DK149201B - Fremgangsmaade til rensning af insulin, dets analoge og derivater - Google Patents
Fremgangsmaade til rensning af insulin, dets analoge og derivater Download PDFInfo
- Publication number
- DK149201B DK149201B DK293277AA DK293277A DK149201B DK 149201 B DK149201 B DK 149201B DK 293277A A DK293277A A DK 293277AA DK 293277 A DK293277 A DK 293277A DK 149201 B DK149201 B DK 149201B
- Authority
- DK
- Denmark
- Prior art keywords
- insulin
- buffer
- nacl
- derivatives
- per
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/18—Ion-exchange chromatography
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23K—FODDER
- A23K10/00—Animal feeding-stuffs
- A23K10/30—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms
- A23K10/32—Animal feeding-stuffs from material of plant origin, e.g. roots, seeds or hay; from material of fungal origin, e.g. mushrooms from hydrolysates of wood or straw
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/62—Insulins
- C07K14/625—Extraction from natural sources
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S530/00—Chemistry: natural resins or derivatives; peptides or proteins; lignins or reaction products thereof
- Y10S530/827—Proteins from mammals or birds
- Y10S530/854—Glands
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Botany (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Physiology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Description
149201
Opfindelsen angår en fremgangsmåde til rensning af insulin, dets analoge og derivater af den i indledningen til kravet angivne art.
Det er allerede kendt, at peptider med samme eller lignende molekylvægt, der adskiller sig fra hinanden ved deres basicitet eller aciditet, kan skilles på ionbyttere.
Denne metode svigter imidlertid, når de forskellige peptider danner komplekser med hverandre, som fremkommer ved ionbytter-chromatografien. Til undgåelse af disse vanskeligheder har man i elueringsmidlet måttet vælge dissocierende betingelser.
Hidtil har man til dette formål i de til elueringen anvendte puffere opløst f.eks. enten urinstof eller urinstofderivater i høje koncentrationer (5 M - 9 M), eller man har arbejdet i med vand blandbare organiske opløsningsmidler. Således er 2 149201 f.eks. insulin blevet chromatograferet på ionbytteren Amberlite IRC 50 i phosphatpuffer med 5 M - 8 M urinstof (R.D. Cole, J. Biol. Chem., 235, 2294 (1960)). Fra GB-patentskrift nr.
881.855 er anvendelsen af et med vand blandbart organisk opløsningsmiddel, f.eks. ethanol, kendt. Ekstreme pH-værdier, der ligeledes virker dissocierende, er på grund af peptidernes følsomhed overfor sådanne betingelser ikke anvendelige. De hidtil kendte metoder har imidlertid forskellige ulemper. Isoleringen af stofferne fra urinstofholdige puffere er således besværlig og tidskrævende. Endvidere kan der i urinstoffet være indeholdt forureninger, som reagerer med peptider såsom insulin. Ved anvendelsen af ethanol som organisk opløsningsmiddel volder genanvendeligheden af ionbytteren vanskeligheder, og desuden er ionbytterchromatografien forbundet med et stort tab af peptid, f.eks. insulin. Endelig er der risiko for denaturering af de højeremolekylære peptider i organiske opløsningsmidler, således som det er kendt i forbindelse med insulin i 60%'s alkohol ved en pH-værdi på 7.
Det har nu ifølge opfindelsen overraskende vist sig, at disse vanskeligheder ved en fremgangsmåde til rensning af insulin, dets analoge og derivater ved ionbytterchromatografi i vandige, pufrede opløsningsmidler kan undgås, når der chromatograferes i opløsningsmidler, som indeholder ikke-ioniske detergenter og en elektrolyt, ved 0-50°C og pH-værdier fra 5,5 til 10 på en basisk ionbytter.
