EA032196B1 - Ингибиторы erk и способы применения - Google Patents

Ингибиторы erk и способы применения Download PDF

Info

Publication number
EA032196B1
EA032196B1 EA201690708A EA201690708A EA032196B1 EA 032196 B1 EA032196 B1 EA 032196B1 EA 201690708 A EA201690708 A EA 201690708A EA 201690708 A EA201690708 A EA 201690708A EA 032196 B1 EA032196 B1 EA 032196B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
group
mmol
trityl
alkyl
mixture
Prior art date
Application number
EA201690708A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201690708A1 (ru
Inventor
Ляньшэн Ли
Тао Ву
Цзюнь Фэн
Пинда Жэнь
И Лю
Original Assignee
Кура Онколоджи, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Кура Онколоджи, Инк. filed Critical Кура Онколоджи, Инк.
Publication of EA201690708A1 publication Critical patent/EA201690708A1/ru
Publication of EA032196B1 publication Critical patent/EA032196B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4162—1,2-Diazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A61K31/5517—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine condensed with five-membered rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. imidazobenzodiazepines, triazolam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B59/00—Introduction of isotopes of elements into organic compounds ; Labelled organic compounds per se
    • C07B59/002—Heterocyclic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/05—Isotopically modified compounds, e.g. labelled

Abstract

Изобретение обеспечивает химические соединения общей формулы I и их фармацевтические композиции, которые способны модулировать некоторые протеинкиназы, такие как ERK (MAPK). Также обеспечиваются способы применения таких соединений или композиций и способы применения таких композиций для модулирования активностей одной или нескольких из этих киназ, особенно для терапевтических применений, таких как лечение расстройств, таких как рак.

