DK141627B - Analogifremgangsmåde til fremstilling af eburnameninderivater. - Google Patents

Description

(m)

Vjja/ (11) FREMLÆ66ELSESSKRIFT 141627 DANMARK (51> lnt Cl·3 c 07 d Λ61/00 «(21) Ansøgning nr. 254θ/76 (22) Indleveret den 9· Jun. 1976 (23) Løbedag 9. Jun. 1976 (44) Ansøgningen fremlagt og fremlæggeteesakrtftet offentliggjort den 12. maj 1 9°0

Dl REKTORATET FOR

PATENT- OG VAREMÆRKEVÆSENET (30) Priorftert begæret fra den

10. Jun. 1975* RI 566, HU

(71) RICHTER GEDEON VEGYESZETI GYÅR RT, 21 Gyoemroi u., Budapest X, HU.

(72) Opfinder: Csaba Lorincz, 56, Bodnar u., Budapest XVI, HU: Kalman Szasz, 67/693 P as ar et 1 u., Budapest II, HU: Maria Bolyos, 21-23, Frankel-Leo u., Budapest II, HU: Karola Jovanovics, 47, Benczur u., Budapest XII, HU:

Laszlo Szpomy, 7, SzaboTcska M. u., Budapest XI, HU: Egon Karpatl, 35, Krlsztlna Krt., Budapest XII, HU: Eva Palosl, 21, Vend u., Budapest II, HU. - (74) Fuldmægtig under sagens behandling:

Kontor for Industriel Eneret v. Svend Sohønnlng.

(54) Analogifremgangsmåde til fremstilling af eburaameninderivater.

Den foreliggende opfindelse angår en analogifremgangs-måde til fremstilling af hidtil ukendte eburaameninderivater med den almene formel 5 JL iL" 1 RO-CH2 \/ C2H5 2 141627 hvor R er et hydrogenatom eller en alkylkarbonylgruppe med 1-15 kulstofatomer i alkyldelen, en alkenylkarbonylgruppe med 2-6 kulstofatomer i alkenyIdelen, en fenylalkylkarbonyl-gruppe med 1-5 kulstofatomer i alkyldelen eller en benzoylgrup-5 pe, der eventuelt er substitueret med 1-3 substituenter valgt blandt halogen, trihalogenmetyl, alkoxy med 1-4 kulstofatomer eller nitro, eller et syreadditionssalt eller et kvaternært salt deraf.

I de hidtil ukendte forbindelser med den almene formel 10 I kan substituenten R foruden et hydrogenatom være en alkylkarbonylgruppe med 1-15 kulstofatomer i alkyldelen, fx en acetylgruppe, en n-propionylgruppe, en isopropionylgruppe, en n-butyrylgruppe, en isobutyrylgruppe, en n-valerylgruppe, en isovalerylgruppe, en hexanoylgruppe, en heptanoylgruppe, 15 en oktanoylgruppe, en nonanoylgruppe, en dekanoylgruppe, en undekanoylgruppe eller en lauroylgruppe, en alkenylkarbonylgruppe med 2-6 kulstofatomer i alkenyldelen, fx en akryloyl-gruppe, en metakryloylgruppe, en vinylacetylgruppe eller en krotonoylgruppe, en fenylalkylkarbonylgruppe med 1-5 kulstof-20 atomer i alkyldelen, fx en fenylacetylgruppe eller en fenyl-propionylgruppe, eller en benzoylgruppe, en klor-, bromeller fluorbenzoylgruppe, en mono-, di- eller trimetoxybenz-ylgruppe eller en dinitrobenzoylgruppe.

De hidtil ukendte apovincinderivater med den almene 25 formel I udviser værdifulde farmakologiske egenskaber, og navnlig deres virkninger på hjertet og blodkarrene er betydningsfuld. Disse virkninger åbenbarer sig ved karudvidelse i forskellige blodkarområder, samt ved ændringer af blodtrykket og pulsfrekvensen.

30 Fra FR patentskrift nr. 2.035.784, Chemical Abstracts, vol. 82, 1975, 129279v ag DK patentansøgning nr. 5404/72 kendes forskellige derivater af vincamin, som er et mere væsentligt alkaloid fra Vinca minor og som er usubstitueret i "A"-ringen.

35 De her omhandlede forbindelser er derivater af vincin, der er et mindre væsentligt alkaloid fra Vinca minor med en metoxysubstituent i "A"-ringen.

Mens vincaminderivaterne og vincamin selv er kendte vasodilatorer, har man ikke hidtil kendt en sådan virkning 40 for vincin og derivater deraf. De hidtil kendte data for vincin 3 141627 og derivater deraf er følgende:

Vincin og apovincin er beskrevet 1 BE patentskrift 765.42J uden nogen éingivelse af terapeutisk virkning. Nogle andre vincinderivater med lokalanæstetisk virkning, antiho-5 stevirkning og sedativ virkning er beskrevet i FR patentskrift 2.117.796. Apovincin er i forbindelse med den foreliggende opfindelse undersøgt for vasodilaterende virkning.

Denne prøve var imidlertid negativ.

Det ovennævnte FR patentskrift nr. 2.035.784 beskri-10 ver vincaminderivaterne apovincaminol, 14-desoxy-vincaminol og estere deraf, samt 14-desoxy-14-formyl-vincaminol. Ifølge patentskriftet påberåbes der for disse forbindelser anvendelighed som CNS-depressanter og hjertestyrkende midler.

Biologisk forsøg 1 15 Bedømmelsen af de farmakologiske virkninger af de hid til ukendte forbindelser blev gennemført på med fenobarbital bedøvede hunde. Gennemstrømningen gennem ekstremiteterne måltes ved arteria femoralis og hjernegennemløbet ved arteria carotis interna med en elektromagnetisk strømningsmåler. De 20 undersøgte forbindelser blev indgivet intravenøst i doser på 1 mg/kg legemsvægt. Gennemsnitsværdierne for de gennemførte målinger udført på grupper af hver 5 dyr er sammenfattet i tabel 1. De enkelte spalter i tabel 1 viser resultaterne for følgende målinger: 25 1: blodtryk i mmHg 2: pulsfrekvens (antal pulsslag pr. minut) 3: hjernegennemløb, rnl/minut 4: ekstremitetsgennemløb, ml/minut

De angivne værdier viser forskellen mellem de efter ind-30 gift af den virksomme forbindelse målte værdier over for de før indgiften målte begyndelsesværdier. Til sammenligning angives også de tilsvarende værdier opnået for vincamin, der er en kendt forbindelse som anvendes i terapien på dette område med gode resultater.

