DK158353B - Analogifremgangsmaade til fremstilling af 3, 6, 7, 8-substituerede s-triazoloe4,3-baapyridaziner. - Google Patents

Description

i

DK 158353B

Den foreliggende opfindelsen angår en analogif remgangsmåde til fremstilling af hidtil ukendte farmakologisk virksomme 3,6,7,8-substituerede s-triazol[4,3-b]pyridaziner med den almene formel : 5 R8 *7 10 hvor R3 er hydrogen eller Cj-Q^alkyl, Rg er amino, Cj-C4alkyl-amino, di-Ci~C4alkyl ami no eller en eventuelt Ci-C4alkylsubsti-15 tueret piperidin-, morpholino, piperazino, pyrrolidino, hexa-hydro-lH-azepin- eller hexahydro-lH-1,4-diazepin-ring; og R7 og Rg tilsammen er tetramethy1 en, som kan være substitueret med methan- eller ethan-broer; og farmakologisk acceptable salte af disse forbindelser. Forbindelserne, hvor R7 og Rg er 20 tetramethylen, kan betegnes enten som s-triazol[4,3-b]pyrida-ziner eller som 7,8,9,10-tetrahydro(l,2,4)triazol[3,4-a]phtha-laziner. Når de betegnes på denne måde, referer 7-, 8-, 9- og 10-sti11 i ngerne til carbonatomerne i tetramethylengruppen bundet til pyridazinresten. En gruppe af sådanne forbindelser er 25 dem med formel I, hvor R7 og Rg sammen er broforbundet tetramethylen, idet de broforbundne polymethylenforbindelser har formlen

30 ^ -μ II

R3 35 hvori R3 og Rg har ovennævnte betydning, og B betegner methy-len eller ethylen. Forbindelser af formel II kan benævnes som substituerede triazolpyridaziner eller som tetrahydrotriazol-phthalaziner.

2

DK 158353 B

De nye forbindelser kan fremstilles ved reak tionen af en 3-halo-6-hydrazinpyridazin af formel III med en substitueret carboxylforbindelse af formlen IV 5 R? Rg

X —^ III

10 “ o

H0-C-R3 IV

hvori R_, R7 og Rr har ovennævnte betydning, og X er halogen, 15 o o almindeligvis ved en temperatur på 40 C-150 C, fortrinsvis 100oC-130°C i et overskud af syre, der eventuelt er fortyndet med et inaktivt opløsningsmiddel, med et kogepunkt på 40-200°C, fortrinsvis 75-175°C efterfulgt af omsætning af den resulterende 6-halo-triazolpyridazin med den tilsvarende Rg-^-amin ved en temperatur på 75°C-160°C, fortrinsvis 100°C-140°C i det samme opløsningsmiddel, som anvendtes til reaktionen af forbindelserne III og IV. Nyttige opløsningsmidler omfatter enten et inaktivt organisk opløsningsmiddel eller et hydroxylisk opløsningsmiddel, såsom f.eks. vand, 2 5

Cl-C'4 adkanoler °9 deres blandinger med vand, C^-C4 alkoxy= alkanoler, glycolethere, dioxan, alifatiske og cykloalifa-tiske hydrocarboner, aromatiske hydrocarboner, chlorbenzen og chlorerede alifatiske hydrocarboner, såsom methylenchlorid. ^^ Reaktionerne gennemføres fortrinsvis ved atmosfærisk tryk, selv om der kan anvendes højere tryk om ønsket.

De nye forbindelser kan således fremstilles ved først at omsætte en 3^-chlor-6-hydrazinpyridazin med en passende syre af formel IV. Denne reaktion forløber, 35 når reaktanterne bringes i kontakt og blandes fortrinsvis ved reaktionsblandingens kogetemperatur. Reaktionens første trin gennemføres fortrinsvis i et overskud af den reagerende syre, idet syreoverskuddet tjener som reaktionsmedium eller

DK 158353 B

3 komponent deraf. 6-halo-triazolpyridazinproduktet kan udvindes fra reaktionsblandingen ved inddampning til fjernelse af overskud af surt reaktionsmedium og kan renses ved hjælp af sædvanlige fremgangsmåder, såsom omkrystallisa-5 tion og vask.

Den substituerede 6-halo-triazolpyridazin i et egnet opløsningsmiddel omsættes så med overskud af Rg-amin (f.eks. mindst dobbelt så meget på molær basis) eller Rg-aminen i nærværelse af en uorganisk base, såsom f.eks, natrium= carbonat, eller en ikke^-nucleofilisk amin som hydrogen-halogenid-acceptor. Reaktionen gennemføres fortrinsvis ved kogetemperaturen, idet der anvendes overskud af Rg-base. Produktet udvindes ved hjælp af sædvanlige fremgangsmåder, såsom koncentration under reduceret tryk.

Udgangsmaterialerne for den ovennævnte fremgangsmåde kan fremstilles ved hjælp af kendte fremgangsmåder. De nødven-20 dige pyridaziner til den ovennævnte metode opnås ved at omsætte den passende 3,6-dihalo-4,5-substitueret-pyridazin med hydrazinhydrat.

Ved en alternativ fremgangsmåde til fremstilling af sub-25 stituerede triazolpyridaziner af formlerne I og II omsættes

en 3,6-dihalo-4,5-substitueret-pyridazin af formlen V

R7 R8 '-O-1

med Rg-aminen til fremstilling af en 3-halo-pyridazin af formlen VI

R7 Rn 4

DK 158353B

Reaktionen gennemføres hensigtsmæssigt i et inaktivt opløsningsmiddel som tidligere beskrevet,ved en temperatur på 25°O150°C, fortrinsvis 50°C-140oC,i nærværelse af en uor-5 ganisk base, såsom f.eks. natriumcarbonat, en ikke-nucleofi- lisk amin eller et overskud af Rg-aminen som en hydrogen= halogenid-acceptor.

Den resulterende 3-halopyridazin omsættes så med en lavere-10 alkanoylhydrazin af formlen VII

O

R3C-NH-NH2 fortrinsvis i nærværelse af en sur katalysator i et inaktivt 15 ~ flydende medium, fortrinsvis et oxygeneret opløsningsmiddel, såsom f.eks. en alkylenglycolalkylether, ved en temperatur fra 50°C til 200°C, fortrinsvis 10Q°C-175°C. Dannelsen af hydrogenhalogenid under reaktionen fremskynder reaktionshastigheden. Produktet udvindes og renses ved hjælp af sæd-20 vanlige fremgangsmåder. Disse reaktioner gennemføres for trinsvis ved atmosfærisk tryk, selv om der kan anvendes højere tryk om ønsket. I de ovennævnte formler har R^, Rg, R^ og Rg de i forbindelse med formlerne I-IV angivne betydninger .

25

Hydrazinopyridazinudgangsmaterialerne kan fremstilles ved hjælp af kendte fremgangsmåder. 3,6-dichlor-4-methylpyridazin opvarmet under tilbagesvaling med overskud af hydrazinhydrat (50% i vand) i 0,3-1 time giver f.eks. 3-chlor-4-methyl-6-30 hydrazinpyridazin og 3-chlor-5-methyl-6-hydrazinpyridazin.

De isomere kan separeres ved fraktioneret krystallisation under anvendelse af ethanol som opløsningsmiddel. Se Takahayashi, Phar. Bull., 5, 229, (1957); Chem. Abstr. 52:6359, Linholter et al., Acta Chem. Scand 16, 2389 (1962); Chem.