Genanvendeligheden af ionbytterne bereder ingen vanskeligheder. En denaturering af insulinerne kan ikke iagttages, og isoleringen er enkel og sker ved fældning af insulinerne med egnede fældningsmidler og eventuelt påfølgende krystallisation. Udbytterne er tydeligt højere end ved anvendelsen af organiske opløsningsmidler som dissocierende midler.
Fremgangsmåden ifølge opfindelsen kan anvendes i forbindelse med insuliner af alle arter, også humaninsulin, insulinanaloge, f.eks. des-phe-Bl-insulin, og insulinderivater, f.eks. insulin-B-kædesulfonat.
Disse forbindelser kan anvendes såvel i forholdsvis uren tilstand som på for-renset form, f.eks. ved gelchromatografi.
Insulin er efter flere ganges krystallisation og også efter gel- 3 149201 chromatografi endnu forurenet med insulin-lignende ledsages toffer med meget nær samme molekylvægt, som ved passene valgt pH-værdi ved deres ladningstilstand adskiller sig fra hverandre og fra insulin, men danner komplekser med insulin.
Eksempler på sådanne stoffer er desamidoinsuliner, arginin- og diarginininsulin og insulinethylester. De kan hverken ved gel-chromatografi eller ved ionbytterchromatografi i ikke-disssocie-rende virkende elueringsmidler skilles fra insulin.
Egnede ionbytteretil rensning af de ovennævnte forbindelser er f.eks. Dowex®l, QAE-Sephadex ® , Biogel® DM, DEAE-Sephadex ® , Amberlyst ®A 21 og A 29, DEAE-Sepharose ® CL-6B og DEAE-Cellulose. Særligt godt egner sig til rensningen af insulin, insulinanaloge og insulinderivater basiske ionbyttere på dextranbasis, f.eks. DEAE-Sephadex ® eller QAE-Sephadex®.
Ionbytningsprocessen udføres i et pufret, vandigt opløsningsmiddel, i hvilket ikke-ioniske detergenter er opløst.
Som sådanne kan f.eks. nævnes palmitylsorbitanpoly-ethylenglycolether, stearylsorbitanpolyethylenglycolether, oleylsorbitanpolyethylenglycolether, nonylphenolglycolether (10-30 mol ethylenoxid pr. mol nonylphenyl), polymerisationsprodukter af propylenoxid og ethylenoxid (10-80% ethylenoxidan-del), fedtalkoholpolyglycolethere og polyglycolethere af syntetiske fedtalkoholer.
Af særlig fordel er fedtalkoholpolyglycolethere, da de er godt virksomme, er lette at håndtere og ikke udviser nogen UV--absorption i absorptionsområdet for aromatiske peptider, hvilket letter erkendelsen af peptiderne i eluatet. Desuden er disse forbindelser biologisk fuldstændigt nedbrydelige, hvilket gør deres anvendelse problemfri med henblik på miljøbelastningen.
Elueringsmidlerne indeholder altid et pufferstof til regulering af elueringsmidlets pH-værdi. Der arbejdes fortrinsvis ved en konstant pH-værdi, og fortrinsvis ved pH-værdier mellem 6 og 9.
Egnede pufferstoffer er kendt fra litteraturen. Temperaturen ved ionbytterchromatografien skal holdes konstant og ligger mellem 0 og 50°C, fortrinsvis mellem 15 og 30°C. De til elueringen anvendte opløsninger indeholder foruden pufferstofferne og detergenterne også en elektrolyt, fortrinsvis et neutralsalt såsom NaCl i koncentrationer mellem 0,01 M og 0,5 M, fortrinsvis mellem 0,05 M og 0,3 M, eller man eluerer med en elektrolytgradient 4 149201 ved kontinuerlig tilblanding af en elektrolytholdig puffer til eluejringspufferen uden elektrolyt, der ellers har samme sammensætning, på den måde, at koncentrationen af den anvendte elektrolyt stiger i afhængighed af elueringsrumfanget og fortrinsvis i lineær afhængighed. Slutkoncentrationen af elektrolyt ligger mellem 0,1 M og 1 M, fortrinsvis mellem 0,3 M og 0,8 M.
