (Aldrich, 870 mg, 9,99 mmol) en DMF (5 mL) se trató con NaH (Aldrich, 120 mg, 5,04 mmol). La mezcla se agitó a aproximadamente 110ºC durante 2,5 horas y luego a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla de reacción se vertió en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo unas cuantas veces más con acetato de etilo y las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na_{2}SO_{4}, se filtraron, y se concentraron. El residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, con 0-100% acetato de etilo en hexanos y luego 0-100% de THF en acetato de etilo) para dar 6-fluoro-5-[(R)-3-hidroxi-pirrolidin-1-il)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo verdoso. (Rendimiento 6 mg, 5%).

Ejemplo 33 6-Fluoro-5-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

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Una mezcla de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (392 mg, 0,69 mmol) y 4-hidroxi-piperidina (Aldrich, 2,12 g, 20,94 mmol) en DMF (6 mL) se trató con NaH. (Aldrich, 250 mg, 10,42 mmol). La mezcla se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente y toda la noche a 120ºC. La mezcla de reacción se vertió en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo unas cuantas veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, con 0-50% acetato de etilo en gradiente de hexanos), y además purificado por HPLC (gel de sílice, 50% acetato de etilo en hexanos) y precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(4-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 85 mg, 38%).

Ejemplo 34 6-Fluoro-5-(3-hidroximetil-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

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Una mezcla de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (230 mg, 0,40 mmol) y 3-hidroximetil-piperidina (Aldrich, 1,20 g, 12,10 mmol) en DMF (6 ml) se trató con NaH (Aldrich, 146 mg, 6,08 mmol). Después de agitar durante 30 minutos a temperatura ambiente y luego 30 horas a 120ºC la mezcla se enfrió y vertió en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo unas cuantas veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía flash (gel de sílice,0-50% acetato de etilo en gradiente de hexanos) y después purificado además por HPLC (gel de sílice, 30% acetato de etilo en hexanos) y precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(3-hidroximetil-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo-[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 12 mg, 8%).

Ejemplo 35 6-Fluoro-5-(3-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

49

Una mezcla de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 4 anterior) (230 mg, 0,40 mmol) y 3-hidroxi-piperidina (Aldrich, 1,23 g, 12,13 mmol) en DMF (15 ml) se calentó a 120ºC durante 1,5 horas. La mezcla se enfrió y se añadió NaH (Aldrich, 140 mg, 5,83 mmol) en pequeñas porciones con agitación. Después de 30 minutos a temperatura ambiente y luego 20 horas a 120ºC la mezcla se enfrió y vertió en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo unas cuantas veces con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró. El residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 60% acetato de etilo en hexanos) y se purificó además por HPLC (gel de sílice, 35% acetato de etilo en hexanos) y una precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(3-hidroxi-piperidin-1-il)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 45 mg, 31%).

Ejemplo 36 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

50

Una mezcla de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (300 mg, 0,60 mmol) y 2-mercaptoetanol limpio (Sigma, 4 mL) se trató con NaH (Aldrich, 98%, 210 mg que fue emulsificado con 0,4 mL de aceite mineral) en porciones pequeñas a temperatura ambiente. Después de que la evolución de gas parara, la mezcla se calentó gradualmente a 120ºC y se agitó a esta temperatura durante 6 horas. La mezcla de reacción se vertió entonces en una mezcla de acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo unas veces más con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró. El residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, con 25% acetato de etilo en hexanos) y luego se precipitó el THF con exceso pentano para dar 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 98 mg, 49%).

Ejemplo 37 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfinil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

51

Una solución de 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 36 anterior) (15 mg, 0,05 mmol) en THF (aproximadamente 7 mL) se trató con mCPBA (Acros, 14 mg, 0,06 mmol, 75%). Después de 20 minutos, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con Na_{2}S_{2}O_{3} acuoso saturado y NaHCO_{3} Acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo resultante se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-100% acetato de etilo en gradiente de hexanos), seguida por la precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfinil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 15 mg, 96%).

Ejemplo 38 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfonil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

52

Una solución de 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 36 anterior) (40 mg, 0,12 mmol) en THF (aproximadamente 10 mL) se trató con mCPBA (Acros, 50 mg, 0,31 mmol, 75%) a temperatura ambiente durante 15 minutos y luego a 50ºC durante 15 horas. La mezcla de reacción se enfrió y luego se añadió otra porción de mCPBA (Acros, 50 mg, 0,31 mmol, 75%). Después de 6 horas más a 50ºC la mezcla de reacción se enfrió y se vertió en acetato de etilo. La mezcla se lavó con Na_{2}S_{2}O_{3} acuoso saturado y NaHCO_{3} Acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, 60% acetato de etilo en hexanos), seguida por precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(2-hidroxi-etanosulfonil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido naranja. (Rendimiento 23 mg, 52%).

Ejemplo 39 terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico

53

Una mezcla de (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (600 mg, 1,28 mmol) y terc-butil-N-(2-mercaptoetil)-carbamato limpio (Aldrich, 19 mL) se trató con NaH (Aldrich, 460 mg, 19,15 mmol) en pequeñas porciones y dentro de un peryodo de 30 minutos a temperatura ambiente. Después de que la evolución de hidrógeno parara, la mezcla se calentó gradualmente a 120ºC. El lodo viscoso se agitó a esta temperatura durante 2 horas y luego se dejó enfriar. La mezcla se repartió entre acetato de etilo y agua. La fase acuosa se extrajo dos veces más con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se secó y se concentró para dar un residuo sólido. Este residuo se lavó con pentano y se purificó por HPLC (gel de sílice, 25% acetato de etilo en hexanos), seguida por precipitación de THF con exceso de pentano para dar terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]-indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico como un sólido amarillo. (Rendimiento 470 mg, 84%).

