CN114957255A - 作为因子xia抑制剂的嘧啶酮 - Google Patents

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M·J·奥瓦特
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Abstract

本发明提供式(I)化合物：

Description

作为因子XIA抑制剂的嘧啶酮
本申请是申请日为2015年7月29日，申请号为201910882473.1，发明名称为“作为因子XIA抑制剂的嘧啶酮”的专利申请的分案申请。
技术领域
本发明大体涉及新颖的大环化合物及其类似物，其为因子XIa和/或血浆激肽释放酶(kallikrein)的抑制剂；含有它们的组合物；及使用它们的方法，例如用于治疗或预防血栓栓塞性病症，或用于治疗与糖尿病视网膜病变和糖尿病黄斑水肿相关的视网膜血管通透性。
背景技术
尽管可利用抗凝血剂(例如华法林(warfarin)
Figure BDA0003662031630000011
肝素、低分子量肝素(LMWH)和合成五糖)和抗血小板剂(例如阿斯匹林(aspirin)和氯吡格雷(clopidogrel)
Figure BDA0003662031630000012
)，但血栓栓塞性疾病仍然是发达国家的主要死因。口服抗凝血剂华法林抑制凝血因子VII、IX、X和凝血酶原的翻译后突变，且已证实对静脉和动脉血栓形成有效。然而，其应用有限，这是应为其治疗指数较窄，治疗效应开始缓慢，有多种膳食和药物相互作用，且需要进行监测和剂量调节。因此，发现和研发用于预防和治疗众多种血栓栓塞性病症的安全有效的口服抗凝血剂已变得愈加重要。
一种方式为通过靶向凝血因子XIa(FXIa)的抑制来抑制凝血酶生成。因子XIa为血液凝固的调控中所涉及的血浆丝氨酸蛋白酶，其在体内通过使组织因子(TF)与因子VII(FVII)结合生成因子VIIa(FVIIa)来引发。所得TF:FVIIa复合物活化因子IX(FIX)和因子X(FX)，其导致产生因子Xa(FXa)。所生成FXa催化凝血酶原转变为少量凝血酶，之后此途径被组织因子途径抑制剂(TFPI)关闭。然后凝血过程通过催化量的凝血酶经由因子V、VIII和XI的反馈活化进一步扩散。(Gailani,D.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,27:2507-2513(2007)。)突然获得的凝血酶将纤维蛋白原转化为聚合形成血凝块结构框架的纤维蛋白，且活化凝血的关键细胞组分血小板(Hoffman,M.,Blood Reviews,17:S1-S5(2003))。因此，因子XIa在此扩增环的扩散中发挥关键作用，且因此为抗血栓疗法的有吸引力的靶标。
血浆前激肽释放酶为胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的酶原且以35μg/mL至50μg/mL存于血浆中。基因结构类似于因子XI。总之，血浆激肽释放酶的氨基酸序列与因子XI具有58％同源性。认为血浆激肽释放酶在多种炎性病症中发挥作用。血浆激肽释放酶的主要抑制剂为丝氨酸蛋白酶抑制蛋白(serpin)C1酯酶抑制剂。C1酯酶抑制剂中存在遗传缺陷的患者患有遗传性血管性水肿(HAE)，其导致面部、手部、喉部、胃肠道和生殖器的间歇性肿胀。在急性发作期间形成的水疱含有高水平的血浆激肽释放酶，其裂解高分子量激肽原，释放增强血管通透性的缓激肽。已显示用大蛋白质血浆激肽释放酶抑制剂治疗可通过防止释放增强血管通透性的缓激肽来有效治疗HAE(Lehmann,A.,"Ecallantide(DX-88),a plasma kallikrein inhibitorfor the treatment of hereditary angioedema and the prevention of blood loss inon-pump cardiothoracic surgery",Expert Opin.Biol.Ther.,8:187-199(2008))。
血浆激肽释放酶-激肽***在晚期糖尿病黄斑水肿患者中异常地大量存在。最近已发表，血浆激肽释放酶在糖尿病大鼠中促进视网膜血管功能障碍(Clermont,A.等人，"Plasma kallikrein mediates retinal vascular dysfunction and induces retinalthickening in diabetic rats",Diabetes,60:1590-1598(2011))。此外，施用血浆激肽释放酶抑制剂ASP-440改善糖尿病大鼠的视网膜血管通透性和视网膜血流异常两者。因此，血浆激肽释放酶抑制剂应可用作降低与糖尿病视网膜病变和糖尿病黄斑水肿相关的视网膜血管通透性的治疗。糖尿病的皆与血浆激肽释放酶相关的其他并发症(诸如脑出血、肾病变、心肌病和神经病变)也可视为血浆激肽释放酶抑制剂的靶标。
迄今为止，尚未批准小分子合成血浆激肽释放酶抑制剂用于医学应用。大蛋白质血浆激肽释放酶抑制剂存在过敏性反应的风险，如已针对艾卡拉肽(Ecallantide)所报道。因此，仍需要抑制血浆激肽释放酶的化合物，其不诱导过敏反应且可口服。此外，已知领域中该分子的特征为高极性和可电离的胍或脒官能团。众所周知，这些官能团可限制肠通透性且因此限制口服利用度。
发明内容
本发明提供新颖的大环化合物、其类似物，包括其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其可用作丝氨酸蛋白酶、尤其因子XIa和/或血浆激肽释放酶的选择性抑制剂。
本发明还提供用于制备本发明化合物的方法和中间体。
本发明还提供药物组合物，其包含药学上可接受的载体和本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物中的至少一种。
本发明化合物可用于治疗和/或预防血栓栓塞性病症。
本发明化合物可用于治疗与糖尿病视网膜病变和糖尿病黄斑水肿相关的视网膜血管通透性。
本发明化合物可用于疗法中。
本发明化合物可用于制造用于治疗和/或预防血栓栓塞性病症的药物。
本发明化合物可单独、与本发明的其他化合物组合或与一或多种、优选一至两种其他药剂组合使用。
下文公开内容将以展开形式阐述本发明的这些及其他特征。
本发明还涉及如下项：
1.一种式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，
Figure BDA0003662031630000031
其中：
环A独立地选自
Figure BDA0003662031630000032
环B独立地选自
Figure BDA0003662031630000033
R1独立地选自H和C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3、CHF2和COOH；
R3独立地选自H、CHF2、CD3、CH3和
Figure BDA0003662031630000041
R4独立地选自H和F；且
R5独立地选自H、F、Cl、CH3和OCH3。
2.项1的化合物，其中R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2。
3.项1至2中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(II)：
Figure BDA0003662031630000042
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
4.项1至3中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(III)：
Figure BDA0003662031630000043
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
5.项1至4中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(IV)：
Figure BDA0003662031630000051
其中：
R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2；且
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3。
6.项1至5中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物选自：
Figure BDA0003662031630000052
Figure BDA0003662031630000061
7.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure BDA0003662031630000071
8.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure BDA0003662031630000072
9.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure BDA0003662031630000073
10.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure BDA0003662031630000074
11.一种药物组合物，其包含一或多种项1至10中任一项的化合物和药学上可接受的载体或稀释剂。
12.一种治疗和/或预防血栓栓塞性病症的方法，其包括：向有此需要的患者施用治疗有效量的项1至10中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的，其中所述血栓栓塞性病症选自动脉心血管血栓栓塞性病症、静脉心血管血栓栓塞性病症和心脏腔室或外周循环中的血栓栓塞性病症。
13.项12的方法，其中所述血栓栓塞性病症选自不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中将血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。
14.项1至11中任一项的化合物或组合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐用作药剂的用途。
15.项1至11中任一项的化合物或组合物或其立体异构体、互变异构体或药学上可接受的盐的用途，其用于治疗血栓栓塞性病症。
具体实施方式
I.本发明的化合物
在一方面中，本发明尤其提供式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药：
Figure BDA0003662031630000081
其中：
环A独立地选自
Figure BDA0003662031630000082
环B独立地选自
Figure BDA0003662031630000091
R1独立地选自H和C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自H、CHF2、CD3、CH3和
Figure BDA0003662031630000092
R4独立地选自H和F；且
R5独立地选自H、F、Cl、CH3和OCH3。
在另一方面中，本发明提供式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环A独立地选自
Figure BDA0003662031630000093
环B独立地选自
Figure BDA0003662031630000094
R1独立地选自H和C1-4烷基；
R2独立地选自F、Cl、CF3、CHF2和COOH；
R3独立地选自H、CHF2、CD3和CH3；
R4独立地选自H和F；且
R5独立地选自H、F、Cl、CH3和OCH3。
在另一方面中，本发明提供式(II)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药：
Figure BDA0003662031630000095
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
在另一方面中，本发明提供式(II)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
在另一方面中，本发明提供式(III)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药：
Figure BDA0003662031630000101
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
在另一方面中，本发明提供式(III)化合物，或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
在另一方面中，本发明提供式(IV)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药：
Figure BDA0003662031630000111
其中：
R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2；且
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3。
在另一方面中，本发明提供式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，其中：
环A独立地选自
Figure BDA0003662031630000112
环B为
Figure BDA0003662031630000113
R1独立地选自H和C1-4烷基；
R2为COOH；
R3独立地选自H、CHF2、CD3和CH3；
R4独立地选自H和F；且
R5独立地选自H、F、Cl、CH3和OCH3。
在另一方面中，本发明提供化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物或前药，所述化合物选自：
Figure BDA0003662031630000121
Figure BDA0003662031630000131
在另一实施方案中，R1独立地选自：H和C1-4烷基。
在另一实施方案中，R1独立地选自：H和甲基、乙基和异丙基。
在另一方面中，本发明提供本申请所示例的任何化合物子集列表的化合物。
在另一实施方案中，本发明化合物具有<10μM的因子XIa或血浆激肽释放酶Ki值。
在另一实施方案中，本发明化合物具有<1μM的因子XIa或血浆激肽释放酶Ki值。
在另一实施方案中，本发明化合物具有<0.5μM的因子XIa或血浆激肽释放酶Ki值。
在另一实施方案中，本发明化合物具有<0.1μM的因子XIa或血浆激肽释放酶Ki值。
II.本发明的其他实施方案
在另一实施方案中，本发明提供包含至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物的组合物。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含药学上可接受的载体和至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含：药学上可接受的载体和治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供制备本发明化合物的方法。
在另一实施方案中，本发明提供用于制备本发明化合物的中间体。
在另一实施方案中，本发明提供进一步包含其他治疗剂的药物组合物。在优选实施方案中，本发明提供药物组合物，其中所述其他治疗剂为抗血小板剂或其组合。优选地，抗血小板剂为氯吡格雷和/或阿斯匹林或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供治疗和/或预防血栓栓塞性病症的方法，其包括向需要该治疗和/或预防的患者施用治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于疗法中。
在另一实施方案中，本发明提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，其用于疗法中以治疗和/或预防血栓栓塞性病症。
在另一实施方案中，本发明还提供本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物在制备用于治疗和/或预防血栓栓塞性病症的药物的用途。
在另一实施方案中，本发明提供治疗和/或预防血栓栓塞性病症的方法，其包括：向有此需要的患者施用治疗有效量的第一和第二治疗剂，其中所述第一治疗剂为本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物，且所述第二治疗剂为至少一种选自以下的药剂：因子Xa抑制剂(诸如阿哌沙班(apixaban)、利伐沙班(rivaroxaban)、贝曲沙班(betrixaban)、依杜沙班(edoxaban))、抗凝血剂、抗血小板剂、凝血酶抑制剂(诸如达比加群(dabigatran))、血栓溶解剂和纤维蛋白溶解剂。优选地，所述第二治疗剂为至少一种选自以下的药剂：华法林、未分级肝素、低分子量肝素、合成五糖、水蛭素、阿加曲班(argatroban)、阿斯匹林、布洛芬(ibuprofen)、萘普生(naproxen)、舒林酸(sulindac)、吲哚美辛(indomethacin)、甲芬那酸酯(mefenamate)、屈噁昔康(droxicam)、双氯芬酸(diclofenac)、苯磺唑酮(sulfinpyrazone)、吡罗昔康(piroxicam)、噻氯匹定(ticlopidine)、氯吡格雷、替罗非班(tirofiban)、埃替非巴肽(eptifibatide)、阿昔单抗(abciximab)、美拉加群(melagatran)、去硫酸水蛭素、组织血纤维蛋白溶酶原活化剂、经修饰组织血纤维蛋白溶酶原活化剂、阿尼普酶(anistreplase)、尿激酶(urokinase)和链球菌激酶(streptokinase)。优选地，所述第二治疗剂为至少一种抗血小板剂。优选地，所述抗血小板剂为氯吡格雷和/或阿斯匹林或其组合。
血栓栓塞性病症包括动脉心血管血栓栓塞性病症、静脉心血管血栓栓塞性病症、动脉脑血管血栓栓塞性病症和静脉脑血管血栓栓塞性病症。血栓栓塞性病症的实例包括但不限于不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、心房颤动、首次心肌梗塞、复发性心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供治疗和/或预防炎性病症的方法，其包括：向需要该治疗和/或预防的患者施用治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。炎性病症的实例包括但不限于败血症、急性呼吸窘迫综合征和全身性炎性反应综合征。
在另一实施方案中，本发明提供预防其中涉及血浆激肽释放酶活性的疾病或病况的方法，其包括向需要该治疗和/或预防的患者施用治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物。
其中涉及血浆激肽释放酶活性的疾病或病况包括但不限于视觉敏锐度受损、糖尿病视网膜病变、糖尿病黄斑水肿、遗传性血管性水肿、糖尿病、胰腺炎、肾病变、心肌病、神经病变、炎性肠病、关节炎、发炎、败血性休克、低血压、癌症、成人呼吸窘迫综合征、弥散性血管内凝血和心肺旁路手术。
在另一实施方案中，本发明提供同时、分开或依序用于疗法中的本发明化合物及其他治疗剂的组合制剂。
在另一实施方案中，本发明提供同时、分开或依序用于治疗和/或预防血栓栓塞性病症的本发明化合物及其他治疗剂的组合制剂。
在不背离本发明的精神或基本属性的条件下本发明可以其他特定形式体现。本发明涵盖本文所述的本发明优选方面的所有组合。应理解，本发明的任一和所有实施方案可结合任何其他实施方案来描述其他实施方案。还应理解，实施方案的每一个别要素为自身的独立实施方案。此外，实施方案的任一要素意欲与任一实施方案的任一和所有其他要素组合以描述另一实施方案。
III.化学
在说明书和随附权利要求通篇中，给定化学式或名称应涵盖所有立体异构体和光学异构体及其外消旋体(若存在此种异构体)。除非另外指明，否则所有手性(对映异构体和非对映异构体)和外消旋形式均在本发明的范围内。这些化合物中还可存在C＝C双键、C＝N双键、环***等多种几何异构体，且所有此类稳定异构体均涵盖于本发明内。描述本发明化合物的顺式和反式(或E-和Z-)几何异构体且可分离成异构体的混合物或分离的异构型式。本发明化合物可以光学活性或外消旋形式分离。光学活性形式可通过拆分外消旋形式或通过自光学活性起始材料合成来制备。用于制备本发明化合物的所有方法及其中制得的中间体均视为本发明的一部分。在制备对映异构或非对映异构产物时，其可通过常规方法(例如通过色谱或分段结晶)来分离。取决于方法条件，本发明的最终产物以游离(中性)或盐形式获得。这些最终产物的游离形式和盐两者均在本发明的范围内。如果需要，则可将化合物的一种形式转化为另一种形式。可将游离碱或酸转化为盐；可将盐转化为游离化合物或另一种盐；可将本发明的异构化合物混合物分离为单一异构体。本发明化合物、其游离形式及盐可以多种互变异构型式存在，其中氢原子转置至分子的其他部分上且由此重排分子中原子之间的化学键。应理解，在所有互变异构型式可存在的范围内，其均包括于本发明内。
术语“立体异构体”是指其原子在空间中的排列不同的相同组成的异构体。对映异构体和非对映异构体为立体异构体的实例。术语“对映异构体”是指一对互为镜像且不可重叠的分子物质中的一种。术语“非对映异构体”是指并非镜像的立体异构体。术语“外消旋体”或“外消旋混合物”是指由等摩尔量的两种对映异构体物质组成的组合物，其中所述组合物无光学活性。
符号"R"和"S"表示手性碳原子周围的取代基的构型。异构体描述语"R"和"S"如本文所述用于指示原子相对于核心分子的构型，且意欲如文献中所定义来使用(IUPACRecommendations 1996,Pure and Applied Chemistry,68:2193-2222(1996))。
术语“手性”是指分子的使其不可能与其镜像重叠的结构特征。术语“纯手性(homochiral)”是指对映异构纯度的状态。术语“光学活性”是指纯手性分子或手性分子的非外消旋混合物旋转偏振光的平面的程度。
本文所用的术语“烷基”或“亚烷基”意欲包括具有指定碳原子数的具支链和直链饱和脂肪族烃基。举例而言，“C1至C10烷基”或“C1-10烷基”(或亚烷基)意欲包括C1、C2、C3、C4、C5、C6、C7、C8、C9和C10烷基。另外，举例而言，“C1至C6烷基”或“C1-C6烷基”表示具有1至6个碳原子的烷基。烷基可为未经取代或经取代的，其中至少一个氢由另一化学基团替换。烷基的实例包括但不限于甲基(Me)、乙基(Et)、丙基(例如，正丙基和异丙基)、丁基(例如，正丁基、异丁基、叔丁基)和戊基(例如，正戊基、异戊基、新戊基)。在使用“C0烷基”或“C0亚烷基”时，其意欲表示直接键。
“炔基”或“亚炔基”意欲包括具有直链或支链构型且具有一或多个、优选一至三个可在沿链任一稳定点存在的碳-碳三键的烃链。举例而言，“C2至C6炔基”或“C2-6炔基”(或亚炔基)意欲包括C2、C3、C4、C5和C6炔基；例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基和己炔基。
术语“烷氧基”或“烷基氧基”是指-O-烷基。“C1至C6烷氧基”或“C1-6烷氧基”(或烷基氧基)意欲包括C1、C2、C3、C4、C5和C6烷氧基。实例性烷氧基包括但不限于甲氧基、乙氧基、丙氧基(例如，正丙氧基和异丙氧基)和叔丁氧基。类似地，“烷基硫基”或“硫代烷氧基”表示具有指定数目的碳原子经由硫桥附接的如上文所定义的烷基，例如甲基-S-和乙基-S-。
“卤基”或“卤素”包括氟、氯、溴和碘。“卤代烷基”意欲包括具有指定碳原子数且经一或多个卤素取代的支链和直链饱和脂肪族烃基两者。卤代烷基的实例包括但不限于氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、三氯甲基、五氟乙基、五氯乙基、2,2,2-三氟乙基、七氟丙基和七氯丙基。卤代烷基的实例还包括“氟烷基”，其意欲包括具有指定碳原子数且经一或多个氟原子取代的支链和直链饱和脂肪族烃基两者。
“卤代烷氧基”或“卤代烷基氧基”表示具有指定数目的碳原子经由氧桥附接的如上文所定义的卤代烷基。举例而言，“C1至C6卤代烷氧基”或“C1-6卤代烷氧基”意欲包括C1、C2、C3、C4、C5和C6卤代烷氧基。卤代烷氧基的实例包括但不限于三氟甲氧基、2,2,2-三氟乙氧基和五氟乙氧基。类似地，“卤代烷基硫基”或“硫代卤代烷氧基”表示具有指定数目的碳原子经由硫桥附接的如上文所定义的卤代烷基；例如三氟甲基-S-和五氟乙基-S-。
本文使用的术语“氨基”是指-NH2。
本文使用的术语“经取代氨基”是指具有词尾“氨基”的下文所定义术语，例如“芳基氨基”、“烷基氨基”、“芳基氨基”等。
本文使用的术语“烷氧基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的烷氧基。
本文使用的术语“烷氧基羰基氨基”是指-NHR，其中R为烷氧基羰基。
本文使用的术语“烷基氨基”是指-NHR，其中R为烷基。
本文使用的术语“烷基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的烷基。
本文使用的术语“烷基羰基氨基”是指-NHR，其中R为烷基羰基。
本文使用的术语“氨基磺酰基”是指-SO2NH2。
本文使用的术语“芳基烷基”是指经一个、两个或三个芳基取代的烷基。
本文使用的术语“芳基氨基”是指-NHR，其中R为芳基。
本文使用的术语“芳基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的芳基。
本文使用的术语“芳基羰基氨基”是指-NHR，其中R为芳基羰基。