Description

Настоящее изобретение направлено на удовлетворение этой потребности и также обеспечивает соответствующие преимущества.
В одном аспекте изобретение обеспечивает соединение формулы I
N или его фармацевтически приемлемую соль; где
К1 представляет собой 3-6-членный гетероциклил, -С1-10алкил-(3-6-членный гетероциклил), -(3-6членный гетероциклил)-С1-10алкил, -(3-6-членный гетероциклил)-С6-10арил или -(3-6-членный гетероциклил)-С1-10гетарил,каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К10 или К11 заместителями;
К21 представляет собой -Ь-См^етероалкил, -Ь-С3-10арил, -Ь-См^етарил, -Ь-С3-10циклоалкил или -Ь
- 1 032196
С1_югетероциклил, каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К12 заместителями;
Ь представляет собой связь;
К72 представляет собой водород;
Ки представляет собой -С1_10алкил, -С2_10алкенил, -С2_10алкинил, -С1_10гетероалкил, -С3.10арил, -С1-10 гетарил, -С3-10циклоалкил или -С1-10гетероциклил, каждый из которых замещен одним или несколькими независимыми К11 заместителями;
К11 и К12 независимо представляют собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -ОН, -СЕ3, -ОСЕ3, -ОК31, -ЫК31К32, -С(О)К31, -СО2К31, -С(==О)ЫК31, -ΝΟ2, -СЫ, -8(О)0-2К31, -8Ο2ΝΚ31Κ32, -ЫК31С(=О)К32, -ЫК31С (=О)ОК32, ЫК31С(=О)ЫК32К33, -ЫК318(О)0-2К32, -С(=8)ОК31, -С(=О)8К31, ЫК31С(=ЫК32)ЫК32К33, -ЫК31С (=ЫК32)ОК33, -ЫК31С(=ЫК32)8К33, -ОС(=О)ОК33, -ОС(=О)ЫК31К32, -ОС(=О)8К31, -8С(=О)8К31, -Р(О) ОК31ОК32 или -8С(=О)ЫК31ЫК32; и каждый из К31, К32 и К33 независимо представляет собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил или -С1-10гетероциклил, или К31 вместе с К32 образуют гетероциклическое кольцо;
где каждый гетероалкил содержит по крайней мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, Ν, Р, δί и 8;
где каждый гетарил содержит один или более кольцевых гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8;
где каждый гетероциклил содержит один, два или три кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8.
Настоящее изобретение также обеспечивает способ ингибирования активности протеинкиназы, присутствующей в клетке, включающий контактирование указанной клетки с эффективным количеством вышеуказанного соединения формулы I.
В ещё одном аспекте настоящее изобретение обеспечивает способ уменьшения тяжести расстройства, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества вышеуказанного соединения формулы I, где расстройство выбрано из группы, состоящей из рака, поражения костей, воспалительного заболевания, иммунного заболевания, заболевания нервной системы, метаболического заболевания, респираторного заболевания и сердечного заболевания.
В ещё одном другом аспекте настоящее изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, обладающую способностью ингибировать ЕКК, включающую эффективное количество вышеуказанного соединения формулы I и фармацевтически приемлемый эксципиент.
Чертеж представляет биологические данные анализов ингибирования ЕКК киназы, р90К8К ЕЫ8А и клеточной пролиферации для соединений, обеспечиваемых настоящим изобретением, где используются следующие символы: + (больше чем 1000 нМ), ++ (от 250 до 1000 нМ), + + + (от 50 до 250 нМ), + + + + (меньше чем 50 нМ).
Подробное описание изобретения
Термин эффективное количество или терапевтически эффективное количество относится к такому количеству соединения, описанного в настоящей заявке, которое является достаточным для предполагаемого применения, включая, но не ограничиваясь этим, лечение заболевания, как определено ниже. Терапевтически эффективное количество может варьироваться в зависимости от предполагаемого применения (ίη νίΐτο или ίη νΐνο) или субъекта и болезненного состояния, подлежащего лечению, например массы тела и возраста субъекта, тяжести болезненного состояния, способа введения и т.п., и его легко сможет определить средний специалист в данной области. Термин также относится к дозе, которая будет вызывать определенный ответ в клетках-мишенях, например, уменьшение адгезии тромбоцитов и/или миграции клеток. Конкретная доза будет варьироваться в зависимости от конкретных выбранных соединений, используемой схемы введения лекарственного средства, от того, вводят это средство в комбинации с другими соединениями или нет, срока введения средства, ткани, в которую вводят средство, физической системы доставки, которая осуществляет перенос средства.
В контексте настоящей заявки лечение, или лечить, или временное облегчение, или уменьшение интенсивности используюся взаимозаменяемо. Эти термины относятся к подходу для получения благоприятных или желаемых результатов, включая, но не ограничиваясь этим, терапевтическую пользу и/или профилактическую пользу. Под терапевтической пользой подразумевается устранение или облегчение тяжести основного расстройства, подлежащего лечению. Также терапевтическая польза достигается путем устранения или облегчения тяжести одного или нескольких физиологических симптомов, связанных с основным расстройством, так, чтобы у субъекта наблюдалось улучшение, несмотря на то, что субъект все еще может страдать от основного расстройства. Для профилактической пользы композиции можно вводить субъекту, у которого имеется риск развития определенного заболевания, или субъекту, сообщающему об одном или нескольких физиологических симптомах заболевания, даже если диагноз такого заболевания может быть не установлен.
Терапевтический эффект, как этот термин используется в настоящей заявке, охватывает терапев
- 2 032196 тическую пользу и/или профилактическую пользу, как они описаны выше. Профилактический эффект включает отсрочку или устранение возникновения заболевания или состояния, отсрочку или устранение начала развития симптомов заболевания или состояния, замедление, остановку или реверсию прогрессирования заболевания или состояния или любое из вышеперечисленных.
Термины совместное введение, вводимый в комбинации с и их грамматические эквиваленты в контексте настоящей заявки охватывают введение двух или более средств животному так, чтобы оба средства и/или их метаболиты присутствовали в организме субъекта одновременно. Совместное введение включает одновременное введение в разных композициях, введение в разное время в разных композициях или введение в композиции, в которой присутствуют оба средства.
Термин фармацевтически приемлемая соль относится к солям, образованным из различных органических и неорганических противоионов, хорошо известных в данной области техники, и включают только в качестве примера натрий, калий, кальций, магний, аммоний, тетраалкиламмоний и т.п., когда молекула содержит кислотную функциональную группу; и когда молекула содержит основную функциональную группу - к солям органических или неорганических кислот, таким как гидрохлорид, гидробромид, тартрат, мезилат (метансульфонат), этансульфонат, ацетат, малеат, оксалат, фосфат и т.п. В соединении с более чем одной щелочной группой больше чем одна из щелочных групп может быть преобразована в форму соли, включая, но не ограничиваясь этим, бис- или трис-соль. Альтернативно, соединение, содержащее более чем одну щелочную группу, может образовывать соль только по одной из щелочных групп.
Термины антагонист и ингибитор используют взаимозаменяемо, они относятся к соединению, обладающему способностью ингибировать биологическую функцию белка-мишени путем ингибирования активности или экспрессии белка-мишени. Соответственно, термины антагонист и ингибиторы определяются в контексте биологической роли белка-мишени. В то время как предпочтительные антагонисты, описанные в настоящей заявке, специфически взаимодействуют с (например, связываются с) мишенью, соединения, которые ингибируют биологическую активность белка-мишени путем взаимодействия с другими членами пути сигнальной трансдукции, членом которого является белок-мишень, также специально включены в это определение. Предпочтительная биологическая активность, ингибируемая антагонистом, связана с развитием, ростом или распространением опухоли.
Термин агонист в контексте настоящей заявки относится к соединению, обладающему способностью инициировать или усиливать биологическую функцию белка-мишени путем усиления активности или экспрессии белка-мишени. Соответственно, термин агонист определяется в контексте биологической роли являющегося мишенью полипептида. В то время как предпочтительные агонисты, описанные в настоящей заявке, специфически взаимодействуют с (например, связываются с) мишенью, соединения, которые инициируют или усиливают биологическую активность являющегося мишенью полипептида путем взаимодействия с другими членами пути сигнальной трансдукции, членом которого является полипептид-мишень, также специально включены в это определение.
В контексте настоящей заявки средство или биологически активное средство относится к биологическому, фармацевтическому или химическому соединению или другому веществу. Неограничивающие примеры включают простую или сложную органическую или неорганическую молекулу, пептид, белок, олигонуклеотид, антитело, производное антитела, фрагмент антитела, производное витамина, углевод, токсин или химиотерапевтическое соединение. Различные соединения могут быть синтезированы, например малые молекулы и олигомеры (например, олигопептиды и олигонуклеотиды), синтетические органические соединения на основании различных структур остова. Кроме того, различные природные источники могут обеспечивать соединения для скрининга, например растительные или животные экстракты и т. п.
Термин выделенное соединение или выделенное средство относится к биологическому, фармацевтическому или химическому соединению или другому веществу, которое выделяют до чистоты более чем 90%.
Сигнальная трансдукция представляет собой процесс, в ходе которого стимуляторные или ингибиторные сигналы передаются в клетку и внутри клетки, чтобы вызвать внутриклеточный ответ. Модулятор пути сигнальной трансдукции относится к соединению, которое модулирует активность одного или нескольких клеточных белков, связанных с одним и тем же специфическим путем сигнальной трансдукции. Модулятор может усиливать (агонист) или подавлять (антагонист) активность сигнальной молекулы.
Противораковое средство, противоопухолевое средство или химиотерапевтическое средство относится к любому средству, полезному в лечении опухолевого состояния. Один класс противораковых средств включает химиотерапевтические средства. Химиотерапия означает введение одного или нескольких химиотерапевтических лекарственных средств и/или других средств страдающему раком пациенту различными способами, включая внутривенный, пероральный, внутримышечный, интраперитонеальный, интравезикальный, подкожный, чрескожный, буккальный или путем ингаляции или в форме суппозитория.
Термин клеточная пролиферация относится к явлению, при котором количество клеток изменяет
- 3 032196 ся в результате деления. Этот термин также охватывает клеточный рост, посредством чего клеточная морфология изменяется (например, увеличение в размере) соответственно пролиферативному сигналу.
Термин селективное ингибирование или селективно ингибировать относится к биологически активному средству и относится к способности средства к преимущественному уменьшению сигнальной активности мишени по сравнению с сигнальной активностью, не относящейся к мишени, через прямое или опосредованное взаимодействие с мишенью.
Активность ЕКК1 и/или ЕКК2 в применении к биологически активному средству относится к способности средства модулировать сигнальную трансдукцию, опосредованную ЕКК1 и/или ЕКК2. Например, модуляция ЕКК1 и/или ЕКК2 активности подтверждается изменением сигнала, выходящего из Как/КаТ/МЕК/ЕКК пути.
Субъект относится к животному, такому как млекопитающее, например человек. Способы, описанные в настоящей заявке, могут быть полезными как для лечения человека, так и для применения в ветеринарии. В некоторых вариантах осуществления субъект представляет собой млекопитающее. В некоторых вариантах осуществления субъект представляет собой человека.
Лучевая терапия означает воздействие на субъекта, с использованием рутинных способов и композиций, известных практикующему врачу, источников излучения, таких как испускающие а-частицы радионуклиды (например, радионуклиды актиния и тория), источники излучения с низкой линейной передачей (ЬЕТ) энергии (т.е. источники β-излучения), конверсионные электронные источники излучения (например, стронций-89 и самарий-153-ЕЭТМР или высокоэнергетическое излучение, включая, без ограничения, рентгеновское излучение, γ-излучение, нейтроны.
Термин ίη νΐνο относится к событию, которое имеет место в организме субъекта.
Термин ίη νΐίτο относится к событию, которое имеет место вне организма субъекта. Например, ίη νΐίτο анализ охватывает любой анализ, осуществляемый вне организма субъекта. Ιη νΐίτο анализы охватывают клеточные анализы, в которых используют живые или мертвые клетки. Ιη νΐίτο анализы также охватывают бесклеточный анализ, в котором не используют никакие интактные клетки.
Если не указано иное, присоединения указанных в названии соединения групп имеют место по крайней группе слева. То есть название заместителя начинается со связывающей группы, продолжается любыми связывающими группами, заканчивается концевой группой. Например, -Е-С1-10алкил-С3-10циклоалкил содержит концевую группу, такую как -С3-10циклоалкильная группа, присоединенную к связывающей -С1-10алкильной группе, которая присоединена к элементу Ь, который, в свою очередь, связан с химическим соединением, несущим этот заместитель.
В контексте настоящей заявки термин гетероатом или кольцевой гетероатом включает кислород (О), азот (Ν), серу (8), фосфор (Р) и кремний (δΐ).
В контексте настоящей заявки термин алкил используется для обозначения алкила, содержащего 1-10 атомов углерода, т.е. 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 или 10 атомов углерода в линейной или разветвленной конфигураци. Во всех вариантах осуществления настоящего изобретения термин алкил включает алкильные группы как с разветвленной, так и с прямой цепью, или их комбинацию. Алкильные группы являются полностью насыщенными, незамещенными или замещенными и могут включать ди- и многовалентные радикалы, содержащие указанное количество атомов углерода (т.е. С1-10 означает от одного до десяти атомов углерода, и С2-10 означает от двух до десяти атомов углерода). Типичные алкильные группы представляют собой метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, втор-бутил, изобутил, трет-бутил, нпентил, изопентил, н-гексил, н-гептил, изооктил, нонил, децил и т. п. Алкил является незамещенным или замещенным.
Термин алкенил относится к углеводородному радикалу с линейной или разветвленной цепью, состоящему исключительно из углеродных и водородных атомов, содержащему по меньшей мере одну двойную связь, содержащему от двух до десяти атомов углерода (т.е. -С2-10алкенил). В каждом случае, когда это указывается в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С2-10, относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например С2-10алкенил означает, что алкенильная группа может состоять из 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алкенил включает от двух до восьми атомов углерода (например, -С2-8 алкенил). В других вариантах осуществления алкенил включает от двух до пяти атомов углерода (например, -С2-5алкенил). Алкенил присоединен к остальной части молекулы при помощи простой связи, например этенил (т.е. винил), проп-1-енил (т.е. аллил), бут-1-енил, пент-1-енил, пента-1,4-диенил и т.п. Алкенил является незамещенным или замещенным.
Термин алкинил относится к углеводородному радикалу с линейной или разветвленной цепью, состоящему исключительно из углеродных и водородных атомов, содержащему по меньшей мере одну тройную связь, содержащему от двух до десяти атомов углерода (т.е. -С2-10алкинил). В каждом случае, когда это указывается в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С2-10 относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например С2-10алкинил означает, что алкинильная группа может состоять из 2 атомов углерода, 3 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. В некоторых вариантах осуществления алкинил включает от двух до восьми атомов углерода (например, -С2-8
- 4 032196 алкинил). В других вариантах осуществления алкинил содержит от двух до пяти атомов углерода (например, -С2-5алкинил). Алкинил присоединен к остальной части молекулы при помощи простой связи, например этинил, пропинил, бутинил, пентинил, гексинил и т.п. Алкинил является незамещенным или замещенным.
Термин гетероалкил относится к радикалу с линейной или разветвленной цепью, состоящему из по меньшей мере одного атома углерода и по меньшей мере одного гетероатома, выбранного из группы, состоящей из О, Ν, Ρ, 81 и 8, где атомы азота, фосфора и серы необязательно могут быть окислены и гетероатом азота необязательно может быть кватернизирован.
Гетероатом(гетероатомы) О, Ν, Р и 8 и 81 могут присутствовать в любом внутреннем положении гетероалкильной группы или в положении, по которому алкильная группа присоединяется к остальной части молекулы. Алкильная часть такой группы является незамещенной или замещенной. Примеры включают, но не ограничиваются этим, -СН2-СН2-О-СН3, -СН2-СН2-КН-СН3, -СН2-СН2-Н(СН3)-СН3, -СН2-8-СН2-СН3, -СН2-СН2, -8(О)-СН3, -СН2-СН2-8(О)2-СНз, -СН=СН-О-СНз, -81(СН3)3, -СН;-СН\ОСН3, -СН=СН-Н(СН3)-СН3, -О-СН3, -О-СН2-СН3 и -СК Вплоть до двух или трех гетероатомов могут быть последовательно расположены, например, -СН2-КН-ОСН3 и -СН2-О-81(СН3)3. Аналогичным образом, термин гетероалкилен как таковой или как часть другого заместителя означает двухвалентный радикал, образованный из гетероалкила, примеры которого включают, но не ограничиваются этим, -СН2СН2-8-СН2-СН2- и -СН2-8-СН2-СН2-КН-СН2-. Что касается гетероалкиленовых групп, гетероатомы также могут присутствовать на любом или на обоих концах цепи (например, алкиленоксо, алкилендиоксо, алкиленамино, алкилендиамино и т.п.). Более того, что касается алкиленовых и гетероалкиленовых связывающих групп, направление, в котором пишется формула связывающей группы, не подразумевает никакую ориентацию связывающей группы. Например, формула С(О)ОК'- представляет собой как -С(О)ОК'-, так и -К'ОС(О)-. Как описано выше, гетероалкильные группы в контексте настоящей заявки включают такие группы, которые присоединены к остальной части молекулы через гетероатом, такой как -С(О)К', -С(О)КК', -ΝΚ'Κ, -ОК', -8К' и/или -8О2Р'. Где указывается гетероалкил с последующим указанием конкретных гетероалкильных групп, таких как -ΝΚ'Ρ или т.п., должно быть понятно, что термины гетероалкил и -ΝΚ'Ρ не являются повторяющимися или взаимоисключающими. Наоборот, конкретные гетероалкильные группы указываются, чтобы внести ясность. Таким образом, термин гетероалкил не следует здесь интерпретировать как исключающий конкретные гетероалкильные группы, такие как -ΝΚ'Κ или т. п.
Термин ароматический или арил относится к ароматическому радикалу с 3-16 атомами углерода (например, -С3-16ароматический или -С3-16арил), который содержит по меньшей мере одно кольцо, имеющее сопряженную пи-электронную систему, которое является карбоциклическим (например, фенил, флуоренил, нафтил). В любом месте, где это указано в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С3-10, относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например, -С3-10арил означает, что арильная группа может состоять из 3 кольцевых атомов, 4 кольцевых атомов и т.д., вплоть до и включая 10 кольцевых атомов. Термин включает моноциклические или содержащие конденсированные кольца полициклические (т.е. кольца, разделяющие между собой смежные пары кольцевых атомов) группы. Примеры арила включают, но не ограничиваются этим, фенил, 4-хлорфенил, 4-фторфенил, 4-бромфенил, 3-нитрофенил, 2-метоксифенил, 2-метилфенил, 3-метилфенил, 4-метилфенил, 4-этилфенил, 2-метил-3метоксифенил, 2,4-дибромфенил, 3,5-дифторфенил, 3,5-диметилфенил, 2,4,6-трихлорфенил, 4метоксифенил, нафтил, 2-хлорнафтил, 2,4-диметоксинафтил, 4-(трифторметил)нафтил, 2-иод-4метилнафтил и т. п. Арильная группа является незамещенной или замещенной.
Термин гетероарил или альтернативно гетероароматический, гетарил, гетероар или гетар относится к ароматическому радикалу с 1-16 углеродными атомами (например, -С1-16гетероарил) , который, кроме того, включает один или несколько кольцевых гетероатомов, выбранных из азота, кислорода и серы, и который может представлять собой моноциклическую, бициклическую, трициклическую или тетрациклическую кольцевую систему. В любом месте, где это указано в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С1-10, относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например, -С1-10 гетарил означает, что гетероарильная группа может состоять из 1 атома углерода, 2 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. Ν-содержащая гетероароматическая или Ν-содержащая гетероарильная группа относится к ароматической группе, в которой по меньшей мере один из атомов каркаса кольца представляет собой атом азота. Полициклическая гетероарильная группа может быть конденсированной или неконденсированной. Гетероатом(гетероатомы) в гетероарильном радикале необязательно является окисленным. Один или несколько атомов азота, если таковые присутствуют, необязательно являются кватернизированными. Гетероарил присоединен к остальной части молекулы через любой атом кольца(колец). Примеры гетероарила включают, но не ограничиваются этим, азепинил, акридинил, бензимидазолил, бензиндолил, 1,3-бензодиоксолил, бензофуранил, бензооксазолил, бензо[б]тиазолил, бензотиадиазолил, бензо [Ь][1,4]диоксепинил, бензо[Ь][1,4]оксазинил, 1,4-бензодиоксанил, бензонафтофуранил, бензоксазолил, бензодиоксолил, бензодиоксинил, бензоксазолил, бензопиранил, бензопиранонил, бензофуранил, бензофуранонил, бензофуразанил, бензотиазолил, бензотиенил (бензотиофенил), бензотиено[3,2-б]пиримидинил, бензотриазолил, бензо[4,6]имидазо[1,2-а]пиридинил, карба- 5 032196 золил, циннолинил, циклопента[й]пиримидинил, 6,7-дигидро-5Н-циклопента[4,5]тиено[2,3-й]пиримидинил, 5,6-дигидробензо[й]хиназолинил, 5,6-дигидробензо[й]циннолинил, 6,7-дигидро-5Н-бензо [6,7]циклогепта[1,2-с]пиридазинил, дибензофуранил, дибензотиофенил, фуранил, фуразанил, фуранонил, фуро[3,2-с]пиридинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклоокта[й]пиримидинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклоокта[й]пиридазинил, 5,6,7,8,9,10-гексагидроциклоокта[й]пиридинил, изотиазолил, имидазолил, индазолил, индолил, индазолил, изоиндолил, индолинил, изоиндолинил, изохинолил, индолизинил, изоксазолил, 5,8-метано-5,6,7,8-тетрагидрохиназолинил, нафтиридинил, 1,6-нафтиридинонил, оксадиазолил, 2оксоазепинил, оксазолил, оксиранил, 5,6,6а,7,8,9,10,10а-октагидробензо[й]хиназолинил, 1-фенил-1Нпирролил, феназинил, фенотиазинил, феноксазинил, фталазинил, птеридинил, пуринил, пиранил, пирролил, пиразолил, пиразоло[3,4-й]пиримидинил, пиридинил, пиридо[3,2-й]пиримидинил, пиридо[3,4й] пиримидинил, пиразинил, пиримидинил, пиридазинил, пирролил, хиназолинил, хиноксалинил, хинолинил, изохинолинил, тетрагидрохинолинил, 5,6,7,8-тетрагидрохиназолинил, 5,6,7,8-тетрагидробензо[4,5]тиено[2,3-й]пиримидинил, 6,7,8,9-тетрагидро-5Н-циклогепта[4,5]тиено[2,3-й] пиримидинил, 5,6,7,8-тетрагидропиридо[4,5-с]пиридазинил, тиазолил, тиадиазолил, тиапиранил, триазолил, тетразолил, триазинил, тиено[2,3-й]пиримидинил, тиено[3,2-й]пиримидинил, тиено[2,3-с] пиридинил, тиофенил (т.е. тиенил). Гетероарильная группа является незамещенной или замещенной.
Термин циклоалкил относится к насыщенной или частично ненасыщенной кольцевой структуре с 3-10 атомами углерода (т.е. -С3-10циклоалкил). В любом месте, где это указано в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С3.10, относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например, -С3-10циклоалкил означает, что циклоалкильная группа может состоять из 3 атомов углерода, 4 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. Термин включает моноциклические или содержащие конденсированные кольца полициклические (т.е. кольца, которые разделяют между собой смежные пары кольцевых атомов) группы. Циклоалкильная группа является незамещенной или замещенной.
Термин гетероциклил, гетциклил или гетероциклоалкил относится к 3-, 4-, 5- или 6-членному насыщенному или частично ненасыщенному кольцу, содержащему один, два или три гетероатома, предпочтительно один или два гетероатома, независимо выбранных из кислорода, азота и серы; или к бициклической кольцевой системе, содержащей вплоть до 10 атомов, включая по меньшей мере один гетероатом, независимо выбранный из кислорода, азота, серы, где кольцо, содержащее гетероатом, является насыщенным. В любом месте, где это указано в настоящей заявке, численный диапазон, такой как С1-1о, относится к каждому целому числу в указанном диапазоне; например, -С1-10гетероциклил означает, что гетероциклоалкильная группа может состоять из 1 атома углерода, 2 атомов углерода и т.д., вплоть до и включая 10 атомов углерода. Примеры гетероциклила включают, но не ограничиваются этим, тетрагидрофуранил, тетрагидрофурил, пирролидинил, пиперидинил, 4-пиранил, тетрагидропиранил, тиоланил, морфолинил, пиперазинил, диоксоланил, диоксанил, индолинил и хроманил. Гетероциклоалкильная группа является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 1-фенилэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2пиримидинилэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-циклопропилэтил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиперидинилэт-1-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкенил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 1-фенилвинил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкенил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-пиримидинилвинил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкенил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкенильной группе, разветвленной или с пря
- 6 032196 мой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-циклопропилвинил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкенил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиперидинилэтен-1-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкинил-Сз-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 1-фенилэтинил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкинил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-пиримидинилэтинил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкинил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-циклопропилэтинил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С2-10алкинил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиперидэтин-1-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероалкил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероалкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 1-фенилэтоксиэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероалкил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей гетероалкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере 1 гетероатом, такой как, например, 2-пиримидинилэтоксиэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероалкил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероалкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 2-циклопропилэтоксиэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероалкил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероалкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-пиперидинилэтоксиэт-1-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкокси-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающему кислородному атому, который также соединен с алкильной группой, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 1-феноксиэтил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкокси-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающему кислородному атому, который также соединен с алкильной группой, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-пиримидоксиэтил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкокси-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающему кислородному атому, который также соединен с алкильной группой, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-циклопропоксиэтил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10алкокси-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающему кислородному атому, который также соединен с алкильной группой, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиперидоксиэт-1-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С1-10алкил относится к алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей арильной группе, которая со
- 7 032196 держит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-этилфенил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С2-10алкенил относится к алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-этенилфенил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С2-10алкинил относится к алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-этинилфенил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиримидинилфен-4-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-циклопропилфенил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10арил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4-пиперидинилфен-4-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С1-10алкил относится к алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4этилпиримидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С2-10алкенил относится к алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-этенилпиримидин-2-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С2-10алкинил относится к алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-этинилпиримидин-2-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-фенилпиримидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-циклопропилпиримидин-2ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетарил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-пиперидинилпиримидин-2-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10циклоалкил-С1-10алкил относится к алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-этилциклопентил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10циклоалкил-С2-10алкенил относится к алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-этенилциклопентил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10циклоалкил-С2-10алкинил относится к алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-этинилциклопентил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10циклоалкил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 2-фенилциклопентил и т. п. Любая часть такой группы является
- 8 032196 незамещенной или замещенной.
Термин -Сз_1оциклоалкил-С1.10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4пиримидинилциклопент-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С3-10циклоалкил-С1-10гетероциклил относится к гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, такой как, например, 4пиперидинилциклопент-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С1-10алкил относится к алкильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-этилпиперидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С2-10алкенил относится к алкенильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-этенилпиперидин-2-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С2-10алкинил относится к алкинильной группе, разветвленной или с прямой цепью и содержащей от 2 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-этинилпиперидин-2-ил и т. п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С3-10арил относится к арильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-фенилпиперидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С1-10гетарил относится к гетарильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4-пиримидинилпиперидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин -С1-10гетероциклил-С3-10циклоалкил относится к циклоалкильной группе, которая содержит от 3 до 10 атомов углерода, присоединенной к связывающей гетероциклильной группе, которая содержит от 1 до 10 атомов углерода и по меньшей мере один гетероатом, такой как, например, 4циклопропилпиперидин-2-ил и т.п. Любая часть такой группы является незамещенной или замещенной.
Термин гало или галоген относится к фтору, хлору, брому или иоду.
Термин галогеналкил относится к алкильной группе, замещенной одной или несколькими группами галогенов, например хлорметил, 2-бромэтил, 3-иодпропил, трифторметил, перфторпропил, 8хлорнонил и т.п. Галогеналкильная группа может быть дополнительно замещенной или не быть дополнительно замещенной.
Термин амин или амино относится к -ΝΚ'Κ''-группе, где каждый К.' независимо представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, -С1-10галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10 гетероарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил или -С1-10алкил-С1-10гетероциклил, если в описании изобретения конкретно не указано иное. Когда оба К' и К'' из -ΝΚ.Έ. группы не являются водородом, К' и К'' могут быть объединены с атомом азота с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Например, подразумевается, что НК.'К включает, но не должен ограничиваться этим, 1-пирролидинил и 4-морфолинил. Если в описании изобретения конкретно не указано иное, аминогруппа необязательно замещена одним или несколькими заместителями, которые независимо представляют собой -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, галоген, -ОН, -СН -СЕ3, -ОСЕ3, -ΝΟ2, -81\1с;. -ОК', -8К', -ОС(О)-К', -НК'Ц, -С(О)К', -С(О)ОК', -ОС(О)Н(К')2, -С(О)Н(К')2, -НЕХОДОК', -Н(К')С(О)К', -Н(К')С(О)Н(К')2, -НК')С(1МК'МК')2, -НК')§(ОХК' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(О)1ОК' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -§(О)1Н(К')2 (где ΐ имеет значение 1 или 2) или РО3(К')2, где каждый К' независимо представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С1-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетероарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил или -С1-10алкил-С1-10 гетероциклил.
Термин амид или амидо относится к химической группе с формулой -С(О)Н(К')2 или -ННС(О)К', где К' выбран из группы, состоящей из водорода, -С1-10алкила, -С1-10гетероалкила, галогеналкила, -С3-10арила, -С1-10алкил-С3-10арила, -С1-10гетарила (связанного через кольцевой углерод), -С1-10алкил-С1-10гетарила, -С3-10циклоалкила, -С1-10алкил-С3-10циклоалкила, -С1-10гетероциклила (связанного через
- 9 032196 кольцевой углерод) или -С1-10алкил-С1-10 гетероциклила. В некоторых вариантах осуществления амид представляет собой С1-С4 радикал, который включает амидкарбонил с таким же общим количеством атомов углерода в радикале. К'2 из -Ν(Κ')2 амида необязательно может быть взят вместе с азотом, к которому он присоединен, с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Если в описании изобретения конкретно не указано иное, амидогруппа необязательно замещена независимо одним или несколькими заместителями, описанными в настоящей заявке для алкила, циклоалкила, арила, гетероарила или гетероциклила. Амид может представлять собой молекулу аминокислоты или пептида, присоединенную к соединению формулы II или III, с образованием, таким образом, пролекарства. Любая аминовая, гидрокси или карбоксильная боковая цепь на соединениях, описанных в настоящей заявке, может быть амидирована. Процедуры и конкретные группы для получения таких амидов известны специалистам в данной области техники, и их легко можно найти в справочниках, таких как Сгеепе апб ХУиК Рго1ссйус Сгоирз ίη Огдаше 8уп1йез15, З.зир.гб Еб., бо11п \УПеу & 8опз, Νο\ν Уогк, Ν.Υ., 1999, который включен в настоящую заявку посредством ссылки во всей полноте.
Термин ацил или карбонил относится к структуре -С(=О)-К, в которой К представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, С1-10гетарил (связанный через кольцевой углерод), -С1-10алкил-С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил (связанный через кольцевой углерод) или -С1-10 алкил-С1-10гетероциклил. Если в описании изобретения конкретно не указано иное, К группа ацильной части необязательно замещена одним или несколькими заместителями, которые независимо представляют собой -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -С3-10арил, -С1-10 алкил-С3-10арил, -С1-10 гетарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, галоген, -ОН, -СН - СЕ3, -ОСЕ3, -ΝΟ2, -81Ме3, -ОК', -8К', -ОС(О)-К', -Ν(Κ')2, -С(О)К', -С(О)ОК', -ОС(О)Н(К')2, -С(О)Н(К')2, -Н(К')С(О)ОК', -Н(К')С(О)К', -Н(К')С(О)Н(К')2, -Ν(Κ')ΟΝΚ')Ν(Κ')2, -Ы(К')8(О)1К' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(О)1ОК' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(ОЩ(К')2 (где ΐ имеет значение 1 или 2) или РО3(К')2, где каждый К' независимо представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетероарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил или -С1-10алкил-С1-10гетероциклил.
Термин карбоксил или карбокси относится к структуре -С(=О)-ОК, в которой К представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетарил (связанный через кольцевой углерод), -С1-10алкил-С1-10 гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10 циклоалкил, -С1-10гетероциклил (связанный через кольцевой углерод) или -С1-10алкил-С1-10гетероциклил. Если в описании изобретения конкретно не указано иное, К группа карбоксильной части необязательно замещена одним или несколькими заместителями, которые независимо представляют собой -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетарил, -С1-10алкил-С1-10 гетарил, галоген, -ОН, -ΟΝ, - СЕ3, -ОСЕ3, -ЫО2, -81Ме3, -ОК', -8К', -ОС(О)-К', -Ы(К')2, -С(О)К', -С(О)ОК', -ОС (О)НК')2, -С(О)НК')2, -Ы(К')С(О)ОК', -Ы(К')С(О)К', -Ы(К')С(О)НК')2, N(К')С(NК')N(К')2, -И(К')8(О)1К' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(О),ОК' (где ΐ имеет значение 1 или 2), ^(ОХНК'Г (где ΐ имеет значение 1 или 2) или РО3(К')2, где каждый К' независимо представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10 арил, -С1-10гетероарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил или -С1-10алкил-С1-10гетероциклил.
Термин оксо относится к кислородному атому, который соединен двойной связью с атомом углерода. Специалисту в данной области техники должно быть понятно, что оксо требует второй связи от атома, к которому оксо присоединен. Соответственно, совершенно очевидно, что оксо не может быть замещен на арильном или гетероарильном кольце, если только он не образует часть ароматической системы в виде таутомера.
Указываемые в настоящей заявке 0-2 в контексте -8(О)(0-2)- представляют собой целые числа, имеющие значения 0, 1 и 2.
Термин сульфонамидил или сульфонамидо относится к структуре -8 (=О)2-ИК'К', где каждый К' выбран независимо из группы, состоящей из водорода, -С1-10алкила, -С3-10циклоалкила, -С3-10арила, -С1-10 гетероарила (связанного через кольцевой углерод) и -С1-10-С1-10гетероциклила (связанного через кольцевой углерод). К' группы в -ΝΡΈ' части -8(=О)2-Ик'К' радикала могут быть взяты вместе с азотом, к которому такая группа присоединена, с образованием 4-, 5-, 6- или 7-членного кольца. Если в описании изобретения конкретно не указано иное, К' группа в сульфонамидо части необязательно замещена одним или несколькими заместителями, которые независимо представляют собой -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, С2-10 алкенил, -С2-10алкинил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С110гетарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, галоген, -ОН, -ΟΝ, -Се3, -ОСЕ3, -ЫО2, -81Ме3, -ОК', -8К', -ОС(О)-К', -Ν(Ε% -С(О)К', -С(О)ОК', -ОС (ОМК'Ц, -С(О)НК')2, -Ы(К')С(О)ОК', -Ы(К')С(О)К', -Ы(К')С(О)НК')2, -НЮОМКДНК'Г, -Ы(К')8(О)К' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(О)ОК' (где ΐ имеет значение 1 или 2), -8(О).Ш')2 (где ΐ имеет значение 1 или 2) или РО3(К')2, где каждый К' независимо представляет собой водород, -С1-10алкил, -С1-10гетероалкил, галогеналкил, -С3-10арил, -С1-10алкил-С3-10арил, -С1-10гетероарил, -С1-10алкил-С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10алкил-С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил или -С1-10ал
- 10 032196 кил-С1-10гетероциклил.
Соединения, которые описаны, могут содержать один или несколько асимметричных центров, и, таким образом, могут быть образованы диастереомеры и оптические изомеры. Настоящее изобретение включает все такие возможные диастереомеры, а также их рацемические смеси, их, по существу, чистые выделенные энантиомеры, все возможные геометрические изомеры и их фармацевтически приемлемые соли. Кроме того, включены также смеси стереоизомеров, а также выделенные конкретные стереоизомеры. В процессе осуществления процедур синтеза для получения таких соединений или при использовании процедур рацемизации или эпимеризации, известных специалистам в данной области, продукты таких процедур могут представлять собой смесь стереоизомеров.
Настоящее изобретение включает все возможные ротамеры и конформационно ограниченные состояния соединения по настоящему изобретению.
А. Общие формулы и подробное описание.
Обеспечивается соединение, или его фармацевтически приемлемая соль, или пролекарство, где соединение имеет формулу I
или его фармацевтически приемлемая соль;
где К1 представляет собой 3-6-членный гетероциклил, -С1-10алкил-(3-6-членный гетероциклил), -(36-членный гетероциклил)-С1-10алкил, -(3-6-членный гетероциклил)-С6-10арил или -(3-6-членный гетероциклил)-С1-10гетарил, каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К10 или К11 заместителями;
К21 представляет собой -Ь-С1-10гетероалкнл, -Ь-С3-10арил, -Ь-С1-10гетарил, -Ь-С3-10циклоалкил или -ЬС1-10гетероциклил, каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К12 заместителями;
Ь представляет собой связь;
К72 представляет собой водород;
Ки представляет собой -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10арил, -С1-10 гетарил, -С3-10циклоалкил, или -С1-10гетероциклил, каждый из которых замещен одним или несколькими независимыми Кп заместителями;
К11 и К12 независимо представляют собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -ОН, -СР3, -ОСР3, -ОК31, -ΝΚ31Κ32, -С(О)К31, -СО2К31, -С(==Ο)ΝΚ31, -ΝΟ2, -СЫ, -8(О)0-2К31, -8Ο2ΝΚ31Κ32, -ЫК31С(=О)К32, -ИК31С(=О)ОК32, ЫК31С(=О)ЫК32К33, -ЫК318(О)0-2К32, -С(=8)ОК31, -С(=О)8К31, ЫК31С(=ЫК32)ЫК32К33, -ЫК31С(=ЫК32)ОК33, -ЫК31С(=ЫК32)8К33, ОС(=О)ОК33, -ОС(=О)ЫК31К32, -ОС(=О)8К31, -8С(=О)8К31, -Р(О)ОК31ОК32 или -8С(=О)ЫК31ЫК32; и каждый из К31, К32 и К33 независимо представляет собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С3-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил или -С1-10гетероциклил, или К31 вместе с К32 образуют гетероциклическое кольцо;
где каждый гетероалкил содержит по крайней мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, Ν, Р, δί и 8;
каждый гетарил содержит один или более кольцевых гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8;
каждый гетероциклил содержит один, два или три кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8.
В предпочтительном варианте обеспечиваются соединения, где К21 представляет собой -Ь-С1-10гетарил, незамещенный или замещенный одним или несколькими независимыми К12 заместителями; и где Ь представляет собой связь. При этом наиболее предпочтительно, когда С1-10гетарил из К21 включает один или несколько атомов азота. Ещё более предпочтительно, когда С1-10гетарил из К21 выбран из группы, состоящей из пиразолила, пиридинила, пиразинила, пиримидинила, пиридазинила.
В одном из предпочтительных вариантов С1-10гетарил из К21 является незамещенным, а в другом предпочтительном варианте С1-10 гетарил в К21 замещен одним, двумя или тремя независимыми заместителями, К12 заместителями.
В предпочтительном варианте обеспечиваются соединения, в которых каждый К12 заместитель независимо выбран из группы, состоящей из -С1-10алкила, -С2-10алкенила, -С2-10алкинила, -С1-10гетероалкила, -С3-10арила, -С1-10гетарила, -С3-10циклоалкила, -С1-10гетероциклила, -ОН, -СР3, -ОСР3, -ОК31; где каждый К31 независимо представляет собой водород или -С1-10алкил.