Ejemplo 40 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

54

Terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico (del Ejemplo 39 anterior) (30 mg) se disolvió a 0ºC en 50% de TFA en una solución de CH_{2}Cl_{2} (aproximadamente 3 mL) que contenía H_{2}O (0,01 mL). Después de agitar durante 2,5 horas la mezcla se vertió en acetato de etilo y se extrajo con hidróxido de amonio acuoso. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se evaporó formando un sólido amarillo. Este sólido se purificó por la precipitación de THF con exceso de pentano para dar 5-(2-amino-etanosulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 18 mg, 78%).

Ejemplo 41 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro

55

Una solución de 5-(2-amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 40 anterior) (20 mg, 0,06 mmol) en DMF (2,5 mL) se trató con HCl acuoso con fuerte agitación. La solución se liofilizó y el residuo se disolvió en metanol, se filtró y se concentró. El residuo se purificó además por precipitación de metanol/ CH_{2}Cl_{2} (1:3) con exceso de pentano para dar 5-(2-amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro como un sólido amarillo oscuro. (Rendimiento 17 mg, 76%).

Ejemplo 42 5-(2-Amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

56

Una solución de terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico (del Ejemplo 39 anterior) (150 mg, 0,35 mmol) en THF (aproximadamente 15 mL) se trató con mCPBA (Acros, 97 mg, 0,42 mmol, 75%) a 0ºC. La mezcla de reacción se dejó agitar y calentar a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla se vertió en acetato de etilo y se lavó sucesivamente con Na_{2}S_{2}O_{3} acuoso saturado y K_{2}CO_{3} Acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, se concentró y el residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, 40% acetato de etilo en hexanos). Al intermediario resultante se precipitó el THF con exceso de pentano. Este material se disolvió entonces a 0ºC en una solución al 50% de TFA en CH_{2}Cl_{2} (10 mL) que contenía H_{2}O (0,5 mL) y se agitó durante 2 horas. Hasta completarse, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se extrajo con hidróxido de amonio acuoso. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró para dar un sólido naranja. Este sólido se disolvió en THF y se precipitó con exceso de pentano para dar 5-(2-amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-in-dol-2-ona como un sólido naranja. (Rendimiento 75 mg, 62%).

Ejemplo 43 5-(2-Amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro

57

Una solución de 5-(2-amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona (del Ejemplo 42 anterior) (20 mg, 0,06 mmol) en DMF (aproximadamente 2,5 mL) se trató con HCl acuoso con fuerte agitación. La solución se liofilizó y el residuo se disolvió en metanol, se filtró y se concentró. El material resultante se purificó además por precipitación de MeOH/CH_{2}Cl_{2} (3:1) con exceso de pentano para dar 5-(2-amino-etanosulfinil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona sal de hidrocloruro como un sólido naranja. (Rendimiento 19 mg, 77%).

Ejemplo 44 5-(2-Amino-etanosulfonil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

58

A una solución de terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico (del Ejemplo 39 anterior) (100 mg) en THF (aproximadamente 15 mL) se añadió K_{2}CO_{3} sólido (64 mg, 0,59 mmol). A este lodo se añadió mCPBA (Acros, 135 mg, 0,59 mmol, 75%) a temperatura ambiente. Después de 15 minutos a temperatura ambiente la mezcla de reacción se calentó a aproximadamente 60ºC. Después de agitar a 60ºC durante 5,5 horas, la mezcla se enfrió y se añadió otra porción de mCPBA (130 mg). Después de agitar durante 16 horas más a 60ºC, se añadió otra porción de mCPBA (260 mg) y K_{2}CO_{3} (64 mg). La mezcla de reacción se agitó durante otras 9 horas y se añadió una porción final de mCPBA (135 mg). Esta mezcla se agitó de nuevo toda la noche a 60ºC. La mezcla de reacción se diluyó entonces con EtOAc y se lavó con Na_{2}S_{2}O_{3} acuoso saturado y K_{2}CO_{3} Acuoso saturado. La fase orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se concentró, y el residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, 25% acetato de etilo en tolueno) y precipitación de THF con exceso de pentano. El intermediario obtenido así se secó y se disolvió a 0ºC en una solución al 50% de TFA en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) que contenía H_{2}O (0,2 mL). Después de 2 horas la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se extrajo con hidróxido de amonio acuoso y luego con NaOH 5N. El pH de la fase acuosa se ajustó con HCl concentrado a 9 y luego se separó la capa de acetato de etilo, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró hasta secarlo. El residuo además se purificó por precipitación de THF con exceso de pentano para dar 5-(2-amino-etanosulfonil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido rojo anaranjado. (Rendimiento 8 mg, 10%).

