EA027748B1 - Применение придопидина в комбинации с тетрабеназином для лечения двигательных нарушений и ожирения - Google Patents

Применение придопидина в комбинации с тетрабеназином для лечения двигательных нарушений и ожирения Download PDF

Info

Publication number
EA027748B1
EA027748B1 EA201491819A EA201491819A EA027748B1 EA 027748 B1 EA027748 B1 EA 027748B1 EA 201491819 A EA201491819 A EA 201491819A EA 201491819 A EA201491819 A EA 201491819A EA 027748 B1 EA027748 B1 EA 027748B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
tetrabenazine
pridopidine
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
dose
Prior art date
Application number
EA201491819A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201491819A1 (ru
Inventor
Росс Николас Уотерс
Ева Сюзанна Уотерс
Original Assignee
Тева Фармасьютикалз Интернэшнл Гмбх
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Тева Фармасьютикалз Интернэшнл Гмбх filed Critical Тева Фармасьютикалз Интернэшнл Гмбх
Publication of EA201491819A1 publication Critical patent/EA201491819A1/ru
Publication of EA027748B1 publication Critical patent/EA027748B1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01—Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/451—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine having a carbocyclic group directly attached to the heterocyclic ring, e.g. glutethimide, meperidine, loperamide, phencyclidine, piminodine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/20—Hypnotics; Sedatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/22—Anxiolytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system

Abstract

Изобретение относится к применению придопидина для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения в качестве дополнительной терапии к или в комбинации с тетрабеназином. Изобретение также относится к применению придопидина для лечения субъекта, страдающего от ожирения или нарушения, связанного с ожирением, где субъект ранее принимал тетрабеназин или принимает тетрабеназин параллельно, а также для снижения или предотвращения одного или нескольких побочных эффектов периодического введения тетрабеназина субъекту. Изобретение также относится к применению тетрабеназина и придопидина при получении комбинации для лечения двигательного нарушения субъекта, где тетрабеназин и придопидин вводят одновременно или параллельно.

