DE4337600A1 - N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen - Google Patents
N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische ZusammesetzungenInfo
- Publication number
- DE4337600A1 DE4337600A1 DE4337600A DE4337600A DE4337600A1 DE 4337600 A1 DE4337600 A1 DE 4337600A1 DE 4337600 A DE4337600 A DE 4337600A DE 4337600 A DE4337600 A DE 4337600A DE 4337600 A1 DE4337600 A1 DE 4337600A1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- general formula
- group
- compounds
- optionally
- amino
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Withdrawn
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D457/00—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid
- C07D457/04—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached in position 8
- C07D457/06—Lysergic acid amides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K51/00—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo
- A61K51/02—Preparations containing radioactive substances for use in therapy or testing in vivo characterised by the carrier, i.e. characterised by the agent or material covalently linked or complexing the radioactive nucleus
- A61K51/04—Organic compounds
- A61K51/08—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins
- A61K51/088—Peptides, e.g. proteins, carriers being peptides, polyamino acids, proteins conjugates with carriers being peptides, polyamino acids or proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C327/00—Thiocarboxylic acids
- C07C327/20—Esters of monothiocarboxylic acids
- C07C327/26—Esters of monothiocarboxylic acids having carbon atoms of esterified thiocarboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D457/00—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid
- C07D457/10—Heterocyclic compounds containing indolo [4, 3-f, g] quinoline ring systems, e.g. derivatives of ergoline, of the formula:, e.g. lysergic acid with hetero atoms directly attached in position 8
- C07D457/12—Nitrogen atoms
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J41/00—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring
- C07J41/0033—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005
- C07J41/0072—Normal steroids containing one or more nitrogen atoms not belonging to a hetero ring not covered by C07J41/0005 the A ring of the steroid being aromatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07J—STEROIDS
- C07J51/00—Normal steroids with unmodified cyclopenta(a)hydrophenanthrene skeleton not provided for in groups C07J1/00 - C07J43/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/575—Hormones
- C07K14/57536—Endothelin, vasoactive intestinal contractor [VIC]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0802—Tripeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/0804—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
- C07K5/0806—Tripeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atoms, i.e. Gly, Ala
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/08—Tripeptides
- C07K5/0827—Tripeptides containing heteroatoms different from O, S, or N
Description
Die Erfindung betrifft N-Alkyl-Peptid-Chelatbildner,
deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu
deren Herstellung und diese Verbindungen enthaltende
radiopharmazeutische Zusammensetzungen.
Die Erfindung betrifft ferner Radiopharmazeutika, welche
diese Chelate in mit Metallen komplexierter Form enthal
ten, deren diagnostische Kits, in denen das Chelat in
nicht komplexierter Form vorliegen kann und entweder
durch Zusatz von Technetium- oder Rhenium-Ionen komple
xiert wird und auch über die Anwendung solcher Präparate
für diagnostische und therapeutische Zwecke.
Radioaktiv markierte Substanzen werden vor allem in der
medizinischen Diagnostik angewandt, um Verformungen und
Funktionsänderungen innerer Organe oder Änderungen patho
logischer Prozesse im Körper festzustellen. Für diese
Anwendung wird dem Patienten eine Formulierung verab
reicht, z. B. in Form einer Injektionslösung, welche die
radioaktive Substanz enthält. Mit geeigneten Detektoren
(z. B. einer Gamma-Kamera) können durch Aufzeichnen der
emittierten Strahlung Bilder von Organen, pathologischen
Prozessen und deren Veränderungen im Körper erhalten
werden; bei besonders hohen Anreicherungen in Organen
oder Gefäßen dienen sie als Therapeutika.
In den vergangenen Jahren wuchs das Verlangen nach spezi
fischen, radioaktiv markierten, chemischen Verbindungen,
die an sogenannte Trägermoleküle (z. B. Steroide, Antikör
per, Lipide, Proteohormone etc.) gekoppelt werden können
und nach dem Prinzip des "Drug Targeting" wirken. Von
besonderem Interesse für die Tumordiagnose und Therapie
sowie zur Rezeptordarstellung (z. B. Steroidkonjugate,
Antikörper, etc.), sind solche Substanzen, die befähigt
sind, die Zellwand und die Blut-Hirn-Schranke zu passie
ren sowie Substanzen zur Überprüfung von Organfunktionen,
z. B. vor und nach erfolgten Transplantationen und zum
Auffinden von Gefäßläsionen. Mit dem Ziel, eine höhere
Selektivität des Radiopharmazeutikums und eine damit
verbundene signifikante Anreicherung eines Radionuklids
im Zielorgan zu erhalten, werden verstärkt Komplexbildner
für eine Vielzahl von Radionukliden entwickelt und an
gewebe- oder stoffwechselspezifische Trägermoleküle
gekoppelt. Für die Therapie sucht man nach Möglichkeiten,
ein radioaktives Isotop des Rhenium anzuwenden.
Das am häufigsten verwendete Radionuklid ist Technetium-
99m, das sich aufgrund seiner günstigen physikalischen
Eigenschaften (keine Korpuskularstrahlung, günstige
physikalische Halbwertzeit, 140 KeV γ-Strahlung) und der
damit verbundenen geringen Strahlenbelastung besonders
gut als Isotop für die in-vivo-Diagnostik eignet. Techne
tium-99m läßt sich ohne Aufwand aus Nuklidgeneratoren als
[99mTc]-Pertechnetat gewinnen. Zur Gewinnung von Techne
tium-99m-Chelaten wird das Pertechnetat durch geeignete
Reduktionsmittel (z. B. SnCl₂, S₂O₄2-, etc.) in eine
niedrigere Oxidationsstufe überführt, in welcher das
Technetium-99m mit Chelatbildnern oder Proteinen Komplexe
bildet. Zur Markierung potentieller Chelatbildner mit
Technetium-99m und zur Herstellung von Kits für den
klinischen Routinebedarf wurden spezielle Verfahren
entwickelt und beschrieben. So lassen sich Proteine
direkt über Donor-Gruppen (Amino-, Amid-, Thiol-, etc.)
des Proteins (J. Nucl. Med. 1986, 27, 685) oder durch
Einführen von Komplexbildnern (US-Patent 44 79 930 und
Fritzberg, A. R. et al, J. Nucl. Med. 1986, 27, 957) mit
Technetium-99m markieren.
Auch aus der Gruppe zyklischer Amine wurden Komplexbild
ner entwickelt (Troutner, D. E. et al; J. Nucl. Med.
1980, 21, 443 und Mäcke, H.; DE-39 11 816), Cyclame
(Ketring, A. R.; Troutner, D. E. et al; J. Nucl. Med.,
1980, 21, 443-448, Int. J. Nucl. Med. Biol. 1984, 11,
113, Volkert et al, Applied Radiat. Isot., 1982, 33,
891-896), N₂O₂-Systeme (Pillai, M. R. A.; Troutner, D. E.
et al; Inorg. Chem. 1990, 29, 1850) und ebenso wurden
N₂S₂-Systeme (Bormans, G. et al; Nucl. Med. Biol. 1990,
17, 499) und N₃S-Systeme (Fritzburg, A.; EP-A-01 73 424
und EP-A-02 50 013) beschrieben.
Alle diese Komplexbildner haben jedoch erhebliche Nach
teile. So sind für die Markierung der Cyclame als auch
literaturbekannter N₂O₂-Systeme (Pillai, M. R. A. et al;
Inorg. Chem. 1990, 29, 1850-1856) pH-Werte von 10-13
erforderlich. Ferner verfügen diese Systeme nicht über
reaktive Gruppen, die eine Verknüpfung mit Biomolekülen
bzw. Proteohormonen ermöglichen. N₂S₂- und N₃S-Systeme
haben zwar in einzelnen Fällen eine hinreichende Stabili
tät, sind aber lediglich für einfache Ausscheidungs
studien, wie der Harnausscheidung, EP-A-02 50 013, geeig
net. Bemühungen, die Herstellung des literaturbekannten
MAG₃ (EP-A-02 50 013), welches zur Markierung ein Erhit
zen auf 100°C verlangt (Bannister, K. M. et al; J. Nucl.
Med. 1990, 31, 1568-1573) zu vereinfachen, sind zwar im
Gange (WO-91-16 076), aber bis heute ohne klinischen
Zugang geblieben.
Für N₂S₂-Komplexe (Bormans, G. et al; Nucl. Med. Biol.
1990, 17, 499) ist die Haltbarkeit zwischen Zubereitung
und Verabreichung geringer als 1 h und bedeutet so einen
empfindlichen Nachteil. Auch hier sind daher - bisher
ohne klinische Relevanz - Bemühungen im Gange, Mängel zu
beheben (Merryn, W. et al, Applied. Radiat. Isot. Vol.
42 (7), 607-612).
Die bisher bekannt gewordenen Komplexbildner haben je
weils eine einheitliche Struktur und sind daher auch
diagnostisch nur für einen Zweck anwendbar. Die Molekül
variationen sind auf Substituenten des Grundgerüstes
beschränkt und ermöglichen daher keine breite medizini
sche Anwendung, wie sie bei einer Komplexvariation mög
lich wäre. Sie sind daher kostenträchtig in Herstellung
und wissenschaftlicher Durchdringung der einzelnen Kom
plexe.
Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, kurzkettige N-
Alkyl-Peptid-Chelatbildner, die in einem breiten pH-
Bereich bei Raumtemperatur mit Technetium und Rhenium
komplexieren, wobei sowohl ionische als auch nicht ioni
sche Komplexe gebildet werden und somit Verbindungen
bereitzustellen, welche die Nachteile bekannter 99mTc-
und 180,188Re-Komplexe nicht aufweisen.
Dabei müssen gleichzeitig die Voraussetzungen für die
Anwendung dieser Verbindungen am Menschen im
Hinblick auf Strahlendosis, Stabilität und Löslichkeit
erfüllt sein; es muß gleichzeitig ein möglichst einfaches
Verfahren zu deren Darstellung geschaffen werden und eine
Kit-Formulierung dieser erfindungsgemäßen
Verbindungen/Konjugate und ihrer Metallkomplexe für ihre
klinische Anwendung bereitgestellt werden.
Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß dadurch gelöst, daß
Verbindungen der allgemeinen Formel I
R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)
worin
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substitu iert ist, und welcher gegebenenfalls eine endständige - COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebildet werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, welcher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl-carb oxyl-, Trifluormethylcarboxyl-, eine NH₂- oder eine OH- Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl- Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlen stoffatomen über deren endständige Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodiazepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Peptid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin-Deri vat, einem Endothelin-Antagonisten oder einem Endothe linfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substitu iert ist, und welcher gegebenenfalls eine endständige - COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebildet werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, welcher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl-carb oxyl-, Trifluormethylcarboxyl-, eine NH₂- oder eine OH- Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl- Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlen stoffatomen über deren endständige Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodiazepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Peptid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin-Deri vat, einem Endothelin-Antagonisten oder einem Endothe linfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II
oder der allgemeinen Formel IIa
ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeu tet,
einen Rest der allgemeinen Formel III
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeu tet,
einen Rest der allgemeinen Formel III
oder der allgemeinen Formel IIIa
darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylenoxy gruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxyethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspaltbare Schwe felschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen zur Verfügung gestellt werden.
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylenoxy gruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxyethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspaltbare Schwe felschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen zur Verfügung gestellt werden.
Überraschenderweise wurde eine Verbindungsklasse gefun
den, welche nicht nur die genannten Nachteile vermeidet,
sondern als 99mTc+5-Komplexe einen Übergang
vom N₃S → N₂SO → S₂O₂ → N₂S₂-N-Alkyl-Peptid-Komplex
system aufweist und daher in großer Breite als Kom
plexbildner eingesetzt werden kann.
Die Formel IV zeigt einen N₃S-N-Alkyl-Peptid-Komplex im
99mTc-Core (neutral) aus
R³S-CH₂-CO-NR¹ [CH₂-CO-NH]₂-CH₂-CO-R²,
die Formel V einen N₂OS-N-Alkyl-Peptid-Komplex im 99mTc-
Core (neutral) aus
R³S-CH₂-CO-NR¹ [CH²-CO-NH]₁-CH₂-COOH,
die Formel VI einen O₂S₂-N-Alkyl-Peptid-Komplex im 99mTc-
Core (mit negativer Ladung) aus
R³S-CH₂-CO-NR¹ [CH₂-CO-NH]₀-CH₂-COOH,
und die Formel VII zeigt schließlich einen N₂S₂-N-Alkyl-
Peptid-Komplex in 99mTc-Core (mit positiver Ladung) aus
R³S-CH₂-CO-NR¹ [CH₂-CO-NH]₀-CH₂-CO-R².