Den her omhandlede rensning af insuliner illustreres nærmere i de følgende udførelseseksempler. I eksemplerne sker renhedskontrollen af udgangsmaterialet samt af insulinerne efter rensningen ved hjælp af polyacrylamidgel-elektroforese og/eller ved højtryksvæskechromatografi.
Eksemgel_l
Der fremstilles en puffer med følgende sammensætning: 0,1 M tris-Oiydroxymethyl)-aminomethan og 1% GenapolSE 150 (fedtalkoholpolyglycolether). pH-Værdien indstilles med HC1 på 7,0.
Til en del af den ovennævnte puffer sættes der 0,5 mol NaCl pr. liter. 450 g DEAE-SephadejPA 25 opkvældes i den ovennævnte puffer, og suspensionen fyldes derpå i en søjle med 5 cm diameter og en længde på 100 cm. Søjlen bringes i ligevægt med pufferen.
5 g Insulin, der er krystalliseret fra citratpuffer, opløses i 75 ml af den ovennævnte puffer (uden NaCl). pH-Slutværdien er 8,3. Den klare opløsning tilføres søjlen, og der elueres ved 25°C med en hastighed på 320 ml pr. time med den ovennævnte puffer (pH 7,0), hvorved der anlægges en lineær NaCl-gradient på den måde, at NaCl-kon-centrationen i eluatet ved gennemløb af 5,5 liter puffer stiger fra 0 til 0,33 M. Der opsamles fraktioner på 22 ml. I eluatet måles UV-ekstinktionen kontinuerligt ved 278 nm og optegnes. Den centrale del af insulin-toppen (fra 0,1 M til 0,24 M NaCl) (1540 ml) opsamles, og der tilsættes 70 ml 1%'s ZnCl2-opløsning. Det amorft udfældede insulin skilles fra ved centrifugering og krystalliseres derpå på i og for sig kendt måde fra en acetoneholdig citratpuffer.
Udbyttet af rent insulin andrager 3,76g(75,2%).
5 149201
Eksemgel_2
Der fremstilles en puffer med følgende sammensætning: 0,1 M tris-(hydroxymethyl)-aminomethan, 0,12 M NaCl og 1% Genapol ® ZDM 110 (polyglycolether af ligekædede, syntetiske fedtalkoholer, gennemsnitlig molekylvægt 190, med 11 mol ethylenoxid pr. mol fedtalkohol .
pH-Værdien indstilles på 7,0 med HCl.
13 g QAE-Sephadex^A 25 opkvældes i den nævnte puffer, og suspensionen fyldes i en søjle med diameter 1,5 cm og længde 30 cm.
Søjlen bringes i ligevægt med pufferen. 300 mg insulin, der efter krystallisationen yderligere ved gelchromatografi på Sephadex G 50 på i og for sig kendt måde er blevet befriet for højeremolekylære bestanddele i vidt omfang, opløses i 15 ml af den nævnte puffer (pH-slut-værdi 8,2). Den klare opløsning hældes på søjlen og elueres ved 25°C med en hastighed på 48 ml pr. time med den nævnte puffer (pH 7). Der opsamles fraktioner på 7 ml. I eluatet måles og optegnes UV-ekstink-tionen ved 278 nm kontinuerligt. Den centrale del af insulin-toppen (620 ml) opsamles, og der tilsættes 28 ml 1%'s ZnC^-opløsning. Det amorft udfældede insulin skilles fra ved centrifugering og krystalliseres derpå på i og for sig kendt måde fra en acetoneholdig citratpuffer. Udbyttet af rent insulin andrager 185 mg (61,6%).