35 Abstr. 59:1632, Steck et al., J. Amer. Chem. Soc., 76, 4454 (1954) og Horning et al., J. Org. Chem., 20, 707 (1955).

5

DK 158353B

Når R^ og Rg er cyklopentylen eller cyklohexylen, fremstilles dichlormellemproduktet hensigtsmæssigt af en 4,5,6,7-tetrahydro-4,7-(methan eller ethan)-isobenzofuran-l,3-dion.

5 Diels og Alder, Ann., 478, 149 (1930); Ann., 490, 236 (1931).

Dion-forbindelsen omsættes med overskud af hydrazinhydrat i en eksotermisk reaktion til dannelse af den tilsvarende hexahydro-5,8-(methan eller ethan)phthalazin-1,4-dion. Yderligere opvarmning til 1Q0°C-170°C i 10-30 min. kan være nyt- 10 tigt til at fuldende reaktionen. Phthalazin-1,4-dionen omsættes så med overskud af phosphoroxychlorid, opvarmes under tilbagesvaling i ca, 2-4 timer, afkøles, og produktet hydrolyseres ved forsigtig tilsætning af is og vand til fremstilling af dichlor-mellemproduktet.

15 3,6,7,8-substitueret-s-triazol[4,3-b]pyridazin-forbindelser-ne svarende til de ovennævnte formler og deres farmakologisk acceptable salte har nyttig biologisk virkning som broncho-dilatorer og har også ønskelig lav toksisitet og er fri for 20 uønskede bivirkninger i doser, som hører sammen med god bronchodilatorvirkning.

Man vec, at nogle triazolpyridaziner har andre egenskaber.

6-methyl-3-(4-morpholinyl)-8-phenyl-s-triazol[4,3-b]-25 pyridazin har f.eks. vist sig i stedet for at have en blokerende histamininduceret bronchokonstriktion at poten-tiere bronchokonstriktion. Forbindelsen 6-morpholino-3-phenyl-s-triazol[4,3-b]pyridazin har, selv om den er en virksom bronchodilator med en høj LD,-q -værdi (lav toksisitet) 30 vist sig at frembringe audiogene konvulsioner hos labora toriedyr i forholdsvis lave doser. Se US patentskrift nr. 4.136.182.

Triazolpyridazinforbindelserne er krystallinske faste stoffer, 35 der let kan tilberedes i vandige eller alkoholiske væsker.

De frie baseforbindelser er i almindelighed letopløselige i vandige væsker,og triazolpyridazinforbindelserne anvendes hensigtsmæssigt enten i form af fri base eller salt.

DK 158353B

6 I praksis indgives en effektiv bronchodila- terende mængde af en eller flere substituerede triazol- pyridaziner internt til et pattedyr, som har behov derfor, ad en vej, som effektivt bringer forbindelsen i kontakt med 5 pattedyrets bronchial- og trachialvæv. Indgivelsen kan gennemføres enten ad parenteral vej, såsom ved intravenøs,intra-peritoneal eller intramuskulær injektion,eller ved indførelse i mave-tarm-kanalen ad oral eller rektal vej, f.eks. for at frembringe en sådan kontakt via blodstrømmen eller ved intratrachial administration ved inhalering af en opløsning i form f.eks. af et sprøjtepræparat.

Den effektive bronchodilaterende mængde af forbindelsen, dvs. den mængde af det substituerede triazolpyridazin, der er tilstrækkelig til at inhibere eller lindre bronchial-spasma, af hasnger af forskellige faktorer, såsom størrelse, type og alder af det dyr, der skal behandles, den specielt anvendte triazolpyridazin eller det specielt anvendte far-makologisk acceptable salt, indgivelsesvej og -hyppighed, alvorligheden af spasme (om nogen) og det involverede forårsagende middel og tidspunktet for indgiften. I specielle tilfælde kan den dosis, der skal indgives, bestemmes ved hjælp af sædvanlige metoder til bestemmelse heraf, f.eks. ved at observere den af forskellige dosismængder fremkaldte bronchodilatorvirkning. Gode resultater kan opnås, når forbindelsen indgives i dosismængder fra 1-3 til 10-50 mg substitueret triazolpyridazin-forbindelse pr. kg. legemsvægt. Det er i almindelighed ønskeligt at indgive enkeltdoser, der er så små som mulige, og som giver den ønskede

w U

beskyttelse mod bronchialspasma og passer sammen med en hensigtsmæssig doseringsplan. Doseringsenheder, der kan anvendes til oral administration såsom tabletter, kapsler, pastiller, eliksirer, sirupper og lignende foretrækkes, og den virksomme triazolpyridazinforbindelse kan tilberedes 3 5 som sædvanlige kapsel- eller tabletpræparater med afpasset frigivelse.

7

DK 158353B

Nogle af forbindelserne kan bevirke audiogeniske Convulsive bivirkninger i doser, som,selv om de er højere end den effektive dosis til bronchodilatering, stadigt ligger lavere end en toksisk dosis. Bronchodilatorvirkning kan opnås ved 5 høje, men ikke toksiske doser, hvor yderligere faktorer kunne frembringe uønskede konvulsive bivirkninger ved at eliminere andre faktorer, som bidrager til audiogeniske konvulsioner. Det foretrækkes imidlertid at anvende for-jg bindeiserne i effektive doser, som er væsentligt lavere end den audiogeniske konvulsive dosis, dvs. en dosis på 1/3 til 1/5, 1/10 eller mindre af den audiogeniske konvulsive dosis. Den audiogeniske konvulsive dosis (den dosis, som bevirker audiogeniske konvulsioner). kan be-„ _ stemmes ved hjælp af kendte fremgangsmåder,som beskrevet f.eks. i USA patentskrift nr. 4.136.182.

Udtrykket "farmakologisk acceptabelt salt" betegner i den foreliggende tekst salte af de substituerede triazolpyri-2Q daziner, hvis anioner er forholdsvis ugiftige og uskade lige for pattedyr i doser, som er i overensstemmelse med god biologisk virkning, således at bivirkninger, der kan skyldes anionerne, ikke ødelægger triazolpyridazin-forbin= delsernes gunstige virkninger. Egnede farmakologisk accep-25 table salte kan fremstilles ved hjælp af sædvanlige frem- gansmåder, såsom opløsning af den fri baseforbindelse i et inaktivt, organisk opløsningsmiddel, såsom ether, og behandling af den resulterende opløsning med et overskud af etheropløsning af en egnet farmakologisk acceptabel 30 syre, såsom saltsyre eller hydrogenbromidsyre.

Sådanne forbindelser vil i det følgende blot blive benævnt som "triazolpyridaziner".

gg De følgende eksempler belyser opfindelsen.

