EA031590B1 - Пиримидиноны в качестве ингибиторов фактора xia - Google Patents

Пиримидиноны в качестве ингибиторов фактора xia Download PDF

Info

Publication number
EA031590B1
EA031590B1 EA201790595A EA201790595A EA031590B1 EA 031590 B1 EA031590 B1 EA 031590B1 EA 201790595 A EA201790595 A EA 201790595A EA 201790595 A EA201790595 A EA 201790595A EA 031590 B1 EA031590 B1 EA 031590B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
mmol
independently selected
methyl
pharmaceutically acceptable
compounds
Prior art date
Application number
EA201790595A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201790595A1 (ru
Inventor
Эндрю К. Дилгер
Джеймс Р. Корте
Индавати Дэ Лукка
Тианан Фан
Ву Ян
Юфен Ван
Кумар Балашанмуга Паббисетти
Уильям Р. Эвинг
Ехен Чжу
Рут Р. Векслер
Дональд Дж.П. Пинто
Майкл Дж. Орват
Леон М. Смит II
Original Assignee
Бристол-Маерс Сквибб Компани
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Бристол-Маерс Сквибб Компани filed Critical Бристол-Маерс Сквибб Компани
Publication of EA201790595A1 publication Critical patent/EA201790595A1/ru
Publication of EA031590B1 publication Critical patent/EA031590B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D471/18—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4162—1,2-Diazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/06—Antianaemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/61—Halogen atoms or nitro radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/34—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings

Abstract

Настоящее изобретение предусматривает соединения формулы (I)или их стереомеры, таутомеры или фармацевтически приемлемые соли, где все переменные имеют значения, указанные в данной заявке, эти соединения являются селективными ингибиторами фактора XIa или двойными ингибиторами FXIa и плазменного калликреина. Данное изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, и к способам лечения тромбоэмболических осложнений и/или воспалительных заболеваний с их применением.