Eksempel_3
Der fremstilles en puffer med følgende sammensætning: 0,1 M tris-(hydroxymethyl)-aminomethan og 2% Genapol® SE 150 (jf. eksempel 1).
pH-værdien indstilles på 7,0 med HCl.
Dele af denne puffer tilføres NaCl i mængder på 0,05 mol pr. liter, 0,1 mol pr. liter,^,2 mol pr. liter og 0,3 mol pr. liter.
450 g DEAE-Sephadex A 25 opkvældes i den nævnte puffer med 0,05 M NaCl, og suspensionen fyldes derpå på en søjle med diameter 5 cm og længde 100 cm. Søjlen bringes i ligevægt med pufferen.
5 g Insulin,jfr. eksempel 2, opløses i 100 ml af den nævnte puffer (0,05 M NaCl) (pH-slutværdi 8,4), hældes på søjlen, og der elueres ved 25°C méd en hastighed på 290 ml pr. time. Der opsamles 6 149201 fraktioner på 28 ml. Efter gennemløb af 1,82 liter af pufferen med 0,05 M NaCl elueres der med 4,76 liter puffer med 0,1 M NaCl, 2,24 liter med 0,2 M NaCl og endelig 5,3 liter med 0,3 M NaCl.
Eluatets UV-ekstinktion måles kontinuerligt og optegnes.
Hovedmængden af insulinet elueres her efter tilsætning af pufferen med 0,3 M NaCl. Den centrale del af insulin-toppen opsamles (820 ml), og der tilsættes 37 ml 1%'s ZnCl2-opløsning. Den amorfe fældning skilles fra ved centrifugering,og insulinet krystalliseres derpå på i og for sig kendt måde fra en acetoneholdig cetratpuffer.
Udbyttet af rent insulin andrager 2,84 g (56,8%).
Eksempel_4
Der fremstilles en puffer med følgende sammensætning: 0,1 M tris-(hydroxymethyl)-aminomethan og 5% Genapol® SE 100 (fedtalkoholpolyglycolether).
pH-Værdien indstilles med HC1. på 7,0.
En del af denne puffer tilføjes 0,5 mol NaCl pr. liter.
13 g DEAE-Sephadex0 A 25 opkvældes i den nævnte puffer .(uden NaCl), og suspensionen fyldes derpå i en søjle med diameter 1,5 cm og længde 30 cm. Søjlen bringes i ligevægt med pufferen.
300 mg insulin, jfr. eksempel 2, opløses i 15 ml af den nævnte puffer (uden NaCl) (pH-slutværdi 8,3). Den klare opløsning hældes på søjlen, og der elueres ved 25°C med en hastighed på 48 ml pr. time, hvorved der anlægges en lineær NaCl-gradient på den måde, at NaCl-koncentra-tionen i eluatet ved gennemløb af 500 ml puffer stiger fra O til 0,5 M. Der opsamles fraktioner på 7 ml. I eluatet måles og optegnes, kontinuerligt UV-ekstinktionen ved 278 nm. Den centrale del af insulin-toppen (fra 0,09 M til 0,22 M NaCl) (100 ml) opsamles, og der tilsættes 4,6 ml 1%'s ZnCl2-opløsning. Det amorft udfældede insulin skilles fra ved centrifugering og krystalliseres derpå på i og for sig kendt måde fra en acetoneholdig citratpuffer.
Udbyttet af rent insulin andrager 160 mg (53,3%).
Eksempel-5
Der gås frem som i eksempel 4, men blot under anvendelse af 1% Arkopal ™ N 100 (nonylphenolpolyglycolether med 10 mol ethylenoxid pr. mol nonylphenol) som detergent.
149201 " 7
Den kontinuerlige UV-måling må på grund af egenabsorptionen for Arkopal'S'N 100 udføres som differensmåling.
Udbyttet af rent insulin andrager 214 mg (71f3%).