本文使用的术语“羰基”是指-C(O)-。
本文使用的术语“氰基”是指-CN。
本文使用的术语“环烷基氨基”是指-NHR，其中R为环烷基。
本文使用的术语“环烷基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的环烷基。
本文使用的术语“环烷基羰基氨基”是指-NHR，其中R为环烷基羰基。
本文使用的术语“环烷基氧基”是指经由氧原子附接至母体分子部分的环烷基。
本文使用的术语“二烷基氨基”是指NR2，其中每一R为烷基。所述两个烷基相同或不同。
本文使用的术语“卤代烷氧基”是指经由氧原子附接至母体分子部分的卤代烷基。
本文使用的术语“卤代烷基”是指经一个、两个、三个或四个卤素原子取代的烷基。
本文使用的术语“卤代烷基氨基”是指-NHR，其中R为卤代烷基。
术语“羰基”是指C(＝O)。
术语“羧基”是指C(＝O)OH。
本文使用的术语“卤代烷基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的卤代烷基。
本文使用的术语“卤代烷基羰基氨基”是指-NHR，其中R为卤代烷基羰基。
术语“烷基羰基”是指键合至羰基的烷基或经取代烷基。
本文使用的术语“烷氧基羰基”是指经由羰基附接至母体分子部分的烷氧基。
术语“羟基”("hydroxy"或"hydroxyl")是指OH。
术语“环烷基”是指环状烷基，包括单环、双环或多环***。“C3至C7环烷基”或“C3-7环烷基”意欲包括C3、C4、C5、C6和C7环烷基。环烷基的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环己基和降冰片基。支链环烷基(例如1-甲基环丙基和2-甲基环丙基)包括于“环烷基”的定义中。
本文使用的“碳环”或“碳环残基”欲意指任何稳定的3员、4员、5员、6员、7员或8员单环或双环烃环，或7员、8员、9员、10员、11员、12员或13员双环或三环烃环，其中任一者可为饱和、部分不饱和、不饱和或芳族。此类碳环的实例包括但不限于环丙基、环丁基、环丁烯基、环戊基、环戊烯基、环己基、环庚烯基、环庚基、环庚烯基、金刚烷基、环辛基、环辛烯基、环辛二烯基、[3.3.0]双环辛烷、[4.3.0]双环壬烷、[4.4.0]双环癸烷(十氢萘)、[2.2.2]双环辛烷、芴基、苯基、萘基、茚满基、金刚烷基、蒽基和四氢萘基(四氢萘)。如上文所示，桥接环也包括于碳环的定义中(例如，[2.2.2]双环辛烷)。除非另外指定，否则优选碳环为环丙基、环丁基、环戊基、环己基、苯基和茚满基。在使用术语“碳环”时，其意欲包括“芳基”。在一或多个碳原子连接两个非相邻碳原子时，产生桥接环。优选桥为一个或两个碳原子。应注意，桥总是将单环转化为三环。在桥接环时，针对该环列举的取代基也可存于桥上。
本文使用的术语“双环碳环”或“双环碳环基团”欲意指含有两个稠合环且由碳原子组成的稳定的9员或10员碳环***。在两个稠合环中，一个环为稠合至第二环的苯并环；且第二环为饱和、部分不饱和或不饱和的5员或6员碳环。双环碳环基团可在任一碳原子处附接至其侧基，从而得到稳定结构。如果所得化合物稳定，则本文所述双环碳环基团可在任一碳上经取代。双环碳环基团的实例为，但不限于，萘基、1,2-二氢萘基、1,2,3,4-四氢萘基和茚满基。
“芳基”是指单环或多环芳族烃，包括(例如)苯基、萘基和菲基。芳基部分为公知的且述于(例如)Lewis,R.J.编辑，Hawley's Condensed Chemical Dictionary,第13版,JohnWiley&Sons公司，New York(1997)中。“C6或C10芳基”或“C6-10芳基”是指苯基和萘基。除非另外指定，否则“芳基”、“C6或C10芳基”或“C6-10芳基”或“芳族残基”可未经取代或经1至5个以下基团、优选地1至3个以下基团取代：OH、OCH3、Cl、F、Br、I、CN、NO2、NH2、N(CH3)H、N(CH3)2、CF3、OCF3、C(＝O)CH3、SCH3、S(＝O)CH3、S(＝O)2CH3、CH3、CH2CH3、CO2H和CO2CH3。
本文使用的术语“苄基”是指一个氢原子由苯基替换的甲基，其中所述苯基可任选经1至5个以下基团、优选1至3个以下基团取代：OH、OCH3、Cl、F、Br、I、CN、NO2、NH2、N(CH3)H、N(CH3)2、CF3、OCF3、C(＝O)CH3、SCH3、S(＝O)CH3、S(＝O)2CH3、CH3、CH2CH3、CO2H和CO2CH3。
本文使用的术语“杂环”或“杂环状环”欲意指稳定的饱和、部分不饱和或完全不饱和3员、4员、5员、6员或7员单环或双环或7员、8员、9员、10员、11员、12员、13员或14员多环杂环，且其含有碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子；且包括任何其中任一上文所定义的杂环状环稠合至苯环的多环基团。氮和硫杂原子可任选经氧化(即，N→O和S(O)p，其中p为0、1或2)。氮原子可经取代或未经取代(即，如果定义，则为N或NR，其中R为H或另一取代基)。杂环可在任一杂原子或碳原子处附接至其侧基，从而得到稳定结构。如果所得化合物稳定，则本文所述杂环状环可在碳原子上或氮原子上经取代。杂环中的氮可任选经季铵化。优选地，杂环中S和O原子的总数超过1，则这些杂原子不彼此相邻。优选地，杂环中S和O原子的总数不大于1。在使用术语“杂环”时，意欲包括杂芳基。
杂环的实例包括但不限于吖啶基、氮杂环丁基、吖辛因基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基(benzothiofuranyl)、苯并噻吩基(benzothiophenyl)、苯并噁唑基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并***基、苯并四唑基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并咪唑啉基、咔唑基、4aH-咔唑基、咔啉基、色满烷基、色烯基、噌啉基、十氢喹啉基、2H,6H-1,5,2-二噻嗪基、二氢呋喃并[2,3-b]四氢呋喃、呋喃基、呋咱基、咪唑烷基、咪唑啉基、咪唑基、1H-吲唑基、吲哚并吡啶基、假吲哚基(indolenyl)、二氢吲哚基、吲嗪基、吲哚基、3H-吲哚基、靛红酰基(isatinoyl)、异苯并呋喃基、异色满基、异吲唑基、异二氢吲哚基、异吲哚基、异喹啉基、异噻唑基、异噻唑并吡啶基、异噁唑基、异噁唑并吡啶基、亚甲基二氧基苯基、吗啉基、二氮杂萘基、八氢异喹啉基、噁二唑基、1,2,3-噁二唑基、1,2,4-噁二唑基、1,2,5-噁二唑基、1,3,4-噁二唑基、噁唑烷基、噁唑基、噁唑并吡啶基、噁唑烷基呸啶基(perimidinyl)、羟吲哚基、嘧啶基、啡啶基、啡啉基、吩嗪基、吩噻嗪基、吩噁噻基、吩噁嗪基、酞嗪基、哌嗪基、哌啶基、哌啶酮基、4-哌啶酮基、胡椒基、蝶啶基、嘌呤基、吡喃基、吡嗪基、吡唑烷基、吡唑啉基、吡唑并吡啶基、吡唑基、哒嗪基、吡啶并噁唑基、吡啶并咪唑基、吡啶并噻唑基、吡啶基、嘧啶基、吡咯烷基、吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、2H-吡咯基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、4H-喹嗪基、喹喔啉基、奎宁环基、四唑基、四氢呋喃基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、6H-1,2,5-噻二嗪基、1,2,3-噻二唑基、1,2,4-噻二唑基、1,2,5-噻二唑基、1,3,4-噻二唑基、噻蒽基、噻唑基、噻吩基、噻唑并吡啶基、噻吩并噻唑基、噻吩并噁唑基、噻吩并咪唑基、噻吩基、三嗪基、1,2,3-***基、1,2,4-***基、1,2,5-***基、1,3,4-***基和呫吨基。还包括含有例如上述杂环的稠合环和螺环化合物。
5员至10员杂环的实例包括但不限于吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡嗪基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、咪唑烷基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、噁二唑基、噁唑烷基、四氢呋喃基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基、***基、苯并咪唑基、1H-吲唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并四唑基、苯并***基、苯并异噁唑基、苯并噁唑基、羟吲哚基、苯并噁唑啉基、苯并噻唑基、苯并异噻唑基、靛红酰基、异喹啉基、八氢异喹啉基、四氢异喹啉基、四氢喹啉基、异噁唑并吡啶基、喹唑啉基、喹啉基、异噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、噁唑并吡啶基、咪唑并吡啶基和吡唑并吡啶基。
5员至6员杂环的实例包括但不限于吡啶基、呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡唑基、吡嗪基、哌嗪基、哌啶基、咪唑基、咪唑烷基、吲哚基、四唑基、异噁唑基、吗啉基、噁唑基、噁二唑基、噁唑烷基、四氢呋喃基、噻二嗪基、噻二唑基、噻唑基、三嗪基和***基。还包括含有例如上述杂环的稠合环和螺环化合物。
本文使用的术语“双环杂环”或“双环杂环基团”欲意指稳定的9或10员杂环***，其含有两个稠合环且由碳原子和1、2、3或4个独立地选自N、O和S的杂原子组成。在所述两个稠合环中，一个环为各自稠合至第二环的5或6员单环芳族环，其包含5员杂芳基环、6员杂芳基环或苯并环。第二环为饱和、部分不饱和或不饱和的5或6员单环，且包含5员杂环、6员杂环或碳环(前提是在第二环为碳环时第一环并非苯并环)。
双环杂环基团可在任何杂原子或碳原子处附接至其侧基，从而得到稳定结构。如果所得化合物稳定，则本文所述的双环杂环基团可在碳原子或氮原子上经取代。优选地，杂环中S和O原子的总数超过1，则这些杂原子不彼此相邻。优选地，杂环中S和O原子的总数不大于1。
双环杂环基团的实例为，但不限于，喹啉基、异喹啉基、酞嗪基、喹唑啉基、吲哚基、异吲哚基、二氢吲哚基、1H-吲唑基、苯并咪唑基、1,2,3,4-四氢喹啉基、1,2,3,4-四氢异喹啉基、5,6,7,8-四氢-喹啉基、2,3-二氢-苯并呋喃基、色满基、1,2,3,4-四氢-喹喔啉基和1,2,3,4-四氢-喹唑啉基。
本文使用的术语“芳族杂环基团”或“杂芳基”欲意指包括至少一个诸如硫、氧或氮等杂原子环成员的稳定单环和多环芳族烃。杂芳基包括但不限于吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、呋喃基、喹啉基、异喹啉基、噻吩基、咪唑基、噻唑基、吲哚基、吡咯基、噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、异噁唑基、吡唑基、***基、四唑基、吲唑基、1,2,4-噻二唑基、异噻唑基、嘌呤基、咔唑基、苯并咪唑基、二氢吲哚基、苯并二氧环戊基和苯并二噁烷。杂芳基为经取代或未经取代的。氮原子为经取代或未经取代的(即，如果定义，则为N或NR，其中R为H或另一取代基)。氮和硫杂原子可任选经氧化(即，N→O和S(O)p，其中p为0、1或2)。
桥接环也包括于杂环的定义中。在一或多个原子(即，C、O、N或S)连接两个非相邻碳原子或氮原子时，出现桥接环。桥接环的实例包括但不限于一个碳原子、两个碳原子、一个氮原子、两个氮原子和碳-氮基团。应注意，桥总是将单环转化为三环。在桥接环时，针对该环列举的取代基也可存于桥上。
术语“抗衡离子”用于表示带负电物质，诸如氯离子、溴离子、氢氧根、乙酸根和硫酸根。
在环结构内使用虚环时，此指示该环结构可为饱和、部分饱和或不饱和。
本文提及的术语“经取代”意指至少一个氢原子经非氢基团替换，前提是维持正常化合价且该取代得到稳定化合物。在取代基为酮基(即＝O)时，则原子上的2个氢被替换。酮基取代基不存在于芳族部分上。在述及环***(例如，碳环或杂环)经羰基或双键取代时，羰基或双键意欲为环的一部分(即，在环内)。本文使用的环双键为在两个相邻环原子之间形成的双键(例如，C＝C、C＝N或N＝N)。
在本发明化合物上存在氮原子(例如，胺)的情形下，这些氮原子可通过用氧化剂(例如，mCPBA和/或过氧化氢)处理而转化为N-氧化物，以提供本发明的其他化合物。因此，认为所显示和要求保护的氮原子涵盖所显示的氮及其N-氧化物(N→O)衍生物两者。
在任何变量在化合物的任何组成或式中出现一次以上时，其在每次出现时的定义独立于其在其他每种情况下出现时的定义。因此，举例而言，如果显示基团经0-3个R基团取代，则该基团可任选经至多三个R基团取代，且在每次出现时R独立地选自R的定义。同样，取代基和/或变量的组合仅在这些组合得到稳定化合物时才被允许。
当显示与取代基的键与连接环中两个原子的键交叉时，则该取代基可键合至该环上的任一原子。当列示取代基但未指示该取代基键合至给定式的化合物的其余部分的原子时，则该取代基可经由该取代基中的任一原子键合。取代基和/或变量的组合仅在此种组合得到稳定化合物时才被允许。
短语“药学上可接受的”在本文中用于指那些如下化合物、材料、组合物和/或剂型：在合理医学判断的范围内，其适用于接触人类和动物的组织而无过度毒性、刺激性、过敏反应和/或其他问题或并发症，且与合理的益处/风险比率相称。
本文使用的“药学上可接受的盐”是指所公开化合物的衍生物，其中母体化合物通过制备其酸式或碱式盐来修饰。药学上可接受的盐的实例包括但不限于碱性基团诸如胺的无机或有机酸盐；及酸性基团诸如羧酸的碱性或有机盐。药学上可接受的盐包括自例如无毒无机酸或有机酸形成的母体化合物的常规无毒盐或季铵盐。举例而言，此类常规无毒盐包括衍生自诸如以下无机酸的那些：盐酸、氢溴酸、硫酸、磺胺酸、磷酸和硝酸；及自诸如以下有机酸制备的盐：乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、苹果酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、巴莫酸、马来酸、羟基马来酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水杨酸、对氨基苯磺酸、2-乙酰氧基苯甲酸、富马酸、甲苯磺酸、甲烷磺酸、乙烷二磺酸、草酸和羟乙磺酸。
本发明的药学上可接受的盐可通过常规化学方法自含有碱性或酸性部分的母体化合物合成。通常，此类盐可通过在水中或在有机溶剂中或在该两者的混合物中使这些化合物的游离酸或碱形式与化学计量量的适宜碱或酸反应来制备；通常，如醚、乙酸乙酯、乙醇、异丙醇或乙腈等非水性介质优选。适宜盐的列表可参见Remington's PharmaceuticalSciences，第18版，Mack Publishing Company,Easton,PA(1990)，其公开内容以引用方式并入本文中。
另外，式I化合物可具有前药形式。将在体内转化以提供生物活性剂(即，式I化合物)的任一化合物在本发明的范围和精神内的前药。前药的各种形式为本领域公知。关于此类前药衍生物的实例，参见以下文献：
a)Bundgaard,H.编辑，Design of Prodrugs,Elsevier(1985)，及Widder,K.等人编辑，Methods in Enzymology,112:309-396,Academic Press(1985)；
b)Bundgaard,H.，第5章，「Design and Application of Prodrugs,」ATextbookof Drug Design and Development，第113-191页，Krosgaard-Larsen,P.等人编辑，Harwood Academic Publishers(1991)；
c)Bundgaard,H.,Adv.Drug Deliv.Rev.,8:1-38(1992)；
d)Bundgaard,H.等人，J.Pharm.Sci.,77:285(1988)；和
e)Kakeya,N.等人，Chem.Pharm.Bull,32:692(1984)。
含有羧基的化合物可形成生理上可水解的酯，所述酯用作前药，通过在体内水解来产生式I化合物本身。此类前药优选经口施用，这是因为在多种情况下，水解主要在消化酶的影响下进行。倘若酯本身具有活性，或在那些在血液中进行水解的情况下，可使用肠胃外施用。式I化合物的生理上可水解的酯的实例包括C1-6烷基、C1-6烷基苄基、4-甲氧基苄基、茚满基、邻苯二甲酰基、甲氧基甲基、C1-6烷酰氧基-C1-6烷基(例如，乙酰氧基甲基、特戊酰基氧基甲基或丙酰基氧基甲基)、C1-6烷氧基羰基氧基-C1-6烷基(例如，甲氧基羰基-氧基甲基或乙氧基羰基氧基甲基、甘氨酰基氧基甲基、苯基甘氨酰基氧基甲基、(5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基)-甲基)的酯及用于例如青霉素(penicillin)和头孢菌素(cephalosporin)领域中的其他公知的生理上可水解的酯。此类酯可通过本领域已知的常规技术来制备。
前药的制备为本领域所熟知且述于例如以下文献中：King,F.D.编辑MedicinalChemistry:Principles and Practice,The Royal Society of Chemistry,Cambridge,UK(1994)；Testa,B.等人，Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolism.Chemistry,Biochemistry and Enzymology,VCHA和Wiley-VCH,Zurich,Switzerland(2003)；Wermuth,C.G.编辑，The Practice of Medicinal Chemistry,Academic Press,San Diego,CA(1999)。
本发明意欲包括存于本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括那些具有相同原子序数但质量数不同的原子。借助于一般实例且不加以限制，氢同位素包括氘和氚。氘核中具有一个质子和一个中子且其质量为普通氢的两倍。氘可表示为诸如"2H"或"D"等符号。本文中的术语“氘代”本身或用于修饰化合物或基团时是指用氘原子替换一或多个附接至碳的氢原子。碳同位素包括13C和14C。
经同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术来制备，或可通过与本文中所述方法类似的方法使用适当经同位素标记的试剂代替以其它方式采用的未经标记的试剂来制备。这些化合物具有多种潜在用途，例如，用作确定潜在药物化合物结合至靶蛋白或受体的能力的标准品和试剂，或用于在体内或体外使结合至生物受体的本发明化合物成像。
“稳定化合物”和“稳定结构”意欲指示化合物足够稳健，从而可在自反应混合物分离至可用纯度时和调配为有效治疗剂时存活。优选地，本发明化合物不含N-卤基、S(O)2H或S(O)H基团。
术语“溶剂化物”意指本发明化合物与一或多种溶剂分子(无论有机或无机)的物理缔合。该物理缔合包括氢键。在某些情况中，举例而言，在结晶固体的晶格中纳入一或多种溶剂分子时，溶剂化物能够分离。溶剂化物中的溶剂分子可以规则排列和/或无序排列存在。溶剂化物可包含化学计量量或非化学计量量的溶剂分子。“溶剂化物”涵盖溶液相和可分离溶剂化物两者。实例性溶剂化物包括但不限于水合物、乙醇合物、甲醇合物和异丙醇合物。溶剂化方法是本领域公知的。
本文使用的缩写如下文所定义："1x"表示1次，"2x"表示2次，"3x"表示3次，"℃"表示摄氏度，"eq"表示当量，"g"表示克，"mg"表示毫克，"L"表示升，"mL"表示毫升，"μL"表示微升，"N"表示当量浓度，"M"表示摩尔浓度，"mmol"表示毫摩尔，"min"表示分钟，"h"表示小时，"rt"表示室温，"RT"表示保留时间，"RBF"表示圆底烧瓶，"atm"表示大气压，"psi"表示磅/平方英寸，"conc."表示浓缩物，"RCM"表示闭环易位(ring-closing metathesis)，"sat"或"sat'd"表示饱和的，"SFC"表示超临界流体色谱，"MW"表示分子量，"mp"表示熔点，"ee"表示对映异构过量，"MS"或"Mass Spec"表示质谱，"ESI"表示电喷雾电离质谱，"HR"表示高分辨率，"HRMS"表示高分辨率质谱，"LCMS"表示液相色谱质谱，"HPLC"表示高压液相色谱，"RP HPLC"表示反相HPLC，"TLC"或"tlc"表示薄层色谱，"NMR"表示核磁共振频谱，"nOe"表示核奥佛豪瑟效应频谱(nuclear Overhauser effect spectroscopy)，"1H"表示质子，"δ"表示德尔塔，"s"表示单峰，"d"表示双重峰，"t"表示三重峰，"q"表示四重峰，"m"表示多重峰，"br"表示宽峰，"Hz"表示赫兹，且"α"、"β"、"R"、"S"、"E"和"Z"为本领域技术人员所熟悉的立体化学标识(designation)。
Me 甲基
Et 乙基
Pr 丙基
i-Pr 异丙基
Bu 丁基
i-Bu 异丁基
t-Bu 叔丁基
Ph 苯基
Bn 苄基
Boc或BOC 叔丁基氧基羰基
Boc2O 一缩二碳酸二-叔丁酯
AcOH或HOAc 乙酸
AlCl3 氯化铝
AIBN 偶氮二异丁腈
BBr3 三溴化硼
BCl3 三氯化硼
BEMP 2-叔丁基亚氨基-2-二乙基氨基-1,3-二甲基全氢-1,3,2-二氮杂磷杂苯
BOP试剂 六氟磷酸苯并***-1-基氧基三(二甲基氨基)鏻
Burgess试剂 1-甲氧基-N-三乙基铵基磺酰基-甲亚胺酸酯
Cbz 苄氧羰基
DCM或CH2Cl2 二氯甲烷
CH3CN或ACN 乙腈
CDCl3 氘代-氯仿
CHCl3 氯仿
mCPBA或m-CPBA 间-氯过氧苯甲酸
Cs2CO3 碳酸铯
Cu(OAc)2 乙酸铜(II)
CuI 碘化亚铜(I)
CuSO4 硫酸铜(II)
Cy2NMe N-环己基-N-甲基环己胺
DBU 1,8-二氮杂二环[5.4.0]十一-7-烯
DCE 1,2二氯乙烷
DEA 二乙胺
Dess-Martin 1,1,1-三(乙酰基氧基)-1,1-二氢-1,2-苯并碘杂噁唑-3-(1H)-酮
DIC或DIPCDI 二异丙基碳二亚胺
DIEA、DIPEA或 二异丙基乙胺
许尼希碱(Hunig's base)
DMAP 4-二甲基氨基吡啶
DME 1,2-二甲氧基乙烷
DMF 二甲基甲酰胺
DMSO 二甲基亚砜
cDNA 互补DNA
Dppp (R)-(+)-1,2-双(二苯基膦基)丙烷
DuPhos (+)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二乙基磷杂环戊基)苯
EDC N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺
EDCI N-(3-二甲基氨基丙基)-N'-乙基碳二亚胺盐酸盐
EDTA 乙二胺四乙酸
(S,S)-EtDuPhosRh(I) (+)-1,2-双((2S,5S)-2,5-二乙基磷杂环戊基)苯(1,5-环辛二烯)铑(I)三氟甲烷磺酸盐
Et3N或TEA 三乙胺
EtOAc 乙酸乙酯
Et2O ***
EtOH 乙醇
GMF 玻璃微纤维过滤器
Grubbs II (1,3-双(2,4,6-三甲基苯基)-2-咪唑烷亚基)二氯(苯基亚甲基)(三环己基膦)钌
HCl 盐酸
HATU O-(7-氮杂苯并***-1-基)-N,N,N',N'-四甲基脲鎓六氟磷酸盐
HEPES 4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-乙烷磺酸
Hex 己烷
HOBt或HOBT 1-羟基苯并***
H2O2 过氧化氢
H2SO4 硫酸
IBX 2-二碘氧基苯甲酸
InCl3 氯化铟(III)
琼斯试剂(Jones reagent) H2SO4水溶液中的CrO3，2M
K2CO3 碳酸钾
K2HPO4 磷酸氢二钾
K3PO4 磷酸钾
KOAc 乙酸钾
K3PO4 磷酸钾
LAH 氢化铝锂
LG 离去基团
LiOH 氢氧化锂
MeOH 甲醇
MgSO4 硫酸镁
MsOH或MSA 甲基磺酸
NaCl 氯化钠
NaH 氢化钠
NaHCO3 碳酸氢钠
Na2CO3 碳酸钠
NaOH 氢氧化钠
Na2SO3 亚硫酸钠
Na2SO4 硫酸钠
NBS N-溴代琥珀酰亚胺
NCS N-氯代琥珀酰亚胺
NH3 氨
NH4Cl 氯化铵
NH4OH 氢氧化铵
NH4COOH 甲酸铵
NMM N-甲基吗啉
OTf 三氟甲磺酸酯/盐或三氟甲烷磺酸酯/盐
Pd2(dba)3 三(二亚苄基丙酮)二钯(0)
Pd(OAc)2 乙酸钯(II)
Pd/C 钯/碳
Pd(dppf)Cl2 [1,1'-双(二苯基膦基)-二茂铁]二氯化钯(II)
Ph3PCl2 三苯基二氯化膦
PG 保护基团
POCl3 磷酰氯(phosphorus oxychloride)
i-PrOH或IPA 异丙醇
PS 聚苯乙烯
rt 室温
SEM-Cl 2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基甲基氯化物
SiO2 二氧化硅
SnCl2 氯化锡(II)
TBAI 四正丁基碘化铵
TFA 三氟乙酸
THF 四氢呋喃
TMSCHN2 三甲基甲硅烷基重氮甲烷
Figure BDA0003662031630000291
丙烷膦酸酐
TRIS 三(羟基甲基)氨基甲烷
pTsOH 对甲苯磺酸
本发明化合物可以有机合成领域技术人员已知的多种方式来制备，这些方式更详细地述于部分VI中。
IV.生物学
尽管血液凝固为生物体止血的调控所必需，但其在多个病理状况中亦有所涉及。在血栓形成中，可形成血凝块或血栓且其局部阻塞循环，从而引起缺血和器官损害。或者，在称为栓塞的过程中，凝块可发生移动且随后阻塞在远端血管中，其中凝块再次引起缺血和器官损害。因病理学血栓形成引起的疾病统称为血栓栓塞性病症，且包括急性冠状动脉综合征、不稳定型心绞痛、心肌梗塞、心腔中的血栓形成、缺血性中风、深部静脉血栓形成、外周闭塞性动脉疾病、短暂性缺血发作和肺栓塞。另外，血栓形成发生于与血液接触的人造表面(包括导管、支架、人造心脏瓣膜和血液透析膜)上。