Description

Данное изобретение относится также к фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, и к способам лечения тромбоэмболических осложнений и/или воспалительных заболеваний с их применением.
Область техники, к которой относится изобретение
Данное изобретение относится в общем к новым макроциклическим соединениям, их аналогам, которые являются ингибиторами фактора XIa и/или плазменного калликреина, к композициям, их содержащим, и к способам их применения, например, для лечения или профилактики тромбоэмболических осложнений или для лечения сосудистой проницаемости стенки сетчатки, связанной с диабетической ретинопатией и диабетическим отёком макулы.
Сведения о предшествующем уровне техники
Тромбоэмболические осложнения остаются основной причиной смертности в развитых странах несмотря на доступность антикоагулянтов, таких как варфарин (COUMADIN®), гепарин, низкомолекулярные гепарины (LMWH) и синтетические пентасахариды и антитромбоцитарные средства, такие как аспирин и клопидогрел (PLAVIX®). Оральный антикоагулянт варфарин ингибирует посттрансляционное созревание факторов коагуляции VII, IX, X и протромбина и оказался эффективным как при венозном, так и при артериальном тромбозе. Однако его применение ограничено из-за его узкого терапевтического индекса, медленного наступления терапевтического эффекта, многочисленных взаимодействий с продуктами питания и другими лекарствами и необходимости мониторинга и регулирования его доз. Следовательно, создание и разработка безопасных и эффективных оральных антикоагулянтов для профилактики и лечения широкого круга тромбоэмболических осложнений являются чрезвычайно важными.
Один из подходов заключается в ингибировании образования тромбина путём направленного ингибирования фактора коагуляции XIa (FXIa). Фактор XIa является сериновой протеазой плазмы, участвующей в регуляции свёртывания крови, которая инициируется in vivo при связывании тканевого фактора (TF) с фактором VII (FVII) с образованием фактора VIIa (FVIIa). Полученный комплекс TF:FVIIa активирует фактор IX (FIX) и фактор X (FX), что приводит к продуцированию фактора Ха (FXa). Полученный FXa катализирует превращение протромбина в небольшие количества тромбина до закрытия этого пути ингибитором тканевого фактора (TFPI). Процесс свёртывания крови затем распространяется при обратной активации факторов V, VIII и XI каталитическими количествами тромбина (Gailani, D. et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 27:2507-2513, 2007). Полученный всплеск активности тромбина превращает фибриноген в фибрин, который полимеризуется с образованием структурного каркаса сгустка крови и активирует тромбоциты, которые являются ключевым клеточным компонентом коагуляции (Hoffman, M., Blood Reviews, 17:S1-S5 (2003)). Следовательно, фактор XIa играет ключевую роль в распространении этой петли амплификации и, таким образом, перспективной целью для антитромботической терапии.
Прекалликреин плазмы представляет собой зимоген трипсиноподобной сериновой протеазы и его содержание в плазме составляет от 35 до 50 мкг/мл. Структура его гена похожа на структуру гена фактора XI. Более того, аминокислотная последовательность калликреина плазмы гомологична последовательности фактора XI на 58%. Полагают, что плазменный калликреин играет роль в развитии ряда воспалительных заболеваний. Основным ингибитором плазменного калликреина является ингибитор серпин С1-эстеразы. Пациенты с генетическим дефицитом ингибитора О-эстеразы страдают от наследственной ангиоэдемы (НАЕ), которая приводит к периодическому распуханию лица, кистей рук, горла, желудочно-кишечного тракта и гениталий. Волдыри, образовавшиеся во время острых эпизодов, содержат большое количество плазменного калликреина, который расщепляет высокомолекулярный кининоген, высвобождая брадикинин, приводящий к повышенной проницаемости сосудов. Лечение при помощи большого белка ингибитора плазменного калликреина, как было показано, приводит к эффективному излечению НАЕ за счёт высвобождения брадикинина, который вызывает повышенную проницаемость сосудов (Lehmann, A., Ecallantide (DX-88), a plasma kallikrein inhibitor for the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss in on-pump cardiothoracic surgery, Expert Opin. Biol. Ther., 8:187-199 (2008)).
Калликреин-кининовая система плазмы крови имеется в аномальном избытке у пациентов с развитым отёком макулы. Недавно сообщалось, что плазменный калликреин участвует в развитии сосудистых дисфункций сетчатки у крыс, больных диабетом (Clermont, A. et al., Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinal thickening in diabetic rats, Diabetes, 60:1590-1598 (2011)). Кроме того, введение ингибитора плазменного калликреина ASP-440 повышало как проницаемость сосудов сетчатки, так и нарушение циркуляции крови в сетчатке у диабетических крыс. Следовательно, ингибитор плазменного калликреина должен найти применение для лечения с целью уменьшения проницаемости сосудов в сетчатке, связанной с диабетической ретинопатией и диабетическим отёком макулы. Другие осложнения от диабета, такие как кровоизлияние в мозг, нефропатия, кардиомиопатия и нейропатия, все из которых ассоциируются с калликреином плазмы, могут также рассматриваться как мишени для ингибитора плазменного калликреина.
До сих пор не были одобрены для медицинского применения синтетические ингибиторы калликреина в виде малых молекул. Ингибиторы плазменного калликреина в виде больших белков могут вызвать анафилактические реакции, как указывалось для экаллантида (Ecallantide). Таким образом, остаётся необходимость в соединениях, которые ингибируют плазменный калликреин, но не вызывают анафилак
- 1 031590 сию и доступны орально. Кроме того, вещества, описанные в уровне техники, содержат сильно полярные и ионизирующиеся гуанидиновые или амидиновые функциональные группы. Хорошо известно, что такие функциональные группы могут ограничивать кишечную проницаемость и, следовательно, оральную биодоступность.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение предусматривает новые макроциклические соединения, их аналоги, включая их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли или сольваты, которые пригодны в качестве селективных ингибиторов ферментов сериновых протеаз, особенно фактора XIa и/или плазменного калликреина.
Данное изобретение предусматривает также способы и промежуточные соединения для получения соединений по изобретению.
Данное изобретение предусматривает также фармацевтические композиции, содержащие фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно из соединений по изобретению или его стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли или сольваты.
Соединения по изобретению могут быть использованы при лечении и/или профилактике тромбоэмболических осложнений.
Соединения по изобретению могут быть использованы при лечении проницаемости стенок сосудов сетчатки, ассоциируемой с диабетической ретинопатией и диабетическим отёком макулы.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть использованы в терапии.
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть использованы для изготовления лекарственного средства для лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения.
Соединения по изобретению могут быть использованы сами по себе или в комбинации с другими соединениями по изобретению или в комбинации с одним или более, предпочтительно одним-двумя другим (-и) агентом (-ами).
Эти и другие признаки данного изобретения будут описаны ниже более подробно в следующем описании.
Сведения, подтверждающие возможность осуществления изобретения
I. Соединения по изобретению
Согласно одному аспекту настоящее изобретение предусматривает, наряду с прочим, соединения формулы (I)
или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где кольцо А независимо выбрано из
кольцо В независимо выбрано из
R1 независимо выбран из Н и C1-4 алкила;
R2 независимо выбран из Н, F, Cl, CF3 и CHF2;
R3 независимо выбран из Н, CHF2, CD3, CH3 и
R4 независимо выбран из Н и F и
R5 независимо выбран из Н, F, Cl, CH3 и OCH3.
Согласно другому аспекту настоящее изобретение предусматривает, наряду с прочим, соединения формулы (I) или его стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где кольцо А независимо выбрано из
- 2 031590
кольцо В независимо выбрано из
R1 независимо выбран из Н и Ci_4 алкила;
R2 независимо выбран из F, Cl, CF3, CHF2 и СООН;
R3 независимо выбран из Н, CHF2, CD3 и CH3;
R4 независимо выбран из Н и F и
R5 независимо выбран из Н, F, Cl, CH3 и OCH3.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (II)
или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где 1
R1 обозначает C1-4 алкил;
R2 независимо выбран из Н, F, Cl, CF3 и CHF2;
R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
R4 обозначает Н; и
R5 независимо выбран из F и Cl.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (II) или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где
R1 обозначает C1-4 алкил;
R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2;
R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
R4 обозначает Н и
R5 независимо выбран из F и Cl.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (III)
или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где 1
R1 обозначает C1-4 алкил;
R2 независимо выбран из Н, F, Cl, CF3 и CHF2;
R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
R4 обозначает Н и
R5 независимо выбран из F и Cl.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (III) или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где
R1 обозначает C1-4 алкил;
R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2;
R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
R4 обозначает Н и
R5 независимо выбран из F и Cl.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (IV)
- 3 031590
или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где
R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2 и
R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения формулы (I) или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства, где кольцо А независимо выбрано из
И ;
кольцо В обозначает
I
R3
R1 независимо выбран из Н и Ci_4 алкила;
R2 обозначает СООН;
R3 независимо выбран из Н, CHF2, CD3 и CH3;
R4 независимо выбран из Н и F и
R5 независимо выбран из Н, F, Cl, CH3 и OCH3.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединения, выбранные из
или их стереизомеры, таутомеры, фармацевтически приемлемые соли, сольваты или пролекарства. Согласно другому варианту R1 независимо выбран из группы, состоящей из Н и C1-4 алкила.
- 4 031590
Согласно другому варианту R1 независимо выбран из группы, состоящей из Н и метила, этила и изопропила.
Согласно другому аспекту данное изобретение предусматривает соединение, выбранное из любого перечня соединений, описанных в примерах данной заявки.
В соответствии с другим вариантом соединения по данному изобретению характеризуются величинами K, в отношении фактора XIa или плазменного калликреина, которые < 10 мкМ. Согласно другому варианту соединения по данному изобретению характеризуются величинами K в отношении фактора XIa или плазменного калликреина, которые < 1 мкМ.
Согласно другому варианту соединения по данному изобретению характеризуются величинами K, в отношении фактора XIa или плазменного калликреина, которые < 0.5 рМ.
Согласно другому варианту соединения по данному изобретению характеризуются величинами K, в отношении фактора XIa или плазменного калликреина, которые < 0.1 рМ.
II. Другие варианты данного изобретения
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает композицию, содержащую по меньшей мере одно из соединений по изобретению или его стереизомер, таутомер, фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно из соединений по изобретению или его стереизомер, таутомер, фармацевтически приемлемую соль, сольват или пролекарство.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую фармацевтически приемлемый носитель и терапевтически эффективное количество по меньшей мере одного из соединений по изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли, сольвата или пролекарства.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ получения соединения согласно данному изобретению.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает промежуточное соединение для получения соединения согласно данному изобретению.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую также дополнительный (-ые) терапевтический (-ие) агент (-ы). Согласно предпочтительному варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, в которой дополнительный (-ые) терапевтический (-ие) агент (-ы) представляет собой антитромбоцитарное средство или его комбинацию. Антитромбоцитарный (-ые) агент (-ы) предпочтительно является клопидогрелом и/или аспирином или их комбинацией.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении и/или профилактике, терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из соединений по изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает соединение согласно данному изобретению или его стереизомер, таутомер, фармацевтически приемлемую соль или сольват для применения в терапии.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает соединение согласно данному изобретению или его стереизомер, таутомер, фармацевтически приемлемую соль или сольват для применения в терапии для лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает также применение соединения согласно данному изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли или сольвата для изготовления лекарственного средства для лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества первого и второго терапевтического агента, причём первым терапевтическим агентом является соединение по данному изобретению или его стереизомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль или сольват, и второй терапевтический агент представляет собой по меньшей мере один агент, выбранный из ингибитора фактора Ха, такого как апиксабан, ривароксабан, бетриксабан, эдоксабан, антикоагулянта, антитромбоцитарного агента, ингибитора тромбина, такого как дабигатран, тромболитического средства и фибринолитического агента. Предпочтительно, если второй терапевтический агент является по меньшей мере одним агентом, выбранным из варфарина, нефракционированного гепарина, низкомолекулярного гепарина, синтетического пентасахарида, гирудина, аргатробана, аспирина, ибупрофена, напроксена, сулиндака, индометацина, мефенамата, дроксикама, диклофенака, сульфинпиразона, пироксикама, тиклопидина, клопидогрела, тирофибана, эптифибатида, абцик
- 5 031590 симаба, мелагатрана, десульфатогирудина, тканевого активатора плазминогена, модифицированного тканевого активатора плазминогена, анистреплазы, урокиназы и стрептокиназы. Предпочтительно, если второй терапевтический агент является по меньшей мере одним антитромбоцитарным средством. Предпочтительно, если антитромбоцитарное (-ые) средство (-а) является (-ются) клопидогрелом и/или аспирином или их комбинацией.
Тромбоэмболическое осложнение включает артериальные сердечно-сосудистые тромбоэмболические нарушения, венозные сердечно-сосудистые тромбоэмболические нарушения, артериальные цереброваскулярные тромбоэмболические нарушения и венозные цереброваскулярные тромбоэмболические нарушения. Примеры тромбоэмболических осложнений включают, но без ограничений, нестабильную стенокардию, острый коронарный синдром, мерцательную аритмию, первый инфаркт миокарда, рецидив инфаркта миокарда, внезапную коронарную смерть, преходящую ишемическую атаку, инсульт, атеросклероз, заболевание периферических артерий, венозный тромбоз, глубокий венозный тромбоз, тромбофлебит, артериальную эмболию, коронарный артериальный тромбоз, церебральный артериальный тромбоз, церебральную эмболию, эмболию почечных артерий, лёгочную эмболию и тромбоз, возникающий от медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь появляется на искусственной поверхности, что ускоряет возникновение тромбоза.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ лечения и/или профилактики воспалительного заболевания, включающий: введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении и/или профилактике терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из соединений согласно данному изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли или сольвата. Примеры воспалительных заболеваний включают, но без ограничения, сепсис, острый респираторный дистресс-синдром и синдром системной воспалительной реакции.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ профилактики заболевания или состояния, при которых наблюдается активность плазменного калликреина, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении и/или профилактике, терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из соединений согласно данному изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли или сольвата.
Заболевание или состояние, при которых наблюдается активность плазменного калликреина, включают, но без ограничения, снижение остроты зрения, диабетическую ретинопатию, диабетический отёк макулы, наследственный ангионевротический отёк, диабет, панкреатит, нефропатию, кардиомиопатию, нейропатию, воспалительное заболевание кишечника, артрит, воспаление, септический шок, гипотонию, рак, респираторный дистресс-синдром взрослых, диссеминированное внутрисосудистое свёртывание и операции в условиях искусственного кровообращения.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает комбинированное получение соединения по изобретению и дополнительного (-ых) терапевтического (-их) агента (-ов) для одновременного, раздельного или последовательного применения в терапии.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает комбинированное получение соединения по изобретению и дополнительного (-ых) терапевтического (-их) агента (-ов) для одновременного, раздельного или последовательного применения при лечении и/или профилактике тромбоэмболического осложнения.
Настоящее изобретение может быть осуществлено в других конкретных формах без выхода за существо и рамки данного изобретения. Данное изобретение охватывает все комбинации предпочтительных аспектов изобретения, описанных в заявке. Следует иметь в виду, что любой или все варианты данного изобретения можно использовать в сочетании с любым другим вариантом или вариантами для описания дополнительных вариантов. Следует также иметь в виду, что каждый отдельный элемент этих вариантов является его собственным независимым вариантом. Кроме того, подразумевается, что любой элемент одного варианта может комбинироваться с любым другим или всеми элементами любого из вариантов для описания дополнительного варианта.
III. Химия
По всему тексту описания и прилагаемой формулы изобретения приведённая химическая формула или название соединения охватывает все стереоизомеры и оптические изомеры и их рацематы, когда такие изомеры существуют. Если иное не указано, все хиральные (энантиомерные и диастереомерные) и рацемические формы входят в объём настоящего изобретения. В соединениях могут находиться многие геометрические изомеры соединений с двойными связями С=С, двойными связями C=N, с кольцевыми системами и т.п. и все такие стабильные изомеры охвачены данным изобретением. Описаны цис- и транс- (или Е- и Z-) геометрические изомеры соединений по данному изобретению, они могут быть выделены в виде смеси изомеров или в виде отдельных изомерных форм. Такие соединения могут быть выделены в виде оптически активных или рацемических форм. Оптически активные формы могут быть получены путём разделения рацемических форм или путём синтеза из оптически активных исходных соединений. Все способы, используемые для получения соединений согласно данному изобретению, и промежуточные соединения, полученные для этого, рассматриваются как часть настоящего изобретения. Когда получаются энантиомерные или диастереомерные продукты, они могут быть разделены обычными
- 6 031590 способами, например, путём хроматографии или фракционной кристаллизации. В зависимости от условий способа конечные продукты согласно данному изобретению получают или в свободной (нейтральной) форме или в виде солей. И свободные формы, и соли таких конечных продуктов охвачены данным изобретением. Если это желательно, одна форма соединения может быть превращена в другую форму. Свободные основание или кислота могут быть превращены в соль; соль может быть превращена в свободное соединение или в другую соль; смесь изомерных соединений по изобретению может быть разделена на индивидуальные изомеры. Соединения согласно данному изобретению, свободные формы и их соли могут находиться во многих таутомерных формах, в которых атомы водорода перемещены в другие части молекулы и химические связи между атомами молекул соответственно перемещены. Следует иметь в виду, что все таутомерные формы, если они существуют, входят в объём данного изобретения.
Термин стереоизомер относится к изомерам идентичного состава, которые отличаются расположением их атомов в пространстве. Примерами стереоизомеров являются энантиомеры и диастереомеры. Термин энантиомер относится к одному соединению из пары молекулярных соединений, которые являются зеркальным отражением друг друга и не совпадают при наложении. Термин диастереомер относится к стереоизомерам, которые не являются зеркальным отображением друг друга. Термин рацемат или рацемическая смесь относится к составу, состоящему из эквимолярных количеств двух энантиомеров, при этом такой состав лишён оптической активности.
Символы R и S отражают конфигурацию заместителей вокруг хирального атома (-ов) углерода. Обозначения изомеров R и S используются в данной заявке для указания конфигурации (-ий) атомов относительно остова молекулы и используются как описано в литературе (IUPAC Recommendations 1996, Pure and Applied Chemistry, 68:2193-2222 (1996)).
Термин хиральный относится к структурной характеристике молекулы, которая делает невозможным наложение её на зеркальное отражение. Термин гомохиральное относится к состоянию энантиомерной чистоты. Термин оптическая активность относится к степени, с которой гомохиральная молекула или нерацемическая смесь хиральных молекул вращает плоскость поляризованного света.
Используемый в данной заявке термин алкил или алкилен включает и разветвлённые, и линейные насыщенные алифатические углеводородные группы, содержащие конкретное количество атомов углерода. Например, C1-C10 алкил или C1-10 алкил (или алкилен) включают C1, C2, C3, С4, C5, C6, C7, C8, C9 и C10 алкильные группы. Дополнительно, например, C1-C6 алкил или C1-C6 алкил обозначает алкил, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. Алкильные группы могут быть незамещёнными или замещёнными по меньшей мере по одному атому водорода другой химической группой. Примеры алкильных групп включают, но без ограничения, метил (Me), этил (Et), пропил (например, н-пропил и изопропил), бутил (например, н-бутил, изобутил, трет.бутил) и пентил (например, н-пентил, изопентил, неопентил). Когда используется термин С0 алкил или С0 алкилен, он обозначает простую связь.
Термин алкинил или алкинилен обозначает углеводородные цепи или линейной, или разветвлённой конфигурации, содержащие одну или более, предпочтительно одну-три, углерод-углеродные тройные связи, которые могут находиться в любой стабильной точке вдоль цепи. Например, C2-C6 алкинил или C2-6 алкинил (или алкинилен) включает C2, C3, C4, C5 и C6 алкинильные группы; такие как этинил, пропинил, бутинил, пентинил и гексинил.
Термин алкокси или алкилокси относится к группе -О-алкил. Ci-C6 алкокси или C1-6 алкокси (или алкилокси) включает Q, C2, C3, C4, C5 и C6 алкоксильные группы. Примеры алкоксильных групп включают, но без ограничения, метокси, этокси, пропокси (например, н-пропокси и изопропокси), и трет.бутокси. Подобным образом, алкилтио или тиоалкокси обозначает алкильную группу, определённую выше, с указанным количеством атомов углерода, присоединённую через серный мостик, например, метил-S- и этил-S-.
Гало или галоген включает фтор, хлор, бром и йод. Термин галогеналкил включает разветвлённые и линейные алифатические углеводородные группы, содержащие указанное количество атомов углерода, замещённых 1 или более атомами галогена. Примеры галогеналкилов включают, но без ограничения, фторметил, дифторметил, трифторметил, трихлорметил, пентафторэтил, пентахлорэтил, 2,2,2трифторэтил, гептафторпропил и гептахлорпропил. Примеры галогеналкилов включают также фторалкил, который включает разветвлённые насыщенные и линейные алифатические углеводородные группы, содержащие указанное количество атомов углерода, замещённых 1 или более атомами фтора.
Термины галогеналкокси или галогеналкилокси обозначают галогеналкильную группу, определённую выше, с указанным количеством атомов углерода, присоединённых через кислородный мостик. Например, C1-C6 галогеналкокси или C1-6 галогеналкокси включает C1, С2, C3, С4, С5 и C6 галогеналкоксильные группы. Примеры галогеналкоксильных групп включают, но без ограничения, трифторметокси, 2,2,2-трифторэтокси и пентафторэтокси. Подобным образом, термин галогеналкилтио или тиогалогеналкокси обозначает галогеналкильную группу, определённую выше, с указанным количеством атомов углерода, присоединённых через серный мостик, например, трифторметил-S- и пентафторэтил-S-.
Термин амино, используемый в данной заявке, относится к -NH2.
Термин замещённый амино, используемый в данной заявке, относится к терминам, определённым ниже, содержащим суффикс амино, таким как ариламино, алкиламино, ариламино и т.д.
- 7 031590
Термин алкоксикарбонил, используемый в данной заявке, относится к алкоксильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин алкоксикарбониламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает алкоксикарбонильный радикал.
Термин алкиламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает алкильную группу.
Термин алкилкарбонил, используемый в данной заявке, относится к алкильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин алкилкарбониламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает алкилкарбонильную группу.
Термин аминосульфонил, используемый в данной заявке, относится к -SO2NH2.
Термин арилалкил, используемый в данной заявке, относится к алкильной группе, замещённой одной, двумя или тремя арильными группами.
Термин ариламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает арильную группу.
Термин арилкарбонил, используемый в данной заявке, относится к арильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин арилкарбониламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает арилкарбонильную группу.
Термин карбонил, используемый в данной заявке, относится к -С(О)-.
Термин циано, используемый в данной заявке, относится к -CN.
Термин циклоалкиламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает циклоалкильную группу.
Термин циклоалкилкарбонил, используемый в данной заявке, относится к циклоалкильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин циклоалкилкарбониламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает циклоалкилкарбонильную группу.
Термин циклоалкилокси, используемый в данной заявке, относится к циклоалкильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через атом кислорода.
Термин диалкиламино, используемый в данной заявке, относится к NR2, где каждый R обозначает алкильную группу. Обе алкильные группы могут быть одинаковыми или разными.
Термин галогеналкокси, используемый в данной заявке, относится к галогеналкильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через атом кислорода.
Термин галогеналкил, используемый в данной заявке, относится к алкильной группе, замещённой одним, двумя, тремя или четырьмя атомами галогена.
Термин галогеналкиламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает галогеналкильную группу.
Термин карбонил относится к С(=О).
Термин карбокси относится к С(=О)ОН.
Термин галогеналкилкарбонил, используемый в данной заявке, относится к галогеналкильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин галогеналкилкарбониламино, используемый в данной заявке, относится к -NHR, где R обозначает галогеналкилкарбонильную группу.
Термин алкилкарбонил относится к алкилу или замещённому алкилу, связанному с карбонилом.
Термин алкоксикарбонил, используемый в данной заявке, относится к алкоксильной группе, присоединённой к родительскому молекулярному фрагменту через карбонильную группу.
Термин гидрокси или гидроксил относится к ОН.
Термин циклоалкил относится к циклизованным алкильным группам, включая моно-, би- или полициклические кольцевые системы. C3-C7 циклоалкил или C3-7 циклоалкил включает C3, С4, C5, C6 и C7 циклоалкильные группы. Примеры циклоалкильных групп включают, но без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил и норборнил. Определение циклоалкил включает также разветвлённые циклоалкильные группы, такие как 1-метилциклопропил и 2-метилциклопропил.
Используемый в данной заявке термин карбоциклил или карбоциклический остаток означает любое стабильное 3-, 4-, 5-, 6-, 7- или 8-членное моноциклическое или бициклическое, или 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12- или 13-членное бициклическое или трициклическое углеводородное кольцо, любое из которых может быть насыщенным, частично ненасыщенным, ненасыщенным или ароматическим. Примеры таких карбоциклилов включают, но без ограничения, циклопропил, циклобутил, циклобутенил, циклопентил, циклопентенил, циклогексил, циклогексенил, циклогептил, циклогептенил, адамантил, циклооктил, циклооктенил, циклооктадиенил, [3.3.0] бициклооктан (должно быть [3.3.0] бициклооктанил), [4.3.0] бициклононан (должно быть [4.3.0] бициклононанил), [4.4.0] бициклодекан (должно быть [4.4.0] бициклодеканил) (декалинил), [2.2.2] бициклооктан (должно быть [2.2.2] бициклооктанил), флуоренил, фенил, нафтил, инданил, адамантил, антраценил и тетрагилронафтил (тетралинил). Как указано выше, определение
- 8 031590 карбоцикла включает мостиковые циклы (например, [2.2.2] бициклооктан). Предпочтительные карбоциклилы представляют собой, если иное не указано, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, фенил и инданил. Когда применяется термин карбоциклил, он включает арил. Мостиковое кольцо образуется, когда один или более атомов углерода соединяет два несоседних атома углерода. Предпочтительными мостиками являются один или два атома углерода. Следует отметить, что мостик всегда превращает моноциклическое кольцо в трициклическое кольцо. Когда кольцо является мостиковым, заместители, указанные для кольца, могут находиться в мостике.
Используемый в данной заявке термин бициклический карбоцикл или бициклическая карбоциклическая группа означает стабильную 9- или 10-членную карбоциклическую кольцевую систему, которая содержит два конденсированных кольца и состоит из атомов углерода. Из двух конденсированных колец одно кольцо является бензольным, конденсированным со вторым кольцом; и второе кольцо является 5- или 6-членным углеродсодержащим кольцом, которое является насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным. Бициклическая карбоциклическая группа может быть присоединена к боковой группе у любого атома углерода, что приводит к образованию стабильной структуры. Бициклическая карбоциклическая группа, описанная в данной заявке, может быть замещена у любого атома углерода, если получающееся соединение является стабильным. Примерами бициклических карбоциклических групп являются, но без ограничения, нафтил, 1,2-дигидронафтил, 1,2,3,4-тетрагидронафтил и инданил.
Термин арил относится к моноциклическим или полициклическим ароматическим углеводородам, включая, например, фенил, нафтил и фенантранил. Арильные группы хорошо известны и описаны, например, в публикации Lewis, R.J., ed., Hawley's Condensed Chemical Dictionary, 13th Edition, John Wiley & Sons, Inc., New York (1997). C6 или C10 арил или C6-10 арил относится к фенилу и нафтилу. Если не оговаривается иное, арил, C6 или C10 арил, или C6-10 арил, или ароматический остаток могут быть незамещёнными или замещёнными 1-5 группами, предпочтительно 1-3 группами: ОН, OCH3, Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2, N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3, C(=O)CH3, SCH3, S(=O)CH3, S(=O)2CH3, CH3, CH2CH3, CO2H и CO2CH3.
Термин бензил, используемый в данной заявке, относится к метильной группе, у которой один из атомов водорода замещён фенильной группой, при этом указанная фенильная группа может быть необязательно замещена 1-5 группами, предпочтительно 1-3 группами: ОН, ОСН3, Cl, F, Br, I, CN, NO2, NH2, N(CH3)H, N(CH3)2, CF3, OCF3, C(=O)CH3, SCH3, S(=O)CH3, S(=O)2CH3, CH3, CH2CH3, CO2H и CO2CH3.
Используемый в данной заявке термин гетероцикл или гетероциклическое кольцо означает стабильное 3-, 4-, 5-, 6- или 7-членное моноциклическое или бициклическое или 7-, 8-, 9-, 10-, 11-, 12-, 13или 14-членное полициклическое гетероциклическое кольцо, которое может быть насыщенным, частично ненасыщенным или полностью ненасыщенным и которое содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома, независимо выбранные из группы, состоящей из N, О и S; включая любую полициклическую группу, в которой любое из указанных выше гетероциклических колец конденсировано с бензольным кольцом. Гетероатомы азот и сера могут быть необязательно окислены (то есть N^O и S(O)p, где p равен 0, 1 или 2). Атом азота может быть замещённым или незамещённым (то есть N или NR, где R обозначает Н или другой заместитель, если это указано). Гетероциклическое кольцо может быть присоединено к своей боковой группе у любого гетероатома или атома углерода, что приводит к получению стабильной структуры. Гетероциклические кольца, описанные в данной заявке, могут быть замещены у атома углерода или у атома азота, если образуется стабильное соединение. Атом азота в гетероцикле может быть кватернизованным. Предпочтительно, когда общее количество атомов S и О в гетероцикле превышает 1, тогда эти атомы не находятся рядом друг с другом. Предпочтительно также, если общее количество атомов S и О в гетероцикле не превышает 1. Когда используется термин гетероцикл, он включает гетероарил.
Примеры гетероциклов включают, но без ограничения, акридинил, азетидинил, азоцинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензотиофуранил, бензотиофенил, бензоксазолил, бензоксазолинил, бензтиазолил, бензтриазолил, бензтетразолил, бензизоксазолил, бензизотиазолил, бензимидазолинил, карбазолил, 4aH-карбазолил, карболинил, хроманил, хроменил, циннолинил, декагидрохинолинил, 2Н,6Н-1,5,2дитиазинил, дигидрофуроРД-^тетрагидрофуран, фуранил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, Ш-индазолил, имидазолопиридинил, индоленил, индолинил, индолизинил, индолил, 3Hиндолил, изатиноил, изобензофуранил, изохроманил, изоиндазолил, изоиндолинил, изоиндолил, изохинолинил, изотиазолил, изотиазолпиридинил, изоксазолил, изоксазолпиридинил, метилендиоксифенил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолинил, оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, оксазолпиридинил, оксазолидинилпиримидинил, оксиндолил, пиримидинил, фенантридинил, фенантролинил, феназинил, фенотиазинил, феноксатиинил, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидинил, пиперидонил, 4-пиперидонил, пиперонил, птеридинил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолпиридинил, пиразолил, пиридазинил, пиридоксазолил, пиридоимидазолил, пиридотиазолил, пиридинил, пиримидинил, пирролидинил, пирролинил, 2-пирролидонил, 2Н-пирролил, пирролил, хиназолинил, хинолинил, 4H-хинолизинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетразолил, тетрагидрофуранил, тетрагидрои
- 9 031590 зохинолинил, тетрагидрохинолинил, 6Н-1,2,5-тиадиазинил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,5тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, тиантренил, тиазолил, тиенил, тиазолпиридинил, тиенотиазолил, тиенооксазолил, тиеноимидазолил, тиофенил, триазинил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,5-триазолил,
1.3.4- триазолил и ксантенил. Предусмотрены также конденсированные кольца и спиросоединения, содержащие, например, описанные выше гетероциклы.
Примеры 5-10-членных гетероциклов включают, но без ограничения, пиридинил, фуранил, тиенил, пирролил, пиразолил, пиразинил, пиперазинил, пиперидинил, имидазолил, имидазолидинил, индолил, тетразолил, изоксазолил, морфолинил, оксазолил, оксадиазолил, оксазолидинил, тетрагидрофуранил, тиадиазинил, тиадиазолил, тиазолил, триазинил, триазолил, бензимидазолил, 1Н-индазолил, бензофуранил, бензотиофуранил, бензтетразолил, бензотриазолил, бензизоксазолил, беноксазолил, оксиндолил, бензоксазолинил, бензтиазолил, бенизотиазолил, изатиноил, изохинолинил, октагидроизохинолинил, тетрагидроизохинолинил, тетрагидрохинолинил, изоксазолпиридинил, хиназолинил, хинолинил, изотиазолпиридинил, тиазолпиридинил, оксазолпиридинил, имидазолпиридинил и пиразолпиридинил.
Примеры 5-6-членных гетероциклов включают, но без ограничения, пиридинил, фуранил, тиенил, пирролил, пиразолил, пиразинил, пиперазинил, пиперидинил, имидазолил, имидазолидинил, индолил, тетразолил, изоксазолил, морфолинил, оксазолил, оксадиазолил, оксазолидинил, тетрагидрофуранил, тиадиазинил, тиадиазолил, тиазолил, триазинил и триазолил. Предусмотрены также конденсированные циклические соединения и спиросоединения, содержащие, например, вышеуказанные гетероциклы.
Используемый в данной заявке термин бициклический гетероцикл или бициклическая гетероциклическая группа означает стабильную 9- или 10-членную гетероциклическую кольцевую систему, которая содержит два конденсированных кольца и состоит из атомов углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатомов, независимо выбранных из группы, состоящей из N, О и S. Из двух конденсированных колец одно кольцо является 5- или 6-членным моноциклическим ароматическим кольцом, содержащим 5-членное гетероарильное кольцо, 6-членное гетероарильное кольцо или бензольное кольцо, каждое из которых конденсировано со вторым кольцом. Второе кольцо представляет собой 5- или 6-членное моноциклическое кольцо, которое является насыщенным, частично ненасыщенным или ненасыщенным и содержит 5членный гетероцикл, 6-членный гетероцикл или карбоцикл (при условии, что первое кольцо не является бензольным, когда второе кольцо является карбоциклическим).
Бициклическая гетероциклическая группа может быть присоединена через любой гетероатом или атом углерода, когда это приводит к образованию стабильной структуры. Бициклическая гетероциклическая группа, описанная в данной заявке, может быть замещённой у атома углерода или атома азота, если полученное соединение является стабильным. Предпочтительно, чтобы, когда общее количество атомов S и О в гетероцикле превышает 1, эти гетероатомы не были расположены рядом друг с другом. Предпочтительно, чтобы общее количество атомов S и О в гетероцикле было не больше 1.
Примерами бициклической гетероциклической группы являются, но без ограничения, хинолинил, изохинолинил, фталазинил, хиназолинил, индолил, изоиндолил, индолинил, 1Н-индазолил, бензимидазолил, 1,2,3,4-тетрагидрохинолинил, 1,2,3,4-тетрагидроизохинолинил, 5,6,7,8-тетрагидрохинолинил, 2,3дигидробензофуранил, хроманил, 1,2,3,4-тетрагидрохиноксалинил и 1,2,3,4-тетрагидрохиназолинил.
Используемый в данной заявке термин ароматическая гетероциклическая группа или гетероарил означает стабильные моноциклические и полициклические ароматические углеводороды, которые включают по меньшей мере один гетероатом в кольце, такой как атом серы, кислорода или азота. Гетероарильные группы включают, но без ограничения, пиридил, пиримидинил, пиразинил, пиридазинил, триазинил, фурил, хинолил, изохинолил, тиенил, имидазолил, тиазолил, индолил, пирролил, оксазолил, бензофурил, бензотиенил, бензтиазолил, изоксазолил, пиразолил, триазолил, тетразолил, индазолил,
1.2.4- тиадиазолил, изотиазолил, пуринил, карбазолил, бензимидазолил, индолинил, бензодиоксоланил и бензодиоксанил. Гетероарильные группы являются замещёнными или незамещёнными. Атом азота является замещённым или незамещённым (то есть N или NR, где R обозначает Н или другой заместитель, если он указан). Гетероатомы азот и сера могут необязательно быть окисленными (то есть N^O и S(O)p, где p равен 0, 1 или 2).
Мостиковые кольца также входят в определение гетероцикла. Мостиковое кольцо образуется, когда один или более атомов (а именно, С, О, N или S) соединяют два атома углерода или атома азота, не являющиеся соседними. Примеры мостиковых колец включают, но без ограничения, кольца, содержащие один атом углерода, два атома углерода, один атом азота, два атома азота и углерод-азотсодержащую группу. Следует отметить, что мостик всегда превращает моноциклическое кольцо в трициклическое кольцо. Когда кольцо является мостиковым, заместители, перечисленные для кольца, могут находиться и в мостиковой группе.
Термин противоион используется для обозначения отрицательно заряженных фрагментов, таких как хлорид, бромид, гидроксид, ацетат и сульфат.
Когда в кольцевой структуре имеется кольцо, обозначенное пунктиром, это показывает, что кольцевая структура может быть насыщенной, частично ненасыщенной или ненасыщенной.
Используемый в данной заявке термин замещён означает, что по меньшей мере один атом водорода замещён группой, при условии, что сохраняется нормальная валентность и что замещение приводит
- 10 031590 к получению стабильного соединения. Когда заместитель представляет собой кетогруппу (то есть =O) (должно быть С=О), тогда замещены два атома водорода. В ароматических фрагментах кетогруппы не содержатся. Когда указано, что кольцевая система (например, карбоциклическая или гетероциклическая) замещена карбонильной группой или двойной связью, то подразумевается, что карбонильная группа или двойная связь являются частью кольца (то есть находятся в кольце). Двойные связи в кольце согласно данному изобретению являются двойными связями, которые образованы между двумя соседними атомами в кольце (например, С=С, C=N или N=N).
В случаях, когда в соединениях по изобретению содержатся атомы азота (например, в аминах) они могут быть превращены в N-оксиды путём обработки окисляющим агентом (например, mCPBA и/или перекисью водорода) с получением других соединений согласно данному изобретению. Таким образом, показанные атомы азота охватывают и сами эти атомы, и N-оксидные производные (N^O).
Когда какая-либо переменная группа встречается более одного раза в части соединения или в химической формуле соединения, её определение в каждом случае является независимым от его определения в каждом другом случае. Так, например, если указано, что группа замещена 0-3 группами R, тогда такая группа может быть необязательно замещена группами R в количестве до 3, и в каждом случае R выбрана независимо от определения R. Допускаются также комбинации заместителей и/или переменных только тогда, когда такие комбинации приводят к получению стабильного соединения. Когда показано, что связь с заместителем пересекает связь, соединяющую два атома в кольце, тогда такой заместитель может быть связан с любым атомом в кольце. Когда указан заместитель без указания атома, через который связан такой заместитель с остальной частью молекулы соединения данной формулы, тогда такой заместитель может быть связан через любой атом в таком заместителе. Допускаются также комбинации заместителей и/или переменных только тогда, когда такие комбинации приводят к получению стабильного соединения.
Выражение фармацевтически приемлемые, используемое в данной заявке, относится к таким соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые с точки зрения здравого медицинского суждения пригодны для использования в контакте с тканями людей и животных без сильной токсичности, раздражения, аллергической реакции и/или других проблем или осложнений при разумном отношении польза/риск.
Выражение фармацевтически приемлемые соли относится к производным описанных соединений, когда родительское соединение модифицируется при получении его солей с кислотой или основанием. Примеры таких солей включают, но без ограничения, соли минеральных и органических кислот с основными соединениями, такими как амины; и щелочные или органические соли кислых соединений, таких как карбоновые кислоты. Фармацевтически приемлемые соли включают обычные нетоксичные соли или соли четвертичного аммония родительского соединения, образованные, например, из нетоксичных неорганических или органических кислот. Например, такие обычные нетоксичные соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как соляная, бромисто-водородная, серная, сульфаминовая, фосфорная и азотная; и соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, памовая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая и изетионовая.
Фармацевтически приемлемые соли согласно данному изобретению могут быть синтезированы из родительского соединения, которое содержит основной или кислый фрагмент, известными химическими способами. Обычно такие соли могут быть получены путём взаимодействия свободной кислой или основной формы этих соединений со стехиометрическим количеством соответствующего основания или кислоты в воде или в среде органического растворителя, или в смеси воды и органического растворителя; обычно в неводной среде, например, предпочтительно в среде простого эфира, этилацетата, этанола, изопропанола или ацетонитрила. Перечни подходящих солей находятся в монографии Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition, Mack Publishing Company, Easton, PA (1990), содержание которой включено в данную заявку посредством отсылки.
Кроме того, соединения формулы I могут быть в виде пролекарств. Любое соединение, которое превращается in vivo с получением биоактивного агента (то есть соединения формулы I) является пролекарством в объёме данного изобретения. Различные виды пролекарств хорошо известны из предшествующего уровня техники. Примеры таких пролекарств описаны в:
a) Bundgaard, H., ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985), and Widder, K. et al., eds., Methods in Enzymology, 112:309-396, Academic Press (1985);
b) Bundgaard, H., Chapter 5, Design and Application of Prodrugs, A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Krosgaard-Larsen, P. et al., eds., Harwood Academic Publishers (1991);
c) Bundgaard, H., Adv. Drug Deliv. Rev., 8:1-38 (1992);
d) Bundgaard, H. et al., J. Pharm. Sci., 77:285 (1988); и
e) Kakeya, N. et al., Chem. Pharm. Bull, 32:692 (1984).
Соединения, содержащие карбоксильные группы, могут образовать физиологически гидролизуемые
- 11 031590 эфиры, которые служат пролекарствами, которые гидролизуются в организме с получением соединения формулы I per se. Такие пролекарства предпочтительно вводить перорально, так как во многих случаях гидролиз происходит в основном под действием пищеварительных ферментов. Парентеральное введение может быть использовано, когда эфир per se является активным, или в тех случаях, когда гидролиз происходит в крови. Примеры физиологически гидролизуемых эфиров соединений формулы I включают C1-6 алкиловый, C1-6 алкилбензиловый, 4-метоксибензиловый, инданиловый, фталиловый, метоксиметиловый, C1-6 алканоилокси-C'iv, алкиловый (например, ацетоксиметиловый, пивалоилоксиметиловый или пропионилоксиметиловый), C1-6 алкоксикарбонилокси-Ц^ алкиловый (например, метоксикарбонилоксиметиловый или этоксикарбонилоксиметиловый, глицилоксиметиловый, фенилглицилоксиметиловый, (5метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метиловый) и другие хорошо известные физиологически гидролизуемые эфиры, например, используемые в области производства пенициллина и цефалоспорина. Такие сложные эфиры могут быть получены стандартными методами, известными из уровня техники.