Ejemplo 45 3,4-Dimetil-2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico terc-butil éster del ácido

59

A una solución de terc-butil éster del ácido 3,4-dimetil-2-formil-pirrol-1-carboxílico (3,18 g, 14,2 mmol) (preparado como se describe en Tietze et al., supra,) en THF seco (40 mL) se añadió cloruro de etinilmagnesio (Aldrich, solución 0,5 M en THF, 57 mL, 28,5 mmol) gota a gota a -65ºC y la mezcla de reacción se agitó a la misma temperatura durante 0,5 horas. Se quitó entonces el baño frío y la mezcla de reacción se agitó durante otras 2 horas para dar una solución clara. La reacción se paró lentamente añadiendo EtOH (8 mL) y una solución acuosa saturada de NH_{4}Cl (26 mL) a 5ºC. La mezcla se extrajo varias veces con acetato de etilo. El extracto orgánico combinado se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. La purificación en cromatografía flash (gel de sílice, 95:5 hexanos/acetato de etilo) del aceite crudo proporcionó terc-butil éster del ácido 3,4-dimetil-2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carbo-xílico como un aceite amarillo. (Rendimiento 3,54g, 100,0%).

Ejemplo 46 terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico

60

Una solución de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 2 anterior) (1 g, 2,22 mmol), y terc-butil éster del ácido 3,4-dimetil-2-(1-hidroxi-prop-2-inil)-pirrol-1-carboxílico (del Ejemplo 45 anterior) (1,38 g, 5,54 mmol) en THF seco (12 mL) y trietilamina (Aldrich, 12 mL) se desgasificó aireando argón a través de la solución durante 10 minutos. Entonces se añadió yoduro de cobre(I) (Aldrich, 84,4 mg, 0,44 mmol) y (Ph_{3}P)_{4}Pd (0,25 g, 0,22 mmol), y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente toda la noche. La mezcla de reacción se filtró y se concentró al vacío. La cromatografía flash (gel de sílice, 85:15 hexanos/acetato de etilo) proporcionó terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico como un aceite naranja. (Rendimiento 0,76 g, 57%).

Ejemplo 47 terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico

61

A una solución de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico (del Ejemplo 46 anterior) (0,76 g, 1,33 mmol) en
CH_{2}Cl_{2} (20 mL) se añadió MnO_{2} (Aldrich, 1,36 g, 13,3 mmol) en una porción. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas. La mezcla de reacción se filtró entonces a través de Celite® y el sólido se lavó con CH_{2}Cl_{2}. Los filtrados combinados se concentraron al vacío para dar terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxi-carboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxí-lico crudo como un sólido marrón que se usó en el siguiente paso sin más purificaciones. (Rendimiento 0,79 g, 100%).

Ejemplo 48 5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona

62

A una mezcla de terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarboniloxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carbo-xílico (del Ejemplo 47 anterior) (0,79 g, 1,33 mmol) y yoduro sódico (Aldrich, 0,50 g, 3,33 mmol) se añadió lentamente TFA (Aldrich, 15 mL) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1,5 horas, y se diluyó entonces con acetato de etilo y una solución acuosa saturada de bicarbonato sódico. Después de la separación, la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El producto crudo se trituró con acetato de etilo, se filtró, y se secó para dar 5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona como un sólido marrón que se usó en el siguiente paso sin más purificaciones. (Rendimiento 0,40 g, 71,4%).

Ejemplo 49 terc-butil éster del ácido [2-[6-Fluoro-2-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico

63

A una suspensión de 5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 48 anterior) (1,58 g, 4,0 mmol) en terc-butil-N-(2-mercaptoetil)-carbamato (Aldrich, 8 mL) se añadió NaH (Aldrich, 95%, 0,3 g, 11,8 mmol) en porciones a temperatura ambiente. Después de agitar a temperatura ambiente durante 30 minutos, la mezcla de reacción se calentó a 120ºC durante 3 horas. La reacción se paró al añadir salmuera y acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. La purificación del residuo por cromatografía flash (gel de sílice, 4:1 hexanos/acetato de etilo) proporcionó terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico como un aceite naranja. (Rendimiento 66 mg, 31%).

Ejemplo 50 Sal del ácido 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético

64

A una solución de terc-butil éster del ácido [2-[6-fluoro-2-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-etil]-carbámico (del Ejemplo 49 anterior) (66 mg, 0,145 mmol) en CH_{2}Cl_{2} (5 mL) se añadió TFA (Aldrich, 2,5 mL) a 0ºC. La mezcla se agitó a 0ºC durante 1 hora. Se añadieron hidróxido de amonio acuoso (4 mL) y acetato de etilo. La fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las capas de acetato de etilo se combinaron y se lavaron con salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtró, y se concentró al vacío. El residuo se purificó por RP-HPLC (C-18, elución con 1% acetonitrilo/0,05% TFA en H_{2}O) para dar sal del ácido 5-(2-amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético como un sólido amarillo verdoso. (Rendimiento 20 mg, 29,4%).

Ejemplo 51 (\pm)-cis-3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentanol

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65

A una solución de (\pm)-cis-terc-butil-dimetil-(6-oxa-biciclo[3,1,0]hex-3-iloxi)-silano (preparado como se describe más abajo) (2,15 g, 9,99 mmol) en EtOH (aproximadamente 70 mL) se añadió 10% de Pd/C (Aldrich, 500 mg). Esta mezcla se hidrogenó con un hidrogenador Parr a 1 atmósfera de presión durante 24 horas y luego a 50 psi durante otras 24 horas. Hasta entonces se añadió otra porción de Pd/C al 10% (500 mg) y la mezcla de reacción se hidrogenó durante otras 24 horas. Entonces la mezcla de reacción se filtró y el catalizador se lavó con THF. Las fases orgánicas combinadas se evaporaron y el residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-100% éter en gradiente de hexanos) para dar (\pm)-cis-3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentanol como un aceite incoloro. (Rendimiento 1,81 g; 83%).