一些状况增加发生血栓形成的风险。举例而言，血管壁的改变、血流的变化和血管腔隙组成的改变。这些风险因子统称为Virchow三要素。(Colman,R.W.等人编辑，Hemostasis and Thrombosis,Basic Principles and Clinical Practice，第5版，第853页,Lippincott Williams&Wilkins(2006))。
通常给予因存在一或多个来自Virchow三要素的倾向性风险因子而具有发生血栓栓塞性疾病的风险的患者抗血栓剂，以预防形成闭塞性血栓(初级预防)。举例而言，在矫形手术环境(例如，髋和膝关节置换)中，通常在手术程序之前施用抗血栓剂。抗血栓剂抵消因与手术有关的急性期响应引起的血管流动改变(停滞)、潜在手术血管壁损伤以及血液组成变化施加的促血栓刺激。使用抗血栓剂进行初级预防的另一实例为在具有发生血栓性心血管疾病的风险的患者中投用血小板活化抑制剂阿斯匹林。此环境中公认的风险因子包括年龄、男性性别、高血压、糖尿病、脂质变化和肥胖症。
在初始血栓发作后，抗血栓剂也适用于次级预防。举例而言，对具有因子V(亦称为莱顿第五因子(factor V Leiden))突变及其他风险因子(例如，怀孕)的患者投用抗凝血剂以预防静脉血栓形成复发。在另一实例中，必须在具有急性心肌梗塞或急性冠状动脉综合征史的患者对心血管事件进行次级预防。在临床环境中，可使用阿斯匹林和氯吡格雷(或其他噻吩并吡啶)的组合来预防第二血栓事件。
还给予抗血栓剂以治疗已开始之后的疾病状态(即，阻止其发展)。举例而言，用抗凝血剂(即，肝素、华法林或LMWH)治疗呈现深部静脉血栓形成的患者以预防静脉闭塞的进一步生长。随时间流逝，这些药剂还引起疾病状态的消退，这是因为促血栓因子与抗凝血剂/促纤维蛋白溶解途径之间的平衡的变化有利于后者。关于动脉血管床的实例包括用阿斯匹林和氯吡格雷治疗患有急性心肌梗塞或急性冠状动脉综合征的患者以预防血管闭塞的进一步生长且最终引起血栓性闭塞的消退。
因此，抗血栓剂广泛用于血栓栓塞性病症的初级和次级预防(即，预防或降低风险)以及已存在血栓过程的治疗。抑制血液凝固的药物或抗凝血剂为“用于预防和治疗血栓栓塞性病症的关键药剂”(Hirsh,J.等人，Blood,105:453-463(2005))。
另一种引发凝血的方式为血液暴露于人造表面时(例如，在血液透析、“停跳(on-pump)”心血管手术、血管移植、细菌性败血症期间)对细胞表面、细胞受体、细胞碎片、DNA、RNA和细胞外基质的操作。此过程也称为接触活化。因子XII的表面吸收使得因子XII分子产生构象变化，由此促进蛋白水解活性因子XII分子(因子XIIa和因子XIIf)的活化。因子XIIa(或XIIf)具有多个靶蛋白，包括血浆前激肽释放酶和因子XI。活性血浆激肽释放酶进一步活化因子XII，导致接触活化扩大。或者，丝氨酸蛋白酶脯氨酰羧肽酶可活化在细胞和基质表面上形成的多蛋白复合物中与高分子量激肽原复合的血浆激肽释放酶(Shariat-Madar等人，Blood,108:192-199(2006))。接触活化为表面介导的过程，其部分负责调控血栓形成和发炎，且至少部分由纤维蛋白溶解、补体、激肽原/激肽及其他体液和细胞途径介导(其综述可参见Coleman,R.,"Contact Activation Pathway",Hemostasis and Thrombosis，第103-122页，Lippincott Williams&Wilkins(2001)；Schmaier,A.H.,"ContactActivation",Thrombosis and Hemorrhage，第105-128页(1998))。因子XII缺陷型小鼠的表型支持接触活化***对血栓栓塞性疾病的生物相关性。更具体而言，在若干个血栓形成模型以及中风模型中防止因子XII缺陷型小鼠发生血栓性血管闭塞，且XII缺陷型小鼠的表型与XI缺陷型小鼠相同(Renne等人，J.Exp.Med.,202:271-281(2005)；Kleinschmitz等人，J.Exp.Med.,203:513-518(2006))。因子XI位于因子XIIa的下游以及XII缺陷型小鼠与XI缺陷型小鼠的表型相同的事实表明，接触活化***可在体内因子XI活化中发挥重要作用。
因子XI系胰蛋白酶样丝氨酸蛋白酶的酶原且以相对低浓度存于血浆中。在内部R369-I370键处的蛋白水解活化产生重链(369个氨基酸)和轻链(238个氨基酸)。后者含有典型胰蛋白酶样催化三元体(H413、D464和S557)。据信，凝血酶对因子XI的活化发生于带负电表面上，最可能发生于经活化血小板的表面上。血小板含有对活化因子XI的高亲和力(0.8nM)特异性位点(130-500个/血小板)。在活化后，因子XIa保持表面结合且识别因子IX作为其正常大分子底物。(Galiani,D.,Trends Cardiovasc.Med.,10:198-204(2000))。
除上述反馈活化机制外，凝血酶活化凝血酶活化的纤维蛋白溶解抑制剂(TAFI)(其为裂解纤维蛋白上的C-末端赖氨酸和精氨酸残基的血浆羧肽酶)，从而降低纤维蛋白增强组织型血纤维蛋白溶酶原活化剂(tPA)依赖性血纤维蛋白溶酶原活化的能力。在针对FXIa的抗体存在下，凝块溶解可独立于血浆TAFI浓度更快地发生。(Bouma,B.N.等人，Thromb.Res.,101:329-354(2001)。)因此，预计因子XIa的抑制剂为抗凝血剂和促纤维蛋白溶解剂。
靶向因子XI的抗血栓栓塞效应的另一证据源自因子XI缺陷型小鼠。已显示，完全fXI缺失防止小鼠发生三氯化铁(FeCl3)诱导的颈动脉血栓形成(Rosen等人，Thromb.Haemost.,87:774-777(2002)；Wang等人，J.Thromb.Haemost.,3:695-702(2005))。同样，因子XI缺失挽救完全蛋白质C缺失的围产期致死表型(Chan等人，Amer.J.Pathology,158:469-479(2001))。此外，针对人类因子XI的狒狒交叉反应性功能阻断抗体可抵抗狒狒动静脉分流血栓形成(Gruber等人，Blood,102:953-955(2003))。关于因子XIa的小分子抑制剂的抗血栓效应的证据也公开于已公开美国专利公开第2004/0180855A1号中。总而言之，这些研究表明，靶向因子XI将降低血栓性和血栓栓塞性疾病的倾向。
遗传学证据指示，正常稳态不需要因子XI，此暗示因子XI机制与竞争性抗血栓机制相比具有优异的安全特性(profile)。与血友病A(因子VIII缺失)或血友病B(因子IX缺失)不同，引起因子XI缺失(血友病C)的因子XI基因突变仅引起轻度至中等出血素质，其特征主要在于手术后或创伤后出血，但极少自发性出血。手术后出血主要发生于具有高浓度内源性纤维蛋白溶解活性的组织(例如，口腔和泌尿生殖***)中。大部分病例因手术前延长aPTT(内生性***)而意外地鉴别出的，且先前无任何出血史。
以下事实进一步支持XIa抑制作为抗凝血疗法的增加的安全性：敲除因子XI的小鼠(其没有可检测的因子XI蛋白质)经历正常发育，且具有正常寿命。未注意到自发性出血的证据。以基因剂量依赖性方式延长aPTT(内生性***)。令人感兴趣的是，即使在严重刺激凝血***(尾部横切术)后，与野生型和杂合型同窝出生仔畜相比，出血时间并未显著延长。(Gailani,D.,Frontiers in Bioscience,6:201-207(2001)；Gailani,D.等人，BloodCoagulation and Fibrinolysis,8:134-144(1997)。)总而言之，这些观察表明，因子XIa的高水平抑制应耐受良好。这与使用其他凝血因子(不包括因子XII)的基因靶向实验不同。
可通过与C1抑制剂或α1抗胰蛋白酶进行复合物形成来确定因子XI的体内活化。在50名患有急性心肌梗塞(AMI)的患者的研究中，大约25％的患者的值高于复合物ELISA的正常范围上限。此研究可视为以下的证据：至少在患有AMI的患者的亚群中，因子XI活化有助于凝血酶形成(Minnema,M.C.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,20:2489-2493(2000))。第二研究确立冠状动脉粥样硬化程度与因子XIa(呈与α1抗胰蛋白酶的复合物)之间的正相关(Murakami,T.等人，Arterioscler.Thromb.Vasc.Biol.,15:1107-1113(1995))。在另一研究中，患者中高于90％的因子XI含量与静脉血栓形成风险增加至2.2倍相关(Meijers,J.C.M.等人，N.Engl.J.Med.,342:696-701(2000))。
同样，优选发现在体外凝块测定(例如活化部分凝血活素时间(aPTT)或凝血酶原时间(PT)测定)中，与已知丝氨酸蛋白酶抑制剂相比，具有改良活性的新化合物。(aPTT和PT测定的说明参见Goodnight,S.H.等人，"Screening Tests of Hemostasis",Disorders ofThrombosis and Hemostasis:A Clinical Guide,第2版，第41-51页，McGraw-Hill,NewYork(2001))。
还期望且优选发现与已知丝氨酸蛋白酶抑制剂相比在以下种类(作为实例给出且不欲具有限制性)中的一或多者中具有有利改良特征的化合物：(a)药物动力学性质，包括口服生物利用度、半衰期和清除率；(b)药物性质；(c)剂量要求；(d)降低血液浓度峰谷特征的因素；(e)增加活性药物在受体处的浓度的因素；(f)降低临床药物-药物相互作用倾向的因素；(g)减小不利副作用(包括对其他生物靶的选择性)的可能性的因素；和(h)改良制造成本或可行性的因素。
临床前研究显示，在维持止血的剂量下，小分子因子XIa抑制剂在动脉血栓形成的兔和大鼠模型中具有显著抗血栓效应。(Wong P.C.等人，American Heart AssociationScientific Sessions,摘要号6118，2006年11月12-15日；Schumacher,W.等人，J.Thromb.Haemost.,3(增刊1):P1228(2005)；Schumacher,W.A.等人，Eur.J.Pharmacol,167-174(2007))。此外，据观察，特定XIa抑制剂对aPTT的体外延长良好地预测本发明血栓形成模型的效能。因此，体外aPTT测试可用作体内效能的替代方式。
本文使用的术语“患者”涵盖所有哺乳动物物种。
本文使用的“治疗(treating)”或“治疗(treatment)”涵盖治疗哺乳动物、尤其人类的疾病状态，且包括：(a)抑制所述疾病状态，即阻止其发展；和/或(b)减轻所述疾病状态，即引起所述疾病状态消退。
本文使用的“预防”为通过向患者施用治疗有效量的至少一种本发明化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐或溶剂化物预防性治疗疾病状态以降低和/或最小化疾病状态复发的风险和/或风险降低。基于已知与一般群体相比增加罹患临床疾病状态的风险的因素来选择预防性疗法的患者。对于预防性治疗，可呈现或可尚未呈现所述临床疾病状态的病况。“预防”治疗可分为(a)初级预防和(b)次级预防。初级预防定义为治疗以降低或最小化尚未呈现临床疾病状态的患者的疾病状态的风险，而次级预防定义为最小化或降低相同或类似临床疾病状态的复发或第二次发生的风险。
本文使用的“风险降低”涵盖降低出现临床疾病状态的发生率的疗法。因此，初级和次级预防疗法为降低风险的实例。
“治疗有效量”意欲包括本发明化合物在单独或组合施用时有效抑制因子XIa和/或血浆激肽释放酶和/或预防或治疗本文所列示病症的量。当应用于组合时，该术语是指活性成分引起预防性或治疗性效应的组合量，不管其组合施用、依序施用或同时施用。
本文使用的术语“血栓形成”是指血栓的形成或存在；即血管内的凝块，其可引起由血管供血的组织的缺血或梗塞。本文使用的术语“栓塞”是指凝块或外来物质(由血流带至其沉积位点)突然阻断动脉。本文使用的术语“血栓栓塞”是指血栓性物质阻塞血管，该血栓性物质由血流自原始位点携带而堵塞另一血管。术语“血栓栓塞性病症”导致“血栓性”和“栓塞性”病症(如上文所定义)两者。
本文使用的术语“血栓栓塞性病症”包括动脉心血管血栓栓塞性病症、静脉心血管或脑血管血栓栓塞性病症和心脏腔室或外周循环中的血栓栓塞性病症。本文使用的术语“血栓栓塞性病症”还包括选自但不限于以下的特定病症：不稳定型心绞痛或其他急性冠状动脉综合征、心房颤动、首次或复发性心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中将血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。医学植入物或装置包括但不限于：人工瓣膜、人造瓣膜、留置导管、支架、血液充氧器、分流器、血管出入口、心室辅助装置和人造心脏或心脏腔室和血管移植物。程序包括但不限于：心肺旁路手术、经皮冠状动脉介入治疗和血液透析。在另一实施方案中，术语“血栓栓塞性病症”包括急性冠状动脉综合征、中风、深部静脉血栓形成和肺栓塞。
在另一实施方案中，本发明提供治疗血栓栓塞性病症的方法，其中所述血栓栓塞性病症选自不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中将血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供治疗血栓栓塞性病症的方法，其中所述血栓栓塞性病症选自急性冠状动脉综合征、中风、静脉血栓形成、心房颤动和自医学植入物及装置引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供血栓栓塞性病症的初级预防方法，其中所述血栓栓塞性病症选自不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、心房颤动、心肌梗塞、缺血性猝死、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中将血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供血栓栓塞性病症的初级预防方法，其中所述血栓栓塞性病症选自急性冠状动脉综合征、中风、静脉血栓形成和自医学植入物及装置引起的血栓形成。
在另一实施方案中，本发明提供血栓栓塞性病症的次级预防方法，其中所述血栓栓塞性病症选自不稳定型心绞痛、急性冠状动脉综合征、心房颤动、复发性心肌梗塞、短暂性缺血发作、中风、动脉粥样硬化、外周闭塞性动脉疾病、静脉血栓形成、深部静脉血栓形成、血栓性静脉炎、动脉栓塞、冠状动脉血栓形成、脑动脉血栓形成、脑栓塞、肾栓塞、肺栓塞和因其中将血液暴露于人造表面而促使血栓形成的医学植入物、装置或操作引起的血栓形成。在另一实施方案中，本发明提供血栓栓塞性病症的次级预防方法，其中所述血栓栓塞性病症选自急性冠状动脉综合征、中风、心房颤动和静脉血栓形成。
本文使用的术语“中风”是指因颈总动脉、内颈动脉或脑内动脉中的闭塞性血栓形成引起的栓塞性中风或动脉粥样硬化血栓性中风。
应注意，血栓形成包括血管闭塞(例如，在旁路手术后)和再闭塞(例如，在经皮腔内冠状动脉成形术期间或之后)。血栓栓塞性病症可因包括但不限于以下的病况而产生：动脉粥样硬化、手术或手术并发症、长期不活动、动脉纤维性颤动、先天性血栓形成倾向、癌症、糖尿病、药物或激素的效应和怀孕并发症。
血栓栓塞性病症通常与患有动脉粥样硬化的患者有关。动脉粥样硬化的风险因子包括但不限于男性性别、年龄、高血压、脂质病症和糖尿病。动脉粥样硬化的风险因子同时是动脉粥样硬化并发症(即，血栓栓塞性病症)的风险因子。
类似地，动脉纤维性颤动通常与血栓栓塞性病症有关。动脉纤维性颤动及随后血栓栓塞性病症的风险因子包括心血管疾病、风湿性心脏病、非风湿性二尖瓣疾病、高血压心血管疾病、慢性肺病和多种杂项心脏异常以及甲状腺毒症。
糖尿病通常与动脉粥样硬化和血栓栓塞性病症有关。较常见2型糖尿病的风险因子包括但不限于家族史、肥胖症、体力活动缺乏、种族/族群、先前空腹葡萄糖异常或葡萄糖耐测量试异常、妊娠糖尿病史或“大婴儿”分娩史、高血压、低HDL胆固醇和***。
先天性血栓形成倾向的风险因子包括凝血因子中的功能突变增加或抗凝血剂途径或纤维蛋白溶解途径中的功能突变损失。
血栓形成与各种肿瘤类型有关，例如，胰腺癌、乳腺癌、脑瘤、肺癌、卵巢癌、***癌、胃肠道恶性病和霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkins lymphoma)或非霍奇金氏淋巴瘤。最新研究表明，患有血栓形成的患者的癌症频率反映一般群体中具体癌症类型的频率(Levitan,N.等人，Medicine(Baltimore),78(5):285-291(1999)；Levine M.等人，N.Engl.J.Med.,334(11):677-681(1996)；Blom,J.W.等人，JAMA,293(6):715-722(2005))。因此，男性中与血栓形成有关的最常见癌症为***癌、结直肠癌、脑癌和肺癌，且在女性中与血栓形成有关的最常见癌症为乳腺癌、卵巢癌和肺癌。癌症患者中观察到静脉血栓栓塞(VTE)的比率显著。不同肿瘤类型之间的不同VTE比率最可能与患者群体的选择有关。具有血栓形成风险的癌症患者可具有以下风险因子中的任一者或全部：(i)癌症阶段(即，存在转移)，(ii)存在中央静脉导管，(iii)手术和抗癌疗法(包括化学疗法)，和(iv)激素和抗血管生成药。因此，常见临床实践为向具有晚期肿瘤的患者投用肝素或低分子量肝素以预防血栓栓塞性病症。FDA已批准多种低分子量肝素制剂用于这些适应症。
在考虑预防医学癌症患者的VTE时有三种主要临床情形：(i)患者已长期卧床不起；(ii)行动患者正在接受化学疗法或放射；和(iii)患者具有留置中央静脉导管。未分级肝素(UFH)和低分子量肝素(LMWH)为经历手术的癌症患者的有效抗血栓剂。(Mismetti,P.等人，Br.J.Surg.,88:913-930(2001))。
A.体外测定
本发明化合物作为凝血因子XIa、VIIa、IXa、Xa、XIIa、血浆激肽释放酶或凝血酶的抑制剂的有效性可分别使用相关经纯化的丝氨酸蛋白酶和适当合成底物来确定。在不存在和存在本发明化合物的两种情况下测量相关丝氨酸蛋白酶对发色或荧光底物的水解速率。底物水解导致释放pNA(对硝基苯胺)，其以分光光度方式通过测量在405nm的吸光度增加来监测；或导致释放AMC(氨基甲基香豆素)，其以分光光度方式通过在380nm激发测量在460nm的发射增加来监测。在抑制剂存在下，吸光度或荧光的变化率的降低指示酶抑制。此类方法为本领域技术人员已知。将该测定的结果表示为抑制常数Ki。
因子XIa测定在50mM HEPES缓冲液(pH为7.4，含有145mM NaCl、5mM KCl和0.1％PEG 8000(聚乙二醇；JT Baker或Fisher Scientific))中进行。测定使用最终浓度为25-200pM的经纯化的人类因子XIa(Haematologic Technologies)和浓度为0.0002-0.001M的合成底物S-2366(pyroGlu-Pro-Arg-pNA；
Figure BDA0003662031630000371
或AnaSpec)进行。
因子VIIa测定在0.005M氯化钙、0.15M氯化钠、0.05M HEPES缓冲液(含有0.1％PEG8000，pH为7.5)中进行。测定使用最终测定浓度为0.5-10nM的经纯化的人类因子VIIa(Haematologic Technologies)或重组人类因子VIIa(Novo Nordisk)、浓度为10-40nM的重组可溶性组织因子和浓度为0.001-0.0075M的合成底物H-D-Ile-Pro-Arg-pNA(S-2288；
Figure BDA0003662031630000372
或BMPM-2；AnaSpec)进行。
因子IXa测定在0.005M氯化钙、0.1M氯化钠、0.0000001M Refludan(Berlex)、0.05M TRIS碱和0.5％PEG 8000(pH为7.4)中进行。添加Refludan以抑制人类因子Ixa的商业制剂中的少量凝血酶。测定使用最终测定浓度为20-100nM的经纯化的人类因子IXa(Haematologic Technologies)和浓度为0.0004-0.0005M的合成底物PCIXA2100-B(CenterChem)或Pefafluor IXa 3688(H-D-Leu-Ph′Gly-Arg-AMC；CenterChem)进行。
因子Xa测定在0.1M磷酸钠缓冲液(pH为7.5，含有0.2M氯化钠及0.5％PEG 8000)中进行。测定使用最终测定浓度为150-1000pM经纯化的人类因子Xa(HaematologicTechnologies)和浓度为0.0002-0.00035M的合成底物S-2222(Bz-Ile-Glu(γ-OMe,50％)-Gly-Arg-pNA；
Figure BDA0003662031630000382
)进行。
因子XIIa测定在0.05M HEPES缓冲液(pH为7.4，含有0.145M NaCl、0.05M KCl和0.1％PEG 8000)中进行。测定使用最终浓度为4nM经纯化的人类因子XIIa(AmericanDiagnostica)和浓度为0.00015M的合成底物
Figure BDA0003662031630000383
312号(H-D-CHT-Gly-L-Arg-pNA.2AcOH；American Diagnostica)进行。
血浆激肽释放酶测定在0.1M磷酸钠缓冲液(pH为7.5，含有0.1-0.2M氯化钠和0.5％PEG 8000)中进行。测定使用最终测定浓度为200pM的经纯化的人类血浆激肽释放酶(Enzyme Research Laboratories)和浓度为0.00008-0.0004M的合成底物S-2302(H-(D)-Pro-Phe-Arg-pNA；
Figure BDA0003662031630000384
)进行。
凝血酶测定在0.1M磷酸钠缓冲液(pH为7.5，含有0.2M氯化钠和0.5％PEG 8000)中进行。测定使用最终测定浓度为200-250pM的经纯化的人类α凝血酶(HaematologicTechnologies或Enzyme Research Laboratories)和浓度为0.0002-0.0004M的合成底物S-2366(pyroGlu-Pro-Arg-pNA；
Figure BDA0003662031630000381
或AnaSpec)进行。
每一蛋白酶水解底物的米氏常数(Michaelis constant)Km在25℃或37℃在抑制剂不存在下确定。Ki值通过容许蛋白酶与底物在抑制剂存在下反应来确定。容许反应进行20-180分钟时间(取决于蛋白酶)且测量速率(吸光度或荧光随时间变化的速率)。使用以下关系来计算Ki值：
(Vmax*S)/(Km+S)
对于具有一个结合位点的竞争性抑制剂，(vo-vs)/vs＝I/(Ki(1+S/Km))；或
vs/vo＝A+(B-A)/(1+(I/IC50)n)；和
对于竞争性抑制剂，Ki＝IC50/(1+S/Km)，其中：
vo为对照在抑制剂不存在下的速率；
vs为在抑制剂存在下的速率；
Vmax为最大反应速率；
I系抑制剂的浓度；
A为最小剩余活性(通常锁定为零)；
B为最大剩余活性(通常锁定为1.0)；
n为希尔系数(Hill coefficient)，其为潜在抑制剂结合位点的数目和协同性的量度；
IC50为抑制剂在测定条件下产生50％抑制的浓度；
Ki为酶:抑制剂复合物的解离常数；
S为底物的浓度；且
Km为底物的米氏常数。
可通过获取给定蛋白酶的Ki值对所关注蛋白酶的Ki值的比率来评价化合物的选择性(即，FXIa对蛋白酶P的选择性＝蛋白酶P的Ki/FXIa的Ki)。选择性比率>20的化合物视为具有选择性。
可使用标准或改良凝块测定来确定本发明化合物作为凝血抑制剂的有效性。血浆凝块时间在抑制剂存在下增加指示抗凝血。相对凝块时间为在抑制剂存在下的凝块时间除以在抑制剂不存在下的凝块时间。该测定的结果可表示为IC1.5×或IC2×，即分别将凝血时间增加50％或100％所需的抑制剂浓度。IC1.5×或IC2×通过使用跨过IC1.5×或IC2×的抑制剂浓度自相对凝血时间对抑制剂浓度曲线线性内插来获得。
凝块时间使用柠檬酸化正常人类血浆以及自多个实验室动物物种(例如，大鼠或兔)获得的血浆来确定。自10mM DMSO储备溶液开始，将化合物稀释至血浆中。DMSO的最终浓度小于2％。在自动化凝血分析仪
Figure BDA0003662031630000391
Dade-Behring,Illinois)中实施血浆凝块测定。类似地，凝块时间可自投用本发明化合物的实验室动物物种或人类确定。
使用
Figure BDA0003662031630000392
(Dade-Behring,Illinois)遵循包装插页中的说明来确定活化部分凝血活素时间(aPTT)。将血浆(0.05mL)升温至37℃并保持1分钟。向血浆中添加
Figure BDA0003662031630000401
FSL(0.05mL)并再培育2至5分钟。向反应混合物中添加氯化钙(25mM,0.05mL)以引发凝血。凝块时间为自添加氯化钙的时刻直至检测到凝块的时间(秒)。
使用凝血活素(Thromboplastin C Plus或
Figure BDA0003662031630000402
Dade-Behring,Illinois)遵循包装插页中的说明来确定凝血酶原时间(PT)。将血浆(0.05mL)升温至37℃并保持1分钟。向血浆中添加凝血活素(0.1mL)以引发凝血。凝块时间为自添加凝血活素的时刻直至检测到凝块时的时间(秒)。
在缓冲至具体pH的各种水性溶剂中确定平衡溶解度。在100μL至300μL溶剂中使用约1mg化合物进行平衡。将样品以300RPM于室温(20±2℃)搅拌24小时。如果观察到整个固体溶解，则添加其他化合物以保持固体在研究的持续时间中过量。24小时后，使用显微术以确定过量固体是否存在形态变化。随后经由0.22μm PVDF滤板过滤上清液并用乙腈稀释用于HPLC分析。还提供校正样品用于HPLC分析。
