DE4020511A1

DE4020511A1 - Stabile pharmazeutische zusammensetzung enthaltend 24,25-dihydroxycholecalcipherol als einen wirkstoff

Info

Publication number: DE4020511A1
Application number: DE4020511A
Authority: DE
Inventors: Toru Hirai; Koichi Niimura; Hideyuki Yamato
Original assignee: Kureha Corp
Current assignee: Kureha Corp
Priority date: 1989-07-28
Filing date: 1990-06-27
Publication date: 1991-01-31
Anticipated expiration: 2010-06-28
Also published as: JPH0358934A; JP2856444B2; DE4020511C2

Description

Die Erfindung betrifft eine pharmazeutische Zusammensetzung mit ausgezeichneter Stabilität umfassend 24,25-Dihydroxycholecalcipherol, das eines der Dihydroxycholecalcipherole darstellt (im folgenden als DHCC bezeichnet), metabolische Produkte von Vitamin D3 und ein Sesamöl.

Bisher war bekannt, daß metabolische Produkte von Vitamin D3, zum Beispiel 1, α-DHCC, 1,25-DHCC und 24,25-DHCC, pharmazeutisch wirksam und weit verbreitet für die Behandlung von Calciumstoffwechselstörungen, wie Hyperkalzämie, Hyperkalzurie und Osteoporose, sind. Es wurde beobachtet, daß unter diesen Metaboliten 24,25-DHCC (im folgenden manchmal als "die vorliegenden Substanz" bezeichnet) im wesentlichen keinen beschleunigenden Effekt auf die Knochenresorption und extrem geringe Nebenwirkungen besitzt, obwohl es eine etwas niedrigere Aktivität als andere Metaboliten, wie 1,α- oder 1,24-DHCC, besitzt, um die Calciumabsorption in den Eingeweiden zu fördern. Demzufolge wird von 24,25-DHCC in starkem Maße erwartet, eine wirksame Medizin bei klinischer Anwendung darzustellen.

Da jedoch 24,25-DHCC nicht stabil gegenüber Hitze und Licht ist und in Luft leicht oxidiert wird, ist es notwendig die Zusammensetzung gefroren, im Dunkeln oder in einer Inertgasatmosphäre aufzubewahren.

Jedoch ist es bei der eigentlichen Herstellung der Zusammensetzung unmöglich alle diese Einflüsse im wesentlichen zu eliminieren, obwohl es möglich sein könnte, die Wirkung von Hitze, Licht oder Sauerstoff auf 24,25-DHCC bis zu einem gewissen Grade zu reduzieren, und demzufolge war es eine ziemlich wichtige Angelegenheit, wie eine Stabilität der Zusammensetzung und auch eine Stabilität während deren Lagerung für eine praktische Anwendung einer pharmazeutischen Zusammensetzung aus der vorliegenden Substanz zu verbessern sei.

Mehrere Versuche sind offenbart, um einen Abbau von 24,25-DHCC während der Herstellung oder Lagerung der pharmazeutischen Zusammensetzung daraus zu verhindern, zum Beispiel offenbart die JP-OS 57-40415 (1982) ein Verfahren, bei dem Hydrochinon seinem öligen Substrat zugesetzt wird, und die JP-OS 59-36656 (1984) offenbart ein Verfahren zur Verwendung von 24,25-DHCC als eine Klathratverbindung. Jedoch die erste Methode beinhaltet ein Problem, daß das als Reduktionsmittel zugesetzte synthetische Hydrochinon toxisch ist, und das letzte Verfahren beinhaltet das Problem, das aufgrund der sehr geringen Menge des zu verwendenden 24,25-DHCC in der Zusammensetzung ein anderes Substrat, wie Ethanol, zugesetzt werden muß.

Weiterhin wird in der JP-OS 61-189219 (1986) ein Verfahren vorgeschlagen, ein Glycerid einer mittleren Fettsäure als öliges Substrat zu verwenden, jedoch der alleinige Gebrauch eines Glycerids ist nicht wirksam genug, um die Stabilität der vorliegenden Substanz zu verbessern.