El material de partida (\pm)-cis-terc-butil-dimetil-(6-oxa-biciclo[3,1,0]hex-3-iloxi)-silano fue preparado por protección estándar de terc-butil-dimetilsililo de (\pm)-cis-6-oxa-biciclo[3,1,0]hexan-3-ol. (\pm)-cis-6-Oxa-biciclo [3,1,0]hexan-3-ol se preparó de acuerdo a Feeia, D. J. Org. Chem. 1981, 46, 3512-3519.

Ejemplo 52 Éster del ácido-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclo-pentil] (\pm)-trans-tioacético

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66

A una solución de (+)-cis-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentanol (del Ejemplo 51 anterior) (2,6 g, 12,02 mmol) y trifenil fosfina (Aldrich, 7,9 g, 30,12 mmol) en THF seco (100 mL) a 0ºC se añadió gota a gota dietil azodicarboxilato (Aldrich, 4,8 mL, 30,48 mmol). Después de agitar durante 15 minutos se añadió gota a gota ácido tioacético (Aldrich, 2,2 mL, 30,78 mmol). La mezcla de reacción se dejó reaccionar a temperatura ambiente lentamente y se agitó toda la noche. Luego, la mezcla de reacción se concentró y el residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-5% éter en gradiente de hexanos) para dar éster del ácido-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentil] (+)-trans-tioacético como un líquido amarillento. (Rendimiento 2,36 g, 72%).

Ejemplo 53 (+)-5-[trans-3-(terc-Butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentilsulfanil]-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

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A una solución de éster del ácido-[3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentil] (\pm)-trans-tioacético (del Ejemplo 52 anterior) (2,4 g, 8,74 mmol) en metanol (60 mL) se añadió K_{2}CO_{3} (1,45 g, 10,48 mmol) y la mezcla de reacción se agitó toda la noche. La mezcla de reacción se concentró en un volumen pequeño y el residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-7% éter en hexanos para proporcionar el tilo desprotegido como un aceite amarillento. A este intermediario se añadió (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (150 mg, 0,30 mmol) y luego NaH (110 mg, 4,53 mmol) en pequeñas porciones a temperatura ambiente. Después de que la evolución de hidrógeno cesara, la mezcla de reacción se calentó a 120ºC. Después de 15 minutos a esta temperatura, se añadió DMF (0,1 mL) para facilitar la disolución y la mezcla de reacción se agitó durante otros 45 minutos a 120ºC. Hasta completarse, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y H_{2}O. La capa de H_{2}O se extrajo con acetato de etilo (2X) y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se concentró. El residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, 25% acetato de etilo en hexanos) para dar (\pm)-5-[trans-3-(terc-butil-dimetil-silaniloxi)-ciclopentilsulfanil]-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 7,8 mg, 5%).

Ejemplo 54 6-Fluoro-5-(-(S)-pirrolidin-2-ilmetilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

68

A (S)-N-Boc-tioprolinol (preparado como se describe más abajo) (2,5 g, 11,50 mmol) se añadió (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (150 mg, 0,302 mmol) y luego NaH (110 mg, 4,53 mmol) en pequeñas porciones. Después de que la evolución de hidrógeno cesara, la mezcla se calentó hasta 120ºC durante 1 hora y luego se enfrió y repartió entre acetato de etilo y H_{2}O. La capa de H_{2}O se lavó de nuevo con acetato de etilo (2X). La fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró. El residuo resultante se purificó por HPLC (gel de sílice, 30% acetato de etilo en hexanos), se precipitó el THF con exceso de pentano, se secó y se disolvió en una solución al 50% de TFA en CH_{2}Cl_{2} (6 mL) que contenía H_{2}O (0,2 mL) a 0ºC. Después de 2 horas esta mezcla se repartió entre acetato de etilo y NaOH 1N acuoso. El pH de la fase acuosa se ajustó a 14 con NaOH 1N y la fase acuosa se separó y se extrajo dos veces más con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con H_{2}O (2X), se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se evaporó hasta secarlo. Este residuo se purificó por precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-(-(S)-pirrolidin-2-ilmetilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo-[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo oscuro. (Rendi-miento 45 mg, 41%).

S-N-Boc-tioprolinol se preparó de acuerdo a Gilbertson, S.R.; Lopez, O. D. J. Am. Chem Soc. 1997, 119, 3399-3400.

Ejemplo 55 terc-butil éster del ácido (S)-3-mercapto-pirrolidina-1-carboxílico

69

Una solución de N-terc-butiloxicarbonil-(R)-(-)-pirrolidinol (preparado como se describe más abajo) (3,00 g, 16,04 mmol) y trifenilfosfina (Aldrich, 4,63 g, 17,64 mmol) en THF seco (70 mL) se trató a 0ºC con dietil azodicarboxilato (3,07 g, 2,80 mL, 17,64 mmol). Después de 10 minutos, se añadió ácido tioacético (Aldrich, 1,34 g, 1,26 mL, 17,64 mmol) y la mezcla de reacción se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente y en agitación toda la noche. La mezcla de reacción se concentró en un volumen pequeño y se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-30% éter en gradiente de hexanos). Se combinaron las fracciones que contienen el producto, y los solventes se evaporaron y el residuo resultante se trató con pentano y se filtró. El pentano filtrado se evaporó para proporcionar el intermediario deseado del éster del ácido tioacético (2,24 g) que se disolvió inmediatamente en metanol (60 mL). A esta solución se añadió K_{2}CO_{3} (1,5 g, 10,97 mmol) a temperatura ambiente y la reacción se agitó toda la noche. La mezcla de reacción se concentró en un volumen pequeño y el residuo se purificó por cromatografía flash (gel de sílice, 0-25% acetato de etilo en gradiente de hexanos) para dar terc-butil éster del ácido (S)-3-mercapto-pirrolidina-1-carboxílico como un líquido amarillo pálido. (Rendimiento 1,4 g; 38%).