Description

(57) Изобретение относится к применению придопидина для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения в качестве дополнительной терапии к или в комбинации с тетрабеназином. Изобретение также относится к применению придопидина для лечения субъекта, страдающего от ожирения или нарушения, связанного с ожирением, где субъект ранее принимал тетрабеназин или принимает тетрабеназин параллельно, а также для снижения или предотвращения одного или нескольких побочных эффектов периодического введения тетрабеназина субъекту. Изобретение также относится к применению тетрабеназина и придопидина при получении комбинации для лечения двигательного нарушения субъекта, где тетрабеназин и придопидин вводят одновременно или параллельно.
По этой заявке испрашивают приоритет предварительной заявки США № 61/783730, которая подана 14 марта 2013 г., предварительной заявки США № 61/625192, которая подана 17 апреля 2012 г., и предварительной заявки США № 61/620203, которая подана 4 апреля 2012 г., содержание которых включено таким образом в настоящий документ посредством ссылки.
На всем протяжении этой заявки ссылки на различные публикации обозначают, что раскрытия этих цитируемых публикаций во всей их полноте включены таким образом в эту заявку для того, чтобы более полно описать уровень техники, существующий на момент изобретения, описанного в настоящем документе.
Предпосылки изобретения
Придопидин, т.е. 4-(3-метансульфонилфенил)-1-пропилпиперидин, представляет собой лекарственное вещество для лечения хореи Г ентингтона, находящееся в настоящее время в клинических исследованиях. Это соединение впервые описано в \УО 01/46145.
Придопидин представляет собой дофаминергический стабилизатор, который проявляет конкурентный антагонизм к дофаминовому Ό2 рецептору с быстрой кинетикой диссоциации (ЭуНппд. 2010). Ιη νίνο придопидин повышает оборот и высвобождение дофамина в полосатом теле и во фронтальной коре (Ροΐβη, 2010; Ре11ег88оп 2010). Поведенческие эффекты включают антагонизм вызванной психостимулятором гиперактивности, предполагая антипсихотические свойства, но без ингибиторных эффектов, оказываемых на самопроизвольную локомоторную активность (Ройеп, 2010; Ыа1е8ап 2006; Νίΐδδοη, 2004).
Тетрабеназин, т.е. (88,РК)-3-изобутил-9,10-диметокси-1,3,4,6,7,11Ь-гексагидропиридо[2,1а]изохинолин-2-он, представляет собой лекарственное вещество, поставляемое на рынок для симптоматического лечения определенных двигательных нарушений (ΡΌΑ ЬаЬе1 ίοτ ΧΕΝΑΖΙΝΕ (Те1гаЬеп/1пе) 07/06/2011). Тетрабеназин представляет собой ингибитор везикулярного транспортера моноаминов 2 типа (УМАТ), который блокирует везикулярное накопление моноаминных нейротрансмиттеров в головном мозге, что тем самым ведет к пониженному синаптическому высвобождению дофамина, серотонина и норэпинефрина (Ра1еаси, 2007). Это снижение моноаминергической передачи нервных импульсов связано с супрессией, например, функций, зависящих от дофамина, включая движение и подкрепление. Супрессию движений используют терапевтически для того, чтобы улучшать непроизвольные движения, например, при хорее Г ентингтона, поздней дискинезии и болезни Туретта. Однако лечение тетрабеназином связано с тяжелыми побочными эффектами. Такие побочные эффекты включают паркинсонизм, т.е. ригидность и ослабленную двигательную функцию, депрессию и ослабленную функциональную способность.
Полагают, что непроизвольные движения, такие как хорея и дискинезия, возникающие в качестве части клинической манифестации, например хореи Гентингтона, связаны с ослабленной активностью в непрямом кортико-стриато-таламическом пути. Таким образом, положительные эффекты тетрабеназина, оказываемые на такие непроизвольные движения, обусловлены пониженным тонусом дофаминовых Ό2 рецепторов на средних шипиковых нейронах непрямого пути, возникающим в качестве последствия снижения дофаминовой передачи, порождаемого тетрабеназином. Сниженный тонус дофаминовых Ό2 рецепторов ведет к сниженному ингибированию этих средних шипиковых нейронов и, следовательно, к повышенной активности непрямого пути и повышенной супрессии непроизвольных движений. Соответственно, дофаминовые Ό2 антагонисты также часто используют для того, чтобы облегчать хорею при НО (81етеагб 2001).
Комбинированное лечение.
Введение двух лекарственных средств для того, чтобы лечить определенное состояние, такое как двигательное нарушение, дает начало множеству потенциальных проблем. Взаимодействия между двумя лекарственными средствами ίη νίνο являются комплексными. Эффекты какого-либо одного лекарственного средства связаны с его абсорбцией, распределением и элиминацией. Когда два лекарственных средства вводят в организм, каждое лекарственное средство может влиять на абсорбцию, распределение и элиминацию другого и, таким образом, изменять эффекты другого. Например, одно лекарственное средство может ингибировать, облегчать или индуцировать образование ферментов, вовлеченных в метаболический путь элиминации другого лекарственного средства (Сшбамсе ίοτ ΙηάιΐδίΓγ, 1999). В одном из примеров экспериментально показано, что комбинированное введение СА и интерферона (ΙΡΝ) аннулирует клиническую эффективность любой терапии из двух (Вгоб 2000). Сообщалось, что в другом эксперименте добавление преднизона при комбинированном лечении с использованием ΙΡΝ-β антагонизировало его эффект повышающего регулятора. Таким образом, когда два лекарственных средства вводят для того, чтобы лечить одно и то же состояние, невозможно предсказать, будет ли каждое дополнять, препятствовать или не оказывать эффекта на терапевтическую активность другого у субъекта-человека.
Не только взаимодействие между двумя лекарственными средствами может влиять на предполагаемую терапевтическую активность каждого лекарственного средства, но взаимодействие может увеличивать уровни токсических метаболитов (Сшбамсе ίοτ 1п6и81гу, 1999). Взаимодействие также может увеличивать или уменьшать побочные эффекты каждого лекарственного средства. Таким образом, при введении двух лекарственных средств для того, чтобы лечить заболевание, невозможно предсказать, какое изменение возникнет в негативном побочном профиле каждого лекарственного средства. В одном из
- 1 027748 примеров наблюдали, что комбинация натализумаба и интерферона β-1α увеличивает риск непредвиденных побочных эффектов. (Уо11тст, 2008; КиФск 2006; КЛспьекпиШ-ОсМаЧсге. 2005; Ьаидег-ОоиМ 2005).
Кроме того, сложно точно предсказывать, когда произойдет манифестация эффектов взаимодействия между двумя лекарственными средствами. Например, метаболические взаимодействия между лекарственными средствами могут стать видны после начального введения второго лекарственного средства, после того, как эти два достигнут равновесной концентрации, или после отмены одного из лекарственных средств (Ошбаисс Тот 1иби81гу, 1999).
Следовательно, уровень техники на момент подачи таков, что эффекты комбинированного лечения двух лекарственных средств, в частности придопидина и тетрабеназина, не могут быть предсказаны прежде, чем будут доступны результаты комбинированных исследований.
Краткое изложение сущности изобретения
К удивлению, сейчас обнаружено, что придопидин способен инвертировать поведенческую заторможенность, обусловленную тетрабеназином, при этом сохраняя основной фармакологический эффект придопидина, т.е. блокаду дофаминовых Ό2 рецепторов. Эти находки подсказывают, что совместное введение придопидина и тетрабеназина будет повышать терапевтически положительные эффекты тетрабеназина, т.е. дополнительно облегчать непроизвольные движения, а также снижать нежелательные двигательные и аффективные эффекты.
Рассматриваемое изобретение предоставляет применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения в качестве дополнительной терапии к или в комбинации с терапевтически эффективным количеством тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли.
Рассматриваемое изобретение также предусматривает применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения.
Рассматриваемое изобретение также предусматривает применение:
a) терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли; и
b) терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли при получении комбинации для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения, где терапевтически эффективное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят одновременно или параллельно.
Рассматриваемое изобретение также предусматривает применение придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от ожирения или нарушения, связанного с ожирением, где субъект ранее принимал тетрабеназин или принимает тетрабеназин параллельно.
Рассматриваемое изобретение также предусматривает применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для снижения или предотвращения одного или нескольких побочных эффектов периодического введения тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.
Другие цели изобретения будут видны специалисту в данной области из следующего подробного описания и примеров.
Краткое описание нескольких изображений на чертежах
Настоящее изобретение дополнительно проиллюстрировано посредством ссылки на сопроводительные чертежи.
Фиг. 1 - самопроизвольная локомоторная активность (ЬМА), выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для тетрабеназина. Активность показана по дозе для каждого зарегистрированного периода времени. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, и=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и тетрабеназина, который тестировали в трех дозах (0,37; 0,64 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 2 - эффект тетрабеназина, оказываемый на стриарную ЭОРАС (3,4-дигидроксифенилуксусная кислота). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и тетрабеназина, который тестировали в трех дозах (0,37; 0,64 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 3 - экспрессия гена агс (уровни мРНК агс или агс), выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы, после лечения тетрабеназином. Экспрессия показана по дозе и по области (стриарный агс (атс8) или агс фронтальной коры (атсР)). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, и=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и
- 2 027748 тетрабеназина, который тестировали в трех дозах (0,37; 0,64 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 4 - самопроизвольная локомоторная активность, которую выражали в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для придопидина. Активность показана по дозе для каждого зарегистрированного периода времени. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.) и придопидина, который тестировали в трех дозах (11; 33 и 100 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 5 - эффект придопидина (N830016), оказываемый на стриарную ЭОРАС. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.) и придопидина, который тестировали в трех дозах (11; 33 и 100 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 6 - экспрессия гена агс, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы, после лечения придопидином. Экспрессия показана по дозе и по области (стриарный агс (агс8) или агс фронтальной коры (агсР)). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.) и придопидина, который тестировали в трех дозах (11; 33 и 100 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 7 - самопроизвольная локомоторная активность, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для галоперидола. Активность показана по дозе для каждого зарегистрированного периода времени. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в трех дозах (0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 8 - самопроизвольная локомоторная активность, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для галоперидола. Животных распределяли по пяти различным группам лечения, п=4. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в четырех различных дозах (0,04; 0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 9 - эффект галоперидола, оказываемый на стриарную ООРАС. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в трех дозах (0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 10 - экспрессия гена агс, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы, после лечения галоперидолом. Экспрессия показана по дозе и по области (стриарный агс (агс8) или агс фронтальной коры (агсР)). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в трех дозах (0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 11 - самопроизвольная локомоторная активность, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для тетрабеназина+придопидина. Активность показана по дозе для каждого зарегистрированного периода времени. Этот эксперимент выполняли одним из двух путей: (1) Способ В881, в котором животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5, группы: лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг), а третья и четвертая группы состояли из придопидина, который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг) или (2) Способ ТА284, в котором животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=10, группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг), а третья и четвертая группы состояли из придопидина, который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг). В этом эксперименте не брали ткань головного мозга. Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 12 - эффект придопидина, оказываемый на вызванное тетрабеназином увеличение стриарного дофамина. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; №аС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из придопидина (N830016), который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
- 3 027748
Фиг. 13 - экспрессия гена агс, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы после лечения тетрабеназином+придопидином. Экспрессия представлена по дозе и по области (стриарный агс (атс8) или агс фронтальной коры (агсР)). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; ЫаС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из придопидина, который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг)). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 14 - самопроизвольная локомоторная активность, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы для тетрабеназина+галоперидола. Активность показана по дозе для каждого зарегистрированного периода времени. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; ЫаС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из галоперидола, который тестировали в двух дозах (0,04 и 0,12 мг/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 15 - эффект галоперидола, оказываемый на вызванное тетрабеназином увеличение стриарного дофамина. Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; ЫаС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из галоперидола, который тестировали в двух дозах (0,04 и 0,12 мг/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг)). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Фиг. 16 - экспрессия гена агс, выраженная в виде процентной доли от среднего значения контрольной группы, после лечения тетрабеназином+галоперидолом. Экспрессия показана по дозе и по области (стриарный агс (атс8) или агс фронтальной коры (агсР)). Животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; ЫаС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из галоперидола, который тестировали в дзух дозах (0,04 и 0,12 мг/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг). Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к комбинированному лечению с применением придопидина и тетрабеназина для лечения, предотвращения или облегчения двигательного нарушения.
Эффекты придопидина, когда дают в комбинации с тетрабеназином, предполагают, во-первых, что основной фармакологический эффект придопидина, т.е. блокада дофаминовых Ό2 рецепторов, все еще присутствует при совместном введении с тетрабеназином. На это указывает дополнительное увеличение стриарной ООРЛС. индуцированное придопидином у крыс, которых лечили тетрабеназином. При условии, что сниженный тонус стриарных Ό2 рецепторов представляет собой предполагаемый механизм, посредством которого тетрабеназин может облегчать непроизвольные движения, например, при хорее Г ентингтона, болезни Туретта и поздней дискинезии, это предполагает, что комбинация тетрабеназина с придопидином может давать дополнительную клиническую пользу при этих нарушениях.
Во-вторых, придопидин инвертирует поведенческую заторможенность, обусловленную тетрабеназином. Эта поведенческая заторможенность представляет собой доклиническую зависимость некоторых связанных с дофамином побочных эффектов, ограничивающих применение тетрабеназина, в частности ярко выраженные двигательные побочные эффекты, такие как паркинсонизм, т.е. сниженная моторика, но также, возможно, подавленное настроение. Следует отметить, что инверсии поведенческой заторможенности, индуцированной тетрабеназином, не следует ожидать от соединения, действующего на дофаминовые Ό2 рецепторы как чистый антагонист, такой как придопидин, и его не наблюдали в схожем исследовании, которое выполняли с применением дофаминового Ό2 антагониста галоперидола. Скорее, совместное лечение с применением галоперидола дополнительно снижало локомоторную активность.
Таким образом, эти доклинические поведенческие данные подразумевают, что придопидин может противодействовать нежелательным двигательным и аффективным эффектам тетрабеназина.
В одном из вариантов осуществления определенные количества, когда принимают вместе, более эффективны для того, чтобы лечить субъекта, чем когда каждое средство в том же количестве вводят отдельно.
В одном из вариантов осуществления или определенное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли, когда принимают отдельно, и определенное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли, когда принимают отдельно, или каждое такое определенное количество, когда принимают отдельно, не эффективно для того, чтобы лечить субъекта.
Как указано выше, рассматриваемое изобретение предусматривает применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления ле- 4 027748 карственного средства для снижения или предотвращения одного или нескольких побочных эффектов периодического введения тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.
В одном из вариантов осуществления один или несколько побочных эффектов выбирают из депрессии, суицидальности, акатизии, возбужденного состояния, возбуждения, паркинсонизма, успокоения, сонливости и дисфагии.
В одном из вариантов осуществления побочный эффект представляет собой паркинсонизм.
В одном из вариантов осуществления субъект страдает от двигательного нарушения.
В одном из вариантов осуществления определенное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли вводят с помощью перорального введения.
В одном из вариантов осуществления определенное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли вводят ежедневно.
В одном из вариантов осуществления количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли составляет 5-100 мг/сутки.
В одном из вариантов осуществления определенное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят с помощью перорального введения.
В одном из вариантов осуществления определенное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят ежедневно.
В одном из вариантов осуществления количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли составляет от 1,5 до 20 мкмоль/кг в сутки.
В одном из вариантов осуществления двигательное нарушение представляет собой хорею Г ентингтона, синдром Туретта или позднюю дискинезию.
В одном из вариантов осуществления определенное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и определенное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли эффективно для того, чтобы облегчать симптом двигательного нарушения.