Eksempel 1 8

DK 158353B

l-chlor-4-hydrazino-5,6,7,8-tetrahydro-5,8-methanphthalazin ® (25 g, 0,12 mol) blev blandet med 150 ml myresyre og opvarmet til kogetemperatur under tilbagesvaling i 2 timer. Reaktionsblandingen blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og optaget i vandig natriumbicarbonat. Det resulterende bundfald blev filtreret fra, vasket med vand og tørret i 10 luft. 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro-7,10-methano[l,2,4]triazol- [3,4-a]phthalazin-produktet (21,6 g, 82,5% udbytte), viste sig at smelte ved 155-156°C og ved 157-158°C efter omkrystallisation fra en blanding af benzen og hexan. Strukturen blev bekræftet ved infrarød spektroskop!, kernemagnetisk resonans-analyse og elementar-analyse. (Beregnet for C^qH^ CIN^: C, 54,42; H, 4,11; N, 25,39. Fundet: C, 54,40; H, 4,12; N, 25,20) . Denne 6-chlor-forbindelse (6,5 g, 0,029 mol) blev blandet med 25 ml N-methylpiperazin, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 6 timer. Blandingen 20 blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og derpå fordelt mellem methylenchlorid og vand. Det organiske lag blev skilt fra, tørret over natriumsulfat og koncentreret til opnåelse af 7,8,9,10-tetrahydro-6-[4-methyl-l-piperazinyl]-7,10-methano(1,2,4)triazol-25 [3,4-a]phthalazin-produktet. Efter omkrystallisation fra benzen/hexan blev der opnået 6,6 g (79% udbytte) af produktet med smp. på 172-173°C. Strukturen blev bekræftet ved infrarød og kernemagnetisk resonans-analyse og ved elementar-analyse. (Beregnet for C15H20N6: 30 C, 63,35; H, 7,09; N, 29,56 .-Fundet: C, 63,30; H, 7,05; N, 29,33) .

Eksempel 2 3 5 Ved en tilsvarende fremgangsmåde som den i eksempel 1 be skrevne blev l-chlor-4-hydrazino-5,6,7,8-tetrahydro-5,8-methanophthalazin (25,0 g, 0,119 mol) blandet med 150 ml eddikesyre, og blandingen blev opvarmet ved kogetemperatur under tilbagesvaling i 2 timer. Reaktionsblandingen blev 9

DK 158353B

koncentreret og resten optaget i vandig natriumbicarbonat.

Det resulterende bundfald blev opsamlet, vasket med vand og lufttørret til opnåelse af 23,4 g (84% udbytte) 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro-3-=-methyl-7,10-methano (1,2,4)- triazol[3,4-a]phthalazin. Efter omkrystallisation fra benzen/hexan smeltede dette produkt ved 137-138°C. Infra-5 rød spektroskopi og elementar-analyse stemte overens med den nævnte struktur.

6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro-3-methyl-7,lO^methan (1,2,4)-triazol[3,4-a]phthalazin (4,5 g, 0,019 mol) blev blandet 10 med 25 ml morpholin, og blandingen blev opvarmet ved kogning under tilbagesvaling i 8 timer. Reaktionsblandingen blev koncentreret og fordelt mellem methylenchlorid og vand. Det organiske lag blev skilt fra, tørret over natrium-sulfat og inddampet til tørhed til opnåelse af 4,4 g (80,6% udbytte), af 7,8,9,10-tetrahydro-3-methyl-6-(4-morpholinyl)-7,10-methan (1,2,4)triazol[3,4-a]phthalazin. Efter omkrystallisation fra benzen/hexan viste produktet sig at smelte ved 166-168°C. Infrarød analyse og kernemagnetisk resonans-analyse bekræftede den pågældende struktur, hvilket ele-mentaranalysen også gjorde. Beregnet for cy5Hp9N5°: C, 63,14; H, 6,71; N 24,55. Fundet: C, 63,20; H, 6,71; N, 24,32.

Eksemplerne 3-10 25 ---

Ve d en tilsvarende fremgangsmåde som de i de foregående eksempler beskrevne blev de følgende forbindelser fremstillet. I hver tilfælde er R7- og Rg-substituenterne i formel I taget sammen 1,3-cyklopentylen, og forbindel-30 serne svarer saledes til den almene formel 35 1 3 hvori Rg og Rg har de i forbindelse med formel I anførte betydninger.

DK 158353B

ίο ϋ -p ^ «· s,® N 1Λ ^ ® H 1-1 O' co Ό oo cn >d

D

to £ o

•H

ti a g s g g 03 (0 (ΰ Π3 nj (β

“d- fc X 1 X K

Ha) a) a) o) a) a) li S £ o ^ ίΐ λ iH ’d 03 -H \ \ \ \ \ ^ +1 S 1 β β β β o CO d) d) (1) (L) 0) β tH N N N N N (0 , ^ fi β S fi C Λ -¾ a> aj <d <u <υ +) S · A Λ Λ Λ Φ Ο in r1 μ υ Η CN Ρ) C0 Η Ο 10 O' OJ Ο - νΟ I 00

Q) Η Η ΟΊ rH LO CN

+J -Ρ I I I I ο I

η Μ cn (ν η >ό m οο φ £ 00 £Ν Ο tO <Ν Γ-

g^jiHHCSHH OJ

æ ft

<β I

S-l o <U H

rH iH ftT3 >1 rH rH >1 rH -ri i>i β β ^i Ρ<»β Η β β ·Η β I ·Η 'd -Η -Η Τ3 -Η Η Τ3 ^ Η Ό ιΗ ·Η Ό I •—''d rH -Η Ο ιΗ ·Η ιΗ ·Η

Ο U Α Ο Η r1irH U

Η 0) Λ Η d) Λ >ιΟ Μ ft H Μ ft -Ρ βΗ >ι ·Η Ο >ι -Η 0)·Ηί ft ft ε ft ft Snu

<£> I I I I I I

ft Η H ^}i tH tH

Γ0 m

m SB

ft Β Β B u U B

a) to

rH

a) =d £ m ϊ in to r- 1 Λ 00 μ ο ft

DK 158353B

11 α)

P

P ~ H

|>i o\° » <> Λ ^ ^ t" 13 to tn

!D

s I <w tn n d ti

O OJ

P rQ

d S n m · tn Η ·β <D (ti 1) HQ) X .G ti ,_) rd d) P di d)

H§ Λ φ d+J

(t5 -H \ S -HH

PS - P C 1,3

S, g g nS-S

g λ Id £3 w λ d o tu O « U d 13 Φ >1

o ° " ^P

ΙΟ Η CN ’H ^ P Pi ^ Η g *ΰ Η Λ! CM C'' 2 d) d H CN |5 ^ s g λ £ tn ft ,5

•H *H

d d p i3

i—I

— d (B

rn tu p H i3 'd Η Η (Η & >i >i O P ,

Id I d H <tj H

P P r-t ·Η Jti P

IN I N d diP

P (0 H (C O S

>i d >1d d Ή t n Λ d> Λ di 13 d <3 P ft P A>i tn di d) -H <D -H p ©. i

S 0» S Λ-Η H < I

to I I 13 au

M ^ w -OM

13 i3 d) d) > S- ro tn η B K P d M U U o o H iji d) P d cn -η -η H p d d) tn tn i3 * S Ό· d * d) h -ri <31 o pa p P 1¾ o s *

Eksemplerne 11-19

DK 158353 B

12 l-chlor-4-hydrazin -5,6,7,8-tetrahydro-5,8-ethanophthalazin ® (2,5 g, 0,111 mol) blev blandet med 150 ml myresyre. Blan dingen blev opvarmet ved kogetemperaturen under tilbagesvaling i 2 timer og derpå inddampet til tørhed. Resten blev sønderdelt med mættet vandig natriumbicarbonat. Det resulterende hvide faste stof blev opsamlet, vasket med vand og lufttørret til opnåelse af 23,0 g (88% udbytte) af 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro-7,10-ethano(1,2,4)triazol-[3,4-a]phthalazin, der smelter ved 137-140°C. Efter omkrystallisation fra en blanding af benzen og hexan smeltede det rensede produkt ved 140,5-141°C. Infrarød spek- 1 *5 troskopi og elementar-analyse bekræftede den anførte struktur.