При этом наиболее предпочтительно, когда каждый К12 заместитель независимо выбран из группы, состоящей из -Ме, -Εΐ, -ί-Рг, -п-Рг, ОН, -ОМе, -ОЕ1. и -ОРг.
- 11 032196
В одном из предпочтительных вариантов предлагается соединение формулы I, где К1 представляет собой
или каждый из которых незамещен или замещен одним или несколькими независимыми К10 или К11 заместителями.
В наиболее предпочтительном варианте обеспечивается соединение формулы I, выбранное из
- 12 032196
- 13 032196
- 14 032196
В. Схемы реакций.
Соединения, раскрытые в настоящей заявке, можно получить путями, описанными ниже. Используемые вещества либо являются коммерчески доступными, либо получены способами синтеза, хорошо известными в данной области техники. Эти схемы не ограничиваются соединениями, которые перечислены, или какими-либо конкретными заместителями, используемыми для иллюстративных целей. Нумерация необязательно соответствует используемой в формуле изобретенияя или других таблицах.
В некоторых вариантах осуществления соединения синтезируют путем связывания К21 группы на Ν-защищенном индазоле А-3 через реакцию сочетания (например, реакцию Сузуки) с получением соединения формулы А-4. Промежуточное соединение А-4 обрабатывают Ν-бромсукцинимидным (ΝΒ8) реагентом для введения бромидной группы в аллильное положение, как в А-5, и затем подвергают взаимодействию с аминогруппой для введения К1 группы и получения соединения формулы А-6. Восстановление нитрогруппы с использованием цинкового катализатора в кислотных условиях дает бисаминогетероароматическое соединение А-7, которое затем конденсируют с карбонилдиимидазолом (СИ1), с получением трициклического соединения формулы А-8. Удаление защитных групп в кислотных условиях дает соединение А-9.
- 15 032196
В других вариантах осуществления К21 группу связывают на Ν-защищенном индазоле В-5 через первую реакцию сочетания (например, реакцию Сузуки) с получением соединения формулы В-6. Винильную группу затем вводят в В-6 через вторую реакцию сочетания (например, реакцию Стилле), как в В-7, затем обрабатывают тетроксидом осмия и периодатом натрия с получением альдегида В-8. Промежуточное соединение В-8 затем подвергают взаимодействию с аминогруппой для введения К1 группы, с последующим восстановлением при помощи борогидрида натрия, с получением соединения формулы В8. Защитные группы удаляют в кислотных условиях с получением бис-аминоиндазола В-10, который подвергают конденсации с карбонилдиимидазолом (СОЦ, с получением трициклического соединения формулы В-11.
И еще в некоторых вариантах осуществления винильную группу можно ввести в Ν-защищенный индазол С-1 через первую реакцию сочетания (например, реакцию Стилле), как в С-2, который затем обрабатывают тетроксидом осмия и периодатом натрия, с получением альдегида С-3. Промежуточное соединение С-3 подвергают взаимодействию с аминогруппой для введения К1 группы, как в С-4. Восстановление нитрогруппы с использованием цинкового катализатора в кислотных условиях дает бисаминогетероароматическое соединение С-5, которое затем подвергают конденсации с карбонилдиимидазолом (СОЦ, с получением трициклического соединения формулы С-6. Соединение С-6 подвергают процедуре удаления защиты в кислотных условиях и обрабатывают Ν-иодсукцинимидом (№8) с получением иодиндазола С-7. После введения тритильных защитных групп в щелочных условиях, как в С-8, К21 группу вводят через вторую реакцию сочетания (например, реакцию Стилле) с получением Νзащищенного трициклического соединения С-9. Удаление защитных групп в кислотных условиях обеспечивает соединения формулы С-11.
- 16 032196
В некоторых вариантах осуществления Ν-защищенный индазол А-3 подвергают бромированию с использованием ΝΒ8 с получением дибромида Ό-1, который затем подвергают взаимодействию с аминогруппой для введения К1 группы с получением промежуточного соединения Ό-2. Восстановление нитрогруппы с использованием цинкового катализатора в кислотных условиях дает бис-аминогетероароматическое соединение Ό-3, которое затем подвергают конденсации с карбонилдиимидазолом (СЭ1). с получением трициклического соединения формулы Ό-4. К21 группу вводят через реакцию сочетания (например, реакцию Сузуки) с получением Ν-защищенного трициклического соединения Ό-5. Удаление защитных групп в кислотных условиях обеспечивает соединения формулы Ό-6.
В других вариантах осуществления промежуточное соединение В-4 подвергают взаимодействию с ацилхлоридом с образованием амида Е-1. К21 группу вводят через первую реакцию сочетания (например, реакцию Сузуки) с получением промежуточного соединения Е-2. Винильная группа может быть введена через вторую реакцию сочетания (например, реакцию Стилле), как в Е-3, с последующей обработкой тетроксидом осмия и периодатом натрия, с получением альдегида Е-4. Трициклическое соединение Е-5 получают через внутримолекулярную альдольную конденсацию в щелочных условиях. Удаление защитных групп в кислотных условиях дает соединения формулы Е-6.
Альтернативно, промежуточное соединение В-8 можно подвергнуть деацетилированию с образованием анилина Е-1. Обработка Е-1 ацилхлоридом в присутствим ТЕА дает соответствующий амид Е-4. Трициклическое соединение Е-5 получают через внутримолекулярную альдольную конденсацию в щелочных условиях. Удаление защитных групп в кислотных условиях дает соединения формулы Е-6.
- 17 032196
В некоторых вариантах осуществления дибром соединение 6-1 можно обработать ацетатом калия в ΌΜΡ с образованием ацетата 6-2. Нитрогруппу можно восстановить в присутствии тиосульфата натрия, и последующий гидролиз сложного эфира с использованием гидроксида лития может обеспечить аминоспирт 6-4. Окисление бензилового спирта до альдегида дает 6-5. Ацилирование при помощи ацилхлорида может привести к образованию соответствующего амида 6-6. Трициклическое соединение 6-7 может быть образовано через внутримолекулярную альдольную конденсацию. К21 группа может быть введена через сочетание с арилбромидом 6-7 (например, сочетание по методу Сузуки). Удаление защитных групп в кислотных условиях дает соединения формулы 6-9.
В некоторых вариантах осуществления бициклическое соединение Н-1 можно обработать при помощи ΝΒ8 и ΑΙΒΝ с получением соответствующего бромида Н-2. Обработка амином может привести к образованию соответствующего бензамина Н-3. Последующее восстановление нитроарена дает анилин Н-4. Трициклическое соединение образуется в результате добавления 60Ι. К21 группа может быть введена через реакцию сочетания с бороновой кислотой (например, сочетание по методу Сузуки). Удаление защитной группы путем гидрирования и обработки при помощи Вос-ангидрида может дать Восзащищенный амин Н-7. Удаление Вос-группы в кислотных условиях и восстановительное аминирование при помощи альдегида может привести к образованию замещенного амина Н-9.
- 18 032196
В некоторых вариантах осуществления бромид Н-2 подвергают реакции сочетания с амином с образованием соответствующего бензиламина Ι-1. Обработка этил 2-хлорацетатом в присутствии основания может дать соединение Ι-2. Восстановление нитрогруппы арила при помощи Ζη в уксусной кислоте приводит к трициклическому соединению Ι-3. К21 группа может быть введена через реакцию сочетания с бороновой кислотой (например, сочетание по методу Сузуки) с получением продукта Ι-4. Удаление защитной группы в кислотных условиях может дать продукт Ι-5.
В некоторых вариантах осуществления арилолефин С-2 можно подвергнуть гидроборированию с образованием линейного спирта 1-1. Окисление спирта до 1-2 может дать карбоновую кислоту. Кислоту можно подвергнуть взаимодействию с амином с образованием амида 1-3, с введением, таким образом, К1 группы через реакцию образования амидной связи. Восстановление амида с использованием борана может обеспечить амин 1-4, и последующее восстановление нитрогруппы при помощи цинка в уксусной кислоте может обеспечить анилин 1-5. Трициклическое соединение 1-6 может быть образовано через добавление СОТ Удаление защиты в кислотных условиях и последующее иодирование приводит к арилиодиду 1-8. Защита Βοο-группой дает промежуточное соединение 1-9, которое можно подвергнуть реакции сочетания (т.е. реакции Сузуки) для введения К21 группы. Удаление Βοο-группы дает продукт 1-10.
- 19 032196
В некоторых вариантах осуществления арилбромид В-1 подвергают реакции сочетания с амином с образованием К-2. Восстановление нитрогруппы арила дает анилин К-3. Трициклическое соединение К4 получают путем добавления трифосгена. Защитную группу удаляют в кислотных условиях с образованием соединения К-5, которое подвергают иодированию при помощи N18, с получением арилиодида К6. Защита соединения Вос-группой дает соединение К-7. Подвергая К-7 реакции сочетания, можно ввести К21 группу (т.е. сочетание по методу Сузуки) с получением соединения К-8.
Схема К
В|ОН|:
КгСОэ н н
N N
Ν, >=О > Н
К11 к1
К-8
В некоторых вариантах осуществления альдегид С-5 подвергают олефинированию (т.е. Н\УЕ реакция) с получением сложного эфира Ь-1. Обработка основанием, таким как ЭВи. обеспечивает трициклическое соединение Ь-2. К21 группа может быть введена через реакцию сочетания с бороновой кислотой (например, сочетание по методу Сузуки) с образованием соединения Ь-3. Селективное бромирование дает соединение Ь-4, которое можно подвергнуть реакции сочетания с образованием соединения Ь-5. Восстановление олефина и удаление бензильной группы дает соединение Ь-6. Удаление защиты в кислотных условиях и последующее восстановительное аминирование может обеспечить соединение Ь-8.
В некоторых вариантах осуществления альдегид М-1 окисляют до кислоты М-2 при помощи реагента Джонса. Отщепление ацетатной группы осуществляют в кислотных условиях с образованием соединения М-3. Взаимодействие с амином (т.е. реакция образования амидной связи) используют для введения К1 группы с образованием, таким образом, соединения М-4. Трициклическое соединение М-5 получают путем добавления СЭЕ
Схема М
В других вариантах осуществления соединение N-1 подвергают бромированию при помощи N18 селективно с образованием N-1. Взаимодействие с винилбороновой кислотой или эфиром бороновой кислоты можно использовать для получения N-3 и введения К10 группы. Гидроборирование и окисление
- 20 032196 олефина может дать спирт Ν-4. Удаление защитной группы в кислотных условиях дает соединение Ν-5. Схема Ν
В некоторых вариантах осуществления соединение О-1 можно подвергнуть селективному сочетанию по азоту пиразола с образованием соединения О-2. Удаление трет-бутильных групп в кислотных условиях может привести к образованию соединения О-3.
В некоторых вариантах осуществления соединение структуры Р-1 может быть окислено до Р-2, например, в присутствии перманганата калия.
Схема Р
Некоторые иллюстративные К1 группы, которые можно ввести, следуя любой из схем А-Р, включают, но не ограничиваются этим
- 21 032196
Дополнительные иллюстративные К1 группы, которые можно ввести, следуя любой из схем А-Р, включают, но не ограничиваются этим
Некоторые иллюстративные К21 и/или К22 группы, которые можно ввести, следуя любой из схем АР, включают, но не ограничиваются этим
- 22 032196
Некоторые иллюстративные соединения, которые можно синтезировать в соответствии с любой из схем А-Р, включают, но не ограничиваются этим, соединения, представленные в табл. 1 (см. примеры).
С. Способы применения композиций, раскрытых в настоящей заявке.
Настоящее изобретение обеспечивает способ ингибирования активности протеинкиназы, присутствующей в клетке, включающий контактирование указанной клетки с эффективным количеством соединения формулы I. Предпочтительно протеинкиназа представляет собой ЕКК и соединение ингибирует ЕКК при !С, значении меньше чем около 1000 нМ, предпочтительно меньше чем около 100 нМ и наиболее предпочтительно меньше чем около 10 нМ.
В одном из вариантов предложенного способа стадия контактирования имеет место ίη νίΐτο, а в другом варианте стадия контактирования имеет место ίη νΐνο.
Ингибирование активности киназы можно определить и продемонстрировать многими различными способами, известными в данной области техники. Неограничивающие примеры включают: (а) иммуноблоттинг и иммунопреципитацию с использованием антител, таких как антифосфотирозиновые, антифосфосериновые или антифосфотреониновые антитела, которые распознают фосфорилированные белки; (Ь) использование антител, которые специфически распознают конкретную фосфорилированную форму киназного субстрата (например, антифосфо ЕКК); (с) анализы клеточной пролиферации, такие как, но не ограничиваясь этим, анализы поглощения тритированного тимидина, поглощения ВгбИ (5'-бром-2'дезоксиуридин) (набор, поставляемый на рынок компанией ί.';·ι№οο1ιοιη). поглощения МТ8 (набор, поставляемый на рынок компанией Рготеда), поглощения МТТ (набор, поставляемый на рынок компанией Снушнп Сйетюа1), поглощения СуОБАЫТ® красителя (поставляемого на рынок компанией [ηνίΙΐΌ^η).
Селективное ингибирование РККа также можно определить на основании уровней экспрессии РККа генов, сигнальных генов, регулирующих последующие звенья ее сигнальных каскадов (например, при помощи КТ-РСК), или уровней экспрессии белков (например, методами иммуноцитохимии, иммуногистохимии, вестерн-блоттинга) по сравнению с другими РК-киназами или протеинкиназами.
Наборы и коммерчески доступные анализы можно использовать для определения одного или нескольких из вышеуказанных.
- 23 032196
В некоторых вариантах осуществления практическое применение такого способа включает стадию контактирования, осуществляемую ίη νίΐτο. В других вариантах осуществления стадия контактирования осуществляется ίη νίνο.
Любое из соединений, представленных выше, может показывать биологическую активность в анализе ингибирования ЕКК в пределах примерно от 0,5 нМ до 25 мкМ (1С50).
Соединения по настоящему изобретению могут специфически связываться с ЕКК (МАРК) киназой или протеинкиназой, выбранной из группы, включающей Как, КаТ, ΊΝΚ, ЕгЬВ-1 (Е6ЕК), Нег2 (ЕгЬВ-2), Нег3 (ЕгЬВ-3), Нег4 (ЕгЬВ-4), МАР2К1 (МЕК1), МАР2К2 (МЕК2), МАР2К3 (МЕК3), МАР2К4 (МЕК4), МАР2К5 (МЕК5), МАР2К6 (МЕК6), МАР2К7 (МЕК7), СЭК1, СЭК2, СОК3, СЭК4, СЭК5, СЭК6, СЭК7, СЭК8, СЭК9, СЭК11 и любые другие протеинкиназы, перечисленные в прилагаемых таблицах и фигурах, также любые их функциональные мутанты.
В некоторых вариантах осуществления 1С50 соединения по настоящему изобретению для ЕКК1 и/или ЕКК2 составляет меньше чем около 1 мкМ, меньше чем около 100 нМ, меньше чем около 50 нМ, меньше чем около 10 нМ, меньше чем 1 нМ или даже меньше чем около 0,5 нМ. В некоторых вариантах осуществления 1С50 соединения по настоящему изобретению для ЕКК составляет меньше чем около 1 мкМ, меньше чем около 100 нМ, меньше чем около 50 нМ, меньше чем около 10 нМ, меньше чем 1 нМ или даже меньше чем около 0,5 нМ. В некоторых других вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению демонстрируют двойную специфичность связывания и способны ингибировать ЕКК киназу (например, ЕКК-1 киназу, ЕКК-2 киназу и т.д.), а также протеинкиназу (например, Как, КаТ, Нег-2, МЕК1 и т.д.) с 1С50 значением меньше чем около 1 мкМ, меньше чем около 100 нМ, меньше чем около 50 нМ, меньше чем около 10 нМ, меньше чем 1 нМ или даже меньше чем около 0,5 нМ. В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению могут обладать способностью ингибирования киназ, вовлеченных в Как-КаТ-МЕК-ЕКК путь, включая, например, Как, КаТ, ίΝΕ, ЕгЬВ-1 (Е6ЕК), Нег2 (ЕгЬВ-2), Нег3 (ЕгЬВ-3), Нег4 (ЕгЬВ-4), МАР2К1 (МЕК1), МАР2К2 (МЕК2), МАР2К3 (МЕК3), МАР2К4 (МЕК4), МАР2К5 (МЕК5), МАР2К6 (МЕК6), МАР2К7 (МЕК7), СЭК1, СЭК2, СОК3, СЭК4, СЭК5, СЭК6, СОК7, СЭК8, СЭК9, СОК11 и их функциональные мутанты. В некоторых вариантах осуществления киназа представляет собой Как, КаТ, .1ХК, ЕгЬВ-1 (Е6ЕК), Нег2 (ЕгЬВ-2), МАР2К1 (МЕК1), СЭК1, СЭК2, СОК3, СЭК4, СЭК5, СОК6 или любые другие киназы, перечисленные в таблицах ниже.
Еще в одном варианте осуществления соединения по настоящему изобретению включая, но не ограничиваясь этим, соединения, представленные в табл. 1, селективно ингибируют ЕКК1 и/или ЕКК2 активность по сравнению с одной или несколькими протеинкиназами, включая, но не ограничиваясь этим, серин/треонин киназу, такую как ЭХА-РК и тТог. Такое селективное ингибирование может быть подтверждено, например, 1С50 значением соединения по настоящему изобретению, которое может представлять 1/2, 1/3, 1/4, 1/5, 1/7, 1/10, 1/20, 1/25, 1/50, 1/100, 1/200, 1/300, 1/400, 1/500, 1/1000, 1/2000 или меньше по сравнению с контрольной протеинкиназой. В некоторых случаях соединения по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, представленные в табл. 1, не обладают существенной перекрестной реактивностью по меньшей мере с около 100, 200, 300 или более протеинкиназами, отличными от ЕКК1 или ЕКК2. Отсутствие существенной перекрестной реактивности с другими неЕКК протеинкиназами может быть подтверждено, например, по меньшей мере, сохранением 50, 60, 70, 80, 90% или более киназной активности, когда соединение по настоящему изобретению применяют для протеинкиназы при концентрации 1, 5, 10 мкМ или выше.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению селективно ингибируют активность как ЕКК1, так и ЕКК2 при значении 1С50 около 100, 50, 10, 5 нМ, 100 пМ, 10 пМ или даже 1 пМ или меньше, как определено в ίη νίΐτο киназном анализе.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению конкурируют с АТФ за связывание с АТФ-связывающим сайтом на ЕКК1 и/или ЕКК2. В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению связываются с ЕКК1 и/или ЕКК2 на сайте, отличном от АТФ-связывающего сайта.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению способны ингибировать и/или иначе модулировать клеточную сигнальную трансдукцию через одну или несколько протеинкиназ или киназ липидов, раскрытых в настоящей заявке. Например, одно или несколько соединений по настоящему изобретению способны ингибировать или модулировать продукт пути сигнальной трансдукции. Продукт сигнальной трансдукции рассматриваемого пути можно измерить по уровню фосфорилирования, дефосфорилирования, фрагментации, восстановления, окисления сигнальной молекулы в представляющем интерес пути. В еще одном специальном варианте осуществления продукт пути может представлять собой клеточный или фенотипический продукт (например, модуляция/ингибирование клеточной пролиферации, клеточной гибели, апоптоза, аутофагии, фагоцитоза, развития клеточного цикла, метастазов, клеточной инвазии, ангиогенеза, васкуляризации, убихитинирования, трансляции, транскрипции, транспорта белков, митохондриальной функции, функции Гольджи, эндоплазматической ретикулярной функции и т.д.). В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению способны в качестве примера вызывать апоптоз, вызы
- 24 032196 вать остановку клеточного цикла, ингибирование клеточной пролиферации, ингибирование роста опухоли, ингибирование ангиогенеза, ингибирование васкуляризации, ингибирование метастазов и/или ингибирование клеточной инвазии.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению вызывает апоптоз указанной клетки или остановку клеточного цикла. Клеточный цикл может быть остановлен соединениями по настоящему изобретению в 60/61 фазе, 8 фазе и/или 62/М фазе.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, перечисленные выше, способны ингибировать клеточную пролиферацию. Например, в некоторых случаях одно или несколько соединений по настоящему изобретению, перечисленных выше, могут ингибировать пролиферацию опухолевых клеток или опухолевых клеточных линий с разнообразным генетическим составом. В некоторых случаях соединения по настоящему изобретению могут ингибировать РС3 клеточную пролиферацию ίη νίΐΓΟ или в ίη νίνο модели, такой как мышиная модель ксенотрансплантата. В некоторых случаях пролиферация ίη νίίτο культивированных РС3 клеток может ингибироваться при значении 1С50 меньше чем 100, 75, 50, 25, 15, 10, 5, 3, 2, 1, 0,5, 0,1 нМ или меньше одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению, перечисленными выше.
В некоторых вариантах осуществления пролиферацию первичных опухолей, выделенных у субъектов (например, раковых пациентов), можно ингибировать при помощи соединения по настоящему изобретению, как показано в ίη νίίτο анализах или ίη νίνο моделях (например, с использованием опухолевых клеток субъектов для получения модели ксенотрансплантата). В некоторых случаях пролиферация первичной опухолевой клеточной линии может ингибироваться при 1С50 меньше чем 100, 75, 50, 25, 15, 10, 5, 3, 2, 1, 0,5, 0,1 нМ или даже меньше одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению, перечисленными в табл. 1. В некоторых случаях среднее значение 1С50 соединения по настоящему изобретению для ингибирования панели 10, 20, 30, 40, 50, 100 или больше первичных опухолевых клеток может быть около 200, 100, 75, 50, 25, 15, 10, 5, 3, 2, 1, 0,5, 0,1 нМ или даже меньше. Опухолевые клетки, которые можно ингибировать соединениями по настоящему изобретению, включают но не ограничиваются этим, панкреатические, ренальные (почки), костные, назофарингеальные, гастральные, желудочные, яичников, ротовой полости, молочной железы, крови, предстательной железы, прямой кишки, толстой кишки, колоректальные, глиальные, нервные, легкочные, кожные клетки.
В некоторых вариантах осуществления, соединения по настоящему изобретению являются эффективными для блокирования сигналов клеточной пролиферации в клетках. В некоторых случаях, передачу сигнала клеточной пролиферации можно ингибировать при помощи одного или нескольких соединений по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, представленные в табл. 1, как показывает Вестерн-блот анализ фосфорилирования белков, таких как ЕОХО1 (фосфорилирование по Т24/3а Т32), 68Κ3β (фосфорилирование по 89), РКА840 (фосфорилирование по Т246) или фосфорилирования МАРК. В некоторых случаях соединения по настоящему изобретению могут ингибировать фосфорилирование сигнальных белков и подавлять пролиферацию клеток, содержащих такие сигнальные белки, но являющихся резистентными к существующим химиотерапевтическим средствам, включая, но не ограничиваясь этим, рапамицин, гливек, дазатиниб, алкилирующие средства, антиметаболиты, антрациклины, растительные алкалоиды, ингибиторы топоизомеразы и другие противоопухолевые средства, раскрытые в настоящей заявке.
В некоторых вариантах осуществления одно или несколько соединений по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, перечисленные выше, могут вызывать остановку клеточного цикла. В некоторых случаях клетки, обработанные одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, перечисленные выше, могут иметь остановку или задержку прохождения через одну или несколько стадий клеточного цикла, таких как 60/61, 8 или 62/М. Например, клетки, обработанные одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению могут иметь остановку или задержку прохождения через 60/61 стадию клеточного цикла. В некоторых случаях около 35, 40, 50, 55, 60, 65, 70% или больше клеток, обработанных одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению, могут находиться в 60/61 стадии клеточного цикла. В некоторых случаях клетки, демонстрирующие остановку клеточного цикла в 60/61 стадии клеточного цикла в ответ на обработку соединениями по настоящему изобретению, представляют собой опухолевые клетки или быстроделящиеся клетки. В некоторых случаях соединения по настоящему изобретению вызывают остановку 60/61, сопоставимую или в большей степени по сравнению с доксорубицином.
В некоторых вариантах осуществления передачу сигнала в клетке в опухолевых клетках, ксенотрансплантированных самкам бестимусных мышей, можно ингибировать при помощи одного или нескольких соединений по настоящему изобретению, таких как соединения, перечисленные выше. В некоторых случаях передачу сигнала в клетке можно ингибировать при помощи одного или нескольких соединений по настоящему изобретению, как показывает вестерн-блот анализ детекции фосфорилирования ЕКК киназы(киназ), экстрагированной из гомогенизированных опухолей. В некоторых случаях ингибирование фосфорилирования может быть сопоставимым или больше, чем обеспечиваемое известными
- 25 032196 ингибиторами киназ, которые также ингибируют одну или несколько изоформ ЕКК в испытываемых условиях.
В некоторых вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь этим, соединения, перечисленные выше, вызывают уменьшение объема опухоли в опухолях, ксенотрансплантированных самкам бестимусных мышей. Например, обработка одним или несколькими соединениями по настоящему изобретению в результате приводит к уменьшению роста или объема опухоли, вызванной приживлением трансплантата А375 (мутант Β-КаТ У600Е), ЬОХ (мутант Β-КаТ У600Е) и Сο1ο-205(мутант Β-КаТ У600Е), ΡΑΝ^1 (мутант К-Как 612Ό), М1аРаса-2 (мутант К-Как С12С), НСТ116 (мутант К-Как 613Ό), Н441 (мутант К-Как С12У), Н23 (мутант К-Как С12С), ΜΌΑ-ΜΒ-231 (мутант К-Как 613Ό) ) и Ь81034 (мутант Ν-Как) опухолевых клеток у бестимусных мышей. Соединения по настоящему изобретению можно вводить перорально, подкожно или внутривенно или любыми другими способами введения соединения, представленными в настоящей заявке. В некоторых случаях соединения вводят один раз в неделю, через день, один раз в день, два раза в день, три раза в день, четыре раза в день или больше. В некоторых случаях вводят 0,01, 0,05, 0,1, 0,2, 0,4, 0,5, 1, 1,5, 2, 3, 4, 5, 7,5, 10, 100 мг/кг соединения или больше за один раз. В некоторых случаях существенное уменьшение объема опухоли можно наблюдать через 5, 10, 15, 20, 25 или 30 дней после приживления опухолевого трансплантата.
Ό. Способы лечения.
Изобретение также обеспечивает способы использования соединений или фармацевтических композиций по настоящему изобретению для лечения болезненных состояний, включая, но не ограничиваясь этим, состояния, связанные с нарушением функции ЕКК1, ЕКК2, Как, КаТ и/или МЕК киназы.
Настоящее изобретение обеспечивает способ уменьшения тяжести расстройства, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы Ι, где расстройство выбрано из группы, состоящей из рака, поражения костей, воспалительного заболевания, иммунного заболевания, заболевания нервной системы, метаболического заболевания, респираторного заболевания и сердечного заболевания.
Предпочтительно расстройство представляет собой рак, выбранный из группы, состоящей из рака молочной железы, рака поджелудочной железы, немелкоклеточного рака легкого Щ8СЬС), рака щитовидной железы, семином, меланомы, рака мочевого пузыря, рака печени, рака почки, миелодиспластического синдрома (ΜΌ8), острого миелогенного лейкоза (АМЬ) и колоректального рака.
В предпочтительном варианте рак представляет собой меланому или колоректальный рак.
В другом предпочтительном варианте расстройство опосредовано ЕКК1 и/или ЕКК2.
Е. Фармацевтические композиции и наборы.
Изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию, обладающую способностью ингибировать ЕКК, включающую эффективное количество соединения формулы Ι и фармацевтически приемлемый эксципиент. Предпочтительно соединение присутствует в терапевтически эффективном количестве.
В одном из вариантов фармацевтическая композиция сформулирована в виде лекарственной формы для перорального введения, в другом варианте фармацевтическая композиция сформулирована в виде таблетки или капсулы.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению обычно формулируют так, чтобы обеспечить терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению в качестве активного ингредиента или его фармацевтически приемлемой соли, сложного эфира, пролекарства, сольвата, гидрата или производного. Где это требуется, фармацевтические композиции содержат фармацевтически приемлемую соль и/или ее координационный комплекс, один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов, носителей, включая инертные твердые разбавители и наполнители, разбавители, включающие стерильный водный раствор и различные органические растворители, усилители проницаемости, солюбилизирующие вещества и адъюванты.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить отдельно или в комбинации с одним или несколькими другими средствами, которые также обычно вводят в форме фармацевтических композиций. Где это требуется, одно или несколько соединений по настоящему изобретению и другое средство(средства) можно смешать в виде одного препарата, или оба компонента можно сформулировать в отдельные препараты для использования их в комбинации отдельно или одновременно.
В некоторых вариантах осуществления концентрация одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, составляет меньше чем 100, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, 1, 0,5, 0,4, 0,3, 0,2, 0,1, 0,09, 0,08, 0,07, 0,06, 0,05, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01, 0,009, 0,008, 0,007, 0,006, 0,005, 0,004, 0,003, 0,002, 0,001, 0,0009, 0,0008, 0,0007, 0,0006, 0,0005, 0,0004, 0,0003, 0,0002или 0,0001% мас./мас., мас./об. или об./об.
В некоторых вариантах осуществления концентрация одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, составляет больше чем 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 19,75, 19,50, 19,25, 19, 18,75, 18,50, 18,25 18, 17,75, 17,50, 17,25 17, 16,75, 16,50, 16,25, 16, 15,75, 15,50, 15,25, 15, 14,75, 14,50, 14,25, 14, 13,75, 13,50, 13,25, 13, 12,75, 12,50, 12,25, 12, 11,75, 11,50, 11,25, 11, 10,75, 10,50, 10,25, 10, 9,75, 9,50, 9,25, 9, 8,75, 8,50, 8,25, 8, 7,75, 7,50, 7,25, 7, 6,75, 6,50, 6,25, 6, 5,75, 5,50, 5,25, 5, 4,75, 4,50, 4,25, 4, 3,75, 3,50, 3,25, 3, 2,75, 2,50, 2,25, 2, 1,75, 1,50, 1,25, 1,
- 26 032196
0,5, 0,4, 0,3, 0,2, 0,1, 0,09, 0,08, 0,07, 0,06, 0,05, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01, 0,009, 0,008, 0,007, 0,006, 0,005, 0,004, 0,003, 0,002, 0,001, 0,0009, 0,0008, 0,0007, 0,0006, 0,0005, 0,0004, 0,0003, 0,0002 или 0,0001% мас./мас., мас./об. или об./об.
В некоторых вариантах осуществления концентрация одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, находится в пределах от приблизительно 0,0001 до приблизительно 50%, от приблизительно 0,001 до приблизительно 40%, от приблизительно 0,01 до приблизительно 30%, от приблизительно 0,02 до приблизительно 29%, от приблизительно 0,03 до приблизительно 28%, от приблизительно 0,04 до приблизительно 27%, от приблизительно 0,05 до приблизительно 26%, от приблизительно 0,06 до приблизительно 25%, от приблизительно 0,07 до приблизительно 24%, от приблизительно 0,08 до приблизительно 23%, от приблизительно 0,09 до приблизительно 22%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 21%, от приблизительно 0,2 до приблизительно 20%, от приблизительно 0,3 до приблизительно 19%, от приблизительно 0,4 до приблизительно 18%, от приблизительно 0,5 до приблизительно 17%, от приблизительно 0,6 до приблизительно 16%, от приблизительно 0,7 до приблизительно 15%, от приблизительно 0,8 до приблизительно 14%, от приблизительно 0,9 до приблизительно 12%, от приблизительно 1 до приблизительно 10% мас./мас., мас./об. или об./об.
В некоторых вариантах осуществления концентрация одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, находится в пределах от приблизительно 0,001 до приблизительно 10%, от приблизительно 0,01 до приблизительно 5%, от приблизительно 0,02 до приблизительно 4,5%, от приблизительно 0,03 до приблизительно 4%, от приблизительно 0,04 до приблизительно 3,5%, от приблизительно 0,05 до приблизительно 3%, от приблизительно 0,06 до приблизительно 2,5%, от приблизительно 0,07 до приблизительно 2%, от приблизительно 0,08 до приблизительно 1,5%, от приблизительно 0,09 до приблизительно 1%, от приблизительно 0,1 до приблизительно 0,9% мас./мас., мас./об. или об./об.
В некоторых вариантах осуществления количество одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, равно или меньше чем 10, 9,5, 9,0, 8,5, 8,0, 7,5, 7,0, 6,5, 6,0, 5,5, 5,0, 4,5, 4,0, 3,5, 3,0, 2,5, 2,0, 1,5, 1,0, 0,95, 0,9, 0,85, 0,8, 0,75, 0,7, 0,65, 0,6, 0,55, 0,5, 0,45, 0,4, 0,35, 0,3, 0,25, 0,2, 0,15, 0,1, 0,09, 0,08, 0,07, 0,06, 0,05, 0,04, 0,03, 0,02, 0,01, 0,009, 0,008, 0,007, 0,006, 0,005, 0,004, 0,003, 0,002, 0,001, 0,0009, 0,0008, 0,0007, 0,0006, 0,0005, 0,0004, 0,0003, 0,0002 или 0,0001 г.
В некоторых вариантах осуществления количество одного или нескольких соединений, содержащихся в фармацевтических композициях по настоящему изобретению, больше чем 0,0001, 0,0002, 0,0003, 0,0004, 0,0005, 0,0006, 0,0007, 0,0008, 0,0009, 0,001, 0,0015, 0,002, 0,0025, 0,003, 0,0035, 0,004, 0,0045, 0,005, 0,0055, 0,006, 0,0065, 0,007, 0,0075, 0,008, 0,0085, 0,009, 0,0095, 0,01, 0,015, 0,02, 0,025, 0,03, 035, 0,04, 0,045, 0,05, 0,055, 0,06, 0,065, 0,07, 0,075, 0,08, 0,085, 0,09, 0,095, 0,1, 0,15, 0,2, 0,25, 0,3, 0,35, 0,4, 0,45, 0,5, 0,55, 0,6, 0,65, 0,7, 0,75, 0,8, 0,85, 0,9, 0,95, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 5,5, 6, 6,5, 7, 7,5, 8, 8,5, 9, 9,5 или 10 г.
В некоторых вариантах осуществления количество одного или нескольких соединений по настоящему изобретению находится в пределах 0,0001-10 г, 0,0005-9 г, 0,001-8 г, 0,005-7 г, 0,01-6 г, 0,05-5 г, 0,1-4 г, 0,5-4 г или 1-3 г.
Соединения в соответствии с изобретением являются эффективными в широком диапазоне доз. Например, для лечения взрослого человека дозы от 0,01 до 1000 мг в день, от 0,1 до 500 мг, от 0,5 до 100 мг, от 1 до 50 мг в день, от 2 до 40 мг в день, от 3 до 30 мг в день, от 4 до 20 мг в день, от 5 до 10 мг в день являются примерами доз, которые можно использовать. Точная доза будет зависеть от пути введения, формы, в которой вводят соединение, субъекта, подлежащего лечению, массы тела субъекта, подлежащего лечению, предпочтения и опыта лечащего врача.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению типично содержит активный ингредиент (например, соединение) по настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и/или координационный комплекс, один или несколько фармацевтически приемлемых эксципиентов, носителей, включая, но не ограничиваясь этим, инертные твердые разбавители и наполнители, разбавители, стерильный водный раствор и различные органические растворители, усилители проницаемости, солюбилизирующие вещества и адъюванты.
Ниже описаны неограничивающие иллюстративные фармацевтические композиции и способы получения таких композиций.
В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для перорального введения, содержащую соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящий для перорального введения.
В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает твердую фармацевтическую композицию для перорального введения, содержащую: (ί) эффективное количество соединения по настоящему изобретению; необязательно (и) эффективное количество второго средства и (ш) фармацевтический эксципиент, подходящий для перорального введения. В некоторых вариантах осуществления композиция дополнительно содержит (ίν) эффективное количество третьего средства.
- 27 032196
В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может представлять собой жидкую фармацевтическую композицию, подходящую для перорального приема.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению, подходящие для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных лекарственных форм, таких как капсулы, саше или таблетки, или в виде жидкостей или аэрозольных спреев, при этом каждая такая форма содержит предварительно определенное количество активного ингредиента в виде порошка или гранул, раствора или суспензии в водной или неводной жидкости, эмульсии масло-в-воде или жидкой эмульсии вода-в-масле. Такие лекарственные формы можно получить любым из способов приготовления лекарственных средств, при этом все способы включают стадию приведения активного ингредиента в ассоциацию с носителем, который составляет один или несколько обязательных ингредиентов. Как правило, композиции получают путем однородного и тесного смешивания активного ингредиента с жидкими носителями или тонкоизмельченными твердыми носителями, или и теми, и другими, затем, если необходимо, формования продукта в желаемую форму. Например, таблетку можно получить путем прессования или формования, необязательно с одним или несколькими вспомогательными ингредиентами. Прессованные таблетки можно получить путем прессования в подходящей машине активного ингредиента в свободнотекучей форме, такой как порошок или гранулы, необязательно смешанного с эксципиентом, таким как, но не ограничиваясь этим, связующее, смазывающее вещество, инертный разбавитель и/или поверхностно-активное или диспергирующее вещество. Формованные таблетки можно получить путем формования в подходящей машине смеси порошкообразного соединения, смоченного инертным жидким разбавителем.
Настоящее изобретение, кроме того, охватывает безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы, включающие активный ингредиент, поскольку вода может способствовать разложению некоторых соединений. Например, в фармацевтике можно добавлять воду (например, 5%) в качестве средства для имитации длительного хранения для определения характеристик, таких как срок хранения или стабильность композиций в течение времени. Безводные фармацевтические композиции и лекарственные формы по настоящему изобретению можно получить с использованием безводных или содержащих низкие количества влаги ингредиентов и в безводных условиях или условиях низкой влажности. Фармацевтические композиции и лекарственные формы по настоящему изобретению, которые содержат лактозу, можно сделать безводными, если ожидается существенный контакт с сыростью и/или влажностью в процессе изготовления, упаковки и/или хранения. Безводную фармацевтическую композицию можно получить и хранить так, чтобы поддерживать ее безводную природу. Соответственно, безводные композиции можно упаковывать с использованием материалов, которые известны как предотвращающие воздействие воды, так, чтобы они были включены в подходящие фармакологические наборы. Примеры подходящей упаковки включают, но не ограничиваются этим, герметичные упаковки из фольги, пластика или т.п., однодозовые контейнеры, блистерные упаковки и контурные упаковки.
Активный ингредиент можно объединить в тесной смеси с фармацевтическим носителем в соответствии с традиционными способами составления фармацевтических композиций. Носитель может принимать самые различные формы в зависимости от формы препарата, которая необходима для введения. Для получения композиций для пероральной лекарственной формы можно использовать любую обычную фармацевтическую среду в качестве носителя, такую как, например, вода, гликоли, масла, спирты, отдушки, консерванты, красители и т.п., в случае пероральных жидких препаратов (таких как суспензии, растворы и эликсиры) или аэрозолей; или носители, такие как крахмалы, сахара, микрокристаллическая целлюлоза, разбавители, гранулирующие вещества, смазывающие вещества, связующие и разрыхлители можно использовать в случае пероральных твердых препаратов, в некоторых вариантах осуществления без использования лактозы. Например, подходящие носители включают порошки, капсулы и таблетки в случае твердых пероральных препаратов. Если желательно, таблетки могут иметь покрытие, нанесенное стандартными водными или неводными методами.
Связующие, подходящие для использования в фармацевтических композициях и лекарственных формах, включают, но не ограничиваются этим, кукурузный крахмал, картофельный крахмал или другие крахмалы, желатин, природные и синтетические камеди, такие как аравийская камедь, альгинат натрия, альгиновая кислота, другие альгинаты, порошкообразные трагакант, гуаровую камедь, целлюлозу и ее производные (например, этилцеллюлозу, ацетат целлюлозы, кальциевую соль карбоксиметилцеллюлозы, натриевую соль карбоксиметилцеллюлозы), поливинилпирролидон, метилцеллюлозу, предварительно желатинизированный крахмал, гидроксипропилметилцеллюлозу, микрокристаллическую целлюлозу и смеси таких веществ.
Примеры подходящих наполнителей для использования в фармацевтических композициях и лекарственных формах, раскрытых в настоящей заявке, включают, но не ограничиваются этим, тальк, карбонат кальция (например, гранулы или порошок), микрокристаллическую целлюлозу, порошкообразную целлюлозу, декстраты, каолин, маннит, кремневую кислоту, сорбит, крахмал, предварительно желатинизированный крахмал и смеси таких веществ.
Разрыхлители можно использовать в композициях по настоящему изобретению для получения таблеток, которые разрушаются под действием водной среды. Слишком много разрыхлителя может привести к получению таблеток, которые могут разрушаться в флаконе. Слишком малое количество может
- 28 032196 быть недостаточным для разрушения таблетки и, таким образом, может изменять скорость и степень высвобождения активного ингредиента(ингредиентов) из лекарственной формы. Таким образом, достаточное количество разрыхлителя, которое не является ни слишком малым, ни слишком большим для негативного влияния на высвобождение активного ингредиента(ингредиентов), можно использовать для получения лекарственных форм соединений, раскрытых в настоящей заявке. Количество используемого разрыхлителя может варьироваться в зависимости от типа композиции и способа введения, и его легко сможет определить средний специалист в данной области. От около 0,5 до около 15 мас.% разрыхлителя или от около 1 до около 5 мас.% разрыхлителя можно использовать в фармацевтической композиции. Разрыхлители, которые можно использовать для получения фармацевтических композиций и лекарственных форм по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются этим, агар-агар, альгиновую кислоту, карбонат кальция, микрокристаллическую целлюлозу, натрий-кроскармелозу, кросповидон, полакрилин калия, натрийкрахмалгликолят, картофельный или тапиоковый крахмал, предварительно желатинизированный крахмал, другие крахмалы, глины, другие альгины, другие целлюлозы, камеди или смеси таких веществ.
Смазывающие вещества, которые можно использовать для получения фармацевтических композиций и лекарственных форм по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются этим, стеарат кальция, стеарат магния, минеральное масло, светлое минеральное масло, глицерин, сорбит, маннит, полиэтиленгликоль, другие гликоли, стеариновую кислоту, лаурилсульфат натрия, тальк, гидрогенизированное растительное масло (например, арахисовое масло, масло семян хлопчатника, подсолнечное масло, кунжутное масло, оливковое масло, кукурузное масло, соевое масло), стеарат цинка, этилолеат, этиллаурат, агар или смеси таких веществ. Дополнительные смазывающие вещества включают, например, силоидный силикагель, коагулированный аэрозоль синтетического кремнезема или смеси таких веществ. Добавление смазывающего вещества является необязательным, и его количество составляет меньше чем примерно 1 мас.% от массы фармацевтической композиции.
Когда для перорального введения желательны водные суспензии и/или эликсиры, активный ингредиент в них может быть объединен с различными подсластителями или отдушками, окрашивающими веществами или красителями и, если это желательно, эмульгаторами и/или суспендирующими веществами вместе с такими разбавителями, как вода, этанол, пропиленгликоль, глицерин, и различными комбинациями таких веществ.
Таблетки могут быть без покрытия или могут иметь покрытие, нанесенное известными методами, для замедления разложения и абсорбции в желудочно-кишечном тракте и обеспечения, таким образом, замедленного действия в течение более длительного периода времени. Например, можно использовать обеспечивающее временную задержку вещество, такое как глицерилмоностеарат или глицерилдистеарат. Композиции для перорального применения также могут быть представлены в виде твердых желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, где активный ингредиент смешан с водой или с масляной средой, например с арахисовым маслом, жидким парафином или оливковым маслом.