本发明化合物结合至人类血清蛋白质的程度可使用透析方法和本领域公知且述于以下中的分析技术来确定：例如，Plise,E.G.等人，"Semi-automated protein bindingmethodology using equilibrium dialysis and a novel mixed-matrix cassetteapproach",J.Pharm.Sci.,99(12):5070-5078(2010)；Waters,N.J.等人，"Validation ofa rapid equilibrium dialysis approach for the measurement of plasma proteinbinding",J.Pharm.Sci.,97(10):4586-4595(2008)；Van Liempd,S.等人，"Developmentand Validation of a Higher-Throughput Equilibrium Dialysis Assay for PlasmaProtein Binding",J.Lab.Autom.,16:56-67(2011)；Di,L.等人，"Impact of Recovery onFraction Unbound Using Equilibrium Dialysis",J.Pharm.Sci.,101(3):1327-1335(2011)。
通过与人类血清组合以获得10μM的最终浓度一式三份地测定本发明化合物。于37℃在10％CO2气氛中以调节至pH 7.4的0.133M磷酸钠缓冲液使用来自Thermo Fisher(Waltham,Massachusetts)的两室快速平衡透析测定板实施透析5小时。在时间零时(T0[血清]和T0[缓冲液])和在培育后5小时(T5h[血清]和T5h[缓冲液])收集来自缓冲液和血清室的测定样品。在分析之前，将经透析的血清样品用调节至pH 7.4的0.133M磷酸钠缓冲液稀释且将经透析的缓冲液样品用人类血清稀释以在每一样品中产生相同的最终血清浓度。随后，通过在含有两种分析内标准品(200nM阿普洛尔(alprenolol)和600nM甲苯磺丁脲)的乙腈中蛋白质沉淀萃取这些样品。通过以4000xg离心10分钟分离所沉淀蛋白质和上清液。通过LC-MS/MS分析样品上清液且针对初始时间零样品(T0[血清]和T0[缓冲液])和平衡后样品(T5h[血清]和T5h[缓冲液])确定化合物对内标准品的峰面积比率。游离％(游离分数)、结合％和回收％结果如下计算：
游离％＝100×(T5h[缓冲液]/T5h[血清])
结合％＝100-游离％
回收％＝100×((T5h[缓冲液]+T5h[血清])/T0[血清])
通过测量测定基质空白(50:50血清:缓冲液)的分析物/内标准品的LC-MS/MS面积比率评价基质干扰。在分析基质空白(50:50血清:缓冲液)的分析物/内标准品的面积比率小于T5h[缓冲液]样品的面积比率的20％时，分析条件视为对于游离％的评估为可接受的。
在上述因子XIa测定中测试下文所公开的例示性实施例，且发现其具有因子XIa抑制活性。观察到因子XIa抑制活性(Ki值)的范围为≤10μM(10000nM)。下表1列举于37℃针对以下实施例测量的因子XIa Ki值。
表1
实施例编号 因子XIa Ki(nM)
1 0.1
2 0.6
10 0.2
11 0.2
15 0.1
16 0.1
17 0.1
18 0.1
19 0.1
20 0.2
21 0.2
在上述血浆激肽释放酶测定中测试下文所公开的例示性实施例，且发现其具有血浆激肽释放酶抑制活性。观察到血浆激肽释放酶抑制活性(Ki值)的范围为≤10μM(10000nM)。下表2列举于37℃针对以下实施例测量的血浆激肽释放酶Ki值。
表2
实施例编号 血浆激肽释放酶Ki(nM)
1 28
2 10
10 23
11 22
实施例编号 血浆激肽释放酶Ki(nM)
15 24
16 32
17 33
18 17
19 19
20 35
21 37
还在上述其他测定(诸如aPTT、溶解度和人类蛋白质结合亲和力)中评估本发明化合物作为抗血栓剂的有效性。与WO 2013/022814和WO2014/022766中所公开的苯基P2'大环相比，本申请的吡唑基P2'大环展现出惊人的药理学活性。如表3中所示，与参照化合物相比，本发明化合物具有优异的抗凝血活性、溶解度和生物利用度。
表3
Figure BDA0003662031630000421
Figure BDA0003662031630000431
B.体内测定
本发明化合物作为抗血栓剂的有效性可使用相关体内血栓形成模型(包括体内电诱导颈动脉血栓形成模型和体内兔动静脉分流血栓形成模型)确定。
a.体内电诱导颈动脉血栓形成(ECAT)模型
可在该研究中使用Wong等人(J.Pharmacol.Exp.Ther.,295:212-218(2000))所述的兔ECAT模型。使用***(50mg/kg+50mg/kg/h，肌内(IM))和甲苯噻嗪(10mg/kg+10mg/kg/h，肌内)麻醉雄性新西兰白兔。视需要补充这些麻醉剂。将电磁流量探针置于一段分离颈动脉上以监测血流量。将在引发血栓形成之前或之后给予(静脉内(i.v.)、腹膜腔内(i.p.)、皮下(s.c.)或经口)测试药剂或媒介物。使用引发血栓形成之前的药物治疗对测试药剂预防血栓形成和降低血栓形成的风险的能力建模，而使用在引发之后的投药对治疗现有血栓性疾病的能力建模。通过使用外部不锈钢双极电极将颈动脉以4mA电刺激3min来诱导血栓形成。在90min时段内连续测量颈动脉血流量以监测血栓诱导的闭塞。通过梯形法则计算90min内的总颈动脉血流量。然后通过将90min内的总颈动脉血流量转化为占总对照颈动脉血流量的百分比来确定90min内的平均颈动脉流量，这在将对照血流量连续维持90min的情况下有效。通过使用希尔S形Emax方程(Hill sigmoid Emax equation)的非线性最小二乘回归程序(DeltaGraph；SPSS公司，Chicago,IL)估计化合物的ED50(使90min内的平均颈动脉血流量增加至对照的50％的剂量)。
b.体内兔动静脉(AV)分流血栓形成模型
可在此研究中使用Wong等人(Wong,P.C.等人，J.Pharmacol.Exp.Ther.292:351-357(2000))所述的兔AV分流模型。使用***(50mg/kg+50mg/kg/h，肌内)和甲苯噻嗪(10mg/kg++10mg/kg/h，肌内)麻醉雄性新西兰白兔。视需要补充这些麻醉剂。分离股动脉、颈静脉和股静脉且***导管。在股动脉和股静脉套管之间连接填充盐水的AV分流装置。AV分流装置由tygon管道的外片(长度＝8cm；内径＝7.9mm)和管道的内片(长度＝2.5cm；内径＝4.8mm)组成。AV分流器还含有8cm长的2-0丝线(Ethicon,Somerville,NJ)。血液自股动脉经由AV分流器流至股静脉中。流动血液暴露于丝线诱导形成显著血栓。40分钟后，断开分流器且称重经血栓覆盖的丝线。将在打开AV分流器之前给予(静脉内、腹膜腔内、皮下或经口)测试药剂或媒介物。确定每一治疗组的血栓形成的抑制百分比。通过使用希尔S形Emax方程的非线性最小二乘回归程序(DeltaGraph；SPSS公司，Chicago,IL)估计ID50值(产生50％的血栓形成抑制的剂量)。
可在使用C1-酯酶抑制剂缺陷型小鼠的伊文思蓝染料外渗测定(Evans Blue dyeextravasation assay)中显示这些化合物的抗炎效应。在该模型中，向小鼠投用本发明化合物，经由尾静脉注射伊文思蓝染料，且通过分光光度计方式自组织提取物确定蓝色染料的外渗。
可在体外灌注***中或通过停跳手术操作在较大哺乳动物(包括狗和狒狒)中测试本发明化合物减轻或预防全身性发炎响应综合征的能力，例如如在停跳心血管操作期间所观察到的。用以评价本发明化合物的益处的读出值包括例如减小的血小板损失、减小的血小板/白细胞复合物、减小的血浆中的中性粒细胞弹性蛋白酶含量、减小的补体因子活化和减小的接触活化蛋白(血浆激肽释放酶、因子XII、因子XI、高分子量激肽原、C1-酯酶抑制剂)的活化和/或消耗。
本发明化合物还可用作其他丝氨酸蛋白酶(尤其人类凝血酶、人类血浆激肽释放酶和人类纤溶酶)的抑制剂。由于其抑制作用，指示这些化合物用于预防或治疗生理学反应，包括血液凝固、纤维蛋白溶解、血压调控和发炎，以及上述种类的酶催化的伤口愈合。具体而言，这些化合物可用作治疗因上述丝氨酸蛋白酶的升高凝血酶活性所致的疾病(例如心肌梗塞)的药物，且可用作在出于诊断及其他商业目的将血液处理为血浆时用作抗凝血剂的试剂。
V.药物组合物、制剂及组合
本发明化合物可以诸如片剂、胶囊(其各自包括持续释放或定时释放制剂)、丸剂、粉剂、颗粒剂、酏剂、酊剂、悬浮液、糖浆和乳液等经口剂型施用。其还可以静脉内(浓注或输注)、腹膜腔内、皮下或肌内形式施用，且皆使用药学领域普通技术人员公知的剂型。其可单独施用，但通常将与基于所选施用途径和标准药学实践选择的药物载体一起施用。
术语“药物组合物”意指包含本发明化合物与至少一种其他药学上可接受的载体的组合的组合物。“药学上可接受的载体”是指本领域公认用于将生物活性剂递送至动物(具体而言哺乳动物)的介质，包括(即)佐剂、赋形剂或媒介物，例如稀释剂、防腐剂、填充剂、流动调控剂、崩解剂、润湿剂、乳化剂、悬浮剂、增甜剂、矫味剂、芳香剂、抗细菌剂、抗真菌剂、润滑剂和分散剂，取决于施用模式和剂型的性质而定。药学上可接受的载体根据本领域普通技术人员公知的多种因素来调配。这些因素包括但不限于：所调配活性剂的类型和性质；含有活性剂的组合物欲施用的个体；组合物的预定施用途径；和所靶向的治疗适应症。药学上可接受的载体包括水性和非水性液体介质两者，以及多种固体和半固体剂型。此类载体除活性剂外可包括多种不同成分和添加剂，这些其他成分由于本领域普通技术人员公知的各种原因(例如，稳定活性剂、粘合剂等)包括于制剂中。关于药学上可接受的适宜载体及其选择中所涉及的因素的说明参见多个易于获得的来源，例如，Remington'sPharmaceutical Sciences，第18版(1990)。
当然，本发明化合物的剂量方案将取决于诸如以下等已知因素而变：具体药剂的药效学特征及其施用模式和途径；接受者的物种、年龄、性别、健康状况、医学病况和体重；症状的性质和程度；同时治疗的种类；治疗频率；施用途径、患者的肾和肝功能及期望效应。医师或兽医可确定预防、抵消或阻止血栓栓塞性病症的进展所需药物的有效量并开处方。
借助一般指导，当用于指定效应时，每一活性成分的日口服剂量将介于约0.001mg/kg体重至约1000mg/kg体重之间，优选介于约0.01mg/kg体重/天至约100mg/kg体重/天之间，且最优选介于约0.1mg/kg/天至约20mg/kg/天之间。在恒速输注期间，静脉内最优选剂量将介于约0.001mg/kg/分钟至约10mg/kg/分钟的范围内。本发明化合物可以单一日剂量施用，或总日剂量可以每日两次、三次或四次的分开剂量施用。
还可通过肠胃外施用(例如，静脉内、动脉内、肌内或皮下)施用本发明化合物。在静脉内或动脉内施用时，可连续或间歇性给予剂量。此外，可开发用于肌内和皮下递送的制剂以确保逐渐释放活性药物成分。在一个实施方案中，药物组合物为固体制剂，例如经喷雾干燥的组合物，其可原样使用，或医师或患者在使用前向其添加溶剂和/或稀释剂。
本发明化合物可以鼻内形式经由局部使用适宜鼻内媒介物或经由经皮途径使用经皮皮肤贴片施用。在以经皮递送***形式施用时，在整个剂量方案期间当然将连续而非间断性地施用剂量。
化合物通常以与根据既定施用形式(例如，口服片剂、胶囊、酏剂和糖浆)适当选择且符合常规药学实践的适宜药物稀释剂、赋形剂或载体(在本文中统称为药物载体)的混合物来施用。
举例而言，对于片剂或胶囊形式的口服施用而言，活性药物组分可与口服、无毒、药学上可接受的惰性载体(诸如乳糖、淀粉、蔗糖、葡萄糖、甲基纤维素、硬脂酸镁、磷酸二钙、硫酸钙、甘露醇、山梨醇等)组合；对于液体形式的口服施用而言，口服药物组分可与任一口服、无毒、药学上可接受的惰性载体(诸如乙醇、甘油、水等)组合。另外，在期望或需要时，还可将适宜粘合剂、润滑剂、崩解剂和着色剂掺入混合物中。适宜粘合剂包括淀粉、明胶、天然糖(诸如葡萄糖或β-乳糖)、玉米增甜剂、天然及合成胶(诸如***胶、黄蓍胶或藻酸钠)、羧甲基纤维素、聚乙二醇、蜡等。用于这些剂型中的润滑剂包括油酸钠、硬脂酸钠、硬脂酸镁、苯甲酸钠、乙酸钠、氯化钠等。崩解剂包括不限于淀粉、甲基纤维素、琼脂、膨润土、黄原胶等。
本发明化合物还可以脂质体递送***形式(诸如小单室囊泡、大单室囊泡和多室囊泡)施用。脂质体可自多种磷脂(诸如胆固醇、硬脂胺或磷脂酰胆碱)形成。
本发明化合物还可与作为可靶向药物载体的可溶性聚合物偶联。这些聚合物可包括聚乙烯基吡咯烷酮、吡喃共聚物、聚羟丙基甲基丙烯酰胺-苯酚、聚羟乙基天冬酰胺苯酚或经棕榈酰残基取代的聚环氧乙烷-聚赖氨酸。此外，本发明化合物可与一类可用于达成药物的受控释放的生物可降解聚合物偶联，例如聚乳酸、聚乙醇酸、聚乳酸和聚乙醇酸的共聚物、聚ε己内酯、聚羟基丁酸、聚原酸酯、聚缩醛、聚二氢吡喃、聚氰基丙烯酸酯和水凝胶的交联或两亲性嵌段共聚物。固体分散物也称作固态分散物。在一些实施方案中，本文所述任一化合物调配为经喷雾干燥的分散物(SDD)。SDD为药物于聚合物基质中的单相无定形分子分散物。其通过将药物和聚合物溶解于溶剂(例如，丙酮、甲醇等)中并将溶液喷雾干燥制备的固体溶液。溶剂自液滴快速蒸发，其将以无定形形式捕获药物的聚合物和药物混合物快速固化为无定形分子分散物。
适于施用的剂型(药物组合物)可含有约1毫克至约1000毫克活性成分/剂量单位。在这些药物组合物中，以组合物的总重量计，活性成分通常将以约0.1重量％至95重量％的量存在。
明胶胶囊可含有活性成分和载体粉末，例如乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。可使用类似稀释剂来制备压制片剂。可将片剂和胶囊两者制成持续释放产品以在数小时时段内连续释放药物。压制片剂可经糖包衣或薄膜包衣以掩蔽任何不良味道并防止片剂受到大气影响，或经肠包衣以选择性地在胃肠道中崩解。
用于口服施用的液体剂型可含有着色剂和矫味剂以提高患者接受性。
通常，水、适宜油、盐水、水性右旋糖(葡萄糖)及相关糖溶液和二醇(诸如丙二醇或聚乙二醇)为肠胃外溶液的适宜载体。用于肠胃外施用的溶液优选含有活性成分的水溶性盐、适宜稳定剂和(如果需要)缓冲物质。诸如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗坏血酸等单独或组合的抗氧化剂为适宜稳定剂。还使用柠檬酸及其盐和EDTA钠。另外，肠胃外溶液可含有防腐剂，诸如苯扎氯铵(benzalkonium chloride)、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和氯丁醇。
适宜药物载体述于Remington's Pharmaceutical Sciences,Mack PublishingCompany中，期为本领域中的标准参考文献。
倘若将本发明化合物与其他抗凝血剂组合，则日剂量可为例如约0.1毫克至约100毫克本发明化合物和约0.1毫克至约100毫克/千克患者体重。对于片剂剂型，本发明化合物通常可以约5毫克/剂量单位至约300毫克/剂量单位的量存在，且第二抗凝血剂可以约1毫克/剂量单位至约500毫克/剂量单位的量存在。
倘若本发明化合物根据一般指导与抗血小板剂组合施用，则日剂量通常可为约0.01毫克至约300毫克本发明化合物和约50毫克至约150毫克抗血小板剂/千克患者体重、优选约0.1毫克至约4毫克本发明化合物和约1毫克至约3毫克抗血小板剂/千克患者体重。
倘若本发明化合物与血栓溶解剂组合施用，则日剂量通常可为约0.1毫克至约100毫克本发明化合物/千克患者体重，且在血栓溶解剂的情形下，在与本发明化合物一起施用时，血栓溶解剂单独施用时的常用剂量可减小约50-80％。
具体而言，在以单一剂量单位提供时，组合的活性成分之间可能存在化学相互作用。出于此原因，在本发明化合物和第二治疗剂以单一剂量单位组合时，其经调配使得尽管活性成分以单一剂量单位组合，但活性成分之间的物理接触降至最低(即减小)。举例而言，一种活性成分可经肠包衣。通过一种活性成分的肠包衣，不仅可能将组合活性成分之间的接触降至最低，且还可能控制这些组分中的一种在胃肠道中的释放，使得这些组分中的一种不在胃中释放而在肠中释放。一种活性成分还可经一种材料包衣，所述材料影响在整个胃肠道中的持续释放且还用于使组合活性成分之间的物理接触降至最低。此外，持续释放组分可另外经肠包衣，使得仅在肠中释放该组分。另一方式会涉及组合产品的调配，其中一种组分经持续释放和/或肠释放聚合物包衣，且另一组分还经聚合物(诸如低粘度等级的羟丙基甲基纤维素(HPMC)或如本领域已知的其他适当材料)包衣，以进一步分离活性组分。聚合物包衣用于形成与另一组分相互作用的额外屏障。
根据本公开内容，本领域普通技术人员将易于明了将以单一剂型施用或在相同时间通过相同方式以分开形式施用的本发明组合产品中的组分之间的接触降至最低的这些以及其他方式。
在另一实施方案中，本发明提供进一步包含选自以下的其他治疗剂的药物组合物：钾通道开放剂、钾通道阻断剂、钙通道阻断剂、钠氢交换抑制剂、抗心律不整剂、抗动脉粥样硬化剂、抗凝血剂、抗血栓剂、促血栓溶解剂、纤维蛋白原拮抗剂、利尿剂、抗高血压剂、ATP酶抑制剂、盐皮质激素受体拮抗剂、磷酸二酯酶抑制剂、抗糖尿病剂、抗炎剂、抗氧化剂、血管生成调节剂、抗骨质疏松剂、激素替代疗法、激素受体调节剂、口服避孕剂、抗肥胖剂、抗抑郁剂、抗焦虑剂、抗精神病剂、抗增殖剂、抗肿瘤剂、抗溃疡和胃食管返流疾病剂、生长激素剂和/或生长激素促分泌素、甲状腺模拟物、抗感染剂、抗病毒剂、抗细菌剂、抗真菌剂、胆固醇/脂质降低剂和脂质谱疗法(lipid profile therapy)和模拟缺血预处理和/或心肌顿抑的药剂或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供进一步包含选自以下的其他治疗剂的药物组合物：抗心律不整剂、抗高血压剂、抗凝血剂、抗血小板剂、凝血酶抑制剂、血栓溶解剂、纤维蛋白溶解剂、钙通道阻断剂、钾通道阻断剂、胆固醇/脂质降低剂或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供进一步包含选自以下的其他治疗剂的药物组合物：华法林、未分级肝素、低分子量肝素、合成五糖、水蛭素、阿加曲班、阿斯匹林、布洛芬、萘普生、舒林酸、吲哚美辛、甲芬那酸酯、双嘧达莫(dipyridamol)、屈噁昔康、双氯芬酸、苯磺唑酮、吡罗昔康、噻氯匹定、氯吡格雷、替罗非班、埃替非巴肽、阿昔单抗、美拉加群、希美加群(ximelagatran)、二硫酸水蛭素、组织血纤维蛋白溶酶原活化剂、经修饰的组织血纤维蛋白溶酶原活化剂、阿尼普酶、尿激酶和链球菌激酶或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其中其他治疗剂选自以下的抗高血压剂：ACE抑制剂、AT-1受体拮抗剂、β-肾上腺素能受体拮抗剂、ETA受体拮抗剂、双重ETA/AT-1受体拮抗剂、肾素抑制剂(阿利吉仑(aliskiren))和血管肽酶抑制剂；选自IKur抑制剂的抗心律不整剂、选自以下的抗凝血剂：凝血酶抑制剂、抗凝血酶-III活化剂、肝素辅因子II活化剂、其他因子XIa抑制剂、其他激肽释放酶抑制剂、血纤维蛋白溶酶原活化剂抑制剂(PAI-1)拮抗剂、凝血酶可活化纤维蛋白溶解抑制剂(TAFI)抑制剂、因子VIIa抑制剂、因子IXa抑制剂和因子Xa抑制剂；或选自以下的抗血小板剂：GPIIb/IIIa阻断剂、GP Ib/IX阻断剂、蛋白酶活化受体1(PAR-1)拮抗剂、蛋白酶活化受体4(PAR-4)拮抗剂、***素E2受体EP3拮抗剂、胶原受体拮抗剂、磷酸二酯酶-III抑制剂、P2Y1受体拮抗剂、P2Y12拮抗剂、凝血脂素受体拮抗剂、环氧合酶-1抑制剂和阿斯匹林；或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其中其他治疗剂为抗血小板剂或其组合。
在另一实施方案中，本发明提供药物组合物，其中其他治疗剂为抗血小板剂氯吡格雷。
本发明化合物可单独施用或与一或多种其他治疗剂组合施用。“组合施用”或“组合疗法”意指将本发明化合物及一或多种其他治疗剂同时施用所治疗哺乳动物。在组合施用时，每一组分可同时施用或在不同时间点以任一顺序依序施用。因此，可分开施用每一组分，但时间足够接近以提供期望治疗效应。
可与本发明化合物组合施用的化合物包括但不限于抗凝血剂、抗凝血酶剂、抗血小板剂、纤维蛋白溶解剂、降血脂剂、抗高血压剂和抗缺血剂。
可与本发明化合物组合使用的其他抗凝血剂(或凝血抑制剂)包括华法林、肝素(未分级肝素或任一市售低分子量肝素，例如，
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))、合成五糖、直接作用的凝血酶抑制剂(包含水蛭素和阿加曲班)以及其他因子VIIa抑制剂、因子IXa抑制剂、因子Xa抑制剂(例如，
Figure BDA0003662031630000492
阿哌沙班、利伐沙班、LY-517717、DU-176b、DX-9065a和公开于WO 98/57951、WO03/026652、WO 01/047919和WO 00/076970中的那些)、因子XIa抑制剂和本领域已知的活化TAFI和PAI-1的抑制剂。
本文使用的术语抗血小板剂(或血小板抑制剂)表示通过(例如)抑制血小板的聚集、粘附或粒子内容物分泌来抑制血小板功能的药剂。这些药剂包括但不限于各种已知的非甾体抗炎药(NSAID)，诸如对乙酰氨基酚(acetaminophen)、阿斯匹林、可待因(codeine)、双氯芬酸、屈噁昔康、芬太尼(fentaynl)、布洛芬、吲哚美辛、酮咯酸(ketorolac)、甲芬那酸酯、***(morphine)、萘普生、非那西汀(phenacetin)、吡罗昔康、舒芬太尼(sufentanyl)、苯磺唑酮、舒林酸及其药学上可接受的盐或前药。在NSAID中，优选阿斯匹林(乙酰基水杨酸或ASA)和吡罗昔康。其他适宜血小板抑制剂包括糖蛋白IIb/IIIa拮抗剂(例如，替罗非班、埃替非巴肽、阿昔单抗和引替瑞林(integrelin))、凝血脂素-A2-受体拮抗剂(例如，伊非曲班(ifetroban))、凝血脂素-A-合成酶抑制剂、磷酸二酯酶-III(PDE-III)抑制剂(例如，双嘧达莫、西洛他唑(cilostazol))和PDE-V抑制剂(诸如西地那非(sildenafil))、蛋白酶活化受体1(PAR-1)拮抗剂(例如，E-5555、SCH-530348、SCH-203099、SCH-529153和SCH-205831)及其药学上可接受的盐或前药。
与本发明化合物组合使用的适宜抗血小板剂的其他实例(含有或不含阿斯匹林)为ADP(二磷酸腺苷)受体拮抗剂，优选嘌呤型受体P2Y1和P2Y12的拮抗剂，且更优选P2Y12拮抗剂。优选的P2Y12受体拮抗剂包括氯吡格雷、噻氯匹定、普拉格雷(prasugrel)、替格雷洛(ticagrelor)和坎格雷洛(cangrelor)及其药学上可接受的盐或前药。噻氯匹定和氯吡格雷也是优选的化合物，这是因为已知其在使用中对胃肠道较阿斯匹林更温和。氯吡格雷位更优选的药剂。
优选的实例为本发明化合物、阿斯匹林和另一抗血小板剂的三元组合。优选地，抗血小板剂为氯吡格雷或普拉格雷，更优选氯吡格雷。
本文使用的术语凝血酶抑制剂(或抗凝血酶剂)表示丝氨酸蛋白酶凝血酶的抑制剂。通过抑制凝血酶，破坏各种凝血酶介导的过程，诸如凝血酶介导的血小板活化(即，例如，血小板聚集和/或血小板粒子内容物(包括血清素)的分泌)和/或纤维蛋白形成。多种凝血酶抑制剂为本领域技术人员已知且预期这些抑制剂可与本发明化合物组合使用。此类抑制剂包括但不限于硼酸精氨酸衍生物、硼酸肽、肝素、水蛭素、阿加曲班、达比加群、AZD-0837及公开于WO 98/37075和WO 02/044145中的那些，及其药学上可接受的盐和前药。硼酸精氨酸衍生物和硼酸肽包括硼酸的N-乙酰基和肽衍生物，诸如赖氨酸、鸟氨酸、精氨酸、高精氨酸的C-末端a-氨基硼酸衍生物及其相应异硫脲鎓类似物。本文使用的术语水蛭素包括水蛭素的适宜衍生物或类似物，其在本文中称为水蛭素类似物，诸如二硫酸水蛭素。
本文使用的术语血栓溶解(或纤维蛋白溶解)剂(或血栓溶解剂或纤维蛋白溶解剂)表示溶解血凝块(血栓)的药剂。此类药剂包括组织血纤维蛋白溶酶原活化剂(天然或重组TPA)及其经修饰形式、阿尼普酶、尿激酶、链球菌激酶、替奈普酶(tenecteplase)(TNK)、拉诺替普酶(lanoteplase)(nPA)、因子VIIa抑制剂、凝血酶抑制剂、因子IXa、Xa和XIa的抑制剂、PAI-I抑制剂(即，组织血纤维蛋白溶酶原活化物抑制剂的钝化剂)、活化TAFI的抑制剂、α-2-抗纤维蛋白溶酶抑制剂和茴酰化血纤维蛋白溶酶原链球菌激酶活化剂复合物，包括其药学上可接受的盐或前药。本文使用的术语阿尼普酶是指茴酰化血纤维蛋白溶酶原链球菌激酶活化剂复合物，如例如欧洲专利申请第028489号中所述，其公开内容以引用方式并入本文中。本文使用的术语尿激酶意欲表示双链和单链尿激酶，后者在本文中亦称为尿激酶原。
与本发明化合物组合使用的适宜胆固醇/脂质降低剂和脂质谱疗法的实例包括HMG-CoA还原酶抑制剂(例如，普伐他汀(pravastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、斯伐他汀(simvastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、瑞舒伐他汀(rosuvastatin)及其他他汀)、低密度脂蛋白(LDL)受体活性调节剂(例如，HOE-402、PCSK9抑制剂)、胆汁酸螯合剂(例如，消胆胺(cholestyramine)和考来替泊(colestipol))、烟酸或其衍生物(例如，
Figure BDA0003662031630000511