В одном из вариантов осуществления симптомом является хорея.
В одном из вариантов осуществления субъект получает терапию тетрабеназином до инициации введения придопидина или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из вариантов осуществления определенное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и определенное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят одновременно.
В одном из вариантов осуществления субъектом является пациент-человек.
Как указано выше, рассматриваемое изобретение предусматривает применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения в качестве дополнительной терапии к или в комбинации с терапевтически эффективным количеством тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли.
В одном из вариантов осуществления двигательное нарушение представляет собой хорею Г ентингтона, синдром Туретта или позднюю дискинезию.
Как указано выше, рассматриваемое изобретение предусматривает применение а) терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и Ь) терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли при получении комбинации для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения, где терапевтически эффективное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят одновременно или параллельно.
В одном из вариантов осуществления двигательное нарушение представляет собой хорею Г ентингтона, синдром Туретта или позднюю дискинезию.
Как указано выше, рассматриваемое изобретение относится к применению терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения.
В предпочтительном варианте осуществления двигательное нарушение представляет собой хорею Гентингтона, синдром Туретта или позднюю дискинезию.
Содержащее придопидин лекарственное средство можно применять одновременно с тетрабеназином, последовательным образом, или посредством раздельного введения. Предпочтительно придопидин дают одновременно с тетрабеназином.
В настоящее время полагают, что придопидин можно использовать (совместно вводить с тетрабеназином) в терапевтически эффективном количестве в диапазоне приблизительно 0,01-1000 мг ΑΡΙ ежедневно, более предпочтительно в диапазоне приблизительно 1-500 мг ΑΡΙ ежедневно, даже более предпочтительно в диапазоне приблизительно 10-200 мг ΑΡΙ ежедневно.
В настоящее время полагают, что тетрабеназин можно использовать (совместно вводить с придопидином) в терапевтически эффективном количестве в диапазоне приблизительно 0,01-1000 мг ΑΡΙ еже- 5 027748 дневно, более предпочтительно в диапазоне приблизительно 1-500 мг ΑΡΙ ежедневно, еще более предпочтительно в диапазоне приблизительно 10-200 мг ΑΡI ежедневно.
Придопидин и тетрабеназин можно совместно вводить посредством какого-либо стандартного пути. В предпочтительном варианте осуществления придопидин и тетрабеназин вводят перорально, внутривенно, внутрисосудисто, интраперитонеально, подкожно, внутримышечно, ингаляционно, топически, с помощью пластыря или суппозитория.
В более предпочтительном варианте осуществления придопидин и тетрабеназин вводят перорально.
В другом более предпочтительном варианте осуществления придопидин и тетрабеназин вводят внутривенно.
В другом варианте осуществления придопидин и тетрабеназин вводят посредством подкожной инъекции.
Любую комбинацию двух или более вариантов осуществления, описанных в настоящем документе, считают входящей в объем настоящего изобретения.
Фармацевтически приемлемые соли.
Активные соединения для применения в соответствии с изобретением можно предоставлять в какой-либо форме, подходящей для предполагаемого введения. Подходящие формы включают фармацевтически (т.е. физиологически) приемлемые соли, и пред- или пролекарственные формы соединения по изобретению.
Примеры фармацевтически приемлемых аддитивных солей включают, без ограничения, нетоксичные неорганические и органические кислотно-аддитивные соли, такие как гидрохлорид, гидробромид, нитрат, перхлорат, фосфат, сульфат, формиат, ацетат, аконат, аскорбат, бензолсульфонат, бензоат, циннамат, цитрат, змбонат, энантат, фумарат, глутамат, гликолят, лактат, малеат, малонат, миндалат, метансульфонат, нафталин-2-сульфонат, фталат, салицилат, сорбат, стеарат, сукцинат, тартрат, толуол-псульфонат и т.п. Такие соли можно формировать посредством процедур, хорошо известных и описанных в данной области.
Хотя соединения для применения в соответствии с изобретением можно вводить в форме сырого соединения, предпочтительно вводить активные ингредиенты, необязательно в форме физиологически приемлемых солей, в фармацевтической композиции вместе с одним или несколькими адъювантами, эксципиентами, носителями, буферами, разбавителями и/или другими обычными фармацевтическими вспомогательными средствами.
Фармацевтическую композицию по изобретению можно вводить посредством какого-либо удобного пути, который подходит для желаемой терапии. Предпочтительные пути введения включают пероральное введение, в частности, в таблетке, капсуле, драже, порошке или в жидкой форме, и парентеральное введение, в частности кожная, подкожная, внутримышечная или внутривенная инъекция. Фармацевтическую композицию по изобретению может изготавливать специалист, используя стандартные способы и общепринятые способы, подходящие для желаемого состава. Когда желательно, можно использовать композиции, адаптированные для того, чтобы получать замедленное высвобождение активного ингредиента.
Дополнительные подробности о способах для состава и введения можно найти в последнем издании Кеттдои'к Рйагтасеийса1 Баеисек (Мааск РиЪНкЫид Со., ЕаЧоп. ΡΑ).
Фактическая доза каждого из активных ингредиентов зависит от природы и тяжести заболевания, которое лечат, точного способа введения, формы введения и благоразумия врача, и дозу можно варьировать с помощью титрования для конкретных условий по данному изобретению, чтобы получать желаемый терапевтический эффект. Однако приведенные ниже дозы для данного соединения и соединения против ожирения считают подходящими.
Определяют дозу соединения в виде ΑΡΙ (активный фармацевтический ингредиент), т.е. вычисляют как свободное основание.
Суточная доза в диапазоне приблизительно 0,1-2 мг ΑΡΙ ежедневно, предпочтительно приблизительно 0,25-1 мг ΑΡΙ ежедневно, в частности 0,25, 0,5 или 1,0 мг ΑΡΙ ежедневно, подходит для терапевтического лечения. Суточную дозу соединения можно вводить одной или несколькими дозами, например двумя, в сутки. В одном из вариантов осуществления суточную дозу вводят в одной дозе.
В настоящее время предполагают, что суточная доза соединения против ожирения должна быть в диапазоне приблизительно 0,1-500 мг активного ингредиента в зависимости от наличествующего соединения. Более конкретные интервалы доз могут быть в диапазоне приблизительно 0,1-2 мг, приблизительно 1-10 мг, приблизительно 10-50 мг, приблизительно 25-100 мг, приблизительно 50-200 мг и приблизительно 100-500 мг ежедневно. Суточную дозу соединения против ожирения можно вводить одной или несколькими дозами, например двумя, в сутки. В одном из вариантов осуществления суточную дозу вводят в одной дозе.
Как используют в настоящем документе, эффективный представляет собой количество, эффективное для того, чтобы достигать конца, обозначает количество компонента, которого достаточно для того, чтобы получить обозначенный терапевтический ответ без чрезмерных нежелательных побочных эффектов (таких как токсичность, раздражение или аллергический ответ) в соответствии с обоснованным
- 6 027748 соотношением польза/риск, когда используют согласно этому раскрытию. Например, количество, эффективное для того, чтобы лечить двигательное нарушение. Конкретное эффективное количество будет варьировать в зависимости от таких факторов, как конкретное состояние, подлежащее лечению, физическое состояние пациента, тип млекопитающего, подлежащего лечению, длительность лечения, свойства сопутствующей терапии (если имеет место) и конкретные используемые составы и структура соединения или его производных.
Как используют в настоящем документе, лечить или лечение охватывает, например, индукцию ингибирования, обратного развития или стаза нарушения и/или заболевания. Как используют в настоящем документе, ингибирование прогрессирования заболевания или осложнения заболевания у субъекта обозначает предотвращение или снижение прогрессирования заболевания и/или осложнения заболевания у субъекта.
Как используют в настоящем документе, комбинация обозначает совокупность реактивов для применения в терапии посредством одновременного или параллельного введения. Одновременное введение относится к введению такой смеси (нестоящей смеси, суспензии, эмульсии или другой физической комбинации) придопидина и тетрабеназина. В этом случае комбинация может представлять собой смесь или отдельные контейнеры придопидина и тетрабеназина, которые комбинируют прямо перед введением. Параллельное введение относится к раздельному введению придопидина и тетрабеназина одновременно или в моменты времени, достаточно близкие друг к другу, чтобы наблюдать синергическую активность или активность, которая является аддитивной или больше, чем аддитивной по отношению к активности отдельно любого из придопидина или тетрабеназина.
Как используют в настоящем документе, ΌΟΡΆΟ представляет собой 3,4дигидроксифенилуксусную кислоту.
Как используют в настоящем документе, ЬМА представляет собой локомоторную активность.
Как используют в настоящем документе, ΤΒΖ представляет собой тетрабеназин.
Придопидин для применения в соответствии с изобретением и тетрабеназин для применения в соответствии с изобретением предпочтительно можно предоставлять в форме, которая подходит для введения в сочетании друг с другом. Предполагают, что это включает случаи, когда один или другой из двух составов можно вводить (необязательно повторно) до, после и/или одновременно с введением другого компонента.
Также придопидин для применения в соответствии с изобретением и тетрабеназин для применения в соответствии с изобретением можно вводить в комбинированной форме или отдельно или отдельно и последовательно, где последовательное введение близко по времени или удалено по времени. В частности, это может включать то, что два состава вводят (необязательно повторно) достаточно близко по времени для получения положительного эффекта для пациента, который больше по сравнению с курсом лечения релевантного состояния, чем если любой из двух составов вводят (необязательно повторно) отдельно, в отсутствие другого состава, в том же курсе лечения. Определение того, обеспечивает ли комбинация больший положительный эффект в отношении конкретного состояния или курса его лечения, зависит от состояния, подлежащего лечению или предотвращению, но может быть достигнуто обычным образом специалистом в данной области.
Когда используют в этом контексте, термин вводят одновременно включает то, что отдельные дозы придопидина и тетрабеназина вводят в пределах 48 ч, например 24 ч, друг от друга.
Введение в примеры.
Двигательной функцией управляет сложная сеть, соединяющая кору головного мозга с подкоровыми структурами, включая базальные ганглии и таламус. Одним из основных путей в этой сети является так называемый непрямой путь, образующий замкнутый контур с обратной связью, который соединяет кору, полосатое тело и таламус через популяцию стриарных САВА-ергических средних шипиковых нейронов, экспрессирующих дофаминовые рецепторы типа Ό2. Этот путь выполняет функцию негативного регулятора движений, и он важен для супрессии чрезмерных движений. Дофамин модулирует непрямой путь посредством ингибиторных дофаминовых Ό2 рецепторов таким образом, что увеличенный дофаминовый тонус на этих рецепторах ведет к сниженной активности непрямого пути и, следовательно, сниженной способности подавлять движения. С другой стороны, сниженный дофаминовый тонус ведет к увеличенной активности непрямого пути, связанной с более сильной супрессией движений.
Другой важный кортико-стриато-таламический путь, вовлеченный в контроль движений, представляет собой так называемый прямой путь, формирующий замкнутый положительный контур с обратной связью через стриарные САВА-ергические средние шипиковые нейроны, экспрессирующе дофаминовые рецепторы типа Ό1. Прямой путь является положительным модулятором двигательной функции, вовлеченным в выбор и обеспечение произвольных движений. Дофамин, действующий на рецепторы типа Ό1, стимулирует стриарные САВА-ергические нейроны в прямом пути, тем самым усиливая движения. Наоборот, снижение дофаминового тонуса на этих Ό1 рецепторах ведет к сниженной способности осуществлять произвольные движения.
Общее снижение дофаминовой передачи, являющееся результатом лечения тетрабеназином, также снижает другие функции, зависящие от дофамина. В частности, также снижается дофаминовый тонус в
- 7 027748 прямом пути со стриарными нейронами, экспрессирующими дофаминовые Ό1 рецепторы, что ведет к ослаблению прямого пути и, следовательно, к сниженной способности осуществлять произвольные движения. Кроме того, истощение дофамина, вызываемое тетрабеназином, вероятно ослабляет мотивацию и подкрепление, зависящие от дофамина, что гипотетически лежит в основе продепрессивных нежелательных эффектов тетрабеназина.
Учитывая, что придопидин является чистым антагонистом дофаминовых Ό2 рецепторов без агонистической активности, ожидают, что терапевтическая комбинация придопидина и тетрабеназина будет вести к дополнительно сниженному тонусу дофаминовых Ό2 рецепторов и, следовательно, к дальнейшему снижению общей локомоторной активности по сравнению с лечением только тетрабеназином.
Примеры
Изобретение дополнительно проиллюстрировано со ссылкой на следующие примеры, которые не предназначены для того, чтобы каким-либо образом ограничивать объем изобретения, как заявлено.
Далее в примерах исследуют взаимодействие между придопидином и тетрабеназином в отношении локомоторной активности. Также определяли стриарные уровни дофамина и ЭОРАС. Тетрабеназин снижает тканевые уровни дофамина в качестве прямого последствия ингибирования УМЛТ. Оба соединения повышают стриарные уровни ЭОРАС в зависимости от дозы ίη νίνο, что отражает сниженный тонус дофаминовых Ό2 рецепторов (РоПеп 2010; РсеНс5. 1983). Кроме того, эффект, оказываемый на экспрессию предраннего гена агс (ассоциированный с цитоскелетом белок с регулируемой активностью/ген с регулируемой активностью 3.1), измеряли во фронтальной коре и полосатом теле. Экспрессия гена агс представляет собой биологический маркер, отражающий синаптическую активность (ЛетаМ, 2001; Ка\\а$1йта 2009). Также осуществляли эксперименты по взаимодействию с тетрабеназином и дофаминовым Ό2 антагонистом галоперидолом для того, чтобы сравнивать эффекты придопидина с таковыми у классического антагониста дофаминовых Ό2 рецепторов.
1) Эффект тетрабеназина, оказываемый на локомоторную активность, стриарную ЭОРЛС и агс.
Тетрабеназин давали подкожно по 0,37, 0,64 и 1,1 мг/кг. ЬМЛ регистрировали в течение 60 мин после дозирования. После этого крыс умерщвляли и брали головной мозг. Анализы тканей головного мозга включали ЭОРЛС в полосатом теле и мРНК агс во фронтальной коре и полосатом теле.
Тетрабеназин снижал локомоторную активность (фиг. 1). Тетрабеназин в зависимости от дозы ингибировал самопроизвольную локомоторную активность. Когда рассматривали полный час регистрации, группа дозы тетрабеназина 1,1 мг/кг показывала значительное снижение до 40% от среднего контрольной группы с наполнителем (Р<0,01). Во время начальных 15 мин значительные снижения (Р<0,05) наблюдали для обеих групп доз тетрабеназина 1,1 и 0,37 мг/кг, тогда как в течение периода 15-60 минут после дозирования достоверные эффекты (Р<0,05) наблюдали при 0,64 и 1,1 мг/кг. Снижение локомоторной активности отражает сниженную дофаминовую передачу, обусловленную ингибированием УМАТ2.
Тетрабеназин в зависимости от дозы повышает стриарную ЭОРАС со статистически значимым эффектом при всех тестированных дозах. Увеличение ЭОРАС представляет собой нейрональный маркер сниженного тонуса дофаминовых Ό2 рецепторов, из-за сниженной дофаминовой передачи у крыс, которых лечили тетрабеназином; см. табл. 1 и фиг. 1, 2.
Агс в полосатом теле и коре: тетрабеназин повышал стриарный агс и снижал агс фронтальной коры. Тетрабеназин в зависимости от дозы повышал мРНК агс в полосатом теле, достигая 147% от среднего контрольной группы с наполнителем (Р<0,01) при наивысшей тестированной дозе (1,1 мг/кг). Во фронтальной коре значительное снижение мРНК агс до 66% средней контрольной группы с наполнителем наблюдали при дозе тетрабеназина 1,1 мг/кг (Р<0,05). При дозе тетрабеназина 0,64 мг/кг имела место тенденция в направлении снижения мРНК фронтальной коры (83% от среднего контрольной группы, р=0,14); см. фиг. 3. Увеличение агс в полосатом теле наиболее вероятно обусловлено сниженным тонусом дофаминовых Ό2 рецепторов. Снижение агс во фронтальной коре вероятно связано со сниженной дофаминовой передачей в коре, что ведет к пониженному тонусу дофаминовых Ό1 рецепторов.
2) Эффект придопидина, оказываемый на локомоторную активность, стриарную ЭОРАС и агс.
Придопидин давали подкожно по 11, 33 и 100 мкмоль/кг. Придопидин не демонстрировал ингибиторного эффекта, оказываемого на самопроизвольную локомоторную активность. Легкое увеличение локомоторной активности наблюдали при средней дозе, 33 мкмоль/кг, в течение всего 60-минутного периода регистрации; см. фиг. 4. Когда исследовали полный час регистрации, значительное увеличение локомоторной активность и до 138% от среднего контрольной группы с наполнителем наблюдали для группы дозы придопидина 33 мкмоль/кг (Р<0,05). Во время начальных 15 мин значительное увеличение (Р<0,05) наблюдали для группы дозы придопидина 11 мкмоль/кг, тогда как в течение периода 15-60 минут после дозирования достоверные эффекты не наблюдали.
Придопидин в зависимости от дозы увеличивает стриарную ЭОРАС, со статистически значимыми эффектами при всех тестированных дозах. Увеличение ЭОРАС представляет собой нейрональный маркер сниженного тонуса дофаминовых Ό2 рецепторов из-за антагонизма к дофаминовому Ό2 рецептору, проявляемого придопидином; см. фиг. 5 и табл. 1.
Придопидин в зависимости от дозы увеличивал стриарную и корковую экспрессию гена агс, достигая статистической значимости при самых высоких тестированных дозах. Придопидин увеличивал уров- 8 027748 ни мРНК агс во фронтальной коре в зависимости от дозы, вплоть до 149% (р<0,01) и 222% (р<0,001) от среднего контрольной группы с наполнителем при дозах 33 и 100 мкмоль/кг соответственно (фиг. 6). Придопидин увеличивал уровни мРНК агс в полосатом теле в зависимости от дозы. По сравнению со средними релевантных контрольных групп, уровни достигали 168 и 253% (р<0,01 для обеих доз при 33 и 100 мкмоль/кг придопидина соответственно) (фиг. 6). Увеличение агс в полосатом теле наиболее вероятно обусловлено сниженным тонусом дофаминовых Ό2 рецепторов. Увеличение агс во фронтальной коре вероятно связано с увеличенной дофаминовой передачей в коре, что ведет к увеличенному тонусу дофаминовых Ό1 рецепторов.
3) Эффект галоперидола, оказываемый на локомоторную активность, стриарную ЭОРАС и агс.
Галоперидол давали подкожно по 0,12, 0,37 и 1,1 мг/кг (см. фиг. 7). В дополнительном эксперименте для оценки эффектов при более низких дозах, давали 0,04, 0,12, 0,37 и 1,1 мг (см. фиг. 8). Галоперидол демонстрировал зависящий от дозы ингибиторный эффект, оказываемый на самопроизвольную локомоторную активность. Статистически значимые эффекты наблюдали при 0,12 мг/кг и более высоких дозах, но не при наименьшей тестированной дозе 0,04 мг/кг.
Более конкретно, когда рассматривали полный час регистрации, группы доз галоперидола 0,37 и 1,1 мг/кг демонстрировали значительные снижения приблизительно до 35% от среднего контрольной группы с наполнителем (Р<0,05). Во время начальных 15 мин значительные снижения (Р<0,05) наблюдали для обеих групп доз галоперидола 0,37 и 1,1 мг/кг, тогда как в течение периода 15-60 мин после дозирования достоверный эффект (Р<0,05) наблюдали только для группы дозы 1,1 мг/кг.