Поверхностно-активные вещества, которые можно использовать для получения фармацевтических композиций и лекарственных форм по настоящему изобретению, включают, но не ограничиваются этим, гидрофильные поверхностно-активные вещества, липофильные поверхностно-активные вещества и смеси таких веществ. Таким образом, можно использовать смесь гидрофильных поверхностно-активных веществ, можно использовать смесь липофильных поверхностно-активных веществ или можно использовать смесь по меньшей мере одного гидрофильного поверхностно-активного вещества и по меньшей мере одного липофильного поверхностно-активного вещества.
Подходящее гидрофильное поверхностно-активное вещество, как правило, может иметь значение ГЛБ по меньшей мере 10, тогда как подходящие липофильные поверхностно-активные вещества, как правило, могут иметь значение ГЛБ, равное или меньше чем около 10. Эмпирический параметр, используемый для характеристики относительной гидрофильности и гидрофобности неионных амфифильных соединений, представляет собой гидрофильно-липофильный баланс (ГЛБ значение). Поверхностноактивные вещества с более низкими значениями ГЛБ являются более липофильными или гидрофобными и имеют более высокую растворимость в маслах, тогда как поверхностно-активные вещества с более высокими значениями ГЛБ являются более гидрофильными и имеют более высокую растворимость в водных растворах.
Как правило, считают, что гидрофильные поверхностно-активные вещества представляют собой такие соединения, которые имеют значение ГЛБ больше чем около 10, а также анионные, катионные или цвиттерионные соединения, для которых ГЛБ шкала в большинстве случаев неприменима. Аналогичным образом, липофильные (т.е. гидрофобные) поверхностно-активные вещества представляют собой соединения, имеющие значение ГЛБ, равное или меньше чем около 10. Однако ГЛБ значение поверхностноактивного вещества просто является грубо ориентировочным, обычно используемым, чтобы обеспечить возможность формулирования промышленных, фармацевтических и косметических эмульсий.
Гидрофильные поверхностно-активные вещества могут быть либо ионными либо неионными. Под
- 29 032196 ходящие ионные поверхностно-активные вещества включают, но не ограничиваются этим, алкиламмониевые соли; соли фузидовой кислоты; жирнокислотные производные аминокислот, олигопептидов и полипептидов; глицеридные производные аминокислот, олигопептидов и полипептидов; лецитины и гидрогенизированные лецитины; лизолецитины и гидрогенизированные лизолецитины; фосфолипиды и их производные; лизофосфолипиды и их производные; соли сложных эфиров жирных кислот и карнитина; соли алкилсульфатов; соли жирных кислот; докузат натрия; ациллактилаты; моно- и диацетилированные моно- и диглицеридные эфиры винной кислоты; сукцинилированные моно- и диглицериды; моно- и диглицеридные эфиры лимонной кислоты и смеси таких веществ.
В описанной выше группе ионные поверхностно-активные вещества включают в качестве примера лецитины, лизолецитин, фосфолипиды, лизофосфолипиды и их производные; соли сложных эфиров жирных кислот и карнитина; соли алкилсульфатов; соли жирных кислот; докузат натрия; ациллактилаты; моно- и диацетилированные моно- и диглицеридные эфиры винной кислоты; сукцинилированные монои диглицериды; моно- и диглицеридные эфиры лимонной кислоты и смеси таких веществ.
Ионные поверхностно-активные вещества могут представлять собой ионизированные формы лецитина, лизолецитина, фосфатидилхолина, фосфатидилэтаноламина, фосфатидилглицерина, фосфатидовой кислоты, фосфатидилсерина, лизофосфатидилхолина, лизофосфатидилэтаноламина, лизофосфатидилглицерина, лизофосфатидовой кислоты, лизофосфатидилсерина, ПЭГ-фосфатидилэтаноламина, ПВПфосфатидилэтаноламина, жирнокислотных эфиров молочной кислоты, стеароил-2-лактилата, стеароиллактилата, сукцинилированных моноглицеридов, моно/диацетилированных моно/диглицеридных эфиров винной кислоты, моно/диглицеридных эфиров лимонной кислоты, холилсаркозина, капроата, каприлата, капрата, лаурата, миристата, пальмитата, олеата, рицинолеата, линолеата, линолената, стеарата, лаурилсульфата, тетрадецилсульфата, докузата, лауроилкарнитинов, пальмитоилкарнитинов, миристоилкарнитинов и их соли и смеси.
Гидрофильные неионные поверхностно-активные вещества могут включать, но не ограничиваются этим, алкилглюкозиды; алкилмальтозиды; алкилтиоглюкозиды; лаурилмакроголглицериды; алкиловые эфиры полиоксиалкилена, такие как алкиловые эфиры полиэтиленгликоля; полиоксиалкиленалкилфенолы, такие как полиэтиленгликоль алкилфенолы; полиоксиалкиленовые эфиры жирных кислот и алкилфенолов, такие как моноэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля и диэфиры жирных кислот и полиэтиленгликоля; полиэтиленгликолевые эфиры глицерина и жирных кислот; сложные полиглицериновые эфиры жирных кислот; полиоксиалкиленовые эфиры сорбитана и жирных кислот, такие как полиэтиленгликолевые эфиры сорбитана и жирных кислот; гидрофильные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из глицеридов, растительных масел, гидрогенизированных растительных масел, жирных кислот и стеролов; полиоксиэтиленстеролы, их производные и аналоги; полиоксиэтилированные витамины и их производные; полиоксиэтилен-полиоксипропиленовые блок-сополимеры; и смеси таких веществ; полиэтиленгликолевые эфиры сорбитана и жирных кислот и гидрофильные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из триглицеридов, растительных масел и гидрогенизированных растительных масел. Полиол может представлять собой глицерин, этиленгликоль, полиэтиленгликоль, сорбит, пропиленгликоль, пентаэритрит или сахарид.
Другие гидрофильные-неионные поверхностно-активные вещества включают, без ограничения, ПЭГ-10 лаурат, ПЭГ-12 лаурат, ПЭГ-20 лаурат, ПЭГ-32 лаурат, ПЭГ-32 дилаурат, ПЭГ-12 олеат, ПЭГ-15 олеат, ПЭГ-20 олеат, ПЭГ-20 диолеат, ПЭГ-32 олеат, ПЭГ-200 олеат, ПЭГ-400 олеат, ПЭГ-15 стеарат, ПЭГ-32 дистеарат, ПЭГ-40 стеарат, ПЭГ-100 стеарат, ПЭГ-20 дилаурат, ПЭГ-25 глицерилтриолеат, ПЭГ32 диолеат, ПЭГ-20 глицериллаурат, ПЭГ-30 глицериллаурат, ПЭГ-20 глицерилстеарат, ПЭГ-20 глицерилолеат, ПЭГ-30 глицерилолеат, ПЭГ-30 глицериллаурат, ПЭГ-40 глицериллаурат, ПЭГ-40 масло из ядер кокосового ореха, ПЭГ-50 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-40 касторовое масло, ПЭГ35 касторовое масло, ПЭГ-60 касторовое масло, ПЭГ-40 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-60 гидрогенизированное касторовое масло, ПЭГ-60 кукурузное масло, ПЭГ-6 капрат/каприлат глицериды, ПЭГ-8 капрат/каприлат глицериды, полиглицерил-10 лаурат, ПЭГ-30 холестерин, ПЭГ-25 фитостерол, ПЭГ-30 соевый стерол, ПЭГ-20 триолеат, ПЭГ-40 сорбитанолеат, ПЭГ-80 сорбитанлаурат, полисорбат 20, полисорбат 80, ПОЭ-9 лауриловый эфир, ПОЭ-23 лауриловый эфир, ПОЭ-10 олеиловый эфир, ПОЭ20 олеиловый эфир, ПОЭ-20 стеариловый эфир, токоферил ПЭГ-100 сукцинат, ПЭГ-24 холестерин, полиглицерил-10 олеат, Т\уеен 40, Т\уеен 60, моностеарат сахарозы, монолаурат сахарозы, монопальмитат сахарозы, ряд ПЭГ 10-100 нонилфенолов, ряд ПЭГ 15-100 октилфенолов и полоксамеры.
Подходящие липофильные поверхностно-активные вещества включают только в качестве примера жирные спирты; сложные эфиры жирных кислот и глицерина; ацетилированные сложные эфиры жирных кислот и глицерина; сложные эфиры жирных кислот низших спиртов; сложные эфиры пропиленгликоля и жирных кислот; сложные эфиры сорбитана и жирных кислот; полиэтиленгликолевые сложные эфиры жирных кислот и сорбитана; стеролы и производные стеролов; полиоксиэтилированные стеролы и производные стеролов; алкиловый эфиры полиэтиленгликоля; сложные эфиры сахаров; эфиры сахаров; моно- и диглицеридные производные молочной кислоты; гидрофобные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из глицеридов, растительных масем, гидро
- 30 032196 генизированных растительных масел, жирных кислот и стеролов; маслорастворимые витамины/производные витаминов; и смеси таких веществ. В этой группе предпочтительные липофильные поверхностно-активные вещества включают сложные эфиры жирных кислот и глицерина, сложные эфиры пропиленгликоля и жирных кислот и смеси таких веществ или представляют собой гидрофобные продукты переэтерификации полиола по меньшей мере с одним членом группы, состоящей из растительных масел, гидрогенизированных растительных масел и триглицеридов.
В одном варианте осуществления композиция может включать солюбилизирующее вещество для обеспечения хорошей солюбилизации и/или растворения соединения по настоящему изобретению и для минимизации преципитации соединения по настоящему изобретению. Это может быть особенно важным для композиций, предназначенных для неперорального применения, например композиций для инъекций. Солюбилизирующее вещество также может быть добавлено для повышения растворимости гидрофильного лекарственного средства и/или других компонентов, таких как поверхностно-активные вещества, или для поддержания композиции в виде стабильного или гомогенного раствора или дисперсии.
Примеры подходящих солюбилизирующих веществ включают, но не ограничиваются этим, следующие: спирты и полиолы, такие как этанол, изопропанол, бутанол, бензиловый спирт, этиленгликоль, пропиленгликоль, бутандиолы и их изомеры, глицерин, пентаэритрит, сорбит, маннит, транскутол, диметилизосорбид, полиэтиленгликоль, полипропиленгликоль, поливиниловый спирт, гидроксипропилметилцеллюлоза и другие производные целлюлозы, циклодекстрины и производные циклодекстринов; эфиры полиэтиленгликолей со средней молекулярной массой от около 200 до около 6000, такие как тетрагидрофурфуриловый спирт ПЭГ эфир (гликофурол) или метокси ПЭГ; амиды и другие азотсодержащие соединения, такие как 2-пирролидон, 2-пиперидон, 8-капролактам, №алкилпирролидон, N гидроксиалкилпирролидон, №алкилпиперидон, №алкилкапролактам, диметилацетамид и поливинилпирролидон; сложные эфиры, такие как этилпропионат, трибутилцитрат, ацетилтриэтилцитрат, ацетилтрибутилцитрат, триэтилцитрат, этилолеат, этилкаприлат, этилбутират, триацетин, пропиленгликоль моноацетат, пропиленгликоль диацетат, ε-капролактон и его изомеры, δ-валеролактон и его изомеры, βбутиролактон и его изомеры; другие солюбилизирующие вещества, известные в данной области техники, такие как диметилацетамид, диметилизосорбид, №метилпирролидоны, монооктаноин, моноэтиловый эфир диэтиленгликоля и вода.
Смеси солюбилизирующих веществ также можно использовать. Примеры включают, но не ограничиваясь этим, триацетин, триэтилцитрат, этилолеат, этилкаприлат, диметилацетамид, N метилпирролидон, №гидроксиэтилпирролидон, поливинилпирролидон, гидроксипропилметилцеллюлозу, гидроксипропилциклодекстрины, этанол, полиэтиленгликоль 200-100, гликофурол, транскутол, пропиленгликоль и диметилизосорбид. Особенно предпочтительные солюбилизирующие вещества включают сорбит, глицерин, триацетин, этиловый спирт, ПЭГ-400, гликофурол и пропиленгликоль.
Количество солюбилизирующего вещества, которое может быть включно, конкретно не ограничивается. Количество данного конкретного солюбилизирующего вещества может ограничиваться биоприемлемым количеством, которое легко сможет определить специалист в данной области. В некоторых обстоятельствах, может быть полезным включение количеств солюбилизирующих веществ намного больше, чем биоприемлемые количества, например, для достижения максимальной концентрации лекарственного средства, при этом избыток солюбилизирующего вещества удаляют до поставки композици субъекту с использованием традиционных процедур, таких как дистилляция или выпаривание. Таким образом, если таковое присутствует, солюбилизирующее вещество может присутствовать в количестве 10, 25, 50, 100 или вплоть до около 200 мас.% в расчете на общую массу лекарственного средства и других эксципиентов. Если желательно, можно использовать также очень малые количества солюбилизирующего вещества, такие как 5, 2, 1 или даже меньше. Типично, солюбилизирующее вещество может присутствовать в количестве от около 1 до около 100%, более типично от около 5 до около 25 мас.%.
Композиция также может включать одну или несколько фармацевтически приемлемых добавок и эксципиентов. Такие добавки и эксципиенты включают, без ограничения, агенты для уменьшения вязкости, противовспенивающие добавки, буферные вещества, полимеры, антиоксиданты, консерванты, хелатообразующие вещества, модуляторы вязкости, агенты тоничности, отдушки, красители, ароматизаторы, вещества, делающие композицию непрозрачной, суспендирующие вещества, связующие, наполнители, пластификаторы, смазывающие вещества и смеси таких веществ.
Кроме того, кислота или основание могут быть включены в композицию для облегчения переработки, для повышения стабильности или для других целей. Примеры фармацевтически приемлемых оснований включают аминокислоты, сложные эфиры аминокислот, гидроксид аммония, гидроксид калия, гидроксид натрия, гидрокарбонат натрия, гидроксид алюминия, карбонат кальция, гидроксид магния, алюмосиликат магния, синтетический силикат алюминия, синтетический гидрокальцит, алюминия-магниягидроокись, диизопропилэтиламин, этаноламин, этилендиамин, триэтаноламин, триэтиламин, триизопропаноламин, триметиламин, трис(гидроксиметил)аминометан (ТК18) и т.п. Также подходящими являются основания, которые представляют собой соли фармацевтически приемлемой кислоты, такой как уксусная кислота, акриловая кислота, адипиновая кислота, альгиновая кислота, алкансульфоновая кислота, аминокислоты, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, борная кислота, масляная кислота, угольная
- 31 032196 кислота, лимонная кислота, жирные кислоты, муравьиная кислота, фумаровая кислота, глюконовая кислота, гидрохиносульфоновая кислота, изоаскорбиновая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, щавелевая кислота, парабромфенилсульфоновая кислота, пропионовая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, янтарная кислота, дубильная кислота, винная кислота, тиогликолевая кислота, толуолсульфоновая кислота, мочевая кислота и т.п. Соли полипротоновых кислот, такие как фосфат натрия, динатрий гидрофосфат и дигидрофосфат натрия, также можно использовать. Когда основание представляет собой соль, катион может быть любым удобным и фармацевтически приемлемым катионом, таким как аммоний, щелочные металлы, щелочно-земельные металлы и т. п. Пример может включать, но не ограничивается этим, натрий, калий, литий, магний, кальций и аммоний.
Подходящие кислоты представляют собой фармацевтически приемлемые органические или неорганические кислоты. Примеры подходящих неорганических кислот включают хлористо-водородную кислоту, бромисто-водородную кислоту, иодисто-водородную кислоту, серную кислоту, азотную кислоту, борную кислоту, фосфорную кислоту и т.п. Примеры подходящих органических кислот включают уксусную кислоту, акриловую кислоту, адипиновую кислоту, альгиновую кислоту, алкансульфоновые кислоты, аминокислоты, аскорбиновую кислоту, бензойную кислоту, борную кислоту, масляную кислоту, угольную кислоту, лимонную кислоту, жирные кислоты, муравьиную кислоту, фумаровую кислоту, глюконовую кислоту, гидрохиносульфоновую кислоту, изоаскорбиновую кислоту, молочную кислоту, малеиновую кислоту, метансульфоновую кислоту, щавелевую кислоту, парабромфенилсульфоновую кислоту, пропионовую кислоту, п-толуолсульфоновую кислоту, салициловую кислоту, стеариновую кислоту, янтарную кислоту, дубильную кислоту, винную кислоту, тиогликолевую кислоту,толуолсульфоновую кислоту, мочевую кислоту и т.п.
В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для инъекций, содержащую соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящей для инъекции. Компоненты и количества веществ в композициях такие, как описано выше.
Формы, в которые могут быть включены новые композиции по настоящему изобретению, для введения путем инъекции включают водные или масляные суспензии или эмульсии с использованием кунжутного масла, кукурузного масла, масла семян хлопчатника или арахисового масла, а также эликсиров, маннита, декстрозы или стерильного водного раствора и подобных фармацевтических носителей.
Водные растворы в физиологическом солевом растворе также традиционно используют для инъекций. Этанол, глицерин, пропиленгликоль, жидкий полиэтиленгликоль и т.п. (и подходящие смеси таких веществ), производные циклодекстринов и растительные масла также можно использовать. Подходящую текучесть можно поддерживать, например, с использованием покрытия, такого как лецитин, для поддержания нужного размера частиц в случае дисперсии и с использованием поверхностно-активных веществ. Предотвращение действия микроорганизмов можно обеспечивать с использованием различных антибактериальных и противогрибковых средств, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты, тимеросала и т.п.
Стерильные растворы для инъекций получают путем включения соединения по настоящему изобретению в необходимом количестве в подходящий растворитель с различными другими ингредиентами, перечисленными выше, в соответствии с требованиями, с последующей стерилизацией фильтрованием. Как правило, дисперсии получают путем включения различных стерилизованных активных ингредиентов в стерильный носитель, который содержит основную дисперсионную среду и другие необходимые ингредиенты из перечисленных выше. В случае стерильных порошков для получения стерильных растворов для инъекций, некоторые подходящие способы получения включают вакуумную сушку и сушку с замораживанием с получением порошка, включающего активный ингредиент плюс любой дополнительный желаемый ингредиент, из содержащего их раствора, полученного ранее путем стерилизации фильтрованием.
В некоторых вариантах осуществления изобретение обеспечивает фармацевтическую композицию для чрескожной доставки, содержащую соединение по настоящему изобретению и фармацевтический эксципиент, подходящий для чрескожной доставки.
Композиции по настоящему изобретению могут быть сформулированы в препараты в твердой, полутвердой или жидкой форме, подходящие для локального или местного введения, например, гели, водорастворимые желе, кремы, лосьоны, суспензии, пены, порошки, взвеси, мази, растворы, масла, пасты, суппозитории, спреи, эмульсии, физиологические солевые растворы, растворы на основе диметилсульфоксида (ΌΜ8Θ). Как правило, носители с более высокой плотностью способны обеспечивать область пролонгированного воздействия активных ингредиентов. В отличие от этого, композиция раствора может обеспечить более быстрое воздействие активного ингредиента на выбранную область.
Фармацевтические композиции также могут включать подходящие носители или эксципиенты в твердой или гелевой фазе, которые представляют собой соединения, обеспечивающие лучшую пенетрацию или способствующие доставке терапевтических молекул через барьер рогового слоя кожи. Существует множество таких усиливающих пенетрацию молекул, известных специалистам в области составления композиций для местного применения. Примеры таких носителей и эксципиентов включают, но не ограничиваются этим, увлажнители (например, мочевина), гликоли (например, пропиленгликоль), спир
- 32 032196 ты (например, этанол), жирные кислоты (например, олеиновая кислота), поверхностно-активные вещества (например, изопропилмиристат и лаурилсульфат натрия), пирролидоны, глицеринмонолаурат, сульфоксиды, терпены (например, ментол), амины, амиды, алканы, алканолы, воду, карбонат кальция, фосфат кальция, различные сахара, крахмалы, производные целлюлозы, желатин и полимеры, такие как полиэтиленгликоли.
Еще одна иллюстративная лекарственная для использования в способах по настоящему изобретению предполагает использование устройств для чрескожной доставки (пластыри). Такие чрескожные пластыри можно использовать для обеспечения непрерывной или прерывистой инфузии соединения по настоящему изобретению в контролируемых количествах либо с использованием, либо без другого средства.
Конструкция и применение чрескожных пластырей для доставки фармацевтических средств хорошо известны в данной области техники. См., например, патенты США №№ 5023252, 4992445 и 5001139. Такие пластыри могут быть сконструированы для непрерывной, импульсной или по мере необходимости доставки фармацевтических средств.
Композиции для ингаляции или инсуффляции включают растворы и суспензии в фармацевтически приемлемых водных или органических растворителях или их смесях и порошки. Жидкие или твердые композиции могут содержать подходящие фармацевтически приемлемые эксципиенты, которые описаны выше. Предпочтительно композиции вводят пероральным или интраназальным путем для местного или системного эффекта. Композиции в предпочтительно фармацевтически приемлемых растворителях можно распылять с использованием инертных газов. Распыляемые растворы можно вдыхать непосредственно из распыляющего устройства, или распыляющее устройство может быть присоединено к дыхательной маске или к дыхательносу устройству с прерывистым положительным давлением. Композиции в виде растворов, суспензий или порошков можно вводить, предпочтительно перорально или назально, из устройств, которые доставляют лекарственный препарат подходящим образом.
Фармацевтнческне композиции также можно получить из композиций, описанных в настоящей заявке, и одного или нескольких фармацевтически приемлемых эксципиентов, подходящих для сублингвального, буккального, ректального, внутрикостного, внутриглазного, интраназального, эпидурального или интраспинального введения. Способы получения таких фармацевтических композиций хорошо известны в данной области. См., например, Лпбегкоп, РйШр О.; КпоЬеп, 1атек Е.; Тгои1тап, Убйат 6, ебк., НапбЬоок οί Сйшса1 Эгид Эа1а, Теп1й Ебйюп, МсСга^-НШ, 2002; Ргай апб Тау1ог, ебк., Ргшс1р1е8 οί Эгид Лсбоп, Тй1гб Ебйюп, СйигсйШ ЬМпдйоп, №\ν Уогк, 1990; Ка1/цпд, еб., Вале апб С11шса1 Рйагтасо1оду, Νίπΐΐι Ебйюп, МсСгач НШ, 20037уЬд; бообтап апб Сбтап, ебк., Тйе Рйагтасо1од1са1 Вал5 οί ТйегареиИск, Теп1й Ебйюп, МсСгач Н111, 2001; Кет1пд1оп§ Рйагтасеибса1 8с1епсе5, 20(й Еб., Ырршсой Убйатк & Убктк., 2000; Магйпба1е, Тйе Ех1га Рйагтасорое1а, ТЫг1у-8есопб Ебйюп (Тйе Рйагтасеибса1 Ргекк, Ьопбоп, 1999); которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки во всей их полноте.
Введение соединений или фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно осуществлять любым способом, который обеспечивает доставку соединений к месту действия. Эти способы включают пероральные пути, интрадуоденальные пути, парентеральную инъекцию (включая внутривенную, интраартериальную, подкожную, внутримышечную, интраваскулярную, интраперитонеальную или инфузию), местный путь (например, чрескожное введение), ректальное введение, местную доставку при помощи катетера или стента или путем ингаляции. Соединения также можно вводить интраадипозальным или интратекальным путем.
Количество вводимого соединения будет зависеть от субъекта, подлежащего лечению, тяжести расстройства или состояния, скорости введения, характера соединения и мнения лечащего вреча, прописывающего такое лечение. Однако эффективная доза находится в пределах от около 0,001 до около 100 мг на 1 кг массы тела в день, предпочтительно примерно от 1 до около 35 мг/кг/день в виде одной или дробных доз. Для человека с массой тела 70 кг это будет составлять примерно от 0,05 до 7 г/день, предпочтительно от около 0,05 до около 2,5 г/день. В некоторых случаях уровни доз меньше нижнего предела указанного диапазона могут быть более чем достаточными, тогда как в других случаях можно использовать еще более высокие дозы, не вызывая при этом каких-либо вредных побочных эффектов, например разделяя такие более высокие дозы на несколько небольших доз для введения в течение суток.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят в виде разовой дозы. Типично, такое введение осуществляют путем инъекции, например внутривенной инъекции, для быстрого введения средства. Однако можно использовать другие пути, известные из уровня техники или описанные в настоящей заявке, которые являются подходящими. Разовую дозу соединения по настоящему изобретению также можно использовать для лечения острого состояния.
В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят в виде нескольких доз. Введение можно осуществлять примерно один раз, два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз или больше чем шесть раз в день. Введение можно осуществлять примерно один раз в месяц, один раз в две недели, один раз в неделю или через день. В другом варианте осуществления соединение по настоящему изобретению и другое средство вводят вместе примерно от одного раза в день до примерно 6 раз в день. В другом варианте осуществления введение соединения по настоящему изобрете
- 33 032196 нию и другого средства продолжают в течение меньше чем примерно 7 дней. Еще в одном варианте осуществления введение осуществляют в течение больше чем примерно 6, 10, 14, 28 дней, два месяца, шесть месяцев или один год. В некоторых случаях непрерывное введение осуществляют и поддерживают так долго, как это необходимо.
Введение соединений по настоящему изобретению может продолжаться так долго, как это необходимо. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят в течение больше чем 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 14 или 28 дней. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят в течение меньше чем 28, 14, 7, 6, 5, 4, 3, 2 или 1 дня. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению вводят в течение длительного времени непрерывно, например, для лечения хронических эффектов.
Эффективное количество соединения по настоящему изобретению можно вводить в виде разовой или нескольких доз любым из принятых путей введения средств, имеющих подобные применения, включая ректальный, буккальный, трансназальный и чрескожный пути, при помощи интраартериальной инъекции, внутривенно, интраперитонеально, парентерально, внутримышечно, подкожно, перорально, местно или путем ингаляции.
Доставку композиций по настоящему изобретению также можно осуществлять через импрегнированное или имеющее покрытие устройство, такое как стент, например, или введенный в артерию цилиндрический полимер. Такой способ введения, например, может способствовать предотвращению или уменьшению рестеноза после процедур, таких как баллонная ангиопластика. Не связывая это с теорией, соединения по настоящему изобретению могут замедлять или ингибировать миграцию и пролиферацию клеток гладких мышц в стенке артерий, способствующие рестенозу. Соединение по настоящему изобретению можно вводить, например, путем местной доставки из каркаса стента, из стент-графта, из трансплантатов или из покрытия или оболочки стента. В некоторых вариантах осуществления соединение по настоящему изобретению смешивают с матрицей. Такая матрица может представлять собой полимерную матрицу и может служить для связывания соединения со стентом. Полимерные матрицы, подходящие для такого применения, включают, например, сложные полиэфиры или сложные сополиэфиры на основе лактонов, такие как полилактид, поликапролактонгликолид, сложные полиортоэфиры, полиангидриды, полиаминокислоты, полисахариды, полифосфазены, поли (простой эфир-сложный эфир) сополимеры (например, РЕО-РЬЬА); полидиметилсилоксан, поли(этилен-винилацетат), акрилатные полимеры или сополимеры (например, полигидроксиэтилметилметакрилат, поливинилпирролидинон), фторированные полимеры, такие как политетрафторэтилен, и сложные эфиры целлюлозы. Подходящие матрицы могут быть неразлагаемыми или могут разлагаться со временем, высвобождая соединение или соединения. Соединения по настоящему изобретению можно наносить на поверхность стента различными способами, такими как нанесение покрытия методом погружения/центрифугирования, нанесение покрытия распылением, нанесение покрытия путем окунания и/или нанесения покрытия при помощи щеточного устройства. Соединения можно наносить в растворителе, и растворителю можно дать возможность испариться, с образованием, таким образом, слоя соединения на стенте. Альтернативно, соединение может находиться в самом стенте или трансплантате, например в микроканалах или микропорах. После имплантации соединение диффундирует из стента для контактирования со стенкой артерии. Такие стенты можно получить путем погружения стента, изготовленного таким образом, чтобы он имел такие микропоры или микроканалы, в раствор соединения по настоящему изобретению в подходящем растворителе, с последующим выпариваним растворителя. Избыток лекарственного средства на поверхности стента можно удалить при помощи дополнительной быстрой промывки растворителем. В некоторых других вариантах осуществления соединения по настоящему изобретению могут быть ковалентно связаны со стентом или имплантатом. Можно использовать ковалентно связывающий агент, который разлагается ίη νίνο, приводя к высвобождению соединения по настоящему изобретению. Любую биолабильную связь можно использовать для таких целей, такую как сложноэфирная, амидная или ангидридная связь. Соединения по настоящему изобретению, кроме того, можно вводить интраваскулярно из баллона, используемого в процессе ангиопластики. Экстраваскулярное введение соединений через перикард или через периартериальное нанесение композиций по настоящему изобретению также можно осуществлять для уменьшения рестеноза.
Различные устройства для стентов, которые можно использовать, как описано выше, раскрыты, например, в следующих ссылочных документах, которые все включены в настоящую заявку посредством ссылки на патенты США №№ 5451233; 5040548; 5061273; 5496346; 5292331; 5674278; 3657744; 4739762; 5195984; 5292331;5674278;5879382;6344053.
Соединения по настоящему изобретению можно вводить дозированно. Из уровня техники известно, что из-за межсубъектной вариабельности фармакокинетики соединения необходима индивидуализация режима введения для оптимальной терапии. Режим введения для соединения по настоящему изобретению можно определить путем рутинного экспериментирования в свете настоящего раскрытия.
Когда соединение по настоящему изобретению вводят в композиции, которая включает одно или несколько средств, и входящее в композицию средство имеет более короткий период полужизни, чем у соединения по настоящему изобретению, стандартные дозы такого средства и соединения по настоящему
- 34 032196 изобретению можно скорректировать соответствующим образом.
Фармацевтическая композиция по настоящему изобретению может, например, быть в форме, подходящей для перорального введения, в виде таблетки, капсулы, пилюли, порошка, композиций замедленного высвобождения, раствора, суспензии, для парентеральной инъекции в виде стерильного раствора, суспензии или эмульсии, для местного введения в виде мази или крема или для ректального введения в виде суппозитория. Фармацевтическая композиция может быть представлена в стандартных лекарственнах формах, подходящих для разового введения точно определенных доз. Фармацевтическая композиция будет включать традиционный фармацевтический носитель или эксципиент и соединение в соответствии с изобретением в качестве активного ингредиента. Кроме того, она может включать другие медицинские или фармацевтические средства, носители, адъюванты и т.д.
Иллюстративные формы для парентерального введения включают растворы или суспензии активного соединения в стерильных водных растворах, например водных растворах пропиленгликоля или декстрозы. Такие лекарственные формы могут быть подходящим образом забуферены, если желательно. Примеры
В следующих далее примерах молекулы с одним хиральным центром, если не указано иное, существуют в виде рацемической смеси. Те молекулы, которые имеют два или больше хиральных центров, если не указано иное, существуют в виде рацемической смеси диастереомеров. Отдельные энантиомеры/диастереомеры можно получить способами, известными специалистам в данной области.
Пример 1. Синтез соединения (6-бензил-3-(пиридин-4-ил)-1,5,6,8-тетрагидро-7Н-пиразоло-[4,3-д]хиназолин-7-он)
3-Бром-5-метил-6-нитро-1Н-индазол (ЕХ 1-2).
К перемешиваемому раствору 5-метил-6-нитро-1Н-индазола (1,77 г, 10 ммоль) в 20 мл безводного ΌΜΕ при комнатной температуре добавляли ΝΒ8 (2,14 г, 12 ммоль) с последующим добавлением КОН (1,12 г, 20 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при этой же температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и насыщенным водным раствором ΝΗ·|ί.Ί. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (3,1 г) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
3-Бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол (ЕХ 1-3).
К перемешиваемому раствору 3-бром-5-метил-6-нитро-1Н-индазола (2,43 г, 9,5 ммоль) в 30 мл безводного ТНР при 0°С добавляли ΝαΗ (60% в минеральном масле, 0,76 г, 19 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 30 мин. Добавляли Тг1С1 (3,97 г, 14,25 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляли. Остаток растворяли в этилацетате и промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на системе Вю1аде (25 г картридж, 0-30% этилацетат в гексан) с получением желаемого продукта (4,5 г, 95% выход) в виде желтого твердого вещества.
5-Метил-6-нитро-3-(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол (ЕХ 1-4).
К раствору 3-бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (2,0 г, 4,0 ммоль) и пиридин-4илбороновой кислоты (736 мг, 6,0 ммоль) в 30 мл 4:1 смеси диоксана и воды при комнатной температуре добавляли РбС12 (брр!) (32 7 мг, 0,40 ммоль) и К2СО3 (1,10 г, 8,0 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом. Смесь фильтровали через слой целита и фильтрат промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали
- 35 032196 и концентрировали. Остаток очищали на системе ВюГаде (25 г картридж, 10-80% этилацетата в гексане) с получением желаемого продукта (1,12 г, 56% выход). Е§1-М§ т/ζ: 497 [М+Н]+.
Ы-Бензил-1 -(6-нитро-3 -(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метенамин (ЕХ 1-6).
К раствору 5-метил-6-нитро-3-(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазола (222 мг, 0,45 ммоль) и ΝΒδ (239 мг, 1,35 ммоль) в 10 мл СС14 при комнатной температуре добавляли ΑΙΒΝ (22 мг, 0,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 2 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры и затем добавляли бензиламин (1,64 мл, 15 ммоль). Полученную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 3 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом, промывали насыщенным водным раствором ИН4С1 и насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Μ§δϋ.·|. фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта (58 мг, 21% выход). ΕδΙ-Μδ т/ζ: 602 [М+Н]+.
5- ((Бензиламино)метил)-3-(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-амин (ЕХ 1-7).
К раствору №бензил-1-(6-нитро-3-(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метанамина (60 мг, 0,10 ммоль) в 3 мл 1:5 смеси АсОН/2-РгОН при комнатной температуре добавляли Ζη пыль (130 мг, 2,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта (36 мг, 63% выход). ΕδΙ-Μδ т/ζ: 572 [М+Н]+.
6- Бензил-3 -(пиридин-4-ил)-1-тритил-1,5,6,8-тетрагидро-7Н-пиразоло-[4,3-д] -хиназолин-7-он (ЕХ 18).
К раствору 5-((бензиламино)метил)-3-(пиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (24 мг, 0,04 ммоль) в 3 мл ЭСМ добавляли Εΐ3Ν (42 мкл, 0,24 ммоль) с последующим добавлением ί.ΌΙ (65 мг, 0,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ΕδΙ^δ т/ζ: 598 [М+Н]+.
6-Бензил-3-(пиридин-4-ил)-1,5,6,8-тетрагидро-7Н-пиразоло-[4,3-д]-хиназолин-7-он (1).
К раствору 6-бензил-3 -(пиридин-4-ил)-1 -тритил-1,5,6,8-тетрагидро-7Н-пиразоло [4,3-д] хиназолин-7она (неочищенный продукт, полученный на предыдущей стадии) в 4 мл ЭСМ добавляли 1 мл ТРА. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. Растворитель удаляли и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта (8 мг, 56% выход, 2 стадии).
Ή ЯМР (400 МГц, Ι)\1δΟ-ιΙ.) δ: 13,25 (шир., 1Н), 9,62 (с, 1Н), 8,63(дд, 1=1,4, 4,6 Гц, 1Н), 7,92-7,95 (м, 3Н), 7,29-7,37 (м, 5Н), 6,98 (с, 1Н), 4,60 (с, 2Н), 4,45 (с, 2Н). Е8БМ8 т/ζ: 356,0 [М+Н]+.
Пример 2. Синтез соединения ((В)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-(1-фенилэтил)-5,6-дигидро-1Нпиразоло-[4,3-д]-хиназолин-7(8Н)-он)
5-Бром-3-иод-6-нитро-1Н-индазол (ЕХ 2-2).
К перемешиваемой смеси 5-бром-6-нитро-1Н-индазола (3,5 г, 14,5 ммоль) в ОМЕ (50 мл) при комнатной температуре добавляли КОН (2,84 г, 50,6 ммоль, 3,5 экв.) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли ΝΙδ (3,58 г, 15,91 ммоль, 1,1 экв.). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Реакционную смесь
- 36 032196 выливали в воду (100 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл х3). Объединенные органические слои промывали при помощи Н2О (200 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (4,2 г, 79% выход) в виде желтого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
5-Бром-3-иод-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол (ЕХ 2-3). К перемешиваемой смеси 5-бром-3-иод-6нитро-1Н-индазола (1 г, 2,7 ммоль) в ТНР (10 мл) при комнатной температуре добавляли №Н (162 мг, 4,08 ммоль) и полученную реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин в атмосфере азота. К этой смеси добавляли Тй-С1 (912 мг, 3,27 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь выливали в воду (30 мл) и экстрагировали этилацетатом (80 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (5-20% этилацетата/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (1,6 г, 96% выход) в виде желтого твердого вещества.
5-Бром-3-иод-1-тритил-1Н-индазол-6-амин (ЕХ 2-4).
К перемешиваемой смеси 5-бром-3-иод-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (1,15 г, 1,89 ммоль) в НОАс/Н2О (16 мл/ 4 мл) при 60°С добавляли Ре порошок (530 мг, 9,46 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 6 ч, затем давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь фильтровали через силикагель и промывали этилацетатом (100 мл). Объединенный фильтрат экстрагировали этилацетатом (80 мл х3). Объединенный органический слой промывали при помощи Н2О (80 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (750 мг, 69% выход) в виде желтого твердого вещества. Полученный неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
№(5-Бром-3-иод-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамид (ЕХ 2-5).
К перемешиваемой смеси 5-бром-3-иод-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (346 мг, 0,6 ммоль) в ЭСМ (10 мл) при 0°С добавляли ЕЦИ (91 мг, 0,9 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин, затем добавляли по каплям раствор ацетилхлорида (61 мг, 0,78 ммоль) в ЭСМ (5 мл). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали при помощи ЭСМ (50 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (350 мг, 95% выход) в виде желтого твердого вещества. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
N-(5-Бром-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамид (ЕХ 2-6).
К смеси N-(5-бром-3-иод-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамида (173 мг, 0,278 ммоль) и 2метилпиридин-4-илбороновой кислоты (42 мг, 0,306 ммоль) в 1,4-диоксане/Н2О (8 мл/2 мл) добавляли последовательно Ράί’ΡάρρΓ (31 мг, 0,042 ммоль) и К3РО4-3Н2О (222 мг, 0,834 ммоль). Полученную смесь дегазировали и снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 85°С в течение 4 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (60 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (60 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (10-40% этилацетата/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (46 мг, 35% выход) в виде белого твердого вещества.
Ν-(3 -(2-Метилпиридин-4-ил)-1-тритил-5-винил-1Н-индазол-6-ил)ацетамид (ЕХ 2-7).
К смеси N-(5-бром-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамида (46 мг, 0,0785 ммоль) и Ρά(ΡΡ1ι3).·ι (18 мг, 0,016 ммоль) в толуоле (6 мл) добавляли трибутил(винил)олово (30 мг, 0,094 ммоль). Полученную смесь дегазировали и снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 115°С в течение 4 ч. Реакционной смеси давали охладиться до комнатной температуры, выливали в воду (20 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (60 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (60 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (20-50% этилацетата/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (30 мг, 90% выход) в виде белого твердого вещества.
№(5-Формил-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1 -тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамид (ЕХ 2-8).
К перемешиваемой смеси N-(3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-5-винил-1Н-индазол-6-ил)ацетамида (28 мг, 0,0524 ммоль) в ТНР (4 мл) и Н2О (1 мл) при 0°С добавляли тетроксид осмия (5 мг) и полученную смесь перемешивали при 0°С в течение 1 ч. К этой смеси добавляли периодат натрия (56 мг, 0,262 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (50 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (30-60%
- 37 032196 этилацетата/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (20 мг, 80% выход) в виде белого твердого вещества.
(К)-Ы-(3-(2-Метилпиридин-4-ил)-5-((1-фенилэтиламино)метил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамид (ЕХ 2-9).
Смесь Ы-(5-формил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)ацетамида (84 мг, 0,157 ммоль) и (К)-1-фенилэтанамина (21 мг, 0,172 ммоль) в Ε1ΘΗ перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 3 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры и затем добавляли ЫаВН4 (12 мг, 0,31 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (40 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (40 мл х3), сушили над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (80 мг, 65% выход) в виде белого твердого вещества. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
(Е)-3-(2-Метилпиридин-4-ил)-5-((1-фенилэтиламино)метил)-1Н-индазол-6-амин (ЕХ 2-10).
Смесь (К)-Ы-(3-(2-метилпиридин-4-ил)-5-((1-фенилэтиламино)метил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил) ацетамида (40 мг, 0,062 ммоль) в 6н. НС1 (5 мл) перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 ч. Смеси давали охладиться до 0°С, добавляли К2СО3 для доведения рН до 9. Смесь экстрагировали этилацетатом (40 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (40 мл х3), сушили над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (30 мг, 85% выход) в виде белого твердого вещества. Полученный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
(К)-3-(2-Метилпиридин-4-ил)-6-(1-фенилэтил)-5,6-дигидро-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он (2).
К смеси (К)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-5-((1-фенилэтиламино)метил)-1Н-индазол-6-амина (30 мг, 0,084 ммоль) в ТНЕ (5 мл) добавляли СБ1 (21 мг, 0,12 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 70°С в течение 5 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, выливали в воду (10 мл) и экстрагировали этилацетатом (30 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным №ь8О4. фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (2-10% МеОН/БСМ) с получением желаемого продукта (10 мг, 31% выход) в виде белого твердого вещества.
'|| ЯМР (300 МГц, БМ8О-б6) δ: 13,25 (с, 1Н), 9,57 (с, 1Н), 8,48(д, 1=5,4 Гц, 1Н), 7,95 (с, 1Н), 7,78 (с, 1Н), 7,73 (д, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,38 (м, 4Н), 7,28 (м, 1Н), 6,97 (с, 1Н), 5,76 (м, 1Н), 4,56 (д, 1=4,7 Гц, 1Н), 4,01 (д, 1=4,9Гц, 1Н), 2,54 (с, 3Н), 1,57 (д, 1=7,2 Гц, 3Н). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 384,3 [М+Н]+.
Пример 3. Синтез 6-(4-фторбензил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-пиразоло[4,3д] хиназолин-7 (8Н)-она.
Х-((3-Бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(4-фторфенил)метанамин.
К раствору 3-бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (500 мг, 1,0 ммоль) и ΝΒ8 (268 мг, 1,5 ммоль) в 10 мл СС14 при комнатной температуре добавляли ΑΙΒΝ (98 мг, 0,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и твердое вещество удаляли фильтрованием. Добавляли (4-фторфенил)метанамин (500 мг, 4,0 ммоль) и 1 мл БМЕ. Полученную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом, промывали насыщенным водным раствором Ν^Ο и насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 15% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта (280 мг, 45% выход). Е81-М8 т/ζ: 621.
5- ((4-Фторбензиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амин.
К раствору №((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(4-фторфенил)метанамина (280 мг, 0,45 ммоль) в 6 мл 1:5 смеси АсОН/2-РгОН добавляли Ζη пыль (587 мг, 9,0 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате и промывали водой. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением неочищенного желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (230 мг). Е81-М8 т/ζ: 591.
6- (4-Фторбензил)-3 -бром-5,6-дигидро-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он.
К раствору 5-((4-фторбензиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (230 мг, 0,39 ммоль) в 6 мл БСМ добавляли Εΐ3Ν (433 мг, 4,3 ммоль) с последующим добавлением СБ1 (316 мг, 1,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (элюировали при помощи 40% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта (180 мг, 75% выход от 2 стадий). Ε8ΙМ8 т/ζ: 611.
6-(4-Фторбензил)-5,6-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин7(8Н)-он.
- 38 032196
К раствору 6-(4-фторбензил)-3-бром-5,6-дигидро-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д] хиназолин-7(8Н )-она (135 мг, 0,22 ммоль) и пиридин-4-илбороновой кислоты (60 мг, 0,44 ммоль) в 11 мл 10:1 смеси диоксана и воды при комнатной температуре добавляли РбС12(бррГ) (16 мг, 0,02 ммоль) и К2СО3 (91 мг, 0,66 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 40% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта (22 мг, 16% выход). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 630.
6-(4-Фторбензил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он.
К раствору 6-(4-фторбензил)-5,6-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д] хиназолин-7(8Н)-она (22 мг, 0,03 ммоль) в 3 мл ЭСМ добавляли 3 мл ТЕЛ и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли и добавляли НН3.МеОН для доведения рН>8,0. Полученную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 7% МеОН в ЭСМ) с получением желаемого продукта (3 мг, 22% выход).
1Н ЯМР (400 МГц, ОМ8О-б6) δ: 13,21 (шир., 1Н), 9,62 (с, 1Н), 8,50 (д, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,96 (с, 1Н), 7,80 (с, 1Н), 7,74 (д, 1=4,4 Гц, 1Н), 7,41 (дд, 1=5,6, 8,0 Гц, 2Н), 7,22 (т, 1=8,8 Гц, 2Н), 6,97 (с, 1Н), 4,58 (с, 2Н), 4,45 (с, 2Н), 2,55 (с, 3Н). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 388.
Пример 4. Синтез 5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-((тиазол-4-ил)метил)-1Н-пиразоло[4,3д]хиназолин-7(8Н)-она.
2-((3-Бром-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)изоиндолин-1,3-дион.
К раствору 3-бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (4,0 г, 8,0 ммоль) и ΝΒ8 (2,14 мг, 12,0 ммоль) в 40 мл СС14 при комнатной температуре добавляли ΑΙΒΝ (787 мг, 4,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и твердое вещество удаляли фильтрованием. Растворитель удаляли в условиях вакуума и добавляли н-калий фталимид (4,44 г, 24 ммоль) и 40 мл ΌΜΡ. Полученную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом, промывали водой и насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 15% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта (2,3 г, 45% выход). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 645.
(3 -Бром-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метанамин.
К раствору 2-((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)изоиндолин-1,3-диона (300 мг, 0,47 ммоль) в метаноле (6 мл) добавляли гидрат гидразина (233 мг, 4,7 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 70°С в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и твердое вещество удаляли фильтрованием. Фильтрат концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 50% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта (140 мг, 58% выход). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 515.
Н-((3-Бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(тиазол-4-ил)метанамин.
К смеси (3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метанамина (380 мг, 0,74 ммоль) и тиазол-4карбальдегида (84 мг, 0,74 ммоль) добавляли 3 капли уксусной кислоты и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. К реакционной смеси добавляли цианоборогидрид натрия (93 мг, 1,48 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 25% этилацетата в дихлорметане) с получением желаемого продукта (177 мг, 32% выход). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 612.
5-(((Тиазол-4-ил)метиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амин.
К раствору Н-((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(тиазол-4-ил)метанамина (177 мг, 0,29 ммоль) в 12 мл 1:5 смеси АсОН/2-РгОН добавляли Ζη пыль (378 мг, 5,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток растворяли в этилацетате, затем промывали водой. Органическую фазу собирали, промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого неочищенного продукта в виде желтого твердого вещества (158 мг). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 582.
5-(((Тиазол-4-ил)метиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амин.
К раствору 5-(((тиазол-4-ил)метиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (158 мг, 0,27 ммоль) в 8 мл ЭСМ добавляли Εΐ3Ν (303 мг, 43,0 ммоль) с последующим добавлением ΕΩΙ (221 мг, 1,36 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (элюировали при помощи 4% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (65 мг, 39% выход от 2 стадий). Ε8Ι-Μ8 т/ζ: 606.
5,6-Дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-((тиазол-4-ил)метил)-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин7(8Н)-он.
- 39 032196
К раствору 5-(((тиазол-4-ил)метиламино)метил)-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (65 мг, 0,11 ммоль) и пиридин-4-илбороновой кислоты (29 мг, 0,21 ммоль) в 11 мл 10:1 смеси диоксана и воды при комнатной температуре добавляли РбС12(брр1) (23 мг, 0,03 ммоль) и К2СО3 (45 мг, 0,33 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 2,5% дихлорметана в метаноле) с получением желаемого продукта (38 мг, 57% выход). Е8ГМ8 т/ζ: 630.
5.6- Дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-((тиазол-4-ил)метил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)он.
К раствору 5,6-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-6-((тиазол-4-ил)метил)-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3 д]хиназолин-7(8Н)-она (38 мг, 0,06 ммоль) в 3 мл ЭСМ добавляли 3 мл ТЕЛ и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли и добавляли ИЩ-МеОН для доведения рН>8,0. Полученную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 7% МеОН в ЭСМ) с получением желаемого продукта (15 мг, 64% выход).
1Н ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б6) δ: 13,24 (шир., 1Н), 9,60 (с, 1Н), 9,10 (д, 1=1,6 Гц, 1Н), 8,51(д, 1= 5,6 Гц, 1Н), 7,99 (с, 1Н), 7,82 (с, 1Н), 7,76(с, 1Н), 7,57(с, 1Н), 6,69 (с, 1Н), 4,72 (с, 2Н), 4,60 (с, 2Н), 2,56 (с, 3Н). Е8ЕМ8 тт%376.
Пример 5. 5,6-Дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6-((К)-1-((тиофен-2-ил)метил)пиперидин-3ил)-1Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он.
3-Бром-5-(бромметил)-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол.
Смесь 3-бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (2 г, 4 ммоль), ΝΒ8 (1 г, 5,6 ммоль) и ΛΓΒΝ (400 мг, 2,4 ммоль) в 40 мл СС14 перемешивали при 80°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (2,5 г) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
(К)-трет-Бутил 3 -((3 -бром-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метиламино)пиперидин-1-карбоксилат.
Смесь 3-бром-5-(бромметил)-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (2,5 г, 4,3 ммоль) и (К)-трет-бутил 3аминопиперидин-1-карбоксилата (2,5 г, 12,9 ммоль) в 30 мл ТНЕ перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (020% ЕА в РЕ) с получением желаемого продукта (860 мг, 47,8% выход) в виде оранжевого масла.
(К)-трет-Бутил 3 -((6-амино-3 -бром-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метиламино)пиперидин-1-карбоксилат.
Смесь 3-((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метиламино)пиперидин-1-карбоксилата (860 мг, 1,23 ммоль) в 10 мл 4:1 смеси НОАс и ГРЛ при 60°С перемешивали в течение 1 ч. К этой смеси добавляли Ζπ (1,6 г, 24,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом. Смесь фильтровали через слой целита и фильтрат промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и остаток концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (668 мг, 81% выход). Е8ЕМ8 т^:668.
(К)-трет-Бутил 3-(3-бром-7,8-дигидро-7-оксо-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-6(5Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилат.
Смесь (К)-трет-бутил 3 -((6-амино-3 -бром-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метиламино)пиперидин-1карбоксилата (668 мг, 1 ммоль), СТО (890 мг, 5,5 ммоль) и Εΐ3Ν (1,1 г, 11 ммоль) в 10 мл ЭСМ перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с диоксидом кремния (0-30% ЕА в РЕ) с получением желаемого продукта (400 мг, 58% выход) в виде желтого твердого вещества. Ε8ΣМ8 т/ζ: 692.
(К)-трет-Бутил 3 -(7,8-дигидро-3 -(2-метоксипиримидин-5-ил)-7-оксо-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3д]хиназолин-6(5Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилат.
Смесь (К)-трет-бутил 3 -(3-бром-7,8-дигидро-7-оксо-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин-6(5Н)ил)пиперидин-1-карбоксилата (400 мг, 0,56 ммоль), 2-метоксипиримидин-5-ил-5-бороновой кислоты (250 мг, 1,65 ммоль), Рб(брр1)С12 (81 мг, 0,1 ммоль) и К2СО3 (138 мг, 1 ммоль) в 18 мл 1:5 Н2О/диоксан перемешивали при 100°С в течение 16 ч. Растворитель удаляли и остаток поглощали этилацетатом, промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (0-50% ЕА в РЕ) с получением желаемого продукта (270 мг, 75% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.Ε8I-М8 т/ζ: 722.
5.6- Дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6-((К)-пиперидин-3-ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин7(8Н)-он.
Смесь (К)-трет-бутил 3 -(7,8-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-7-оксо-1 -тритил-1Н-пиразоло
- 40 032196 [4,3-д]хиназолин-6(5Н)-ил)пиперидин-1-карбоксилата (270 мг, 0,37 ммоль) и 3 мл ТЕА и 7 мл ЭСМ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-20% МеОН в ЭСМ) с получением желаемого продукта (130 мг, 92,8% выход) в виде белого твердого вещества. Е81-М8 т/ζ: 380.
5,6-Дигидро-3 -(2-метоксипиримидин-5-ил)-6-((К)-1-((тиофен-2-ил)метил)пиперидин-3-ил)-1Нпиразоло [4,3 -д] хиназолин-7 (8Н)-он.
Смесь 5,6-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-6-((К)-пиперидин-3-ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-она (130 мг, 0,34 ммоль) и тиофен-2-карбальдегида (307 мг, 2,74 ммоль) в 70 мл 8:1 смеси НОАс и МеОН перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли NаΒНзСN(55 мг, 0,86 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-10% МеОН в ЭСМ) с получением желаемого продукта (110 мг, 67,5% выход) в виде светло-желтого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, ОМ8О-с16) δ: 13,05 (с, 1Н), 9,45 (с, 1Н), 9,14 (с, 2Н), 7,94 (с, 1Н), 7,42-7,41 (м, 1Н), 6,96-6,91 (м, 3Н), 4,5494,37 (м, 2Н), 4,30-4,23 (м, 1Н), 4,00 (с, 3Н), 3,72-3,71 (м, 2Н), 2,86-2,27 (м, 2Н), 2,19-2,14 (м, 1Н), 1,91-1,87 (м, 1Н), 1,75-1,50 (м, 4Н). Е81-М8 т/ζ: 476.
Пример 6. Синтез 3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-(1-фенилэтил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она.
6-Амино-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-5-карбальдегид.
К перемешиваемому раствору N-(5-формил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6ил)ацетамида (16,0 г, 28 ммоль) в 200 мл безводного МеОН при 0°С добавляли по каплям 8ОС12 (12 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли. Остаток разбавляли этилацетатом и промывали насыщенным водным раствором NаНСОз. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (15 г) в виде коричневого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
№(5-Формил-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1 -тритил-1Н-индазол-6-ил)-3-фенилбутанамид.
К перемешиваемому раствору 6-амино-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-5-карбальдегида (1,5 г, 3,1 ммоль) в 20 мл безводного ЭСМ при 0°С добавляли ТЕА (1,5 г, 13,7 ммоль) с последующим медленным добавлением 3-фенилбутаноилхлорида (1,6 г, 9,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 4 ч. Растворитель удаляли, остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЭСМ/МеОН=25:1) с получением желаемого продукта (2,0 г, 95% выход) в виде желтого твердого вещества.
3-(2-Метилпиридин-4-ил)-6-(1-фенилэтил)-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-он.
Условие 1. К раствору N-(5-формил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)-3фенилбутанамида (2,0 г, 3,1 ммоль) в 60 мл ТНЕ при комнатной температуре добавляли КОН (700 мг, 12,5 ммоль) и 1 мл ЕЮН. Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:2) с получением желаемого продукта (50 мг, 3% выход). Е81-М8 т/ζ: 623.
Условие 2. К раствору N-(5-формил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)-3фенилбутанамида (7,0 г, 10,9 ммоль) в 200 мл МеОН добавляли МеО№ (5,5 г, 100 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:2) с получением желаемого продукта (1,3 г, 18% выход). Е81-М8 т/ζ: 623.
3-(2-Метилпиридин-4-ил)-6-(1 -фенилэтил)-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7(8Н)-он.
К раствору 3 -(2-метилпиридин-4-ил)-6-( 1-фенилэтил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7(8Н)она (1,3 г, 2,0 ммоль) в 4 мл ЭСМ добавляли 4 мл ТЕА. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток гасили при помощи 7М ХН3.МеОН. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ОСМ/МеОН=20:1) с получением желаемого продукта (500 мг, 66% выход).
Ή ЯМР (400 МГц, ОМ8О-с16) δ: 13,44 (шир., 1Н), 11,67 (с, 1Н), 8,62 (с, 1Н), 8,56 (д, 1=5,2 Гц, 1Н), 8,01 (с, 1Н), 7,93 (с, 1Н), 7,86 (д, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,38 (с, 1Н), 7,15-7,35 (м, 5Н), 4,38 (кв., 1=7,2 Гц, 1Н), 2,61 (с, 3Н), 1,56 (кв., 1 =7,2 Гц, 3Н). Е81-М8 т/ζ: 381.
Пример 7. Синтез 3-(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3-ил)-6-(1-фенилэтил)-1Н-пиразоло[4,3д]хинолин-7(8Н)-она.
(3 -Бром-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метилацетат.
К перемешиваемому раствору 3-бром-5-(бромметил)-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (500 мг, 1 ммоль, неочищенный) в 10 мл безводного ОМЕ добавляли АсОК (700 мг, 7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь распределяли между ЕА и Н2О. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на
- 41 032196 силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:6) с получением желаемого продукта (250 мг, 50% выход) в виде желтого твердого вещества.
(6-Амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метилацетат.
К перемешиваемому раствору (3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метилацетата (500 мг, 1 ммоль) в 10 мл ЕЮН добавляли Ыа282О4 (1,7 г, 10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 10 ч. Растворитель удаляли и остаток распределяли между ЕА и Н2О. Органический слой концентрировали в вакууме с получением продукта (350 мг, 70% выход) в виде желтого твердого вещества без дополнительной очистки.
(6-Амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метанол.
К раствору (6-амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метилацетата (350 мг, 0,65 ммоль) в смеси ТНЕ/ЕЮН/Н2О (6,0 мл, 1:1:1) при комнатной температуре добавляли ЫОН (109 мг, 2,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 8 ч. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:3) с получением продукта (130 мг, 50% выход) в виде желтого твердого вещества.
6-Амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-карбальдегид.
К перемешиваемому раствору (6-амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метанола (130 мг, 0,27 ммоль) в 10 мл Ό0Μ добавляли МпО2(480 мг, 5,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме с получением продукта (100 мг, 70% выход) в виде желтого твердого вещества без дополнительной очистки.
3-Бром-6-( 1-фенилэтил)-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д] хинолин-7(8Н )-он.
К раствору М-(3-бром-5-формил-1-тритил-1Н-индазол-6-ил)-3-фенилбутанамида (2,0 г, 3,2 ммоль) в 40 мл МеОН добавляли МеОЫа (1,73 г, 32 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:5) с получением желаемого продукта (300 мг, 15% выход). Выделяли некоторое количество исходного вещества (около 1,0 г). Е81-М8 т/ζ: 612.
3-(6-(4-Метилпиперазин-1 -ил)пиридин-3 -ил)-6-(1-фенилэтил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д] хинолин7(8Н)-он.
Смесь 3-бром-6-(1-фенилэтил)-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (200 мг, 0,33 ммоль), К2СОз (100 мг, 0,72 ммоль) и 1-метилпиперазина (0,5 мл) в 2 мл ЭМ8О перемешивали при 100°С в герметично закрытой пробирке в течение 10 ч. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЕА/РЕ=1:2) с получением желаемого продукта (70 мг, 30% выход). Е81М8 т/ζ: 707.
3-(6-(4-Метилпиперазин-1 -ил)пиридин-3 -ил)-6-(1-фенилэтил)-1Н-пиразоло [4,3-д] хинолин-7 (8Н)-он.
К раствору 3 -(6-(4-метилпиперазин-1-ил)пиридин-3 -ил)-6-(1-фенилэтил)-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (70 мг, 0,1 ммоль) в 2 мл ЭСМ добавляли 2 мл ТЕЛ. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток гасили при помощи 7М №Н3.МеОН. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи ЭСМ/МеОН=20:1) с получением желаемого продукта (10 мг, 66% выход).
Ή ЯМР (400 МГц, ПМЗО-ф) δ: 13,02 (шир., 1Н), 11,59 (шир., 1Н), 8,82 (д, 1=2,0 Гц, 1Н), 8,47 (с, 1Н), 8,56 (дд, 1=8,8, 2,0 Гц, 1Н), 7,99 (с, 1Н), 7,29 (м, 5Н), 7,18 (м, 1Н), 6,98 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 4,37 (кв., 1=7,2 Гц, 1Н) , 3,60 (м, 4Н), 2,51 (м, 3Н), 2,46 (м, 4Н), 1,54 (д, 1=7,2 Гц, 3Н). Е81-М8 т/ζ: 465.
Пример 8. Синтез 6-(4-трет-бутил-1-(2,2,2-трифторэтил)пирролидин-3-ил)-5,6-дигидро-3-(2метилпиридин-4-ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-она.
3,3-Диметил-1 -нитробутан-2-ол.
К смеси пивалальдегида (10 г, 116 ммоль) и нитрометана (7,1 мг, 116 ммоль) в 150 мл метанола на ледяной бане медленно добавляли водный раствор гидроксида натрия (4,88 г, 122 ммоль, 88 мл Н2О) и температуре давали повыситься медленно до комнатной температуры. Смесь перемешивали в течение 1 ч. Растворитель удаляли, остаток растворяли в воде и этилацетате. Смесь промывали раствором карбоната натрия. Органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта в виде желтого масла (14 г, 82% выход). Е81М8 т/ζ: 148.
(Е)-3,3-Диметил-1-нитробут-1 -ен.
К раствору 3,3-диметил-1-нитробутан-2-ола (4,0 г, 27 ммоль) в 20 мл дихлорметана при 0°С медленно добавляли трифторуксусный ангидрид (3,5 г, 16,5 ммоль), с последующим добавлением триэтиламина и температуре давали медленно повыситься до комнатной температуры. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой силикагеля и промывали дихлорметаном. Фильтрат концентрировали (без нагревания) в вакууме с получением желтого масла. Это масло поглощали в 20% раствор бензина в эфире, фильтровали через слой силикагеля и промывали 20% петролейным эфиром. Фильтрат концентрировали (без нагревания) в вакууме с получением
- 42 032196 продукта в виде желтого масла (3 г неочищенного продукта). Е8БМ8 т/ζ: 130.
3- трет-Бутил-1-бензил-4-нитропирролидин.
К смеси (Е)-3,3-диметил-1-нитробут-1-ена (3,5 г, 27 ммоль) и ТЕЛ (307 мг, 2,7 ммоль) в 300 мл дихлорметана медленно добавляли №(метоксиметил)-№((триметилсилил)метил)(фенил)метанамин (7,7 г, 32 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение уикенда. Растворитель удаляли и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 22,5% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта в виде желтого масла (2,3 г, 32% выход). Е8ЕМ8 т/ζ: 263.
4- трет-Бутил-1 -бензилпирролидин-3 -амин.
К смеси 3-трет-бутил-1-бензил-4-нитропирролидина (1,2 г, 4,6 ммоль) в 20 мл метанола при 0°С добавляли N1 Ренея (1 г) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме с получением продукта в виде желтого масла (2,3 г, 32% выход). Е8ЕМ8 т/ζ: 233.
4- трет-Бутил-1-бензил-№((3 -бром-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)пирролидин-3 -амин синтезировали в соответствии с общей схемой Ό.
5- ((4-трет-Бутил-1-бензилпирролидин-3 -иламино)метил)-3-бром-1 -тритил-1Н-индазол-6-амин синтезировали в соответствии с общей схемой Ό.
6- (4-трет-Бутил-1-бензилпирролидин-3 -ил)-3 -бром-5,6-дигидро-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д] хиназолин-7(8Н)-он синтезировали в соответствии с общей схемой Ό.
6-(4-трет-Бутил-1-бензилпирролидин-3 -ил)-5,6-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Нпиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он синтезировали в соответствии с общей схемой Ό.
трет-Бутил 3-трет-бутил-4-(7,8-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-7-оксо-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3д]хиназолин-6(5Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилат.
Смесь 6-(4-трет-бутил-1 -бензилпирролидин-3-ил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-она (200 мг, 0,27 ммоль), (Вос)2О (190 мг, 0,81 ммоль) и 10% Рб(ОН)2/С (50 мг) в 20 мл этилацетата перемешивали в атмосфере Н2 при комнатной температуре в течение ночи. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 50% этилацетата в петролейном эфире) с получением желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (60 мг, 30% выход). Е8ЕМ8 т/ζ: 747.
6-(4-трет-Бутилпирролидин-3-ил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3д]хиназолин-7(8Н)-он.
Раствор трет-бутил 3 -трет-бутил-4-(7,8-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-7-оксо-1 -тритил-1Нпиразоло[4,3-д]хиназолин-6(5Н)-ил)пирролидин-1-карбоксилата (60 мг, 0,08 ммоль) в АсОН/МеОН (1:4, 6 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 1,5 ч. К этой смеси добавляли NΗз·ΜеОΗ для доведения рН до >8,0. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 8% NΗз·ΜеОΗ в дихлорметане) с получением желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (30 мг, 58% выход). Е8ЕМ8 т/ζ: 647.
6-(4-трет-Бутил-1 -(2,2,2-трифторэтил)пирролидин-3 -ил)-5,6-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он.
К раствору 6-(4-трет-бутилпирролидин-3-ил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Нпиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-она (30 мг, 0,05 ммоль) в ОМЕ добавляли 2,2,2-трифторэтилтрифторметансульфонат (22 мг, 0,09 ммоль) с последующим добавлением Юэтил-Юизопропилпропан-2-амина (24 мг, 0,18 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь распределяли между водой и этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором, сушили над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (элюировали при помощи 5% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (30 мг, 89% выход). Е8ЕМ8 т/ζ: 729.
6-(4-трет-Бутил-1-(2,2,2-трифторэтил)пирролидин-3-ил)-5,6-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Нпиразоло[4,3-д]хиназолин-7(8Н)-он синтезировали в соответствии с общей схемой Ό (10 мг, 50% выход).
Ή ЯМР (400 МГц, 1)М8О-с1.6) δ: 13,22 (шир., 1Н), 9,47 (с, 1Н), 8,54 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 8,03 (с, 1Н), 7,84 (с, 1Н), 7,79(д, 1=5,2 Гц, 1Н), 6,96 (с, 1Н), 4,91 (м, 2Н), 4,65 (д, 1=12,3 МГц, 1Н), 4,51 (д, 1=12,3 Гц, 1Н), 3,34 (м, 1Н), 3,20 (м, 1Н), 3,02 (м, 1Н), 2,91 (м, 1Н), 2,73 (м, 1Н), 2,58 (с, 3Н), 0,85 (с, 9Н). Е8ЕМ8 т/ζ: 487.
Пример 9. Синтез 6-(3-хлорбензил)-6,7-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-[1,4]диазепино[6,5!]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она.
3-Бром-5-(бромметил)-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол.
К перемешиваемому раствору 3-бром-5-метил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (5,0 г, 10 ммоль) в 150 мл СС14 добавляли ΝΒ8 (2,7 г, 15 ммоль) и ΛΕΝ (1,0 г, 6,0 ммоль). Смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток использовали на сле
- 43 032196 дующей стадии без дополнительной очистки.
№((3-Бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(3-хлорфенил)метанамин.
Смесь 3-бром-5-(бромметил)-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (4,0 г, 8 ммоль), (3хлорфенил)метанамина (7,0 г, 50 ммоль) и ТЕА (5,0 г, 50 ммоль) в 150 мл СС14 перемешивали при 70°С в течение 3 ч. Смесь промывали водой и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (0-2% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (1,6 г, 25% выход) в виде желтого твердого вещества. Е81-М8 т/ζ: 639.
Этил 2-(№(3-хлорбензил)-И-((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)амино)ацетат.
Смесь №((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)(3-хлорфенил)метанамина (1,6 г, 2,5 ммоль) и №1ОН (150 мг, 3,7 6 ммоль) в 10 мл ОМЕ перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К смеси добавляли этил 2-бромацетат (630 мг, 3,76 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 3 ч. Смесь охлаждали, выливали в воду и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл х3). Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-1% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (1,2 г, 67% выход). Е81-М8 ιη/ζ:725.
6-(3-Хлорбензил)-3-бром-6,7-дигидро-1-тритил-[1,4]диазепино[6,5-Г]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-он.
К раствору этил 2-(Ы-(3-хлорбензил)-Н-((3-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)метил)амино) ацетата (1,1 г, 1,52 ммоль) в АсОН/1-РгОН (20 мл/4 мл) при 60°С добавляли 2п (2,0 г, 30,3 ммоль) и полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 5 ч. Смесь концентрировали в вакууме. Остаток разбавляли при помощи ЕА и промывали насыщенным раствором NаНСО3. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-2% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (910 мг, 93% выход). Е81-М8 т/ζ: 649.
6-(3-Хлорбензил)-6,7-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-1-тритил-[1,4]диазепино[6,5Г]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-он.
Смесь 6-(3-хлорбензил)-3-бром-6,7-дигидро-1-тритил-[1,4]диазепино[6,5-Г]индазол-8(1Н,5Н,9Н)она (400 мг, 0,62 ммоль), 2-метоксипиримидин-5-ил-5-бороновой кислоты (240 мг, 1,54 ммоль), Рб(бррГ)С12 и К2СО3 в диоксане/Н2О (15 мл/1,5 мл) перемешивали при 90°С в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-1% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (320 мг, 76% выход). Е81-М8 т/ζ: 677.
6-(3-Хлорбензил)-6,7-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-[1,4]диазепино[6,5-Г]индазол8(1Н,5Н,9Н)-он.
К раствору 6-(3-хлорбензил)-6,7-дигидро-3 -(2-метоксипиримидин-5-ил)-1-тритил-[1,4] диазепино[6,5-Г]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она (100 мг, 0,147 ммоль) в 3 мл ЭСМ добавляли ТЕА (6 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали в вакууме, разбавляли при помощи №Н3 в метаноле. Смесь концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-10% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (25 мг, 39% выход).
Ή ЯМР (400 МГц, ЭМ8О-б6) δ: 13,34 (с, 1Н), 10,25 (с, 1Н), 9,21 (м, 2Н), 8,09 (с, 1Н), 7,34-7,41 (м, 4Н), 7,23 (с, 1Н), 4,00 (с, 3Н), 3,83 (с, 2Н), 3,75 (с, 2Н), 3,12 (с, 2Н). Е81-М8 т/ζ: 435.
Пример 10. Синтез 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-[1,3]диазепино[5,4Г]индазол-8 (1Н,5Н,9Н)-она.
5- Бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол.
К перемешиваемому раствору 5-бром-6-нитро-1Н-индазола (5 г, 20,7 ммоль) в 60 мл безводного ТНЕ при 0°С добавляли NаН (60% в минеральном масле, 1,16 г, 29 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при этой же температуре в течение 30 мин. К смеси добавляли Тг!С1 (6,92 г, 24,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Растворитель удаляли. Остаток растворяли в этилацетате и промывали насыщенным солевым раствором. Органический раствор сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением желаемого продукта (9 г, 90% выход) в виде желтого твердого вещества.
6- Нитро-1 -тритил-5-винил-1Н-индазол.
К смеси 5-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (9 г, 18,6 ммоль) и Рб(рр13)4 (2,15 г, 1,86 ммоль) в толуоле (60 мл) добавляли трибутил(винил)олово (7 г, 22,32 ммоль). Полученную смесь дегазировали и снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 115°С в течение 4 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры. Раствор выливали в воду (100 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (300 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над №28О4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с получением желаемого продукта 6-нитро-1-тритил-5-винил-1Н-индазола (6,8 г, 85% выход) в виде белого твердого вещества.
2-(6-Нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)этанол.
К перемешиваемому раствору 6-нитро-1-тритил-5-винил-1Н-индазола (6,8 г, 15,77 ммоль) в 60 мл безводного ТНЕ при 0°С медленно добавляли ВН3-ТНЕ (1н. раствор, 47,33 мл, 47,33 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. К этой смеси медленно добавляли №ОН (3н. раствор, 15,77 мл, 47,33 ммоль) и Н2О2 (4,94 г, 47,33 ммоль, 30%) и полученную смесь пере
- 44 032196 мешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Раствор выливали в воду (100 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле с получением желаемого продукта 2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)этанола (3,9 г, 55% выход).
2-(6-Нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)уксусная кислота.
Смесь Н51О6 (4,94 г, 21,69 ммоль ) и СгО3 (43 мг, 0,43 ммоль) в 50 мл СН3СЫ:Н2О (99,25%:0,75%) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К этой смеси медленно добавляли 2-(6-нитро-1тритил-1Н-индазол-5-ил)этанол (3,9 г, 8,67 ммоль) в 50 мл СН3СЫ:Н2О (99,25%:0,75%) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Раствор выливали в воду (100 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле с получением желаемого продукта 2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)уксусной кислоты (3,2 г, 80% выход).
Ы-(4-Фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)ацетамид.
К перемешиваемому раствору 2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)уксусной кислоты (3,2 г, 6,91 ммоль) в 40 мл безводного ΌΜΡ добавляли (4-фторфенил)метанамин (1,04 г, 8,29 ммоль), ЕЭС.НС1 (2,64 г, 13,82 ммоль), НОВ! (1,86 г, 13,82 ммоль) и ТЕА (2,79 г, 27,64 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Раствор выливали в воду (100 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4, концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением желаемого продукта Ы-(4-фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)ацетамида (3,15 г, 80% выход).
Ы-(4-Фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)этанамин.
К перемешиваемому раствору Ы-(4-фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)ацетамида (3,15 г, 5,53 ммоль) в 30 мл безводного ТНР при 0°С медленно добавляли ВН3-ТНР (1н. раствор, 16,6 мл, 16,6 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в течение 5 ч. Раствор выливали в воду (80 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением желаемого продукта Ν-(4фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)этанамина (2,31 г, 75% выход).
5-(2-(4-Фторбензиламино)этил)-1-тритил-1Н-индазол-6-амин.
К перемешиваемому раствору Ы-(4-фторбензил)-2-(6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)этанамина (2,31 г, 4,15 ммоль) в 40 мл 1:5 смеси АсОН/2-РгОН при 60°С добавляли С 2п пыль (5,4 г, 83,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры. Твердое вещество удаляли фильтрованием и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток выливали в раствор ЫаНСО3 (80 мл) и экстрагировали при помощи ЕА (100 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме. Собирали желтое твердое вещество, представляющее собой 5-(2-(4-фторбензиламино)этил)-1тритил-1Н-индазол-6-амин (1,96 г, 90% выход), которое использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
7-(4-Фторбензил)-6,7-дигидро-1-тритил-[1,3]диазепино[5,4-1]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-он.
К раствору 5-(2-(4-фторбензиламино)этил)-1-тритил-1Н-индазол-6-амина (1,96 г, 4,56 ммоль) в 20 мл ЭСМ добавляли Е13Ы (5 г, 50 ммоль) и СЭ1 (4 г, 25,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Раствор выливали в воду (40 мл) и экстрагировали при помощи ЭСМ (60 мл) три раза. Органический слой промывали насыщенным солевым раствором два раза, сушили над Ыа28О4, концентрировали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле с получением желаемого продукта 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-1-тритил-[1,3]диазепино[5,4-1]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она (1,51 г, 60% выход).
7-(4-Фторбензил)-6,7-дигидро-[1,3]диазепино[5,4-1]индазол-8-(1Н,5Н,9Н)-он.
К раствору 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-1-тритил-[1,3]диазепино[5,4-1]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она (1,51 г, 2,73 ммоль) в 10 мл ЭСМ добавляли 5 мл ТРА. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 5 ч. Растворитель удаляли и остаток очищали препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-[1,3]диазепино[5,4-1]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она (677 мг, 80% выход).
7-(4-Фторбензил)-6,7-дигидро-3-иод-[1,3]-диазепино-[5,4-1]-индазол-8(1Н,5Н,9Н)-он.
К перемешиваемой смеси 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-[1,3]-диазепино-[5,4-1]-индазол8(1Н,5Н,9Н)-она (677 мг, 2,18 ммоль) в ЭМР (10 мл) при комнатной температуре добавляли КОН (366 мг, 6,54 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К реакционной смеси добавляли N18 (540 мг, 2,4 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (60 мл х3). Объединенный органический слой промывали при помощи Н2О (200 мл х3), сушили над без
- 45 032196 водным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением желаемого продукта (713 мг, 75% выход) в виде желтого твердого вещества. Неочищенный продукт использовали непосредственно на следующей стадии без дополнительной очистки.
трет-Бутил-7-(4-фторбензил)-6,7,8,9-тетрагидро-3-иод-8-оксо-[1,3]-диазепино[5,4-1]индазол-1(5Н)карбоксилат.
К перемешиваемой смеси 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-3-иод-[1,3]-диазепино[5,4-1]индазол8(1Н,5Н,9Н)-она (713 мг, 1,68ммоль) в ТНЕ (10 мл) при комнатной температуре добавляли (Вос)2О (403 мг, 1,85 ммоль), ОМАР (31 мг, 0,25 ммоль), ТЕА (339 мг, 3,36 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 ч. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (60 мл х3). Объединенный органический слой промывали при помощи Н2О (200 мл х3), сушили над безводным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем с получением желаемого продукта трет-бутил 7-(4-фторбензил)-6,7,8,9-тетрагидро-3-иод-
8-оксо-[1,3]-диазепино[5,4-1]индазол-1(5Н)-карбоксилата (720 мг, 80% выход).
7-(4-Фторбензил)-6,7-дигидро-3-(2-метоксипиримидин-5-ил)-[1,3]-диазепино[5,4-1]индазол8(1Н,5Н,9Н)-он.
К смеси трет-бутил 7-(4-фторбензил)-6,7,8,9-тетрагидро-3-иод-8-оксо-[1,3]-диазепино[5,4Е]индазол-1(5Н)-карбоксилата (720 мг, 1,34 ммоль) и 2-метоксипиримидин-5-ил-5-бороновой кислоты (616 мг, 4 ммоль) в 1,4-диоксане/Н2О (8 мл/2 мл) последовательно добавляли РйС12(брр1) (292 мг, 0,4 ммоль) и К2СОз (553 мг, 4 ммоль). Полученную смесь дегазировали и снова заполняли аргоном три раза и затем перемешивали при 85°С в течение 4 ч. Смеси давали охладиться до комнатной температуры. Реакционную смесь выливали в воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (60 мл х3). Объединенный органический слой промывали насыщенным солевым раствором (60 мл х3), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле с получением желаемого продукта 7-(4-фторбензил)-6,7-дигидро-3-(2метоксипиримидин-5-ил)-[1,3]-диазепино[5,4-1]индазол-8(1Н,5Н,9Н)-она (392 мг, 70% выход) в виде белого твердого вещества.
'|| ЯМР (400 МГц, :ЭМ8О-д6) δ: 13,12 (с, 1Н), 9,15 (с, 2Н), 9,06 (с, 1Н), 7,86 (с, 1Н), 7,36 (м, 2Н), 7,27 (с, 1Н), 7,17 (м, 2Н), 4,54 (с, 2Н), 3,99 (с, 3Н), 3,42 (м, 2Н), 3,08(м, 2Н).
Пример 11. Синтез 5-бензил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-имидазо[4,5-1]индазол-6-(1Н,5Н,7Н)-она. №Бензил-6-нитро-1 -тритил-1Н-индазол-5-амин.
Раствор 5-бром-6-нитро-1-тритил-1Н-индазола (4 г, 8,23 ммоль), фенилметанамина (1,32 г, 12,39 ммоль), Рб2(бЬа)3 (760 мг, 0,823 ммоль), Χαηφίιοδ (480 мг, 1,24 ммоль), С§2СО3 (8 г, 24,49 ммоль) в диоксане (30 мл) перемешивали при 110°С в атмосфере азота в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (0-5% этилацетат/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (2,16 г, 51% выход) в виде красного твердого вещества.
'Н ЯМР (400 МГц, :ЭМ8О-д6) δ: 8,08 (с, 1Н), 7,70 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,23-7,42 (м, 14Н), 7,14-7,18 (м, 7Н), 7,04(с, 1Н), 4,51 (д, 1=6,0 Гц, 2Н).
^-Бензил-1-тритил-1Н-индазол-5,6-диамин.
К раствору №бензил-6-нитро-1-тритил-1Н-индазол-5-амина и никеля Ренея (1 г) в ТНЕ (20 мл) и МеОН (10 мл) при 0°С добавляли по каплям ^Н4-Н2О (10 мл). Смесь нагревали до комнатной температуры и перемешивали при этой температуре в течение 1 ч. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме с получением продукта (2 г, 97% выход) в виде серого твердого вещества, которое использовали непосредственно на следующей стадии.
1-Бензил-5-тритилимидазо[4,5-1]индол-2(1Н,3Н,5Н)-он.
К раствору ^-бензил-1-тритил-1Н-индазол-5,6-диамина (2 г, 4,17 ммоль), ТЕА (1,2 мл, 4,17 ммоль) в ЭСМ (20 мл) при 0°С медленно добавляли трифосген (1,19 г, 4,17 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере Ν2 в течение 1 ч. Смесь распределяли между водой и ЭСМ. Органический слой сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (0-30% этилацетат/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (720 мг, 34% выход).
5-Бензилимидазо[4,5-1]индазол-6(1Н,5Н,7Н)-он.
Смесь 5-бензил-1-тритилимидазо[4,5-1]индазол-6(1Н,5Н,7Н)-она (720 мг, 1,42 ммоль) в ТЕА перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали досуха. Добавляли ИН3/МеОН (7н. раствор) и смесь концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле (0-10% МеОН/ОСМ) с получением желаемого продукта (358 мг, 95% выход) в виде белого твердого вещества.
5-Бензил-3-иодимидазо[4,5-1]индазол-6(1Н,5Н,7Н)-он.
К раствору 5-бензилимидазо[4,5-1]индазол-6(1Н, 5Н,7Н)-она (620 мг, 2,35 ммоль) в ОМЕ (5 мл) добавляли КОН (657 мг, 11,74 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин. К смеси добавляли ΝΙ8 (684 мг, 3,05 ммоль) и затем смесь перемешивали при комнатной
- 46 032196 температуре в течение ночи. Смесь распределяли между водой и этилацетатом. Органический слой сушили над Να2δΟ4, фильтровали и концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле (0-10% МеОН/ОСМ) с получением желаемого продукта (358 мг, 75% выход) в виде белого твердого вещества.
трет-Бутил 5-бензил-3-иод-6-оксо-6,7-дигидроимидазо[4,5-Г]индазол-1(5Н)-карбоксилат.
Смесь 5-бензил-3-иодимидазо[4,5-Г]индазол-6(1Н,5Н,7Н)-она (690 мг, 1,77 ммоль), ОМАР (108 мг, 0,88 ммоль), ТЕА (0,5 мл, 3,54 ммоль) в ТНЕ (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. К этой смеси добавляли ВОС2О (1,16 г, 5,3 ммоль) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь концентрировали досуха и остаток очищали колоночной флэшхроматографией на силикагеле(0-20% этилацетат/петролейный эфир) с получением желаемого продукта (516 мг, 59% выход) в виде желтого твердого вещества.
5- Бензил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-имидазо[4,5-Г]индазол-6(1Н,5Н,7Н)-он.
Смесь трет-бутил 5-бензил-3-иод-6-оксо-6,7-дигидроимидазо [4,5-Г] индазол-1 (5Н)-карбоксилата (250 мг, 0,51 ммоль), 2-метилпиридин-4-илбороновой кислоты (209 мг, 1,53 ммоль), К2СО3 (209 мг, 1,53 ммоль), Рй(йррГ)С.’Е (112 мг, 0,15 ммоль) в Н2О (3 мл) и диоксане (12 мл) перемешивали при 100°С в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле (0-10% МеОН/ОСМ) с получением желаемого продукта (43 мг, 24% выход) в виде коричневого твердого вещества.
Ή ЯМР (400 МГц, 1)\ЕО-сЕ) δ: 13,24 (с, 1Н), 11,08 (с, 1Н), 8,52 (д, 1=5,2 Гц, 1Н), 7,75 (м, 2Н), 7,63 (с, 1Н), 7,36 (м, 4Н), 7,26 (м, 1Н), 7,09 (с, 1Н), 5,16 (с, 2Н), 2,57 (с, 3Н). ΕδI-Μδ т/ζ: 356,1.
Пример 12. Синтез 6-(1-бензилпиперидин-3-ил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-пиразоло-[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она.
Этил 4-(6-амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)бут-3-еноат.
К раствору триэтилфосфоноацетата (1,06 г, 4,73 ммоль) в ТНЕ (20 мл) при 0°С добавляли №1Н (145 мг, 4,73 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. К этой смеси медленно добавляли 6-амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-карбальдегид (1,9 г, 3,94 ммоль) в ТНЕ (10 мл) и затем смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь распределяли между водой и ЕА. Органический слой концентрировали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем (0-1,5% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (1,9 г, 88% выход). ΕδI-Μδ т/ζ: 553.
3-Бром-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3 -д] хинолин-7(8Н)-он.
Смесь этил 4-(6-амино-3-бром-1-тритил-1Н-индазол-5-ил)бут-3-еноата (1,7 г, 3,08 ммоль) и ΌΒυ (9,35 г, 61,54 ммоль) в №МР (170 мл) перемешивали при 160°С в течение ночи. Смесь концентрировали в вакууме. Остаток распределяли между водой и ЕА. Органический слой концентрировали в вакууме и остаток очищали на колонке с силикагелем (0-3% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (1,0 г, 64% выход). ΕδI-Μδ т/ζ: 506.
3-(2-Метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7 (8Н)-он.
Смесь 3-бром-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (1,1 г, 2,17 ммоль), 2-метилпиридин4-ил-4-бороновой кислоты (743 мг, 5,43 ммоль), Рй(йррГ)С12 (480 мг, 0,65 ммоль) и К2СО3 (900 мг, 6,52 ммоль) в диоксане/Н2О (50 мл/5 мл) перемешивали при 90°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем (0-2% метанола в дихлорметане) с получением желаемого продукта (700 мг, 64% выход). ΕδI-Μδ т/ζ: 519.
6- Бром-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7(8Н)-он.
Смесь 3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (700 мг, 1,35 ммоль) и ΝΒδ (1,44 г, 8,10 ммоль) в ОМЕ (15 мл) перемешивали при 55°С в течение ночи. Смесь выливали в воду и экстрагировали при помощи ЕА. Органический слой концентрировали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем (ЭСМ/МеОН=200/1-75/1) с получением желаемого продукта (450 мг, 56% выход). ΕδI-Μδ т/ζ: 597.
6-(1 -Бензил-1,2,5,6-тетрагидропиридин-3 -ил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло [4,3д]хинолин-7(8Н)-он.
Смесь 6-бром-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (170 мг, 0,28 ммоль), 1-бензил-1,2,5,6-тетрагидропиридин-3-ил-3-бороновой кислоты (300 мг, 1,38 ммоль), Рй(йррГ) С12 (52 мг, 0,07 ммоль) и К2СО3 (120 мг, 0,85 ммоль) в диоксане/Н2О (12 мл/3 мл) перемешивали при 90°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем (ОСМ/МеОН=200/1-50/1) с получением желаемого продукта (170 мг, 87% выход). ΕδI-Μδ т/ζ: 690.
трет-Бутил 3-(7,8-дигидро-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-7-оксо-1 -тритил-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-6ил)пиперидин-1-карбоксилат.
Смесь 6-(1 -бензил- 1,2,5,6-тетрагидропиридин-3-ил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1 -тритил-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (200 мг, 0,29 ммоль), Рй(ОН)2/С (300 мг) и (Вос)2О (160 мг, 0,73 ммоль) в ЕЮАс (15 мл) перемешивали в атмосфере водорода в течение ночи. Смесь фильтровали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток очищали на колонке с силикагелем (ЭСМ/МеОН=200/1-50/1) с получе
- 47 032196 нием желаемого продукта (80 мг, 40% выход). Е81-М8 т/ζ: 702.
3-(2-Метилпиридин-4-ил)-6-(пиперидин-3 -ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7 (8Н)-он.
К раствору трет-бутил 3-(7,8-дигидро-3-(2-метилпиридин-4-ил)-7-оксо-1-тритил-1Н-пиразоло[4,3д]хинолин-6-ил)пиперидин-1-карбоксилата (75 мг, 0,107 ммоль) в ЭСМ (3 мл) добавляли ТЕА (3 мл) и Е1381Н (3 капли). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь концентрировали в вакууме и остаток разбавляли при помощи ΝΉ3 (в метаноле). Смесь концентрировали в вакууме и остаток (38 мг, 100% выход) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. Е81-М8 т/ζ: 360.