4 141627

Tabel 1 G ennemsni t s værdi er for de ved intravenøse doser på 1 mg/kg forårsagede forandringer ;

Virksom forbindelse 1234 5 (-)-ll-Metoxy-14—bydroxymetyl- 3a, 15®- eburnameninnatrium- hydro gensulfat -16 +22 +23 +25 (-)-ll-metoxy-14-acetoxymetyl- 3a,l6a-eburnaiaenin-tartrat -32 +48 +47 +34 10 (-)-ll-metoxy-14-fenylacetyl-oxymetyl-3a, 16a- eburnamenin- tartrat -12 +6 +22 +9 (-)-ll-metoxy-14-(3f,4' ,5’-trimetoxybenzen-oxymetyl)- 15 3a,l6a-ebnrnamenin-tartrat O -8 +3 +1 (-)-ll-metoxy-14-oktanoyl- oxymetyl-3a,16a-eburnamenin-tartrat +1 -2 +4 +11 (-)-ll-metoxy-14—propionyloxy- metyl-3a,l6a-eburnamenin-tartrat -19 +4 +34 +11 20 (-)-ll-metoxy-14-(4,-klorbenzoyl- oxymetyl )-3a, 16a-eburnamenin-tartrat -10 +1 +9 +7 (-)-ll-met oxy-14-akr yl oyl oxyme t yl - 3a,l6o-eburnamenin-tartrat -19 +7 +18 +15 (-)-ll-metoxy-14-(3'-trifluormetyl-25 benzoxymetyl)-3a,16a-eburnamenin- -tartrat -4 +7 +5 +5 vincamin -19 -17 +1 +19 5 141627

Som det fremgår af resultaterne 1 den ovenstående tabel er den blodkarudvidende virkning hos de ifølge opfindelsen tilvejebragte forbindelser højere end den tilsvarende virkning af vincamin. Særlig fremragende er virkningen af 5 (-) -ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a, 16a-eburnamenln-natrium- hydrogensulfat, samt de med eddikesyre, propionsyre og fenyl-eddikesyre dannede estre af (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-301,16a-eburnamenin.

Biologisk forsøg 2 10 Vasodilatorisk virkning.

Der er foretaget en sammenligning mellem apovinca-minol-acetat, der er kendt fra dansk patentansøgning nr.

5404/72, apovincamlnol-benzoat, der er beskrevet i C.A. 82, 129279v, 1975, og et udvalg af de ifølge opfindelsen frem-15 stillede forbindelser (nummereret 1-10). Ved forsøget måltes det gennemsnitlige arterieblodtryk (MABP) og den vaskulære modstand i hjernen (CVR). Måleværdierne er angivet i forhold til vincamin, dvs. de pågældende værdier for vincamin er sat til 1. De forbindelser, der viser en nogenlvinde høj CVR-værdi 20 kan betragtes som gode vasodilatorer. På den anden side kan de forbindelser, der viser en hvilken som helst CVR-virkning også betragtes som gode vasodilatorer hvis de har en nogenlunde lav MABP-værdi. Resultaterne er opstillet i tabel 2.

Det fremgår af tabel 2, at forbindelserne 1-5 er 25 bedre end apovincaminol-benzoat, og at forbindelserne 1 og 5 er bedre end apovincaminol-acetat.

6 141627 TABEL 2

Nr Forbindelse MAPB CVR

.1. (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl- -3a,16a-eburnamenin-natrium- 0,84 1,35 hydrogensulfat 2. (-)-ll-metoxy-14-acetyloxymetyl- 1 68 1 40 -3 a,16 a-eburnamenin-tartrat (-)-ll-metoxy-14-fenylacetyl- 3. oxymetyl-3a,16a-eburnamenin- 0,63 0,88 -tartrat (-)-ll-metoxy-14-(3',4',5'-tri- 4. metoxybenzoyl)-oxymetyl-3a,16a- 0 0,1 -eburnamenin-tartrat (-)-ll-metoxy-14-oktanoyloxy- 5. metyl-3a,16a-eburnamenin- 0 0,75 tartrat (-)-ll-metoxy-14-propionyloxymetyl- ^ 0,65 -3a,16a-eburnamenin-tartrat η (-)-ll-metoxy-14-(4'-klorbenzoyl)- 0 53 06 -oxymety1-3a,16 a-eburnamenin-tartrat g (-)-ll-metoxy-14-akryloyloxymetyl- ^ 0 56 -3a,16a-eburnamenin-tartrat (-)-ll-metoxy-14-(3'-trifluormetyl- 9. benzoyl)-oxymetyl-3a,16a-eburnamenin- 0,2 0,25 tartrat (-)-ll-metoxy-14-(41-nitrobenzoyl)- 10. -oxymetyl-3a,16a-eburnamenin- 0,15 0,3 -tartrat apovincaminol-benzoat 0,18 0,85 apovincaminol-acetat 1,4 1,5 vincamin 1 1 7 141S27 På grund af deres ovenfor beskrevne farmakologiske egenskaber kan de ifølge opfindelsen tilvejebragte hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I anvendes som lægemidler til behandling af forskellige, med blodkarforsnævring forbund-5 ne sygdomsformer og arterirforkalkning, samt til supplerende behandling af høje blodtryk.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen er ejendommelig ved, at man reducerer apovincin med formlen

JL X Jl /V

X XX

j It 0 C2H5 10 og om ønsket omdanner den vundne forbindelse med den almene formel I, hvori R er et hydrogenatom, dvs. ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16a-eburnamenin ved behandling med et acyle-ringsmiddel til en forbindelse med den almene formel I, hvori R er den tilsvarende acylgruppe som angivet under formel I, 15 og/eller om ønsket omdanner den vundne forbindelse med den almene formel I til et fysiologisk acceptabelt syreadditionssalt eller et kvaternært salt.

Apovincin er som nævnt foran en kendt forbindelse. BE" patentskrift nr. 765.427 beskriver en halvsyntetisk metode til 20 fremstilling af apovincin ud fra (-)-11-metoxy-tabersonln.

Reduktionen af apovincin kan gennemføres i et organisk opløsningsmiddel, hensigtsmæssigt i en kulbrinte af benzenrækken, eller i tetrahydrofuran. Som reduktionsmiddel kan der fx anvendes komplekse metalhydrider, navnlig litiumaluminiumhy-25 drid eller natriumborhydrid eller også organiske aluminatar såsom natrium-dihydro-bis-(metoxyætoxy)»aluminat. Reduktionen gennemføres ved temperaturer mellem -10 og +50°C, hensigtsmæssigt ved stuetemperatur. Reduktionens forløb kan følges ved tyndlagskromatografi. Efter reduktionens afslutning sønderdeles 30 det uomsatte reduktionsmiddel med et dertil egnet middel, fx med ætylacetat i tilfælde af komplekse metalhydrider, og dét som reduktionsprodukt vundne ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16a- 141627 δ eburnamenin isoleres ved inddampning af reaktionsblandingen, opløsning af remanensen i en fortyndet syre og ekstraktion af opløsningen der er gjort alkalisk med et med vand ikke blandbart organisk opløsningsmiddel, hensigtsmæssigt med en kloreret 5 kulbrinte som fx med diklormetan, kloroform eller tetraklor-metan.

Det på denne måde isolerede ll-metoxy-14-acyloxymetyl-3a,16a-eburnamenin kan renses ved kromatografi, idet man hensigtsmæssigt anvender silikagel som adsorbent og en blanding 10 af benzen og 1-10% alkohol som opløsningsmiddel. Elueringen indledes med den samme opløsningsmiddelblanding, hvorved først det uomsatte apovincin fjernes. Det ønskede produkt kan derpå elueres med benzen indeholdende ca. 10-20% alkohol.