Die bei der Molekülvariation entstehenden Komplexe zeigen
eine überraschende Breite und Übereinstimmung im Hinblick
auf ihr biologisches Verhalten. So sind Verbindungen
dieses Typs, gekoppelt an einen Bioliganden, verwendbar
zur Rezeptordarstellung, was bisher für
99mTc-Verbindungen nicht beschrieben wurde und hervorra
gend geeignet zur Darstellung von Plaques bei Gefäß
läsionen und der Messung der Nierenfunktion, wobei die
Verbindungen jeweils an bioaktive Liganden gekoppelt sein
können.
Bevorzugt sind Verbindungen, bei denen R¹ eine -CH₂-
(CH₂)m-CH₃-Gruppe mit m = 1-14 darstellt
oder R¹ eine Phenyl-, eine p-Phenylamin-, eine Cyclo hexylamin-, p-Hydroxyphenyl -, 4-Hydroxycyclohexyl, p- Halogenphenyl- oder 4-Halogencyclohexyl-Gruppe ist.
oder R¹ eine Phenyl-, eine p-Phenylamin-, eine Cyclo hexylamin-, p-Hydroxyphenyl -, 4-Hydroxycyclohexyl, p- Halogenphenyl- oder 4-Halogencyclohexyl-Gruppe ist.
Bevorzugt sind außerdem Verbindungen der allgemeinen
Formel I, worin
R¹ gleich -(CH₂)q-OOC-CH₂-OOC-(CH₂)r-CH₃ ist,
wobei q und r jeweils ganze Zahlen von 1 bis 16 bedeuten.
Besonders bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen
Formel I, worin R¹ ein geradkettiger oder verzweigter
Alkylrest mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder ein P-
Bromphenylrest ist.
Ferner sind Verbindungen der allgemeinen Formel I bevor
zugt, bei denen R² ein Rest der allgemeinen Formel II
oder der allgemeinen Formel IIa
ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylamino-, Propinylamino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeu tet.
R⁴ eine Methylen-, Propenylamino-, Propinylamino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe bedeu tet.
Von diesen Steroiden sind 17α-Ethinyl-Estradiole oder
deren 3-Methyl-Ether bevorzugt.
Eine 17α-Ethinylgruppe des Estradiols kann auch gekoppelt
sein mit einem Ethen. Die Reihenfolge der Ethin- und
Ethengruppen ist austauschbar; auch eine Verdopplung der
Ethin- oder Ethengruppe ist zweckmäßig. Wichtig ist ein
Mindestabstand zwischen Chelator und Estradiolmolekül,
bevorzugt eine starre Ethin- oder Ethen-Gruppe, so daß
keine Faltung der Seitenkette eintreten kann.
Erfolgt die Bindung von I in dieser bevorzugten 17α-Posi
tion des Estradiolgerüstes, ist bei den erhaltenen Che
lat-Komplex-Bioligand-Verbindungen keine oder nur eine
geringe Abnahme der biologischen Aktivität zu erwarten,
wie es z. B. in Epperly, M. W. et al [J. Steriod Biochem.
Molec. Biol. Vol. 39, Nr. 5A, 729-734, 1991] belegt wird.
Die hervorragende Bedeutung dieser Estrogen-Chelat-Kom
plexe liegt in ihrer Eigenart, die Zellwand zu durchdrin
gen und sich an den Estrogen-Rezeptor anzulagern. Dies
gilt insbesondere für Komplexbildner gemäß der allgemei
nen Formel I, bei denen n = 2 ist. Bei 99mTc+5 sind diese
N₃S-Komplexe als Folge der N¹-Alkylierung im Tc-Core
neutral (vgl. Formel IV). Während geladene Komplexe die
Zellwand nicht zu durchdringen vermögen, z. B. N₃S-Kom
plex als Steroid 17α-ethinyl-Chelat, vom Typ Thioacetyl
glycyl-glycyl-glycyl-O-Ester (eigene Versuche), durch
dringen die erfindungsgemäßen N¹-alkylierten Komplexe (N¹
= methyl) die Zellwand und reichern sich nach i.v.
Injektion im Uterus an. Die Anreicherung beträgt, ausge
drückt als Quotient zwischen Blut/Uterus, 0,2 und läßt
sich in Abhängigkeit von der N¹-Alkyl-Kettenlänge bzw.
Substituenten variieren. Damit wird eine Mamma-ca Früher
kennung nach dem SPECT-Verfahren möglich. Besonders
bevorzugt ist hier die Verbindung gemäß Beispiel 10.
Weiterhin bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen
Formel I, bei denen R² ein Rest der
allgemeinen Formel III
allgemeinen Formel III
oder der allgemeinen Formel IIIa
ist, wobei
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen darstellen.
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen darstellen.
Diese Verbindungen der allgemeinen Formeln III und IIIa
sind Ergolin-Derivate.
Von diesen Ergolinen wird das 8α-Amino-6-Methyl-Ergolin
ggf. mit Alkyl-Substituenten in 2- und/oder 6-Position
mit einer Kettenlänge von C₁ in 2-Position oder C1-3 in
Position 6 und/oder einem Methyl- bzw. Halogensubstituen
ten in Position 2 bevorzugt. Der Substituent in 8-Positi
on des Ergolins kann außer αNH₂ auch β-CH₂O- oder αNH-CO-
N< oder αNH-CO-NH- sein.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel
I tragen am endständigen Schwefelatom einen Rest R³.
Dieser Rest R³ stellt eine Schwefelschutzgruppe dar,
welche während der Synthese der erfindungsgemäßen Verbin
dungen der allgemeinen Formel I erforderlich ist. Eine
solche Schutzgruppe muß leicht abspaltbar sein. Geeignete
Rest R³ sind beispielsweise Acetyl-, Benzoyl-, p-Methoxy
benzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trime
thylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxyethyl- oder
Trityl-Gruppen. Besonders bevorzugt ist die Benzyol
gruppe.
Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind ferner die
Metallchelatkomplexe radioaktiver Metallionen mit den
erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I,
worin R¹, R² und R³ die oben angegebene Bedeutung haben.
Geeignete radioaktive Metallionen sind beispielsweise
Ionen der Radioisotope der Elemente Tc, Re, Cu, Ga, Gd, Y
und In. Die Auswahl des Radionuklids richtet sich nach
der gewünschten Art der Anwendung der erfindungsgemäßen
Metallchelatkomplexe der allgemeinen Formel I.
Dabei werden für die Radiodiagnostik oder Radiotherapie
unterschiedliche Radionuklide verwendet.
Bevorzugt werden dabei radioaktive Metallionen der Iso
tope der Elemente Tc und Re.
Besonders bevorzugt ist das Radioisotop Technetium-99m.
Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind
Konjugate, enthaltend Verbindungen der allgemeinen Formel
I oder Metallchelatkomplexe radioaktiver Metallionen der
Elemente Tc, Re, Cu, Ga, Gd, Y und In mit Verbindungen
der allgemeinen Formel I und sich selektiv in erkrankten
Geweben oder in Tumoren anreichernde Substanzen, wobei
zwischen diesen eine kovalente Bindung besteht und diese
im Falle von Carboxy- oder Aminogruppen enthaltenden
Substanzen wie Peptiden, Proteinen, Antikörpern oder
deren Fragmenten, amidisch oder im Falle von Hydroxygrup
pen enthaltenden Substanzen wie Fettalkoholen, esterartig
oder im Falle von Aldehydgruppen enthaltenden Substanzen
imidisch vorliegt.
Bevorzugt sind Konjugate mit sich in erkranktem Gewebe
anreichernden Peptiden wie Endotheline, Teilsequenzen von
Endothelinen, Endothelin-Analoga, Endothelin-Derivate
oder Endothelin-Antagonisten.
Insbesondere bevorzugt sind solche Konjugate mit den
Verbindungen der allgemeinen Formel I und sich selektiv
in erkranktem Gewebe anreichernden Peptiden, wobei die
Peptide die folgenden Sequenzen
aufweisen.
Ein weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist
ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen
Verbindungen der allgemeinen Formel I
R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)
worin
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Ha logenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxylgruppe, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodia zepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Pep tid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Ha logenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxylgruppe, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodia zepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Pep tid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II
oder der allgemeinen Formel IIa
ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III
oder der allgemeinen Formel IIIa
darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen
welches sich dadurch auszeichnet, daß man
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen
welches sich dadurch auszeichnet, daß man
- a) ein Diketopiperazinderivat des Glycins oder
- b) Glycin
mit einem Halogencarbonsäurehalogenid und anschließend
mit einem Alkylamin oder Arylamin der allgemeinen
Formel VI
R¹-NH₂ (VI)
wobei R¹ die oben angegebene Bedeutung hat, umsetzt,
erneut mit einem Halogencarbonsäurehalogenid umsetzt
und anschließend mit einer Verbindung der allgemeinen
Formel IV
R³-SH (IV)
wobei R³ die oben angegebene Bedeutung hat,
umsetzt
oder eine Verbindung der allgemeinen Formel V
umsetzt
oder eine Verbindung der allgemeinen Formel V
R¹-NH-CH₂-CO-R² (V)
wobei R² die oben angegebene Bedeutung hat, mit einem
Halogencarbonsäurehalogenid und anschließend mit einem
Alkylamin oder Arylamin der allgemeinen Formel VI
R¹-NH₂ (VI)
wobei R¹ die oben angegebene Bedeutung hat, umsetzt,
erneut mit einem Halogencarbonsäurehalogenid umsetzt und
anschließend mit einer Verbindung der allgemeinen Formel
IV
R³-SH (IV),
wobei R³ die oben angegebene Bedeutung hat, umsetzt
und diese Verbindungen gegebenenfalls mit einer pharma
zeutisch annehmbaren Säure oder Base in deren Salz über
führt.
Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel
I lassen sich auch derart herstellen, daß man ausgehend
von einer erfindungsgemäßen Verbindung der allgemeinen
Formel I, wobei n 0 oder 1 ist, diese mit einer Verbin
dung umsetzt, welche endständige Gruppen aufweist, und
dadurch nach der Kopplung an die oben genannte Verbindung
einen Rest R² bildet. Dabei werden erfindungsgemäße
Verbindungen der allgemeinen Formel I gebildet, bei denen
n 1 oder 2 ist. Dies bedeutet, daß ein Teil der Kette der
erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel I
durch den angekoppelten Rest R² zur Verfügung gestellt
wird.
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Metallchelatkom
plexe radioaktiver Metallionen mit den erfindungsgemäßen
Verbindungen der allgemeinen Formel I ist ein weiterer
Gegenstand der vorliegenden Erfindung.
Die Umsetzung der Verbindungen der allgemeinen Formel I,
gegebenenfalls unter vorheriger oder gleichzeitiger
Abspaltung des Restes R³ erfolgt in an sich bekannter
Weise.
Die Herstellung von Metallchelatkomplexen radioaktiver
Metallionen der Elemente Tc und Re mit Verbindungen der
allgemeinen Formel I erfolgt dadurch, daß man Technetium-
99m oder Re in Form von Pertechnetat oder Perrhenat in
Gegenwart eines Reduktionsmittels und gegebenenfalls
eines Hilfsliganden mit einer Verbindung der allgemeinen
Formel I
R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)
worin R¹, R² und R³ die oben angegebene Bedeutung haben,
umsetzt.
Von besonderer erfinderischer Bedeutung ist nun die
überraschende Variabilität der Verbindungen und ihrer
Komplexe. Für Verbindungen mit n = 2 gemäß der allgemei
nen Formel I erhält man ein N₃S-System. Geht man von n =
2 auf n = 1 über, so kann sich ein N₂SO-N-Alkyl-System
mit einer überraschend hohen Komplexstabilität bilden.
Schließlich kann sich bei n = 0 aus dem N₁S₁-N-Alkyl-
System beim Komplexieren ein Chelatkomplex, der sowohl
ein N₂S₂-N-Alkyl-System aufzeigt oder aber als weiteres
Dimeres ein O₂S₂-N-Alkyl-Komplex ist, bilden, ohne daß
eine chemische kovalente Brückenfunktion den Komplex
verbindet.
Die neuen Verbindungen haben wegen ihrer chemischen
Variabilität und ihrer Varianten in der Komplexbildung
auch eine außerordentliche Breite der klinischen Anwen
dung.
Bis heute gibt es keine Methode, die - in vivo - die
Bildung von Plaques als Beginn einer Atherosklerose
bildlich darstellt. Die Atherosklerose ist eine Volks
krankheit und eine Vorstufe einer koronaren Herzerkran
kung, an deren Folgen etwa 40% der Bevölkerung der
Industriestaaten sterben. Es ist daher von besonderem
Wert, mit einem einfachen Mittel zu einer bildhaften
Darstellung der Gefäßläsionen zu gelangen. So können die
erfindungsgemäßen N-Alkyl-Chelate zur Früherkennung
atherosklerotischer Gefäßerkrankungen verwendet werden.