_Eksempel_6__
Der gås frem som i eksempel 4, men blot under anvendelse af 2% Arkopal^ N 300 (nonylphenolpolyglycolether med 30 mol ethylenoxid pr. mol nony^phenol) som detergent og under anvendelse af QAE-Sephadex^ A 25 som ionbytter. Udbyttet af rent insulin andrager 156 mg (52%).
Den kontinuerlige UV-måling må på grund af egenabsorptionen af Arkopal N 300 gennemføres som differensmåling.
De i eksemplerne anvendte detergenter er handelsprodukter fra firma Hoechst AG.
De i eksemplerne anvendte ionbyttere er handelsprodukter fra firma Pharmacia Fine Chemicals.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE2629568 | 1976-07-01 | ||
DE2629568A DE2629568C3 (de) | 1976-07-01 | 1976-07-01 | Verfahren zur Reinigung von Insulin, seinen Analogen und Derivaten |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DK293277A DK293277A (da) | 1978-01-02 |
DK149201B true DK149201B (da) | 1986-03-10 |
DK149201C DK149201C (da) | 1986-08-04 |
Family
ID=5981950
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DK293277A DK149201C (da) | 1976-07-01 | 1977-06-30 | Fremgangsmaade til rensning af insulin, dets analoge og derivater |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4129560A (da) |
JP (1) | JPS535101A (da) |
AT (1) | AT352922B (da) |
AU (1) | AU509110B2 (da) |
BE (1) | BE856385A (da) |
CA (1) | CA1086308A (da) |
CH (1) | CH626051A5 (da) |
DE (1) | DE2629568C3 (da) |
DK (1) | DK149201C (da) |
ES (1) | ES460099A1 (da) |
FI (1) | FI61490C (da) |
FR (1) | FR2356630A1 (da) |
GB (1) | GB1582056A (da) |
GR (1) | GR78333B (da) |
IE (1) | IE44766B1 (da) |
IT (1) | IT1080658B (da) |
NL (1) | NL188804C (da) |
NO (1) | NO145692C (da) |
NZ (1) | NZ184516A (da) |
PT (1) | PT66751B (da) |
SE (1) | SE440507B (da) |
ZA (1) | ZA773964B (da) |
Families Citing this family (26)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4701521A (en) * | 1978-07-17 | 1987-10-20 | The Trustees Of Boston University | Method of effecting cellular uptake of molecules |
US4783441A (en) * | 1979-04-30 | 1988-11-08 | Hoechst Aktiengesellschaft | Aqueous protein solutions stable to denaturation |
US4292041A (en) * | 1979-11-02 | 1981-09-29 | Merck & Co., Inc. | Surfactant assay |
US4459226A (en) * | 1982-02-26 | 1984-07-10 | Eli Lilly And Company | Process for recovering insulin |
US4839341A (en) * | 1984-05-29 | 1989-06-13 | Eli Lilly And Company | Stabilized insulin formulations |
DE3511269A1 (de) * | 1985-04-12 | 1986-10-09 | Veb Berlin-Chemie, Ddr 1199 Berlin | Verfahren zur reinigung von insulin |
JPS6230956A (ja) * | 1985-07-31 | 1987-02-09 | Sumitomo Chem Co Ltd | 合成ペプチド類に含有されるイオン類の分析法 |
DE3726655A1 (de) * | 1987-08-11 | 1989-02-23 | Hoechst Ag | Verfahren zur isolierung basischer proteine aus proteingemischen, welche solche basischen proteine enthalten |
JPH07119767B2 (ja) * | 1989-03-07 | 1995-12-20 | 積水化学工業株式会社 | 梅毒検査用試薬及びその製造法 |
DE4028120C2 (de) * | 1990-09-05 | 1996-09-19 | Hoechst Ag | Verfahren zur Reinigung von Insulin und/oder Insulinderivaten |
DK0547544T3 (da) * | 1991-12-18 | 1997-09-08 | Hoechst Ag | Fremgangsmåde til fremstilling af insulinholdige opløsninger. |
US6444788B1 (en) * | 1999-03-15 | 2002-09-03 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatography of GLP-1, analogs and derivatives thereof |