Ved i alt væsentligt den samme fremgangsmåde men ved at anvende eddikesyre i stedet for myresyre blev der frem-20 stillet 23,8 g 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro-3-methyl-7,10- ethano(1,2,4)triazol[3,4-a)phthalazin (86% udbytte). Smp. 178-179°C efter omkrystallisation fra benzen/hexan.

Under anvendelse af 5-10 g af en af de to ovenfor nævnte 25 substituerede 6-chlor-triazolpyridaziner og 50 ml af den passende amin-Rg-reaktans blev der fremstillet følgende forbindelser. Reaktionsblandingerne blev opvarmet under tilbagesvaling i ca. 2 timer. Reaktionsblandinger blev derpå koncentreret og fordelt mellem vand og methylen-30 chlorid. De organiske lag blev tørret og koncentreret.

I hvert tilfælde er Ry- og Rg-substituenten l,4-cyklo= hexylen, således at forbindelserne kan navngives som 7,8,9,10-tetrahydro-3,6-substitueret-7,10-ethan -1,2,4-triazol[3,4-a]phthalaziner svarende til den almene formel: 35

DK 158353 B

13 vy\ -η 5 T i i K3 hvori R^ og R^ har de ovenfor i forbindelse med formel 10 I anførte betydninger.

15 20 25 30 35

DK 158353B

14 Φ +> -P — r- lo h t" oo σ' ^ cr> co co in oo in 0 m a o 7! s c β s β c

+J <0 (0 rc (0 ro nJ

^ X X X X X X

ω 4) ¢) <u m <0 ¢) j rj æ x; λ λ Λ Λ ηό \\\\\\ «β'ϋβββββββ -ρ ·η (u οι o> <u d> <u φ

mg NNNNNN N

>< β β β β β β β U φ φ Φ Φ Φ Φ Φ 44 Λ Λ Λ Λ Λ Λ Λ £ ο cn m ιΗ co O' co in

CO ^ CN · O O H rH

o Η H 04 04 04 04 04

10 I I I I 1 I I

o Hr-IOlOC-'C- ^

aJ+J 00 04 O O pH H

ρΗ,Μ Η H 04 04 04 04 04 Φ S £ β CO Οι m

Sh Φ rH pH pH Ql >1 κΉ pH p-1 pH pH ·γΗ β β >Λ β ÉH >Η ft

•Η ·Η β ·Η β β I

Ό V ·Η Ό ·Η -Η Η •Η ·Η γΗ ·γΗ Ό pH I

pH JH Ο Η Ή Ο pH

Ο Φ ,β Ο Μ £3 >ιρΗ Μ -Η β)Μ Φ ft £! >ι u ο* u μ a μ -μ β >i -Η Ο >i ·Η Ο Φ ·Η OHfcSftftSSX ω i i i i i i ι Ρ5 pH pH τ}1 pH pH ^ί* ro η η cn S X rn _ os æajKouuæ φ ω

rH

φ Τ5 β r-icNoO'^incoO'

2 pH pH pH pH pH pH 'pH

SH

O

fe

DK 158353B

15 *!

£ H £ P oo i -Η Π3 d) -pH £ -P (U

cd tn to rd >

+) £ -P H -P

-H tn d) PQ d) -P >no\° 00 £ O -P Td d)

£ — r, CO H · d) -P

rrt N O -Q. 4J (d -P £ M-i

n vD H di to (d tn fU

Qi P Ti £ P

O S· Ή o tn>: +> p Λ o ω

di -P O P rQ

I -P m H (d -P

ω P O dl > c* BH ΟΉ μ 0)

o g O Λ Φ H

-H t n P g P ,Q

-p . - tn O Ti £ 4J

(d H - O >ι·Η £ ^ to ω S S Pi μ o) ^

H Ti +i 2 d) H Q (d £ (U

i—i ·Η vj ^ Ngcocn

(dg ^ Si £ td · Λ! H

jJ H 0} 0) CO d) -P (U

CO 2 S ' ,Q & CO 0) £ Ti >i SS 0 ^ 5=5

Li 5 ‘ η η -P -P ·η

M 5 S ' g > id tø A! ,Q

g « o I d)£gidP

η ® Λ OH id P O

ίο Λ i ti -P m p d) ω d) •Η Ό Id g Λ M H -P CD (d

! id £ M rQ

0) 10 t?

§ O H Ό g Ή O H

S S CD £ di CO P

u S' co £ h id ti m IO Lj i Ή rQ d) ,Q -Π d) λ) cO CD P d) 4J-P S h Ti d> tn-P O Td ιΗ^! η £ Ό O P H £ d) £ H £ |0 r£ d) ed Λ d) d ·η O p M a P P ·& t n £ di

O d) P di -P

I I o 4-1 -P (d £ Η Ή (d (dtn Hpdi>id p pfd m £ m tn,£ co aj djn id Dl £ £P dl

DtH ft ΰ) -Η -Η Φ P

-Η O -H tn p C fi ft!U ft-H MH CO £ its ip es -P id © nd α> Η Η 4Η d) i—1 d) Ό I = I w d) Q ft ft g

Η H CD H O PH

>lH t*irH -Qi ft) -P fd ,£>1 iJ>i H CO -r-| Di d) P £ 4->£ ftidi O P £ <U *H d) -H O tn d) d)

SNSN Ti ti r£ P

<Ό I I .p -ri 0) TJ (d £ »i ^ id P > £ PP · o id PM d) Ό Η P £> co d co CD CD Μ P >i

> O -P ·Ρ d) -P H

jn βρ cn rd S> „ æ -P CD FB -P > fl PS W O d)tnPcod)*id H OM -SHP Η P dlHfl Od 0) -H ti rQ Qj J-i ©.

C0 -P >i O £ CO p H to r£ £ Cl) (d

d) M g d) > tn-P P

ti *« 0) ti P <d £ w m d “ 2 p Φ £ Η -H (d £

rH H H |X| g p) rQ ti 4-1 -H

s *

O

Pm

Eksempel .20 .16

DK 158353B

1-chlor-4-hydrazin -5,6,7,8-tetrahydrophthalazin, der også kan benævnes 3-chlor-4,5-tetramethylen-6-hydrazin-pyridazin (50 g, 0,25 mol) blev blandet med 250 ml myresyre. Blandingen 5 blev opvarmet til kogetemperaturen under tilbagesvaling i 2 timer. Blandingen blev koncentreret ved inddampning under reduceret tryk og olieresten blandet med mættet vandig na= triumbicarbonat-opløsning. Det resulterende hvide fast stof blev filtreret fra, vasket med vand og tørnet i luft. 6-chlor-10 7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4)triazol[3,4-a]phthalazin-produktet blev omkrystalliseret fra alkohol/hexan og viste sig at smelte ved 124-125°C. (Udbytte 42,4 g, 81%). Elementar-analyse bekræftede strukturen.