El material de partida N-terc-butiloxicarbonil-(R)-(-)-pirrolidinol se preparó de acuerdo a Kucznierz, R; Grams, F.; Leinert, H.; Marzenell, K.; Engh, R. A.; von der Saal, W. J. Med. Chem. 1998, 41, 4983-4994.

Ejemplo 56 terc-butil éster del ácido (S)-3-[6-Fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-pirrolidina-1-carboxílico

70

A una mezcla de terc-butil éster del ácido (S)-3-mercapto-pirrolidina-1-carboxílico (del Ejemplo 55 anterior) (1,35 g, 5,81 mmol) y (Z)-5-fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona (del Ejemplo 8 anterior) (100 mg, 0,20 mmol) se añadió NaH (48 mg, 2,01 mmol) en pequeñas porciones a temperatura ambiente. Después de que la evolución del hidrógeno cesara, la mezcla se calentó a 120ºC durante 1 hora luego se enfrió y se repartió entre acetato de etilo y agua. La capa de agua se extrajo con acetato de etilo (3X) y la fase orgánica combinada se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró y se concentró. El residuo se purificó por HPLC (gel de sílice, 25% acetato de etilo en hexanos) seguida por una precipitación de THF con exceso de pentano para dar terc-butil éster del ácido (S)-3-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-pirrolidina-1-carboxílico como un sólido amarillo. (Rendimiento 57 mg; 62%).

Ejemplo 57 6-Fluoro-5-[(S)-(pirrolidin-3-ilsulfanil)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona

71

Terc-butil éster del ácido (S)-3-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-pirrolidina-1-carboxílico (del Ejemplo 56 anterior) (54 mg, 0,12 mmol) se disolvió a 0ºC en a 50% TFA en una solución de CH_{2}Cl_{2} (6 mL) que contenía H_{2}O (0,3 mL). Después de 2 horas la mezcla de reacción se repartió entre acetato de etilo y NaOH 1N acuosa. El pH de la fase acuosa se ajustó a 14. La fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo y la fase orgánica combinada se lavó con H_{2}O, se secó sobre Na_{2}SO_{4}, se filtró, y se concentró hasta secarla. El residuo se purificó por precipitación de THF con exceso de pentano para dar 6-fluoro-5-[(S)-(pirrolidin-3-ilsulfanil)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona como un sólido amarillo. (Rendimiento 41 mg; 97%).

Ejemplo 58 Actividad Antiproliferativa

La actividad antiproliferativa de los compuestos de la invención se demuestra más abajo. Estas actividades indican que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento del cáncer, en particular tumores sólidos como tumores de mama y colon.

Ensayo CDK2 en FlashPlate

Para determinar la inhibición de la actividad CDK2, se recubrió en FlashPlates de 96 pozos (New England Nuclear, Boston, MA) con la proteína recombinante purificada de retinoblastoma (Rb). Rb es un sustrato natural para la fosforilación por CDK2 (Herwig y Strauss Eur. J. Biochem., Vol. 246 (1997) p. 581-601 y las referencias allí dadas). Los complejos recombinantes de la Ciclina humana activa E/CDK2 se purificó parcialmente a partir de extractos de células de insecto. La Ciclina E/CDK2 activa se añadió a los FlashPlates cubiertos con Rb con ^{33}P-ATP y diluciones de los compuestos a probar. Las placas se incubaron durante 25 minutos a temperatura ambiente con agitación, luego se lavaron y se contaron en un contador de centelleo Topcount (Packard Instrument Co., Downers Grove, IL). Diluciones de los compuestos del ensayo se probaron por duplicado en cada ensayo. El porcentaje de inhibición de fosforilación de Rb, que es una medida de la inhibición de la actividad CDK2, se determinó de acuerdo con la siguiente fórmula:

72

donde "compuesto prueba" se refiere a la media de centelleos por minuto de los duplicados del ensayo, "no específico" se refiere a la media de centelleos por minuto cuando no se añade Ciclina E/CDK2, y "total" se refiere a la media de centelleos por minuto cuando no se añade el compuesto.

Los resultados de los experimentos anteriores in vitro están señalados en la Tabla I más abajo. El valor de IC_{50} es la concentración del compuesto prueba que reduce en un 50% la incorporación inducida de la protein-quinasa de la marca radioactiva bajo las condiciones del ensayo descritas.

Cada uno de los compuestos de la Tabla I posee una IC_{50} inferior o igual a 10 \muM.

TABLA I

Ejemplo	CDK2 IC_{50}
7	\leq10
13	\leq10
6	\leq10
23	\leq10
16	\leq10
14	\leq10
9	\leq10
12	\leq10
11	\leq10
15	\leq10
24	\leq10
21	\leq10
32	\leq10
22	\leq10
33	\leq10
34	\leq10
29	\leq10
20	\leq10
35	\leq10
31	\leq10
25	\leq10
28	\leq10
26	\leq10
36	\leq10
38	\leq10
40	\leq10
41	\leq10
44	\leq10
27	\leq10
42	\leq10
43	\leq10
50	\leq10
17	\leq10

Ensayos Basados en Células (Ensayo de proliferación de tinta de Tetrazolio)

La proliferación se evaluó mediante el ensayo de tinte de tetrazolio de acuerdo con el proceso de Denizot y Lang (Denizot, F. y Lang, R. J. Immunol Methods 1986, 89, 271-277). Las líneas celulares usadas fueron MDA-MB435, una línea celular de carcinoma de mama y RKO, una línea celular de carcinoma de colon.