)、GPR109B(烟酸受体)调节剂、非诺贝酸(fenofibricacid)衍生物(例如，吉非罗齐(gemfibrozil)、氯贝特(clofibrate)、非诺贝特(fenofibrate)和苯扎贝特(benzafibrate))及其他过氧化物酶体增殖物活化受体(PPAR)α调节剂、PPARδ调节剂(例如，GW-501516)、PPARγ调节剂(例如，罗格列酮(rosiglitazone))、具有调节PPARα、PPARγ和PPARδ的各种组合的活性的多官能基的化合物、匹洛布克(probucol)或其衍生物(例如，AGI-1067)、胆固醇吸收抑制剂和/或尼曼-匹克(Niemann-Pick)C1样转运蛋白抑制剂(例如，依折麦布(ezetimibe))、胆固醇酯转移蛋白抑制剂(例如，CP-529414)、角鲨烯合酶抑制剂和/或角鲨烯环氧酶抑制剂或其混合物、酰基辅酶A:胆固醇基酰基转移酶(ACAT)1抑制剂、ACAT2抑制剂、双重ACAT1/2抑制剂、回肠胆汁酸转运抑制剂(或顶端钠共依赖性胆汁酸转移抑制剂)、微粒体甘油三酯转移蛋白质抑制剂、肝-X-受体(LXR)α调节剂、LXRβ调节剂、LXR双重α/β调节剂、FXR调节剂、ω3脂肪酸(例如，3-PUFA)、植物固醇和/或植物固醇的脂肪酸酯(例如，用于
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人造奶油中的谷甾烷醇(sitostanol))、内皮脂酶抑制剂和活化胆固醇逆转运的HDL功能模拟物(例如，apoAI衍生物或apoAI肽模拟物)。
本发明化合物还可在涉及凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的抑制的测试或测定中用作标准或参考化合物，例如用作品质标准品或对照。此类化合物可以商业试剂盒提供以例如用于涉及凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的药物研究中。举例而言，本发明化合物可在测定中用作参考以比较其已知活性与具有未知活性的化合物。这将确保实验者正确实施测定且提供比较依据，尤其在测试化合物为参考化合物的衍生物时。在研发新的测定或方案时，可使用本发明化合物测试其有效性。
本发明化合物还可用于涉及凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的诊断测定中。举例而言，可通过将相关发色底物(例如因子XIa的S2366)添加至一系列含有测试样品和任选一种本发明化合物的溶液中确定凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶在未知样品中的存在。如果在含有测试样品但不存在本发明化合物的溶液中观察到产生pNA，则可推断存在因子XIa。
还可在涉及血清样品中的凝血酶、因子VIIa、IXa、Xa、XIa和/或血浆激肽释放酶的定量的诊断测定中使用本发明的极有效且具选择性的化合物，即针对靶蛋白酶的Ki值小于或等于0.001μM且针对其他蛋白酶的Ki大于或等于0.1μM的那些。举例而言，血清样品中的因子XIa的量可通过在相关发色底物S2366存在下用本发明的有效因子XIa抑制剂谨慎滴定蛋白酶活性来确定。
本发明还涵盖制品。本文使用的制品意欲包括但不限于试剂盒和包装。本发明制品包含：(a)第一容器；(b)位于所述第一容器内的药物组合物，其中所述组合物包含：包含本发明化合物或其药学上可接受的盐形式的第一治疗剂；和(c)包装插页，其陈述，所述药物组合物可用于治疗血栓栓塞性和/或炎性病症(如先前所定义)。在另一实施方案中，包装插页陈述，所述药物组合物可与第二治疗剂组合(如先前所定义)以治疗血栓栓塞性和/或炎性病症。制品可进一步包含：(d)第二容器，其中组分(a)和(b)位于所述第二容器内且组分(c)位于所述第二容器内或外侧。位于第一和第二容器内意指相应容器将物品容纳于其边界内。
第一容器为用于容纳药物组合物的贮器。该容器可用于制造、储存、运送和/或个别/整体出售。第一容器意欲涵盖瓶、罐、小瓶、烧瓶、注射器、管(例如，用于乳膏制备)或用于制造、容纳、储存或分配药物产品的任何其他容器。
第二容器为用于容纳第一容器和任选包装插页的贮器。第二容器的实例包括但不限于盒(例如，纸板盒或塑料盒)、条板箱、纸板箱、袋(例如，纸袋或塑料袋)、小袋和包。包装插页可经由胶带、胶水、U形钉或另一附接方法物理附接至第一容器外侧，或其可位于第二容器内侧，未经任何物理方式附接至第一容器。或者，包装插页位于第二容器外侧。当位于第二容器外侧时，包装插页优选经由胶带、胶水、U形钉或另一附接方法物理附接。或者，其可不经物理附接相邻或接触第二容器外侧。
包装插页为标记、标签、标记物等，其列举与位于第一容器内的药物组合物相关的信息。所列举信息通常将由管理欲出售制品的地区的管理机构(例如，美国食品药品管理局(United States Food and Drug Administration))确定。优选地，包装插页明确列举已批准使用药物组合物的适应症。包装插页可由任一材料制得，可在该材料上阅读其中或其上所含的信息。优选地，包装插页为其上已形成(例如，印刷或施加)期望信息的可印刷材料(例如，纸、塑料、纸板、箔、粘合剂背衬纸或塑料等)。
根据实例性实施方案的以下说明将明了本发明的其他特征，这些实例性实施方案用于说明本发明且不意欲限制本发明。以下实施例使用本文所公开的方法制备、分离和表征。
VI.包括方案的一般合成
本发明化合物可通过有机化学领域技术人员可用的多种方法来合成(Maffrand,J.P.等人，Heterocycles,16(1):35-37(1981))。下文阐述制备本发明化合物的一般合成方案。这些方案为说明性的且不意欲限制本领域技术人员可用于制备本文所公开化合物的可能技术。本领域普通技术人员将明了制备本发明化合物的不同方法。另外，可以替代顺序实施合成中的多个步骤以得到期望化合物。
通过一般方案中描述的方法制备的本发明化合物的实例在下文所述的中间体和实施例部分中给出。纯手性实例的制备可通过本领域技术人员已知的技术来实施。举例而言，纯手性化合物可通过使用手性相制备型HPLC分离外消旋产物来制备。或者，实施例化合物可通过已知产生富含对映异构体的产物的方法来制备。这些方法包括但不限于在外消旋中间体中掺入手性辅助官能基，其用于控制转变的非对映异构选择性，从而在所述手性辅助官能基裂解后提供富含对映异构体的产物。
本发明化合物可以多种有机合成领域技术人员已知的方式来制备。本发明化合物可使用下述方法以及合成有机化学领域中已知的合成方法，或通过其如本领域普通技术人员所了解的变化形式来合成。优选方法包括但不限于下文所述的那些。这些反应在适合于所用试剂和材料且适合于所实现转变的溶剂或溶剂混合物中进行。有机合成领域技术人员应了解，存于分子上的官能基应与所提出的转变一致。有时此需要判断以修改合成步骤的顺序或选择一种而非另一种具体方法方案，以获得本发明的期望化合物。
还应认识到，在本领域中计划任一合成途径时，另一主要考虑因素为慎重选择用于保护存于本发明所述化合物中的反应官能基的保护基团。描述经训练从业者的多种选择的权威记载为Greene等人(Protective Groups in Organic Synthesis，第4版，Wiley-Interscience(2006))。
本发明的代表性嘧啶酮化合物1a可如方案1中所述来制备。使用Xiao(OrganicLetters,11:1421(2009))所述的改进操作，在HATU和DBU存在下，在诸如CH3CN等溶剂中，适宜经取代的嘧啶-4-醇衍生物1b可与适当经取代的大环胺1c偶联，以提供嘧啶酮化合物1a。当环A为经SEM保护的咪唑环时，需要采用4M HCl/二噁烷或TFA/DCM的另一去保护步骤提供本发明化合物。
方案1
Figure BDA0003662031630000541
方案2描述适宜取代的嘧啶-4-醇衍生物1b的合成。在诸如许尼希碱或磷酸钾等碱存在下，在诸如甲苯和乙醇等溶剂混合物或THF中，使用诸如Pd(PPh3)4或第2代Xphos等前催化剂使6-氯嘧啶-4-醇(2a)和适当取代的芳基或杂芳基硼酸或酯2c之间发生铃木-宫浦偶联(Suzuki-Miyaura coupling)，提供1b。或者，在使用4-氯-6-甲氧基嘧啶2b时，需要在高温采用HBr水溶液的另一去保护步骤以提供嘧啶-4-醇衍生物1b。
方案2
Figure BDA0003662031630000551
根据方案3中所概述的一般方法，用于制备其中环A为6员杂环基(实例-吡啶)的本发明化合物的中间体可衍生自适当取代的醛3a。在无水硫酸铜或碳酸铯存在下，在诸如DCM等溶剂中，使由Negi(Synthesis,991(1996))所述的改进操作制备的醛3a(X＝N)与(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺缩合，产生亚磺酰亚胺3b(Ellman,J.,J.Org.Chem.,64:1278(1999))。使用由Kuduk(Tetrahedron Letters,45:6641(2004))所述的改进操作，可将适宜取代的Grignard试剂(例如烯丙基溴化镁)添加至亚磺酰亚胺3b，以产生呈非对映异构体混合物的亚磺酰胺3c，其可在该序列的各个阶段分离。将烯丙基溴化镁添加至亚磺酰亚胺3b的非对映异构选择性可通过根据Xu(Xu,M.-H.,Org.Lett.,10(6):1259(2008))的改进操作采用氯化铟(III)来改善。保护基团互相转化可在两个步骤中完成，以产生3d。关键亚单位偶联经由由Sames(J.Am.Chem.Soc,131:3042(2009))开发的方法来完成。在催化性Pd(OAc)2和P(nBu)Ad2存在下用经N-保护的硝基吡唑3e处理氯吡啶3d制出期望芳基吡唑键，从而形成3f。还原该硝基吡唑，从而产生3g。然后可使用
Figure BDA0003662031630000562
和诸如吡啶等碱使该氨基吡唑与适当取代的羧酸3h偶联，以产生酰胺3i。可使用诸如Grubbs(II)等催化剂在诸如EtOAc等适宜溶剂中于高温经由闭环易位使二烯环化，以产生含有吡啶的大环3j。可在钯/碳或氧化铂上利用氢还原烯烃。随后如方案1中所述利用嘧啶醇3k实施第二偶联反应以产生嘧啶酮3l。随后利用TFA/DCM或4M HCl/二噁烷使吡唑去保护，之后与芳基碘进行Ullmann偶联，从而得到3m作为主要区域异构体。如果形成3n，则其为产物混合物的次要组分。
方案3
Figure BDA0003662031630000561
如3n等化合物可遵循方案4中的合成操作以排他性产物形式获得。所有操作皆类似于方案3中的那些直至吡唑偶联反应。近似取代的硝基吡唑4a在方案3中所述的相同条件下产生所示区域异构体吡唑4b。还原成4c、用3h酰胺化以形成4d和闭环易位以形成大环4e也以类似方式发生。还原烯烃并去保护，之后嘧啶醇偶联，如方案1和3中所述。
方案4
Figure BDA0003662031630000571
合成众多种可用作制备本发明化合物的起始材料的经取代吡啶化合物的方法为本领域公知且已广泛评论。(可用于制备吡啶起始材料的方法的实例参见：Kroehnke,F.,Synthesis,1(1976)；Abramovitch,R.A.编辑，"Pyridine and Its Derivatives",TheChemistry of Heterocyclic Compounds,14(增刊1-4),John Wiley&Sons,New York(1974)；Boulton,A.J.等人编辑，ComprehensiveHeterocyclic Chemistry,2:165-524,Pergamon Press,New York(1984)；McKillop,A.编辑，Comprehensive HeterocyclicChemistry,5:1-300,Pergamon Press,New York(1996))。
中间体和最终产物的纯化经由正相或反相色谱来实施。除非另外指示，否则正相色谱使用预先充填的SiO2柱以己烷和EtOAc或DCM和MeOH的梯度洗脱来实施。反相制备型HPLC使用C18管柱以溶剂A(90％水，10％MeOH，0.1％TFA)和溶剂B(10％水，90％MeOH，0.1％TFA，UV 220nm)的梯度或以溶剂A(90％水，10％ACN，0.1％TFA)和溶剂B(10％水，90％ACN，0.1％TFA，UV 220nm)的梯度或以溶剂A(98％水，2％ACN，0.05％TFA)和溶剂B(98％ACN，2％水，0.05％TFA，UV 220nm)的梯度洗脱，(或)使用SunFire Prep C18 OBD 5μ30×100mm，以0-100％B的25min梯度洗脱来实施。A＝H2O/ACN/TFA 90:10:0.1。B＝ACN/H2O/TFA 90:10:0.1。
除非另有所述，否则最终产物的分析通过反相分析型HPLC来实施。
方法A：Waters SunFire管柱(3.5μm C18，3.0×150mm)。使用10-100％溶剂B运行12min，然后100％溶剂B运行3min的梯度洗脱(0.5mL/min)。溶剂A为(95％水，5％乙腈，0.05％TFA)且溶剂B为(5％水，95％乙腈，0.05％TFA，UV 254nm)。
方法B：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7-μm粒子；流动相A：5:95乙腈:水，含有10mM乙酸铵；流动相B：95:5乙腈:水，含有10mM乙酸铵；温度：50℃；梯度：0-100％B经3分钟，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.11mL/min。
方法C：Waters Acquity UPLC BEH C18,2.1×50mm,1.7-μm粒子；流动相A：5:95乙腈:水，含有0.1％TFA；流动相B：95:5乙腈:水，含有0.1％TFA；温度：50℃；梯度：0-100％B经3分钟，然后在100％B下保持0.75分钟；流速：1.11mL/min。
方法X：
Figure BDA0003662031630000581
SB C18管柱(4.6×75mm)。使用0-100％溶剂B运行8min，然后100％溶剂B运行2min的梯度洗脱(2.5mL/min)。溶剂A为(90％水，10％MeOH,0.02％H3PO4)且溶剂B为(10％水，90％MeOH，0.02％H3PO4，UV 220nm)。
实施例
实施例1.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000591
1A.1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑的制备
将Cs2CO3(14.41g,44.2mmol)悬浮于4-硝基-1H-吡唑(5.00g,44.2mmol)和DMF(40mL)的溶液中。在加热至120℃并保持5min后，经20min以10等份添加固体2-氯-2,2-二氟乙酸钠(13.48g,88mmol)。在再加热10min后，反应完成。将混合物添加至含有100mL水的分液漏斗中并用Et2O(2×50mL)萃取。浓缩合并的有机层。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱纯化产生澄清无色油状1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(6.99g,42.9mmol,97％产率)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.58(s,1H),8.22(s,1H),7.39-7.05(t,J＝60Hz,1H)。
1B.(S)-(1-(4-(1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的500mL圆底烧瓶(RBF)中添加如实施例3中所述制备的(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-4-基)氨基甲酸叔丁酯(10g,35.4mmol)、1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑(6.34g,38.9mmol)和二噁烷(100mL)。将溶液用N2鼓泡5min。然后添加Pd(OAc)2(0.40g,1.7mmol)、二(金刚烷-1-基)(丁基)膦(1.27g,3.5mmol)、K2CO3(14.7g,106mmol)和PvOH(1.08g,10.61mmol)。将反应混合物用N2鼓泡5min，然后将反应混合物加热至100℃并保持3h。此时间后，将溶液冷却至室温并添加水(200mL)。然后用EtOAc(2×200mL)萃取反应混合物。用水(200mL)、盐水(200mL)洗涤合并的有机萃取物，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱纯化产生浅黄色油状(S)-(1-(4-(1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(12.91g,31.5mmol,89％产率)。MS(ESI)m/z:410.4[M+H]+。1NMR(400MHz,CDCl3)δ8.80(dd,J＝5.1,0.7Hz,1H),8.36(s,1H),7.34(s,1H),7.31(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),7.27-6.91(t,J＝58Hz,1H),5.79-5.63(m,1H),5.16-5.03(m,2H),4.92(d,J＝5.9Hz,1H),2.67(t,J＝6.4Hz,2H),1.46(br.s.,9H)。
1C.(S)-(1-(4-(4-氨基-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向100mL 3颈圆底烧瓶中添加(S)-(1-(4-(1-(二氟甲基)-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.78g,1.90mmol)于MeOH(12mL)中的溶液和NH4Cl(1.02g,19mmol)于水(3mL)中的溶液。向溶液中添加Fe(0.53g,9.49mmol)。将反应混合物加热至65℃并保持3h。添加水(50mL)。在冷却至室温后，经由
Figure BDA0003662031630000601
垫过滤混合物并用MeOH(200mL)清洗。在真空中浓缩滤液。在EtOAc(100mL)与水(100mL)之间分配残余物。分离有机相，用水(100mL)、盐水(100mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱纯化产生油状(S)-(1-(4-(4-氨基-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.585g,1.54mmol,81％产率)。MS(ESI)m/z:380.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(dd,J＝5.0,0.7Hz,1H),7.43(s,1H),7.36(s,1H),7.32(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),7.28-6.97(t,J＝58Hz,1H),5.80-5.66(m,1H),5.65-5.53(m,1H),5.13-5.03(m,2H),4.87(br.s.,1H),3.22(br.s,2H),2.65(t,J＝6.5Hz,2H),1.52-1.37(m,9H)。
1D.((S)-1-(4-(1-(二氟甲基)-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的3颈250mL圆底烧瓶中添加(S)-(1-(4-(4-氨基-1-(二氟甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(5g,13.18mmol)和EtOAc(50mL)的溶液。使溶液冷却至-10℃并添加如实施例2中制备的(R)-2-甲基丁-3-烯酸(1.72g,17.13mmol)、吡啶(4.26mL,52.7mmol)和
Figure BDA0003662031630000602
(23.54mL,39.5mmol)。移除冷却浴并使溶液升温至室温，然后搅拌20h的时段。添加水(30mL)和EtOAc(30mL)并将混合物搅拌30min。分离有机相并用EtOAc(30mL)萃取水层。用盐水(50mL)洗涤合并的有机萃取物，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱纯化产生((S)-1-(4-(1-(二氟甲基)-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(5.69g,12.33mmol,94％产率)。MS(ESI)m/z:462.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.75(dd,J＝5.0,0.6Hz,1H),8.37(s,1H),7.32(t,J＝59Hz,1H),7.28(br.s.,1H),7.20(s,1H),5.97-5.85(m,1H),5.78-5.65(m,1H),5.56-5.44(m,1H),5.28-5.19(m,2H),5.12(d,J＝2.0Hz,2H),4.91-4.82(m,1H),3.20-3.11(m,1H),2.72-2.62(m,2H),1.48-1.43(s,9H),1.33(d,J＝6.8Hz,3H)。
1E.N-[(9R,10E,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的2L 3颈圆底烧瓶中添加((S)-1-(4-(1-(二氟甲基)-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3g,6.50mmol)于EtOAc(1300mL)中的溶液。将溶液用氩喷射15min。以一份添加Grubbs II(1.38g,1.63mmol)。将反应混合物加热至回流并保持24h。在冷却至室温后，移除溶剂并通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱来纯化残余物，以产生褐色固体状N-[(9R,10E,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(2.13g,4.91mmol,76％产率)。MS(ESI)m/z:434.4[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝5.1Hz,1H),7.78(s,1H),7.44-7.40(m,1H),7.36(br.s.,1H),7.27(t,J＝58Hz,1H),6.87(s,1H),6.49-6.39(m,1H),5.78(s,1H),4.80(br.s.,2H),3.18-3.08(m,1H),3.08-2.98(m,1H),2.06-1.93(m,1H),1.51(s,9H),1.19(d,J＝6.6Hz,3H)。
1F.N-[(9R,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将Pd/C(0.60g,0.570mmol)添加至250mL Parr氢化烧瓶中，该烧瓶含有N-[(9R,10E,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(2.46g,5.68mmol)于EtOH(100mL)中的溶液。将烧瓶用N2吹扫并加压至55psi H2，将其搅拌18h。经由
Figure BDA0003662031630000611
过滤反应混合物并浓缩，以产生褐色固体状N-[(9R,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(2.17g,88％产率)。MS(ESI)m/z:436.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.32(s,1H),8.71(d,J＝5.0Hz,1H),7.96(t,J＝58Hz,1H),7.43(s,1H),7.32(d,J＝4.8Hz,1H),7.22(d,J＝7.3Hz,1H),4.66(d,J＝8.3Hz,1H),2.62(br.s.,1H),1.88(d,J＝12.8Hz,1H),1.77-1.59(m,2H),1.42-1.28(m,9H),1.15(d,J＝18.2Hz,2H),0.83(d,J＝7.0Hz,3H)。
1G.(9R,13S)-13-氨基-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02 ,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
将4N HCl/二噁烷(3.88mL,15.5mmol)添加至N-[(9R,13S)-3-(二氟甲基)-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(2.25g,5.2mmol)于MeOH(10mL)中的溶液中。将反应混合物在室温搅拌2h。在冰浴中冷却反应混合物，并添加MeOH中的7N NH3(13.3mL,93.0mmol)。在5min后，用CH2Cl2(80mL)稀释反应混合物并过滤所形成固体。浓缩滤液，以产生(9R,13S)-13-氨基-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(1.3g,3.88mmol,75％产率)。MS(ESI)m/z:336.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.33(s,1H),8.71(d,J＝5.0Hz,1H),7.94(t,J＝58Hz,1H),7.85(s,1H),7.40(s,1H),7.32(d,J＝5.0Hz,1H),4.01(dd,J＝10.2,5.1Hz,1H),2.63-2.53(m,1H),1.90-1.69(m,2H),1.53-1.36(m,2H),1.16-1.00(m,1H),0.85(d,J＝7.0Hz,3H)。
1H.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备.
单独地向含有如实施例4中所述制备的6-(5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基)嘧啶-4-醇(0.83g,2.7mmol)于ACN(36mL)中的白色悬浮液的烧瓶中添加HATU(1.12g,3.0mmol)和DBU(0.53mL,3.5mmol)。在室温搅拌所得澄清黄色溶液。5min后，添加(9R,13S)-13-氨基-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(0.9g,2.68mmol)并将所得悬浮液于室温搅拌3h。然后浓缩反应混合物并通过用0％至100％EtOAc/己烷梯度洗脱的正相硅胶色谱纯化，以产生白色固体状(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(0.87g,50％产率)。MS(ESI)m/z:626.2[M+H]+。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.91-8.83(m,1H),8.78-8.71(m,1H),8.33(s,1H),7.88(d,J＝2.5Hz,1H),7.74(s,2H),7.69-7.67(m,1H),7.65(s,1H),7.63(t,J＝58Hz,1H),7.52-7.50(m,1H),6.36(d,J＝0.8Hz,1H),6.06-5.95(m,1H),2.76-2.65(m,1H),2.36-2.21(m,1H),2.08-1.93(m,2H),1.63-1.53(m,1H),1.53-1.42(m,1H),0.99(d,J＝6.9Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝8.87min，纯度＝99.7％。
实施例2.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-4-(吡啶-3-基)-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2,5,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000631
2A.4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑的制备
在0℃向4-硝基-1H-吡唑(5.0g,44.2mmol)于THF(100mL)中的溶液中添加N-环己基-N-甲基环己胺(0.948mL,4.43mmol)，之后逐滴添加SEM-Cl(12.55mL,70.7mmol)。然后使反应混合物逐渐升温至室温并于室温搅拌过夜。随后浓缩反应混合物，之后通过使用正相色谱纯化，以产生澄清油状4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(2.4g,21％产率)。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.31(s,1H),8.10(s,1H),5.46(s,2H),3.67-3.55(m,2H),0.99-0.90(m,2H),0.05-0.03(m,9H)。
2B.(S)-(1-(4-(4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯的制备
向N2冲洗的耐压小瓶中添加如实施例5中所述制备的(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.9g,6.00mmol)、4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑(1.6g,6.60mmol)、二(金刚烷-1-基)(丁基)膦(0.323g,0.90mmol)、PvOH(0.209mL,1.80mmol)和K2CO3(2.48g,17.9mmol)。然后向上述混合物中添加DMA(45mL)并将小瓶用N2吹扫5min。然后向此混合物中添加Pd(OAc)2(0.135g,0.600mmol)。将反应混合物再次用N2短暂吹扫。密封小瓶并在120℃在微波中加热1h。使反应混合物冷却至室温并在10％LiCl水溶液(15mL)与EtOAc(30mL)之间分配。用EtOAc(2×20mL)萃取水层并用盐水(15mL)洗涤合并的有机层且经MgSO4干燥。然后使用正相色谱纯化粗产物，以产生棕色油状(S)-(1-(4-(4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.92g,58％产率)。MS(ESI)m/z:524.2(M+H)+。
2C.(S)-(1-(4-(4-氨基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯的制备
将如实施例2B中所述制备的(S)-(1-(4-(4-硝基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.92g,3.68mmol)于MeOH(20mL)和AcOH(2mL)中的溶液在油浴中加热至40℃。然后向上述澄清溶液中缓慢添加Zn(0.481g,7.35mmol，以3部分(50:25:25％))，且在相同温度搅拌5min。向反应混合物中添加额外Zn。通过LCMS监测反应混合物，且在完成时，冷却反应混合物且然后添加2.0gK2CO3(1g用于1mL AcOH)和2.0mL水。然后将反应混合物搅拌5min。然后经
Figure BDA0003662031630000641
垫过滤反应混合物并在真空中浓缩，以产生粗产物。然后在EtOAc(30mL)与饱和NaHCO3(15mL)溶液之间分配粗产物。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。然后使用正相色谱纯化粗产物，以产生浅黄色油状(S)-(1-(4-(4-氨基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.15g,63％产率)。MS(ESI)m/z:494.4(M+H)+。
2D.((S)-1-(4-(4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯的制备
向N2冲洗的3颈250mL圆底烧瓶中添加(S)-(1-(4-(4-氨基-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.15g,2.33mmol)和EtOAc(15mL)的溶液。使溶液冷却至-10℃并添加(R)-2-甲基丁-3-烯酸(350mg,3.49mmol)、吡啶(0.564mL,6.99mmol)和
Figure BDA0003662031630000642
(2.77mL,4.66mmol)。移除冷却浴并使溶液升温至室温，然后搅拌20h的时段。添加水(20mL)和EtOAc(20mL)并将混合物搅拌30min。分离有机相并用EtOAc(20mL)萃取水层。用盐水(15mL)洗涤合并的有机萃取物，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱来纯化，产生((S)-1-(4-(4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.12g,79％产率)。MS(ESI)m/z:576.4[M+H]+。
2E.N-[(9R,10E,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸苄酯的制备
向N2冲洗的250mL 3颈圆底烧瓶中添加((S)-1-(4-(4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(1.12g,1.945mmol)于DCE(18mL)中的溶液。将溶液用Ar喷射15min。以一份添加Grubbs II(662mg,0.778mmol)。将反应混合物在120℃在微波中加热30min。在冷却至室温后，移除溶剂并通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱来纯化残余物，以产生褐色固体状N-[(9R,10E,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸苄酯(477mg,42％产率)。MS(ESI)m/z:548.3[M+H]+。
2F.N-[(9R,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸苄酯的制备
将Pd/C(0.93g,0.871mmol)添加至250mL Parr氢化烧瓶中，该烧瓶含有N-[(9R,10E,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸苄酯(477mg,0.871mmol)于EtOH(20mL)中的溶液。用N2吹扫烧瓶并加压至55psi H2，且将其搅拌4h。经由
Figure BDA0003662031630000651
垫过滤反应混合物并浓缩，以产生褐色固体状N-[(9R,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸苄酯(245mg,64％产率)。MS(ESI)m/z:416.4[M+H]+。
2G.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
向含有如实施例4中所述制备的6-(5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基)嘧啶-4-醇(0.580g,1.88mmol)于ACN(25.0ml)中的白色悬浮液的100mL烧瓶中添加HATU(0.785g,2.06mmol)和DBU(0.370ml,2.44mmol)。在室温搅拌所得澄清黄色溶液。5min后，添加N-[(9R,13S)-9-甲基-8-氧代-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸苄酯(0.780g,1.88mmol)并将所得悬浮液于室温搅拌3h。浓缩反应混合物并通过正相硅胶色谱纯化粗物质，以产生(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(0.65g,0.92mmol,49.0％产率)，其分离为紫色固体。MS(ESI)m/z:706.7[M+H]+。
2H.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
向(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3-{[2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基]甲基}-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(12mg,0.017mmol)于DCM(0.8mL)中的溶液中添加TFA(0.2mL,2.60mmol)且将反应混合物在室温搅拌30min。然后浓缩反应混合物并通过制备型HPLC纯化来纯化残余物，以产生浅粉色固体状(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(5.3mg,43％产率)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.72-8.57(m,2H),8.37(s,1H),7.99(s,1H),7.91(d,J＝2.2Hz,1H),7.82-7.72(m,2H),7.70-7.63(m,2H),6.41(s,1H),6.11-5.95(m,1H),2.81(td,J＝6.8,3.4Hz,1H),2.44-2.17(m,2H),2.15-2.01(m,1H),1.80-1.65(m,1H),1.62-1.46(m,1H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H),1.01(br.s.,1H)。MS(ESI)m/z：5764[M+H]+。分析型HPLC(方法A)：RT＝6.98min，纯度＝>95.0％。
2I.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-4-(吡啶-3-基)-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2,5,14,16-五烯-8-酮；三氟乙酸盐的制备
将(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-177-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮单三氟乙酸盐(0.09g,0.16mmol)、(1R,2R)-N1,N2-二甲基环己烷-1,2-二胺(0.022g,0.16mmol)、3-碘吡啶(0.032g,0.16mmol)、CuI(2mg,10.5μmol)、Cs2CO3(0.10g,0.31mmol)和DMF(2mL)添加至含有Teflon隔膜的小瓶中。将混合物排空并用Ar回填三次且然后加热至100℃并保持3h。将反应混合物冷却并用2mL 9:1ACN-H2O溶液稀释。在经由注射器过滤器过滤后，通过制备型HPLC纯化产物，以产生褐色固体状(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-9-甲基-4-(吡啶-3-基)-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2,5,14,16-五烯-8-酮；三氟乙酸盐(52mg,42％)。MS(ESI)m/z:653.6[M+H]+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ9.31-9.24(m,1H),8.80-8.73(m,1H),8.71-8.64(m,2H),8.60(s,2H),8.37(s,1H),8.01-7.96(m,1H),7.95-7.90(m,1H),7.86-7.80(m,1H),7.79-7.73(m,2H),7.71-7.64(m,1H),6.44-6.36(m,1H),6.17-6.04(m,1H),2.97-2.80(m,1H),2.40-2.22(m,2H),2.15-2.00(m,1H),1.82-1.69(m,1H),1.69-1.52(m,1H),1.41-1.26(m,1H),1.11(d,J＝7.0Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝6.69min，纯度＝97.5％。
实施例3.N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000671
3A.4-氯-2-[(E)-2-[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]乙烯基]吡啶的制备
向S-(-)-叔丁基-亚磺酰胺(0.856g,7.06mmol)于DCM(14.13mL)中的溶液中依序添加CuSO4(2.481g,15.54mmol)和4-氯吡啶甲醛[1.0g，7.06mmol，根据由Negi(Synthesis,991(1996))所述的改进操作制备]。在室温搅拌白色悬浮液。在3h后，经由
Figure BDA0003662031630000672
过滤棕色悬浮液，用DCM洗脱，以产生澄清棕色滤液。浓缩产生称重1.85g的棕色油状粗产物。通过正相色谱纯化产生澄清黄色油状N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.31g)。MS(ESI)m/z:245.0(M+H)+。
3B.(R)-N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
经30min向InCl3(13.56g,61.3mmol)于THF(170mL)中的经冷却(0℃至5℃)的混合物中逐滴添加烯丙基溴化镁(1M，于Et2O中)(62mL,61.3mmol)。使反应混合物升温至室温。在1h后，将4-氯-2-[(E)-2-[(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰基]乙烯基]吡啶(10g,40.9mmol)于EtOH(170mL)中的溶液添加至反应混合物。在2-3h后，在真空和50℃至55℃浓缩反应混合物。在EtOAc(200ml)与水(1×50ml)之间分配粗物质并分离各层。用EtOAc(2×50ml)萃取水层。合并有机层并用盐水(1×100ml)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩，以产生黄色油状(R)-N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(13.5g,106％)。MS(ESI)m/z:287.2(M+H)+。此物质未经进一步纯化即用于下一步骤。
3C.(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-胺的制备
将(R)-N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(75g,261mmol)溶解于MeOH(1500mL)中。添加6N HCl(750ml,4.5mol)。将反应混合物在室温搅拌2-3h，然后浓缩。用水(2L)稀释残余物，用EtOAc(500ml)洗涤。用饱和Na2CO3溶液碱化水层，然后萃取至EtOAc(3×1L)中。用水(1×1L)和盐水(1×1L)洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并在真空和50℃至55℃浓缩，以产生(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-胺(43g,90％)，其未经进一步纯化。MS(ESI)m/z:183.2(M+H)+。
3D.N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-胺(42g,230mmol)溶解于DCM(420mL)中。添加Et3N(32.1mL,230mmol)，之后逐滴添加BOC2O(53.4mL,230mmol)。将反应混合物在室温搅拌2-3h。用过量DCM(1L)稀释反应混合物，用水(1×500ml)和盐水(1×500ml)洗涤。经Na2SO4干燥有机层，过滤并浓缩。然后使用硅胶色谱纯化粗产物，以产生浅黄色固体状N-[(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(61g,86％)。MS(ESI)m/z:283.2(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.44(d,1H),7.26-7.16(dd,2H),5.69-5.61(m,1H),5.59(bs,1H),5.07-5.03(m,2H),4.76(bs,1H),2.62-2.55(m,2H),1.42(s,9H)。
实施例4.6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000681
4A.4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺的制备
Figure BDA0003662031630000682
在20mL微波小瓶中添加2-溴-4-氯苯胺(3g,14.53mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.53g,21.80mmol)、KOAc(3.66g,37.3mmol)、Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2加合物(0.32g,0.44mmol)和DMSO(9mL)。用N2吹扫所得悬浮液，封盖并在80℃加热22h。使反应混合物冷却至室温。添加水以溶解盐，然后过滤反应混合物。将剩余固体悬浮于DCM中并过滤不溶固体。浓缩滤液，然后通过正相色谱纯化，以产生白色固体状4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(3.15g,86％产率)。MS(ESI)m/z:172.3(M-C6H10+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(d,J＝2.6Hz,1H),7.13(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),6.52(d,J＝8.6Hz,1H),4.72(br.s.,2H),1.34(s,12H)。
4B.4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺的制备
Figure BDA0003662031630000691
含有4-氯-6-甲氧基嘧啶(3.13g,21.62mmol)、4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(7.31g,21.62mmol)、Na2CO3(2.29g,21.62mmol)、DME(86ml)、EtOH(10.81ml)和水(10.81ml)的圆底烧瓶配备有冷凝器。将混合物用氩吹扫数分钟，然后添加Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2加合物(1.77g,2.16mmol)。将反应混合物在90℃加热5h。使反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，浓缩并通过正相色谱纯化，以产生黄色固体状4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(2.86g,56.1％产率)。MS(ESI)m/z:236.0(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.78(d,J＝1.1Hz,1H),7.49(d,J＝2.5Hz,1H),7.15(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.99(d,J＝1.1Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,1H),5.89(br.s.,2H),4.03(s,3H)。
4C.4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶的制备
Figure BDA0003662031630000692
在0℃向4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(1.5g,6.36mmol)于ACN(90ml)中的溶液中添加亚硝酸3-甲基丁基酯(1.28ml,9.55mmol)，之后逐滴添加叠氮基三甲基硅烷(1.26ml,9.55mmol)。观察到气体逸出。在10分钟后，移除冰浴，且使反应混合物升温至室温。(注意，芳基叠氮化物潜在地***。)在1h后，添加乙炔基三甲基硅烷(2.72ml,19.09mmol)和Cu2O(0.09g,0.64mmol)并将反应混合物再搅拌1h。在EtOAc与饱和NH4Cl中分配反应混合物并分离各层。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过正相色谱纯化产生黄色固体状4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(2.13g,5.92mmol,93％产率)。MS(ESI)m/z:360.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝1.1Hz,1H),7.82(d,J＝2.2Hz,1H),7.61-7.56(m,1H),7.54-7.48(m,2H),6.20(d,J＝1.1Hz,1H),3.92(s,3H),0.32-0.28(m,9H)。
4D.4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶的制备
Figure BDA0003662031630000701
向4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(1.56g,4.33mmol)于ACN(28.9ml)中的溶液中添加NCS(2.03g,15.17mmol)和硅胶(6.51g,108mmol)。将反应混合物在80℃搅拌1h。然后，过滤反应混合物以移除硅胶并用EtOAc洗涤所收集硅胶。用水(2×)、盐水洗涤滤液并浓缩。通过正相色谱纯化产生黄色泡沫状4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶(0.90g,64.5％产率)。MS(ESI)m/z:322.3(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(d,J＝1.1Hz,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.66-7.55(m,2H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H),6.52(d,J＝0.9Hz,1H),3.98(s,3H)。
4E.6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000702
向4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶(900mg,2.79mmol)于AcOH(6ml)中的溶液中添加48％HBr/水(3ml,26.5mmol)。将混合物在85℃搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，然后在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分配。分离混合物并用EtOAc(2×)萃取水层。合并有机层，浓缩，然后通过正相色谱纯化残余物，以产生白色固体。将固体悬浮于Et2O中，过滤并用Et2O洗涤，以产生白色固体状6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇(610mg,70.9％产率)。MS(ESI)m/z:308.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(s,1H),7.74-7.67(m,2H),7.62(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.47(d,J＝8.4Hz,1H),6.44(d,J＝0.9Hz,1H)。
实施例5.(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯的制备
Figure BDA0003662031630000711
于0℃向(1S)-1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-胺(15.37g,60.1mmol)于THF(150mL)中的溶液中添加H2O(150mL)中的NaHCO3(15.16g,180mmol)，之后添加CBz-Cl(12.88mL,90mmol)。然后将反应混合物于0℃搅拌2h。用EtOAc(150mL)稀释反应混合物。分离有机相，用盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并在减压下浓缩。使用用0-20％EtOAc/石油醚梯度洗脱的正相硅胶色谱纯化粗物质，以获得浅黄色液体状(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸苄酯(16g,84％产率)。MS(ESI)m/z:317.5(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.44(d,J＝5.3Hz,1H),7.41-7.12(m,7H),5.77(d,J＝7.0Hz,1H),5.72-5.57(m,1H),5.16-5.00(m,4H),4.86(q,J＝6.7Hz,1H),2.60(t,J＝6.2Hz,2H)。
实施例6.6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000712
6A.4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺的制备
Figure BDA0003662031630000713
在20mL微波小瓶中添加2-溴-4-氯苯胺(3g,14.53mmol)、4,4,5,5-四甲基-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷(5.53g,21.80mmol)、KOAc(3.66g,37.3mmol)、Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2加合物(0.32g,0.44mmol)和DMSO(9mL)。用N2吹扫所得悬浮液，封盖并在80℃加热22h。使反应混合物冷却至室温。添加水以溶解盐，然后过滤反应混合物。将剩余固体悬浮于DCM中并过滤不溶固体。浓缩滤液，然后通过正相色谱纯化，以产生白色固体状4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(3.15g,86％产率)。MS(ESI)m/z:172.3(M-C6H10+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.54(d,J＝2.6Hz,1H),7.13(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),6.52(d,J＝8.6Hz,1H),4.72(br.s.,2H),1.34(s,12H)。
6B.4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺的制备
Figure BDA0003662031630000721
含有4-氯-6-甲氧基嘧啶(3.13g,21.62mmol)、4-氯-2-(四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯胺(7.31g,21.62mmol)、Na2CO3(2.29g,21.62mmol)、DME(86ml)、EtOH(10.81ml)和水(10.81ml)的圆底烧瓶配备有冷凝器。将混合物用氩吹扫数分钟，然后添加Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2加合物(1.77g,2.16mmol)。将反应混合物在90℃加热5h。使反应混合物冷却至室温，用水稀释并用EtOAc萃取。用盐水洗涤有机层，浓缩并通过正相色谱纯化，以产生黄色固体状4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(2.86g,56.1％产率)。MS(ESI)m/z:236.0(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.78(d,J＝1.1Hz,1H),7.49(d,J＝2.5Hz,1H),7.15(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),6.99(d,J＝1.1Hz,1H),6.67(d,J＝8.8Hz,1H),5.89(br.s.,2H),4.03(s,3H)。
6C.4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶的制备
Figure BDA0003662031630000731
在0℃向4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(1.5g,6.36mmol)于ACN(90ml)中的溶液中添加亚硝酸3-甲基丁基酯(1.28ml,9.55mmol)，之后逐滴添加叠氮基三甲基硅烷(1.26ml,9.55mmol)。观察到气体逸出。在10分钟后，移除冰浴，且使反应混合物升温至室温。(注意，芳基叠氮化物潜在地***。)在1h后，添加乙炔基三甲基硅烷(2.72ml,19.09mmol)和Cu2O(0.09g,0.64mmol)并将反应混合物再搅拌1h。在EtOAc与饱和NH4Cl水溶液中分配反应混合物并分离各层。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过正相色谱纯化产生黄色固体状4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(2.13g,5.92mmol,93％产率)。MS(ESI)m/z:360.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝1.1Hz,1H),7.82(d,J＝2.2Hz,1H),7.61-7.56(m,1H),7.54-7.48(m,2H),6.20(d,J＝1.1Hz,1H),3.92(s,3H),0.32-0.28(m,9H)。
6D.4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶的制备
Figure BDA0003662031630000732
向4-{5-氯-2-[4-(三甲基甲硅烷基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(1.56g,4.33mmol)于ACN(28.9ml)中的溶液中添加NCS(2.03g,15.17mmol)和硅胶(6.51g,108mmol)。将反应混合物在80℃搅拌1h。然后，过滤反应混合物以移除硅胶并用EtOAc洗涤所收集硅胶。用水(2×)、盐水洗涤滤液并浓缩。通过正相色谱纯化产生黄色泡沫状4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶(0.90g,64.5％产率)。MS(ESI)m/z:322.3(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.70(d,J＝1.1Hz,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.66-7.55(m,2H),7.50(d,J＝8.6Hz,1H),6.52(d,J＝0.9Hz,1H),3.98(s,3H)。
6E.6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000741
向4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-甲氧基嘧啶(900mg,2.79mmol)于AcOH(6ml)中的溶液中添加48％HBr/水(3ml,26.5mmol)。将混合物在85℃搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥且然后在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分配。分离混合物并用EtOAc(2×)萃取水层。合并有机层，浓缩，然后通过正相色谱纯化残余物，以产生白色固体。将固体悬浮于Et2O中，过滤并用Et2O洗涤，以产生白色固体状6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇(610mg,70.9％产率)。MS(ESI)m/z:308.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ7.96(s,1H),7.74-7.67(m,2H),7.62(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.47(d,J＝8.4Hz,1H),6.44(d,J＝0.9Hz,1H)。
实施例7.N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000742
7A.(R)-N-[(1E)-(2-溴吡啶-4-基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺的制备
Figure BDA0003662031630000743
经10min向(R)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(13.03g,108mmol)和Cs2CO3(52.5g,161mmol)于DCM(400ml)中的搅拌悬浮液中添加2-溴吡啶-4-甲醛(20g,108mmol)。然后将反应混合物在室温搅拌18.5h。浓缩反应混合物并用EtOAc(50ml)稀释残余物且用盐水(3×20ml)洗涤。经MgSO4干燥有机层，并过滤且然后浓缩滤液。通过使用己烷和EtOAc作为洗脱剂的正相色谱纯化残余物，以提供白色固体状(R)-N-[(1E)-(2-溴吡啶-4-基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(27.2g,87％)。MS(ESI)m/z:289-291.0(M+H)+。
7B.(R)-N-[(IS)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-磺酰胺的制备
Figure BDA0003662031630000751
向(R)-N-[(1E)-(2-溴吡啶-4-基)亚甲基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.73g,2.52mmol)和铟(0.435g,3.79mmol)于THF(6ml)中的溶液中缓慢添加3-溴丙-1-烯(0.458g,3.79mmol)并将所得溶液在60℃加热18h。冷却反应混合物，经由
Figure BDA0003662031630000752
过滤并浓缩滤液。向残余物中添加EtOAc(100ml)和5％NaHCO3(水溶液)(1000ml)且立即形成乳液。经由纸过滤悬浮液。用盐水洗涤有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过使用己烷和EtOAc作为洗脱剂的正相色谱纯化所得残余物，以提供黄色液体状(R)-N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-磺酰胺(0.62g,74％)。MS(ESI)m/z:331-333.0(M+H)+。
7C.N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000753
向(R)-N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.38g,4.17mmol)于MeOH(10ml)中的溶液中添加4N HCl/二噁烷(5.21mL,20.83mmol)。将反应混合物在室温搅拌1.5h，然后浓缩。向所得残余物中添加ACN(10ml)、TEA(5.81ml,41.7mmol)和Boc2O(1.818g,8.33mmol)。在18h后，浓缩反应混合物并在EtOAc中吸收残余物，用水、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过使用己烷和EtOAc作为洗脱剂的正相色谱纯化所得残余物，以提供浅黄色油状N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.80g,58.7％)。MS(ESI)m/z:324-326.1(M+H)+。
实施例8.(R)-2-甲基丁-3-烯酸的制备
Figure BDA0003662031630000754
8A.(R)-4-苄基-3-((R)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮的制备
在0℃向2-甲基丁-3-烯酸(5.59g,55.9mmol)和NMM(6.14mL,55.9mmol)于THF(62mL)中的溶液中逐滴添加特戊酰氯(6.87mL,55.9mmol)。使反应混合物冷却至-78℃，并搅拌约2h。在单独烧瓶中：在-78℃向(R)-4-苄基噁唑烷-2-酮(8.25g,46.6mmol)于THF(126mL)中的溶液中逐滴添加N-丁基锂(2.5M，于己烷中)(20.49mL,51.2mmol)。在35min后，将该反应混合物经由套管转移至第一反应混合物中。将反应混合物在-78℃搅拌2h，然后移除冷浴，并用饱和NH4Cl淬灭反应。用水稀释反应混合物并用EtOAc(3×)萃取。用盐水洗涤合并的有机层，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以产生黄色油(15g)。通过硅胶色谱纯化，提供无色油状(R)-4-苄基-3-((R)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮(6.59g,55％)。MS(ESI)m/z:282.1(M+Na)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ7.36-7.19(m,5H),6.03-5.93(m,1H),5.23-5.10(m,2H),4.69-4.63(m,1H),4.51-4.43(m,1H),4.23-4.15(m,2H),3.29(dd,J＝13.5,3.3Hz,1H),2.79(dd,J＝13.5,9.6Hz,1H),1.35(d,J＝6.9Hz,3H)ppm。还获得白色固体状另一非对映异构体(R)-4-苄基-3-((S)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮(4.6g,38％)。MS(ESI)m/z:260.1(M+H)+。
8B.(R)-2-甲基丁-3-烯酸的制备
在0℃向(R)-4-苄基-3-((R)-2-甲基丁-3-烯酰基)噁唑烷-2-酮(6.05g,23.33mmol)于THF(146mL)中的澄清无色溶液中逐滴添加30％H2O2水溶液(9.53mL,93mmol)，之后添加2N LiOH(23.33mL,46.7mmol)。在30min后，用25mL饱和Na2SO3与25mL饱和NaHCO3淬灭反应。然后浓缩反应混合物以移除THF。用水稀释残余物并用CHCl3(3×)萃取。用浓HCl将水层酸化至pH约3，然后将其用EtOAc(3×)萃取。合并EtOAc层，用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，以提供无色油状(R)-2-甲基丁-3-烯酸(2.15g,92％)。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ10.84(br.s,1H),5.94(ddd,J＝17.4,10.1,7.4Hz,1H),5.22-5.13(m,2H),3.23-3.15(m,1H),1.31(d,J＝7.2Hz,3H)ppm。
实施例9.(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
Figure BDA0003662031630000761
9A.N-[(1S)-1-[2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向大型微波小瓶中添加如实施例2中所述制备的N-[(1S)-1-(2-溴吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.0g,3.06mmol)、1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(0.427g,3.36mmol)、二噁烷(10ml)、二(金刚烷-1-基)(丁基)膦(0.164g,0.458mmol)、K2CO3(1.267g,9.17mmol)和特戊酸(0.106ml,0.917mmol)。用Ar使反应混合物脱气。其后，添加Pd(OAc)2(0.069g,0.306mmol)并在100℃搅拌反应混合物。在4h后，停止加热且将反应混合物在室温搅拌72h。用水(20ml)淬灭反应并用EtOAc(3×50ml)萃取。用盐水(20ml)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，并过滤并浓缩。通过使用庚烷和EtOAc作为洗脱剂的正相色谱纯化残余物，以产生白色泡沫状N-[(1S)-1-[2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.62g,54％)。MS(ESI)m/z:374.08(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.73(d,J＝5.2Hz,1H),8.28-8.15(m,1H),7.66-7.54(m,1H),7.43-7.34(m,1H),5.76-5.63(m,1H),5.26-5.16(m,2H),4.99(br.s.,1H),4.83(br.s.,1H),3.97-3.85(m,3H),2.66-2.46(m,2H),1.45(br.s.,9H)。
9B.N-[(1S)-1-[2-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N-[(1S)-1-[2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.62g,1.660mmol)的经冷却的(0℃)丙酮(40ml)/水(12ml)溶液中添加NH4Cl(0.444g,8.30mmol)和Zn(1.086g,16.60mmol)。移除冰浴并将反应混合物搅拌18h。经由纸过滤反应混合物并用水(20ml)和EtOAc(75ml)分配。用EtOAc(2×50ml)萃取水层。用盐水(25ml)洗涤合并的有机层并干燥(MgSO4)。过滤混合物，浓缩并通过使用DCM和0-10％MeOH作为洗脱剂的正相色谱纯化残余物，以产生N-[(1S)-1-[2-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.46g,60％)。MS(ESI)m/z:344.5(M+H)+。
9C.N-[(1S)-1-(2-{1-甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基}吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N-[(1S)-1-[2-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.6g,1.747mmol)中添加EtOAc(5.8ml)中的如实施例8中所述制备的(R)-2-甲基丁-3-烯酸(0.189g,1.893mmol)，冷却至0℃。添加吡啶(0.424ml,5.24mmol)和
Figure BDA0003662031630000771
(2.1ml,3.49mmol)中的50％EtOAc溶液。在24h后，在饱和NaHCO3水溶液(10ml)与EtOAc(20ml)之间分配反应混合物。用EtOAc(2×20ml)萃取水层。用盐水(10ml)洗涤合并的有机层并干燥(MgSO4)。过滤混合物并浓缩并通过使用己烷和EtOAc作为洗脱剂的正相色谱纯化残余物，以产生N-[(1S)-1-(2-{1-甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基}吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.35g,47％)。MS(ESI)m/z:426.1(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ10.23(br.s.,1H),8.70-8.56(m,1H),8.35(d,J＝1.1Hz,1H),7.56-7.44(m,1H),7.25-7.14(m,1H),6.03(ddd,J＝17.2,10.2,8.0Hz,1H),5.39-5.17(m,3H),5.03-4.63(m,2H),4.14-4.08(m,3H),3.22(quin,J＝7.2Hz,1H),2.66-2.49(m,1H),1.84-1.72(m,1H),1.50-1.40(m,9H),1.42-1.37(m,3H),1.06-0.93(m,1H)。
9D.N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N-[(1S)-1-(2-{1-甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基}吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.160g,0.376mmol)的经脱气的DCE(20ml)溶液中添加Grubbs II(0.096g,0.113mmol)并将反应混合物在微波中加热至120℃并保持30min。浓缩反应混合物并通过使用DCM和MeOH作为洗脱剂的正相色谱纯化残余物，以提供绿色膜状期望产物(29mg,19％)。MS(ESI)m/z:398.3(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.71(d,J＝4.7Hz,1H),7.58(s,1H),7.23(d,J＝13.8Hz,1H),7.03-6.94(m,1H),6.61(s,1H),5.82-5.71(m,1H),5.19-5.09(m,2H),4.75(br.s.,1H),4.15-4.09(m,3H),3.19-3.10(m,1H),2.67(br.s.,1H),2.28-2.15(m,2H),1.54-1.39(m,9H),1.34-1.28(m,3H)。
9E.(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
Figure BDA0003662031630000781
向N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(29mg,0.073mmol)的EtOH(3mL)溶液中添加PtO2(4mg)。用氢吹扫反应混合物，然后在55psi下氢化。在3h后，经由0.45μM过滤器过滤反应混合物并浓缩，以提供深色固体(MS(ESI)m/z:400.3(M+H)+)。将深色固体残余物溶解于4N HCl/二噁烷(1ml)和MeOH(1ml)。在3h后，浓缩混合物并将所得HCl盐溶解于DCM/MeOH中且通过碱性柱，以提供深色固体状(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(21mg,96％)，其未经进一步纯化即用于下一步骤。MS(ESI)m/z:300.2(M+H)+。
实施例10.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000791
向如实施例6中所述制备的6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇(0.019g,0.060mmol)于CH3CN(0.4ml)中的溶液中添加HATU(0.030g,0.078mmol)和DBU(0.014mL,0.090mmol)。在30min后，添加如实施例9中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮和DMF(0.2ml)。在18h后，用DMF稀释反应混合物，过滤并浓缩。通过反相HPLC使用
Figure BDA0003662031630000792
Luna5U30×100mm(10:90ACN/H2O至90:10ACN/H2O,0.1％TFA)(20％B开始，14min梯度)纯化残余物。浓缩期望级分并冷冻干燥，以提供灰白色固体状(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3,9-二甲基-3,4,7,17-三氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(11.9mg,27％)。MS(ESI)m/z:590.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.78-8.70(m,1H),8.41-8.33(m,2H),7.92-7.85(m,2H),7.80-7.73(m,1H),7.71-7.65(m,1H),7.51(s,1H),7.21(dd,J＝5.3,1.8Hz,1H),6.50-6.42(m,1H),5.77(dd,J＝12.5,3.1Hz,1H),4.23-4.16(m,3H),2.69-2.58(m,1H),2.41(dd,J＝7.5,4.2Hz,1H),2.22-2.09(m,1H),2.07-1.96(m,1H),1.74-1.60(m,1H),1.38(d,J＝7.7Hz,2H),1.15(d,J＝7.0Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝7.38min，纯度＝96％。
实施例11.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000801
11A.1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑的制备
Figure BDA0003662031630000802
将4-硝基-1H-吡唑(10.3g,91mmol)溶解于THF(200ml)中并冷却至0℃。向该溶液中逐份添加NaH(60％,4.37g,109mmol)并再冷搅拌0.5h。然后向该冷的乳状溶液中逐滴添加CD3I(6.23ml,100mmol)并将反应混合物冷搅拌3h，然后升温至室温并于该温度搅拌过夜。将反应混合物用冷水(200ml)淬灭，用EtOAc(2×200ml)萃取并用MgSO4干燥。过滤溶液并浓缩，从而产生黄色固体。自己烷/乙酸乙酯使物质重结晶，提供黄色固体状期望化合物(11.5g,97％)。1H NMR(CDCl3)δ8.85(s,1H),8.82(s,1H)。
11B.N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000803
白色泡沫N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.80g,70％)以与如实施例9A中所述的N-[(1S)-1-[2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯相同的方式通过用1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑替换1-甲基-4-硝基-1H-吡唑来制备。MS(ESI)m/z:377.5(M+H)+。1HNMR(500MHz,CDCl3)δ8.73(d,J＝5.2Hz,1H),8.28-8.15(m,1H),7.59(s,1H),7.43-7.34(m,1H),5.73-5.63(m,1H),5.24-5.18(m,2H),4.99(br.s.,1H),4.83(br.s.,1H),2.69-2.42(m,2H),1.45(br.s.,9H)。
11C.N-[(1S)-1-{2-[4-氨基-1-(2H3)甲基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000811
褐色固体N-[(1S)-1-{2-[4-氨基-1-(2H3)甲基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.56g,76％)以与如实施例9B中所述的N-[(1S)-1-[2-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯相同的方式通过用N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯替换如实施例9A中所述制备的N-[(1S)-1-[2-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI)m/z:347.3(M+H)+。
11D.N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000812
黄色固体N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.49g,72％)以与如实施例9C中所述的N-[(1S)-1-(2-{1-甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基}吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯相同的方式通过用N-[(1S)-1-{2-[4-氨基-1-(2H3)甲基-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯替换如实施例9B中所述制备的N-[(1S)-1-[2-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-4-基]丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI)m/z:429.08(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ10.13(br.s.,1H),8.56-8.50(m,1H),8.25(s,1H),7.42-7.35(m,1H),7.15-7.08(m,1H),5.92(ddd,J＝17.1,10.1,8.0Hz,1H),5.68-5.56(m,1H),5.26-5.19(m,3H),5.16-5.11(m,2H),4.88(br.s,1H),4.70(br.s.,1H),3.12(quin,J＝7.2Hz,1H),2.57-2.39(m,1H),1.36(br.s.,9H),1.30(d,J＝6.9Hz,3H)。
11E.N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0003662031630000821
绿色固体N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(64mg,33％)以与如实施例9D中所述的N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯相同的方式通过用N-[(1S)-1-{2-[1-(2H3)甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基]吡啶-4-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯替换如实施例9C中所述制备的N-[(1S)-1-(2-{1-甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基}吡啶-4-基)丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI)m/z:401.3(M+H)+。1H NMR(500MHz,CDCl3)δ8.67(br.s.,1H),7.55(s,1H),7.20(br.s.,1H),6.97(s,1H),6.75(br.s.,1H),5.74(br.s.,1H),5.14(br.s.,2H),4.76(br.s.,1H),3.13(br.s.,1H),2.66(br.s,1H),2.20(s,1H),1.47(br.s.,9H),1.28(br.s.,3H)。
11F.(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02 ,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
Figure BDA0003662031630000822
褐色固体(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(48mg)以与如实施例9E中所述的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮相同的方式用N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯替换如实施例9D中所述制备的N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯来制备。MS(ESI)m/z:303.3(M+H)+。
11G.(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000831
白色固体(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(10.8mg,18％)以与如实施例10中所述的(9R,13S)-13-{4-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基}-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮相同的方式通过用如实施例11F中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮替换如实施例9E中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮来制备。MS(ESI)m/z:593.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.78-8.69(m,1H),8.42-8.33(m,2H),7.92-7.86(m,2H),7.80-7.74(m,1H),7.69-7.64(m,1H),7.52(s,1H),7.21(dd,J＝5.3,1.5Hz,1H),6.51-6.43(m,1H),5.77(dd,J＝12.5,3.3Hz,1H),2.62(ddd,J＝9.5,6.7,3.4Hz,1H),2.48-2.38(m,1H),2.22-2.11(m,1H),2.06-1.97(m,1H),1.69-1.59(m,1H),1.42-1.33(m,2H),1.15(d,J＝6.8Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝7.26min，纯度＝96％。
实施例12.6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000841
12A.4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶的制备
Figure BDA0003662031630000842
在0℃向如实施例6B中所述制备的4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(1.0g,4.24mmol)于ACN(60.6ml)中的溶液中添加亚硝酸3-甲基丁基酯(0.86ml,6.36mmol)，之后逐滴添加叠氮基三甲基硅烷(0.84ml,6.36mmol)。观察到气体逸出。在10分钟后，移除冰浴，且使反应混合物升温至室温。(注意，芳基叠氮化物潜在地***。)在2h后，添加Cu2O(61mg,0.42mmol)，之后经5min的时段缓慢鼓泡3,3,3-三氟丙-1-炔气体。再过10min后，在DCM与饱和NH4Cl水溶液之间分配反应混合物，然后分离各层。用盐水洗涤有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过正相色谱纯化产生黄色固体状4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(1.46g,97％产率)。MS(ESI)m/z:356.1(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.62(d,J＝1.1Hz,1H),8.00(d,J＝0.7Hz,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.66-7.60(m,1H),7.52(d,J＝8.6Hz,1H),6.60(d,J＝1.1Hz,1H),3.98(s,3H)。19F NMR(376MHz,CDCl3)δ-61.10(s)。
12B.6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}嘧啶-4-醇的制备
Figure BDA0003662031630000843
向4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-甲氧基嘧啶(1.46g,4.10mmol)于AcOH(10ml)中的溶液中添加48％HBr/水(5ml,44.2mmol)。将混合物在85℃搅拌1h。将反应混合物浓缩至干燥，然后在EtOAc与饱和NaHCO3水溶液之间分配。分离各层并用EtOAc(2×)萃取水层。合并有机层并用饱和NaHCO3水溶液、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤且在真空下减少溶剂直至开始形成某种固体为止。将所得悬浮液与Et2O一起研磨。过滤固体并用Et2O洗涤，以产生浅黄色固体状6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}嘧啶-4-醇(1g,71.3％产率)。MS(ESI)m/z:342.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.83(d,J＝0.7Hz,1H),7.99(d,J＝0.9Hz,1H),7.87(d,J＝2.2Hz,1H),7.79-7.72(m,1H),7.70-7.62(m,1H),6.45(d,J＝0.9Hz,1H)。19F NMR(376MHz,CD3OD)δ-62.61(s)。
实施例13.(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
Figure BDA0003662031630000851
13A.1-甲基-4-硝基-1H-吡唑的制备
向4-硝基-1H-吡唑(2.5g,22.11mmol)于THF(50mL)中的溶液中添加NaH(0.973g,24.32mmol)并将混合物在室温搅拌5min。然后向该悬浮液中添加CH3I(1.382mL,22.11mmol)并在室温搅拌过夜。然后，用EtOAc(2×25mL)稀释反应混合物并用盐水(25mL)洗涤。浓缩有机层，之后使用正相色谱纯化，以产生白色固体状1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(1.9g,80％产率)。1H NMR(400MHz,CDCl3)δppm 8.12(s,1H),8.06(s,1H),3.97(s,3H)。
13B.(S)-(1-(4-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的耐压小瓶中添加(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(3.0g,10.61mmol)、1-甲基-4-硝基-1H-吡唑(1.348g,10.61mmol)、二(金刚烷-1-基)(丁基)膦(1.141g,3.18mmol)、PvOH(0.369ml,3.18mmol)和K2CO3(4.40g,31.8mmol)。然后向上述混合物中添加DMF(21mL)并将小瓶用N2吹扫5min。然后向该混合物中添加Pd(OAc)2(0.476g,2.122mmol)。将反应混合物再次用N2短暂吹扫。密封小瓶并在120℃在油浴中加热4h。使反应混合物冷却至室温并在10％LiCl水溶液(15mL)与EtOAc(30mL)之间分配。用EtOAc(2×20mL)萃取水层，且用盐水(15mL)洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。然后使用正相色谱纯化粗产物，以产生棕色油状(S)-(1-(4-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g,29％产率)。MS(ESI)m/z:374.4(M+H)+。
13C.(S)-(1-(4-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
将(S)-(1-(4-(1-甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(1.2g,3.21mmol)于MeOH(10mL)和AcOH(1mL)中的溶液在油浴中加热至40℃。然后向上述澄清溶液中以3份(50:25:25％)缓慢添加Zn(0.420g,6.43mmol)并在相同温度搅拌5min。通过LCMS监测反应混合物，且一旦反应完成，然后向冷却的反应混合物中添加1gK2CO3(1g用于1mL AcOH)和1mL水。然后将反应混合物搅拌5min。然后经
Figure BDA0003662031630000861
垫过滤反应混合物并在真空中浓缩，以产生粗产物。然后在EtOAc(30mL)与饱和NaHCO3(15mL)水溶液之间分配粗产物。分离有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。然后使用正相色谱纯化粗产物，以产生浅棕色油状(S)-(1-(4-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.88g,76％产率)。MS(ESI)m/z:344.4(M+H)+。
13D.((S)-1-(4-(1-甲基-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的3颈250mL圆底烧瓶中添加(S)-(1-(4-(4-氨基-1-甲基-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(620mg,1.805mmol)和EtOAc(15mL)的溶液。使溶液冷却至-10℃并添加如实施例2中制备的(R)-2-甲基丁-3-烯酸(271mg,2.71mmol)、吡啶(0.437mL,5.42mmol)和
Figure BDA0003662031630000862
(2.149mL,3.61mmol)。移除冷却浴并使溶液升温至室温，然后搅拌20h的时段。添加水(15mL)和EtOAc(15mL)并将混合物搅拌30min。分离有机相并用EtOAc(15mL)萃取水层。用盐水(15mL)洗涤合并的有机萃取物，经Na2SO4干燥，过滤并在真空中浓缩。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱纯化产生((S)-1-(4-(1-甲基-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.26g,34％产率)。MS(ESI)m/z:426.5[M+H]+。
13E.N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N2冲洗的250mL 3颈圆底烧瓶中添加((S)-1-(4-(1-甲基-4-((R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基)-1H-吡唑-5-基)吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(266mg,0.625mmol)于DCE(18mL)中的溶液。将溶液用氩喷射15min。以一份添加Grubbs II(213mg,0.250mmol)。将反应混合物在微波中加热至120℃并保持30min。在冷却至室温后，移除溶剂并通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱来纯化残余物，以产生褐色固体状N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(60mg,23％产率)。MS(ESI)m/z:398.4[M+H]+。
13F.N-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将Pd/C(0.016g,0.015mmol)添加至100mL Parr氢化烧瓶中，该烧瓶含有N-[(9R,10E,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(60mg,0.151mmol)于EtOH(6mL)中的溶液。将烧瓶用N2吹扫并加压至55psi H2，且将其搅拌5h。经由
Figure BDA0003662031630000872
垫过滤反应混合物并浓缩，以产生褐色固体状N-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(48mg,76％产率)。MS(ESI)m/z:400.5[M+H]+。
13G.(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
向N-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(48mg,0.120mmol)于DCM(2.5mL)中的溶液中添加TFA(0.6mL,7.79mmol)且将反应混合物在室温搅拌1.5h。然后浓缩反应混合物，以产生棕色固体状(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮双三氟乙酸盐(63mg,94％产率)，然后将其溶解于MeOH(1mL)中，以产生澄清棕色溶液。将溶液添加至预清洗的
Figure BDA0003662031630000871
StratoSpheres SPEPL-HCO3MP树脂柱中。重力过滤，用MeOH洗脱，产生澄清浅黄色滤液。浓缩提供浅黄色固体状(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(25mg,93％)。MS(ESI)m/z:300.4[M+H]+。
实施例14.(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
Figure BDA0003662031630000881
14A.1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑的制备
将DIAD(5.59mL,28.7mmol)添加至4-硝基-1H-吡唑(2.5g,22.11mmol)、CD3OD(0.898mL,22.11mmol)和Ph3P(树脂结合)(8.84g,26.5mmol)于THF(40ml)中的溶液中并搅拌过夜。用水淬灭反应，用EtOAc萃取，用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱纯化粗产物，以提供白色固体状期望产物(1.92g,14.76mmol,66.7％产率)。MS(ESI)m/z:131.0(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.13(d,J＝0.4Hz,1H),8.05(s,1H)。
14B.N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向大型微波小瓶中添加(S)-(1-(4-氯吡啶-2-基)丁-3-烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.61g,9.22mmol)、1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑(1.0g,7.69mmol)、二(金刚烷-1-基)(丁基)膦(0.413g,1.15mmol)、K2CO3(3.19g,23.06mmol)和特戊酸(0.268ml,2.306mmol)和DMF(15.37ml)。将反应混合物用氩吹扫10min，添加Pd(OAc)2(0.173g,0.769mmol)，密封小瓶，且在115℃搅拌过夜。然后在EtOAc与H2O之间分配反应混合物。用额外EtOAc(2×)萃取水层。用盐水洗涤合并的有机层，经MgSO4干燥，过滤并浓缩。通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱纯化残余物，以产生淡紫色泡沫状期望产物(1.49g,3.96mmol,51.5％产率)。MS(ESI)m/z:377.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.77(d,J＝4.8Hz,1H),8.21(s,1H),7.26(s,1H),7.23(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),5.78-5.65(m,1H),5.55(d,J＝6.8Hz,1H),5.14-5.03(m,2H),4.89(d,J＝6.8Hz,1H),2.66(t,J＝6.6Hz,2H),1.44(s,9H)。
14C.N-[(1S)-1-{4-[4-氨基-1-(2H3)甲基-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)甲基-4-硝基-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(1.45g,3.85mmol)溶解于丙酮(15ml)/水(3ml)中，冷却至0℃，并添加NH4Cl(1.030g,19.26mmol)和锌(2.52g,38.5mmol)，之后移除冰浴。在1h后，过滤反应混合物并用水(30ml)和EtOAc(50ml)分配滤液。用EtOAc(2×50ml)萃取水层。用盐水(20ml)洗涤合并的有机层，干燥(MgSO4)，过滤并浓缩。通过用DCM/MeOH梯度洗脱的正相色谱纯化残余物，以提供期望产物(0.62g,46.5％)。MS(ESI)m/z:347.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.67(dd,J＝5.1,0.7Hz,1H),7.26-7.23(m,2H),7.21(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),5.79-5.66(m,1H),5.58(d,J＝7.3Hz,1H),5.11-5.05(m,2H),4.86(q,J＝6.6Hz,1H),2.64(t,J＝6.7Hz,2H),1.44(s,9H)。
14D.N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
将EtOAc(17.900ml)中的(R)-2-甲基丁-3-烯酸(233mg,2.327mmol)、N-[(1S)-1-{4-[4-氨基-1-(2H3)甲基-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(620mg,1.79mmol)、吡啶(0.433ml,5.37mmol)在Ar下冷却至-10℃，之后逐滴添加
Figure BDA0003662031630000891
(50％wt，于EtOAc中)(2.131ml,3.58mmol)且然后逐渐升温至室温。在3.5h后，用EtOAc稀释反应混合物，用1.5M K2HPO4且之后用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。然后通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相色谱将粗产物纯化成黄色泡沫状期望产物(529mg,1.234mmol,69.0％产率)。MS(ESI)m/z:429.2(M+H)+。
14E.N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
在5个大型微波小瓶中等量装填以下物质：将经脱气的DCE(90ml)中的N-[(1S)-1-{4-[1-(2H3)甲基-4-[(2R)-2-甲基丁-3-烯酰氨基]-1H-吡唑-5-基]吡啶-2-基}丁-3-烯-1-基]氨基甲酸叔丁酯(0.51g,1.190mmol)在120℃在Grubbs II(0.404g,0.476mmol)存在下辐照30min。合并反应混合物，浓缩，并通过用己烷/EtOAc梯度洗脱的正相柱色谱纯化残余物，以产生棕色固体状期望产物(0.124g,26.0％)。MS(ESI)m/z:401.2(M+H)+。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ8.66(d,J＝5.1Hz,1H),7.52(s,1H),7.19(d,J＝4.8Hz,1H),6.80(s,1H),6.37(d,J＝7.5Hz,1H),5.68(t,J＝11.2Hz,1H),4.82-4.63(m,2H),3.12-2.93(m,2H),1.93(q,J＝11.1Hz,1H),1.48(s,9H),1.15(d,J＝5.9Hz,3H)。
14F.N-[(9R,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯的制备
向N-[(9R,10E,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,10,14,16-六烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(0.120g,0.300mmol)于EtOH(10ml)中的经搅拌溶液中添加PtO2(6.80mg,0.030mmol)。使悬浮液经受氢气氛(55psi)达1h。经由
Figure BDA0003662031630000902
塞过滤催化剂并浓缩滤液。产物(0.104g,86％)未经进一步纯化原样继续用于下一反应。MS(ESI)m/z:403.2(M+H)+。
14G.(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02 ,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮的制备
将二噁烷(1.621ml)中的4.0M HCl添加至N-[(9R,13S)-3-(2H3)甲基-9-甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]氨基甲酸叔丁酯(0.100g,0.248mmol)于MeOH(3ml)中的搅拌溶液中并搅拌过夜。将反应混合物浓缩至干燥并置于高真空下。通过溶解于MeOH中使盐酸盐游离碱化，通过树脂结合的NaHCO3管柱(Stratospheres SPE；500mg,0.90mmol载量)并浓缩滤液。该物质原样继续用于以下反应。MS(ESI)m/z:303.4(M+H)+。
实施例15.(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000901
向含有无水ACN(0.5mL)中的如实施例12中所述制备的6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}嘧啶-4-醇(22.8mg,0.067mmol)、HATU(33.0mg,0.087mmol)的闪烁小瓶中添加DBU(15mL,0.100mmol)。在30min后，添加如实施例13中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(20mg,0.067mmol)于0.5ml CH3CN和DMF(0.1ml)中的溶液。将所得溶液在室温搅拌2h，然后通过反相色谱纯化，在浓缩及冻干后，以产生白色固体状(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(26.98mg,53.1％产率)。MS(ESI)m/z:624.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)d 8.81(d,J＝0.7Hz,1H),8.75(s,1H),8.70(d,J＝5.3Hz,1H),7.89(d,J＝2.4Hz,1H),7.77-7.72(m,1H),7.72-7.66(m,2H),7.53(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),7.49(s,1H),6.43(s,1H),6.02-5.93(m,1H),4.04(s,3H),2.70(td,J＝6.7,3.3Hz,1H),2.27(tt,J＝12.7,4.4Hz,1H),2.12-1.94(m,2H),1.66-1.52(m,1H),1.45(ddd,J＝15.0,9.8,5.0Hz,1H),1.00(d,J＝7.0Hz,3H),0.69(br.s.,1H)。19FNMR(376MHz,CD3OD)d-62.54(s),-77.44(s)。分析型HPLC(方法A)：RT＝11.02min，纯度＝96.7％。
实施例16.(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000911
(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(11mg,30％产率)以与实施例15中所述的操作类似的方式通过用如实施例14中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(15mg,0.050mmol)替换(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮来制备。MS(ESI)m/z:627.3(M+H)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.81(s,1H),8.77-8.66(m,2H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.79-7.64(m,3H),7.59-7.51(m,1H),7.49(s,1H),6.44(s,1H),5.97(dd,J＝12.4,3.9Hz,1H),2.76-2.62(m,J＝6.5,3.4,3.4Hz,1H),2.34-2.21(m,1H),2.12-1.94(m,2H),1.68-1.53(m,1H),1.51-1.39(m,1H),1.00(d,J＝6.8Hz,3H),0.78-0.63(m,1H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝8.64min，纯度＝99.4％。
实施例17.(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000921
(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(20mg,50％产率)以与实施例15中所述的操作类似的方式通过用(9R,13S)-13-氨基-3-(二氟甲基)-9-甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(17mg,0.051mmol)替换(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮来制备。MS(ESI)m/z:660.3(M+H)。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.81(d,J＝3.7Hz,2H),8.71(d,J＝5.1Hz,1H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.81-7.62(m,5H),7.56-7.46(m,1H),6.44(s,1H),6.00(dd,J＝12.7,4.5Hz,1H),2.70(td,J＝6.5,3.0Hz,1H),2.32-2.20(m,1H),2.10-1.91(m,2H),1.65-1.51(m,1H),1.51-1.39(m,1H),0.99(d,J＝6.8Hz,3H),0.70-0.51(m,1H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝9.74min，纯度＝97.8％。
实施例18.(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000922
灰白色固体(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮,TFA盐(9mg,20％)系以与实施例10的相同方式用实施例12B中所述制备的6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯基}嘧啶-4-醇替换实施例6中所述制备的6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇来制备。MS(ESI)m/z:624.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)δ8.84(d,J＝0.7Hz,1H),8.71(d,J＝5.1Hz,1H),8.29(s,1H),7.91(d,J＝2.4Hz,1H),7.86(s,1H),7.80-7.75(m,1H),7.72(s,1H),7.51(s,1H),7.17(dd,J＝5.3,1.8Hz,1H),6.52(d,J＝0.7Hz,1H),5.77(dd,J＝12.4,3.2Hz,1H),4.18(s,3H),2.64-2.56(m,1H),2.38(br.s.,1H),2.11(dd,.7＝13.1,3.6Hz,1H),2.02-1.95(m,1H),1.64(d,J＝6.8Hz,1H),1.39(dd,J＝16.9,8.1Hz,2H),1.14(d,J＝6.8Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝8.05min，纯度＝95％。
实施例19.(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000931
灰白色固体(9R,13S)-13-(4-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-1,2,3-***-1-基]苯基}-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-1-基)-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮三氟乙酸盐(11.7mg,23％)以与实施例10相同的方式用如实施例12B中所述制备的6-{5-氯-2-[4-(三氟甲基)-1H-吡唑-1-基]苯基}嘧啶-4-醇替换如实施例6中所述制备的6-[5-氯-2-(4-氯-1H-1,2,3-***-1-基)苯基]嘧啶-4-醇来制备。同样，用如实施例6F中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3-(2H3)甲基-9-甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮替换如实施例9中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,17-四氮杂三环[12.3.1.02 ,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮。MS(ESI)m/z:627.3(M+H)+。1H NMR(400MHz,CD3OD)8 8.86-8.82(m,1H),8.75-8.69(m,1H),8.28(s,1H),7.94-7.87(m,1H),7.86(s,1H),7.80-7.76(m,1H),7.74-7.69(m,1H),7.51(s,1H),7.20-7.09(m,1H),6.56-6.51(m,1H),5.77(dd,J＝12.5,3.3Hz,1H),2.67-2.58(m,1H),2.47-2.37(m,2H),2.19-2.06(m,1H),2.03-1.96(m,1H),1.73-1.60(m,1H),1.48-1.31(m,2H),1.14(d,J＝6.8Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝8.02min，纯度＝96％。
实施例20.1-(4-氯-2-(1-((5R,9S)-21,5-二甲基-4-氧代-21H-3-氮杂-1(2,4)-吡啶-2(5,4)-吡唑并环壬番(cyclononaphane)-9-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基)苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000941
20A.N-(4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺的制备
Figure BDA0003662031630000942
向如实施例6B中所述制备的4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(0.523g,2.219mmol)和三氟乙酸酐(0.376ml,2.66mmol)于DCM(17.47ml)中的溶液中添加TEA(0.371ml,2.66mmol)。在1h后，浓缩反应混合物并通过正相色谱纯化，以产生白色固体状N-(4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.684g,93％产率)。MS(ESI)m/z:332.1(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3-d)δ13.95(br.s.,1H),8.83(d,J＝1.1Hz,1H),8.59(d,J＝9.0Hz,1H),7.76(d,J＝2.4Hz,1H),7.49(dd,J＝9.0,2.4Hz,1H),7.16(d,J＝0.9Hz,1H),4.09(s,3H)。
20B.N-(4-氯-2-(6-羟基嘧啶-4-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺的制备
Figure BDA0003662031630000951
在60℃向N-(4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.68g,2.05mmol)于THF(13.67ml)中的经搅拌溶液中添加48％HBr/H2O(1.693ml,14.97mmol)。在3h后，浓缩反应混合物，用饱和NaHCO3(40ml)淬灭，并用EtOAc(3×30ml)萃取。用盐水(15mL)洗涤合并的有机层并干燥(MgSO4)。通过正相色谱纯化残余物，以产生期望产物(0.195g,30％)。MS(ESI)m/z:318.1(M+H)+。1H NMR:(400MHz,CDCl3-d)δ8.50(d,J＝9.0Hz,1H),8.27(s,1H),7.66(d,J＝2.4Hz,1H),7.57-7.49(m,1H),6.89(s,1H)。
20C.(5R,9S)-9-(4-(2-氨基-5-氯苯基)-6-氧代嘧啶-1(6H)-基)-21,5-二甲基-21H-3-氮杂-1(2,4)-吡啶-2(5,4)-吡唑并环壬番-4-酮的制备
Figure BDA0003662031630000952
向含有N-(4-氯-2-(6-羟基嘧啶-4-基)苯基)-2,2,2-三氟乙酰胺(0.035g,0.110mmol)和HATU(0.054g,0.143mmol)于ACN(1.10ml)中的白色悬浮液的1打兰小瓶中添加DBU(0.025ml,0.165mmol)。在10min后，添加实施例9(0.033g,0.110mmol)于DMF(1.102ml)中的紫色溶液。在搅拌过夜后，将反应混合物用水稀释，用EtOAc(3×)萃取，将有机物用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。通过正相色谱纯化粗产物，以产生黄色泡沫状期望中间体(在1H NMR中还观察到30％不期望异构体)。该物质继续用于后续反应。通过将化合物溶解于MeOH(2ml)中、用HCl(1ml)处理并加热至75℃移除三氟乙酰胺基团。在2h后，移除有机物并将水层冷冻干燥。通过将残余物溶解于MeOH中并通过两个连续NaHCO3管柱(500mg)中和HCl盐并浓缩滤液，以产生黄色泡沫状期望产物(0.040g,0.079mmol,72.0％产率)。MS(ESI)m/z:504.3(M+H)+。
20D.1-(4-氯-2-(1-((5R,9S)-21,5-二甲基-4-氧代-21H-3-氮杂-1(2,4)-吡啶-2(5,4)-吡唑并环壬番-9-基)-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基)苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000961
在0℃向20C(0.040g,0.079mmol)于ACN(1.134ml)中的黄色溶液中添加ACN(0.25ml)中的亚硝酸异戊酯(0.032ml,0.238mmol)，之后逐滴添加ACN(0.25ml)中的叠氮基三甲基硅烷(0.031ml,0.238mmol)。在10min后，移除冷浴，并使反应混合物升温至室温。在1h后，在室温添加丙炔酸叔丁酯(0.050g,0.397mmol)ACN(0.25ml)和Cu2O(1.136mg,7.94μmol)。在6h后，将反应混合物用DCM稀释并用饱和NH4Cl、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，以产生黄色油。通过正相色谱纯化粗物质，以产生黄色泡沫状期望中间体。通过用50％/TFA/DCM处理来水解叔丁酯。在1h后，浓缩反应混合物，通过反相色谱纯化，并冷冻干燥，以产生期望产物(15mg,25％)。使此物质经受手性纯化，以移除任何剩余残余不期望异构体。在使用
Figure BDA0003662031630000962
IC,21×250mm ID,5μ、使用40％MeOH:ACN:FA/60％CO2以45.0mL/min、100巴及40℃的手性HPLC分离后，标题化合物为早期洗脱的异构体。MS(ESI)m/z:600.3(M+H)+。1H NMR:(400MHZ,ACN-d3)d 8.66(d,J＝5.1Hz,1H),8.41(s,1H),8.07(s,1H),7.83-7.77(m,2H),7.73-7.66(m,2H),7.65-7.61(m,1H),7.37(s,1H),6.99(d,J＝4.2Hz,1H),6.39(s,1H),5.66-5.61(m,1H),4.12(s,3H),2.52(br.s.,1H),2.25-2.19(m,1H),2.07-2.01(m,1H),1.54(dd,J＝13.4,5.5Hz,1H),1.31(d,J＝7.9Hz,1H),1.19-1.14(m,1H),1.05(d,J＝6.8Hz,3H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝5.31min，纯度>95％。
实施例21.1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000971
21A.1-[4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯的制备
Figure BDA0003662031630000972
向如实施例4B中所述制备的4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯胺(0.400g,1.70mmol)于CH3CN(24.2mL)中的冷却(0℃)澄清黄色溶液中添加亚硝酸异戊酯(0.34mL,2.55mmol)，之后逐滴添加叠氮基三甲基硅烷(0.34mL,2.55mmol)。观察到气体逸出。在10min后，移除冷浴，且使反应混合物升温至室温且在室温搅拌1h。形成黄色悬浮液。随后，添加丙炔酸乙酯(0.500g,5.09mmol)和Cu2O(0.024g,0.17mmol)。在1h后，将浑浊浅绿色反应混合物用DCM稀释并用饱和NH4Cl水溶液、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩，以产生黄色油。通过正相色谱纯化产生黄色固体状1-[4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯(0.507g,83％产率)。MS(ESI)m/z:360.0(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.65(d,J＝1.1Hz,1H),8.19(s,1H),7.75(d,J＝2.4Hz,1H),7.62(dd,J＝8.4,2.4Hz,1H),7.50(d,J＝8.4Hz,1H),6.56(d,J＝1.1Hz,1H),4.44(q,J＝7.3Hz,2H),3.96(s,3H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
21B.1-[4-氯-2-(6-羟基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯的制备
Figure BDA0003662031630000973
向1-[4-氯-2-(6-甲氧基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯(0.200g,0.56mmol)于CH3CN(3mL)中的悬浮液中添加TMS-I(0.38mL,2.78mmol)。将所得澄清黄色溶液在50℃加热过夜。将反应混合物冷却至室温且然后将其倒入10％硫代硫酸钠与饱和NaHCO3水溶液的混合物中。用DCM(3×)萃取反应混合物。合并有机层并浓缩。通过正相色谱纯化产生白色固体状1-[4-氯-2-(6-羟基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯(0.098g,51％产率)。MS(ESI)m/z:345.9(M+H)+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.30(s,1H),7.97(d,J＝1.1Hz,1H),7.73(d,J＝2.2Hz,1H),7.62(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.49(d,J＝8.4Hz,1H),6.46(d,J＝0.9Hz,1H),4.44(q,J＝7.3Hz,2H),1.42(t,J＝7.2Hz,3H)。
21C.1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯三氟乙酸盐的制备
Figure BDA0003662031630000981
向含有1-[4-氯-2-(6-羟基嘧啶-4-基)苯基]-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯(0.035g,0.10mmol)和HATU(0.050g,0.13mmol)于CH3CN(1.0mL)中的白色悬浮液的1打兰小瓶中添加DBU(0.023mL,0.15mmol)。将所得澄清黄色溶液在室温搅拌20min。然后添加如实施例13中所述制备的(9R,13S)-13-氨基-3,9-二甲基-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-8-酮(0.030g,0.10mmol)于DMF(1.0mL)中的澄清紫色溶液。在室温搅拌反应混合物。在3h后，停止反应，通过反相色谱直接纯化，在浓缩及冻干后，其产生灰白色固体状1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯三氟乙酸盐(0.0292g,39％产率)。MS(ESI)m/z:628.4(M+H)+。1H NMR(500MHz,CD3OD)δ8.81(s,1H),8.78(s,1H),8.70(d,J＝5.2Hz,1H),7.89(d,J＝2.5Hz,1H),7.74(dd,J＝8.5,2.5Hz,1H),7.70-7.65(m,2H),7.52(dd,J＝5.0,1.7Hz,1H),7.49(s,1H),6.39(s,1H),5.99-5.93(m,1H),4.40(q,J＝7.2Hz,2H),4.05(s,3H),2.74-2.66(m,1H),2.32-2.23(m,1H),2.11-1.93(m,2H),1.64-1.54(m,1H),1.50-1.41(m,1H),1.38(t,J＝7.2Hz,3H),1.00(d,J＝6.9Hz,3H),0.73-0.61(m,1H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝4.90min，纯度＝98.8％。
21D.1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸三氟乙酸盐的制备
将1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸乙酯三氟乙酸盐(0.020g,0.027mmol)于MeOH(0.54mL)和1.0MNaOH(0.14mL,0.14mmol)中的澄清无色溶液在室温搅拌。在2h后，停止反应，用1.0M HCl中和且然后浓缩反应混合物，以产生白色固体。通过反相色谱纯化，在浓缩及冻干后，产生白色固体状1-(4-氯-2-{1-[(9R,13S)-3,9-二甲基-8-氧代-3,4,7,15-四氮杂三环[12.3.1.02,6]十八-1(18),2(6),4,14,16-五烯-13-基]-6-氧代-1,6-二氢嘧啶-4-基}苯基)-1H-1,2,3-***-4-甲酸三氟乙酸盐(0.0126g,64％产率)。MS(ESI)m/z:600.3(M+H)+。1HNMR(500MHz,CD3OD)δ8.78(s,1H),8.73(s,1H),8.71(d,J＝5.2Hz,1H),7.89(d,J＝2.2Hz,1H),7.76-7.73(m,1H),7.70-7.66(m,2H),7.50(dd,J＝5.1,1.5Hz,1H),7.49(s,1H),6.40(s,1H),6.00-5.94(m,1H),4.05(s,3H),2.74-2.66(m,1H),2.32-2.23(m,1H),2.11-1.93(m,2H),1.64-1.54(m,1H),1.51-1.40(m,1H),1.00(d,J＝6.9Hz,3H),0.73-0.61(m,1H)。分析型HPLC(方法A)：RT＝3.37min，纯度＝100％。

Claims (10)

1.一种式(I)化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，
Figure FDA0003662031620000011
其中：
环A独立地选自
Figure FDA0003662031620000012
环B独立地选自
Figure FDA0003662031620000013
R1独立地选自H和C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3、CHF2和COOH；
R3独立地选自H、CHF2、CD3、CH3和
Figure FDA0003662031620000014
R4独立地选自H和F；且
R5独立地选自H、F、Cl、CH3和OCH3。
2.权利要求1的化合物，其中R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2。
3.权利要求1至2中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(II)：
Figure FDA0003662031620000021
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
4.权利要求1至3中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(III)：
Figure FDA0003662031620000022
其中：
R1为C1-4烷基；
R2独立地选自H、F、Cl、CF3和CHF2；
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3；
R4为H；且
R5独立地选自F和Cl。
5.权利要求1至4中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有式(IV)：
Figure FDA0003662031620000031
其中：
R2独立地选自F、Cl、CF3和CHF2；且
R3独立地选自CHF2、CD3和CH3。
6.权利要求1至5中任一项的化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物选自：
Figure FDA0003662031620000032
Figure FDA0003662031620000041
7.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure FDA0003662031620000042
8.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure FDA0003662031620000043
9.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure FDA0003662031620000051
10.一种化合物或其立体异构体、互变异构体、药学上可接受的盐，所述化合物具有以下结构：
Figure FDA0003662031620000052
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ZA (1) ZA201702478B (zh)

Families Citing this family (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB201116559D0 (en) 2011-09-26 2011-11-09 Univ Leuven Kath Novel viral replication inhibitors
NO2760821T3 (zh) 2014-01-31 2018-03-10
CN116987080A (zh) * 2014-01-31 2023-11-03 百时美施贵宝公司 作为因子xia抑制剂的具有杂环p2′基团的大环化合物
JP6526796B2 (ja) 2014-09-04 2019-06-05 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｆｘｉａ阻害剤であるジアミドマクロ環
US9453018B2 (en) 2014-10-01 2016-09-27 Bristol-Myers Squibb Company Pyrimidinones as factor XIa inhibitors
RU2717558C2 (ru) 2014-10-01 2020-03-24 Мерк Патент Гмбх Производные бороновой кислоты
NO2721243T3 (zh) * 2014-10-01 2018-10-20
JOP20160086B1 (ar) 2015-05-08 2021-08-17 2 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research And Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JP6742348B2 (ja) 2015-06-19 2020-08-19 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 第ｘｉａ因子阻害剤としてのジアミド大員環
CN114874222A (zh) 2015-07-29 2022-08-09 百时美施贵宝公司 携带非芳族p2,基团的因子xia新大环
EP3328851B1 (en) * 2015-07-29 2020-04-22 Bristol-Myers Squibb Company Factor xia macrocyclic inhibitors bearing alkyl or cycloalkyl p2' moieties
JO3633B1 (ar) 2015-09-16 2020-08-27 Katholieke Univ Leuven Ku Leuven Research & Development مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JOP20160198B1 (ar) 2015-09-16 2022-03-14 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندول مستبدلة احاديا او ثنائيا بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
EP3423458A1 (en) 2016-03-02 2019-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Diamide macrocycles having factor xia inhibiting activity
MX2018011788A (es) 2016-03-31 2019-05-20 Janssen Pharmaceuticals Inc Derivados de indolina sustituidos como inhibidores de la replicacion virica de dengue.
CO2018009559A2 (es) 2016-03-31 2018-09-20 Janssen Pharmaceuticals Inc Derivados de indol sustituidos como inhibidores de la replicación vírica del dengue
JOP20170069B1 (ar) 2016-04-01 2021-08-17 1 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
CR20180494A (es) 2016-04-01 2019-01-29 Janssen Pharmaceuticals Inc Derivados de compuestos de indol sustituidos como inhibidores de la replicación vírica del dengue
WO2018133793A1 (zh) * 2017-01-18 2018-07-26 广东东阳光药业有限公司 凝血因子XIa抑制剂及其用途
JOP20180025B1 (ar) 2017-03-31 2021-08-17 Janssen Pharmaceuticals Inc مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
JOP20180026A1 (ar) 2017-03-31 2019-01-30 Univ Leuven Kath مشتقات اندولين مستبدلة بصفتها مانعات للتكاثر الفيروسي لحمى الفنك
AU2018274101C1 (en) 2017-05-22 2022-09-15 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Substituted indoline derivatives as dengue viral replication inhibitors
AU2018274100B2 (en) 2017-05-22 2022-06-23 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Substituted indoline derivatives as dengue viral replication inhibitors
WO2020210613A1 (en) * 2019-04-11 2020-10-15 Bristol-Myers Squibb Company Novel synthetic options towards the manufacture of (6r,10s)-10- {4-[5-chloro-2-(4-chloro-1h-1,2,3-triazol-1-yl)phenyl]-6-oxo-1(6h)- pyrimidinyl}- 1-(difluoromethyl)-6-methyl-1,4,7,8,9,10-hexahydro-11,15 -(metheno)pyrazolo [4,3-b] [1,7] diazacyclotetradecin-5(6h)-one
KR20210151183A (ko) * 2019-04-11 2021-12-13 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 치료 혈장 농도를 달성하기 위한 무정형 고체 및 가용화된 제제의 증진된 성능
US20220204508A1 (en) * 2019-04-16 2022-06-30 Medshine Discovery Inc. Macrocyclic derivatives acting as xia factor inhibitor
CN114008047B (zh) * 2019-07-23 2023-03-21 南京明德新药研发有限公司 作为XIa因子抑制剂的大环衍生物
EP4132930A1 (en) * 2020-04-10 2023-02-15 Bristol-Myers Squibb Company Crystalline forms of (9, 135s)-13- {4-[5-chloro-2-(4-chloro-1h,2,3- triazol- 1 -yl)phenyl] -6-oxo- 1,6-dihydropyrimidin- 1-yl}-3-(difluoromethyl)-9-methyl-3,4,7,15- tetraazatricyclo [ 12.3.1.0] octadeca- 1(18), 2(6), 4, 14, 16-pentaen-8-one
TW202229280A (zh) * 2020-10-12 2022-08-01 美商必治妥美雅史谷比公司 （６ｒ，１０ｓ）－１０－｛４－［５－氯－２－（４－氯－１ｈ－１，２，３－***－１－基）苯基］－６－側氧基－１（６ｈ）－嘧啶基｝－１－（二氟甲基）－６－甲基－１，４，７，８，９，１０－六氫－１１，１５－（亞甲橋基）吡唑并［４，３－ｂ］［１，７］二氮雜環十四炔－５（６ｈ）－酮之製備方法
CN115215867B (zh) * 2021-04-21 2023-12-26 上海美悦生物科技发展有限公司 FXIa抑制剂及其药物组合物、制备方法和用途

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3065190D1 (en) 1979-11-05 1983-11-10 Beecham Group Plc Enzyme derivatives, and their preparation
PE121699A1 (es) 1997-02-18 1999-12-08 Boehringer Ingelheim Pharma Heterociclos biciclicos disustituidos como inhibidores de la trombina
ZA985247B (en) 1997-06-19 1999-12-17 Du Pont Merck Pharma Guanidine mimics as factor Xa inhibitors.
WO2000077027A2 (en) 1999-06-14 2000-12-21 Tularik Limited Serine protease inhibitors
DE19962924A1 (de) 1999-12-24 2001-07-05 Bayer Ag Substituierte Oxazolidinone und ihre Verwendung
AR035216A1 (es) 2000-12-01 2004-05-05 Astrazeneca Ab Derivados de acido mandelico ,derivados farmaceuticamente aceptables, uso de estos derivados para la fabricacion de medicamentos, metodos de tratamiento ,procesos para la preparacion de estos derivados, y compuestos intermediarios
PL204653B1 (pl) 2001-09-21 2010-01-29 Bristol Myers Squibb Co Pochodna pirazolo [3, 4-c] pirydyny, jej zastosowanie i kompozycja farmaceutyczna
US20040180855A1 (en) 2003-02-19 2004-09-16 Schumacher William A. Methods of treating thrombosis with reduced risk of increased bleeding times
AU2011215898B2 (en) * 2010-02-11 2016-08-11 Bristol-Myers Squibb Company Macrocycles as Factor XIa inhibitors
TW201319068A (zh) 2011-08-05 2013-05-16 必治妥美雅史谷比公司 作為ｘｉａ因子抑制劑之環狀ｐ１接合劑
TW201311689A (zh) * 2011-08-05 2013-03-16 必治妥美雅史谷比公司 作為因子ｘｉａ抑制劑之新穎巨環化合物
US9327839B2 (en) 2011-08-05 2016-05-03 General Atomics Method and apparatus for inhibiting formation of and/or removing ice from aircraft components
KR102011534B1 (ko) * 2011-12-21 2019-08-16 오노 야꾸힝 고교 가부시키가이샤 인자 ＸＩａ 억제제로서 피리디논 및 피리미디논 유도체
BR112015002293A2 (pt) 2012-08-03 2017-07-04 Bristol Myers Squibb Co di-hidropiridona pi como inibidores do fator xia
US9409908B2 (en) * 2012-08-03 2016-08-09 Bristol-Myers Squibb Company Dihydropyridone p1 as factor XIa inhibitors
CN116987080A (zh) * 2014-01-31 2023-11-03 百时美施贵宝公司 作为因子xia抑制剂的具有杂环p2′基团的大环化合物
NO2760821T3 (zh) * 2014-01-31 2018-03-10
NO2721243T3 (zh) * 2014-10-01 2018-10-20

Also Published As

Publication number Publication date
NZ731416A (en) 2024-01-26
TW202043228A (zh) 2020-12-01
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TN2017000112A1 (en) 2018-07-04
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KR20180126612A (ko) 2018-11-27
CO2017003833A2 (es) 2017-07-11
CY1119678T1 (el) 2018-04-04
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JP2021185182A (ja) 2021-12-09
PH12020500195A1 (en) 2021-02-08
EA031590B1 (ru) 2019-01-31
WO2016053455A1 (en) 2016-04-07
UY36244A (es) 2016-01-29
MX2017003695A (es) 2017-05-30
CN110734435A (zh) 2020-01-31
MX2020010840A (es) 2020-11-06
AU2015324530B2 (en) 2019-10-24
SG11201702576QA (en) 2017-04-27
AU2015324530A1 (en) 2017-05-18
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SI3293186T1 (sl) 2021-01-29
JP7317905B2 (ja) 2023-07-31
AR101367A1 (es) 2016-12-14
IL251434A0 (en) 2017-05-29
LT3293186T (lt) 2020-12-28
SI3089979T1 (sl) 2017-12-29
KR102269999B1 (ko) 2021-06-25
ES2963267T3 (es) 2024-03-26
MA40123A1 (fr) 2017-09-29
KR101921436B1 (ko) 2018-11-22
LT3089979T (lt) 2017-12-27
EP3293186A1 (en) 2018-03-14
KR20170057431A (ko) 2017-05-24
DK3089979T3 (en) 2018-01-15
PT3293186T (pt) 2020-12-09
JP6462865B2 (ja) 2019-01-30
RS56786B1 (sr) 2018-04-30
ES2836270T3 (es) 2021-06-24
EP3828186A2 (en) 2021-06-02
ZA201702478B (en) 2019-06-26
TW202310844A (zh) 2023-03-16
EA201790595A1 (ru) 2017-07-31
PL3089979T3 (pl) 2018-02-28
CL2017000712A1 (es) 2017-11-03
CN106795161B (zh) 2019-10-15
RS61183B1 (sr) 2021-01-29
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BR112017006702A2 (pt) 2017-12-26
EP4286372A2 (en) 2023-12-06
EP3828186A3 (en) 2021-07-28
CY1123663T1 (el) 2022-03-24
CN106795161A (zh) 2017-05-31
CA2963395A1 (en) 2016-04-07
IL276470A (en) 2020-09-30
PH12017500580B1 (en) 2017-08-30
SG10201911652TA (en) 2020-02-27
EP4286372A3 (en) 2024-02-21
EP3293186B1 (en) 2020-09-23
IL251434B (en) 2020-08-31
NO2721243T3 (zh) 2018-10-20
EP3089979B1 (en) 2017-10-18
TN2018000229A1 (en) 2019-10-04
HUE052812T2 (hu) 2021-05-28
HRP20201927T1 (hr) 2021-02-05
AU2020200376B2 (en) 2021-07-08
EP3089979A1 (en) 2016-11-09
DK3293186T3 (da) 2020-12-14
HRP20171950T1 (hr) 2018-02-23
TWI692478B (zh) 2020-05-01
TWI769442B (zh) 2022-07-01
PE20210922A1 (es) 2021-05-19

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