Получение пролекарств хорошо известно из уровня техники и описано, например, в публикациях F.D., ed., Medicinal Chemistry: Principles and Practice, The Royal Society of Chemistry, Cambridge, UK (1994); Testa, B. et al., Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism. Chemistry, Biochemistry and Enzymology, VCHA and Wiley-VCH, Zurich, Switzerland (2003); Wermuth, C.G., ed., The Practice of Medicinal Chemistry, Academic Press, San Diego, СА (1999).
Настоящее изобретение включает все изотопы атомов, содержащихся в заявленных соединениях. Изотопы включают атомы, имеющие одинаковый атомный номер, но разные массовые числа. В качестве примера и без ограничения, можно указать изотопы водорода дейтерий и тритий. Дейтерий имеет один протон и один нейтрон в ядре и массу, в два раза превышающую массу обычного водорода. Дейтерий можно обозначать символами, такими как 2Н или D. В данной заявке термин дейтерированный сам по себе или используемый для модификации соединения или группы, относится к замещению одного или более атомов водорода, которые присоединены к атому (-ам) углерода, атомом дейтерия. Изотопы углерода включают 13С и 14С.
Меченные изотопами соединения согласно данному изобретению могут быть обычно получены традиционными методами, известными специалистам в данной области или способами, аналогичными описанным в данной заявке, с использованием соответствующего меченного изотопом реагента вместо обычно используемого не меченного изотопом реагента. Такие соединения имеют разнообразное возможное применение, например, в качестве стандартов и реагентов при определении способности потенциального фармацевтического соединения связывать целевые белки или рецепторы, или для визуализации соединений по изобретению, связанных с биологическими рецепторами in vivo или in vitro.
Термины стабильное соединение и стабильная структура предназначены для указания соединения, которое является достаточно устойчивым, чтобы выдержать выделение из реакционной смеси до приемлемой степени чистоты и введение в состав эффективного терапевтического агента. Предпочтительно, чтобы соединения согласно данному изобретению не содержали группы N-галоид, S(O)2H или S(O)H.
Термин сольват означает физический ассоциат соединения по изобретению с одной или более молекулами растворителя, или органического, или неорганического. Этот физический ассоциат включает наличие водородных связей. В некоторых случаях сольват способен выделяться, например, когда одна или более молекул растворителя включены в кристаллическую решётку кристаллического твёрдого вещества. Молекулы растворителя в сольвате могут быть расположены регулярно и/или нерегулярно. Сольват может содержать или стехиометрическое, или нестехиометрическое количество молекул растворителя. Термин сольват охватывает сольваты как в фазе раствора, так и сольваты, которые можно выделить. Сольваты включают, но без ограничения, гидраты, этаноляты, метаноляты и изопропаноляты. Методы сольватации широко известны в уровне техники.
В данной заявке применяются следующие сокращения: 1 х означает один раз, 2 х - два раза, 3 х - три раза, °C обозначает градусы Цельсия, экв.- эквивалент или эквиваленты, г - грамм или граммы, мг - миллиграмм или миллиграммы, л - литр или литры, мл - миллилитр или миллилитры, мкл - микролитр или микролитры, N - нормальный, М - молярность, ммол - миллимоль или миллимоли, мин - минуту или минуты, ч - час или часы, rt - комнатная температура, RT - время удерживания, RBF - круглодонная колба, атм - атмосфера, ф/дюйм2 - фунты на кв. дюйм, конц. - концентрированный, RCM - метатезис с закрытием кольца, нас. - насыщенный, SFC - сверхкритическая флюидная хроматография, ММ - молекулярная масса, т. пл. - температура плавления, ее - избыток энантиомера, MS или масс. спектр. - масс-спектрометрия, ESI - масс-спектрометрия с электрораспылительной ионизацией, HR - высокое разрешение, HRMS - масс-спектрометрия высокого разрешения, LCMS - жидкостная хроматография с масс-спектрометрией, HPLC - жидкостная хроматография высокого давления, RP HPLC - HPLC с обращенной фазой, TLC или tlc - тонкослойная хроматография, NMR - спектроскопия ядерного магнитного резонанса, nOe - спектроскопия ядерного эффекта Оверхаузера, 1Н - протон, δ - дельта, s - синглет, d - дублет, t - триплет, q - квартет, m - мультиплет, br - широкий, Hz - герц и α, β, R, S, Еи Z - стереохимические обозначе
- 12 031590 ния, известные специалисту в данной области.
Me метил
Et этил
Pr пропил
z-Pr изопропил
Bu бутил
z-Bu изобутил
/-Bu трет, бутил
Ph фенил
Bn бензил
Вос или трет, бутил оксикарбонил
ВОС
ВосгО ди-трет. бутилдикарбонат
АсОН или уксусная кислота
НОАс
А1С1з хлорид алюминия
AIBN азобисизобутиронитрил
ВВгз трибромид бора
ВС1з трихлорид бора
ВЕМР 2-трет. бутилимино-2-диэтиламино-1,3- диметилпергидро-1,3,2-диазафосфорин
ВОР бензотриазол-1-ил окси- трис- (диметиламино)фосфония гексафторфосфат
Реагент 1-MeTOKCH-N-
Бёрджесса Cbz триэтиламмонийсульфонилметанимидат карбобензилокси
DCM или CH2CI2 дихлорметан
CH3CN или ACN ацетонитрил
CDCh дейтеро-хлороформ
СНС1з хлороформ
шСРВА мета-хлорбензойная кислота
или ш-СРВА
CS2CO3 карбонат цезия
Си(ОАс)2 ацетат меди (II)
Cui йодид меди©
CuSO4 сульфат меди (II)
Cy2NMe Х-циклогексил-Х-метилциклогексанамин
DBU 1,8-диазабицикло[5.4.0]у ндец-7-ей
DCE 1,2-дихлорэтан
DEA диэтил амин
Реагент 1,1,1 -трис-(ацетил окси)-1,1 -дигидро-1,2-
Десс-Мартина бензйодоксол-3-(1Н)-он
DIC или
DIPCDI диизопропилкарбодиимид
DIEA, DIPEA диизопропилэтиламин
или основание Хунига
DMAP 4-диметиламинопиридин
DME 1,2-диметоксиэтан
DMF д иметил ф ормамид
DMSO диметил сульфоксид
cDNA комплементарная ДНК
- 13 031590
Dppp DuPhos (7?)-(+)-1,2-бис(дифенилфосфин)пропан (+)-1,2-бис((28,58)-2,5-диэтилфосфолан)бензол
EDC N-(3-диметил аминопропил)-А'-этилкарбодиимд
EDCI N-(3-диметил аминопро пил )-М'-этил карбодиимида гидрохлорид
EDTA этилендиаминтетрауксусная кислота
(5.8)- EtDuPhosRh(I) (+)-1,2-6hc((2S,5S)-2,5- диэтилфосфолан)бензол(1,5-цикл ооктадиен)родия(1) трифторметансульфонат
EtsN или триэтил амин
TEA
EtOAc этилацетат
Et2O диэтиловый эфир
EtOH этанол
GMF фильтр из стеклянного микроволокна
Grubbs II (1,3-бис(2,4,6-триметилфенил)-2- имидазолдинилиден)дихлор- (фенилметилен)(трициклогексилфосфин)рутений
HCl соляная кислота
HATU О-(7-азабензотриазол-1 -hh)-N,N,N',N'- тетраметилурония гексафторфосфат
HEPES 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1 этансульфокислота
Hex гексан
HOBt или HOBT 1 -гидроксибензотриазол
H2O2 перекись водорода
H2SO4 серная кислота
IBX 2-йодоксибензойная кислота
InCh хлорид индия(Ш)
Реагент Джонса СгОз в водном растворе H2SO4, 2 М
К2СОз карбонат калия
K2HPO4 двухосновный фосфат калия
K3PO4 трёхосновный фосфат калия
КОАс ацетат калия
K3PO4 фосфат калия
LAH литийалюминийгидрид
LG уходящая группа
LtOH гидроксид лития
MeOH метанол
MgSO4 сульфат магния
MsOH или метил сульфокислота
MSA
NaCl хлорид натрия
NaH гидрид натрия
NaHCCh бикарбонат натрия
Na2CO3 карбонат натрия
NaOH гидроксид натрия
Na2SO3 сульфит натрия
Na2SO4 сульфат натрия
NBS N-бромсукцинимид
NCS N-хлорсукцинимид
NH3 аммиак
NH4C1 хлорид аммония
nh4oh гидроксид аммония
nh4cooh формиат аммония
NMM N-метилморфолин
OTf трифлат или трифторметансульфонат
Pd2(dba)3 трис(дибензилнденацетон)днпалладий(0)
Pd(OAc)2 ацетат палладия(П)
Pd/C палладий на угле
Pd(dppf)Cl2 [ 1, Г -бис(дифенилфосфин)ферроцен]дихдлорпалладий(П)
Ph3PCl2 дихлорид трифенил фосф ина
PG защитная группа
POCh оксихлорид фосфора
- 14 031590
i-PrOH или изопропанол
PS полистирол
rt комнатная температура
SEM-C1 2-(триметилсилил)этоксиметилхлорид
SiO2 оксид кремния
SnCl2 хлорид олова(П)
ТВ Al тетра-н-бутиламмониййодид
TFA трифторуксусная кислота
THF тетрагидрофуран
TMSCHN2 триметилсилилдиазометан
T3P® ангидрид пропанфосфоновой кислоты
TRIS трис(гидроксиметил)аминометан
pTsOH п-толуолсульфокислота
Соединения согласно данному изобретению могут быть получены разными способами, известными специалисту в области органического синтеза, которые описаны более подробно в разделе VI.
IV. Биология
Хотя процесс свёртывания крови является существенным для регуляции гемостаза организма, он также участвует во многих патологических состояниях. При тромбозе сгусток крови или тромб может образовываться и локально мешать циркуляции крови, вызывая ишемию и повреждение органов. Альтернативно, в процессе, известном как эмболия, такой сгусток может смещаться и затем захватываться в дистальном сосуде, где он снова вызывает ишемию и повреждение органов. Заболевания, возникающие из-за патологического образования тромба все вместе называются тромбоэмболическими осложнениями и включают острый коронарный синдром, нестабильную стенокардию, инфаркт миокарда, тромбоз в полости сердца, ишемическую атаку, глубокий венозный тромбоз, окклюзионное заболевание периферических артерий, преходящую ишемическую атаку и лёгочную эмболию. Кроме того, тромбоз возникает на искусственных поверхностях при контакте с кровью, включая катетеры, стенты, искусственные сердечные клапаны и гемодиализные мембраны.
Некоторые условия вызывают риск развития тромбоза, например, изменения в стенках сосудов, изменения в потоке крови и изменения в составе сосудистого компартмента. Эти факторы риска известны как триада Вирхова (Colman, R.W. et al., eds., Hemostasis and Thrombosis, Basic Principles and Clinical Practice, Fifth Edition, p. 853, Lippincott Williams & Wilkins (2006)).
Антитромботические агенты часто прописывают пациентам с риском развития тромбоэмболических осложнений из-за наличия одного или более предрасполагающих факторов риска из триады Вирхова для предотвращения образования окклюзионного тромба (первичная профилактика). Например, в начале ортопедической хирургии (например, замене бедренного или коленного сустава), антитромботический агент часто вводится до операции. Антитромботический агент уравновешивает протромботические раздражители, вызванные изменениями в потоке крови в сосудах (стаз), возможным хирургическим повреждением стенок сосудов, а также изменениями в составе крови вследствие острофазового ответа на хирургию. Другим примером использования антитромботического агента для первичной профилактики является введение аспирина, ингибитора активации тромбоцитов, пациентам с риском развития тромботического сердечно-сосудистого заболевания. Хорошо известные факторы риска в таких случаях включают возраст, принадлежность к мужскому полу, гипертонию, наличие сахарного диабета, изменения содержания липидов и ожирение.
Антитромботические агенты показаны также для вторичной профилактики после первоначального тромботического события. Например, пациентам с мутациями фактора V (известного также как фактор V Лейдена) и с дополнительными факторами риска (например, беременным) вводят антикоагулянты для предотвращения рецидива венозного тромбоза. Другим примером является вторичная профилактика сердечно-сосудистых событий у пациентов с историей острого инфаркта миокарда или острым коронарным синдромом. В клинической ситуации для предотвращения второго тромботического события может быть использована комбинация аспирина и клопидогрела (или других тиенопиридинов).
Антитромботические агенты вводят для лечения болезненного состояния (то есть для остановки его развития) после его возникновения. Например, пациентов с глубоким венозным тромбозом лечат при помощи антикоагулянтов (а именно, гепарина, варфарина или LMWH) для профилактики дальнейшего роста венозной окклюзии. Со временем эти агенты также вызывают регрессию болезненного состояния, так как равновесие между протромботическими факторами и сигнальными путями антикоагулянта/профибринолитика меняется в сторону последнего фактора. Примеры лечения на сосудистом русле артерий включают лечение пациентов с острым инфарктом миокарда или острым коронарным синдромом при помощи аспирина и клопидогрела для профилактики дальнейшего роста сосудистых окклюзий, и в конечном счёте это приводит к регрессии тромботических окклюзий.
Таким образом, антитромботические агенты широко используются для первичной и вторичной профилактики (то есть профилактики или уменьшения риска) тромбоэмболических осложнений, а также для лечения уже имеющегося тромботического процесса. Лекарства, которые ингибируют коагуляцию
- 15 031590 крови, или антикоагулянты, являются центральными агентами для профилактики и лечения тромбоэмболических осложнений (Hirsh, J. et al., Blood, 105:453-463 (2005)).
Альтернативный путь инициации коагуляции работает, когда кровь попадает на искусственные поверхности (например, во время гемодиализа, сердечно-сосудистой хирургии с использованием гемодиализа, применения сосудистых трансплантатов, бактериального сепсиса), на поверхности клеток, клеточных рецепторов, клеточного дебриса, ДНК, РНК и внеклеточных матриксов. Этот процесс называют также контактной активацией. Поверхностная абсорбция фактора XII приводит к конформационному изменению молекулы фактора XII, облегчая при этом активацию молекул протеолитического активного фактора XII (фактора ХПа и фактора XIIf). Фактор XIIa (или XIIf) содержит ряд целевых белков, включая плазменный прекалликреин и фактор XI. Активный плазменный калликреин затем активирует фактор XII, приводя к амплификации контактной активации. Альтернативно, сериновая протеаза пролилкарбоксипептидазы может активировать плазменный калликреин в комплексе с высокомолекулярным кининогеном в мультибелковом комплексе, образованном на поверхности клеток и матриц (Shariat-Madar et al., Blood, 108:192-199 (2006)). Контактная активация представляет собой опосредованный поверхностно процесс, частично ответственный за регуляцию тромбоза и воспаления, и он опосредован, по меньшей мере частично, сигнальными путями: фибринолитическим, комплементным, кининоген/кининовым и другими гуморальными и клеточными сигнальными путями (см. обзор в Coleman, R., Contact Activation Pathway, Hemostasis and Thrombosis, pp. 103-122, Lippincott Williams & Wilkins (2001); Schmaier, A.H., Contact Activation, Thrombosis and Hemorrhage, pp. 105-128 (1998)). Биологическая релевантность системы контактной активации для тромбоэмболических осложнений поддерживается фенотипом мышей, дефицитных по фактору XII. Более конкретно, мыши с дефицитом фактора XII были защищены от тромботической сосудистой окклюзии в нескольких моделях тромбоза, а также в моделях инсульта, и фенотип мышей, дефицитных по фактору XII, был идентичен фенотипу мышей с дефицитом фактора XI (Renne et al., J. Exp. Med., 202:271-281 (2005); Kleinschmitz et al., J. Exp. Med., 203:513-518 (2006)). Тот факт, что фактор XI находится после фактора XIIa, в сочетании с идентичным фенотипом мышей с дефицитом XII и XI, позволяет предположить, что система контактной активации может играть основную роль в активации фактора XI in vivo.
Фактор XI является зимогеном трипсиноподобной сериновой протеазы и содержится в плазме в сравнительно низкой концентрации. Протеолитическая активация во внутренней связи R369-I370 приводит к получению тяжёлой цепи (369 аминокислот) и лёгкой цепи (238 аминокислот). Последняя содержит типичную трипсиноподобную каталитическую триаду (Н413, D464 и S557). Полагают, что активация фактора XI тромбином происходит на отрицательно заряженных поверхностях, наиболее вероятно, на поверхности активированных тромбоцитов. Тромбоциты содержат специфические сайты с высоким сродством (0.8 нМ) (130-500/тромбоцит) для активированного фактора XI. После активации фактор XIa остаётся связанным с поверхностью и распознаёт фактор IX как свой обычный макромолекулярный субстрат (Galiani, D., Trends Cardiovasc. Med., 10:198-204 (2000)).
В дополнение к механизмам активации конечного продукта, описанным выше, тромбин активирует активированный тромбином ингибитор фибринолиза (TAFI), плазменную карбоксипептидазу, которая расщепляет лизин и аргинин С-концевых остатков фибрина, уменьшая способность фибрина способствовать активации плазминогена, зависимую от активатора плазминогена тканевого типа (tPA). В присутствии антител против FXIa, лизис сгустка может возникать быстрее независимо от концентрации плазменного TAFI (Bouma, B.N. et al., Thromb. Res., 101:329-354, 2001). Таким образом, ожидается, что ингибиторы фактора XIa будут обладать свойствами антикоагулянтов и профибринолитиков.
Дальнейшие доказательства антитромбоэмболического действия направленного фактора видны в случае мышей с дефицитом фактора XI. Было показано, что полный дефицит fXI защищал мышей от тромбоза сонной артерии, вызванного хлоридом железа (FeCl3) (Rosen et al., Thromb. Haemost., 87:774777 (2002); Wang et al., J. Thromb. Haemost., 3:695-702 (2005)). Дефицит фактора XI также избавляет от перинатального летального фенотипа полного дефицита белка С (Chan et al., Amer. J. Pathology, 158:469479 (2001)). Далее, кросс-реактивные, блокирующие функции, антитела бабуинов к человеческому фактору XI защищают от тромбоза, вызванного артериально-венозным шунтированием (Gruber et al., Blood, 102:953-955 (2003)). Свидетельства антитромботического действия ингибиторов фактора XIa с малыми молекулами описаны также в опубликованной заявке США на патент № 2004/0180855 А1. Взятые вместе, эти исследования позволяют предположить, что направленный фактор XI будет уменьшать подверженность к тромботическим и тромбоэмболическим осложнениям.
Генетические данные показывают, что фактор XI не требуется для нормального гомеостаза, предполагается, что имеет место превосходный профиль механизма безопасности фактора XI по сравнению с конкурирующими антитромботическими механизмами. В противоположность гемофилии А (дефицит фактора VIII) или гемофилии В (дефицит фактора IX) мутации гена фактора XI, вызывающие дефицит фактора XI (гемофилия С), приводят к геморрагическому диатезу только в степени от слабой до умеренной, характеризующейся прежде всего послеоперационной или посттравматической, но редко спонтанной кровопотерей. Послеоперационное кровотечение в основном возникает в ткани с высокой концентрацией эндогенной фибринолитической активности (например, в полости рта и в урогенитальной сис
- 16 031590 теме). Большинство случаев по счастливой случайности идентифицируется путём дооперационной пролонгации аРТТ (характерной системы) без какой-либо предыдущей истории кровотечения.
Повышенная безопасность ингибирования XIa как антикоагулянтной терапии далее подкрепляется тем фактом, что мыши с нокаутом по фактору XI, у которых отсутствует детектируемый белок фактора XI, развиваются нормально и имеют нормальную продолжительность жизни. Не были отмечены случаи спонтанной кровоточивости. Активированное частичное тромбопластиновое время (аРТТ) (характерная система) пролонгируется в зависимости от дозы гена. Интересно, что даже после жёсткого стимулирования системы коагуляции (при рассечении хвоста) время кровотечения увеличивается незначительно по сравнению с однопомётниками дикого типа и гетерозиготными однопомётниками (Gailani, D., Frontiers in Bioscience, 6:201-207 (2001); Gailani, D. et al., Blood Coagulation and Fibrinolysis, 8:134-144 (1997).) Взятые вместе, эти данные позволяют предположить, что высокие уровни ингибирования фактора XIa должны хорошо переноситься. Эти данные противоречат данным опытов с нацеливанием других факторов коагуляции на гены, исключая фактор XII.
In vivo активация фактора XI может быть определена путём образования комплекса или с ингибитором С1, или с альфа-1-антитрипсином. При изучении 50 пациентов с острым инфарктом миокарда (AMI) около 25% пациентов характеризовались величинами, превышающими высшее значение нормального интервала при проведении комплексного анализа ELISA. Это исследование можно рассматривать как доказательство того, что по меньшей мере в субпопуляции пациентов с AMI активация фактора XI вносит вклад в образование тромбина (Minnema, M.C. et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 20:24892493 (2000)). Другое исследование установило положительную корреляцию между степенью развития коронарного артериосклероза и фактором XIa в комплексе с альфа-1-антитрипсином (Murakami, T. et al., Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol., 15:1107-1113 (1995)). Ещё одно исследование показало, что уровни фактора XIa выше 90-го процентиля у пациентов были связаны с увеличенным в 2,2 раза риском развития венозного тромбоза (Meijers, J.C.M. et al., N. Engl. J. Med., 342:696-701 (2000)).
Предпочтительно также создание новых соединений с повышенной активностью в in vitro анализах коагулирующей активности по сравнению с известными ингибиторами сериновой протеазы, таких как определение активированного частичного тромбопластинового времени (аРТТ) или протромбинового времени (РТ) (описание определения аРТТ и РТ см. в публикации Goodnight, S.H. et al., Screening Tests of Hemostasis, Disorders of Thrombosis and Hemostasis: A Clinical Guide, Second Edition, pp. 41-51, McGraw-Hill, New York (2001)).
Желательно и предпочтительно также получить соединения с благоприятными и улучшенными характеристиками по сравнению с известными ингибиторами сериновых протеаз в одной или более категорий, которые указаны в качестве примеров и не ограничивают данное изобретение: (а) фармакокинетические свойства, включая оральную биодоступность, период полужизни и клиренс; (b) фармацевтические свойства; (с) требования к дозировке; (d) факторы, которые снижают концентрацию пик-плато в крови; (е) факторы, которые повышают концентрацию активного лекарства у рецептора; (f) факторы, которые уменьшают предрасположение к клиническим взаимодействиям лекарство-лекарство; (g) факторы, которые уменьшают возможность неблагоприятных побочных эффектов, включая селективность в зависимости от других биологических мишеней; и (h) факторы, которые снижают расходы при производстве или применении.
Доклинические исследования продемонстрировали значительное антитромботическое действие ингибиторов фактора XIa с малыми молекулами в моделях артериального тромбоза у кролика и крысы при дозах, которые сохраняли гемостаз (Wong Р.С. et al., American Heart Association Scientific Sessions, Abstract No. 6118, November 12-15, 2006; Schumacher, W. et al., J. Thromb. Haemost, 3(Suppl. 1): P1228 (2005); Schumacher, W.A. et al., Eur. J. Pharmacol, 167-174 (2007)). Далее, было установлено, что in vitro пролонгирование аРТТ при помощи специфических ингибиторов фактора XIa является хорошим прогностическим фактором эффективности лечения в наших моделях тромбоза. Таким образом, in vitro определение аРТТ может быть использовано как замена эффективности in vivo.
Используемый в данной заявке термин пациент охватывает все виды млекопитающих.
Используемый в данной заявке термин лечение или долечивание подразумевает лечение болезненного состояния у млекопитающего, в частности у человека, и включает: (а) ингибирование болезненного состояния, то есть остановку его развития; и/или (b) облегчение болезненного состояния, то есть достижение регрессии болезненного состояния.
Используемый в данной заявке термин профилактика относится к охранительному лечению болезненного состояния для снижения и/или минимизации риска и/или снижения риска рецидивов болезненного состояния путём введения пациенту терапевтически эффективного количества по меньшей мере одного из соединений по данному изобретению или его стереоизомера, таутомера, фармацевтически приемлемой соли или сольвата. Пациенты могут быть выбраны для проведения профилактической терапии на основе факторов, которые, как известно, повышают риск заболеть клиническим заболеванием по сравнению с общей популяцией. При профилактическом лечении признаки клинического болезненного состояния могут наблюдаться или ещё могут быть не выявлены. Профилактическое лечение можно разделить на (а) первичную профилактику и (b) вторичную профилактику. Первичная профилактика оп
- 17 031590 ределяется как лечение для уменьшения или минимизации риска возникновения болезненного состояния у пациента, который ещё не проявил признаки клинического болезненного состояния, в то время как вторичная профилактика определяется как минимизация или уменьшение риска рецидива или повторного возникновения того же или похожего клинического болезненного состояния.
Используемый в данной заявке термин уменьшение риска охватывает виды терапии, которые снижают вероятность развития клинического болезненного состояния. Как таковые, первичное и вторичное профилактическое лечение являются примерами уменьшения риска.
Термин терапевтически эффективное количество включает количество соединения по данному изобретению, которое является эффективным, когда оно вводится в отдельности или в комбинации для ингибирования фактора XIa и/или плазменного калликреина и/или для предотвращения или лечения заболеваний, указанных в данной заявке. Когда используют комбинацию лекарств, этот термин относится в общим количествам активных ингредиентов, которые приводят к появлению профилактического или терапевтического эффекта при введении в комбинации последовательно или одновременно.
Термин тромбоз, используемый в данной заявке, относится к образованию или наличию тромба (тромбов); свёртыванию крови в кровеносном сосуде, которое может вызвать ишемию или инфаркт тканей, снабжаемых кровью при помощи этого сосуда. Термин эмболия, используемый в данной заявке, относится к внезапному блокированию артерии сгустком или чужеродным материалом, который ток крови доставил в место расположения сгустка. Термин тромбоэмболия, используемый в данной заявке, относится к закупорке кровеносного сосуда тромботическим материалом, попавшим в циркулирующую кровь при отрыве от места своего образования. Термин тромбоэмболические осложнения включает как тромботические, так и эмболические нарушения (указанные выше).
Термин тромбоэмболические осложнения, используемый в данной заявке, включает артериальные сердечно-сосудистые тромбоэмболические осложнения, венозные сердечно-сосудистые или цереброваскулярные тромбоэмболические осложнения и тромбоэмболические осложнения в полостях сердца или в периферической части системы кровообращения. Термин тромбоэмболические осложнения, используемый в данной заявке, включает также специфические заболевания, выбранные, но без ограничения, из нестабильной стенокардии или других острых коронарных синдромов, мерцательной аритмии, первого или повторного инфаркта миокарда, внезапной ишемической смерти, преходящей ишемической атаки, инсульта, атеросклероза, окклюзионной болезни периферических артерий, венозного тромбоза, глубокого венозного тромбоза, тромбофлебита, артериальной эмболии, коронарного артериального тромбоза, церебрального артериального тромбоза, церебральной эмболии, эмболии почечных артерий, лёгочной эмболии и тромбоза, возникающего от применения медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь соприкасается с искусственной поверхностью, что ускоряет возникновение тромбоза. Медицинские импланты и приспособления включают, но без ограничения: искусственные клапаны, полостные катетеры, стенты, оксигенаторы крови, шунты, порты сосудистого доступа, устройства для поддержки желудочка и искусственные сердца или полости сердца и сосудистые имплантаты. Процедуры включают, но без ограничения: сердечно-лёгочное шунтирование, чрескожное коронарное вмешательство и гемодиализ. Согласно другому варианту термин тромбоэмболические осложнения включает острый коронарный синдром, инсульт, глубокий венозный тромбоз и лёгочную эмболию.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает способ лечения тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из нестабильной стенокардии, острого коронарного синдрома, мерцательной аритмии, инфаркта миокарда, преходящей ишемической атаки, инсульта, атеросклероза, окклюзионной болезни периферических артерий, венозного тромбоза, глубокого венозного тромбоза, тромбофлебита, артериальной эмболии, коронарного артериального тромбоза, церебрального артериального тромбоза, церебральной эмболии, эмболии почечных артерий, лёгочной эмболии и тромбоза, возникающего от применения медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь соприкасается с искусственной поверхностью, что ускоряет возникновение тромбоза. Согласно другому варианту данное изобретение предусматривает способ лечения тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из острого коронарного синдрома, инсульта, венозного тромбоза, мерцательной аритмии и тромбоза, возникающего при применении медицинских имплантов и приспособлений.
Согласно другому варианту данное изобретение предусматривает способ первичной профилактики тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из нестабильной стенокардии, острого коронарного синдрома, мерцательной аритмии, инфаркта миокарда, преходящей ишемической атаки, инсульта, атеросклероза, окклюзионной болезни периферических артерий, венозного тромбоза, глубокого венозного тромбоза, тромбофлебита, артериальной эмболии, коронарного артериального тромбоза, церебрального артериального тромбоза, церебральной эмболии, эмболии почечных артерий, лёгочной эмболии и тромбоза, возникающего от применения медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь соприкасается с искусственной поверхностью, что ускоряет возникновение тромбоза. Согласно другому варианту данное изобретение предусматривает способ первичной профилактики тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из острого коронарного синдрома, инсульта, венозного тромбоза и тромбоза, возникающего при
- 18 031590 применении медицинских имплантов и приспособлений.
Согласно другому варианту данное изобретение предусматривает способ вторичной профилактики тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из нестабильной стенокардии, острого коронарного синдрома, мерцательной аритмии, инфаркта миокарда, преходящей ишемической атаки, инсульта, атеросклероза, окклюзионной болезни периферических артерий, венозного тромбоза, глубокого венозного тромбоза, тромбофлебита, артериальной эмболии, коронарного артериального тромбоза, церебрального артериального тромбоза, церебральной эмболии, эмболии почечных артерий, лёгочной эмболии и тромбоза, возникающего от применения медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь соприкасается с искусственной поверхностью, что ускоряет возникновение тромбоза. Согласно другому варианту данное изобретение предусматривает способ вторичной профилактики тромбоэмболического осложнения, при этом тромбоэмболическое осложнение выбрано из острого коронарного синдрома, инсульта, мерцательной аритмии и венозного тромбоза.
Термин инсульт, используемый в данной заявке, относится к эмболическому инсульту или атеротромботическому инсульту, возникающему при наличии окклюзионного тромбоза в общей сонной артерии, внутренней сонной артерии или во внутрицеребральных артериях.
Следует отметить, что тромбоз включает окклюзию сосудов (например, после шунтирования) и реокклюзию (например, во время или после проведения чрескожной транслюминальной коронарной ангиопластики). Тромбоэмболические осложнения могут возникать при наличии условий, включающих, но без ограничения, наличие атеросклероза, хирургическое вмешательство или осложнения после хирургического вмешательства, пролонгированную неподвижность, мерцательную аритмию, врождённую тромбофилию, наличие ракового заболевания, диабета, действие медицинских препаратов или гормонов и осложнения после беременности.
Тромбоэмболические осложнения часто ассоциируются с пациентами, страдающими от атеросклероза. Факторы риска возникновения атеросклероза включают, но без ограничения, принадлежность к мужскому полу, возраст, гипертонию, расстройство липидного обмена и сахарный диабет. Факторы риска возникновения атеросклероза в то же самое время являются факторами риска появления осложнений, вызванных атеросклерозом, то есть тромбоэмболических осложнений.
Подобным образом мерцательная аритмия часто ассоциируется с тромбоэмболическими осложнениями. Факторы риска возникновения мерцательной аритмии и последующих тромбоэмболических осложнений включают сердечно-сосудистое заболевание, ревматический порок сердца, неревматический митральный порок сердца, гипертоническое сердечно-сосудистое заболевание, хроническое заболевание лёгких и ряд смешанных аномалий сердца, а также тиреотоксикоз.
Сахарный диабет часто ассоциируется с атеросклерозом и тромбоэмболическими осложнениями. Факторы риска развития более частого диабета 2 типа включают, но без ограничений, отягощённую наследственность, ожирение, физическую пассивность, расу/этническое происхождение, ранее нарушенную гликемию натощак или нарушенную переносимость глюкозы, наличие гестационного сахарного диабета в анамнезе или рождение большого ребёнка, гипертонию, низкое содержание холестерина липопротеинов высокой плотности и синдром поликистозных яичников.
Факторы риска возникновения врождённой тромбофилии включают мутации приобретения функции в факторах коагуляции или мутацию с потерей функции в сигнальных путях антикоагулянтов или фибринолиза.
Тромбоз ассоциируется с рядом видов опухолей, например, при раке поджелудочной железы, раке молочной железы, с опухолями мозга, при раке лёгкого, раке яичника, раке простаты, при злокачественных опухолях желудочно-кишечного тракта и лимфоме Ходжкина и лимфоме не-Ходжкина. Недавние исследования позволяют предположить, что частота появления ракового заболевания у пациентов с тромбозом отражает частоту возникновения конкретного вида рака в общей популяции (Levitan, N. et al., Medicine (Baltimore), 78(5):285-291 (1999); Levine M. et al., N. Engl. J. Med., 334(11):677-681 (1996); Blom,
J.W. et al., JAMA, 293(6):715-722 (2005)). Следовательно, наиболее часто с тромбозом у мужчин ассоциируются рак простаты, колоректальный рак, рак мозга и рак лёгкого, и у женщин - рак молочной железы, рак яичника и рак лёгкого. Наблюдаемая частота возникновения венозной тромбоэмболии (VTE) у раковых больных является значительной. Различная частота VTE при разных видах опухолей наиболее вероятно связана с выбором популяции пациентов. Раковые больные с риском возникновения тромбоза могут иметь любой или все следующие факторы риска: (i) стадию ракового заболевания (а именно, наличие метастазов), (ii) наличие катетеров в центральной вене, (iii) хирургическое вмешательство и противораковую терапию, включая химиотерапию, и (iv) приём гормонов и антиангиогенных лекарств. Таким образом, обычная клиническая практика состоит во введении пациентам, имеющим развившиеся опухоли, гепарина или низкомолекулярного гепарина для предотвращения тромбоэмболических осложнений. Ряд препаратов низкомолекулярного гепарина был одобрен FDA для этих показаний.
Имеются три основных клинических ситуации, когда рассматривается профилактика VTE у пациентов, больных раком: (i) пациент прикован к постели в течение длительного времени; (ii) амбулаторный больной получает химиотерапию или облучение; и (iii) у пациента имеются полостные катетеры в центральной вене. Нефракционированный гепарин (UFH) и низкомолекулярный гепарин (LMWH) представ
- 19 031590 ляют собой эффективные антитромботические агенты для раковых больных, подвергающихся хирургическому вмешательству (Mismetti, P. et al., Br. J. Surg., 88:913-930 (2001).)
A. In Vitro анализы
Эффективность соединений по данному изобретению в качестве ингибиторов факторов коагуляции XIa, VIIa, IXa, Ха, XIIa, плазменного калликреина или тромбина может быть определена с применением релевантной очищенной сериновой протеазы соответственно и подходящего синтетического субстрата. Скорость гидролиза хромогенного или флуорогенного субстрата путём действия релевантной сериновой протеазы была измерена как в отсутствие, так и в присутствии соединений согласно данному изобретению. Гидролиз субстрата приводил к высвобождению pNA (паранитроанилина), содержание которого регистрировали спектрофотометрически путём измерения увеличения поглощения при длине волны 405 нм, или к высвобождению АМС (аминометилкумарина), содержание которого регистрировали спектрофотометрически путём измерения увеличения эмиссии при длине волны 460 нм с возбуждением при длине волны 380 нм. Снижение скорости поглощения или изменение интенсивности флуоресценции в присутствии ингибитора является показателем ингибирования ферментов. Такие методы известны специалистам в данной области. Результаты такого анализа выражаются в виде константы ингибирования, Ki.
Определение фактора XIa проводили при рН 7.4 в буферном растворе 50 мМ HEPES, содержащем 145 мМ NaCl, 5 мМ KCl и 0.1% PEG 8000 (полиэтиленгликоль; JT Baker или Fisher Scientific). Определения осуществляли, используя очищенный человеческий фактор XIa с конечной концентрацией 25-200 пМ (Haematologic Technologies) и синтетический субстрат S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg-pNA; CHROMOGENIX® или AnaSpec) с концентрацией 0.0002-0.001 М.
Определения фактора VIIa проводили в среде из 0.005 М хлорида кальция, 0.15 М хлорида натрия, 0.05 М HEPES буфера, содержащего 0.1% PEG 8000 при рН 7.5. Определения осуществляли, используя очищенный человеческий фактор VIIa (Haematologic Technologies) или рекомбинантный человеческий фактор VIIa (Novo Nordisk) с конечной концентрацией 0.5-10 нМ, рекомбинантный растворимый тканевой фактор с концентрацией 10-40 нМ и синтетический субстрат H-D-Ile-Pro-Arg-pNA (S-2288; CHROMOGENIX® или ВМРМ-2; AnaSpec) с концентрацией 0.001-0.0075 М.
Определения фактора IXa проводили в среде из 0.005 М хлорида кальция, 0.1 М хлорида натрия, 0.0000001 М рефлудана (Refludan, Berlex), 0.05 М основания TRIS и 0.5% PEG 8000 при рН 7.4. Рефлудан добавляли для ингибирования небольших количеств тромбина в коммерческих препаратах человеческого фактора IXa. Определения осуществляли, используя очищенный человеческий фактор IXa (Haematologic Technologies) с конечной концентрацией 20-100 нМ и синтетический субстрат PCIXA2100-B (CenterChem) или Pefafluor IXa 3688 (H-D-Leu-Ph'Gly-Arg-AMC; CenterChem) с концентрацией 0.0004-0.0005 M.
Определения фактора Ха проводили при рН 7.5 в среде из 0.1 М фосфата натрия в качестве буфера, содержащего 0.2 М хлорида натрия и 0.5% PEG 8000. Определения осуществляли, используя очищенный человеческий фактор Ха (Haematologic Technologies) с конечной концентрацией 150-1000 пМ и синтетический субстрат S-2222 (Bz-Ile-Glu (gamma-OMe, 50%)-Gly-Arg-pNA; CHROMOGENIX®) с концентрацией 0.0002-0.00035 М.
Определения фактора XIIa проводили при рН 7.4 в 0.05 М буфере HEPES, содержащем 0.145 М NaCl, 0.05 М KCl и 0.1% PEG 8000. Определения осуществляли, используя очищенный человеческий фактор XIIa с конечной концентрацией 4 нМ (American Diagnostica) и синтетический субстрат SPECTROZYME® #312 (H-D-CHT-Gly-L-Arg-pNA.2AcOH; American Diagnostica) с концентрацией 0.00015 М.
Определения плазменного калликреина проводили при рН 7.5 в 0.1 М фосфата натрия в качестве буфера, содержащего 0.1-0.2 М хлорида натрия и 0.5% PEG 8000. Определения осуществляли, используя очищенный плазменный калликреин (Enzyme Research Laboratories) с конечной концентрацией 200 пМ и синтетический субстрат S-2302 (H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA; CHROMOGENIX®) с концентрацией 0.000080.0004 М.
Определения тромбина проводили при рН 7.5 в среде из 0.1 М фосфата натрия в качестве буфера, содержащего 0.2 М хлорида натрия и 0.5% PEG 8000. Определения осуществляли, используя очищенный человеческий альфа-тромбин (Haematologic Technologies or Enzyme Research Laboratories) с конечной концентрацией 200-250 пМ и синтетический субстрат S-2366 (pyroGlu-Pro-Arg-pNA; CHROMOGENIX® или AnaSpec) с концентрацией 0.0002-0.0004 М.
Константу Михаэлиса, Km, при гидролизе субстрата под действием каждой протеазы определяли при 25 или 37°C в отсутствие ингибитора. Величины K определяли, давая протеазе прореагировать с субстратом в присутствии ингибитора. Реакции протекали в течение 20-180 мин (в зависимости от вида протеазы), затем определяли скорости (скорость поглощения или изменения интенсивности флуоресценции в зависимости от времени). Для расчёта величин K, использовали следующие уравнения:
(Vmax * S)/(Km + S) (vo-vs)/vs = I/(Ki(1 + S/Km)) для конкурентного ингибитора с одним сайтом связывания или
Vs/Vo = А + (В-А)/(1 + (I/IC50)n) и
Ki = IC50/(1 + S/Km) для конкурентного ингибитора,
- 20 031590 где vo обозначает скорость контрольного образца в отсутствие ингибитора;
vs обозначает скорость в присутствии ингибитора;
Vmax обозначает максимальную скорость реакции;
I обозначает концентрацию ингибитора;
А обозначает минимальную остающуюся активность (обычно фиксируется при нуле);
В обозначает максимальную остающуюся активность (обычно фиксируется при 1.0);
n обозначает коэффициент Хилла, меру числа и кооперативного эффекта потенциальных сайтов связывания ингибитора;
IC50 обозначает концентрацию ингибитора, продуцирующую 50% ингибирование в условиях анализа;
K, обозначает константу диссоциации комплекса фермент: ингибитор;
S обозначает концентрацию субстрата; и
Km обозначает константу Михаэлиса для субстрата.
Селективность соединения можно оценить по отношению величины K для данной протеазы к величине K, для протеазы, представляющей интерес (то есть селективность для FXIa в зависимости от P = K, протеазы для протеазы P/K, для FXIa). Соединения с индексом селективности > 20 считаются селективными.
Эффективность соединений по данному изобретению в качестве ингибиторов коагуляции может быть определена с применением стандартного или модифицированного метода анализа коагулирующей активности. Увеличение времени свёртывания в плазме крови в присутствии ингибитора является показателем антикоагуляции. Относительное время свёртывания представляет собой отношение времени свёртывания крови в присутствии ингибитора к времени свёртывания крови в отсутствие ингибитора. Результаты этого определения могут быть выражены как IC1.5x или IC2x, концентрации ингибитора, требуемая для увеличения времени свёртывания на 50 или 100% соответственно. IC1.5x или IC2x находят путём линейной интерполяции графиков зависимости относительного времени свёртывания от концентрации ингибитора, используя концентрацию ингибитора, которая охватывает IC1.5x или IC2x.
Время свёртывания определяется с использованием стабилизированной цитратом нормальной плазмы человека, а также плазмы, полученной от ряда лабораторных животных (например, крысы или кролика). Взятое соединение разбавляют в плазме, начиная с 10 мМ исходного раствора в DMSO. Конечная концентрация DMSO составляет менее 2%. Анализ коагулирующей активности в плазме осуществляли в автоматическом анализаторе свёртываемости (коагуляции) (SYSMEX®, Dade-Behring, Illinois). Подобным образом время свёртывания можно определить у лабораторных животных или людей, которым вводили соединения по изобретению.
Активированное частичное тромбопластиновое время (аРТТ) определяют, используя ACTIN® FSL (Dade-Behring, Illinois) в соответствии с инструкциями на упаковке. Плазму (0.05 мл) нагревают при 37°С в течение 1 мин. ACTIN® FSL (0.05 мл) добавляют к плазме и выдерживают ещё в течение 2-5 мин. Для начала коагуляции в реакционную смесь добавляют хлорид кальция (25 мМ, 0.05 мл). Время свёртывания является временем в секундах, отсчитываемым от момента добавления хлорида кальция до момента обнаружения сгустка.
Протромбиновое время (РТ) определяют с использованием тромбопластина (Thromboplastin С Plus или INNOVIN®, Dade-Behring, Illinois) в соответствии с инструкциями на упаковке. Плазму (0.05 мл) нагревают при 37°С в течение 1 мин. Для начала коагуляции к плазме добавляют тромбопластин (0.1 мл). Время свёртывания является временем в секундах, отсчитываемым от момента добавления тромбопластина до момента обнаружения сгустка.
Равновесную растворимость определяли в разных водных растворителях, забуферированых до достижения конкретного значения рН. Для приведения в равновесие использовали примерно 1 мг соединения в 100-300 мкл растворителя. Образцы перемешивали со скоростью 300 об/мин при комнатной температуре (20 ± 2°С) в течение 24 ч. Если наблюдалась солюбилизация всего твёрдого продукта, добавляли дополнительное количество соединения для сохранения избытка твёрдого во время определения. Через 24 ч для определения наличия изменения в морфологии избытка вещества использовали микроскоп. Надосадочную жидкость затем отфильтровывали через фильтр из ПВДФ с диаметром пор 22 мкм и разбавляли ацетонитрилом для анализа методом ВЭЖХ. Для ВЭЖХ готовили также калибровочные образцы.
Степень связывания соединений согласно данному изобретению с белками сериновой протеазы человека может быть определена методом диализа и аналитическими методами, хорошо известными из уровня техники и описанными, например, в публикациях Plise, E.G. et al., Semi-automated protein binding methodology using equilibrium dialysis and a novel mixed-matrix cassette approach, J. Pharm. Sci., 99(12):5070-5078 (2010); Waters, N.J. et al., Validation of a rapid equilibrium dialysis approach for the measurement of plasma protein binding, J. Pharm. Sci., 97(10):4586-4595 (2008); Van Liempd, S. et al., Development and Validation of a Higher-Throughput Equilibrium Dialysis Assay for Plasma Protein Binding, J. Lab. Autom., 16:56-67 (2011); Di, L. et al., Impact of Recovery on Fraction Unbound Using Equilibrium Dialysis,
- 21 031590
J. Pharm. Sci., 101(3): 1327-1335 (2011).
Соединения по изобретению анализировали в трёх параллельных анализах путём соединения с человеческой сывороткой до получения конечной концентрации 10 мкМ. Диализ проводили в течение 5 ч при 37°С в присутствии 10% СО2 против 0.133 М буфера, представляющего собой фосфат натрия с pH 7.4, используя двухкамерный планшет для быстрого равновесного диализа от компании Thermo Fisher (Waltham, Massachusetts). Пробы для анализа из камеры с буфером и из камеры с сывороткой собирали в момент времени 0 (Т0[Сыв.] и Т0[буфер]) и через 5 ч после инкубации (Т5ч[сыв j и Т5ч[буфер]). Перед проведением анализа диализованные образцы сыворотки разбавляли при помощи 0.133 М буферного фосфата натрия с pH 7.4, и диализованные образцы буферного раствора разбавляли человеческой сывороткой для достижения той же конечной концентрации в каждом образце. Затем эти образцы экстрагировали при осаждении белков в ацетонитриле, содержащем два аналитических внутренних стандарта (200 нМ алпренолола и 600 нМ толбутамида). Осаждённые белки и надосад очные жидкости разделяли путём центрифугирования при 4000хг в течение 10 мин. Образцы надосадочной жидкости анализировали методом LC-MS/MS и определяли отношение площадей пиков соединения и внутреннего стандарта для образцов, взятых в начальное время 0 (Т0[сыв] и Т0[буфер]) и для образцов после достижения равновесия (Т5ч[СЫВ ] и Т5ч[буфер])· Результаты для свободного вещества (свободной фракции), для связанного вещества и выделенного вещества рассчитывали следующим образом:
Свободное вещество = 100 х (Т5ч[сыв ] и Т5ч[буфер]).
Связанное вещество = 100 - свободное вещество.
Выделенное вещество = 100 х ((Т5ч[сыв ] и Т5ч[буфер]))/То[сыв.])
Интерференцию матриц оценивали путём измерения методом LC-MS/MS отношения площадей аналит/внутренний стандарт для матрицы холостой пробы (50:50 сыворотка: буфер). Аналитические условия оказались приемлемыми для оценки содержания свободного вещества, когда площадь пиков аналит/внутренний стандарт для матрицы холостой пробы (50:50 сыворотка: буфер) была менее 20% от отношения площадей пиков для образца Т5ч[буфер]·
Соединения в примерах, описанных далее, анализировали при использовании фактора Xia, как описано выше, было найдено, что эти соединения обладают ингибирующей активностью в отношении фактора Х1а. Ингибирующая активность для фактора Х1а (величины Κι) составляла <10 мкМ (10000 нМ). В табл. 1 ниже приведены величины Kf для фактора Xia, измеренные в следующих примерах при 37°С.
___________________ Таблица 1
Прим ер No. Ki фактора Х1а (нМ)