10,4 g (0,05 mol) af 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4)-15 triazol[3,4-a]phthalazinen blev blandet med 8,53 g (0,12 mol) pyrrolidin i 100 ml ethanol. Blandingen blev opvarmet ved kogetemperaturen under tilbagesvaling i 10 timer, derpå koncentreret ved inddampning under reduceret tryk, indtil der blev opnået en fast rest. Det faste stof blev for-20 delt mellem methylenchlorid og vand. Det organiske lag blev skilt fra, og det vandige lag blev ekstraheret to gange med methylenchlorid. Methylenchloridlaget og ekstrakterne blev forenede, tørret over vandfri natriumsulfat, filtreret og inddampet under reduceret tryk. Det resulterende farve-25 løse fast stof, 6-(1-pyrrolidinyl)-7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4) -triazol[3,4-a]phthalazin-produkt blev omkrystalliseret fra ethanol og viste sig at smelte ved 194-195,5°C. Der blev opnået 9 g produkt, et 74% udbytte fra dette trin. Elementar-analyse bekræftede strukturen (beregnet for C13H17N5: 30 C, 64,17; H, 7,04; N, 28,79. Fundet: C, 64,4; H, 7,01; N 28,83). Produktet benævnes også 6-pyrrolidin -7,8-tetra= methylen-s-triazol[4,3-b]pyridazin.

Eksempel 2.1 17

DK 158353B

Ved en tilsvarende fremgangsmåde blev der fremstillet 6-piperidin -7,8-tetramethylen-s-triazol [4,3-b] pyridazin, 5 kaldes også 6-piperidino-7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4)triazol-[3,4-a]phthalazin, smp. 134,5-135,5°C.

Eksempel 2 2 10

Ved en tilsvarende fremgangsmåde som beskrevet i de foregående ek- sem/Élev 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4)triazol[3,4-a]- phthalazin (fremstillet som beskrevet i eksempel 20) (10 g, 0,048 mol) og 12,2 g (0,122 mol) N-methylpiperazin i 100 ml ethanol opvarmet under tilbagesvaling i 20 timer. Tyndt-15 lagskromatografi (TLC) viste nærværelsen af uomsæt phthalazin. Ethanolen blev afdampet, 50 ml N-methylpiperazin blev tilsat, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling i 2 timer, hvorefter tyndtlagskromatografi viste, at reaktionen var fuldstændig. Blandingen blev koncentreret og fordelt mellem 20 methylenchlorid og vand, og resten,efter afdampning af methylen= chlorid, blev omkrystalliseret to gange fra en blanding af benzen og hexan og derpå én gang fra hexan. 6-(4-methyl-l- piperazinyl)-7,8-tetramethylen(1,2,4)triazol[4,3-b]pyridazin- produktet viste sig at smelte ved 16Q-162°C. Der blev opnået 25 12,45 g af produktet (95% udbytte). Strukturen blev bekræftet ved kernemagnetisk resonans-analyse og infrarød spektroskop!. (Beregnet: C, 61,74; H, 7,40; N, 30,86. Fundet: C, 61,90; H, 7,35; N, 30,59). Kernemagnetisk resonans (CDC1,); δ 9,84 (s, 1, CH); 3,4-3,0 (m, 6); 2,8-2,5 (m, 6); ου 2,38 (s, 3, CH3); 2,1-1,7 (m, 4, CH2CH2CH2CH2). Monohydro= chloridsaltets smp. 265-266°C.

35

DK 158353B

18

Ved tilsvarende fremgangsmåder fremstilles følgende forbindel-5 ser: 6-morpholin-7,8-tetremthylen-s-triazol[3,4-b]pyridazin også kaldet 6-morpholin-7,8,9,10-tetrahydro(l,2,4)triazol[3,4-a]-phthalazin, smelter ved 194-196eC, 10 6-(2-methylpiperidin)-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-b]pyri-dazin, smelter ved 84-86°C, molekylvægt 299,41, 6-piperidi n-3-methyl-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-b]pyrida-15 zin, smelter ved 144-144,5°C, 6-morpholi n-3-methyl-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-b]pyrida-zin, smelter ved 189-190°C.

20

Eksempel 2 3 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro(1,2,4)triazol[3,4-a]phthalazin (7,2 g, 0,0345 mol) blev blandet med 20 ml hexamethylenimin 25 og 100 ml methanol. Blandingen blev opvarmet ved kogetemperaturen under tilbagesvaling i 30 timer, afkølet og fordelt mellem methylenchlorid og vand. Methylenchloridlaget blev tørret og inddampet til tørhed. Resten blev omkrystalliseret fra benzen/hexan til opnåelse af 6-(hexahydro-lH-azepin-30 l-yl)-7,8-tetramethylen(l,2,4)triazol[4,3-b]pyridazin som farveløse krystaller, der smelter ved 109°C. Elementar-analyse: C, Η, N beregnet: 66,39; 7,80; 25,81; C, Η, N fundet: 66,04; 7,42; 25,76. Den ovennævnte reaktion blev gennemført uden methanolreaktionsmediet, og produktet viste __ sig at smelte ved 108^109°C.

O D

Eksempel 24 19

DK 158353B

15/65 g 6-chlor-7,8-tetramethylen(1,2,4)triazol[4,3-b]-pyridazin og 35 ml 2-methylpyrrolidin blev blandet og opvarmet under tilbagesvaling i 2 timer. Reaktionsblan-5 dingen blev inddampet til tørhed og fordelt mellem methylen= chlorid og vand. Methylenchloridlaget blev tørret og inddampet til en rest på 12/5 g (64,8% udbytte) af 6-(2-methyl= pyrrolidinyl)-7,8-tetramethylen(1,2,41triazol[4,3-b]pyridazin. Produktet blev omkrystalliseret fra benzen/hexan og viste 10 sig at smelte ved 146-147°C. C, Η, N beregnet: 65,34; 7,44; 27,22. C, Η, N fundet: 65,5; 7,51; 27,36.

Eksemplerne 25-31

Ved hjælp af tilsvarende fremgangsmåder som beskrevet i eksemplerne 23 og 24 blev der fremstillet følgende 6-substi-15 tueret-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-bJpyridaziner. For bindelsen er identificeret nedenfor ved hjælp af Rg-substi-tuenterne, idet R-, og Rg er tetramethylen, og Rg er hydrogen.

Udbytte Smelte-

Eksempel __Rg___(%) punkt °C

20 '25 Methylamino 86 155-156 26 Dimethylamino 71,7 153-154 27 3-methylpiperidino 100 99-102 28 4-methylpiperidino 100 152,5-154 29 Hexahydro-4-methyl- 25 lH-l,4-diazepin-l-yl 63,3 135-136 30 Dihydrochloridsalt - 249-251 af 29 31 Ethylamino - 250-251

Eksemplerne - 32-38 30 ved hjælp af en tilsvarende fremgangsmåde blev der fremstillet følgende forbindelser, hvori Rg er methyl, R^ og Rg er tetramethylen, og Rg er angivet nedenfor.

DK 158353B

20

Udbytte Smelte-

Eksempel _ Rg_ (% 1 punkt' C

'32 Methylamino 78/1 279--280 33 Dimethylamino 72,6 128-129 5 34 2-methyl-l- pyrrolidinyl 50 142 35 3-methylpiperidino 61 152-153 36 4-methylpiperidino 81,7 143-144 37 4-meth.yl-lpiperazinyl 66,8 183 10 38 Hexahydro-4-methy1- lH-l,4-diazepin-l-yl 56,6 114-115

Dihydrochlorid 56,6 240-241

Eksemplerne 39-47 A. En opløsning af 98,5 g (0,496 mol) l-chlor-4-hydrazin - 15 5,6,7,8-tetrahydrophthalazin i 300 ml propionsyre blev opvarmet til tilbagesvaling i 18 timer, derpå koncentreret ved inddampning til halvdelen af det oprindelige volumen. Opløsningen blev fortyndet med vandig natriumcarbonat indtil neutral (pH-værdi 7). Det resulterende bundfald blev 20 opsamlet, lufttørret ved omgivelsernes temperatur og derpå tørret i en tørringsoyn til fremstilling af 105 g (0,444 mol) 6-chlor~3-ethyl-7,8,9,10-tetrahydro-l,2,4-triazol[3,4-a]-phthalazin, smelter ved 93-94°C (89,6% udbytte). Beregnet for C’^H^CIN^ C, 55,81; H, 5,53; N, 23,67. Fundet: 25 C, 56,00; H, 5,63; N, 23,87.