US6451987B1 (en) | 1999-03-15 | 2002-09-17 | Novo Nordisk A/S | Ion exchange chromatography of proteins and peptides |
EP1664108B1 (en) * | 2003-08-21 | 2009-10-14 | Novo Nordisk A/S | Separation of polypeptides comprising a racemized amino acid |
US20080090753A1 (en) | 2004-03-12 | 2008-04-17 | Biodel, Inc. | Rapid Acting Injectable Insulin Compositions |
US20080096800A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-24 | Biodel, Inc. | Rapid mucosal gel or film insulin compositions |
US20080085298A1 (en) * | 2004-03-12 | 2008-04-10 | Biodel, Inc. | Rapid Mucosal Gel or Film Insulin Compositions |
US7713929B2 (en) * | 2006-04-12 | 2010-05-11 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
US8084420B2 (en) | 2005-09-29 | 2011-12-27 | Biodel Inc. | Rapid acting and long acting insulin combination formulations |
JP2009533471A (ja) | 2006-04-12 | 2009-09-17 | バイオデル, インコーポレイテッド | 即効型および長時間作用型組合せインスリン製剤 |
US9060927B2 (en) | 2009-03-03 | 2015-06-23 | Biodel Inc. | Insulin formulations for rapid uptake |
JP6110312B2 (ja) | 2011-02-01 | 2017-04-05 | ノヴォ ノルディスク アー/エス | インスリンの精製 |
WO2013026803A1 (en) | 2011-08-25 | 2013-02-28 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Cation and anion exchange chromatography method |
JP6093364B2 (ja) * | 2011-09-30 | 2017-03-08 | ジーイー・ヘルスケア・バイオプロセス・アールアンドディ・アクチボラグ | 生体分子の精製方法 |
CN103130868B (zh) * | 2013-03-12 | 2014-09-17 | 合肥天麦生物科技发展有限公司 | 一种蛋白质或多肽的纯化方法 |
EP3171888B1 (en) | 2014-07-21 | 2022-12-28 | Merck Sharp & Dohme LLC | Chromatography process for purification of inlsulin and insulin analogs |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US3616235A (en) * | 1968-05-16 | 1971-10-26 | Forsch Die Garungsindustrie En | Process for precipitating enzymes and enzymatic inactive proteins in solution with synthetic tanning materials |
US3607858A (en) * | 1970-03-31 | 1971-09-21 | American Cyanamid Co | Process for preparing lyophilized human blood proteins such as gamma globulin in the presence of a nonionic surfactant |
US3683939A (en) * | 1970-05-28 | 1972-08-15 | Wilson Pharm & Chem Corp | Proteinaceous cosmetic material for hair conditioning |
US3907676A (en) * | 1970-07-28 | 1975-09-23 | Novo Terapeutisk Labor As | Process for purifying insulin |
JPS5328989B2 (da) * | 1974-05-27 | 1978-08-17 | ||
US4076800A (en) * | 1975-01-13 | 1978-02-28 | The Procter & Gamble Company | Protein-containing detergent compositions for protecting keratinous materials |
-
1976
- 1976-07-01 DE DE2629568A patent/DE2629568C3/de not_active Expired
-
1977
- 1977-06-24 NL NLAANVRAGE7707037,A patent/NL188804C/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-06-25 ES ES460099A patent/ES460099A1/es not_active Expired
- 1977-06-28 GR GR53823A patent/GR78333B/el unknown
- 1977-06-28 CH CH792577A patent/CH626051A5/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-29 US US05/810,979 patent/US4129560A/en not_active Expired - Lifetime
- 1977-06-29 FI FI772023A patent/FI61490C/fi not_active IP Right Cessation
- 1977-06-29 IT IT25221/77A patent/IT1080658B/it active
- 1977-06-29 NZ NZ184516A patent/NZ184516A/xx unknown
- 1977-06-30 DK DK293277A patent/DK149201C/da not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 AT AT466377A patent/AT352922B/de not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 ZA ZA00773964A patent/ZA773964B/xx unknown
- 1977-06-30 GB GB27395/77A patent/GB1582056A/en not_active Expired
- 1977-06-30 NO NO772318A patent/NO145692C/no unknown
- 1977-06-30 AU AU26604/77A patent/AU509110B2/en not_active Expired
- 1977-06-30 IE IE1358/77A patent/IE44766B1/en not_active IP Right Cessation
- 1977-06-30 CA CA000281825A patent/CA1086308A/en not_active Expired
- 1977-06-30 PT PT66751A patent/PT66751B/pt unknown
- 1977-06-30 SE SE7707612A patent/SE440507B/xx not_active IP Right Cessation
- 1977-07-01 FR FR7720310A patent/FR2356630A1/fr active Granted
- 1977-07-01 JP JP7797677A patent/JPS535101A/ja active Granted
- 1977-07-01 BE BE179012A patent/BE856385A/xx not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
DK149201B (da) | Fremgangsmaade til rensning af insulin, dets analoge og derivater | |
DE68916932T2 (de) | Antimikrobielle peptide, zusammensetzungen, die diese enthalten, und verwendungen daraus. | |
Bowsher et al. | Rat histamine N-methyltransferase. Quantification, tissue distribution, purification, and immunologic properties. | |
US7879331B2 (en) | Ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
Hutchens et al. | Structurally intact (78-kDa) forms of maternal lactoferrin purified from urine of preterm infants fed human milk: identification of a trypsin-like proteolytic cleavage event in vivo that does not result in fragment dissociation. | |
JP2003048900A (ja) | 高純度アルブミンの製造 | |
Carter | Interferon: evidence for subunit structure | |
RU93046317A (ru) | Хиндроитиназа, способ ее получения и содержание ее фармацевтические композиции | |
AU2006287833B2 (en) | An ultra-high yield intravenous immune globulin preparation | |
EP0991666B1 (de) | Alpha 1-antitrypsin-präparation sowie verfahren zu deren herstellung | |
US5132404A (en) | Method of purifying human serum albumin using organic carboxylic acids and acetyl tryptophan | |
Kelmers | Preparation of a highly purified phenylalanine transfer ribonucleic acid | |
Williams et al. | Purification of the insulin receptor from human placental membranes | |
US4476109A (en) | Method of preparing gamma globulin suitable for intravenous administration | |
NO157787B (no) | Korrosjonshindrende, sinkrik maling inneholdende manganomanganioksyd-rkpigment. | |
EP0013826A1 (en) | Process for purifying insulin and insulin so prepared | |
NL8501105A (nl) | Werkwijze voor de zuivering van insuline. | |
JPH07330626A (ja) | 血清アルブミン製剤の製造方法 | |
JPS59231097A (ja) | 均質ヒト免疫インターフェロンサブタイプ21kおよびその製造法 | |
KR800000970B1 (ko) | 고분자량의 펩타이드의 정제 방법 | |
Strøbæk et al. | Ribulose-1, 5-diphosphate carboxylase from barley (Hordeum vulgare) Isolation, characterization, and peptide mapping studies of the subunits | |
Tikkanen et al. | Large‐scale purification and preliminary X‐ray diffraction studies of human aspartylglucosaminidase | |
Hitchcock et al. | Affinity purification of renal dipeptidase solubilized with detergent | |
Matsumoto et al. | Fractionation of chromosomal proteins of pea seedlings using procedures which avoid denaturation | |
Lindemans et al. | Purification of human transcobalamin II-cyanocobalamin by affinity chromatography using thermolabile immobilization of cyanocobalamin |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PUP | Patent expired |