1 0.1
2 0.6
10 0.2
11 0.2
15 0.1
16 0.1
17 0.1
18 0.1
19 0.1
20 0.2
21 0.2
Соединения по примерам, описанным ниже, испытывали при проведении анализа плазменного калликреина, описанного выше, эти соединения обладали ингибирующей активностью по отношению к плазменному калликреину. Ингибирующая активность для плазменного калликреина (величины Kf) составляла <10 мкМ (10000 нМ). В табл. 2 ниже приведены величины К{ для плазменного калликреина, измеренные в следующих примерах при 37°С.
Таблица 2
Пример No. Ki плазменного калликреина (нМ)
1 28
2 10
10 23
11 22
15 24
16 32
17 33
17
19 19
SC1 15
21 17
Эффективность соединений по изобретению в качестве антитромботических агентов оценивалась
-22031590 также при помощи других анализов, таких как определение аРТТ, растворимости, сродства к связыванию человеческих белков, описанное выше. По сравнению с фенил-Р2'-макроциклами, описанными в WO 2013/022814 и WO 2014/022766, пиразолил-Р2'-макроциклы согласно данному изобретению имели превосходную фармакологическую активность. Как показано в табл. 3, соединения по данному изобретению обладают превосходной антикоагулянтной активностью, растворимостью и биодоступностью по сравнению с референсными соединениями.
__________________________________________ Таблица 3
Пример No. aPTTi.sx Растворимость при pH =6.5 (мкг/мл) Связывание человеч. белка, свободная фракция
кМ) (м
Пример 1 из WO 2014/022766 50 1. <0.001 (крист.) 0.7 %
Пример 100 из WO 2013/022814 33 1. 0.005 (аморфн.) 5%
1 50 0. 6 (крист.) 9%
10 37 0. 16 (аморфн.) 17 %
11 34 0. 159 (аморфн.) 25 %
15 32 0. 100 (аморфн.) 21 %
16 36 0. 82 (аморфн.) 21 %
17 52 0. 2 (крист.) 8%
18 42 0. 106 (аморфн.) 24%
19 37 0. 44 (крист.) 26%
20 22 0. >3,000 (аморфн.) 25 %
21 24 0. >3,400 (аморфн.) 11 %
В. In Vivo анализы
Эффективность соединений по изобретению в качестве антитромботических агентов оценивалась с использованием релевантных in vivo моделей тромбоза, включая in Vivo электрически индуцированные модели тромбоза в сонной артерии и in Vivo модели тромбоза у кролика, вызванного артериовенозным шунтированием.
a. In Vivo модель электрически индуцированного тромбоза в сонной артерии (ЕСАТ)
В данном опыте может быть использована модель ЕСАТ у кролика, описанная в публикации Wong et al. (J. Pharmacol. Exp. Ther., 295:212-218 (2000. Самцов белых новозеландских кроликов анестезировали кетамином (50 мг/кг + 50 мг/кг/ч, внутримышечно) и ксилазином (10 мг/кг + 10 мг/кг/ч, внутримышечно). Анестетики дополнялись, если это было необходимо. Электромагнитный датчик потока помещали на сегмент изолированной сонной артерии для мониторинга потока крови. Испытуемые агенты или носитель вводят (в.в., и.п., п.к., или орально) до или после инициации тромбоза. Введение лекарства до инициации тромбоза использовали для моделирования способности испытуемых агентов предотвращать риск образования тромбы и снижать этот риск, в то время как дозирование после инициации использовали для моделирования способности лечить уже имеющийся тромбоз. Образование тромба индуцируется электрической стимуляцией сонной артерии в течение 3 мин при силе тока 4 мА с использованием внешнего биполярного электрода из нержавеющей стали. Скорость потока крови в сонной артерии измеряли непрерывно в течение 90 мин для мониторинга индуцированной тромбом окклюзии. Общую скорость потока крови в сонной артерии в течение 90 мин рассчитывали по правилу трапеций. Среднюю скорость потока в каротидной артерии затем определяли путём превращения общей скорости потока крови в сонной артерии в процентную долю от общей скорости потока крови в контрольной сонной артерии, которая получится, если контрольная скорость потока крови поддерживалась постоянной в течение 90 мин. Величины ED50 (дозы, которая увеличивала среднюю скорость потока крови в сонной артерии в течение 90 мин на 50% от контрольной величины) соединений рассчитывали по программе нелинейной регрессии наименьших квадратов, используя сигмоидальное уравнение Emax Хилла (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
b. In vivo модель тромбоза у кролика, вызванного артериовенозным (AV) шунтированием (AV)
Модель тромбоза у кролика, вызванного (AV) шунтированием, описанную Wong et al. (Wong, P.C. et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 292:351-357 (2000)), можно использовать для проведения этого опыта. Сам
- 23 031590 цов белых новозеландских кроликов анестезировали кетамином (50 мг/кг + 50 мг/кг/ч, внутримышечно) и ксилазином (10 мг/кг + 10 мг/кг/ч, внутримышечно). Эти анестетики дополнялись, если это было необходимо. Изолировали бедренную артерию, яремную вену и бедренную вену и вводили в них катетеры. Заполненный физиологическим раствором AV шунт соединяли между канюлями в бедренной артерии и бедренной вене. AV шунт состоит из внешней трубки Tygon (длина = 8 см; внутренний диаметр = 7.9 мм) и внутренней трубки (длина = 2.5 см; внутренний диаметр = 4.8 мм). В AV шунт вставлена шёлковая нить 2-0 длиной 8 см (Ethicon, Somerville, NJ). Кровь текла из бедренной артерии через AV шунт в бедренную вену. Действие текущей крови на шёлковую нить вызывало образование значительного тромба. Через сорок минут шунт отсоединяли и шёлковую нить вместе с прилипшим тромбом взвешивали. Испытуемые агенты или носитель вводили (в.в., и.п., п.к. или орально) перед открытием AV шунта. Степень ингибирования образования тромб определяли в каждой группе, участвующей в испытании. Величины ID50 (дозы, которая приводит к 50% ингибированию образования тромба) рассчитывали по программе нелинейной регрессии наименьших квадратов, используя сигмоидальное уравнение Emax Хилла (DeltaGraph; SPSS Inc., Chicago, IL).
Противовоспалительный эффект испытуемых соединений может быть показан при использовании метода просачивания (экстравазации) с применением красителя голубого Эванса и мышей с дефицитом ингибитора С1-эстеразы. В этой модели мышам дозировали соединение согласно данному изобретению, краситель голубой Эванса инъецировали в хвостовую вену и наблюдали просачивание голубого красителя из экстрактов тканей методом спектрофотометрии.
Способность соединений по изобретению уменьшать или предотвращать появление синдрома системного воспалительного ответа, наблюдаемый, например, во время сердечно-сосудистого вмешательства с применением искусственного кровообращения, можно определить в in vitro перфузионных системах или во время сердечно-сосудистого вмешательства с применением искусственного кровообращения для больших млекопитающих, включая собак и бабуинов. Данные для оценки действия соединений по изобретению включают, например, пониженную потерю тромбоцитов, наличие комплексов сниженные тромбоциты/лейкоциты, пониженное содержание нейтрофилэластазы в плазме, пониженная активация факторов комплемента и пониженная активация и/или потребление белков контактной активации (плазменного калликреина, фактора XII, фактора XI, высокомолекулярного кининогена, ингибиторов С1эстеразы).
Соединения по данному изобретению могут использоваться как ингибиторы дополнительных сериновых протеаз, особенно человеческого тромбина, плазменного калликреина человека и человеческого плазмина. Благодаря ингибирующему действию эти соединения показаны для применения для профилактики или лечения физиологических реакций, включая свёртывание крови, фибринолиз, регуляцию кровяного давления и воспаление, а также заживление ран, катализируемое вышеуказанным классом ферментов. Данные соединения можно использовать как лекарства для лечения заболеваний с повышенным уровнем активности тромбина из ряда вышеуказанных сериновых протеаз, таких как инфаркт миокарда, и в качестве реагентов, используемых в качестве антикоагулянтов при обработке крови получения плазмы для диагностических и других коммерческих целей.
V. Фармацевтические композиции, составы и комбинации
Соединения согласно настоящему изобретению могут вводиться в таких оральных лекарственных формах, как таблетки, капсулы (каждая из которых включает составы с замедленным или пролонгированным высвобождением), пилюли, порошки, гранулы, эликсиры, микстуры, суспензии, сиропы и эмульсии. Они могут также вводиться в внутривенных (в виде болюса или инфузии), внутрибрюшинных, подкожных или внутримышечных формах, все эти лекарственные формы хорошо известны средним специалистам в области фармацевтики. Они могут вводиться сами по себе, но обычно вводятся вместе с фармацевтическим носителем, выбранным на основе выбранного пути введения и стандартной фармацевтической практики.
Термин фармацевтическая композиция означает композицию, содержащую соединение по изобретению в комбинации с по меньшей мере одним дополнительным фармацевтически приемлемым носителем. Термин фармацевтически приемлемый носитель относится к среде, обычно используемой в данной области для доставки биологически активных агентов животным, в особенности, млекопитающим, включая, в зависимости от вида способа введения и лекарственной формы, адъювант, эксципиент или носитель, такой как разбавители, консервирующие агенты, наполнители, агенты, улучшающие текучесть, дезинтегрирующие агенты, смачивающие агенты, эмульгаторы, суспендирующие агенты, подсластители, вкусовые агенты, отдушки, антибактериальные агенты, противогрибковые агенты, смазывающие вещества и необязательные добавки. Фармацевтически приемлемые носители вводятся в композицию в соответствии с рядом факторов, известных средним специалистам в данной области. Эти факторы включают, но без ограничения, вид и природу активного агента, входящего в состав композиции, вид субъекта, которому композиция, содержащая этот агент, должна вводиться; выбранный способ введения композиции и терапевтическое показание для лечения. Фармацевтически приемлемые носители включают и водные, и неводные жидкие среды, а также различные твёрдые и полутвёрдые лекарственные формы. Такие носители помимо активного агента могут включать ряд различных ингредиентов и добавок,
- 24 031590 такие дополнительные ингредиенты включаются в состав по ряду причин, например, для стабилизации активного агента, связующих и т.д., хорошо известных средним специалистам в данной области. Описание подходящих фармацевтически приемлемых носителей и факторов, принимаемых во внимание при их выборе, содержится в различных доступных источниках, таких как, например, Remington's Pharmaceutical Sciences, 18th Edition (1990).
Схема приёма соединений согласно данному изобретению, конечно, сильно зависит от известных факторов, таких как фармакодинамические характеристики конкретного агента и способ и путь его введения; вид, возраст, пол, состояние здоровья, медицинское состояние и вес реципиента; природа и степень развития симптомов; вид сопутствующего лечения; частота циклов лечения; путь введения, состояние почечной и печёночной функций пациента и желательный эффект. Практикующий врач или ветеринар могут определить и прописать эффективное количество лекарства, требующегося для профилактики, противодействия или остановки развития тромбоэмболического осложнения.
В общем дневная оральная доза каждого активного ингредиента, при использовании для получения ожидаемого эффекта составляет от примерно 0.001 до примерно 1000 мг/кг веса, предпочтительно от примерно 0.01 до примерно 100 мг/кг веса в день и наиболее предпочтительно от примерно 0.1 до примерно 20 мг/кг/день. При внутривенном введении наиболее предпочтительные дозы составляют от примерно 0.001 до примерно 10 мг/кг/мин во время инфузии с постоянной скоростью. Соединения по изобретению могут вводиться в виде однократной дневной дозы или общая дневная доза может быть введена в виде разделённых доз два, три или четыре раза в день.
Соединения по изобретению парентерально (например, внутривенно, внутриартериально, внутримышечно или подкожно. При внутривенном или внутриартериальном введении доза соединения может вводиться непрерывно или дробно. Далее, можно получить состав для внутримышечного или подкожного введения, который обеспечит постепенное высвобождение активного фармацевтического ингредиента. Согласно одному из вариантов фармацевтическая композиция представляет собой твёрдый состав, например, композицию, высушенную распылением, которая может быть использована как таковая или при добавлении врачом или пациентом растворителей и/или разбавителей перед применением.
Соединения по изобретению могут вводиться интраназально при топическом применении подходящих интраназальных носителей или трансдермально с использованием трансдермальных пластырей, накладываемых на кожу. При применении в виде системы для трансдермальной доставки дозу вводят скорее непрерывно, чем дробно во время осуществления дозирования.
Соединения обычно вводятся в смеси с подходящими фармацевтическими разбавителями, эксципиентами или носителями (все вместе они называются в данной заявке фармацевтическими носителями), выбранными в зависимости от намеченного способа введения, например, в виде оральных таблеток, капсул, эликсиров и сиропов, и в соответствии с обычной фармацевтической практикой.
Например, для орального введения в виде таблетки или капсулы активный лекарственный компонент может быть соединён с оральным, нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как лактоза, крахмал, сахароза, глюкоза, метилцеллюлоза, стеарат магния, дикальцийфосфат, сульфат кальция, маннит, сорбит и т.п.; для орального введения в жидкой форме оральные лекарственные компоненты могут быть соединены с любым оральным, нетоксичным, фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и т.п. Более того, когда это желательно или необходимо, в смесь могут быть введены подходящие связующие, смазочные агенты, дезинтегрирующие агенты и красители. Подходящие связующие включают крахмал, желатин, природные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, сахаристые вещества из кукурузы, природные и синтетические смолы, такие как смола акации, трагакант или альгинат натрия, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль, воски и т.п. Смазывающие вещества, применяемые в этих лекарственных формах, включают олеат натрия, стеарат натрия, стеарат магния, бензоат натрия, ацетат натрия, хлорид натрия и т.п. Дезинтеграторы включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую смолу и т.п.
Соединения по данному изобретению могут также вводиться в виде систем для доставки липосом, таких как маленькие униламеллярные пузырьки, большие униламеллярные пузырьки и мультиламеллярные пузырьки. Липосомы могут быть получены из различных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.
Соединения по изобретению могут также сочетаться с растворимыми полимерами в качестве целевых носителей лекарств. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, сополимеры пирана, полигидроксипропилметакрил-фенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксид-полизин, замещённый пальмитоильными остатками. Далее, соединения по изобретению могут сочетаться с классом биоразлагаемых полимеров, пригодных для достижения регулируемого высвобождения лекарства, например, с полимолочной кислотой, полигликолевой кислотой, сополимерами полимолочной и полигликолевой кислоты, поли-эпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, полиортоэфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианацилатами и сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами в виде гидрогелей. Твёрдые дисперсии называются также дисперсиями в твёрдом состоянии. Согласно некоторым вариантам любое соединение, описанное в данной заявке, может вводиться в состав дисперсии, полученной путём сушки распылением (SDD). SDD является однофазной
- 25 031590 аморфной молекулярной дисперсией лекарства в матрице полимера. Это твёрдая дисперсия получается путём растворения лекарства и полимера в растворителе (например, в ацетоне, метаноле или т. п.) и сушки раствора при распылении. Растворитель быстро испаряется из капель, что быстро приводит к отвердеванию смеси полимера и лекарства, захватывающей лекарство в аморфной форме в виде аморфной молекулярной дисперсии.
Лекарственные формы (фармацевтические композиции), подходящие для введения, могут содержать от примерно 1 мг до примерно 1000 мг активного ингредиента в стандартной дозе. В этих фармацевтических композициях активный ингредиент обычно находится в количестве примерно 0.1-95 вес.% в расчёте на общий вес композиции.
Желатиновые капсулы могут содержать активный ингредиент и порошкообразные носители, такие как лактоза, крахмал, производные целлюлозы, стеарат магния, стеариновую кислоту и т. п. Похожие разбавители могут быть использованы для получения прессованных таблеток. И таблетки, и капсулы можно изготавливать в виде продуктов с пролонгированным высвобождением для непрерывного высвобождения лекарственного средства в течение нескольких часов. Прессованные таблетки могут быть покрыты сахаром или плёнкой для маскировки неприятного вкуса и защиты таблетки от атмосферного воздействия или они могут иметь энтеропокрытие для селективной дезинтеграции в желудочно-кишечном тракте.
Жидкие лекарственные формы для орального введения могут содержать красители и вкусовые вещества для повышения приемлемости для пациентов.
В общем, подходящими носителями для парентеральных растворов являются вода, подходящее масло, физиологический раствор, водная декстроза (глюкоза) и подходящие растворы Сахаров и гликолей, такие вещества, как пропиленгликоль или полиэтиленгликоли, являются подходящими носителями для парентеральных растворов. Растворы для парентерального введения предпочтительно содержат водорастворимую соль активного ингредиента, подходящие стабилизирующие агенты и, если это необходимо, буферные вещества. Стабилизирующими агентами являются антиокислители, такие как бисульфит натрия, сульфит натрия или аскорбиновая кислота, или в отдельности, или в виде комбинаций. Используются также лимонная кислота и её соли и натриевая соль ЭДТА. Кроме того, парентеральные растворы могут содержать консерваторы, такие как бензалконийхлорид, метил- или пропилпарабен и хлорбутанол.
Подходящие фармацевтические носители описаны в монографии Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, являющейся стандартной отсылкой в данной области.
Когда соединения по изобретению соединяются, например, с другими антикоагулянтами, дневная доза может составлять от примерно 0.1 до примерно 100 мг соединения по данному изобретению и от примерно 0.1 до примерно 100 мг на кг веса пациента. В лекарственной форме в виде таблеток соединения по изобретению обычно могут содержаться в количестве от примерно 5 до примерно 300 мг на стандартную дозированную форму, и второй антикоагулянт содержится в количестве от примерно 1 до примерно 500 мг на стандартную дозированную форму.
Когда соединения по изобретению вводятся в комбинации с антитромботическим агентом, в общем, дневная доза может содержать от примерно 0.01 до примерно 300 мг соединения по данному изобретению и от примерно 50 до примерно 150 мг антитромботического агента, предпочтительно от примерно 0.1 до примерно 4 мг соединения по данному изобретению и от примерно 1 до примерно 3 мг антитромботических агентов на кг веса пациента.
Когда соединения по изобретению вводятся в комбинации с тромболитическим агентом, в общем, дневная доза может содержать от примерно 0.1 до примерно 100 мг соединения по данному изобретению на кг веса пациента и, в случае тромболитических агентов, обычная доза тромболитического агента, когда его вводят в отдельности, может быть снижена примерно на 50-80% при введении с соединением по настоящему изобретению.
В частности, когда получают однократную дозу, существует возможность химического взаимодействия между соединёнными вместе активными ингредиентами, по этой причине, когда соединение по изобретению и второй терапевтический агент соединяют в однократной дозе, состав готовят так, что, хотя активные ингредиенты соединены в однократной дозе, физический контакт между активными ингредиентами сводится к минимуму (то есть уменьшается). Например, один активный ингредиент может содержать энтеропокрытие. При получении энтеропокрытия одного из активных ингредиентов можно не только свести к минимуму контакт между соединёнными активными ингредиентами, но также можно регулировать высвобождение одного из таких компонентов в желудочно-кишечном тракте таким образом, что один из этих компонентов не высвобождается в желудке, а высвобождается в кишечнике. Один из активных ингредиентов может быть покрыт материалом, который влияет на пролонгирование высвобождения в желудочно-кишечном тракте и также служит для минимизации физического контакта между соединёнными активными ингредиентами. Далее, компонент с пролонгированным высвобождением может содержать дополнительно энтеропокрытие, чтобы высвобождение этого компонента происходило только в кишечнике. Ещё один подход будет включать получение комбинационного продукта, в котором один компонент покрыт полимером для пролонгированного высвобождения в кишечнике, и другой компонент также содержит покрытие на основе полимера, такого как низковязкая гидроксипропилметилцел
- 26 031590 люлоза (НРМС) или другого подходящего материала, известного из уровня техники, для дальнейшего разделения активных компонентов. Полимерное покрытие служит для образования дополнительного барьера, препятствующего взаимодействию с другим компонентом.
Эти и другие пути минимизации контакта между компонентами комбинированных продуктов согласно данному изобретению, когда они вводятся в виде одной дозы или в виде отдельных форм, но таким же образом, очевидны для специалистов в данной области, ознакомившихся с данной заявкой.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую также дополнительный (-ые) терапевтический (-ие) агент (-ы), выбранный (-ые) из веществ, открывающих калиевые каналы, блокаторы калиевых каналов, блокаторов кальциевых каналов, ингибиторов обмена с участием гидрида натрия, антиаритмических агентов, антиатеросклеротических агентов, антикоагулянтов, антитромботических агентов, протромболитических агентов, антагонистов фибриногена, диуретиков, антигипертонических агентов, ингибиторов АТФазы, антагонистов минералокортикоидных рецепторов, ингибиторов фосфодиэстеразы, антидиабетических агентов, противовоспалительных агентов, антиоксидантов, амодуляторов ангиогенеза, антиостеопорозных агентов, гормонозаместительных терапевтических агентов, модуляторов рецепторов гормонов, оральных контрацептивов, агентов от ожирения, антидепрессантов, транквилизаторов, антипсихотических агентов, антипролиферативных агентов, противоопухолевых агентов, противоязвенных средств и агентов для лечения гастроэзофагеальной рефлюксной болезни, гормонов роста и/или средств, усиливающих секрецию соматотропного гормона, тироидных миметиков, противоинфекционных агентов, противовирусных агентов, антибактериальных агентов, противогрибковых агентов, агентов, снижающих уровень холестерина/липидов и терапевтических агентов, улучшающих липидный профиль и агентов, которые стимулируют ишемическое прекондиционирование и/или постишемическое нарушение сократительной функции миокарда или их комбинации.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую также дополнительный (-ые) терапевтический (-ие) агент (-ы), выбранный (-ые) из антиаритмического агента, антигипертонического агента, антикоагулянта, антитромбоцитарного агента, ингибитора тромбина, тромболитического агента, фибринолитического агента, блокатора кальциевых каналов, блокатора калиевых каналов, агента, снижающего уровень холестерина/липидов или их комбинации.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, содержащую также дополнительный (-ые) терапевтический (-ие) агент (-ы), выбранный (-ые) из варфарина, нефракционированного гепарина, низкомолекулярного гепарина, синтетического пентасахарида, гирудина, аргатробана, аспирина, ибупрофена, напроксена, сулиндака, индометацина, мефенамата, дипиридамола, дроксикама, диклофенака, сульфинпиразона, пироксикама, тиклопидина, клопидогрела, тирофибана, эптифибатида, абциксимаба, мелагатрана, ксимелагатрана, дисульфатогирудина, активатора тканевого плазминогена, модифицированного активатора тканевого плазминогена, анистреплазы, урокиназы и стрептокиназы или их комбинации.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, в которой дополнительным терапевтическим агентом является антигипертонический агент, выбранный из ингибиторов АСЕ, антагонистов рецепторов АТ-1, антагонистов бета-адренергических рецепторов, антагонистов рецепторов ЕТА, антагонистов двойных рецепторов ЕТА/АТ-1, ингибиторов ренина (алискирена) и ингибиторов вазопептидазы, антиаритмического агента, выбранного из ингибиторов IKur, антикоагулянта, выбранного из ингибиторов тромбина, активаторов антитромбина-Ш, активаторов кофактора гепарина-II, других ингибиторов фактора XIa, других ингибиторов калликреина, антагонистов ингибиторов активатора плазминогена (PAI-1), активируемых тромбином ингибиторов фибринолиза (TAFI), ингибиторов фактора VIIa, ингибиторов фактора IXa и ингибиторов фактора X или антитромбоцитарного агента, выбранного из блокаторов GPIIb/IIIa, блокаторов GP Ib/IX, антагонистов активированного протеазой рецептора 1 (PAR-1), антагонистов активированного протеазой рецептора 4 (PAR-4), антагонистов рецептора EP3 простагландина Е2, антагонистов рецепторов коллагена, ингибиторов фосфодиэстеразы-Ш, антагонистов рецепторов P2Yb антагонистов P2Y12, антагонистов рецепторов тромбоксана, ингибиторов циклооксигеназы-1 и аспирина или их комбинации.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, в которой дополнительным терапевтическим агентом является антитромбоцитарный агент или его комбинация.
Согласно другому варианту настоящее изобретение предусматривает фармацевтическую композицию, в которой дополнительным терапевтическим агентом является антитромбоцитарный агент клопидогрел.
Соединения согласно данному изобретению могут вводиться в отдельности или в комбинации с одним или более дополнительными терапевтическими агентами. Под термином вводимый в комбинации или комбинированная терапия подразумевают, что соединение по изобретению и один или более дополнительных терапевтических агентов вводятся одновременно млекопитающему, подвергающемуся лечению. При введении комбинации каждый компонент может вводиться в одно и то же время или по
- 27 031590 следовательно в любом порядке в разные моменты времени. Таким образом, каждый компонент может быть введён отдельно, но достаточно близко по времени, чтобы обеспечить желательный терапевтический результат.
Соединения, которые могут быть введены в комбинации с соединениями по данному изобретению, включают, но без ограничения, антикоагулянты, антитромбиновые агенты, антитромбоцитарные агенты, фибринолитики, гиполипидемические агенты, антигипертонические агенты и антиишемические агенты.
Другие антикоагулянты (или агенты, ингибирующие коагуляцию), которые могут быть введены в комбинации с соединениями по данному изобретению, включают варфарин, гепарин (или нефракционированный гепарин, или любой коммерчески доступный низкомолекулярный гепарин, например, LOVENOX®), синтетический пентасахарид, ингибиторы тромбина прямого действия, включая гирудин и аргатробан, а также другие ингибиторы фактора VIIa, ингибиторы фактора IXa, ингибиторы фактора Ха (например, ARIXTRA®, апиксабан, ривароксабан, LY-517717, DU-176b, DX-9065a и соединения, описанные в заявках WO 98/57951, WO 03/026652, WO 01/047919 и WO 00/076970), ингибиторы фактора Xia и ингибиторы активированных TAFI и PAI-1, известные в уровне техники.
Термин антитромбоцитарные агенты (или агенты, ингибирующие тромбоциты), используемые в данной заявке, обозначает агенты, которые ингибируют функцию тромбоцитов, например, путём ингибирования агрегации, адгезии или секрецию гранул тромбоцитами. Такие агенты включают, но без ограничения, различные известные нестероидные противовоспалительные средства (NSAIDs), такие как ацетаминофен, аспирин, кодеин, диклофенак, дроксикам, фентанил, ибупрофен, индометацин, кеторолак, мефенамат, морфин, напроксен, фенацетин, пироксикам, сульфентанил, сульфинпиразон, сулиндак и их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства. Предпочтительными NSAIDs являются аспирин (ацетилсалициловая кислота или ASA) и пироксикам. Другие подходящие агенты, ингибирующие тромбоциты, включают антагонисты гликопротеина IIb/IIIa (например, тирофибан, эптифибатид, абциксимаб иинтегрелин), антагонисты рецептора тромбоксана А2 (например, ифетробан), ингибиторы тромбоксанА-синтетазы, ингибиторы фосфодиэстеразы-III (PDE-III) (например, дипиридамол, цилостазол) и ингибиторы PDE-V (такие как силденафил), антагонисты активированного протеазой рецептора 1 (PAR-1) (например, Е-5555, SCH-530348, SCH-203099, SCH-529153 и SCH-205831) и их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства.
Другие примеры подходящих антитромбоцитарных агентов для применения в комбинации с соединениями по данному изобретению, вместе с аспирином или без него, включают антагонисты рецепторов ADP (аденозиндифосфата), предпочтительно антагонисты пуринергических P2Y1 и P2Y12 рецепторов, при этом P2Y12 является даже более предпочтительным. Предпочтительные антагонисты P2Y12 рецепторов включают клопидогрел, тиклопидин, прасугрел, тикагрелор и кангрелор и их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства. Тиклопидин и клопидогрел также являются предпочтительными соединениями, так как известно, что они представляют собой более мягкие лекарства, чем аспирин при использовании для введения в желудочно-кишечный тракт. Клопидогрел является даже более предпочтительным агентом.
Предпочтительным примером является тройная комбинация соединения по данному изобретению, аспирина и другого антитромбоцитарного агента. Предпочтительным антитромбоцитарным агентом при этом является клопидогрел или прасугрел, более предпочтителен клопидогрел.
Термин ингибиторы тромбина (или антитромбиновые агенты), используемый в данной заявке, обозначает ингибиторы сериновой протеазы тромбина. Путём ингибирования тромбина нарушаются различные опосредованные тромбином процессы, такие как опосредованная тромбином активация тромбоцитов (то есть, например, агрегация тромбоцитов и/или секреция гранул тромбоцитами, включая серотонин), и/или образование фибрина. Специалисту в данной области известен ряд ингибиторов тромбина и эти ингибиторы предусмотрены для применения в комбинации с заявленными соединениями. Такие ингибиторы включают, но без ограничения, производные бороаргинина, боропептиды, гепарины, гирудин, аргатробан, дабигатран, AZD-0837 и ингибиторы, описанные в заявках WO 98/37075 и WO 02/044145, и их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства. Производные бороаргинина и боропептиды включают N-ацетильные и пептидные производные бороновой кислоты, такие как С-концевые производные альфа-аминобороновой кислоты, лизина, орнитина, аргинина, гомоаргинина и соответствующие их изотиоурониевые аналоги. Термин гирудин, используемый в данной заявке, включает подходящие производные или аналоги гирудина, называемые в данной заявке гирулогами, такие как дисульфатогирудин.
Термин тромболитические (или фибринолитические) агенты (или тромболитики или фибринолитики), используемый в данной заявке, обозначает агенты, которые лизируют кровяные сгустки (тромбы). Такие агенты включают активатор тканевого плазминогена (ТРА, природный или рекомбинантный) и его модифицированные формы, анистреплазу, урокиназу, стрептокиназу, тенектеплазу (TNK), ланотеплазу (nPA), ингибиторы фактора VIIa, ингибиторы тромбина, ингибиторы факторов IXa, Xa и XIa, ингибиторы PAI-I (то есть инактиваторы ингибиторов тканевого активатора плазминогена), ингибиторы активированных TAFI, ингибиторы альфа-2-антиплазмина и анизоилированный комплекс стрептокиназа
- 28 031590 плазминоген, включая их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства. Термин анистреплаза, используемый в данной заявке, относится к анизоилированному комплексу плазминоген-стрептокиназа, описанному, например, в европейской заявке на патент № 028489, содержание которой включено в данную заявку посредством отсылки. Термин урокиназа, используемый в данной заявке, обозначает двойную и одиночную цепи урокиназы, последняя в данной заявке называется также проурокиназой.
Примеры подходящих агентов, снижающих уровень холестерина/липидов и липидный профиль для применения в комбинации с соединениями по данному изобретению, включают ингибиторы HMG-CoA редуктазы (например, правастатин, ловастатин, симвастатин, флувастатин, аторвастатин, росувастатин и другие статины), модуляторы активности рецептора липопротеина низкой плотности (LDL) (например, ингибиторы НОЕ-402, PCSK9), секвестранты жёлчных кислот (например, холестирамин и колестипол), никотиновую кислоту и её производные (например, модуляторы NIASPAN®), GPR109B (рецептора никотиновой кислоты), производные фенофибриновой кислоты (например, гемфиброзил, клофибрат, фенофибрат и бензафибрат) и другие альфа-модуляторы рецепторов, активируемых пероксисомными активаторами (PPAR), модуляторы PPaRдельта (например, GW-501516), модуляторы PPARгамма (например, росиглитазон), соединения, которые содержат множество функциональных групп для моделирования активности различных комбинаций PPARальфа, PPARгамма и PPARдельта, пробукол или его производные (например, AGI-1067), ингибиторы абсорбции холестерина и/или ингибиторы С-1-подобных транспортёров Нимана-Пика (например, эзетимиб), ингибиторы белка, переносчика эфиров холестерина (например, СР-529414), ингибиторы сквален-синтазы и/или ингибиторы сквален-эпоксидазы или их смеси, ацил-коэнзим А: ингибиторы холестерилацилтрансферазы (ACAT) 1, ингибиторы АСАТ2, двойные ингибиторы АСАТ1/2, ингибиторы подвздошнокишечного переносчика жёлчных кислот (или ингибиторы апикального натрий-созависимого переносчика жёлчных кислот), ингибиторы микросомального белкапереносчика триглицерида, альфа-модуляторы печёночного рецептора X (LXR), модуляторы LXR-бета, двойные альфа/бета модуляторы LXR, модуляторы FXR, омега-3 жирные кислоты (например, 3-PUFA), растительные станолы и/или эфиры жирных кислот растительных станолов (например, эфир ситостанола, используемый при производстве маргарина BENECOL®), ингибиторы эндотелиальной липазы и функциональные миметики HDL, которые активируют обратный транспорт холестерина (например, производные apoAI или пептидные миметики apoAI).
Соединения по данному изобретению пригодны также в качестве стандартов или референсных соединений, например, в качестве стандартов качества или контроля, при проведении тестов или анализов с участием ингибирования тромбина, факторов VIIa, IXa, Ха, XIa и/или плазменного калликреина. Такие соединения могут содержаться в коммерческом наборе, например, для применения при проведении фармацевтических исследований с применением тромбина, факторов VIIa, IXa, Xa, XIa и/или плазменного калликреина. Например, соединение по данному изобретению можно использовать как референсное при проведении анализа для сравнения его известной активности с неизвестной активностью другого соединения. Это поможет экспериментатору считать, что анализ был проведён корректно и обеспечит основу для сравнения, особенно, если испытуемое соединения являлось производным референсного. При разработке новых методов анализа или протоколов соединения согласно настоящему изобретению могут быть использованы для оценки их эффективности.
Соединения по данному изобретению могут быть также использованы в диагностических анализах с участием тромбина, факторов VIIa, IXa, Xa, XIa и/или плазменного калликреина. Например, наличие тромбина, факторов VIIa, IXa, Xa, XIa и/или плазменного калликреина в неизвестном образце может быть определено путём добавления релевантного хромогенного субстрата, например, S2366 для фактора XIa, к ряду растворов, содержащих испытуемый образец и необязательно одно из соединений по данному изобретению. Если наблюдается образование pNA в растворах, содержащих испытуемый образец, но не в присутствии соединения по изобретению, можно сделать вывод, что содержится фактор XIa.
Чрезвычайно активные и селективные соединения согласно данному изобретению, те, которые характеризуются величинами Ki меньшими или равными 0.001 мкМ против целевой протеазы и большими или равными 0.1 мкМ против других протеаз, могут также использоваться в диагностических анализах, включающих количественное определение тромбина, факторов VIIa, IXa, Xa, XIa и/или плазменного калликреина в образцах сыворотки. Например, количество фактора XIa в образцах сыворотки может быть определено путём осторожного титрования активности протеазы в присутствии релевантного хромогенного субстрата, S2366, с активным ингибитором фактора XIa согласно данному изобретению.
Настоящее изобретение охватывает также изделия. Изделия по данному изобретению включают, но без ограничения, наборы и упаковки. Изделие согласно настоящему изобретению включает: (а) первый контейнер; (b) фармацевтическую композицию, помещённую в первый контейнер, причём эта композиция включает: первый терапевтический агент, являющийся соединением по изобретению или его фармацевтически приемлемую соль; и (с) вкладыш для упаковки, информирующий о том. что данная фармацевтическая композиция может быть использована для лечения тромбоэмболического и/или воспалительного заболевания (как указано ранее). Согласно другому варианту вкладыш в упаковку свидетельствует о том, что данная фармацевтическая композиция может быть использована в комбинации (как ука
- 29 031590 зано ранее) со вторым терапевтическим агентом для лечения тромбоэмболического и/или воспалительного заболевания. Такое изделие может также содержать: (d) второй контейнер, где компоненты (а) и (b) расположены во втором контейнере и компонент (с) расположен во втором контейнере или вне второго контейнера. Расположение в первом и втором контейнерах означает, что в соответствующем контейнере внутри находится его содержимое.
Первый контейнер является приёмником, используемым для размещения фармацевтической композиции. Этот контейнер может служить для изготовления, хранения, перевозки и/или продажи всего продукта или его части. Первый контейнер может быть бутылочкой, банкой, колбой, шприцом, трубкой (например, для приготовления крема), или любым другим контейнером, используемым для изготовления, размещения, хранения, или распространения фармацевтического продукта.
Второй контейнер используется для помещения первого контейнера и, необязательно, вкладыша. Примеры второго контейнера включают, но без ограничения, коробки (например, из картона или пластика), ящики, картонный футляры, пакеты (например, бумажные или пластиковые пакеты), мешки. Вкладыш в упаковку может быть физически прикреплён к наружной части первого контейнера липкой лентой, клеем, степлером или другим способом или он может быть размещён внутри второго контейнера без прикрепления физическими средствами к первому контейнеру. Альтернативно, вкладыш располагается на наружной поверхности второго контейнера. Когда он расположен на наружной поверхности второго контейнера, предпочтительно, чтобы этот вкладыш-листовка был прикреплён физически липкой лентой, клеем, степлером или другим способом. Или же он может соседствовать или касаться наружной поверхности второго контейнера без физического прикрепления.
Вкладыш в упаковку является этикеткой, биркой, маркировочным знаком и т. п., которые содержат информацию, относящуюся к фармацевтической композиции, расположенной внутри первого контейнера. Содержание такой информации обычно определяется регулирующим органом данной местности, где должно продаваться данное изделие (например, Управлением по контролю качества продуктов питания и лекарственных средств США). Предпочтительно, чтобы вкладыш в упаковку конкретно указывал показания, для которых фармацевтическая композиция была одобрена. Листовка-вкладыш может быть изготовлена из любого материала, на котором можно прочитать информацию, содержащуюся в листовке или на ней. Предпочтительно, если вкладыш выполнен из запечатываемого этикеточного материала (например, из бумаги, пластика, картона, фольги, бумаги с адгезивной подложкой или пластика и т. д.), на котором будет расположена желательная информация (например, напечатана или нанесена).
Другие признаки настоящего изобретения станут очевидными из следующего описания примерных вариантов, которые приведены для иллюстрации данного изобретения и не ограничивают его. Следующие далее соединения были получены, выделены и охарактеризованы с использованием способов, описанных в данной заявке.
VI. Общие способы получения, включая схемы
Соединения согласно настоящему изобретению могут быть синтезированы многими способами, доступными для специалистов в данной области органической химии (Maffrand, J.P. et al., Heterocycles, 16(1):35-37 (1981)). Общие схемы синтеза получения соединений по изобретению описаны ниже. Эти схемы являются иллюстративными и не ограничивают возможные способы, которые специалист в данной области может использовать для получения соединений, описанных в данной заявке. Специалистам в данной области являются очевидными различные способы получения соединений согласно настоящему изобретению. Кроме того, для получения желательного соединения или соединений различные стадии способа синтеза могут осуществляться в альтернативной последовательности.
Примеры соединений согласно настоящему изобретению, полученных способами, показанными на общих схемах, приведены ниже в разделе, содержащем описание промежуточных продуктов и примеры. Получение гомохиральных соединений может осуществляться методами, известными специалисту в данной области. Например, гомохиральные соединения могут быть получены путём разделения рацемических продуктов методом препаративной ВЭЖХ с применением хиральной фазы. Альтернативно, соединения могут быть получены способами, которые, как известно, обеспечивают образование продуктов, обогащённых энантиомерами. Эти способы включают, но без ограничения, введение хиральных вспомогательных функциональных групп в рацемические промежуточные соединения, которые служат для регулирования диастереоселективности превращений, обеспечивая получение продуктов, обогащённых энантиомерами при расщеплении хиральных вспомогательных групп.
Соединения по данному изобретению могут быть получены различными способами, известными специалисту в области органического синтеза. Соединения по данному изобретению могут быть получены с использованием способов, описанных ниже, и способами синтеза, известными в области синтетической органической химии, или этими способами, изменёнными специалистами в данной области. Предпочтительные способы включают, но без ограничения, способы, описанные ниже. Реакции проводят в среде растворителя или смеси растворителей, подходящих для используемых реагентов и материалов и для осуществляемых превращений. Специалистам в данной области очевидно, что функциональность молекулы должна соответствовать предлагаемым превращениям. Это иногда требует решения о модификации порядка осуществления стадий синтеза или выборе конкретной схемы реакций из других схем для
- 30 031590 того, чтобы получить желательное соединение по изобретению.
Известно также, что другим важным аспектом планирования любого способа синтеза в этой области является обоснованный выбор защитной группы, используемой для защиты реакционноспособных функциональных групп, содержащихся в соединениях, описанных в данной заявке. Авторитетный обзор многих альтернатив для подготовленного специалиста можно найти в публикации Greene et al. (Protective Groups in Organic Synthesis, Fourth Edition, Wiley-Interscience (2006)).
Типичные пиримидиноновые соединения 1a по изобретению могут быть получены, как показано на схеме 1. Согласно модифицированной методике, описанной Xiao (Org. Lett., 11:1421 (2009)), замещённые надлежащим образом производные пиримидин-4-ола 1b соединяют с замещённым надлежащим образом макроциклическим амином 1с в присутствии HATU и DBU в среде растворителя, такого как CH3CN, с получением пиримидинонов 1а. Когда кольцо А является SEM-защищённым имидазольным кольцом, для получения соединений по изобретению требуется дополнительная стадия снятия защиты с применением 4М HCl в среде диоксана или TFA в среде DCM.
Схема 1 он
1Ь
2) <сгдз Р ЯЕЛяетст
ЕМ-ЗЭ_д,И-Д&Н-'ЫН
Схема 2 описывает синтез замещённых надлежащим образом производных пиримидин-4-ола 1b. Соединение 1b получают, используя реакцию Сузуки-Мияра (Suzuki-Miyaura) 6-хлорпиримидин-4-ола (2а) и замещённой надлежащим образом арил-или гетероарилбороновой кислоты или сложного эфира 2с в присутствии основания, такого как основание Хунига или трёхосновный фосфат калия, в смеси растворителей, таких как толуол и этанол или THF, с использованием прекатализатора, такого как Pd(PPh3)4 или XPhos 2-го поколения. Альтернативно, когда используется 4-хлор-6-метоксипиримидин 2b, для получения производных пиримидин-4-ола 1b требуется дополнительная стадия снятия защиты с применением водного раствора HBr при повышенной температуре.
Схема 2
Промежуточные соединения для получения соединений по настоящему изобретению, в которых кольцо А представляет собой 6-членный гетероцикл (например, пиридин) могут быть синтезированы из замещённых надлежащим образом альдегидов 3a согласно общему способу, показанному на Схеме 3. Конденсация альдегида 3 a (X = N), полученного в соответствии с модифицированной методикой, описанной Negi (Synthesis, 991 (1996)), с ^)-2-метилпропан-2-сульфинамидом в присутствии безводного сульфата меди или карбоната цезия в среде растворителя, такого как DCM, приводит к получению сульфинимина 3b (Ellman, J., J. Org. Chem., 64:1278 (1999)). С применением модифицированной методики, описанной Kuduk (Tetrahedron Letters, 45:6641 (2004)), к сульфинимину 3b могут быть добавлены замещённые надлежащим образом реактивы Гриньяра, например, аллилмагнийбромид, с получением сульфинамида 3c в виде смеси диастереомеров, которая может быть разделена на различных стадиях процесса. Диастереоселективность для добавления аллилмагнийбромида к сульфинимину 3 b может быть улучшена при применении хлорида индия(Ш) в соответствии с модифицированной методикой Xu (Xu, M.-H., Org. Lett., 10(6): 1259 (2008)). Взаимное превращение защитных групп может быть осуществлено в две стадии с получением 3d. Критическое взаимодействие подъединиц осуществляется по методике, разработанной Sanies (J. Am. Chem. Soc, 131:3042 (2009)). Обработка хлорпиридина 3d N-защищённым нитропиразолом 3е в присутствии каталитического Pd(OAc)2 и P(nBu)Ad2 создаёт нужную арилпиразольную связь с образованием 3f. Восстановление этого нитропиразола приводит к получению соединения 3g. Этот аминопиразол затем взаимодействует с замещённой надлежащим образом карбоновой кислотой 3h при использовании T3P® и основания, такого как пиридин, с получением амида 3i. Диен может циклизоваться при метатезисе с закрытием кольца в присутствии катализатора, такого как катализатор Груббса(П), в среде подходящего растворителя, такого как EtOAc, при повышенной температуре с получением пиридинсодержащего макроцикла 3j. Алкен может быть восстановлен водородом над палладием на
- 31 031590 угле или в присутствии оксида платины. Вторая реакция сочетания затем выполняется, как показано на Схеме 1, с пиримидинолом 3k с образованием пиримидинона 3l. Последующее снятие защиты пиразола при помощи TFA в DCM или 4М HCl в диоксане приводит к получению после реакции Ульмана с арилйодидом к получению соединения 3m как основного региоизомера. Если образуется соединение 3n, оно является второстепенным компонентом в смеси продуктов.
Схема 3