B. Ved hjælp af en tilsvarende fremgangsmåde som den i de foregående eksempler beskrevne blev 6-chlortetramethylen= triazolpyridazin-mellemproduktet omsat med overskud af Rg-amin (mere end to ækvivalenter), ved tilbagesvaling.

3Q Reaktionsforløbet blev overvåget ved hjælp af tyndtlags- kromatografi på silicagel, fremkaldt med 9:1 chloroform: methanol, hvor 6-chlor-mellemproduktet viste sig som en fluorscerende plet, og produktet ikke var fluorscerende.

Efter endt reaktion blev reaktionsblandingen koncentre-35 ret og resten fordelt mellem vand og methylenchlorid.

DK 158353B

21

De organiske lag blev tørret med natriumsulfat, koncentreret og resten omkrystalliseret fra benzen/hexan. Der blev dannet salte ved opløsning af basen i acetone og tilsætning af etherisk syre (hydrogenchlorid). Under anvendelse af 5 det ovennævnte 6-chlor-mellemprodukt blev der fremstillet følgende, hvori Rg er ethyl, R^ og Rg er tetramethylen, og Rg er identificeret nedenfor.

Udbytte Smelte-

Eksempel _Rg_ (% \ punkt °C

10 39 Hexahydro-4-methyl-lH- 1,4-diazepin-l-yl 44 95-96 40 Dihydrochlorid af 39 53 225-228 £ 41 Hexahydroazepin-l-yl 28,2 104 42 Morpholino 62,0 170-171 43 Piperidino 57,8 135-136 44 2-methylpyrrolidino 55,2 152-153 45 Pyrrolidino 59,8 118-119 46 4-methyl-1-piperazinyl 67,8 172-173 20 47 Dihydrochlorid af 46 86,7 250-252 ±£ £ Omkrystalliseret fra methanol/acetone ££ Omkrystalliseret fra isopropanol.

Eksemplerne 48-50 A. Ved en tilsvarende fremgangsmåde som den i eksempel 39 A 25 beskrevne blev 98,5 g l-chlor-4-hydrazin -5,6,7,8-tetrahydro= phthalazin opvarmet under tilbagesvaling i 300 ml isosmørsyre. Efter 18 timers forløb blev overskud af isosmørsyre afdestil-leret og resten neutraliseret med vandig natriumbicarbonat.

Det resulterende faste stof, 6-chlor-7,8,9,10-tetrahydro= 30 3-(l-methylethyl)-l,2,4-triazol[3,4-a]phthalazin blev opsamlet og lufttørret til opnåelse af 100 g (80,4% udbytte). Efter omkrystallisation fra isopropanol var udbyttet 56,2 g, der smelter ved 67-68°C.

B. Under anvendelse af det ovennævnte 6-chlor-mellemprodukt 22 DK 1583538 og den i eksempel 39 B og de foregående eksempler beskrevne fremgangsmåde blev der fremstillet følgende forbindelser, hvori R^ er isopropyl, Ry og Rg er tetramethylen, og Rg er identificeret nedenfor: 5 Udbytte Smelte-

Eksempel _Rg (%) punkt °C

48 Hexahydro-4-methyl-lH- 1,4-diazepin-l-yl 55,9 62-63 49 2-methyl-pyrrolidino 44,5 129-130 1° 50 Pyrrolidino 32,6 119-121

Eksempel 51 1 g (0,49 mol) · 3,6-dichlor-4,5-tetramethylenpyridazin, 78,3 g (0,738 mol) natriumcarbonat og 5Q0 ml diglyme (diethylenglycol= dimethylether) blev blandet. 46,1 g (0,54 mol) 2-methylpyrro-15 lidin blev tilsat langsomt under omrøring, og blandingen blev opvarmet under tilbagesvaling (134,5°C) i 72 timer og derpå afkølet til 95°C. 400 ml deioniseret vand blev tilsat, og blandingen blev afkølet til ca. 25°C. De resulterende krystaller blev filtreret fra, vasket med vandog tørret under 20 reduceret tryk til opnåelse af 104,0 g 3-chlor-6-(2-methyl-l-pyrrolidinyl)-4,5-tetramethylenpyridazin, der smelter ved 134-136°C, 210 g (0,834 moll 3-chlor-6-(2-methyl-l-pyrrolidinyl)-4,5-tetramethylenpyridazin, 216 g (2,92 mol) ethylformiat og 25 1260 ml ethylenglycolethylether blev blandet. I løbet af en periode på 10 min. blev der tilsat 146,2 g (2,92 mol) hydrazinhydrat til dannelse af formylhydrazin in situ. Under tilsætningen steg temperaturen fra 25°C til 35°C. Blandingen blev opvarmet til 100°C i ca. 30 min., og i dette tidsrum 30 blev der i et Dean Stark apparat opsamlet 100 ml ethanol, vand og reaktionsmediet. Blandingen blev derpå opvarmet til tilbagesvaling i 120°C i 24 timer, afkølet til 95°C og lanj-

DK 158353B

23 somt fortyndet med ca. 5 liter deioniseret vand. Opløsningen blev afkølet og podet med produktkrystaller ved 6Q°C, derpå afkølet til 25°C. Det krystallinske produkt blev filtreret fra, vasket med fire portioner deioniseret vand på 500 ml 5 o hver og tørret under reduceret tryk i ca. 18 timer ved 95 C.

Der blev opnået 144,3 g (67,2% udbytte) 6-(2-methyl-l-pyrrolidinyl)-7,S-tetramethylen-l,2,4-triazol[4,3-b]pyridazin som et krystallinsk fast stof, der smelter ved 144-145°C.

10

Bronchodilatorvirkninq

Bronchodilatorvirkning af repræsentative triazolpyridazinfor-bindelser fremstillet ifølge opfindelsen undersøges ved Kon-15 zett-Rossler marsvinemetoden ifølge godkendt praksis. Se Kon-zett og Rossier; Arch. f. Exp. Path. u. Pharmkol. 195: 71-74 (1940); Rosenthale og Dervinis, Arch. Int. Pharmacodyn. 172: 9194 (1968). Ved denne fremgangsmåde respireres et bedøvet marsvin kunstigt med et fastsat luftvolumen. Luftvolumenet 2q vælges således, at det overstiger marsvinets lungers kapacitet en smule, og luftoverskuddet eller "overskuddet" måles. Testforbindelserne undersøges ved at indgive en testforbindelse intravenøst 2 min. før indgift af en antagonistforbindelse (histamin, serotonin eller acetylcholin) efter 3 tidligere an-25 tagonistdoser, der resulterer i forholdsvis ensartet (±10%) bronchokonstriktion. Når den bronchospasme, der skyldes indgift af antagonistforbindelsen viser sig, kan dyrets lunger modtage mindre luft, og således forøges "overskuddet" måleligt. Når en testforbindelse blokerer den bronchokonstriktion, 30 som fremkaldes af indgift af antagonistforbindelsen, kan resultaterne udtrykkes kvantitativt som procent blokering. Dette beregnes ved at dividere "overskud"-antagonistreaktionen, målt efter indgift af testforbindelsen, med gennemsnittet af de tre forudgående antagonist-reaktioner, gange med 100 og 35 trække denne værdi fra 100%. Resultaterne kan også udtrykkes i sammenligning med en kendt bronchodilator, såsom aminophyllin.