Г алоперидол в зависимости от дозы увеличивает стриарную ЭОРЛС, со статистически значимыми эффектами при всех тестированных дозах. Увеличение ЭОРЛС представляет собой нейрональный маркер сниженного тонуса дофаминовых Ό2 рецепторов из-за антагонизма к дофаминовым Ό2 рецепторам; см. табл. 1 и фиг. 9.
Галоперидол в зависимости от дозы увеличивал мРНК агс в полосатом теле, достигая 262% (Р<0,01), 331% (Р<0,001), 409% (Р<0,01) соответственно, от среднего контрольной группы с наполнителем при дозах 0,12, 0,37 и 1,1 мг/кг. Увеличение агс в полосатом теле наиболее вероятно обусловлено сниженным тонусом дофаминовых Ό2 рецепторов. Достоверный эффект галоперидола, оказываемый на корковую экспрессию гена агс, отсутствовал; см. фиг. 10.
Таблица 1
Эффекты, оказываемые на стриарную ЭОРЛС у крыс, которые не получали лекарственных средств, и крыс, которых лечили тетрабеназином
Доза-ответ у крыс, которые не получали лекарственных средств Доза-ответ у крыс, которые не получали лекарственных средств Взаимодействие с тетрабеназином Взаимодействие с тетрабеназином
Тестовое соединение Группа дозы Стриарная ООРАС Стриарный ОА Стриарная ООРАС
Тетрабеназин 0,37 мг/кг 0,64 мг/кг 1,1 мг/кг 100±6 14418** 208+14*** 263119*** 100+6 48+2*** 3313*** 20+2*** - -
Придопидин С ТС 11 мкмоль/кг 33 мкмоль/кг 100 мкмоль/кг С 100+5 117+5* 17817*** 236+17*** 10013 5311” 299113’”
- 100+11 100+10
10413 - -
101+3 12318 91+11
73+4*** 15514’- 98+8
Галоперидол С ТС 100122 100+5 6513”’ 100+3 202+9’” 10018
0,04 мг/кг 117135 96+5 18716”’ 79+3’
0, 12 мг/кг 27618*** 7813** 218112’” 8 7110
0, 37 мг/кг 254+17*** 79+5* -
1,1 мг/кг 292+10*** 81+2* -
С - контрольная группа с носителем;
БОРЛС - 3,4-дигидроксифенилукусусная кислота;
ТС - контрольная группа тетрабеназина;
*р<0,05; **р<0,01; ***р<0,001 в сравнении с контрольной группой с носителем; 1р<0,05; ί 1р<0,01; ί 1тр<0,001 в сравнении с контрольной группой тетрабеназина.
Данные представлены как уровни ЭОРЛС среднее±стандартная ошибка среднего, выраженная в виде процентных долей от среднего контрольной группы.
Вкратце, хотя все три антидофаминергических соединения вызывали увеличение стриарной ПОРАС и увеличение экспрессии гена стриарного агс, оба эффекта наиболее вероятно связаны со сниженным тонусом дофаминовых Ό2 рецепторов, придопидин уникален в том отношении, что он не ингибирует локомоторную активность. Другой признак, отличающий придопидин от галоперидола или тетрабена- 9 027748 зина, заключается в увеличенной корковой экспрессии гена агс.
Комбинационные эксперименты.
Для того чтобы тестировать эффект дофаминового Ό2 антагониста, когда вводят животным с частично истощенным дофамином, галоперидол и придопидин комбинировали с тетрабеназином в дозе, которая вызывала субмаксимальные, но достоверные эффекты в стриарной ΌΟΡΑΟ и локомоторной активности.
4) Эффект придопидина, оказываемый на вызванное тетрабеназином снижение локомоторной активности, увеличение стриарного дофамина и агс.
В эксперименте по взаимодействию с придопидином и тетрабеназином, придопидин давали по 33 и 100 мкмоль/кг в комбинации с тетрабеназином по 0,64 мг/кг; см. фиг. 11. Записи локомоторной активности демонстрировали, что придопидин инвертировал поведенческую заторможенность, вызванную тетрабеназином. Однако эффекты, оказываемые на стриарную ΌΟΡΑΟ, были аддитивными, т.е. совместное введение придопидина дополнительно увеличивало стриарную ΌΟΡΑΟ.
Для ингибирования локомоторной активности имело место значительное снижение в контрольной группе тетрабеназина в сравнении с контролями, которых лечили наполнителем, для полного часа регистрации (Р<0,001), также как для периода 0-15 мин (Р<0,01), так и для периода 15-60 мин (Р<0,01). При рассмотрении полного часа регистрации, придопидин инвертировал ингибирование локомоторной активности, индуцированное тетрабеназином в обеих группах доз 33 и 100 мкмоль/кг, достигая 135% (Р<0,05) и 137% (Р<0,01) соответственно, от среднего значения тетрабиназинового контроля. В течение периодов 0-15 мин, а также 15-60 мин, этот эффект инверсии достигал значимости для группы дозы придопидина 100 мкмоль/кг. Это подразумевает, что тонус стриарных Ό2 рецепторов дополнительно снижали, когда добавляли придопидин животным с истощенными моноаминами; см. фиг. 11.
В эксперименте по взаимодействию, где 0,64 мг/кг тетрабеназина комбинировали с 33 или 100 мкмоль/кг придопидина, наблюдали, что тетрабеназин индуцировал значительное увеличение уровней стриарной ΌΟΡΑΟ по сравнению с контрольной группой, которую лечили наполнителем (р<0,01; табл. 1). Придопидин дополнительно увеличивал уровни ΌΟΡΑΟ в полосатом теле, достигая 155% от среднего контрольной группы тетрабеназина в дозе 100 мкмоль/кг (р<0,01); см. табл. 1 и фиг. 12.
Аналогичным образом, дополнительно увеличивали экспрессию стриарного агс посредством добавления придопидина. В отличие от этого, снижению агс, индуцированному тетрабеназином, противодействовал придопидин.
Придопидин инвертировал снижение агс фронтальной коры, индуцированное тетрабеназином, как показано на фиг. 13. Более конкретно, тетрабеназин не оказывал достоверного эффекта на мРНК стриарного агс в дозе 0,64 мг/кг, которую использовали в эксперименте по взаимодействию. Придопидин при совместном введении с тетрабеназином в зависимости от дозы увеличивал стриарный агс, достигая 144% (Р<0,05) и 207% (Р<0,01) соответственно, среднего контрольной группы тетрабеназина при дозах придопидина 33 и 100 мкмоль/кг.
Тетрабеназин индуцировал значительное снижение (Р<0,05) мРНК агс фронтальной коры, что соответствует тенденции в направлении снижения мРНК агс фронтальной коры при дозе 0,64 мг/кг, которое наблюдали в эксперименте по дозозависимому эффекту с тетрабеназином (фиг. 3). Придопидин в зависимости от дозы инвертировал снижение мРНК агс фронтальной коры, индуцированное тетрабеназином. При 33 и 100 мкмоль/кг придопидина происходило повышение мРНК агс до 125% (Р<0,05) и 193% (Р<0,05) соответственно, от среднего контрольной группы тетрабеназина.
5) Эффект галоперидола, оказываемый на индуцированное тетрабеназином снижение локомоторной активности, увеличение стриарного дофамина и агс.
В эксперименте по взаимодействию с галоперидолом и тетрабеназином, галоперидол давали по 0,04 и 0,12 мг/кг в комбинации с тетрабеназином по 0,64 мг/кг.
Записи локомоторной активности демонстрировали, что галоперидол дополнительно снижал локомоторную активность у животных, которых лечили тетрабеназином. Более конкретно, регистрация локомоторной активности в течение полного часа демонстрировала, что галоперидол значительно (Р<0,01) снижал локомоторную активность у крыс, которых лечили тетрабеназином в обеих дозах 0,04 и 0,12 мг/кг, до 51 и 41% от среднего контрольной группы тетрабеназина соответственно. В течение первых 15 мин регистрации этот понижающий эффект был значительным при обеих дозах 0,04 мг/кг (Р<0,01) и 0,12 мг/кг (Р<0,05), тогда как в течение периода 15-60 мин снижение было значительным только для дозы 0,12 мг/кг (Р<0,05); см. фиг. 14.
Эффекты, оказываемые на стриарную ΌΟΡΑΟ, были аддитивными, т.е. совместное введение галоперидола с тетрабеназином вызывало дополнительное увеличение стриарной ΌΟΡΑΟ. В эксперименте по взаимодействию, где тетрабеназин 0,64 мг/кг комбинировали с галоперидолом 0,04 или 0,12 мг/кг, тетрабеназин индуцировал значительное увеличение уровней стриарной ΌΟΡΑΟ по сравнению с контрольной группой, которую лечили наполнителем (р<0,001; табл. 1). Галоперидол дополнительно увеличивал уровни ΌΟΡΑΟ в полосатом теле, достигая 187 и 218% от среднего контрольной группы тетрабеназина в дозах 0,04 и 0,12 мг/кг соответственно (р<0,001 для обеих доз); см. табл. 1 и фиг. 15.
Отсутствовал достоверный эффект галоперидола, оказываемый на экспрессию коркового гена агс у
- 10 027748 крыс, которых совместно лечили тетрабеназином. Галоперидол дополнительно увеличивает стриарный агс у животных, которых лечили тетрабеназином (фиг. 16). Тетрабеназин не оказывал достоверный эффект на мРНК стриарного агс в дозе 0,64 мг/кг, которую использовали в эксперименте по взаимодействию. Галоперидол при совместном введении с тетрабеназином в зависимости от дозы увеличивал стриарный агс, достигая 272% (Р<0,001) и 400% (Р<0,001) соответственно, от средней контрольной группы тетрабеназина при дозах галоперидола 0,04 мг/кг и 0,12 мг/кг.
Тетрабеназин проявлял тенденцию к снижению мРНК агс фронтальной коры (Р=0,08), что находится в соответствии с тенденцией в направлении снижения мРНК агс фронтальной коры при дозе 0,64 мг/кг, которое наблюдали в эксперименте по дозозависимому эффекту с тетрабеназином (фиг. 3), и значительного снижения, которое наблюдали в эксперименте по взаимодействию с придопидином и тетрабеназином (фиг. 13). Отсутствовал достоверный эффект галоперидола, оказываемый на мРНК агс фронтальной коры у животных, которых лечили тетрабеназином.
Способы тестирования.
Следующие тесты используют для оценки соединений для применения в соответствии с изобретением.
Животные.
Использовали самцов крыс 8ргадие-0а^1еу из В&К 8сапЬиг (§о11еи1ииа, 8\уебеп) (1ВВ858), СНаг1с5 Ктует (Кб1п, Оеттаиу) (КК104, В831) или Тасотс (Г)Ьу, Пеитагк) (В885, В881, КК219, ТА284). В момент прибытия крысы весили 160-180 г. Крыс взвешивали 220-260 г в момент исследований локомоторной активности и нейрохимии тканей. Животных содержали по пять животных на клетку со включенным освещением между 06:00 и 18:00. Все эксперименты осуществляли в соответствии со шведским законодательством по защите животных и с одобрения местного комитета по этике отношений к животным.
Дозирование.
1ВВ858: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (физиологический раствор; ИаС1 0,9% об./мас.) и АСК16, который тестировали в трех дозах (11; 33 и 100 мкмоль/кг).
В831: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в трех дозах (0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг).
К104: животных распределяли по пяти различным группам лечения, п=4. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и галоперидола, который тестировали в четырех различных дозах (0,04; 0,12; 0,37 и 1,1 мкмоль/кг).
КК219: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя (глюкоза 5,5% об./мас.) и тетрабеназина, который тестировали в трех дозах (0,37; 0,64 и 1,1 мкмоль/кг).
В881: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; ИаС1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из N830016, который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг).
ТА284: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=10. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; №С1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из N830016, который тестировали в двух дозах (33 и 100 мкмоль/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг). В этом эксперименте не брали ткань головного мозга.
В885: животных распределяли по четырем различным группам лечения, п=5. Группы лечения состояли из наполнителя 1:1 (физиологический раствор; №С1 0,9% об./мас.+5,5% глюкоза с несколькими каплями НАс), вторая группа состояла из одной дозы тетрабеназина (0,64 мг/кг) и третья и четвертая группы состояли из галоперидола, который тестировали в двух дозах (0,04 и 0,12 мг/кг вместе с тетрабеназином в одной дозе (0,64 мг/кг).
Все соединения инъецировали подкожно за 4 мин до начала регистрации локомоторной активности в объеме 5 мл/кг.
Тест щ νίνο. Поведение.
Поведенческую активность измеряют с использованием восьми мониторов активности ОщЕсап (ΚΧΥΖΜ (16) ТАО, Отпйеск Е1ес1готс8, Со1итЬи8, ОН, И8А), соединенных с анализатором Отпйеск ЭщЕсап и компьютером Арр1е МасшЮкЬ, оснащенным цифровой интерфейсной платой ^В ΌΙΟ-24, №-1йоиа1 П'ЩгитепК И8А). Каждый монитор активности состоит из квадратной металлической рамки, оборудованной фотолучевыми датчиками. Во время измерений поведенческой активности крысу помещают в прозрачную акриловую клетку с матовым черным полом (ШхГхВ, 41x41x30 см), которую в свою очередь помещают в монитор активности. Каждый монитор активности оборудован тремя рядами инфракрасных фотолучевых датчиков, каждый ряд состоит из 16 датчиков. Два ряда помещают вдоль передней части и бока пола клетки, под углом 90°, а третий ряд помещают в 10 см над полом для того, чтобы из- 11 027748 мерять вертикальную активность. Фотолучевые датчики располагают на 2,5 см. Каждый монитор активности вставляют в идентичный ящик, ослабляющий звук и свет (ШхГхВ 55x55x45), который содержит слабое домашнее освещение и вентилятор.
Компьютерное программное обеспечение написано с использованием объектно-ориентированного программирования (ЬаЪУ1Е^™, Ыайоиа1 иЩгитспК ΛιΐδΙίη. ТХ, И8А).
Поведенческие данные от каждого монитора активности, представляющие положение (горизонтальный центр тяжести и вертикальная активность) животного в каждый момент времени, регистрируют на частоте дискретизации 25 Гц и собирают с использованием специально написанного приложения ЬАВУ1О№™. Данные каждого сеанса регистрации хранят и анализируют с учетом пройденного расстояния. Каждый сеанс регистрации поведения длится 60 мин, начиная приблизительно через 4 мин после инъекции тестируемого соединения. Результаты представлены в виде счетов/60 мин, счетов/45 мин или счетов/15 мин, в произвольных единицах длины. Статистическое сравнение осуществляют с использованием критерия Стьюдента против контрольной группы.
Тест ίη νίνο. Нейрохимия.
Сразу после сеансов поведенческой активности крыс декапитируют и их головной мозг быстро изымают и помещают на ледяную чашку Петри.
Головной мозг разрезали на полосатое тело, лимбическую область (содержит прилежащее ядро как сердцевину, так и оболочку, миндалевидное тело, большинство частей обонятельного бугорка и вентрального паллидума), фронтальную кору и гиппокамп. Образцы тканей незамедлительно замораживали и хранили при -80°С до того, как их гомогенизировали с использованием перхлорной кислоты (РСА) (0,1 М), этилендиаминтетрауксусной кислоты (ЭДТА) (5,37 мМ), глутатиона (О8Н) (0,65 мМ) и альфаметилдофамина (0,25 мкМ) в качестве внутреннего стандарта. Цифровой ультразвуковой дезинтегратор (Вгапкоп Όίβίΐαΐ §отйет 250-Ό) использовали для того, чтобы гомогенизировать ткань из полосатого тела и лимбической области. Ткань коры гомогенизировали с использованием гомогенизатора ЦЦта Тиггах Т25. Все образцы центрифугировали на 10000 об./мин в течение 10 мин при 4°С. Ткань коры фильтровали в фильтровальной бумаге Мипк1е11 5,5 см марки 1Р. Анализировали тканевые концентрации (нг/г ткани) моноаминных трансмиттерных веществ (норэпинефрин (ΝΑ), дофамин (ΌΑ), 5-гидрокситриптамин (5-НТ)) в тканевых элюатах, а также их аминных метаболитов (норметанефрин (ΝΜ), 3-метокситирамин (3-МТ)) и кислых метаболитов (3,4-дигидроксифенилаланин (ΌΟΡΑΟ), 5-гидроксииндолуксусная кислота (5-Н1АА), гомованилиновая кислота (НУА)) посредством ВЭЖХ разделения и электрохимического обнаружения (ВЭЖХ/ЭХ). Стоковые стандарты (ЭА, NΑ, 5-НТ, 3-МТ, ЭОРАС, НУА, Н1АА, 500 мкг/мл) и внутренний стандарт (АМОА 500 мкг/мл) получают один раз каждые три месяца. 5-НТ и 5Н1АА растворяют в воде тййЦ. ЭА, NΑ, ЭОРАС, ММ, 3-МТ и НУА растворяют в 0,01 М НС1. 5-НТ, 5-Н1АА, ΝΜ и НУА держат в холодильнике; ОА, ЭОРАС, NΑ и 3-МТ держат в морозилке. Стандартный раствор для анализов, содержащий стандарты, разведенные в гомогенизирующем растворе до концентрации 0,05 мкг/мл, получают ежедневно.
Аналитический способ основан на двух хроматографических разделениях, специализированных для аминов или кислот. Две хроматографические системы совместно используют общий автоинжектор с 10портовым клапанами и двумя контурами образцов для одновременной инжекции в две системы. Обе системы оборудованы колонкой с обращенной фазой (Ьипа С18(2), йр 3 мкм, 50x2 мм 1.Й., РЬепотепех) и электрохимическое обнаружение выполняют при двух потенциалах на стеклоуглеродных электродах (Р1000, Вюапа1уйса1 8у81ет8, 1пс.). Эффлюент колонки пропускают через Т-образное соединение в ячейку обнаружения или в выпуск для отходов. Это выполняют посредством двух соленоидных клапанов, которые блокируют выпуск отходов или детектора. Предотвращая достижение детектора хроматографическим фронтом, достигают более хороших условий обнаружения. Водная подвижная фаза (0,4 мл/мин) для кислотной системы содержит лимонную кислоту 14 мМ, цитрат натрия 10 мМ, МеОН 15% (об./об.) и ЭДТА 0,1 мМ. Потенциалы обнаружения относительно Ад/АдС1 эталона составляют 0,45 и 0,60 В. Водная подвижная фаза для образования ионных пар (0,5 мл/мин) для аминной системы содержит лимонную кислоту 5 мМ, цитрат натрия 10 мМ, МеОН 9% (об./об.), ΜеСN 10,5% об./об.), декансульфоновую кислоту 0,45 мМ и ЭДТА 0,1 мМ. Потенциалы обнаружения относительно А§/А§С1 эталона составляют 0,45 и 0,65 В.
ПЦР.
Для данных, представленных на фиг. 3, 13 и 16, использовали следующие способы.
Общую РНК получают способом с гуанидинизотиоцианатом (СЬотсхуткк 1987). Осадки РНК разрешают в воде МО и хранят при -80°С. Концентрацию образца определяют спектрофотометрически посредством ШпоЭгор Ό-1000. Число показателя качества и число целостности рРНК измеряют с использованием Ехрепоп (Вю-Кай) на случайных образцах.
Двухстадийную обратную транскрипцию осуществляют с использованием набора Бирегкспр! III (1пШго§еп). 1 мкг общей РНК подвергают обратной транскрипции с 5 мкл 2х КТ КеасИоп М1х, 1 мкл КТ Еп/уте М1х, объем корректировали до 10 мкл ОЕРС-обработанной водой. Добавляют 1 Ед РНКазы Н Е. сой. кДНК разводят в 40 раз и хранят при -20°С.
- 12 027748
Три последовательности (один ген, представляющий интерес, и два эталонных гена) амплифицируют вместе в тройной ПЦР-реакции. Для измерений в реальном времени ПЦР: 5 мкл кДНК реакции амплифицируют в 20 мкл реакционной смеси, содержащей 10 мкл буфера ОнапШ, 3,5 мкл Мр, 0,15 мкМ каждого праймера и 0,1 мкМ каждого зонда. ПЦР в реальном времени измеряют на СРХ96 (Вюгаб) с использованием следующих настроек для всех генов: предварительная инкубация 3 мин при 95°С, после чего следовало 40 циклов из денатурации при 95°С в течение 15 с, отжига и элонгации при 60°С в течение 1 мин.
Эталонные гены представляют собой НРКТ и циклофилин.
Последовательности праймеров и зонда для измерения агс представляют собой следующее.
Ген с регулируемой активностью (агс) (номер доступа И19866).
Смысловой: 5'-ОСА СТТ САА САА СОА ОТТ ТС-3'.
Антисмысловой: 5'-ССА САТ АСА СТО ТСТ СОТ А-3'.
Зонд: ССС СТТ АСС ССА САС САА СТ.
Краситель: 5'РАМ. Гаситель: 31 ΒΗζ)1.
Размер продукта: 149.
Гипоксантинфосфорибозилтрансфераза (НРКТ) (номер доступа ΆΓ001282).
Смысловой: 5'- -АСС САТ ТТС ААТ САТ СТТ ТС-3'.
Антисмысловой: : 5 1 - -СТО СТА СТТ СТТ ТАС ТСС С-3
Зонд: ТСТ АСА ттс ААС ТТС ССС СТС ТС.
Циклофилин А (номер доступа М19533).
Краситель: 5ΉΕΧ. Гаситель: 31 ВН<21 Размер продукта: 121
Смысловой: : 5'-СТС САС САА АСА САА АТС- -3 ' .
Антисмысловой: 5'-АТС ССТ ТСТ ТТС АСС ТТС-3
Зонд: Т С ССА ТСС АСС САС ТСА СТ.
Краситель: : 5' Техасский красный.
Гаситель: 3' ВН<22 .
Размер продукта: 100.
Правильные ПЦР продукты подтверждают электрофорезом в агарозном геле (2%). ПЦР продукты очищают с использованием набора для очистки ПЦР из Р1адеп (Уа1епс1а, СА, ИЗА). Все гены секвенируют в М^О, Оегшапу. Количества генов, представляющих интерес, нормализуют с использованием двух эталонных генов НРКТ и циклофилина А.
Для данных, представленных на фиг. 6, обратную транскрипцию и ПЦР осуществляли следующим образом.
Обратную транскрипцию осуществляют с использованием набора ТйегшоЗспр! (1пуйгодеп). 1 мкг общей РНК подвергают обратной транскрипции с 25 пмоль олиго (бТ), 62,5 нг случайных гексамеров, 7,5 Ед Тйегшозспр! КТ, 10 Ед ККазеОи!, 2 мкл 5х οΙ)ΝΛ Зуп1йе818 Вийег, 1 мМ бЫТР, 0,05М ОТТ, корректируют объем до 10 мкл ОЕРС-обработанной водой. Затем кДНК разводят в 40 раз и хранят при -20°С.
Для измерений одинарной ПЦР в реальном времени: 0,7 мкл кДНК реакции амплифицируют в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 1х буфер для ПЦР, 0,2 мМ бЫТР, 3,7 мМ МдС12, 0,15 мМ 3ΥΒΚ Огееп, 0,4 мкМ праймера и 1 Ед полимеразы Тац. ПЦР в реальном времени измеряют на 1сус1ег (Вюгаб) с использованием следующих настроек для всех генов: предварительная инкубация 60 с при 95°С, после чего следовало 40 циклов из денатурации при 95°С в течение 20 с, отжига при 56°С в течение 20 с, элонгации при 72°С в течение 30 с.
Анализ мРНК агс: исследование дозозависимого эффекта и взаимодействий для тетрабеназина, придопидина и галоперидола.
Общую РНК получали способом с гуанидинизотиоцианатом (ЗсйаеГег 1984). Осадки РНК растворяли в воде ультравысокой чистоты и хранили при -80°С. Концентрацию РНК определяли спектрофотометрически с использованием ЫапоОгор ΝΏ-1000 (Тйегшо Зшепййс, ^а11йаш, Маззасйизейд, ИЗА). Число показателя качества и число целостности рибосомной РНК определяли для случайных образцов с использованием электрофоретической системы Ехрепоп (Вю-Каб ЬаЪогаЩпез, НегсШез, Са1йогша, ИЗА). Обратную транскрипцию осуществляли с использованием набора Зирегзспр! III или набора ТйегшоЗспр! (оба из Ы£е ТесйпоЬщез Еигоре ВУ, З1оскйо1ш, З^ебеп). Для исследований дозозависимого эффекта и взаимодействия тетрабеназина 1 мкг РНК подвергали обратной транскрипции с 5 мкл 2х КТ Кеасйоп М1х и 1 мкл КТ Еп/уте М1х (набор Зирегьспр! III); для исследований с придопидином и галоперидолом 1 мкг
- 13 027748
РНК подвергали обратной транскрипции с использованием набора Тйегто8спр1; с 25 пмоль олиго(бТ), 62,5 нг случайных гексамеров, 7,5 Ед обратной транскриптазы Тйегто8сг1р1, 10 Ед КЫазеОи!, 2 мкл 5х сГЖА 8уп1йе§1§ Вийег, 1 мМ 6ΝΤΡ и 0,05 М дитиотреитола. Во всех исследованиях объем кДНК корректировали до 10 мкл водой, обработанной диэтилпирокарбонатом. Добавляли РНКазу Н ЕзсйеысЫа сой (1 Ед), после чего кДНК разводили в 40 раз и хранили при -20°С.
кДНК агс и двух эталонных генов, гипоксантингуанинфосфорибозилтрансферазы (НРКТ) и циклофилина А, амплифицировали с помощью ПЦР в реальном времени или в тройной реакции (исследования тетрабеназина) или в трех одинарных реакциях (исследования с придопидином и галоперидолом). Для тройной ПЦР в реальном времени 5 мкл кДНК амплифицировали в 20 мкл реакционной смеси, содержащей 10 мкл буфера ОиаШа (ОиапШ Вюзшепсез 1пс., Оаййегзйигд, Магу1апб, И8А), 3,5 мкл воды ультравысокой чистоты, 0,15 мкМ каждого праймера и 0,1 мкМ каждого зонда (последовательности используемых праймеров и зондов приведены в табл. 3). Продукты тройной ПЦР в реальном времени обнаруживали в системе СРХ96 (Вю-Каб Еайога&пез, Негси1е§, Сай&гша, И8А) с использованием следующих настроек для всех генов: предварительная инкубация 3 мин при 95°С, после чего следовало 40 циклов из денатурации при 95°С в течение 15 с и отжига и элонгации при 60°С в течение 1 мин. Для измерений одинарной ПЦР в реальном времени 0,7 мкл кДНК амплифицировали в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 1х буфер для ПЦР, 0,2 мМ 6ΝΤΡ, 3,7 мМ МдС12, 0,15 мМ 8ΥΒΚ Огееп, 0,4 мкМ праймера (табл. 2) и 1 Ед полимеразы Тад. Использовали систему обнаружения 1сус1ег (Вю-Каб ЕаЬога1ог1е§, Негси1ез, Сай&гша, И8А) со следующими настройками для всех генов: предварительная инкубация 60 с при 95°С, после чего следовало 40 циклов из денатурации при 95°С в течение 20 с, отжига при 56°С в течение 20 с, элонгации при 72°С в течение 30 с. ПЦР продукты правильных размеров подтверждали с помощью электрофореза в агарозном геле (2%); после этого продукты очищали с использованием набора для очистки ПЦР из ^^адеη (Уа1епша, СА, И8А). Все гены секвенировали в МШО Вю1есй (Ейегзйегд, Оегтапу). Количество мРНК тКА нормализовали к таковым у двух эталонных генов посредством калибровочной кривой, построенной для каждого гена с использованием шести серийных четырехкратных разведений очищенных ПЦР продуктов.
Праймеры.
Гипоксантинфосфорибозилтрансфераза (НРКТ) (номер доступа АР001282).
Смысловой: 5'-ССС САС АСТ ТОТ ТСС АТТ ТС-3'.
Антисмысловой: 5'-ССС СТС ТСТ ТТТ АСС СТТ ТС-3'.
Циклофилин А (номер доступа М19533)
Смысловой: 5'-СТС ТСТ ТТТ ССС ССС ТТС СТ-3'.
Антисмысловой: 5'-ТСТ ССТ СТС ТТТ ССА АСТ ТТС ТСТ С-3'.
Ген с регулируемой активностью (агс) (номер доступа и 19866)
Смысловой: 5'-СТС ССА САТ ССА САА ССА СА-3'.
Антисмысловой: 5'-ССТ ССТ САС ССТ ССА САТ АС-3'.
Начальные количества ДНК определяют посредством калибровочной кривой, построенной для каждого гена с использованием 6 серийных 4-кратных разведений очищенных ПЦР продуктов.
Для данных, представленных на фиг. 10, применяли те же способы, что и для данных на фиг. 6, за исключением того, что ПЦР проводили на термоциклере МуК) (Вюгаб).
Обсуждение примеров.
Продемонстрировано, что придопидин инвертировал поведенческую заторможенность, обусловленную тетрабеназином. Этот эффект не разделялся галоперидолом, который снижал локомоторную активность у животных, которых лечили тетрабеназином. Эксперименты по взаимодействию дополнительно показывали, что как придопидин, так и галоперидол сохраняли свои характерные нейрохимические эффекты, то есть увеличение стриарной ЭОРАС при совместном введении с тетрабеназином. Аналогичным образом, сопровождающее увеличение уровней мРНК стриарного агс, индуцированное придопидином и галоперидолом, сохранялось в экспериментах по взаимодействию с тетрабеназином.
В дополнение к локомоторной депрессии и увеличенным уровням стриарной ЭОРАС тетрабеназин вызывал зависящее от дозы снижение уровней стриарного дофамина, на который не влияло совместное введение придопидина или галоперидола. Кроме того, тетрабеназин вызывал зависящее от дозы увеличение уровней мРНК агс фронтальной коры. Этому эффекту в зависимости от дозы противодействовал придопидин, но не галоперидол.
Придопидин противодействовал поведенческой депрессии, индуцированной тетрабеназином. В соответствии с предыдущими данными, тетрабеназин и галоперидол отчетливо ингибировали самопроизвольную локомоторную активность (8а1ои 2001, 8сйае£ег 1984), тогда как придопидин не проявлял таких эффектов. Это отсутствие ингибиторных эффектов, оказываемых на самопроизвольную локомоторную активность у крыс, представляет собой часть характерного фармакологического профиля придопидина (Роп1еп 2010).
Фармакологический эффект придопидина, оказываемый на дофаминовые 1)2 рецепторы, также присутствовал при совместном введении с тетрабеназином. Нейрохимический анализ показывал, что все три
- 14 027748 тестированных соединения вызывали дозозависимое увеличение стриарной ЭОРАС, достигая приблизительно 250-300% от контрольных уровней при применении самых высоких доз, наряду с предыдущими результатами. Увеличение стриарной ЭОРАС является обычным признаком дофаминовых Ό2 антагонистов, а также соединений, в целом вызывающих сниженный тонус центральных дофаминовых Ό2 рецепторов, включая частичные агонисты с низкой собственной активностью и лекарственные средства, которые истощают моноамины (Эотбап, 2004; Ко£Пег-Тат1оу 1971). Наблюдаемое увеличение стриарной ΌΘРАС, таким образом, представляет основной фармакологический эффект каждого из тестированных соединений. В экспериментах по взаимодействию как галоперидол, так и придопидин вызывали дополнительное увеличение стриарной ЭОРАС при совместном введении с тетрабеназином. Это явно указывает на то, что основной эффект придопидина и галоперидол все еще присутствовал у крыс с частично истощенными моноаминами. Кроме того, несмотря на тот факт, что придопидин инвертирует локомоторносупрессорный эффект тетрабеназина, когда их вводят совместно, придопидин влиял на снижение тканевых уровней дофамина, вызываемых в качестве отличительного эффекта тетрабеназина, что подсказывает, что он не отменяет фармакологические эффекты тетрабеназина как такового.
В общем, типичные нейрохимические эффекты всех трех соединений, оказываемые на ЭОРАС. а также на уровни дофамина, присутствовали на всем протяжении исследований, что указывает на сохранение основных эффектов каждого соединения, оказываемых на дофаминергическую передачу.
Увеличенная совместным лечением придопидином мРНК агс в коре может помочь объяснять инверсию индуцированной тетрабеназином локомоторной депрессии. В качестве дополнительного биологического маркера значимости, в частности, для различения придопидина и галоперидола, мРНК агс измеряли во фронтальной коре и полосатом теле. Агс представляет собой ранний ген, связанный с синаптической активацией и передачей сигналов рецептора ΜΌΑ, и ранее сообщалось о его увеличении в полосатом теле в ответ на несколько дофаминовых Ό2 антагонистов, а также дофаминергические стабилизаторы. Однако ранее не сообщалось об эффектах тетрабеназина, оказываемых на экспрессию гена агс. Как продемонстрировано в примерах, тетрабеназин индуцировал значительное увеличение стриарного агс. Хотя по величине он и несколько ниже, чем эффекты придопидина и галоперидола, этот эффект также может быть связан со сниженной стриарной дофаминовой передачей у животных, которых лечили тетрабеназином. Как в случае для ЭОРАС, тетрабеназин и придопидин вызывали схожие эффекты, оказываемые на стриарный агс как у крыс, которые как не получали лекарственных средств, так и у крыс, которых лечили тетрабеназином.
Во фронтальной коре тетрабеназин снижал экспрессию гена агс в зависимости от дозы, с достоверными эффектами при дозах, которые равны или превышают использованные для экспериментов по взаимодействию. Исследования дозозависимых эффектов придопидина и галоперидола в зависимости от дозы демонстрировали увеличение экспрессии гена агс во фронтальной коре с помощью придопидина, но не эффекты галоперидола. Способность придопидина увеличивать экспрессию гена агс во фронтальной коре также очевидна у крыс, которых лечили тетрабеназином. Таким образом, этот фармакологический эффект, который отличает придопидин от галоперидола и других классических дофаминовых Ό2 антагонистов, сохранялся при частичном истощении моноаминов. Возможно, что он представляет некоторую степень корковой синаптической активации, которая может вносить вклад в способность придопидина противодействовать поведенческой заторможенности у крыс, которых лечили тетрабеназином. В поддержку этой интерпретации, придопидин демонстрировал увеличение возникновений потенциалов действия у спонтанно активных пирамидальных клеток во фронтальной коре.
Хотя примеры четко показывают, что эффекты придопидина сохраняются при совместном введении придопидина с тетрабеназином, комбинация придопидина и тетрабеназина не вызывает возникновения каких-либо признаков нежелательных эффектов. В отличие от этого, комбинация галоперидола и тетрабеназина вызывала выраженную поведенческую депрессию, что указывает на риск чрезмерных побочных антидофаминергических двигательных эффектов при использовании такой комбинации у человека, наряду с существующими рекомендациями соблюдают осторожность в отношении совместного лечения пациентов с хореей Гентингтона тетрабеназином и нейролептическими лекарственными средствами.
Сводка по уровням дофамина в полосатом теле.
Эффекты различных способов лечения на уровни дофамина в стриарной ткани приведены в табл. 1. Тетрабеназин индуцировал дозозависимое снижение стриарного дофамина. В дозе, использованной в экспериментах по взаимодействию, 0,64 мг/кг, тетрабеназин значительно снижал стриарный дофамин, достигая приблизительно 50% от среднего контрольной группы с наполнителем, на всем протяжении проведенных исследований. Придопидин и галоперидол вызывали меньшие снижения стриарного дофамина при наиболее высоких тестированных дозах. В экспериментах по взаимодействию совместное лечение с использованием придопидина или галоперидола, по существу, не влияло на эффект тетрабеназина, оказываемый на стриарный дофамин.
Вкратце, придопидин инвертировал поведенческую заторможенность, вызванную истощающим моноамины тетрабеназином, при этом сохраняя основные нейрохимические эффекты придопидина, связанные с антагонизмом к дофаминовому Ό2 рецептору. Таким образом, придопидин облегчал локомо- 15 027748 торные депрессорные эффекты тетрабеназина, несмотря дополнительное снижение тонуса стриарных дофаминовых Ό2 рецепторов при введении придопидина в дополнение к тетрабеназину. Придопидин также инвертировал индуцированное тетрабеназином снижение экспрессии гена агс во фронтальной коре. Предположительно, это отражает активацию корковой нейрональной активности, которая может вносить вклад в локомоторные стимулирующие эффекты придопидина у гипоактивных крыс с частично истощенными моноаминами.
Таблица 2
Сводка по исследованиям дозозависимых эффектов и взаимодействий
Исследование Придопидин Тетрабеназин Галоперидол Животных в группе Группа 1 Группа 2 Группа 3 Г руппа 4 Г руппа 5 Измерение(я)
1 Исследование дозозависимого эффекта 5а Носитель11 Придопидин 11 мкмоль/кг Придопидин 33 мкмоль/кг Придопидин 100 мкмоль/кг Локомоторная активность, ООРАС,мРНК
2 Исследование дозозависимого эффекта 5Ь Носитель6 Тетрабеназин 0,37 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг Тетрабеназин 1,1 мкмоль/кг Локомоторная активность, ООРАС, мРНК агс
3 Исследование дозозависимого эффекта 4е Носитель6 Г алоперидол 0,04 мг/кг Галоперидол 0,12 мг/кг Галоперидол 0,37 мг/кг Г алоперидол 1,1 мг/кг Локомоторная активность, ООРАС
4 Исследование дозозависимого эффекта 5е Носитель6 Галоперидол 0,12 мг/кг Галоперидол 0,37 мг/кг Галоперидол 1,1 мг/кг мРНК агс
5 Исследование взаимодействия лекарственных средств 5Ь Носитель1 Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+придопидин 33 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+придопидин 100 мкмоль/кг Локомоторная активность, ООРАС, мРНК агс
6 Исследование взаимодействия лекарственных средств 10ь Носитель1 Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+придопидин 33 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+придопидин 100 мкмоль/кг Локомоторная активность
7 Исследование взаимодействия лекарственных средств 5Ь Носитель1 Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+галоперидол 0,04 мг/кг Тетрабеназин 0,64 мкмоль/кг+галоперидол 0,12 мг/кг Локомоторная активность, ООРАС, мРНК агс
а Животные из ЗсаиЬиг;
Ь животные из Тасошс;
с животные из Сйаг1с§ Ктусг;
' 0,9% (мас./об.) ЫаС1;
с 5,5% (мас./об.) глюкоза;
‘ смесь 0,9% (мас./об.) №С1 и 5,5% (мас./об.) глюкозы 1:1, скорректированная до рН 4,5 ледяной уксусной кислотой.
Таблица 3
Последовательности праймеров и зондов для измерения экспрессии Агс и двух эталонных генов
Ген с регулируемой активностью (агс) Гипоксантинфосфорибо- зилтрансфераза (НРВТ) Циклофилин А
Номер доступа ОепеВапк и!9866 АР001282 М19533
Праймеры (5'-3') Смысловой Антисмысловой ΘΘΑΘΤΤΟΑΑΘ ААОСАОТТТС ССАСАТАСАО ТОТСТОбТА ΑΘΟΘΑΊΠΤΟΑ АТСАТОТТТе СТОСТАОТТС тттастсос СТСОАССАА АСАСАААТО АТСССТТСТТ ТСАССТТС
Зонд ссесттАсесс АСА6СААСТ ТОТАбАТТСААСТТ оссбстетс ттассАТСслес САСТСАСТ
Краситель 5' - РАМ 5'-НЕМ 5'-техасский красный
Гаситель 3' -ВН<21 3'-ЕНО1 3'-ВН02
Размер продукта (п. о . ) 149 121 100
- 16 027748
Список литературы.
АпЬегзеп НЬ, КИра£г1ск 1С. ΡΓβνΘΠίίοη Ьу (+/-)-8-ЬуЬгоху2- (сП-п-ргору1ат1по) ЬеЬгаПп о£ ЬоЬЬ. са£а1ерзу апб. ЬЬе гхзез ίη га£ зЬг1аЬа1 Ьорашгпе теЬаЬоНзт саизеЬ Ьу Ьа1орег1с1о1. Вг И РЬагтасо1 1996,-118 (2): 421-7.
ВгоЬ ей а1. (2000) Аппа1з о£ Ыеиго1оду, 47:127-131.
ВигдипЬег СМ, СиЬЬтап М, Рег1тап 3, СооЬтап Ν, уап Каттеп ΌΡ, СооЬтап Ь. Ап 1пЬегпаЫопа1 Зиглгеу-ЪазеЦ А1дог1£Ьт £ог ЬНе РЬагтасо1од1с ТгеаЬтепЬ о£ СЬогеа ίη НипЫпдЬоп'з Олзеазе. РЬоЗ Сигг 2011;3:ΚΚΝ1260.
СЬотсгупзк!, Р. & ЗассЫ, Ν. Апа1. В1осНет. 162: 156-159,
1987 ОуЬгхпд Т, Νίεΐ3θη ЕО, Зопеззоп С, Ре££егззоп Р, Каг1ззоп ,3, Змепззоп Р, еС а1. ТЬе Ьораттпегдгс зЬаЫИгегз ΡΓίάορίάίηβ (АСК16) апб (-)-03116162 Ызр1ау Ьоратлпе Ώ(2) гесерЬог апЬадопхзт апб. £аз£ гесерЬог сНззоЫаЫоп ргорегЫез. Еиг И РНагшасо1 2010,-628(1-3):19-26.
Сгоплег В, ИаЬегз Ν, РопЬеп Н, К1атег Ώ, ТДаЬегз 3, ТеЦго££ И. РЫоркНпе тпсгеазез д1и£ата£егд1с пеигоп £1г1пд ίη ЬЬе £гоп£а1 согСех. 1п: 1п£егпаЫопа1 Сопдгезз о£ РагЫпзоп'з Отзеазе апЬ Μονβπιβηϋ О1зог0егз 2012,- 2012; ϋιώΐίη, 1ге1апб;
2012 .
СилЬапсе £ог 1пЬиз£гу. Ιη νίνο Ьгид теЬаЬоЫзт/Ьгид гпЬегасЫоп зЬиЫез - зЬибу Ьезгдп, ЬаЬа апа1уз1з, апЬ гесоттепЬаЬгопз £ог скэзхпд апН 1аЬеЫпд, и.З. Ώερ£. Неа1ЬЬ апЬ Нишап 3νο3., ΡΌΑ, СЬг. £ог Бгид Еча1. апб Кез., СЬг. Рог В1о1од1ез Ема1. апс! Кез., С1тп./РЬагт., Νον. 1999 <ЫЬр : //νννζνζ. £Ьа . дом/сЬег/дЫпз/те£аЬо1. ρά£> .
ИогсЗап 3, Коргтмгса V, Оипп К, ТоЬЬог! К, ЫкисЫ Т, А1£аг СА. ίη νίνο е££ес£з о£ аг1ртрга2о1е оп согЫса1 апЬ з£г1а£а1 Ьораттпегдхс апЬ зегоЬопегдтс £ипсЫоп. Еиг И РНагтасо1 2004 ;483 (1) :45-53 .
КаадазЫта Т, Окипо Н, Иопака М, АбасЫ-МогтзЫта А, Куо Ν, Окатига М, е£ а1. ЗупарЫс Ησ£ίνί£γ-τβ3ροη3ίνθ е1етеп£ ίη СЬе Агс/АгдЗ. 1 рготоЬег еззепЫа1 £ог зупарзе-£о-пис1еиз зхдпаИпд ίη асЬЫаЬеЬ пеигопз. Ргос ИаЫ АсасЯ 3οί иЗА 2009,-106 (1):31621.
- 17 027748
К1е1пзсНт10Р-ВеМазРегз ер а1. (2005) Ыете Епд1апс1 СГоигпа1 о£ Μεάίοίηε, 353:369-379.
Ьапдег-Сои1а еР а1. (2005) Иете Епд1апД Лоигпа1 о£ Μεάίοίηβ, 353:369-379.
ИаРезап 5, 3νεη33οη КА, Ееск1езз СЕ, ЫоЬгеда ЛЯ, Ваг1оте КВ, СоНапззоп АМ, е£ а1. ТНе Дораштпе зЬаЬШгегз (5)-(-)-{3теРНапези1£опу1-рНепу1)-1-ргору1-р1рег1й1пе [ ( - ) -03116162] апб 4-(3-теРНапези1£опу1рНепу1)-1-ргору1-р1рег1сИпе (АСЕ16) зНоте Н1дН ίη νίνο 02 гесерРог оссирапсу, апРгрзусНоРхс-Ике е££1сасу, апсЗ. 1оте роРепР1а1 £ог тоРог 31с1е е££ес£з ίη £Не гаР. ί РНагтасо1 Ехр ТНег 2006,-318(2):810-8.
Νίΐ33οη М, Саг1ззоп А, МагктпНиНРа КЕ, Зопеззоп С, РеРРегззоп Р, Си11ше М, е£ а1. ТНе доратхпегдхс зРаЬШзег АСЕ16 соипРегасРз РНе ΗεΗενίουΓεΙ ргхпкьРхуагаРхоп тпйисей Ьу £Не ΝΜΌΑ гесерРог апРадопгзР МК-801 ίη тхсе: лтрИсаРхопз £ог содпурдоп. Ргод ЫеигорзусНорНагшасо1 ΒίοΙ РзусНгаРгу 2004,-28 (4) :677-85.
Ра1еаси ϋ. ТеРгаЬепаггпе ίη РНе РгеаРтепР о£ НипРгпдРоп'з сПзеазе. ЫеигорзусНгаРг Пз ТгеаР 2007,-3(5).-545-51.
РеРРегззоп Р, РопРеп Н, МаРегз Ν, МаРегз 3, Зопеззоп С. ЗупРНезгз апб. еуа1иаРгоп о£ а зеР о£ 4-р.Иепу1р1рег1а1пез ап<3 4рНепуХргрегаггпез аз 02 гесерРог ИдапНз апН РНе άίεοονθΓγ о£ РНе Йоратгпегдгс зРаЬШгег 4-[3-(теРНу1зи1£опу1)рНепу1]-1ргору1р1рег1<Ипе (НипРехИ, ΡΓίάορίάίηε, АСЕ16) . Л МеД СНет 2010;53(6):2510-20.
РопРеп Н, Зоппгкзеп К, АЬгаНашззоп Т, ИаРегз Ν, СизРа£ззоп В, Напзе Е, ер а1. ΒеΗаν^ο^а1 апН пеигосНет1са1 герегсиззгопз о£ Н1рросатра1 пеРмогк асРгугРу ЫоскаЬе Ьиггпд РНе пеопаРа1 реггой. Вгагп Еез Όεν Вгагп Еез 2005,-155(1):81-6.
РопРеп Н, КиШпдздо Л, ЬадегкуазР 3, МагРгп Р, РеРРегззоп Р, Зопеззоп С, еР а1. Ιη νίνο рНагтасо1оду о£ РНе Ьорашгпегдгс зРаЫЫгег ΡΓΪάορίάίηβ. Еиг Л РНагтасо1 2010,-644(1-3):88-95.
ЕесНез А, Вигке ЕЕ, КиНп СМ, Наззап ΜΝ, Ласкзоп УЕ, РаНп 3. ТеРгаЬепаггпе, ап ат1пе-0ер1еР1пд <3гид, а1зо Ыоскз йоратгпе гесерРогз ίη гаР Ьгапп. Л РНагтасо1 Ехр ТНег 1983,-225(3):51521.
- 18 027748
Ко££1ег-Таг1ом 3, ЗЬагшап ΌΡ, ТедегДгпе Р. 3,4сИНу<Згохур11епу1асе£1с асз.с1 апй 4-Цуйгоху-3-те£1юхурЬепу1асе£1С ас1Й ίη £Не тоизе зРгхаРит: а ге£1есЫоп о£ 1п£га- апд ех£гапеигопа1 теРаЬоНзш о£ Доратхпе? Вг Л РЬагтасо1 1971;42(3) :34351.
За£ои Т, АпЛегзоп АЛ, ίΡοΗ Т, Татпаг Υ, НауазЫ Υ,
НазЫтоРо 3. Керер£р1\ге аДт1п1зРгаР1оп о£ ТеРгаЪепаг1пе хпДисез ТггеллепзтЫе сЬапдез ίη ΙοοοπιοΡίοη апй тогрЬо1оду о£ РНе зиЬзРапРта птдга ίη газ. Εχρ Τοχίοοί РаРЬо1 2001,-53 (4):303-8.
ЗсЬае£ег ОСТ, М1сНае1 ЕР. Огид гпРегасРтопз оп зропРапеоиз 1осогаоРог асР^тРу ίη гаРз. Иеиго1ерр1сз апб. атрНеРаттпетпДисеД ЬурегасР^хРу. ИеигорНагтасо1оду 1984,-23(8):909-14.
ЗРездагб. О, Мог1еу РР. 3θ1θ3Ρίνε РагдеРтпд о£ пеад1у зупРИезТгеЛ Агс тКЫА Ро асРъуе зупарзез гедиггез ΝΜΏΑ гесерРог асР^аПоп. Иеигоп 2001,-30(1):227-40.
Уо11тег еР а1. (2008) С1аР1гатег асеРаРе а£Рег ίηάυοΡίοη
РИегару ννίΡΗ штРохапРгопе ίη ге1арз!пд ти1Р1р1е зс1егоз1з
ΜιιΐΡίρΙβ Зс1егоз13, 00:1-8.
ΡϋΑ ЬаЬе1 £ог ΧΕΝΑΖΙΝΕ (ТеРгаЬепгхпе) 07/06/2011.

Claims (12)

1. Применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения, в качестве дополнительной терапии к или в комбинации с терапевтически эффективным количеством тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли.
2. Применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения.
3. Применение по п.2, где лекарственное средство вводится ежедневно и содержит 5-100 мг тетрабеназина.
4. Применение по любому из пп.1-3, где лекарственное средство вводится ежедневно и содержит от 1,5 до 20 мкмоль придопидина/кг массы тела субъекта.
5. Применение по любому из пп.1-4, где двигательное нарушение представляет собой хорею Гентингтона, синдром Туретта или позднюю дискинезию.
6. Применение придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для лечения субъекта, страдающего от ожирения или нарушения, связанного с ожирением, где субъект ранее принимал тетрабеназин или принимает тетрабеназин параллельно.
7. Применение терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли для изготовления лекарственного средства для снижения или предотвращения одного или нескольких побочных эффектов периодического введения тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли субъекту.
8. Применение по п.7, где один или несколько побочных эффектов выбирают из депрессии, суицидальности, акатизии, возбужденного состояния, возбуждения, паркинсонизма, успокоения, сонливости и дисфагии.
9. Применение по любому из пп.7, 8, где лекарственное средство вводится ежедневно и содержит от 1,5 до 20 мкмоль придопидина/кг массы тела субъекта.
10. Применение по любому из пп.7-9, где субъект страдает от двигательного нарушения, выбранного из группы, состоящей из хореи Гентингтона, синдрома Туретта или поздней дискинезии.
11. Применение по любому из пп.1-5 и 10, где лекарственное средство эффективно для того, чтобы облегчать симптом двигательного нарушения.
12. Применение а) терапевтически эффективного количества тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и Ь) терапевтически эффективного количества придопидина или его фармацевтически приемлемой соли при получении комбинации для лечения субъекта, страдающего от двигательного нарушения, где терапевтически эффективное количество тетрабеназина или его фармацевтически приемлемой соли и терапевтически эффективное количество придопидина или его фармацевтически приемлемой соли вводят одновременно или параллельно.
EA201491819A 2012-04-04 2013-04-03 Применение придопидина в комбинации с тетрабеназином для лечения двигательных нарушений и ожирения EA027748B1 (ru)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261620203P 2012-04-04 2012-04-04
US201261625192P 2012-04-17 2012-04-17
US201361783730P 2013-03-14 2013-03-14
PCT/US2013/035124 WO2013152105A1 (en) 2012-04-04 2013-04-03 Pharmaceutical compositions for combination therapy

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201491819A1 EA201491819A1 (ru) 2015-04-30
EA027748B1 true EA027748B1 (ru) 2017-08-31

Family

ID=49292803

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201491819A EA027748B1 (ru) 2012-04-04 2013-04-03 Применение придопидина в комбинации с тетрабеназином для лечения двигательных нарушений и ожирения

Country Status (16)

Country Link
US (3) US20130267552A1 (ru)
EP (1) EP2844346B1 (ru)
JP (1) JP6177875B2 (ru)
KR (1) KR20150013476A (ru)
CN (1) CN104470585A (ru)
AU (1) AU2013243461A1 (ru)
BR (1) BR112014024672A8 (ru)
CA (1) CA2869145A1 (ru)
EA (1) EA027748B1 (ru)
ES (1) ES2776678T3 (ru)
HK (1) HK1206297A1 (ru)
IL (1) IL234831B (ru)
MX (1) MX2014011971A (ru)
NZ (1) NZ630560A (ru)
WO (1) WO2013152105A1 (ru)
ZA (1) ZA201407726B (ru)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
USRE46117E1 (en) 1999-12-22 2016-08-23 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Modulators of dopamine neurotransmission
NZ580856A (en) * 2007-04-12 2011-11-25 Nsab Af Neurosearch Sweden Ab N-oxide and/or di-n-oxide derivatives of dopamine receptor stabilizers/modulators displaying improved cardiovascular side-effects profiles
SG10201506761XA (en) 2010-09-03 2015-10-29 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Deuterated analogs of pridopidine useful as dopaminergic stabilizers
KR20140075703A (ko) 2011-09-07 2014-06-19 아이백스 인터내셔널 게엠베하 프리도피딘 하이드로클로라이드의 다형 형태
US9012476B2 (en) 2011-12-08 2015-04-21 IVAX International GmbH Hydrobromide salt of pridopidine
SG11201509729YA (en) 2013-06-21 2015-12-30 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Use of high dose pridopidine for treating huntington's disease
US11090297B2 (en) 2013-06-21 2021-08-17 Prilenia Neurotherapeutics Ltd. Pridopidine for treating huntington's disease
HUE058288T2 (hu) 2014-01-22 2022-07-28 Prilenia Neurotherapeutics Ltd Pridopidin módosított hatóanyag-leadású készítményei
AR100187A1 (es) * 2014-04-25 2016-09-14 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Composición farmacéutica que contiene un inhibidor de alk (quinasa de linfoma anaplásico)
TW201613859A (en) 2014-06-30 2016-04-16 Teva Pharma Analogs of PRIDOPIDINE, their preparation and use
CA2970799A1 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Teva Pharmaceuticals International Gmbh L-tartrate salt of pridopidine
US11471449B2 (en) 2015-02-25 2022-10-18 Prilenia Neurotherapeutics Ltd. Use of pridopidine to improve cognitive function and for treating Alzheimer's disease
HUE060353T2 (hu) 2015-02-25 2023-02-28 Prilenia Neurotherapeutics Ltd Pridopidin alkalmazása memória javítására
AR105434A1 (es) 2015-07-22 2017-10-04 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Proceso para preparar pridopidina
EP3419622B1 (en) 2016-02-24 2024-03-06 Prilenia Neurotherapeutics Ltd. Treatment of neurodegenerative eye disease using pridopidine
BR112019003731A2 (pt) 2016-08-24 2019-07-16 Prilenia Therapeutics Dev Ltd aplicação de pridopidina para tratamento de distonias
CN109923102B (zh) 2016-08-24 2022-11-15 普瑞尼亚神经治疗有限公司 普利多匹定用于治疗功能下降的用途
DK3512506T3 (da) 2016-09-16 2022-04-19 Prilenia Neurotherapeutics Ltd Anvendelse af pridopidin til behandling af retts syndrom
JP7114604B2 (ja) 2017-01-20 2022-08-08 プリレニア ニューロセラピューティクス リミテッド 脆弱ｘ症候群の治療のためのプリドピジンの使用
WO2019010491A1 (en) * 2017-07-07 2019-01-10 University Of Pittsburgh-Of The Commonwealth System Of Higher Education COMBINATIONS OF MEDICINES FOR THE PROTECTION AGAINST THE DEATH OF NEURONAL CELLS
WO2019016357A1 (en) 2017-07-20 2019-01-24 Neurolixis USE OF SELECTIVE 5-HT1A SEROTONIN RECEPTOR AGONISTS TO TREAT THE ADVERSE EFFECTS OF VMAT INHIBITORS
CN111278440B (zh) 2017-08-14 2023-04-25 普瑞尼亚神经治疗有限公司 用普利多匹定治疗肌萎缩性脊髓侧索硬化症的方法
BR112020004045A2 (pt) 2017-08-30 2020-09-01 Prilenia Neurotherapeutics Ltd. formas de dosagem de elevada concentração de pridopidina
WO2019050775A1 (en) * 2017-09-08 2019-03-14 Teva Pharmaceuticals International Gmbh PRIDOPIDINE FOR THE TREATMENT OF DYSKINESIC INDUCED BY A MEDICINAL PRODUCT
WO2020110128A1 (en) * 2018-11-29 2020-06-04 Prilenia Neurotherapeutics Ltd. Combination of pridopidine and an additional therapeutic agent for treating drug induced dyskinesia
JP2021510971A (ja) * 2018-01-17 2021-04-30 ヒルシュマン カー コミュニケーション ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＨｉｒｓｃｈｍａｎｎ Ｃａｒ Ｃｏｍｍｕｎｉｃａｔｉｏｎ ＧｍｂＨ 受信機システムから遠隔にあるｌｔｅモジュール
CA3097189A1 (en) * 2018-04-25 2019-10-31 Shinkei Therapeutics Llc Tetrabenazine transdermal delivery device

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214859B1 (en) * 1997-08-07 2001-04-10 Fujimoto Brothers Co., Ltd. Ethylamine derivatives
WO2008133884A2 (en) * 2007-04-23 2008-11-06 Combinatorx, Incorporated Methods and compositions for the treatment of neurodegenerative disorders
US20100055133A1 (en) * 2008-08-12 2010-03-04 Biovail Laboratories International (Barbados) S.R.L Pharmaceutical compositions
US20100197712A1 (en) * 2007-06-18 2010-08-05 Arvid Carlsson Use of dopamine stabilizers
US20100204258A1 (en) * 2007-03-12 2010-08-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods and compositions for modulating insulin secretion and glucose metabolism
US20110021590A1 (en) * 2009-06-05 2011-01-27 Link Medicine Corporation Aminopyrrolidinone derivatives and uses thereof
US20110206782A1 (en) * 2010-02-24 2011-08-25 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Piperidine modulators of dopamine receptor
WO2011107583A1 (en) * 2010-03-04 2011-09-09 Nsab, Filial Af Neurosearch Sweden Ab, Sverige Substituted 4-phenyl-n-alkyl-piperidines for preventing onset or slowing progression of neurodegenerative disorders

Family Cites Families (73)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB850662A (en) 1956-10-22 1960-10-05 Parke Davis & Co Substituted piperazines and processes for their production
BE662455A (ru) 1964-04-14
GB1060160A (en) 1964-08-05 1967-03-01 Allen & Hanburys Ltd 4-phenylpiperidine derivatives
US3539573A (en) 1967-03-22 1970-11-10 Jean Schmutz 11-basic substituted dibenzodiazepines and dibenzothiazepines
ZA7546B (en) 1974-01-21 1976-08-25 Parke Davis & Co New antibacterial amide compounds and methods for their production
US4048314A (en) 1974-12-17 1977-09-13 Delmar Chemicals Limited Morpholino containing 4-arylpiperidine derivatives
US4202898A (en) 1978-06-05 1980-05-13 Synthelabo Method of treating anxiety and depression
US4267328A (en) 1978-08-01 1981-05-12 Synthelabo 1-Phenylpiperazines
US4333942A (en) 1979-08-03 1982-06-08 Byk Gulden Lomberg Chemische Fabrik Gmbh Anti-depressant and analgesic 4-phenoxypiperidines
US4518712A (en) 1980-06-30 1985-05-21 Taiho Pharmaceutical Company Limited Piperazine derivative and analgesic composition containing the same
GB2083476B (en) 1980-09-12 1984-02-08 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
FR2501506A1 (fr) 1981-03-11 1982-09-17 Sanofi Sa Compositions pharmaceutiques a action anorexigene contenant des derives de la tetrahydropyridine
US4415736A (en) 1981-12-28 1983-11-15 E. I. Du Pont De Nemours & Co. Certain tetrahydropyridine intermediates
US4485109A (en) 1982-05-07 1984-11-27 E. I. Du Pont De Nemours And Company 4-Aryl-4-piperidinecarbinols
ATE50987T1 (de) 1982-05-10 1990-03-15 Takeda Chemical Industries Ltd Dihydropyridinderivate, deren herstellung und verwendung.
US4504660A (en) 1982-07-06 1985-03-12 American Home Products Corporation Process for the production of 2,6-diaminobenzonitrile derivatives
DE3306964A1 (de) 1983-02-28 1984-09-06 Boehringer Ingelheim KG, 6507 Ingelheim Neues n-arylpiperazin und verfahren zu seiner herstellung
HU198454B (en) 1987-12-14 1989-10-30 Richter Gedeon Vegyeszet Process for production of new derivatives of tetrahydrospiridin and medical compositions containing these compounds
FR2639226B1 (fr) 1988-11-18 1993-11-05 Sanofi Utilisation de trifluoromethylphenyltetrahydropyridines pour la preparation de medicaments destines a combattre les troubles anxio-depressifs
JPH05503517A (ja) 1989-12-18 1993-06-10 バージニア・コモンウェルス・ユニバーシティ シグマレセプターリガンド及びその用途
ATE201669T1 (de) 1991-04-17 2001-06-15 Upjohn Co Substituierte (s)-3-phenylpiperidin derivate, deren herstellung und deren verwendung als dopamin autorezeptor antagonisten
EP0591426A4 (en) 1991-06-27 1996-08-21 Univ Virginia Commonwealth Sigma receptor ligands and the use thereof
IE914218A1 (en) 1991-09-11 1993-03-24 Mcneilab Inc Novel 4-arylpiperazines and 4-arylpiperidines
EP0533268B1 (en) 1991-09-18 2001-08-16 Glaxo Group Limited Benzanilide derivatives as 5-HT1D antagonists
GB9119920D0 (en) 1991-09-18 1991-10-30 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
GB9119932D0 (en) 1991-09-18 1991-10-30 Glaxo Group Ltd Chemical compounds
US5502050A (en) 1993-11-29 1996-03-26 Cornell Research Foundation, Inc. Blocking utilization of tetrahydrobiopterin to block induction of nitric oxide synthesis
IL112099A (en) 1993-12-23 1999-07-14 Ortho Pharma Corp N-oxides of 4-arylpiperazines and 4-arylpiperidines and pharmaceutical compositions containing them
CA2144669A1 (en) 1994-03-29 1995-09-30 Kozo Akasaka Biphenyl derivatives
IL114027A (en) 1994-06-08 1999-11-30 Lundbeck & Co As H 4-Phenyl piperazine (piperidine or tetrahydropyridine) derivatives serotinin 5-HT1A and dopamin D2 receptor ligand pharmaceutical compositions containing them
AU6470096A (en) 1995-07-19 1997-02-18 Yoshitomi Pharmaceutical Industries, Ltd. Fused triazole compounds
ZA9610745B (en) 1995-12-22 1997-06-24 Warner Lambert Co 4-Subsituted piperidine analogs and their use as subtype selective nmda receptor antagonists
KR100537843B1 (ko) 1996-07-22 2006-04-28 다이이치 아스비오파마 가부시키가이샤 아릴피페리디놀및아릴피페리딘유도체및이들을함유하는약제
US5892041A (en) 1996-08-12 1999-04-06 Neurogen Corporation Fused indolecarboxamides: dopamine receptor subtype specific ligands
DE19637237A1 (de) 1996-09-13 1998-03-19 Merck Patent Gmbh Piperazin-Derivate
CA2288172A1 (en) 1997-04-18 1998-10-29 Smithkline Beecham P.L.C. A bicyclic aryl or a bicyclic heterocyclic ring containing compounds having a combined 5ht1a, 5ht1b and 5ht1d receptor antagonistic activity
SK283394B6 (sk) 1997-06-10 2003-07-01 Synthon B. V. Zlúčeniny 4-fenylpiperidínu a jej farmaceuticky prijateľné soli, spôsob ich prípravy, liečivo s ich obsahom a ich použitie
SE9702716D0 (sv) 1997-07-15 1997-07-15 Ross Nicholas Waters Substituted phenylazacycloalkanes in the treatment of cognitive disorders
US6232326B1 (en) 1998-07-14 2001-05-15 Jodi A. Nelson Treatment for schizophrenia and other dopamine system dysfunctions
EP1135136B1 (en) 1998-11-23 2003-11-05 Sepracor Inc. Pharmaceutical compositions containing olanzapine-n-oxide
IL146403A0 (en) 1999-06-22 2002-07-25 Neurosearch As Novel benzimidazole derivatives and pharmaceutical compositions comprising these compounds
WO2001008678A1 (en) 1999-07-30 2001-02-08 University Of Kentucky Research Foundation Cis-2,6-disubstituted piperidines for the treatment of psychostimulant abuse and withdrawal, eating disorders, and central nervous system diseases and pathologies
SE9904723D0 (sv) 1999-12-22 1999-12-22 Carlsson A Research Ab New modulators of dopamine neurotransmission II
SE9904724D0 (sv) 1999-12-22 1999-12-22 Carlsson A Research Ab New modulators of dopamine neurotransmission I
USRE46117E1 (en) 1999-12-22 2016-08-23 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Modulators of dopamine neurotransmission
AU2001280599A1 (en) 2000-07-15 2002-01-30 Smith Kline Beecham Corporation Compounds and methods
JP2004523530A (ja) 2001-01-23 2004-08-05 イーライ・リリー・アンド・カンパニー メラノコルチン受容体アゴニストとしてのピペラジンおよびピペリジン誘導体
SE0200301D0 (sv) 2002-02-01 2002-02-01 Axon Biochemicals Bv Thio-carbostyril derivative
US20050004164A1 (en) 2003-04-30 2005-01-06 Caggiano Thomas J. 2-Cyanopropanoic acid amide and ester derivatives and methods of their use
US7160888B2 (en) 2003-08-22 2007-01-09 Warner Lambert Company Llc [1,8]naphthyridin-2-ones and related compounds for the treatment of schizophrenia
US7851629B2 (en) 2004-06-08 2010-12-14 Nsab, Filial Af Neurosearch Sweden Ab, Sverige Disubstituted phenylpiperidines as modulators of dopamine and serotonin neurotransmission
DK1773772T3 (da) 2004-06-08 2010-09-13 Nsab Af Neurosearch Sweden Ab Nye disubstituerede phenylpiperidiner/piperaziner som modulatorer af dopaminneurotransmission
DE602005017784D1 (de) 2004-06-08 2009-12-31 Nsab, Filial Af Neurosearch Sweden Ab Neue disubstituierte phenylpiperidine als modulatoren der dopamin- und serotoninneurotransmission
SE0401465D0 (sv) 2004-06-08 2004-06-08 Carlsson A Research Ab New substituted piperdines as modulators of dopamine neurotransmission
CA2582447C (en) 2004-10-01 2012-04-17 Merck & Co., Inc. Aminopiperidines as dipeptidyl peptidase-iv inhibitors for the treatment or prevention of diabetes
WO2006040156A1 (en) 2004-10-13 2006-04-20 Neurosearch Sweden Ab Process for the synthesis of 4-(3-sulfonylphenyl)-piperidines
HUE029790T2 (hu) 2004-10-13 2017-04-28 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Eljárás 4-(3-metánszulfonil-fenil)-l-N-propil-piperidin elõállítására
WO2007023141A1 (en) 2005-08-22 2007-03-01 Solvay Pharmaceuticals B.V. N-oxides as prodrugs of piperazine & piperidine derivatives
SE529246C2 (sv) 2005-10-13 2007-06-12 Neurosearch Sweden Ab Nya disubstituerade fenyl-piperidiner som modulatorer för dopaminneurotransmission
WO2007065655A1 (en) 2005-12-07 2007-06-14 Neurosearch Sweden Ab Disubstituted phenylpiperidines as modulators of cortical catecholaminergic neurotransmission
MX2008013887A (es) 2006-05-02 2009-01-29 Solvay Pharm Bv N-oxidos de derivados de piridilmetilpiperazina y piridilmetilpiperdina.
JP2009536187A (ja) 2006-05-05 2009-10-08 アステックス・セラピューティクス・リミテッド 癌の処置のための４−（２，６−ジクロロ−ベンゾイルアミノ）−１ｈ−ピラゾール−３−カルボン酸（１−メタンスルホニル−ピペリジン−４−イル）−アミド
EP1961742A1 (en) 2007-02-22 2008-08-27 Novartis AG compounds of formula (I) as serine protease inhibitors
NZ580856A (en) 2007-04-12 2011-11-25 Nsab Af Neurosearch Sweden Ab N-oxide and/or di-n-oxide derivatives of dopamine receptor stabilizers/modulators displaying improved cardiovascular side-effects profiles
WO2011019956A2 (en) * 2009-08-12 2011-02-17 Biovail Laboratories International (Barbados) S.R.L. Pharmaceutical compositions
MX2011005096A (es) 2008-11-13 2011-11-18 Link Medicine Corp Derivados de azaquinolinona y usos de los mismos.
US20120122848A1 (en) 2009-07-29 2012-05-17 Green Cross Corporation (+)-3-hydroxymorphinan derivatives as neuroprotectants
WO2011107593A1 (en) 2010-03-05 2011-09-09 Dsm Ip Assets B.V. Process for the production of an uhmwpe article
CA2801061A1 (en) * 2010-06-01 2011-12-08 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Benzoquinolone inhibitors of vmat2
EP2598662A1 (en) 2010-07-02 2013-06-05 Aktiebolaget SKF Mechanical component and method for surface hardening
SG10201506761XA (en) 2010-09-03 2015-10-29 Teva Pharmaceuticals Int Gmbh Deuterated analogs of pridopidine useful as dopaminergic stabilizers
KR20140075703A (ko) 2011-09-07 2014-06-19 아이백스 인터내셔널 게엠베하 프리도피딘 하이드로클로라이드의 다형 형태
US9012476B2 (en) 2011-12-08 2015-04-21 IVAX International GmbH Hydrobromide salt of pridopidine

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6214859B1 (en) * 1997-08-07 2001-04-10 Fujimoto Brothers Co., Ltd. Ethylamine derivatives
US20100204258A1 (en) * 2007-03-12 2010-08-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Methods and compositions for modulating insulin secretion and glucose metabolism
WO2008133884A2 (en) * 2007-04-23 2008-11-06 Combinatorx, Incorporated Methods and compositions for the treatment of neurodegenerative disorders
US20100197712A1 (en) * 2007-06-18 2010-08-05 Arvid Carlsson Use of dopamine stabilizers
US20100055133A1 (en) * 2008-08-12 2010-03-04 Biovail Laboratories International (Barbados) S.R.L Pharmaceutical compositions
US20110021590A1 (en) * 2009-06-05 2011-01-27 Link Medicine Corporation Aminopyrrolidinone derivatives and uses thereof
US20110206782A1 (en) * 2010-02-24 2011-08-25 Auspex Pharmaceuticals, Inc. Piperidine modulators of dopamine receptor
WO2011107583A1 (en) * 2010-03-04 2011-09-09 Nsab, Filial Af Neurosearch Sweden Ab, Sverige Substituted 4-phenyl-n-alkyl-piperidines for preventing onset or slowing progression of neurodegenerative disorders

Also Published As

Publication number Publication date
US20170266170A1 (en) 2017-09-21
CN104470585A (zh) 2015-03-25
NZ630560A (en) 2016-11-25
KR20150013476A (ko) 2015-02-05
IL234831A0 (en) 2014-12-31
EP2844346A4 (en) 2015-11-18
ES2776678T3 (es) 2020-07-31
EP2844346A1 (en) 2015-03-11
US20200000785A1 (en) 2020-01-02
EP2844346B1 (en) 2020-01-01
US20130267552A1 (en) 2013-10-10
MX2014011971A (es) 2015-01-16
ZA201407726B (en) 2016-05-25
IL234831B (en) 2020-10-29
JP2015515475A (ja) 2015-05-28
BR112014024672A2 (ru) 2017-06-20
AU2013243461A1 (en) 2014-11-06
EA201491819A1 (ru) 2015-04-30
CA2869145A1 (en) 2013-10-10
JP6177875B2 (ja) 2017-08-09
US11207308B2 (en) 2021-12-28
HK1206297A1 (en) 2016-01-08
WO2013152105A1 (en) 2013-10-10
BR112014024672A8 (pt) 2018-04-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA027748B1 (ru) Применение придопидина в комбинации с тетрабеназином для лечения двигательных нарушений и ожирения
US20240091177A1 (en) Methods for treating cancer
AU2021282467B2 (en) AR+ breast cancer treatment methods
EP3463350B1 (en) Pyrrolo-pyridines and pyrrolo-pyrimidines for use in treating liver fibrosis
US11179412B2 (en) Methods of treating conditions involving elevated inflammatory response
BR112019015286A2 (pt) Compostos para tratamento ou prevenção de transtornos do sistema nervoso e seus sintomas e manifestações e para citoproteção contra doenças e envelhecimento das células e seus sintomas e manifestações
US9505727B2 (en) Rufinamide and derivatives and their use in modulating the gating process of human voltage-gated sodium channels
TW202207928A (zh) 肝病之組合治療
KR102460731B1 (ko) 요실금 예방용 및/또는 치료용의 신규한 의약 조성물
CN115776894A (zh) T型钙通道调节剂的使用方法
EP3866799B1 (en) Compositions for treating vascular ehlers danlos syndrome
EP3528622A2 (en) Methods of treating diseases resulting from a maladapted stress response
JP2019516699A (ja) 純粋な５−ｈｔ６受容体アンタゴニストとアセチルコリンエステラーゼ阻害剤の組合せ
JP7164537B2 (ja) 運動ニューロン疾患の治療のためのガングリオシド代謝阻害剤
US20220047546A1 (en) Combination cancer therapies
TW201625253A (zh) 包含ｐｇｄ２拮抗劑之伴隨過敏性疾病之症狀之治療用醫藥
US11730769B2 (en) Compositions and methods for Williams Syndrome (WS) therapy
KR20060072127A (ko) 세로토닌 재흡수 억제제 및 록사핀의 조합
TW201345528A (zh) 用於組合療法之醫藥組合物
KR20060072126A (ko) 세로토닌 재흡수 억제제 및 아목사핀의 조합

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU

NF4A Restoration of lapsed right to a eurasian patent

Designated state(s): RU

PC4A Registration of transfer of a eurasian patent by assignment