Соединения типа 3n могут быть получены как высококачественные продукты по способу синтеза, показанному на схеме 4. Все стадии реакции аналогичны показанным на схеме 3 для стадии сочетания пиразола. Замещённые надлежащим образом нитропиразолы 4а обеспечивают получение показанных региостереомерных пиразолов 4b в тех же условиях, которые показаны на схеме 3. Восстановление с получением 4с, амидирование при помощи 3h с образованием соединения 4d и метатезис с закрытием кольца с получением макроцикла 4е проводятся также подобным образом.
Восстановление олефина и снятие защиты сопровождаются реакцией пиримидинола, как показано на схемах 1 и 3.
Схема 4
Способы синтеза различных замещённых пиридиновых соединений, пригодных в качестве исходных материалов для получения соединений согласно настоящему изобретению, хорошо известны из уровня техники и широко описаны. (Примеры способов, пригодных для получения исходных пиридинов см. в публикациях Kroehnke, F., Synthesis, 1 (1976); Abramovitch, R.A., ed., Pyridine and Its Derivatives, The Chemistry of Heterocyclic Compounds, 14(Suppl. 1-4), John Wiley & Sons, New York (1974); Boulton, A.J. et al., eds., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 2:165-524, Pergamon Press, New York (1984); McKillop, A., ed., Comprehensive Heterocyclic Chemistry, 5:1-300, Pergamon Press, New York (1996)).
- 32 031590
Очистка промежуточных соединений и конечных продуктов осуществлялась методом хроматографии с нормальными фазами или методом обращённо-фазовой хроматографии. Нормально-фазовая хроматография осуществлялась с использованием картриджей, предварительно упакованных SiO2, при элюировании с градиентом гексан и EtOAc или DCM и МеОН, если не указано иное. Обращённо-фазовая ВЭЖХ проводилась с применением колонок С18 при элюировании с градиентом Растворитель А (90% воды, 10% МеОН, 0.1% TFA) и Растворитель В (10% воды, 90% МеОН, 0.1% TFA, УФ 220 нм) или с градиентом Растворитель А (90% воды, 10% ACN, 0.1% TFA) и Растворитель В (10% воды, 90% ACN, 0.1% TFA, УФ 220 нм) или с градиентом Растворитель А (98% воды, 2% ACN, 0.05% TFA) и Растворитель В (98% ACN, 2% воды, 0.05% TFA, УФ 220 нм) (или) SunFire Prep C18 OBD 5 мк, 30x100 мм, градиент 25 мин от 0-100% В. А = H2O/ACN/TFA 90:10:0.1. В = ACN/H2O/TFA 90:10:0.1.
Если иное не указано, анализ конечных продуктов проводили методом аналитической обращённофазовой ВЭЖХ.
Метод А: колонка Waters SunFire (3.5 мкм С18, 3.0 x 150 мм). Использовали градиент элюирования (0.5 мл/мин) от 10-100% Растворителя В в течение 12 мин и затем 100% Растворителя В в течение 3 мин. Растворитель А представлял собой (95% воды, 5% ацетонитрила, 0.05% TFA) и Растворитель В содержал (5% воды, 95% ацетонитрила, 0.05% TFA, УФ 254 нм).
Метод В: Колонка Waters Acquity UPLC ВЕН С18, 2.1 x 50 мм, частицы 1.7 мкм; Подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил: вода с 10 мМ ацетата аммония; подвижная фаза В: 95:5 ацетонитрил: вода с 10 мМ ацетата аммония; температура: 50°С; градиент: 0-100% В в течение 3 мин, затем выдержка в течение 0.75 мин при 100% В; скорость истечения: 1.11 мл/мин.
Метод С: Колонка Waters Acquity UPLC ВЕН С18, 2.1 x 50 мм, частицы 1.7 мкм; Подвижная фаза А: 5:95 ацетонитрил: вода с 0.1% TFA; подвижная фаза В: 95:5 ацетонитрил: вода с 0.1% TFA; температура: 50°С; градиент: 0-100% В в течение 3 мин, затем выдержка в течение 0.75 мин при 100% В; скорость истечения: 1.11 мл/мин.
Метод X: Колонка ZORBAX® SB C18 (4.6x75 мм). Использовали градиентное элюирование (2.5 мл/мин) от 0-100% Растворителя В в течение 8 мин и затем 100% Растворителя В в течение 2 мин. Растворитель А представлял собой (90% воды, 10% МеОН, 0.02% H3PO4) и Растворитель В содержал (10% воды, 90% МеОН, 0.02% H3PO4, УФ 220 нм).
Примеры
Пример 1. Получение (9^^)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6дигидропиримидин-1-ил}-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
IA. Получение 1-(дифторметил)-4-нитро-Ш-пиразола
Cs2CO3 (14.41 г, 44.2 ммол) суспендировали в растворе 4-нитро-Ш-пиразола (5.00 г, 44.2 ммол) и DMF (40 мл). После нагрева до 120°С в течение 5 мин добавляли в течение 20 мин 10 равными порциями твёрдый 2-хлор-2,2-дифторацетат натрия (13.48 г, 88 ммол). Реакция завершалась через 10 мин дополнительного нагрева. Смесь помещали в разделительную воронку, содержащую 100 мл воды и экстрагировали Et2O (2 x 50 мл). Соединённые органические слои концентрировали. Очистка методом нормальнофазовой хроматографии и с градиентом гексан/EtOAc привела к получению 1-(дифторметил)-4-нитроШ-пиразола (6.99 г, 42.9 ммол, выход 97%) в виде прозрачного бесцветного масла. 1H NMR (500 MHz, CDQ3) δ 8.58 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.39-7.05 (t, J = 60 Hz, 1H).
IB. Получение ^)-трет.бутил-(1-(4-(1-(дифторметил)-4-нитро-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-
3- ен-1 -ил) карбамата
В RBF (круглодонную колбу) (500 мл), промытую N2, помещали ^)-трет.бутил-(1-(4-хлорпиридин-
2-ил)бут-3-ен-1-ил) карбамат, полученный, как описано в примере 3, (10 г, 35.4 ммол), 1-(дифторметил)-
4- нитро-Ш-пиразол (6.34 г, 38.9 ммол) и диоксан (100 мл). Через раствор пропускали N2 в течение 5 мин. Затем добавляли Pd(OAc)2 (0.40 г, 1.7 ммол), ди(адамантан-1-ил)(бутил)фосфин (1.27 г, 3.5 ммол), K2CO3 (14.7 г, 106 ммол) и PvOH (1.08 г, 10.61 ммол). Через реакционную смесь пропускали N2 в течение 5 мин, затем реакционную смесь нагревали до 100°С в течение 3 ч. Затем полученный раствор охлаждали до rt и добавляли воду (200 мл). Затем реакционную смесь экстрагировали EtOAc (2 x 200 мл). Соединённые органические экстракты промывали водой (200 мл), рассолом (200 мл), высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали in vacuo. Путём очистки методом хроматографии с нормальными фазами с элюированием с градиентом гексан/EtOAc, получали ^)-трет.бутил-(1-(4-(1-(дифторметил)-4нитро-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат (12.91 г, 31.5 ммол, выход 89%) в виде
- 33 031590 слегка жёлтого масла. MS(ESI) m/z: 410.4 [М+Н]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.80 (dd, J=5.1, 0.7 Hz, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 7.31 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 7.27-6.91 (t, J=58 Hz, 1H), 5.79-5.63 (m, 1H), 5.165.03 (m, 2H), 4.92 (d,J=5.9 Hz, 1H), 2.67 (t, J=6.4 Hz, 2H), 1.46 (br. s., 9H).
IC. Получение ^-трет.бутил-ЦД-Д-амино-ДдифторметилГШ-пиразол^-илДиридин^-ил^ут-
3-ен-1 -ил)карбамата
В трёхгорлую RBF (100 мл) помещали раствор ^-трет.бутил-Ц-Д-Ц-Дифторметил^-нитро-Шпиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (0.78 г, 1.90 ммол) в среде МеОН (12 мл) и раствор NH4Cl (1.02 г, 19 ммол) в воде (3 мл). К раствору добавляли Fe (0.53 г, 9.49 ммол). Реакционную смесь нагревали до 65°С в течение 3 ч. Добавляли воду (50 мл). После охлаждения до rt реакционную смесь отфильтровывали через слой CELITE® и промывали МеОН (200 мл). Полученный фильтрат концентрировали in vacuo. Остаток распределяли между EtOAc (100 мл) и водой (100 мл). Органическую фазу отделяли, промывали водой (100 мл), рассолом (100 мл), высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали in vacuo. Очистка методом хроматографии с нормальными фазами с элюированием с градиентом DCM/MeOH привела к получению ^)-трет.бутил-(1-(4-(4-амино-1-(дифторметил)-Ш-пиразол-
5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (0.585 г, 1.54 ммол, выход 81%) в виде масла. MS(ESI) m/z:
380.1 [М+Н]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (dd, J=5.0, 0.7 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.36 (s, 1H), 7.32 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 7.28-6.97 (t, J=58 Hz, 1H), 5.80-5.66 (m, 1H), 5.65-5.53 (m, 1H), 5.13-5.03 (m, 2H), 4.87 (br. s., 1H), 3.22 (br. s., 2H), 2.65 (t, J=6.5 Hz, 2H), 1.52-1.37 (m, 9H).
ID. Получение трет.бутил-(^)-1-(4-(1-(дифторметил)-4-(^)-2-метилбут-3-енамидо)-Ш-пиразол-5ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата
В трёхгорлую RBF (250 мл), промытую азотом, помещали раствор ^)-трет.бутил-(1-(4-(4-амино-1(дифторметил)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (5 г, 13.18 ммол) и EtOAc (50 мл). Раствор охлаждали до -10°С и добавляли ^)-2-метилбут-3-еновую кислоту, полученную, как в Примере 2, (1.72 г, 17.13 ммол), пиридин (4.26 мл, 52.7 ммол) и T3P® (23.54 мл, 39.5 ммол). Удаляли охлаждающую баню, давали раствору нагреться до rt и затем перемешивали в течение 20 ч. Добавляли воду (30 мл) и EtOAc (30 мл) и полученную смесь перемешивали в течение 30 мин. Органическую фазу отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (30 мл). Соединённые органические экстракты промывали рассолом (50 мл), высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали in vacuo. Очистка методом нормально-фазовой хроматографии с элюированием с градиентом гексан/EtOAc привела к получению трет.бутил-(^)-1 -(4-( 1-(дифторметил)-4-(^)-2-метилбут-3-енамидо)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-
2- ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (5.69 г, 12.33 ммол, выход 94%). MS(ESI) m/z: 462.2 [М+Н]+. 'H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.75 (dd, J=5.0, 0.6 Hz, 1H), 8.37 (s, 1H), 7.32 (t, J=59 Hz, 1H), 7.28 (br. s., 1H), 7.20 (s, 1H), 5.97-5.85 (m, 1H), 5.78-5.65 (m, 1H), 5.56-5.44 (m, 1H), 5.28-5.19 (m, 2H), 5.12 (d, J=2.0 Hz, 2H), 4.91-4.82 (m, 1H), 3.20-3.11 (m, 1H), 2.72-2.62 (m+, 2H), 1.48-1.43 (s, 9H), 1.33 (d, J=6.8 Hz, 3H).
IE. Получение трет.бутил-N-[(9R,10E,13S)-3-(дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата
В трёхгорлую RBF (2 л), промытую N2, помещали раствор трет.бутил-(^)-1-(4-(1-(дифторметил)-4(^)-2-метилбут-3-енамидо)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (3 г, 6.50 ммол) в EtOAc (1300 мл). Через раствор пропускали аргон в течение 15 мин. Одной порцией добавляли катализатор Груббса (Grubbs) II (1.38 г, 1.63 ммол). Реакционную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 24 ч. После охлаждения до rt удаляли растворитель, и очищали остаток методом хроматографии с нормальными фазами с элюированием с градиентом DCM/MeOH, получая трет.бутил-N-[(9R,10Е, 13S)-
3- (дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16гексаен-13-ил]карбамат (2.13 г, 4.91 ммол, выход 76%) в виде оранжевого твёрдого продукта. MS(ESI) m/z: 434.4 [М+Н]+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.44-7.40 (m, 1H), 7.36 (br. s., 1H), 7.27 (t, J=58 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 6.49-6.39 (m, 1H), 5.78 (s, 1H), 4.80 (br. s., 2H), 3.18-3.08 (m, 1H), 3.08-2.98 (m, 1H), 2.06-1.93 (m, 1H), 1.51 (s, 9H), 1.19 (d, J=6.6 Hz, 3H).
IF. Получение трет.бутил-N-[(9R,13S)-3-(дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата
Pd/C (0.60 г, 0.570 ммол) добавляли в колбу Парра для гидрирования объёмом 250 мл, содержащую раствор трет.бутил-N-[(9R,10E,13S)-3-(дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексан-13-ил]карбамата (2.46 г, 5.68 ммол) в EtOH (100 мл). Колбу промывали азотом и подавали водородом давление равное 55 ф/дюйм2, перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь отфильтровывали через слой CELITE® и концентрировали с получением трет.бутил-N-[(9R,13S)-3-(дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата (2.17 г, выход 88%) в виде оранжевого твёрдого продукта. MS(ESI) m/z: 436.3 [М+Н]+. 1Н NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.32 (s, 1H), 8.71 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.96 (t, J=58 Hz, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.32 (d, J=4.8 Hz, 1H), 7.22 (d, J=7.3 Hz, 1H), 4.66 (d, J=8.3 Hz, 1H), 2.62 (br. s., 1H), 1.88 (d, J=12.8 Hz, 1H), 1.77-1.59 (m, 2H), 1.42-1.28 (m, 9H), 1.15 (d, J=18.2 Hz, 2H), 0.83 (d, J=7.0 Hz, 3H).
IG. Получение (9R,13S)-13-амино-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]
- 34 031590 октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
N HCl в диоксане (3.88 мл, 15.5 ммол) добавляли к раствору трет.бутил-Х-[(9Я,138)-3-(дифторметил)-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентан-13ил]карбамата(2.25 г, 5.2 ммол) в МеОН (10 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали на ледяной бане и добавляли 7 N NH3 в МеОН (13.3 мл, 93.0 ммол). Через 5 мин реакционную смесь разбавляли CH2Cl2 (80 мл) и отфильтровывали полученный твёрдый продукт. Фильтрат концентрировали, получая (9Я,138)-13-амино-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (1.3 г, 3.88 ммол, выход 75%). MS(ESI) m/z: 336.3 [М+Н]+. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.33 (s, 1H), 8.71 (d, J=5.0 Hz, 1H), 7.94 (t, J=58 Hz, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.32 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.01 (dd, J=10.2, 5.1 Hz, 1H), 2.63-2.53 (m, 1H), 1.90-1.69 (m, 2H), 1.53-1.36 (m, 2H), 1.16-1.00 (m, 1H), 0.85 (d, J=7.0 Hz, 3H).
1H. Получение (9R,13 S) -13 - {4-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш- 1,2,3-триазол-1 -ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил }-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она.
В колбу объёмом 100 мл, содержащую белую суспензию 6-(5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1ил)фенил)пиримидин-4-ола (0.83 г, 2.7 ммол), полученного, как описано в Примере 4, в ACN (36 мл) добавляли HATU (1.12 г, 3.0 ммол) и DBU (0.53 мл, 3.5 ммол). Полученный прозрачный раствор жёлтого цвета перемешивали при rt. Через 5 мин добавляли (9R,13S)-13-амино-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (0.9 г, 2.68 ммол) и полученную суспензию перемешивали при rt в течение 3 ч. Затем реакционную смесь концентрировали и очищали методом нормально-фазовой хроматографии на силикагеле, элюируя с градиентом от 0 до 100% EtOAc в гексане и получали (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил }-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло-[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (0.87 г, выход 50%) в виде твёрдого продукта белого цвета. MS(ESI) m/z:
626.2 [М+Н]+. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.91-8.83 (m, 1H), 8.78-8.71 (m, 1H), 8.33 (s, 1h), 7.88 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.74 (s, 2H), 7.69-7.67 (m, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.63 (t, J=58 Hz, 1H), 7.52-7.50 (m, 1H), 6.36 (d, J=0.8 Hz, 1H), 6.06-5.95 (m, 1H), 2.76-2.65 (m, 1H), 2.36-2.21 (m, 1H), 2.08-1.93 (m, 2H), 1.63-1.53 (m, 1H), 1.53-1.42 (m, 1H), 0.99 (d, J=6.9 Hz, 3Н). Аналитическая ВЭЖХ (Метод A): RT = 8.87 мин, степень чистоты = 99.7%.
Пример 2. Получение (9R, 13S)-13-{4-|5-хлор-2-(4-хлор-111-1,2,3-триазол-1-ил)фенил|-6-оксо-1,6дигидропиримидин-1 -ил}-9-метил-4-(пиридин-3-ил)-3,4,7,15 -тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека1(18),2,5,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
2А. Получение 4-нитро-1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразола
К раствору 4-нитро-1Н-пиразола (5.0 г, 44.2 ммол) в THF (100 мл) при 0°С добавляли N-циклогексил-Л-метилциклогексанамин (0.948 мл, 4.43 ммол) и затем по каплям добавляли SEM-Cl (12.55 мл, 70.7 ммол). Затем давали реакционной смеси постепенно нагреваться до rt и перемешивали при rt в течение ночи. Затем реакционную смесь концентрировали, очищали методом хроматографии с нормальными фазами, получая 4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол в виде прозрачного масла (2.4 г, выход 21%). 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.31 (s, 1Н), 8.10 (s, 1Н), 5.46 (s, 2Н), 3.67-3.55 (m, 2H), 0.990.90 (m, 2H), 0.05-0.03 (m, 9H).
2В. Получение ^)-бензил-(1-(4-(4-нитро-1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1 Н-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата
В сосуд, работающий под давлением, промытый N2, добавляли ^)-бензил-(1-(4-хлорпиридин-2ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат, полученный, как описано в примере 5 (1.9 г, 6.00 ммол), 4-нитро-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-Ш-пиразол (1.6 г, 6.60 ммол), ди(адамант-1-ил)(бутил)фосфин (0.323 г, 0.90 ммол), PvOH (0.209 мл, 1.80 ммол) и K2CO3 (2.48 г, 17.9 ммол). К этой смеси затем добавляли DMA (45 мл) и промывали сосуд N2 в течение 5 мин. К этой смеси затем добавляли Pd(OAc)2 (0.135 г, 0.600 ммол). Реакционную смесь затем быстро промывали при помощи N2. Сосуд герметизировали и нагревали в микроволновой печи при 120°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали до rt и распределяли между 10% водным раствором LiCl (15 мл) и EtOAc (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 х 20 мл) и промывали соединённые органические слои рассолом (15 мл) и высушивали над MgSO4. Затем сырой продукт очищали методом нормально-фазовой хроматографии, получая (S)-benzyl (1-(4-(4-nitr(S)бензил-( 1-(4-(4-нитро-1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1I Ι-ι шразол-5 -ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 ил)карбамат (1.92 г, выход 58%) в виде коричневого масла. MS(ESI) m/z: 524.2 (М+Н)+.
2С. Получение ^)-бензил-(1-(4-(4-амино-1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1Н-пиразол-5-ил)пи
- 35 031590 ридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата
Раствор ^)-бензил-(1 -(4-(4-нитро-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1H-пиразол-5-ил)пиридин-2ил)буи-3-ен-1-ил)карбамата (1.92 г, 3.68 ммол), полученного, как описано в примере 2В, в МеОН (20 мл) и АсОН (2 мл) нагревали на масляной бане до 40°С. К этому прозрачному раствору затем тремя порциями (50:25:25%) добавляли медленно Zn (0.481 г, 7.35 ммол) и перемешивали при этой же температуре в течение 5 мин. Затем дополнительно добавляли Zn. За ходом реакции следили при помощи LCMS и после завершения реакции реакционную смесь охлаждали и добавляли 2.0 г K2CO3 (1 г для 1 мл АсОН) и 2.0 мл воды. Реакционную смесь затем перемешивали в течение 5 мин. После этого реакционную смесь отфильтровывали через CELITE® и концентрировали с получением сырого продукта. Затем сырой продукт распределяли между EtOAc (30 мл) и насыщенным раствором NaHCO3, (15 мл). Органические слои отделяли, высушивали над MgSO4, отфильтровывали и концентрировали. Затем очищали сырой продукт методом нормально-фазовой хроматографии, получая ^)-бензил-(1-(4-(4-амино-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат (1.15 г, выход 63%) в виде бледно-жёлтого масла. MS(ESI) m/z: 494.4 (М+Н)+.
2D. Получение бензил-(^)-1-(4-(4-(^)-2-метилбут-3 -енамидо)-1 -((2-(триметилсилил)этокси)метил)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата
В трёхгорлую RBF (250 мл), промытую N2, добавляли раствор ^)-бензил-(1-(4-(4-амино-1-((2(триметилсилил)этокси)метил)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (1.15 г, 2.33 ммол) и EtOAc (15 мл). Раствор охлаждали до -10°С и добавляли ^)-2-метилбут-3-еновую кислоту (350 мг, 3.49 ммол), пиридин (0.564 л, 6.99 ммол) и T3P® (2.77 мл, 4.66 ммол). Охлаждающую баню удаляли и раствору давали нагреться до rt и затем перемешивали его в течение 20 ч. Добавляли воду (20 мл) и EtOAc (20 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органическую фазу отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (20 мл). Соединённые органические экстракты промывали рассолом (15 мл), высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали in vacuo. Очистка методом нормально-фазовой хроматографии при элюировании с градиентом гексан/EtOAc привела к получению бензил-(^)-1-(4-(4(^)-2-метилбут-3 -енамидо)- 1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1И-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 ен-1-ил)карбамата (1.12 г, выход 79%). MS(ESI) m/z: 576.4 [М+Н]+.
2Е. Получение бензил-N-[(9R,10E, 13S)-9-метил-8-оксо-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексан-13-ил]карбамата
В трёхгорлую RBF (250 мл), промытую N2, добавляли раствор бензил-(^)-1-(4-(4-(^)-2-метилбут3-енамидо)-1-((2-(триметилсилил)этокси)метил)-1И-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата (1.12 г, 1.945 ммол) в DCE (18 мл). Раствор продували аргоном в течение 15 мин. Добавляли одной порцией катализатор Груббса II (662 мг, 0.778 ммол). Реакционную смесь нагревали при 120°С в микроволновой печке в течение 30 мин. После охлаждения до rt растворитель удаляли и остаток очищали методом нормально-фазовой хроматографии с градиентом DCM/MeOH, получая бензил-N-[(9R,10E,13S)-9-метил8-оксо-3-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,10,14,16-гексан-13-ил]карбамат (477 мг, выход 42% в виде твёрдого продукта оранжевого цвета. MS(ESI) m/z: 548.3 [М+Н]+.
2F. Получение бензил-N-[(9R,13S)-9-метил-8-оксо-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата
Pd/C (0.93 г, 0.871 ммол) помещали в колбу Парра для гидрирования объёмом 250 мл, содержащую раствор бензил-N-[(9R,10E,13S)-9-метил-8-оксо-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексан-13-ил]карбамата (477 мг, 0.871 ммол) в EtOH (20 мл). Колбу продували азотом и создавали водородом давление равное 55 ф/дюйм2, перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь отфильтровывали через слой CELITE® и концентрировали, получая бензил-N-[(9R,13S)-9-метил-8-оксо-3-{[2-(триметилсилил)этокси]-метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамат (245 мг, выход 64%) в виде твёрдого продукта оранжевого цвета. MS(ESI) m/z: 416.4 [М+Н]+.
2G. Получение (9R, 13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил}-9-метил-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
В колбу объёмом 100 мл, содержащую белую суспензию 6-(5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1ил)фенил)пиримидин-4-ола (0.580 г, 1.88 ммол), полученного, как описано в примере 4, в ACN (25.0 мл) добавляли HATU (0.785 г, 2.06 ммол) и DBU (0.370 мл, 2.44 ммол). Полученный прозрачный жёлтый раствор перемешивали при rt. Через 5 мин добавляли бензил-N-[(9R,13S)-9-метил-8-оксо-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентан-13ил]карбамат (0.780 г, 1.88 ммол) и полученную суспензию перемешивали при rt в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали и сырой продукт очищали методом нормально-фазовой хроматографии с получением (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-3-{[2-(триметилсилил)этокси] метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она (0.65 г, 0.92 ммол, выход 49.0%) в виде твёрдого продукта пурпурного
- 36 031590 цвета. MS(ESI) m/z: 706.7 [М+Н]+.
2Н. Получение (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8она трифторацетата
К раствору (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-3-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она (12 мг, 0.017 ммол) в DCM (0.8 мл) добавляли TFA (0.2 мл, 2.60 ммол) и реакционную смесь перемешивали при rt в течение 30 мин. Затем реакционную смесь концентрировали и остаток очищали методом препаративной ВЭЖХ, получая (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетат (5.3 мг, выход 43% в виде твёрдого продукта светло-розового цвета. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.72-8.57 (m, 2H), 8.37 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.91 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.82-7.72 (m, 2H), 7.70-7.63 (m, 2H), 6.41 (s, 1H), 6.11-5.95 (m, 1H), 2.81 (td, J=6.8, 3.4 Hz, 1H), 2.44-2.17 (m, 2H), 2.15-2.01 (m, 1H), 1.80-1.65 (m, 1H), 1.62-1.46 (m, 1H), 1.11 (d, J=7.0 Hz, 3H), 1.01 (br. s., 1H). MS(ESI) m/z: 576.4 [M+H]+. Аналитическая ВЭЖХ (Метод A): RT = 6.98 мин,степень чистоты = >95.0%.
2I. Получение (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-4-(пиридин-3-ил)-3,4,7,15-тетраазатрицикло-[12.3.1.02,6]октадека1(18),2,5,14,16-пентаен-8-она трифторацетата (9R,13S)-13-{4-[5-Хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1ил}-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она монотрифторацетат (0.09 г, 0.16 ммол), (1R,2R)-N1,N2-диметилциклогексан-1,2-диамин (0.022 г, 0.16 ммол), 3йодпиридин (0.032 г, 0.16 ммол), CuI (2 мг, 10.5 мкмол), Cs2CO3 (0.10 г, 0.31 ммол) и DMF (2 мл) помещали в сосуд, содержащий тефлоновую перегородку. Эту смесь три раза промывали аргоном и затем нагревали до 100°С в течение 3 ч. Охлаждали реакционную смесь и разбавляли 2 мл раствора 9:1 ACNH2O. После фильтрации через шприцевой фильтр полученный продукт очищали методом препаративной ВЭЖХ, получая (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-9-метил-4-(пиридин-3-ил)-3,4,7,15-тетраазатрицикло-[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2,5,14,16пентаен-8-он трифторацетат (52 мг, 42%) в виде продукта оранжевого цвета. MS(ESI) m/z: 653.6 [М+Н]+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.31-9.24 (m, 1H), 8.80-8.73 (m, 1H), 8.71-8.64 (m, 2H), 8.60 (s, 2H), 8.37 (s, 1H), 8.01-7.96 (m, 1H), 7.95-7.90 (m, 1H), 7.86-7.80 (m, 1H), 7.79-7.73 (m, 2H), 7.71-7.64 (m, 1H), 6.44-6.36 (m, 1H), 6.17-6.04 (m, 1H), 2.97-2.80 (m, 1H), 2.40-2.22 (m, 2H), 2.15-2.00 (m, 1H), 1.82-1.69 (m, 1H), 1.691.52 (m, 1H), 1.41-1.26 (m, 1H), 1.11 (d, J=7.0 Hz, 3H). Аналитическая ВЭЖХ (Метод A): RT = 6.69 мин, степень чистоты = 97.5%.
Пример 3. Получение трет.бутил-Ы-[(Ш)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата
BocHN ci
3А. Получение 4-хлор-2-[(Е)-2-[^)-2-метилпропан-2-сульфинил]этенил]пиридина
К раствору S-(-)-трет.бутилсульфинамида (0.856 г, 7.06 ммол) в DCM (14.13 мл) последовательно добавляли CuSO4 (2.481 г, 15.54 ммол) и 4-хлорпиколиновый альдегид [1.0 г, 7.06 ммол, полученный согласно модифицированному способу, описанному Negi (Synthesis, 991 (1996))]. Полученную белую суспензию перемешивали при rt. Через 3 ч отфильтровывали суспензию коричневого цвета через CELITE®, промывали DCM и получали прозрачный фильтрат коричневого цвета. После концентрации получали сырой продукт в виде коричневого масла весом 1.85 г. После очистки методом нормально-фазовой хроматографии получали трет.бутил-Ы-[(Ш)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамат (1.31 г в виде прозрачного масла жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 245.0 (М+Н)+.
3В. Получение (R)-N-[(1S)-1 -(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил]-2-метилпропан-2-сульфинамида
К охлаждённой (до 0-5°С) смеси InCl3 (13.56 г, 61.3 ммол) в THF (170 мл) по каплям в течение 30 мин добавляли аллилмагнийбромид (1M в Et2O) (62 мл, 61.3 ммол). Давали реакционной смеси нагреться до rt. Через 1 ч при rt к реакционной смеси добавляли раствор 4-хлор-2-[(E)-2-[(S)-2-метилпропан-2сульфинил]этенил] пиридина (10 г, 40.9 ммол) в EtOH (170 мл). Через 2-3 ч реакционную смесь концентрировали в вакууме при 50-55°С. Сырой продукт распределяли между EtOAc (200 мл) и водой (1 х 50 мл) и разделяли слои. Водный слой экстрагировали EtOAc (2 х 50 мл). Органические слои соединяли и промывали рассолом (1 х 100 мл), высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали, получая Щ)-Ы-[(Ш)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]-2-метилпропан-2-сульфинамид (13.5 г, 106%) в виде жёлтого масла. MS(ESI) m/z: 287.2 (М+Н)+. Это вещество применяли на следующей стадии без очистки.
- 37 031590
3C. Получение (1Б)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-амина
Щ)-Л-[(^)-1-(4-Хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]-2-метилпропан-2-сульфинамид (75 г, 261 ммол) растворяли в МеОН (1500 мл). Добавляли 6N HCl (750 мл, 4.5 мол). Реакционную смесь перемешивали при rt в течение 2-3 ч и затем концентрировали. Остаток разбавляли водой (2 л), промывали EtOAc (500 мл). Водный слой подщелачивали насыщенным раствором Na2CO3, затем экстрагировали EtOAc (3 х 1 л). Соединённые органические слои промывали водой (1 х 1 л) и рассолом (1 х 1 л), сушили над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали в вакууме при 50-55°С с получением (^)-1-(4-хлорпиридин-2ил)бут-3-ен-1-амина (43 г, 90%), который не подвергали дальнейшей очистке. MS(ESI) m/z: 183.2 (М+Н)+.
3D. Получение трет.бутил-Л-[(^)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата (^)-1-(4-Хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-амин (42 г, 230 ммол) растворяли в DCM (420 мл). Добавляли Et3N (32.1 мл, 230 ммол) с последующим добавлением по каплям BOC2O (53.4 мл, 230 ммол). Реакционную смесь перемешивали при rt в течение 2-3 ч. Реакционную смесь разбавляли избытком DCM (1 л), промывали водой (1 х 500 мл) и рассолом (1 х 500 мл). Органический слой высушивали над Na2SO4, отфильтровывали и концентрировали. Сырой продукт очищали методом хроматографии на силикагеле, получая трет.бутил-Л-[(^)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамат (61 г, 86%) в виде бледножёлтого твёрдого продукта. MS(ESI) m/z: 283.2 (М+Н)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, 1H), 7.267.16 (dd, 2H), 5.69-5.61 (m, 1H), 5.59 (bs, 1H), 5.07-5.03 (m, 2H), 4.76 (bs, 1H), 2.62-2.55 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
Пример 4. Получение 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ола
А. Получение 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина
Во флакон для микроволнового синтеза ёмкостью 20 мл помещали 2-бром-4-хлоранилин (3 г, 14.53 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (5.53 г, 21.80 ммоль), KOAc (3.66 г, 37.3 ммоль), аддукт Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0.32 г, 0.44 ммоль) и DMSO (9 мл). Полученную суспензию продували N2, закрывали пробкой и нагревали при 80°C в течение 22 ч. Реакционную смесь охлаждали до rt. Добавляли воду для растворения солей, затем фильтровали реакционную смесь. Оставшийся осадок суспендировали в DCM и нерастворённые вещества отфильтровывали. Фильтрат упаривали, а затем очищали нормально-фазовой хроматографией, получали 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)анилин (3.15 г, выход 86%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z:
172.3 (М-ОЩо+Н^. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.13 (dd, J=8.8, 2.6 Hz, 1H), 6.52 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.72 (br. s., 2H), 1.34 (s, 12H).
4B. Получение 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина
RBF, содержащую 4-хлор-6-метоксипиримидин (3.13 г, 21.62 ммоль), 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)анилин (7.31 г, 21.62 ммоль), Na2CO3 (2.29 г, 21.62 ммоль), DME (86 мл), EtOH (10.81 мл) и воду (10.81 мл), снабдили обратным холодильником. Смесь продували аргоном в течение нескольких минут, затем добавляли аддукт Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1.77 г, 2.16 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°C в течение 5 ч. Реакционную смесь охлаждали до rt, добавляли воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали рассолом, упаривали и очищали нормально-фазовой хроматографией, получали 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилин (2.86 г, выход 56.1%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 236.0 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.78 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.15 (dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J=1.1 Hz, 1H), 6.67 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.89 (br. s., 2H), 4.03 (s, 3H).
- 38 031590
4C. Получение 4- {5-хлор-2-[4-(триметилсилил)-Ш- 1,2,3-триазол-1 -ил]фенил }-6-метоксипиримидина
К раствору 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина (1.5 г, 6.36 ммоль) в ACN (90 мл) при 0 °C прибавляли 3-метилбутил нитрит (1.28 мл, 9.55 ммоль), а затем по каплям прибавляли азидотриметилсилан (1.26 мл, 9.55 ммоль). Наблюдали выделение газа. Через 10 мин баню со льдом удаляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до rt. (Внимание! Арилазиды являются взрывоопасными.) Через 1 ч добавляли этинилтриметилсилан (2.72 мл, 19.09 ммоль) и Cu2O (0.09 г, 0.64 ммоль) и реакционную смесь перемешивали ещё в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и насыщенным раствором NH4Cl и слои разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала 4-{5-хлор- 2-[4-(триметилсилил)-1Н-1,2,3триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримидин (2.13 г, 5.92 ммоль, выход 93%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 360.3 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.82 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.61-7.56 (m, 1H), 7.54-7.48 (m, 2H), 6.20 (d, J=1.1 Hz, 1h), 3.92 (s, 3H), 0.32-0.28 (m, 9H).
4D. Получение 4- [5-хлор-2-(4-хлор- 1H-1,2,3-триазол-1 -ил)фенил]-6-метоксипиримидина
К раствору 4- {5-хлор-2-[4-(триметилсилил)- 1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил }-6-метоксипиримидина (1.56 г, 4.33 ммоль) в ACN (28.9 мл) прибавляли NCS (2.03 г, 15.17 ммоль) и силикагель (6.51 г, 108 ммолей). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч. Затем реакционную смесь отфильтровывали для удаления силикагеля и объединённый осадок силикагеля промывали EtOAc. Фильтрат промывали водой (2х), рассолом и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала 4-[5-хлор-2(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-метоксипиримидин (0.90 г, выход 64.5%) в виде жёлтой пены. MS(ESI) m/z: 322.3 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.66-7.55 (m, 2H), 7.50 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.52 (d, J=0.9 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H).
4E. Получение 6-[5-хлор-2-(4-хлор-1Н-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ола
К раствору 4-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-метоксипиримидина (900 мг, 2.79 ммоль) в АсОН (6 мл) прибавляли 48% HBr в воде (3 мл, 26.5 ммоль). Смесь перемешивали при 85°C в течение 1 ч. Реакционную смесь упаривали досуха, а затем распределяли между EtOAc и нас. водным раствором NaHCO3. Смесь разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2х). Органические вытяжки объединяли, упаривали, а затем остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, получая твёрдое вещество белого цвета. Это твёрдое вещество суспендировали в Et2O, фильтровали и промывали Et2O, получали 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил] пиримидин-4-ол (610 мг, выход 70.9%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 308.3 (М+Н)+. *H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96 (s, 1H), 7.74-7.67 (m, 2H), 7.62 (dd, J=8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.47 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.44 (d, J=0.9 Hz, 1H).
Пример 5. Получение ^)-бензил (1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата bU°
К раствору (^)-1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3-ен-1-амина (15.37 г, 60.1 ммоль) в THF (150 мл) прибавляли NaHCO3 (15.16 г, 180 ммолей) в Н2О (150 мл) при 0°C, а затем CBz-Cl (12.88 мл, 90 ммолей). Реакционную смесь перемешивали при 0°C в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли EtOAc (150 мл). Органический слой отделяли, промывали рассолом (50 мл), сушили Na2SO4, фильтровали и упарива
- 39 031590 ли в вакууме. Сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией на силикагеле, элюируя в градиенте 0-20% смесью EtOAc/петролейный эфир, получали ^)-бензил (1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3ен-1-ил)карбамат (16 г, выход 84%) в виде жидкости бледно-жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 317.5 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.44 (d, J=5.3 Hz, 1H), 7.41-7.12 (m, 7H), 5.77 (d, J=7.0 Hz, 1H), 5.72-5.57 (m, 1H), 5.16-5.00 (m, 4H), 4.86 (q, J=6.7 Hz, 1H), 2.60 (t, J=6.2 Hz, 2H).
Пример 6. Получение 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ола
Cl
А. Получение 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)анилина
CI
Во флакон для микроволнового синтеза ёмкостью 20 мл помещали 2-бром-4-хлоранилин (3 г, 14.53 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-(тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,3,2-диоксаборолан (5.53 г, 21.80 ммоль), KOAc (3.66 г, 37.3 ммоль), аддукт Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (0.32 г, 0.44 ммоль) и DMSO (9 мл). Полученную суспензию продували N2, закрывали пробкой и нагревали при 80°C в течение 22 ч. Реакционную смесь охлаждали до rt. Добавляли воду для растворения солей, затем реакционную смесь фильтровали. Оставшийся осадок суспендировали в DCM и нерастворённые вещества отфильтровывали. Фильтрат упаривали, а затем очищали нормально-фазовой хроматографией, получали 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)анилин (3.15 г, выход 86%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z:
172.3 (М-ебИю+Н^. Ή NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (d, J=2.6 Hz, 1H), 7.13 (dd, J=8.8, 2.6 Hz, 1H), 6.52 (d, J=8.6 Hz, 1H), 4.72 (br. s., 2H), 1.34 (s, 12H).
6B. Получение 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина ci
К RBF, содержащей 4-хлор-6-метоксипиримидин (3.13 г, 21.62 ммоль), 4-хлор-2-(тетраметил-1,3,2диоксаборолан-2-ил)анилин (7.31 г, 21.62 ммоль), Na2CO3 (2.29 г, 21.62 ммоль), DME (86 мл), EtOH (10.81 мл) и воду (10.81 мл), подсоединяли холодильник. Смесь продували аргоном в течение нескольких минут, затем добавляли аддукт Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2 (1.77 г, 2.16 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 90°C в течение 5 ч. Охлаждали до rt, добавляли воду и экстрагировали EtOAc. Органический слой промывали рассолом, упаривали и очищали нормально-фазовой хроматографией, получали 4-хлор-2-(6метоксипиримидин-4-ил)анилин (2.86 г, выход 56.1%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 236.0 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.78 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.49 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.15 (dd, J=8.8, 2.5 Hz, 1H), 6.99 (d, J=1.1 Hz, 1H), 6.67 (d, J=8.8 Hz, 1H), 5.89 (br. s., 2H), 4.03 (s, 3H).
6C. Получение 4-{ 5-хлор-2-[4-(триметилсилил)-Ш-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримиди на
Cl
К раствору 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина (1.5 г, 6.36 ммоль) в ACN (90 мл) при 0°C прибавляли 3-метилбутил нитрит (1.28 мл, 9.55 ммоль), а затем по каплям прибавляли азидотриметилсилан (1.26 мл, 9.55 ммоль). Наблюдали выделение газа. Через 10 мин баню со льдом отставляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до rt. (Внимание! Арилазиды являются взрывоопасными.) Через 1 ч добавляли этинилтриметилсилан (2.72 мл, 19.09 ммоль) и Cu2O (0.09 г, 0.64 ммоль) и реакционную смесь перемешивали ещё в течение 1 ч. Реакционную смесь распределяли между EtOAc и насыщенным водным раствором NH4Cl и слои разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала 4-{5-хлор-2-[4-(триметилсилил)1Н-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримидин (2.13 г, 5.92 ммоль, выход 93%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 360.3 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.82 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.61-7.56 (m, 1H), 7.54-7.48 (m, 2H), 6.20 (d, J=1.1 Hz, 1H), 3.92 (s, 3H), 0.32-0.28 (m,
- 40 031590
9H).
6D. Получение 4- [5-хлор-2-(4-хлор- 1H-1,2,3-триазол-1 -ил)фенил]-6-метоксипиримидина
CI
К раствору 4- {5-хлор-2-[4-(триметилсилил)- 1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримидина (1.56 г, 4.33 ммоль) в ACN (28.9 мл) прибавляли NCS (2.03 г, 15.17 ммоль) и силикагель (6.51 г, 108 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°C в течение 1 ч. Затем реакционную смесь фильтровали для удаления силикагеля и объединённый силикагель промывали EtOAc. Фильтрат промывали водой (2х), рассолом и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала 4-[5-хлор-2-(4-хлорШ-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-метоксипиримидин (0.90 г, выход 64.5%) в виде жёлтой пены. MS(ESI) m/z: 322.3 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.75 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.66-7.55 (m, 2H), 7.50 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.52 (d, J=0.9 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H).
6E. Получение 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ола ci
Cl
К раствору 4-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-метоксипиримидина (900 мг, 2.79 ммоль) в АсОН (6 мл) прибавляли 48% HBr в воде (3 мл, 26.5 ммоль). Смесь перемешивали при 85°C в течение 1 ч. Реакционную смесь упаривали досуха, а затем распределяли между EtOAc и насыщенным водным раствором NaHCO3. Смесь разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2х). Органические вытяжки объединяли, упаривали, а затем остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, получали твёрдое вещество белого цвета. Это твёрдое вещество суспендировали в Et2O, фильтровали и промывали Et2O, получали 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ол (610 мг, выход 70.9%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 308.3 (М+Н)+. *Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ
7.96 (s, 1H), 7.74-7.67 (m, 2Н), 7.62 (dd, J=8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.47 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.44 (d, J=0.9 Hz, 1H). Пример 7. Получение трет-бутил №[(^)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил] карбамата
7А. Получение ^)^-[(1Е)-(2-бромпиридин-4-ил)метилиден]-2-метилпропан-2-сульфинамида о
II
Вг
К суспензии (К)-2-метилпропан-2-сульфинамида (13.03 г, 108 ммоль) и Cs2CO3 (52.5 г, 161 ммоль) в DCM (400 мл) при перемешивании в течение 10 мин прибавляли 2-бромпиридин-4-карбальдегид (20 г, 108 ммоль). Затем реакционную смесь перемешивали в течение 18.5 ч при rt. Реакционную смесь упаривали и к остатку добавляли EtOAc (50 мл) и промывали рассолом (3 х 20 мл). Органический слой сушили MgSO4 и фильтровали, а затем фильтрат упаривали. Остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов гексан и EtOAc, получали (27.2 г, 87%) (R)-\-|(1 ЕН2-бромпиридин-4-ил)метилиден]-2-метилпропан-2-сульфинамид в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 289-291.0 (М+Н)+.
7В. Получение (R)-N-[(1S)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]-2-метилпропан-2-сульфонамида
Вг
К раствору (Kj-Ny 1 Е)-(2-бро\111иридин-4-ил[метилиден|-2-\1етил11ро11а11-2-сульфина\1ида (0.73 г,
2.52 ммоль) и индия (0.435 г, 3.79 ммоль) в THF (6 мл) медленно прибавляли 3-бромпроп-1-ен (0.458 г,
3.79 ммоль) и полученный раствор нагревали при 60°C в течение 18 ч. Реакционную смесь охлаждали, фильтровали через слой целита (CELITE®) и фильтрат упаривали. К остатку прибавляли EtOAc (100 мл) и 5% NaHCO3 (водн.) (1000 мл), мгновенно образовывалась эмульсия (должно быть суспензия). Суспензию фильтровали через бумажный фильтр. Органический слой промывали рассолом, сушили Na2SO4,
- 41 031590 фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов гексан и EtOAc, получали (0.62 г, 74%) ^)-Ы-[(^)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-
1-ил]-2-метилпропан-2-сульфонамид в виде жёлтой жидкости. MS(ESI) m/z: 331-333.0 (М+Н)+.
7С. Получение трет-бутил №[(^)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата
К раствору ^)-Ы-[(^)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]-2-метилпропан-2-сульфинамида (1.38 г, 4.17 ммоль) в МеОН (10 мл) прибавляли 4 N HCl в диоксане (5.21 мл, 20.83 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1.5 ч при rt, затем упаривали. К остатку прибавляли ACN (10 мл), TEA (5.81 мл, 41.7 ммоль) и Boc2O (1.818 г, 8.33 ммоль). Через 18 ч реакционную смесь упаривали и остаток растворяли в EtOAc, промывали водой, рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Полученный остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, применяя в качестве элюентов гексан и EtOAc, получали (0.80 г, 58.7%) трет-бутил №[(^)-1-(2-бромпиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамат в виде масла бледно-жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 324-326.1 (М+Н)+.
Пример 8. Получение (И)-2-метилбут-3-еновой кислоты
8А. Получение ^)-4-бензил-3-(^)-2-метилбут-3-еноил)оксазолидин-2-она
К раствору 2-метилбут-3-еновой кислоты (5.59 г, 55.9 ммоль) и NMM (6.14 мл, 55.9 ммоль) в THF (62 мл) при 0°C по каплям прибавляли пивалоилхлорид (6.87 мл, 55.9 ммоль). Реакционную смесь охладили до -78°C и перемешивали в течение ~2 ч. В отдельной колбе: К раствору ^)-4-бензилоксазолидин-
2-она (8.25 г, 46.6 ммоль) в THF (126 мл) при -78°C по каплям прибавляли N-бутиллитий (2.5 М в гексане) (20.49 мл, 51.2 ммоль). Через 35 мин эту реакционную смесь с помощью полой иглы переносили в первую реакционную смесь. Реакционную смесь перемешивали при -78°C в течение 2 ч, затем охлаждающую баню отставляли и реакцию прекращали (гасили), добавляя насыщенный раствор NH4Cl. К реакционной смеси прибавляли воду и экстрагировали EtOAc (3х). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом, сушили Na2SO4, фильтровали и упаривали, получали жёлтое масло (15 г). Очистка хроматографией на силикагеле дала ^)-4-бензил-3-(^)-2-метилбут-3-еноил)оксазолидин-2-он (6.59 г, 55%) в виде бесцветного масла. MS(ESI) m/z: 282.1 (M+Na)+. Ή NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.36-7.19 (m, 5H), 6.03-5.93 (m, 1H), 5.23-5.10 (m, 2H), 4.69-4.63 (m, 1H), 4.51-4.43 (m, 1H), 4.23-4.15 (m, 2Н), 3.29 (dd, J= 13.5, 3.3 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 13.5, 9.6 Hz, 1H), 1.35 (d, J = 6.9 Hz, 3H) ppm. Также получали другой стереоизомер, ^)-4-бензил-3-(^)-2-метилбут-3-еноил)оксазолидин-2-он, (4.6 г, 38%), в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 260.1 (М+Н)+.
8В. Получение ^)-2-метилбут-3-еновой кислоты
К прозрачному бесцветному раствору ^)-4-бензил-3-(^)-2-метилбут-3-еноил) оксазолидин-2-она (6.05 г, 23.33 ммоль) в THF (146 мл) при 0°C по каплям прибавляли 30% водный раствор H2O2 (9.53 мл, 93 ммоль), а затем 2 N LiOH (23.33 мл, 46.7 ммоль). Спустя 30 мин реакцию гасили, добавляя 25 мл нас. Na2SO3 и 25 мл нас. NaHCO3. Затем реакционную смесь упаривали для удаления THF. К остатку добавляли воду и экстрагировали CHCl3 (3х). Водный слой подкисляли, добавляя конц. HCl до рН~3, экстрагировали посредством EtOAc (3х). EtOAc вытяжки объединяли, промывали рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали, получали ^)-2-метилбут-3-еновую кислоту (2.15 г, 92%) в виде бесцветного масла. '11 NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.84 (br. s., 1H), 5.94 (ddd, J= 17.4, 10.1, 7.4 Hz, 1H), 5.22-5.13 (m, 2H), 3.23-3.15 (m, 1H), 1.31 (d, J = 7.2 Hz, 3H) ppm.
Пример 9. Получение (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
9А. Получение трет-бутил №(^)-1-[2-(1-метил-4-нитро-Ш-пиразол-5-ил) пиридин-4-ил]бут-3-ен-
1-ил]карбамата
В большой флакон для микроволнового синтеза помещали трет-бутил №[(^)-1-(2-бромпиридин-4ил)бут-3-ен-1-ил]карбамат (1.0 г, 3.06 ммоль), полученный, как описано в примере 2, 1-метил-4-нитроШ-пиразол (0.427 г, 3.36 ммоль), диоксан (10 мл), ди(адамантан-1-ил)(бутил)фосфин (0.164 г, 0.458 ммоль), K2CO3 (1.267 г, 9.17 ммоль) и пивалиновую кислоту (0.106 мл, 0.917 ммоль). Реакционную смесь дегазировали с помощью Ar. Затем добавляли Pd(OAc)2 (0.069 г, 0.306 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при 100°C. Через 4 ч нагревание прекращали и реакционную смесь перемешивали при rt в течение 72 ч. Реакцию гасили, добавляя воду (20 мл), и экстрагировали EtOAc (3 х 50 мл). Объединённые
- 42 031590 органические вытяжки промывали рассолом (20 мл), сушили (MgSO4), фильтровали и упаривали. Остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов гептан и EtOAc, получали трет-бутил №[(1Б)-1-[2-(1-метил-4-нитро-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1-ил]карбамат (0.62 г, 54%) в виде белой пены. MS(ESI) m/z: 374.08 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.73 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.28-8.15 (m, 1H), 7.66-7.54 (m, 1H), 7.43-7.34 (m, 1H), 5.76-5.63 (m, 1H), 5.26-5.16 (m, 2H), 4.99 (br. s., 1H), 4.83 (br. s., 1H), 3.97-3.85 (m, 3H), 2.66-2.46 (m, 2H), 1.45 (br. s., 9H).
9B. Получение трет-бутил №(Ш)-1-[2-(4-амино-1-метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1ил] карбамата