Ved en sådan fremgangsmåde udtrykkes sammenligningsresultater som "procent aminophyllin" beregnet ved at udtrykke den pro-

DK 158353B

24 centiske blokering frembragt ved hjælp af en testforbindelse som en procentdel af den gennemsnitlige procentblokade frembragt ved hjælp af doser af aminophyllin indgivet til det samme testdyr, som blev anvendt til testforbindelsen, idet amino-5 phyllinundersøgelserne går forud for og følger efter vurderingen af testforbindelse i dette dyr.

Ved repræsentative undersøgelser med trazolpyridazinforbindel-ser fremstillet ifølge opfindelsen indgivet intravenøst i en 10 dos i s mængde på 3 mg testforbindelse pr. kg 1 eg em s vægt (med mindre andet er angivet) og under anvendelse af aminophyllin i en dosismængde på 10 mg/kg til sammenligning og histamin som antagonisten gav repræsentative forbindelser fremragende resultater i form af procent blokade af histamin og procent af 15 aminophyllin.

Ingivet som en vandig opløsning viste forbindelse 6-pyrroli-di n-7,8-tetramethylen-s-tri azol[4,3-b]pyridazin og forbindelsen 6-morpholino-7,8-tetramethylen-s-trazol[4,3-b]pyridazin 20 sig at give henholdsvis 100 og 75% blokering af histamin, hvilket svarer til 105 og 113% aminophy11 i n-aktivitet.

Audiogeniske konvulsive bivirkninger 25 Visse xanthin-forbindelse, såsom den kendte bronchodilator aminophyllin,har centralnervesystem-stimulerende bivirkninger, som det er vanskeligt at påvise i dyremodeller, som er tilfredsstillende til vurdering af andre forbindelser. Indvirkningen af lyd på lægemidlers konvulsive tærskel 30 er et kendt fænomen, der kan anvendes til at undersøge sådanne bivirkninger. Se f.eks. Schlesinger et al., Life Science 4, 2345-2351 (1965), 7, 437-447 (1968) og 9 (I) 721-729 (1970); Buckholtz, Pharmacol. Biochem. and Behavior 3, 65-68 (1975); og US patentskrift nr. 4.136.182. I en 35 fremgangsmåde til farmakologisk undersøgelse kan sænkning af den konvulsive tærskel eller formindskelse af LDjjq-værdien ved hjælp af lyd undersøges i mus.

DK 158353 B

25

Ved forsøgene indgives til mus en testforbindelse ved intraperi- toneal injektion ved forskellige doser, og antallet af mus, som viser toniske konvulsioner, og antallet af dødsfald, som optræder i løbet af 30 min., optegnes. ED^g-værdien for to-5 niske konvulsioner og LD^g-værdien for 30 min. bestemmes derpå. Forsøgene gennemføres i standard-laboratoriebur med mus, der er blevet akklimatiseret til laboriet.

De overlevende mus udsættes derpå også for lyd i ca. 30 min.

10 efter doseringen. Lydbehandlingen gennemføres ved at anbringe musene i et lydisoleret bur med en klokke, som udsender 120 decibel, og idet klokken aktiveres i 2 min. Antallet af toniske konvulsioner og dødeligheden optegnes derpå til bestemmelse af EDgg-værdien og LD^g-værdien i nærværelsen af lydpåvirkningen, I en række lignende forsøg har det vist sig, at forholdet af LD^g-værdien i 30 min. uden lyd til den lydfremkaldte LOgg-værdi for aminophyllin, theophyllin og coffein er større end 3 for alle tre forbindelser, medens stryknin ikke udviste nogen signifikant toksisitetsændring ved lyd.

US patentskrift nr. 4.136.182.

Forskellige triazolpyridazinforbindelser har vist sig at 25 udvise forøget toksisitet og lavere konvulsive tærskler i sådanne behandlinger,ligesom aminophyllin. Andre triazol= pyridaziner, som har bronchodilatorvirkning, udviste et langt lavere toksisk potential for audiogene anfald. Forholdet af LD^g uden lyd til LD5g med lyd for 6^morpholin- 7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3^b]pyridazin viste sig f.eks. at være 3,8, medens forholdet for 6-morphol±n-3-methyl-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-bJpyridazin viste sig at være ca. 1,18. Nogle triazolpyridaziner har overraskende vist sig at bevirke en signifikant sænkning af audiogenisk kon-35 vulsiv tærskel uden en ledsagende forøgelse i de lydfremkaldte dødsfald som angivet ved hjælp af en lav ED^g-værdi for audiogene toniske konvulsioner i sammenligning med LD j- g -værdien med lyd.

26

DK 158353B

Den efterfølgende tabel belyser bronchodilatorvirkningen af repræsentative forbindelser ifølge opfindelsen og deres akute toksisitet og audiogene konvulsive egenskaber.

5 10 15 20 25 30 35

DK 158353B

27

o -rH

X

«1 M •H > « G -ri >

<D 01 I CnH O

οΰ>Λ η ^ o ιή o •h>Q æ η φ n m

>X3 p; W <N rt Η H

G O

< X

Ή

H

? in co <# io cn o V Q σ' cn cn cn r»

" J CS Η Η Η H

4 H i g 'o

LO CO Is O' O' H

o Q σ> ^ ^ n cr> O) μ| CVJ Η Η Η rt

G

•HQ) CN Η H CO tf>

g P*· θ' v£> en CO

G (tf +> X 0) O

pH rH

Λ λ CO >1

cd G

-H

N

O)

(¾ M

1X1 4) Q) -H ft H O J°| * CD > G ® 1 J, -

C ^ H G I G · G -S

5 -H rH -Η -Η Ό

'ri <, G1 Ό >ι Η *0 -H

g g -H Jd O ·Η H

O “g Q)Q)G,Q)G

g O. 2 M Ou H

rrt u -H I O -H >1

^ g PM S S dl PM

-H 0) g -*-1 n m G cni is æ om o; I s s o u d

DK 158353B

28 •Η ό M hl tn aj H >> d -H i 0) t n o ijiH m f* m η o h odQ iji ^ ο φ tu io

•H > W HH

Ό d d o

•H

H o rrtin ι^Γ'ΐηοοο’Φ ir a vp oo o σ> t>

£ J Η Η H

H

el •Η T g o in r- in in 10 00 10 00 »ir-cooooco

CO J Η Η Η H

d ·

-H <D

η 'ΰ (tftti r»Mint^^io -P ,¾ ® O' W CO CO > tn o

Η H ffi rQ

00 HH-

Pi d d

*» -Η -H

Γ- NN

(¾ IB »tf d d d

H <D 4) <U

d H ft ft

O >i -Η -H

> +)] lO P4 fri

Λ d I I

Φ η h d d a« ^ η I I -rj ·Η d d m dO η Η Ό Ό -d -d

,2 ΦΗ >1 >, -d -d Ό H

(11 m M rd »d H H *H o $ ,2¾ +j +j o o d Λ ^ mn <u <D d d <U ft

•H 5 I 2 S ij M ft M

n ^ rn I I >1 >i -d O

^ -H . S S3 fd fti E

0 rQ ^

Od . ” JP nP

y cn ffi Del ffi ^ cd I S a o « s o

DK 158353B

29 •ri ti u M « tn > -ri >i β -H _ 11) Bl ° (-η_ι tf) Η Γ* C" P) 01

^ H ^ H tO

H >0 H H H H

ti d d O

c x ri f H l-o .tf) Η Γ*· Ρ» Is· ΙΛ

Op r* H Cp ^ 00

!^<3 Η Η Η H

M

ri.