El receptor negativo de estrógenos de la línea de carcinoma epitelial de mama (MDA-MB435) se adquirió de la Colección Americana de Tipos de Cultivos Celulares (ATCC; Rockville, MD) y se hizo crecer en el medio recomendado por ATCC. Para analizar el efecto de los compuestos prueba en el crecimiento de estas células, se colocaron 2000 células por pozo en una placa de cultivos de tejidos de 96-pozos, y se incubaron toda la noche a 37ºC con 5% de CO_{2}. Al día siguiente, los compuestos prueba se disolvieron en dimetil sulfóxido al 100% (DMSO) para proporcionar una solución stock 10 mM. Cada compuesto se diluyó con medio estéril a 1 mM en una cantidad suficiente para dar lugar a una concentración final de 120 \muM. Los compuestos se diluyeron entonces de forma seriada en medio con 1,2% de DMSO. Un cuarto del volumen final de los compuestos diluidos se transfirió a las placas de 96 pozos. Los compuestos prueba se probaron por duplicado. El DMSO se añadió a una fila de "células control" siendo la concentración final de DMSO en cada pozo de 0,3%. Los pozos a los que no se les añadió células sirvieron como "blancos." Los pozos a los que no se les añadió inhibidor sirvieron como "control sin inhibidor". Las placas se devolvieron al incubador, y 5 días después de la adición del compuesto prueba, se analizaron como se describe más abajo.

Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difenil-2H-tetrazolio (azul de tiazolilo; MTT) se añadió a cada pozo para dar una concentración final de 1 mg/mL. Las placas se incubaron entonces a 37ºC durante 3 horas. Las placas se centrifugaron a 1000 rpm durante 5 minutos antes de aspirar las MTT-que contienen medio. Las MTT-que contienen medio se eliminaron y se añadió 100 \muL de EtOH al 100% a cada pozo para disolver el metabolito de formazan resultante. Para asegurar una disolución completa, las placas se agitaron durante 15 minutos a temperatura ambiente. Las absorbancia se leyeron en un lector de placas de micropocillos (Molecular Dynamics) a una longitud de onda de 570 nm con una referencia a 650 nm. El porcentaje de inhibición se calculó restando la absorbancia de los pozos en blanco (sin células) de todos los pozos, luego se resta de 1,00, el resultado de la división de la absorbancia media de cada duplicado del ensayo de la media de los controles. Las concentraciones (IC_{50}) inhibitorias se determinaron a partir de la regresión linear de la representación del logaritmo de la concentración versus el porcentaje de inhibición.

La línea de carcinoma de colon RKO se obtuvo también del ATCC y se probó de acuerdo con el mismo protocolo proporcionado excepto que la línea celular RKO se incubó con 500 células por pozo.

Los resultados de las pruebas in vitro se muestran más abajo en las Tablas II y III. Cada uno de los compuestos en las Tablas II y III presentan una IC_{50} inferior o igual a 10 \muM.

TABLA II Actividad Antiproliferativa en la Línea Celular MDA-MB435*

Ejemplo	MDA MB435 IC_{50} (\muM)
7	\leq10
13	\leq10
6	\leq10
23	\leq10
16	\leq10
9	\leq10
12	\leq10
11	\leq10
15	\leq10
24	\leq10
21	\leq10
32	\leq10

TABLA II (continuación)

Ejemplo	MDA MB435 IC_{50} (\muM)
22	\leq10
33	\leq10
34	\leq10
19	\leq10
35	\leq10
36	\leq10
38	\leq10
40	\leq10
41	\leq10
44	\leq10
42	\leq10
43	\leq10
50	\leq10

* La mayoría de los datos reflejan los resultados de un experimento. En los casos en los que el experimento se repite, los datos anteriores son una media de los resultados de los experimentos por separado.

TABLA III Actividad Antiproliferativa en la Línea Celular RKO*

Ejemplo	RKO IC_{50} (\muM)
7	\leq10
13	\leq10
6	\leq10
23	\leq10
16	\leq10
9	\leq10
12	\leq10
11	\leq10
15	\leq10
24	\leq10
21	\leq10
32	\leq10

TABLA III (continuación)

Ejemplo	RKO IC_{50} (\muM)
22	\leq10
33	\leq10
34	\leq10
19	\leq10
35	\leq10
36	\leq10
37	\leq10
38	\leq10
40	\leq10
41	\leq10
44	\leq10
42	\leq10
43	\leq10
50	\leq10

Ejemplo 59 Formulación de Comprimidos

77

* El compuesto A representa un compuesto de el invención.

Proceso de elaboración

1.: Mezclar los objetos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 15 minutos.

2.: Granular la mezcla del polvo obtenido en el paso 1 con una Solución al 20% de Povidone K30 (Objeto 4).

3.: Secar la granulación del paso 2 a 50ºC.

4.: Pasar la granulación del paso 3 a través de un equipo de molienda adecuado.

5.: Añadir el objeto 5 a la granulación molids del paso 4 y mezclar durante 3 minutos.