Til fremstiling af ll-metoxy-14-acyloxymetyl-3a,16a-15 eburnameniner, dvs. forbindelser med den almene formel I, hvor R er en acyloxygruppe, behandles det på den ovenfor beskrevne måde vundne ll-metoxy-14-hydroxy-3a,16a-eburnamenin med et til indføring af den ønskede acylgruppe egnet acyleringsmiddel. Til acyleringen indføres ll-metoxy-14-hydroxymetyl-20 3a,16a-eburnameninet fortrinsvis i form af den frie base. Man kan imidlertid også acylere syreadditionssaltene af denne forbindelse, men da opløselighedsforholdene for den frie base er gunstigere er det sædvanligvis fordelagtigere at anvende den frie base.

25 Acyleringen kan gennemføres ifølge de sædvanlige metoder, idet der som acyleringsmiddel kan anvendes de tilsvarende kar-bonsyrer, syrehalogenider, navnlig syreklorider eller syrean-hydrider. Acyleringen med karbonsyre gennemføres i et organisk opløsningsmiddel, fortrinsvis i en kloreret kulbrinte 30 fx i klormetan eller kloroform, hensigtsmæssigt i nærværelse af et syrebindende middel, navnlig af dicyklohexylkarbodiimid, ved temperaturer mellem ca. 0°C og 50°C. Anvendes der syrehalogenider, navnlig syreklorider, som acyleringsmiddel anvendes der fortrinsvis som opløsningsmiddel pyridin som samtidigt 35 også virker som syrebindende middel, men man kan også anvende andre organiske opløsningsmidler, fx klorerede kulbrinter såsom diklormetan eller kloroform i nærværelse af syrebindende midler, fx af alkalihydroxyder eller alkalikarbonater. Acyteringen med syrehalogenider gennemføres ved temperaturer mellem 40 ca. -30°C og reaktionsblandingens kogepunkt, navnlig 9 141627 mellem -20°C og 25°C. Syreanhydriderne anvendes ligeledes 1 nærværelse af organiske opløsningsmidler, navnlig af klorerede kulbrinter såsom diklormetan eller kloroform, idet man arbejder ved temperaturer mellem ca. 0°C og 50°C, hensigts-5 mæssigt ved stuetemperatur.

Det acylerede reaktionsprodukt kan evt. renses ved kromatografi. Som adsorbens anvendes silikagel eller aluminiumoxyd og som opløsningsmiddel anvendes navnlig benzen. Om ønsket kan man også anvende andre rensningsmetoder, fx omkrystallisation.

10 Såvel' apovincin der tjener som udgangsforbindelse ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen som de ved fremgangsmåden ifølge opfindelsen vundne hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I kan eksistere i racemiske eller i optisk aktive former. Som følge heraf omfatter den foreliggende opfindelse også frem-15 stillingen af optisk aktive forbindelser med den almene formel I, idet man enten opspalter dé i racemisk form vundne forbindelser med den almene formel I på i og for sig kendt måde i de optiske antipoder, eller allerede som udgangsmateriale anvender apovincin i optisk aktiv form. Hertil skal det bemærkes at i det sidstnævnte 20 tilfælde ændres forbindelsens polaritet på en karakteristisk måde ved reduktionen, idet der ved reduktion af (+)-apovincin dannes (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16c&~eburnamenin, hvorimod denne polaritet bliver uændret i de følgende skridt, altså ved acyle-ringen, saltdannelsen osv.

25 De hidtil ukendte forbindelser med den almene formel I

kan anvendes i terapien som frie baser eller i form af fysiologisk acceptable syreadditionssalte eller kvaternære salte.

Som eksempler på terapeutisk anvendelige salte kan nævnes salte dannet med ikke-toksiske uorganiske syrer såsom hydroklo-* 30 rider og hydrobromider, sulfater, navnlig sure sulfater, såsom natrium- eller kaliumhydrogensulfat, og endvidere syreadditionssalte med organiske syrer såsom tartrater, succinater, citrater og askorbater, samt kvaternære salte såsom metojodider og æto-j o di der ·.

35 Fremstillingen af disse salte kan foregå på i og for sig kendt måde. Syreadditionssaltene fremstilles fx på den måde at man til opløsningen af basen i et organisk opløsningsmiddel, hensigtsmæssigt direkte det ved kromatografisk rensning vundne eluat sætter en mættet syreopløsning i æter eller acetone. Til fremstil- 141627 ίο ling af sure syreadditionssalte fremstiller man fortrinsvis ud fra et tilsvarende krystallinsk surt salt, fx ud fra natrium-hydrogensulfat eller kaliumhydrogensulfat, under tilsætning af et inaktivt opløsningsmiddel (fx benzne) en kromatografisk 5 kolonne, og lader den i et inaktivt opløsningsmiddel, fx i benzen, opløste base løbe gennem denne kolonne, hvorved basen bindes .i kolonnen i form af det tilsvarende sure syreadditionssalt og kan elueres i denne form med et e'gnet opløsningsmiddel, fx med en kloreret kulbrinte.

10 De kvaternære salte kan fremstilles på sædvanliq måde ved omsætning af basen opløst i et organisk opløsningsmiddel fx i acetone, med et tilsvarende halogenid, fx med metyl-, ætyl-, isobutyl- eller benzyljodid.

De ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan ind-15 gå i almindelige lægemiddelpræparater. Præparaterne kan indeholde en eller flere af forbindelserne med den almene formel I eller salte deraf i racemisk eller optisk aktiv form.

Den daglige dosis af de ifølge opfindelsen fremstillede forbindelser kan ved oral, rektal eller parenteral indgift ud-20 gøre ca. 10 til ca. 50 mg, hensigtsmæssigt i flere deldoser i løbet af dagen.

Fremgangsmåden ifølge opfindelsen belyses nærmere i det følgende ved hjælp af nogle eksempler. De i eksemplerne angivne smeltepunkter måltes med et Boetius-apparat, den specifikke 25 drejningsværdi bestemtes med et Perken-Elmer 141 polarimeter og de infrarøde spektre bestemtes med et Perken-Elmer 257 spektrometer. De ved søjlekromatografi vundne eluatfraktioner identificeredes ved tyndlagskromatografi. Målingen af Rf-værdi-erne blev foretaget på silikagelplader med opløsningsmiddel-30 blandingerne ætylacetat/eddikesyre/pyridin/vand i forholdet 60:6:20:11 eller kloroform/ætylacetat/metanol i forholdet 8:2:1.

Eksempel 1 (-) -ll-Metoxy-M-hydroxymetyl-Sa, 16a-eburnamenin 35 9,34 g (0,024 mol) (+)-apovincin opløses i 50 ml benzen og til opløsningen sættes 10 ml 70%*s benzenopløsning af na-trium-dihydro-bis-(2-metoxyætoxy)-aluminat, hvilket svarer til 0,034 mol. Reaktionsblandingen omrøres i 2 timer. Reduktionens forløb følges ved tyndlagskromatografi. Det uomsatte reduktions- 141527 n middel nedbrydes ved tilsætning af 10 ml ætylaætat, hvorpå blandingen inddampes -under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen optages i 200 ml 2%s svovlsyre og blandingens pH-værdi indstilles på 8-9 med 10%s vandig natriumlydroxyd. Den vundne basiske vandige 5 opløsning ekstraheres med 4 x 2 00 ml metylenklorid. Ekstrakterne forenes, tørres over kalciumkarbonat og inddampes under nedsat tryk til tørhed.