Der im Tiermodell (Kaninchen der Art WHHL mit künstlich
erzeugten atherosklerotischen Gefäßveränderungen: WHHL-
Kaninchen weisen aufgrund eines fehlenden oder defekten
LDL Rezeptors hohe LDL Spiegel im Blut auf und bilden
daher atherosklerotische Gefäßveränderungen aus)
erreichte Quotient nach i.v. Gabe von Verbindungen gemäß
der allgemeinen Formel I, wobei R² ein Endothelin, eine
Teilsequenz von Endothelin, ein Endothelin-Analoga, ein
Endothelin-Derivat oder ein Endothelin-Antagonist ist,
aus Aktivität im Plaque und unbeschädigten Gefäß, lag bei
1 : 5 (vgl. hierzu Abb. 1 und 2).
Es war in hohem Maße überraschend, daß trotz der Lipho
philie des Komplexes, als Folge der R¹-Alkylkette mit
einer Kettenlänge von C₆ bereits nach 3 Stunden die
Ausscheidung soweit erfolgt war. Die Läsionen im Bereich
der Aorta sind autoradiographisch überraschend gut dar
stellbar. Hier liegt eine durch die Fettähnlichkeit der
Moleküle gegebene Affinität zu den Plaques oder deren
Rezeptoren vor, die so hoch ist, daß trotz abfallender
Konzentration der Verbindung im Blut - als Folge der
Ausscheidung via Leber - die Haftung an den Plaques
erhalten bleibt.
Die Affinität zu Plaques bei atherosklerotischen Verände
rungen der Gefäße läßt sich durch die Variation der R¹-
Alkyl-Gruppe beeinflussen. So läßt sich über die Eigenart
des in R¹ befindlichen Restes die Lipophilie steuern, und
gleichzeitig bietet R² als freie Carboxylgruppe die
notwendige Voraussetzung für eine gute Wasserlöslichkeit.
Anstelle von R² als freie Carbonsäure kann aber auch eine
Amidierung dieser Carboxylgruppe mit einem Aminokohlen
wasserstoff zur Wasserlöslichkeit beitragen.
Es ist bekannt, daß Proteine, insbesonders kurzkettige
Proteohormone wie Endotheline, beim Ankoppeln eines
Chelators über eine kovalente Bindung ihre Wirksamkeit
verlieren. Völlig unerwartet war daher das Verhalten der
erfindungsgemäßen Verbindungen bei der kovalenten Bindung
an Endotheline, deren Antagonisten oder Fragmente
(Beispiel 11, 12).
Die hier gezeigte Art der Generierung der erfindungsge
mäßen N-Alkyl-Komplexbildner der allgemeinen Formel I mit
Endothelinen (Beispiel 11 und 12) aus Chelatbildungs
vorstufen ist eine neue Methode zur Generierung von
solchen Komplexbildungsstellen. Die Stabilität der neuen
N-Alkyl-Komplexe der allgemeinen Formel I entspricht den
bekannten N₃S-Komplexen.
Nicht-invasive Techniken zur Diagnose der Atherosklerose
wurden beschrieben, insbesonders mit einer Radio-Jod-
Markierung. So wurden mit Radioisotopen markierte Anti
körper oder auch markierte "Low Density Lipoproteine"
(LDL) vorgestellt, die an atherosklerotische Wandbereiche
binden (Lees et al, 1983, J. Nucl. Med. 24, 154-156,
Kaliman et al, 1985, Circulation, 72, 300; Virgolini et
al, 1991, Eur. J. Nucl. Med., 18, 944-947). Diese Metho
den beinhalten jedoch entscheidende Nachteile, wie z. B.
die antigene Wirkung der Antikörper auf den Organismus
und die lange Zeitdauer (mehrere Tage), die zur Isolie
rung, Reinigung und Markierung des LDL aus dem Blut des
Patienten benötigt wird. Vor allem aber sind diese großen
Moleküle durch eine lange Halbwertzeit im Blut ausge
zeichnet, die zusammen mit einer hohen Hintergrundstrah
lung im gesamten Körper eine Lokalisation der atheros
klerotischen Läsionen erschwert, wenn nicht gar unmöglich
macht (Shih et al, 1990 Proc. Natl. Acad. Sci., 87,
1436-1440), synthetisierten Teilsequenzen des LDL-Proteinan
teils (apo-B-100), die zwar noch an die atheroskleroti
schen Plaques binden, aber sich durch eine weitaus kürze
re Halbwertzeit im Blut und ein verbessertes Si
gnal/Rausch-Verhältnis hervorheben. Aufgrund einer zu
geringen Affinität zum Plaque und/oder der geringen
Dichte der Bindungsstellen dieser Peptide im Plaque,
konnte auch mit diesen apo-B-Peptiden keine erfolgreiche
in vivo Diagnose der Atherosklerose gezeigt werden.
Allgemein ist diesen Verbindungen der Nachteil des radio
aktiven Iod-123 zu eigen. Die schlechte Verfügbarkeit
wegen der Herstellung im Cyclotron und der physikalischen
Halbwertzeit von 13 Stunden, verbunden mit der leichten
Abspaltbarkeit im Organismus. So war es überraschend, daß
die erfindungsgemäßen Verbindungen nach Formel I nach
kovalenter Bindung an NH-Gruppen des Endothelins und
Komplexierung mit 99mTc eine gute Anreicherung in athero
sklerotischen Plaques zeigten. Insbesonders auffallend
ist der Vorteil, daß die n = 1 und n = 0 Verbindungen
nach kovalenter Bindung an Endotheline über eine Amidbil
dung neue N-Alkyl-Peptid-Komplexbildner generieren, ggf.
unter Einbeziehung der in geeigneter Position befindli
chen NH- und SH-Gruppen des jeweiligen Endothelins.
Bei der Umsetzung der erfindungsgemäßen Verbindungen mit
dopaminergen bioaktiven Molekülen geht überraschend die
Rezeptoraffinität dieser aus der Ergolinreihe stammenden
Verbindungen nicht verloren, sondern es gelang sogar bei
Vorstufen - mit oder ohne Affinität zum D₂-Rezeptor -
eine hinreichende Gehirngängigkeit zu erreichen, die eine
Darstellung der D₂-Rezeptoren ermöglicht. Bemühungen, mit
99mTc+5-Komplexen Rezeptoren im Gehirn darzustellen, sind
bis heute ohne Erfolg geblieben. So findet man bei der
Umsetzung von 8α-Amino-6-Methyl-Ergolin mit Mercapto-
Acetyl-Glycyl-Glycyl-Glycin zum 8α-Amid und Komplexierung
mit 99mTc+5 nach i.v. Injektion an der Ratte (Wistar)
keine Aufnahme im Gehirn.
Führt man hingegen die Umsetzung mit den erfindungsgemä
ßen Verbindungen nach Formel I durch, wobei R¹ = Methyl
ist und die Amidierung oder Veresterung über R² erfolgt,
so erhält man unter analogen Bedingungen eine Anreiche
rung im Gehirn von 0,1 bis 0,5% der Dosis.
Bei n = 1 und n = 0 Komplexen bilden sich neue N-Alkyl-
Peptid-Komplexstrukturen heraus, die im Zusammenwirken
mit dem bioaktiven Molekül, überraschenderweise Struktu
ren dopaminerger Verbindungen nachahmen und eine hohe
Anreicherung im Gehirn zeigen, die zur Sichtbarmachung
der D-Rezeptoren genutzt werden kann (Formel IX).
Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen er
folgt nach den dem Fachmann bekannten Verfahren [A Spe
cialist Periodical Report; Amino-acids, Peptides and
Proteins;
The Chemical Society, Burlington House, London, W1VOBN].
Zur Herstellung der Verbindungen mit R¹ = CH₃ und R² = OH
geht man vom Sarcosin aus und setzt dieses mit
Chloracetylchlorid um. Das entstehende Chloracetylsarco
sin wird mit Thiobenzoesäure in üblicher Weise umgesetzt
und man gelangt zu Strukturen mit n = 0
Die Herstellung der Verbindungen mit n = 2 erfolgt durch
Umsetzung des Diketopiperazins des Glycins mit
Chloracetylchlorid. Das entstehende Chloracetylglycyl
glycin wird anschließend mit N-Methylamin oder zur Ein
führung längerer Reste mit N-Alkylaminen, Phenylaminen,
Alkyl-oxa-alkylaminen, Cycloalkylaminen oder
Glycinglycolsäureester umgesetzt. Durch erneutes Umsetzen
mit Chloracetylchlorid und anschließende Thiobenzoylie
rung werden Verbindungen der Formel n = 2 erhalten.
R¹ steht dabei für die Variationen am Sarcosylstick
stoffatom.
Die entsprechenden Verbindungen mit n = 1 erhält man
durch Umsetzung von Salzen des Glycins mit N-geschütz
ten Sarcosylverbindungen oder durch Umsetzung von Glycin
mit Chloracetylchlorid mit nachfolgender Aminolyse der
Chlormethylgruppe. Erneute Reaktion mit Chloracetylchlo
rid und anschließender Thiobenzylierung liefert die
Titelverbindungen mit n = 1.
Die Verbindungen A, B, C reagieren in üblicher Weise mit
Aminogruppen- oder Hydroxylgruppentragenden Reaktions
partnern. Zu diesem Zweck werden A bis C in N-Methyl
pyrrolidon gelöst, mit BOP (B. Castro et al Tetrahedron
Letters 14 (1975) 1219) oder TBTU (Knorr et al Tetrahe
dron Letters 30 (1989), 1927) voraktiviert und anschlie
ßend mit der Aminokomponente umgesetzt. Veresterungen
werden vorzugsweise mit Dicyclohexylcarbodiimid in Gegen
wart von Dimethylaminopyridin durchgeführt. Für die
Synthese von Verbindungen mit einem Estrogen als Bioli
gand geht man von einem Estrogen aus, das bereits einen
ungesättigten Substituenten in 17α wie Propargylamin-
oder Propargylyalkoholrest trägt und setzt diesen mit
einer der Verbindungen A bis C in der beschriebenen Weise
um.
Die Umsetzung der Verbindungen A bis C mit Peptiden,
insbesondere mit Endothelinbausteinen erfolgt nach in der
Peptidchemie gebräuchlichen Methoden entweder konventio
nell in Lösung, vorzugsweise in Dimethylformamid, Dime
thylacetamid, N-Methylpyrrolidon, Dimethylsulfoxid oder
Gemischen aus diesen Komponenten. Bei Verwendung der
Solid-Phase-Methode kann die Acylierung der Aminokompo
nente auch unter üblichen Bedingungen am Syntheseharz
erfolgen. Abspaltung vom Syntheseharz liefert die ge
wünschten Verbindungen. Eine präparative Reinigung, falls
erforderlich, erfolgt chromatographisch an einer RP 18
Säule in einem Wasser/Acetonitrilgradienten, der 0,1%
Trifluoressigsäure enthält.
Für die Umsetzung mit Aminogruppen- oder Hydroxylgruppen
tragenden Ergolinen wurde analog zu den Umsetzungen mit
Peptiden in Lösung verfahren. Die Umsetzungen wurden in
N-Methylpyrrolidon durchgeführt. Die präparative Reini
gung erfolgt ebenfalls wie für Peptide angegeben.
Die anderen R⁴-Reste werden nach Aufbau der geschützten
Dipeptide A-C erhalten, in dem R¹, wobei R² = OH ist,
nach Aktivierung mit
NH₂-CH₂Cl,
NH₂-CH₂-CH=CHJ oder
NH₂-CH₂-C=CJ
umgesetzt wird und nach der Palladium-O-Reaktion das 17α-
Ethinylsteroid mit dem gewünschten Komplexbildner über
eine C-C-Bindung kovalent gebunden wird.
Die Komplexbildung wird bevorzugt in wäßrigem Medium,
bei einem pH-Wert zwischen 6 und 9 und bei Raumtempera
tur, durch Reduktion von Na-Pertechnetat mit z. B.
Zinn(II)chlorid oder Dithionid, ggf. über einen Hilfsli
ganden wie Natriumcitrat oder Natriumtartrat ausgeführt,
wobei die Schutzgruppe R³ bereits zuvor oder in situ
abgespalten wird.
Eine Aktivierung der im Falle von R² = OH entstehenden R²
Carboxylgruppe oder der Ersatz der Carboxylgruppe durch
eine NCS- oder ähnlich reaktive Gruppe führen dazu,
Peptidchelate kovalent an ein größeres Protein oder
Proteohormone, Endotheline, Endothelinanaloge, Endothe
lin-Antagonisten, Endothelinderivate, Teilsequenzen von
Endothelinen zu binden und nachträglich eine Komplexie
rung durchzuführen.
Wie in der Herstellungsvorschrift ausgewiesen, lassen
sich die erfindungsgemäßen 99mTc- und 186,188Re-Komplexe
bei Raumtemperatur, neutralem bis schwach alkalischem pH
und mit oder ohne Umchelatisierung (z. B. über ein
Heptagluconat-99mTc-Komplex) in Ausbeuten zu 95% als
Komplexe herstellen. Ihre leichte Salzbildung über ein
freies Kation führen zu einer guten Wasserlöslichkeit.
Herstellung der Metallkomplexe: Die Abspaltung der
Schutzgruppe erfolgt nach dem Fachmann bekannten Methoden
(s. "Protective groups in organic synthesis" T. N. Greene,
John; Wiley and Sons 1981).
Für die Anwendung im humandiagnostischen Bereich werden
üblicherweise zwischen 370 MBq und 1850 MBq eingesetzt,
bevorzugt 740 bis 1480 MBq. Zur Anwendung am Menschen
werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Form eines
Kit′s bereitgestellt. Der Kit enthält mindestens einen
Chelator nach der allgemeinen Formel I in freier oder an
Liganden gebundener Form.
Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Cold-Kit,
welches einen Chelatbildner nach der allgemeinen Formel I
in freier Form oder an ein bioaktives Molekül, wie z. B.
eine Ergolin-, Estradiol- oder Endothelin-Derivat gebun
den, enthält und welches in der Lage ist, Metallatome zu
binden.
Erhebliche Schwierigkeiten bereitet oft die Abspaltung
der intermediär zur Ausführung der Synthese eingeführten
Schutzgruppen. Gerade Chelatbildner mit Peptid-Verknüp
fungen werden bei der Abspaltung der -S-Schutzgruppe (R³)
durch gleichzeitig ablaufende Spaltung der Peptidkette
stark in Mitleidenschaft gezogen bzw. führen zu nicht
mehr verwertbaren Bruchstücken, umso überraschender war
es, daß bei gleichzeitiger Anwesenheit von Wasser
stoff/Pd/CaCO₃, also einer Schutzgruppenabspaltung unter
hydrierenden Bedingungen, in Gegenwart von dem üblich
angewendeten Alkali, eine hohe, bis zu 80% reichende
Abspaltung eintritt.
Diese entscheidende Verbesserung in der Synthese der
freien Chelat-Komplexe ist insofern von hoher Bedeutung,
als damit eine Schutzgruppenabspaltung vor der Kit-Formu
lierung erfolgen kann und die Gewinnung des schutzgrup
penfreien Chelators technisch erheblich verbessert wird.
Am Beispiel 3 wird die erfindungsgemäße Abspaltungsmetho
de beschrieben. Während bei der üblichen Abspaltung mit
Alkali ein nur schwer zu trennendes Gemisch erhalten
wurde, erhielt man bei der Schutzgruppenabspaltung mit
Alkali in Gegenwart von Wasserstoff/Pd/CaCO₃ eine 100%ige
Stoffausbeute mit über 80% an gewünschtem Material.
Beispielhaft sei genannt, daß die Umsetzung mit Aminen
bzw. Alkoholen über eine Aktivierung der Carbonsäure R² =
OH verläuft, wobei dem Fachmann bekannte Methoden ange
wendet werden.
Als aktivierte Gruppen seien beispielhaft genannt: Säu
rechloride, gemischte Anhydride [Org. Prep. Proc. Int.
1975, 7, 215], aktivierte Ester [Adv. Org. Chem. Part B,
472]. Die Verknüpfung mit Biomolekülen kann direkt oder
auch über Linker erfolgen, hier sei die Carbodiimidmetho
de (Fieser, Reagents for Organic Synthesis 10, 142)
genannt. Die Verknüpfung erfolgt derartig, daß zwischen
Chelat und Biomolekül eine kovalente Bindung gebildet
wird.
Bei Verwendung von Steroiden als Biomoleküle werden
bevorzugt Estradiol Derivate mit Substituenten in 17α-
Position verwendet. Die Synthese solcher Verbindungen
wird z. B. von Blickenstaff für 17α-Ethinyl-Derivate des
Estradiols beschrieben. (Blickenstaff A.; Steroids 46,
889 (1985); USP 462 426) . Für Estradiol-Derivate mit 17α-
Propargyl-Substituenten mit endständiger NH₂ oder
OH-Funktion wird die Synthese von Blickenstaff, Brandes
und Poirier beschrieben. (Blickenstaff et al; Steroids
48, 223 (86); Brandes, A. et al Dissertation 87-01 441,
1986, University of Illinois, D. Poirier et al, J.
Steroids. Biochem. Molec. Biol. 38, Nr. 6, 759-774,
1991).
Eine Übersicht über die Verknüpfung von Dreifach- mit
Zweifach-Bindungen, z. B. nach der Palladium-O-Reaktion,
sind in Aldrichchimica Acta, Vol. 15, Nr. 1, 1982; Shun
ichi Murahashi et al, Stephen A. Godleski, Tetrahedron
Letters, Vol. 22, Nr. 24, pp 2247-2250, 1981; Tetrahedron
Letters, Vol. 29, Nr. 24, 2973-2976, 1988; beschrieben.
Hierbei wird z. B. I mit R² = -NH-CH₂-C≡CH bei der Kopp
lung mit z. B. 17α[2-Halogen-ethenyl]-estradiol gemäß
genannter Literaturstellen umgesetzt.
Aus der Literatur ist bekannt, daß Ergotalkaloide vom Typ
der 6-Methyl-8-substituierter Ergoline über ein breites
Spektrum an chemischer Variation verfügen, ohne daß bis
heute ein Zusammenhang zwischen Wirkung und Substituenten
in Position 8 eindeutig erkennbar wäre [Ergot Alkaloids
and Related Compounds, Editors: B. Berde and H. O. Schild,
Springer-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, 1978].
Ein bevorzugter dopaminerger Ligand ist Ergolin. Eine
Übersicht über Synthesewege zu 8-substituierten Ergolinen
findet man bei Ergot Alkaloids and Related Compounds,
Editors B. Berde and H. O. Schild, Springer-Verlag Berlin,
Heidelberg, New York, 1978, Chapter II Chemical Back
ground, J. Ruisemmann and P. A. Stadler.
Bevorzugt ist die Umsetzung mit dem 8α-Amino- bzw. 8β-
Hydroxy-Methyl-Ergolin. Sie erfolgt über eine aktivierte
Gruppe in R², beispielsweise das mit Benzotriazol-1-yl-
tetra-methyl-uronium-tetrafluoroborat oder nach der
bekannten Carbodiimidmethode.
Bei der erfindungsgemäßen Anwendung der n = 1 und n = 0
Komplex- bzw. Partialkomplexbildner werden unter Einbe
ziehung des Stickstoffs in der 8α-Amino- und 6-N-Methyl-
Gruppe des Ergolins neue Komplexe generiert.
Ein weiterer Gegenstand der Erfindung ist die Verwendung
der Metallchelate für diagnostische und/oder therapeuti
sche Zwecke sowie pharmazeutische Mittel, die mindestens
ein erfindungsgemäßes Chelat der allgemeinen Formel I,
gegebenenfalls mit den in der Galenik üblichen Zusätzen,
enthalten.
Zur Anwendung am Menschen werden die erfindungsgemäßen
Verbindungen in Form eines Cold- oder Hot-Kit′s bereit
gestellt. Der Kit enthält mindestens einen Chelator nach
Formel I in freier oder gebundener Form, wobei die Ligan
den bevorzugt aus der Stoffklasse der Ergoline, Estra
diole, Endotheline, kurzkettige synthetische Peptide,
Cholecystokinine gewonnen werden.
Tc-Gluconat:
2 ml 99m
Tc-Generatoreluat werden zu 2 ml 0,1 M Natrium
gluconatlösung gegeben und mit 10 µl 0.01 M SnCl₂ (in
0,01 M HCl) versetzt. Danach erfolgt
dünnschichtchromatographische Prüfung der quantitativen
Pertechnetatreduktion.
DC (Kieselgel/Aceton): 99m
DC (Kieselgel/Aceton): 99m
Tc-Gluconat Rf: 0-0.1;
99m
TcO⁴-Rf: 0,9
0,07 mol Sarkosin werden in 50 ml 1N Natronlauge gelöst
und bei 0°C portionsweise mit 0,08 mol Chloracetylchlorid
und 110 ml 1N Natronlauge versetzt. Nach 45 min ist die
Zugabe beendet und die Reaktionslösung wird mit 20 ml 5N
Salzsäure angesäuert.
Das Produkt wird unter vermindertem Druck zur Trockne
eingeengt und der Rückstand mit dreimal je 50 ml kaltem
Aceton extrahiert. Das Aceton wird unter vermindertem
Druck entfernt und der Rückstand mit 100 ml Ether extra
hiert. Der Ether wird abgedampft und das zurückbleibende
Öl mit etwas Ether aufgenommen und unter starkem Rühren
zur Kristallisation gebracht.
Ausbeute: 77% d. Th.
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,65 (Jodbedampfung).
Ausbeute: 77% d. Th.
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,65 (Jodbedampfung).
0,02 mol Chloracetyl-sarkosin werden in 750 ml Methanol
unter Rühren in einer Schutzgas-Atmosphäre bei Raumtempe
ratur gelöst. Dazu wird langsam eine Lösung von 0,041 mol
Thiobenzoesäure, gelöst in 20 ml Methanol und neutrali
siert mit Natriummethylat, zugetropft und weitere 12 h
gerührt.
Das Lösungsmittel wird unter vermindertem Druck entfernt
und der Rückstand mit 2N Salzsäure aufgenommen. Das
Reaktionsprodukt fällt als braunes Öl aus, das von der
überstehenden Lösung abgetrennt und mit Chloroform extra
hiert wird. Das Chloroform wird unter vermindertem Druck
entfernt und der Rückstand mit Ether versetzt. Durch
Kühlen und intensives Rühren wird das Reaktionsprodukt
ausgefällt, abfiltriert und auf dem Tonteller getrocknet.
pH-Titration und IR-Spektrum zeigten, daß das Reaktions
produkt aus einem Gemisch von 60% Methylester und 40%
freier Aminosäure bestand.
0,08 mmol des erhaltenen Gemisches werden in 2 ml absolu
tem Methanol suspendiert, mit 2 mg Pd/CaCO₃ (5%) ver
setzt und bei einem Wasserstoffdruck von 66 kPa unter
Rühren mit einer Lösung von 0,13 mmol Natriummethylat in
1 ml absolutem Methanol umgesetzt. Man rührt noch 15 min
und neutralisiert danach die Lösung mit methanolischem
Dowex 50WX8. Der Katalysator und das Harz werden abfil
triert, die Substanz lyophilisiert und die Verunreini
gungen mit 2 ml Benzol extrahiert. Anschließend wird das
Benzol abgetrennt und die Substanz aus Ethanol lyophili
siert.
Das erhaltene Produktgemisch aus Ester und freier Säure
wird über Sephadex G10 getrennt. (Säule 14 × 1000, 20
ml/h, RI-Detektor) Mercapto-acetyl-sarkosin-methylester
wird als zweite Fraktion abgetrennt, vgl. Beispiel 1 a).
Mercaptoacetyl-sarkosin:
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,7 (Ninhydrin)
RP 18/Methanol Rf: 0,85 (Ninhydrin)
¹H-NMR (DMSO) TMS δ2,9 (SH, 1H), δ3,1 (N-CH3, 3H), δ3,9 (-CH2, 2H)
Mercaptoacetyl-sarkosin:
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,7 (Ninhydrin)
RP 18/Methanol Rf: 0,85 (Ninhydrin)
¹H-NMR (DMSO) TMS δ2,9 (SH, 1H), δ3,1 (N-CH3, 3H), δ3,9 (-CH2, 2H)
Zu 2 ml 99mTc-gluconatlösung werden ca. 1 mg N-Methyl-
MAG1, gelöst in 200 µl Wasser, gegeben. Nach einer Reak
tionszeit von 15-20 min erfolgt die Reinheitskontrolle
mittels DC auf Kieselgel 60/95% Ethanol.
Die Hauptmenge der Aktivität läuft mit Rf = 0.1 (ca. 80%);
weitere Peaks bei Rf = 0.2 (ca. 10%) und Rf = 0.4 (ca. 10%).
Im Elektropherogramm wird ein anionischer Tc-MAG1-Komplex
nachgewiesen mit einer relativen Beweglichkeit
uPertechn./uTcMAG1 von 0,2.
Bei der Auftrennung des Reaktionsgemisches aus Beispiel
1, Stufe 3 erhält man 20% Mercapto-acetyl-sarkosin
methylester als farbloses Öl.
0,021 mol Chloressigsäure werden mit 0,1 mol Hexylamin
versetzt und 5 Tage bei Raumtemperatur stehengelassen.
Danach wird der dicke Sirup in 500 ml Aceton eingerührt
und kristallisiert in Form von weißen Blättchen aus.
Ausbeute 2,1 g (63% d.Th.)
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,6 (Ninhydrin).
Ausbeute 2,1 g (63% d.Th.)
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,6 (Ninhydrin).
0,01 mol Hexylaminoessigsäure werden in 10 ml 1N Natron
lauge gelöst, gekühlt und bei 0°C abwechselnd mit 1,5 ml
(1 ml = 0,012 mol) Chloracetylchlorid und 20 ml 1N Na
tronlauge versetzt. Nach 30 min ist die Reaktion beendet
und es wird noch 30 min unter leichter Erwärmung nachge
rührt. Mit 3 ml 5N Salzsäure wird angesäuert und das
ausfallende braune Öl abgetrennt.
Das Öl wird mehrfach mit heißem Wasser extrahiert und als
farbloses Öl ohne weitere Reinigung für die nächste
Synthesestufe eingesetzt.
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung).
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung).
0,018 mol Chloracetyl-hexylaminosäure werden in 500 ml
Methanol unter Stickstoff gerührt. 0,036 mol Thiobenzoe
säure werden mit Natriummethylat neutralisiert und inner
halb von 30 min zu der Lösung gegeben. Es wird noch
weitere 12 h unter Schutzgas gerührt. Das Methanol wird
unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand mit 2N
Salzsäure angesäuert und das ausfallende gelbe Öl abge
trennt.
Ausbeute: 370 mg
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,5
Ausbeute: 370 mg
DC: Kieselgel//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,5
10 g Glycinanhydrid werden in einem 250 ml Dreihalskolben
in 50 ml 2N Natronlauge bei Raumtemperatur gelöst. Nach
45 min wird die Lösung auf 0°C abgekühlt und 11,1 g
Chloracetylchlorid und 24 ml 5N Natronlauge abwechselnd
unter fortgesetztem Rühren und Kühlen zugetropft. Nach 45
min ist die Zugabe beendet. Anschließend werden 40 ml 5N
Salzsäure zugegeben, wobei sich die Lösung entfärbt und
die Substanz zu kristallisieren beginnt. Man läßt sie
noch ca. 1 h bei 0°C stehen und saugt ab. Er wird mehr
mals mit kaltem Wasser gewaschen und aus heißem Wasser
umkristallisiert.
Ausbeute: 5 g.
Ausbeute: 5 g.
Die Mutterlauge wird unter vermindertem Druck eingeengt.
Der Niederschlag wird aus Wasser umkristallisiert.
Ausbeute: 2,5 g
Schmp.: 173°C
DC: Kieselgel//n-Butanol/Eisessig/Wasser/ 4 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1636, 1676; δNH 1550; νCOOH 1708 cm-1.
Ausbeute: 2,5 g
Schmp.: 173°C
DC: Kieselgel//n-Butanol/Eisessig/Wasser/ 4 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1636, 1676; δNH 1550; νCOOH 1708 cm-1.
5 g Chloracetyldiglycin werden mit 15 ml 33%iger wäßri
ger Methylaminlösung versetzt und 2 Tage bei Raumtempera
tur stehen gelassen. Danach wird die Lösung auf Sirup
dicke unter vermindertem Druck eingeengt, der Sirup auf
dem Wasserbad erwärmt und mit 50 ml heißem Ethanol ver
setzt. Den Niederschlag läßt man in der Kälte absetzen
und saugt über eine G4-Fritte ab. Er wird in 43 ml heißem
Wasser gelöst und 43 ml heißes Ethanol zugegeben. Das
Produkt kristallisiert aus, man saugt ab und lyophili
siert.
Ausbeute: 3 g = 60% d. Th.
Schmp.: 237°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser/ 4 : 1 : 1
Rf: 0,3 (Ninhydrin)
IR (fest in KBr): νC=O 1620, 1650, δNH 1540; νCOOH 1672 cm-1
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 2,8 (N-CH₃, 3H), δ 3,8-4,1 (-CH₂-, 6H).
Ausbeute: 3 g = 60% d. Th.
Schmp.: 237°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser/ 4 : 1 : 1
Rf: 0,3 (Ninhydrin)
IR (fest in KBr): νC=O 1620, 1650, δNH 1540; νCOOH 1672 cm-1
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 2,8 (N-CH₃, 3H), δ 3,8-4,1 (-CH₂-, 6H).
2 g Sarkosyl-diglycin werden in 10 ml 1N NaOH bei Raum
temperatur gelöst und dann bei 0°C unter Rühren abwech
selnd mit 1 ml Chloracetylchlorid und 16 ml 1N NaOH
innerhalb von 30 min versetzt. Man läßt weitere 30 min
rühren, säuert mit 3 g 5N HCl an und engt das Produkt
unter vermindertem Druck bis zur Trockne ein. Die dabei
anfallenden Kristalle werden in heißem Wasser gelöst und
die Lösung mit Ethanol versetzt. Vom ausgefallenen Natri
umchlorid wird abfiltriert und das Filtrat unter vermin
dertem Druck eingeengt. Durch mehrmaliges Behandeln mit
jeweils 30 ml heißem Aceton wird das gewünschte Produkt
extrahiert, das Aceton unter vermindertem Druck entfernt
und der Rückstand mit wenig Wasser aufgenommen und lyo
philisiert.
Ausbeute: 1,1 g = 53% d. Th.
Schmp.: 74°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,7 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1655; δNH 1550; νCOOH 1730 cm-1.
Ausbeute: 1,1 g = 53% d. Th.
Schmp.: 74°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,7 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1655; δNH 1550; νCOOH 1730 cm-1.
1 g Chloracetyl-sarkosyl-diglycin wird in 140 ml Met
hanol, p.a., unter Rühren und unter Schutzgas bei Raum
temperatur gelöst.
In einem Erlenmeyerkolben werden 0,8 g Thiobenzoesäure in
3 ml Methanol gelöst und mit Natriummethylat neutrali
siert. Diese Lösung wird unter Rühren und unter Schutz
gas-Atmosphäre langsam zur Ausgangslösung zugetropft und
noch weitere 12 Stunden gerührt. Man entfernt unter
vermindertem Druck das Lösungsmittel und nimmt den Rück
stand mit 2N HCl auf. Es wird abgesaugt und mit warmen
Wasser neutral gewaschen. Anschließend wäscht man noch
mit 20 ml Chloroform, 20 ml Acetonitril und 20 ml Ether
und trocknet den Rückstand unter vermindertem Druck.
Ausbeute: 0,83 g = 61% d.Th.
Schmp.: 134°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,8 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1620; δNH 1550 cm-1, νCOOH 1720 cm-1.
Ausbeute: 0,83 g = 61% d.Th.
Schmp.: 134°C
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,8 (Jodbedampfung)
IR (fest in KBr): νC=O 1620; δNH 1550 cm-1, νCOOH 1720 cm-1.
Die Abspaltung der Schutzgruppe nach dem üblichen Verfah
ren mit Natriummethylat führte zu einem stark verunrei
nigten Endprodukt. Das Mercaptoacetyl-sarkosyl-diglycin
ist nur zu etwa 25% enthalten. Neben einem nicht identi
fizierten Nebenprodukt entstehen bei dieser Verseifung in
der Hauptsache Mercaptoacetyl-sarkosin und Diglycin. Das
gewünschte Produkt wird nur in geringer Ausbeute erhal
ten.
0,08 mmol Substanz werden in 2 ml wasserfreiem Methanol
suspendiert, mit 2 mg Pd/CaCo₃ (5%) versetzt und bei
einem Wasserstoffdruck von 60 kPa unter Rühren mit einer
Lösung von 0,13 mmol Natriummethylat in 1 ml wasserfreiem
Methanol umgesetzt. Man rührt noch 15 min und neutrali
siert danach die Lösung mit methanolischem Dowex 50WX8.
Der Katalysator und das Harz werden abfiltriert, die
Substanz lyophilisiert und mit 2 ml Benzol extrahiert.
Anschließend wird das Benzol abgetrennt und die Substanz
aus Ethanol lyophilisiert.
Ausbeute: 10,2 mg = 61% d. Th., farbloses Öl
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,4 (Ninhydrin)
RP 18//Methanol
Rf = 0,8 (Ninhydrin)
IR (fest in KBr): νC=O 1650, 1680; δNH 1550, νCOOH 1745 cm-1
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 2,8 (SH, 1H), δ 3,0 (N-CH₃, 3H), δ 3,5- 4,1 (-CH₂, 8H), δ 8,1-8,2 (CO-NH-, 2H)
Ausbeute: 10,2 mg = 61% d. Th., farbloses Öl
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1
Rf: 0,4 (Ninhydrin)
RP 18//Methanol
Rf = 0,8 (Ninhydrin)
IR (fest in KBr): νC=O 1650, 1680; δNH 1550, νCOOH 1745 cm-1
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 2,8 (SH, 1H), δ 3,0 (N-CH₃, 3H), δ 3,5- 4,1 (-CH₂, 8H), δ 8,1-8,2 (CO-NH-, 2H)
1 ml 99mTc-Gluconatlösung wird mit einer Lösung von 0,4
mg Reinsubstanz aus Vorstufe 4, in 0,5 ml Wasser, ver
setzt. Nach 30 min ist die Umsetzung vollständig.
DC: (Kieselgel 60, 95% Ethanol):
Zwei Komponenten Rf 0-0,1 (40%), Rf 0,8 (60%)
Elektrophorese (pH 7,0):
Beide Komponenten wandern als Anionen.
DC: (Kieselgel 60, 95% Ethanol):
Zwei Komponenten Rf 0-0,1 (40%), Rf 0,8 (60%)
Elektrophorese (pH 7,0):
Beide Komponenten wandern als Anionen.
0,0048 mol Chloracetyl-diglycin werden mit 0,05 mol
Hexylamin und 5 ml Ethanol versetzt und stehen gelassen.
Nach 6 Tagen wird das Lösungsmittel unter vermindertem
Druck entfernt. Der ölige Rückstand wird in 50 ml Aceton
gegeben und erhitzt. Nach dem Abkühlen wird die gelbe
Lösung abgetrennt und der weiße Rückstand nochmals mit
ca. 5 ml Aceton gewaschen. Das Produkt wird auf dem
Tonteller getrocknet.
Ausbeute: 610,5 mg (47% d. Th.)
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,3 (Ninhydrin)
RP 18//Methanol, Rf: 0,7 (Ninhydrin).
Ausbeute: 610,5 mg (47% d. Th.)
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,3 (Ninhydrin)
RP 18//Methanol, Rf: 0,7 (Ninhydrin).
0,0022 mol Hexylglycyl-diglycin werden in 5 ml 1N Natron
lauge gelöst und 30 min bei Raumtemperatur gerührt.
Anschließend wird die Lösung gekühlt. Bei 0°C werden
abwechselnd innerhalb von 30 min 0,3 ml Chloracetylchlo
rid und 4 ml 1N Natronlauge zugegeben. Dann wird noch 30
min ohne Kühlung gerührt.
Nach dem Ansäuern mit 5N Salzsäure wird das Lösungsmittel
unter vermindertem Druck entfernt und das Produkt als
gelbes Öl gewonnen. Nach mehrmaligem Extrahieren mit
jeweils 100 ml heißem Aceton wird das Aceton unter ver
mindertem Druck entfernt und der Rückstand mit 30 ml
Aceton aufgeschlämmt. Der weiße Bodensatz wird auf dem
Tonteller getrocknet.
Ausbeute: 311 mg (40% d.Th.)
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung).
Ausbeute: 311 mg (40% d.Th.)
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,75 (Jodbedampfung).
0,00089 mol Chloracetyl-hexylglycyl-diglycin werden in 70
ml Methanol (spezialrein für Mikroelektronik) gelöst und
unter Schutzgas (N₂) gerührt. 0,002 mol Thiobenzoesäure
werden in 5 ml Methanol gelöst und mit 0,4 ml Na-Methano
lat neutralisiert. Diese Lösung wird unter Schutzgas
langsam zugegeben und noch 12 Stunden weitergerührt. Das
Methanol wird unter vermindertem Druck entfernt und der
Rückstand mit 2N HCl aufgenommen. Die Salzsäure wird
ebenfalls unter vermindertem Druck entfernt, der Rück
stand mit Wasser gewaschen und das Waschwasser durch
Abdekantieren entfernt. Der zähflüssige Rückstand wird
mit wenig Methanol versetzt und das Produkt fällt aus. Es
wird mit Acetronitril gewaschen und auf dem Tonteller
getrocknet.
Ausbeute: 253, 3 mg (67% d. Th.)
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,8 (UV).
Ausbeute: 253, 3 mg (67% d. Th.)
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,8 (UV).
0,064 (28,8 mg) mmol Benzoylmercaptoacetyl-hexylglycyl-
diglycin werden in 2 ml Methanol suspendiert, 2,7 mg 5%
Pd/CaCO3 zugegeben und an der Hydrierapparatur ange
bracht. In einem Winkelkolben werden 0,04 ml Na-Methano
lat und 1 ml Methanol gegeben. Die Apparatur wird evaku
iert und anschließend mit Wasserstoff gespült.
Das Methanolat wird zugegeben und bei einem Wasserstoff
druck von 60 kPa noch 15 min gerührt. Die Lösung wird mit
methanolischem Dowex 50WX8 angesäuert, das Harz über
einen Faltenfilter abfiltriert (Argonglocke), mit
Methanol gewaschen und anschließend lyophilisiert. Der
Rückstand wird dreimal mit jeweils 4 ml Benzol extra
hiert, das Benzol durch Dekantieren entfernt, der Rück
stand erneut in Methanol aufgenommen und lyophilisiert.
Das Produkt wurde über eine Sephadex-Säule gereinigt.
Ausbeute: 9,8 mg (42% d. Th.)
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,5 (Ninhydrin)
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 1,2 (-CH3, 3H), δ 3,1 (SH, 1H), δ 3,2 (N-CH2, 1OH), δ 3,7 (-CH2, 6H), δ 3,8 (CH2-SH, 2H) δ 8,2-8,5 (-NH, 2H).
Ausbeute: 9,8 mg (42% d. Th.)
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,5 (Ninhydrin)
¹H-NMR (DMSO) TMS δ 1,2 (-CH3, 3H), δ 3,1 (SH, 1H), δ 3,2 (N-CH2, 1OH), δ 3,7 (-CH2, 6H), δ 3,8 (CH2-SH, 2H) δ 8,2-8,5 (-NH, 2H).
1 ml 99mTc-Gluconatlösung wird mit 400 µl 0,1 N NaOH und
30 µl Vorstufe 4 Lösung - 1,63 mg/100 µl Wasser - ver
setzt. Nach 40 minütigem Stehenlassen wird der Reaktions
ansatz mit 2 ml einer 0,1 M Natriumphosphatpufferlösung
(pH 7,0) neutralisiert. Die Reaktionsmischung ist
mindestens 2 Stunden lang stabil.
DC (Kieselgel 60; 95% Ethanol)
Rf: 0,7 (95%)
Elektrophorese (pH 7,0): Wanderung als Anion
DC (Kieselgel 60; 95% Ethanol)
Rf: 0,7 (95%)
Elektrophorese (pH 7,0): Wanderung als Anion
99,9 GBq (2,7 mCi) der nach Beispiel 4 markierten Sub
stanz wurde mit phosphatgepufferter Saline auf 1 ml
verdünnt und einem narkotisierten WHHL-Kaninchen Rom
pun/Ketavet (1 : 2) über eine Ohrvene appliziert. 5 Stunden
nach Applikation wurde das Kaninchen getötet und sowohl
eine Autoradiographie der Aorta als auch eine Sudan III-
Färbung zur Darstellung der atherosklerotischen Plaques
durchgeführt (Abb. 1). Der Anreicherungsfaktor
zwischen normalen und atherosklerotischen Wandbereichen
betrug je nach Ausbildung der Plaques (Sudan III-Färbung)
zwischen 3 und 5. Die In-vivo-Darstellung eines WHHL-
Kaninchens ist in Abb. 2 dargestellt.
200 mg S-Bzl-acetyl-Sar-Gly-Gly-OH und 161 mg Benzotria
zol-1-yl-tetramethyl-uronium-tetrafluoroborat wurden in 1
ml N-Methylpyrrolidon gelöst und 172 µl Diisopropyl
ethylamin addiert. Nach 3 min wird die farblose Lösung zu
einer gerührten Lösung von 120 mg 8α-Amino-ergolin
getropft. Die rotbraune Lösung wird bei Raumtemperatur
noch 4 Stunden gerührt, wobei der Fortgang der Reaktion
HPLC-chromatographisch an einer VYDAC C18 Säule (4,6 ×
250 mm) unter Anlegung eines Gradienten von 10% auf 60%
B in 25 min verfolgt wurde (Laufmittel A 1000 ml Wasser/2
ml Trifluoressigsäureanhydrid, Laufmittel B 500 ml
Acetonitril/100 ml Wasser/1 ml Trifluoressigsäureanhy
drid).
Der Reaktionsansatz wird ohne weitere Vorbehandlung
präparativ an einer VYDAC-Säule (40 × 300 mm) unter
Anlegung eines Gradienten von 20% auf 30% B in 20 min
getrennt (Laufmittelzusammensetzung wie oben angegeben).
Anschließend wird lyophilisiert.
Ausbeute: 75 mg
Ein Massenspektrum zeigte das erwartete Molekulargewicht.
Ausbeute: 75 mg
Ein Massenspektrum zeigte das erwartete Molekulargewicht.
60 mg S-Bzl-acetyl-[N1-Hexyl]-Gly-Gy-Gly-OH und 40 mg
Benzotriazol-1-yl-tetramethyl-uronium-tetrafluoroborat
wurden in 0,6 ml N-Methylpyrrolidon suspendiert und durch
Zugabe von 17,2 µl Diisopropylethylamin in Lösung ge
bracht. Diese Lösung wurde zu einer Lösung von 30 mg 8α-
Amino-ergolin in 0,4 ml N-Methylpyrrolidon getropft. Nach
4 Stunden wurde die Reaktionslösung aufgearbeitet. Die
rohe Reaktionsmischung wurde präparativ chromatographiert
(wie für Beispiel 5 beschrieben). Anschließende Lyophili
sierung ergab das gewünschte Produkt.
Ausbeute: 30 mg eines pseudokristallinen Produktes.
Das Massenspektrum zeigte das erwartete Molekulargewicht.
Ausbeute: 30 mg eines pseudokristallinen Produktes.
Das Massenspektrum zeigte das erwartete Molekulargewicht.
180 mg S-Bzl-acetyl-Sar-Gly-OH und 161 mg Benzotriazol-1-
yl-tetramethyl-uronium-tetrafluoroborat wurden in 1 ml N-
methyl-pyrrolidon gelöst und 172 µl Diisopropylethylamin
addiert. Nach 3 min wird die farblose Lösung unter Rühren
zu einer Lösung von 120 mg 8α-Amino-ergolin getropft. Die
rotbraune Lösung wird bei Raumtemperatur noch 4 Stunden
gerührt und - wie bei Beispiel 5 beschrieben -
aufgearbeitet und chromatographiert.
Ausbeute: 70 mg (Pseudokristallin)
Ein MS zeigte den erwarteten Peak.
Ausbeute: 70 mg (Pseudokristallin)
Ein MS zeigte den erwarteten Peak.
120 mg S-Bzl-acetyl-Sar-OH und 161 mg Benzotriazol-1-yl-
tetramethyl-uronium-tetrafluoroborat wurden in 1 ml N-
methyl-pyrrolidon gelöst und 172 µl Diisopropylethylamin
addiert.
Man setzt dann analog Beispiel 5 um und erhält nach
Aufarbeiten und Trennen 52 mg einer pseudokristallinen
Verbindung.
Ein MS zeigt den erwarteten Massenpeak.
Man fügt zu einer Suspension von 130,0 mg 17β-Hydroxy-
17α-iodvinyl-1,3,5-estratrien-3-tetrahydropyranyl
ether, 0,35 g [S-Benzoyl-thioacetyl-sarkosyl-glycyl
propargylamid], 11,0 mg Benzyl-triethyl-ammoniumchlorid,
11,5 mg Tetrakis-(triphenylphosphin)palladium (0), 9 mg
Kupfer-(I)-iodid, in 5 ml Toluol suspendiert und rührt 90
Stunden bei Raumtemperatur. Man versetzt mit Wasser,
extrahiert mit Toluol und trocknet. Das Lösemittel wird
unter vermindertem Druck entfernt, der Rückstand in 10 ml
Tetrahydrofuran aufgenommen, mit 190 mg Pyridinium
paratoluolsulfonsäure in 5 ml Ethanol versetzt und 3
Stunden unter Rückfluß erhitzt. Anschließend wird das
Lösungsmittel unter vermindertem Druck entfernt und man
reinigt mit Methylenchlorid/Methanol (8 : 1) an einer
Silicagelsäule.
Ausbeute: 30% d. Th.
Die Substanz zeigt im DC (CH₂Cl₂/MeOH] 5 : 5 einen Rf von 0,4.
Ausbeute: 30% d. Th.
Die Substanz zeigt im DC (CH₂Cl₂/MeOH] 5 : 5 einen Rf von 0,4.
Man fügt zu einer Suspension von 110 mg 17β-Hydroxy-17α-
propargyl-amino-1,3,5-estratrien-3-tetrahydropyranyl
ether, in 3 ml DMF 350 mg S-Benzoyl-thioacetyl-sarkosyl-
glycin in 3 ml DMF. Man rührt bei 100°C 24 Stunden unter
Schutzgas.
Nach Zugabe von 10 ml Tetrahydrofuran, saugt man vom
Kristallisat ab und engt unter vermindertem Druck ein.
Der Rückstand wird in 20 ml Tetrahydrofuran aufgenommen,
mit 100 mg Pyridinium-para-toluolsulfonsäure in 3 ml
Ethanol gelöst, versetzt und 1 Stunde unter Rückfluß
erhitzt. Nach Entfernen des Lösemittels wird an Silica
gel-Niederdrucksäule im System Methanol/Methylenchlorid
(1 : 8) gereinigt.
Die Substanz zeigte im DC (CH₂Cl₂/MeOH) 5 : 5 einen Rf
von 0, 6.
Ausbeute: 71 mg
Ausbeute: 71 mg
0,001 mol S-Bzl-acetyl-Sar-Gly-OH und 322 mg Benzotria
zol-1-yl-tetramethyl-uroniumtetrafluoroborat werden in 3
ml DMF gelöst unter Zugabe von 344 µl Diisopropylethyla
min. Es wird zur Bildung des Benzotriazolylesters 5
Minuten voraktiviert und anschließend die klare Lösung zu
33 mmol geschütztem His(Trt)-Leu-Asp(OBut)-Ile-Ile-Trp-
Harz addiert. Die Suspension wird eine Stunde gerührt,
anschließend mehrfach mit DMF gewaschen, abgesaugt und
getrocknet. Das getrocknete Harz wird dann wie üblich mit
TFA/Scavanger behandelt, um das Produkt von den Schutz
gruppen zu befreien. Die Reinigung wird wie für Beispiel
5 beschrieben ausgeführt.
Die nach Beispiel 10 erhaltene Verbindung wird nach dem
als allgemeine Methode (Beispiel 1) angegebenen Verfahren
mit 99mTc komplexiert.
0,010 mol His(Trt)-Leu-Asp(OBut)-Ile-Ile-Trp-OH, herge
stellt am Sasrin-Harz, werden in einem Gemisch aus
DMF/NMP unter Zugabe von 0,010 mol Diisopropylethylamin
gelöst und unter Rühren mit 0,010 mol S-Bzl-acetyl-Sar-
OH, vorbereitet wie unter Beispiel 11, gelöst in 3 ml DMF
versetzt. Es wird 2 Stunden gerührt und anschließend das
Lösungsmittel entfernt. Der verbleibende Rückstand wird
mit Wasser verrührt und abgesaugt, gewaschen und getrock
net. Die Schutzgruppen werden wie üblich entfernt und das
Produkt durch Eingießen in Ether erhalten. Die Reinigung
wird wie für Beispiel 5 beschrieben ausgeführt.
10 g Glycinanhydrid werden in einem 250 ml Dreihalskolben
in 50 ml 2N Natronlauge bei Raumtemperatur gelöst. Nach
45 min wird die noch etwas trübe Lösung auf etwa 0°C
abgekühlt und 11,1 g (7,8 ml) Chloracetylchlorid und 24
ml 5N Natronlauge im Wechsel unter Rühren zugetropft.
Nach 45 min ist die Zugabe beendet. Die Lösung färbt sich
leicht rosa. Anschließend werden 40 ml 5N Salzsäure
zugegeben, wobei sich die Lösung entfärbt und die Sub
stanz zu kristallisieren beginnt. Man läßt noch ca.
1 Stunde bei 0°C stehen und saugt den Niederschlag ab.
Er wird mehrmals mit kaltem Wasser gewaschen und aus
heißem Wasser umkristallisiert.
Ausbeute: 5 g
Schmp. : 173-174°C.
Ausbeute: 5 g
Schmp. : 173-174°C.
Die Mutterlauge wird unter vermindertem Druck eingeengt
und der Rückstand wird ebenfalls aus Wasser umkristalli
siert.
Ausbeute: 2,5 g
Schmp.: 173 °C
Gesamtausbeute: 7,5 g = 41% d.Th.
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1.
Ausbeute: 2,5 g
Schmp.: 173 °C
Gesamtausbeute: 7,5 g = 41% d.Th.
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 4 : 1 : 1.
0,0144 mol Chloracetyldiglycin werden mit 0,029 mol 4-
Bromanilin in 20 ml Ethanol und 20 ml 1N NaOH 7 Stunden
am Rückfluß erhitzt. Nach Entfernen des Lösungsmittels
unter vermindertem Druck wird der verbleibende Rückstand
dreimal mit je 50 ml warmen Aceton extrahiert. Das zu
rückbleibende Produkt wird aus heißem Wasser umkristalli
siert. Das Rohprodukt wird in Stufe 3 eingesetzt.
Ausbeute: ca. 60%.
Ausbeute: ca. 60%.
0,01 mol 4-Bromphenyl-triglycin werden in 10 ml 1N NaOH
bei Raumtemperatur gelöst und dann bei 0°C unter Rühren
abwechselnd mit 0,012 mol Chloracetylchlorid und 20 ml 1N
NaOH innerhalb von 30 min versetzt. Man läßt weitere 30
min rühren, säuert mit 5N HCl an und engt das Produkt
unter vermindertem Druck zur Trockne ein. Die dabei
anfallenden Kristalle werden in heißem Wasser gelöst und
die Lösung mit Ethanol versetzt. Das ausfallende Natrium
chlorid wird abfiltriert und das Filtrat am Rotationsver
dampfer eingeengt. Durch mehrmaliges Behandeln mit
jeweils 30 ml heißem Aceton wird das gewünschte Produkt
extrahiert, das Aceton unter vermindertem Druck entfernt
und der Rückstand mit wenig Wasser aufgenommen und lyo
philisiert.
Ausbeute: 50% d.Th.
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0, 6.
Ausbeute: 50% d.Th.
DC: Silufol//n-Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0, 6.
0,01 mol des Chloracetylproduktes werden in 140 ml
Methanol unter Rühren und Schutzgas bei Raumtemperatur
gelöst. Hierzu werden 0,02 mol Thiobenzoesäure in 20 ml
Methanol gelöst und mit Natriummethylat neutralisiert,
unter Rühren und unter Schutzgas langsam zugetropft und
noch weitere 12 Stunden gerührt. Man entfernt das Lö
sungsmittel unter vermindertem Druck und nimmt den Rück
stand mit 2N HCl auf. Die dabei anfallenden Kristalle
werden abgesaugt und mit warmem Wasser neutral gewaschen.
Anschließend wäscht man noch mit 20 ml Chloroform, 20 ml
Acetonitril und 20 ml Ether und trocknet den Rückstand
unter vermindertem Druck.
Ausbeute: 60% d.Th.
Ausbeute: 60% d.Th.
0,08 mmol Substanz von Stufe 4 werden mit 2 ml wasser
freiem Methanol suspendiert, mit 2 mg Pd/CaCO3 (5%) ver
setzt und bei einem Wasserstoffdruck von 66 kPa unter
Rühren mit einer Lösung von 0,13 mmol Natriummethylat in
1 ml absolutem Methanol umgesetzt. Man rührt noch 15 Min
und neutralisiert danach die Lösung mit methanolischem
Dowex 50WX8. Der Katalysator und das Harz werden abfil
triert, die Substanz lyophilisiert und mit 2 ml Benzol
extrahiert. Anschließend wird das Benzol abgetrennt und
die Substanz aus Ethanol lyophilisiert. Die Reinigung
erfolgt mittels präparativer HPLC.
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,8
Ausbeute: 40% d.Th.
DC: Silufol//Butanol/Eisessig/Wasser 2 : 1 : 1
Rf: 0,8
Ausbeute: 40% d.Th.
Wie zur allgemeinen Komplexierung vor Beispiel 1 be
schrieben, wird Thio-acetyl-[N¹-Bromphenyl]-Gly-Gly-Gly-
OH mit einer [99mTc]-Gluconat-Präparation umgesetzt.
Claims (19)
1. Verbindungen der allgemeinen Formel I
R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)worin
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxyl, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzo diazepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Peptid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II oder der allgemeinen Formel IIa ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III oder der allgemeinen Formel IIIa darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen.
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxyl, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzo diazepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Peptid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II oder der allgemeinen Formel IIa ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III oder der allgemeinen Formel IIIa darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen bedeuten,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen.
2. Verbindungen nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet,
daß R¹ ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest
mit 1 bis 6 Kohlenstoffatomen oder ein p-Bromphenyl
rest ist.
3. Verbindungen nach mindestens einem der Ansprüche 1 und
2, dadurch gekennzeichnet, daß R² eine OH- oder CH₃-O-
Gruppe darstellt.
4. Verbindungen nach mindestens einem der Ansprüche 1 und
2, dadurch gekennzeichnet, daß R² ein Rest der allge
meinen Formel II
oder der allgemeinen Formel IIa
ist, wobei
R⁴ eine Methylen- oder Propinylenaminogruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom bedeutet.
R⁴ eine Methylen- oder Propinylenaminogruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom bedeutet.
5. Verbindungen nach mindestens einem der Ansprüche 1 und
2, dadurch gekennzeichnet, daß R² ein Rest der allge
meinen Formel III
oder der allgemeinen Formel IIIa
ist, wobei
R⁵ eine NH-Gruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ einen Methyl-, Ethyl- oder n-Propylrest darstel len.
R⁵ eine NH-Gruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ einen Methyl-, Ethyl- oder n-Propylrest darstel len.
6. Verbindungen nach mindestens einem der Ansprüche 1 bis
5, dadurch gekennzeichnet, daß R³ ein Wasserstoffatom
oder ein Benzoylrest ist.
7. Verbindungen nach Anspruch 1, nämlich
17α-[5-(Mercapto-acetyl-sarkosyl-glycyl-amino-1- penten-3-inyl]estra-1,3,5(10)-trien-3,17β-diol,
6-N-Methyl-8α-amino-[8α-N-(thio-acetyl-sarkosyl- glycyl-glycyl)]ergolin,
6-N-Methyl-8α-amino-[8α-N-(thio-acetyl-sarko syl)]ergolin,
6-N-Methyl-8β-hydroxymethylen-[O-(thio-acetyl-sarko syl-glycyl-glycyl)]ergolin und
6-N-Methyl-8β-hydroxymethylen-[O-(thio-acetyl-sarko syl-glycyl]ergolin.
17α-[5-(Mercapto-acetyl-sarkosyl-glycyl-amino-1- penten-3-inyl]estra-1,3,5(10)-trien-3,17β-diol,
6-N-Methyl-8α-amino-[8α-N-(thio-acetyl-sarkosyl- glycyl-glycyl)]ergolin,
6-N-Methyl-8α-amino-[8α-N-(thio-acetyl-sarko syl)]ergolin,
6-N-Methyl-8β-hydroxymethylen-[O-(thio-acetyl-sarko syl-glycyl-glycyl)]ergolin und
6-N-Methyl-8β-hydroxymethylen-[O-(thio-acetyl-sarko syl-glycyl]ergolin.
8. Metallchelatkomplexe radioaktiver Metallionen der
Elemente Tc, Re, Cu, Ga, Gd, Y und In mit
Verbindungen der allgemeinen Formel I R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)worin
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxylgruppe, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodia zepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Pep tid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II oder der allgemeinen Formel IIa ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III oder der allgemeinen Formel IIIa darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen darstellt,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen.
Verbindungen der allgemeinen Formel I R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)worin
n eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet,
R¹ einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 20 Kohlenstoffatomen, welcher gegebenenfalls durch ein bis drei Sauerstoffatome unterbrochen oder substituiert ist, und welcher gegebenenfalls eine end ständige -COOH-, -OH- oder -NH₂-Gruppe trägt, welche gegebenenfalls mit Glykolsäure oder Glykolsäureestern oder -ethern verestert oder verethert ist,
wobei die Ester oder Ether mit Carbonsäuren oder Alkoholen mit bis zu 18 Kohlenstoffatomen gebil det werden,
oder einen Phenyl- oder Cyclohexylrest darstellt, wel cher gegebenenfalls in der 4-Position mit einer COOH-, NH₂- oder OH-Gruppe, welche gegebenenfalls mit Carbon säuren oder Alkoholen mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen verestert, verethert oder amidiert ist oder einem Halogenatom substituiert ist,
R² ein Halogenatom, eine Halogenmethyl-, Methyl carboxyl-, Trifluormethylcarboxylgruppe, eine NH₂- oder eine OH-Gruppe darstellt,
wobei die im Falle von R² = OH gebildete Carboxyl-Gruppe entweder unmittelbar oder nach Veresterung mit einer α,ω-Hydroxycarbonsäure mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen über deren endständi ge Carboxyl-Gruppe mit einem Biomolekül, einem Steroid, einem Ergolinderivat, einem Benzodia zepinderivat, einem Cholecystokinin, einem Pep tid, einem Protein, einem Proteohormon, einem Aminozucker, einem Endothelin, einem Endothelin- Derivat, einem Endothelin-Antagonisten oder ei nem Endothelinfragment verestert oder amidiert ist,
ein Rest der allgemeinen Formel II oder der allgemeinen Formel IIa ist, wobei
R⁴ eine Methylen-, Propenylenamino-, Propinylen amino-, Methylenamino- oder Methylenoxygruppe und
R⁸ ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe be deutet,
einen Rest der allgemeinen Formel III oder der allgemeinen Formel IIIa darstellt, worin
R⁵ eine -NH-, -NH-CO-N<, -NH-CO-NH- oder Methylen oxygruppe,
R⁶ ein Wasserstoffatom, ein Halogenatom oder eine Methylgruppe und
R⁷ ein Wasserstoffatom oder einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit bis zu 6 Kohlen stoffatomen darstellt,
R³ ein Wasserstoffatom, eine Acetyl-, Benzoyl-, p- Methoxybenzyl-, Acetamidomethyl-, Benzamidomethyl-, Trimethylacetamidomethyl-, Hydroxyacetyl-, Ethoxy ethyl-, Ethylthio-, Trityl- oder eine leicht abspalt bare Schwefelschutzgruppe bedeutet
und deren Salze mit pharmazeutisch annehmbaren Säuren oder Basen.
9. Metallchelatkomplexe nach Anspruch 8, dadurch gekenn
zeichnet, daß die radioaktiven Metallionen Isotope
der Elemente Tc und Re sind.
10. Metallchelatkomplexe nach mindestens einem der An
sprüche 8 und 9, dadurch gekennzeichnet, daß das
Radioisotop Technetium-99m ist.
11. Verbindungen nach Anspruch 8, nämlich
[99mTc]-Mercaptoacetylsarkosin,
[99mTc]-Mercaptoacetyl-sarkosyl-diglycin,
[99mTc]-Mercaptoacetyl-hexyglycyl-diglycin und
[99mTc]-Mercaptoacetyl-N¹-[4-Bromphenyl]-glycyl- glycyl-glycin.
[99mTc]-Mercaptoacetylsarkosin,
[99mTc]-Mercaptoacetyl-sarkosyl-diglycin,
[99mTc]-Mercaptoacetyl-hexyglycyl-diglycin und
[99mTc]-Mercaptoacetyl-N¹-[4-Bromphenyl]-glycyl- glycyl-glycin.
12. Konjugate, enthaltend Verbindungen der allgemeinen
Formel I oder Metallchelatkomplexe radioaktiver
Metallionen der Elemente Tc, Re, Cu, Ga, Gd, Y und In
mit Verbindungen der allgemeinen Formel I und sich
selektiv in erkrankten Geweben anreichernde Substan
zen, wobei zwischen diesen eine kovalente Bindung
besteht und diese im Falle von Carboxy- oder Amino
gruppen enthaltenden Substanzen wie Peptiden, Pro
teinen, Antikörpern oder deren Fragmenten, amidisch
oder im Falle von Hydroxygruppen enthaltenden Sub
stanzen wie Fettalkoholen, esterartig oder im Falle
von Aldehydgruppen enthaltenden Substanzen imidisch
vorliegt.
13. Konjugate nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,
daß die sich im erkrankten Gewebe anreichernden Sub
stanzen Peptide wie Endotheline, Teilsequenzen von
Endothelinen, Endothelin-Analoga, Endothelin-Derivate
oder Endothelin-Antagonisten bedeuten.
14. Konjugate nach Anspruch 12, dadurch gekennzeichnet,
daß die Peptide die folgenden Sequenzen
aufweisen.
15. Verfahren zur Herstellung einer Verbindung der allge
meinen Formel I, dadurch gekennzeichnet, daß man
- a) ein Diketopiperazinderivat des Glycins oder
- b) Glycin
mit einem Halogencarbonsäurehalogenid und
anschließend mit einem Amin der allgemeinen Formel VI
R¹-NH₂ (VI)wobei R¹ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat,
umsetzt, erneut mit einem Halogencarbonsäurehalogenid
umsetzt und anschließend mit einer Verbindung der
allgemeinen Formel IVR³-SH (IV)wobei R³ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat,
umsetzt
oder eine Verbindung der allgemeinen Formel VNH₂-CH₂-CO-R² (V)wobei R² die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, mit einem Halogencarbonsäurehalogenid und an schließend mit einem Amin der allgemeinen Formel VIR¹-NH₂ (VI)wobei R¹ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, umsetzt, erneut mit einem Halogencarbonsäurehalogenid umsetzt und anschließend mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IVR³-SH (IV)wobei R³ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, umsetzt und daß man diese Verbindung gegebenenfalls mit einer pharmazeutisch annehmbaren Säure oder Base in deren Salz überführt.
umsetzt
oder eine Verbindung der allgemeinen Formel VNH₂-CH₂-CO-R² (V)wobei R² die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, mit einem Halogencarbonsäurehalogenid und an schließend mit einem Amin der allgemeinen Formel VIR¹-NH₂ (VI)wobei R¹ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, umsetzt, erneut mit einem Halogencarbonsäurehalogenid umsetzt und anschließend mit einer Verbindung der allgemeinen Formel IVR³-SH (IV)wobei R³ die in Anspruch 1 angegebene Bedeutung hat, umsetzt und daß man diese Verbindung gegebenenfalls mit einer pharmazeutisch annehmbaren Säure oder Base in deren Salz überführt.
16. Verfahren zur Herstellung von Metallchelatkomplexen
radioaktiver Metallionen der Elemente Tc und Re mit
Verbindungen der allgemeinen Formel I, dadurch ge
kennzeichnet, daß Technetium-99m oder Re in Form von
Pertechnetat oder Perrhenat in Gegenwart eines Reduk
tionsmittels und gegebenenfalls eines Hilfsliganden
mit einer Verbindung der allgemeinen Formel I
R³-S-CH₂-CO-NR¹-[CH₂-CO-NH]n-CH₂-CO-R² (I)worin R¹, R² und R³ die in Anspruch 1 angegebene
Bedeutung haben, umgesetzt wird.
17. Kit zur Herstellung von Radiopharmaka, bestehend aus
einer Verbindung der allgemeinen Formel I gemäß einem
der Ansprüche 1 bis 7 oder einem Konjugat gemäß einem
der Ansprüche 12 bis 14, sowie einem Reduktionsmittel
und gegebenenfalls einem Hilfsliganden, die in
trockenem Zustand oder in Lösung vorliegen, sowie
einer Gebrauchsanweisung mit einer Reaktionsvor
schrift zur Umsetzung der beschriebenen Verbindungen
mit Technetium-99m oder Re in Form einer Pertech
netatlösung oder Perrhenatlösung.
18. Radiopharmazeutische Zusammensetzung zur nicht inva
siven in vivo Darstellung von Rezeptoren und rezept
orhaltigem Gewebe und/oder von atherosklerotischen
Plaques und/oder zur Nierenfunktionsprüfung, dadurch
gekennzeichnet, daß sie eine Verbindung nach einem
der Ansprüche 8 bis 10 oder einem Konjugat gemäß ei
nem der Ansprüche 12 bis 14 sowie gegebenenfalls mit
den in der Galenik üblichen Zusätzen enthält, wobei
die Verbindung in einem Kit nach Anspruch 17 mit
Technetium-99m oder Re in Form einer Pertechnetatlö
sung oder Perrhenatlösung zubereitet wird.
Priority Applications (11)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE4337600A DE4337600A1 (de) | 1993-11-01 | 1993-11-01 | N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen |
ZA948411A ZA948411B (en) | 1993-11-01 | 1994-10-26 | N-alkyl peptide chelating agents |
CA002173844A CA2173844A1 (en) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-alkyl peptide chelate formers, their metal complexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds |
AU81038/94A AU681919B2 (en) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-alkyl peptide chelate formers, their metal complexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds |
HU9601140A HUT74881A (en) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-alkyl peptide chelate formers, their metal comlexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compounds |
EP95900059A EP0726909A1 (de) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-alkyl-peptidchelatbildner, deren metallkomplexe mit radionukliden, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende radiopharmazeutische zusammensetzungen |
CN94193990A CN1134158A (zh) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-烷基肽螯合剂、它们与放射性核素的金属配合物、它们的制备方法及含有这些化合物的放射性药物 |
PCT/DE1994/001295 WO1995012610A1 (de) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N-alkyl-peptidchelatbildner, deren metallkomplexe mit radionukliden, verfahren zu ihrer herstellung und diese verbindungen enthaltende radiopharmazeutische zusammensetzungen |
JP7512959A JPH09508351A (ja) | 1993-11-01 | 1994-10-27 | N‐アルキルペプチドキレート化剤、その放射性核種との金属錯体、その製造方法、およびこの化合物を含む放射性医薬 |
KR1019960702247A KR960705842A (ko) | 1993-11-01 | 1996-04-30 | N-알킬 펩티드 킬레이트 형성제, 방사핵종을 갖는 그의 금속 착물, 이들의 제조방법 및 이들 화합물을 함유한 방사성의약 조성물(n-alkyl peptide chelate formers, their metal complexes with radionuclides, processes for producing them and radio-pharmaceutical compositions containing these compound) |
NO961743A NO961743D0 (no) | 1993-11-01 | 1996-04-30 | N-alkyl-peptid-chelatdannere, deres metallkomplekser med radionuklider, fremgangsmåte ved deres fremstilling og radiofarmasöytiske sammensetninger inneholdende disse forbindelser |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
DE4337600A DE4337600A1 (de) | 1993-11-01 | 1993-11-01 | N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
DE4337600A1 true DE4337600A1 (de) | 1995-05-04 |
Family
ID=6501750
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
DE4337600A Withdrawn DE4337600A1 (de) | 1993-11-01 | 1993-11-01 | N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen |
Country Status (11)
Country | Link |
---|---|
EP (1) | EP0726909A1 (de) |
JP (1) | JPH09508351A (de) |
KR (1) | KR960705842A (de) |
CN (1) | CN1134158A (de) |
AU (1) | AU681919B2 (de) |
CA (1) | CA2173844A1 (de) |
DE (1) | DE4337600A1 (de) |
HU (1) | HUT74881A (de) |
NO (1) | NO961743D0 (de) |
WO (1) | WO1995012610A1 (de) |
ZA (1) | ZA948411B (de) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5980860A (en) * | 1995-10-19 | 1999-11-09 | The Trustees Of University Of Pennsylvania | Dopamine and serotonin transporter ligands and imaging agents |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US6162378A (en) * | 1999-02-25 | 2000-12-19 | 3D Systems, Inc. | Method and apparatus for variably controlling the temperature in a selective deposition modeling environment |
US6171578B1 (en) | 1999-04-14 | 2001-01-09 | Diatide, Inc. | Benzodiazepine derivatives for imaging thrombi |
IL152450A0 (en) | 2000-05-12 | 2003-05-29 | Genzyme Corp | COMPOUNDS HAVING TNF-alpha SIGNAL MODULATING ACTIVITY |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
ZA811340B (en) * | 1980-06-09 | 1982-03-31 | Morton Norwich Products Inc | N-(cycloalkyl)amino acid compounds |
AU1995392A (en) * | 1991-05-08 | 1992-12-21 | Mallinckrodt Medical, Inc. | Technetium chelates to be used for determining the renal function |
JPH0570484A (ja) * | 1991-09-12 | 1993-03-23 | Hitachi Chem Co Ltd | ペプチドおよびその塩 |
EP0630264B1 (de) * | 1992-02-06 | 2002-11-06 | BioSynthema Inc. | Liganden zur verbesserung der metallchelatbildungskinetik |
CA2136330C (en) * | 1992-05-21 | 2002-03-19 | Richard T. Dean | Technetium-99m labeled peptides for thrombus imaging |
DE4311021A1 (de) * | 1993-03-31 | 1994-10-27 | Diagnostikforschung Inst | Bifunktionelle Chelatbildner, deren Technetium- und Rhenium-Komplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Mittel |
-
1993
- 1993-11-01 DE DE4337600A patent/DE4337600A1/de not_active Withdrawn
-
1994
- 1994-10-26 ZA ZA948411A patent/ZA948411B/xx unknown
- 1994-10-27 CA CA002173844A patent/CA2173844A1/en not_active Abandoned
- 1994-10-27 EP EP95900059A patent/EP0726909A1/de not_active Withdrawn
- 1994-10-27 HU HU9601140A patent/HUT74881A/hu unknown
- 1994-10-27 WO PCT/DE1994/001295 patent/WO1995012610A1/de not_active Application Discontinuation
- 1994-10-27 CN CN94193990A patent/CN1134158A/zh active Pending
- 1994-10-27 JP JP7512959A patent/JPH09508351A/ja active Pending
- 1994-10-27 AU AU81038/94A patent/AU681919B2/en not_active Ceased
-
1996
- 1996-04-30 KR KR1019960702247A patent/KR960705842A/ko not_active Application Discontinuation
- 1996-04-30 NO NO961743A patent/NO961743D0/no unknown
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5980860A (en) * | 1995-10-19 | 1999-11-09 | The Trustees Of University Of Pennsylvania | Dopamine and serotonin transporter ligands and imaging agents |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPH09508351A (ja) | 1997-08-26 |
ZA948411B (en) | 1995-06-30 |
NO961743L (no) | 1996-04-30 |
HU9601140D0 (en) | 1996-07-29 |
KR960705842A (ko) | 1996-11-08 |
WO1995012610A1 (de) | 1995-05-11 |
AU681919B2 (en) | 1997-09-11 |
HUT74881A (en) | 1997-02-28 |
CA2173844A1 (en) | 1995-05-11 |
AU8103894A (en) | 1995-05-23 |
NO961743D0 (no) | 1996-04-30 |
CN1134158A (zh) | 1996-10-23 |
EP0726909A1 (de) | 1996-08-21 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0417870B1 (de) | Chelatbildner zur Komplexierung von radioaktiven Isotopen, deren Metallkomplexe sowie ihre Verwendung in Diagnostik und Therapie | |
DE69738353T2 (de) | Radiometall-bindende peptide analoge | |
DE69434384T2 (de) | Metalkomplexbildner | |
JPH04505022A (ja) | 診断または治療に使用する放射性同位元素で標識した蛋白質 | |
EP0692976B1 (de) | Chelatbildner vom typ xn 1?s 1?o 1? für radioaktive isotope, deren metallkomplexe und ihre verwendung in diagnostik und therapie | |
DE19536781A1 (de) | Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ XSNS für radioaktive Isotope | |
EP0304780A1 (de) | Verfahren zur Markierung von Substanzen mit Technetium oder Rhenium | |
DE19536783A1 (de) | Bifunktionelle Nicotinamid-Chelatbildner vom Typ N¶2¶S¶2¶ für radioaktive Isotope | |
DE4311021A1 (de) | Bifunktionelle Chelatbildner, deren Technetium- und Rhenium-Komplexe, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Mittel | |
DE19536785A1 (de) | Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ S¶2¶NY für radioaktive Isotope | |
DE69333611T2 (de) | Radiomarkierte mehrwertige phenolverbindungen | |
DE4337600A1 (de) | N-Alkyl-Peptidchelatbildner, deren Metallkomplexe mit Radionukliden, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese Verbindungen enthaltende radiopharmazeutische Zusammesetzungen | |
EP1923382A1 (de) | [F-18] markierte L-Glutaminsäure, [F-18] markiertes Glutamin, ihre Derivate und ihre Verwendung sowie Verfahren zu ihrer Herstellung | |
DE60223729T2 (de) | Verbindungen zur diagnose und überwachung von erkrankungen in zusammenhang mit der bildung von amyloidfibrillen | |
EP0692981B1 (de) | Chelatbildner vom typ xn 1?s 1?x' für radioaktive isotope, deren metallkomplexe und ihre verwendung in diagnostik und therapie | |
EP0692980B1 (de) | Chelatbildner vom typ s3n2 für radioaktive isotope, deren metallkomplexe und ihre verwendung in diagnostik und therapie | |
DE4425781A1 (de) | Technetium-Sulfonamid-Komplexe, deren Verwendung, diese enthaltende pharmazeutische Mittel, sowie Verfahren zur Herstellung der Komplexe und Mittel | |
JPH05148283A (ja) | テクネチウム−およびレニウムキレート、それを含有する診断剤、それを含有する腫瘍治療のための医薬品およびその製造方法 | |
Baldwin et al. | Structure-activity relationships of 123 I labeled o-iodobenzamide derivatives | |
DE69824147T2 (de) | Technetium-99m markierte Diäthylentriaminpentaessigsäure-Diester und Verfahren zu deren Herstellung | |
DE2142422C3 (de) | Derivate des Digoxigenins, Verfahren zu ihrer Herstellung und deren Verwendung zur radioimmunologischen Bestimmung von Digoxin | |
DE19536780A1 (de) | Bifunktionelle sulfidhaltige Sulfonamid-Chelatbildner vom Typ XSNY für radioaktive Isotope | |
WO1994023757A1 (de) | Verwendung von cyclopentadienylcarbonyl-übergangsmetall-carbonsäuren und deren derivaten zur markierung von proteinen | |
DE2142422B2 (de) | Derivate des Digoxigenins, Verfahren zu ihrer Herstellung und deren Verwendung zur radioimmunologischen Bestimmung von Digoxin |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
8110 | Request for examination paragraph 44 | ||
8130 | Withdrawal |