Es wurde ein Substrat extensiv untersucht, das von sich aus sicher und stabil ist und dessen alleiniger Gebrauch eine pharmazeutische Zusammensetzung enthaltend einen instabilen Wirkstoff, zum Beispiel 24,25-DHCC, stabilisieren kann, und die vorliegende Erfindung wurde vervollständigt durch den Befund, daß bestimmte pflanzliche Öle die Möglichkeit bieten, als Substrat verwendet zu werden.

Der vorliegenden Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, eine stabile pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend 24,25-DHCC und ein Sesamöl, zur Verfügung zu stellen.

Eine weitere Aufgabe besteht darin, eine pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend 0,00001 bis 1,0 Gew.-% 24,25-DHCC in Sesamöl, zur Verfügung zu stellen.

Eine weitere Aufgabe besteht darin, eine pharmazeutische Zusammensetzung, enthaltend ein Sesamöl mit einem Peroxidwert von 0 bis 2,1 me/kg und 24,25-DHCC, zur Verfügung zu stellen.

Die vorliegende Erfindung betrifft eine stabile pharmazeutische Zusammensetzung umfassend 24,25-DHCC und ein Sesamöl.

24,25-DHCC umfaßt 24R,25-DHCC, 24S,25-DHCC und Mischungen daraus, und jedes davon kann für die erfindungsgemäße Zusammensetzung verwendet werden, jedoch ist eine Verwendung von 24R,25-DHCC, das als Agens zur Kontrolle des Calciummetabolismus in vivo am wirksamsten ist, besonders bevorzugt.

Jedes Sesamöl kann erfindungsgemäß als Substrat verwendet werden, solange das Öl von den Samen von Sesam genommen und gereinigt wird, und besonders bevorzugt sind solche mit einem Peroxidwert von 0 bis 2,1 me/kg, und ganz besonders bevorzugt sind solche mit 0 bis 1,0 me/kg.

Da Sesamöl seit langem als Speiseöl verwendet wird, ist seine Sicherheit als Substrat einer pharmazeutischen Zusammensetzung deutlich gezeigt.

Die in dem Öl zu lösende Menge an 24,25-DHCC für die praktische Verwendung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung kann von Fall zu Fall ermittelt werden, je nach benötigter Dosierungsmenge an DHCC. Allgemein gesagt ist es jedoch bevorzugt, 0,00001 bis 1 Gew.-% der vorliegenden Substanz in einem Sesamöl zu lösen, und es ist besonders bevorzugt, 0,00001 bis 0,1 Gew.-% zu lösen. Die Temperatur bei der die vorliegende Substanz in einem Sesamöl gelöst wird beträgt vorzugsweise -5 bis 25°C, besonders bevorzugt 0 bis 10°C. Als alternative Methode zur Herstellung der erfindungsgemäßen Zusammensetzung kann eine Lösung der vorliegenden Substanz in einem organischen Lösungsmittel wie Methanol oder Ethanol mit einem Sesamöl gemischt werden. Weiterhin kann ein Additiv, das üblicherweise für pharmazeutische Zusammensetzungen eines aktivierten Vitamins verwendet wird, wie ein Korrigenz, ein Aromastoff, ein Dickungsmittel oder ein Konservierungsmittel, der erfindungsgemäßen Zusammensetzung falls nötig zugesetzt werden.

Die Stabilität der vorliegenden Substanz wird wie unten beschrieben gemessen.

400 mg der vorliegenden Substanz werden in einem Sesamöl gelöst und je 5 ml der Lösung werden in Gefäße mit 10 ml Volumen gegeben. Jedes Gefäß wird mit UV-Strahlen, die durch eine 15 W Sterilisierlampe erzeugt werden, bestrahlt oder in einem Ofen bei 60°C für vorab bestimmte Zeiten hitzebehandelt.

Nach jeder der vorab bestimmten Zeiten wird jeweils eine Probe aus jedem der Gefäße entnommen und unter Verwendung von Hochdruckflüssigkeitschromatographie (im folgenden als "HPLC" bezeichnet) gemessen. Das Verhältnis der in der Lösung verbliebenen Restmenge zu der ursprünglichen Menge vor der Behandlung wurde als Stabilität errechnet.