6.: Comprimir la granulación del paso 5 en una prensa adecuada.

Ejemplo 60 Formulación de Cápsulas

79

* El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Proceso de elaboración

2.: Añadir los objetos 4 y 5 y mezclar durante 3 minutos.

3.: Introducir en una cápsula adecuada.

Ejemplo 61 Solución Inyectable/Preparación en Emulsión

81

* El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Proceso de elaboración

1.: Disolver el objeto 1 en el objeto 2.

2.: Añadir los objetos 3, 4 y 5 al objeto 6 y mezclar hasta dispersar, luego homogeneizar.

3.: Añadir la solución del paso 1 a la mezcla del paso 2 y homogeneizar hasta que la dispersión sea transparente.

4.: Filtrar estérilmente a través de un filtro de 0,2 \mum y rellenar los recipientes.

Ejemplo 62 Solución Inyectable/Preparación en Emulsión

82

* El compuesto 1 representa un compuesto de el invención.

Proceso de elaboración

1.: Disolver el objeto 1 en el objeto 2.

2.: Añadir los objetos 3, 4 y 5 al objeto 6 y mezclar hasta dispersarlos, luego homogeneizar.

Mientras que la invención se ha mostrado en referencia a realizaciones específicas y preferidas, aquellos ilustrados en el campo entenderán que las variaciones y modificaciones pueden hacerse a través de la experimentación rutinaria y la práctica de la invención. De este modo, la invención no se limita a la descripción detallada, pero se define por las reivindicaciones anexadas y sus equivalentes.

Claims

1. Un compuesto de fórmula:

83

O las sales o ésteres farmacéuticamente aceptables del mismo, en donde:

: R^{1} es seleccionado del grupo consistente en

: -H, -OR^{5}, halógeno, -CN, -NO_{2},, -COR^{5}, -COOR^{5}, -CONR^{5}R^{6}, -NR^{5}R^{6}, -S(O)_{n}R^{5}, -S(O)_{2}NR^{5}R^{6}, y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

: R^{2} es seleccionado del grupo consistente en

: -H, -OR^{5}, halógeno, -CN, -NO_{2}, -COR^{5}, -COOR^{5}, -CONR^{5}R^{6}, -NR^{5}R^{6}, -S(O)_{n}R^{5}, -S(O)_{2}NR^{5}R^{6}, C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}, ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}, y heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8};

: R^{3} y R^{4} están cada uno independientemente seleccionado del grupo de

: -H, -OR^{5}, -CN, -NO_{2}, -COR^{5}, -COOR^{5}, -CONR^{5}R^{6}, -NR^{5}R^{6}, -S(O)_{n}R^{5},

: -S(O)_{2}NR^{5}R^{6}, y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

: R^{5} es seleccionado del grupo consistente en

: -H, C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}, ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo que opcional-mente puede estar sustituido por R^{8}, arilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}, heteroarilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}, y heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8};

: R^{6} es seleccionado del grupo de

: -H, -COR^{9}, -CONR^{9}R^{10}, -S(O)_{n}R^{9}, -S(O)_{2}NR^{9}R^{10}, C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}, y ciclo- C_{3}-C_{8}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8},

: o, alternativamente, NR^{5}R^{6} opcionalmente puede formar un anillo formado por 5-6 átomos, dicho anillo opcionalmente incluye uno o más hetero átomos adicionales y siendo opcionalmente sustituido por R^{8};

: R^{7} es seleccionado del grupo de

: -OR^{9}, halógeno, -CN, -NO_{2}, -COR^{9}, -COOR^{9}, -CONR^{9}R^{10}, -NR^{9}R^{10},-S(O)_{n}R^{9}, -S(O)_{n}NR^{9}R^{10};

: R^{8} es seleccionado del grupo de

: OR^{9}, -CN, =O, -NO_{2}, -COR^{9}, -COOR^{9}, -CONR^{9}R^{10}, -NR^{9}R^{10}, -S(O)_{n}R^{9}, -S(O)_{2}NR^{9}R^{10}, y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7};

: R^{9} es seleccionado del grupo de

: -H, C_{1}-C_{6}-alquilo y ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo;

: R^{10} es seleccionado del grupo consistente en

: -H, -COR^{11}, C_{1}-C_{6}-alquilo y ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo,

: o, alternativamente, NR^{9}R^{10} opcionalmente puede formar un anillo que posee 5-6 átomos, dicho anillo opcionalmente incluye uno o más hetero átomos adicionales;

: R^{11} es seleccionado del grupo consistente en

: C_{1}-C_{6}-alquilo y ciclo-C_{3}-C_{8}-alquilo;

: a es un enlace opcional; y

: n es 0, 1 ó 2.

2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde, R^{1} es seleccionado del grupo consistente en H, halógeno, C_{1}-C_{6}-alquilo sustituido por halógeno, -NO_{2}, -CONR^{5}R^{6}, y -CN.

3. El compuesto de la reivindicación 1 y 2 en donde el C_{1}-C_{6}-alquilo sustituido por halógeno es perfluoro-alquilo.

4. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en donde el perfluoroalquilo es -CF_{3}.

5. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde R^{2} es seleccionado del grupo consistente en -H, -OR^{5}, -NO_{2}, -CONR^{5}R^{6}, -S(O)_{n}R^{5} y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7} .

6. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 en donde -OR^{5} es seleccionado del grupo consistente en -OCH_{3}, -OCH_{2}CH_{3}, -OCH_{2}CH_{2}OH, -OCH_{2}CH_{2}CH_{2}OH, y -OCH_{2}CH_{2}NH_{2}.

7. El compuesto de la reivindicación 5 en donde el C_{1}-C_{6}-alquilo sustituido por halógeno es perfluoroalquilo.

8. El compuesto de la reivindicación 7 en donde el perfluoroalquilo es -CF_{3}.

9. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8 en donde R^{2} es -NR^{5}R^{6}.

10. El compuesto de la reivindicación 9 en donde el -NR^{5}R^{6} grupo es-NHCH_{2}CH_{2}NH_{2}.

11. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 en donde R^{3} es seleccionado del grupo consistente en H y C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}.

12. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 en donde R^{4} es H.

13. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 en donde R^{5} es seleccionado del grupo consistente en C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7} y heterociclo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{8}.

14. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13 en donde R^{6} es C_{1}-C_{6}-alquilo que opcionalmente puede estar sustituido por R^{7}.

15. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14 en donde -NR^{5}R^{6} es un anillo que posee de 5-6 átomos, dicho anillo opcionalmente incluye uno o más hetero átomos adicionales y siendo opcionalmente sustituido por R^{8}.

16. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15 en donde R^{7} es seleccionado del grupo consistente en -OR^{9} y -NR^{9}R^{10}.

17. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 16 en donde R^{8} es seleccionado del grupo consistente en -OR^{9} y -NR^{9}R^{10}.

18. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17 en donde R^{9} es seleccionado del grupo consistente en H y C_{1}-C_{6}-alquilo.

19. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18 en donde R^{10} es seleccionado del grupo consistente en H y C_{1}-C_{6}-alquilo.

20. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19 en donde n es 0.

21. El compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20 en donde "a" es un enlace.

22. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 seleccionado del grupo consistente en

a) 6-Fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

b) 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

d) sal del ácido 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfónico,

e) sal del ácido 5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacé-tico,

f) 6-Fluoro-5-metoxi-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]-indol-2-ona,

g) 5-Etoxi-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

h) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etilamino)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

i) 6-Fluoro-5-(2-hidroxi-etoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

j) 6-Fluoro-5-(3-hidroxi-propoxi)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

k) 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

l) sal del ácido 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona metanosulfó-nico,

m) sal del ácido 5-(3-Amino-propilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona acético,

o) 6-Fluoro-5-morfolin-4-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

p) sal del ácido 6-Fluoro-5-piperazin-1-il-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona acético,

q) 6-Fluoro-5-metil-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

r) (rac)-5-sec-Butil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

s) 5-Etil-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

v) sal del ácido 5-(2-Dimetilamino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético,

jj) sal del ácido 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona trifluoroacético,

kk) 6-Fluoro-5-(-(S)-pirrolidin-2-ilmetilsulfanil)-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

ll) terc-butil éster del ácido (S)-3-[6-fluoro-2-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-1,2-dihidro-benzo[cd]indol-5-ilsulfanil]-pirrolidina-1-carboxílico,

mm) 6-Fluoro-5-[(S)-(pirrolidin-3-ilsulfanil)]-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

nn)5-(2-Amino-etilamino)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

oo) 5-(2-Amino-etoxi)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona, y

pp) 5-(2-Amino-etilsulfanil)-6-fluoro-3-(1H-pirrol-2-il)-1H-benzo[cd]indol-2-ona,

y las sales o ésteres farmacéuticamente aceptables de los compuestos expuestos.

23. Una composición farmacéutica que comprende como ingrediente activo una cantidad efectiva de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 y un vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable.

24. La composición farmacéutica de la reivindicación 23 que sea adecuada para la administración parenteral.

25. El uso del compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 para la preparación de medicamentos.

26. El uso de la reivindicación 25 para la preparación de medicamentos para el tratamiento de trastornos proliferativos celulares.

27. El uso de la reivindicación 29 para la preparación de medicamentos para el tratamiento de cáncer.

28. El uso de la reivindicación 25 para la preparación de medicamentos para el tratamiento de cáncer.

29. El uso de acuerdo con las reivindicaciones 25 y 27 en donde el cáncer es un tumor de mama, colon, pulmón o próstata.

30. Un compuesto intermediario para la preparación de un compuesto de acuerdo a cualquiera de las reivindicacio-nes 1 a 22 seleccionado del grupo consistente en

a) terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarbonil-oxi-5-fluoro-4-yodo-indol-1-carboxílico.

b) terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarbonil-oxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico,

c) terc-butil éster del ácido 2-terc-butoxicarbonil-oxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-4-indol-1-carboxílico,

d) (Z)-5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona,

e) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarbonil-oxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-hidroxi-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico,

f) terc-butil éster del ácido 2-terc-Butoxicarbonil-oxi-4-[3-(1-terc-butoxicarbonil-3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-3-oxo-prop-1-inil]-5-fluoro-indol-1-carboxílico o

g) 5-Fluoro-4-[1-yodo-3-oxo-3-(3,4-dimetil-1H-pirrol-2-il)-propenil]-1,3-dihidro-indol-2-ona.

31. El proceso para la preparación de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 en donde

a) un compuesto de fórmula V

84

reacciona con R^{2}H en presencia de una base, como NaH,

b) un compuesto de fórmula VIII

85

reacciona con R^{2}Li en presencia de CuI, o,

c) un compuesto de fórmula VIII

86

reacciona con R^{2}ZnX o (R^{2})_{2}Zn en presencia de CuCN.

32. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22 obtenido mediante el proceso de la reivindicación 31.