Inddampningsremanensen opløses i 10-15 ml af en benzen/ ætanol-blanding i forholdet 98:2 og opløsningen oparbejdes med 10 søjlekromatografi under anvendelse af kiselgel (Merck) med en kornstørrelse på 0,05-0,02 mm som adsorbens.

Det uomsatte (+)-apovincin udvaskes af kolonnen med ben-zen/ætanol-blanding i forholdet 98:2 og derpå med en sådan blanding i forholdet 95:5. Derefter elueres det ved reaktionen blan-15 dede ( “ )-ll-metoxy-14~hydroxymetyl-3a,16»-eburnamenin med en blanding af benzen og ætanol i forholdet 8;2. Derved opsamles fraktioner på hver 150 ml. Disse identificeres ved tyndlagskroma-tografisk analyse (adsorbens:kiselgel, flydemiddel: kloroform/ ætylacetat/metanol i forholdet 8:2:l). De fraktioner der indeholder 20 (+)-apovincin (10.-13. fraktion) oparbejdes adskilt fra de fraktioner der indeholder (-) -metoxy-14-hydroxymetyl- 3α, 16a-eburna»enln (15.-26. fraktion). Begge fraktionsgrupper inddampes under nedsat tryk. Det på denne måde tilbagevundne (+)-apovincin kan anvendes påny. De vundne 6,28 g rå (-)-11-metoxy-14-hydroxymetyl-3α, 16oc-25 eburnamenin omkrystalliseres fra 20 ml cyklohexan. Derved vindes 6,08 g rent produkt med smeltepunkt 162-164°C. Dette svarer til et udbytte på 70,0%.

Rf: 0,4;ap° = -110,3° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: Vmax 3700, 3200 cm”1 (OH), 3100, 3000 cm-1 30 (CH aromatisk), 3000,,2800 cm”1 (CHg, CHg), 1650, 1612 cm”1 (C-C), 1570 cm”1 (C=C), 1300 cm”1 (β-0Η), 1025 cm"1 (C-0(H), 820 cm”1 (γ CH).

Beregnet for C21H26°2N2: C 74-S H 7-7 » 8,2 0 9,4

Fundet: C 74,5 H 7,4 N 8,1¾.

12

Eksempel 2 U1S27 (-)-ll-Metoxy-14-hydroxvmetyl-3a,l6a-eburnamenin 0,65 g (0,0017 mol) (+)-apovincin opløses i 20 ml peroxyd-frit tetrahydrofuran. Til opløsningen sættes ved 20-25°C 0,15 g 5 (0,0039 mol) litiumaluminiumhydrid suspenderet i tetrahydrofuran.

Reaktions blandingen omrøres i 2 timer. Reduktionens fremadskriden følges tyndtlagskromatografisk. Det uomsatte reduktionsmiddel sønderdeles ved tilsætning af 7 ml ætylacetat hvorpå reaktionsblandingen inddampes under nedsat tryk til tørhed. Inddampnings-10 remanensen optages i 100 ml 2%s svovlsyre og blandingens pH-værdi indstilles på 8-9 med 10%s vandigt natriumhydroxyd. Den vundne vandigt-alkaliske blanding ékstraheres med 4 x 50 ml kloroform. Ekstrakterne forenes, tørres over kalciumbar bonat og inddampes under nedsat tryk til tørhed. Remanensen oparbejdes på den i 15 eksempel 1 beskrevne måde ved søjlekromatografi. Der vindes 0,36 g (60%) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,Ιβα-eburnamenin. De fysiske data for produktet stemmer overens med de tilsvarende værdier for det i eksempel 1 vundne produkt.

Eksempel 3 20 Syreadditionssalte og kvaternære salte af (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a, I6a-eburnamenin a) (-)-ii-metoxy-14-hydroxymetyl-3cc, 16 a-eburnamenin-natriumhydrogensulfat.

1 g (-}-ii-metoxy-14-hydroxymetyl-3«,Ιβα-eburnamenin opløses 25 i 20 ml benzen. Til en kromatografisk kolonne, der er gennemvædet med en opløsning af 50 g natriumhydrogensulfat i 0,5 ml vand og 50-100 ml benzen, overføres den ovenfor fremstillede benzen opløsning. Det dannede sure salt af (-)-ll-metoxy-l4-hydroxymetyl-3a,16a-eburnamenin elueres fra kolonnen med 1400 ml kloroform.

30 Eluatet inddampes til tørhed under nedsat tryk og inddampnings-remanensen afkrystalliseres fra ætylæter. Der vindes 1,2 g (88,2%) 141627 13 ( - )-11-metoxy-l4-hydroxymetyl-3α,16 a-eburnamenin-natriumhydro gen-sulfat med smeltepunkt 100-105°C. a^°=: -41,8° (c=l, pyridin).

b) (-)-Metoxy-l4-hydroxymetyl-3a,16a-eburnamenin~citrat

Til 0,2 g (-)-11-metoxy-l4-hydroxymetyl-3α,16a-eburnamenin 5 sættes under stadig omrøring ætylæter mættet med citronsyre indtil der opnås en pH-værdi på 4. Den allerede krystalliserende opløsning henstår ved 0-2°C i 8 timer. Derpå frafiltreres det krystallinske produkt som vaskes med 7-8 ml diætylæter hvorpå flet tørres. Der vindes 0,18 g (57,0$) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,l6æ-10 eburnamenin-citrat med smeltepunkt 109-114°C. a^° = -79,3° (c=l, pyridin).

c) (-)-11-Metoxy-l4-hydroxymetyl-3a,16a-eburnamenin-succinat.

Ravsyresaltet fremstilles på samme arbejdsmåde som beskre-15 vet i eksempel 3-b. Der vindes et 58$s udbytte. (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16o-eburnamenin-succinat smelter ved 85-90°C. a^° = -90,4° (c=l, pyridin).

d) (-)-ll-Metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16o-eburnamenin-metojodid.

20 0,2 g (0,59 mmol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16a- eburnamenin opløses i 10 ml acetone og til opløsningen sættes der 0,2 g (0,014 mol) metyljodid. Opløsningen henstår ved stuetemperatur i 12-24 timer. Dannelsen af det kvaternære salt følges ved tyndlagskromatografi (adsorberende lag: kiselgel, flydemiddel: 25 kloroform/ætylacetat/metanol i forholdet 8:2:i). Efter reaktionens afslutning inddampes blandingen under nedsat tryk til tørhed og inddampningsremanensen optages i 5 ml dimetylæter. Opløsningen henstår ved 0 til +2°C i 12 timer. Derpå frafiltreres det krystallinske bundfald som vaskes med 3-4 ml kold diætylæter og 30 derefter tørres. Udbytte: 0,23 g (82,0$) (-)-ll-metoxy-14-hydroxy-metyl- 3α, 16 ar-eburnamenin-meto jodid.

Rf = 0,0.

α p° = -92,9° (c=l, pyridin).

Beregnet for C22H2902N2J: C 55,0 H 6,0 N 5,8 0 6,6 J 26,5 35 Fundet: C 55,1 H 6,0 N 5,7 0 “ J26,5?f 14 141627 e) (- )-ll-Metoxy-14-hydroxymetyl- 3α, 16a-eburnamenin-tartrat. 0,2 g (0,59 mmol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16a-eburnamenin tilsættes diætylæter mættet med vinsyre indtil pH-værdien er ca.

4. Blandingen oparbejdes på den i eksempel 3-b beskrevne måde.

5 Der vindes 0,22 g (76%) (-)-ll-metoxy-14~hydroxymetyl-3a,l6a-eburnamenin-tartrat med smeltepunkt 143-148°C.

= -96,1° (c=l, pyridin).

Eksempel 4 (-)-ll—Metoxy-14-benzoyloxymetyl-3a,16a-eburnamenin-tartrat 10 1 g (0,0029 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16a- eburnamenin opløses i 5 ml pyridin. Til opløsningen sættes der ved stuetemperatur 0,5 g (0,0035 mol) benzoylklorid. Reaktionsblandingen omrøres i 30 min og henstilles derpå ved 20-25°C i 6 timer på et mørkt sted. Derefter tilsættes der 50 ml vand hvor-15 efter pH-værdien indstilles til 8-9 med 10%s vandigt natriumhydroxyd Den alkaliske reaktionsblanding ekstraheres med 3 x 30 ml metylenklorid. De organiske faser der indeholder reaktionsproduktet forenes og tørres over kalciumkarbonat hvorpå de inddampes under nedsat tryk til tørhed.

20 Inddampningsremanensen opløses i 5-10 ml benzen. Benzen opløsningen oparbejdes ved søjlekromatografi (adsorbens: aluminiumoxyd med aktivitet III, elueringsvæske: benzen). Der opsamles fraktioner på hver 20 ml. De fraktioner der indeholder (-)—limet oxy-1 4- benzoyl- oxyme tyl- 3a, I6a-eburnamenin-basen (4.-10. frak-25 tion) identificeres ved hjælp af tyndlagskormato gr afisk analyse (adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel: ætylacetat/iseddike/ _ pyridin/vand i forholdet 60:6:20:11). De fraktioner der indeholder (-)-H-metoxy-l4-benzoyloxymetyl-3a,l6a-eburnameninet forenes og inddampes under nedat tryk til tørhed. Som inddampningsremanens 30 vindes 0,78 g (-)-ll-metoxy-14-benzoy1oxymety1-3 α, 16α-eburnamenin. Til produktet sættes ætylæter mættet med vinsyre indtil pH-værdien er 4. Den krystalliserende blanding henstår ved 0 til +5°C i 12 timer. Derpå frafiltreres produktet som vaskes med 8 ml ætylæter og til sidst tørres. Der vindes 0,85 g (48%) (-)-ll-metoxy-35 14-benz oy loxymetyl-3α, 1 β α-ebur namenin-1 art rat som smelter ved 98- 105°C. Ef = 0,77; a^° = -69,2° (c=l, pyridin).

141627 15

Infrarødt spektrum: 3000, 2800 cm”1 (γθΗ2, CH^), 1720 cm 1 ( \>C0 ester) 1620 cm-1 (V C=C), 1280 cm""1 ( V COC ester), 818, 775 cm"1 ( yCH).

Beregnet for: C32H36°9N2: C 64,8 H 6,1 N 4,7 0 24,3 5 Fundet: C 64,7 H 6,2 N 4,7 0 —

Eksempel 5 (-)-ll-Metoxy-14-( 3 '-trifluormetylbenzoylj-oxvmetyl-Stt, 16o&-eburnamenin-tartrat 1 g (0,0029 mol) (-)-ll-metoxy-14~hydroxymetyl-3a,16a-10 eburnamenin opløses i 20 ml metylenklorid. Til opløsningen sættes natriumkarbonat i en mængde der er ækvivalent med den ved esterdannelsen fremkomne syre. Derefter tilsættes der ved 20-25°C 0,64 g (0,033 mol) m-trifluormetylbenzoesyreklorid. Reaktionsblandingen omrøres ved 20-25°C i 2 timer hvorpå der tilsættes 15 20 ml vand og pH-værdien indstilles på 8-9 med vandigt natrium- hydroxyd. Efter 10 minutters omrøring fyldes blandingen i en skilletragt. Derpå skilles faserne fra hinanden, metylenklorid-fasen sættes foreløbig til side og den vandige fase ekstraheres med yderligere 10 ml metylenklorid. Ekstrakten forenes med metylen-20 kloridfasen og denne opløsning oparbejdes på den i eksempel 4 beskrevne måde med den undtagelse at eluatet opsamles i fraktioner på hver 50 ml. Basen er indeholdt i fraktionerne 1-3. Der vindes 1,62 g (82,2%) (-)-ll-metoxy-14-(3'-trifluormetylbenzoyl)-oxometyl-3a,l6a-eburnamenin-tartrat som smelter ved 104-106°C.

25 Rf = 0,66. = -59,8° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 300 cm"1 (Ό CH aromatisk), 300, 2800 cm"1 (VCH2, ch3), 1729 cm"1 (VCO ester), 1615 cm"1 (y?C=C), 1338 cm"1 (VC-F), 1250 cm"1 (Vcoc), 1135 cm1" (%?C-F), 815, 760, 700 cm"1 ( γ CH).

30 Beregnet for C33H35N2F3°g* C 60,0 H 5,3 N 4,2 0 21,8 F 8,6

Fundet: C 60,o H 5,2 N 4,4$

Eksempel 6 141627 16 (-)-11-Met oxy-14- (4 ’ -klorbenz oyl) -oxymetyl- 3 a ,160c- eburnamenin-tartrat

Som udgangsforbindelser anvendes (-)-ll-metoxy-14-hydroxy-5 metyl-3ar, I6a>-eburnamenin og p-klorbenzoesyreklorid. Arbejdsmåden svarer til den der er beskrevet i eksempel 5. Basen indeholdes i eluatfraktionen 1-8. Der vindes 1,48 g (80,0¾) (-)-ll~metoxy-14-(4 '-kl or benzoyl )-oxymetyl-3a, 16<r-eburnamenin-tartrat som smelter ved 105-il0°C. R£ = 0,67 (adsorptionsmiddel: kiselgel, flydemiddel: 10 en blanding af kloroform/ætylacetat/metanol i forholdet 8:2:1). a^° = -62,3° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 aif*1 (V CH aromatisk), 3000, 2800 cm"1 (\}CH2, CH3), 1720 cm"1 (^00),1615 cmT1 (V C=C), 1270 cm"1 (VCOC), 1018 cm'*1 (\)c-Cl), 850, 812, 760 cm"1 ( yCH).

15 Beregnet for C^É^N^Cl: C 61,2 H 5,5 F 4,4 023,0 Cl 5,6

Fundet:' C 61,2 H 5,6 N 4,4 - Cl 5,4¾ ·. Eksempel 7 (-)-ll-Metoxy-14-akryloyloxymetyl-3<x,16<t-eburnamenin-tartrat 20 Som udgangsforbindelser anvendes (-)-ll-metoxy-14— hydroxymetyl-3a,16Q5-eburnamenin og akrylsyreklorid. Man går frem på den i eksempel 4 beskrevne måde. Basen indeholdes i eluat-fraktionerne 2-7. Der vindes 1,11 g (68,8¾)(-)-ll-metoxy-l4-akry-loyloxymetyl-3a,16æ-eburnamenin-tartrat som smelter ved 85-90°C.

25 Bf = 0,74 (adsorptionslag: kisel gel, flydemiddel: en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2:l).

a^° = -65,0° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm-1 (9 CH aromatisk), 3000, 2800 cm"1 (VCH2 CH3), 1725 cm"1 ( \>C0 ester), 1615 cm"1 (Vc=C), 1220 30 cm"1 ( COC) , 810 cm"1 (γ CH) .

Beregnet for C^H^N^O^: C 61,9 H 6,2 N 5,1 0 26,6

Fundet: C 62,0 H 6,3 N 5,0¾

Eksempel 8 141627 17 (-)-11-Met oxy-14-(41-ni trobenzoyl)-oxymetyl-3«,l6a-eburnamenin-tartrat

Som udgangsforbindelser anvendes (-)-11-metoxy-l4-hydroxy-5 metyl-3a,16a~eburnamenin og p-nitrobenzoesyreklorid. Arbejdsmåden svarer til den der er beskrevet i eksempel 4. Basen indeholdes i eluatfraktionerne 1-6. Der vindes 0f47 g (50/6) (-)-ll-metoxy-14-(4'-nitrobenzoyl)-oxymetyl-3α,16a-eburnamenin-tartrat som smelter ved 119-124°C. Rf = 0,67 (adsorptionsmiddel: kiselgel, flydemiddel: 10 en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2:1).

= -60,2° (c=l, pyridin)

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm”1 (Υ^ΟΗ aromatisk), 3000, 2800 cm”1 (ψ0Η2, CH3), 1730 cm”1 (V CO ester), 1530 cm"1 (Vas N02), 1350 cm-1 (^s N02), 1270 cm”1 ( y’cOC ester), 721, 681 cm”1 15 (YCH).

Beregnet for C^H^l^O^: C 60,3 H 5,4 N 6,6 0 27,6

Fundet: C 60,3 H 5,3 N 6,6%

Eksempel 9 (-)-ll-Metoxy-14-lauroyloxymetyl-3oc,l6a-eburnamenin-tartrat 20 Som udgangsforbindelser anvendes (-)-ll-metoxy-14-hydroxy- metyl-3a,16a-eburnamenin og laurinsyreklorid og man går frem på den i eksempel 4 beskrevne måde. Basen indeholden i eluatfraktionerne 1 og 2. Der vindes 0,99 g (52,5%) (-)-ll-metoxy-14-lauryloxy-metyl-3a,16æ-eburnamenin-tartrat med smeltepunkt 8l-85°c, Rf = 0,79 25 (adsorptionsmiddel: kiselgel, flydemiddel: en blanding af ætylacetat, iseddike, pyridin og vand i forholdet 60:6:20:11).

a^° = -54,8° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3000, 28000 cm 1 (VCH2, CHg), 1740 cm (yCH

( y>cO ester), 1615 cm”1 (V C=C), 1220 cm”1 (V COC ester), 812 cm”1/.

30 Beregnet for ^28^34^2^9" C 62,0 H 6,2 N 5,1 026,6

Fundet: C 62,2 H 6,6 N 5,1%

Eksempel 10 141627 18 (- )-ll-Metoxy-14-oktanoyloxymetyl-3g, 16a-eburnamenin-tartrat 1 g (0,0029 mol) (-)-11-metoxy-14-hydr oxymetyl- 3 a,16 a-eburnamenin opløses i 10 ml pyridin. Til opløsningen sættes ved 5 20-25°C 0,7 (0,004 mol) kaprylsyreklorid. Blandingen omrøres i 2 timer og derefter tilsættes der først 50 ml 2%s vandigt natrium-hydroxyd og derpå 50 ml kloroform. Derved går den ved reaktionen dannede ester over i kloroformfasen. Den vandige fase ekstraheres med yderligere 25 ml kloroform. Kloroformfaserne forenes, tørres 10 over kaliumkarbonat og inddampes derefter under nedsat tryk til tørhed, inddampningsremanensen oparbejdes på den i eksempel 4 beskrevne måde. Det fastslås kromatografisk at den fremkomne kaprylsyreesterbase er indeholdt i eluatfraktionerne 1-3. Der vindes 1,06 g (58,0%) (-)-ll-metoxy-14-oktanoyloxymetyl-3a,16a:-15 eburnamenin-tartrat som smelter ved 65-67°C. Rf = 0,80 (absorptionslag: kiselgel, flydemiddel: en blanding af kloroform, ætyl-acetat og metanol i forholdet 8:2:l). dp0 = -56,3° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum = 3100, 3000 cm-1 (VcH aromatisk), 3000 20 2800 cm”1 (yCH2, CH3), 1740 cm"1 (\> CO ester), 1613 (^0=0), 1220 cm"1 (9C0C), 810 cm"1 (γ CH).

Beregnet for C33H46N203: C 64,5 H 7,5 N 4,5 0 23,4

Fundet: C 64,4 H 7,5 N 4,4%

Eksempel 11 25 (-)-ll-Metoxy-14-(21-klorbenzoyl)-oxymetyl-3«,16a-eburnamenin- tartrat

Der anvendes samme udgangsforbindelser (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3æ,l6a-eburnamenin og 2-klorbenzoesyreklorid og man går frem på den i eksempel 10 beskrevne måde. Basen indeholdes 30 i eluatfraktionerne 1-6. Der vindes 1,16 g (62,2%) (-)-ll-metoxy- 14-(2'-klorbenzoyl)-oxymetyl-3a,Ιβα-eburnamenin-tartrat som smelter ved 98-103°C. Rf = 0,81 (adsorbenslag: kiselgel, flyde-middel: blanding af ætylacetat, iseddike , pyridin og vand i forholdet 60:6:20:11).

35 oCp° = -47,6° (c=l, pyridin).

1ft U1627 19

Infrarødt spektrum: 3100, 300 cm"1 (^CH aromatisk), 3000, 2800 cm"1 ( V^CH2, CH3), 1732 cm"1 (Vco ester), 1612 cm"1 (\?C=C), 1250 cm"1 ( COC), 1050 cm 1 (9 C-Cl), 812, 750, 610 cm"1 (γ CH).

Beregnet for C32H35N2OgCl: C 61,2 H 5,5 N 4,4 0 23,0 Cl 5,6 5 Fundet: C 61,1 H 5,4 N 4,5 - Cl 5,7*

Eksempel 12 (-) -11-Me t oxy-14-pr opi onyloxyme t vi- 3a. 16 (&- eburnamenin-tar tr a t

Der anvendes som udgangsforbindelser (-)-il-metoxy-14-hydroxymetyl-3a, 16c&-eburnamenin og propionsyreklorid og man går 10 frem på den i eksempel 10 beskrevne måde med den undtagelse at ekstraktionen først foretages med 30 ml og derefter med 15 ml kloroform. Basen indeholdes i eluatfraktionerne 1-7. Der vindes 1,1 g (69,0%) (-)-11-metoxy-14-propionyloxymetyl-3oc, 16α-eburnamenin-tartrat som smelter ved 79-84°C. Rf = 0,74 (adsorbenslag: kiselgel, 15 flydemiddel: en blanding af ætylacetat, iseddike, pyridin og vand i forholdet 60:6:20:11).

Infrarødt spektrum: 3100, 2800 cm"1 ( \?CH aromatisk, CHg, CHg),

1740 cm"1 (\)C0 ester), 1612 cm"1 (-^ C=C), 1218 cm"1 (J _ COC

Ί 3.S

ester), 810, 760 cm 1 (γ CH).

20 Beregnet for C28H36N20g: C 61,8 H 6,6 N 6,1 026,5

Fundet: C 61,7 H 6,6 N 5,0*.

Eksempel 13 C-)-ll-Metoxy-14-(3' ,4*, 5f--trimetoxybenzoyl)-oxymetyl-3cctl6a-eburnamenin-tartrat 25 1 g (0,0029 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,l6a- eburnamenin opløses i 15 ml pyridin og til opløsningen sættes der 0,72 g (0,003 mol) 3,4,5-trimetoxybenzoylklorid. Reaktionsblandingen henstår ved 20-25°C i mørke i 16 timer hvorefter der tilsættes 40 ml kloroform. Den kloroformholdige reaktionsblan-30 ding udrystes tre gange med 40 ml 2*s vandig natriumhydroxyd hver gang. Kloroformfasen, der indeholder esteren, skilles fra, tørres over kalciumkarbonat og inddampes derpå under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen oparbejdes kromatografisk 141627 20 på den i eksempel 4 beskrevne måde. Basen er indeholdt i eluat-fraktionerne 2-9. Der vindes 0,34 g (17/0 (-)-ll-metoxy-14-(3',4', 5 '-trimetoxybenzoyl )-oxymetyl-3a:, 16a—eburnamenin-tartrat som smelter ved 103-107°C Ef = 0,7 (adsorbenslag: kiselgel, 5 . flydemiddel: en blanding af ætylacetat, iseddike, pyridin og vand i forholdet 60:6:-20:11). ctp0 = -44,3° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm (v)ch), 3000, 2800 cm"1 (\)CH2, CH3) 1720 cm-1 (\>C0 ester), 1650 cm"1 ( V C=C), 1215 cm"1 10 Was C0C ester) 68l> 765 c®”1 (r CH).

Eksempel 14 (-)-ll-Metoxy-14~fenylacetyloxymetyl-3a:,l6a-eburnamenin-tartrat 1 g (0,0029 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3cc,l6a-eburnamenin opløses i 35 ml ætanolfri kloroform. Til opløsningen 15 sættes ved 20-25°C 0,8 g (0,005 mol) fenyleddikesyreklorid. Eeak-tionsblandingen afkøles til -14°C og omrøres ved denne temperatur i en time. Derefter sættes der ved 20-25°C 30 ml 20%s vandig natriumhydroxyd til blandingen og der omrøres i 10 min. Faserne skilles fra hinanden og den vandige fase ekstraheres med yderligere 20 20 ml kloroform. Kloroformfaserne, der indeholder esteren, forenes, tørres over kalciumkarbonat og inddampes under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen oparbejdes på den i eksempel 5 beskrevne måde. Basen indeholdes i eluatfraktionerne 1-5. Der ' vindes 1,43 g (79,8%) (-)-ll-metoxy-14-fenylacetyloxymetyl-3a,-25 I6a-eburnamenin-tartrat som smelter ved 87-90°C. Ef = 0,65 adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel: En blanding af ætylacetat, pyridin, iseddike og vand i forholdet 60:20:6:ll)„ (¾0 = -49,6° (c=l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm”1 (VCH aromatisk), 3000, 30 2800 cm"1 \?CH2, CH3), 1740 cm-1 (V CO ester) 1615 cm-1 (Vc=C).

1220 cm"1 ( Vas COC ester) 725, 700, 680 cm-1 (γ CH).

Beregnet for C33H3g0 »2: C 65,2 H 6,2 N 4,6 0 23,8

Fundet: C 65,1 H 6,2 N 4,7%

Eksempel 15 21 U1627 (-)-ll-Metoxy-14-fenylacetyloxymetyl-3a:,l6a-eburnamenin-tartrat 0,2 g (0,00059 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,16æ-eburnamenin, 0,092 g fenyleddikesyre og 0,14 g Ν,Ν'-dicyklohexyl-5 karbodiimid opløses ved 20-25°C i 3,5 ml ætanolfri kloroform.

Reaktionsblandingen henstår ved stuetemperatur i mørke i 12 timer. Derpå frafiltreres det udfældede Ν,Ν'-dicyklohexylkarbamid og filtratet inddampes til tørhed under nedsat tryk. Inddampningsrema-nensen optages i 3 ml metylklorid og opløsningen henstår ved 10 0-5°C i 5-6 timer. Derved udskilles resten af Ν,Ν’-dicyklohexyl- karbamatet kvantitativt, og det frafiltreres og filtratet inddampes under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen opløses i 3-4 ml benzen og den oparbejdes kromatografisk med aluminium-oxyd-adsorbens med aktivitet III. Der elueres med benzen. Eluat-15 fraktionerne identificeres for hver 10 ml ved tyndlagskromatografi (adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel: en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2:l). Basen indeholdes i fraktionerne 2-4. Der vindes 0,14 g (50,0$) af den frie base som på den i eksempel 4 beskrevne måde omdannes til et vinsyresalt.

20 udbytte: 0,18 g (50,0$) (-)-ll-metoxy-14-fenylacetyloxymetyl-3a,l6a-eburnamenin-tartrat. De fysiske konstanter for produktet er de samme som for det ifølge eksempel 14 vundne produkt.

Eksempel 16 (-)-ll-Metoxy-14-acetyloxymetyl-3«,16g-eb'urnamenin-tartrat 25 1 g (0,0029 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3a,l6a- eburnamenin opløses i 7 ml pyridin. Til opløsningen sættes der dråbevis ved 20-25°C 0,45 g (0,0057 mol) acetylklorid. Reaktionsblandingen omrøres i en time hvorpå pH-værdien indstilles til 9 med 10$s vandig natriumhydroxyd og den dannede forbindelse ekstra-30 reres med 3 x 30 ml kloroform fra den alkaliske reaktionsblanding. De forenede’ ekstrakter tørres over kalciumkarbonat og inddampes derpå under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen oparbejdes ved søjlekromatografi på den i eksempel 4 beskrevne måde med den undtagelse at eluatet opsamles i fraktioner på hver 40 ml.

141627 22

Basen indeholdes i de første fem fraktioner. udbytte: 0,7 g (63,0%) (-)-11-met oxy-14—acetyl oxymetyl- 3cc, 16oc-ebur namenin med smeltepunkt 96-102°C. Ef = 0,55 (adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel: en blanding af ætylacetat, iseddikesyre, pyri din og vand i forholdet 5 60:6:20:11). a£° = -53,0° (c=-l, pyridin).

^ f—Ί —X

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm" (CH aromatisk), 3000, 2800 cm ( Vch2* CH3), 1740 cm"1 ( \J CO ester), 1620 cm”1 (\)C=sC), 1240 cm”1 (V?asym. coc838» 779 cm"1 (γ CH).

Beregnet for. C27H34N20g: C 61,1 H 6,4 I 5,3 0 27,2 10 Fundet: C 61,0 H 6,3 N 5,4$

Eksempel 17 (-)-ll-Metoxy-14-acetyloxymetyl-3a,l6oc-eburnamenin-tartrat

Til en opløsning af 0,2 g (0,00059 mol) (-)-ll-metoxy-14-hydroxymetyl-3oc, l6a-eburnamenin i 5 ml metylenklorid sættes 15 dråbevis ved 20-25°C under omrøring 0,1 ml eddikesyreanhydrid. Reaktionsblandingen omrøres i en time. Derefter tilsættes der 10 ml 2$s vandigt natriumhydroxyd. Blandingen omrøres i yderligere 5 minutter og derpå skilles faserne i en skilletragt. Den vandige fase ekstraheres med yderligere 5 ml metylenklorid. Metylenklo-20 ridfaserne forenes og inddampes under nedsat tryk til tørhed. Inddampningsremanensen optages i 2-4 ml benzen og opløsningen kromatograferes ved hjælp af kiselgel med aktiviteten III. Der elueres med benzen og man opsamler eluatfraktioner for hver 10 ml. Fraktionerne identificeres tyndlagskromatografisk idet der som 25 adsorbenslag anvendes kiselgel og som flydemiddel anvendes en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2:1. Fraktionerne 1-4 inddampes til tørhed og på denne måde vindes 0,21 g (93/0 (-)-11-metoxy-14-acetyloxymetyl-4ce, 16a-eburnamenin som. på den i eksempel 4 beskrevne måde omdannes til et tartrat.

30 Der vindes 0,20 g (90,o%) (-)-ll-metoxy-14-acetyloxymetyl-3a,l6oc-eburnamenin-tartrat. De fysiske konstanter for produktet stemmer overens med konstanterne for det i eksempel 16 fremstillede pro— .- dukt.

Eksempel 18 141627 23 (^-ll-Metoxy-l^CS', 5 ,-dinitrobenzoyl)-oxymetyl-3oc,16ai--eburna-menin og dets syreadditionssalte 2 g (0,0059 mol) (-)-ll-metoxy-14~hydroxymetyl-3a,16a-5 eburnamenin opløses i 16 ml alkoholfri kloroform. Til opløsningen sættes der natriumkarbonat i en mængde der er ækvivalent med den ved esterdannelsen udviklede syre. Derpå sættes der til reaktionsblandingen ved 20-25°C 1,4 g (0,0061 mol) 3,5-dinitrobenzoe-syreklorid. Efter en times omrøring sættes der 15 ml 2%s vandigt 10 natriumhydroxyd til og der omrøres i yderligere 5 minutter.

Derpå fraskilles kloroformfasen i en skilletragt. Den vandige fase ekstraheres med yderligere 15 ml kloroform og ekstrakten forenes med den tidligere vundne kloroformfase. Opløsningen tørres over kaliumkarbonat og inddampes derefter under nedsat tryk 15 til tørhed. Inddampningsremanensen opløses i en 10-15 ml blanding af benzen og ætanol i forholdet 98:2 og oparbejdes søjlekromatografisk (adsorbens: kiselgel Merck med partikelstørrelsen 0,05-0,2 mm, elueringsmiddel: en blanding af benzen og ætanol i forholdet 98:2). Ved kromatograferingen opsamles der eluatfraktioner 20 på hver 40 ml. Disse fraktioner identificeres tyndtlagkromatografisk (adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel, en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2;l). Produktet er indeholdt i eluatfraktioner 3-7. Disse fraktioner inddampes under nedsat tryk til tørhed. Det vundne 1,39 g råprodukt omkrystalli-25 seres fra 10 ml cyklohexan idet man lader den krystalliserende blanding stå ved 0-5°C i 12 timer hvorefter krystallerne fra-filtreres, vaskes med 10-15 ml cyklohexan og endelig tørres.

Der vindes 1,23 g (39,0%) (-J-ll-metoxy-l^-CS’^’-ditrobenzoyl)-oxymetyl-3a,l6a-eburnamenin som smelter ved 160-162°C. Rf = 0,59. 30 =3 -90,8° (c=-l, pyridin).

Infrarødt spektrum: 3100, 3000 cm-'1' (>) CH aromatisk), 3000, 2800 cm-1 ( VCH2, CH3), 1721 cm-1 (^ 0=0), 1545 cm”1 (^- NQg), 1347 cm"1 (>j NO«), 1275 cm-1 (V_„ C0C), 1165 cm-1 (ν’ C0C), 807, 732, 721 cm”1 (7 CH).

35 Beregnet for C^HggN^: C 63,1 H 5,2 N 10,5 0 21,1

Pundet: C 63,2 H 5,3 N 10,4%.

24 T41627 0,2 g (-)-ll-metoxy-14—(3',5'-dinitr obenzoyl)-oxymetyl-3α,16α-eburnamenin opløses i acetone. Opløsningens pH-værdi indstilles på 4 med en 90%s askorbinsyreopløsning i acetone. Det udskilte askorbinsyresalt frafiltreres, vaskes med acetone og 5 tørres derefter. Der vindes 0,15 g (56,0%) (-)-ll-metoxy-14-(3',51-dinitrobenzoyl)-oxymetyl-3a,16 a-eburnamenin-askorbinat som smelter ved 153-157°C. a^° = -41,0° (c=l, pyridin).

Ud fra 0,2 g (-)-ll-metoxy-14-(3',5'-dinitrobenzoyl)-10 oxymetyl-3a,16α-eburnamenin fremstilles hydrokloridet på den beskrevne måde. Udbytte: 0,19 g (89%) (-^ll-metoxy-l^-iS'^'-dinitrobenzoyl)-oxymetyl-3α,16a-eburnamenin-hydroklorid. Smeltepunkt 190-196°C. α^ = -104,2° (c=l, pyridin).

i

Eksempel 19 15 (-)-ll-Metoxy-14-(31,5 *-dinitrobenzoyl )-oxymetyl-3a,I6a-eburna- menin-met o.j odi d 0,15 g (0,00028 mol) (-)-ll-metoxy-14-(3',5’^-dinitrobenzoyl )-oxymetyl-3α, 16a-eburnamenin opløses i 6 ml acetone og der sættes 0,1 g (0,0007 mol) metyljodid til opløsningen.. Opløsningen 20 henstår ved 20-25°C i 6 timer imens saltdannelsens fremadskriden følges ved tyndlagskromatografi. Efter reaktionens afslutning henstår blandingen ved 0-2°C i 12 timer hvorefter det krystallinske stof frafiltreres, vaskes med 3-4 ml afkølet acetone hvorefter der tørres. Der vindes 0,17 g (89%) (-)-ll-metoxy-14-25 (3*,5,-dinitrobenzoyl)-oxymetyl-3a,l6a-eburnamenin-metojodid.

Rf = 0,0 (adsorbenslag: kiselgel, flydemiddel: en blanding af kloroform, ætylacetat og metanol i forholdet 8:2:l).

α^° = -94,0° (c=l, pyridin).

Beregnet for C29H: 30 C 51,6 H 4,6 N8,3 0 16,6 J18,8

Pundet: C 51»6 H 4,6 N 8,3 J 18,8%