Um das Ausmaß der Verbesserung der Stabilität der erfindungsgemäßen Zusammensetzung kennenzulernen, wurde die Stabilität der vorliegenden Substanz auf die gleiche Weise wie oben gemessen, außer daß ein Triglycerid mittlerer Fettsäuren mit 8 bis 12 Kohlenstoffatomen anstelle des Sesamöls verwendet wurde, und die beiden Stabilitäten werden verglichen.

Wie aus den folgenden Beispielen deutlich wird, ist die pharmazeutische Zusammensetzung umfassend die vorliegende Substanz und ein Sesamöl in seiner Stabilität derjenigen Zusammensetzung, umfassend die vorliegende Substanz und eine mittlere Fettsäure, überlegen. Weiterhin, wenn ein Sesamöl mit einem Peroxidwert von 0 bis 2,1 me/kg, vor allem mit einem Peroxidwert von 0 bis 1,0 me/kg, verwendet wird, besitzt die erfindungsgemäße Zusammensetzung ausgezeichnete Stabilität.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.

Beispiel 1

Jeweils 400 mg 24,25-DHCC wurden in 2 kg Sesamöl mit einem Peroxidwert von 0,21 me/kg oder derselben Menge eines Triglycerids einer mittleren Fettsäure mit 8 bis 12 Kohlenstoffatomen bei 4°C gelöst. Nachdem 150 l Argongas 30 min lang durch jede der Lösungen geleitet worden war, wurden jeweils 5 ml der Lösungen in durchsichtige Gefäße mit 10 ml Volumen verteilt, in jedem Gefäß wurde Luft durch Argongas ersetzt, und jedes Gefäß wurde verschlossen. Jedes Gefäß wurde mit UV-Strahlen, erzeugt durch eine Sterilisierlampe (CH-521, hergestellt durch Mitsubishi Co., Ltd.), bestrahlt, indem das Gefäß in einem Abstand von 20 cm direkt unter die Lampe gebracht wurde. Nach jeweils vorab bestimmter Zeit der Bestrahlung wurde die Stabilität der vorliegenden Substanz in jedem Gefäß mittels HPLC unter den folgenden Bedingungen gemessen.

Säule:
Zorbax ODS (C18) (Umkehrphasensäule, hergstellt durch SHIMAZU SEISAKUSHO)
Lösungsmittel:	80% Acetonitril-Ethylacetat
Flußrate:	0,5 ml/min
Detektion:	Messung der Absorption bei 290 nm
Arbeitsgang:	100 µl einer jeden Probe wurden in eine Mikrospritze aufgenommen und in die HPLC-Apparatur (LC-6A Typ, hergestellt von SHIMAZHU SEISAKUSHO) eingespritzt und zuerst mit 80% Acetonitril-Ethylacetat als Elutionsmittel 20 min lang eluiert und dann 15 min lang mit 100% Ethylacetat eluiert und schließlich 25 min lang mit 80% Acetonitril-Ethylacetat eluiert. Die Lichtabsorption des Eluats bei 290 nm wurde kontinuierlich durch ein selbstregistrierendes Spektralphotometer (SPD-6A; hergestellt durch SHIMAZU SEISAKUSHO) gemessen.

Die Stabilität wurde durch das Verhältnis der Restmenge an 24R,25-DHCC bei jeder der vorab bestimmten Zeiten zu der ursprünglichen Menge an 24R, 25-DHCC vor der UV-Bestrahlung angegeben und die Ergebnisse sind in Tabelle 1 gezeigt.

Wie aus Tabelle 1 ersichtlich, wurde gefunden, daß die Stabilität von 24R,25-DHCC keine wesentlichen Änderungen aufzeigte in einem Sesamöl während der Meßzeit von 48 Stunden, wohingegen die Stabilität in dem Triglycerid einer mittleren Fettsäure mit einer Zunahme der Bestrahlungszeit verringert wurde. Nämlich es wurde gefunden, daß die Stabilität von 24R,25-DHCC gegen UV-Strahlen in einem Sesamöl besser ist als in einem Triglycerid mittlerer Fettsäuren.

Tabelle 1

Der Peroxidwert eines Sesamöls wurde nach der unten beschriebenen Methode nach Wheeler gemessen.

Ein Sesamöl wurde in einem gemischten Lösungsmittel aus Eisessig und Chloroform gelöst, und es wurde eine gesättigte wäßrige Lösung aus Kaliumjodid dem gemischten Lösungsmittel zugesetzt und gerührt. Dann wurde destilliertes Wasser zugesetzt und freies Jod mit einer wäßrigen Lösung an Natriumthiosulfat titriert. Bei einem Punkt nahe dem Endpunkt der Titration wurde die Lösung heftig geschüttelt, um Jod aus der Chloroformphase in die wäßrige Phase zu überführen, und eine wäßrige Lösung von Stärke wurde zugesetzt und die Titration fortgeführt, bis die violette Farbe verschwand. Der Peroxidwert wurde gemäß der folgenden Formel berechnet:

Peroxidwert (me/kg) = (TxF/W) × 10

worin

T: die titrierte Menge an Natriumthiosulfat (ml);

F: der Titer der 0,01 N Natriumthiosulfatlösung und

W: die Menge an Sesamöl (g) bedeuten.

Beispiel 2

Jeweils 400 mg an 24R,25-DHCC wurden in 2 kg eines Sesamöls mit einem Peroxidwert von 0,5 me/kg oder derselben Menge an Triglycerid mittlerer Fettsäuren mit 8 bis 12 Kohlenstoffatomen bei 5°C gelöst. Nachdem 150 l Argongas 30 min lang durch die Lösung geleitet worden waren, um gelösten Sauerstoff zu entfernen, wurden je 5 ml der Lösungen in braune Gefäße mit einem Volumen von 10 ml verteilt, und die Luft in jedem Gefäß wurde durch Argongas ersetzt, und jedes Gefäß wurde verschlossen.

Jedes der Gefäße verblieb in einem Ofen bei 60°C für 60 Tage und die Stabilität von 24R,25-DHCC wurde nach dem gleichen Verfahren wie in Beispiel 1 gemessen. Stabilitäswerte von 100% und 82% wurden für die Lösungen des Sesamöls bzw. Triglycerids erhalten.

Beispiel 3

Jeweils 400 g 24R,25-DHCC wurden in jeweils 2 kg von 6 verschiedenen Sesamölarten mit unterschiedlichen Peroxidwerten bei 4°C gelöst, um die entsprechenden Lösungen zu erhalten. 150 l Argongas wurde 30 min lang durch jede der Lösungen geleitet, um gelösten Sauerstoff zu entfernen. Dann wurden jeweils 5 ml der Lösungen jeweils in braune Gefäße mit einem Volumen von 10 ml verteilt, Luft in jedem Gefäß wurde durch Argongas ersetzt, und die Gefäße wurden verschlossen und in einem Ofen bei 60°C für 60 Tage gelassen. Die Stabilität von 24R,25-DHCC wurde nach dem gleichen Verfahren wie in Beispiel 1 bestimmt, und die erhaltenen Ergebnisse sind in Tabelle 2 gezeigt.

Tabelle 2

Claims

1. Pharmazeutische Zusammensetzung umfassend 24,25-Dihydroxycholecalcipherol und ein Sesamöl.

2. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das 24,25-Dihydroxycholecalcipherol ist.

3. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das 24,25-Dihydroxycholecalcipherol 24S,25-Dihydroxycholecalcipherol ist.

4. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß das 24,25-Dihydroxycholecalcipherol zu 0,00001 bis 1,0 Gew.-% in dem Sesamöl enthalten ist.

5. Pharmazeutische Zusammensetzung nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß der Peroxidwert des Sesamöls 0 bis 2,1 me/kg beträgt.

6. Verwendung der pharmazeutischen Zusammensetzung nach Anspruch 1 zur Behandlung eines Patienten mit einer Calciumstoffwechselstörung.

7. Verwendung nach Anspruch 6, dadurch gekennzeichnet, daß die Calciumstoffwechselstörung Hyperkalzämie, Hyperkalzurie oder Osteoporose ist.