6-(1-Бензилпиперидин-3 -ил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7(8Н)-он.
Смесь 3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-(пиперидин-3-ил)-1Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7(8Н)-она (38 мг, 0,2 ммоль), бензальдегида (120 мг, 2,1 ммоль) и АсОН (50 мг, 0,83 ммоль) в 10 мл МеОН перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К этой смеси добавляли цианоборогидрид натрия (50 мг, 0,79 ммоль) и полученную смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали досуха. Остаток очищали на колонке с силикагелем (ЭС.'М/МеОН=100/1-10/1) с получением желаемого продукта (20 мг, 43% выход).
'Н ЯМР (400 МГц, СЭ3ОЭ) δ: 8,70 (м, 2Н), 8,44 (с, 1Н), 8,39 (д, 1=6,4 Гц, 1Н), 8,11 (с, 1Н), 7,53 (с, 1Н), 3,77-3,62 (м, 2Н), 3,15 (м, 1Н), 2,96 (с, 3Н), 2,85 (с, 3Н), 2,21-1,95 (м, 6Н). Е81-М8 т/ζ: 450.
Пример 13. Синтез 6-(3-хлорбензил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1,8-дигидро-5Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-5,7(6Н)-диона.
6-Ацетамидо-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1 -тритил-1Н-индазол-5-карбоновая кислота.
К перемешиваемому раствору N-(5-формил-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-6ил)ацетамида (220 мг, 0,40 ммоль) в 40 мл ацетона при комнатной температуре добавляли 20 мл реагента Джонса. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли и остаток подвергали очистке колоночной флэш-хроматографией с получением желаемого продукта (68 мг, 30%).
6-Амино-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-индазол-5-карбоновая кислота.
К перемешиваемому раствору 6-ацетамидо-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1Н-индазол-5карбоновой кислоты (268 мг, 0,50 ммоль) в 10 мл диоксана при комнатной температуре добавляли 10 мл 6н. раствор НС1. Реакционную смесь перемешивали при 100°С в течение 2 ч. Растворитель удаляли. Остаток разбавляли в ЭС.’М и промывали NаНСО3 и водой. Органический слой сушили и концентрировали в вакууме с получением 102 мг неочищенного продукта. Этот продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
6-Амино-И-(3-хлорбензил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-индазол-5-карбоксамид.
К перемешиваемому раствору неочищенной 6-амино-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-индазол-5карбоновой кислоты с предыдущей стадии (14 мг, 0,05 ммоль) и (3-хлорфенил)метанамина (18 мкл, 0,15 ммоль) в 2 мл безводного ЭМЕ добавляли НАТИ (29 мг, 0,075 ммоль) с последующим добавлением Э1ЕА (45 мкл, 0,25 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой два раза. Органический слой сушили и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с получением желаемого продукта (11 мг, 54%) в виде желтого порошка.
6-(3 -Хлорбензил)-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1,8-дигидро-5Н-пиразоло [4,3-д]хиназолин-5,7(6Н)дион.
К раствору 6-амино-И-(3-хлорбензил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1Н-индазол-5-карбоксамида (5 мг, 0,013 ммоль) в 3 мл ЭСМ добавляли Ξΐ3Ν (14 мкл, 0,078 ммоль) с последующим добавлением СЭ1 (21 мг, 0,128 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель удаляли и остаток подвергали очистке при помощи препаративной ВЭЖХ и препаративной ТСХ с получением желаемого продукта (2,8 мг, 53% выход).
Ή ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-а6) δ: 13,62 (с, 1Н), 10,56 (с, 1Н), 8,75 (с, 1Н), 8,594 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,84 (с, 1Н), 7,78 (д, 1=5,0 Гц, 1Н), 7,41 (с, 1Н), 7,28-7,36 (м, 3Н), 7,13 (с, 1Н), 5,12 (с, 2Н), 2,59 (с, 3Н). Е81-М8 т/ζ: 417,1.
Пример 14. Синтез 6-(2-гидрокси-1-фенилэтил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7-она.
6-Бром-3 -(2-метилпиридин-4-ил)- 1-тритил-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7-он.
К раствору 3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1,8-дигидро-7Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7-она (14 мг, 0,025 ммоль) в 3,0 мл ЭМЕ при комнатной температуре добавляли Νβ8 (22 мг, 0,12 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 50°С в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом, промывали водой и сушили над №138О3. Высушенный раствор концентрировали и остаток подвергали колоночной хроматографии с получением желаемого продукта (12 мг, 75%).
3-(2-Метилпиридин-4-ил)-6-(1 -фенилвинил)-1 -тритил-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7он.
К раствору 6-бром-3 -(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д]хинолин-7
- 48 032196 она (120 мг, 0,20 ммоль) и (1-фенилвинил)бороновой кислоты (89 мг, 0,60 ммоль) в 3,0 мл 4:1 смеси диоксан/вода при комнатной температуре добавляли РбС12(бррГ) (33 мг, 0,04 ммоль) и К2СО3 (83 мг, 0,60 ммоль). Реакционную смесь дегазировали и снова заполняли азотом. Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи. Твердое вещество отфильтровывали и фильтрат концентрировали в вакууме. Остаток подвергали очистке колоночной флэш-хроматографией с получением желаемого продукта (72 мг, 58% выход).
6-(2-Гидрокси-1-фенилэтил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д] хинолин-7-он.
Перемешиваемый раствор 3-(2-метилпиридин-4-ил)-6-(1-фенилвинил)-1-тритил-1,8-дигидро-7Нпиразоло[4,3-д]хинолин-7-она (96,8 мг, 0,16 ммоль) в 5 мл безводного ТНЕ охлаждали до 0°С на бане с ледяной водой, добавляли по каплям большое избыточное количество комплекса боран-диметилсульфид (4 мл). Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 ч и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и затем добавляли 5 мл деионизированной воды. К реакционной смеси добавляли 5 мл 3М №ОН. с последующим добавлением по каплям 10 мл Н2О2 раствора, полученную смесь перемешивали при 50°С в течение 1 ч. Реакционную смесь экстрагировали 3 раза при помощи ЭСМ. Органический слой сушили над безводным №ь8О4 и концентрировали в вакууме с получением неочищенного продукта в виде коричневого твердого вещества. Неочищенное соединение использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.
6-(2-Гидрокси-1-фенилэтил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1,8-дигидро-7Н-пиразоло [4,3-д] хинолин-7 он.
К раствору неочищенного 6-(2-гидрокси-1-фенилэтил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1-тритил-1,8дигидро-7Н-пиразоло[4,3-д]хинолин-7-она с предыдущей стадии в 10 мл ЭСМ добавляли 1 мл ТЕА и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь промывали насыщенным NаНСΟ3 и насыщенным солевым раствором, сушили над безводным №ь8О4 и концентрировали в вакууме. Остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (10% МеОН в ЭСМ) с получением желаемого продукта в виде желтого твердого вещества (32 мг, 55% выход).
1Н ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-б6) δ: 13,42 (с, 1Н), 11,65 (с, 1Н), 8,60 (с, 1Н), 8,56 (д, 1=5,0 Гц, 1Н), 8,03 (с, 1Н), 7,93 (с, 1Н), 7,86 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,37 (с, 1Н), 7,33 (д, 1=7,0 Гц, 2Н), 7,29 (т, 1=7,0 Гц, 2Н), 7,19 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,84 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 4,34 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,00 (м, 1Н), 3,90 (м, 1Н), 2,60 (с, 3Н). Е8ЬМ8 т/ζ: 397,2.
Пример 15. Синтез (6-бензил-3-(2,6-диметилпиридин-4-ил)-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-1Н-пиразоло [4,3 -д] хиназолин-1-ил)метила.
(6-Бензил-3-(2,6-диметилпиридин-4-ил)-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-1ил)метил ди-трет-бутилфосфат.
К перемешиваемому раствору 6-бензил-3-(2,6-диметилпиридин-4-ил)-1,5,6,8-тетрагидро-7Нпиразоло[4,3-д]хиназолин-7-она (76 мг, 0,20 ммоль) в 5,0 мл безводного ОМА при комнатной температуре добавляли Сз2СО3 (196 мг, 0,60 ммоль) с последующим добавлением ди-трет-бутил(хлорметил)фосфата (78 мг, 0,30 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 40°С в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали водой. Органический раствор отделяли и сушили. Растворитель удаляли и остаток подвергали очистке колоночной флэш-хроматографией с получением желаемого продукта (50 мг, 41% выход).
(6-Бензил-3-(2,6-диметилпиридин-4-ил)-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-1ил)метил дигидрофосфат.
Раствор (6-бензил-3-(2,6-диметилпиридин-4-ил)-7-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-1Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-1-ил)метил ди-трет-бутилфосфата (80 мг, 0,132 ммоль) в 4,0 мл 1:3 смеси АсОН/Н2О перемешивали при 50°С в течение 12 ч.
Реакционную смесь концентрировали в вакууме и остаток подвергали очистке при помощи препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта (38 мг, 58%).
1Н ЯМР (500 МГц, ЭМ8О-б6) δ: 10,21 (с, 1Н), 8,23 (шир., 1Н), 7,90 (с, 1Н), 7,60 (с, 2Н), 7,28-7,41 (м, 5Н), 5,91 (с, 2Н), 4,62 (с, 2Н), 4,44 (с, 2Н). Е8ЬМ8 т/ζ: 493,1.
Пример 16. Синтез 6-(3-хлор-4-фторбензил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1,8-дигидро-5Н-пиразоло[4,3д]хиназолин-5,7(6Н)-диона.
К перемешиваемому раствору 6-(3-хлор-4-фторбензил)-3-(2-метилпиридин-4-ил)-1,5,6,8тетрагидро-7Н-пиразоло[4,3-д]хиназолин-7-она (8 мг, 0,02 ммоль) в 2 мл ЭМ8О при комнатной температуре добавляли КМпО4 (63 мг, 0,40 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч. Твердое вещество отфильтровывали и полученный ЭМ8О раствор подвергали очистке при помощи препаративной ВЭЖХ с получением желаемого продукта (2,5 мг 30%).
1Н ЯМР (500 МГц, 1)\18О-с1.) δ: 13,71 (шир., 1Н), 11,60 (шир., 1Н), 8,74 (с, 1Н), 8,59 (д, 1=5,0 Гц, 1Н), 7,83 (с, 1Н), 7,78 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,58 (дд, 1=2,0, 7,0 Гц, 1Н), 7,36-7,39 (м, 2Н), 7,28 (с, 1Н), 5,10 (с, 2Н), 2,54 (с, 3Н). Е8ГМ8 т/ζ: 435,1.
Пример 17. Анализы ингибирования ЕКК.
- 49 032196
Ингибирование ЕКК активности соединениями, раскрытыми в настоящей заявке, определяли с использованием набора для киназного анализа Ζ'-ЬУТЕ (ЫТе ТесЬ^^^ек) с 8ег/ТНг 3 пептидным субстратом (ЫТе ТесΗηο1οд^ек) в соответствии с инструкциями изготовителя. Анализ осуществляли с концентрацией ЕКК2 фермента (ЫТе ТесΗηο1οд^ек) 0,47 нг/мкл при 100 мкМ АТФ (приблизительно АТФ Кт для ЕКК2). Значения Юс, для соединений определяли с использованием 3-кратных серийных разведений в двух повторах. Соединения сначала разбавляли с получением 1:3 разведений в 100% БМ8О при 100Х желаемой концентрации, затем снова разбавляли (1:25) в 20 мМ НЕРЕ8 буфере (Ιηνΐίτο^η) для получения 4Х растворов перед добавлением к раствору фермента. Конечная БМ8О концентрация в анализе составляла 1%. Конечный объем реакции составлял 20 мкл/лунка в 384-луночных планшетах. Киназные реакции осуществляли в течение 1 ч с последующим развитием реакции (1 ч) в 20 мкл/лунка в формате 384-луночных планшетов. Одно или несколько соединений, раскрытых в настоящей заявке, показали значение Ιί% меньше чем 10 нМ при испытании в этом анализе (см. чертеж).
Таблица 1 Ιη νΐίτο Егк2 Ι%. данные для выбранных соединений по настоящему изобретению
Используются следующие символы:
+ (больше чем 1000 нМ), ++ (от 250 до 1000 нМ), +++ (от 50 до 250 нМ), + + + + (меньше чем 50 нМ)
№ Химическая Структура Егк2 1С50 (нМ) Рассчитанная молекулярная масса Найденная масса (М+1)
1 н н /А Е л ++++ 355,4 356,1
2 ХбфЭ Ν\ ++++ 383,5 384,3
3 н н ++++ 389,8 390,1
4 Ν·~Χ ++++ 403,9 404,4
- 50 032196
5 ,йучХ° Υ/ уСССи 'ν +++ 401,4 402,2
6 н н ухдиси 'ν-'Υ +++ 366,4 367,2
7 н н Ϊ ,ΒγΥ^γΟ Д γχχχγ 'ν ++++ 405,4 406,2
8 даЖ и ’ 4 ? Ν-\ ++++ 421,9 422,2
9 ΝΝγγν° °- 'ν\ ++++ 400,4 401,4
10 уОжОС/ Ν X ++++ 399,4 400,3
11 Η Η N. .-¾. .Ν.,Ο ^τχ,Ε ν' μ | Γ Г |! ЖА/Μγ ά ’ ++++ 405,4 406,3
12 охгаст’ Ο Ν-\ +++ 437,4 438,2
13 Η Η -рССОД ο. ++++ 405,4 406,3
14 Ζν01 у|ДАХ/ ο. Ν~\ ++++ 403,9 402,5 (Μ-1)
15 νΎγθ у Ε γΧλίχΐ ( /] ° Ν- Α +++ 435,8 436,1
16 Η Η О С1 Ν'\ 1 1 ' ί η ά ' ++++ 417,9 418,2
17 Η Η Й Ν >0 γ Ε α Ιι ,1 ί . ( ή 14-% +++ 413,4 414,2
18 Η Η Νγ·¥ Νγ° νΑΛΓ^, Α <Λ X ++++ 401,4 4 02,2
19 Η Η Ν γγ Ν ν' || [ \=ο Ж 4 ) X/ Ν-\ ++++ 355,4 356,2
20 Η Η Ν -.Γ№4>.--Ν Ν ί| Ί Χθ ό χ Ν ' Ό +++ 369,4 370,2
21 ΧΤϊ°Χ< С> +++ 384,4 385,2
22 χ. 1 4 .ί Ν~\ ++++ 380,4 381,2
23 Η Η Ν ,Ν. ,Ο ,0Ν ,ΧΧΙΧΙ X Ν-\ ++++ 408,5 409,2
24 χχη η ° Ν-'\ +++ 417,1 418,1
25 χΧΧίχ Βγ ++ 391,7 391
26 Η Η γΟ-χΟς ν< “ + + + + 433,9 434,1
27 Η н 'ΗννΝχ° XX *ν-\ ++++ 363,4 384,2
28 Η Η «Л ^ |[ 1 ί 4'γ”° +++ 417,9 418,4
29 ΝΧΧΧΧ Βγ ++ 374,0 375,2
30 Η Η μ N. .0 Ρ уХШ X < ί Ν-\ ++++ 387,4 388,2
31 «γΧ·» ΝΧΙ л X 4 ν·/ ++++ 410,8 411,1
32 Νγνίγ0 \1.Χ 1,. г? ъ Ν - +++ 362,4 363,2
33 Η н Λ :Χ . χ +++ + 376,5 377,3
- 52 032196
34 Η н “ΎΧ Υ ,!ΧΙη Γ> 'Η Ν -4 +++ 362,4 363,2
35 Η η \ΧΙ χιχ / - - γ -%! X? Ν-\ ++++ 417,9 418,1
36 Η Η ?ο Ρ χχχχ X ν-Ν ++++ 437,9 438,1
37 Η Η Ν X--. N.. ,Ο Ε чХХЛЛХ, Μ ό. ++++ 438,8 439,1
38 Η Η Χ%° Κ- -Ζ χ.χ·.χς Γ} X / ++++ 437,9 438,1
39 Η н Ν ,.ΟΝ ХХХХСГ -X Γ ? ΝΛ ++++ 394,4 395,2
40 Η η Н^Чг-Ν^Ο - Ρ лхиа. ο Г Ρ +++ 424,8 425,1
41 Η Η Ν. ,Ν.χ,Ο ,Ρ ΝΧΧΧΧΧ, X7 ++++ 437,9 438,2
42 Η Η N.. Ν_Ο Ρ дхил, 4 +++ 370,8 371,1
43 «ууИ/ ххс,. π Ν-\ ++++ 323,3 325,2
44 Η Η Ν_Χ4χ·Ν ν° χχχ ΝΛ ++++ 363,4 364,2
45 Х/γ0 γΧΛχ0 X χχ X ++++ 381,4 382,2
46 ХЩ, ΓΛ ι ( ί Ν -\ +++ 350,4 351,2
- 53 032196
47 у ++++ 37 6,4 377,1
48 ++++ 396,8 397,1
49 Н Н Χ'Υ Ν--\ ++++ 363,4 364,2
50 N ..- .N ,0 и х ++++ 417,9 418,1
51 н н N К 0 ХУ. У к ,ο и ++++ 392,5 393,2
52 н Н ы ,-ъ> .Ν . ... О Д; ί ./ 1 к / Ν-\ ++++ 337,4 338,2
53 о >— ^гГ ** > жжДД/Ж ζ ДД ++++ 363,5 364,2
54 н н Νλ ]| г ^Χ'Χγ'Χ 0Η Ή-\ ++++ 337,4 338,2
55 к/ч Л·/’ ^х ЪХОЛ, й ++++ 394,4 395,2
56 УХУ Су Ν\ ++++ 376,4 377,2
57 Шх о Ч-Ν ++++ 389,8 390,1
58 ΧΙΤ.Ο ίΑ/%Ν4>4Αα /Г > г ++++ 403,9 404,1
59 Й- -Ж γ.θ у-. ДД 1Д к X ' ' Дд Ν-Η ++++ 429,9 430,1
60 Ν-.^,ΝγΡ х дОДХД д ν-ν н ++++ 378,8 379,1
- 54 032196
61 н н ы Ν 0 \ ι л ι ι ΗΝ ' Γ ++++ 405,8 406,1
62 Η Η Ν -Ν ,0 ή, Ν +++ 416,5 417,3
63 Η Η - - ϊ X V ) ' !> ' ' Ν - ++++ 452,6 453,3
64 η η Ν - Α-· ,Ν 0 - Ν 1! Г Г 1 ] .7 I Γ ί Ν' +++ + 394,5 395,3
65 Η Η β , .. Ν 0 <7 Д ΐ ). 7 с“ ++++ 408,5 409,2
66 Η Η Ν -^,Ν Λ.0 %ХХХ, Ν Ν ++++ 390,8 391,1
67 Μ η Ο Ν. 1 -1 ? д χ .„_Ν Γ ί! /'X Ε ++ 415,5 416,2
68 Η Ν Ν /¾. .N.^.0 ,·> XX, X \—Ν ί Ο ++++ 420,9 421,1
69 Η Η Ν Υνγ° XX ο Х»А +++ 416,5 417,2
70 Η Η ДХХХ ++++ 452,6 453,3
71 ддх г> о. ++++ 434,9 435,1
72 Н И ' Х5т^° '[:^Р 7 ΙΝ 0 \ ++++ 404,4 405,1
73 н о ν' Ιι Ι Г Χ'ό, Ν-\ + 412,5 413,2
74 .й^йго ΧΧφχ Υιί / оч +++ 433,9 434,1
- 55 032196
75 %ΧΧΧχΧ у 0 ++++ 419,9 420,1
76 Η Н ΙγγΝγΟ Г^уГ Ф- ' ·.- л ум о \ ++++ 403,4 404,1
77 Ν-Ύ^ν-Νγ-° ДД <Лл ,ί ХХГ х ' -<· // N ++++ 417,9 418,1
78 н н Ν-^·4γ'Ν ^° ν<. 1 I ί 1 1 0 ++++ 397,9 398,1
79 н н <ХХСП X X ч-ы / 0 ++++ 417,4 418,1
80 н м ы N ,0 дхг-.,,, л и '0-Ν 0. ++++ 418,4 419,1
81 Ε Χγ° уи-ХХх г—- м\ )--Ν 0 + + 393,4 394,2
82 н в Д Κ.-η ο + + 447,5 448,3
83 Ν Д Α 0.0.-, 0 ++++ 322,4 32 3,2
84 ;-οϊ;ο С< ’ ++++ 380,4 381,2
85 Η 4 Ν . -у Ν γ 0 X ΰ Χ_ Ν л С1 д ' ' ' ο ΠΝ ο ++++ 433,9 434,1
86 Η Η у-^'Ν τ° Υ0,.Εχγ. Ν ' ,-Ν Ο ++++ 434,9 435,1
87 Η Η Ν -·. Ν ,Ο ·. Ρ - XXX у д Γ ι и ?-·Ν Ο ++++ 421,4 422,1
- 56 032196
83 ί!А -· А Ν -7 ι ο. ++++ 422,4 423,1
89 Η Η Й -Ν. ,0 уаа.а,, Α °ί·° ++++ 466,9 467
90 Η в Μ Ν .0 Ν. 7 >-Ν ++++ 404,9 405,1
91 дата. ^,ι ο +++ 389,8 390,1
92 «А·// λ <1 1X11 й гм о ++++ 421,4 422,1
93 н н Ν ...0 уаллк, Η:Ν ++++ 405,8 406,1
94 Η Η Ку^^уО ~ ΧΛΙΛΑ γΑ V ЫС +++ 413,9 414,1
95 Η Η ν-^ά·ν-^° Αγ01 νΑΑ Α у Ν 0^ ++++ 434,9 435,1
96 Η Η Ν^^ν-Ν 0 Ν-χ ’ Ν ЦААчА ,Α ΑΧ Ν 7 ΓΝ 0. +++ 310,3 311,1
97 Η Η Ν νν „0 Ε /ααχι ο Ν ++++ 374,4 375,1
98 η η ζθ Ν-χ.-Ά^Χ ν' Ιΐ Ι ) /Ол /~-\ ' νί Ν. 7' Ъ г оч + 434,9 435,1
99 Η Η ν^γ·νύΑ αχ/ 1 Ν 1 1 ' ί ν\ 7 Τ 0. ++++ 422,4 423,1
- 57 032196
100 %Χθ ΛΑ ρ Г с X ο + + + + 425,4 426,1
101 Η н Ν Ά 'Υ > ' Λ'-ΌΧ. \~Ν Ο + + + + 487,5 488,2
102 Η Η ΜΎΛ·κ^ο ρ ΑΛίΧι Ν ') Ρ ΓΝ 0 + + + + 505,5 506,2
103 Λ·χ-Λ° Ό “χΧγ'ΛΧ χ % Χ^ г” О. +++ + 517,6 518,2
104 Η н Νν4%° ДлХХгу Ν ‘‘ )'Ν 0 +++* 469,5 470,2
105 «/ΜγΟ Χΐ Λ Ν Й ' Τ ' Г-·: 0 Ν ' Υ-Ν 0 + + + + 409,4 410,2
106 Η н Ν , ,Ν_ ,Ο Λ XXX И Η Ν, !' .... Ν Ο + + + 395,4 396,2
107 ы НО ух) X. '—\ ν' V λ Χει у-Ν \Χ ο + + 448,9 449,1
108 Η Η ΗγνΝγ° XX X ]ι 1 ί к !1 Сл + + + 403,9 404,1
109 ы но < Τί ΐ 2 χχλ.ν Ν. // Λ-Ν Ο + 324,3 325,2
110 8-Χν”ν° ί . ή ' и 'ν-Ν + +++ 388,4 389,2
111 Η η ΧΧΧΧΛ Ν-ν + +++ 404,9 405,1
112 Η η Й <4_,Ν Ο Η·^-ΑλΧ Η ΝΗ2 /-X X —ο ++++ 353,4 354,2
113 Η η Ν^-Λ,-Ν^Ο ”Д X Χ\ Νχ Υ-Ν -Ο + + + 339,4 340,2
- 58 032196
114 Η н ХХОЭ / I Λλ ρ С 7 ν-ν ++++ 392,4 393,1
115 ΒννΜ Χν01 νχλ ι υ а 'τ ~ Ν-Ν ++++ 404,9 405,1
116 Η Η <ΧΧΤ- ή Ц.-И Ρ +++ 487,5 488,2
117 Η Η χΛ,Λ ϊ £1 1 С '/} ΟΗ ν-ν ++++ 420,9 421,1
118 Ν Ν Ο ,-. \Χ.ΧΧΧ,χ X ' ι £-Ν ! оч ++++ 450,9 451,1
119 Η в Ν Ν χ Ο ΧΧ££% X. Ν. !ΐ Υ Ο ++++ 454,4 455,1
120 Ν -X, «. ΝΧΧ X- .-Χ^Χ X ί: у τι Ν-Η ++++ 439,5 440,1
121 т%х° \ Τ -χ ,Χ Τ Τ ι > - * ν-ν ++++ 457,5 458,2
122 Η Η -χο; .γΊ д 1 >.1 1 Ν Ν ++++ 475,5 476,2
123 Ν- ΖΧ N ° уОХСЛ, Хг/ ++++ 390,8 391,1
124 ХЛХк.% < >! ν-ν ++++ 424,4 425,1
125 Ν 'χ,Τ'-Ο -X ΜΤΧ Τλ у -Λ '.,- ,, >-см Ν Ί X Ο ++++ 411,4 412,2
126 Η ρ Ν X Ν ,0 -Λ Χϊ.ί,,,χ / , ' ' Ρ ' - ' Ν-·* ++++ 487,5 488,2
127 £·νγ Λ аХСхЛ-З ί. И Ν-Ν ++++ 392,4 393,1
128 Й.γχΤ° ^‘Χ ν£ΧΛ γ-Ά ’ / ν-ν ++++ 381,4 382,1
- 59 032196
129 Η к Ν- А, 0 νΐ 11 -Ο Д ~ - γ<- όι Ν Λ Γ'Ν 6 +++ 431,9 432,1
130 ρ /М Μ Η ο ή. Λ Ν, [| Д Ν—' Λ%( ' Νγ-Ν ό. +++ 418,4 419,1
131 Η Η Ν ΐ _Ν. Ο >λν,τ. Ν \ +++ 4 67,6 468,2
132 Й. , . ΝγΟ Μ 1 Η < > - Г Ν-\ ++++ 471,5 472,2
133 Η Η Ν χ\ N .. .0 ν4 -ί С ., Ρ ' 'Ή 1'Ν Γ— \ ---,-1 ‘-Ν (ν !> ' Ν-* ++++ 456,5 457,2
134 Ν - N .. \ ΓΙ. I . с + ΐ 9 Γ1ρ > И - - Ρ Ν Λ ++++ 505,0 505,2
135 Η Η Ν -·ΐ Ν, Ο <£.Ι Г ...... Г ' I. Ν Α Α ++ + 4 60,6 461,2
136 г ·-- ·γ ν '« г-л 1 ) < // Ν-\ +++ 446,6 447,3
137 •Я'1ГтВт° гЛ +++ 430,5 431,3
138 Η Η <ΧΧΥ Ν—\ +++ 444,6 445,2
139 Η Η НууИуО νΧΧ,ν^ο. ^,Ν ++++ 457,5 458,2
140 У ы-\ ++++ 473,6 474,2
141 ΧΛΧγΝ-γ, ц ++ + 458,6 459,3
142 νΟΥ ++++ 470,6 471,3
143 н н 'ν-/ ++++ 488,5 489,2
- 60 032196
144 -χάΤ-Ά Сл ъ ++++ 500,6 501,2
145 У»· Г° А ъ ++++ 466, 6 467,2
146 0. ++++ 438,5 439,2
147 доХбЯ и +++ 474,5 475,5
148 н н 'ν-Χ, ++++ 454,6 455,2
149 н в νίΧν. и м ++++ 412,5 413,2
150 Н Н .«ν4'Νν° хо N 11 1 Ы 1 N -\ ++++ 483, 6 484,2
151 Н I4 ΝΎΖ¥ Ν ν° Ν-\ ++++ 470,5 471,2
152 н н УХЛу-.ДчЛ й ъ и ++++ 501,0 501,2
153 О „ <П{ Я) Ν-Λ, ++++ 452,6 453,2
154 н н -Κν%ΝΥ° > Д'-оУ чн-\ ++++ 466,6 467,2
155 Алл ц ++++ 430,5 431,3
156 Νγ4ν-^γ° 'нА, ++++ 487,0 487,2
157 н Н \х1 1 т ΑΑ',^γ-χ и +++ 466,6 467,2
158 «ХхТ -Л Ν-\ ++++ 487,0 487,1
159 АпА д ΧΌΑ «А ++++ 487,0 487,2
160 уСХХДХ + + + 386,5 387,2
161 Η Ν »ХХ”Г° ^д· ^Ν--\ + + + + 521,5 522,2
162 ΫΧΧ Ν-\ + + + + 486,5 487 ,2
163 Η Η + + + + 488,5 489,2
164 ЮХ..-О,. α ъ + + + + 501,0 501,2
165 4χό°-.χγ XX О-у*Х) Ν-\ Π + + + + 459,6 460,3
166 ЙуЦМ уХХн -,Μ Д Ό + + + + 454,5 455,5
167 Η η Ν^^Ν·.<Χ° ^ίχ,Ρ -ШД^^дХ ο Ν-\ + + + 484,6 485,2
168 Η Ν СХХГ ΝχγΧ + + + + 467,6 468,5
169 «γνγ . 4 ъ Ν-\ + + + + 432,6 433,2
170 Η Η ЬХХд. ζΓ Ό < + + + + 467,6 468,2
171 Η Ν Ν-\ +++ 453,5 454,2
172 Η Η /ίΡτν^° 0 Χϋ*ο «Α + + + + 466,5 467,2
173 Αα-ΎΙγ· Ц ++++ 4 64,9 4 65,1
174 ι» Η хсстпхх «Α ++++ 473,0 473,2
175 η η ΝΧΧ3Χ. Л нХО-. Ν-\ + + + + 430,5 431,2
- 62 032196
176 н н Д н V м 14 X ++++ 446,9 447,2
177 Н Н N -. N 0 х N '[| ’1 г н 1 1 ' ·. ' -· ; N ++++ 466,6 467,2
178 ШУ л Ό Ν X ++++ 458,5 459,2
179 Шх, й. и а. +++ 484,6 485,2
180 И й Л ΝννΜ . γγγ νΆ +++ 501,0 501,2
181 н н мЛ 11111 ;Х· +++ 414,9 415,1
182 +++ 430,5 431,3
183 н б Ηγ-γΜ χγγ +++ 467,6 468,2
184 ++++ 470,5 471,2
185 Η Μ ДХЙГ° Ν-\ ++++ 488,5 489,2
186 »χτΥ ΓρΌΧ +++ 499,6 500,3
187 ΧΜ ++++ 488,5 489,2
188 Η Η ^сод° Ν-\ ++++ 483,6 484 ,2
189 Η Η ΝγΥγ^γΟ -ха О Ν-\ +++ 402,5 403,2
190 »Α ++++ 488,5 489,2
191 Η Μ осх° Ο 4' Ν-\ ++++ 424,5 425,2
- 63 032196
- 64 032196
208 н н У Ν\ +++ 466,6 467,5
209 Ы Н Я-γ^Ν^Ο Ду ++++ 446,5 447,4
210 н н +++ 416,5
211 %αϊο \у ++++ 377,4 378,2
212 ХХХ У ++++ 361,4 362,2
213 'УАу0 гу уххои М А, ++++ 375,2 376,3
214 Н Н жх и ++++ 430,4 431,1
215 Κν№γ° Г\ Νν-Ο^Νγ^ΝΌ X Ό +++ 430,5 431,3
216 УУ о> Ν-У ++++ 458,5 459,3
217 н н ухуз С| 'ν-Α, ++++ 403,9 404,2
218 Н И уху) У СРз и ++++ 437,4 438,2
219 ух ++++ 391,5 392,3
220 усу-. У Ν-Λ ++++ 391,5 392,7
221 н н Йуу у уХХХди л=У ОН ν-\ ++++ 382,4 383,2
222 уУ уу X ) ΝΑ 1=3С (Рацемат) +++ 506,5 507,3
- 65 032196
223 нуук0 ίθ 11 1 ι! Λ=Χ ^-ΝΗ Ν-\ (Рацемат) ++++ 424,5 425,3
224 Η Η Ν./-νΗ№° ++++ 397,4 398,2
225 хсХ +Ч-++ 419,4 420,1
226 Η Η Ν-\ ++++ 435,9 436,1
227 ϊχώΑ Δ. +*++ 389,5 390,1
228 ухъх ό Ν \ ++++ 404,5 405,1
229 ΧΧΟ X) Ν-\ +*++ 383,4 384,2
230 Η Η ^αχχ 431,9 4 32,1
231 Χχχ Χν η X ++++ 474,9 475,1
232 Η Η Χ'τΧΌ νΑ. ++++ 466,5 467,2
233 ++++ 451,4 452,2
234 Η в ххд 4Μ-\ ++++ 390,5 391,1
235 Η Η Ηγνν ухох XΝ— ~Ν +++ 392,8 393,1
236 Η07< уХХу 'Ν \ +++ 4 62,6 461,4 (Μ-1)
- 66 032196
- 67 032196
251 Η Η и х ъ- X ++++ 472,6 472,3 (Μ-1)
252 Η Η .4X4 % 3 1 I XXX 0. ++++ 458,6 459,2
253 Η ч γίΧΟΧο й' ++++ 347,4 348,2
254 Η Η χχχΎ? Х ' ++++ 458,6 459,2
255 4X4 α ъ' Ν X ++++ 362,4 363,1
256 κν№γ° \ΧΧΧ У Χχ Ο νΧ ++++ 376,5 377,2
257 Η Η ,Χ мЧ. +++ 443,5 444,2
258 ί-χΧο XXX Ν-\ ++++ 333,4 334,1
259 Η Η ν-ν \ ++++ 419,4 420,1
260 Χχ° τ •χϊχ ο 7 — Ν ++ 486,0 486,2
261 χχ ++++ 441,5 442,2
262 Η Η •ΧίΥ X ΧΧφΧ 0. ++++ 391,5 392,2
263 XX χ *ι ++ 488,5 489,2
264 Η Η Κη^γΝγθ ΧΧΟ «Λ ρ γ ++++ 488,5 489,3
265 Я-ХуО Χ'Α·-’· Γ Ν— **ν' +++ 419,4 420,1
- 68 032196
- 69 032196
280 Η Η уД. 7 .1 0 ++++ 505,5 506,2
281 Ν-./ Ρ ΐ ++++ 477,5 478,2
282 Η Η У Τι Τ' X СЕз νΟ Г ++++ 431,4 432,2
283 Й .- Х...Э +++ 347,4 348,2
284 ΧΧΪΌ~ώ Я г ++++ 488,5 489,2
285 Η Η Ν-Α-τ-Ν>>Ο “рСХ>-^У2} Ν-Χ ++++ 441,5 442,2
286 η Η ι Н ..3-:,г ч-3·0 ν' И Τ Τ ? V уААу-ЧА Ο μ \ ++++ 418,5 419,2
287 Η Η <ΎΎ Τ Г Τ 4Ν-Α\ +++ 398,4 399,1
288 йууМ ^γΓ рииуи 4Ν·-\ ++++ 398,4 399,2
289 ν 1| 1 Γ ΊνΤ. ++++ 344,4 345,2
290 у^утх- 4 /) Ν—\ ++++ 476,6 477,2
291 Η Η ЙуАуМ Г° ρ даТда Ν-\ ++++ 476,6 477,3
292 У У/ У ++++ 453,5 454,3
293 ДхУг/уУ у ++++ 489,5 490,3
294 ЖССо о. ++++ 375,5 376,2
- 70 032196
295 Η X £Ν Η ΎΝγ° ++++ 475,6 476,2
Η Η ΛΛ
Ν-^- -^-Νγος; χχ Χ7
296 +++ 466,6 467,3
Γ^\
ζ X Ν \ £
Η Ν-^ζ Υγ°Ο
297 Х^б '-Ν ++++ 466,6 467,2
Ο Ν \ £
Η Ν^γ· Ν Д Η γΝγ°
298 X χϊ ΧΤ ++++ 447,6 448,2
X \
Η Η
299 ДОЗ '—с ϊ:₽ί ++++ 430,4 431,2
Μ
Ρ
Η Ν< χ8γ° 0
300 ^*Ν ++++ 524,5 525,2
Ο Ν \ ν0Ε3
ί Рацемат)
й^ Ν/ί
301 Ο Αχ·ο_Υ ++++ 438,5 439,2
Ν-\
Η Ν^, χ1 -χΧ^,ο
302 ++++ 444,5 445,2
( 3 Ν \ νορ3
(Рацемат)
Η Η Λ / £
Ν_- Χ ΑγΝγ°
303 + + 506,5 507,2
γ£\ X
4. X Ν-\ -СР,
Η Μ /ЗЛ
304 Νχ- X ^γΝγ° \Χ Λ ν ^Χχ> ++++ 506,5 507,2
ζ } Ν-\ ν-ΟΓ3
Ρ
Η Ν Ν γ㣫0
305 ££^ +++ 470,5 471,2
-Τ
(Рацемат)
И ν' γ£γ°Ο.
6ДО
306 /-— X ++++ 470,5 471,2
* 4Ν-^
(Рацемат;
Η η ЗЛ
307 Ν Νχ доХ° Λχχ,.χ +++ 452,6 453,2
\
νΆ
308 О’ / / ^Ν\ Ν ++++ 452,6 453,2
309 Жд 0 +++ 444,5 445,2
310 м-\ ++++ 444,5 445,2
311 ^срз (Рацемат ί +++ 524,5 525,2
312 +++ 416,4 417,2
313 Н Н νΝ ||' Г V н ί; ~Ί Д ϊΤ - 'ν _ ++++ 466,6 467,3
314 Η Η Ν.ΑνΝν° ν' 1 1 ++++ 373,5 374,2
315 Η Η Ν^ν%° ν/.ο 1ч ++++ 447,5 370,1
316 Η Η /11 Τ Г 1 α-ΟΟαΟ^/ΟΟ Λ Ν-^ / ++++ 464,6 465,3
317 Η Η ΝγνΟ0 Ο> να[ι γι Νί=/ +++ 369,4 370,2
318 Е.г #° риЛоо X ++++ 464,6 465,3
319 Рацемическая ,80υ0 > О ^СРз смесь χ +++ 470,5 471,2
320 Η н Ν-~χΑ<-ΝΆΟ ν,Ύ τ у ЛО^ОХз Ν V Α ρι Ρ Ρ οχ +++ 505,5 506,3
- 72 032196
321 : : η ΧΥ 4 /1 —ср Ν-\ СРз Рацемическая смесь ++++ 512,6 513,3
322 Рацемическая н н , уХХХр и а. смесь 4 +++ 472,5 473,3
323 н н Ν | Г 1 νΑΥχΑγΖγΖ О ' Ν'Ν ++++ 367,4 368,2
324 н н Π - Ν Α Λ .ΎΥΎ γπ υ +++ 451,5 452,3
325 Η н ν^υη/ν <>0 γγ ν Τ| I г ι ά <Ώ ++++ 451,5 452,3
326 Η н Ν ^γΑ-γΟ γ. ν ι Γ ι Ν'^ ++++ 366,4 367,2
327 Рацемическая Η н . Ν II Г г ζ ? \ Ν-Υ смесь 4 - 404,5 405,3
326 Η н Ν 1 Γ 1 0 0Η Ν \ ++++ 396,4 397,2
32 9 ϋΧ° 4 гА Α ζ Д τ «А г,с Рацемическая смесь ++ 486,5 487,4
330 Η н Νγ-γΝγ° ΥΑ ν τ ϊ г ι υ ύ ++++ 366,4 367,2
331 Рацемическая Η н ννύΥντ° г= ΑΥ ^-Ν X > Ν-γ ρ Ζ смесь 4 Γ3ν ++++ 498,4 499,3
332 Η Η ++++ 449,5 450,4
- 73 032196
- 74 032196
348 Η νΧΪ Α ΓΝ °χ Χλ н (Γ~\χ /N^0 \_/ Ν χχ ^Ν ’—СЕ3 ++++ 523,5 524,4
Η /-\
349 Ν^ ΝγΛ χ. ,Ν^.0 . Ν ++++ 507,5 508,3
N. 7 Γ 4 -СЕ3
Η Νχν Ν Η χχΖ
350 + + 495,5 496,3
Γν— X > ^Ν
^СЕ3
Η Ν·_ Ν 11 X Η XX .N^0 V/
X! .. к <5Α
351 ++++ 508,5 509,2
Νκ ) у-Ν —СЕз
η2ν
Η Ν^χν 11 X- ΧοΟ
352 \-Χ. ίίΥ У- χ^> ‘'Ν ++++ 495,5 496,2
Ν'Ν СЕ3
\
Η Ν\ 1! Ху х°О
χ^· -Νχ
353 / \ ^Ν ++++ 454,5 455,3
у-Ν \
0
Рацемическая смесь
Η н /О)
Ν-^χ- Ν\ ]| Ху -Νγ°\χ
354 χ· -Νχ ^Ν ++++ 454,5 455,3
ζ \
Ν ъ
/ Рацемическая смесь
Рацемическая
Η Ν-^- ν'/1 'X χ°Ο
355 ^Νν> ^•Ν ++++ 455,5 456,3
Ν // ^-Ν \
Ο χ смесь <
Рацемическая
Η ΝΧ Ху .....Ο
356 Ν>Λ г| ++++ 477,6 478,3
η ^~Ν ™
Ο
смесь \
Η
Ν-νΧ Μ^Ο XX
Νχ 11 хкАД
357 Γ ++++ 388,5 389,2
ο
Η Νχ Ху Η ,Ν, Λ)
Έ ]Ι „I ту
358 ό Ν7 / +++ 387,5 388,2
- 75 032196
359 Л°Д и Ь Рацемическая смесь +++ 508,6 509,3
360 Н н \а +++ 463,6 464,3
361 %.-:;Ον° Ό уШл нХ Л7 ( / 'СЕз До +++ 514,5 515,3
362 Рацемическая Ν-^^Ν^ΰθ мД I -г V) О Лр Ν\ \ смесь Р ++++ 488,5 489,2
363 н Н п ν Ύ Т Т У~ ОД) Ν·-\ ++++ 466,6 467,3
364 Ν^χχΝχ° Д^дод 1\Ц // ΟΝ οχ ++++ 466,5 467,3
365 Νλ I ζΐ ί у^ од Ν 1/ ΟΝ °χ +++ 469,5 470,3
366 Ν-γΑγ°θ ν. Д 1 ί ? ΑΑ, ^~Ν У Рацемическая смесь ++++ 463,5 464,2
367 Η н Дд° У Τ Τ уМОД уы А +++ 465,5 466,3
368 ΛΑ рд^ОД уи οχ +++ 468,6 469,3
369 Н И Ν^νν Р ЛсУ Дм 0 ++ 504,5 505,4
370 уд Л- +++ + 465,5 466,4
371 Уду од чУ1 У Г Ев N Д +++ 382,5 383,2
372 ΝγρΧγ0 уХХСО \-Д +++ + 369,4 370,2
- 76 032196
- 77 032196
386 Н N. Ν-5. Н /' 'νΝΤ° - . Υ*' Υ / Р Р 502,2 503,3
Н Ν..,/ N Н /Г'
387 1 ; '-· N 520,2 521,2
СР3
Рацемическая смесь
н N N 1 н У ' N.. О
388 / у 464,6 465,3
'Ν-'’. ь
Рацемическая смесь
Н N.. Н ф N ,ОС
389 Ν, Ό-- ДАМ 1 'Ν 478,6 479,3
Ν-\
Рацемическая смесь
Пример 18. Иммуно-ферментный анализ (ЕЫ8Л) фосфо-р90 К8К с использованием А375 (ВгаГ У600Е) клеток.
В день 1 А375 клетки (клеточная линия меланомы с ВгаГ У600Е мутацией) выращивали до около 80% конфлюентности, трипсинизировали. высевали при 50000 клеток на лунку в 100 мкл полной питательной среды (10% ЕВ8 в ЭМЕМ) в 96-луночный планшет. Клетки инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение ночи перед обработкой. При подготовке для анализа ЕЫ8А планшет с предварительно нанесенным козлиным антимышиным антителом (Тйегто 8с1еп11Г1с) обрабатывали мышиным античеловеческим К8К1 антителом (моноклональное, 1пУ11годеп) при 1:800 разведении (150 нг/лунка) в РВ8, планшет помещали на устройство для встряхивания планшетов при 4°С в течение ночи. В день 3 соединения сначала разбавляли с получением 1:3 разведений в 100% ЭМ8О при 250Х желаемой концентрации, затем снова разбавляли (1:50) в 10% ЭМЕМ питательной среде. Разбавленные соединения добавляли в содержащий клетки планшет (25 мкл для 5Х разведения) и клетки обрабатывали соединениями (0,4% ЭМ8О в 10% ЕВ8 ЭМЕМ) в течение 2 ч при 37°С в атмосфере 5% СО2. В лунки с контрольными клетками добавляли только носитель (0,4% 1)М8О в 10% ЕВ8 ЭМЕМ). Каждую концентрацию соединений испытывали в двух повторах. Через 2 ч после обработки соединением супернатант удаляли из содержащего клетки планшета, клетки лизировали в 100 мкл/лунка клеточного лизисного буфера (Се11 81дпа11пд ТесЬпо1од1е8), содержащего ингибиторы фосфатазы и протеазы (Се11 81дпа1тд ТесЬпо1од1е8), на устройстве для встряхивания планшетов при 4°С в течение 20 мин. ЕЫ8А планшет промывали четыре раза промывочным буфером ЕЫ8А (Тйегто 8сзеп11Г1с) перед добавлением 100 мкл клеточного лизата. Лизат инкубировали на ЕЫ8А планшете при осторожном встряхивании при комнатной температуре в течение 2 ч. Содержимое лунок удаляли и ЕЫ8А планшет промывали четыре раза промывочным буфером, инкубировали с 100 мкл/лунка антифосфо-К8К1 (ТЬг359/8ег363) кроличьего моноклонального антитела (М1111роге) при разведении 1:1000 в 8!агГтдВ1оск буфере (Тйегто 8с1епйГ1с) на устройстве для встряхивания планшетов при комнатной температуре в течение 1 ч. Содержимое лунок удаляли и ЕЫ8А планшет промывали четыре раза промывочным буфером, инкубировали с 100 мкл/лунка козлиного антикроличьего НКР (Тйегто 8с1еп11Г1с) при разведении 1:3000 в 8ГайтдВ1оск буфере (Тйегто 8с1еп11Г1с) на устройстве для встряхивания планшетов при комнатной температуре в течение 1 ч. Содержимое лунок удаляли и ЕЫ8А планшет промывали четыре раза промывочным буфером, затем инкубировали с 100 мкл/лунка раствора ТМВ субстрата (Тйегто 8с1еп11Г1с) на устройстве для встряхивания планшетов при комнатной температуре в течение 20 мин. В завершение 100 мкл ТМВ стоп-раствора (Тйегто 8с1еп11Г1с) добавляли в каждую лунку и поглощение измеряли при 450 нм на планшет-ридере Тесап. Одно или несколько соединений, раскрытых в настоящей заявке, продемонстрировали ЕС50 меньше чем 50 нМ при испытании в этом анализе (см. чертеж).
Пример 19. Анализ пролиферации опухолевой клеточной линии.
Способность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению ингибировать пролиферацию опухолевой клеточной линии определяли в соответствии со стандартными процедурами, известными в данной области техники. Например, осуществляли ш νίΐΐΌ анализ клеточной пролиферации для измерения метаболической активности живых клеток. Опухолевые клеточные линии А375, АМ-2664 или клетки НСТ116 (АТСС) выращивали до около 80% конфлюентности, трипсинизировали и высевали при 1500 клеток/лунка в объеме 100 на лунку в полной питательной среде (10% ЕВ8 в ЭМЕМ или
- 78 032196
10% РВ8 в КРМ1) в 96-луночный планшет.
Клетки инкубировали при 37°С в атмосфере 5% СО2 в течение 2 ч для обеспечения их адгезии к планшетам. Соединения сначала разбавляли с получением 1:3 разведений в 100% ЭМ8О при 250Х желаемой концентрации, затем снова разбавляли (1:50) в 10% ЭМЕМ питательной среде. Разбавленные соединения добавляли в содержащий клетки планшет (25 мкл для 5Х разведения) и клетки обрабатывали соединениями (0,4% ЭМ8О в 10% РВ8 ЭМЕМ) в течение 2 ч при 37°С в атмосфере 5% СО2. В лунки с контрольными клетками добавляли только носитель (0,4% ЭМ8О в 10% РВ8 ЭМЕМ или в 10% РВ8 КРМ1). Каждую концентрацию соединений испытывали в двух повторах. Через 96 ч после обработки соединением добавляли СеПТйег 61о реагент (Рготеда) при 1:5 разведении в каждую лунку содержащего клетки планшета и содержащий клетки планшет помещали в условия комнатной температуры на 30 мин. Люминесценцию лунок определяли с использованием планшет-ридера Тесап. Одно или несколько соединений, раскрытых в настоящей заявке, при испытании в этом анализе продемонстрировали 1С5() меньше чем 80 нМ в А375 клетках, 1С50 меньше чем 50 нМ в НСТ1116 клетках и 1С50 меньше чем 110 нМ в Н358 клетках (см. чертеж).
Таблица 2 1п уЧго 1С50 данные для выбранных соединений по настоящему изобретению (номера соединений соответствуют тем, которые указаны в табл. 1)
250 нМ или меньше (+++) От 250 нМ до 1000 нМ (++) Больше чем 1000 нМ (+)
Клеточный 1, 2, 3, 4, 6, 5, 915, 17, 20, 32, 33,
фосфо-р90В8К 7, 8, 10, И, 19/ 21, 27, 34, 40, 42,
1С50 (нМ) 12, 13, 14, 16, 36, 38, 39, 43, 46, 51,
18, 22, 23, 26, 44, 45, 47, 54, 59, 60,
30, 31, 35, 37, 48, 49, 53, 61/ 67, 83,
41, 50, 55, 57, 56, 62, 66, 117, 128, 131,
58, 63, 64, 68, 70, 95, 97, 133, 151, 157,
71, 72, 75, 76, 100, 110, 111/ 160, 164, 166,
77, 78, 84, 86, 114, 115, 124, 167, 171, 173,
88, 90, 92, 99, 125, 127, 129, 189, 201, 202,
101 102, 103, 136, 137, 138, 206, 208, 210,
104 118, 120, 139, 145, 149, 235, 236, 247,
121 122, 123, 152, 155, 159, 255, 256, 260,
126 132, 134, 168, 169, 170, 263, 265, 268,
140 141, 142, 172, 175, 176, 283, 296, 303,
143 144, 146, 177, 182, 183, 314, 317, 327,
147 148, 150, 186, 191, 192, 329, 335, 343,
153 154, 156, 194, 195, 203, 350, 358, 363,
158 161, 162, 204, 207, 209, 365, 383, 385
163 165, 174, 215, 218, 219,
178 179, 180, 221, 223, 230,
181 184, 185, 232, 257, 287,
187 188, 190, 289, 307, 309,
193 196, 197, 310, 313, 315,
199 200, 205, 319, 322, 331,
211 212, 213, 351, 355, 359,
214 216, 217, 360, 367, 371,
220 222, 224, 373, 387
225 226, 227,
228 229, 231,
233 234, 237,
- 79 032196
238, 239, 240, 241, 242, 243, 244, 245, 246, 248, 249, 250, 251, 252, 253, 254, 258, 259, 261, 262, 264, 266, 267, 269, 270, 271, 272, 273, 274, 275, 276, 277, 278, 279, 280, 281, 284, 285, 286, 288, 290, 291, 292, 293, 294, 295, 297, 298, 299, 300, 301, 302, 304, 305, 306, 308, 311, 312, 316, 318, 320, 321, 323, 324, 325, 326, 328, 330, 332, 333, 334, 336, 338, 339, 340, 341, 342, 344, 345, 346, 347, 348, 349, 352, 353, 354, 356, 357, 361, 362, 364, 366, 370, 372, 380, 384, 386
А375 (У599Е) клеточная 1, з, 4, 22, 63, 64, 68, 77, 2, 6, 7, 8, 10, 11, 12, 5, 9, 15, 17, 19, 20, 24,
пролиферация 1С50 (нМ) 84, 101, 102, 103, 104, 134, 143, 144, 146, 148, 149, 151, 153, 154, 156, 158, 162, 165, 181, 184, 185, 187, 190, 196, 197, 212, 213, 214, 225, 237, 239, 240, 241, 243, 244, 245, 248, 251, 252, 254, 264, 267, 269, 270, 271, 272, 273, 275, 278, 279, 280, 281, 284, 285, 288, 291, 292, 293, 304, 305, 306, 316, 318, 324, 325, 326, 332, 333, 338, 339, 357, 362, 364 13, 14, 16, 18, 21, 23, 26, 30, 31, 35, 36, 37, 41, 92, 99, 120, 123, 132, 136, 138 , 139 , 140, 141, 147, 161, 163, 174, 178, 179, 180, 193, 199, 200, 204, 205, 211, 216, 221, 222, 224, 226, 227, 228, 229, 231, 234, 242, 301, 308, 311, 320, 321, 323, 328, 330, 331, 27, 32, 33, 34, 39, 47, 49, 201, 202, 257, 317, 366
Н358 (Кгаз, <312С) клеточная пролиферация 1С50 (нМ) 1, 35, 63, 64, 84, 101, 102, 103, 143, 144, 146, 147, 165, 174, 181, 196, 197, 214 30, 31, 36, 37, 39, 41, 68, 77, 99, 120, 123, 132, 134, 139, 140, 141, 161, 163, 178, 179, 180, 190, 193, 199, 200, 205, 221, 222 26, 27, 32, 33, 34, 47, 49, 136, 138, 201, 202, 204
ΉΜ-266-4 1, з, 4, 7, 8, 2, 5, 6, 9, 15, 17, 19,
(У599Э) 10, 11, 12, 22 13, 14, 16, 20, 23, 24
клеточная 18, 21
пролиферация
1С50 (нМ)
Пример 20. Анализ стабильности с использованием микросом.
Стабильность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению определяли в соответствии со стандартными процедурами, известными в данной области техники. Например, стабильность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению устанавливали при помощи ίη νίίτο анализа. В частности, осуществляли ίη νίίτο анализ стабильности с использованием микросом, который измеряет стабильность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению при взаимодействии с мышиными, крысинами или человеческими микросомами из печени. Реакцию микросом с соединениями осуществляли в 1,5 мл пробирке Эппендорфа. Каждая пробирка содержала 0,1 мкл 10,0 мг/мл НАЭРН; 75 мкл 20,0 мг/мл микросом печени мыши, крысы или человека; 0,4 мкл 0,2 М фосфатного буфера, 425 мкл 44Н2О. Пробирка с отрицательным контролем (без КАЭРН) содержала 75 мкл 20,0 мг/мл микросом печени мыши, крысы или человека; 0,4 мкл 0,2 М фосфатного буфера и 525 мкл 44Н2О. Реакцию начинали путем добавления 1,0 мкл 10,0 мМ испытываемого соединения. Реакционные пробирки инкубировали при 37°С. 100 мкл образца собирали в новую пробирку Эппендорфа, содержащую 300 мкл холодного метанола, через 0, 5, 10, 15, 30 и 60 мин реакции. Образцы центрифугировали при 15000 об/мин для удаления белка. Супернатант после центрифугирования образца переносили в новую пробирку. Концентрацию стабильного соединения после реакции с микросомами в супернатанте измеряли при помощи жидкостой хроматографии/масс-спектрометрии (ЖХ-МС).
Стабильность в микросомах одного или нескольких соединений по настоящему изобретению, определенная в этих условиях, представленная как Т1/2 (мин), была в пределах, требуемых для клинических исследований.
Пример 21. Анализ стабильности в плазме.
Стабильность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению в плазме определяли в соответствии со стандартными процедурами, известными в данной области техники. См., например, Кар1б ΟοΜίη. Ма§5 8рес1гот., 10: 1019-1026. Следующая процедура представляет собой ВЭЖХМС/МС анализ с использованием человеческой плазмы; другие виды, включая обезьяну, собаку, крысу и мышь, также можно использовать. Замороженную гепаринизированную человеческую плазму оттаивали на бане с холодной водой и центрифугировали в течение 10 мин при 2000 об/мин при 4°С перед использованием. Соединение по настоящему изобретению добавляли из 400 мкМ исходного раствора к аликвоте предварительно отогретой плазмы для получения конечного объема для анализа 400 мкл (или 800 мкл для определения времени полужизни), содержащего 5 мкМ испытываемого соединения и 0,5% ЭМ8О. Реакции инкубировали при встряхивании в течение 0 мин и 60 мин при 37°С или в течение 0, 15, 30, 45 и 60 мин при 37°С для определения времени полужизни. Реакции останавливали путем переноса 50 мкл инкубационной смеси в 200 мкл охлажденного льдом ацетонитрила и смешивали путем встряхивании в течение 5 мин. Образцы центрифугировали при 6000хд в течение 15 мин при 4°С и 120 мкл супернатанта забирали в чистые пробирки. Образцы затем упаривали досуха и подвергали анализу ВЭЖХ-МС/МС.
Где это требуется, одно или несколько контрольных или эталонных соединений (5 мкМ) испытывали одновременно с испытываемыми соединениями: одно соединение, пропоксикаин, с низкой стабильностью в плазме и другое соединение, пропантелин, со средней стабильностью в плазме.
Образцы восстанавливали в смеси ацетонитрил/метанол/вода (1/1/2, об/об/об) и анализировали методом (ОФ)ВЭЖХ-МС/МС с использованием контроля селективных реакций (8КМ). ВЭЖХ условия включали бинарный ЖХ насос с автоматическим пробоотборником, смешанный режим, колонку С12, 2х20 мм и программу градиента. Площади пиков, соответствующие аналитам, регистрировали при помощи ВЭЖХ-МС/МС. Количество исходного соединения, остающееся через 60 мин, относительно количества, остающегося на время ноль, выраженное в виде процента, представляли как стабильность в плазме. В случае определения времени полужизни время полужизни определяли из угла наклона исходного линейного диапазона логарифмической кривой оставшегося соединения (%) против времени, предполагая кинетику первого порядка.
Пример 22. Анализ химической стабильности.
Химическую стабильность одного или нескольких соединений по настоящему изобретению определяли в соответствии со стандартными процедурами, известными в данной области техники. Далее подробно описана иллюстративная процедура для определения химической стабильности соединения по настоящему изобретению. Стандартный буфер, используемый для анализа химической стабильности, представлял собой фосфатно-буферный солевой раствор (РВ8) при рН 7,4; можно использовать другие подходящие буферы. Соединение по настоящему изобретению добавляли из 100 мкМ исходного раствора к аликвоте РВ8 (в двух повторах) для получения конечного анализируемого объема 400 мкл, содержащего 5 мкМ испытываемого соединения и 1% ЭМ8О (для определения времени полужизни получали
- 81 032196 общий объем образца 700 мкл). Реакции инкубировали при встряхивании в течение 0 мин и 24 ч при 37°С; для определения времени полужизни образцы инкубировали в течение 0, 2, 4, 6, 24 ч. Реакции останавливали путем немедленного добавления 100 мкл инкубационной смеси к 100 мкл ацетонитрила и интенсивного перемешивания в течение 5 мин. Образцы затем хранили при -20°С до анализа ВЭЖХМС/МС. Где это требуется, контрольное соединение или эталонное соединение, такое как хлорамбуцил (5 мкМ), испытывали одновременно с соединением по настоящему изобретению, представляющим интерес, поскольку такое соединение в основном гидролизуется в течение 24 ч. Образцы анализировали методом (ОФ)ВЭЖХ-МС/МС с использованием контроля селективных реакций (3КМ). ВЭЖХ условия включали бинарный ЖХ насос с автоматическим пробоотборником, смешанный режим, колонку С12, 2х20 мм и программу градиента. Площади пиков, соответствующие аналитам, регистрировали при помощи ВЭЖХ-МС/МС. Количество исходного соединения, оставшееся через 24 ч, относительно количества, остающегося на время ноль, выраженное в виде процента, представляли как химическую стабильность. В случае определения времени полужизни время полужизни определяли из угла наклона исходного линейного диапазона логарифмической кривой оставшегося соединения (%) против времени, предполагая кинетику первого порядка.
Пример 23. Фармакокинетический анализ с использованием грызунов.
Для исследования фармакокинетики соединений по настоящему изобретению соединения растворяли в подходящем носителе (например, 5% 1-метил-2-пирролидинона, 85% полиэтиленгликоля 400, 10% 8о1и1ог) и вводили перорально группе 4-10-недельных мышей с 12-часовыми интервалами ежедневно. Всех животных умерщвляли в СО2 через 2 ч после конечного введения соединения. Кровь собирали сразу же и хранили на льду для отделения плазмы. Плазму выделяли путем центрифугирования при 5000 об/мин в течение 10 мин. Собранную плазму замораживали для определения фармакокинетических свойств.
Альтернативно, осуществляли неотложное введение соединений (например, один раз) и через некоторое время (например, около 0, 30 с, 1 мин, 5, 10, 20, 30 мин, 1 ч, 2, 3, 5, 8, 10, 12 ч, 1 день, 2 дня и т.д.), кровь собирали и анализировали, как описано ниже.
Результаты, как ожидается, демонстрируют фармакокинетические параметры, такие как абсорбция, дистрибуция, метаболизм, экскреция, токсичность, для соединений по настоящему изобретению.
Пример 24. Ингибирование роста опухоли ίη νίνο.
Клеточные линии: человеческие раковые клеточные линии с А375 (мутант В-Ка£ ν600Ε), ЬОХ (мутант В-Ка£ ν600Ε) и Со1о-205(мутант В-Ка£ ν600Ε), ΡΑΝΟ-1 (мутант К-Как 612Ό), М1аРаса-2 (мутант ККак С12С), НСТ116 (мутант К-Как 613Ό), Н441 (мутант К-Как Ο12ν), Н23 (мутант К-Как С12С), МИАМВ-231 (мутант К-Как 613Ό) и 631034 (мутант Ν-Как) получали от АТСС. Клетки поддерживали в клеточной культуре в среде, рекомендованной АТСС, при 37°С в 5% СО2/воздух. Клетки собирали в экспоненциальной фазе роста.
Животные: 5-7-недельных самок Ьа1Ь/с бестимусных, СВ17.3СГО (тяжелый комбинированный иммунодефицит) или ЗСГО/с врожденным отсутствием естественных клеток-киллеров мышей получали от Сйаг1ек ККег ЬаЬога1опек. Животные содержались в клетках одноразового использования и индивидуально проветриваемых, находящихся в 3РЕ помещениях или изолированных помещениях, в стерильных непатогенных условиях. Животным давали стандартный корм в виде стерилизованных сухих гранул, и они имели свободный доступ к стерильной воде. Все исследования были одобрены Комитетом по содержанию и использованию лабораторных животных ΕχρΕιπ Вю1аЬк, где осуществляют исследования, и исследования осуществляли в соответствии с требованиями Комитета по содержанию и использованию лабораторных животных \Уе118рппд Вюкаепсек и в соответствии с инструкциями по содержанию и использованию лабораторных животных (1996).
Модель ксенотрансплантата опухоли: мышам возраста 7-9-недель подкожно вводили прививку (25х106 клеток в РВ3 или смеси РВ8:Ма!пде1) в правый бок. Массу тела животных измеряли 3 раза/неделя до начала лечения, с этого времени массу тела измеряли ежедневно перед введением средства. Размеры опухолей измеряли 2-3 раза/неделя с использованием циркуля. Объем опухоли рассчитывали с использованием формулы I (ЬхХ)/2, где Ь представляет собой длину опухоли и представляет собой ширину опухоли соответственно. Типично, введение начинают, когда средний размер составляет 100 мм3. Мышей рандомизированно распределяли по группам испытания (п=9-10/группа). Соединения формулировали в РВ3, ПЭГ300 (полиэтиленгликоль) или СМС/Н2О (карбоксиметилцеллюлоза) и вводили животным в соответствии с массой тела (5 мкл/мг) перорально ежедневно один или два раза в день. Животных умерщвляли, когда опухоли в контрольной группе введения носителя достигали объема 2000 мм3. Для люцифераза-трансфицированных моделей опухоли, жизнеспособность опухоли контролировали 2-3 раза/неделя с использованием Хеподеп ΐνΐδ® 200.
Данные и статистический анализ: ингибирование роста опухоли (ТС1) рассчитывали как [1-(ТТ0)/(С-С0)]/100, где Т и Т0 представляют собой средние объемы опухоли для группы обработки в конкретный день эксперимента и в первый день обработки, соответственно, для экспериментальных групп; С и С0 представляют собой средние объемы опухоли для контрольной группы.
- 82 032196
Данные выражали как среднее значение ± 8ЕМ (стандартная ошибка среднего). Статистическую значимость в средних значениях определяли при помощи АЫОУА (дисперсионный анализ) с использованием апостериорного критерия множественных сравнений Даннетта (СгарйРаб Рплп®) или критерия Тьюки (8Р88 16.0). Р-значение <0,05 считается статистически значимым.

Claims (25)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы 11-Е или его фармацевтически приемлемая соль;
    где К1 представляет собой 3-6-членный гетероциклил, -С1-10алкил-(3-6-членный гетероциклил), -(36-членный гетероциклил)-С1-10алкнл, -(3-6-членный гетероциклил)-С6-10арил или -(3-6-членный гетероциклил)-С1-10гетарил, каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К10 или К11 заместителями;
    К21 представляет собой -Ь^^гетероалкил, -Ь-С6-10арил, -Ь-С1-10гетарил, -Ь-С^щиклоалкил или -ЬС1-10гетероциклил, каждый из которых является незамещенным или замещен одним или несколькими независимыми К12 заместителями;
    Ь представляет собой связь;
    К72 представляет собой водород;
    К10 представляет собой -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С6-10арил, -С1-10 гетарил, -С3-10циклоалкил или -С1-10гетероциклил, каждый из которых незамещен или замещен одним или несколькими независимыми К11 заместителями;
    К11 и К12 независимо представляют собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С6-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил, -С1-10гетероциклил, -ОН, -СР3, -ОСР3, -ОК31, -ЫК31К32, -С(О)К31, -СО2К31, -С(=О)ЫК31, -ЫО2, -СЫ, -8(О)0-2К31, -8О2ЫК31К32, -ЫК31С(=О)К32, -ЫК31С(=О)ОК32, ЫК31С(=О)ЫК32К33, -ЫК318(О)0-2К32, -С(=8)ОК31, -С(=О)8К31, ЫК31С(=ЫК32)ЫК32К33, -ЫК31С(=ЫК32)ОК33, -ЫК31С(=ЫК32)8К33, -ОС(=О)ОК33, -ОС(=О)ЫК31К32, -ОС(=О)8К31, -8С(=О)8К31, -Р(О)ОК31ОК32 или 8С(=О)ЫК31ЫК32; и
    31 32 33 каждый из К , К и К независимо представляет собой водород, галоген, -С1-10алкил, -С2-10алкенил, -С2-10алкинил, -С1-10гетероалкил, -С6-10арил, -С1-10гетарил, -С3-10циклоалкил или -С1-10гетероциклил, или К31 вместе с К32 образуют гетероциклическое кольцо;
    где каждый гетероалкил содержит по крайней мере один гетероатом, выбранный из группы, состоящей из О, Ν, Р, 81 и 8;
    каждый гетарил содержит один или более кольцевых гетероатомов, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8;
    каждый гетероциклил содержит один, два или три кольцевых гетероатома, выбранных из группы, состоящей из Ν, О и 8.
  2. 2. Соединение по п.1, где К21 представляет собой -Ь-С1-10гетарил, незамещенный или замещенный одним или несколькими независимыми К12 заместителями; и где Ь представляет собой связь.
  3. 3. Соединение по п.2, где С1-10гетарил из К21 включает один или несколько атомов азота.
  4. 4. Соединение по п.3, где С1-10гетарил из К21 выбран из группы, состоящей из пиразолила, пиридинила, пиразинила, пиримидинила, пиридазинила.
  5. 5. Соединение по п.4, где С1-10гетарил из К21 является незамещенным.
  6. 6. Соединение по п.4, где С1-10гетарил из К21 замещен одним, двумя или тремя независимыми К12 заместителями.
  7. 7. Соединение по любому из пп.2-4 или 6, где каждый К12 заместитель независимо выбран из группы, состоящей из -С1-10алкила, -С2-10алкенила, -С2-10алкинила, -С1-10гетероалкила, -С6-10арила, -С1-10гетарила, -С3-10циклоалкила, -С1-10гетероциклила, -ОН, -СР3, -ОСР3, -ОК31; где каждый К31 независимо представляет собой водород или -С1-10алкил.
  8. 8. Соединение по п.7, где каждый К12 заместитель независимо выбран из группы, состоящей из -Ме, -Е!, -ί-Рг, -п-Рг, ОН, -ОМе, -ОЕ! и -ОРг.
  9. 9. Соединение по любому из пп.1-8, где К1 представляет собой
    - 83 032196 или каждый из которых незамещен или замещен одним или несколькими независимыми Кю или Иц заместителями.
  10. 10. Способ ингибирования активности протеинкиназы, присутствующей в клетке, включающий контактирование указанной клетки с эффективным количеством соединения по любому из предшествующих пунктов.
  11. 11. Способ по п.10, где протеинкиназа представляет собой ЕКК.
  12. 12. Способ по п.10, где соединение ингибирует ЕКК при 1С50 значении меньше чем около 1000 нМ.
  13. 13. Способ по п.10, где соединение ингибирует ЕКК при 1С50 значении меньше чем около 100 нМ.
  14. 14. Способ по п.10, где соединение ингибирует ЕКК при 1С50 значении меньше чем около 10 нМ.
  15. 15. Способ по п.10, где стадия контактирования имеет место ίη νίίτο.
  16. 16. Способ по п.10, где стадия контактирования имеет место ίη νίνο.
  17. 17. Способ уменьшения тяжести расстройства, включающий введение субъекту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по любому из пп.1-9, где расстройство выбрано из группы, состоящей из рака, поражения костей, воспалительного заболевания, иммунного заболевания, заболевания нервной системы, метаболического заболевания, респираторного заболевания и сердечного заболе вания.
  18. 18. Способ по п.17, где расстройство представляет собой рак, выбранный из группы, состоящей из рака молочной железы, рака поджелудочной железы, немелкоклеточного рака легкого (^СЬС), рака щитовидной железы, семином, меланомы, рака мочевого пузыря, рака печени, рака почки, миелодиспластического синдрома (МО8), острого миелогенного лейкоза (АМЬ) и колоректального рака.
  19. 19. Способ по п.18, где рак представляет собой меланому или колоректальный рак.
  20. 20. Способ по п.17, где расстройство опосредовано ЕКК1 и/или ЕКК2.
  21. 21. Фармацевтическая композиция, обладающая способностью ингибировать ЕКК, включающая эффективное количество соединения по любому из пп.1-9 и фармацевтически приемлемый эксципиент.
  22. 22. Фармацевтическая композиция по п.21, где соединение присутствует в терапевтически эффек тивном количестве.
  23. 23. Фармацевтическая композиция по п.21, где указанная композиция сформулирована в виде лекарственной формы для перорального введения.
  24. 24. Фармацевтическая композиция по п.21, где указанная композиция сформулирована в виде таб летки или капсулы.
  25. 25. Соединение по п.1, выбранное из
    - 84 032196
    - 85 032196
    - 86 032196
    - 87 032196
    - 88 032196
    - 89 032196
EA201690708A 2013-10-03 2014-10-03 Ингибиторы erk и способы применения EA032196B1 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361886552P 2013-10-03 2013-10-03
US201462032446P 2014-08-01 2014-08-01
PCT/US2014/059197 WO2015051341A1 (en) 2013-10-03 2014-10-03 Inhibitors of erk and methods of use

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201690708A1 EA201690708A1 (ru) 2016-12-30
EA032196B1 true EA032196B1 (ru) 2019-04-30

Family

ID=52779215

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201690708A EA032196B1 (ru) 2013-10-03 2014-10-03 Ингибиторы erk и способы применения

Country Status (27)

Country Link
US (4) US9624228B2 (ru)
EP (2) EP3052096B8 (ru)
JP (2) JP6427197B2 (ru)
KR (1) KR20160081908A (ru)
CN (2) CN108864102A (ru)
AU (2) AU2014331628B2 (ru)
BR (1) BR112016006994A8 (ru)
CA (1) CA2924584A1 (ru)
CY (1) CY1120095T1 (ru)
DK (1) DK3052096T3 (ru)
EA (1) EA032196B1 (ru)
ES (1) ES2664794T3 (ru)
HK (1) HK1255851A1 (ru)
HR (1) HRP20180538T1 (ru)
HU (1) HUE036600T2 (ru)
IL (1) IL244488A0 (ru)
LT (1) LT3052096T (ru)
ME (1) ME02991B (ru)
MX (1) MX2016004163A (ru)
PH (1) PH12016500432B1 (ru)
PL (1) PL3052096T3 (ru)
PT (1) PT3052096T (ru)
RS (1) RS57058B1 (ru)
SG (1) SG11201602572YA (ru)
SI (1) SI3052096T1 (ru)
WO (1) WO2015051341A1 (ru)
ZA (1) ZA201601701B (ru)

Families Citing this family (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SI3052096T1 (en) 2013-10-03 2018-04-30 Kura Oncology, Inc. EAQ inhibitors and application procedures
TW201805000A (zh) * 2016-06-20 2018-02-16 庫拉腫瘤技術股份有限公司 利用erk抑制劑之鱗狀細胞癌之治療
EP3601231B1 (en) 2017-03-28 2023-05-10 Basf Se Pesticidal compounds
WO2019076336A1 (zh) * 2017-10-19 2019-04-25 江苏豪森药业集团有限公司 含吡唑基的三并环类衍生物、其制备方法和应用
CN109761986B (zh) * 2017-11-10 2021-10-08 上海翰森生物医药科技有限公司 三并环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用
CN107879989B (zh) * 2017-11-29 2020-01-03 重庆市中药研究院 具有生物活性的3,4,5-取代苯并二氮卓2-酮类药物分子及其制备方法
EP3643705A1 (en) 2018-10-24 2020-04-29 Basf Se Pesticidal compounds
BR112021009430A2 (pt) * 2018-11-16 2021-08-17 California Institute Of Technology inibidores de erk e usos dos mesmos
WO2020200161A1 (zh) * 2019-04-02 2020-10-08 上海翰森生物医药科技有限公司 含吲唑基的三并环类衍生物的盐及其晶型
EP3766879A1 (en) 2019-07-19 2021-01-20 Basf Se Pesticidal pyrazole derivatives
EP4198023A1 (en) 2021-12-16 2023-06-21 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds
WO2023156402A1 (en) 2022-02-17 2023-08-24 Basf Se Pesticidally active thiosemicarbazone compounds

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3984556A (en) * 1973-01-19 1976-10-05 Sandoz, Inc. Alkyl-substituted-tricyclic quinazolinones for lowering blood pressure
US4042704A (en) * 1976-03-18 1977-08-16 Sandoz, Inc. Benzindazoles
US5116843A (en) * 1987-01-17 1992-05-26 Boehringer Mannheim Gmbh Tricyclic benzimidazole compounds, pharmaceutical compositions and methods of use
US6596726B1 (en) * 1994-01-25 2003-07-22 Warner Lambert Company Tricyclic compounds capable of inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family
US20080227767A1 (en) * 1999-05-24 2008-09-18 Neurochem (International) Limited Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
US20100056800A1 (en) * 2008-08-27 2010-03-04 The Ohio State University Method of synthesizing 1h-indazole compounds
EP2455381A1 (en) * 2009-07-17 2012-05-23 Japan Tobacco, Inc. Triazolopyridine compound, and action thereof as prolyl hydroxylase inhibitor and erythropoietin production inducer
WO2012170845A2 (en) * 2011-06-08 2012-12-13 Heffernan Michele L R Metabotropic glutamate receptor 5 modulators and methods of use thereof

Family Cites Families (60)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3657744A (en) 1970-05-08 1972-04-25 Univ Minnesota Method for fixing prosthetic implants in a living body
BE791816R (fr) 1971-11-24 1973-05-23 Sandoz Sa Derives de la quinazolinone, leur preparation et medicaments contenant ces
US4352931A (en) 1980-05-22 1982-10-05 Siegfried Aktiengesellschaft Lin-benzoaminopurinols
US4733665C2 (en) 1985-11-07 2002-01-29 Expandable Grafts Partnership Expandable intraluminal graft and method and apparatus for implanting an expandable intraluminal graft
US5023252A (en) 1985-12-04 1991-06-11 Conrex Pharmaceutical Corporation Transdermal and trans-membrane delivery of drugs
US5350395A (en) 1986-04-15 1994-09-27 Yock Paul G Angioplasty apparatus facilitating rapid exchanges
US5040548A (en) 1989-06-01 1991-08-20 Yock Paul G Angioplasty mehtod
US5061273A (en) 1989-06-01 1991-10-29 Yock Paul G Angioplasty apparatus facilitating rapid exchanges
US4748982A (en) 1987-01-06 1988-06-07 Advanced Cardiovascular Systems, Inc. Reinforced balloon dilatation catheter with slitted exchange sleeve and method
US5001139A (en) 1987-06-12 1991-03-19 American Cyanamid Company Enchancers for the transdermal flux of nivadipine
US4992445A (en) 1987-06-12 1991-02-12 American Cyanamid Co. Transdermal delivery of pharmaceuticals
CA1322628C (en) 1988-10-04 1993-10-05 Richard A. Schatz Expandable intraluminal graft
GB8827305D0 (en) 1988-11-23 1988-12-29 British Bio Technology Compounds
US5292331A (en) 1989-08-24 1994-03-08 Applied Vascular Engineering, Inc. Endovascular support device
US6344053B1 (en) 1993-12-22 2002-02-05 Medtronic Ave, Inc. Endovascular support device and method
US5674278A (en) 1989-08-24 1997-10-07 Arterial Vascular Engineering, Inc. Endovascular support device
US5455258A (en) 1993-01-06 1995-10-03 Ciba-Geigy Corporation Arylsulfonamido-substituted hydroxamic acids
US5863949A (en) 1995-03-08 1999-01-26 Pfizer Inc Arylsulfonylamino hydroxamic acid derivatives
MX9708026A (es) 1995-04-20 1997-11-29 Pfizer Derivados del acido arislfulfonil hidroxamico, composiciones que los contienen y uso de los mismos.
EP0780386B1 (en) 1995-12-20 2002-10-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Matrix metalloprotease inhibitors
EP0923585B1 (en) 1996-07-18 2002-05-08 Pfizer Inc. Phosphinate based inhibitors of matrix metalloproteases
EA199900139A1 (ru) 1996-08-23 1999-08-26 Пфайзер, Инк. Производные арилсульфониламиногидроксамовой кислоты
ATE272640T1 (de) 1997-01-06 2004-08-15 Pfizer Cyclische sulfonderivate
JP3765584B2 (ja) 1997-02-03 2006-04-12 ファイザー・プロダクツ・インク アリールスルホニルアミノヒドロキサム酸誘導体
BR9807824A (pt) 1997-02-07 2000-03-08 Pfizer Derivados de n-hidróxi-beta-sulfonil-propionamida e seu uso como inibidores de metaloproteinases de matriz
IL131123A0 (en) 1997-02-11 2001-01-28 Pfizer Arylsulfonyl hydroxamic acid derivatives
GB9725782D0 (en) 1997-12-05 1998-02-04 Pfizer Ltd Therapeutic agents
GB9801690D0 (en) 1998-01-27 1998-03-25 Pfizer Ltd Therapeutic agents
PA8469401A1 (es) 1998-04-10 2000-05-24 Pfizer Prod Inc Derivados biciclicos del acido hidroxamico
PA8469501A1 (es) 1998-04-10 2000-09-29 Pfizer Prod Inc Hidroxamidas del acido (4-arilsulfonilamino)-tetrahidropiran-4-carboxilico
US6087368A (en) 1998-06-08 2000-07-11 Bristol-Myers Squibb Company Quinazolinone inhibitors of cGMP phosphodiesterase
EP1317452B1 (en) 2000-09-15 2006-05-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole compounds useful as protein kinase inhibitors
JP3896309B2 (ja) * 2001-07-09 2007-03-22 ファイザー株式会社 プロテインキナーゼｃ阻害物質としてのピラゾロキノリノン誘導体
US7119111B2 (en) 2002-05-29 2006-10-10 Amgen, Inc. 2-oxo-1,3,4-trihydroquinazolinyl derivatives and methods of use
TWI339206B (en) 2003-09-04 2011-03-21 Vertex Pharma Compositions useful as inhibitors of protein kinases
WO2005025515A2 (en) * 2003-09-12 2005-03-24 California Institute Of Technology Proteasome pathway inhibitors and related methods
US7244757B2 (en) 2004-04-01 2007-07-17 Pfizer Inc Pyrazole-amine compounds for the treatment of neurodegenerative disorders
US7384930B2 (en) 2004-11-03 2008-06-10 Bristol-Myers Squibb Company Constrained compounds as CGRP-receptor antagonists
DE602007009932D1 (de) 2006-02-16 2010-12-02 Schering Corp Pyrrolidin-derivate als erk-hemmer
MY148609A (en) 2007-06-05 2013-05-15 Merck Sharp & Dohme Polycyclic indazole derivatives and their use as erk inhibitors for the treatment of cancer
US20110038876A1 (en) * 2007-06-18 2011-02-17 Robert Sun Heterocyclic compounds and use thereof as erk inhibitors
CN104193741B (zh) 2007-10-01 2016-08-24 阿尔法梅根有限责任公司 作为α7-烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环-4-基甲基1H-吲哚-3-甲酸酯衍生物
US8716483B2 (en) 2008-02-21 2014-05-06 Merck Sharp & Dohme Corp. Compounds that are ERK inhibitors
EP2408448A4 (en) 2009-03-18 2012-09-19 Univ Leland Stanford Junior METHOD AND COMPOSITIONS FOR TREATING FLAVIVIRIDAE VIRUS INFECTIONS
WO2011041152A1 (en) 2009-09-30 2011-04-07 Schering Corporation Novel compounds that are erk inhibitors
EP2613782B1 (en) 2010-09-01 2016-11-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Indazole derivatives useful as erk inhibitors
EP2615916B1 (en) 2010-09-16 2017-01-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused pyrazole derivatives as novel erk inhibitors
WO2012058127A2 (en) 2010-10-29 2012-05-03 Schering Corporation Novel compounds that are erk inhibitors
WO2012087772A1 (en) 2010-12-21 2012-06-28 Schering Corporation Indazole derivatives useful as erk inhibitors
WO2013063214A1 (en) 2011-10-27 2013-05-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds that are erk inhibitors
CA2882950A1 (en) 2012-09-28 2014-04-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds that are erk inhibitors
EP2900223B1 (en) 2012-09-28 2017-10-25 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds that are erk inhibitors
WO2014134772A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Compounds inhibiting leucine-rich repeat kinase enzyme activity
EP2991654B1 (en) 2013-04-30 2018-11-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel compounds that are erk inhibitors
SI3052096T1 (en) 2013-10-03 2018-04-30 Kura Oncology, Inc. EAQ inhibitors and application procedures
WO2016095089A1 (en) 2014-12-15 2016-06-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Erk inhibitors
WO2016095088A1 (en) 2014-12-15 2016-06-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Erk inhibitors
WO2016100147A1 (en) 2014-12-18 2016-06-23 Merck Sharp & Dohme Corp. (s)-n-(3-(6-isopropoxypyridin-3-yl)-1h-indazol-5-yl)-1-(2-(4-(4-(1-methyl-1h-1,2,4-triazol-3-yl)phenyl)-3,6-dihydropyridin-1(2h)-yl)-2-oxoethyl)-3- (methylthio)pyrrolidine-3-carboxamide compositions for pharmaceutical preparations
KR20170094795A (ko) 2014-12-19 2017-08-21 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 제약 제제용 (s)-n-(3-(6-이소프로폭시피리딘-3-일)-1h-인다졸-5-일)-1-(2-(4-(4-(1-메틸-1h-1,2,4-트리아졸-3-일)페닐)-3,6-디히드로피리딘-1(2h)-일)-2-옥소에틸)-3-(메틸티오)피롤리딘-3-카르복사미드 조성물
TWI704151B (zh) 2014-12-22 2020-09-11 美商美國禮來大藥廠 Ｅｒｋ抑制劑

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3984556A (en) * 1973-01-19 1976-10-05 Sandoz, Inc. Alkyl-substituted-tricyclic quinazolinones for lowering blood pressure
US4042704A (en) * 1976-03-18 1977-08-16 Sandoz, Inc. Benzindazoles
US5116843A (en) * 1987-01-17 1992-05-26 Boehringer Mannheim Gmbh Tricyclic benzimidazole compounds, pharmaceutical compositions and methods of use
US6596726B1 (en) * 1994-01-25 2003-07-22 Warner Lambert Company Tricyclic compounds capable of inhibiting tyrosine kinases of the epidermal growth factor receptor family
US20080227767A1 (en) * 1999-05-24 2008-09-18 Neurochem (International) Limited Methods and compounds for inhibiting amyloid deposits
US20100056800A1 (en) * 2008-08-27 2010-03-04 The Ohio State University Method of synthesizing 1h-indazole compounds
EP2455381A1 (en) * 2009-07-17 2012-05-23 Japan Tobacco, Inc. Triazolopyridine compound, and action thereof as prolyl hydroxylase inhibitor and erythropoietin production inducer
WO2012170845A2 (en) * 2011-06-08 2012-12-13 Heffernan Michele L R Metabotropic glutamate receptor 5 modulators and methods of use thereof

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PubChem CID 13481918 February 8, 2007, pp. 1-8 [online], [retrieved on 2014-11-26] Retrieved from the Internet <URL https//pubchem ncbi nlm nih gov/compound/13481918>, page 3, formula *
PubChem CID 18347999 December 4, 2007, pp. 1-9 [online], [retrieved on 2014-11-26] Retrieved from the Internet <URL http//pubchem ncbi nlm nih gov/compound/18347999#section=Create-Date>, page 3, formula *
PubChem CID 70205837 December 1, 2012, pp. 1-9 [online], [retrieved on 2014-11-26] Retrieved from the Internet <URL http//pubchem ncbi nlm nih gov/compound/70205837#section=Top>, page 3, formula *
TSURUO, T. et al. Platelet aggregation in the formation of tumor metastasis. Proceedings of the Japan Academy, Series B, Vol. 84, № 6, 2008, pp. 189-198 [online], [retrieved on 2014-11-26] Retrieved from the Internet <URL https//www.jstage jst go jp/article/pjab/84/6/84_6_189/_pdf>, abstract *

Also Published As

Publication number Publication date
EP3052096A4 (en) 2017-03-15
US9951078B2 (en) 2018-04-24
JP2016531952A (ja) 2016-10-13
WO2015051341A1 (en) 2015-04-09
EP3052096A1 (en) 2016-08-10
JP6427197B2 (ja) 2018-11-21
US9624228B2 (en) 2017-04-18
EP3052096B8 (en) 2018-03-07
CY1120095T1 (el) 2018-12-12
EP3363800A1 (en) 2018-08-22
US20160237091A1 (en) 2016-08-18
JP2019031549A (ja) 2019-02-28
KR20160081908A (ko) 2016-07-08
SG11201602572YA (en) 2016-04-28
SI3052096T1 (en) 2018-04-30
HK1255851A1 (zh) 2019-08-30
BR112016006994A2 (pt) 2017-08-01
IL244488A0 (en) 2016-04-21
BR112016006994A8 (pt) 2020-02-27
EA201690708A1 (ru) 2016-12-30
ES2664794T3 (es) 2018-04-23
HUE036600T2 (hu) 2018-07-30
PL3052096T3 (pl) 2018-07-31
ME02991B (me) 2018-10-20
US20190292194A1 (en) 2019-09-26
HRP20180538T1 (hr) 2018-05-04
CN105636586B (zh) 2018-05-29
PT3052096T (pt) 2018-04-04
CN105636586A (zh) 2016-06-01
PH12016500432A1 (en) 2016-05-16
AU2018250439A1 (en) 2018-11-15
ZA201601701B (en) 2019-09-25
US10301317B2 (en) 2019-05-28
DK3052096T3 (en) 2018-03-12
US20180237444A1 (en) 2018-08-23
MX2016004163A (es) 2016-09-07
PH12016500432B1 (en) 2016-05-16
CA2924584A1 (en) 2015-04-09
US20170226110A1 (en) 2017-08-10
AU2014331628A1 (en) 2016-03-24
EP3052096B1 (en) 2018-01-17
LT3052096T (lt) 2018-04-10
RS57058B1 (sr) 2018-05-31
AU2014331628B2 (en) 2018-08-30
CN108864102A (zh) 2018-11-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032196B1 (ru) Ингибиторы erk и способы применения
ES2900184T3 (es) Combinaciones terapéuticas de un inhibidor de BTK y un inhibidor de BCL-2
JP6242885B2 (ja) ５−アザインダゾール化合物及び使用方法
AU2018244935A1 (en) Naphthyridines as inhibitors of HPK1
BR112019019555A2 (pt) composto de fórmula i, composição farmacêutica, método de inibição de hpk1, método para melhorar uma resposta imune, método para tratar um distúrbio e uso do composto
RU2478636C2 (ru) ПРОИЗВОДНЫЕ ИМИДАЗОПИРИДИН-2-ОНА, ОБЛАДАЮЩИЕ mTOR ИНГИБИРУЮЩЕЙ АКТИВНОСТЬЮ
KR20200036922A (ko) 단백질 아르기닌 메틸트랜스퍼라제 5 (prmt5)의 선택적 억제제
CN107922396B (zh) 集落刺激因子-1受体(csf-1r)抑制剂
JP7366996B2 (ja) 抗腫瘍療法で使用するためのデュアルａｔｍ及びｄｎａ－ｐｋ阻害剤
EA025466B1 (ru) Определенные триазолопиридины и триазолопиразины, их композиции и способы их применения
KR20130043198A (ko) 키나제 억제제로서 치환된 이미다조퀴놀린 유도체
TW201217381A (en) Imidazotriazinone compounds
AU2018301696A1 (en) Heterocyclic inhibitors of ATR kinase
CN111205310B (zh) 杂环稠合嘧啶衍生物、其药物组合物及应用
CN110167941B (zh) 取代的稠合杂芳基化合物作为激酶抑制剂及其应用
CN116940563A (zh) Cdk抑制剂及其作为药物的用途
ES2924371T3 (es) Compuestos tricíclicos y su uso como inhibidores de la fosfodiesterasa
JP2023522045A (ja) アリール炭化水素受容体モジュレーターとしてのピリドピリミジノン誘導体およびその使用
KR20220085735A (ko) 아이소옥사졸리딘 유도체 화합물 및 이의 용도
TW202220987A (zh) 經取代雜環化合物及其治療用途
AU2014284013B2 (en) Five-membered heterocyclic pyridine compounds and preparation method and use thereof
WO2023279041A1 (en) Indazole compounds
TW202332429A (zh) 治療性化合物及其使用方法
WO2024006726A2 (en) Compounds as inhibitors of axl
CN116925070A (zh) 取代的氮杂稠环化合物及其医药用途

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU