DE422951T1 - Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I. - Google Patents
Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I.Info
- Publication number
- DE422951T1 DE422951T1 DE90311190T DE90311190T DE422951T1 DE 422951 T1 DE422951 T1 DE 422951T1 DE 90311190 T DE90311190 T DE 90311190T DE 90311190 T DE90311190 T DE 90311190T DE 422951 T1 DE422951 T1 DE 422951T1
- Authority
- DE
- Germany
- Prior art keywords
- restriction endonuclease
- hpa
- dna
- vector
- pbiihi
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 title claims 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims 2
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 claims 10
- 241000606766 Haemophilus parainfluenzae Species 0.000 claims 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims 8
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims 8
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims 6
- 239000013599 cloning vector Substances 0.000 claims 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims 4
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims 4
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 claims 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 claims 3
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 claims 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims 2
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 claims 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 claims 1
- 238000001712 DNA sequencing Methods 0.000 claims 1
- 102000004533 Endonucleases Human genes 0.000 claims 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 claims 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 claims 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 claims 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/10—Transferases (2.)
- C12N9/1003—Transferases (2.) transferring one-carbon groups (2.1)
- C12N9/1007—Methyltransferases (general) (2.1.1.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/22—Ribonucleases RNAses, DNAses
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Claims (19)
1. Eine DNA-Sequenz, erhältlich aus Haemophilus parainfluenzae,
welche eine Hpa I Restriktionsendonuklease und eine Hpa I Modifikationsmethylase kodiert.
2. Ein Vektor, welcher die DNA-Sequenz gemäß Anspruch 1 enthält.
3. Ein Vektor, enthaltend die DNA-Sequenz: 5'AAG CTT TAG TCG AAT TAG AAC TGC ATA TGT TAA AGA CCC TAA TTT TAT
TTT TAT AAT ATT ATC CAT AAA ACA CAG TGT ATA TGT AAA AGA AAT GAA TAC ACA AAT TAA TGG ATG GAA TAA TGC AAA TAT TGA
CTT TAA TGT TTA TGA TTT AAA GTA TAT ATC TGA TTC AGA CAT AAG TTA TAC CCA GCA TAG G 3'.
4. Der Vektor p(pBIIHI.2)HpaIRM-7.5-AlO.
5. Der Vektor p(pBIIHI.2KI)HpaIRM-10.5-45.
6. Der Vektor &rgr;(pBIIHI.2)HpaIRM-7.4-13.
7. Der Vektor &rgr;(pBIIHI.2)HpaIRM-7.4-2.
30
30
8. Ein mikrobieller Wirt, transformiert durch den Vektor gemäß Anspruch 2, 3, 4, 5, 6 oder 7.
9. Eine rekombinante Restriktionsendonuklease, erhältlich \
aus Haemophilus parainfluenzae, welche die DNA-Sequenz
GTTAAC erkennt und die Sequenz zwischen dem zweiten 5' T und dem ersten 5' A Rest spaltet.
10. Eine rekombinante Modifikationsmethylase, erhältlich
aus Haemophilus parainfluenzae, welche DNA vor Verdau
durch die Restriktionsendonuklease gemäß Anspruch 9 schützt.
11. Ein Verfahren zum Klonieren eines Hpa I Restriktionsendonukleasegenes,
welches umfaßt:
(a) Bilden einer Bibliothek aus Genom DNA aus Haemophilus parainfluenzae;
(b) Isolieren von Klonen, welche das Gen enthalten, welches die Hpa I Modifikationmethylase kodiert;
(c) Reinigen und Sequenzieren des Restriktionsendonukleaseproteines;
(d) Bestimmen der Orientierung der Restriktionsendonuklease durch DNA Sequenzierung,
Bestimmung des Ortes der Restriktionsendonuklease in dem Modifikationsmethylaseklon und
bestimmen des Ortes der Restriktionsendonuklease auf dem Haemophilus parainfluenzae-Genom;
25
25
(e) Bilden einer Bibliothek, basierend auf den Daten, welche aus den Schritten (b) - (d) erhalten
wurden; und
(f) Isolieren von Klonen, welche die Hpa I
Modifikationsmethylase- und Restriktionsendonukleasegene
enthalten.
12. Das Verfahren nach Anspruch 11, wobei die Bibliothek gebildet wird durch die Schritte:
(a) Reinigen von Genom DNA aus Haemophilus parainfluenza;
(b) Verdauen der gereinigten DNA, um DNA Fragmente zu bilden;
(c) Ligieren der Fragmente in einen Klonierungsvektor;
(d) Transformieren eines mikrobiellen Wirtes mit dem
Klonierungsvektor, um eine Zellbibliothek zu bilden; und
(e) Reinigen von rekombinanten Vektoren aus der Zellbibliothek, um eine Plasmidbibliothek zu
bilden.
13. Das Verfahren nach Anspruch 12, wobei der Klonierungsvektor pBIIHI.2, pBIIHI.2KI, pBIlOl, pUC19, pACYC184,
pACYC177, pBR322, ist.
14. Das Verfahren nach Anspruch 12, wobei der mikrobielle Wirt ein Escherichia coli Stamm ist, welcher mrr~ ist.
15. Das Verfahren nach Anspruch 12, wobei der Klon, welcher das Modifikationsmethylasegen enthält, isoliert wird
durch Verdauung der Plasmidbibliothek mit Hpa I, um einen Verdauungspool zu bilden, Übertragen des Verdauungspooles
in einen mikrobiellen Wirt und Auswählen von Klonen, welche die Modifikationsmethylase enthalten.
16. Ein Verfahren zum Herstellen der Hpa I Restriktionsendonuklease,
welches Exprimieren eines Genes gemäß irgendeinem der Ansprüche 2 bis 8 oder Reinigen der Endonuklease
aus Haemophilus parainfluenzae, umfaßt.
17. Ein Verfahren zum Herstellen von Hpa I Restriktionsendonuklease,
welches umfaßt:
(a) Reinigen von DNA aus Haemophilus parainfluenzae;
5
5
(b) Verdauen der gereinigten DNA mit einer geeigneten Restriktionsendonuklease, um DNA Fragmente
zu bilden;
(c) Ligieren der Fragmente in einen Klonierungsvektor,
um eine DNA Mischung zu bilden;
(d) Transformieren eines mikrobiellen Wirtes mit der DNA Mischung, um eine Bibliothek zu bilden;
(e) Isolieren von Klonen, welche das Hpa I Modifxkationsmethylasegen enthalten;
(f) Testen der Klone und Isolieren von Klonen daraus, welche ebenfalls das Hpa I Restriktions-
endonukleasegen enthalten;
(g) Kultivieren des mikrobiellen Wirtes, welcher die Klone gemäß Schritt (f) enthält; und
(h) Gewinnen von Hpa I Restriktionsendonuklease aus der Kultur.
18. Das Verfahren nach Anspruch 17, wobei der Klonierungsvektor ein Plasmid- oder ein virales DNA Molekül ist.
19. Das Verfahren nach Anspruch 18, wobei das Plasmid pUC19, pBIIHI.2 oder pBIIHI.2KI ist.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US07/421,272 US5298404A (en) | 1989-10-13 | 1989-10-13 | Method for producing the Hpa I restriction endonuclease and methylase |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| DE422951T1 true DE422951T1 (de) | 1994-02-03 |
Family
ID=23669879
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE69018189T Expired - Lifetime DE69018189T2 (de) | 1989-10-13 | 1990-10-12 | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I. |
| DE90311190T Pending DE422951T1 (de) | 1989-10-13 | 1990-10-12 | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I. |
Family Applications Before (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| DE69018189T Expired - Lifetime DE69018189T2 (de) | 1989-10-13 | 1990-10-12 | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I. |
Country Status (4)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5298404A (de) |
| EP (1) | EP0422951B1 (de) |
| JP (1) | JP3003117B2 (de) |
| DE (2) | DE69018189T2 (de) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5731185A (en) * | 1995-07-21 | 1998-03-24 | New England Biolabs, Inc. | Isolated DNA encoding the hphi restriction endonuclease and related methods for producing the same |
| EP2548953A1 (de) | 2005-08-04 | 2013-01-23 | New England Biolabs, Inc. | Neuartige Restriktionsendonukleasen, DNA-Kodierung dieser Endonukleasen und Verfahren zur Identifizierung neuer Endonukleasen mit der gleichen oder variierten Spezifizität |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IN166864B (de) * | 1985-03-01 | 1990-07-28 | New England Biolabs Inc | |
| ATE113653T1 (de) * | 1986-06-06 | 1994-11-15 | New England Biolabs Inc | Verfahren zur klonierung eines restriktionsmodifizierungssystems. |
| US5030569A (en) * | 1987-10-15 | 1991-07-09 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the AFL II restriction endonuclease and methylase |
| US4988620A (en) * | 1987-12-17 | 1991-01-29 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the FnuDI restriction endonuclease and methylase |
| US4987074A (en) * | 1987-12-17 | 1991-01-22 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the HgiAI restriction endonuclease and methylase |
| US4999294A (en) * | 1987-12-17 | 1991-03-12 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the FokI restriction endonuclease and methylase |
| US4983522A (en) * | 1987-12-17 | 1991-01-08 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the HinPI restriction endonuclease and methylase |
| US4999293A (en) * | 1987-12-17 | 1991-03-12 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the HhaI restriction endonuclease and methylase |
| US4983542A (en) * | 1987-12-21 | 1991-01-08 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the XbaI restriction endonuclease and methylase |
| JPH02216708A (ja) * | 1988-04-11 | 1990-08-29 | Fuji Photo Film Co Ltd | 導電性皮膜 |
| US4996151A (en) * | 1988-05-19 | 1991-02-26 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the Eag I restriction endonuclease and methylase |
| US5015581A (en) * | 1989-03-15 | 1991-05-14 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the Hinc II restriction endonuclease and methylase |
| US5002882A (en) * | 1989-04-27 | 1991-03-26 | New England Biolabs, Inc. | Method for producing the XmaI restriction endonuclease and methylase |
-
1989
- 1989-10-13 US US07/421,272 patent/US5298404A/en not_active Expired - Lifetime
-
1990
- 1990-10-12 DE DE69018189T patent/DE69018189T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 JP JP2275156A patent/JP3003117B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1990-10-12 DE DE90311190T patent/DE422951T1/de active Pending
- 1990-10-12 EP EP90311190A patent/EP0422951B1/de not_active Expired - Lifetime
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH03224488A (ja) | 1991-10-03 |
| US5298404A (en) | 1994-03-29 |
| DE69018189D1 (de) | 1995-05-04 |
| EP0422951B1 (de) | 1995-03-29 |
| DE69018189T2 (de) | 1995-11-09 |
| JP3003117B2 (ja) | 2000-01-24 |
| EP0422951A1 (de) | 1991-04-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DE395367T1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und -methylase XamI. | |
| EP0171024B1 (de) | Gentechnologisches Verfahren zur Herstellung von Hirudinen und Mittel zur Durchführung dieses Verfahrens | |
| DE675198T1 (de) | Gene die steriles pflanzencytoplasma identifizieren und verfahren zur herstellung hybrider pflanzen durch verwendung derselben. | |
| DE121386T1 (de) | Dna-vektoren und ihre verwendung in der rekombinanten dna-technologie. | |
| DE388212T1 (de) | Verfahren zur Herstellung der Hinc-II-Restriktionsendonuklease und Methylase. | |
| DE3932015A1 (de) | Gen und genstruktur, codierend fuer eine aminotransferase, mikroorganismen, die dieses gen exprimieren, und transaminierungsverfahren unter verwendung des expressionsprodukts | |
| ATE177786T1 (de) | Herstellungsverfahren für ein plasmid mit fähigkeiten zu expression und prozessierung nach translation eines retroviralen gens, so erhaltenes plasmid und dessen expressionsprodukt | |
| DE343010T1 (de) | Verfahren zur Herstellung der EagI-Restriktionsendonuklease und Methylase. | |
| DE69403210T3 (de) | Verfahren zur herstellung von n-acetylneuraminsäure | |
| DE3332264C2 (de) | ||
| Shafferman et al. | Structural properties of the beta origin of replication of plasmid R6K. | |
| DE323081T1 (de) | Verfahren zur Herstellung von xbaI-Restriktionsendonuklease und -methylase. | |
| Digby et al. | Rainbow trout mitochondrial DNA: sequence and structural characteristics of the non-coding control region and flanking tRNA genes | |
| DE3433156C2 (de) | ||
| DE422951T1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und Methylase Hpa I. | |
| DE388136T1 (de) | Verfahren zur Herstellung von Restriktionsendonuklease und -Methylase-MwoI. | |
| DE437100T1 (de) | Verfahren zur Klonierung und Herstellung der SfiI-Restriktionsendonuklease und Methylase. | |
| Haughn et al. | High A+ T content conserved in DNA sequences upstream of leuABCD in Escherichia coli and Salmonella typhimurium | |
| DE69500108T2 (de) | Stabile D-N-alpha-Carbamylase Mutanten | |
| DE68913587T2 (de) | Extraktion von menschlichem Interleukin-4 aus Bakterien. | |
| DE3735381A1 (de) | Rekombinante dna zur reprimierbaren und induzierbaren expression von fremdgenen | |
| EP0161629A1 (de) | Signalpeptid für die Exkretion von Peptiden in Streptomyceten | |
| DE3886250T2 (de) | Herstellung von menschlichem Somatomedin C mit hohem Titer. | |
| DE3103714A1 (de) | Dns-rekombinationsverfahren zur herstellung eines dem menschlichen interferon aehnlichen proteins | |
| DE69434072T2 (de) | Regulierende nukleinsaeuresequenzen und verwendungen |