dl 3? g 1 o tn h to r* r- co O Q ψ η 'Φ t# ri

ΓΠ iJ H r*l Η Η H

d -Η Φ S ti (5 tf in to o οι oo 4j ^ in to σ' oo tn tn o

•H pH

M rQ

co ,

Pi T1 ^ >1 >1 d d

t-. *H -H

1¾ SS

Μ Φ « « n ^ 0· ft

P k, , -H -H

S c1 JO PN ft Λ S' 05 .11 S d d η h

λ\ r· 'S Ή -H I I C

0) ^ o Ό Ό Η Η -H

“ ^ Tj -ri -H >i >i H

ΗΗΧ5ΛΟ O H >| O O -P -P £5 ti JO !-i S-ι <U <U Q«

β 'O * Μ M 2 £ M

-H d ^ >-, >i I 10 Λ ·Η -. (¾ (¾ 2 Z 2 M rQ r-l O ti

Pm OM co co

fe Φ ml ffl K

qS I U K U K ffl

DK 158353B

30

Histamin-aerosol-behandling

Ved en anden fremgangsmåde blev testforbindelser indgivet til marsvin ved intraperitoneal injektion, og marsvinene 5 blev 2 timer senere påvirket ved behandling med en histaminaerosol. Ubehandlede dyr kollaberede, når de blev udsat for histamin-aerosolen. Ved disse behandlinger blev dyrene undersøgt, og det blev beregnet en EDgQ-værdi som den dosis, hvor 50% af dyrene fremviste en kollapstid på overden gennemsnit-10 lige kollapstid plus to standardafvigelsesenheder observeret med kontroldyr behandlet med injektionsbæreren alene. EDc-g-værdierne af repræsentative forbindelser er angivet i den efterfølgende tabel.

Forbindelse fra eksempel nr. ED^g-værdi (mg/kg i.p.) 15 23 5,0 24- . X’6 25 4’° 26 2,5 27 1,8 20 28 1,3 32 2,1 33 2,2 38(dihydrochlorid) 23,8 39 5,0 25 -40 <5 41 (skønnet) 4,95 45 <2,5 47 36,4 49 (skønnet) 7,9 30 (skønnet) 5,1 31

DK 158353B

Forsøgsrapport

Prøveforbindel ser 5 I. 8-methyl-6-piperidin-s-triazol[4,3-b]pyridazin (sammen ligning) II. 6-(2-methyl pyrrol id i ny1)-7,8-tetramethy1en-s-triazol-[4,3-b]pyridazin III. 3-methyl-6-(hexahydro-4-methy1-1H-1,4-diazepin-l-yl)-7,8-10 tetramethylen-s-triazol[4,3-b]pyridazin.

Prøvemetode

Ved bedømmelse af bronchodilatoraktiviteten blev de under af-15 prøvning værende forbindelser indgivet til marsvin ved intra-peritoneal injektion i en dosis, som var 30% af LD50· Marsvinene blev derefter udsat for en histamin-aerosol i perioder på fra 15 minutter til 2 timer efter indgift af den under afprøvning værende forbindelse, idet 5-6 dyr blev undersøgt for 20 hvert tidspunkt. Ubehandlede dyr faldt sammen, da de blev udsat for histamin-aerosolen. Ved disse undersøgelser blev dyrene iagttaget og sammenbrudstiden blev noteret. Den gennemsnitlige forlængelse af tiden indtil sammenbrud (i sekunder) kan opsummeres som følger: 25

Dyr i

Prøvefor- Dosis hver prøve- Timer efter injektion bindeiser_(mq/kq)_gruppe_0,25 0,5 1_2 I 44,1 5 177 78 35 21 II 10,6 6 270 275 147 101 30 III 49 6 211 175 196 227 35

Claims (3)

1. Analogifremgangsmåde til fremstilling af terapeutisk aktive 5 3,6,7,8-substituerede s-triazol[4,3-b]pyridaziner med formlen X8 R7 S|^N| 10 r6 R3 hvor R3 er hydrogen eller Cj-C^alkyl; Rg er amino, Cj-^alkyl-15 amino, di-Ci-C4alkylamino eller en eventuelt Ci-C4alkylsubsti- tueret piperidin-, morpholin-, piperazin-, pyrrol idin-,^ hexa-hydro-lH-azepin- eller hexahydro-lH-l,4-diazepin-ring, og R7 og Rg tilsammen et tetramethylen, som kan være substitueret med methan- eller ethan-broer, kendetegnet ved, 20 at man a) omsætter en 3,6-dihalogen-4,5-substitueret pyridazin med formlen

25 XX 1 2 3 4 5 6 hvor R7 og Rg har de ovenfor angivne betydninger og X er halo 2 gen, med en amin svarende til den ovenfor angivne gruppe Rg, i 3 et inaktivt opløsningsmiddel og i nærværelse af et overskud af 4 en ikke-nukleofi 1 amin, den samme amin eller en uorganisk ba 5 se, som hydrogenhalogenidaccepterende middel, ved en tempera- 6 tur på 25 til 150°C, til dannelse af en 3-halogenpyridazin, som derefter omsættes med en forbindelse med formlen DK 158353B O II R3C-NHNH2 hvor R3 har den ovenfor angivne betydning, i et inaktivt, fly-5 dende medium ved en temperatur på 50-250eC; eller b) omsætter en forbindelse med formlen El/R*

10 X-\ tf—NHNH2 hvor X, R7 og Rg har de ovenfor angivne betydninger, ved en jg temperatur på 40 til 150°C med en forbindelse med formlen O II HO-C-R3 hvor R3 har den ovenfor angivne betydning, og omsætter den re- 20 suiterende 6-halogen-triazolpyridazin ved en temperatur på 75 til 160°C med en amin svarende til den ovenfor angivne gruppe Rg i et inaktivt opløsningsmiddel eller i et overskud af en Rg-amin som reaktionsmedium eller Rg-aminen i nærværelse af en uorganisk base eller en ikke-nukleofi 1 amin, 25

2. Fremgangsmåde ifølge krav 1 til fremstilling af 6-(2-me-thylpyrrol idinyl)-7,8-tetramethylen-s-triazol[4,3-b]pyrida-zin, kendetegnet ved, at der anvendes udgangsmaterialer, hvor R3 er hydrogen, Rg er 2-methylpyrrolidinyl, og R7 3 0 og Rg tilsammen er tetramethylen.

3. Fremgangsmåden ifølge krav 1 til fremstilling af 3-methyl' 6-(hexahydro-4-methyl-lH-l,4-diazepin-l-yl)-7,8-tetramethylen' s-triazol[4,3-b]pyridazin, kendetegnet ved, at der 3 5 anvendes udgangsmaterialer, hvori R3 er methyl, Rg er hexahy' dro-4-methyl-lH-l,4-diazepin-l-yl og R7 og Rg tilsammen er te-tramethylen.