К охлаждённому (0°C) раствору трет-бутил №[(Ш)-1-[2-(1-метил-4-нитро-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1-ил]карбамата (0.62 г, 1.660 ммоль) в смеси ацетон (40 мл)/вода (12 мл) прибавляли NH4Cl (0.444 г, 8.30 ммоль) и Zn (1.086 г, 16.60 ммоль). Баню со льдом отставляли и реакционную смесь перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь фильтровали через бумажный фильтр и распределяли между водой (20 мл) и EtOAc (75 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 х 50 мл). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом (25 мл) и сушили (MgSO4). Смесь фильтровали, упаривали и остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов DCM и 0-10% МеОН, получали трет-бутил №[(Ш)-1-[2-(4-амино-1-метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1ил]карбамат (0.46 г, 60%). MS(ESI) m/z: 344.5 (М+Н)+.
9С. Получение трет-бутил N-[(1S)-1-(2-{1-метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол-5ил}пиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата
К трет-бутил №[(Ш)-1-[2-(4-амино-1-метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1-ил]карбамату (0.6 г, 1.747 ммоль) прибавляли Ш)-2-метилбут-3-еновую кислоту (0.189 г, 1.893 ммоль), полученную, как описано в Примере 8, в EtOAc (5.8 мл), охлаждали до 0 °C, добавляли пиридин (0. 0.424 мл, 5.24 ммоль) и 50% раствор T3P® (2.1 мл, 3.49 ммоль) в EtOAc. Через 24 ч реакционную смесь распределяли между насыщенным водным раствором NaHCO3 (10 мл) и EtOAc (20 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 х 20 мл). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом (10 мл) и сушили (MgSO4). Смесь фильтровали и упаривали и остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов гексан и EtOAc, получали трет-бутил N-[(1S)-1-(2-{1-метил-4-[(2R)-2метилбут-3-енамидо]-Ш-пиразол-5-ил}пиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамат (0.35 г, 47%). MS(ESI) m/z: 426.1 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDCl3) δ 10.23 (br. s., 1H), 8.70-8.56 (m, 1H), 8.35 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.56-7.44 (m, 1H), 7.25-7.14 (m, 1H), 6.03 (ddd, J=17.2, 10.2, 8.0 Hz, 1H), 5.39-5.17 (m, 3H), 5.03-4.63 (m, 2H), 4.14-4.08 (m, 3H), 3.22 (quin, J=7.2 Hz, 1H), 2.66-2.49 (m, 1H), 1.84-1.72 (m, 1H), 1.50-1.40 (m, 9H), 1.42-1.37 (m, 3H), 1.06-0.93 (m, 1H).
9D. Получение трет-бутил N-[(9R,10Е,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата
К дегазированному раствору трет-бутил N-[(1S)-1-(2-{1-метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1Hпиразол-5-ил}пиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата (0.160 г, 0.376 ммоль) в DCE (20 мл) прибавляли катализатор Граббса II (второго поколения) (0.096 г, 0.113 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 120°C в течение 30 мин в микроволновом режиме. Реакционную смесь упаривали и остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, используя в качестве элюентов DCM и МеОН, получали целевой продукт (29 мг, 19%) в виде плёнки зелёного цвета. MS(ESI) m/z: 398.3 (М+Н)+. 1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=4.7 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.23 (d, J=13.8 Hz, 1H), 7.03-6.94 (m, 1H), 6.61 (s, 1H), 5.825.71 (m, 1H), 5.19-5.09 (m, 2H), 4.75 (br. s., 1H), 4.15-4.09 (m, 3H), 3.19-3.10 (m, 1H), 2.67 (br. s., 1H), 2.282.15 (m, 2H), 1.54-1.39 (m, 9H), 1.34-1.28 (m, 3H).
9Е. Получение (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
К раствору трет-бутил N-[(9R,10Е,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата (29 мг, 0.073 ммоль) в EtOH (3 мл) добавляли PtO2 (4 мг). Реакционную смесь продували водородом, а затем гидрировали при 55 psi (379.2 кПа). Через 3 ч реакционную смесь отфильтровали через фильтр 0.45 мкМ и упаривали, получили твёрдое вещество чёрного цвета (MS(ESI) m/z: 400.3 (М+Н)+). Этот чёрный твёрдый остаток растворяли в 4N HCl в диоксане (1 мл) и МеОН (1 мл). Через 3 ч смесь упаривали и полученную HCl соль растворяли в смеси DCM/MeOH и пропускали через щелочной картридж, получали (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он в виде чёрного твёрдого вещества (21 мг, 96%), который применяли на следующей стадии без дополнительной очистки. MS(ESI) m/z: 300.2 (М+Н)+.
Пример 10. Получение (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6дигидропиримидин-1-ил}-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16- 43 031590 пентаен-8-она трифторацетата
К раствору 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ола (0.019 г, 0.060 ммоль), полученного, как описано в примере 6, в CH3CN (0.4 мл) прибавляли HATU (0.030 г, 0.078 ммоль) и DBU (0.014 мл, 0.090 ммоль). Через 30 мин добавили (9й,^)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он, полученный, как описано в Примере 9, с DMF (0.2 мл).
Через 18 ч к реакционной смеси добавляли DMF, фильтровали и упаривали. Остаток очищали обращённо-фазовой HPLC на колонке PHENOMENEX® Luna 5U 30 х 100 мм (от 10:90 ACN/H2O до 90:10 ACN/H2O, 0.1% TFA) (20% В на старте, 14 мин градиент). Нужные фракции упаривали и лиофилизировали, получали (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02’6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (11.9 мг, 27%) в виде твёрдого вещества почти белого цвета. MS(ESI) m/z: 590.3 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.78-8.70 (m, 1H), 8.41-8.33 (m, 2H), 7.92-7.85 (m, 2H), 7.80-7.73 (m, 1H), 7.71-7.65 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.21 (dd, J=5.3, 1.8 Hz, 1H), 6.50-6.42 (m, 1H), 5.77 (dd, J=12.5, 3.1 Hz, 1H), 4.23-4.16 (m, 3H), 2.69-2.58 (m, 1H), 2.41 (dd, J=7.5, 4.2 Hz, 1H), 2.22-2.09 (m, 1H), 2.07-1.96 (m, 1H), 1.74-1.60 (m, 1H), 1.38 (d, J=7.7 Hz, 2H), 1.15 (d, J=7.0 Hz, 3H). Аналитическая HPLC (Метод A) RT = 7.38 мин, чистота = 96%.
Пример 11. Получение (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6дигидропиримидин-1-ил}-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетрааза-трицикло[12.3.1.02,6]октадека-
11А. Получение 1-(2H3)метил-4-нитро-1H-пиразола
4-Нитро-Ш-пиразол (10.3 г, 91 ммоль) растворяли в THF (200 мл) и охлаждали до 0°C. К этому раствору порциями прибавляли NaH (60%, 4.37 г, 109 ммоль) и перемешивали ещё в течение 0.5 ч при охлаждении. Затем к этому холодному непрозрачному раствору по каплям прибавляли CD3I (6.23 мл, 100 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при охлаждении в течение 3 ч, затем нагревали до rt и перемешивали при этой температуре в течение ночи. К реакционной смеси прибавляли холодную воду (200 мл), экстрагировали EtOAc (2 х 200 мл) и сушили MgSO4. Раствор фильтровали и упаривали, получали твёрдое вещество жёлтого цвета. Перекристаллизация из смеси гексан/этилацетат дала целевое соединение в виде твёрдого вещества жёлтого цвета (11.5 г, 97%). 1Н NMR (CDCl3) δ 8.85 (s, 1H), 8.82 (s, 1H).
11В. Получение трет-бутил N-(1S)-1-{2-[1-(2H3)метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил}бут-
3-ен-1 -ил]карбамата
трет-Бутил N-[(1S)-1-{2-[1 -(Ш^метил^-нитроЧ H-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил } бут-3 -ен-1 -ил]карба мат (0.80 г, 70%), в виде пены белого цвета, получали по методике получения трет-бутил N-[(1S)-1-[2-(1метил-4-нитро-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1-ил]карбамата, описанной в примере 9А, с заменой Бметил^-нитро-Ш-пиразола на 1-(2Н3)метил-4-нитро-Ш-пиразол. MS(ESI) m/z: 377.5 (М+Н)+. 1Н
NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.73 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.28-8.15 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.43-7.34 (m, 1H), 5.73-5.63 (m, 1H), 5.24-5.18 (m, 2H), 4.99 (br. s., 1H), 4.83 (br. s., 1H), 2.69-2.42 (m, 2H), 1.45 (br. s., 9H).
- 44 031590
11C. Получение трет-бутил Ы-(18)-1-{2-[4-амино-1-(2Нз)метил-1Н-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил}бут3-ен-1-ил]карбамата трет-Бутил N- [(1S)-1 - {2- [4-амино-1 -(2Н3)метил-1Н-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил} бут-3 -ен-1 -ил]карбамат (0.56 г, 76%), твёрдое вещество коричневого цвета, получали по методике, аналогичной методике получения трет-бутил N- [(1S)-1 - [2-(4-амино-1 -метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил] бут-3-ен-1 -ил]карбамата, описанной в примере 9В, с заменой трет-бутил №[(Ш)-1-[2-(1-метил-4-нитро-Ш-пиразол-5ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1-ил]карбамата, полученного по методике, описанной в примере 9А, на третбутил N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил}бут-3-ен-1-ил]карбамат.
MS(ESI) m/z: 347.3 (М+Н)+.
11D. Получение трет-бутил N-(1S)-1-{2-[1-(2H3)метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол5-ил]пиридин-4-ил} бут-3-ен-1-ил] карбамата трет-Бутил N-[(1S)-1 -{2-[1 -(2Н3)метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол-5-ил]пиридин-4ил}бут-3-ен-1-ил] карбамат (0.49 г, 72%), твёрдое вещество жёлтого цвета, получали по методике, аналогичной методике получения трет-бутил N-[(1S)-1-(2-{1-метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол-5-ил}пиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата, описанной в примере 9С, с заменой трет-бутил N[(Ш)-1-[2-(4-амино-1 -метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-4-ил]бут-3-ен-1 -ил]карбамата, полученного, как описано в Примере 9В, на трет-бутил №[(Ш)-1-{2-[4-амино-1-(2П3)метил-Ш-пиразол-5-ил]пиридин-4ил}бут-3-ен-1-ил] карбамат. MS(ESI) m/z: 429.08 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDQ3) δ 10.13 (br. s., 1H), 8.56-8.50 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.42-7.35 (m, 1H), 7.15-7.08 (m, 1H), 5.92 (ddd, J=17.1, 10.1, 8.0 Hz, 1H),
5.68-5.56 (m, 1H), 5.26-5.19 (m, 3H), 5.16-5.11 (m, 2H), 4.88 (br. s., 1H), 4.70 (br. s., 1H), 3.12 (quin, J=7.2
Hz, 1H), 2.57-2.39 (m, 1H), 1.36 (br. s., 9H), 1.30 (d, J=6.9 Hz, 3H).
11E. Получение трет-бутил N-[(9R,10E,13S)-3-(2Н3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата н
трет-Бутил N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамат (64 мг, 33%), твёрдое вещество зелёного цвета, получали по методике, аналогичной методике получения трет-бутил N-[(9R,10Е,13S)-3,9-диметил-8-оксо3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата, описанной в примере 9D, с заменой трет-бутил N-[(1S)-1-(2-{1-метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол-5ил}пиридин-4-ил)бут-3-ен-1-ил]карбамата, полученного, как описано в примере 9С, на трет-бутил N[(1S)-1-{2-[1 -(2H3)метил-4-[(2R)-2-метилбут-3 -енамидо]- Ш-пиразол-5-ил]пиридин-4-ил } бут-3-ен-1 ил]карбамат. MS(ESI) m/z: 401.3 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CDQ3) δ 8.67 (br. s., 1H), 7.55 (s, 1H), 7.20
2.66 (br. s., 1H), 2.20 (s, 1H), 1.47 (br. s., 9H), 1.28 (br. s., 3H).
11F. Получение (9R, 13 S)-13 -амино-3-(2Л3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она (9R,13S)-13-Амино-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (48 мг), твёрдое вещество коричневого цвета, получали по методике, аналогичной методике получения (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она, описанной в примере 9Е, с заменой трет-бутил N-[(9R,10E,13S)3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13ил]карбамата, полученного, как описано в примере 9D, на трет-бутил N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)метил-9
- 45 031590 метил-8-оксо-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамат. MS(ESI) m/z: 303.3 (М+Н)+.
11G. Получение (9R,13S)-13-{4-[5-хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил }-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
(9R,13 S)-13-{4-[5-Хлор-2-(4-хлор-1H-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидро пиримидин-1ил}-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетат, (10.8 мг, 18%), твёрдое вещество белого цвета, получали по методике, аналогичной методике получения (9R,13 S)-13 - {4-[5-хлор-2-(4-хлор- Ш-1,2,3-триазол-1 -ил)фенил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил}-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она, описанной в примере 10, с заменой (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она, полученного, как описано в примере 9Е, на (9R,13S)-13-амино-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он, полученный, как описано в примере 11F. MS(ESI) m/z: 593.3 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.78-8.69 (m, 1H), 8.42-8.33 (m, 2H), 7.92-7.86 (m, 2H), 7.80-7.74 (m, 1H), 7.697.64 (m, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.21 (dd, J=5.3, 1.5 Hz, 1H), 6.51-6.43 (m, 1H), 5.77 (dd, J=12.5, 3.3 Hz, 1h), 2.62 (ddd, J=9.5, 6.7, 3.4 Hz, 1H), 2.48-2.38 (m, 1H), 2.22-2.11 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 1H), 1.69-1.59 (m, 1H), 1.421.33 (m, 2H), 1.15 (d, J=6.8 Hz, 3H). Аналитическая HPLC (Method A) RT = 7.26 мин, чистота = 96%.
Пример 12. Получение 6-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}пиримидин-4ола
12А. Получение 4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримидина
К раствору 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина (1.0 г, 4.24 ммоль), полученного, как описано в примере 6В, в ACN (60.6 мл) при 0°C прибавили 3-метилбутилнитрит (0.86 мл, 6.36 ммоль), а затем по каплям прибавляли азидотриметилсилан (0.84 мл, 6.36 ммоль). Наблюдали выделение газа. Через 10 мин баню со льдом отставляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до rt. (Внимание! Арилазиды являются взрывоопасными.) Через 2 ч добавляли Cu2O (61 мг, 0.42 ммоль), а затем через реакционную смесь медленно пропускали газообразный 3,3,3-трифторпроп-1-ин в течение 5 мин. Ещё через 10 мин реакционную смесь распределяли между DCM и насыщенным водным раствором NH4Cl, а затем слои разделяли. Органический слой промывали рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала 4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-1,2,3-триазол-1ил] фенил }-6-метоксипиримидин (1.46 г, выход 97%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 356.1 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.00 (d, J=0.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.66-7.60 (m, 1H), 7.52 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.60 (d, J=1.1 Hz, 1H), 3.98 (s, 3H). 19F NMR (376 MHz,
CDCl3) δ -61.10 (s).
12B. Получение 6-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)- 1H-1,2,3-триазол-1-ил] фенил } пиримидил-4-ола
ci
- 46 031590
К раствору 4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-метоксипиримидина (1.46 г, 4.10 ммоль) в АсОН (10 мл) прибавляли 48% HBr в воде (5 мл, 44.2 ммоль). Смесь перемешивали при 85°C в течение 1 ч. Реакционную смесь упаривали досуха, а затем распределяли между EtOAc и насыщенным водным раствором NaHCO3. Слои разделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (2х). Органические вытяжки объединяли и промывали насыщенным водным раствором NaHCO3, рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и растворитель отгоняли в вакууме до тех пор, пока не начал образовываться осадок. Полученную суспензию растирали с Et2O. Осадок отфильтровали и промывали Et2O, получали 6{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}пиримидин-4-ол (1 г, выход 71.3%) в виде твёрдого вещества бледно-жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 342.0 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.83 (d, J=0.7 Hz, 1H), 7.99 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.87 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.79-7.72 (m, 1H), 7.70-7.62 (m, 1H), 6.45 (d, J=0.9 Hz, 1H). 19F NMR (376MHz, CD3OD) δ -62.61 (s).
Пример 13. Получение (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
Me
13А. Получение 1-метил-4-нитро-Ш-пиразола
К раствору 4-нитро-Ш-пиразола (2.5 г, 22.11 ммоль) в THF (50 мл) прибавляли NaH (0.973 г, 24.32 ммоль) и смесь перемешивали при rt в течение 5 мин. Затем к этой суспензии прибавляли CH3I (1.382 мл, 22.11 ммоль) и перемешивали при rt в течение ночи. Затем к реакционной смеси прибавляли EtOAc (2 х 25 мл) и промывали рассолом (25 мл). Органический слой упаривали с последующей очисткой нормально-фазовой хроматографией, получали 1-метил-4-нитро-Ш-пиразол в виде твёрдого вещества белого цвета (1.9 г, выход 80%). 31 NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 8.12 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 3.97 (s, 3H).
13В. Получение (Ь)-трет-бутил (1-(4-(1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1ил)карбамата
Во флакон, продутый N2 под давлением, помещали (Ь)-трет-бутил (1-(4-хлорпиридин-2-ил)бут-3ен-1-ил)карбамат (3.0 г, 10.61 ммоль), 1-метил-4-нитро-Ш-пиразол (1.348 г, 10.61 ммоль), ди(адамант-1ил)(бутил)фосфин (1.141 г, 3.18 ммоль), PvOH (0.369 мл, 3.18 ммоль) и K2CO3 (4.40 г, 31.8 ммоль). Затем к этой смеси прибавляли DMF (21 мл) и флакон продували N2 в течение 5 мин. Затем к этой смеси прибавляли Pd(OAc)2 (0.476 г, 2.122 ммоль). Через реакционную смесь снова быстро продули N2. Флакон плотно герметизировали и нагревали на масляной бане при 120°C в течение 4 ч. Реакционную смесь охлаждали до rt и распределяли между 10% водным раствором LiCl (15 мл) и EtOAc (30 мл). Водный слой экстрагировали EtOAc (2 х 20 мл) и объединённые органические вытяжки промывали рассолом (15 мл), сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Затем сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией, получали ^)-трет-бутил-(1-(4-( 1-метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 ил)карбамат (1.2 г, выход 29%) в виде коричневого масла. MS(ESI) m/z: 374.4 (М+Н)+.
13С. Получение (Ь)-трет-бутил (1-(4-(4-амино-1-метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1ил)карбамата
Раствор (Ь)-трет-бутил (1-(4-(1 -метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата (1.2 г, 3.21 ммоль) в МеОН (10 мл) и АсОН (1 мл) нагревали на масляной бане при 40°C. Затем к этому прозрачному раствору медленно прибавляли Zn (0.420 г, 6.43 ммоль, тремя порциями (50:25:25%) и оставляли перемешиваться при той же температуре в течение 5 мин. За ходом реакции следили с помощью LCMS и по завершении реакции к охлаждённой реакционной смеси прибавляли 1 г K2CO3 (1 г на 1 мл АсОН) и 1 мл воды. Затем реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин, фильтровали через слой целита (CELITE®) и упаривали в вакууме, получая сырой продукт. Сырой продукт распределяли между EtOAc (30 мл) и насыщенным водным раствором NaHCO3 (15 мл). Органический слой отделяли, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Затем сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией, получали ^)-трет-бутил-(1-(4-(4-амино-1 -метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил) карбамат (0.88 г, выход 76%) в виде масла бледно-коричневого цвета. MS(ESI) m/z: 344.4 (М+Н)+.
13D. Получение трет-бутил (^)-1-(4-(1-метил-4-(Ш)-2-метилбут-3-енамидо)-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3 -ен-1 -ил)карбамата
В продутую N2 трёхгорлую RBF на 250 мл помещали раствор (Ь)-трет-бутил (1-(4-(4-амино-1метил-Ш-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамата (620 мг, 1.805 ммоль) в EtOAc (15 мл). Раствор охлаждали до -10°C и добавляли (И)-2-метилбут-3-еновую кислоту, полученную, как описано в примере 2, (271 мг, 2.71 ммоль), пиридин (0.437 мл, 5.42 ммоль) и T3P® (2.149 мл, 3.61 ммоль). Охлаждающую баню отставляли и раствор оставляли нагреваться до rt и перемешивали в течение 20 ч. Добавляли воду (15 мл) и EtOAc (15 мл) и смесь перемешивали в течение 30 мин. Органическую фазу отделяли и водный слой экстрагировали EtOAc (15 мл). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом (15 мл), сушили Na2SO4, фильтровали и упаривали в вакууме. Очистка нормально-фазовой хромато
- 47 031590 графией с элюированием в градиенте гексан/EtOAc дала трет-бутил (^)-1-(4-(1-метил-4-(Щ)-2-метилбут3-енамидо)-1И-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат (0.26 г, выход 34%). MS(ESI) m/z: 426.5 [М+Н]+.
13Е. Получение трет-бутил N-[(9R,10E,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата
В продутую N2 трёхгорлую RBF на 250 мл помещали раствор трет-бутил (^)-1-(4-(1-метил-4-(Щ)-
2-метилбут-3-енамидо)-1И-пиразол-5-ил)пиридин-2-ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат (266 мг, 0.625 ммоль) в DCE (18 мл). Через раствор пропускали аргон в течение 15 мин. Одной порцией прибавляли катализатор Граббса II (213 мг, 0.250 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 120°C в микроволновом режиме в течение 30 мин. По охлаждении до rt растворитель отгоняли и остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя в градиенте DCM/MeOH, получали трет-бутил N-[(9R,10E,13S)-3,9-диметил-8оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамат (60 мг, выход 23%) в виде твёрдого вещества желтовато-коричневого цвета. MS(ESI) m/z: 398.4 [М+Н]+.
13F. Получение трет-бутил N-[(9R,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата
Pd/C (0.016 г, 0.015 ммоль) добавляли в прибор (сосуд) Парра для гидрирования на 100 мл содержащий раствор трет-бутил N-[(9R,10E,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата (60 мг, 0.151 ммоль) в EtOH (6 мл). Прибор продували N2, подавали H2 под давлением 55 psi (379.2 кПа) и оставляли перемешиваться в течение 5 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и упаривали, получая трет-бутил N-[(9R,13S)-3,9диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамат (48 мг, выход 76%) в виде твёрдого вещества желтовато-коричневого цвета. MS(ESI) m/z: 400.5 [М+Н]+.
13G. Получение (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
К раствору трет-бутил N-(9R,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата (48 мг, 0.120 ммоль) в DCM (2.5 мл) добавляли TFA (0.6 мл, 7.79 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при rt в течение 1.5 ч. Затем реакционную смесь упаривали, получали (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она бистрифторацетата (63 мг, выход 94%) в виде твёрдого вещества коричневого цвета, которое затем растворяли в МеОН (1 мл), получили прозрачный коричневый раствор.
Этот раствор помещали на предварительно промытый картридж AGILENT® StratoSpheres SPE PLHCO3 МР Resin. В результате гравитационной фильтрации (свободного фильтрования) с МеОН в качестве элюента получали прозрачный слабожёлтый фильтрат. После упаривания получали (9R,13S)-13амино-3,9-диметил-3,4,7,15- тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (25 мг, 93%) в виде твёрдого вещества бледно-жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 300.4 [М+Н]+.
Пример 14. Получение (9R,13S)-13-амино-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
14А. Получение Н^Из^етилЧ-нитро-Ш-пиразола
К раствору 4-нитро-Ш-пиразола (2.5 г, 22.11 ммоль), CD3OD (0.898 мл, 22.11 ммоль) и полимерсвязанного Ph3P (8.84 г, 26.5 ммоль) в THF (40 мл) прибавляли DIAD (5.59 мл, 28.7 ммоль) и перемешивали в течение ночи. К реакционной смеси прибавляли воду, экстрагировали EtOAc, промывали рассолом, сушили Na2SO4, фильтровали и упаривали. Сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя в градиенте DCM/MeOH, получали целевой продукт (1.92 г, 14.76 ммоль, выход 66.7%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 131.0 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 (d, J=0.4 Hz, 1H), 8.05 (s, 1H).
14В. Получение трет-бутил N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)метил-4-нитро-1H-пиразол-5-ил]пиридин-2-ил}бут-
3-ен-1 -ил]карбамата
В большой флакон для микроволнового синтеза помещали (Ъ)-трет-бутил (1-(4-хлорпиридин-2ил)бут-3-ен-1-ил)карбамат (2.61 г, 9.22 ммоль), 1-(2H3)метил-4-нитро-1H-пиразол (1.0 г, 7.69 ммоль), ди(адамантил)(бутил)фосфин (0.413 г, 1.15 ммоль), K2CO3 (3.19 г, 23.06 ммоль), пивалиновую кислоту (0.268 мл, 2.306 ммоль) и DMF (15.37 мл). Через реакционную смесь пропускали аргон в течение 10 мин, добавляли Pd(OAc)2 (0.173 г, 0.769 ммоль), флакон герметично закрывали и перемешивали при 115°C в течение ночи. Затем реакционную смесь распределяли между EtOAc и H2O. Водный слой экстрагировали дополнительным количеством EtOAc (2х). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали. Остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя в градиенте гексан/EtOAc, получали целевой продукт (1.49 г, 3.96 ммоль, выход 51.5%) в виде пены
- 48 031590 бледно-лилового цвета. MS(ESI) m/z: 377.0 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.77 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.23 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 5.78-5.65 (m, 1H), 5.55 (d, J=6.8 Hz, 1H), 5.14-5.03 (m, 2H), 4.89 (d, J=6.8 Hz, 1H), 2.66 (t, J=6.6 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H).
14C. Получение трет-бутил N-[(1S)-1-{4-[4-амино-1-(2H3)метил-1H-пиразол-5-ил]пиридин-2ил}бут-3-ен-1-ил]карбамата трет-Бутил N-[(1 S)-1-{4-[1 -(2H3)метил-4-нитро-1 ^пиразол-5-ил] пиридин-2-ил } бут-3-ен-1 -ил] карбамат (1.45 г, 3.85 ммоль) растворяли в смеси ацетон (15 мл)/вода (3 мл), охлаждали до 0°C и добавляли NH4Cl (1.030 г, 19.26 ммоль) и цинк (2.52 г, 38.5 ммоль), затем отставляли баню со льдом. Через 1 ч реакционную смесь фильтровали и фильтрат распределяли между водой (30 мл) и EtOAc (50 мл). Водный слой экстрагировали рассолом (20 мл), сушили (MgSO4), фильтровали и упаривали. Остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя в градиенте DCM/MeOH, получали целевой продукт (0.62 г, 46.5%). MS(ESI) m/z: 347.2 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.67 (dd, J=5.1, 0.7 Hz, 1H), 7.26-7.23 (m, 2H), 7.21 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 5.79-5.66 (m, 1H), 5.58 (d, J=7.3 Hz, 1H), 5.11-5.05 (m, 2H), 4.86 (q, J=6.6 Hz, 1H), 2.64 (t, J=6.7 Hz, 2H), 1.44 (s, 9H).
14D. Получение трет-бутил N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)метил-4-[(2R)-2-метилбут-3-енамидо]-1H-пиразол-
5- ил] пиридин-2-ил } бут-3 -ен-1-ил] карбамата
^)-2-Метилбут-3-еновую кислоту (233 мг, 2.327 ммоль), трет-бутил №[(^)-1-{4-[4-амино-1(2H3)метил-1Н-пиразол-5-ил]пиридин-2-ил}бут-3-ен-1-ил] карбамат (620 мг, 1.79 ммоль), пиридин (0.433 мл, 5.37 ммоль) в EtOAc (17.900 мл) под Ar охлаждали до -10°C, а затем по каплям добавили T3P® (50% вес. в EtOAc) (2.131 мл, 3.58 ммоль) и постепенно нагревали до rt. Через 3.5 ч к реакционной смеси прибавляли EtOAc, промывали 1.5 М K2HPO4, рассолом, сушили Na2SO4, фильтровали и упаривали. Затем сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией в градиенте элюентов гексан/EtOAc, получали целевой продукт (529 мг, 1.234 ммоль, выход 69.0%) в виде жёлтой пены. MS(ESI) m/z: 429.2 (М+Н)+.
14Е. Получение трет-бутил N-(9R,10Е,13S)-3-(2H3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1 (18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил] карбамата
В пять больших флаконов для микроволнового синтеза помещали равные количества трет-бутил N[(1S)-1-{4-[1 -(2H3)метил-4-[(2R)-2-метилбут-3 -енамидо]- Ш-пиразол-5-ил] пиридин-2-ил } бут-3-ен-1 -ил] карбамата (0.51 г, 1.190 ммоль) в дегазированном DCE (90 мл), подвергали воздействию СВЧ-излучения при температуре 120°C в течение 30 мин в присутствии катализатора Граббса II (0.404 г, 0.476 ммоль). Реакционные смеси объединяли, упаривали и остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, элюируя в градиенте растворителей гексан/EtOAc, получали целевой продукт (0.124 г, 26.0%) в виде твёрдого вещества коричневого цвета. MS(ESI) m/z: 401.2 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.66 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.19 (d, J=4.8 Hz, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.37 (d, J=7.5 Hz, 1H), 5.68 (t, J=11.2 Hz, 1H), 4.82-4.63 (m, 2H), 3.12-2.93 (m, 2H), 1.93 (q, J=11.1 Hz, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.15 (d, J=5.9 Hz, 3H).
14F. Получение трет-бутил N-[(9R,13S)-3-(2H3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил] карбамата
К раствору трет-бутил N-(9R,10Е,13S)-3-(2H3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,10,14,16-гексаен-13-ил]карбамата (0.120 г, 0.300 ммоль) в EtOH (10 мл) при перемешивании прибавляли PtO2 (6.80 мг, 0.030 ммоль). Суспензию выдерживали в атмосфере водорода под давлением (55 psi, 379.2 кПа) в течение 1 ч. Катализатор отфильтровывали через слой целита и фильтрат упаривали. Продукт (0.104 г, 86%) использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. MS(ESI) m/z: 403.2 (М+Н)+.
14G. Получение (9R, 13 S)-13-амино-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она
К раствору трет-бутил N-[(9R,13S)-3-(2H3)метил-9-метил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]карбамата (0.100 г, 0.248 ммоль) в МеОН (3 мл) при перемешивании прибавляли 4.0 М раствор HCl в диоксане (1.621 мл) и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь упаривали досуха и выдерживали в высоком вакууме. Хлористо-водородную соль превращали в свободное основание, растворяя в МеОН и пропуская через фильтр-картридж с полимерсвязанным NaHCO3 (StratoSpheres SPE; нагрузка 500 мг, 0.90 ммоль) и фильтрат упаривали. Продукт использовали в последующей реакции без дополнительной очистки. MS(ESI) m/z: 303.4 (М+Н)+.
Пример 15. Получение (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-
6- оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
CI
- 49 031590
В сцинтилляционный флакон, содержащий 6-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1Н-1,2,3-триазол-1ил] фенил }пиримидин-4-ол (22.8 мг, 0.067 ммоль), полученный, как описано в примере 12, HATU (33.0 мг, 0.087 ммоль) в безводном ACN (0.5 мл) прибавляли DBU (15 мл, 0.100 ммоль). Через 30 мин прибавили раствор (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она (20 мг, 0.067 ммоль), полученного, как описано в примере 13, в 0.5 мл CH3CN и DMF (0.1 мл). Полученный раствор перемешивали при rt в течение 2 ч, затем очищали обращённо-фазовой хроматографией, после упаривания и лиофилизации получали (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2[4-(трифторметил)-Ш- 1,2,3-триазол-1 -ил] фенил }-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3,9-диметил3,4,7, 15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетат (26.98 мг, выход 53.1%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 624.3 (М+Н)+. NMR (400 MHz,
CD3OD) d 8.81 (d, J=0.7 Hz, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.70 (d, J=5.3 Hz, 1H), 7.89 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.77-7.72 (m, 1H), 7.72-7.66 (m, 2H), 7.53 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.43 (s, 1H), 6.02-5.93 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 2.70 (td, J=6.7, 3.3 Hz, 1H), 2.27 (tt, J=12.7, 4.4 Hz, 1H), 2.12-1.94 (m, 2H), 1.66-1.52 (m, 1H), 1.45 (ddd, J=15.0, 9.8, 5.0 Hz, 1H), 1.00 (d, J=7.0 Hz, 3H), 0.69 (br. s., 1H). 19F NMR (376 MHz, CD3OD) δ -62.54 (s), -77.44 (s). Аналитическая HPLC (Метод A): RT = 11.02 мин, чистота = 96.7%.
Пример 16. Получение (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-
6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3 -(2H3)метил-9-метил-3,4,7,15 -тетраазатрицикло [12.3.1.02,6] октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
(9R,13S)-13-(4-{5-Хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1 -ил] фенил }-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил)-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16пентаен-8-она трифторацетат (11 мг, выход 30%) получали по методике, описанной в примере 15, с заменой (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16пентаен-8-он на (9R,13S)-13-амино-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (15 мг, 0.050 ммоль), полученный, как описано в примере 14. MS(ESI) m/z: 627.3 (М+Н). Ή NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 8.77-8.66 (m, 2H), 7.89 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.79-7.64 (m, 3H), 7.59-7.51 (m, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 5.97 (dd, J=12.4, 3.9 Hz, 1H), 2.76-2.62 (m, J=6.5, 3.4, 3.4 Hz, 1H), 2.34-2.21 (m, 1H), 2.12-1.94 (m, 2H), 1.68-1.53 (m, 1H), 1.51-1.39 (m, 1H), 1.00 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.78-0.63 (m, 1H). Аналитическая HPLC (Метод A): RT = 8.64 мин, чистота = 99.4%.
Пример 17. Получение (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
(9R,13S)-13-(4-{5-Хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил)-3-(дифторметил)-9-метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он, трифторацетат (20 мг, выход 50%) получали по методике, аналогичной методике, описанной в примере 15, с заменой (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пента-ен-8-она на (9R, 13S)-13-амино-3-(дифторметил)-9метил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он (17 мг, 0.051 ммоль). MS(ESI) m/z: 660.3 (М+Н). lH NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.81 (d, J=3.7 Hz, 2H), 8.71 (d, J=5.1 Hz, 1H), 7.89 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.81-7.62 (m, 5H), 7.56-7.46 (m, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.00 (dd, J=12.7, 4.5 Hz, 1H), 2.70 (td, J=6.5, 3.0 Hz, 1H), 2.32-2.20 (m, 1H), 2.10-1.91 (m, 2H), 1.65-1.51 (m, 1H), 1.51-1.39 (m, 1H), 0.99 (d, J=6.8 Hz, 3H), 0.70-0.51 (m, 1H). Аналитическая HPLC (Метод A): RT = 9.74 мин, чистота = 97.8%.
Пример 18. Получение (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-
- 50 031590 (9К138)-13-(4-{5-Хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-1,2,3-триазол-1 -ил] фенил }-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1 -ил)-3,9-диметил-3,4,7,17 -тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она TFA соль (9 мг, 20%), твёрдое вещество почти белого цвета, получали по методике, описанной в примере 10, заменяя 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ол, полученный, как описано в примере 6, на 6-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-пиразол-1-ил] фенил }пиримидин-4ол, полученный, как описано в примере 12В. MS(ESI) m/z: 624.3(M+H)+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.84 (d, J=0.7 Hz, 1H), 8.71 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.91 (d, J=2A Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80-7.75 (m, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.17 (dd, J=5.3, 1.8 Hz, 1H), 6.52 (d, J=0.7 Hz, 1H), 5.77 (dd, J=12.4, 3.2 Hz, 1H), 4.18 (s, 3H), 2.64-2.56 (m, 1H), 2.38 (br. s., 1H), 2.11 (dd, J=13.1, 3.6 Hz, 1H), 2.02-1.95 (m, 1H), 1.64 (d, J=6.8 Hz, 1H), 1.39 (dd, J=16.9, 8.1 Hz, 2H), 1.14 (d, J=6.8 Hz, 3H). Аналитическая HPLC (Метод A) RT = 8.05 мин, чистота = 95%.
Пример 19. Получение (9R,13S)-13-(4-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1-ил]фенил}6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3 -(2Н3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она трифторацетата
(9R,13S)-13-(4-{5-Хлор-2-[4-(трифторметил)-1H-1,2,3-триазол-1 -ил] фенил }-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-1-ил)-3-(2H3)метил-9-метил-3,4,7,17-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16пентаен-8-она трифторацетат (11.7 мг, 23%), твёрдое вещество почти белого цвета, получали, как описано в примере 10, заменяя 6-[5-хлор-2-(4-хлор-Ш-1,2,3-триазол-1-ил)фенил]пиримидин-4-ол, полученный, как описано в примере 6, на 6-{5-хлор-2-[4-(трифторметил)-Ш-пиразол-1-ил] фенил }пиримидин-4ол, полученный, как описано в примере 12В. Также (9R,13S)-13-амино-3,9-диметил-3,4,7,17-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он, полученный, как описано в примере 9, заменяли на (9R, 13 S)-13 -амино-3 -(^^метил^-метил^ ,4,7,17 -тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-он, полученный, как описано в примере 6F. MS(ESI) m/z: 627.3 (M+H)+. 1H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.86-8.82 (m, 1H), 8.75-8.69 (m, 1H), 8.28 (s, 1H), 7.94-7.87 (m, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.80-7.76 (m, 1H), 7.74-7.69 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.20-7.09 (m, 1H), 6.56-6.51 (m, 1H), 5.77 (dd, J=12.5, 3.3 Hz, 1H), 2.67-2.58 (m, 1H), 2.47-2.37 (m, 2H), 2.19-2.06 (m, 1H), 2.03-1.96 (m, 1H), 1.73-1.60 (m, 1H), 1.481.31 (m, 2H), 1.14 (d, J=6.8 Hz, 3H). Аналитическая HPLC (Метод А) RT = 8.02 мин, чистота = 96%.
Пример 20. Получение 1-(4-хлор-2-(1-((5R,9S)-21,5-диметил-4-оксо-21H-3-аза-1(2,4)-пиридина2(5,4)-пиразолациклононафан-9-ил)-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил)фенил)-Ш-1,2,3-триазол-4карбоновой кислоты трифторацетат
20А. Получение №(4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил)-2,2,2-трифторацетамида о
CI
К раствору 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4- ил)анилина (0.523 г, 2.219 ммоль), полученного, как описано в примере 6В, и ангидрида трифторуксусной кислоты (0.376 мл, 2.66 ммоль) в DCM (17.47 мл) прибавляли TEA (0.371 мл, 2.66 ммоль). Через 1 ч реакционную смесь упаривали и очищали нормальнофазовой хроматографией, получали №(4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил)-2,2,2-трифторацетамид (0.684 г, выход 93%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 332.1 (М+Н)+. 1Н NMR (400 MHz, CDCl3-d) δ 13.95 (br. s., 1H), 8.83 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.59 (d, J=9.0 Hz, 1H), 7.76 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.49 (dd, J=9.0, 2.4 Hz, 1H), 7.16 (d, J=0.9 Hz, 1H), 4.09 (s, 3H).
20В. Получение №(4-хлор-2-(6-гидроксипиримидин-4-ил)фенил)-2,2,2-трифторацетамида
ci
- 51 031590
К раствору №(4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил)-2,2,2-трифторацетамида (0.68 г, 2.05 ммоль) в THF (13.67 мл) при перемешивании при 60°C прибавляли 48% HBr в H2O (1.693 мл, 14.97 ммоль). Через 3 ч реакционную смесь упаривали, реакцию гасили, добавляя насыщенный раствор NaHCO3 (40 мл), и экстрагировали EtOAc (3 х 30 мл). Объединённые органические вытяжки промывали рассолом (15 мл) и сушили (MgSO4). Остаток очищали нормально-фазовой хроматографией, получали целевой продукт (0.195 г, 30%). MS(ESI) m/z: 318.1 (М+Н)+. ’И NMR: (400 MHz, CDCl3-d) δ 8.50 (d, J=9.0 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.66 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.57-7.49 (m, 1H), 6.89 (s, 1H).
20C. Получение (5R,9S)-9-(4-(2-амино-5-хлорфенил)-6-оксопиримидин-1 (6Н)-ил)-21,5-диметил21H-3 -аза-1(2,4)-пиридина-2(5,4)-пиразолациклононафан-4-она
Во флакон на 1 драхму (~3,72 мл), содержащий белую суспензию №(4-хлор-2-(6-гидроксипиримидин-4-ил)фенил)-2,2,2-трифторацетамида (0.035 г, 0.110 ммоль) и HATU (0.054 г, 0.143 ммоль) в ACN (1.10 мл), добавляли DBU (0.025 мл, 0.165 ммоль). Через 10 мин добавляли окрашенный в пурпурный цвет раствор из примера 9 (0.033 г, 0.110 ммоль) в DMF (1.102 мл). После перемешивания в течение ночи к реакционной смеси прибавляли воду, экстрагировали EtOAc (3х), органические вытяжки промывали рассолом, сушили Na2SO4, фильтровали и упаривали. Сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией, получая целевой интермедиат в виде жёлтой плёнки (1Н NMR спектр показал также присутствие 30% нецелевого изомера). Продукт вводили в последующие реакции. Трифторацетамидную группу удаляли путём растворения соединения в МеОН (2 мл), добавления HCl (1 мл) и нагревания при 75°C в течение 2 ч, после чего органический слой удаляли и водный слой лиофилизировали. HCl соль нейтрализовали, растворяя остаток в МеОН и пропуская через два последовательных NaHCO3 картриджа (500 мг), и фильтрат упаривали, получали целевой продукт (0.040 г, 0.079 ммоль, выход 72.0%) в виде жёлтой плёнки. MS(ESI) m/z: 504.3 (М+Н)+.
20D. Получение 1 -(4-хлор-2-( 1-((5R,9S)-21,5-диметил-4-оксо-21Н-3 -аза-1 (2,4)-пиридина-2(5,4)пиразолациклононафан-9-ил)-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил)фенил)-1Н- 1,2,3-триазол-4-карбоновой кислоты трифторацетата
CI
К жёлтому раствору 20С (0.040 г, 0.079 ммоль) в ACN (1.134 мл) при 0°C прибавляли изоамил нитрит (0.032 мл, 0.238 ммоль) в ACN (0.25 мл), а затем, по каплям, азидотриметилсилан (0.031мл, 0.238 ммоль) и ACN (0.25 мл). Через 10 мин холодную баню отставляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до rt. Через 1 ч при rt прибавили трет-бутил пропиолат (0.050 г, 0.397 ммоль), ACN (0.25 мл) и Cu2O (1.136 мг, 7.94 мкмоля). Через 6 ч к реакционной смеси прибавляли DCM и промывали нас. NH4Cl, рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали, получали жёлтое масло. Сырой продукт очищали нормально-фазовой хроматографией, получали целевой интермедиат в виде жёлтой плёнки. третБутиловый эфир гидролизовали с помощью 50%/TFA/DCM. Через 1 ч реакционную смесь упаривали, очищали обращённо-фазовой хроматографией и лиофилизировали, получая целевой продукт (15 мг, 25%). Этот продукт очищали хиральной хроматографией с целью удаления любых остаточных количеств нецелевого изомера. Титульное соединение представляло собой изомер, который в процессе разделения с помощью хиральной HPLC элюировался раньше на колонке CHIRALPAK® IC, 21 х 250 мм ID, 5 мк, элюирование: 40% MeOH:ACN:FA/60% СО2, скорость потока 45.0 мл/мин, 100 бар (1 кПа) и 40°C. MS(ESI) m/z: 600.3 (M+H)+. 1H NMR: (400 MHz, ACN-d3) d 8.66 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.83-7.77 (m, 2H), 7.73-7.66 (m, 2H), 7.65-7.61 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.99 (d, J=4.2 Hz, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.66-5.61 (m, 1H), 4.12 (s, 3H), 2.52 (br. s., 1H), 2.25-2.19 (m, 1H), 2.07-2.01 (m, 1H), 1.54 (dd, J=13.4, 5.5 Hz, 1H), 1.31 (d, J=7.9 Hz, 1H), 1.19-1.14 (m, 1H), 1.05 (d, J=6.8 Hz, 3H). Аналитическая HPLC (Метод A) RT = 5.31 мин, чистота > 95%.
Пример 21. Получение 1-(4-хлор-2-{1-[(9R,13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил } фенил)-1 Н-
1,2,3-триазол-4-карбоновой кислоты трифторацетата
- 52 031590
А. Получение этил
- [4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил]- 1H-1,2,3-триазол-4-карбок- силата
К охлаждённому (0°C) прозрачному жёлтому раствору 4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)анилина (0.400 г, 1.70 ммоль), полученного, как описано в примере 4В, в CH3CN (24.2 мл), добавляли изоамилнитрит (0.34 мл, 2.55 ммоль), а затем по каплям добавляли азидотриметилсилан (0.34 мл, 2.55 ммоль). Наблюдали выделение газа. Через 10 мин холодную баню отставляли и реакционную смесь оставляли нагреваться до rt и перемешивали при rt в течение 1 ч. Образовалась жёлтая суспензия. Затем добавляли этил пропиолат (0.500 г, 5.09 ммоль) и Cu2O (0.024 г, 0.17 ммоль). Через 1 ч к непрозрачной реакционной смеси зеленоватого цвета добавляли DCM и промывали насыщенным водным раствором NH4Cl, рассолом, сушили MgSO4, фильтровали и упаривали, получая жёлтое масло. Очистка нормальнофазовой хроматографией дала этил-1-[4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил]-Ш-1,2,3-триазол-4карбоксилат (0.507 г, выход 83%) в виде твёрдого вещества жёлтого цвета. MS(ESI) m/z: 360.0 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.65 (d, J=1.1 Hz, 1H), 8.19 (s, 1H), 7.75 (d, J=2.4 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.50 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.56 (d, J=1.1 Hz, 1H), 4.44 (q, J=7.3 Hz, 2H), 3.96 (s, 3H), 1.42 (t, J=1.2 Hz, 3H).
21B. Получение этил 1-[4-хлор-2-(6-гидроксипиримидин-4-ил)фенил]-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоксилата
К суспензии этил 1-[4-хлор-2-(6-метоксипиримидин-4-ил)фенил]-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоксилата (0.200 г, 0.56 ммоль) в CH3CN (3 мл) прибавляли TMS-I (0.38 мл, 2.78 ммоль). Образовавшийся прозрачный жёлтый раствор нагревали при 50°C в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до rt, а затем выливали в смесь 10% водного раствора тиосульфата натрия и насыщенного водного раствора NaHCO3. Экстрагировали с помощью DCM (3х). Органические вытяжки объединяли и упаривали. Очистка нормально-фазовой хроматографией дала этил 1-[4-хлор-2-(6-гидроксипиримидин-4-ил)фенил]-Ш-1,2,3триазол-4-карбоксилат (0.098 г, выход 51%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 345.9 (М+Н)+. 1H NMR (400 MHz, CDO3) δ 8.30 (s, 1H), 7.97 (d, J=1.1 Hz, 1H), 7.73 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.62 (dd, J=8.5, 2.3 Hz, 1H), 7.49 (d, J=8.4 Hz, 1H), 6.46 (d, J=0.9 Hz, 1H), 4.44 (q, J=7.3 Hz, 2H), 1.42 (t, J=7.2 Hz, 3H).
21C. Получение этил 1-(4-хлор-2-{1-[(9R,13S)-3,9-диметил-8-охо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил } фенил)- 1H-
1,2,3-триазол-4-карбоксилата трифторацетата
Во флакон на 1 драхму (~3,72 мл), содержащий белую суспензию этил 1-[4-хлор-2-(6-гидроксипиримидин-4-ил)фенил]-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоксилата (0.035 г, 0.10 ммоль) и HATU (0.050 г, 0.13 ммоль) в CH3CN (1.0 мл), прибавляли DBU (0.023 мл, 0.15 ммоль). Образовавшийся прозрачный жёлтый раствор перемешивали при rt в течение 20 мин. Затем добавляли пурпурный раствор (9R,13S)-13-амино3,9-диметил-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-8-она (0.030 г, 0.10 ммоль), полученного, как описано в примере 13, в DMF (1.0 мл). Реакционную смесь перемешивали при
- 53 031590 rt. Через 3 ч реакцию прекращали, очищали непосредственно обращённо-фазовой хроматографией и после упаривания и лиофилизации получали этил-1-(4-хлор-2-{1-[(9^13Б)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]окта-дека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-
4-ил}фенил)-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоксилат, трифторацетат (0.0292 г, выход 39%) в виде почти белого твёрдого вещества. MS(ESI) m/z: 628.4 (М+Н)+. 1H NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.81 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.70 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J=2.5 Hz, 1H), 7.74 (dd, J=8.5, 2.5 Hz, 1H), 7.70-7.65 (m, 2H), 7.52 (dd, J=5.0, 1.7 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.39 (s, 1H), 5.99-5.93 (m, 1H), 4.40 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.05 (s, 3H), 2.74-2.66 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.11-1.93 (m, 2H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.50-1.41 (m, 1H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.00 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.73-0.61 (m, 1H). Аналитическая HPLC (Метод A) RT = 4.90 мин, чистота = 98.8%.
21D. Получение 1 -(4-хлор-2-{ 1-[(9R, 13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло [12.3.1.02,6]октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил} фенил)- 1H-
1,2,3-триазол-4-карбоновой кислоты трифторацетата
Прозрачный бесцветный раствор этил 1-(4-хлор-2-{1-[(9^13Б)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15тетраазатрицикло[12.3.1.02,6] октадека-1(18),2(6),4,14,16-пентаен-13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4ил}фенил)-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоксилата трифторацетата (0.020 г, 0.027 ммоль) в МеОН (0.54 мл) и 1.0 М NaOH (0.14 мл, 0.14 ммоль) перемешивали при rt. Через 2 ч реакцию прекращали, нейтрализовали с помощью 1.0 М НС1, а затем реакционную смесь упаривали, получая твёрдое вещество белого цвета. Очистка обращённо-фазовой хроматографией, после упаривания и лиофилизации, дала 1-(4-хлор-2-{1[(9R, 13S)-3,9-диметил-8-оксо-3,4,7,15-тетраазатрицикло[12.3.1.02,6]октадека- 1(18),2(6),4,14,16-пентаен13-ил]-6-оксо-1,6-дигидропиримидин-4-ил} фенил)-Ш-1,2,3-триазол-4-карбоновую кислоту, трифторацетат (0.0126 г, выход 64%) в виде твёрдого вещества белого цвета. MS(ESI) m/z: 600.3 (М+Н)+. 1Н NMR (500 MHz, CD3OD) δ 8.78 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.71 (d, J=5.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J=2.2 Hz, 1H), 7.76-7.73 (m, 1H), 7.70-7.66 (m, 2H), 7.50 (dd, J=5.1, 1.5 Hz, 1H), 7.49 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 6.00-5.94 (m, 1H), 4.05 (s, 3H), 2.74-2.66 (m, 1H), 2.32-2.23 (m, 1H), 2.11-1.93 (m, 2H), 1.64-1.54 (m, 1H), 1.51-1.40 (m, 1H), 1.00 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.73-0.61 (m, 1H). Аналитическая HPLC (Метод А) RT = 3.37 мин, чистота = 100%.

Claims (11)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль, где кольцо А независимо выбрано из кольцо В независимо выбрано из
    R1 R2 R3 независимо выбран из Н и C1-4 алкила; независимо выбран из F, Cl, CF3, CHF2 и СООН;
    независимо выбран из Н, CHF2, CD3, CH3 и
    R4 независимо выбран из Н и F и
    R5 независимо выбран из Н, F, Cl, CH3 и OCH3.
  2. 2. Соединение по п.1, где R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2.
  3. 3. Соединение по любому из пп.1, 2, имеющее формулу (II)
    - 54 031590 или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль, где
    R1 обозначает C1-4 алкил;
    R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2;
    R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
    R4 обозначает Н;
    R5 независимо выбран из F и Cl.
    или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль, гд 1 е
    R1 обозначает C1-4 алкил;
    R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2;
    R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3;
    R4 обозначает Н и
    R5 независимо выбран из F и Cl.
  4. 5. Соединение по любому из пп.1-4, имеющее формулу (IV) или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль, гд 2 е
    R2 независимо выбран из F, Cl, CF3 и CHF2 и
    R3 независимо выбран из CHF2, CD3 и CH3.
  5. 6. Соединение по любому из пп.1-5, выбранное из группы, состоящей из
    Cl CI ci CI или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль.
  6. 7. Соединение, имеющее структуру
    CI или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль.
  7. 8. Соединение, имеющее структуру
    CI или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль.
    или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль. 10. Соединение, имеющее структуру или его стереомер, таутомер, фармацевтически приемлемая соль.
  8. 11. Фармацевтическая композиция для ингибирования фактора XIa, содержащая одно или более соединений по любому из пп.1-10 и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель.
  9. 12. Способ лечения и/или профилактики тромбоэмболического осложнения, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества соединения по любому из пп.1-10 или его стереомера, таутомера или фармацевтически приемлемой соли, при этом тромбоэмболи- 56 031590 ческое осложнение выбрано из артериальных сердечно-сосудистых тромбоэмболических осложнений, венозных сердечно-сосудистых тромбоэмболических осложнений и сердечно-сосудистых и тромбоэмболических осложнений в камерах сердца или в периферической части системы кровообращения.
  10. 13. Способ по п.12, где тромбоэмболическое осложнение выбрано из нестабильной стенокардии, острого коронарного синдрома, мерцательной аритмии, инфаркта миокарда, преходящей ишемической атаки, инсульта, атеросклероза, заболевания периферических артерий, венозного тромбоза, глубокого венозного тромбоза, тромбофлебита, артериальной эмболии, коронарного артериального тромбоза, церебрального артериального тромбоза, церебральной эмболии, эмболии почечных артерий, лёгочной эмболии и тромбоза, возникающего от медицинских имплантов, приспособлений или процедур, при которых кровь появляется на искусственной поверхности, что ускоряет возникновение тромбоза.
  11. 14. Применение соединения или композиции по любому из пп.1-11 или стереомера, таутомера или фармацевтически приемлемой соли этого соединения для лечения тромбоэмболического осложнения.
EA201790595A 2014-10-01 2015-07-29 Пиримидиноны в качестве ингибиторов фактора xia EA031590B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462058316P 2014-10-01 2014-10-01
PCT/US2015/042576 WO2016053455A1 (en) 2014-10-01 2015-07-29 Pyrimidinones as factor xia inhibitors

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201790595A1 EA201790595A1 (ru) 2017-07-31
EA031590B1 true EA031590B1 (ru) 2019-01-31

Family

ID=53784023

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201790595A EA031590B1 (ru) 2014-10-01 2015-07-29 Пиримидиноны в качестве ингибиторов фактора xia

Country Status (34)

Country Link
EP (4) EP4286372A3 (ru)
JP (4) JP6462865B2 (ru)
KR (2) KR102269999B1 (ru)
CN (3) CN106795161B (ru)
AR (1) AR101367A1 (ru)
AU (3) AU2015324530B2 (ru)
CA (1) CA2963395C (ru)
CL (1) CL2017000712A1 (ru)
CO (1) CO2017003833A2 (ru)
CY (2) CY1119678T1 (ru)
DK (2) DK3293186T3 (ru)
EA (1) EA031590B1 (ru)
ES (3) ES2836270T3 (ru)
HR (2) HRP20171950T1 (ru)
HU (2) HUE052812T2 (ru)
IL (2) IL251434B (ru)
LT (2) LT3293186T (ru)
MA (1) MA40123A1 (ru)
MX (2) MX2017003695A (ru)
MY (1) MY183987A (ru)
NO (1) NO2721243T3 (ru)
NZ (2) NZ766570A (ru)
PE (2) PE20170939A1 (ru)
PH (2) PH12017500580B1 (ru)
PL (1) PL3089979T3 (ru)
PT (2) PT3293186T (ru)
RS (2) RS61183B1 (ru)
SG (2) SG10201911652TA (ru)
SI (2) SI3089979T1 (ru)
TN (2) TN2018000229A1 (ru)
TW (2) TWI769442B (ru)
UY (1) UY36244A (ru)
WO (1) WO2016053455A1 (ru)
ZA (1) ZA201702478B (ru)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201116559D0 (en) 2011-09-26 2011-11-09 Univ Leuven Kath Novel viral replication inhibitors
NO2760821T3 (ru) 2014-01-31 2018-03-10
US9777001B2 (en) * 2014-01-31 2017-10-03 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with aromatic P2′ groups as factor xia inhibitors
EP3189047B1 (en) 2014-09-04 2018-12-26 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles that are fxia inhibitors
AU2015327345B9 (en) 2014-10-01 2020-06-18 Merck Patent Gmbh Boronic acid derivatives
NO2721243T3 (ru) * 2014-10-01 2018-10-20
US9453018B2 (en) 2014-10-01 2016-09-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
JOP20160086B1 (ar) 2015-05-08 2021-08-17 2 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research And Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
WO2016205482A1 (en) 2015-06-19 2016-12-22 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles as factor xia inhibitors
ES2871111T3 (es) 2015-07-29 2021-10-28 Bristol Myers Squibb Co Inhibidores macrocíclicos del factor XIa que contienen un grupo P2' no aromático
EP3328851B1 (en) 2015-07-29 2020-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Factor xia macrocyclic inhibitors bearing alkyl or cycloalkyl p2' moieties
JO3633B1 (ar) 2015-09-16 2020-08-27 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research & Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JOP20160198B1 (ar) 2015-09-16 2022-03-14 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
CN109195973A (zh) 2016-03-02 2019-01-11 百时美施贵宝公司 具有因子xia抑制活性的二酰胺大环类化合物
BR112018068676A2 (pt) 2016-03-31 2019-01-15 Janssen Pharmaceuticals Inc derivados de indol substituídos como inibidores da replicação viral do dengue
MX2018011788A (es) 2016-03-31 2019-05-20 Janssen Pharmaceuticals Inc Derivados de indolina sustituidos como inhibidores de la replicacion virica de dengue.
MA44502A (fr) 2016-04-01 2019-02-06 Janssen Pharmaceuticals Inc Dérivés d'indole substitués utilisés en tant qu'inhibiteurs de réplication du virus de la dengue
JOP20170069B1 (ar) 2016-04-01 2021-08-17 1 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
WO2018133793A1 (zh) * 2017-01-18 2018-07-26 广东东阳光药业有限公司 凝血因子XIa抑制剂及其用途
JOP20180025B1 (ar) 2017-03-31 2021-08-17 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JOP20180026A1 (ar) 2017-03-31 2019-01-30 Univ Leuven Kath مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JP7179773B2 (ja) 2017-05-22 2022-11-29 ヤンセン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド デングウイルス複製阻害剤としての置換インドリン誘導体
MA48943A (fr) 2017-05-22 2021-04-28 Janssen Pharmaceuticals Inc Dérivés d'indoline substitués utilisés en tant qu'inhibiteurs de réplication du virus de la dengue
PE20212367A1 (es) * 2019-04-11 2021-12-21 Bristol Myers Squibb Co Rendimiento mejorado de formulaciones solidas y solubilizadas amorfas para lograr concentraciones de plasma terapeuticas
SG11202111132WA (en) * 2019-04-11 2021-11-29 Bristol Myers Squibb Co Novel synthetic options towards the manufacture of (6r,10s)-10- {4-[5-chloro-2-(4-chloro-1h-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl]-6-oxo-1(6h)- pyrimidinyl}- 1-(difluoromethyl)-6-methyl-1,4,7,8,9,10-hexahydro-11,15 -(metheno)pyrazolo [4,3-b] [1,7] diazacyclotetradecin-5(6h)-one
AU2020257911B2 (en) * 2019-04-16 2023-01-05 China Resources Biopharmaceutical Company Limited Macrocyclic derivatives acting as XIa factor inhibitor
US20220281868A1 (en) * 2019-07-23 2022-09-08 Medshine Discovery Inc. Macrocyclic derivatives as factor xia inhibitors
JP2023521411A (ja) * 2020-04-10 2023-05-24 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー （９ｒ，１３ｓ）－１３－｛４－［５－クロロ－２－（４－クロロ－１ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イル）フェニル］－６－オキソ－１，６－ジヒドロピリミジン－１－イル｝－３－（ジフルオロメチル）－９－メチル－３，４，７，１５－テトラアザトリシクロ［１２．３．１．０２，６］オクタデカ－１（１８），２（６），４，１４，１６－ペンタエン－８－オンの結晶体
TW202229280A (zh) * 2020-10-12 2022-08-01 美商必治妥美雅史谷比公司 （６ｒ，１０ｓ）－１０－｛４－［５－氯－２－（４－氯－１ｈ－１，２，３－***－１－基）苯基］－６－側氧基－１（６ｈ）－嘧啶基｝－１－（二氟甲基）－６－甲基－１，４，７，８，９，１０－六氫－１１，１５－（亞甲橋基）吡唑并［４，３－ｂ］［１，７］二氮雜環十四炔－５（６ｈ）－酮之製備方法
WO2022222960A1 (zh) * 2021-04-21 2022-10-27 上海美悦生物科技发展有限公司 FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013093484A1 (en) * 2011-12-21 2013-06-27 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Pyridinone and pyrimidinone derivatives as factor xia inhibitors
WO2014022767A1 (en) * 2012-08-03 2014-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Dihydropyridone p1 as factor xia inhibitors
WO2015116886A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with hetrocyclic p2' groups as factor xia inhibitors

Family Cites Families (15)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3065190D1 (en) 1979-11-05 1983-11-10 Beecham Group Plc Enzyme derivatives, and their preparation
PE121699A1 (es) 1997-02-18 1999-12-08 Boehringer Ingelheim Pharma Heterociclos biciclicos disustituidos como inhibidores de la trombina
ZA985247B (en) 1997-06-19 1999-12-17 Du Pont Merck Pharma Guanidine mimics as factor Xa inhibitors.
AU5413600A (en) 1999-06-14 2001-01-02 Eli Lilly And Company Compounds
DE19962924A1 (de) 1999-12-24 2001-07-05 Bayer Ag Substituierte Oxazolidinone und ihre Verwendung
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
MXPA04002526A (es) 2001-09-21 2004-05-31 Bristol Myers Squibb Co Compuestos que contienen lactama y sus derivados como inhibidores del factor xa.
US20040180855A1 (en) 2003-02-19 2004-09-16 Schumacher William A. Methods of treating thrombosis with reduced risk of increased bleeding times
WO2011100402A1 (en) * 2010-02-11 2011-08-18 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles as factor xia inhibitors
US9327839B2 (en) 2011-08-05 2016-05-03 General Atomics Method and apparatus for inhibiting formation of and/or removing ice from aircraft components
TW201319068A (zh) 2011-08-05 2013-05-16 必治妥美雅史谷比公司 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑
TW201311689A (zh) * 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
PL2882734T3 (pl) * 2012-08-03 2017-05-31 Bristol-Myers Squibb Company Dihydropirydon jako inhibitory czynnika XIA
NO2760821T3 (ru) * 2014-01-31 2018-03-10
NO2721243T3 (ru) * 2014-10-01 2018-10-20

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013093484A1 (en) * 2011-12-21 2013-06-27 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Pyridinone and pyrimidinone derivatives as factor xia inhibitors
WO2014022767A1 (en) * 2012-08-03 2014-02-06 Bristol-Myers Squibb Company Dihydropyridone p1 as factor xia inhibitors
WO2015116886A1 (en) * 2014-01-31 2015-08-06 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles with hetrocyclic p2' groups as factor xia inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
ES2655884T3 (es) 2018-02-22
HUE038061T2 (hu) 2018-09-28
MA40123A1 (fr) 2017-09-29
TN2018000229A1 (en) 2019-10-04
PE20170939A1 (es) 2017-07-13
SI3293186T1 (sl) 2021-01-29
PL3089979T3 (pl) 2018-02-28
ZA201702478B (en) 2019-06-26
AU2020200376B2 (en) 2021-07-08
EP4286372A3 (en) 2024-02-21
JP2023134734A (ja) 2023-09-27
UY36244A (es) 2016-01-29
SI3089979T1 (sl) 2017-12-29
IL251434A0 (en) 2017-05-29
ES2963267T3 (es) 2024-03-26
WO2016053455A1 (en) 2016-04-07
NZ766570A (en) 2024-01-26
KR102269999B1 (ko) 2021-06-25
EP3293186B1 (en) 2020-09-23
CN110734435B (zh) 2022-06-07
CA2963395A1 (en) 2016-04-07
TWI769442B (zh) 2022-07-01
MX2020010840A (es) 2020-11-06
HUE052812T2 (hu) 2021-05-28
KR20170057431A (ko) 2017-05-24
EP4286372A2 (en) 2023-12-06
PT3293186T (pt) 2020-12-09
HRP20201927T1 (hr) 2021-02-05
CN110734435A (zh) 2020-01-31
CO2017003833A2 (es) 2017-07-11
EP3828186A3 (en) 2021-07-28
EP3828186B1 (en) 2023-08-23
EA201790595A1 (ru) 2017-07-31
PT3089979T (pt) 2018-01-16
NZ731416A (en) 2024-01-26
RS61183B1 (sr) 2021-01-29
PH12020500195A1 (en) 2021-02-08
PH12017500580A1 (en) 2017-08-30
CN114957255A (zh) 2022-08-30
AR101367A1 (es) 2016-12-14
AU2015324530A1 (en) 2017-05-18
PE20210922A1 (es) 2021-05-19
SG11201702576QA (en) 2017-04-27
AU2020200376A1 (en) 2020-02-06
SG10201911652TA (en) 2020-02-27
JP2017530157A (ja) 2017-10-12
AU2021245098B2 (en) 2023-11-23
AU2015324530B2 (en) 2019-10-24
KR101921436B1 (ko) 2018-11-22
NO2721243T3 (ru) 2018-10-20
DK3089979T3 (en) 2018-01-15
TW202043228A (zh) 2020-12-01
LT3293186T (lt) 2020-12-28
MY183987A (en) 2021-03-17
CY1119678T1 (el) 2018-04-04
IL276470B (en) 2021-04-29
PH12017500580B1 (en) 2017-08-30
AU2021245098A1 (en) 2021-10-28
CN106795161A (zh) 2017-05-31
DK3293186T3 (da) 2020-12-14
KR20180126612A (ko) 2018-11-27
CA2963395C (en) 2023-03-14
HRP20171950T1 (hr) 2018-02-23
BR112017006702A2 (pt) 2017-12-26
LT3089979T (lt) 2017-12-27
JP2019069989A (ja) 2019-05-09
JP6937734B2 (ja) 2021-09-22
ES2836270T3 (es) 2021-06-24
IL276470A (en) 2020-09-30
EP3089979A1 (en) 2016-11-09
CY1123663T1 (el) 2022-03-24
TWI692478B (zh) 2020-05-01
JP6462865B2 (ja) 2019-01-30
EP3089979B1 (en) 2017-10-18
JP2021185182A (ja) 2021-12-09
JP7317905B2 (ja) 2023-07-31
MX2017003695A (es) 2017-05-30
CN106795161B (zh) 2019-10-15
TW201613923A (en) 2016-04-16
EP3293186A1 (en) 2018-03-14
CL2017000712A1 (es) 2017-11-03
TW202310844A (zh) 2023-03-16
RS56786B1 (sr) 2018-04-30
IL251434B (en) 2020-08-31
TN2017000112A1 (en) 2018-07-04
EP3828186A2 (en) 2021-06-02

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2021245098B2 (en) Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
CA2937739C (en) Macrocycles with heterocyclic p2&#39; groups as factor xia inhibitors
DK3099688T3 (en) MACROCYLIC FACTOR XIA INHIBITORS CONDENSED WITH HETEROCYCLES
JP6082463B2 (ja) 第ｘｉａ因子阻害剤としてのジヒドロピリドンｐ１
KR102086934B1 (ko) 알킬 또는 시클로알킬 P2&#39; 모이어티를 갖는 인자 XIa 마크로시클릭 억제제
KR20180033267A (ko) 비-방향족 P2&#39; 기를 갖는 인자 XIa 신규 마크로사이클
TWI834182B (zh) 作為因子xia抑制劑之嘧啶酮
BR112017006702B1 (pt) Pirimidinonas inibidoras de fator xia, composição farmacêutica e seu uso

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM